本发明属于凝集素的制备及应用技术领域。 凝集素（Jaealin）是一种非免疫来源的，能结合糖和凝集细胞以及沉淀糖复合物的蛋白质或糖蛋白。在已有技术中，国外一些研究人员已从几个不同国家和地区，如菲律宾马尼拉、日本冲绳岛、新加坡、印尼、巴西及南非等地所产的木菠萝种子中提取了凝集素，定名为Jacalin，其方法是将木菠萝种子经烘干、磨碎、搅拌、沉淀、离心透析、冷冻干燥得凝集素粗品，将粗品经Sepharose G-100柱凝胶过滤;收集主峰、超滤，再经免疫球白A-葡聚糖4B柱进行亲和层析，最后用半乳糖洗脱得Jacalin精品，其纯化过程复杂，工艺流程长，成本高。目前有关Jacalin的应用仅局限于科学研究。
本发明的目的是从海南岛、广西等地产的木菠萝种子中分离纯化凝集素，定名为HN.Jacalin，并对HN Jacalin的性质、血凝作用，对细胞增殖的影响，对免疫球蛋白的专一性进行研究，制备抗HN Jacalin单克隆抗体、HN Jacalin亲和层析柱，以及用HN Jacalin来研究和分泌初乳（colostram）中的分泌型免疫球蛋白A（SIgA），并对Jacalin的进一步利用进行开发研究。
本发明的技术方案是：①HN Jacalin的纯化，取新鲜海南省产木菠萝种子，37℃烘干、磨碎，加入PH7.2、内含0.2M Nacl的0.01M的磷酸缓冲液（PBS）其重量体积比为10%（g/ml）在4℃下连续搅拌24小时，（5000转/分）离心30分钟，取上清液加固体硫酸铵至60%饱和度，4℃静置12小时，10000转/分离心30分钟取沉淀，用相同的PBS透析，将（经3～4天）透析后的样品冷冻干燥，即为HN Jacalin粗品。将粗品直接加到Sepharose 4B柱（瑞典，Pharmacia公司产品）上进行亲和层析，再用0.8M半乳糖（galactose）洗脱就得到HN Jacalin纯品。②海南木菠萝种子凝集素-葡聚糖（HN Jacalin-Sepharose 4B）亲和层析柱的制备。
将Sepharose-4B悬浮于0.5M的碳酸盐缓冲液，冰块降温，加溴化氰（CNBr），用浓NaOH溶液调pH至恒定为pH 11，10～15分钟后用砂芯漏斗快速过滤，取沉淀用预冷的10～20倍碳酸盐缓冲（pH9.5～10）洗涤，悬浮于0.2M碳酸盐缓冲液中（pH10），加等体积的含HN-Jacalin的同样碳酸盐缓冲液，使pH恒定在pH8.5～9.5之间，室温搅拌过夜，砂芯漏斗过滤，用蒸馏水充分洗涤，再用0.1M pH9.0的甘氨酸缓冲液洗涤，水洗，备用。
③初乳SIgA地纯化。
合并新鲜收集的人初乳，在3000转/分离心30分钟，去除脂肪和细胞碎片，用pH4.52%冰醋酸，将去脂肪初乳酸化以沉淀酪蛋白，离心（5000转/分）去沉淀，上清液用0.1N NaOH将pH调至7.0，冷冻干燥后对pH7.2，0.01M pB-0.15M NaCl（PBS）透析。将透析后无细胞去脂去酪蛋白的乳清加至HN Jacalin-sepharose 4B柱上，用PBS洗柱至收集液的280nm紫外光吸收小于0.02，改用0.8M D-半乳糖洗脱，洗脱液去盐去糖后超滤，冷冻干燥即为初乳中的SIgA。
利用本发明所述生产工艺纯化的HN Jacalin经HPLC鉴定为单一峰，经PH4.3的PAGE也显示单一区带，但经PH8.3的不连续PAGE显示多带，等电聚焦后也在PH5-8范围显示多带。HN Jacalin的两亚基以非共价键结合，分子量分别为12KD和14.5KD，等电点为PH5-8，分子中酸性氨基酸残基较多，半胱氨酸含量极少，不存在二硫键。
本发明所述HN-Jacalin是一种D-半乳糖（D-gol）和N-乙酰半乳糖胺（gol-Nac）特异结合的凝集素，能选择性结合和沉淀人血清，初乳中的免疫球蛋白A（IgA）。初乳中高含量的分泌型免疫球蛋白A（SIgA）对免疫系统尚未发育完全的新生儿起被动免疫作用，因此可以初乳为来源用HN-Jacalin亲和层析来大量制备SIgA作为临床药物。离心后的正常人血清和病人的胸腹水经用HN-Jacalin亲和柱分离也能得出与HN-Jacalin结合的免疫球蛋白A（IgA）。
下面是本发明的实施例：
①木菠萝种子提取液烘干粉200g加入10%（W/V）0.01PBS（内含0.2M、NaCl）PH7.2 20001，4℃下搅拌24小时，5000转/分离心30分钟，取上清液加固体（NH4）2SO4至60%饱和度，4℃静置12小时，10000转/分离心30分钟，取沉淀，用相同的PBS透析，将经3～4天透析后的HN-Jacalin粗品直接加到Sepharose 4B柱上进行亲和层析，再用0.8M galactose洗脱就得到HN-Jacalin纯品，每100g木菠萝种子烘干粉可得3.08g HN Jacalin蛋白。血凝活力（凝集新鲜人红血球所需凝集素的最小浓度微克/毫升表示）0.056，每毫克蛋白活力17858。
②HN Jacalin-Sepharose 4B的制备
30ml沉淀体积的Sepharose Cl 4B悬浮于30ml 0.5M PH11的碳酸盐缓冲液，冰块降温，加1.5g CNBr，用浓NaOH溶液调PH至恒定为11，10～15分钟后用砂芯漏斗快速过滤，用预冷的10～20倍碳酸盐缓冲（PH9.5～10）洗涤，悬浮于30ml 0.2M碳酸盐缓冲液中（PH10），加等体积的含150mg HN Jacalin的同样碳酸盐缓冲液，使PH恒定在8.5～9.5之间，室温搅拌过夜，砂芯漏斗过滤，用蒸馏水充分洗涤，再用0.1M PH9.0的甘氨酸缓冲液洗涤，水洗，备用。
③初乳的纯化，见技术方案。