《复合菌种煤炭生物絮凝剂及其净化煤泥水的方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《复合菌种煤炭生物絮凝剂及其净化煤泥水的方法.pdf（12页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。
1、(10)申请公布号 CN 102874912 A (43)申请公布日 2013.01.16 C N 1 0 2 8 7 4 9 1 2 A *CN102874912A* (21)申请号 201110459425.5 (22)申请日 2011.12.31 C02F 1/56(2006.01) (71)申请人安徽理工大学 地址 232001 安徽省淮南市舜耕中路168号 (72)发明人张东晨 王涛 侯志翔 (74)专利代理机构北京双收知识产权代理有限 公司 11241 代理人王菊珍 解政文 (54) 发明名称 复合菌种煤炭生物絮凝剂及其净化煤泥水的 方法 (57) 摘要 本发明涉及一种复合菌种煤炭。
2、生物絮凝剂， 其优点在于絮凝率高、降低了各种因素对絮凝效 果的限制，使其适用范围更广。本发明包括体积比 为11的黑曲霉菌液和黄孢原毛平革菌菌液，其 中黑曲霉菌液和黄孢原毛平革菌菌液分别是指培 养黑曲霉和黄孢原毛平革菌得到的培养原液、由 培养原液离心得到的培养原液离心上清液、将培 养原液经过破碎得到的破碎液或将破碎液离心得 到的破碎离心上清液，其中黑曲霉培养原液和黄 孢原毛平革菌培养原液分别通过以下步骤制备得 到：a、富集培养b、适应性培养c、再次富集培养d、 活性培养。 (51)Int.Cl. 权利要求书2页 说明书8页 附图1页 (19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 权。
3、利要求书 2 页 说明书 8 页 附图 1 页 1/2页 2 1.一种复合菌种煤炭生物絮凝剂，其特征在于：包括体积比为11的黑曲霉菌液和 黄孢原毛平革菌菌液，其中黑曲霉菌液和黄孢原毛平革菌菌液分别是指培养黑曲霉和黄孢 原毛平革菌得到的培养原液、由培养原液离心得到的培养原液离心上清液、将培养原液经 过破碎得到的破碎液或将破碎液离心得到的破碎离心上清液，其中黑曲霉培养原液和黄孢 原毛平革菌培养原液分别通过以下步骤制备得到： 1)黑曲霉：a、富集培养：将黑曲霉接种于黑曲霉培养基中28培养3d；b、适应性培 养：将富集培养的黑曲霉培养基菌液接种于1号培养基中，28培养3d后，将1号培养基菌 液接种于2。
4、号培养基中，28培养3d后，再把2号培养基菌液接种于3号培养基中，28培 养3d；c、再次富集培养：再将3号培养基菌液接种到黑曲霉培养基，在160rpm，28的条件 下培养3d后；d、活性培养：再将步骤c所得的黑曲霉培养基菌液接种到黑曲霉培养基中， 在160rpm，28的条件下培养2-4d； 所述黑曲霉培养基配方为：20马铃薯汁1000mL，葡萄糖20g，KH 2 PO 4 3g， MgSO 4 7H 2 O1.5g，维生素B1 8mg，pH6，其中20马铃薯汁的配制方法为：取去皮马铃薯 200g，切成小块，加水1000mL煮沸20min，滤去马铃薯块，将滤液补足1000mL；所述1号培养 基。
5、配方为：90体积黑曲霉培养基和10体积煤泥水混合；所述2号培养基配方为：70体 积黑曲霉培养基和30体积煤泥水混合；所述3号培养基配方为：40体积黑曲霉培养 基和60体积煤泥水混合； 2)黄孢原毛平革菌：a、富集培养：将黄孢原毛平革菌接种于黄孢原毛平革菌培养基 中，28培养7d；b、适应性培养：将富集培养的黄孢原毛平革菌培养基菌液接种于1号培 养基中，28培养7d后，将1号培养基菌液接种于2号培养基中，28培养7d后，再把2 号培养基菌液接种于3号培养基中，28培养7d；c、再次富集培养：再将3号培养基菌液 接种到黄孢原毛平革菌培养基中，在160rpm，28的条件下培养7d；d、活性培养：再将。
6、步骤 c所得黄孢原毛平革菌培养基菌液接种到黄孢原毛平革菌培养基中，在160rpm，28的条 件下培养2-4d； 所述黄孢原毛平革菌培养基配方为：20马铃薯汁1000mL，葡萄糖20g，KH 2 PO 4 3g， MgSO 4 7H 2 O 1.5g，维生素B1 8mg，pH6，其中20马铃薯汁的配制方法为：取去皮马铃 薯200g，切成小块，加水1000mL煮沸20min，滤去马铃薯块，将滤液补足1000mL；所述1号 培养基配方为：90体积黑曲霉培养基和10体积煤泥水混合；所述2号培养基配方为： 70体积黑曲霉培养基和30体积煤泥水混合；所述3号培养基配方为：40体积黑曲 霉培养基和60体积煤。
7、泥水混合。 2.根据权利要求1所述的复合菌种煤炭生物絮凝剂，其特征在于：所述黑曲霉菌液为 黑曲霉培养原液和培养原液离心上清液；所述黄孢原毛平革菌菌液为黄孢原毛平革菌培养 原液和培养原液离心上清液。 3.根据权利要求2所述的复合菌种煤炭生物絮凝剂，其特征在于：所述黑曲霉菌液为 黑曲霉培养原液离心上清液；所述黄孢原毛平革菌菌液为黄孢原毛平革菌培养原液离心上 清液。 4.根据权利要求3所述的复合菌种煤炭生物絮凝剂，其特征在于：黑曲霉和黄孢原毛 平革菌活性培养步骤的条件为：在160rpm，28的条件下培养3d。 5.根据权利要求4所述的复合菌种煤炭生物絮凝剂，其特征在于：黑曲霉和黄孢原毛 权 利 要 。
8、求 书CN 102874912 A 2/2页 3 平革菌的适应性培养步骤中，所述接种的接种量为每100mL培养基中接5mL菌液；黑曲霉和 黄孢原毛平革菌的再次富集培养和活性培养步骤中，所述接种的接种量为每100mL培养基 中接1mL菌液。 6.一种权利要求1-5之一所述的复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥水的方法，其特征 在于包括以下步骤： 1)在煤泥水中加入助凝剂，搅拌均匀，其中：助凝剂为2质量的CaCl 2 水溶液，煤泥水 与助凝剂的体积比为90(1-4)； 2)加入复合菌种煤炭生物絮凝剂，调节煤泥水的pH值至5-8，搅拌均匀，其中步骤1中 的煤泥水与煤炭生物絮凝剂的体积比为90(1-4)。 。
9、7.根据权利要求6所述的复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥水的方法，其特征在于： 所述煤泥水与助凝剂的体积比为90(3-4)。 8.根据权利要求6或7所述的复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥水的方法，其特征在 于：所述煤泥水与煤炭生物絮凝剂的体积比为903。 9.根据权利要求8所述的复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥水的方法，其特征在于： 所述调节煤泥水的pH值至7-8。 10.根据权利要求9所述的复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥水的方法，其特征在于： 所述煤泥水与助凝剂的体积比为903，所述调节煤泥水的pH值至8。 权 利 要 求 书CN 102874912 A 1/8页 4 复合菌种煤炭生物絮凝剂及其净。
10、化煤泥水的方法 技术领域 0001 本发明涉及一种微生物制剂及其应用，特别是涉及一种复合菌种煤炭生物絮凝剂 及其应用。 背景技术 0002 长期以来，煤泥水的净化一直难以解决。其主要原因是随着选煤机械化程度的提 高，煤泥水中细粒煤所占的比重越来越大。煤泥水集中了原煤中最细、最难处理的微细颗 粒，由于这些颗粒粒度细、灰分高、粘性大、难以沉降，因而极难用常规的沉淀、回收和脱水 设备处理。目前的煤泥水处理系统，只有采用絮凝剂进行处理，才能有效地实现煤泥水的闭 路循环，由于煤泥水工艺过程受到诸多因素的影响，使得选煤厂煤泥水处理系统成为全厂 最复杂、投资最多、生产成本最大、管理最困难的部分。 发明内容 。
11、0003 本发明要解决的技术问题是提供一种复合菌种煤炭生物絮凝剂和使用该絮凝剂 净化煤泥水的方法，其优点在于：絮凝率高、降低了各种因素对絮凝效果的限制。 0004 本发明中所用生物材料来源如下：黑曲霉，购自广东省微生物菌种保藏中心， 菌种编号：GIM3.25。黄孢原毛平革菌，购自广东省微生物菌种保藏中心，菌种编号： BKM-F-1767。 0005 一种复合菌种煤炭生物絮凝剂，包括体积比为11的黑曲霉菌液和黄孢原毛平 革菌菌液，其中黑曲霉菌液和黄孢原毛平革菌菌液分别是指培养黑曲霉和黄孢原毛平革菌 得到的培养原液、由培养原液离心得到的培养原液离心上清液、将培养原液经过破碎得到 的破碎液或将破碎液。
12、离心得到的破碎离心上清液，其中黑曲霉培养原液和黄孢原毛平革菌 培养原液分别通过以下步骤制备得到： 0006 1)黑曲霉：a、富集培养：将黑曲霉接种于黑曲霉培养基中28培养3d；b、适应性 培养：将富集培养的黑曲霉培养基菌液接种于1号培养基中，28培养3d后，将1号培养基 菌液接种于2号培养基中，28培养3d后，再把2号培养基菌液接种于3号培养基中，28 培养3d；c、再次富集培养：再将3号培养基菌液接种到黑曲霉培养基，在160rpm，28的条 件下培养3d后；d、活性培养：再将富集培养的黑曲霉培养基菌液接种到黑曲霉培养基中， 在160rpm，28的条件下培养2-4d； 0007 所述黑曲霉培养。
13、基配方为：20马铃薯汁1000mL，葡萄糖20g，KH 2 PO 4 3g， MgSO 4 7H 2 O1.5g，维生素B1 8mg，pH6，其中20马铃薯汁的配制方法为：取去皮马铃薯 200g，切成小块，加水1000mL煮沸20min，滤去马铃薯块，将滤液补足1000mL；所述1号培养 基配方为：90体积黑曲霉培养基和10体积煤泥水混合；所述2号培养基配方为：70体 积黑曲霉培养基和30体积煤泥水混合；所述3号培养基配方为：40体积黑曲霉培养 基和60体积煤泥水混合； 0008 2)黄孢原毛平革菌：a、富集培养：将黄孢原毛平革菌接种于黄孢原毛平革菌培养 说 明 书CN 102874912 A。
14、 2/8页 5 基中，28培养7d；b、适应性培养：将富集培养的黄孢原毛平革菌培养基菌液接种于1号 培养基中，28培养7d后，将1号培养基菌液接种于2号培养基中，28培养7d后，再把 2号培养基菌液接种于3号培养基中，28培养7d；c、再次富集培养：再将3号培养基菌 液接种到黄孢原毛平革菌培养基中，在160rpm，28的条件下培养7d；d、活性培养：再将富 集培养的黄孢原毛平革菌培养基菌液接种到黄孢原毛平革菌培养基中，在160rpm，28的 条件下培养2-4d； 0009 所述黄孢原毛平革菌培养基配方为：20马铃薯汁1000mL，葡萄糖20g，KH 2 PO 4 3g，MgSO 4 7H 2 。
15、O 1.5g，维生素B1 8mg，pH6，其中20马铃薯汁的配制方法为：取去皮马 铃薯200g，切成小块，加水1000mL煮沸20min，滤去马铃薯块，将滤液补足1000mL；所述1 号培养基配方为：90体积黑曲霉培养基和10体积煤泥水混合；所述2号培养基配方 为：70体积黑曲霉培养基和30体积煤泥水混合；所述3号培养基配方为：40体积 黑曲霉培养基和60体积煤泥水混合。 0010 本发明复合菌种煤炭生物絮凝剂，其中黑曲霉和黄孢原毛平革菌活性培养步骤的 条件为：在160rpm，28的条件下培养3d。 0011 本发明复合菌种煤炭生物絮凝剂，其中所述黑曲霉菌液为黑曲霉培养原液和培养 原液离心上清。
16、液；所述黄孢原毛平革菌菌液为黄孢原毛平革菌培养原液和培养原液离心上 清液。 0012 本发明复合菌种煤炭生物絮凝剂，其中所述黑曲霉菌液为黑曲霉培养原液离心上 清液；所述黄孢原毛平革菌菌液为黄孢原毛平革菌培养原液离心上清液。 0013 本发明复合菌种煤炭生物絮凝剂，其中所述离心的条件是：5000r/min离心 30min。 0014 本发明复合菌种煤炭生物絮凝剂，其中所述破碎的条件是：SK2200H超声波破碎 仪破碎30min。 0015 本发明复合菌种煤炭生物絮凝剂，其中：黑曲霉和黄孢原毛平革菌的适应性培养 步骤中，所述接种的接种量为每100mL培养基中接5mL菌液；黑曲霉和黄孢原毛平革菌的再。
17、 次富集培养和活性培养步骤中，所述接种的接种量为每100mL培养基中接1mL菌液。 0016 本发明还涉及一种复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥水的方法，包括以下步骤： 0017 1.在煤泥水中加入助凝剂，搅拌均匀，其中：助凝剂为2质量的CaCl 2 水溶液，煤 泥水与助凝剂的体积比为90(1-4)； 0018 2.加入复合菌种煤炭生物絮凝剂，调节煤泥水的pH值至5-8，搅拌均匀，其中步骤 1中的煤泥水与煤炭生物絮凝剂的体积比为90(1-4)。 0019 本发明复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥水的方法，其中所述煤泥水与助凝剂的 体积比为90(3-4)。 0020 本发明复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥。
18、水的方法，其中所述煤泥水与煤炭生物 絮凝剂的体积比为903。 0021 本发明复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥水的方法，其中所述调节煤泥水的pH 值至7-8。 0022 本发明复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥水的方法，其中所述煤泥水与助凝剂的 体积比为903。 说 明 书CN 102874912 A 3/8页 6 0023 本发明复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥水的方法，其中所述调节煤泥水的pH 值至8。 0024 本发明不同于现有技术之处在于：复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥水时絮凝率 均高于单一使用黑曲霉和黄孢原毛平革菌，复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥水时平均絮 凝率为91.76；以黑曲霉单一菌种。
19、净化煤泥水，平均絮凝率为84.02；以黄孢原毛平革菌 单一菌种净化煤泥水，平均絮凝率为86.50；如图1所示，通过复合菌种的共同作用，降低 了单一菌种在净化煤泥水时的条件限制，使其适用范围更广，絮凝范围更宽，。 0025 下面结合附图对本发明做进一步说明。 附图说明 0026 图1是复合菌种煤炭生物絮凝剂和单一菌种净化煤泥水时的絮凝率对比图，其中 表示复合菌种，表示黑曲霉，表示黄孢原毛平革菌。 具体实施方式 0027 实施例1获得黑曲霉和黄孢原毛平革菌培养原液以及培养原液的各部分 0028 1、获得黑曲霉培养原液 0029 黑曲霉培养基配方：20马铃薯汁1000mL，葡萄糖20g，KH 2 P。
20、O 4 3g，MgSO 4 7H 2 O 1.5g，维生素B1 8mg，pH6(20马铃薯汁配制：取去皮马铃薯200g，切成小块，加水 1000mL煮沸20min，滤去马铃薯块，将滤液补足1000mL)。 0030 基于上述黑曲霉培养基配方，得到下面3种液体培养基： 0031 1号培养基：90体积黑曲霉培养基和10体积煤泥水混合。 0032 2号培养基：70体积黑曲霉培养基和30体积煤泥水混合。 0033 3号培养基：40体积黑曲霉培养基和60体积煤泥水混合。 0034 将各培养基在121条件下高温灭菌15min备用。 0035 黑曲霉培养方法：a、富集培养：用接种针挑取1环黑曲霉接种于黑曲霉。
21、培养基中， 28培养3d进行富集培养；b、适应性培养：将5mL富集培养的黑曲霉培养基菌液接种于 100mL1号培养基中，28培养3d后，将1号培养基菌液5mL接种于100mL 2号培养基中， 28培养3d后，再把2号培养基菌液5mL接种于100mL 3号培养基中，28培养3d；c、再 次富集培养：用无菌移液管吸取1mL 3号培养基菌液，接种到100mL的黑曲霉培养基中，在 160rpm，28恒温振荡培养箱内进行培养3d；d、活性培养：再将富集培养的黑曲霉培养基 菌液1mL接种到黑曲霉培养基100mL中，在160rpm，28的条件下培养2-4d。 0036 2、获得黄孢原毛平革菌培养原液 003。
22、7 黄孢原毛平革菌培养基配方：20马铃薯汁1000mL，葡萄糖20g，KH 2 PO 4 3g， MgSO 4 7H 2 O 1.5g，维生素B1 8mg，pH6(20马铃薯汁配制：取去皮马铃薯200g，切成小 块，加水1000mL煮沸20min，滤去马铃薯块，将滤液补足1000mL)。 0038 基于上述黄孢原毛平革菌培养基配方，得到下面3中液体培养基： 0039 1号培养基：90体积黄孢原毛平革菌培养基和10体积煤泥水混合。 0040 2号培养基：70体积黄孢原毛平革菌培养基和30体积煤泥水混合。 0041 3号培养基：40体积黄孢原毛平革菌培养基和60体积煤泥水混合。 说 明 书CN 1。
23、02874912 A 4/8页 7 0042 将各培养基在121条件下高温灭菌15min备用。 0043 黄孢原毛平革菌培养方法：a、富集培养：用接种针挑取1环黄孢原毛平革菌接种 于黄孢原毛平革菌培养基中，28培养7d进行富集培养；b、适应性培养：将5mL富集培养 的黄孢原毛平革菌菌液接种于100mL 1号培养基中，28培养7d后，将1号培养基菌液 5mL接种于100mL 2号培养基中，28培养7d后，再把2号培养基菌液5mL接种于100mL 3号培养基中，28培养7d；c、再次富集培养：用无菌移液管吸取1ml3号培养基菌液，接 种到100mL的黄孢原毛平革菌培养基中，在160rpm，28恒温。
24、振荡培养箱内进行培养7d并 保存；d、活性培养：再将富集培养的黄孢原毛平革菌培养基菌液1mL接种到黄孢原毛平革 菌培养基100mL中，在160rpm，28的条件下培养2-4d；其中黄孢原毛平革菌的活性培养 时，与黑曲霉的活性培养时间相等。 0044 3、由培养原液5000r/min离心30min得到培养原液离心上清液，将培养原液经过 破碎SK2200H超声波破碎仪破碎30min得到破碎液，将破碎液以5000r/min离心30min得 到破碎离心上清液。 0045 实施例2复合菌种煤炭生物絮凝剂净化煤泥水 0046 煤炭生物絮凝剂净化煤泥水时的絮凝效果以絮凝率来衡量，絮凝率越高，絮凝效 果越好。。
25、絮凝率的计算公式为： 0047 0048 式中：A o -未加入煤炭生物絮凝剂时的上清液OD 660 值； 0049 A i -加入煤炭生物絮凝剂絮凝之后上清液OD 660 值。 0050 为了保证煤泥颗粒絮凝的绝对量具有可比性，以下实例中将各反应体系总体积保 持在固定量。 0051 以下实例中所用煤泥水取自淮南望峰岗选煤厂浮选尾煤泥水。煤泥水相关性质如 表2： 0052 表2 0053 0054 煤泥的粒度组成及其灰分分析如表3： 0055 表3 0056 说 明 书CN 102874912 A 5/8页 8 0057 实例1 0058 1)取90mL搅拌均匀的煤泥水，再加入2质量CaCl 。
26、2 助凝剂2mL，用磁力慢速搅 拌器搅拌1min； 0059 2)加入煤炭生物絮凝剂3mL，补加煤泥水至100mL，用笔型pH计调节煤泥水的pH 值至7，再用磁力搅拌器慢速搅拌1min，其中煤炭生物絮凝剂包括黑曲霉原液离心上清液 1.5mL和黄孢原毛平革菌原液离心上清液1.5mL，黑曲霉和黄孢原毛平革菌的活性培养时 间均为2天。 0060 3)静置30min吸取上清液，用UV-5100紫外分光光度计于660nm处测上清液的吸 光度值，得到絮凝率为92.48。在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成3ml黑 曲霉原液离心上清液，絮凝率为87.88，在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换 。
27、成3ml黄孢原毛平革菌原液离心上清液，絮凝率为93.0。 0061 实例2 0062 1)取90mL搅拌均匀的煤泥水，再加入2质量CaCl 2 助凝剂4mL，用磁力慢速搅 拌器搅拌1min； 0063 2)加入煤炭生物絮凝剂1mL，补加煤泥水至100mL，用笔型pH计调节煤泥水的pH 值至8，再用磁力搅拌器慢速搅拌1min，其中煤炭生物絮凝剂包括黑曲霉破碎液0.5mL和黄 孢原毛平革菌破碎液0.5mL，黑曲霉和黄孢原毛平革菌的活性培养时间均为2天。 0064 3)静置30min吸取上清液，用UV-5100紫外分光光度计于660nm处测上清液的吸 光度值，得到絮凝率为97.89。在其他条件不变的。
28、情况下，将煤炭生物絮凝剂换成1ml黑 曲霉破碎液，絮凝率为95.41，在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成1ml黄 孢原毛平革菌破碎液，絮凝率为93.5. 0065 实例3 0066 1)取90mL搅拌均匀的煤泥水，再加入2质量CaCl 2 助凝剂1mL，用磁力慢速搅 拌器搅拌1min； 0067 2)加入煤炭生物絮凝剂4mL，补加煤泥水至100mL，用笔型pH计调节煤泥水的pH 值至6，再用磁力搅拌器慢速搅拌1min，其中煤炭生物絮凝剂包括黑曲霉破碎离心上清液 2mL和黄孢原毛平革菌破碎离心上清液2mL，黑曲霉和黄孢原毛平革菌的活性培养时间均 为2天。 0068 3)静置30min吸。
29、取上清液，用UV-5100紫外分光光度计于660nm处测上清液的吸 光度值，得到絮凝率为62.11。在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成4ml黑 曲霉破碎离心上清液，絮凝率为42.03，在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换 成4ml黄孢原毛平革菌破碎离心上清液，絮凝率为91.86。 0069 实例4 0070 1)取90mL搅拌均匀的煤泥水，再加入2质量CaCl 2 助凝剂3mL，用磁力慢速搅 拌器搅拌1min； 0071 2)加入煤炭生物絮凝剂3mL，补加煤泥水至100mL，用笔型pH计调节煤泥水的pH 值至6，再用磁力搅拌器慢速搅拌1min，其中煤炭生物絮凝剂包括黑曲霉破碎液。
30、1.5mL和黄 孢原毛平革菌破碎液1.5mL，黑曲霉和黄孢原毛平革菌的活性培养时间均为3天。 0072 3)静置30min吸取上清液，用UV-5100紫外分光光度计于660nm处测上清液的吸 说 明 书CN 102874912 A 6/8页 9 光度值，得到絮凝率为95.92。在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成3ml黑 曲霉破碎液，絮凝率为92.81，在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成3ml黄 孢原毛平革菌破碎液，絮凝率为8721。 0073 实例5 0074 1)取90mL搅拌均匀的煤泥水，再加入2质量CaCl 2 助凝剂2mL，用磁力慢速搅 拌器搅拌1min； 0075。
31、 2)加入煤炭生物絮凝剂2mL，补加煤泥水至100mL，用笔型pH计调节煤泥水的pH 值至8，再用磁力搅拌器慢速搅拌1min，其中煤炭生物絮凝剂包括黑曲霉破碎离心上清液 1mL和黄孢原毛平革菌破碎离心上清液1mL，黑曲霉和黄孢原毛平革菌的活性培养时间均 为3天。 0076 3)静置30min吸取上清液，用UV-5100紫外分光光度计于660nm处测上清液的吸 光度值，得到絮凝率为94.91。在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成2ml黑 曲霉破碎离心上清液，絮凝率为86.28，在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换 成2ml黄孢原毛平革菌破碎离心上清液，絮凝率为80.73。 0077。
32、 实例6 0078 1)取90mL搅拌均匀的煤泥水，再加入2质量CaCl 2 助凝剂4mL，用磁力慢速搅 拌器搅拌1min； 0079 2)加入煤炭生物絮凝剂4mL，补加煤泥水至100mL，用笔型pH计调节煤泥水的pH 值至7，再用磁力搅拌器慢速搅拌1min，其中煤炭生物絮凝剂包括黑曲霉培养原液2mL和黄 孢原毛平革菌培养原液2mL，黑曲霉和黄孢原毛平革菌的活性培养时间均为3天。 0080 3)静置30min吸取上清液，用UV-5100紫外分光光度计于660nm处测上清液的吸 光度值，得到絮凝率为98.07。在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成4ml黑 曲霉培养原液，絮凝率为95.13。
33、，在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成4ml 黄孢原毛平革菌培养原液，絮凝率为82.41。 0081 实例7 0082 1)取90mL搅拌均匀的煤泥水，再加入2质量CaCl 2 助凝剂1mL，用磁力慢速搅 拌器搅拌1min； 0083 2)加入煤炭生物絮凝剂1mL，补加煤泥水至100mL，用笔型pH计调节煤泥水的pH 值至5，再用磁力搅拌器慢速搅拌1min，其中煤炭生物絮凝剂包括黑曲霉培养原液离心上 清液0.5mL和黄孢原毛平革菌培养原液离心上清液0.5mL，黑曲霉和黄孢原毛平革菌的活 性培养时间均为3天。 0084 3)静置30min吸取上清液，用UV-5100紫外分光光度计于660。
34、nm处测上清液的吸 光度值，得到絮凝率为90.23。在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成1ml黑 曲霉培养原液离心上清液，絮凝率为87.16，在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝 剂换成1ml黄孢原毛平革菌培养原液离心上清液，絮凝率为84.9。 0085 实例8 0086 1)取90mL搅拌均匀的煤泥水，再加入2质量CaCl 2 助凝剂3mL，用磁力慢速搅 拌器搅拌1min； 0087 2)加入煤炭生物絮凝剂1mL，补加煤泥水至100mL，用笔型pH计调节煤泥水的pH 说 明 书CN 102874912 A 7/8页 10 值至7，再用磁力搅拌器慢速搅拌1min，其中煤炭生物絮凝剂包。
35、括黑曲霉破碎离心上清液 0.5mL和黄孢原毛平革菌破碎离心上清液0.5mL，黑曲霉和黄孢原毛平革菌的活性培养时 间均为4天。 0088 3)静置30min吸取上清液，用UV-5100紫外分光光度计于660nm处测上清液的吸 光度值，得到絮凝率为96.47。在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成1ml黑 曲霉破碎离心上清液，絮凝率为87.38，在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换 成1ml黄孢原毛平革菌破碎离心上清液，絮凝率为79.76。 0089 实例9 0090 1)取90mL搅拌均匀的煤泥水，再加入2质量CaCl 2 助凝剂4mL，用磁力慢速搅 拌器搅拌1min； 0091 2。
36、)加入煤炭生物絮凝剂2mL，补加煤泥水至100mL，用笔型pH计调节煤泥水的pH 值至6，再用磁力搅拌器慢速搅拌1min，其中煤炭生物絮凝剂包括黑曲霉原液离心上清液 1mL和黄孢原毛平革菌原液离心上清液1mL，黑曲霉和黄孢原毛平革菌的活性培养时间均 为4天。 0092 3)静置30min吸取上清液，用UV-5100紫外分光光度计于660nm处测上清液的吸 光度值，得到絮凝率为90.50。在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成2ml黑 曲霉原液离心上清液，絮凝率为85.33，在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换 成2ml黄孢原毛平革菌原液离心上清液，絮凝率为87.88。 0093 实。
37、例10 0094 1)取90mL搅拌均匀的煤泥水，再加入2质量CaCl 2 助凝剂1mL，用磁力慢速搅 拌器搅拌1min； 0095 2)加入煤炭生物絮凝剂3mL，补加煤泥水至100mL，用笔型pH计调节煤泥水的pH 值至6，再用磁力搅拌器慢速搅拌1min，其中煤炭生物絮凝剂包括黑曲霉培养原液1.5mL和 黄孢原毛平革菌培养原液1.5mL，黑曲霉和黄孢原毛平革菌的活性培养时间均为4天。 0096 3)静置30min吸取上清液，用UV-5100紫外分光光度计于660nm处测上清液的吸 光度值，得到絮凝率为91.47。在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成3ml黑 曲霉培养原液，絮凝率为72。
38、.44，在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成3ml 黄孢原毛平革菌培养原液，絮凝率为78.25。 0097 实例11 0098 1)取90mL搅拌均匀的煤泥水，再加入2质量CaCl 2 助凝剂3mL，用磁力慢速搅 拌器搅拌1min； 0099 2)加入煤炭生物絮凝剂3mL，补加煤泥水至100mL，用笔型pH计调节煤泥水的pH 值至8，再用磁力搅拌器慢速搅拌1min，其中煤炭生物絮凝剂包括黑曲霉培养原液离心上 清液1.5mL和黄孢原毛平革菌培养原液离心上清液1.5mL，黑曲霉和黄孢原毛平革菌的活 性培养时间均为3天。 0100 3)静置30min吸取上清液，用UV-5100紫外分光光度计。
39、于660nm处测上清液的吸 光度值，得到絮凝率为99.32。在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝剂换成3ml黑 曲霉培养原液离心上清液，絮凝率为82.34，在其他条件不变的情况下，将煤炭生物絮凝 剂换成3ml黄孢原毛平革菌培养原液离心上清液，絮凝率为91.95。 说 明 书CN 102874912 A 10 8/8页 11 0101 本发明复合菌种煤炭生物絮凝剂是采用将黑曲霉菌液与黄孢原毛平革菌菌液按 11的体积比混合，并对煤泥水进行了絮凝活性试验，从上述实施例可以看出，复合菌种 的絮凝效果要优于单一菌种。从实例1-11来看，复合菌种净化煤泥水，絮凝率在90以上 的有10组，平均絮凝率为91。
40、.76；以黑曲霉单一菌种净化煤泥水，平均絮凝率为84.02； 以黄孢原毛平革菌单一菌种净化煤泥水，平均絮凝率为86.50。黑曲霉和黄孢原毛平革菌 协同作用一方面提高了絮凝率，另一方面降低了其它因素对絮凝效果的限制，使其适用范 围更广，絮凝范围更宽。因此降低了煤炭生物絮凝剂在絮凝煤泥水时的条件限制，进而降低 成本，提高效率。 0102 以上所述的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范 围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通技术人员对本发明的技术方 案作出的各种变形和改进，均应落入本发明权利要求书确定的保护范围内。 说 明 书CN 102874912 A 11 1/1页 12 图1 说 明 书 附 图CN 102874912 A 12 。