该发明用于固相免疫分析中,尤其是固相放射免疫分析。 固相免疫分析方法已广泛用于卫生防疫、血站血库、生物制剂及相关科研中。固相免疫分析试剂盒已有多种,应用这类试剂盒进行检测,一般需要经过加样、温育、洗涤和测量几步,其中关键是温育和洗涤分离两步。
通常的温育方法是在固相载体(为4~6.5大小的聚苯乙烯小球)上包被有抗原或抗体,该抗原或抗体与液相中的抗体或抗原发生结合反应,这种反应是在固液界面进行的,免疫活性分子要想结合到固相表面,首先要同固相表面接触,一旦发生接触结合就可在瞬间完成,因而结合反应完成的时间主要决定于分子运动到固相表面,即进入反应区域的时间,现有的温育方法沿用的静置于水浴中温育的方法,仅凭分子自身由浓度差引起的扩散,由于免疫活性的分子大,液相粘度高,其扩散速度是很慢的,因而要结合反应进行的充分,则需要很长的时间。
现有的自动洗珠器的反应托盘(8)中间部分为平面,洗涤时,由中心部位静态加水,靠水自然流动进入周边的反应孔内,这里有两个可能存在的问题,其一是由于表面张力或仪器放置略不水平,使有的孔中进水少,造成洗涤结果不均一,可能会出现假阳性,其二有的孔中进水过多,漫至平面而使相邻孔污染,结果也会出现假阳性。
本发明地目的是发明一种能克服上述缺点,且把温育和洗涤分离这两个原来分开的步骤有机地结合起来的温育、洗涤分离方法和仪器。
本发明是这样实现的:将原来只能起洗涤分离作用的洗珠器改成可以温育和洗涤分离的仪器。
温育、洗涤分离器由外壳(15)、电机(19)、电磁阀(30)、托盘(25)、托座(24)、盖板(26)、接头(22)、出水嘴(18)、水碗(21)等组成,其中托盘(25)中部有一与其一体的方轴套(32),托盘(25)的小孔(33)由筋板(31)隔开,使每个小孔有独自的进水沟,托盘(25)中间有方轴(28)。
温育时,将带有抗原或抗体的固相载体放在小孔(33)内,加入反应液,让电机(19)带动托盘(25)正、反向交替转动,这样固相载体上的抗原或抗体极易与反应液中的抗体或抗原相接触,大大加快了温育的速度。
洗涤分离时,托盘(25)在电机(19)的带动下,先快速运转离去反应液,接着慢速运转加水,再停水,快速运转,接着仍慢速运转,以此循环,至洗涤完毕,快速转离去水,完成整个工作过程。
这种方法,将温育和洗涤分离两个步骤连在一起,用一仪器完成,减少了连接温育和洗涤分离时带来的环境污染。同时,用动态温育,大大加快了温育的时间,洗涤过程也由于动态加水和托盘(25)上加有筋板(31)而避免了洗涤过程可能产生的污染。
图1是现有的自动洗珠器的示意图。由电磁阀(12)、托盘(8)、盖板(9)、电机(5)、水碗(4)、出水嘴(3)等组成,托盘(8)底面有三根立柱,与盖板(9)上的三个孔眼相套,用橡皮筋(10)套住三根立柱,以使盖板(9)与托盘(8)固定连接。各部件由螺栓(1)、(6)、(11)分别连接,在电机(5)与外壳(13)之间有垫圈(2)。
图2是现有的自动洗珠器的托盘(8)的局部俯视图。
图3是现有的自动洗珠器的托盘(8)的正视图。
图4是温育、洗涤器。
图5是温育、洗涤器托盘(25)的局部俯视图。
图6是温育、洗涤器托盘(25)的正视图。
图7是温育、洗涤器控制程度方框图。
实施例:
如图1所示的温育和洗涤分离器由外壳(15)、电机(19)、电磁阀(30)、托盘(25)、托座(24)、盖板(26)、接头(22)、出水嘴(18)、水碗(21)等组成,其特征在于托盘(25)中部有一与其一体的方轴套(32),托盘(25)的小孔(33)由筋板(31)隔开,使周边每孔有自己的进水沟,托盘(25)中间有方轴(28)、螺栓(16)、(23)、(27)、(29)把各部件连接起来。
盖板(26)侧面用卡口与托盘(25)固定,托盘(25)底部设有立柱,这样避免了洗涤水流受阻的现象。
在托座(24)上加一隔板,以防止离心出的水反射到中心轴处使电机(19)潮湿。
水碗(21)底部与出水嘴(18)平齐,这样避免了出水嘴面高于水底,使洗涤的废水不能完全排除的现象。
反应托盘的转动由周边孔管带动,改为由中间轴带动,操作人员在取放时,不用接触边管,因而不会接触放射性或病毒,更加安全。
下面对现有操作方法与本发明的方法列表进行对比:
项目自动洗珠器温育、洗涤分离器功能洗涤小球温育、洗涤小球准备工作将温育好的固相载体(小球)放入孔内将固相载体(小球)放入孔内,在孔内加入反应液电机运转程序快转→停、加水→快转→停、加水 如此反复4次后,快转-停即报声温育:慢速正向和反向交替转动,每半圈(180°)变换一次方向,直至指定温度时间洗涤:快转→慢转、加水→快转→慢转、加水→如此反复4次后,快转→停→报声效果解决了人工洗涤的麻烦,减少外环境污染节省洗涤时间(相对于手工)和劳动同时使温育和洗涤全部自动化,节省了整个分析过程的时间和劳动、减少了内外环境的污染,提高了检测精度和结果的准确性加水方法水由托盘(8)中央静态加入,靠自然流动分配流入各反应孔管缺点:各孔管中加入的水量可能相差太大致使小珠洗涤不均匀已加入孔管中的水可能由于漫出而回流造成相邻孔管之间的污染,使结果不准确由托盘(25)一侧动态加水,由离心力流入各边孔中,由于托盘(25)在缓慢旋转中,各边孔均能加入洗涤,又加之离心力和沟槽的作用,进入小孔中的水既不会漫到别的孔,也不会回流。因而避免了自动洗珠器可能出现的缺点