一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱、制备方法及其应用.pdf

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1、(10)申请公布号 CN 102516168 A (43)申请公布日 2012.06.27 C N 1 0 2 5 1 6 1 6 8 A *CN102516168A* (21)申请号 201110414849.X (22)申请日 2011.12.13 C07D 215/56(2006.01) C07D 405/14(2006.01) C07D 401/14(2006.01) A61P 35/00(2006.01) A61P 35/02(2006.01) (71)申请人河南大学 地址 475004 河南省开封市明伦街85号 (72)发明人胡国强 敬永升 陈寅生 张东娣 张亚红 毋小魁 王国强 。

2、段楠楠 温晓漪 曹铁耀 (74)专利代理机构郑州睿信知识产权代理有限 公司 41119 代理人牛爱周 (54) 发明名称 一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱、制备 方法及其应用 (57) 摘要 本发明属于医药技术领域，具体公开了一种 环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱，同时还公开了 一种制备方法及其在制药领域中的应用。环丙氟 喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的化学结构式如通式I 所示：通式I，其 中，Ar选自苯基、取代苯基、杂环芳香烃基和取代 杂环芳香烃基。试验表明，本发明提供的环丙氟喹 诺酮C3/C7双腙西弗碱对L1210、CHO和HL60癌细 胞株均具有较强的体外细胞毒活性作用，显示出 较强的抗。

3、肿瘤活性，可通过与人体可接受的药用 载体混合用于制备抗肿瘤药物，也可进一步制成 人体可接受的药用盐用于制备抗肿瘤药物。 (51)Int.Cl. 权利要求书1页 说明书11页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 11 页 1/1页 2 1.一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱，其特征在于，化学结构式如通式I所示： 其中，Ar选自苯基、取代苯基、杂环芳香烃基和取代杂环芳香烃基。 2.根据权利要求1所述的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱，其特征在于，Ar选自苯基、 烷基苯基、羟基苯基、烷氧基苯基、卤代苯基、硝基苯基、吡啶基、吡啶稠杂环中的任一种。 。

4、3.根据权利要求1或2所述的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱，其特征在于，Ar选自 中的任一种。 4.一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)将6-氟-7-氯-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-3-喹啉羧酸乙酯溶于过量的质量 百分比浓度为80的水合肼中，然后回流反应2436小时，制得7-肼基-6-氟-1-环丙 基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼； (2)将7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼与无水乙醇 混合，制得混合液，然后加热回流所述混合液至澄清，之后向所述混合液中加入通式II所 示化合物，然后再加热回流。

5、1030小时，制得通式I所示化合物；其中通式II所示化合物 与7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼的摩尔比为：通式II 所示化合物7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼(1.2 1.3)1； 其中，Ar选自苯基、取代苯基、杂环芳香烃基和取代杂环芳香烃基。 5.一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱及其药用盐在制备抗肿瘤药物中的应用。 权 利 要 求 书CN 102516168 A 1/11页 3 一种环丙氟喹诺酮 C3/C7 双腙西弗碱、 制备方法及其应用 技术领域 0001 本发明属于医药技术领域，具体涉及一种环丙氟喹诺酮C3/。

6、C7双腙西弗碱，同时 还涉及其制备方法及其在制药中的应用。 背景技术 0002 氟喹诺酮(FQ)为上世纪80年代以氟哌酸(即诺氟沙星)为代表发展而来的临床 抗菌药。基于其作用靶点拓扑异构酶(TOPO)与哺乳动物TOPO具有相似的功能，据此把抗 菌FQ转化为抗肿瘤FQ是目前研究的一个新方向。虽然已设计合成了结构包括二环喹诺酮、 三环喹诺酮、四环喹诺酮、手性喹诺酮、类黄酮类等抗肿瘤FQ化合物，但目前这些化合物在 不同程度上存在毒性与活性相平行、体内溶解度差导致生物利用度低、在体内易被代谢失 活等亟待解决的共性问题。因此，寻找新的结构修饰途径，发现新的先导化合物是目前亟待 解决的问题。目前新研究发现。

7、，氟喹诺酮C-3羧基虽对抗菌活性是必须的，但对抗肿瘤活性 并非必要，可被一些电子等排体取代而发挥抗肿瘤作用。另外，虽然保留7-位哌嗪基是抗 菌氟喹诺酮通用的结构修饰方法，但对抗肿瘤而言，哌嗪基是否可用其他基团取代，我们所 知甚少。鉴于酰腙及腙类化合物在抑菌、抗病毒、抗肿瘤等方面的广泛应用，以酰腙和腙分 别替代抗菌氟喹诺酮骨架C-3和C-7位羧基及哌嗪基，得到新结构的双腙西弗碱抗肿瘤氟 喹诺酮先导化合物是本发明研究的主要目的，目前尚未见有环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗 碱的相关报道。 发明内容 0003 本发明的目的是提供一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱。 0004 本发明的目的还在于提供一。

8、种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法。 0005 本发明的目的还在于提供一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱在制药中的应用。 0006 为了实现以上目的，本发明所采用的技术方案是：一种环丙氟喹诺酮C3/C7双腙 西弗碱，其化学结构式如通式I所示： 0007 0008 其中，Ar选自苯基、取代苯基、杂环芳香烃基和取代杂环芳香烃基。 0009 优选的，Ar选自苯基、烷基苯基、羟基苯基、烷氧基苯基、卤代苯基、硝基苯基、吡啶 基、吡啶稠杂环中的任一种。 说 明 书CN 102516168 A 2/11页 4 0010 进一步优选的，Ar选自 和中的任一种。 0011 环丙氟喹诺酮C3/C7双腙。

9、西弗碱的制备方法，包括以下步骤： 0012 (1)将6-氟-7-氯-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-3-喹啉羧酸乙酯(如式A 所示)溶于过量的质量百分比浓度为80的水合肼中，然后回流反应2436小时，制得 7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼(如式B所示)； 0013 (2)将7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼与无水 乙醇混合，制得混合液，然后加热回流所述混合液至澄清，之后向所述混合液中加入通式II 所示化合物，然后再加热回流1030小时，制得通式I所示化合物；其中通式II所示化合 物与7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，。

10、4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼的摩尔比为：通式II 所示化合物7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼(1.2 1.3)1； 0014 0015 其中，Ar选自苯基、取代苯基、杂环芳香烃基和取代杂环芳香烃基。 0016 经试验表明，本发明提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱对实验L1210、CHO、 HL60癌细胞株均具有较强的体外细胞毒活性作用，显示出较强的抗肿瘤活性，可通过与人 体可接受的药用载体混合用于制备抗肿瘤药物，也可进一步制成人体可接受的药用盐用于 制备抗肿瘤药物。 具体实施方式 0017 下面通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。 0。

11、018 实施例1-15是环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的具体实施例。 说 明 书CN 102516168 A 3/11页 5 0019 实施例1 0020 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为苯甲醛缩(1-环丙 基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0021 0022 实施例2 0023 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为对甲基苯甲醛缩(1-环丙 基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0024 0025 实施例3 0026 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为对甲氧基苯甲醛缩(1。

12、-环丙 基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0027 0028 实施例4 0029 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为邻羟基苯甲醛缩(1-环丙 基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0030 0031 实施例5 0032 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为邻甲氧基苯甲醛缩(1-环丙 基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0033 说 明 书CN 102516168 A 4/11页 6 0034 实施例6 0035 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双。

13、腙西弗碱为3，4-二氧亚甲基苯甲醛缩 (1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0036 0037 实施例7 0038 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为3-甲氧甲基-4-羟基苯甲醛 缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0039 0040 实施例8 0041 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为3-羟基-4-甲氧甲基-苯甲 醛缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0042 0043 实施例9 0044 本实施例提供的环丙氟喹。

14、诺酮C3/C7双腙西弗碱为3，4，5-三甲氧甲基-苯甲醛 缩(1-环丙基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0045 说 明 书CN 102516168 A 5/11页 7 0046 实施例10 0047 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为对氯苯甲醛缩(1-环丙 基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0048 0049 实施例11 0050 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为对氟苯甲醛缩(1-环丙 基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0051 0052。

15、 实施例12 0053 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为对硝基苯甲醛缩(1-环丙 基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0054 0055 实施例13 0056 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为4-吡啶甲醛缩(1-环丙 基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0057 说 明 书CN 102516168 A 6/11页 8 0058 实施例14 0059 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为3-吡啶甲醛缩(1-环丙 基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，。

16、其结构式为： 0060 0061 实施例15 0062 本实施例提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱为2-吡啶甲醛缩(1-环丙 基-6-氟-7-肼基-喹啉-4(1H)-酮-3-甲酰肼)双腙，其结构式为： 0063 0064 以下实施例16-30是环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱制备方法的具体实施例。 0065 首先制备式B所示化合物，即7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹 啉-3-甲酰肼，将50.0g的式A所示化合物6-氟-7-氯-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧 代-3-喹啉羧酸乙酯与80g质量百分比浓度为80的水合肼混合，反应液搅拌回流反应32 小时，冷却，过滤产生的。

17、固体，干燥，制得7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹 啉-3-甲酰肼粗品，7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼粗品 用乙醇重结晶，制得7-肼基-6-氟-1-环丙基-1，4-二氢-4-氧代-喹啉-3-甲酰肼。 0066 0067 实施例16 0068 本实施例是实施例1提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体 实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅 拌加热回流混合液至澄清，之后再加入0.74g苯甲醛，继续加热回流26小时。冷却，过滤 说 明 书CN 102516168 A 7/11页。

18、 9 产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例1提供的化合物1.47g，产率 91，其熔点 为292-294。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(ppm)：1.181.32(m，4H，环丙基-H)，3.81 3.82(m，1H，环丙基-H)，7.407.77(m，10H，Ph-H)，8.21(s，1H，C8-H)，8.37(s，2H，2N CH)，8.46(s，1H，C5-H)，8.68(s，1H，C2-H)，10.37(s，1H，6-NH)，13.26(s，1H，CONH)；MS(m/ z)：468M+H + ，计算467.51M + 。 0069 实施例17 0070 本。

19、实施例是实施例2提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具 体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液， 搅拌加热回流混合液至澄清，再加入对甲基苯甲醛0.84g，然后继续加热回流反应20小 时。冷却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例2提供的化合物，产率90，熔 点 262-264。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(ppm)：1.171.30(m，4H，环丙基-H)，2.28， 2.32(s，6H，2CH3)，3.783.83(m，1H，环丙基-H)，7.447.68(m，8H，Ph-H)，8.18(s，1H， C。

20、8-H)，8.35(s，2H，2NCH)，8.44(s，1H，C5-H)，8.64(s，1H，C2-H)，10.36(s，1H，6-NH)， 13.23(s，1H，CONH)；MS(m/z)：496M+H + ，计算495.56M + 。 0071 实施例18 0072 本实施例是实施例3提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实 施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热 回流混合液至澄清，再加入对甲氧基苯甲醛0.95g，继续加热回流反应30小时。冷却，过滤 产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例3提供的化合物，产率89，熔点 2。

21、65-266。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(ppm)：1.141.30(m，4H，环丙基-H)，3.343.37(m，1H，环丙 基-H)，3.78(s，6H，2OCH3)，7.047.67(m，8H，Ph-H)，8.19(s，1H，C8-H)，8.298.36(m， 2H，2NCH)，8.59(s，1H，C5-H)，8.67(s，1H，C2-H)，10.20(s，1H，6-NH)，13.19(s，1H， CONH)；MS(m/z)：528M+H + ，计算527.56M + 。 0073 实施例19 0074 本实施例是实施例4提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的。

22、制备方法的具体 实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌 加热回流混合液至澄清，再加入邻羟基苯甲醛0.85g，再加热回流26小时。冷却，过滤产 生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例4提供的化合物，产率87，熔点 303-304。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(ppm)：1.151.30(m，4H，环丙基-H)，3.803.83(m，1H，环 丙基-H)，6.947.70(m，8H，Ph-H)，8.21(s，1H，C8-H)，8.26(m，2H，2NCH)，8.67(s， 1H，C5-H)，8.69(s，1H，C2-H)，10。

23、.32，10.40(s，2H，2OH)，11.34(s，1H，6-NH)，13.29(s，1H， CONH)；MS(m/z)：500M+H + ，计算499.51M + 。 0075 实施例20 0076 本实施例是实施例5提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体 实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌 加热回流混合液至澄清，再加入邻甲氧基苯甲醛0.95g，再加热回流26小时。冷却，过滤 产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例5提供的化合物，产率86，熔点 254-256。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(pp。

24、m)：1.171.32(m，4H，环丙基-H)，3.353.37(m，1H，环丙 基-H)，3.82(s，6H，2OCH3)，7.257.66(m，8H，Ph-H)，8.18(s，1H，C8-H)，8.308.45(m， 说 明 书CN 102516168 A 8/11页 10 2H，2NCH)，8.60(s，1H，C5-H)，8.68(s，1H，C2-H)，10.23(s，1H，6-NH)，13.25(s，1H， CONH)；MS(m/z)：528M+H + ，计算527.56M + 。 0077 实施例21 0078 本实施例是实施例6提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体。

25、 实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌 加热回流混合液至澄清，再加入3，4-二甲氧亚甲基苯甲醛1.1g，再加热回流26小时。冷 却，过滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例6提供的化合物，产率86，熔点 300。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(ppm)：1.161.31(m，4H，环丙基-H)，3.783.85(m， 1H，环丙基-H)，6.11(s，2H，2OCH2O)，6.997.36(m，6H，Ph-H)，8.01(s，1H，C8-H)， 8.188.23(m，2H，2NCH)，8.36(s，1H，C5-H)，8。

26、.74(s，1H，C2-H)，10.22(s，1H，6-NH)， 13.18(s，1H，CONH)；MS(m/z)：556M+H + ，计算555.53M + 。 0079 实施例22 0080 本实施例是实施例7提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实 施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热 回流混合液至澄清，再加入3-甲氧基-4-羟基-苯甲醛1.1g，再加热回流26小时。冷却，过 滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例7提供的化合物，产率95，熔点300。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(ppm)：1。

27、.181.34(m，4H，环丙基-H)，3.823.89(m，7H，环 丙基-H和OCH3)，7.267.58(m，6H，Ph-H)，8.13(s，1H，C8-H)，8.228.34(m，2H，2N CH)，8.38(s，1H，C5-H)，8.78(s，1H，C2-H)，10.46(s，2H，2OH)，11.38(s，1H，6-NH)， 13.36(s，1H，CONH)；MS(m/z)：560M+H + ，计算559.56M + 。 0081 实施例23 0082 本实施例是实施例8提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实 施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30。

28、mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热 回流混合液至澄清，再加入3-羟基-4-甲氧基-苯甲醛1.1g，再加热回流26小时。冷却，过 滤产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例8提供的化合物，产率92，熔点300。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(ppm)：1.151.32(m，4H，环丙基-H)，3.803.88(m，7H，环 丙基-H和OCH3)，7.247.55(m，6H，Ph-H)，8.08(s，1H，C8-H)，8.148.25(m，2H，2N CH)，8.26(s，1H，C5-H)，8.66(s，1H，C2-H)，10.38(s，2H，2OH)，11.32(s，1H，。

29、6-NH)， 13.33(s，1H，CONH)；MS(m/z)：560M+H + ，计算559.56M + 。 0083 实施例24 0084 本实施例是实施例9提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具体实 施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加热 回流混合液至澄清，再加入3，4，5-三甲氧基-苯甲醛1.4g，再加热回流26小时。冷却，过滤 产生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例9提供的化合物，产率96，熔点 258-260。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(ppm)：1.171.36(m，4H，环丙基-H)，3。

30、.783.92(m，13H，环 丙基-H和3OCH3)，7.327.66(m，4H，Ph-H)，8.12(s，1H，C8-H)，8.208.28(m，2H， 2NCH)，8.34(s，1H，C5-H)，8.67(s，1H，C2-H)，11.35(s，1H，6-NH)，13.40(s，1H，CONH)； MS(m/z)：648M+H + ，计算647.67M + 。 0085 实施例25 说 明 书CN 102516168 A 10 9/11页 11 0086 本实施例是实施例10提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具 体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL。

31、无水乙醇中，得混合液，搅 拌加热回流混合液至澄清，再加入对氯苯甲醛1.0g，再加热回流26小时。冷却，过滤产生 的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例10提供的化合物，产率83，熔点 260-262。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(ppm)：1.221.38(m，4H，环丙基-H)，3.833.95(m，4H，环 丙基-H)，7.647.76(m，4H，Ph-H)，8.18(s，1H，C8-H)，8.258.32(m，2H，2NCH)， 8.45(s，1H，C5-H)，8.76(s，1H，C2-H)，11.40(s，1H，6-NH)，13.44(s，1H，CONH)；MS(。

32、m/z)：536 for C135M+H + ，计算536.40M + 。 0087 实施例26 0088 本实施例是实施例11提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具 体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅 拌加热回流混合液至澄清，再加入对氟苯甲醛0.87g，再加热回流26小时。冷却，过滤产 生的固体，用无水乙醇重结晶，得到实施例11提供的化合物，产率93，熔点 281-282。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(ppm)：1.241.42(m，4H，环丙基-H)，3.864.07(m，4H，环 丙基-H)，7.7。

33、27.81(m，4H，Ph-H)，8.20(s，1H，C8-H)，8.328.36(m，2H，2NCH)， 8.51(s，1H，C5-H)，8.82(s，1H，C2-H)，11.44(s，1H，6-NH)，13.50(s，1H，CONH)；MS(m/z)： 504M+H + ，计算503.49M + 。 0089 实施例27 0090 本实施例是实施例12提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具 体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅 拌加热回流混合液至澄清，再加入对硝基苯甲醛1.1g，再加热回流26小时。冷却，过滤 产生的固体，用无。

34、水乙醇重结晶，得到实施例12提供的化合物，产率92，熔点300。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(ppm)：1.271.45(m，4H，环丙基-H)，3.884.14(m，4H，环 丙基-H)，7.797.86(m，4H，Ph-H)，8.32(s，1H，C8-H)，8.378.41(m，2H，2NCH)， 8.56(s，1H，C5-H)，8.85(s，1H，C2-H)，11.46(s，1H，6-NH)，13.53(s，1H，CONH)；MS(m/z)： 558M+H + ，计算557.50M + 。 0091 实施例28 0092 本实施例是实施例13提供的环丙氟喹诺酮C3。

35、/C7双腙西弗碱的制备方法的具体 实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅拌加 热回流混合液至澄清，再加入4-吡啶醛0.80g，再加热回流10小时。冷却，过滤产生的固体， 用无水乙醇重结晶，得实施例13提供的化合物，产率93，熔点300。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ， 400MHz)(ppm)：1.301.47(m，4H，环丙基-H)，3.924.22(m，4H，环丙基-H)，8.43(s， 1H，C8-H)，8.448.62(m，7H，2NCH，C5-H and py-H)，8.91(s，1H，C2-H)，11.52(s，1H， 6-NH)。

36、，13.62(s，1H，CONH)；MS(m/z)：470M+H + ，计算469.48M + 。 0093 实施例29 0094 本实施例是实施例14提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具 体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液， 搅拌加热回流混合液至澄清，再滴加3-吡啶醛0.80g，再加热回流10小时。冷却，过滤 产生的固体，用无水乙醇重结晶，得实施例14提供的化合物，产率83，熔点262-264。 说 明 书CN 102516168 A 11 10/11页 12 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(ppm)：1.2。

37、81.44(m，4H，环丙基-H)，3.904.17(m，4H，环 丙基-H)，8.38(s，1H，C8-H)，8.418.60(m，7H，2NCH，C5-H and py-H)，8.87(s，1H， C2-H)，11.46(s，1H，6-NH)，13.55(s，1H，CONH)；MS(m/z)：470M+H + ，计算 469.48M + 。 0095 实施例30 0096 本实施例是实施例15提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的制备方法的具 体实施例，其制备方法为：将1.0g式B所示化合物悬浮于30mL无水乙醇中，得混合液，搅 拌加热回流混合液至澄清，再滴加2-吡啶醛0.80g，再加热。

38、回流10小时。冷却，过滤产 生的固体，用无水乙醇重结晶，得实施例15提供的化合物，产率73，熔点 248-250。 1 H-NMR(DMSO-d 6 ，400MHz)(ppm)：1.251.42(m，4H，环丙基-H)，3.874.15(m，4H，环 丙基-H)，8.36(s，1H，C8-H)，8.378.59(m，7H，2NCH，C5-H and py-H)，8.85(s，1H， C2-H)，11.34(s，1H，6-NH)，13.48(s，1H，CONH)；MS(m/z)：470M+H + ，计算 469.48M + 。 0097 试验例 实施例1-15提供的各环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西。

39、弗碱的抗肿瘤活性测定 0098 实施例1-15提供的环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱及其结构相近的对照 双西弗碱抗肿瘤药比生群(Bisantrene，BT)为供试样品，用二甲基亚砜(DMSO)配成 1.010-2molL -1 浓度的储备液，用10小牛血清的RPMI-1640培养液按10倍稀释法 稀释到所需的5个浓度梯度，取对数生长期的中国仓鼠卵巢(CHO)细胞以每孔5000个细 胞接种于96孔板，培养隔夜后，加入不同浓度的上述供试样品，48小时后弃去培养基，每孔 加入1gL -1 的溴化四氮唑蓝(MTT)溶液100L，继续培养4小时后弃去上清液，每孔加入 150L的二甲亚砜(DMSO)，轻轻。

40、振荡30分钟，用酶标仪在570nm波长处测其吸光度(OD) 值；再取对数生长期的人白血病细胞(HL60)和鼠白血病细胞(L1210)，以每孔7000个细胞 接种于96孔板，随后加入不同浓度的上述供试样品，48小时后每孔加入5gL -1 的MTT溶 液10L，继续培养4小时后加入10十二烷基磺酸内(SDS)溶液100L培养过夜，用酶 标仪在570nm波长处测其吸光度(OD)值。 0099 按下列公式计算出各浓度对癌细胞的抑制率，公式为：细胞抑制率() (1-实验组吸光度值)/对照组吸光度值100，然后以各药物浓度对数值对各浓度下 的细胞抑制率作线性回归，得到浓度-效应方程，从所得浓度-效应方程计。

41、算出各供试化合 物对实验癌细胞的半数抑制浓度(IC 50 )，具体测定数据见表1所示。 0100 表1各实施例提供环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱的抗肿瘤活性测定数据 说 明 书CN 102516168 A 12 11/11页 13 0101 0102 0103 从表1可以看出，实施例1-15提供的各环丙氟喹诺酮C3/C7双腙西弗碱对3种实 验癌细胞株的IC 50 值均低于50.0M，这表明实施例1-15提供的各环丙氟喹诺酮C3/C7双 腙西弗碱均具有较强的体外细胞毒活性。尤其是苯环含游离羟基和氟的化合物如实施例4 化合物、实施例7化合物、实施例8化合物和实施例11化合物以及杂环芳香烃基化合物如 实施例14化合物的活性优于或接近对照药物比生群的活性，具有强的体外细胞毒活性。 0104 按照药物开发的一般途径是先进行常规的抗肿瘤体外筛选，然后进行针对性的成 药研究，所以本发明提供的化合物具有强的抗肿瘤活性，可通过与人体可接受的酸成盐或 与药用载体混合用于制备抗肿瘤药物。 说 明 书CN 102516168 A 13 。