7-醚-紫杉酚类似物、 抗肿瘤药物用途及含有它们的药物组合物 发明背景
紫杉酚是二萜中紫杉烷家族中的一员，具有如下所示的结构：所示对紫杉酚的位次编排系统为国际应用和纯粹化学协会(IUPAC)所推荐(IUPAC，有机化学命名会议，1978)。
David G.I.Kingston对有效的抗癌剂-二萜紫杉酚及其类似物的化学作了综述，重点在于分离和分析、结构修饰、部分合成以及构效关系(紫杉酚的化学，Pharmac.Ther.，Vol 52，1-34页，1991)。
Eric K.Rowinsky和Ross C.Donehower对紫杉酚的临床药理学作了综述(癌症化疗中抗微管药物的用途及临床药理学，Pharmac.Ther.，Vol52，35-84页，1991)。William J.Slichenmyer和Daniel D.Von Hoff对紫杉酚的临床和临床前研究作了综述(紫杉酚：一种新型有效的抗癌药物，Anti-cncer Drugs，Vol.2，519-530页，1991)。
紫杉酚及其类似物是许多专利的发明主题，包括，例如美国专利4814470；4857653；4942184；4924011；4924012；4960790；5015744；5157049；5059699；5136060；4876399；5227400；5248796以及PCT公开号WO92/095859、欧洲专利申请90305845.1(公开号A2 0 400 971)、90312366.9(公开号A1 0 428 376)、89400935.6(公开号A1 0 366 841)、90402333.0(公开号0 414 610 A1)、87401669.4(A1 0 253739)、92308608.6(A1 0 534 708)、92308609.4(A1 0 534 709)和PCT公开号WO91/17977、WO91/17976、WO91/13066、WO91/13053。
在Tetrahedron Letters，1992，33，5185；J.Org.Chem.，1991，56，1681和J.Org.Chem.，1991，56，5114中记载了紫杉酚(及其中间体和类似物)的各种制备方法。
Chen等报道将7-表紫杉酚衍生物用DAST在二氯甲烷中处理发生了预想不到的反应，反应涉及C-19甲基的参与和环丙烷环的完全形成(Serendipitous Synthesis of a Cyclopropane-Containing Taxol Analog viaAnchimeric Participation of an Unactivated Angular Methylgroup，Advance ACS Abstracts，Vol1，No.2，1993年七月15日)。亦见J.Org.Chem.，1993，58，4520(1993年8月13日)和美国专利5245580(1993年10月19日授权)。
美国专利5248796(1993年9月28日授权)涉及10-去乙酰氧基-11，12-二氢紫杉酚-10，12(18)-二烯衍生物以及10-去乙酰氧基紫杉酚的制备。
欧洲专利申请0558959 A1公开了多种水溶性增加的紫杉酚的膦酰氧基2’紫杉酚和2’紫杉酚碳酸酯衍生物。
Nicolaou，K.C.；Riemer，C.；Kerr，M.A.；Rideout，D.；Wrasidlo，W.，Nature 364：464-66(1993)公开了水溶性的前-紫杉酚类似物。
J.Am.Chem.Soc.，Vol.116，No.4，1599-1600(1994)记载了7-BOM浆果赤霉素III的生产。将7-BOM浆果赤霉素III用六甲基二硅杂叠氮锂处理并将生成的酚盐与(3R，4S)-N-苯甲酰-3-O-TES-4-苯基-2-azetedinone反应生成7-BOM-2’-TES-紫杉酚。将其与HF-吡啶反应生成7-BOM-紫杉酚。
在美国化学会第207届年会上，L.Klein描述了9-OH-taxotere地7-醚类似物、特别是7-OMe和7-烯丙基类似物的“出人意料的良好活性”。没有记载合成的方法。
美国专利5229526(Holton)记载了7-O-保护基(即T1，包括三甲基硅烷基和乙氧乙基)在制备各种生物活性的浆果赤霉素III和10-去乙酰基浆果赤霉素III的衍生物中的用途，其中的C-7和C-2’羟基保护基在温和的条件下水解因而不会影响酯键或紫杉烷取代基。
发明概述
本发明提供分子式I的紫杉酚类似物：
分子式I的化合物可用于治疗紫杉酚显示活性的相同的癌症，包括卵巢癌、乳腺癌、恶性黑色素瘤以及肺癌、胃癌、结肠癌、头部和颈部肿瘤、以及白血病。
分子式及变量的定义规则
用来表示说明书和权利要求中的各种化合物或分子片段的化学式除含有表达性限定的结构特征外还可能含有可变取代基。这些可变取代基用字母或带有数字下标的字母表示，例如“Z1”或“Ri”，其中“i”是整数。这些取代基可以是一价或二价的，即它们代表通过一或两个化学键连接到分子式上的基团。例如，如果连接到分子式CH3-C(＝Z1)上，基团Z1将代表一个二价的变量。如果连接到分子式CH3-CH2-C(Ri)(Rj)-H上，基团Ri和Rj将代表一价可变取代基。当化学式以直线的形式画出时，例如以上的那些，则包含在圆括号内的可变取代基是与该可变取代基左侧紧邻的原子相结合。当有两个或更多的连串的可变取代基包含在圆括号内时，连串的可变取代基中的每一个均与左侧的不包含在圆括号内的前一个紧邻的原子相结合。因此，在上述的分子式中，Ri和Rj均与前一个碳原子相结合。另外，对于任何有确定的碳原子编排系统的分子，例如紫杉酚，这些碳原子被标记为Ci，其中“i”是与碳原子的排位相对映的整数。例如，C6代表本领域技术人员所常规标记的环上的6位碳原子。
以直线的形式画出的化学式或其片段表示直链中的原子。符号“-”通常代表链中两个原子之间的单键。因此，CH3-O-CH2-CH(Ri)-CH3代表化合物2-取代-1-甲氧基丙烷。同样，符号“＝”代表双键，例如，CH2＝C(Ri)-O-CH3，符号“≡”代表三键，例如，HC≡C-CH(Ri)-CH2-CH3。羰基用-CO-或-C(＝O)-两种方法之一表示，前一种方法因为简便较为优选。
环状化合物或分子片段的的化学式可以用直线的形式表示。因此，化合物4-氯-2-甲基吡啶可以用直线的形式表示为N＊＝C(CH3)CH＝CCl-CH＝C＊H，规则是用星号(＊)标记的原子彼此结合在一起形成一个环。同样，环状的分子片段，4-(乙基)-1-哌嗪基可以用-N＊-(CH2)2-N(C2H5)-CH2-C＊H2表示。同样的，2-呋喃基可以用-C＊-O-CH＝CH-C＊H＝表示，2-噻吩基用-C＊-S-CH＝CH-C＊H＝表示。
任何化合物的刚性环结构在此表明连接在刚性环状化合物的各原子上的取代基相对于环平面的取向。对于在一个环系碳原子上连接有两个取代基的饱和化合物，-C(X1)(X2)-，两个取代基相对于环的位置可以是直立或平伏的并可以在直立/平伏间转变。但是，两个取代基相对于环的位置及彼此之间的相对位置仍然是固定的。尽管各取代基可能在大部分时间都处在环的平面内(平伏)而不是在平面上或平面下(直立)，一个取代基却总是在另一个取代基之上。在描述这些化合物的化学结构式中，将“低于”另一个取代基(X2)的取代基(X1)标记为处于α构型并用连接在碳原子上的间断的短线或点状线表示，即用符号“--”或“…”表示。将相应的“高于”另一个取代基(X1)的取代基(X2)标记为处于β构型并用连接在碳原子上的不间断的直线表示。
当一个可变取代基是二价时，可以将价键合并或分离或者两者兼用来定义可变取代基。例如，一个以-C(＝Ri)-连接在碳原子上的可变Ri可以是二价的，从而可以定义为氧代或酮基〔从而形成一个羰基(-CO-)〕或定义为两个分别连接的一价可变取代基α-Ri-j和β-Ri-k。当将可变取代基Ri定义为由两个一价的可变取代基组成时，用于定义该二价可变取代基的规则是“α-Ri-j：β-Ri-k”的形式或其变换的形式。在这种情况下，α-Ri-j和β-Ri-k均连接在碳原子上形成-C(α-Ri-j)(β-Ri-k)-。例如，当将二价取代基R6，-C(＝R6)-定义为由两个一价的可变取代基组成时，这两个一价的可变取代基是α-R6-1：β-R6-2，…α-R6-9：β-R6-10等，形成-C(α-R6-1)(β-R6-2)-，…-C(α-R6-9)(β-R6-10)-等。同样，对于二价取代基R11，-C(＝R11)-，两个一价的可变取代基是α-R11-1：β-R11-2。对于不存在分别的α和β取向的环状取代基(例如由于在环中存在双键所造成)以及与环外碳原子相结合的取代基，仍然使用以上规则但省略α和β的标定。
正如可以将一个二价变量定义为两个分别的一价可变取代基一样，也可以将两个分别的一价可变取代基定义在一起形成一个二价变量。例如，在分子式-C(Ri)H-C2(Rj)H-中(C1和C2分别任意指第一个和第二个碳原子)可以将Ri和Rj定义在一起形成(1)C1和C2之间的第二个键或(2)一个二价基团例如氧代(-O-)从而分子式表示一个环氧化物。当Ri和Rj合在一起形成一个更复杂的部分时，例如-X-Y-基团，则该部分的定位为：上述分子式中的C1与X相结合，C2与Y相结合。因此，根据规则，“Ri和Rj合在一起形成-CH2-CH2-O-CO-…”是指一个羰基接在C2上的内酯。然而，当指定“…Ri和Rj合在一起形成-CO-O-CH2-CH2-”时，规则指一个羰基接在C1上的内酯。
取代基的碳原子个数用两种方法之一表示。第一种方法是在变量的全名前使用前缀例如“C1-C4”，其中的“1”和“4”是代表变量中碳原子个数的最小值和最大值的整数。前缀和变量间用空格分开。例如，“C1-C4烷基”代表1至4个碳原子的烷基(包括它们的异构体形式，除非给出相反的指示)。每逢给出这种单独的前缀时，该前缀表示被定义的变量中的全部碳原子个数。因此C2-C4烷氧羰基指基团CH3-(CH2)n-O-CO-，其中n是零、一或二。使用第二种方法，通过将“Ci-Cj”放入圆括号内并将其紧邻地(没有插入的空格)放置在被定义部分的前面，仅将各定义部分的碳原子个数单独地表示出来。通过这种规则，(C1-C3)烷氧羰基与C2-C4烷氧羰基具有相同的意义，因为“C1-C3”仅指烷氧基的碳原子个数。尽管C2-C6烷氧基烷基和(C1-C3)烷氧基(C1-C3)烷基同样地表示含有2到6个碳原子的烷氧基烷基基团，但两种定义却不相同，因为前一种定义允许烷氧基或烷基部分均可以含有4或5个碳原子而后一种定义则将这两个基团均限制在3个碳原子以内。
当权利要求中含有相当复杂的(环状)取代基时，在命名该具体的取代基的片语的结尾将有一个在(圆括号)内的注解，该注解与表/图之一(也提供该具体取代基的化学结构式)中的同样的命名相对应。
术语“Boc”指C(O)O-叔丁基，“Troc”指C(O)CH2CCl3，TES指Si(Et)3，Ph值苯基，Ac指C(O)CH3，Bz指C(O)Ph，Cbz指C(O)OCH2C6H5。
发明详述
更具体地讲，本发明提供通式I的7-醚-紫杉酚类似物其中：
R1选自
-CH3，
-C6H5或被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-
C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、羟基或硝基取代的
苯基，
-2-呋喃基、2-噻吩基、1-萘基、2-萘基或3，4-亚甲二氧基苯基；
R2选自-H、-NHC(O)H、-NHC(O)C1-C10烷基(优选-NHC(O)C4-C6烷基)、-NHC(O)苯基、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、羟基或硝基取代的-NHC(O)苯基、-NHC(O)C(CH3)＝CHCH3、-NHC(O)OC(CH3)3、-NHC(O)OCH2苯基、-NH2、-NHSO2-4-甲基苯基、-NHC(O)(CH2)3COOH、-NHC(O)-4-(SO3H)苯基、-OH、-NHC(O)-1-金刚烷基、-NHC(O)O-3-四氢呋喃基、-NHC(O)O-4-四氢吡喃基、-NHC(O)CH2C(CH3)3、-NHC(O)C(CH3)3、-NHC(O)OC1-C10烷基、-NHC(O)NHC1-C10烷基、-NHC(O)NHPh、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基或硝基取代的-NHC(O)NHPh、-NHC(O)C3-C8环烷基、-NHC(O)OC(CH2CH3)2CH3、-NHC(O)OC(CH3)2CH2Cl、-NHC(O)OC(CH3)2CH2CH3、-NHC(O)-1-苯基-1-环戊基、-NHC(O)-1-甲基-1-环己基、NHC(S)NHC(CH3)3或NHC(O)NHC(CH3)3；
R3选自-H、-NHC(O)苯基或-NHC(O)OC(CH3)3，总的条件是R2和R3之一是-H但R2和R3不能同时是-H；
R4是-H或选自-OH、-OAc(-OC(O)CH3)、-OC(O)OCH2C(Cl)3、-OCOCH2CH2NH3+HCOO-、-NHC(O)苯基、-NHC(O)O(CH3)3、-OCOCH2CH2COOH及其药物可接受的盐、-OCO(CH2)3COOH及其药物可接受的盐、-OC(O)-Z-C(O)-R’[其中Z是亚乙基(-CH2CH2-)、亚丙基(-CH2CH2CH2-)、-CH＝CH-、1，2-环己烷或1，2-亚苯基；R’是-OH、-OH碱、-NR’2R’3、-OR’3、-SR’3、-OCH2C(O)NR’4R’5其中R’2是-H或-CH3，R’3是-(CH2)nNR’6R’7或(CH2)nN+R’6R’7R’8X-其中n是1-3，R’4是-H或-C1-C4烷基，R’5是-H、-C1-C4烷基、苄基、羟基乙基、-CH2CO2H或二甲胺基乙基，R’6和R’7是-CH3、-CH2CH3、苄基或R’6和R’7与NR’6R’7的氮合在一起形成吡咯烷基、哌啶基、吗啉基或N-甲基吡嗪基；R’8是-CH3、-CH2CH3或苄基、X-是卤离子，碱是NH3、(HOC2H4)3N、N(CH3)3、CH3N(C2H4)2NH、NH2(CH2)6NH2、N-甲基葡糖胺、NaOH或KOH]、-OC(O)(CH2)nNR2R3[其中n是1-3，R2是-H或-C1-C3烷基并且R3是-H或-C1-C3烷基]、-OC(O)CH(R″)NH2[其中R″选自-H、-CH3、-CH2CH(CH3)2、-CH(CH3)CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2苯基、-(CH2)4NH2、-CH2CH2COOH、-(CH2)3NHC(＝NH)NH2]、脯氨酸的残基、-OC(O)CH＝CH2、-C(O)CH2CH2C(O)NHCH2CH2SO3-Y+、-OC(O)CH2CH2C(O)NHCH2CH2CH2SO3-Y+其中Y+是Na+或N+(Bu)4-、OC(O)CH2CH2C(O)OCH2CH2OH；
R5是-H或-OH，总的条件是当R5是-OH时R4是-H，进一步的条件是当R5是-H时R4不能是-H；
R6是-H：-H；
R7是α-R91：β-R92，其中R91和R92之一是-H并且R91和R92中的另一个是-W，其中W选自
-O-C1-C10烷基，
-O-C3-C10不饱和烷基(优选烯丙基和丁烯基)，
-O-C5-C15杂烷基[例如-OCH2(2-或3-呋喃基)、-OCH2(2-或3-吡咯基)、-OCH2(2-、3-或4-吡啶基)、-OCH2(2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基)、-OCH2(1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基)、-OCH2(2-、4-或5-咪唑基)、-OCH2(3-、4-或5-吡唑基)、-OCH2(2-吡嗪基)、-OCH2(2-、4-、5-或6-嘧啶基)、-OCH2(2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基)、-OCH2(3-、4-或5异恶唑基)；优选-OCH2(2-或3-呋喃基)、-OCH2(2-或3-吡咯基)、-OCH2(2-、3-或4-吡啶基)、-OCH2(2-、4-或5-咪唑基)、-OCH2(3-、4-或5异恶唑基)]，
-O-CH(R21)OR22其中
R21是-H或-C1-C6烷基，并且
R22是-C1-C10烷基、C3-C10不饱和烷基(优选烯丙基和丁烯基)、-
C5-C15杂烷基[例如CH2(2-或3-呋喃基)、-CH2(2-或3-吡咯基)、-
CH2(2-、3-或4-吡啶基)、-CH2(2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-
喹啉基)、-CH2(1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基)、-CH2(2-、
4-或5-咪唑基)、-CH2(3-、4-或5-吡唑基)、-CH2(2-吡嗪基)、-
CH2(2-、4-、5-或6-嘧啶基)、-CH2(2-、3-、4-、5-、6-或7-
吲哚基)、-CH2(3-、4-或5异恶唑基)；优选-CH2(2-或3-呋喃基)、
-CH2(2-或3-吡咯基)、-CH2(2-、3-或4-吡啶基)、-CH2(2-、4-或
5-咪唑基)、-CH2(3-、4-或5异恶唑基)]，
或当R21和R22合在一起时形成一个4到6个碳原子的环(优
选5到6个碳原子的环)，-CH(R28)S(O)mAr
其中Ar是苯基或被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤
素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、或硝基取代
的苯基，-CH(R28)S(O)mCH2R28其中R28是
-C1-C6烷基，
-C3-C10不饱和烷基(优选烯丙基和丁烯基)，
-(CH2)q苯基其中q是0-6，
-(CH2)q苯基其中q是0-6并且被1、2或3个C1-C4烷基、C1-
C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基
胺基、或硝基取代，
-萘基，
被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫
基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、或硝基取代的-萘基，
-C5-C15杂烷基[例如-(2-或3-呋喃基)、(2-或3-吡咯基)、-(2-、3-
或4-吡啶基)、(2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基)、(1-、3-、
4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基)、(2-、4-或5-咪唑基)、(3-、4-
或5-吡唑基)、(2-吡嗪基)、(2-、4-、5-或6-嘧啶基)、(2-、3-、
4-、5-、6-或7-吲哚基)、(3-、4-或5异恶唑基)；优选-(2-或3-
呋喃基)、(2-或3-吡咯基)、(2-、3-或4-吡啶基)、(2-、4-或5-咪
唑基)、(3-、4-或5异恶唑基)]，
或当R28和R28合在一起时形成一个4到6个碳原子的环(优
选5到6个碳原子的环)，
m是0到2；R8是-CH3；R30是-H、-OH或-OC(O)CH3；
及其药物可接受的盐(当化合物含有酸性或碱性官能团时)。
本发明的一个实施方案是分子式I的化合物，其中2位是-O(R40)(其中R40是1、2或3个叠氮基、氰基、甲氧基、或卤素取代的-C(O)苯基；优选-C(O)-3-叠氮基苯基)而不是-O-C(O)苯基。
本发明的一个优选实施方案是分子式I的化合物，其中R1是苯基或卤代苯基，R2是-NHC(O)C6H5，R3和R5是-H，R4是-OH，R30是-OH或-OC(O)CH3。另一个优选的实施方案是分子式I的化合物其中R1优选是苯基或卤代苯基，R2是-NHC(O)OC(CH3)3，R3和R5是-H，R4是-OH，R30是-OH或-OCOCH3。
W优选选自：
-O-C1-C10烷基(更为优选-O-C1-C10烷基)；
-O-C3-C10不饱和烷基(更为优选-O-C3-C4不饱和烷基)；
-O-CH(R21)OR22其中
R21是-H或-C1-C6烷基，并且
R22是-C1-C6烷基、C3-C10不饱和烷基(更为优选-O-C3-C4不饱和
烷基)；
-CH(R28)S(O)mAr其中Ar是苯基或被1、2或3个C1-C4烷基、C1-
C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺
基、或硝基取代的苯基；
-CH(R28)S(O)mCH2R28
其中R28是
-C1-C6烷基，
-C3-C10不饱和烷基(更为优选-O-C3-C4不饱和烷基)，或
-(CH2)q苯基其中q是0-3；并且
m是0。
本发明的一个实施方案是分子式I的化合物，其中R2是-NHC(O)C6H5，R4是羟基，R3和R5是-H，R1是苯基或取代的苯基，并且-W选自：
-O-C1-C10烷基(更为优选-O-C1-C10烷基)；
-O-C3-C10不饱和烷基(更为优选-O-C3-C4不饱和烷基)；
-O-CH(R21)OR22其中
R21是-H或-C1-C6烷基，并且
R22是-C1-C6烷基或-C3-C10不饱和烷基(更为优选-O-C3-C4不饱和
烷基)；
-CH(R28)S(O)mAr其中Ar是苯基或被1、2或3个C1-C4烷基、C1-
C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺
基、或硝基取代的苯基；
-CH(R28)S(O)mCH2R28
其中R28是
-C1-C6烷基，
-C3-C10不饱和烷基(更为优选-O-C3-C4不饱和烷基)，或
-(CH2)q苯基其中q是0-3；并且
m是0。
本发明的另一个实施方案是分子式I的化合物，其中R2是-NHC(O)OC(CH3)3，R1是苯基或取代的苯基，R4是羟基，R3和R5是-H，并且-W选自：
-O-C1-C10烷基(更为优选-O-C1-C10烷基)；
-O-C3-C10不饱和烷基(更为优选-O-C3-C4不饱和烷基)；
-O-CH(R21)OR22其中
R21是-H或-C1-C6烷基，并且
R22是-C1-C6烷基或-C3-C10不饱和烷基(更为优选-O-C3-C4不饱和
烷基)；-CH(R28)S(O)mAr其中Ar是苯基或被1、2或3个C1-C4烷基、C1-
C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺
基、或硝基取代的苯基；
-CH(R28)S(O)mCH2R28
其中R28是
-C1-C6烷基，
-C3-C10不饱和烷基(更为优选-O-C3-C4不饱和烷基)，或
-(CH2)q苯基其中q是0-3；并且
m是0。
本发明的一个实施方案是分子式I的化合物，2其中R1选自-CH3、-C6H5或被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、羟基或硝基取代的苯基；R2选自-H、-NHC(O)H、-NHC(O)C1-C10烷基(优选-NHC(O)C4-C6烷基)、-NHC(O)苯基、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、羟基或硝基取代的-NHC(O)苯基、-NHC(O)C(CH3)＝CHCH3、-NHC(O)OC(CH3)3、-NHC(O)OCH2苯基、-NH2、-NHSO2-4-甲基苯基、-NHC(O)(CH2)3COOH、-NHC(O)-4-(SO3H)苯基、-OH、-NHC(O)-1-金刚烷基、-NHC(O)O-3-四氢呋喃基、-NHC(O)O-4-四氢吡喃基、-NHC(O)CH2C(CH3)3、-NHC(O)C(CH3)3、-NHC(O)OC1-C10烷基、-NHC(O)NHC1-C10烷基、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基或硝基取代的-NHC(O)NHPh、-NHC(O)C3-C8环烷基、-NHC(O)OC(CH2CH3)2CH3、-NHC(O)OC(CH3)2CH2Cl、-NHC(O)OC(CH3)2CH2CH3、-NHC(O)-1-苯基-1-环戊基、-NHC(O)-1-甲基-1-环己基、NHC(S)NHC(CH3)3或NHC(O)NHC(CH3)3。
分子式I的其它优选实施方案包括：
7-(O-乙氧基甲基)-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(4)，
7-(O-甲氧基乙氧基甲基)-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(6)，
7-(O-甲氧甲基)-13-(N-Boc-2’-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(8)，
7-(O-苄氧甲基)-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(1o)，
7-[O-(2，2，2-三氯乙氧基)甲基]-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(21)，
7-[O-(2，2，2-三氯乙氧基)甲氧甲基]-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(22)，
7-(O-甲基硫基甲基)紫杉酚(42)，
7-(O-甲基硫基甲基)-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(44)，和
7-(O-苯基硫基甲基)紫杉酚(46)，
7-O-甲基紫杉酚(47)，
7-[O-乙基(1-硫基乙基)]紫杉酚(49)，
13-(N-(叔丁基氨基羰基)-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III 7-O-甲基硫基甲醚(55)，
13-(N-(叔丁基氨基羰基)-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III 7-O-甲醚(56)，
13-(N-Boc-2’-TES-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III 7-O-甲醚(58)，更为优选：
7-(O-乙氧基甲基)-13-(N-(叔丁基氨基羰基)-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(14)和
7-(O-甲氧甲基)-13-(N-(叔丁基氨基羰基)-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(27)。
本发明的一个优选实施方案是分子式I的化合物其中R1优选是苯基或卤代苯基，R2是-NHC(O)NHC(CH3)3，R3和R5是-H，R4是-OH，并且R30是-OH或-OCOCH3。
分子式I的化合物包括7-醚取代的7-α和7-β两种构型。
优选的-O-C5-C15杂烷基基团包括：
-OCH2-(2-或3-呋喃基)、-OCH2(2-或3-吡咯基)、-OCH2(2-、3-或4-吡啶基)、-OCH2(2-、4-或5-咪唑基)、-OCH2(3-、4-或5异恶唑基)。
本发明的一个实施方案是通式为分子式I的7-去氧-7-W-紫杉酚类似物，其中：
R1选自-CH3、-C6H5或被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、羟基或硝基取代的苯基；
R2选自-H、-NHC(O)C1-C10烷基(优选-NHC(O)C4-C6烷基)、-NHC(O)苯基、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、羟基或硝基取代的-NHC(O)苯基、-NHC(O)C(CH3)＝CHCH3、-NHC(O)OC(CH3)3、-NH2、-NHSO2-4-甲基苯基、-NHC(O)(CH2)3COOH、-NHC(O)-4-(SO3H)苯基、-OH、-NHC(O)-1-金刚烷基、-NHC(O)O-3-四氢呋喃基、-NHC(O)O-4-四氢吡喃基、-NHC(O)CH2C(CH3)3、-NHC(O)C(CH3)3、-NHC(O)OC1-C10烷基、-NHC(O)NHC1-C10烷基、-NHC(O)NHC(CH3)3、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基或硝基取代的-NHC(O)NHPh、-NHC(O)C3-C8环烷基；
R3选自-H、-NHC(O)苯基或-NHC(O)OC(CH3)3，总的条件R2和R3之一是-H但R2和R3不能同时是-H；
R4是-H或选自-OH、-OAc(-OC(O)CH3)、-OC(O)OCH2C(Cl)3、-OCOCH2CH2NH3+HCOO-、-NHC(O)苯基、-NHC(O)O(CH3)3、-OCOCH2CH2COOH及其药物可接受的盐、-OCO(CH2)3COOH及其药物可接受的盐、-OC(O)-Z-C(O)-R’[其中Z是亚乙基(-CH2CH2-)、亚丙基(-CH2CH2CH2-)、-CH＝CH-、1，2-环己烷或1，2-亚苯基；R’是-OH、-OH碱、-NR’2R’3、-OR’3、-SR’3、-OCH2C(O)NR’4R’5其中R’2是-H或-CH3，R’3是-(CH2)nNR’6R’7或(CH2)nN+R’6R’7R’8X-其中n是1-3，R’4是-H或-C1-C4烷基，R’5是-H、-C1-C4烷基、苄基、羟基乙基、-CH2CO2H或二甲胺基乙基，R’6和R’7是-CH3、-CH2CH3、苄基或R’6和R’7与NR’6R’7的氮合在一起形成吡咯烷基、哌啶基、吗啉基或N-甲基吡嗪基；R’8是-CH3、-CH2CH3或苄基、X-是卤离子，碱是NH3、(HOC2H4)3N、N(CH3)3、CH3N(C2H4)2NH、NH2(CH2)6NH2、N-甲基葡糖胺、NaOH或KOH]、-OC(O)(CH2)nNR2R3[其中n是1-3，R2是-H或-C1-C3烷基并且R3是-H或-C1-C3烷基]、-OC(O)CH(R″)NH2[其中R″选自-H、-CH3、-CH2CH(CH3)2、-CH(CH3)CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2苯基、-(CH2)4NH2、-CH2CH2COOH、-(CH2)3NHC(＝NH)NH2]、脯氨酸的残基、-OC(O)CH＝CH2、-C(O)CH2CH2C(O)NHCH2CH2SO3-Y+、-OC(O)CH2CH2C(O)NHCH2CH2CH2SO3-Y+其中Y+是Na+或N+(Bu)4-、OC(O)CH2CH2C(O)OCH2CH2OH；
R5是-H或-OH，总的条件是当R5是-OH时R4是-H，进一步的条件是当R5是-H时R4不能是-H；
R30是-H、-OH或-OC(O)CH3；
及其药物可接受的盐(当化合物含有酸性或碱性官能团时)。
本发明的另一个实施方案是通式为分子式I的7-去氧-7-W-紫杉酚类似物，其中：
R1选自-CH3、-C6H5或被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、羟基或硝基取代的苯基；
R2选自-H、-NHC(O)C1-C10烷基(优选-NHC(O)C4-C6烷基)、-NHC(O)苯基、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、羟基或硝基取代的-NHC(O)苯基、-NHC(O)C(CH3)＝CHCH3、-NHC(O)OC(CH3)3、-NH2、-NHSO2-4-甲基苯基、-NHC(O)(CH2)3COOH、-NHC(O)-4-(SO3H)苯基、-OH、-NHC(O)-1-金刚烷基、-NHC(O)O-3-四氢呋喃基、-NHC(O)O-4-四氢吡喃基、-NHC(O)CH2C(CH3)3、-NHC(O)C(CH3)3、-NHC(O)OC1-C10烷基、-NHC(O)NHC1-C10烷基、-NHC(O)NHC(CH3)3、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基或硝基取代的-NHC(O)NHPh、-NHC(O)C3-C8环烷基；并且
W选自：
O-甲基；
O-丙基；
O-烯丙基；
O-甲氧甲基；
O-乙氧基甲基；
O-甲氧基乙氧基甲基；
O-苄氧甲基；
O-(2，2，2-三氯乙氧基)甲基；
O-(2，2，2-三氯乙氧基)甲氧甲基；
O-甲基硫基甲基；和
O-苯基硫基甲基；
R3、R4、R5和R30如上所定义。
本发明的又一个实施方案是通式为分子式I的7-去氧-7-W-紫杉酚类似物，其中：
R1选自-CH3、-C6H5或被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、羟基或硝基取代的苯基；
R2选自-H、-NHC(O)C1-C10烷基(优选-NHC(O)C4-C6烷基)、-NHC(O)苯基、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、羟基或硝基取代的-NHC(O)苯基、-NHC(O)C(CH3)＝CHCH3、-NHC(O)OC(CH3)3、-NH2、-NHSO2-4-甲基苯基、-NHC(O)(CH2)3COOH、-NHC(O)-4-(SO3H)苯基、-OH、-NHC(O)-1-金刚烷基、-NHC(O)O-3-四氢呋喃基、-NHC(O)O-4-四氢吡喃基、-NHC(O)CH2C(CH3)3、-NHC(O)C(CH3)3、-NHC(O)OC1-C10烷基、-NHC(O)NHC1-C10烷基、-NHC(O)NHC(CH3)3、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基或硝基取代的-NHC(O)NHPh、-NHC(O)C3-C8环烷基；
W选自：
O-乙氧基甲基；
O-甲氧基乙氧基甲基；
O-苄氧甲基；
O-(2，2，2-三氯乙氧基)甲基；
O-(2，2，2-三氯乙氧基)甲氧甲基；
O-甲基硫基甲基；和
O-苯基硫基甲基；并且
R3、R4、R5和R30如上所定义。
在分子式I的化合物中，W优选选自：
O-甲基；
O-丙基；
O-烯丙基；
O-甲氧甲基；
O-乙氧基甲基；
O-甲氧基乙氧基甲基；
O-苄氧甲基；
O-(2，2，2-三氯乙氧基)甲基；
O-(2，2，2-三氯乙氧基)甲氧甲基；
O-甲基硫基甲基；和
O-苯基硫基甲基；更为优选：
O-甲氧甲基；
O-乙氧基甲基；
O-甲氧基乙氧基甲基；
O-苄氧甲基；
O-(2，2，2-三氯乙氧基)甲基；
O-(2，2，2-三氯乙氧基)甲氧甲基；
O-甲基硫基甲基；和
O-苯基硫基甲基。
-O-C5-C15杂烷基的例子包括：-OCH2(2-或3-呋喃基)、-OCH2(2-或3-吡咯基)、-OCH2(2-、3-或4-吡啶基)、-OCH2(2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基)、-OCH2(1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基)、-OCH2(2-、4-或5-咪唑基)、-OCH2(3-、4-或5-吡唑基)、-OCH2(2-吡嗪基)、-OCH2(2-、4-、5-或6-嘧啶基)、-OCH2(2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基)、-OCH2(3-、4-或5异恶唑基)。
C1-C6烷基的例子包括直链或支链的烷基，包括例如甲基、乙基、异丙基、叔丁基、异丁基和2-甲基-戊基。
C1-C3烷氧基的例子是甲氧基、乙氧基、丙氧基及其异构体的形式。
本发明还提供分子式5的恶唑烷的制备方法其中
R1如上所定义；
R9选自C1-C6烷基；R11是-(OC1-C2烷基)n取代的苯基其中n是1至3；
R12选自-C(O)H、-C(O)C1-C10烷基(优选-C(O)C4-C6烷基)、-C(O)苯基、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、羟基或硝基取代的-C(O)苯基、-C(O)C(CH3)＝CHCH3、-C(O)OC(CH3)3、-C(O)OCH2苯基、-SO2-4-甲基苯基、-C(O)(CH2)3COOH、-C(O)-4-(SO3H)苯基、-C(O)-1-金刚烷基、-C(O)O-3-四氢呋喃基、-C(O)O-4-四氢吡喃基、-C(O)CH2C(CH3)3、-C(O)C(CH3)3、-C(O)OC1-C10烷基、-C(O)NHC1-C10烷基、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基或硝基取代的-C(O)NHPh、-C(O)C3-C8环烷基、-C(O)OC(CH2CH3)2CH3、-C(O)OC(CH3)2CH2Cl、-C(O)OC(CH3)2CH2CH3、-C(O)-1-苯基-1-环戊基、-C(O)-1-甲基-1-环己基、-C(S)NHC(CH3)3、-C(O)NHC(CH3)3或-C(O)NHPh；
该方法包括将分子式3的羟胺其中的R1和R3如上所定义并且R2选自-NHC(O)H、-NHC(O)C1-C10烷基(优选-NHC(O)C4-C6烷基)、-NHC(O)苯基、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、羟基或硝基取代的-NHC(O)苯基、-NHC(O)C(CH3)＝CHCH3、-NHC(O)OC(CH3)3、-NHC(O)OCH2苯基、-NHSO2-4-甲基苯基、-NHC(O)(CH2)3COOH、-NHC(O)-4-(SO3H)苯基、-NHC(O)-1-金刚烷基、-NHC(O)O-3-四氢呋喃基、-NHC(O)O-4-四氢吡喃基、-NHC(O)CH2C(CH3)3、-NHC(O)C(CH3)3、-NHC(O)OC1-C10烷基、-NHC(O)NHC1-C10烷基、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基或硝基取代的-NHC(O)NHPh、-NHC(O)C3-C8环烷基、NHC(O)OC(CH2CH3)2CH3、-NHC(O)OC(CH3)2CH2Cl、-NHC(O)OC(CH3)2CH2CH3、-NHC(O)-1-苯基-1-环戊基、-NHC(O)-1-甲基-1-环己基、NHC(S)NHC(CH3)3、NHC(O)NHC(CH3)3或-NHC(O)NHPh；
与(1)分子式4A的富电子的苯甲醛或(2)分子式4的富电子的缩醛反应其中n是1-3。
另外，本发明还提供的制备方法，包括将分子式7的游离恶唑烷酸与分子式8的浆果赤霉素化合物在脱水剂的存在下反应。其中的R10和R14可以相同或不同，选自-C(O)C1-C6烷基(优选-C(O)CH3)、-C(O)OC1-C6烷基、-C(O)OCH2CX3其中X是卤素、-C(O)OCH2CH2SiR20(其中R20是C1-C6烷基)、或Si(R20)3，或R14选自：
-O-C1-C10烷基，
-O-C3-C10不饱和烷基(优选烯丙基和丁烯基)，
-O-C5-C15杂烷基[例如-CH2(2-或3-呋喃基)、-CH2(2-或3-吡咯基)、-CH2(2-、3-或4-吡啶基)、-CH2(2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基)、-CH2(1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基)、-CH2(2-、4-或5-咪唑基)、-CH2(3-、4-或5-吡唑基)、-CH2(2-吡嗪基)、-CH2(2-、4-、5-或6-嘧啶基)、-CH2(2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基)、-CH2(3-、4-或5异恶唑基)；优选-CH2(2-或3-呋喃基)、-CH2(2-或3-吡咯基)、-CH2(2-、3-或4-吡啶基)、-CH2(2-、4-或5-咪唑基)、-CH2(3-、4-或5异恶唑基)]，
-O-CH(R21)OR22其中
R21是-H或-C1-C6烷基，并且
R22是-C1-C10烷基、C3-C10不饱和烷基(优选烯丙基和丁烯基)、-C5-C15杂烷基[例如CH2(2-或3-呋喃基)、-CH2(2-或3-吡咯基)、-CH2(2-、3-或4-吡啶基)、-CH2(2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基)、-CH2(1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基)、-CH2(2-、4-或5-咪唑基)、-CH2(3-、4-或5-吡唑基)、-CH2(2-吡嗪基)、-CH2(2-、4-、5-或6-嘧啶基)、-CH2(2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基)、-CH2(3-、4-或5异恶唑基)；优选-CH2(2-或3-呋喃基)、-CH2(2-或3-吡咯基)、-CH2(2-、3-或4-吡啶基)、-CH2(2-、4-或5-咪唑基)、-CH2(3-、4-或5异恶唑基)]，
或当R21和R22合在一起时形成一个4到6个碳原子的环，
-CH(R28)S(O)mAr
其中Ar是苯基或被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤
素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、或硝基取代
的苯基，
-CH(R28)S(O)mCH2R28
其中R28是
-C1-C6烷基，
-C3-C10不饱和烷基(优选烯丙基和丁烯基)，
-(CH2)q苯基其中q是1-6，
-(CH2)q苯基其中q是1-6并且被1、2或3个C1-C4烷基、C1-
C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基
胺基、或硝基取代，
-萘基，
被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫
基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、或硝基取代的-萘基，
-C5-C15杂烷基4例如-(2-或3-呋喃基)、(2-或3-吡咯基)、-(2-、3-
或4-吡啶基)、(2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基)、(1-、3-、
4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基)、(2-、4-或5-咪唑基)、(3-、4-
或5-吡唑基)、(2-吡嗪基)、(2-、4-、5-或6-嘧啶基)、(2-、3-、
4-、5-、6-或7-吲哚基)、(3-、4-或5异恶唑基)；优选-(2-或3-
呋喃基)、(2-或3-吡咯基)、(2-、3-或4-吡啶基)、(2-、4-或5-咪
唑基)、(3-、4-或5异恶唑基)]，
或当R28和R28合在一起时形成一个4到6个碳原子的环；
m是0到2；
R11和R12如上所定义。
本发明的化合物(分子式I)可以通过图表A′、A″、A和B所示的方法制备。
在图表2-20中所使用的术语R20、R23、R24、R25、R26和R27定义如下：
R20选自：
-O-C1-C10烷基，
-O-C3-C10不饱和烷基(优选烯丙基和丁烯基)，
-O-C5-C15杂烷基[例如-CH2(2-或3-呋喃基)、-CH2(2-或3-吡咯基)、-CH2(2-、3-或4-吡啶基)、-CH2(2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基)、-CH2(1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基)、-CH2(2-、4-或5-咪唑基)、-CH2(3-、4-或5-吡唑基)、-CH2(2-吡嗪基)、-CH2(2-、4-、5-或6-嘧啶基)、-CH2(2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基)、-CH2(3-、4-或5异恶唑基)；优选-CH2(2-或3-呋喃基)、-CH2(2-或3-吡咯基)、-CH2(2-、3-或4-吡啶基)、-CH2(2-、4-或5-咪唑基)、-CH2(3-、4-或5异恶唑基)]，
-O-CH(R21)OR22其中
R21是-H、-C1-C6烷基，并且
R22是-C1-C10烷基、C3-C10不饱和烷基(优选烯丙基和丁烯基)、-C5-C15杂烷基[例如CH2(2-或3-呋喃基)、-CH2(2-或3-吡咯基)、-CH2(2-、3-或4-吡啶基)、-CH2(2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基)、-CH2(1-、3-、4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基)、-CH2(2-、4-或5-咪唑基)、-CH2(3-、4-或5-吡唑基)、-CH2(2-吡嗪基)、-CH2(2-、4-、5-或6-嘧啶基)、-CH2(2-、3-、4-、5-、6-或7-吲哚基)、-CH2(3-、4-或5异恶唑基)；优选-CH2(2-或3-呋喃基)、-CH2(2-或3-吡咯基)、-CH2(2-、3-或4-吡啶基)、-CH2(2-、4-或5-咪唑基)、-CH2(3-、4-或5异恶唑基)]，
或当R21和R22合在一起时形成一个4到6个碳原子的环，
-CH(R28)S(O)mAr
其中Ar是苯基或被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤
素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、或硝基取代
的苯基，-CH(R28)S(O)mCH2R28
其中R28是
-C1-C6烷基，
-C3-C10不饱和烷基(优选烯丙基、丁烯基)，
-(CH2)q苯基其中q是1-6，
-(CH2)q苯基其中q是1-6并且被1、2或3个C1-C4烷基、C1-
C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基
胺基、或硝基取代，
-萘基，
被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫
基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、或硝基取代的-萘基，
-C5-C15杂烷基[例如-(2-或3-呋喃基)、(2-或3-吡咯基)、-(2-、3-
或4-吡啶基)、(2-、3-、4-、5-、6-、7-或8-喹啉基)、(1-、3-、
4-、5-、6-、7-或8-异喹啉基)、(2-、4-或5-咪唑基)、(3-、4-
或5-吡唑基)、(2-吡嗪基)、(2-、4-、5-或6-嘧啶基)、(2-、3-、
4-、5-、6-或7-吲哚基)、(3-、4-或5异恶唑基)；优选-(2-或3-
呋喃基)、(2-或3-吡咯基)、(2-、3-或4-吡啶基)、(2-、4-或5-咪
唑基)、(3-、4-或5异恶唑基)]，
或当R28和R28合在一起时形成一个4到6个碳原子的环；
m是0到2；
R23选自-H、-C1-C10烷基(优选-C4-C6烷基)、-苯基、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基、羟基或硝基取代的-苯基、-C(CH3)＝CHCH3、-OC(CH3)3、-OCH2苯基、-SO2-4-甲基苯基、-(CH2)3COOH、-4-(SO3H)苯基、-1-金刚烷基、-O-3-四氢呋喃基、-O-4-四氢吡喃基、-CH2C(CH3)3、-C(CH3)3、-OC1-C10烷基、-NHC1-C10烷基、被1、2或3个C1-C4烷基、C1-C3烷氧基、卤素、C1-C3烷基硫基、三氟甲基、C2-C6二烷基胺基或硝基取代的-NHPh、-C3-C8环烷基、-C(CH2CH3)2CH3、-C(CH3)2CH2Cl、-C(CH3)2CH2CH3、-1-苯基-1-环戊基、-1-甲基-1-环己基、-C(S)NHC(CH3)3、-NHC(CH3)3或NHPh。
R24优选Troc和TES。
R25是-(OC1-C2烷基)n取代的苯基其中n是1至3；
R26是-H；并且
R27选自-C(O)C1-C6烷基(优选-C(O)CH3)、-C(O)OC1-C6烷基、-C(O)OCH2CX3其中X是卤素、-C(O)OCH2CH2SiR20(其中R20是C1-C6烷基)、或Si(R20)3或，优选Troc和TES。
3-叠氮基-2-羟基-羧酸酯1可以如文献所述进行制备(参见Denis，J-N.；Correa，A.；Greene，A.E.，J.Org.Chem.，1990，55，1957)。这些原料可以方便地氢化成游离的胺2，尽管文献通过在还原叠氮化物之前先形成羟基乙酰化了的中间体而有意避免该中间体。胺2具有足够的稳定性因而在分离该胺以及直接用它制备N-乙酰化的游离羟基化合物3的过程中不会遇到问题。化合物3曾经通过将羟基保护、将酯水解成酸并与浆果赤霉素III衍生物直接缩合或在转变成恶嗪酮后缩合而使用过(欧洲专利0 428 376 A1，US 436235)。这些方法明显较差，因为它们需要大大过量的酰化试剂而且反应完全程度通常不超过大约60％。还记载有使用β-内酰胺中间体的方法，但是这些方法仍然需要大大过量的试剂或引入非常强的碱例如LDA，从而使这些方法难于操作并且不适合于某些类似物(Ojiama，I.；Habus，I.；Zhao，M.；George，G.I.；Jayasinghe，L.R.，J.Org.Chem.，1991，56，1681，EP 0 400 971 A2)。Commercon，A，；B②zard，D.；Bernard，F.；Bourzat，J.D.公开了一种非常有效的缩合方法，涉及将羟胺衍生物3转变为在2位有2非氢取代基的恶唑烷(Tetrahedron Lett.，1992，33，5185和专利WO92/09589)。该缩合方法以非常高的收率进行，但是保护基的脱除需要很强的酸从而使敏感的紫杉酚类似物在该脱保护条件下被破坏。我们通过在形成恶唑烷5时使用富电子的苯甲醛4而不是前述研究人员所用的酮对该方法进行了改善。
Didier，E.；Fouque，E.；Taillepied，I，Commercon，A.最近公开了这种方法(Tetrahedron Lett.1994，35，2349)。从苯甲醛4得到的恶唑烷以非对映体混合物的形式生成，但已经在某些情况下将它们进行了分离并已证实该非对映体在合成中同样有用。恶唑烷5很容易被水解成盐6和酸7。该酸不稳定从而需要在制备后尽快使用。恶唑烷的两个异构体在与保护了的浆果赤霉素8的缩合反应中同样有效，高产率地生成恶唑烷保护的紫杉酚类似物9。更为重要的是，从这些富电子的苯甲醛得到的恶唑烷的两个异构体在均可以非常温和的酸性条件下方便地水解，从而使脱保护反应不会引起对酸非常敏感的紫杉酚衍生物例如10(本发明的目的化合物)的不良改变。有较多关于使用富电子的醛来保护1，2-二醇例如二氧戊环的文献，但没有关于使用这样的醛来保护2-羟基保护的胺的在先文献(除前面引用的Didier的文献外)。进行脱保护时可以将9的恶唑烷和7保护的羟基同时除去或各自分别地除去。另外还记载了选择的尿烷类似物10生成游离胺11的脱保护过程(图表B)。然后再将它们转变成各种酰胺类似物10。
将叠氮化物1转变成胺2通过本领域已知的还原反应来完成。因此，该反应可以通过在各种氢化反应催化剂例如钯、铂、铑或钌的存在下进行氢化来完成。另外，还可以通过用膦例如三苯基或三丁基膦处理或用酸例如盐酸、硫酸、三氟醋酸或氢溴酸在金属例如锌、铁、或锡的存在下处理将叠氮化物还原。这些反应可以在溶剂例如乙醇、甲醇、醋酸乙酯、甲基叔丁基醚或四氢呋喃等中进行。将胺2转变成其酰化的衍生物3通过将胺在吡啶或含有叔胺例如三乙胺或乙基二异丙基胺的非碱性溶剂例如二氯甲烷或四氢呋喃中用酰化试剂处理来完成。如果3是尿烷，将2用试剂例如氯甲酸苄酯、2，2，2-三氯乙氧基羰酰氯、焦碳酸二叔丁酯、或本领域已知的其它可形成尿烷的试剂处理。如果3是酰胺，将2用酰化试剂例如酰氯、酸酐或本领域已知的其它酰化试剂处理。如果3是硫脲，将2用试剂例如烷基或芳基异氰酸酯、烷基或芳基异硫氰酸酯或本领域已知的其它可形成硫脲的试剂处理。
在图表A″中列出了另一个制备分子式3的化合物(其中R2＝R12NH-，R3＝-H，R9＝-H)的方法。图表A″中所示的倒数第二个化合物是分子式3的化合物，其中的R2＝R12NH-，R3＝-H，R9＝-t-Bu。在图表A″中TMS是三甲基硅烷基基团，TMSCl是三甲基氯硅烷，LDA是二异丙基氨基锂。
在图表A中列出了另一个制备分子式3的化合物(其中R2＝R12NH-，R3＝-H，R9＝-H)的方法。在图表A中，Ts是对甲苯磺酰基基团。
在图表A″和图表A中制备的羟基酸可以通过与重氮甲烷反应或用本领域已知的其它方法酯化被进一步转变为分子式3的化合物，其中R2＝R12NH-，R3＝-H，R9＝-CH3。
通过将羟基酰胺或尿烷3用富电子的苯甲醛或其缩醛例如二甲基或二乙基缩醛4及酸性催化剂，例如对甲苯磺酸、吡啶对甲苯磺酸盐或本领域已知的其它酸性催化剂在溶剂，例如四氢呋喃、甲苯、二氯甲烷或其它非质子溶剂中处理将其转变为恶唑烷5。富电子的苯甲醛包括但不仅限于2-、3-、4-甲氧基苯甲醛；2，4-、3，5-、2，5-二甲氧基苯甲醛；2，4，6-三甲氧基苯甲醛；以及4-乙氧基苯甲醛。优选的苯甲醛为2，4-二甲氧基苯甲醛。恶唑烷的形成通常通过加热至回流以蒸除溶剂并除去生成的水或醇来完成。通过将5的酯用碱或氢氧化季铵或碱金属的碳酸盐或本领域已知的其它碱在溶剂例如水、甲醇、乙醇或其它质子溶剂中处理将其水解成盐6。反应可以在-78℃到100℃之间进行。产物6是稳定的，可以通过蒸除溶剂来分离并以固体的形式储存；或将反应液直接使用，通过用酸处理将6转变成酸7。通常，通过将6的水溶液用足够的酸例如盐酸、硫酸、硫酸氢钾等在分液漏斗内处理并将所需的酸分配到有机溶剂例如醋酸乙酯、二氯甲烷、醚等中并蒸除溶剂制得7。得到的7具有足够的纯度和稳定性以用于下一步的反应，但通常没有稳定到可以长期保存。将酸7与浆果赤霉素8在脱水剂的存在下缩合生成酯9。对于该方法最为优选的是碳二亚胺例如二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺、二对甲苯基碳二亚胺、乙基二甲胺基丙基碳二亚胺盐酸盐等，以及碱性催化剂，优选4-二甲胺基吡啶。反应通常在非质子溶剂中例如甲苯、苯、四氢呋喃、二氧六环等，在25℃到100℃进行。可能用到的制备9的其它脱水方法是例如用磺酸(例如甲苯磺酰氯或苯磺酰氯)将7转变成它的混合酯；或者对于对酸敏感的羧酸，按本领域公知的方法在草酰氯的存在下从干燥的6生成酰基卤。可以将恶唑烷9脱保护，因此依据7位的保护基以及反应条件可以将保护的恶唑烷以及封锁浆果赤霉素的7位羟基的基团以任何顺序分别脱除或将二者一起脱除。如果R14是对酸不稳定的基团例如硅醚，则恶唑烷的水解可以在弱酸条件下进行并同时引起7位脱保护，直接生成10MZ。用于这种转变的条件包括在醋酸水溶液、0.01到0.1N的醇酸水溶液中在0℃到50℃下水解或在0.01到0.1N的醇酸中在0℃到50℃下水解。另外，如果7位的保护基对酸是稳定的，可以在第二步将其除去。例如，可以通过本领域公知的还原反应将7位的三氯乙氧基羰基基团从10MY(图表B)除去生成10MZ。依据10MZ(图表B)的氮上保护基(即R2或R3)的性质可以将保护基除去生成11Z。例如，当R2是PhCH2OC(O)NH时，可以通过温和的氢解反应将其除去。用于这种转变的条件包括用氢气在金属催化剂例如钯上，在溶剂例如乙醇或醋酸乙酯中，在室温及从一到三个大气压的压力下还原。其它方法是本领域已知的。可以通过将2转变成3所述的酰化过程将生成的胺11Z转变成酰胺或尿烷10MZ(图表B)。可以对产物10MZ的2’羟基进行保护，生成12MZ(图表Z)。例如，可以将2’羟基用三氯乙氧基羰酰氯在吡啶或其它芳香胺溶剂、或含有叔胺碱的非碱性溶剂例如甲苯、二氯甲烷或四氢呋喃中酰化。反应可以在-50℃到100℃进行。用于该酰化的其它方法是本领域众所周知的。
紫杉酚、紫杉酚类似物10MZ(R10是醋酸基或其它适当的酰基部分)、浆果赤霉素III、或浆果赤霉素III类似物8(R10是醋酸基或其它适当的酰基部分)与肼的反应构成了制备10-去乙酰基紫杉酚、10-去酰基紫杉酚类似物(10MZ，R10＝H)、10-去乙酰基浆果赤霉素III、和10-去酰基浆果赤霉素III类似物(8，R10＝H)的特别有利的方法。虽然已报道的从紫杉酚和浆果赤霉素结构的该位置除去酰基的方法(Samaranayake，G.等，J.Org.Chem.，1991，56，5114)，即溴化锌的甲醇溶液，会生成除所需的去酰基的产物之外的许多其它产物，而与肼的反应几乎只生成所需的去酰基的产物。反应可以在室温下在有机溶剂中进行，依据反应物，通常需要最少15分钟或最多24小时。该反应的优选溶剂是95％的乙醇，优选的试剂是98％的肼。
本发明的分子式I的化合物[其中R40不等于-C(O)C6H5]可以通过图表D所示的方法根据Chaudhary，A.G.等的方法制备(J.Am.Chem.Soc.，1994，116，4097-8)。
下面提供合成分子式I的化合物的通用方法。
可以通过与三烷基氯硅烷在非质子溶剂例如THF、吡啶或DMF中，在碱例如咪唑或吡啶的存在下的反应；或与烷氧基羰酰氯(例如氯甲酸三氯乙基酯、苄氧氯甲酸酯或烯丙基氧氯甲酸酯)在非质子溶剂(例如二氯甲烷或吡啶)以及加入的碱(例如吡啶、三乙胺或二异丙基乙基胺)中的反应将图表2的紫杉酚类似物III转变成2’-保护的衍生物IV。可以按照图表A’中将3转变成5所述将紫杉酚类似物III转变成2’，3’-恶唑烷衍生物V。
可以通过与三烷基氯硅烷在非质子溶剂例如THF、吡啶或DMF中，在碱例如咪唑或吡啶的存在下的反应；或与烷氧基羰酰氯(例如氯甲酸三氯乙基酯、苄氧氯甲酸酯或烯丙基氧氯甲酸酯)在非质子溶剂(例如二氯甲烷或吡啶)以及加入的碱(例如吡啶、三乙胺或二异丙基乙基胺)中的反应将图表3的浆果赤霉素类似物VI转变成7-保护的浆果赤霉素VII。可以将图表3的7-保护的浆果赤霉素VII与恶唑烷酸VIII在脱水剂的存在下缩合生成酯IX。对于该方法最为优选的是碳二亚胺，例如二环己基碳二亚胺、二异丙基碳二亚胺、二对甲苯基碳二亚胺、乙基二甲胺基丙基碳二亚胺盐酸盐等，以及碱性催化剂，优选4-二甲胺基吡啶。反应通常在非质子溶剂中例如甲苯、苯、四氢呋喃、二氧六环等，在25℃到100℃进行。可能用到的制备IX的其它脱水方法是例如用磺酸例如甲苯磺酰氯或苯磺酰氯将VIII转变成它的混合酯；或者对于对酸敏感的羧酸，按本领域公知的方法在草酰氯的存在下从VIII的干燥的碱金属盐生成酰基卤。可以将7-保护的恶唑烷进行选择性的脱保护生成7-羟基恶唑烷V。如果R27是三烷基硅烷基，从IX转变成V的反应可以用氟化物例如四丁基氟化铵、氟化吡啶或三氢氟化三乙胺在惰性溶剂例如THF或二氯甲烷中完成。如果R27是保护基例如三氯乙氧基羰基，可以通过用锌或其它金属在弱酸(例如醋酸或氯化铵)的存在下在溶剂(例如醋酸或甲醇或这些溶剂与水的混合物)中进行还原将其除去。
图表4的2’-保护的紫杉酚类似物X(R20是烷氧甲基-或芳氧甲基醚)可以从2’-保护的-7-羟基-紫杉酚IV和氯甲基烷基或氯甲基芳基醚通过本领域公知的反应制得(Braun，H.；Hild，W.Angew.Chem.Int.Ed.Eng.1984，23，723；Danishefsky，S.；Barbachyn，M.J.Am.Chm.Soc.1985，107，7661；McCarvey，G.J.；Bajiva，J.S.JOrg.Chem.1984，49，409；Falck，J.R.；Yadageri，P.J.Org.Chem.1984，54，5851；Andreev，V.M.；Fonchenko，Z.V.；Cherkayev，G.V.；Mochalin，V，.B.；Kheifits，L.A.Khim.Farm.Zh.1990，24，50；Swindel，C.S.；Kraus，N.E.；Horwitz，S.B.；Ringel，I.J.Med.Chem.1991，34，1176；Wu.Z.F.；Fraserreid，B.；Mootoo，D.R.Tetrahedron Lett.1988，29，6549)。图表4的2’-保护的紫杉酚类似物X(R20是烷基-、烯丙基烷芳基醚)可以从2’-保护的-7-羟基-紫杉酚IV通过图表7-20所示的方法或通过和重氮烷基或芳基重氮化合物在过渡金属催化剂例如铑、钌或钯的存在下，在非质子溶剂(例如THF、二氧六环或DMF)中，在-20℃到150℃的温度下反应制得。紫杉酚类似物XI可以从2’-保护的类似物X通过本领域公知的方法脱去2’-保护基制得。
图表5的恶唑烷基-紫杉酚类似物XII(R20是烷氧甲基-或芳氧甲基醚)可以从恶唑烷基-7-羟基-紫杉酚V和氯甲基烷基或氯甲基芳基醚通过本领域公知的反应制得(Braun，H.；Hild，W.Angew.Chem.Int.Ed.Eng.1984，23，723；Danishefsky，S.；Barbachyn，M.J.Am.Chm.Soc.1985，107，7661；McCarvey，G.J.；Bajiva，J.S.JOrg.Chem.1984，49，409；Falck，J.R.；Yadageri，P.J.Org.Chem.1984，54，5851；Andreev，V.M.；Fonehenko，Z.V.；Cherkayev，G.V.；Mochalin，V，.B.；Kheifits，L.A.Khim.Farm.Zh.1990，24，50；Swindel，C.S.；Kraus，N.E.；Horwitz，S.B.；Ringel，I.J.Med.Chem.1991，34，1176；Wu.Z.F.；Fraserreid，B.；Mootoo，D.R.Tetrahedron Lett.1988，29，6549)。图表5的恶唑烷基紫杉酚类似物XII(R20是烷基-、烯丙基烷芳基醚)可以从恶唑烷基-7-羟基-紫杉酚V通过图表7-20所示的方法或通过和重氮烷基或芳基重氮化合物在过渡金属催化剂例如铑、钌或钯的存在下，在非质子溶剂例如THF、二氧六环或DMF中，在-20℃到150℃的温度下反应制得。紫杉酚类似物XI可以从恶唑烷基类似物XII通过在醋酸水溶液、0.01到0.1N的醇酸水溶液中在0℃到50℃下水解或在0.01到0.1N的醇酸中在0℃到50℃下水解或本领域公知的其它方法制得。
图表6的浆果赤霉素类似物VI可以通过与图表4的IV转变成X的相似的方法转变成7-醚浆果赤霉素XIII。图表6的7-醚浆果赤霉素XIII可以按照图表3中关于VII与VIII缩合的描述与恶唑烷酸VIII在脱水剂的存在下缩合生成酯XII。可以如图表5所述将恶唑烷XII脱保护生成类似物XI。
图表7的2’-保护的紫杉酚7-醚XIV可以从2-保护的紫杉酚类似物IV通过与二烷基硫醚和过氧苯甲酰反应(Medina，J.C.；Soloamn，M.；Kyler，K.S.Tetrahedron Lett.1988，29，3773)或通过与氯代烷基硫基烷基醚在强碱(例如氢化钠)或硝酸银和三级碱(例如三乙胺或二异丙基乙基胺)的存在下，在非质子溶剂(例如THF、二氧六环、或二氯甲烷)中反应制得(Holton，R.A.；Davis，R.G.TetrahedronLett.1977，533；Suzuki，K；Inanga，J.；Yamaguchi，M.Chem.Lett.1979，1277)。同样，图表7的2’-保护的紫杉酚7-芳基硫基烷基醚XV可以从2-保护的紫杉酚类似物IV通过与芳基烷基硫醚和过氧苯甲酰反应(Medina，J.C.；Soloamn，M.；Kyler，K.S.TetrahedronLett.1988，29，3773)或通过与氯代烷基硫基芳基醚在强碱(例如氢化钠)或硝酸银和三级碱(例如三乙胺或二异丙基乙基胺)的存在下在非质子溶剂(例如THF、二氧六环、或二氯甲烷)中反应制得(Holton，R.A.；Davis，R.G.Tetrahedron Lett.1977，533；Suzuki，K；Inanga，J.；Yamaguchi，M.Chem.Lett.1979，1277)。
图表8的2’-保护的紫杉酚7-烷基硫基烷基醚XIV可以通过偏高碘酸钠和醇性溶剂或通过本领域公知的其它方法(Carrasco，M.；Jones，R.J.；KameIS.；Rapoport，H.；Truong，T.Org.Syn.1991，2029；Johnson，C.；Keiser，L.Org.Syn.Coll.Vol.V，1973，791)进行氧化生成亚砜XVI。同样，图表9的2’-保护的紫杉酚7-芳基硫基烷基醚XV可以通过偏高碘酸钠和醇性溶剂或通过本领域公知的其它方法(Carrasco，M.；Jones，R.J.；KamelS.；Rapoport，H.；Truong，T.Org.Syn.1991，2029；Johnson，C.；Keiser，L.Org.Syn.Coll.Vol.V，1973，791)进行氧化生成亚砜XVIII。
图表8的2’-保护的紫杉酚7-烷基硫基烷基醚XIV可以通过间氯过苯甲酸在非质子溶剂例如二氯甲烷或THF中氧化；或通过过氧化氢在非质子或质子溶剂(例如二氯甲烷、甲醇或乙醇)中氧化(Carpino，L.A.；McAdams，L.V.Org.Syn.Coll.Vol.VI，1988，403；Paquette，L.A.；Carr，R.V.C.Org.Syn.1985，64，157)或通过本领域公知的其它方法进行氧化生成砜XVII。同样，图表9的2’-保护的紫杉酚7-芳基硫基烷基醚XV可以通过间氯过苯甲酸在非质子溶剂例如二氯甲烷或THF中氧化；或通过过氧化氢在非质子或质子溶剂(例如二氯甲烷、甲醇或乙醇)中氧化(Carpino，L.A.；McAdams，L.V.Org.Syn.Coll.Vol.VI，1988，403；Paquette，L.A.；Carr，R.V.C.Org.Syn.1985，64，157)或通过本领域公知的其它方法进行氧化生成砜XVII。
图表10的2’-保护的紫杉酚7-芳基硫基氧甲基醚XVIII(R28＝H)可以通过用强碱(例如氢化钠、二乙氨基锂、六甲基二硅烷基锂或类似的强碱)在非质子溶剂(例如THF、醚、二氧六环或1，2-二甲氧基乙烷)中处理，随后用烷基化试剂(例如烷基碘化物、烷基溴化物或烷基醇磺酸酯)处理来将其烷基化生成2’-保护的紫杉酚7-芳基硫基氧烷基醚XVIII(R28＝烷基)。同样，图表11的2’-保护的紫杉酚7-芳基硫基二氧甲基醚XIX(R28＝H)可以通过用强碱(例如氢化钠、二乙氨基锂、六甲基二硅烷基锂或类似的强碱)在非质子溶剂(例如THF、醚、二氧六环或1，2-二甲氧基乙烷)中处理，随后用烷基化试剂(例如烷基碘化物、烷基溴化物或烷基醇磺酸酯)处理来将其烷基化生成2’-保护的紫杉酚7-芳基硫基二氧烷基醚XIX(R28＝烷基)。
图表12的2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-醚XXII可以从2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚类似物V通过与二烷基硫醚和过氧苯甲酰反应(Medina，J.C.；Soloamn，M.；Kyler，K.S.Tetrahedron Lett.1988，29，3773)；或通过与氯代烷基硫基烷基醚和三级碱(例如三乙胺或二异丙基乙基胺)在非质子溶剂(例如THF、二氧六环、或二氯甲烷)中反应制得。同样，图表12的2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-芳基硫基烷基醚XXIII可以从2’3’-恶唑烷保护的紫杉酚类似物V通过与芳基烷基硫醚和过氧苯甲酰反应(Medina，J.C.；Soloamn，M.；Kyler，K.S.Tetrahedron Lett.1988，29，3773)或通过与氯代烷基硫基芳基醚和三级碱(例如三乙胺或二异丙基乙基胺)在非质子溶剂(例如THF、二氧六环、或二氯甲烷)中反应制得。图表13的2’，3’-恶唑烷紫杉酚7-烷基硫基烷基醚XXII可以通过偏高碘酸钠和醇性溶剂或通过本领域公知的其它方法(Carrasco，M.；Jones，R.J.；KamelS.；Rapoport，H.；Truong，T.Org.Syn.1991，2029；Johnson，C.；Keiser，L.Org.Syn.Coll.Vol.V，1973，791)进行氧化生成亚砜XXIV。同样，图表14的2’，3’-恶唑烷紫杉酚7-芳基硫基烷基醚XXIII可以通过偏高碘酸钠和醇性溶剂或通过本领域公知的其它方法(Carrasco，M.；Jones，R.J.；KamelS.；Rapoport，H.；Truong，T.Org.Syn.1991，2029；Johnson，C.；Keiser，L.Org.Syn.Coll.Vol.V，1973，791)进行氧化生成亚砜XXVI。
图表13的2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-烷基硫基烷基醚XXII可以通过间氯过苯甲酸在非质子溶剂例如二氯甲烷或THF中氧化；或通过过氧化氢在非质子或质子溶剂例如二氯甲烷、甲醇或乙醇中氧化(Carpino，L.A.；McAdams，L.V.Org.Syn.Coll.Vol.VI，1988，403；Paquette，L.A.；Carr，R.V.C.Org.Syn.1985，64，157)或通过本领域公知的其它方法进行氧化生成砜XXV。同样，图表14的2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-芳基硫基烷基醚XXIII可以通过间氯过苯甲酸在非质子溶剂例如二氯甲烷或THF中氧化；或通过过氧化氢在非质子或质子溶剂例如二氯甲烷、甲醇或乙醇中氧化(Carpino，L.A.；McAdams，L.V.Org.Syn.Coll.Vol.VI，1988，403；Paquette，L.A.；Carr，R.V.C.Org.Syn.1985，64，157)或通过本领域公知的其它方法进行氧化生成砜XXVII。
图表15的2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-芳基硫基氧甲基醚XXVI(R28＝H)可以通过用强碱(例如氢化钠、二乙氨基锂、六甲基二硅烷基锂或类似的强碱)在非质子溶剂(例如THF、醚、二氧六环或1，2-二甲氧基乙烷)中处理，随后用烷基化试剂(例如烷基碘化物、烷基溴化物或烷基醇磺酸酯)处理来将其烷基化生成2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-芳基硫基氧烷基醚XXVI(R28＝烷基)。同样，图表16的2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-芳基硫基二氧甲基醚XXVII(R28＝H)可以通过用强碱(例如氢化钠、二乙氨基锂、六甲基二硅烷基锂或类似的强碱)在非质子溶剂(例如THF、醚、二氧六环或1，2-二甲氧基乙烷)中处理，随后用烷基化试剂(例如烷基碘化物、烷基溴化物或烷基醇磺酸酯)处理来将其烷基化生成2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-芳基硫基二氧烷基醚XXVII(R28＝烷基)。
2’-保护的紫杉酚7-烷基硫基烷基XIV(图表17)、2’-保护的紫杉酚7-芳基硫基烷基醚XV(图表18)、7-甲基硫基氧甲基醚XVI(图表8，R28＝H)、7-烷基硫基氧烷基醚XVI(图表8，R28＝烷基)、7-甲基硫基二氧甲基醚XVII(图表8，R28＝H)、7-烷基硫基二氧烷基醚XVII(R28＝烷基)、7-芳基硫基氧甲基醚XVIII(图表9，R28＝H)、7-芳基硫基氧烷基醚XVIII(图表10，R28＝烷基)、7-芳基硫基二氧甲基醚XIX(图表9，R28＝H)或7-芳基硫基二氧烷基醚XIX(图表11，R28＝烷基)可以用阮内镍脱硫(Pettit，G.R.；Van Tamelen，E.E.Organic Reactions，1962，12，356)分别生成的2-保护的紫杉酚醚XX。2’-保护的紫杉酚醚XX可以按照将XII转变为XI(图表5)所述进行脱保护生成紫杉酚7醚类似物。
2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-烷基硫基烷基XXII(图表19)、2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-芳基硫基烷基醚XXIII(图表20)、2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-甲基硫基氧甲基醚XXIV(图表13，R28＝H)、2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-烷基硫基氧烷基醚XXIV(图表13，R28＝烷基)、2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-甲基硫基二氧甲基醚XXV(图表13，R28＝H)、2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-烷基硫基二氧烷基醚XXV(图表13，R28＝烷基)、2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-芳基硫基氧甲基醚XXVI(图表14，R28＝H)、2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-芳基硫基氧烷基醚XXVI(图表15，R28＝烷基)、2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-芳基硫基二氧甲基醚XXVII(图表14， R28＝H)或2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚7-芳基硫基二氧烷基醚XXVII(图表16，R28＝烷基)可以用阮内镍脱硫(Pettit，G.R.；Van Tamelen，E.E.OrganicReactions，1962，12，356)分别生成的2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚醚XXVIII。2’，3’-恶唑烷保护的紫杉酚醚XXVIII可以按照将XII转变为XI(图表6)所述进行脱保护生成7-醚类似物XXI。实施例1 13-(N-Boc-2’-TSE-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(2)的制备
将13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(1，1.36克，1.6mmol)溶于无水吡啶(16ml)并将该溶液冷却至0℃。向其中加入三乙基氯硅烷(0.3mL，1.76mmol)。反应液0℃搅拌下2小时。室温搅拌过夜后，TLC仍表明有一些起始物。将反应冷却至0℃，再次加入三乙基氯硅烷(0.3mL，1.76mmol)。此后每隔两小时加一次三乙基氯硅烷，共重复三次(加入的量依次是0.2mL，0.25mL，及0.20mL)。将反应加热至室温并搅拌过夜。TLC表明没有起始物存在。用饱和CuSO4提取溶液两次。再用乙酸乙酯提取水层。合并有机层，用硫酸钠过滤，真空下浓缩。剩余物用填有1∶9乙酸乙酯∶己烷的硅胶柱(150克)色谱分离。用(1∶9)乙酸乙酯：己烷(300mL)，(1∶4)乙酸乙酯：己烷(1L)，(1∶3)乙酸乙酯：己烷(500mL)，(1∶1)乙酸乙酯：己烷(1L)洗脱，每份收集70mL洗脱液。蒸发53.69部分得到白色固体状13-(N-BOC-2’-TSE-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(2，1.24克，收率80％)。
1H NMR(CDCl3；TMS)：δ0.39(m，6H)；0.78(m，9H)；1.90(m，4H)；2.25(s，3H)；2.39(m)；2.53(s)；2.50-2.63(m)；3.83(d，1H)；4.20(d，m)；4.34(d，1H)；4.47(m，1H)；4.55s，1H)；5.00(d，1H)；5.28(m，1H)；5.49(m，1H)；5.68(m，1H)6.30(m，2H)；7.28(m，)；7.37(m，2H)；7.50(m，2H)；7.61(m，1H)；8.12(d，2H)
质谱(FAB高分辨)理论值：965.4514，实测值：964.4528实施例2 7-(O-乙氧甲基)-13-(N-Boc-2’-TSE-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(3)的制备
将13-(N-BOC-2’-TSE-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(2,100mg,O.104mM)在室温和氮气在二氨甲烷(1mL)中搅拌。向反应液中加入氯甲基乙基醚(58mL，O.624mM)和二异丙基乙基胺(109mL，0.624mM、)。两天后TLC表明反应完全．然后将反应液在二氯甲烷和水中分配。分离各层并用二氯甲烷重新提取水层。用硫酸钠干燥有机层，将其合并并在真空下蒸干。将粗产物进行硅胶(10克)色谱分离，并用(20-80)丙酮-己烷洗脱。每酚收集3mL洗脱液并用TLC进行检测。将13-28部分合并并在真空下蒸干得到白色固体状7-(O-乙氧甲基)-13-(N-BOC-2’-TSE-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(3,104mg，收率98％)。
TLC(硅胶)：(30-70)丙酮-己烷；Rf：0.48
1H NMR(CDCl3；TMS)：δ0.3-0.50(m，6H)；0.74-0.84(t，9H)；1.10-1.20(t，3H)；1.21(s，3H)；1.26(s，3H)；1.33(s，9H)；1.76(s，3H)；1.96(s，3H)；2．21(s，3H)；2.33-2.46(m，1H)；2.52(s，3H)；2.78-2.94(m，1H)；3.35-3.48(m，1H)；3.60-3.74(m，1H)；3.85-3.94(d，1H)；4.10-4.20(m，1H)；4.15-4.23(d，m)；4.30-4.37(d，1H)；4.56(s，1H)；4.75(s，2H)；4.92-5.00(d，m)；5.20-5.33(bd，1H)；5.43-5.55(bd，1H)：5.64．5.73(d，1H)；6.20-631(t，1H)；6.37(s，1H)；7.14-7.34(m，3H)；7.34-7.43(t，2H)；7.437.55(t，2H)；7.55-7.84(t，1H)；8.08-8.16(d，2H)实施例3 7-(O-乙氧甲基)-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(4)的制备
在室温和氮气下将7-(O-乙氧甲基)-13-(N-Boc-2’-TSE-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(3，104mg，0.102mM)在0.1N HCl的甲醇溶液中(1mL，由71mL乙酰氯和10mL甲醇制得)中搅拌。15分钟后TLC表明无起始物存在。将反应液在乙酸乙酯-5％碳酸氢钠之间进行分配。分离各层并用乙酸乙酯再提取水层。用硫酸钠干燥有机层，将其合并，并在真空下蒸干。将粗产物进行硅胶(10克)色谱分离，并用(30-70)丙酮-己烷洗脱。每份收集3mL洗脱液并进行TLC检测。将17-29部分合并并在真空下蒸干得到白色固体状7-(O-乙氧基甲基)-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(4，71mg，收率77％)。
TLC(硅胶)：(40-60)丙酮-己烷；Rf：0.64
1H NMR(CDCl3；TMS)：δ1.10-1.20(t，3H)；1.21(s，3H)；1.22(s，3H)；1.35(s，9H)；1.75(s，3H)；1.88(s，3H)；2.21(s，3H)；2.36(s，3H)；2.76-2.90(m，1H)；3.33-3.49(m，1H)；3.55(bs，1H)；3.59-3.73(m，1H)；3.80-3.90(d，1H)；4.03-4.22(m，2H)；4.24-4.34(d，1H)；4.61(ds，1H)；4.73(s，2H)；4.86-4.96(d，1H)；5.19-5.31(bd，1H)；5.41-5.54(bd，1H)；5.60-5.70(d，1H)；6.09-6.23(t，1H)；6.34(s，1H)；7.25-7.43(m，5H)；7.43-7.54(t，2H)；7.54-7.65(t，1H)；8.00-8.13(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+为908.4089；C48H62N1O16的理论值为908.4086；908，627，585，105，59，57。实施例4 7-(O-甲氧基乙氧基甲基)-13-(N-Boc-2’-TSE-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(5)的制备
室温充氮的条件下将13-(N-Boc-2’-TSE-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(2，100mg，0.104mM)在二氯甲烷(1mL)中搅拌，并用氯代MEM(71mL，0.624mM)和二异丙基胺(109mL，0.624mM)处理溶液。持续反应两天后反应仍未完全。再加入氯代MEM(71mL，0.624mM)和二异丙基胺(109m L，0.624mM)。继续反应三天后反应完全。将反应液在二氯甲烷和水之间进行分配。分离各层并用二氯甲烷再提取水层。用硫酸钠干燥有机层，将其合并并在真空下蒸干。将粗产物进行硅胶(11克)色谱分离，并用(20-80)丙酮-己烷洗脱。每份收集3mL洗脱液并进行TLC检测。将17-37部分合并并在真空下蒸干得到白色固体状7-(O-甲氧基乙氧基甲基)-13-(N-Boc-2’-TSE-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(5，101mg，收率93％)。
TLC(硅胶)：(30-70)丙酮-己烷； Rf：0.44
1H NMR(CDCl3；TMS)：δ0.3-0.51(m，6H)；0.75-0.85(t，9H)；1.21(s，3H)；1.26(s，3H)；1.33(s，9H)；1.76(s，3H)；1.95(s，3H)；2.20(s，3H)；2.31-2.45(m，1H)；2.52(s，3H)；2.80-2.95(m，1H)；3.35(s，3H)；3.47-3.60(m，1H)；3.51(s，2H)；3.70-3.82(m，1H)；3.86-3.95(d，1H)；4.13-4.24(m，2H)；4.29-4.37(d，1H)；4.55(s，1H)；4.75-4.87(q，2H)；4.92-5.00(d，1H)；5.20-5.34(bd，1H)；5.44-5.56(bd，1H)；5.65-5.73(d，1H)；6.19-6.33(t，1H)；6.36(s，1H)；7.23-7.43(m，5H)；7.44-7.54(t，2H)；7.54-7.64(t，1H)；8.06-8.16(d，2H).实施例5 7-(O-甲氧基乙氧基甲基)-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(6)的制备
室温充氮的条件下将7-(O-甲氧基乙氧基甲基)-13-(N-Boc-2’-TSE-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(5,101mg，0.096mM)在(80-20)乙酸-水(2mL)中搅拌。TLC表明在5小时内反应完全。将反应混合物冷冻干燥。粗产物进行硅胶(10克)色谱分离，用(30-70)丙酮-己烷洗脱。每份收集3mL洗脱液并进行TLC检测。将23-48部分合并并在真空下蒸干得到白色固体状7-(O-甲氧基乙氧基甲基)-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(6，90mg，收率100％)。
TLC(硅胶)：(30-70)丙酮-己烷； Rf：0.27
1H NMR(CDCl3；TMS)：δ1.20(s，3H)；1.24(s，3H)；1.35(s，9H)；1.75(s，3H)；1.87(s，3H)；2.21(s，3H)；2.36(s，3H)；2.81-2.96(m，1H)；3.34(s，3H)；3.50(s，2H)；3.46-3.60(m，1H)；3.66(bs，1H)；3.72-3.82(m，1H)；3.82-3.91(d，1H)；4.08-4.23(m，2H)；4.26-4.36(d，1H)；4.63 (bs，1H)；4.73-4.85(m，2H)；4.88-4.98(d，1H)；5.21-5.34(bd，1H)；5.52-5.62(bd，1H)；5.62-5.71(d，1H)；6.14-6.26(t，1H)；6.33(s，1H)；7.28-7.43(m，5H)；7.43-7.55(t，2H)；7.56-7.68(t，1H)；8.02-8.16(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+为938.4166；C49H64N1O17的理论值为938.4174；938，882，878，657，105，89，59，57。实施例6 7-(O-甲氧基甲基)-13-(N-Boc-2’-TSE-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(7)的制备
在室温充氮的条件下将13-(N-Boc-2’-TSE-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(2，100mg，0.104mM)在无水THF(1mL)中搅拌，并用氯甲基甲基醚(47mL，0.624mM)和二异丙基乙基胺(109mL，0.624mM)处理溶液。室温下放置过夜，在此期间THF蒸发至原体积的一半并产生沉淀。加入二氯甲烷(0.5mL)重新溶解沉淀。此时TLC表明反应未完全，于是将反应液浓缩至原体积的一半并用氯甲基甲基醚(47mL，0.624mM)和二异丙基乙基胺(109mL，0.624mM)处理。持续反应四天后反应完全。将反应液在二氯甲烷和水之间进行分配。分离各层并用二氯甲烷再提取水层。用硫酸钠干燥有机层，将其合并并在真空下蒸干。将粗产物进行硅胶(11克)色谱分离并用(20-80)丙酮-己烷洗脱。每份收集3mL洗脱液并进行TLC检测。将17-37部分合并并在真空下蒸干得到白色固体状7-(O-甲氧甲基)-13-(N-Boc-2’-TSE-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(7，76mg，收率72％)。
TLC(硅胶)：(30-70)丙酮-己烷；Rf：0.44
1H NMR (CDCl3；TMS)：δ0.3-0.52(m，6H)；0.74-0.85(t，9H)；1.22(s，3H)；1.26(s，3H)；1.33(s，9H)；1.77(s，3H)；1.97(s，3H)；2.21(s，3H)；2.32-2.47(m，1H)；2.53(s，3H)；2.75-2.90(m，1H)；3.30(s，3H)；3.86-3.94(d，1H)；4.10-4.20(m，1H)；4.15-4.24(d，1H)；4.30-4.36(d，1H)；4.56(s，1H)；4.63-4.70(d，1H)；4.70-4.79(d，1H)；4.92-5.02(d，1H)；5.22-5.34(bd，1H)；5.44-5.56(bd，1H)；5.67-5.74(d，1H)；6.20-6.30(t，1H)；6.39(s，1H)；7.24-7.34(m，3H)；7.34-7.44(t，2H)；7.45-7.55(t，2H)；7.56-7.65(t，1H)；8.07-8.16(d，2H).实施例7 7-(O-甲氧甲基)-13-(N-Boc-2’-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(8)的制备
在室温氮气保护下将7-(O-甲氧甲基)-13-(N-叔丁基氧羰-2’--TES-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(7，76mg，0.075mM)溶于(80-20)醋酸-水(2ml)。几分钟后，形成沉淀。加入四氢呋喃(2ml)使沉淀重新溶解。将反应液放置1.5天，一些四氢呋喃蒸发掉。TLC检测证明此时反应完全。将反应混合物冷冻干燥。粗产物进行硅胶柱色谱分离(10g)，(30-70)丙酮-己烷洗脱。每份收集3mL，TLC检测。在第15-29份中发现产物，将其合并真空蒸发得到白色固体状7-(O-甲氧甲基)-13-(N-Boc-2’-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(8，63mg，产率94％)。
TLC(硅胶)：(30-70)丙酮-己烷；Rf：0.28
1H NMR(CDCl3；TMS)：δ1.21(s，3H)；1.23(s，3H)；1.35(s，9H-)；1.76(s，3H)；1.90(s，3H)；2.21(s，3H)；2.37(s，3H)；2.72-2.87(m，1H)；3.29(s，3H)；3.56(bs，1H)；3.80-3.90(d，1H)；4.04-4.20(m，2H)；4.25-4.34(d，1H)；4.54-4.68(d，1H)；4.58(bs，1H)；4.68-4.75(d，1H)；4.87-4.96(d，1H)；5.20-5.31(bd，1H)；5.42-5.56(bd，1H)；5.62-5.70(d，1H)；6.10-6.23(t，1H)；6.36(s，1H)；7.24-7.44(m，5H)；7.44-7.54(t，2H)；7.54-7.66(t，1H)；8.01-8.13(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+为894.3943；C47H60N1O16的理论值为894.3912；894，838，613，571，553，107，57。实施例8 7-苄氧甲基-13-(N-Boc-2’-TES-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(9)的制备
在室温和氮气保护下将13-(N-Boc-2’-TES-β-苯基异丝氨酸基)浆果赤霉素III(2，100mg，0.104mM)在二氯甲烷中(1mL)搅拌并将溶液用苄基氯甲基醚(104mL，0.624mM，纯度80％)和二异丙基乙基胺(109mL，0.624mM)处理。将反应液放置2天，TLC检测反应完全。将反应液在二氯甲烷-水之间进行分配，分出各层，水层用二氯甲烷再提取。将有机层用硫酸钠干燥，合并，真空蒸馏。粗产物进行硅胶柱色谱分离(15g)，(20-80)丙酮-己烷洗脱。每份收集3mL，TLC检测。在第19-33份中发现产物，将其合并并真空蒸馏得到白色固体7-(O-苄氧甲基)-13-(N-Boc-2’-TES-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(9，92mg，产率81％)。
TLC(硅胶)：(30-70)丙酮-己烷；Rf：0.50
1H NMR(CDCl3；TMS)：δ0.3-0.53(m，6H)；0.70-0.85(t，9H)；1.22(s，3H)；1.26(s，3H)；1.33(s，9H)；1.79(s，3H)；1.95(s，3H)；2.20(s，3H)；2.33-2.46(m，1H)；2.51(s，3H)；2.83-2.98(m，1H)；3.88-3.96(d，1H)；4.15-4.29(m，2H)；4.30-4.38(d，1H)；4.40-4.49(d，1H)；4.55(s，1H)；4.64-4.74(d，1H)；4.86(s，2H)；4.90-5.00(d，1H)；5.21-5.34(bd，1H)；5.44-5.58(bd，1H)；5.67-5.76(d，1H)；6.21-6.32(t，1H)；6.40(s，1H)；7.20-7.44(m，5H)；7.44-7.54(t，2H)；7.54-7.64(t，1H)；8.06-8.15(d，2H).实施例9 7-(O-苄氧甲基)-13-(N-B0c-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(10)的制备
在室温和氮气保护下将7-(O-苄氧甲基)-13-(N-Boc-2’-TES-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(9，92mg，0.085mM)溶于(80-20)醋酸-水中(2mL)。几分钟后形成沉淀，加入四氢呋喃(2mL)将其重新溶解。将反应液在室温下放置1.5天，45℃放置3天后。此刻TLC表明反应基本完全。将反应混合物冷冻干燥。粗产物进行硅胶柱色谱分离(10g)，(30-70)丙酮-己烷洗脱。每份收集3mL，TLC检测。在第15-26份中发现产物，将其合并并真空蒸馏得到白色固体状7(-O-苄氧甲基)-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(10，70mg，产率85％)。
TLC(硅胶)：(30-70)丙酮-己烷；Rf：0.30
1II NMR(CDCl3；TMS)：δ1.22(s，3H)；1.23(s，3H)；1.35(s，9H)；1.78(s，3H)；1.87(s，3H)；1.95-2.10(m，1H)；2.21(s，3H)；2.36(s，3H)；2.82-2.96(m，1H)；3.48-3.58(bd，1H)；3.82-3.92(d，1H)；4.13-4.24(m，2H)；4.28 4.36(d，1H)；4.39-4.48(d，1H)：4.64(bs，1H)；4.65-4.72(d，1H)；4.81-4.90(m，2H)；4.90-4.98(d，1H)；5.22-5.32(bd，1H)；5.42-5.54(bd，1H)；5.62-5.71(d，1H)；6.12-6.24(t，1H)；6.37(s，1H)；7.21-7.43(m，10H)；7.43-7.54(t，2H)；7.55-7.65(t，1H)；8.04-8.15(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+为970.4242；C53H64N1O16的理论值为970.4225；970，914，689，647，105，57，43。实施例9a 7-TES-浆果赤霉素III-(4S，5R)-N-叔丁脲-2-(2，4-二甲氧苯基)-4-苯基-5-恶唑烷羧酸酯(11)的制备
将(4S，5R)-N-叔丁脲-2-(2，4二甲氧苯基)-4-苯基-5-恶唑烷酸甲酯粗品(475mg，1.07mM)溶于甲醇(10mL)，水(0.4mL)并加入碳酸钾(190mg)。搅拌过夜后TLC显示只有停在原点不动的点。真空浓缩溶液，将残余物在二氯甲烷和5％硫酸氢钠之间进行分配。分出各层，水层用乙酸乙酯提取。合并的有机层滤过无水硫酸钠并真空浓缩得到(4S，5R)-N-叔丁脲-2-(2，4-二甲氧苯基)-4-苯基-5-恶唑烷羧酸。将7-TES-浆果赤霉素III(500mg，0.71mM)溶于甲苯中(7mL)。将上述得到的所有(4s，5R)-N-叔丁脲-2-(2，4-二甲氧苯基)-4-苯基-5-恶唑烷羧酸加入二氯甲烷中，将其加热到80℃挥发掉二氯甲烷后加入DCC(240mg，1.15mM)和DMAP(45mg，0.36mM)。0.5小时后TLC表明不再有起始物，将浆料冷却。将反应液用硅藻土过滤，滤液真空浓缩后进行硅胶柱色谱分离(80g)，(1∶3)乙酸乙酯∶己烷湿法装柱，(1∶3)乙酸乙酯∶己烷(200ml)和(1∶2)乙酸乙酯∶己烷(1L)洗脱，每份收集40mL。在第28-47份中得到7-TES-浆果赤霉素III-(4S，5R)-N-叔丁脲-2-(2，4-二甲氧苯基)-4-苯基-5-恶唑烷羧酸酯(11，906mg)。
质谱：理论值1111.5198实测值1111.5189
1H NMR(CDCl3；TMS)：δ0.59(m，6H)；0.92(m，9H)；1.20(m)；1.92(s，3H)；2.13(s，3H)；2.19(s，3H)；2.50(m，1H)；3.84(m)；3.92(s，3H)；4.13(d，1H)；4.26(d，1H)；4.48(m，2H)；4.88(d，1H)；4.95(d，1H)；5.55(d，1H)；5.69(d，1H)；6.50(m)；6.72(m)：7.27-7.64(m，10H)；8.06(d，2H)实施例10 浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苯基)-4-苯基-5-恶唑烷羧酸酯(12)和7-表-浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁基氨基羰基)-2-(2，4-二甲氧苯基)-4-苯基-5-恶唑烷羧酸酯的制备
在室温和氮气保护下将浆果赤霉素III-13(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-(2，4-二甲氧苯基)-4-苯基-5-恶唑烷羧酸酯(11，198mg，0.178mM)在无水四氢呋喃中搅拌。向其中加入四-正丁基氟化铵(56mg，0.178mM)。TLC检测表明起始物在45分钟内反应完全，得到两个极性更大的产物。将反应混合物在乙酸乙酯-5％碳酸氢钠-盐水之间进行分配。水层用乙酸乙酯再提取。合并有机层，硫酸钠干燥，真空蒸馏。粗产物进行硅胶柱色谱分离(20g)，(50-50)乙酸乙酯-己烷洗脱。混合组份重新柱色谱分离。每份收集3mL，TLC检测。蒸馏第42-56份得到白色固体状浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苯基)-4-苯基-5-恶唑烷羧酸酯(12，61mg，产率34％)，蒸馏第24-31份得到白色固体状7-表-浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苯基)-4-苯基-5-恶唑烷羧酸酯(68mg，产率38％)。
7-表-浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苯基)-4-苯基-5-恶唑烷羧酸酯的数据：
TLC(硅胶)：(50-50)乙酸乙酯-己烷；Rf：0.39
1H NMR(CDCl3；TMS)：δ1.16(s，12H)；1.23(s，3H)；1.65(s，3H)；2.00(s，3H)；2.04(s，3H)；2.22(s，3H)；3.65-3.74(bd，1H)；3.86(s，3H)；3.90(s，3H)；4.34(s，2H)；4.57(s 1H)；4.80-4.92(m，2H)；4.94-4.98(d，1H)；5.58-5.61(d，1H)；5.73-5.78(d，1H)；6.23-6.33(t，1H)；6.49-6.56(d，1H)；6.53(s，1H)；6.70(s，1H)；6.86(s，1H)；7.26-7.58(m，8H)；7.58-7.66(t，1H)；8.01-8.09(d，2H).
有关浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苯基)-4-苯基-5-恶唑烷羧酸酯(12)的数据：
TLC(硅胶)：(50-50)乙酸乙酯-己烷；Rf：0.24
1H NMR(CDCl3；TMS)：δ1.16(s，12H)；1.28(s，3H)；1.66(s，3H)；1.90(s，3H)；1.98(s，3H)；2.26(s，3H)；2.43-2.55(m，2H)；3.73-3.81(d，1H)；3.84(s，3H)；3.91(s，3H)；4.11-4.16(d，1H)；4.21-4.27(d，1H)；4.36-4.47(m，1H)；4.50(s，1H)；4.82-4.92(bd，1H)；4.92-4.96(d，1H)；5.50-5.55(d，1H)；5.61-5.68(d，1H)；6.25-6.37(m， 2H)；6.47-6.55(m，2H)；6.71(s，1H)；7.23-7.57(m，8H)；7.57-7.64(t，1H)；8.00-8.07(d，2H).浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苯基-5-恶唑烷酸酯(12)的制备
在室温和氮气保护下，将浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苄基-5-恶唑烷酸酯(11，3.41g，3.07mmol)在30毫升干燥乙腈中搅拌，用三乙基胺三氢氟化物(5mL)处理，生成的粘稠浆状物在7小时后溶解。以TLC检测反应，7.5小时后反应完全。此时用乙酸乙酯稀释反应液，用5％的碳酸氢钠，5％的硫酸氢钠及盐水洗，有机层用硫酸钠干燥，减压蒸干。粗产物用硅胶进行色谱分离(300g)，依次用丙酮-己烷(25-75，1L)，(30-70，1L)及(40-60，1L)洗脱，每份40毫升，以TLC检测。将第72-92份合并，减压蒸干，得白色固体状浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苄基-5-恶唑烷酸酯(1 2，2.26g，74％产率)。
TLC(硅胶)：(50-50)乙酸乙酯-己烷；Rf；0.24
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ 1.16(s，12H)；1.28(s，3H)；1.66(s，3H)；1.90(s， 3H)；1.98(s，3H)；2.26(s，3H)；2.43-2.55(m，2H)；3.73-3.81(d，1H)；3.84(s，3H)；3.91 (s，3H)；4.11-4.16(d，1H)；4.21-4.27(d，1H)；4.36-4.47(m，1H)；4.50(s 1H)；4.82-4.92 (bd，1H)；4.92-4.96(d，1H)；5.50 5.55(d，1H)；5.61-5.68(d，1H)；6.25-6.37(m，2H)； 6.47-6.55(m，2H)；6.71(s，1H)；7.23-7.57(m，8H)；7.57-7.64(t，1H)；8.00-8.07(d， 2H).实施例11 7-(O-乙氧甲基)-浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苄基-5-恶唑烷酸酯(13)的制备
在室温和氮气保护下，将浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苄基-5-恶唑烷酸酯(12，61mg，0.06mM)在1mL二氯甲烷中搅拌，加入氯甲基乙醚(28mL，0.306mM)及二异丙基乙胺(53mL，0.306mM)，用TLC检测反应，两天反应仍未完全。此时，再次加入氯甲基乙醚(28mL，0.306毫摩尔)及二异丙基乙胺(53毫升，0.306毫摩尔)。5天后用二氯甲烷-水萃取反应液。合并有机层，用硫酸钠干燥，蒸干。粗产物用硅胶进行色谱分离(10克)，用丙酮-己烷从(20-80)到(30-70)梯度洗脱。每份3毫升，以TLC检测。将第35-57份合并，减压蒸干得到白色固体状7-(O-乙氧甲基)-浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苄基-5-恶唑烷酸酯(13，44毫克，69％产率)。
TLC(硅胶)(30-70)乙酸乙酯-己烷；Rf；0.67
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ1.08-1.18(t，3H)；1.18(s，9H)；1.21(s，3H)；1.26(s，3H)；1.74(s，3H)；1.98(s，3H)；2.06(s，3H)；2.26(s，3H)；2.74-2.88(m，1H)；3.38-3.48(m，1H)；3.62-3.73(m，1H)；3.82 3.94(d，1H)；3.84(s，3H)；3.92(s，3H)；4.10-4.21(m，2H)；4.21-4.30(d，1H)；4.58(s，1H)；4.74(s，2H)；4.82-4.92(d，1H)；4.94-4.98(d，1H)；5.55-5.59(d，1H)；5.62-5.70(d，1H)；6.26-6.37(t，1H)；6.37(s，1H)；6.47-6.56(m，2H)；6.75(s，1H)；7.25-7.66(m，9H)；8.02-8.11(d，2H).实施例12 7-(O-乙氧甲基)-13-(4S，5R)-N-((叔丁胺基羰基)-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(14)的制备
在室温和氮气保护下，将7-(O-乙氧甲基)-浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苄基-5-恶唑烷酸酯(13，44毫克，0.042毫摩尔)在(80-20)的乙酸-水溶液(2毫升)中搅拌，TLC检测反应，4小时后反应完全。将反应液冷冻干燥。粗产物进行硅胶色谱分离(10g)，以30-70的丙酮-己烷洗脱。每份3毫升，以TLC检测，在第17-32份发现产物，将其合并并蒸干得到白色固体状7-(O-乙氧甲基)-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(14，26毫克，68％收率)。
TLC(硅胶)(30-70)丙酮-己烷；Rf；0.39
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ1.09-1.17(t，3H)；1.20(s，3H)；1.21(s，3H)；1.23(s，9H)；1.75(s，3H)；1.87(s，3H)；1.88-2.01(t，1H)；2.20(s，3H)；2.23-2.32(d，2H)；2.39(s，3H)；2.75-2.88(m，1H)；3.34-3.45(m，1H)；3.58-3.70(m，1H)；3.81(s，1H)；3.81-3.87(d，1H)；4.05-4.15(dd，1H)；4.15-4.20(d，1H)；4.27-4.31(d，1H)；4.59-4.65(m，2H)；4.72(s，2H)；4.89-4.97(d，1H)；5.17-5.22(d，1H)；5.30-5.36(dd，1H)；5.63-5.70(d，1H)；6.09-6.19(t，1H)；6.33(s，1H)；7.27-7.41(m，5H)；7.43-7.54(t，2H)；7.57-7.65(t，1H)；8.06-8.12(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+为907.4240；C48H62N2O15的理论值为907.4228；907，627，567，281，263，235，205，136，105，59，43。实施例17 7-[O-(2，2，2-三氯乙氧)甲基]-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(21)及7-[O(2，2，2-三氯乙氧)甲氧甲基]-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(22)的制备
在室温和氮气保护下，将13-(N-叔丁氧羰-2’-TES-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(2，95毫克，0.099毫摩尔)在二氯甲烷(1毫升)中搅拌，将溶液用(1-1)的氯甲基-(2，2，2-三氯乙基)醚和氯甲基-(2，2，2-三氯乙氧)甲基醚的混合物(98毫升)，以及二异丙基乙胺(109毫升，0.624毫摩尔)处理。用TLC检测反应，显示22天反应仍未完全。再加入(1-1)的氯甲基-(2，2，2-三氯乙基)醚及氯甲基-(2，2，2-三氯乙氧)甲基醚的混合物(98毫升)，以及1，2-二氯乙烷(1毫升)。每天将反应液加热至75℃保持8小时，然后降至室温16小时，反应4天。然后在75℃反应24小时。将反应混合物进行硅胶色谱分离(15克)，以(25-75)丙酮-己烷洗脱。每份3收集毫升，以TLC检测，共含四个化合物。两个极性较小的化合物在10-13份中，两个大极性的化合物在14-33份中。将10-13份蒸干得剩余物，将其用(80-20)的乙酸-水(3毫升)处理，然后将反应液冷动干燥。TLC显示此产物与14-33份所含化合物相同。因此，合并所有剩余物并在E-Merck的A型HPLC硅胶柱上进行色谱分离，以丙酮-己烷从(20-80)到(40-60)进行梯度洗脱。将(52-66)份蒸干后得到白色固体状7-[O(2，2，2-三氯乙氧)甲基]-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(21，23毫克，23％产率)，将(68-88)份蒸干后得到白色固体状7-[O(2，2，2-三氯乙氧)甲氧甲基]-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(22，23毫克，22％产率)。
7-[O(2，2，2-三氯乙氧)甲基]-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(21)的数据：
TLC(硅胶)(25-75)乙酸乙酯-己烷：Rf；0.25
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ1.20(s，3H)；1.24(s，3H)；1.35(s，9H)；1.76(s，3H)；1.87(s，3H)；1.92-2.03(t，1H)；2.22(s，3H)；2.26-2.34(d，2H)；2.37(s，3H)；2.85-2.99(m，1H)；3.37-3.53(bs，1H)；3.80-3.89(d，1H)；3.97-4.06(d，1H)；4.12-4.25(m，3H)；4.27-4.34(d，1H)；4.63(bs，1H)；4.87-5.03(m，3H)；5.18-5.30(bd，1H)；5.37-5.47(bd，1H)；5.61-5.70(d，1H)；6.12-6.23(t，1H)；6.32(s，1H)；7.27-7.45(m，5H)；7.45-7.54(t，2H)；7.57-7.65(t，1H)；8.05-8.15(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+908.4089；C48H62N1O16的理论值为908.4068；908，627，585，105，59，57。
7-[O(2，2，2-三氯乙氧)甲氧甲基]-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(22)的数据：
TLC(硅胶)：(25-75)乙酸乙酯-己烷：Rf；0.17
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ 1.22(s，6H)；1.35(s，9H)；1.75(s，3H)；1.91(s，3H)；2.21(s，3H)；2.25-2.32(d，2H)；2.37(s，3H)；2.69-2.82(m，1H)；3.35-3.48(bs，1H)；3.80-3.86(d，1H)；4.13-4.26(m，4H)；4.26-4.34(d，1H)；4.63(bs，1H)；4.73-4.80(d，1H)；4.83-5.04(m，4H)；5.21-5.32(d，1H)；5.40-5.47(d，1H)；5.64-5.70(d，1H)；6.14-6.24(t，1H)；6.39(s，1H)；7.30-7.45(m，5H)；7.45-7.57(t，2H)；7.57-7.66(t，1H)；8.07-8.15(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+908.4089；C48H62N1O16的理论值为908.4068；908，627，585，105，59，57。实施例21 7-(O-甲氧甲基)-浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苄基-5-恶唑烷酸酯(26)的制备
在室温和氮气保护下，将浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苄基-5-恶唑烷酸酯(12，610毫克，0.612毫摩尔)在二氯甲烷(3毫升)中搅拌，将溶液用氯甲基甲醚(232毫升，3.06毫摩尔)及二异丙基乙胺(530毫升，3.06毫摩尔)处理。用TLC检测反应。24小时后反应完全。以二氯甲烷稀释反应液，用5％的硫酸氢钠，5％的碳酸氢钠洗，硫酸钠干燥，减压蒸干。粗产物上进行硅胶色谱分离(70克)，以丙酮-己烷从(25-75)到(30-70)梯度洗脱。每份20毫升，以TLC检测。将(31-47)份蒸干后得到白色固体状7-(O-甲氧甲基)-浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苄基-5-恶唑烷酸酯(小极性异构体26a，532毫克，84％产率)，将(48-57)份蒸干后得到白色固体状7-(O-甲氧甲基)-浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苄基-5-恶唑烷酸酯(大极性异构体26b，62毫克，10％产率)。7-(O-甲氧甲基)-浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苄基-5-恶唑烷酸酯(26a)的数据：
TLC(硅胶)：(30-70)丙酮-己烷；Rf；0.42
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ1.17(s，12H)；1.23(s，3H)；1.75(s，3H)；1.93(s， 3H)；2.07(s，3H)；2.21(s，3H)；2.66-2.83(m，1H)；3.29(s，3H)；3.78-3.90(m，1H)； 3.82(s，3H)；3.91(s，3H)；4.06-4.30(m，3H)；4.56-4.76(m，3H)；4.81-4.91(d，1H)；4.97 (s，1H)；5.58(s，1H)；5.62-5.70(d，1H)；6.24-6.36(t，1H)；6.39(s，1H)；6.45-6.57(m， 2H)；6.75(s，1H)；7.24-7.64(m，9H)；7.96-8.08(d，2H).7-(O-甲氧甲基)-浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苄基-5-恶唑烷酸酯(26b)的数据：
TLC(硅胶)：(30-70)丙酮-己烷：Rf；0.35
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ0.96(s，9H)；1.16(s，3H)；1.20(s，3H)；1.66(s，3H)；1.70(s，3H)；1.81(s，3H)；2.20(s，3H)；2.67-2.82(m，1H)；3.28(s，3H)；3.72-3.78(d，1H)；3.82(s，3H)；3.90(s，3H)；4.03-4.17(m，2H)；4.20-4.25(d，1H)；4.50-4.54(d，1H)；4.58-4.65(d，1H)；4.65-4.70(d，1H)；4.80-4.88(d，1H)；5.40-5.46(d，1H)；5.58-5.64(d，1H)；6.03-6.13(t，1H)；6.27(s，1H)；6.48-6.58(m，2H)；6.73(s，1H)；7.33-7.58(m，8H)；7.58-7.65(t，1H)；7.99-8.05(d，2H). 实施例22 7-(O甲氧甲基)-13-(N-(叔丁胺基羰基)-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(27)的制备
在室温、氮气保护下，将7-(O-甲氧甲基)-浆果赤霉素III-13-(4S，5R)-N-(叔丁胺基羰基)-2-(2，4-二甲氧苄基)-4-苄基-5-恶唑烷酸酯(594毫克，由实施例21得到的26a及26b，0.57毫摩尔)在(80-20)的乙酸-水溶液(25毫升)中搅拌，TLC检测反应，4小时后反应完全。将反应液冷冻干燥。将粗产物用硅胶色谱分离(60克)进行纯化，35-65的丙酮-己烷洗脱。每份15毫升，TLC检测，第27-45份含纯产物，合并、减压蒸干，得白色固体状7-(O甲氧甲基]-13-N-(叔丁胺基羰基)-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(27，385毫克，75％产率)。
TLC(硅胶)(30-70)丙酮-己烷：Rf；0.23
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ1.22(s，3H)；1.24(s，12H)；1.76(s，3H)；1.89(s，3H)；2.20(s，3H)；2.25-2.34(d，2H)；2.40(s，3H)；2.72-2.86(m，1H)；3.29(s 2H)；3.68(bs，1H)；3.81-3.88(d，1H)；4.07-4.15(dd，1H)；4.15-4.22(d，1H)；4.26-4.34(d，1H)；4.55(bs，1H)；4.60-4.74(m，3H)；4.89-4.96(d，1H)；5.06-5.16(bd，1H)；5.30-5.37(dd，1H)；5.64-5.70(d，1H)；6.10-6.20(t，1H)；6.36(s，1H)；7.27-7.40(m，5H)；7.45-7.55(t，2H)；7.58-7.66(t，1H)；8.06-8.14(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+893.4095；C47H61N2O15的理论值为893.4072；969，893，613，281，263，235，205，136，105。实施例35 2’-TES-7-(O-甲基硫基甲基)紫杉酚(41)的制备
在0℃，氮气保护下，将2’-TES紫杉酚(40，100mg，0.103mM)在0.4mL干燥乙腈中搅拌，将该溶液用二甲硫醚(58mL)及过氧苯甲酰(25mg)处理4次，每次间隔5分钟。反应物于0℃下保持3.5小时。然后以乙酸乙酯稀释，用5％的碳酸氢钠洗，用硫酸钠干燥，减压蒸干。粗产物用硅胶进行色谱分离(10g)，用乙酸乙酯-己烷(30-70)洗脱。每份3mL，以TLC检测。第24-46份含纯产物，合并、蒸干，得白色固体状2’-TES-7-甲基硫基甲基紫杉酚(41，54mg，51％)。
TLC(硅胶)：(30-70)乙酸乙酯-己烷：Rf；0.31
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ0.34-0.58(m，6H)；0.77-0.85(t，9H)；1.26(s，3H)；1.27(s，3H)；1.78(s，3H)；1.80-1.94(m，2H)；2.08(s，3H)；2.12(s，3H)；2.19(s，3H)；2.35-2.50(m，1H)；2.56(s，3H)；2.76-2.90(m，1H)；3.86-3.96(d，1H)；4.18-4.39(2d+1m，3H)；4.68(s，2H)；4.70-4.75(d，1H)；4.93-5.03(d，1H)；5.68-5.79(m，2H)；6.20-6.32(t，1H)；6.58(s，1H)；7.13-7.23(d，1H)；7.30-7.60(m，10H)；7.71-7.80(d，2H)；7.90-7.97(d，1H)；8.06-8.17(d，2H).实施例36 7-(O-甲基硫基甲基)紫杉酚(42)的制备
在室温、氮气保护下，将2’-TES-7-(O-甲基硫基甲基)紫杉酚(41，54mg，0.053mM)在(80-20)的乙酸-水溶液(6mL)中搅拌3小时，以TLC检测至反应完全。将反应液冷冻干燥。粗产物用5g硅胶进行色谱分离，以50-50的乙酸乙酯-己烷洗脱。每份1mL，以TLC检测，第11-35份含纯产物，合并、蒸干，得白色固体状7-(O-甲基硫基甲基)紫杉酚(42，42mg，88％)。
TLC(硅胶)：(40-60)乙酸乙酯-己烷：Rf；0.23
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ1.10(s，3H)；1.14(s，3H)；1.68(s，3H)；1.85(s， 3H)；2.04(s，3H)；2.11(s，3H)；2.20-2.28(d，2H)；2.30(s，3H)；2.64-2.80(m，1H)； 3.74-3.82(d，1H)；4.07-4.15(d，1H)；4.15-4.30(d+m，2H)；4.58(s，2H)；4.70-4.75(d， 1H)；4.82-4.92(d，1H)；5.55-5.64(d，1H)；5.68-5.76(d，1H)；6.04-6.15(t，1H)；6.44(s， 1H)；6.99-7.09(d，1H)；7.23-7.49(m，10H)；7.64-7.74(d，2H)；8.00-8.08(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+914.3429；C49H56N1O14S1的理论值为914.3421；990，914，836，629，286，268，240，210，121，105，61，43。实施例37 7-(O-甲基硫基甲基)-13-(N-叔丁氧羰-2’-TES-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(43)的制备
在0℃，氮气保护下，将13-(N-叔丁氧羰-2’-TES-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(2，287mg，0.298mM)在0.4毫升干燥乙腈中搅拌，此溶液用二甲硫醚(170mL)及过氧苯甲酰(73mg)处理4次每次间隔5分钟。反应物于0℃下保持4个小时，以TLC检测至反应完全。然后以乙酸乙酯稀释，用5％的碳酸氢钠-盐水洗，硫酸钠干燥，减压蒸干。粗产物用硅胶进行色谱分离(35g)以乙酸乙酯-己烷(30-70)洗脱。每份4mL，以TLC检测。第26-51份含纯产物，合并、蒸干，得白色固体状7-(O-甲基硫基甲基)-13-(N-叔丁氧羰-2’-TES-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(43，273mg，90％产率)。
TLC(硅胶)：(30-70)乙酸乙酯-己烷：Rf；0.46
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ0.30-0.49(m，6H)；0.71-0.84(t，9H)；1.26(s，3H)；1.32(s，9H)；1.77(s，3H)；1.80-1.93(t，2H)；2.05(s，3H)；2.12(s，3H)；2.15(s，3H)；2.19(s，3H)；2.33-2.44(m，1H)；2.53(s，3H)；2.78-2.89(m，1H)；3.87-3.95(d，1H)；4.16-4.23(d，H)；4.25-4.35(d+m，2H)；4.57(s，1H)；4.67(s，1H)；4.93-5.01(d，1H)；5.23-5.35(bs，1H)；5.46-5.56(d，1H)；5.67-5.75(d，1H)；6.23-6.32(t，1H)；6.57(s，1H)；7.23-7.33(m，3H)；7.33-7.41(t，2H)；7.43-7.53(t，2H)；7.53-7.63(t，1H)；8.06-8.14(d，2H).实施例38 7-(O-甲基硫基甲基)-13-(N-叔丁氧羰-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(44)的制备
在室温、氮气保护下，将7-(O-甲基硫基甲基)-13-(N-叔丁氧羰-2’-TES-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(43，273mg，0.267mM)在(80-20)的乙酸-水溶液(30mL)中搅拌4.5小时，以TLC检测至反应完全。将反应液冷冻干燥。粗产物用30g硅胶进行色谱分离，以70-30的乙酸乙酯-己烷洗脱。每份4mL，以TLC检测，第15-25份含纯产物，合并、蒸干，得白色固体状7-(O-甲基硫基甲基)-13-(N-叔丁氧羰-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(44，225mg，93％产率)。
TLC(硅胶)：(30-70)乙酸乙酯-己烷：Rf；0.26
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ1.20(s，3H)；1.34(s，9H)；1.75(s，3H)；1.79-1.96(m，2H)；1.89(s，3H)；2.11(s，3H)；2.14(s，3H)；2.18(s，3H)；2.23-2.32(d，2H)；2.36(s，3H)；2.73-2.85(m，1H)；3.54-3.63(d，1H)；3.83-3.91(d，1H)；4.13-4.21(d，1H)；4.25-4.34(d+m，2H)；4.55-4.70(m，3H)；4.90-4.98(d，1H)；5.20-5.32(bd，1H)；5.44-5.56(bd，1H)；5.64-5.72(d，1H)；6.14-6.24(t，1H)；6.54(s，1H)；7.24-7.44(m，5H)；7.44-7.53(t，2H)；7.54-7.64(t，1H)；8.04-8.14(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+910.3697；C47H60N1O15S1的理论值为910.3683；910，629，587，569，105，61，57，43。实施例39 2’-TES-7-(O-苯基硫基甲基)紫杉酚(45)的制备
在0℃，氮气保护下，将2’-TES紫杉酚(40，104mg，0.107mM)在0.4mL干燥乙腈中搅拌，此溶液用苯硫基甲烷(97毫升)及过氧苯甲酰(25毫克)处理4次，每次间隔5分钟。反应物于0℃下保持5个小时并在冰箱中放置过夜，以TLC检测至反应完全。然后以乙酸乙酯稀释，用5％的碳酸氢钠洗，硫酸钠干燥，减压蒸干。粗产物进行硅胶色谱分离(12g)，以乙酸乙酯-己烷(30-70)洗脱。每份4mL，以TLC检测。第18-43份含纯产物，合并、蒸干，得白色固体状2’-TES-7-(O-苯基硫基甲基)紫杉酚(45，91mg，78％产率)。
TLC(硅胶)：(30-70)乙酸乙酯-己烷：Rf；0.47
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ0.37-0.59(m，6H)；0.78-0.90(t，9H)；0.88(s，3H)；1.16(s，3H)；1.79(s，3H)；1.95(s，3H)；2.09(s，3H)；2.35-2.48(m，1H)；2.56(s，3H)；2.74-2.87(m，1H)；3.89-3.97(d，1H)；4.20-4.28(d，1H)；4.30-4.44(m，2H)；4.70-4.75(d，1H)；4.90-4.99(d，1H)；5.05(s，2H)；5.69-5.76(m，2H)；6.18-6.30(t，1H)；6.52(s，1H)；7.11-7.63(m，16H)；7.72-7.80(d，2H)；8.07-8.17(d，2H).实施例40 7-(O-苯基硫基甲基)紫杉酚(46)的制备
在室温、氮气保护下，将2’-TES-7-(O-苯基硫基甲基)紫杉酚(45，91mg)在(80-20)的乙酸-水溶液(10mL)中搅拌2小时，以TLC检测至反应完全。将反应液冷冻干燥。粗产物用10g硅胶进行色谱分离，以70-30的乙酸乙酯-己烷洗脱。每份3mL，以TLC检测，第10-30份含纯产物，合并、蒸干，得白色固体状7-(O-苄基硫基甲基)紫杉酚(46，62mg，77％产率)。
TLC(硅胶)：(40-60)乙酸乙酯-己烷：Rf；0.26
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ1.06(s，3H)；1.11(s，3H)；1.69(s，3H)；1.86(s，3H)；1.89(s，3H)；2.18-2.27(d，2H)；2.30(s，3H)；2.60-2.76(m，1H)；3.74-3.83(d，1H)；4.07-4.14(d，1H)；4.16-4.30(m，2H)；4.69-4.74(d，1H)；4.77-4.86(d，1H)；4.95(s，2H)；5.55-.5.64(d，1H)；5.68-5.76(dd，1H)；6.04-6.14(t，1H)；6.36(s，1H)；7.04-7.14(t，2H)： 7.14-7.47(m，14H)；7.47-7.56(t，1H)；7.62-7.70(d，2H)；7.97-8.07(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+976.3557；C54H58N1O14S1的理论值为976.3578；1052，976，836，691，286，268，240，210，123，105，77，43。实施例41 7-O-甲基紫杉酚(47)的制备
在0℃，氮气保护下，7-(O-苄基硫基甲基)紫杉酚(46，50mg，0.051mM)在2mL无水乙醇中搅拌，用溶于1mL无水乙醇的0.5mLRaney镍处理(Raney镍用前用水(5倍量)，丙酮，及乙醇洗)，几分钟后将反应液升至室温。以TLC检测反应。40分钟后将反应液用硅藻土过虑，用无水乙醇洗。粗产物进行硅胶色谱分离(5g)，以从30-70到70-30的乙酸乙酯-己烷梯度洗脱。每份1mL，以TLC检测，第55-78份含不纯的产物，合并、减压蒸干，不纯产物重用HPLC级硅胶进行色谱分离，以(35-65)的丙酮-己烷洗脱，得白色固体状7-O-甲基紫杉酚(47，13mg，30％产率)。
TLC(硅胶)：(35-65)乙酸乙酯-己烷；Rf：0.44
氢谱(CDCl3；TMS)：
δ1.20(s，6H)；1.68(s，3H)；1.82(s，3H)；2.22(s，3H)；2.25-2.34(dd，2H)；2.38(s，3H)；2.64-2.80(m，1H)；3.34(s，3H)；3.63-3.74(d，1H)；3.74-3.91(m，2H)；4.12-4.22(d，1H)；4.25-4.34(d，1H)；4.74-4.84 bs，1H)；4.90-5.01(d，1H)；5.60-5.70(d，1H)；5.74-5.84(dd，1H)；6.12-6.24(t，1H)；6.39(s，1H)；7.06-7.14(d，1H)；7.30-7.56(m，10H)；7.56-7.66(t，1H)；7.21-7.32(d，2H)；8.04-8.16(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+868.3534；C48H54N1O14的理论值为868.3544；868，583，286，268，240，210，121，105，43。实施例42 7-[O-乙基(1-硫基乙基)]紫杉酚(49)的制备
在0℃，氮气保护下，将2’-TES紫杉酚(40，200mg，0.207mM)在0.8毫升干燥乙腈中搅拌，此溶液用二甲硫醚(0.178mL)及过氧苯甲酰(50mg)处理4次，每次间隔5分钟。反应物在0℃继续反应3小时，在制冷器中反应5小时并置冰箱中过夜，以TLC检测反应。然后以乙酸乙酯稀释，用5％的碳酸氢钠洗，有机层用硫酸钠干燥，减压蒸干。粗产物进行硅胶色谱分离(25g)，以从30-70到90-10的乙酸乙酯-己烷梯度洗脱。每份5mL，以TLC检测，含2’-TES 7-乙基硫基乙基紫杉酚(48)的部分合并，减压蒸干。此粗产物在室温、氮气保护下，在(80-20)的乙酸-水溶液(3mL)中搅拌，以TLC检测，发现2小时后反应完全。将反应液冷冻干燥。产物用HPLC级硅胶进行色谱分离，以45-55的乙酸乙酯-己烷洗脱，仍不纯的产物再次用HPLC级硅胶进行色谱分离，以从30-70到40-60的乙酸乙酯-甲苯梯度洗脱，得白色固体状7-[O-乙基(1-硫基乙基)]紫杉酚(49，17mg)。
TLC(硅胶)：(50-50)乙酸乙酯-己烷；Rf；0.5
氢谱(CDCl3；TMS)
δ1.12-1.32(2s+1t，9H)；1.50-1.56(d，3H)；1.67-1.84(m，5H)；1.92(s，3H)；2.18(s，3H)；2.38(s，3H)；2.54-2.70(m，1H)；2.70-2.84(m，1H)；3.68-3.74(d，1H)；3.82-3.90(d，1H)；4.13-4.23(d，1H)；4.264.35(d，1H)；4.50-4.60(dd，1H)；4.64-4.74(q，1H)；4.80(bs，1H)；4.92-5.01(d，1H)；5.62-5.70(d，1H)；5.75-5.84(dd，1H)；6.13-6.24(t，1H)；6.55(s，1H)；7.05-7.14(d，1H)；7.30-7.57(m，10H)；7.57-7.66(t，1H)；7.72-7.78(d，2H)；8.07-8.16(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+942.3713；C51H60N1O14S1的理论值为942.3734；942，880，854，836，286，268，240，210，122，105，89，77，43。实施例44 13-(N-Cbz-2’-TES-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(51)的制备
该化合物由13-(N-Cbz-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(50)制备(参见U.S.No.PCT/US 93/11827，93年12月13日递交及WO 94/13655，94年6月23日公开)，其方法与实施例1由13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III制备13-(N-Boc-2’-TES-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III相同。实施例45 13-(2’-TES-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(52)的制备
在室温、氮气保护下，将13-(N-苄氧羰基-2’-TES-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(51，217mg，0.217mM)在2mL干燥四氢呋喃-3mL甲醇中搅拌，加入100mg甲酸铵及60mg10％的钯/碳。反应持续30分钟，此时TLC显示反应完全。以硅藻土过滤，乙酸乙酯洗，合并滤液，用5％的碳酸氢钠-盐水洗，硫酸钠干燥，减压蒸干。残余物以甲苯溶解两次并蒸干，再用乙酸乙酯-己烷溶解并蒸干。得白色固体状13-(2’-TES-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(52，186毫克)。
TLC(硅胶)：(50-50)乙酸乙酯-己烷；Rf；0.36
氢谱(CDCl3；TMS)
1H NMR(CDCL3；TMS)：d 0.43-0.57(m，6H)；0.78-0.92(t，9H)；1.03(s，3H)；1.14(s，3H)；1.54(s，3H)；1.73(s，3H)；2.08(s，3H)；2.21(s，3H)；2.38-2.52(m，1H)；3.61-3.69(d，1H)；4.01-4.12(2d，2H)；4.13-4.24(2d，2H)；4.24-4.35(dd，1H)；4.81-4.89(d，1H)；5.49-5.56(d，1H)；5.93-6.05(t，1H)；6.18(s，1H)；7.03-7.30(m，5H)；7.40-7.50(t，2H)；7.54-7.63(t，1H)；7.90-7.98(d，2H).实施例46 13-(N-(叔丁胺基羰基)2’-TES-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(53)的制备
在0℃、氮气保护下，将13-(2’-TES-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(52，186mg，0.215mM)在2mL干燥四氢呋喃中搅拌，用注射器加入异氰酸叔丁醇酯(0.03mL)。5分钟后，升至室温，以TLC检测反应。2小时后再加入异氰酸叔丁醇酯(0.01mL)，反应共进行4.5小时，此时TLC显示已反应完全。反应液减压蒸干，残余物用20g硅胶进行色谱分离，用40-60的乙酸乙酯-己烷洗脱。每份2mL，以TLC检测。第20-72份含纯产物，合并、减压蒸干，得白色固体状13-(N-(叔丁胺基羰基)2’-TES-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(53，193mg)。
TLC(硅胶)：(50-50)乙酸乙酯-己烷；Rf：0.61
氢谱(CDCl3；TMS)
1H NMR(CDCL3；TMS)：d 0.14-0.38(m，6H)；0.64-0.74(t，9H)；1.08(s，3H)；1.15(s.9H)；1.20(s，3H)；1.63(s，3H)；1.86(s，3H)；2.16(s，3H)；2.52(s，3H)；2.60-2.66(d，1H)；3.72-3.79(d，1H)；4.11-4.18(d，1H)；4.20-4.28(d，1H)；4.28-4.38(m，1H)；4.46-4.50(d，1H)；4.88-4.96(m，2H)；5.10-5.18(d，1H)；5.22-5.30(d，1H)；5.58-5.64(d，1H)；6.12-6.24(t，1H)；6.26(s，1H)；7.15-7.33(m，5H)；7.36-7.66(t，2H)；7.47-7.55(t，1H)；7.99-8.06(d，2H).实施例47 13-(N-(叔丁胺基羰基)-2’-TES-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III7-O-甲基硫基甲基醚(54)的制备
在0℃，氮气保护下，将13-(N-(叔丁胺基羰基)2’-TES-b-苯基异丝氨酸)浆果赤霉素III(53，193mg，0.203mM)在2mL干燥乙腈中搅拌，用注射器加入二甲硫醚(0.115mL)，每5分钟1次加入4次过氧苯甲酰(50mg)。30分钟后全部加完，2小时后TLC显示反应完全。反应液用乙酸乙酯及5％的碳酸氢钠萃取。有机层用硫酸钠干燥，减压蒸干。粗产物用20g硅胶进行色谱分离，以乙酸乙酯-己烷(30-70)洗脱。每份2mL，以TLC检测。第25-61份含纯产物，合并、蒸干，得白色固体状13-(N-(叔丁胺基羰基)-2’-TES-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基硫基甲基醚(54，178mg)。
TLC(硅胶)：(50-50)乙酸乙酯-己烷；Rf；0.34
氢谱(CDCl3；TMS)：
1H NMR(CDCL3；TMS)：d 0.14-0.40(m，6H)；0.64-0.76(t，9H)；1.16(s，3H)； 1.17(s.12H)；1.70(s，3H)；1.74-1.88(m，1H)；2.00(s，3H)；2.03(s，3H)；2.11(s，3H)； 2.14-2.24(m，1H)；2.30-2.44(m，1H)；2.54(s，3H)；2.71-2.86(m，1H)；3.79-3.88(d， 1H)；4.10-4.23(m，2H)；4.23-4.29(d，1H)；4.47-4.51(d，1H)；4.54-4.61(d，1H)；4.87- 4.95(d+s，2H)；5.12-5.20(d，1H)；5.24-5.30(d，1H)；5.60-5.68(d，1H)；6.09-6.21(t， 1H)；6.49(s，1H)；7.17-7.34(m，5H)；7.38-7.46(t，2H)；7.48-7.56(t，1H)；7.99-8.08(d， 2H).实施例48 13-(N-(叔丁胺基羰基)-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基硫基甲基醚(55)的制备
在室温、氮气保护下，将13-(N-(叔丁胺基羰基)2’-TES-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基硫基甲基醚(54，178mg，0.174mM)在25mL(80-20)的乙酸-水溶液中搅拌，TLC显示5分钟后反应完全。放于冰箱中过夜。粗产物用20g硅胶色谱分离，以乙酸乙酯-己烷(50-50)洗脱。每份3mL，以TLC检测。第30-60份发现含13-(N-(叔丁胺基羰基)-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基硫基甲基醚(55)为白色固体。
TLC(硅胶)：(50-50)乙酸乙酯-己烷；Rf；0.47
氢谱(CDCl3；TMS)：
1H NMR(CDCL3；TMS)：d 1.20(s，3H)；1.24(s，12H)；1.71(s，3H)；2.00(s，3H)；2.12(s，3H)；2.20(s，3H)；2.27-2.35(d，2H)；2.40(s，3H)；2.74-2.88(m，1H)；3.72-3.79(d，1H)；3.84-3.90(d，1H)；4.15-4.22(d，1H)；4.26-4.35(m，2H)；4.54(s，1H)；4.61-4.70(m，2H)；4.93-4.99(d，1H)；5.10-5.16(d，1H)；5.33-5.40(dd，1H)；5.67-5.74(d，1H)；6.10-6.21(t，1H)；6.54(s，1H)；7.28-7.42(m，5H)；7.45-7.54(t，2H)；7.58-7.65(t，1H)；8.08-8.14(d.2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+909.3822；C47H61N2O14S1的理论值为942.3734；281，263，235，205，182，136，105，61，43。实施例49 13-(N-(叔丁胺基羰基)-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基醚(56)的制备
将4mL用无水乙醇湿化Raney镍在0℃、氮气保护下搅拌，用注射器加入2mL13-(N-(叔丁胺基羰基)-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基硫基甲基醚(55，52mg，0.057mM)的无水乙醇溶液。反应及洗涤过程均保持在0℃。反应TLC检测并进行5小时。Raney镍沉降后吸取上清液，如此重复4次，加入四氢呋喃(20mL)，搅拌2分钟，吸取清液。合并的洗液减压蒸干，得50mg固体，粗产物用5gHPLC级硅胶进行色谱分离，以50-50的乙酸乙酯-己烷洗脱，每份2mL，以TLC检测。在第29-40份发现含有白色固体状13-(N-(叔丁胺基羰基)-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基醚(56，18mg)。
TLC(硅胶)：(50-50)乙酸乙酯-己烷；Rf；0.32
氢谱(CDCl3；TMS)：
1H NMR(CDCL3；TMS)：d 1.19(s，3H)；1.22(s，9H)；1.71(s，3H)；1.88(s， 3H)；2.16(s，3H)；2.21(s，3H)；2.23-2.33(d，2H)；2.41(s，3H)；2.63-2.78(m，1H)；3.32 (s，3H)；3.78-3.91(m，2H)；4.07-4.20(m，2H)；4.23-4.32(d，1H)；4.59(bs，1H)；4.91(s， 1H)；4.93-5.01(d，1H)；5.24-5.34(dd，1H)；5.39-5.49(d，1H)；5.62-5.70(d，1H)；6.04- 6.18(t，1H)；6.40(s，1H)；7.22-7.40(m，5H)；7.42-7.53(t，2H)；7.54-7.64(t，1H)；8.00- 8.12(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+863.3992；C46H59N2O14的理论值为863.3966；583，523，281，263，235，205，182，136，105。实施例50 13-(N-(叔丁胺基羰基)-2’-TES-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素-III7-O-甲基醚(57)的制备
将8mL用无水乙醇湿化Raney镍在0℃、氮气保护下搅拌，用注射器加入2mL 13-(N-(叔丁胺基羰基)-2’-TESb-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III7-O-甲基硫基甲基醚(54，100mg，0.098mM)的无水乙醇溶液。反应及洗涤过程均保持在0℃。以TLC检测反应3小时，此时反应近完全。Raney镍沉降后吸取上清液，如此重复9次，加入四氢呋喃(40mL)，搅拌2分钟，吸取清液。合并的洗液减压蒸干，得60mg固体，粗产物用10g硅胶进行色谱分离，以30-70的乙酸乙酯-己烷洗脱，每份3mL，以TLC检测。第15-44份合并、减压蒸干，得白色固体状13-(N-(叔丁胺基羰基)-2’-TES-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基醚(57，56mg)。
TLC(硅胶)：(30-70)乙酸乙酯-己烷；Rf：0.29
氢谱(CDCl3；TMS)：
1H NMR(CDCL3；TMS)：d 0.19-0.46(m，6H)；0.70.0.82(t，9H)；1.22(s，3H)； 1.25(s，3H)；1.27(s，9H)；1.75(s，3H)；2.00(s，3H)；2.22(s，3H)；2.36-2.50(m，1H)； 2.65(s，3H)；3.37(s，3H)；3.86-3.95(m，2H)；4.19-4.26(d，1H)；4.30-4.38(d，1H)； 4.54-4.60(d，1H)；4.96-5.06(d，1H)；5.16(s，1H)；5.18(s，1H)；5.26-5.35(d，1H)；5.65- 5.74(d，1H)；6.20-6.30(t，1H)；6.46(s，1H)；7.24-7.40(m，5H)；7.44-7.55(t，2H)；7.57- 7.65(t，1H)；8.07-8.16(d，2H).实施例51 13-(N-(叔丁胺基羰基)-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基醚(56)的制备
在室温、氮气保护下，将13-(N-(叔丁胺基羰基)-2’-TES-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基醚(57，56mg，0.057mM)在2mL(80-20)的乙酸-水溶液中搅拌，TLC表明10分钟后反应完全。将反应液冷冻干燥。粗产物用7g HPLC级硅胶进行色谱分离，以50-50及60-40的乙酸乙酯-己烷各50mL洗脱，每份2m L，以TLC检测。发现第22-35份含有13-(N-(叔丁胺基羰基)-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基醚(56，38mg)，蒸干后为白色固体。
TLC(硅胶)：(60，40)乙酸乙酯，己烷；Rf：0.42
氢谱(CDCl3；TMS)：
1H NMR(CDCL3；TMS)：d 1.20(s，3H)；1.22(s，3H)；1.23(s，9H)；1.72(s， 3H)；1.89(s，3H)；2.21(s，3H)；2.23-2.32(d，1H)；2.41(s，3H)；2.63-2.78(m，1H)； 2.78-2.92(m，3H)；4.12-4.20(d，1H)；4.26-4.33(d，1H)；4.57-4.63(m，1H)；4.70(s， 1H)；4.92-5.00(d，1H)；5.20-5.34(m，2H)；5.60-5.68(d，1H)；6.07-6.17(t，1H)；6.41 (s，1H)；7.24-7.40(m，5H)；7.44-7.53(t，2H)；7.56-7.65(t，1H)；8.05-8.11(d，2H).实施例52 13-(N-叔丁氧羰-2’-TES-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(2)的制备
在室温、氮气保护下，将13-(2’-TES-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(52，360mg，0.401mM)在2mL干燥四氢呋喃中搅拌，加入含0.06mL三乙胺的1mL焦碳酸二叔丁酯的干燥四氢呋喃溶液。反应共进行20小时直至TLC显示反应完全。反应液减压蒸干，残余物用40g硅胶色谱分离，以40-60的乙酸乙酯-己烷洗脱，每份15mL，以TLC检测。第11-23份含有白色固体状的13-(N-叔丁氧羰-2’-TES-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(2，360mg)。
TLC(硅胶)40-60乙酸乙酯-己烷；Rf：0.46
氢谱(CDCl3；TMS)：
1H NMR(CDCL3；TMS)：d 0.28-0.52(m，6H)；0.74-0.85(t，9H)；1.16(s，3H)；1.30(s.3H)；1.31(s，9H)；1.69(s，3H)；1.90(s，3H)；2.24(s，3H)；2.33-2.45(m，1)；2.53(s，3H)；3.80-3.88(d，1H)；4.15-4.23(d，1H)；4.28-4.37(d，1H)；4.39-4.50(m，1H)；4.55(s，1H)；4.94-5.04(d，1H)；5.21-5.34(bd，1H)；5.40-5.54(bd，1H)；5.65-5.74(d，1H)；6.23-6.35(m，2H)；7.21-7.43(m，5H)；7.43-7.55(t，2H)；7.55-7.65(t，1H)；8.04-8.16(d，2H).实施例53 13-(N-Boc-2’-TES-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基醚(57)的制备
将5mL用无水乙醇湿化的Raney镍在0℃、氮气保护下搅拌，用注射器加入2mL13-(N-(叔丁氧羰-2’-TES-b-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基硫基甲基醚(44，50mg，0.055mM)的无水乙醇溶液。反应及洗涤过程均保持在0℃。以TLC检测反应，30分钟后不再有原料。Raney镍沉降后吸取上清液，如此重复11次，加入无水乙醇(10mL)，搅拌2分钟，吸取清液。合并的洗液减压蒸干，得33mg固体，粗产物用10g HPLC级的硅胶进行色谱分离，以从40-60到60-40的乙酸乙酯-己烷梯度洗脱，每份2mL，以TLC检测。第27-40份含有白色固体状的13-(N-Boc-2’-TES-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III 7-O-甲基醚(57，21mg)。
TLC(硅胶)：40-60乙酸乙酯-己烷；Rf：0.25
氢谱(CDCl3；TMS)：
1H NMR(CDCL3；TMS)：d 1.16(s，6H)；1.28(s，9H)；1.65(s，3H)；1.83(s，3H)；2.15(s，3H)；2.30(s，3H)；2.57-2.75(m，1H)；3.28(s，3H)；3.32-3.48(m，1H)；3.70-3.88(m，2H)；4.01-4.16(d，1H)；4.18-4.30(d，1H)；4.56(s，1H)；4.83-4.98(d，1H)；5.13-5.27(d，1H)；5.32-5.44(d，1H)；5.53-5.65(d，1H)；6.04-6.19(t，1H)；6.36(s，1H)；7.13-7.37(m，5H)；7.37-7.48(t，2H)；7.48-7.60(t，1H)；7.94-8.08(d，2H).
质谱(FAB，m/z)测得(M+H)+864.3805；C46H58N1O15的理论值为864.3806；808，730，583，541，523，105，77，57，43。制备1 7-(O-烯丙基)-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III的制备
将13-(N-叔丁氧羰-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(2，1mmol)的二氯甲烷溶液用烯丙基三氯乙酰亚胺(2mmol)及三氟甲烷磺酸(25mL)处理并将反应液在室温搅拌48小时。过滤，滤液用5％的碳酸氢钠水溶液洗，有机层用MgSO4干燥，溶液减压蒸干。残余物用硅胶柱经色谱纯化，得7-(O-烯丙基)-13-(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III。类似与Kloosterman，M.；de Nijs，M.P.；van Boom，J.H.J.Carbohyd.Chem.1986，5，2247。制备2 7-(O-烯丙基)-13-(N-叔丁氧羰-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III的制备
将氢化钠(在矿物油中的55％分散液，43mg，1mmol)用倾析的方法以正己烷洗三次，在0℃下加入13-(N-叔丁氧羰-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(2，1mmol)的干燥二甲基甲酰胺DMF(6mL)溶液，反应混合物室温下搅拌30分钟。然后用烯丙基溴(1.3mmol)处理并再搅拌60分钟。反应以5％的氯化铵水溶液终止并用乙醚萃取。有机层用MgSO4干燥，溶液减压蒸干。残余物经硅胶色谱纯化，得7-(O-烯丙基)-13-(N-叔丁氧羰-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III。类似与 Lakhmiri，R.；Lhoste，P.；Sinou，D.Tetrahedron Lett.1989，30，4669.制备3 7-(O-烯丙基)-13-(N-叔丁氧羰-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III的制备
氩气下，将三(二苯亚甲基酮)二钯(1.125mmol)及1，4-二(二苯膦)丁烷(0.1mmol)加入四氢呋喃(2mL)中。将该溶液用13-(N-叔丁氧羰-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III(2，1mmol)及烯丙基乙酸酯的四氢呋喃(2mL)溶液处理。65℃下搅拌4小时，溶液减压蒸干，残余物经硅胶色谱纯化，得7-(O-烯丙基)-13-(N-叔丁氧羰-β-苄基异丝氨酸)-浆果赤霉素III。
按照实施例40、41及42以及制备1、2和3描述的方法但使用实施例2及11的适当的起始物制得了以下7-醚-紫杉酚类似物：
7-(O-甲基)-13(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III；
7-(O-甲基)-13(N-叔丁胺基羰基-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III；
7-(O-乙基)-13(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III；
7-(O-乙基)-13(N-叔丁胺基羰基-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III；
7-(O-丙基)-13(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III；
7-(O-丙基)-13(N-叔丁胺基羰基-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III；
7-(O-烯丙基)-13(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III；
7-(O-烯丙基)-13(N-叔丁胺基羰基-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III；
7-(O-苄基)-13(N-Boc-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III；
7-(O-苄基)-13(N-叔丁胺基羰基-β-苯基异丝氨酸)-浆果赤霉素III。
紫杉酚以及其他起始的紫杉酚类似物是已知或可以通过已知的方法制得的。参见紫杉酚的化学，Pharmac.Ther.，52卷，1-34页，1991以及： U.S.Patent Nos.4,814,470；4,857,653；4,942,184；4,924,011；4,924,012； 4,960,790；5,015,744；5,059,699；5,136,060；5,157,049；4,876,399；5,227,400， 5,254,580 as well as PCT Publication No.WO 92/09589，European Patent Application 90305845.1(Publication No.A2 0 400 971)，89400935.6 (Publication No.A1 0 366 841)and 90402333.0(Publication No.0 414 610 A1)，87401669.4(A1 0 253 739)，92308608.6(A1 0 534 708)，92308609.4(A1 534 709)，and PCT Publication Nos.WO 91/17977，WO 91/17976，WO 91/13066，WO 91/13053所有这些均在此引入本文作为参考。
本发明的化合物可以用药物本身的制成药物制剂，也可用其药物可接受的盐，尤其是无毒的药物可接受的加成盐或可接受的碱式盐制的形式成制剂。可按照常规的化学方法由含有酸性或碱性基团的本发明的化合物制备这些盐类。
通常，可将游离的碱或酸与化学当量的或过量的可生成所需盐的无机或有机酸在适当的溶剂或各种混合溶剂中反应制备该盐。例如，将游离碱溶于适当的酸的水溶液中，通过标准技术(例如蒸发溶液)回收该盐。或者，可将游离碱溶于有机溶剂中，例如低级链烷醇、醚、烷基酯或其混合物，例如，甲醇、乙醇、乙醚、乙酸乙酯、乙酸乙酯-乙醚溶液及其类似物，随后加入适当的酸生成相应的盐。可通过标准技术回收盐，例如滤出溶液中自然析出的盐或者加入一种不能溶解该盐的溶剂使其沉淀将其回收。
本发明的紫杉酚衍生物因其细胞毒性及抗癌活性可用于癌症的治疗。新化合物可以片剂、丸剂、粉末混合物、胶囊、注射剂、溶液、栓剂、乳剂、胶体、food premix以及其它适合的形式给药。含有化合物的药物制剂通常和无毒的药物有机载体或无毒的药无机无机载体混合，通常是每剂量单位0.01mg至2500mg或更高，其最佳含量为50-500mg。典型的药物可接受载体是，例如：甘露糖醇、脲、葡聚糖、乳糖、土豆和玉米淀粉、硬脂酸镁、滑石、植物油、聚亚烷基二醇、乙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、碳酸钙、油酸乙酯、异丙基肉豆蔻酯、苯甲酸苄酯、碳酸钠、明胶、碳酸钾、硅酸及其它常用的药物可接受的载体。药物制剂中还可以含有无毒的赋形剂，例如：乳化剂、防腐剂、润湿剂等，例如脱水山梨糖单月桂酸酯、三乙醇胺油酸盐、聚氧乙烯单硬脂酸酯、三棕榈酸甘油酯、二辛基硫基琥珀酸钠等。
制备含有活性成分的片剂的一般方法是首先将药物与无毒的粘合剂诸如明胶、阿拉伯胶、乙基纤维素等混合。混合过程通常于无水条件下在标准V-掺和机中进行。随后，将刚制得的混合物通过常规的制片机得到片剂。新制得的片剂可以包衣，也可以不包衣。适当的包衣的例子是无毒的包衣，包括紫胶、甲基纤维素、巴西棕榈蜡、苯乙烯-马来酸聚合物等。用于口服的压缩片剂可按照上述说明，并利用Remington’s Pharmaceutical Science，Chapter 39，Mack Publishing Co.，1965中提及的本专业技术人员熟知的制作工艺制成0.01mg，5mg，25mg，50mg，500mg...直至2500mg的片剂。
为制成片剂，将活性成分、玉米淀粉、乳酸、磷酸钙和碳酸钙于干燥条件下在常规的V-掺和机中混合直至所有组分均匀地混合在一起。随后，将玉米淀粉调成10％的浆糊并与刚制好的混合物混合直至得到均一混合物。然后将混合物通过标准光筛，在无水环境中干燥，再与硬脂酸钙混合，压缩成片剂，如有需要可包衣。其它含10，50，100，150mg等的片剂可用类似方法制备。
下面的配方1是含有本发明化合物的片剂配方的一个例子。 配方I 成份 每片，mg.活性化合物 50.0 玉米淀粉 15.0 玉米淀粉糊 4.5 碳酸钙 15.0 乳酸 67.0硬脂酸钙 2.0 磷酸二钙 50.0
生产含有10至2500毫克的口服胶囊通常须将活性化合物与无毒载体混合，并把该混合物封入聚合套中，该聚合套通常是明胶或其类似物。该胶囊可以是本领域人员熟知的软型胶囊，它的制备是将该化合物均匀分散于可食用的相匹配的载体中；该胶囊也可制成硬型胶囊，它的制备是将主要化合物与诸如滑石、硬脂酸钙、碳酸钙及其类似物的无毒固体混合。含有25mg，75mg，125mg的单一新化合物或两个或更多新化合物混合物的胶囊可按下面的例子制备： 配方 II 成份 每个胶囊，mg.活性化合物 50.0 碳酸钙 100.0 乳酸 200.0 淀粉 130.0 硬脂酸镁 4.5
将上述成分在标准掺和机中混合后分装成可用于出售的胶囊。当使用更高浓度的活性物质时，可相应减少乳糖的用量。
也可将本发明的化合物冷冻干燥，如有需要可将其与其他药物可接受的赋形剂组合制备适合于胃肠外，注射给药的剂型。为了进行给药，可以将制剂在水中(普通水，盐水)或水与例如丙二醇、乙醇等有机溶剂的混合物中重新溶解。
当然，由于化合物的效能不同，所选的给药途径、服药者的年龄和病人本身的情况的不同，无论是单一剂量、复合剂量或日剂量的服用剂量均需随所用的特定化合物而改变。给药的剂量并无特定的限制，但它通常是有效的剂量，或与活性药物在代谢中从剂型中释放出的药理活性的游离形式在摩尔上相当的量，以可产生所需的药理和生理效应。
通常，本发明的化合物可静脉内注射给药，剂量为每个病人每一疗程1-500毫克，其最佳剂量为2-100毫克，确切剂量可随病人的年龄、体重和状况而定。一个用于注射的适合的配方例子是使用本发明化合物的聚乙氧基醇和无水酒精(例如1∶1)的混合溶液，在灌注或注射前用5％的葡萄糖水溶液稀释。
配方I中的化合物可用于治疗紫杉酚显示活性的相同的癌症，包括卵巢癌、乳腺癌、恶性黑素瘤、肺癌、胃癌、结肠癌、颈部肿瘤和白血病。参照如下：the clinical pharmacology of taxol is reviewed by Eric K.Rowinsky and Ross C.Donehower，The Clinical Pharmacology and Use ofAntimicrotubule Agents in Cancer Chemotherapeutics，Pharmac.Ther.，Vol 52，pp 35-84，1991.Clinical and preclinical studies with taxol arereviewed by William J.Slichenmyer and Daniel D.Von Hoff，Taxol：ANew and Effective Anti-cancer Drug，Anti-Cancer Drugs，Vol.2，pp 519-530，1991.
已用广为熟知的方法验证了本发明的化合物7-脱氧-7-醚-紫杉酚(配方1)的生物活性。例如，对比培养的L1210大鼠白血病癌细胞中Cpd 8和紫杉酚本身的细胞毒性，发现7-(邻-甲氧甲基)-13-(N-Boc-2’-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(8)的IC90(90％生长抑制浓度)是0.0011mg/ml，而紫杉酚的IC90是0.017mg/ml。在体外微管蛋白聚合测定(方法可参照F.Gaskin，et al.，J.Mol.Biol.，89：737，1974)，7-(O-乙氧甲基)-13-(N-Boc-2’-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(4)和7-(O-甲氧甲基)-13-(N-(叔丁氨基羰基)-β-苯基异丝氨酸基)-浆果赤霉素III(27)能以非常类似于紫杉酚的方式诱导微管蛋白的聚合。
已用广为熟知的方法进一步验证了本发明化合物对于L1210白血病的生物活性，其结果列于表1。可通过标准的广为人知的方法得到该结果(Li，L.H.；Kuentzel，S.L.；Murch，L.L.；Pschigoga，L.M.；and W.C.Krueger，“Comparative biological and biochemical efffects of nogalamycin and itsanalogs on L1210 leukemia，”Cancer Res.39：4816-4822(1979))。该结果用IC50表示，它的意义是可抑制细胞在无药时自由生长的50％所需的药物浓度。数值越小，表明活性越高。
表1 化合物L1210(IC50ug/ml) 紫杉酚 0.017 taxotere 0.004 6 0.0023 8 0.0011 10 0.001 14 0.0014 21 0.0024 22 0.0047已用广为熟知的方法进一步验证了本发明化合物对于A2780人类卵巢癌的生物活性作用，其结果列于表2。可通过标准的广为人知的方法得到该结果(Perez，R.P.；O’Dwyer，P.J.；Handel，L.M.；Ozols，R.F.；Hamilton，T.C.Int.J.Cancer 1991，48.265，Alley，M.C.；Scudiero，D.A.；Monks，A.；Monks，A.；Hursey，M.L；Czerwinski，M.J.；Fine，D.L.；et al. Cancer Res1988，48，589)。
表2 化合物 A2780(IC50ug/ml) 紫杉酚 0.0018 taxotere 0.0007 4 0.0007 14 0.00007 27 0.00004 42 0.00047 44 0.00037 46 0.0016 47 0.0007 0.00044(再试验) 49 0.0057 55 0.00025 56 0.00034 58 0.00038
图表A’
图表A&图表A
图表B
图表D
图表1
图表2
图表3
图表4
图表5
图表6
图表7
图表8
图表9
图表10
图表11
图表12
图表13
图表14
图表15
图表16
图表17
图表18
图表19
图表20
反应式：1
反应式：2
反应式：3
反应式：4
反应式：4a
反应式：5
反应式：8
反应式：10
反应式：18
反应式：19
反应式：20
反应式：21
反应式：22
反应式：23
反应式：24
反应式：25
反应式：26
反应式：27