一种和田霉素A的全合成方法技术领域
本发明涉及化学合成领域，具体涉及一种和田霉素A的全合成方法。
背景技术
和田霉素A(Hetiamacin A)，即2-((4S，5S，6S)-5-羟基-6-(((S)-1-((S)-8-羟基-
1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基))六氢嘧啶-4-基)乙酸，是一种植物叶片内生
枯草芽孢杆菌的次级代谢产物中分离得到Amicoumacin类抗生素；其结构式如下所示：
专利文献CN102977082A首次公开了和田霉素A，并公开其具有较广谱的细菌抑制
活性，对革兰氏阳性菌如葡萄球菌属(耐β-内酰胺抗生素的菌株)、革兰氏阴性菌如肺炎克
雷伯菌(Klebsiella pneumoniae)、福氏志贺氏菌(Shigella flexneri)、肺炎链球菌
(Streptococcus pneumoniae)等在体外都具有强抑制作用；同时，对HeLa肿瘤细胞也具有
良好的抑制作用。
现有技术获得和田霉素A的方法为从异香豆素类抗生素的发酵液中提取；然而，和
田霉素A在发酵液中的含量低，提取分离操作比较复杂，目前，亟待开发一种和田霉素A的全
合成方法，以便于和田霉素A的大规模生产和应用。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种和田霉素A，即化合物2-((4S，
5S，6S)-5-羟基-6-(((S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基))六
氢嘧啶-4-基)乙酸的全合成方法。
所述反应的合成路线如下：
该反应由化合物(S)-3-((S)-1-氨基-3-甲基丁基)-8-羟基异苯并二氢吡喃-1-酮
与化合物(2S，3S，4S)-2-氨基-4-(苄氧羰基氨基)-6-(叔丁氧基)-3-((叔丁基二甲基)氧
基)-6-氧代己酸经缩合反应得到关键中间体(3S，4S，5S)-5-叠氮基-3-(苄氧羰基氨基)-4-
羟基-6-((1-(8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨基)-6-氧代己酸叔丁
酯；再依次经氢化还原、环化反应、脱掉叔丁基二甲基硅醚反应、水解反应得到2-((4S，5S，
6S)-5-羟基-6-((1-(8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨基甲酰基)六
氢嘧啶-4-基)乙酸，即和田霉素A。
具体而言，和田霉素A由以下具体步骤制备而成：
该步骤具体为：(S)-3-((S)-1-氨基-3-甲基丁基)-8-羟基异苯并二氢吡喃-1-酮
(化合物8)与(2S，3S，4S)-2-氨基-4-(苄氧羰基氨基)-6-(叔丁氧基)-3-((叔丁基二甲基)
氧基)-6-氧代己酸(化合物20)经缩合反应得到((3S，4S，5S)-5-叠氮基-3-(苄氧羰基氨
基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-6-(((S)-1-S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-
3-基)-3-甲基丁基)氨基)-6-氧代己酸叔丁酯(化合物21)。
优选地，此反应的碱为二异丙基乙胺，三乙胺等；缩合剂选择EDCI，DCC，HATU，HBTU
等；反应温度为-10℃至25℃；所选溶剂可为二氯甲烷，四氢呋喃等。
该步骤具体为：((3S，4S，5S)-5-叠氮基-3-(苄氧羰基氨基)-4-((叔丁基二甲基甲
硅烷基)氧基)-6-(((S)-1-S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨基)-
6-氧代己酸叔丁酯(化合物21)经催化氢化得到(3S，4S，5S)-3,5-二氨基-4-((叔丁基二甲
基甲硅烷基)氧基)-6-(((S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨
基)-6-氧代己酸叔丁酯(化合物22)。
优选地，此反应的温度为室温；反应时间为1h至5h；反应溶剂可以为甲醇，乙醇，乙
酸乙酯，四氢呋喃等；催化剂为10％的Pd/C,用量为原料药重量的10％。
该步骤具体为：(3S，4S，5S)-3,5-二氨基-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-6-
(((S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨基)-6-氧代己酸叔丁酯
(化合物22)与甲醛关环反应得到2-((4S，5S，6S)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-6-
(((S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基
丁基)氨甲酰基)六氢嘧啶-4-基)乙酸叔丁酯(化合物23)。
优选地，该反应的温度为30℃-60℃；反应时间为1h至5h；反应溶剂可以为甲醇，乙
醇，四氢呋喃等。
该步骤具体为：2-((4S，5S，6S)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-6-(((S)-1-
((S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨甲酰基)六氢嘧啶-4-基)乙酸
叔丁酯(化合物23)脱叔丁基二甲硅醚保护基，得到2-((4S，5S，6S)-5-羟基-6-(((S)-1-
((S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨基甲酰基)六氢嘧啶-4-基)乙
酸叔丁酯(化合物24)。
优选地，该反应的温度为室温；反应时间为1h至20h；反应溶剂可以为二氯甲；脱保
护的试剂选择四丁基氟化铵或氢氟酸-吡啶等。
该步骤具体为：2-((4S，5S，6S)-5-羟基-6-(((S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并
二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨基甲酰基)六氢嘧啶-4-基)乙酸叔丁酯(化合物24)经水解
反应得到2-((4S，5S，6S)-5-羟基-6-(((S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-
基)-3-甲基丁基)氨基甲酰基)六氢嘧啶-4-基)乙酸(化合物25，即和田霉素A)。
优选地，该反应的温度为0℃-25℃；反应时间为1h至5h；反应溶剂可以为甲醇，乙
醇，四氢呋喃，1,4-二氧六环等；水解条件可选择酸性或碱性条件；所述酸性条件中的酸为
盐酸，硫酸，三氟乙酸，优先选择盐酸；所述碱性条件中的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化
锂、碳酸钾、碳酸钠等。
作为本发明采用的核心原料之一，化合物(S)-3-((S)-1-氨基-3-甲基丁基)-8-羟
基异苯并二氢吡喃-1-酮由如下方法合成得到：
该方法以2-甲氧基6-甲基苯甲酸为起始原料，保护羧基后，与(4-甲基-1-氧代戊
烷-2-基-氨基甲酸苄酯加成内酯化生成中间产物(S)-1-((S)-8-甲氧基-1-氧代异苯并二
氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基-氨基甲酸苄酯，再依次脱除甲基、苄氧羰基保护基所得。
具体而言，所述化合物(S)-3-((S)-1-氨基-3-甲基丁基)-8-羟基异苯并二氢吡
喃-1-酮由以下步骤S1～S9的反应制备而成。
S1：2-甲氧基-6-甲基苯甲酸(化合物1)与二氯亚砜反应生成相应的酰氯，再与噁
唑烷-2-酮反应生成3-(2-甲氧基-6-甲基苄基)恶唑烷-2-酮(化合物2)。
优选地，该反应的温度为60℃～90℃，反应时间为2～12小时。
S2：3-(2-甲氧基-6-甲基苄基)恶唑烷-2-酮(化合物2)在碱性条件下开环得到N-
(2-羟乙基)-2-甲氧基-6-甲基苯甲酰胺(化合物3)。
优选地，该反应所用的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、所用的溶剂喂甲醇、乙醇或丙酮、
乙腈，反应温度60℃至100℃，反应时间为1至12小时。
S3：N-(2-羟乙基)-2-甲氧基-6-甲基苯甲酰胺(化合物3)羟基卤化生成N-(2-氯乙
基)-2-甲氧基-6-甲基苯甲酰胺(化合物4)。
优选地，此反应的温度为0℃至100℃，反应时间为2至12小时。
S4：N-(2-氯乙基)-2-甲氧基-6-甲基苯甲酰胺(化合物4)在碱性条件下关环得到
2-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-4,5-二氢恶唑(化合物5)
优选地，该反应所用的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、所用的溶剂为甲醇、乙醇或丙酮、
乙腈，反应温度60℃至100℃，反应时间为1至12小时。
S7：2-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-4,5-二氢噁唑(化合物5)与(4-甲基-1-氧代戊烷-
2-基-氨基甲酸苄酯(化合物11)反应得到(S)-1-((S)-8-甲氧基-1-氧代异苯并二氢吡喃-
3-基)-3-甲基丁基-氨基甲酸苄酯(化合物6)。
优选地，此反应的碱为丁基锂、二异丙基氨基锂、氰化钠、氢化锂，反应的溶剂为四
氢呋喃，环己烷等，反应温度为-78℃至-60℃。
S8：(S)-1-((S)-8-甲氧基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基-氨基甲酸
苄酯(化合物6)与三溴化硼反应得到苄基(S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-
基)-3-甲基丁基-氨基甲酸酯(化合物7)。
优选地，该反应的温度为-78℃至25℃，优先选择-78℃至-60℃，溶剂选择二氯甲
烷、四氯化碳，环己烷。三溴化硼的用量为原料药的1-20倍。
S9：(S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基-氨基甲酸苄
酯(化合物7)经催化氢化反应，脱掉苄氧羰基，得到(S)-3-((S)-1-氨基-3-甲基丁基)-8-羟
基异苯并二氢吡喃-1-酮(化合物8)。
优选地，该反应温度为室温；反应时间为1h至5h；反应溶剂可以为甲醇，乙醇，乙酸
乙酯，四氢呋喃等；催化剂为10％的Pd/C,用量为原料药重量的10％。
其中，作为原料的(4-甲基-1-氧代戊烷-2-基-氨基甲酸苄酯(化合物11)，是由如
下方法合成得到：
该方法以亮氨酸甲酯为起始原料，依次经苄氧基羰基保护氨基、还原反应所得。
具体而言，所述(4-甲基-1-氧代戊烷-2-基-氨基甲酸苄酯可由以下步骤S5～S6的
反应制备而成。
S5：L-亮氨酸甲酯(化合物9)经苄氧基羰基保护，得到N-苄氧基羰基-L-亮氨酸甲
酯(化合物10)
优选地，此反应的碱为二异丙基乙胺，三乙胺等；反应温度为-10℃至25℃；所选溶
剂可为二氯甲烷，四氢呋喃等。
S6：N-苄氧基羰基-L-亮氨酸甲酯(化合物10)在低温下用DIBAL-H选择性还原得到
4-甲基-1-氧代戊烷-2-基-氨基甲酸苄酯(化合物11)
优选地，该反应的温度为-78℃至-60℃，溶剂选择四氢呋喃，环己烷。
作为本发明采用的核心原料之一，所述化合物(2S，3S，4S)-2-氨基-4-(苄氧羰基
氨基)-6-(叔丁氧基)-3-((叔丁基二甲基)氧基)-6-氧代己酸由如下方法合成得到：
该方法以N-苄氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯为起始原料，依次经缩合反应、还原
反应、维蒂希反应、夏普莱斯不对称双羟基化反应、磺酰化、叠氮化、叔丁基二甲基硅醚保护
羟基、水解反应所得。
具体而言，所述化合物(2S，3S，4S)-2-氨基-4-(苄氧羰基氨基)-6-(叔丁氧基)-3-
((叔丁基二甲基)氧基)-6-氧代己酸由以下步骤S10～S17的反应制备而成。
S10：N-苄氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯(化合物12)与N,O-二甲基羟胺盐酸缩合
反应生成(S)-3-苄氧羰基氨基)-4-(甲氧基(甲基)氨基)-4-氧代丁酸叔丁酯(化合物13)。
优选地，此反应的碱为二异丙基乙胺，三乙胺等；缩合剂选择EDCI，DCC，HATU，HBTU
等；反应温度为-10℃至25℃；所选溶剂可为二氯甲烷，四氢呋喃等。
S11：(S)-3-(苄氧羰基氨基)-4-(甲氧基(甲基)氨基)-4-氧代丁酸叔丁酯(化合物
13)用DIBAL-H还原得到(S)-3-(苄氧羰基氨基)-4-氧代丁酸叔丁酯(化合物14)。
优选地，该反应的温度为-78℃至-60℃，溶剂选择四氢呋喃，环己烷。
S12：(S)-3-(苄氧羰基氨基)-4-氧代丁酸叔丁酯(化合物14)与(三苯基膦烯)乙酸
乙酯发生Wittig反应生成(S，E)-4-(苄氧羰基氨基)己-2-烯二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合
物15)
优选地，此反应在氮气或惰性气体的保护下进行；反应的溶剂选择二氯甲烷，四氢
呋喃，甲苯等；温度为室温。
S13：(S，E)-4-(苄氧羰基氨基)己-2-烯二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(15)与AD-mix-a在
甲磺酰胺的催化下反应生成(2R，3S，4S)-4-(苄氧羰基氨基)-2,3-二羟基己二酸-1-乙酯-
6-叔丁酯(16)。
优选地，此反应的溶剂选择叔丁醇与水，叔丁醇和水的比例为1:1；反应的温度为0
℃，甲磺酰胺的量与原料药的比例为1:1。
S14：(2R，3S，4S)-4-(苄氧羰基氨基)-2,3-二羟基己二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合
物16)与对硝基苯磺酰氯反应得到(2S，3S，4S)-4-(苄氧羰基氨基)-3-羟基-2-((4-硝基苯
磺酰基)氧基)己二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合物17)。
优选地，此反应的碱为二异丙基乙胺，三乙胺等；反应温度为-10℃至25℃；所选溶
剂可为二氯甲烷，四氢呋喃等。
S15：(2S，3S，4S)-4-(苄氧羰基氨基)-3-羟基-2-((4-硝基苯磺酰基)氧基)己二
酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合物17)与叠氮钠反应得到(2S，3S，4S)-2-叠氮基-4-(苄氧羰基氨
基)-3-羟基己二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合物18)。
优选地，该反应为叠氮钠的SN2反应；原料：叠氮钠的摩尔比为1:1-10；反应温度为
50℃-80℃；溶剂为DMF。
S16：(2S，3S，4S)-2-叠氮基-4-(苄氧羰基氨基)-3-羟基己二酸-1-乙酯-6-叔丁酯
(化合物18)转化为硅醚，得到(2S，3S，4S)-4-(苄氧羰基氨基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷
基)氧基)-2-((4-硝基苯磺酰基)氧基)己二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合物19)。
优选地，此反应温度为-78℃至-30℃；碱为2,6-二甲基吡啶或三乙胺；反应时间为
0.5-2小时；反应在无水二氯甲烷或四氢呋喃中进行。
S17：(2S，3S，4S)-4-(苄氧羰基氨基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-((4-
硝基苯磺酰基)氧基)己二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合物19)在碱性条件下水解得到(2S，3S，
4S)-2-氨基-4-(苄氧羰基氨基)-6-(叔丁氧基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-6-氧
代己酸(化合物20)。
优选地，此反应温度为0℃；碱为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化锂、碳酸钾、碳酸钠
等；反应时间为0.5-2小时；溶剂为水和四氢呋喃混合溶液。
作为本发明的优选方案，本发明所述和田菌素A的全合成整体路线如下所示：
该优选方案以亮氨酸甲酯为起始原料，经苄氧基羰基保护氨基，还原反应得到中
间体苄基(4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)氨基甲酸酯；以2-甲氧基6-甲基苯甲酸为起始原料，
用2-烷基-1,3-噁唑啉保护羧基，经加成内酯化，再脱除甲基、苄氧羰基保护基得到关键中
间体异苯并二氢吡喃-1-酮母核；以N-苄氧羰基-L-天冬氨酸-4-叔丁酯为起始原料，经缩合
反应、还原反应、维蒂希反应、夏普莱斯不对称双羟基化反应、磺酰化、叠氮化、叔丁基二甲
基硅醚保护羟基、水解反应、缩合反应得到关键中间体(3S，4S，5S)-5-叠氮基-3-(苄氧羰基
氨基)-4-羟基-6-((1-(8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨基)-6-氧代
己酸叔丁酯；再通过氢化还原，环化反应，脱掉叔丁基二甲基硅醚反应，水解反应得到2-
((4S，5S，6S)-5-羟基-6-((1-(8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨基甲
酰基)六氢嘧啶-4-基)乙酸，即和田霉素A。
本发明提供的和田菌素A的全合成方法，具有原料药易得、操作简便、成本低廉等
优点。该方法合成得到的和田菌素A具有较广谱的细菌抑制活性及抗肿瘤活性。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
下面的具体实施例是本发明的优选实施方案，其不应理解为对本发明构成任何限
制。其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所做的改变、修饰、替代、组合、简化，均
应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。本发明用于标准化合物信息的1H-
NMR和13C-NMR用Bruker(500M，600M)超导核磁仪测定。
实施例
按照以下步骤S1～S22合成和田霉素A：
S1：制备3-(2-甲氧基-6-甲基苄基)恶唑烷-2-酮(化合物2)：
在250mL反应瓶中，加入2-甲氧基-6-甲基苯甲酸(1，6g，36.11mmol)、二氯亚砜
(40mL)，磁力搅拌回流50min。将反应体系冷却至室温，减压除去过量的二氯亚砜。得到油状
物直接用于下一步反应。
S2：制备N-(2-羟乙基)-2-甲氧基-6-甲基苯甲酰胺(化合物3)：
向步骤S1所得油状物中加入恶唑烷酮(3.46g，39.72mmol)，65℃反应2小时。反应
完成后。将反应体系冷却至室温，向其中加入NaOH溶液(10％，35mL)和乙醇(35mL)。混合液
加热回流2h后冷却至室温，用3N稀盐酸调节pH至5。用二氯甲烷萃取，有机相用饱和食盐水
洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残余物用硅胶柱色谱进行纯化得白色固体
5.9g，产率78.04％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(500MHz,CDCl)δ7.26(t,J＝8.0Hz,1H),6.85(d,J＝7.7Hz,1H),6.79(d,J
＝8.3Hz,1H),6.30(s,1H),3.85(d,J＝2.7Hz,5H),3.63(q,J＝5.3Hz,2H),2.79(s,1H),
2.38(s,3H)。
S3：制备N-(2-氯乙基)-2-甲氧基-6-甲基苯甲酰胺(化合物4)：
在100mL圆底烧瓶中，加入步骤S2所得N-(2-羟乙基)-2-甲氧基-6-甲基苯甲酰胺
(化合物3，5.9g，28.20mmol)、二氯亚砜(20mL)，回流反应2小时。反应结束后，减压除去过量
的二氯亚砜。加入二氯甲烷，用饱和碳酸氢钠洗涤。用二氯甲烷萃取，有机相用饱和食盐水
洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残余物用硅胶柱色谱进行纯化得白色固体
4.31g，产率67.13％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.20(t,J＝8.0Hz,1H),6.79(d,J＝7.7Hz,1H),6.74(d,J
＝8.3Hz,1H),6.29(s,1H),3.79(d,J＝10.5Hz,5H),3.56(q,J＝5.3Hz,2H),2.83(s,1H),
2.32(s,3H)。
S4：制备2-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-4,5-二氢噁唑(化合物5)：
在100mL反应瓶中，加入步骤S3所得N-(2-氯乙基)-2-甲氧基-6-甲基苯甲酰胺(化
合物4，4.31g，18.93mmol)、乙醇(17.5mL)、盐酸(10％，17.5mL)。回流反应2h。反应后，用二
氯甲烷萃取，有机相用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残余物用硅
胶柱色谱进行纯化得白色固体3.13g，产率86.46％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(500MHz,CD3OD)δ7.30(t,J＝8.0Hz,1H),6.86(dd,J＝13.7,8.0Hz,2H),
4.46(t,J＝9.6Hz,2H),4.02(t,J＝9.6Hz,2H),3.79(s,3H),2.27(s,3H)。
S5：制备N-苄氧基羰基-L-亮氨酸甲酯(化合物10)：
在250mL反应瓶中，加入L-亮氨酸甲酯(9，5.1g，35.12mmol)、蒸馏水(50mL)，0℃时
加入NaHCO3(7.38g，87.8mmol)、氯甲酸苄酯(7.79g，45.66mmol)，反应15小时。反应结束后，
用二氯甲烷萃取，有机层用1N稀盐酸溶液、饱和食盐水洗，无水Na2SO4干燥，过滤，减压除去
溶剂。残余物用硅胶柱色谱进行纯化得白色固体9.56g，产率97.45％。经鉴定，所得产物为
N-苄氧基羰基-L-亮氨酸甲酯。
S6：制备4-甲基-1-氧代戊烷-2-基-氨基甲酸苄酯(化合物11)：
在250mL圆底烧瓶中，加入步骤S5所得N-苄氧基羰基-L-亮氨酸甲酯(化合物10，
9.56g，34.2mmol)、四氢呋喃(100mL)，溶液冷却至-78℃。在氮气保护下滴加二异丁基氢化
铝(51.3mL，1.0mol/L in THF，51.34mmol)，反应30分钟后，用甲醇和饱和碳酸氢钠淬灭反
应。加入乙酸乙酯稀释，常温快速搅拌30min。有机相用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过
滤，减压除去溶剂。残余物用硅胶柱色谱进行纯化得白色固体7g，产率82.06％。经鉴定，所
得产物为4-甲基-1-氧代戊烷-2-基-氨基甲酸苄酯。
S7：制备(S)-1-((S)-8-甲氧基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基氨基
甲酸苄酯(化合物6)：
在250mL圆底烧瓶中加入步骤S4所得2-(2-甲氧基-6-甲基苯基)-4,5-二氢噁唑
(化合物5，1g，5.23mmol)、四氢呋喃(30mL)，搅拌至完全溶解，-78℃下滴加正丁基锂和步骤
S6所得4-甲基-1-氧代戊烷-2-基-氨基甲酸苄酯(化合物11，1.1g，4.41mmol)。-78℃反应1
小时，反应完成后，加饱和氯化铵淬灭，将体系升至室温。用二氯甲烷萃取，有机相用饱和食
盐水洗三次，无水Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残余物用硅胶柱色谱进行纯化得白色固
体210.32mg，产率10.11％。
所得产物的表征信息如下：
1H-NMR(500MHz,CD3OD)δ7.52(t,J＝8.1Hz,1H),7.34(dt,J＝24.8,7.3Hz,5H),
7.05(d,J＝7.5Hz,1H),6.85(d,J＝7.2Hz,1H),5.10(s,2H),4.32–4.20(m,1H),3.89(s,
4H),2.98–2.83(m,2H),1.78–1.65(m,1H),1.58–1.41(m,2H),0.96(d,J＝6.7Hz,3H),0.93
(d,J＝6.5Hz,3H)。
S8：制备(S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基氨基甲
酸苄酯(化合物7)：
在100mL圆底烧瓶中，加入步骤S7所得(S)-1-((S)-8-甲氧基-1-氧代异苯并二氢
吡喃-3-基)-3-甲基丁基氨基甲酸苄酯(化合物6，400mg，1.04mmol)、二氯甲烷(15mL)。-78
℃下加入三溴化硼(0.5mL)，反应2小时后，用饱和碳酸氢钠溶液淬灭，用二氯甲烷萃取，有
机相用饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残余物用硅胶柱色谱进行纯
化得白色固体370.71mg，产率96.07％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(500MHz,CD3OD)δ7.44(t,J＝7.9Hz,1H),7.39–7.26(m,5H),6.84(d,J＝
8.4Hz,1H),6.74(d,J＝7.5Hz,1H),5.10(s,2H),4.50–4.41(m,1H),3.97(dt,J＝10.6,
5.1Hz,1H),3.05–2.91(m,2H),1.71(h,J＝6.2Hz,1H),1.53(dq,J＝13.8,9.9Hz,2H),0.97
(d,J＝6.7Hz,3H),0.93(d,J＝6.6Hz,3H).
S9：制备(S)-3-((S)-1-氨基-3-甲基丁基)-8-羟基异苯并二氢吡喃-1-酮(化合物
8)：
在50mL反应瓶中，加入步骤S8所得((S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-
3-基)-3-甲基丁基)氨基甲酸苄酯(化合物7，300mg，0.78mmol)、乙醇(15mL)、10％的Pd/C
(30mg)、3N盐酸水溶液(4d)。在氢气流下室温常压反应10小时。反应结束后过滤，将滤液减
压旋干。得白色固体181.70mg，产率96.07％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(500MHz,CD3OD)δ7.51(dt,J＝8.3,4.2Hz,1H),6.89(dd,J＝19.6,7.7Hz,
2H),4.91(dd,J＝13.3,3.2Hz,1H),3.71(s,1H),3.19–3.07(m,1H),3.01(dd,J＝15.9,
3.5Hz,1H),1.84–1.56(m,3H),1.04(ddd,J＝15.7,6.5,3.0Hz,6H).
S10：制备(S)-3-((叔丁氧羰基)氨基)－4－(甲氧基(甲基)氨基)-4-氧代丁酸叔
丁酯(化合物13)：
在500mL反应瓶中，加入(S)-4-(叔丁氧基)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-4-氧代丁酸
(化合物12，25g，86.41mmol)、二氯甲烷(200mL)，冷却至-15℃，加入N，O-二甲基羟胺盐酸盐
(7.2g，86.41mmol)、NMM(17mL，172.82mmol)、15min内分批次加入EDCI(14.2g，86.41mmol)。
室温下搅拌2小后，加入冷的1M稀盐酸溶液(80mL)。用二氯甲烷萃取，有机相分别用饱和碳
酸氢钠溶液和饱和食盐水洗三次，无水Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残余物用硅胶柱色
谱进行纯化得白色固体26g，产率90.5％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.34(d,J＝4.2Hz,5H),5.65(d,J＝9.2Hz,1H),5.08(dd,J
＝27.4,15.2Hz,3H),3.78(s,3H),3.22(s,3H),2.71(dd,J＝15.2,5.4Hz,1H),2.59–2.48
(m,1H),1.42(s,9H)；
13C NMR(151MHz,CDCl3)δ170.99,169.22,155.69,136.28,128.47,128.09,
128.01,81.37,66.90,61.65,48.42,38.33,32.31,27.97。
S11：制备(S)-3-(苄氧羰基氨基)-4-氧代丁酸叔丁酯(化合物14)：
在500mL反应瓶中，加入步骤S10所得(S)-3-(苄氧羰基氨基)-4-(甲氧基(甲基)氨
基)-4-氧代丁酸叔丁酯(化合物13，26g，70.96mmol)、甲苯(200mL)，冷却至-78℃。在氮气保
护下滴加DIBAL-H(1.0M的四氢呋喃溶液，141.9mL，141.9mmol，2当量)，-78℃搅拌30分钟
后。用甲醇淬灭反应，加入饱和硫酸氢钠溶液、乙酸乙酯，搅拌30分钟，过滤。有机层用饱和
食盐水洗三次，无水Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂，得到为黄色油状物。产物无需纯化，直
接用于下一步反应。
S12：制备(S，E)-4-(苄氧羰基氨基)己-2-烯二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合物15)：
在1000mL反应瓶中，加入(三苯基亚正膦基)乙酸乙酯(21.2g，60.8mmol，1.1当
量)、二氯甲烷(300mL)、步骤S11所得黄色油状物(化合物14，17g，55.3mmol)。在氮气流下室
温反应10h。反应液减压除去溶剂。残余物中反复加入乙酸乙酯中，过滤，减压除去溶剂，除
去三苯基氧磷。残余物用硅胶柱色谱进行纯化得白色固体18g，产率86％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.42–7.30(m,5H),6.89(dd,J＝15.7,5.0Hz,1H),5.96
(dd,J＝15.7,1.9Hz,1H),5.62(s,1H),5.12(t,J＝10.3Hz,2H),4.71(s,1H),4.19(q,J＝
7.1Hz,2H),2.66–2.49(m,2H),1.42(s,9H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H)；
13C NMR(151MHz,CDCl3)δ169.78,165.91,155.49,146.06,136.18,128.52,
128.18,128.12,81.89,66.99,60.52,48.71,39.39,27.99,14.19。
S13：制备(2R，3S，4S)-4-(苄氧羰基氨基)-2,3-二羟基己二酸-1-乙酯-6-叔丁酯
(化合物16)：
在1000mL反应瓶中，加入AD-mix-a(63g，1.4g/mmol)、叔丁醇150mL、蒸馏水150mL，
0℃下加入MeSO2NH2(4.28g，62.79mmol)，搅拌2小时后，加入步骤S12所得(S，E)-4-(苄氧羰
基氨基)己-2-烯二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合物15，23.7g，62.79mmol)。混合溶液在0℃下
反应96小时，反应结束后，用饱和亚硫酸钠猝灭反应，加入乙酸乙酯稀释。有机相用水洗三
次后，无水Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残余物用硅胶柱色谱进行纯化得白色固体15g，
产率80.9％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.41–7.29(m,1H),5.75(d,J＝9.1Hz,1H),5.21–5.05(m,
0H),4.27(ddt,J＝13.5,6.5,3.2Hz,1H),4.13–4.03(m,0H),3.96(t,J＝8.9Hz,0H),3.65
(s,0H),2.79–2.55(m,1H),1.44(s,2H),1.30(t,J＝7.1Hz,1H)；
13C NMR(151MHz,CDCl3)δ172.31,171.25,156.73,136.03,128.57,128.30,
128.21,81.67,73.01,70.45,67.25,62.10,50.21,36.53,28.02,14.16。
S14：制备(2S，3S，4S)-4-(苄氧羰基氨基)-3-羟基-2-((4-硝基苯磺酰基)氧基)己
二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合物17)
250mL反应瓶中，加入步骤S13所得(2R，3S，4S)-4-(苄氧羰基氨基)-2,3-二羟基己
二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合物16，10g，24.3mmol)、TEA(4.1mL，29.17mmol)、4-硝基苯磺酰
氯(915mg，4.13mmol)、二氯甲烷(100mL)。0℃下反应12小时。反应结束后，用二氯甲烷稀释，
分别用1N稀盐酸(100mL)、饱和碳酸钠溶液(100mL)和饱和食盐水洗涤。有机相用水洗三次
后，无水Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残余物用硅胶柱色谱纯化得浅黄色固体10.5g，产
率72.4％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.35(d,J＝8.5Hz,2H),8.17(d,J＝8.5Hz,2H),7.36(p,J
＝10.1,8.6Hz,5H),5.47(d,J＝9.0Hz,1H),5.23(s,1H),5.09(s,2H),4.35(d,J＝8.1Hz,
1H),4.20(d,J＝9.3Hz,2H),3.96(s,1H),2.72(qd,J＝16.6,5.3Hz,2H),2.32(s,1H),1.42
(s,9H),1.25(dt,J＝7.5,3.9Hz,3H)；
13C NMR(151MHz,CDCl3)δ172.74,164.58,155.64,151.02,141.38,135.48,
128.70,128.60,128.32,124.31,83.29,67.60,63.13,49.55,33.93,13.96。
S15：制备(2S，3S，4S)-2-叠氮基-4-(苄氧羰基氨基)-3-羟基己二酸-1-乙酯-6-叔
丁酯(化合物18)：
在250mL反应瓶中加入，叠氮化钠(3.7g，56.88mmol)、DMF(30mL)，加热至50℃，在
反应液中加入步骤S14所得(2S，3S，4S)-4-(苄氧羰基氨基)-3-羟基-2-((4-硝基苯磺酰基)
氧基)己二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合物17，8g，14.22mmol)、DMF(5mL)50℃下反应12小时。
反应结束后，加入适量水，用乙酸乙酯萃取、有机相用饱和食盐水洗三次，无水Na2SO4干燥，
过滤，减压除去溶剂。残余物用硅胶柱色谱纯化得到白色固体4.8g，产率83.9％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(500MHz,CDCl3)δ7.42–7.28(m,5H),5.56(d,J＝8.8Hz,1H),5.10(s,2H),
4.28(q,J＝7.2Hz,2H),4.19–4.06(m,2H),4.03(d,J＝5.7Hz,1H),3.62(d,J＝7.0Hz,1H),
2.65(qd,J＝16.5,5.0Hz,2H),1.43(s,9H),1.32(t,J＝7.2Hz,3H)；
13C NMR(151MHz,CDCl3)δ171.52,168.74,155.90,136.16,128.53,128.22,
128.12,81.79,73.11,67.02,63.45,62.35,49.67,35.89,28.00,14.11。
S16：制备(2S，3S，4S)-4-(苄氧羰基氨基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-
((4-硝基苯磺酰基)氧基)己二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合物19)：
在250mL反应瓶中，加入步骤S15所得(2S，3S，4S)-2-叠氮基-4-(苄氧羰基氨基)-
3-羟基己二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合物18，4g，9.16mmol)、二氯甲烷(100mL)，冷却至-30
℃。反应液中加入2,6-二甲基吡啶(4.27mL，36.66mmol)、TBSOTf(4.21mL，18.33mmol，4当
量)，-30℃下反应1小时。反应结束后，加入乙酸乙酯，用0.5N稀盐酸、饱和碳酸氢钠溶液洗
涤。有机相用饱和食盐水洗三次，无水Na2SO 4干燥，过滤，减压除去溶剂。残余物用硅胶柱色
谱纯化得到透明油状物3g，产率59.4％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(500MHz,CD3OD)δ7.27(dt,J＝22.1,7.4Hz,5H),5.00(s,2H),4.33(d,J＝
3.1Hz,1H),4.12(ddh,J＝10.7,7.7,3.5Hz,3H),2.61(dd,J＝15.3,3.7Hz,1H),2.34(dd,J
＝15.3,9.5Hz,1H),1.35(s,9H),1.22(t,J＝7.1Hz,3H),0.86(d,J＝2.4Hz,9H),0.10(s,
3H),0.07(s,3H)；
13C NMR(151MHz,CD3OD)δ172.39,169.23,157.58,138.16,129.44,129.01,82.13,
75.73,67.51,66.67,63.00,51.69,38.17,28.32,26.34,18.87,14.44,-3.57,-4.24。
S17：制备(2S，3S，4S)-2-氨基-4-(苄氧羰基氨基)-6-(叔丁氧基)-3-((叔丁基二
甲基甲硅烷基)氧基)-6-氧代己酸(化合物20)：
在100mL反应瓶中，加入步骤S16所得(2S，3S，4S)-2-叠氮基-4-(苄氧羰基氨基)-
3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)己二酸-1-乙酯-6-叔丁酯(化合物19，500mg，
0.91mmol)、四氢呋喃(6mL)、蒸馏水(6mL)，0℃下加入氢氧化锂(9.1mL，0.1mol/L)，搅拌1小
时后。室温下反应4小时。反应完成后，将混合物用稀盐酸(1mol/L)酸化，用乙酸乙酯萃取，
有机相用饱和食盐水洗三次，无水Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂，得到油状物410mg，产率
59.4％。产物无需纯化，直接用于下一步反应。
S18：制备((3S，4S，5S)-5-叠氮基-3-(苄氧羰基氨基)-4-((叔丁基二甲基甲硅烷
基)氧基)-6-(((S)-1-S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨基)-6-氧
代己酸叔丁酯(化合物21)：
在250mL反应瓶中，加入步骤S17所得油状物(2S，3S，4S)-2-氨基-4-(苄氧羰基氨
基)-6-(叔丁氧基)-3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-6-氧代己酸(化合物20，400mg，
0.77mmol)、步骤S9所得(S)-3-((S)-1-氨基-3-甲基丁基)-8-羟基异苯并二氢吡喃-1-酮
(化合物8，190.8mg，0.77mmol)、DIEA(0.38mL，2.3mmol)、二氯甲烷(50mL)，在0℃下加入
HATU(290mg，0.77mmol)，搅拌30分钟后，加热至室温反应3小时。反应结束后，加入二氯甲
烷，用稀盐酸(1mol/L)和饱和食盐水洗涤，无水Na2SO4干燥，过滤，减压除去溶剂。残余物用
硅胶柱色谱法纯化，得到白色固体280mg，产率48.5％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(500MHz,CD3OD)δ7.43(t,J＝8.0Hz,1H),7.36–7.25(m,5H),6.83(d,J＝
8.4Hz,1H),6.76(d,J＝7.4Hz,1H),5.06(s,2H),4.72–4.65(m,1H),4.31(d,J＝9.8Hz,1H),
4.20(s,1H),4.05(dd,J＝7.1,2.8Hz,1H),3.20–3.11(m,1H),2.91(d,J＝16.3Hz,1H),2.72
(dd,J＝15.9,3.8Hz,1H),2.34(dd,J＝15.8,10.0Hz,1H),1.84–1.75(m,1H),1.69(d,J＝
6.6Hz,1H),1.54–1.44(m,1H),1.35(s,9H),0.97(d,J＝6.7Hz,3H),0.93(d,J＝6.4Hz,3H),
0.85(s,9H),0.17(s,3H),0.08(s,3H)；
13C NMR(151MHz,CD3OD)δ171.97,171.07,168.41,163.24,158.40,141.61,
138.25,137.37,129.48,129.11,119.62,116.69,109.60,82.24,76.23,67.78,67.08,
51.99,51.22,40.54,38.20,31.12,28.33,26.56,25.86,23.71,22.20,19.02,-3.74,-
4.61。
S19：制备(3S，4S，5S)-3,5-二氨基-4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-6-(((S)-
1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨基)-6-氧代己酸叔丁酯(化合物
22)：
在100mL反应瓶中，加入步骤S18所得((3S，4S，5S)-5-叠氮基-3-(苄氧羰基氨基)-
4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-6-(((S)-1-S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-
基)-3-甲基丁基)氨基)-6-氧代己酸叔丁酯(化合物21，200mg，0.27mmol)、乙醇(10mL)、
10％的Pd/C(20mg)。在30psi氢气中室温反应12小时。反应结束后过滤，将滤液减压旋干。得
到无色油状150mg，产率92％。所得产物直接用于下一步反应。
S20：制备2-((4S，5S，6S)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)-6-(((S)-1-((S)-8-
羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨甲酰基)六氢嘧啶-4-基)乙酸叔丁酯
(化合物23)
在50mL的反应瓶中，加入步骤S19所得无色油状物(3S，4S，5S)-3,5-二氨基-4-
((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-6-(((S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-
基)-3-甲基丁基)氨基)-6-氧代己酸叔丁酯(化合物22，120mg，)、甲醛(0.3mL，30％)、甲醇
(5mL)。混合溶液在50℃下反应8小时。反应结束后，减压除去溶剂，用硅胶柱色谱法纯化，得
到为白色固体80mg，产率65.6％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(600MHz,CD3OD)δ7.45(dd,J＝8.4,7.4Hz,1H),6.85(dt,J＝8.5,1.0Hz,
1H),6.76(d,J＝7.3Hz,1H),4.70(dt,J＝12.8,3.1Hz,1H),4.27(ddd,J＝9.7,4.7,3.1Hz,
1H),3.86–3.78(m,2H),3.51(d,J＝13.1Hz,1H),3.31(p,J＝1.6Hz,2H),3.25(d,J＝7.5Hz,
1H),3.15–3.07(m,1H),2.97–2.87(m,2H),2.65(dd,J＝16.5,4.3Hz,1H),2.36(dd,J＝
16.5,7.7Hz,1H),1.73(tdd,J＝14.9,8.6,4.9Hz,2H),1.57–1.48(m,1H),1.45(s,9H),0.97
(dd,J＝11.8,6.5Hz,6H),0.83(s,9H),0.11(s,3H),0.02(s,3H)；
13C NMR(151MHz,CD3OD)δ173.70,172.84,171.04,163.40,141.46,137.67,
119.60,116.96,109.53,82.21,81.80,69.98,66.28,60.05,58.99,50.94,40.73,38.05,
30.81,28.56,26.65,25.78,23.85,22.47,19.20,-3.16,-3.75。
S21：制备2-((4S，5S，6S)-5-羟基-6-(((S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡
喃-3-基)-3-甲基丁基)氨基甲酰基)六氢嘧啶-4-基)乙酸叔丁酯(化合物24)：
在50mL反应瓶中，加入步骤S20所得2-((4S，5S，6S)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基
氧基)-6-(((S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨甲酰基)六
氢嘧啶-4-基)乙酸叔丁酯(23，70mg,)、四氢呋喃(2mL)、氢氟酸-吡啶(2mL)。混合溶液在室
温下反应12小时。反应结束后。用乙酸乙酯萃取，有机层用稀盐酸(1mol/L)和饱和食盐水洗
涤，减压除去溶剂，残余物用制备型HPLC纯化，得到白色固体30mg，产率52.8％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(500MHz,CD3OD)δ7.47–7.41(m,1H),6.83(t,J＝6.4Hz,1H),6.78(t,J＝
7.8Hz,1H),4.65(dt,J＝12.8,2.8Hz,1H),4.38–4.30(m,1H),3.88(d,J＝12.9Hz,1H),3.51
(d,J＝12.9Hz,1H),3.29–3.16(m,3H),2.93–2.81(m,2H),2.67(dd,J＝16.1,3.9Hz,1H),
2.29(dd,J＝16.1,7.7Hz,1H),1.85–1.70(m,2H),1.46(s,1H),1.43(s,9H),0.98(d,J＝
6.6Hz,3H),0.94(d,J＝6.5Hz,3H)；
13C NMR(151MHz,CD3OD)δ173.63,173.01,171.21,163.21,141.95,137.49,
119.57,116.61,109.42,82.87,82.06,71.43,65.92,60.97,59.68,50.44,40.90,38.65,
30.83,28.39,25.75,23.80,22.15。
S22：制备2-((4S，5S，6S)-5-羟基-6-(((S)-1-((S)-8-羟基-1-氧代异苯并二氢吡
喃-3-基)-3-甲基丁基)氨基甲酰基)六氢嘧啶-4-基)乙酸(化合物25)：
在50mL反应瓶中，加入步骤S21所得2-((4S，5S，6S)-5-羟基-6-(((S)-1-((S)-8-
羟基-1-氧代异苯并二氢吡喃-3-基)-3-甲基丁基)氨基甲酰基)六氢嘧啶-4-基)乙酸叔丁
酯(化合物24，15mg，0.058mmol)、盐酸-二氧六环(1mol/mL，2mL)。在氮气保护下室温反应15
小时。反应结束后，加压除去溶剂，得到黄色油状物。用制备型HPLC纯化，得到白色固体
10mg，产率75.2％。
所得产物的表征信息如下：
1H NMR(600MHz,CD3OD)δ7.39(t,J＝7.9Hz,1H),6.78(d,J＝8.3Hz,1H),6.72(d,J
＝7.4Hz,1H),4.61(dt,J＝12.9,2.7Hz,1H),4.33–4.27(m,2H),3.91(d,J＝12.4Hz,1H),
3.51(d,J＝9.7Hz,1H),3.35(d,J＝9.4Hz,1H),3.19–3.09(m,2H),2.80(dd,J＝16.5,
2.9Hz,1H),2.70(d,J＝16.9Hz,1H),2.41(dd,J＝17.1,7.5Hz,1H),1.78(ddd,J＝13.8,
10.8,4.6Hz,1H),1.70–1.62(m,1H),1.41(ddd,J＝13.8,9.4,4.2Hz,1H),0.93(d,J＝
6.7Hz,3H),0.89(d,J＝6.5Hz,3H)13C NMR(151MHz,CD3OD)δ172.0,171.6,171.1,141.6,
137.5,119.5,116.7,109.4,83.0,82.7,82.0,67.9,60.5,59.0,50.4,40.7,33.5,30.9,
25.9,23.7,22.0。
经鉴定，所得产物为化合物25，即和田菌素A。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描
述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见
的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的
范围。