《一种斯氏木碱的制备方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种斯氏木碱的制备方法.pdf（4页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。
1、(10)申请公布号 CN 102875616 A (43)申请公布日 2013.01.16 C N 1 0 2 8 7 5 6 1 6 A *CN102875616A* (21)申请号 201210359912.9 (22)申请日 2012.09.25 C07H 17/00(2006.01) C07H 1/08(2006.01) (71)申请人南京泽朗农业发展有限公司 地址 211225 江苏省南京市溧水县白马镇工 业集中区食品园3号 (72)发明人苏刘花 (54) 发明名称 一种斯氏木碱的制备方法 (57) 摘要 本发明提供一种斯氏木碱的制备方法，其特 征在于包含以下步骤：（1）将威廉斯氏木。
2、药材粉 碎，用乙醇水溶液采用回流或渗漉法提取，提取液 浓缩至小体积，加盐酸溶解，滤除不溶物，再将酸 液调至碱性，用二氯甲烷萃取，萃取液回收试剂得 总生物碱；（2）将上述总生物碱采用高速逆流色 谱法分离纯化得斯氏木碱。本方法具有所得产品 含量高，操作简单，提率高等优点。 (51)Int.Cl. 权利要求书1页 说明书2页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权利要求书 1 页 说明书 2 页 1/1页 2 1.一种斯氏木碱的制备方法，其特征在于包含以下步骤： （1）提取：将威廉斯氏木药材粉碎，加入512倍量的乙醇水溶液液回流或渗漉提取12 次，每次0.55h，合并得提取液。
3、； （2）除杂：将上述提取液浓缩至小体积，加入25倍量质量百分比浓度为1%的盐酸水 溶液溶解，过滤，再加入碱液将稀释液调至pH911，加等体积量的二氯甲烷萃取，萃取液回 收试剂得威廉斯氏木总生物碱； （3）纯化：将上述威廉斯氏木总生物碱采用高速逆流色谱法分离纯化，设定色谱仪转速 为800900r/min，流速为1.55.0ml/min，收集流出液，回收试剂，真空干燥得产品。 2.如权利要求1所述的一种斯氏木碱的制备方法，其特征在于步骤（1）所述乙醇液为 体积百分比浓度为6080%的乙醇水溶液。 3.如权利要求1所述的一种斯氏木碱的制备方法，其特征在于步骤（2）所述提取液浓 缩至密度1.21.6。
4、g/ml。 4.如权利要求1所述的一种斯氏木碱的制备方法，其特征在于步骤（2）所述碱性溶液 为25mol/L的氨水溶液。 5.如权利要求1所述的一种斯氏木碱的制备方法，其特征在于步骤（3）所述高速逆流 色谱法采用的溶剂系统是二氯甲烷-甲醇-pH3.3磷酸盐缓冲液（5-9:15-17:5-8）。 6.如权利要求5所述的一种斯氏木碱的制备方法，其特征在于步骤（3）所述溶剂系统 制备方法为：将氯仿-甲醇-pH3.3磷酸盐缓冲液按上述比例量取，混合均匀后静置，放出上 层作为固定相，下层作为流动相，将威廉斯氏木总生物碱用下相溶解。 权 利 要 求 书CN 102875616 A 1/2页 3 一种斯氏木。
5、碱的制备方法 技术领域 0001 本发明属于天然产物分离领域，具体是涉及一种应用高速逆流色谱技术从威廉斯 氏木中纯化斯氏木碱的方法。 背景技术 0002 斯氏木碱（Sickingine）是从茜草科植物染料斯氏木Sickingia tinctoria (HBK) Schum.及威廉斯氏木Sickingia williamsii Standl.植物中分离得到的一种吲哚类生物 碱，呈淡黄色无定形粉末转，mp.136-138。现代药理研究表明，斯氏木碱具有抑制回肠收 缩作用，可抑制豚鼠离体回肠由点刺激引起的收缩，ED 50 为100M。 0003 现有提取斯氏木碱的报道并不多见，市场上也尚未有斯氏木碱。
6、对照品的出售，因 此提供一种斯氏木碱的制备方法则很有必要，可以为其后续研究提供支持。 发明内容 0004 本发明的目的是提供一种斯氏木碱的制备方法，该方法制得的斯氏木碱质量好， 纯度高。 0005 为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案： 一种斯氏木碱的制备方法，其特征在于包含以下步骤： （1）提取：将威廉斯氏木药材粉碎，加入512倍量的乙醇水溶液液回流或渗漉提取12 次，每次0.55h，合并得提取液； （2）除杂：将上述提取液浓缩至小体积，加入25倍量质量百分比浓度为1%的盐酸水 溶液溶解，过滤，再加入碱液将稀释液调至pH911，加等体积量的二氯甲烷萃取，萃取液回 收试剂得威廉斯氏木总生物。
7、碱； （3）纯化：将上述威廉斯氏木总生物碱采用高速逆流色谱法分离纯化，设定色谱仪转速 为800900r/min，流速为1.55.0ml/min，收集流出液，回收试剂，真空干燥得产品。 0006 步骤（1）所述乙醇液为体积百分比浓度为6080%的乙醇水溶液。 0007 步骤（2）所述提取液浓缩至密度1.21.6g/ml。 0008 步骤（2）所述碱性溶液为25mol/L的氨水溶液。 0009 步骤（3）所述高速逆流色谱法采用的溶剂系统是二氯甲烷-甲醇-pH3.3磷酸盐 缓冲液（5-9:15-17:5-8）。 0010 步骤（3）所述溶剂系统制备方法为：将氯仿-甲醇-pH3.3磷酸盐缓冲液按上述比。
8、 例量取，混合均匀后静置，放出上层作为固定相，下层作为流动相，将威廉斯氏木总生物碱 用下相溶解。 0011 本发明的有益效果是采用高速逆流色谱法纯化，样品损失少，得率高。 0012 具体实施方式： 下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限 于下列实施方式。 说 明 书CN 102875616 A 2/2页 4 0013 实施例1： 取威廉斯氏木全植物10kg，粉碎，加入50L60%乙醇回流提取2次，每次0.5h，合并提取 液，浓缩至密度1.5g/ml，加入2倍量1%盐酸溶液稀释，滤除沉淀后，加入2mol/L氨水调至 pH9.2，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收试剂，。
9、得威廉斯氏木总碱。 0014 取氯仿-甲醇-pH3.3磷酸盐缓冲液按（5:13:6）体积比置于分液漏斗中，混匀 后，静置，放出上层作为固定相，下层作为流动相，将威廉斯氏木总碱用下相溶解，开启制备 型高速逆流色谱仪，先将固定相泵入色谱柱中，再以1.5ml/min流速泵入流动相，并通过进 样阀连续进样，控制转速为800r/min，收集流出液，浓缩，干燥得斯氏木碱1.45g，检测含量 94.4%。 0015 实施例2： 取威廉斯氏木全植物20kg，粉碎，加入240L70%乙醇渗漉提取2次，每次5h，合并提取 液，浓缩至密度1.6g/ml，加入3倍量1%盐酸溶液稀释，滤除沉淀后，加入4mol/L氨水调。
10、至 pH11.0，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收试剂，得威廉斯氏木总碱。 0016 取氯仿-甲醇-pH3.3磷酸盐缓冲液按（6:17:5）体积比置于分液漏斗中，混匀 后，静置，放出上层作为固定相，下层作为流动相，将威廉斯氏木总碱用下相溶解，开启制备 型高速逆流色谱仪，先将固定相泵入色谱柱中，再以3.5ml/min流速泵入流动相，并通过进 样阀连续进样，控制转速为920r/min，收集流出液，浓缩，干燥得斯氏木碱2.81g，检测含量 96.2%。 0017 实施例3： 取威廉斯氏木全植物20kg，粉碎，加入160L80%乙醇回流提取1次，提取3h，合并提取 液，浓缩至密度1.2g/ml，加入5倍。
11、量1%盐酸溶液稀释，滤除沉淀后，加入5mol/L氨水调至 pH10.3，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收试剂，得威廉斯氏木总碱。 0018 取氯仿-甲醇-pH3.3磷酸盐缓冲液按（9:16:8）体积比置于分液漏斗中，混匀 后，静置，放出上层作为固定相，下层作为流动相，将威廉斯氏木总碱用下相溶解，开启制备 型高速逆流色谱仪，先将固定相泵入色谱柱中，再以5ml/min流速泵入流动相，并通过进样 阀连续进样，控制转速为1000r/min，收集流出液，浓缩，干燥得斯氏木碱3.46g，检测含量 93.7%。 0019 实施例4： 取威廉斯氏木全植物20kg，粉碎，加入138L65%乙醇回流提取2次，提取2。
12、.5h，合并提 取液，浓缩至密度1.4g/ml，加入3倍量1%盐酸溶液稀释，滤除沉淀后，加入2mol/L氨水调 至pH10.6，用等量二氯甲烷萃取，萃取液回收试剂，得威廉斯氏木总碱。 0020 取氯仿-甲醇-pH3.3磷酸盐缓冲液按（8:15:7）体积比置于分液漏斗中，混匀 后，静置，放出上层作为固定相，下层作为流动相，将威廉斯氏木总碱用下相溶解，开启制备 型高速逆流色谱仪，先将固定相泵入色谱柱中，再以2.2ml/min流速泵入流动相，并通过进 样阀连续进样，控制转速为850r/min，收集流出液，浓缩，干燥得斯氏木碱3.43g，检测含量 95.3%。 说 明 书CN 102875616 A 。