本发明涉及新的喹啉硫醚的制备方法及其药物组合物。 3-氨基-4-乙硫基喹啉已在先有技术[Hiroyuki Sawanishi等：Heterocycles，22/7，1501-1504（1984）]中揭示。根据这篇文献，该化合物可在乙硫醇存在下，经3-叠氮基喹啉光解或热解来制备。但是，作者全然没有提及3-氨基-4-乙硫基喹啉有任何生物作用。
本发明提供了通式Ⅰ所示的新的喹啉硫醚及其与药物学上可接受的酸的加成盐，
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通式中
R
1代表C
1-5烷基，C
2-5烯基，C
2-5炔基，C
3-7环烷基或任意取代的苯基-（C
1-4烷基）;
R
2代表氢或C
1-5酰基;
X
1和X
2可以相同或不同，各自代表氢，囟素，三氟甲基或C
1-4烷氧基;
条件是当R
1代表乙基时，R
2，X
1和X
2中至少一个不是氢。
通式Ⅰ的化合物具有有价值的药物性质，首先用作有效的和选择性的抗焦虑剂。通式Ⅰ化合物的特别优点在于它的选择性的抗焦虑作用，即该抗焦虑作用实际上没有镇静和抗惊厥作用。
本申请文中所用术语“C
1-5烷基”是指直链或支链烷基（例如甲基，乙基，正丙基，异丙基，正丁基等）。术语“C
2-5烯基”是指至少有一个双键的直链或支链脂肪烃基（例如，乙烯基，烯丙基，2-丙烯基，甲代烯丙基等）。术语“C
2-5炔基”是指至少有一个三键的直链或支链脂肪烃基（例如，炔丙基）。术语“C
3-7环烷基”是指如环丙基，环丁基，环戊基，环己基等环烷基。术语“苯基-（C
1-4烷基）”是指至少一个氢原子被苯基取代了的C
1-4烷基（例如苄基，β-苯基乙基），而该苯基也可以有一个或多个相同的或不同的取代基（例如囟素，烷氧基，烷基，硝基，氨基，羟基等）。术语“C
1-5酰基”指的是相应烷链羧酸的酸残基（例如乙酰基，丙酰基，丁酰基等）。术语“囟素”是指氟，氯，溴和碘原子。
通式Ⅰ化合物的药物上可接受的酸加成盐可由通式Ⅰ化合物与药物可接受的无机酸或强的有机酸（例如盐酸，氢溴酸，氢碘酸，硫酸，高氯酸，乙磺酸等）生成。
通式Ⅰ化合物的特别好的代表性化合物是3-氨基-4-乙硫基-7-氯-喹啉及其药物上可接受的酸加成盐。
本发明还提供了通式Ⅰ化合物及其药物上可接受的酸加成盐的制备方法，包括
a）通式为Ⅱ的3-氨基-4-喹啉硫醇或其盐与通式为Ⅲ的化合物反应
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其中X
1、X
2和R
1的定义同上，X代表离去基团;或
b）通式为Ⅳ的3-硝基-4-囟代喹啉与通式为Ⅴ的硫醇化合物或其盐反应并进一步还原所得的产物，
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其中Hlg代表囟素，X
1、X
2和R
1的定义同上;或
c）通式为Ⅵ的3-硝基-4-喹啉硫醇或其盐与通式为Ⅲ的化合物反应，并进一步还原所得的产物，
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其中X
1和X
2的定义同上，
如果需要，可酰化R为氢的通式Ⅰ化合物成为R
2为C
1-5酰基的相应的通式Ⅰ化合物;和/或
如果需要，可水解R
2为C
1-5酰基的通式Ⅰ化合物为R
2为氢的相应的通式Ⅰ化合物;和/或如果需要，可以将通式Ⅰ化合物转变成其药物上可接受的酸加成盐或者由其酸加成盐释出通式Ⅰ化合物。
按照方法a），通式Ⅱ化合物与通式Ⅲ化合物反应。在通式Ⅲ化合物中，离开基团X最好代表囟素（如氯，溴或碘）或烷磺酰氧基（如甲磺酰氧基）或芳磺酰氧基（如苯磺酰氧基，对-溴苯磺酸氧基或对-甲苯基磺酰氧基）。
通式为Ⅲ的烷基化剂最好过量使用。该反应可以在20℃-160℃进行，最好是在沸点。该反应可以在极性溶剂中进行，最好在水性介质中。所得通式Ⅰ化合物可通过已知方法从反应混合物中分离出来（例如冷却和过滤，或提取）。
按照方法b），通式为Ⅳ的4-囟代-3-硝基喹啉与通式为Ⅴ的硫醇或其盐反应，并进一步还原所得产物。通式Ⅳ化合物和通式Ⅴ化合物的反应可在20℃-160℃进行。通式Ⅴ的硫醇也可以用其盐（如碱金属盐）。
反应可在极性溶剂中完成。优选的反应介质是烷醇（例如甲醇或乙醇），二甲基亚砜或二甲基甲酰胺。通过已知方法可将所得产物就地还原成所需的通式为Ⅰ的氨基化合物。最好使用硫化钠作为还原剂并在水-醇介质中进行。
按照方法c），通式为Ⅵ的3-硝基-4-喹啉硫醇或其盐与通式为Ⅲ的烷基化剂反应，并还原所得产物。通式为Ⅵ的化合物与通式为Ⅲ的化合物之间的反应可以在20℃-160℃完成，最好是在加热下进行。可以用已知方法就地还原所得产物生成所要的氨基化合物。最好用硫化钠将硝基还原为氨基，如方法b）所述。
如果需要，可以将R
2为氢的通式Ⅰ化合物酰化成R
2为C
1-5酰基的通式Ⅰ化合物。酰化作用可通过已知方法用相应的链烷酸或其反应活性衍生物就地进行。所说的反应活性衍生物可以是酰囟，酸酐或酯。最好是使用相应的酸酐酰化R
2为氢的通式Ⅰ化合物。所说的酸酐也可过量使用，这时它还起反应介质的作用。不过，酰化作用也可以在惰性有机溶剂（如吡啶）中进行。如果酰化作用用酰囟进行，最好是在酸结合剂存在下 进行。为此可应用有机碱或无机碱（例如碱金属碳酸盐，碱金属碳酸氢盐，三乙胺等）。酰化作用也可应用相应的游离的链烷酸进行，这时，最好在脱水剂（例如二环己基碳二亚胺）存在下进行。酰化作用可在0-40℃下方便地进行。
如果需要，R
2为酰基的通式Ⅰ化合物可以水解成R
2为氢的通式Ⅰ化合物。水解作用可通过已知方法，在酸性（例如盐酸）或碱性（例如氢氧化钠）介质中就地进行。
通式Ⅰ化合物可以转化成药物上可接受的酸的加成盐。可以通过已知方法在惰性溶剂中，通式Ⅰ地碱与等摩尔相应的酸就地反应而进行成盐反应。
通式Ⅱ和Ⅳ的原料化合物部分是已知的[Bachman等：J.Am.Chem.Soc.69，365-371（1947）]或可按照制备类似已知化合物的方法制备。通式Ⅲ和Ⅴ的化合物是市场上可买到的。
3-氨基-4-乙硫基-7-氯-喹啉盐酸盐（以下称“化合物A”）的药理作用由以下试验确证。该化合物A是通式Ⅰ化合物的典型代表。
1）急性毒性
急性毒性以CFY大鼠（100-160g）评价。每组十只大鼠。以10ml/kg口服给化合物A。试验前停食16小时。每一剂量给药组由等数雄性和雌性大鼠组成。记录48小时内的死亡数。LD
50值由Litchfield和Wilcoxon作图法计算。
口服LD
50＝465mg/kg。
2）化合物A抗焦虑效应与镇静作用的测定
测定药物抗焦滤效应的基本策略是在冲突情况下检验药物的活性。我们诱发一个获得性的反应，然后，当反应发生时通过冲击来抑制该反应，并通过药物诱发而增加此冲击效应来测定抗焦虑作用，而镇静效应则是通过药物诱发而减低的未冲击效应来测定。
试验大鼠停食96小时但可自由饮水，停食第四天供水约7ml而在给干食时每天供水35ml[Knoll，J.J.，Neural Transm.59，163-194（1984）]。这样，当我们将饮水管和鼠笼底部栅网接到电路上时，大鼠由于试图找水喝而经常被电击。极度饥饿的大鼠没有水喝就不能进食，因而必须尽最大可能克服这种障碍。这是检验化合物抗焦虑作用的一种灵敏试验。
10只一组体重230-250g的雄性CFY大鼠喂以标准食粒并随意喝自来水，在标准环境条件（室温22-24℃）下饲养两周供试验使用。试验前，单个放在笼子中的大鼠停食96小时但可随意饮水。
只选择饥饿期间体重损失不超过80g的大鼠做试验。在我们的试验中，由550只雄性大鼠在96小时停食期间体重损失主得的平均值为66g。
选择试验大鼠的另一方面是观察停食后其身体健康状况和正常活动。有不到百分之十的大鼠由于身体状况不好不能用于试验。
试验中使用一个清洁的有不透钢格底的有机玻璃盒子（39×27×12cm），盒子里有放饲料块的盘子和饮水管。该不透钢格底、饮水管和电刺激器（玻璃S48）相连接每隔20秒钟在电路中发出10秒钟的电休克刺激。电流参数（100V25ohm;7.5ms;5Hz）是经验选定的，是根据可阻止非常饥饿的大鼠耗水量至可阻止对照组（未受冲击）大鼠的三分之一耗水量的电休克刺激选择的。
停食96小时后，大鼠在该装置中度过1小时。在长期饥饿后进食期的第1小时，给非常饥饿的大鼠吃5-6g饲料块。未受电冲击大鼠组在进食期的第1小时中，饿鼠的耗水量经测量为6-7ml，而受冲击组的大鼠，耗水量减少到小于3ml。
按0.5ml/100g体重剂量胃肠外给药。考虑到长时间停食所以不口服给药。
用t-试验进行统计分析。抗焦虑作用由受过电冲击的大鼠确定而镇 静作用由未受冲击的大鼠确定。
参考化合物利眠宁的抗焦虑与镇静效果示于表1中。皮下注射0.1mg/kg利眠宁显示出特征的抗焦虑效果，而镇静剂量为10mg/kg。
利眠宁具有苯并二氮杂
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受体的激动剂的作用，其抗焦虑效应被RO-15-1788拮抗，RO-15-1788是苯并二氮杂
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受体选择性的拮抗剂，这些效果如表Ⅱ所示。
表Ⅲ示出化合物A的抗焦虑效果，在此试验中化合物A比作抗焦虑剂的利眠宁强20倍。RO-15-1788对化合物A的抗焦虑活性的拮抗作用示于表Ⅳ中。
镇静剂量和抗焦虑剂量之间的比值，是10∶1＝100（见表1）;而化合物A是2.5∶0.005＝500（见表Ⅲ）。
3.化合物A与苯并二氮杂
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受体结合的测定
化合物A与利眠宁的离体结合试验是用大鼠脑膜制剂进行比较测定的。用有聚四氟乙烯杵棒的玻璃匀浆器将雄性CFY大鼠皮层于0.32M蔗糖中匀浆。细胞核以1000g旋沉15分钟。上清液以40，000g，离心15分钟。颗粒在PH7.1的5mM TRIS-柠檬酸盐缓冲液中用polytron P10匀浆并于0℃泡溶15分钟。此微粒溶于PH7.1的50mM TRIS-柠檬酸盐缓冲液中并于-20℃下放置过夜。熔化并离心（40，000g15分钟）后，该微粒用PH7.1的50mM TRIS-柠檬酸盐缓冲液用离心法洗涤三次。最终微粒以1∶30（体积比）转入同样的缓冲液中。配基：2n M
3H-安定比活性86 Ci/mmol）。
保温：在PH7.1的50mM TRIS-柠檬酸盐缓冲液中，于0℃-4℃，1小时
最终体积：0.25ml
最终蛋白质浓度：约0.5mg/ml。
用冷缓冲液稀释以中止结合反应并用GF/B Whatman滤纸迅速过滤。
用六个不同浓度药剂做三个平行试验并重复两次。将化合物A溶解于浓乙酸和蒸馏水中，然后用保温缓冲液进一步稀释浓度成10
-3M的溶液。不含药物的空白溶液以同样方法制备。将利眠宁溶解于保温缓冲液中。
利眠宁和化合物A将3H-安定由其受体上置换下来，与浓度相关。两种药物的IC
50值是处于同一浓度范围。因为空白溶液不能转换浓度小于10
-4M的同位素标记的安定，所以，乙酸对化合物A效果的影响可以排除。
4）化合物A对抗电源性和药物诱导的惊厥效果的测定
大鼠口服直至200mg/kg化合物A，对于戊四唑，士的宁或印防已霉素诱导的惊厥没有效果，而对电休克诱发的惊厥仅有轻微的效果。
皮下注射120mg/kg戊四唑诱导大鼠前后肢强直伸展并杀死100%大鼠。如果在注射戊四唑120mg/kg之前给于10mg/kg安定或苯巴比妥钠，则惊厥减轻，予处理的大鼠均得到保护全部存活。然而，即使以200mg/kg化合物A予处理大鼠，也不能改变戊四唑惊厥的严重性，予处理的大鼠没有一个存活。
化合物A（200mg/kg）对安定（10mg/kg）的抗惊厥作用没有影响。
由士的宁（2.5mg/kg，S.C）诱导的致死性惊厥可被50mg/kg苯巴比妥钠或10mg/kg安定不完全地拮抗，其死亡率分别为40%和80%，而化合物A直至200mg/kg剂量仍完全无效。
50mg/kg苯巴比妥钠对由印防已毒素（10mg/kg，皮波注射）诱导的致死性惊厥影响很小，80%死亡，而用安定或化合物A予处理的大鼠仍无变化。
电击诱导的致死性惊厥，只被200mg/kg化合物A轻微影响，70%大鼠死亡。用苯巴比妥钠（30-50mg/kg）予处理的大鼠可完全防护电诱导的惊厥而安定可使80%大鼠存活。
总之，在动物试验中化合物A是一种有效的和选择性的抗焦虑剂。其 抗焦虑效果似乎与苯二氮杂
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受体有关，但与苯并二氮杂
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大不相同，临床应用化合物A时，实际上没有镇静和抗惊厥活性。
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本发明的另一特征是提供一类药物组合物，这类药物组合物至少包括一种通式Ⅰ的化合物或其药物上可接受的酸加成盐和适宜的惰性固体载体或液体药用载体。
活性组分可加工成适合口服的形式（例如片剂丸剂，包衣丸剂，糖锭剂，硬的或软的明胶胶囊剂，溶液，乳剂，悬浮剂），注射的形式（例如注射液）或直肠给药形式（例如栓剂）。
本发明的药物组合物可以用已知制药工业的方法制备。将通式Ⅰ的化合物或其药物上可接受的酸加成盐与惰性的固体或液体的，有机的或无机的药用载体和/或赋形剂混合并将此组合物制成格林剂型。
片剂，丸剂，包衣丸剂，糖锭剂和硬明胶胶囊剂可含有作为载体的乳糖，玉米淀粉，马铃薯淀粉，滑石粉，碳酸镁，硬脂酸镁，碳酸钙，硬脂酸或其盐等。软明胶胶囊剂可含有作为载体的植物油，脂肪、腊或粘度适合的多羟基化合物等。在溶液或糖浆制剂中，可使用作为载体的水，多羟基化合物，聚乙二醇，蔗糖或葡萄糖。注射液可含有例如水，醇类，多羟基化合物，甘油或植物油作为载体。
制备栓剂，可用例如油，腊，脂脑和粘度适宜的多羟基化合物作载体。
本发明的药物组合物还可以含有制药工业中常用的辅助剂（例如湿润剂，分散剂，防腐剂，乳化剂，着色剂，甜味剂，香料，改进渗透压的盐，缓冲剂等）。本发明的药物组合物还可以含有具有治疗价值的物质。
最好是以适宜的口服的形式应用通式Ⅰ化合物特别是片剂或胶囊。含活性组分2.5mg-50mg的片剂或胶囊特别好。
通式Ⅰ化合物的每日剂量可以根据不同因素（例如活性组分的效力，患者的状态和年令，疾病的严重程度等）在很宽的范围内变化。每日口服剂量大约在1-300mg，日胃肠外给药剂量大约在0.5-150mg。必须强调的 是，上述剂量范围仅为理论值，实际用量可以低或高，总之应由医师来决定。
本发明的另一方面是提供了通式Ⅰ化合物或其药物上可接受的酸加成盐作为抗焦虑药物制剂的应用。
本发明还提供了抗焦虑治疗方法，该方法包括给患者有效剂量的通式Ⅰ化合物或其药物上可接受的酸加成盐。
本发明的详细情况可通过以下实例进一步得到了解，但本发明不限于以下实例。
实例1
将17.62g（0.1mole）3-氨基-4-喹啉硫醇溶解于50ml2摩尔的氢氧化钠溶液中，接着，在低于40℃下加入21.29g（0.15mloe）碘甲烷。在40℃下搅拌此反应混合物1小时，用氯仿提取，加活性炭使澄清并蒸发。得到18.6g3-氨基-4-甲硫基喹啉，产率94.6%，m.p.96-98℃（甲醇重结晶）。
将19g（0.1mole）上述碱溶解于150ml乙酸乙酯中，接着加含氯化氢的乙醇。得到21g3-氨基-4-甲硫基喹啉盐酸盐，产率95%，m.p.228-229℃（分解）。
实例2-11
从类似实例1的方法，制得表Ⅴ所示的化合物。
表Ⅴ
实例 化合物 产率 m.p.
号 （%） （℃）
2 3-氨基-4-（正丙硫基）喹啉，HCl 80 168-170
3 3-氨基-4-苄硫基喹啉，HCl 85 214-215
4 3-氨基-7-氯-4-甲硫基喹啉，HCl 84 235-237
5 3-氨基-4-乙硫基-7-氯喹啉，HCl 80 214-216（分解）
6 3-氨基-7-氯-4-异丙硫基喹啉，HCl 78 232-233（分解）
7 3-氨基-7-氯-4-正丙硫基喹啉，HCl 86 209-210（分解）
8 3-氨基-4-烯丙硫基-7-氯喹啉，HCl 82 210-212
9 3-氨基-7-氯-4-炔丙硫基喹啉，HCl 84 222-223
10 3-氨基-4-苄硫基-7-氯喹啉，HCl 80 228-230
11 3-氨基-7-氯-4-（4-氯苄硫基）喹啉HCl 85 215-（分解）
实例12
将21.06g（0.1mole）3-氨基-7-氯-4-喹啉硫醇溶解于100ml 2摩尔氢氧化钠溶液中，然后加23.30g（0.125mole）苯磺酸乙酯。加热反应混合物使沸腾2小时，并用氯仿提取生成的产物。用活性炭净化氯仿溶液，干燥并用含氯化氢的乙醇酸化。得到24.0g 3-氨基-4-乙硫基-7-氯喹啉盐酸盐。甲醇中重结晶，产物的熔点为212-216℃（分解）。产率85%。所得化合物与实例5制得的化合物相同。
实例13
将22.67g（0.1mole）3-氨基-4-甲硫基喹啉盐酸盐[或19.02g（0.105mole）相应的碱]溶解于125ml吡啶中，于10-15℃下加10.7g（0.105mole）乙酸酐。当溶液的黄色消失时，将反应混合物倾于1000ml水中。过滤出白色结晶，得到20.9g3-乙酰氨基-4-甲硫基喹啉，产率90%，m.p.137-138℃（乙酸乙酯中重结晶）。
实例14-19
以类似于实例13所述的方法，制得表Ⅵ所列化合物。
表Ⅵ
实例 化合物 产率 m.p.
号 （%） （℃）
14 3-乙酰氨基-7-氯-4-甲硫基喹啉 80 168-170
15 3-乙酰氨基-4-乙硫基喹啉 91 141-143
16 3-乙酰氨基-4-乙硫基-7-氯喹啉 90 163-165
17 3-乙酰氨基-4-正丙硫基喹啉 92 103-105
18 3-乙酰氨基-7-氯-4-异丙硫基喹啉 89 144-147
19 3-乙酰氨基-7-氯-4-炔丙硫基喹啉 92 175-176
实例20
将21.06g（0.1mole）3-氨基-7-氯-4-喹啉硫醇溶解于100ml 2摩尔的氢氧化钠溶液中，接着加19.27g（0.15mole）硫酸二乙酯。反应混合物加热沸腾2小时，冷至室温并用二氯乙烷提取，干燥二氯乙烷溶液，净化，蒸发。得到20.2g 3-氨基-4-乙硫基-7-氯喹啉，产率85%，m.p.105-106℃（甲醇中重结晶）。
将11.9g（0.05mole）上述碱溶解于150ml乙酸乙酯中，接着加含氯化氢的乙醇。滤出沉淀的结晶，得到13.0g 3-氨基-4-乙硫基-7-氯喹啉盐酸盐，产率，95%，m.p.212-216℃。产物与实例5制得的化合物相同。
实例21
以类似于实例20中所述的方法，制得3-氨基-7-氯-4-甲硫基喹啉盐酸盐，产率80%，m.p.235-237℃。
实例22
以类似实例1中所述方法，制得以下化合物：
3-氨基-4-乙硫基-6-氯喹啉盐酸盐，产率85%，m.p.250-252℃，和
3-氨基-4-乙硫基-6，7-二甲氧基喹啉盐酸盐，产率80%，m.p.210-212℃。