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1、(10)申请公布号 CN 104231100 A (43)申请公布日 2014.12.24 C N 1 0 4 2 3 1 1 0 0 A (21)申请号 201410446251.2 (22)申请日 2014.09.04 C08B 37/00(2006.01) (71)申请人中山安荞生物科技有限公司 地址 528437 广东省中山市火炬开发区会展 东路16号数码大厦1403号房 (72)发明人刘巴宁 郑安乔 (74)专利代理机构东莞市中正知识产权事务所 44231 代理人侯来旺 (54) 发明名称 一种云芝多糖的提取方法 (57) 摘要 本发明涉及一种云芝多糖的提取方法。该 方法包括以下步骤。
2、：先对样品进行预处理包括漂 洗、烘干及粉碎，再将样品加入碳酸钠溶液进行超 声提取，并先后经微孔滤膜及超孔滤膜过滤，然 后将滤液进行两次离心，将沉淀加碳酸钠溶液进 行浸提，离心并浓缩制得浓缩浆，最后将浓缩浆干 燥至含水量为3%8%。本发明对云芝进行超声提 取可使多糖提取率达到最高，同时可大大节省操 作时间，提高了提取效率，在云芝多糖在提取过程 中，采用2%5%的碳酸钠溶液作为溶剂，提取效果 好，且溶剂廉价，安全无害，经济环保，且本发明先 对样品进行粉碎过筛，在超声提取后先后两次过 滤，避免了有关杂质对提取过程的干扰。 (51)Int.Cl. 权利要求书1页 说明书3页 (19)中华人民共和国国家。
3、知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书1页 说明书3页 (10)申请公布号 CN 104231100 A CN 104231100 A 1/1页 2 1.一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤： （1）样品预处理：取云芝适量漂洗干净，烘干研磨成粉状，待用； （2）取步骤（1）的云芝粉末脱脂5-10g，加入溶剂1020ml超声提取，先进行微孔滤膜 过滤，收集滤液，再将滤液进行超孔滤膜过滤，收集超滤后的滤液； （3）将步骤（1）中超滤后的滤液加入1020ml无水乙醇中，混匀离心，弃上清液，沉淀再 加70%80%的乙醇1020ml混匀，离心，弃上清液，沉淀加碳酸钠溶液2050ml浸提。
4、0.51h， 离心，取上清液，进一步浓缩得到浓缩浆； （4）将步骤（2）中制得的浓缩浆进行干燥直到含水量为3%8%。 2.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，所述的云芝粉末为 可过40目的粗粉。 3.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（2）中所述的脱 脂方法具体为：用95%的乙醇在8085水浴2030min后抽干。 4.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（2）中所述的溶 剂为2%5%的碳酸钠溶液。 5.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（2）中所述的超 声提取时间为4555min。 6.根据权利要。
5、求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，根据权利要求1所述 的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（2）中微孔滤膜孔径为0.051um，微孔滤膜 过滤时的进压为26bar,出压为05bar。 7.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（2）中超滤选择 截留分子量为8001000Da的超滤膜，操作温度为3840；进压为18bar，出压为13bar。 8.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（3）中所述的浸 提时操作温度为6070。 9.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（3）中的离心速 度为40005000r/mi。
6、n，离心温度为4。 10.根据权利要求1所述的一种云芝多糖的提取方法，其特征在于，步骤（3）中所述的 浓缩为在4080条件下、真空度-0.08 -0.085Mpa浓缩到固形物含量为30%70%的的浓 缩浆。 权 利 要 求 书CN 104231100 A 1/3页 3 一种云芝多糖的提取方法 技术领域 0001 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种云芝多糖的提取方法。 背景技术 0002 云芝(Coriolusversicolor)又称为采绒革盖菌、千层蘑、彩云革盖菌等, 隶属真 菌门、担子菌亚门、多孔菌科、革盖菌属。云芝味甘、 淡, 性微寒, 有健脾利湿, 止咳平 喘, 清热解毒,抗肿瘤。
7、的功效。云芝多糖是云芝的主要有效成分，能激活免设细胞、提高机 体免疫功能，抗肿瘤、降血脂及抗菌，是安全有效的人或动物的免疫增强剂，可作为保健食 品的添加剂。 0003 目前云芝多糖的提取方法主要包括水浸提法、酸或碱提法等，两者对云芝多糖的 最高得率相差不大，但后者可对环境造成严重污染，而前者在生产工艺及生产成本等方面 具有较大的优势。但目前的水浸提法提取过程需花费510h，浸提液用量大，耗能大，且云芝 多糖的得率仅为7.81%左右。因此，急需寻求一种能获得高产率高含量的云芝多糖的提取 方法。 发明内容 0004 本发明的目的就是针对上述现有技术中存在的缺陷提供一种能获得高产率高含 量的云芝多糖。
8、的提取方法。 0005 本发明的技术方案如下： 一种云芝多糖的提取方法，包括以下步骤： （1）样品预处理：取云芝适量漂洗干净，烘干研磨成粉状，待用； （2）取步骤（1）的云芝粉末脱脂5-10g，加入溶剂1020ml超声提取，先进行微孔滤膜 过滤，收集滤液，再将滤液进行超孔滤膜过滤，收集超滤后的滤液； （3）将步骤（1）中超滤后的滤液加入1020ml无水乙醇中，混匀离心，弃上清液，沉淀再 加70%80%的乙醇1020ml混匀，离心，弃上清液，沉淀加碳酸钠溶液2050ml浸提0.51h， 离心，取上清液，进一步浓缩得到浓缩浆； （4）将步骤（2）中制得的浓缩浆进行干燥直到含水量为3%8%。 000。
9、6 优选的，所述的云芝粉末为可过40目的粗粉。 0007 步骤（2）中所述的脱脂方法具体为：用95%的乙醇在8085水浴2030min后抽 干。 0008 优选的，步骤（2）中所述的溶剂为2%5%的碳酸钠溶液。 0009 优选的，步骤（2）中所述的超声提取时间为4555min。 0010 步骤（2）中微孔滤膜孔径为0.051um，微孔滤膜过滤时的进压为26bar,出压为 05bar。 0011 步骤（2）中超滤选择截留分子量为8001000Da的超滤膜，操作温度为3840；进 压为18bar，出压为13bar。 说 明 书CN 104231100 A 2/3页 4 0012 优选的，步骤（3）。
10、中所述的浸提时操作温度为6070。 0013 优选的，步骤（3）中的离心速度为40005000r/min，离心温度为4。 0014 优选的，步骤（3）中所述的浓缩为在4080条件下、真空度-0.08 -0.085Mpa 浓缩到固形物含量为30%70%的的浓缩浆。 0015 本发明与现有技术相比，具有以下有益效果： 1. 研究显示，在室温下先将云芝粗粉浸泡4h左右后采用常规方法和超声提取多糖提 取率相似，均可达到最高。因此，本发明先对样品进行超声提取，不仅能达到较高的多糖提 取率，同时可大大节省操作时间，提高了提取效率。 0016 2. 本发明中在云芝多糖在提取过程中，采用2%5%的碳酸钠溶液作。
11、为溶剂，提取 效果好，且溶剂廉价，安全无害，经济环保。 0017 3.本发明先对样品进行粉碎过筛，在超声提取后先后两次过滤，避免了有关杂质 对提取过程的干扰。 具体实施方式 0018 本发明通过以下具体实施例更详细的说明本发明，可以使本专业技术人员更全面 的了解本发明，但不以任何方式限制本发明。 0019 实施例1 一种云芝多糖的提取方法，包括以下步骤： （1）样品预处理：取云芝适量漂洗干净，烘干研磨成40目的粗粉，待用； （2）取步骤（1）的云芝粉末脱脂5g，加入2%的碳酸钠溶液10ml超声提取45min，先采 用0.05um的微孔滤膜过滤，进压为2bar,出压为0bar，收集滤液，再将滤液。
12、采用截留分子量 为800Da的超滤膜进行超孔滤膜过滤，操作温度为38，进压为1bar，出压为1bar，收集超 滤后的滤液； （3）将步骤（1）中超滤后的滤液加入10ml无水乙醇中，混匀离心，弃上清液，沉淀再 加70%的乙醇10ml混匀，离心，弃上清液，沉淀加碳酸钠溶液20ml浸提0.5h，操作温度为 60，离心，取上清液，进一步浓缩得到浓缩浆； （4）将步骤（2）中制得的浓缩浆进行干燥直到含水量为3%。 0020 步骤（2）中所述的脱脂方法具体为：用95%的乙醇在80水浴20min后抽干。 0021 步骤（3）中的离心速度为4000r/min，离心温度为4。 0022 步骤（3）中所述的浓缩为。
13、在40条件下、真空度-0.08 Mpa浓缩到固形物含量为 30%的的浓缩浆。 0023 实施例2 一种云芝多糖的提取方法，包括以下步骤： （1）样品预处理：取云芝适量漂洗干净，烘干研磨成40目的粗粉，待用； （2）取步骤（1）的云芝粉末脱脂10g，加入5%的碳酸钠溶液20ml超声提取55min，先采 用1um的微孔滤膜过滤，进压为6bar,出压为5bar，收集滤液，再将滤液采用截留分子量为 1000Da的超滤膜进行超孔滤膜过滤，操作温度为40，进压为8bar，出压为3bar，收集超滤 后的滤液； （3）将步骤（1）中超滤后的滤液加入20ml无水乙醇中，混匀离心，弃上清液，沉淀再加 说 明 书C。
14、N 104231100 A 3/3页 5 80%的乙醇20ml混匀，离心，弃上清液，沉淀加碳酸钠溶液50ml浸提1h，操作温度为70， 离心，取上清液，进一步浓缩得到浓缩浆； （4）将步骤（2）中制得的浓缩浆进行干燥直到含水量为8%。 0024 步骤（2）中所述的脱脂方法具体为：用95%的乙醇在85水浴30min后抽干。 0025 步骤（3）中的离心速度为5000r/min，离心温度为4。 0026 步骤（3）中所述的浓缩为在80条件下、真空度 -0.085Mpa浓缩到固形物含量为 70%的的浓缩浆。 0027 实施例3 一种云芝多糖的提取方法，包括以下步骤： （1）样品预处理：取云芝适量漂洗。
15、干净，烘干研磨成40目的粗粉，待用； （2）取步骤（1）的云芝粉末脱脂8g，加入4%的碳酸钠溶液15ml超声提取50min，先采 用0.051um的微孔滤膜过滤，进压为4bar,出压3bar，收集滤液，再将滤液采用截留分子量 为900Da的超滤膜进行超孔滤膜过滤，操作温度为39，进压为5bar，出压为2bar，收集超 滤后的滤液； （3）将步骤（1）中超滤后的滤液加入15ml无水乙醇中，混匀离心，弃上清液，沉淀再 加75%的乙醇15ml混匀，离心，弃上清液，沉淀加碳酸钠溶液30ml浸提0.5h，操作温度为 65，离心，取上清液，进一步浓缩得到浓缩浆； （4）将步骤（2）中制得的浓缩浆进行干燥直到含水量为6%。 0028 步骤（2）中所述的脱脂方法具体为：用95%的乙醇在82水浴25min后抽干。 0029 步骤（3）中的离心速度为4500r/min，离心温度为4。 0030 步骤（3）中所述的浓缩为在60条件下、真空度-0.08 Mpa浓缩到固形物含量为 50%的的浓缩浆。 0031 以上所述实施例只是本发明的较佳实例，并非来限制本发明实施范围，故凡依本 发明申请专利范围所述的构造、特征及原理所做的等效变化或修饰，均应包括本发明专利 申请范围内。 说 明 书CN 104231100 A 。