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1、(10)申请公布号 CN 102850415 A (43)申请公布日 2013.01.02 C N 1 0 2 8 5 0 4 1 5 A *CN102850415A* (21)申请号 201210350202.X (22)申请日 2012.09.20 C07H 15/18(2006.01) C07H 1/08(2006.01) (71)申请人南京泽朗医药科技有限公司 地址 210046 江苏省南京市栖霞区尧化街道 甘家边108号05幢6楼 (72)发明人刘东锋 (54) 发明名称 一种海力可苷的制备方法 (57) 摘要 本发明涉及一种海力可苷的制备方法,方法 是将车前地上部分粉碎成粗粉,加5。
2、-10倍水加热 至60-70保温提取,提取液滤过,加入超滤膜系 统超滤,透过液再加入纳滤膜系统纳滤,浓缩液加 乙醇搅拌溶解,静置,减压浓缩至无醇味,加水稀 释后用乙酸乙酯萃取,水层蒸去乙酸乙酯后上大 孔吸附树脂柱,水醇洗脱,洗脱液减压浓缩至干得 到粗提物,将粗提物采用高速逆流色谱分离,紫外 检测器检测,收集目标成分,冷藏结晶,得到海力 可苷。采用本发明制备海力可苷,效率高、产品含 量高,适合规模化生产。 (51)Int.Cl. 权利要求书1页 说明书3页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 3 页 1/1页 2 1.1、一种海力可苷的制备方法。
3、,其特征在于包括以下步骤:将车前地上部分粉碎成粗 粉,加8-12倍水加热至60-70保温提取2-4次,合并水提取液,加入超滤膜系统超滤,透过 液再加入纳滤膜系统纳滤,浓缩液加90-95%乙醇搅拌溶解,静置过夜,抽滤,减压浓缩至无 醇味,浓缩液加水稀释后用乙酸乙酯萃取多次,将水层蒸去乙酸乙酯后上大孔吸附树脂柱, 先用水洗脱杂质,再用40-60%乙醇洗脱,醇洗脱液减压浓缩至干得到粗提物,将粗提物采 用高速逆流色谱分离,紫外检测器检测,收集目标成分,冷藏结晶,得到海力可苷。 2.2、根据权利要求1所述的一种海力可苷的制备方法,其特征在于所述超滤膜为截留 分子量3000-10000的中空纤维素膜,纳滤。
4、膜为截留分子量300-500的中空纤维素膜。 3.3、根据权利要求1所述的一种海力可苷的制备方法,其特征在于所述大孔吸附树脂 为HPD100、XDA-1、AB-8、KLFC-150型大孔吸附树脂中的一种。 4.4、根据权利要求1所述的一种海力可苷的制备方法,其特征在于所述高速逆流色谱 的溶剂系统为正己烷-甲醇-水-乙腈组合,比例为(5-10):(3-5):(2-5):(1-4),下 相为流动相,上相为固定相。 权 利 要 求 书CN 102850415 A 1/3页 3 一种海力可苷的制备方法 技术领域 0001 本发明属于中药化学领域,涉及一种海力可苷的制备方法。 背景技术 0002 海力可。
5、苷为苯丙素苷类化合物,CAS号为132278-04-7,分子式为C 29 H 36 O 17 ,分子 量为656.59,mp.182.6-190.3,来源于车前科(Plantaginaceae)植物车前Plantago astiatica L.地上部分。药理研究发现海力可苷可抑制cAMP磷酸二酯酶活性、可抑制5-脂 氧化酶活性,还具有醛糖还原酶抑制作用等。 0003 目前尚未检索到从车前中提取制备海力可苷的方法报道。 发明内容 0004 本发明要解决的技术问题是提供一种海力可苷的制备方法,该工艺过程简单、产 品纯度高、可连续制备。 0005 为实现上述目的,本发明采用以下技术方案: 一种海力可。
6、苷的制备方法,其特征在于包括以下步骤: 将车前地上部分粉碎成粗粉,加8-12倍水加热至60-70保温提取2-4次,合并水提取 液,加入超滤膜系统超滤,透过液再加入纳滤膜系统纳滤,浓缩液加90-95%乙醇搅拌溶解, 静置过夜,抽滤,减压浓缩至无醇味,浓缩液加水稀释后用乙酸乙酯萃取多次,将水层蒸去 乙酸乙酯后上大孔吸附树脂柱,先用水洗脱杂质,再用40-60%乙醇洗脱,醇洗脱液减压浓 缩至干得到粗提物,将粗提物采用高速逆流色谱分离,紫外检测器检测,收集目标成分,冷 藏结晶,得到海力可苷。 0006 所述超滤膜为截留分子量3000-10000的中空纤维素膜,纳滤膜为截留分子量 300-500的中空纤维。
7、素膜。 0007 所述大孔吸附树脂为HPD100、XDA-1、AB-8、KLFC-150型大孔吸附树脂中的一种。 0008 所述高速逆流色谱的溶剂系统为正己烷-甲醇-水-乙腈组合,比例为(5-10): (3-5):(2-5):(1-4),下相为流动相,上相为固定相。 0009 本发明的有益效果在于:采用膜分离技术,物理除杂,能耗低,污染小;采用高速 逆流色谱分离,分离速度快,样品无损失,溶剂可以循环使用,适合连续制备。 0010 具体实施方式: 下面将结合具体实施方式进一步说明本发明,但本发明要求保护的范围并不局限于下 列实施方式。 0011 实施例1: 将车前地上部分粉碎,取5kg,加10倍。
8、水加热70保温提取1.5小时,过滤液体,再加8 倍水加热至70提取1小时,合并水提液冷至常温,滤过,加入截留分子量5000的中空纤维 素膜系统超滤,加适量水透析,收集透过液加入截留分子量400的中空纤维素膜系统浓缩, 浓缩液加3倍体积的90%乙醇,搅拌均匀,静置过夜,抽滤,滤液回收乙醇至无醇味,浓缩液 说 明 书CN 102850415 A 2/3页 4 加水稀释,用乙酸乙酯萃取3次(每次用乙酸乙酯500ml),水层蒸去乙酸乙酯后上AB-8大孔 吸附树脂柱,先用6倍柱体积的去离子水洗脱杂质,再用5倍柱体积的45%乙醇洗脱,收集 醇洗脱液,减压回收乙醇至干得粗提物3.5g。取正己烷、甲醇、水、乙。
9、腈按8:4:3:3混合,混 合充分分层后,取上相注满高速逆流色谱柱,同时开转主机800rpm,泵入下相做流动相,待 系统平衡后,流速调节为2.5ml/min,同时用固定相溶解粗提物,由进样阀进样,紫外检测器 监测,收集目标流分,连续制备,冷藏流分,得结晶物370mg,经HPLC检测,纯度98.6%。 0012 实施例2: 将车前地上部分粉碎,取10kg,加9倍水加热60保温提取2小时,过滤液体,再加8 倍水加热至70提取1小时,合并水提液冷至常温,滤过,加入截留分子量3000的中空纤维 素膜系统超滤,加适量水透析,收集透过液加入截留分子量500的中空纤维素膜系统浓缩, 浓缩液加3倍体积的95%。
10、乙醇,搅拌均匀,静置过夜,抽滤,滤液回收乙醇至无醇味,浓缩液 加水稀释,用乙酸乙酯萃取2次(每次用乙酸乙酯1000ml),水层蒸去乙酸乙酯后上XDA-1大 孔吸附树脂柱,先用8倍柱体积的去离子水洗脱杂质,再用5倍柱体积的50%乙醇洗脱,收 集醇洗脱液,减压回收乙醇至干得粗提物7g。取正己烷、甲醇、水、乙腈按10:3:5:4混合,混 合充分分层后,取上相注满高速逆流色谱柱,同时开转主机750rpm,泵入下相做流动相,待 系统平衡后,流速调节为2.5ml/min,同时用固定相溶解粗提物,由进样阀进样,紫外检测器 监测,收集目标流分,连续制备,冷藏流分,得结晶物734mg,经HPLC检测,纯度98.。
11、9%。 0013 实施例3: 将车前地上部分粉碎,取10kg,加8倍水加热60保温提取1.5小时,过滤液体,再加 8倍水加热至70提取1小时,如此反复再提取1次,合并水提液冷至常温,滤过,加入截 留分子量10000的中空纤维素膜系统超滤,加适量水透析,收集透过液加入截留分子量500 的中空纤维素膜系统浓缩,浓缩液加3倍体积的90%乙醇,搅拌均匀,静置过夜,抽滤,滤液 回收乙醇至无醇味,浓缩液加水稀释,用乙酸乙酯萃取3次(每次用乙酸乙酯1000ml),水层 蒸去乙酸乙酯后上HPD100大孔吸附树脂柱,先用6倍柱体积的去离子水洗脱杂质,再用4 倍柱体积的40%乙醇洗脱,收集醇洗脱液,减压回收乙醇至。
12、干得粗提物7.2g。取正己烷、甲 醇、水、乙腈按5:3:2:1混合,混合充分分层后,取上相注满高速逆流色谱柱,同时开转主机 850rpm,泵入下相做流动相,待系统平衡后,流速调节为2.5ml/min,同时用固定相溶解粗提 物,由进样阀进样,紫外检测器监测,收集目标流分,连续制备,冷藏流分,得结晶物726mg, 经HPLC检测,纯度98.2%。 0014 实施例4: 将车前地上部分粉碎,取20kg,加12倍水加热65保温提取2.5小时,过滤液体,再加 8倍水加热至70提取2小时,反复提取4次,合并水提液冷至常温,滤过,加入截留分子量 8000的中空纤维素膜系统超滤,加适量水透析,收集透过液加入截。
13、留分子量300的中空纤 维素膜系统浓缩,浓缩液加3倍体积的95%乙醇,搅拌均匀,静置过夜,抽滤,滤液回收乙醇 至无醇味,浓缩液加水稀释,用乙酸乙酯萃取4次(每次用乙酸乙酯2000ml),水层蒸去乙酸 乙酯后上KLFC-150大孔吸附树脂柱,先用7倍柱体积的去离子水洗脱杂质,再用6倍柱体 积的60%乙醇洗脱,收集醇洗脱液,减压回收乙醇至干得粗提物15g。取正己烷、甲醇、水、乙 腈按6:5:4:2混合,混合充分分层后,取上相注满高速逆流色谱柱,同时开转主机900rpm, 泵入下相做流动相,待系统平衡后,流速调节为2.5ml/min,同时用固定相溶解粗提物,由进 说 明 书CN 102850415 A 3/3页 5 样阀进样,紫外检测器监测,收集目标流分,连续制备,冷藏流分,得结晶物1.4g,经HPLC检 测,纯度98.5%。 说 明 书CN 102850415 A 。