一种灵芝孢子油的提取方法技术领域
本发明属于物质提取技术领域，尤其涉及一种灵芝孢子油的提取方法。
背景技术
灵芝(学名:GanodermaLucidumKarst)，外形呈伞状，菌盖肾形、半圆形或近圆形。
灵芝为担子菌纲多孔菌科灵芝属真菌，素有“仙草”美誉，它具有补气安神、止咳平喘的功
效，用于眩晕不眠、心悸气短、虚劳咳喘。灵芝已实现人工种植，其中以林中灵品质最佳，药
用价值优于野生灵芝。
灵芝当中含有三萜类化合物、多糖类、核苷类等多种功效成分，其中灵芝三萜成分
能够直接毒杀肿瘤细胞和间接抑制肿瘤生长。灵芝孢子是灵芝在发育后期产生释放出来的
种子，是灵芝的精华，而灵芝孢子油中包含了灵芝孢子中的三萜类、多糖类及核苷类等全部
有效成分，是灵芝孢子有效成分的集合体，具有多种生理活性。由于灵芝孢子的内外双层壁
是坚硬的几丁质，如果没有破壁，其内部成分就很难被提取出来，服用后也很难被人体吸
收。灵芝孢子破壁后，采用超临界CO2提取可获得孢子油，根据药理研究，灵芝孢子油可增强
机体的免疫力，抗肿瘤，保肝养胃，对心血管疾病、高血压、糖尿病和精神衰弱具有良好的保
健功能。
现有的破壁方法主要有两种：一是生物破壁法，以无菌的灵芝孢子粉加入蛹虫草
进行固体发酵，使灵芝孢子粉破壁。由于其制备过程中需要经过长时间的发酵，而且发酵后
必须经过固液分离，干燥，才能得到破壁后的灵芝孢子粉，工艺较为复杂，容易引入其它杂
质，破坏灵芝孢子的营养成分。二是机械粉碎法，精选灵芝孢子粉，添加20～80％的水，50℃
干燥12h以上，放入罐体，球料比(2-3):1，球料占罐体的四分之三左右，球磨时间4～9h，大
珠、中珠、小珠的个数比例为1:1:1，进行破壁处理，得破壁灵芝粉。此种方法球磨效率一般，
破壁率较低，球磨过程中对于营养成分的损失较大，且容易引入重金属元素。此外，传统的
灵芝孢子油提取方法是溶剂提取，存在提取率低、提取活性成分含量少、有溶剂残留等问
题，灵芝孢子中的有效成分易氧化酸败，抗癌有效成分“灵芝三萜类物质”，在空气中两个小
时就会氧化、挥发而失效，此外水分的存在会加剧油的酸化。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供一种灵芝孢子油的提取方法，在破壁前添加葡
萄籽粉末来保护灵芝孢子粉的有效成分免于被氧化和酸败，提高了灵芝孢子粉的出油率及
油的品质，保持其活性成分的完整性，减小环境污染，降低提取成本。
本发明通过以下技术方案实现：
一种灵芝孢子油的提取方法，包括如下步骤：
步骤一，将净制后的葡萄籽进行干燥处理，破碎至粒径为0.1μm—50μm的葡萄籽粉
末备用；
步骤二，将净制后的灵芝孢子粉与步骤一制得的葡萄籽粉末混合后在50℃、
0.05MPa下干燥2小时；
步骤三，将步骤二中经干燥处理后的灵芝孢子粉与葡萄籽粉末混合物放入低温破
壁机中，在-25-30℃、CO2气体保护下进行冷冻破壁，得到破壁灵芝孢子粉；
步骤四，采用超临界二氧化碳流体从步骤三的灵芝孢子粉中提取灵芝孢子油；萃
取时将筛选过的灵芝孢子粉颗粒放入萃取釜的物料桶中，将二氧化碳气体注入萃取釜，保
持萃取釜内温度和压力在二氧化碳气体的超临界状态与物料接触，使灵芝孢子粉中的灵芝
孢子油成分溶解于超临界流体之中，从萃取釜的萃取出口收集含有灵芝孢子油的流体；萃
取后在不同压力条件下将灵芝孢子油通过两次分离出来并进行匀质、灌装和保存。
作为上述方案的进一步改进，萃取时萃取釜内温度为42～50℃，压力为30～
35MPa，二氧化碳气体通过萃取釜的流量为150～250kg/h，萃取时间为3～4h。
作为上述方案的进一步改进，两次分离中，分离一的温度为40～45℃，压力为8～
10MPa，分离二的温度为40～45℃，压力为6MPa。
作为上述方案的进一步改进，所述葡萄籽为巨峰、夏黑、美人指等优质品种葡萄籽
粒中的一种或几种的混合物。
作为上述方案的进一步改进，所述步骤二中，灵芝孢子粉与葡萄籽粉末的质量比
为100:0.1—100：2。
作为上述方案的进一步改进，所述灵芝孢子粉在CO2气体保护下进行破壁，破壁温
度为-15℃—30℃时，破壁率≥95％。
作为上述方案的进一步改进，在萃取前进行选料，选料步骤是选取含水率不大于
12％，长度为7～10mm的条索状灵芝孢子粉颗粒为原料，并筛选出60目以下的部分作为萃取
物料。
作为上述方案的进一步改进，匀质、灌装和保存步骤是将同一批原料的灵芝孢子
油放入匀质机中，每20kg灵芝孢子油中加入1片VE，匀质后，灌装，避光冷藏保存。
本发明的有益效果是：
一、本发明采用葡萄籽为抗氧剂供体，葡萄籽中含有多酚类物质(GPS),主要有儿
茶素类和原花青素类。儿茶素类化合物包括儿茶素、表儿茶素及其没食子酸酯，是葡萄籽中
主要的单聚体，也是原花青素寡聚体和多聚体的构成单位，将葡萄籽与灵芝孢子粉协同配
合后，将能够具有更好的抗氧化作用，有效避免了破壁后的灵芝孢子粉中有效成分被氧化
和酸败，提高了灵芝孢子粉的出油率，并保证了灵芝孢子油中有效成分的纯度及含量，延长
了灵芝孢子油的保质期。
二、采用CO2气体保护的低温冷冻剪切式破壁技术，在破碎过程中先将孢子粉进行
低温冷冻，使得孢子粉便于挤压破壁，并辅以CO2气体保护，能够有效防止破壁过程中由于
破壁机的局部过热导致孢子粉中所含活性物质的高温损害和变质。
三、超临界萃取溶剂CO2无毒、无味、无嗅，在超临界状态下具有强的溶解力，而该
溶解力又随超临界压力和温度的改变而变化，它直接从破壁的孢子粉中提纯的脂溶性物
质，高度集中了灵芝孢子原生质的三萜类、多糖类、核苷类等全部有效成分，且出油率高，提
取的孢子油没有化学溶剂的残留，使用安全；提取温度为35～60℃，易保持油中的活性成分
不被破坏。本发明的技术方案下，采用最佳工艺条件下可萃取得到占灵芝孢子粉颗粒原料
总质量的20～27％的灵芝孢子油，萃取率高。
四、用超临界态下的二氧化碳流体作为萃取溶剂，该溶剂在同一系统中循环使用，
溶剂消耗少，且售价便宜，因此萃取成本低。萃出的灵芝孢子油为亮黄色澄清液体，冷藏4～
6℃为淡黄色膏状物，常温放置一周无酸败，冷藏储存一月仍无酸败，本发明萃取方法能保
持灵芝孢子油中活性成分的稳定性。本发明工艺简单，能耗低。
具体实施方式
实施例1：
一种灵芝孢子油的提取方法，包括如下步骤：
步骤一，将净制后的葡萄籽进行干燥处理，破碎至粒径为0.1μm—50μm的葡萄籽粉
末备用，所述葡萄籽为巨峰、夏黑、美人指等优质品种葡萄籽粒中的一种或几种的混合物；
步骤二，将净制后的灵芝孢子粉与步骤一制得的葡萄籽粉末混合后在50℃、
0.05MPa下干燥2小时，其中，灵芝孢子粉与葡萄籽粉末的质量比为100:0.1—100：2；
步骤三，将步骤二中经干燥处理后的灵芝孢子粉与葡萄籽粉末混合物放入低温破
壁机中，在-25-30℃、CO2气体保护下进行冷冻破壁，得到破壁灵芝孢子粉；
步骤四，采用超临界二氧化碳流体从步骤三的灵芝孢子粉中提取灵芝孢子油：先
从步骤三得到的灵芝孢子粉中选取含水率不大于12％，长度为7～10mm的条索状灵芝孢子
粉颗粒为原料；然后过60目筛网的灵芝孢子粉颗粒为原料；称取165g筛选过的灵芝孢子粉
颗粒放入萃取釜的物料桶中，将二氧化碳气体注入萃取釜，保持萃取釜内温度和压力在二
氧化碳气体的超临界状态与物料接触，使灵芝孢子粉中的灵芝孢子油成分溶解于超临界流
体之中，从萃取釜的萃取出口收集含有灵芝孢子油的流体。超临界温度为42℃，萃取压力为
30MPa，分离一压力9MPa，分离二压力为6MPa；二氧化碳气体通过萃取釜的流量为180kg/h，
萃取时间为3.5h，获得灵芝孢子油40.06g，萃取率为24.28％。萃取分离后将同一批原料的
灵芝孢子油树脂放入匀质机中，每20kg灵芝孢子油中加入1片VE，匀质后，灌装，避光冷藏保
存。
实施例2：
一种灵芝孢子油的提取方法，包括如下步骤：
步骤一，将净制后的葡萄籽进行干燥处理，破碎至粒径为0.1μm—50μm的葡萄籽粉
末备用，所述葡萄籽为巨峰、夏黑、美人指等优质品种葡萄籽粒中的一种或几种的混合物；
步骤二，将净制后的灵芝孢子粉与步骤一制得的葡萄籽粉末混合后在50℃、
0.05MPa下干燥2小时，其中，灵芝孢子粉与葡萄籽粉末的质量比为100:0.1—100：2；
步骤三，将步骤二中经干燥处理后的灵芝孢子粉与葡萄籽粉末混合物放入低温破
壁机中，在-15-30℃、CO2气体保护下进行冷冻破壁，破壁率≥95％，得到破壁灵芝孢子粉；
步骤四，采用超临界二氧化碳流体从步骤三的灵芝孢子粉中提取灵芝孢子油：先
从步骤三得到的灵芝孢子粉中选取含水率不大于10％，长度为7～10mm的条索状灵芝孢子
粉颗粒为原料；然后过60目筛网的灵芝孢子粉颗粒为原料；称取180g筛选过的灵芝孢子粉
颗粒放入萃取釜的物料桶中，将二氧化碳气体注入萃取釜，保持萃取釜内温度和压力在二
氧化碳气体的超临界状态与物料接触，使灵芝孢子粉中的灵芝孢子油成分溶解于超临界流
体之中，从萃取釜的萃取出口收集含有灵芝孢子油的流体。超临界温度为46℃，萃取压力为
35MPa，分离一为压力10MPa，分离二压力为6MPa；二氧化碳气体通过萃取釜的流量为250kg/
h，萃取时间为4h，获得灵芝孢子油46.5g，萃取率为25.83％。萃取分离后将同一批原料的灵
芝孢子油树脂放入匀质机中，每20kg灵芝孢子油中加入1片VE，匀质后，灌装，避光冷藏保
存。
实施例3：
一种灵芝孢子油的提取方法，包括如下步骤：
步骤一，将净制后的葡萄籽进行干燥处理，破碎至粒径为0.1μm—50μm的葡萄籽粉
末备用，所述葡萄籽为巨峰、夏黑、美人指等优质品种葡萄籽粒中的一种或几种的混合物；
步骤二，将净制后的灵芝孢子粉与步骤一制得的葡萄籽粉末混合后在50℃、
0.05MPa下干燥2小时，其中，灵芝孢子粉与葡萄籽粉末的质量比为100:0.1—100：2；
步骤三，将步骤二中经干燥处理后的灵芝孢子粉与葡萄籽粉末混合物放入低温破
壁机中，在-25-30℃、CO2气体保护下进行冷冻破壁，得到破壁灵芝孢子粉；
步骤四，采用超临界二氧化碳流体从步骤三的灵芝孢子粉中提取灵芝孢子油：先
从步骤三得到的灵芝孢子粉中选取含水率不大于12％，长度为7～10mm的条索状灵芝孢子
粉颗粒为原料；然后过60目筛网的灵芝孢子粉颗粒为原料；称取175g筛选过的灵芝孢子粉
颗粒放入萃取釜的物料桶中，将二氧化碳气体注入萃取釜，保持萃取釜内温度和压力在二
氧化碳气体的超临界状态与物料接触，使灵芝孢子粉中的灵芝孢子油成分溶解于超临界流
体之中，从萃取釜的萃取出口收集含有灵芝孢子油的流体。超临界温度为44℃，萃取压力为
32MPa，分离一压力8MPa，分离二压力为6MPa；二氧化碳气体通过萃取釜的流量为200kg/h，
萃取时间为3h，获得灵芝孢子油39.7g，萃取率为22.69％。萃取分离后将同一批原料的灵芝
孢子油树脂放入匀质机中，每20kg灵芝孢子油中加入1片VE，匀质后，灌装，避光冷藏保存。
实施例4：
一种灵芝孢子油的提取方法，包括如下步骤：
步骤一，将净制后的葡萄籽进行干燥处理，破碎至粒径为0.1μm—50μm的葡萄籽粉
末备用，所述葡萄籽为巨峰、夏黑、美人指等优质品种葡萄籽粒中的一种或几种的混合物；
步骤二，将净制后的灵芝孢子粉与步骤一制得的葡萄籽粉末混合后在50℃、
0.05MPa下干燥2小时，其中，灵芝孢子粉与葡萄籽粉末的质量比为100:0.1—100：2；
步骤三，将步骤二中经干燥处理后的灵芝孢子粉与葡萄籽粉末混合物放入低温破
壁机中，在-15-30℃、CO2气体保护下进行冷冻破壁，破壁率≥95％，得到破壁灵芝孢子粉；
步骤四，采用超临界二氧化碳流体从步骤三的灵芝孢子粉中提取灵芝孢子油：先
从步骤三得到的灵芝孢子粉中选取含水率不大于12％，长度为7～10mm的条索状灵芝孢子
粉颗粒为原料；然后过60目筛网的灵芝孢子粉颗粒为原料；称取165g筛选过的灵芝孢子粉
颗粒放入萃取釜的物料桶中，将二氧化碳气体注入萃取釜，保持萃取釜内温度和压力在二
氧化碳气体的超临界状态与物料接触，使灵芝孢子粉中的灵芝孢子油成分溶解于超临界流
体之中，从萃取釜的萃取出口收集含有灵芝孢子油的流体。超临界温度为42℃，萃取压力为
30MPa，分离一压力9MPa，分离二压力为6MPa；二氧化碳气体通过萃取釜的流量为180kg/h，
萃取时间为3.5h，获得灵芝孢子油40.06g，萃取率为24.28％。萃取分离后将同一批原料的
灵芝孢子油树脂放入匀质机中，每20kg灵芝孢子油中加入1片VE，匀质后，灌装，避光冷藏保
存。
实施例5：
一种灵芝孢子油的提取方法，包括如下步骤：
步骤一，将净制后的葡萄籽进行干燥处理，破碎至粒径为0.1μm—50μm的葡萄籽粉
末备用，所述葡萄籽为巨峰、夏黑、美人指等优质品种葡萄籽粒中的一种或几种的混合物；
步骤二，将净制后的灵芝孢子粉与步骤一制得的葡萄籽粉末混合后在50℃、
0.05MPa下干燥2小时，其中，灵芝孢子粉与葡萄籽粉末的质量比为100:0.1—100：2；
步骤三，将步骤二中经干燥处理后的灵芝孢子粉与葡萄籽粉末混合物放入低温破
壁机中，在-25-30℃、CO2气体保护下进行冷冻破壁，得到破壁灵芝孢子粉；
步骤四，采用超临界二氧化碳流体从步骤三的灵芝孢子粉中提取灵芝孢子油：先
从步骤三得到的灵芝孢子粉中选取含水率不大于10％，长度为7～10mm的条索状灵芝孢子
粉颗粒为原料；然后过60目筛网的灵芝孢子粉颗粒为原料；称取180g筛选过的灵芝孢子粉
颗粒放入萃取釜的物料桶中，将二氧化碳气体注入萃取釜，保持萃取釜内温度和压力在二
氧化碳气体的超临界状态与物料接触，使灵芝孢子粉中的灵芝孢子油成分溶解于超临界流
体之中，从萃取釜的萃取出口收集含有灵芝孢子油的流体。超临界温度为46℃，萃取压力为
35MPa，分离一压力10MPa，分离二压力为6MPa；二氧化碳气体通过萃取釜的流量为250kg/h，
萃取时间为4h，获得灵芝孢子油46.5g，萃取率为25.83％。萃取分离后将同一批原料的灵芝
孢子油树脂放入匀质机中，每20kg灵芝孢子油中加入1片VE，匀质后，灌装，避光冷藏保存。
实施例6：
一种灵芝孢子油的提取方法，包括如下步骤：
步骤一，将净制后的葡萄籽进行干燥处理，破碎至粒径为0.1μm—50μm的葡萄籽粉
末备用，所述葡萄籽为巨峰、夏黑、美人指等优质品种葡萄籽粒中的一种或几种的混合物；
步骤二，将净制后的灵芝孢子粉与步骤一制得的葡萄籽粉末混合后在50℃、
0.05MPa下干燥2小时，其中，灵芝孢子粉与葡萄籽粉末的质量比为100:0.1—100：2；
步骤三，将步骤二中经干燥处理后的灵芝孢子粉与葡萄籽粉末混合物放入低温破
壁机中，在-15-30℃、CO2气体保护下进行冷冻破壁，破壁率≥95％，得到破壁灵芝孢子粉；
步骤四，采用超临界二氧化碳流体从步骤三的灵芝孢子粉中提取灵芝孢子油：先
从步骤三得到的灵芝孢子粉中选取含水率不大于12％，长度为7～10mm的条索状灵芝孢子
粉颗粒为原料；然后过60目筛网的灵芝孢子粉颗粒为原料；称取165g筛选过的灵芝孢子粉
颗粒放入萃取釜的物料桶中，将二氧化碳气体注入萃取釜，保持萃取釜内温度和压力在二
氧化碳气体的超临界状态与物料接触，使灵芝孢子粉中的灵芝孢子油成分溶解于超临界流
体之中，从萃取釜的萃取出口收集含有灵芝孢子油的流体。超临界温度为42℃，萃取压力为
30MPa，分离一压力9MPa，分离二压力为6MPa；二氧化碳气体通过萃取釜的流量为180kg/h，
萃取时间为3.5h，获得灵芝孢子油40.06g，萃取率为24.28％。萃取分离后将同一批原料的
灵芝孢子油树脂放入匀质机中，每20kg灵芝孢子油中加入1片VE，匀质后，灌装，避光冷藏保
存。
实施例7：
一种灵芝孢子油的提取方法，包括如下步骤：
步骤一，将净制后的葡萄籽进行干燥处理，破碎至粒径为0.1μm—50μm的葡萄籽粉
末备用，所述葡萄籽为巨峰、夏黑、美人指等优质品种葡萄籽粒中的一种或几种的混合物；
步骤二，将净制后的灵芝孢子粉与步骤一制得的葡萄籽粉末混合后在50℃、
0.05MPa下干燥2小时，其中，灵芝孢子粉与葡萄籽粉末的质量比为100:0.1—100：2；
步骤三，将步骤二中经干燥处理后的灵芝孢子粉与葡萄籽粉末混合物放入低温破
壁机中，在-25-30℃、CO2气体保护下进行冷冻破壁，得到破壁灵芝孢子粉；
步骤四，采用超临界二氧化碳流体从步骤三的灵芝孢子粉中提取灵芝孢子油：先
从步骤三得到的灵芝孢子粉中选取含水率不大于12％，长度为7～10mm的条索状灵芝孢子
粉颗粒为原料；然后过60目筛网的灵芝孢子粉颗粒为原料；称取165g筛选过的灵芝孢子粉
颗粒放入萃取釜的物料桶中，将二氧化碳气体注入萃取釜，保持萃取釜内温度和压力在二
氧化碳气体的超临界状态与物料接触，使灵芝孢子粉中的灵芝孢子油成分溶解于超临界流
体之中，从萃取釜的萃取出口收集含有灵芝孢子油的流体。萃取后在不同压力条件下将灵
芝孢子油通过两次分离出来并进行匀质、灌装和保存。其中，萃取时萃取釜内温度为42～50
℃，压力为30～35MPa，二氧化碳气体通过萃取釜的流量为150～250kg/h，萃取时间为3～
4h。而两次分离中，分离一的温度为40～45℃，压力为8～10MPa，分离二的温度为40～45℃，
压力为6MPa。
最后说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非对其进行限制，尽
管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明，但本领域的普通技术人员应当理解，可以对
本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本技术方案的宗旨和范围，其均应涵
盖在本发明的权利要求范围内。