一种分离纯化制备神经节苷脂工艺.pdf

摘要
申请专利号：	CN85102590	申请日：	1985.04.01
公开号：	CN85102590A	公开日：	1985.11.10
当前法律状态：	撤回	有效性：	无权
法律详情：	\|\|\|公开\|\|\|
IPC分类号：	B01D15/08	主分类号：	B01D15/08
申请人：	南开大学
发明人：	商宗一; 张金红
地址：	天津市南开区八里台
优先权：
专利代理机构：	南开大学专利事务所	代理人：	朱祚铭;解松凡
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内容摘要

一般分离纯化制备神经节苷脂工艺是将细胞匀浆清液浓缩后透析，再用无机吸附或离子交换树脂柱分离纯化。本工艺使用新型大孔吸附树脂直接及附匀浆清液中的全部神经节苷脂成分，可在层析柱上完成浓缩、脱盐、纯化全部过程。大大节省时间和有机溶剂用量，并简化中间处理程序。产品纯度高。实收率高。

权利要求书

1：一种分离纯化制备神经节苷脂工艺，其特征在于将细胞匀浆提取清液直接通过大孔吸附树脂层析柱，再用有机溶剂(氯仿和甲醇)与水的混合液洗脱，得纯神经节苷脂。
2：按照权利要求1所说的分离纯化制备神经节苷脂工艺，其特征在于细胞匀浆提取清液中含有机溶剂（氯仿和甲醇）和水，其有机溶剂与水之比为3∶2～4∶3，PH为2-6。
3：按照权利要求1所说的分离纯化制备神经节苷脂工艺，其特征在于所用大孔吸附树脂为中等极性的吸附树脂。
4：按照权利要求1所说的分离纯化制备神经节苷脂工艺，其特征在于洗脱用的有机溶剂与水之比为8∶1～9∶1。

说明书

本发明属于制备具有生物活性物质的工艺。
    神经节苷脂有重要生物功能和活性，它主要存在于动物脑细胞膜，现有一般制备方法〔1-3〕，是将脑组织匀浆后的提取液浓缩、透析再经过无机吸附柱或离子交换树脂柱分离纯化，用有机溶剂洗脱，再浓缩、冷冻干燥而得。该工艺周期长，有机溶剂耗量大，神经节苷脂部分有效组分损失，产品实收率较低。

    本发明的特点主要是利用中等极性的大孔径吸附树脂层析柱，当含有机溶剂（氯仿和甲醇）的脑组织匀浆清液（有机溶剂与水之比为3∶2～4∶3，PH为2-6）通过层析柱时，神经节苷脂的有效组分全部吸附于柱上，杂质（有机的和无机的）可洗去，再改变有机溶剂与水的配比即8∶1-9∶1，进行洗脱，可将神经节苷脂洗脱下来。从而省去了提取浓缩及透析等过程。将洗脱液浓缩、冷冻干燥即可得纯品。这大大简化了现有生产工艺过程。同时可避免有效组分在透析和离子交换柱中的丢失和破坏。本工艺处理过程周期短，条件温和，可保持有效组分的生物活性，全过程所需时间只相当现有生产工艺的五分之一，产品纯度高，组分全。

    实例：将鲜脑组织5Kg匀浆，同时加入有机溶剂和水（3∶2）。弃渣，得提取清液约40立升。将清液通过大孔树脂柱，流出液可回收有机溶剂，再用有机溶剂（与水之比8∶1）洗脱。

    a.收集全部洗脱液，经浓缩、干燥，得粗制品15g。粗制品中唾液酸含量20%，粗制品实收率为～3g/Kg鲜组织。

    b.如将收集地洗脱液，再上一次树脂柱，经洗脱、干燥，得精制品8g，实收率为～1.6g/Kg鲜组织。精制品含唾液酸为30%。

    参考文献

    1.Biochem.Biophys.Acta.617：97-109    （1980）

    2.Biochem.Biophys.Acta.60：350    （1962）

    3.Biochem.J.    88：373（1963）