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白细胞三分类试剂的配制方法
    本发明涉及一种将血液中的白细胞分成淋巴球、中性白细胞和其他白细胞三个亚类的试剂的配制方法。

    对白细胞的检测结果，被作为医院临床诊断和治疗的指导，一直受到重视，老法检测是用血液涂片，固定和染色，在高倍显微镜下目测计数。本世纪八十年代以来，研制出电阻式自动分析仪，如美国西科亚—特勒公司生产的CELL-DYN610型分析仪等，一次可测8个项目。但仪器所用的溶血剂、稀释剂都需进口。

    白细胞三分类试剂大多采用十二烷基三甲基氯化铵作溶血剂、氰化钾作络合剂配制。如US3874852(Apr.1.1975)公布的由1L水、0.25gKCN、35gC12H25N(CH3)3Cl配制。US4346018(Aug.24.1982)公布的由40-70g/L(最佳60g/L)C12H25N(CH3)3Cl(50％溶液)、4-7g/L(最佳6g/L)C12H25N(CH3)3Br、0.25-0.5g/L(最佳0.3g/L)KCN、H2O稀释至1升配制成。US4485175(NOV.27.1984)公布的由40-70g/L(最佳60g/L)C12H25N(CH3)3Cl、4-7g/L(最佳6g/L)C12H25N(CH3)3Br、0.25-0.5g/L(最佳0.3g/L)KCN、H2O稀释至1升配制成。上述文件均只介绍了十二烷基三甲基氯化铵、氰化钾等组分，对后续工序没有予以介绍。

    本发明的目的旨在提供一种白细胞三分类试剂的配制方法，所配出的试剂可适于CELL-DYN610、1700型血液分析仪使用。

    本发明目的的实现方式为，白细胞三分类试剂的配制方法，试剂由十二烷基三甲基氯化铵、氰化钾配制而成。每升试剂取30-35g十二烷基三甲基氯化铵、0.4-0.5g氰化钾，用双蒸水稀释至1升，用三羟甲基甲胺缓冲溶液调PH＝9±0.2。

    血液中加入白细胞三分类试剂后，红细胞迅速肿胀而溶血，白细胞由于超微结构与红细胞不同，它们在溶血剂低渗溶液中，可发生收缩，使体积减小。几个亚类的白细胞，收缩的快慢有差异，淋巴细胞迅速，中性细胞较慢，其他白细胞则在二者之间。这些收缩快慢不同的颗粒通过仪器中的微孔时，就会产生脉冲信号，经电脑处理转换成各种参数。为此对溶血剂的组成、含量及其溶液的PH值，要求非常严格。本发明十二烷基三甲基氯化铵、氰化钾配制成后，加缓冲液调节PH值，试剂使用可靠。

    武汉空军医院对用本制备方法配制的白细胞三分类试剂作了有关测试，其测试结果见附表，沙丘图见附图。血样有浓血样、稀血样，对比试剂为进口试剂的ASK试剂。附表NO  血  样            溶血剂   剂量  WBC(g/L)        LYM         GRAN HGB(g/L)  g/L    ％L    g/L   ％g  1  浓  血  样             ASK  1mL    15.5  4.3  27.8  11.2  72.2    167  2  自  制        原液  0.5mL    15.7  4.1  26.3  11.5  73.7    172  3  原液∶稀释剂(1∶1)  1mL    15.0  3.9  25.9  11.1  74.1    164  4  原液∶双蒸水(1∶1)  1mL    15.5  4.3  26.4  11.3  73.6    167  5  稀  血  样              ASK  1mL    11.0  3.7  33.4  7.4  66.6    114  6  自  制        原液  0.5mL    11.3  3.3  29.1  8.0  70.9    116  7  原液：稀释剂(1∶1)  1mL    10.9  3.1  28.3  7.8  71.7    111  8  原液∶双蒸水(1∶1)  1mL    10.9  3.3  30.1  7.6  69.6    112

    图1-8分别为1-8号沙丘图谱。

    本配制方法操作简单，所得试剂可用于CELL-DYN610、1700型血液分析仅等仪器。