吲哚衍生物 【发明领域】
本发明涉及新的具有强有力β3-肾上腺素能受体刺激活性的吲哚衍生物，它们对肾上腺素能受体具有高选择性。
背景技术
人们已知交感神经的β-受体具有两种亚型，即β1-受体和β2-受体。现今，β1-肾上腺素能受体兴奋剂在临床上用作心功能助促进剂或血管加压剂，而β2-肾上腺素能受体兴奋剂则相应地用作支气管扩张剂。
近年来，人们业已发现并分离出β-肾上腺素能受体的第三种亚型--β3-肾上腺素能受体，它不同于前面所述的两种亚型[Emorine，L.J.等人；科学，245，1118-1121(1989)]。β3-肾上腺素能受体存在于棕色脂肪细胞中，估计通过分解粘连于皮下组织或内部器官的白色脂肪细胞的脂质能显示出产热活性，因此，β3-肾上腺素能受体被认为与肥胖的起因之一有关。此外，已经报道，非胰岛素依赖性糖尿病的转折点也可能与β3-肾上腺素能受体有关。
当β3-肾上腺素能受体兴奋剂同样作用于β1-肾上腺素能受体和β2-肾上腺素能受体亚型时，可能存在某些副作用如心脏超功能，手脚震颤等。因此，最好是开发具有强有力β3-肾上腺素能受体刺激活性，而无β1-肾上腺素能受体和β2-肾上腺素能受体刺激活性，或者具有较弱β1-和β2-肾上腺素能受体刺激活性的药物。在本发明说明书和权利要求中，具有这种特性的化合物有时表示作“高肾上腺素能受体选择性化合物”。
至于β3-肾上腺素能受体兴奋剂，已公开的有BRL35135{(R*，R*)-(±)-[4-[2-[2-(3-氯苯基)-2-羟乙基氨基]丙基]苯氧基]乙酸甲酯氢溴酸盐；日本专利再次公开(公告)26744/1988号和欧洲专利公开23385号}，SR-58611A{(R，S)-N-(7-乙氧基羰基甲氧基-1，2，3，4-四氢萘-2-基)-2-(3-氯苯基)-2-羟基乙胺盐酸盐；日本专利首次公开(公开)66152/1989号和欧洲专利公开255415号}等。然而，BRL35135和SR-58611A完全不同于下述本发明化合物，这两种化合物非吲哚衍生物。
表1中所列吲哚化合物也是已知的。
表1
然而，这些化合物的化学结构仍不同于本发明化合物，它们在苯环上具有两个取代基，且吲哚核上无取代基。此外，这些文献一点也没有暗示这些化合物具有β3-肾上腺素能受体刺激活性。
较之表1中所列化合物，下述已知化合物的化学结构更类似于本发明化合物。
例如，药学&药理学杂。(J.Pharm.Phamacol.)，17，742-746(1965)中公开了下述化合物A。化合物A
Polon.药学学报(Acta.Polon.Pharm.)，38，407-410(1981)(化学文摘，96，142543k(1982))中公开了下述化合物B。化合物B
上述化合物A和B具有不同于本发明化合物的化学结构，它们的苯环上无取代基，并且不存在相应于下述本发明化合物R5取代基的取代基。而且，这些文献中从没有指出乃至暗示化合物A和B的任何药理活性。
此外，化学文摘，109，128763n(1988)公开了下式[VIII]所示的N-吲哚基烷基氨基-1-芳基-取代的链烷醇衍生物：其中R为苯基，间-或对-硝基苯基等，且R1为氢原子或甲基。
上述化合物的化学结构不同于本发明化合物，其苯环上的取代基为硝基基团，而且吲哚核上无取代基。上述式[VIII]化合物尤其包括下述化合物C。化合物C
如下述药理试验所示，作为β3-肾上腺素能受体兴奋剂，本发明化合物更优于上述化合物A，B和C。
因此，本发明的目的是提供新的具有强有力β3-肾上腺素能受体刺激活性的吲哚衍生物或其盐，它们对肾上腺素能受体具有高选择性。
发明公开
本发明涉及下述式[I]吲哚衍生物或其盐：其中R1代表羟基任选取代的低级烷基，苯磺酰氨基，低级烷基磺酰氨基，单-或二-低级烷基氨基磺酰基，或选自下述(a)至(d)地基团，或者与R2结合形成亚甲二氧基，所述亚甲二氧基被羧基或低级烷氧基羰基任意取代，
(a)下式基团：-X-Ra(其中X为O，S或NH，Ra为氢原子或低级烷基，其条件是当X为S时，则Ra为低级烷基)；
(b)下式基团：(其中Rb为氢原子，低级烷基，低级烷氧基羰基或羧基，Rbb为低级烷氧基羰基或羧基，m为0至3的整数，且n为0或1)；
(c)下式基团：-O(CH2)p-Rc(其中Rc为低级烷酰基，羟基，氰基，苯基，单-或二-低级烷基氨基羰基，或下式基团：(其中RA为氢原子或低级烷基)，以及p为1至4的整数)；
(d)下式基团：-Y-(CH2)q-Rd(其中Y为NH或S，Rd为羧基或低级烷氧基羰基，q为1至4的整数)；
R2为氢原子，卤原子，羟基任选取代的低级烷基，羟基，低级烷氧基，或上述(b)或(c)的基团，或与R1结合形成亚甲二氧基，所述亚甲二氧基被羧基或低级烷氧基羰基任意取代；
R3为氢原子或低级烷基；
W为键合在吲哚核的2-或3-位上的式[II]基团：其中R4为卤原子或三氟甲基，R5为低级烷基。
本发明化合物(I)的结构特征包括：(1)在取代基W的苯环的3-位上具有特定原子或特定基团；(2)取代基R5为低级烷基；(3)吲哚核的4-至7-位上具有特定取代基R1和R2；(4)吲哚核的2-或3-位上具有取代基W。
本发明化合物的强有力β3-肾上腺素能受体刺激活性以及高肾上腺素能受体选择性特性是基于上述本发明化合物的结构特征或其组合。
本发明说明书及权利要求中所用术语解释如下。
附加有“低级”的基团是指具有1至4个碳原子的基团。“低级烷基”包括，例如，甲基，乙基，丙基，异丙基，丁基，异丁基，仲丁基，叔丁基等，但更优选甲基，乙基，丙基和异丙基。“羟基取代的低级烷基”包括，例如，羟甲基，2-羟基乙基等。“低级烷基磺酰氨基”包括，例如，甲磺酰氨基，乙磺酰氨基等。“单-或二-低级烷基氨基磺酰基”包括，例如，一甲基氨基磺酰基，二甲基氨基磺酰基，一乙基氨基磺酰基，二乙基氨基磺酰基等。“低级烷氧基羰基”包括，例如，甲氧基羰基，乙氧基羰基，丙氧基羰基，丁氧基羰基等。“低级烷酰基”包括，例如，乙酰基，丙酰基等。“单-或二-低级烷基氨基羰基”包括，例如，甲氨基羰基，二甲基氨基羰基，甲乙基氨基羰基等。“卤原子”是指氟，氯，溴，碘，且优选氟，氯，溴，更优选氟和氯。“低级烷氧基”包括，例如，甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，丁氧基，异丁氧基，仲丁氧基，叔丁氧基等。“低级烷氧基羰基-低级烷氧基”包括，例如，甲氧基羰基甲氧基，1-甲氧基羰基乙氧基，2-甲氧基羰基乙氧基，1-甲氧基羰基丙氧基，3-甲氧基羰基丙氧基等。“羧基-低级烷氧基”包括，例如，羧基甲氧基，1-羧基乙氧基，2-羧基乙氧基、1-羧基丙氧基，3-羧基丙氧基等。“苯基-低级烷氧基”包括，例如，苄氧基，苯乙氧基等。
本发明式[I]化合物的盐为如酸加成盐，格外优选可药用的酸加成盐。酸加成盐包括，例如，与无机酸，如盐酸，氢溴酸，氢碘酸，硫酸，磷酸成的盐；与有机酸，如草酸，马来酸，富马酸，乳酸，苹果酸，柠檬酸，酒石酸，苯甲酸，甲磺酸等形成的盐。此外，其中取代基R1或R2定义为羧基的本发明化合物可以以碱金属盐形式或与有机碱成盐的形式存在，如与碱金属如钠，钾等形成的盐，或与有机碱如三乙胺，三丁胺，二异丙基乙胺，N-甲基吗啉，二环己基胺等形成的盐。
这些酸加成盐，碱金属盐或与有机碱成的盐可以以其水合物或溶剂化物形式存在，本发明也包括这些水合物和溶剂化物。
本发明式[I]化合物中含有两个不对称碳原子，即式[II]中与羟基键合的碳原子以及与R5键合的碳原子为不对称碳原子。因此，本发明化合物具有四种立体异构体，本发明还包括这些旋光的化合物，外消旋化合物，及其混合物。
优选的本发明化合物为其中取代基W键合在吲哚核的3-位上的式[I]化合物或其盐，亦即式[I-a]化合物或其盐：其中R1，R2，R4和R5的定义同上。其中，更优选的本发明化合物为式[I-a]化合物或其盐，其中R1键合于吲哚核的5-，6-或7-位上，且R2为氢原子，或者更优选的本发明化合物为式[I-a]化合物或其盐，其中R2不为氢原子，且R1和R2之一键合在吲哚核的6-位上，而另一键合在其7-位上。
其它优选的本发明化合物为式[I-a]吲哚衍生物或其盐，其中R1为羟基取代的低级烷基，苯磺酰氨基，低级烷基磺酰基氨基，二-低级烷基氨基磺酰基，或下述(a)，(b-1)，(c-1)或(d)的基团；
(a)下式基团：-X-Ra(其中X和Ra的定义同上)；
(b-1)下式基团：(其中Rb-1为氢原子或低级烷基，Rbb，m和n的定义同上)；
(c-1)下式基团：-O(CH2)p-Rc-1(其中Rc-1为低级烷酰基，苯基，单-低级烷基氨基羰基，且p的定义同上)；
(d)下式基团：-Y-(CH2)q-Rd(其中Y，Rd和q的定义同上)；
R2为氢原子，卤原子，羟基任选取代的低级烷基，羟基，低级烷氧基，或上述(b-1)或(c-1)基团。上述化合物中，进一步优选的化合物为式[I-a]吲哚衍生物或其盐，其中R1为低级烷氧基，低级烷基，低级烷氧基羰基，低级烷氧基羰基-低级烷氧基，羧基低级烷氧基，苯基-低级烷氧基或二-低级烷基氨基磺酰基，R2为氢原子，卤原子，低级烷氧基，低级烷基，低级烷氧基羰基，低级烷氧基羰基-低级烷氧基，羧基低级烷氧基或苯基-低级烷氧基，R3为氢原子，R4为卤原子，以及R5为甲基。
特别优选的化合物为式[I-a]吲哚衍生物或其盐，其中R1为甲氧基，乙氧基，丙氧基，异丙氧基，甲基，甲氧基羰基，甲氧基羰基甲氧基，羧基甲氧基，苄氧基，或二甲基氨基磺酰基，R2为氢原子或甲氧基，R3为氢原子，R4为氯原子，R5为甲基。
最优选的本发明化合物为式[I-a]吲哚衍生物或其盐，其中R1为甲氧基，乙氧基，甲氧基羰基，甲氧基羰基甲氧基或羧基甲氧基，其键合在吲哚核的6-或7-位上，R2和R3为氢原子，R4为氯原子，R5为甲基。
最优选化合物的代表例包括：(1)2-[3-(7-甲氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-1-(3-氯苯基)乙醇(2)2-[3-(7-乙氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-1-(3-氯苯基)乙醇(3)2-[3-(7-甲氧基羰基甲氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-1-(3-氯苯基)乙醇(4)2[3-(7-羧基甲氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-1-(3-氯苯基)乙醇以及它们的旋光异构体，或其盐。
本发明包括的代表性化合物为如表2，3和4中所列化合物及其盐。
表2R1 R4R1 R46-OH Cl6-COOH Cl6-OCH2COCH3 Cl6-OCH2CONHCH3 Cl6-SCH2COOH Cl6-SCH2COOCH3 Cl6-NHCH2COOH Cl6-NHCH2COOCH3 Cl6-NHSO2CH3 Cl6-NHSO2Ph Cl7-OH Cl7-SCH2COOCH3 Cl7-NHCH2COOCH3 Cl7-NHCH2COOH Cl7-NHSO2Ph Cl7-NHSO2CH3 Cl7-NH2 Cl7-OCH3 CF37-OC2H5 CF37-COOCH3 CF37-OCH2COOH CF37-OCH3 Cl6-OCH3 Cl6-CH3 Cl6-OCH2COOCH3 Cl4-OCH3 Cl6-SO2N(CH3)2 Cl7-OCH2COOCH3 Cl7-O(CH2)2CH3 Cl7-OC2H4COOH Cl7-OCH(CH3)2 Cl7-OC2H4COOCH3 Cl7-OCH2COCH3 Cl7-OCH2CONHCH3 Cl7-OCH2CH2OH Cl7-OCH2CN Cl7-OCH(COOH)2 Cl7-OCH(COOCH3)2 Cl7-SCH3 Cl7-SCH2COOH Cl7-CH2OH Cl7-COOH Cl7-COOCH3 Cl7-OCH(CH3)COOH Cl7-OCH(CH3)COOCH3 Cl7-SO2N(CH3)2 Cl6-COOCH3 CF36-OCH2COOH CF36-OCH2COOCH3 CF37-OCH2COOCH3 CF37-OC2H5 Cl7-OCH2Ph Cl7-CH3 Cl6-COOCH3 Cl4-CH3 Cl6-OCH2COOH Cl6-CH2O)H Cl7-OCH2COOH Cl
表3R1 R2 R1 R2OCH3 FOCH3 OCH2COOHOCH3 OC2H5OCH3 OHOCH3 OCH(CH3)COOHOCH3 OCH2COOCH3OCH3 OCH(CH3)COOCH3OCH2COOH OCH2COOHOCH2COOCH3 OCH3OC2H4COOH OC2H5OCH2COOH OCH3OC2H4COOH OC2H4COOHOCH3 OCH3 OCH3 OC2H4COOCH3 OC2H5 F OC2H5 OCH3 OC2H5 OC2H4COOH OC2H5 OC2H5 OC2H5 OCH2COOH OCH2COOH OC2H5 OH OCH3 OH OCH(CH3)COOH -O-CH2-O- -O-C(COOH)2-O- -O-C(COOCH3)2-O-
表4 R1* R1 R1 R1 OCH3 CH3 OCH2COOH COOCH3 OCH2COOCH3 OC2H5 OC2H4COOH O(CH2)2CH3*：取代基R1键合在吲哚核的6-或7-位上。
本发明化合物可通过下述方法制备。方法(a)
本发明式[I]化合物可按下所述制备：使式[III]化合物：其中R4的定义同上，与式[IV]化合物或其盐反应：其中R1，R2，R3和R5的定义同上。
反应在适当溶剂中或在无溶剂条件下进行。溶剂应当根据所用起始化合物的种类进行选择，例如为醇(如甲醇，乙醇，异丙醇等)，酮(如丙酮，甲乙酮等)，卤代烃(如二氯甲烷，氯仿等)，醚(如乙醚，四氢呋喃，二恶烷等)，芳烃(如苯，甲苯等)，乙酸乙酯，N，N-二甲基甲酰胺，二甲亚砜等等，这些溶剂可单独使用或两种或多种结合使用。此外，当化合物[IV]为酸加成盐形式时，例如，为与无机酸成的盐象盐酸盐，氢溴酸盐等，或与有机酸成的盐，象草酸盐，马来酸盐，富马酸盐等时，反应是在碱存在下进行。碱包括，例如，碱金属碳酸氢盐如碳酸氢钠，碳酸氢钾等，碱金属碳酸盐如碳酸钠，碳酸钾等，或有机碱如三乙胺，三丁胺，二异丙基乙胺，N-甲基吗啉等。另外，当取代基R1或R2包含羧基时，反应在如上所述的碱存在下进行。
反应温度视所用起始化合物的种类而变化，但通常在室温至约150℃范围之间，优选在约25℃至约100℃之间。
方法(a)中，起始化合物[III]和[IV]都含有不对称碳原子，反应进行时保持不对称碳原子的立体构型不变，得到具有相同立体构型的所要化合物[I]。也就是说，例如，具有(R，R)-构型的所要化合物[I]是由具有R-构型的起始化合物[III]和具有R-构型的起始化合物[IV]制得。
式[III]旋光化合物可通过，例如，与Bloom，J.D.等人在医学化学杂。(J.Med.Chem.)，35，3081-3084(1992)中所述类似的方法，或与Eliel，E.L. & Delmonte，D.W.在有机化学杂。(J.Org.Chem.)，21，596-597(1956)中所述类似方法制备。例如，按与Repke，D..B. & Ferguson，W.J.，杂环化学杂。(J.Heterocycl.Chem.)，13，775-778(1976)所述类似的方法，可以制得式[IV]旋光化合物。
式[IV]起始化合物可用如有机化学杂志，25，1548-1558(1960)中所公开的方法制备。
式[IV]起始化合物中，其中下式结构部分键合在吲哚核3-位上的式[IV]化合物可按照有机化学杂志，51，4294-4295(1986)中公开的方法制备：其中R5的定义同上。方法(b)：
其中取代基R1为具有更多限定的基团R1′的本发明的式[I]化合物，亦即式[I-b]化合物可按下所述制备：其中R1′为羟基任意取代的低级烷基，苯磺酰氨基，低级烷基磺酰氨基，单-或二-低级烷基氨基磺酰基，或为选自下述(a)′，(b)，(c)和(d)′的基团，或者与R2结合形成亚甲二氧基，所述亚甲二氧基被羧基或低级烷氧基羰基任意取代，
(a)′下式基团：-X′-Ra(其中X′为O或S，Ra的定义同上，其条件是当X′为S时，则Ra为低级烷基)；
(b)下式基团：(其中Rb，Rbb，m和n的定义同上)；
(c)下式基团：-O(CH2)p-Rc(其中Rc和p的定义同上)；
(d)′下式基团：-Y′-(CH2)q-Rd(其中Y′为S，Rd和q的定义同上)；在还原条件下，使式[V]化合物：其中R4的定义同上，与式[VI]化合物反应：其中R1′，R2，R3和R5的定义同上。
此方法中的“在还原条件下反应”是指在仅还原反应期间形成的亚胺部分并对羰基无任何影响的还原剂或催化剂存在下的式[V]化合物与式[VI]化合物的反应。
还原剂包括如氰基硼氢钠，催化剂包括如钯，氧化铂等。
反应是在适当溶剂中于还原剂或催化剂存在下进行。溶剂优选为醇如甲醇，乙醇等。使用还原剂时，反应通常是在约20℃至约80℃下进行，而当使用催化剂时，反应则通常是在约10℃至约25℃下进行。方法(c)
其中取代基R1或R2中不包含羰基或氰基的式[I]化合物，亦即式[I-c]化合物：其中R1″为羟基任意取代的低级烷基，苯基磺酰氨基，低级烷基磺酰氨基，单-或二-低级烷基氨基磺酰基，或选自下面(a)或(c)”的基团，或者与R2”结合成亚甲二氧基，
(a)下式基团：-X-Ra(其中X和Ra定义同上)；
(c)”下式基团：-O(CH2)p-Rc”(其中Rc”为羟基，苯基，或下式基团：(其中RA为氢原子或低级烷基)，且p的定义同上)，R2″为氢原子，卤原子，羟基任意取代的低级烷基，羟基，低级烷氧基，或上面(c)”的基团，或与R1″结合形成亚甲二氧基，且R3，R4和R5的定义同上，可通过还原式[VII]化合物制得：其中R1″，R2″，R3，R4和R5的定义同上。
此反应是在适当溶剂中于还原剂存在下进行。还原剂包括如二硼烷，氢化铝锂，或其烷氧基-配合物，其过渡金属盐，附加有氯化铝，三氟化硼，三氯氧化磷或羧酸(如乙酸，三氟乙酸等)的硼氢化钠等。溶剂包括如醚如乙醚，四氢呋喃，二甲氧基乙烷，二恶烷，二甘醇二甲醚等。反应温度依据所使用的还原剂种类改变，但一般在约0至约160℃范围内。
上述方法中，起始化合物[VII]的不对称碳原子的立体构型继续保留在最终产物中。
起始化合物[VII]为新化合物，并通过式[IX]化合物：其中R4的定义同上，与式[X]化合物或其盐反应制备：其中R1″，R2″，R3和R5的定义同上。
化合物[IX]与化合物[X]的反应是在缩合剂存在下进行，缩合剂如N，N′-二环己基碳化二亚胺，1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐，N，N′-羰基二咪唑，N，N′-羰基二琥珀酰亚胺，1-乙氧基羰基-2-乙氧基-1，2-二氢喹啉，二苯基磷酰基叠氮化物，丙膦酸酐等。当使用N，N′-二环己基碳化二亚胺或1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐作为缩合剂时，反应可借助加入N-羟基琥珀酰亚胺，1-羟基苯并三唑等进行。
反应一般是在适当溶剂中进行。溶剂包括如与方法(a)所述相同的溶剂。此外，化合物[X]可以如方法(a)中所述的酸加成盐形式使用，并且当使用化合物[X]的酸加成盐时，反应是在有机碱如三乙胺，三丁胺，二异丙基乙胺，N-甲基吗啉等存在下进行。反应通常在约20至约50℃下进行。
化合物[IX]和化合物[X]的立体构型仍保持在所要化合物[VII]中。
化合物[IX]的旋光化合物可按Collet，A.和Jacques.J.，法国化学会志，3330-3334(1973)中所报道的类似方法制备。
化合物[X]的旋光化合物可按日本专利首次公开(Kokai)22559/1988号中所报道的类似方法制备。
利用常规方法如色谱，重结晶，再沉淀等，可以分离并纯化上述各方法中所制得的产物。
依据所用反应条件，上述各方法所得产物可以以其酸加成盐形式或游离碱形式得到。这些产物可以通过常规方法转化成酸加成盐或游离碱。
上述每一方法中，当取代基R1或R2为氨基或被下式基团取代低级烷氧基时：或当取代基R1或R2含有羧基或羟基时，所要化合物可通过反应其中所述取代基用常规保护基保护的起始化合物，然后，接着除去产物的保护基制备。
当上述各方法所制的本发明化合物或起始化合物为外消旋化合物或为非对映体混合物形式时，用常规方法，如用欧洲专利公开455006号中所报道的方法，分离每一立体异构体。优选实施方案药理试验
进行下述药理试验，以评估本发明代表性化合物在下述各方面的活性：(1)人β3-和β2-肾上腺素能受体刺激活性(2)降血糖水平活性，和(3)抗肥胖活性。
首先，阐述高效表达人β3-和β2-肾上腺素能受体细胞系的确立，然后，举例说明利用它们的实验。高效表达人β3-肾上腺素能受体细胞系的确立(1)构建表达载体
动物细胞表达载体，pKCRH2[Mishina等人，自然307：604-608(1984)]用限制酶SalI消化并用DNA平端化试剂盒(DNABlunting Kit)(Takara Shuzo有限公司)补平。独立地，将另一动物细胞表达载体，pSV2-neo[Southern和Berg，J.Mol.Appl.Genet.1：327-341(1982)]用限制性核酸内切酶AccI和AatII消化，并用DNA平端化试剂盒补平。这些DNAs用DNA连接试剂盒(Takara Shuzo有限公司)连接，并用常规方式导入到E.大肠杆菌株HB101内，产生转化体。质粒DNAs由转化体制备并用限制性核酸内切酶PstI消化。选择能产生约3.8kbp，2.2kbp，1.4kbp和0.9kbp片断的克隆，产生命名为pKCN0的质粒。质粒pKCN0用限制性核酸内切酶HindIII消化，并利用DNA连接试剂盒与下面SEQ ID NO：1所示的合成衔接头连接。
5’-AGCTCCTGCAGGCGCGCCGATATCTCGAGCGGCCGCGGTACCA-3′
3’-GGACGTCCGCGCGGCTATAGAGCTCGCCGGCGCCATGGTTCGA-5’
反应混合物用于大肠杆菌株HB101的转化，并且质粒DNAs由特定转化体制备。质粒DNAs用限制性核酸内切酶DraI和HindIII消化，并选择能产生约430bp片断的克隆，产生命名为pKCN1的表达载体质粒。(2)构建表达质粒：
从人成神经细胞瘤细胞系SK-N-MC(ATCC HTB 10)中提取全RNA，并采用SuperScript系统(Life Technologies)合成cDNA。分别使用下面SEQ ID NO：2和NO：3所示的引物寡核苷酸1和2，利用Gene Amp PCR试剂盒(Perkin-Elmer)扩增cDNA。在PCR反应中加入10％二甲亚砜。
5’-CCACCTGCAGGTGATTTGGGAGACCCC-3’ ---寡核苷酸1
5’-TTCTCGAGCCGGGGAATCCCATGGGAC-3’ ---寡核苷酸2
反应混合物用限制性核酸内切酶Sse8387I和StuI消化之后，通过电泳分离到约1.3kbp的片断。此片断用限制性核酸内切酶Sse8387I和EcoRV消化的表达载体pKCN1连接，采用常规方式，将产物导入大肠杆菌株HB101上。质粒DNA由特定转化体制备，测定通过限制性核酸内切酶Sse8387I和XhoI消化质粒DNA所得的约1.3kbp片断的核苷酸序列。此序列与Lelias等人[FEBS Lett.324：127-130(1994)]所报道的人β3-肾上腺素能受体cDNA的序列相同。该表达人β3-肾上腺素能受体的质粒命名为pKREX10。(3)确立高效表达细胞系
采用磷酸钙法，用表达人β3-肾上腺素能受体的质粒pKREX10转化中国仓鼠卵巢细胞系CHO-K1(ATCC CCL61)，并用溶在补加有10％胎牛血清和11.5μg/ml脯氨酸的MEM-Dulbecco’s培养基(ICN Biomedicals)中的600μg/mlG-418(Life Techonligies)选择转化体。为培养耐69G-418克隆，移去培养基后，用含有0.5mM乙二胺四乙酸(EDTA)的磷酸缓冲盐水在37℃温育10分钟，剥落这些细胞。离心收集这些细胞，并悬浮于含有1mM EDTA的10mM Tris-HCl缓冲液(pH7.5)中，浓度5X106细胞/ml。将此悬浮液(20μl)和(-)3-[125I]碘氰基吲哚心安(1.5nM)(Amersham)在含有1％牛血清白蛋白，0.1％NaN3和20mM HEPES缓冲液(pH7.4)的RPMI-1640培养基(200μl)(ICN Biomedicals)中混合，并将混合物在4℃培养2小时。反应混合物用0.3％聚乙烯亚胺预浸渍的玻璃滤器GF/C(Whatman)过滤，并用BIO-DOT装置(BIO-RadLaboratories)洗涤，用γ-射线计数器计数滤器的放射性强度。对于人β3-肾上腺素能受体表达细胞系，使用一种命名为CHO/pKREX10-36的克隆，这种克隆显示出最高放射性。确立高效表达人β2-肾上腺素能受体的细胞系
采用SuperScript系统(Life Technologies)，用衍生自人脑的Poly(A)+RNA(Clontech：商标号；CL6516-1)合成cDNA。分别使用下面SEQ ID NO：4和NO：5所示的引物寡核苷酸3和4，利用Gene Amp PCR试剂盒(Perkin-Elmer)扩增此cDNA。
5’-ACACCTGCAGGTGAGGCTTCCAGGCGTCC-3’ ---寡核苷酸3
5’-TGTAAGCTTCTGCTTTACAGCAGTGAGTC-3’ ---寡核苷酸4
反应之后，混合物用限制性核酸内切酶Sse8387I和HindIII消化，通过电泳分离到约1.4kbp的片断。此片断用限制性核酸内切酶Sse8387I和HindIII消化的表达载体pKCN1连接，并采用常规方式导入到大肠杆菌株HB101上。质粒DNA由特定转化体制备，测定通过限制性核酸内切酶Sse8387I和HindIII消化质粒DNA所得的约1.4kbp片断的核苷酸序列。此序列与KobilkaB.K.等人[美国全国科学院会议录84：46-50(1987)]所报道的人β2-肾上腺素能受体cDNA的序列相同。此高效表达人β2-肾上腺素能受体的质粒命名为pKREX21，并按与确立高效表达人β3-肾上腺素能受体细胞系相同的方式导入到CHO-K1中。对于人β2-肾上腺素能受体，使用一种命名为CHO/pKREX21-8的克隆，它显示出最高放射性。试验1 人β-肾上腺素能受体刺激活性：
人β3-肾上腺素能受体高效表达细胞系CHO/pKREX10-36用补加有10％胎牛血清和11.5μg/ml脯氨酸和200μg/mlG-418的MEM-Dulbecco’s培养基培养3天。移去培养基后，用含有0.5mMEDTA的磷酸缓冲盐水在37℃温育10分钟，剥落这些细胞。离心收集CHO/pKREX10-36细胞，并悬浮于含有1mM L-抗坏血酸和1mM3-异丁基-1-甲基黄嘌啉的Hanks平衡盐溶液(ICN Biomedicals)中，浓度2X106细胞/ml。将此悬浮液(20μl)和试验化合物在相同平衡盐溶液(500μl)中混合，并于37℃温育30分钟，接着沸腾5分钟终结反应。反应混合物浓缩后，采用cAMPEIA系统(Amersham)，测量上清液中cAMP的量。
同样，利用高效表达人β2-肾上腺素能受体CHO/pKREX21-8替代高效表达人β3-肾上腺素能受体CHO/pKREX10-36，测量cAMP的量。
向反应混合物中加入10-5M(-)异丙肾上腺素或完全不加入时，cAMP的量分别认作为100％和0％，本发明每一化合物的相对最大应答表示为内源活性％(intrinsic activity)[I.A.(％)]。
最小二乘法回归分析每一化合物的浓度-反应曲线，计算获得50％cAMP积累时所需试验化合物的浓度，即EC50值。
结果示于表5中。上述化合物A，B和C用作参比化合物。
表5试验化合物 人β3-和β2-肾上腺素能受体刺激活性 EC50值(nM) β2/β3比 I.A.值(％) β3-受体 β2-受体 β3-受体 β2-受体1*11-A1-A-b22-A345678121314 1.7 0.67 0.36 2.0 0.96 22 16 12 35 25 31 4.0 31 0.43 25 13 3.6 55 15 170 43 33 88 33 _*2 31 _*2 6.0 14.7 19.4 10.0 27.5 15.6 7.7 2.7 2.8 2.5 1.3 - 7.8 - 14.0 113 114 89 117 96 102 116 95 91 76 92 98 101 95 33 36 35 31 23 22 36 41 19 15 5 13 6 29化合物A化合物B化合物CIP*3 910 180 540 5.5 410 _*2 _*2 5.6 0.5 - - 1.0 92 100 105 100 16 8 5 100*1：实施例1化合物(以下相同)*2：未检测到，因为这些化合物的活性非常弱*3：(-)-异丙肾上腺素
具有低RC50值和高I.A.值的化合物被认为具有强有力的人β3-或人β2-肾上腺素能受体刺激活性。因此，如表5所示，本发明化合物，尤其是实施例1，1-A，1-A-b，2，2-A和14的化合物具有强有力的人β3-肾上腺素能受体刺激活性。此外，本发明化合物的人β3-肾上腺素能受体刺激活性强于其人β2-肾上腺素能受体。特别是，实施例1，1-A，1-A-b，2，2-A和14的化合物对人β3-肾上腺素能受体具有优越的肾上腺素能受体选择性。
另一方面，与本发明化合物相比，前面所述的参比化合物A，B和C显示出非常弱的人β3-肾上腺素能受体刺激活性。
此外，研究离体豚鼠右心房的自发收缩率发现，本发明化合物几乎不显示人β1-肾上腺素能受体刺激活性。
如上结果所示，本发明化合物可以为人β3-肾上腺素能受体兴奋剂，并具有优越的肾上腺素能受体选择性。试验2 对禁食小鼠的降血糖活性
对禁食雄性ddY小鼠(体重：20-30g)口服施用悬浮在0.5％黄蓍胶溶液中的试验化合物，在施用试验化合物之前和三小时之后，采集血液。用Kunst A.等人的方法(己糖激酶/G6PDH法)[Bergmeyer，H.U.(编)，酶学方法，VI卷，第3版，Verlag ChemieGmbH，Weinheim·Deerfield Beach，Florida·Basel，163-172(1984)]测定血液中葡萄糖的水平。试验化合物的降血糖活性用ED25表示，即将施用试验化合物之前葡萄糖水平降低25％所需试验化合物的浓度。使用甲磺吡脲作为参比化合物，这是一种市售治疗糖尿病的药物。结果示于表6中。
表6 试验化合物对小鼠的降血糖活性(ED25；mg/kg po 1* 1-A 2 3 5 6 7 8 10 0.05 0.003 0.03 3.3 4.5 4.5 1.5 1.4 0.1 甲磺吡脲 0.87*：实施例1的化合物(以下相同)试验3 对糖尿病型肥胖小鼠的抗肥胖活性：
对糖尿病型肥胖小鼠(KK-Ay/Ta，Jcl.雌性；50-60g，CleaJapan Inc.)口服施用悬浮在0.5％黄蓍胶溶液中的试验化合物，剂量3mg/kg/天，连续服用三周，然后，取出腹膜后脂肪组织和肩甲胛间脂肪组织，并测量它们的重量，分别作为白脂组织和褐脂组织。结果见表7中所示。
表7组 白脂组织重量 (g) 褐脂组织重量 (g)对照组 4.92±0.28 0.460±0.03实施例1的化合物 2.35±0.12* 0.289±0.04*
*：明显不同于对照组数据，p＜0.01。
本发明化合物显示出低毒性，例如，在采用小鼠的急性毒性试验中，以300mg/kg(体重)剂量口服施用实施例1-A的化合物，完全不显示毒性。因此，考虑到治疗有效剂量，本发明化合物对活体的安全无任何问题。
本发明化合物是优越的β3-肾上腺素能受体兴奋剂，并具有高肾上腺素能受体选择性，并因此可用于预防或治疗哺乳动物包括人的肥胖症和糖尿病。此外，本发明化合物也可用于治疗肠激惹综合症，急性或慢性腹泻，或用于改善伴随消化溃疡，急性或慢性胃炎，胆囊运动障碍，胆囊炎等疾病的某些症状如腹痛，恶心，呕吐，腹部不适等。
本发明化合物[I]或其可药用盐可以作为β3-肾上腺素能受体兴奋剂通过经口，胃肠外或直肠途径施用，但优选通过经口途径施用。本发明化合物的剂量依据施用途径，病症，患者年龄，或目的类别(预防或治疗)等因素而变化，但一般在0.01-20mg/kg/天范围内，优选0.05-10mg/kg/天。
本发明化合物通常以药物制剂形式施用，这种制剂通过混合本发明化合物和可药用载体或稀释剂制备。可药用载体或稀释剂可以为制药领域通常使用的且不与本发明化合物反应的任何常规载体或稀释剂。可药用载体或稀释剂的适当例子包括乳糖，葡萄糖，甘露糖醇，糊精，淀粉，白糖，铝硅酸镁，合成硅酸铝，结晶纤维素，羧甲基纤维素钠，羟丙基淀粉，羧甲基纤维素钙，离子交换树脂，甲基纤维素，明胶，阿拉伯胶，羟丙基纤维素，寡取代羟丙基纤维素，羟丙基甲基纤维素，聚乙烯吡咯烷酮，聚乙烯醇，轻质无水硅酸，硬脂酸镁，滑石，羧乙烯基聚合物，二氧化钛，脱水山梨糖醇脂肪酸酯，十二烷基硫酸钠，甘油脂肪酸酯，纯化羊毛脂，甘油明胶，多乙氧基醚，聚乙二醇，植物油，石蜡，非离子表面活性剂，丙二醇，水等。
药物制剂为如片剂，胶囊，粒剂，粉剂，糖浆，悬浮液，栓剂，凝胶制剂，注射剂等。这些制剂可用常规方法制得。对于液态制剂的制备，是在施用时将本发明化合物溶于或悬浮于水或其它适当溶剂中。片剂或粒剂可用常规方法包衣。就注射剂而言，优选的是将本发明化合物[I]的可药用酸加成盐溶于水中，但如果需要的话，也可溶在等张剂中，并且进一步地，可向其中加入pH调节剂，缓冲剂或防腐剂。
这些制剂可含有至少0.01％比例，优选0.05-70％比例的本发明化合物。这些制剂也可包含有其它药学活性化合物。
实施例
本发明借助下述参考实施例及实施例更详细说明，但并不局限于此。
本发明化合物通过元素分析，质谱，IR谱，NMR谱等手段确认。
为简化公开内容，本发明说明书中使用了下述缩写词。
Me： 甲基
Et： 乙基
Ph： 苯基
E： 乙醇
M： 甲醇
H： 正-己烷
DE： 乙醚
CF： 氯仿
EA： 乙酸乙酯
DMF： 二甲基甲酰胺
s： 单重峰
d： 二重峰
dt： 双三重峰
dd： 双二重峰
t： 三重峰
m： 多重峰
q： 四重峰
MS： 质谱参考实施例13-(2-氨基丙基)-7-甲氧基吲哚的制备
标题化合物按英国专利公开974,893号中公开的方法通过下述步骤制备。
(1)在冰浴中冷却二甲基甲酰胺(DMF，16ml)，向其中滴加磷酰氯(5ml)，并搅拌混合物10分钟。向混合物中滴加入7-甲氧基吲哚(6.5g)的DMF(16ml)溶液，并室温搅拌混合物2小时，其中7-甲氧基吲哚是按照杂环，16，1119-1124(1981)中公开的方法，由3-甲基-2-硝基苯甲醚制得。在冰冷却下，向混合物中加入30％氢氧化钠水溶液(30ml)，混合物在热浴中于约80℃加热5分钟，并放置冷却。过滤收集沉淀，水洗，干燥，得到7-甲氧基吲哚-3-甲醛粗品(4.6g)。
(2)将乙酸铵(3.6g)，乙酸酐(1ml)和乙酸(3.2ml)混合物在50℃加热搅拌20分钟，并向其中加入上步(1)所得产物(4.5g)，乙酸(19.2ml)和硝基乙烷(16ml)。加热混合物至100℃，向其中加入乙酸钠(2.25g)。回流混合物2小时，同时向其中逐渐滴加乙酸酐(3.2ml)。放置冷却后，加水到混合物中，过滤收集沉淀，水洗并干燥，得到1-(7-甲氧基吲哚-3-基)-2-硝基丙烯粗品(3.35g)。
(3)冰冷却下，将上步(2)中所得硝基丙烯化合物(3.2g)的四氢呋喃(60ml)溶液滴加到氢化铝锂(3.2g)的乙醚(60ml)悬浮液中，并回流混合物5.5小时。在冰冷却下向混合物中加入饱和酒石酸钾钠，滤去不溶物，用无水硫酸镁干燥滤液。减压蒸去混合物中的溶剂，得到所要化合物粗品(3.2g)，为油状产物，它用作实施例1的起始化合物。
MS(m/z)：205(MH+)参考实施例23-(2-氨基丙基)-6-甲氧基羰基甲氧基吲哚的制备：
(1)向丙酮(100ml)中加入6-羟基吲哚(2.9g)，氯乙酸甲酯(2.7g)，碳酸钾(5.5g)和碘化钾(0.2g)，并回流混合物8小时。反应混合物冷却至室温，滤去不溶物。减压蒸发滤液。残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂∶氯仿)，得到6-甲氧基羰基甲氧基吲哚(2.83g)。
1H-NMR谱(CDCl3)：3.78(3H，s，COOCH3)，4.67(2H，s，OCH2)，6.49(1H，m)，6.83(1H，m)，6.88(1H，s)，7.11(1H，m)，7.53(1H，m)，8.2(1H，s，NH)
(2)向上面产物(2.77g)的苯(50ml)溶液中加入2-硝基丙烯(3.56g)的苯(17.8ml)溶液，并回流混合物15小时。减压蒸发混合物，除去溶剂，残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂∶氯仿)，得到3-(2-硝基丙基)-6-甲氧基羰基甲氧基吲哚(2.15g)，为油状产物。
1H-NMR谱(CDCl3)：1.56(3H，d，J＝7Hz，CHCH3)，3.10-3.48(2H，m，CH2CHNO2)，3.77(3H，s，COOCH3)，4.64(2H，s，OCH2)，4.92(1H，m，CHNO2)，6.76-7.05(3H，m)，7.48(1H，m)，8.08(1H，s，NH)
(3)将上步产物(2.1g)溶于乙醇(50ml)，并向其中加入阮内镍，在大气压及50℃下，还原混合物。在消耗掉理论量氢之后，滤去阮内镍。蒸发滤液，除去溶剂，得到3-(2-氨基丙基)-6-甲氧基羰基甲氧基吲哚粗品(1.98g)，为油状产物，它作为实施例7的起始化合物。
MS(m/z)：263(MH+)参考实施例3-13
按与参考实施例1或2相同的方式，制得如表8中所列的下述起始化合物。
表8 Ref.Ex. R1 R2 MS(m/z) (MH+) Process 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 7-OC2H5 6-OCH3 7-OCH2Ph 6-CH3 7-CH3 6-COOCH3 4-OCH3 4-CH3 6-SO2N(CH3)2 6-OCH3 7-OCH2COOCH3 H H H H H H H H H 7-OCH3 H 219 205 281 189 189 233 205 189 281 219 263 1*1 1 1 1 1 2*2 1 1 2 1 2
*1：按与参考实施例1所述相同的方式制备。
*2：按与参考实施例2所述相同的方式制备。实施例12-[3-(7-甲氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-1-(3-氯苯基)乙醇的制备：方法(a)：
向甲醇(20ml)中加入(3-氯苯基)环氧乙烷(0.77g)和3-(2-氨基丙基)-7-甲氧基吲哚(2.16g)，室温搅拌混合物64小时。减压蒸发混合物，除去溶剂，残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂∶氯仿/甲醇＝12∶1)，合并含有所要产物的部分，减压浓缩，得到油状产物(1.06g)。
1H-NMR谱(CDCl3)：1.12(3H，d，J＝7Hz，CHCH3)，2.61(1H，m)，2.78-2.86(2H，m)，2.88-3.12(2H，m)，3.95(3H，s，OCH3)，4.56(1H，m，CHOH)，6.65(1H，m)，6.93-7.09(2H，m)，7.11-7.29(4H，m)，7.33(1H，m)，8.25(1H，s，吲哚-NH)
用富马酸处理上述油状产物(0.3g)，得到所要化合物的富马酸盐(0.15g)(实施例1化合物的富马酸盐)。
M.p.143-147℃(乙醇/乙醚重结晶)方法(b)：
向甲醇(10ml)中加入7-甲氧基吲哚-3-丙酮(0.4g)[按英国专利974,893号中公开的方法制备]和2-(3-氯苯基)乙醇胺盐酸盐(0.45g)，并在冰滤冷却下，向其中加入氰基硼氢钠(0.2g)。搅拌混合物5分钟，然后于室温搅拌18小时。减压蒸发混合物，除去溶剂，并向残留物中加入饱和碳酸氢钠水溶液。混合物用乙酸乙酯提取，提取液依次用水和饱和氯化钠水溶液洗涤，硫酸镁干燥。减压蒸发所得物，除去溶剂，所得残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂∶氯仿/甲醇＝15∶1)，得到所要化合物(0.58g)，为油状产物。方法(c)：
(1)向含有3-(2-氨基丙基)-7-甲氧基吲哚(12.24g)和3-氯扁桃酸(7.46g)的DMF溶液(80ml)中加入六氟磷酸苯并三唑-N-氧基三(二甲基氨基)鏻(17.68g)，然后滴加三乙胺(9.8ml)。室温搅拌混合物5小时，向反应混合物中加入乙酸乙酯。混合物依次用水，10％柠檬酸溶液，水，饱和碳酸氢钠水溶液，水以及饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸镁干燥。减压蒸发混合物，除去溶剂，残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂；乙酸乙酯/正-己烷＝1∶1→2∶1)，得到N-[3-(7-甲氧基吲哚-3-基)-2-丙基]-3-氯扁桃酰胺(14.02g)，为油状产物。
1H-NMR谱(CDCl3)：1.2，1.18(3H，d，J＝7Hz，CHCH3)，2.82-
2.95(2H，m，CH2CH)，3.97(3H，s，OCH3)，4.33(1H，m，CHCH3)，4.85(1H，s，
CHOH)，6.65(1H，m)，6.86-7.37(7H，m)，8.26(1H，d，J＝13Hz，CONH)
(2)20℃下，将上步酰胺化合物(13.4g)的四氢呋喃(144ml)溶液滴加到1M硼烷-四氢呋喃配合物溶液(144ml)，并回流混合物4小时。冰冷却下，向此混合物中滴加甲醇(150ml)。回流混合物1小时，以分解过量硼烷。减压蒸发混合物，除去溶剂。向残留物中加入氯仿，混合物依次用饱和碳酸氢钠水溶液和饱和氯化钠水溶液洗涤，无水硫酸镁干燥。减压蒸发混合物，除去溶剂，残留物通过硅胶柱层析纯化(洗脱剂∶氯仿/甲醇＝20∶1→10∶1)，得到所要化合物(7.35g)，为油状产物。实施例1-A2-[3-(7-甲氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-(1R)-1-(3-氯苯基)乙醇的制备：
采用(R)-(3-氯苯基)环氧乙烷(SEPRACO有限公司生产；光学纯度：99.2％e.e.)替代实施例1中的(3-氯苯基)环氧乙烷，以与实施例1，方法(a)所述相同方式制得所要化合物，为油状产物。
MS(m/z)：359(MH+)实施例1-A-a和-b2-[(2R或2S)-3-(7-甲氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-(1R)-1-(3-氯苯基)乙醇和2-[(2S或2R)-3-(7-甲氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-(1R)-1-(3-氯苯基)乙醇的制备：
实施例1-A得到的2-[3-(7-甲氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-(1R)-1-(3-氯苯基)乙醇为两种非对映体混合物，取3.0g此混合物，通过柱层析分离，用较低极性溶剂洗脱时得到化合物(1-A-a)(0.82g)，在用较高极性溶剂洗脱时，得到化合物(1-A-b)(1.12g)。化合物(1-A-a)：
高效液相色谱(HPLC)的保留时间为20.3分钟(光学纯度：＞99％d.e.)
HPLC的分离条件：
1.柱：CHIRALPAK AD(4.6mm×250mm，Diacel化学工业公司)
2.洗脱剂：正-己烷/乙醇/二乙胺＝85∶15∶0.1
3.流速：0.4ml/min.
4.温度：40℃
5.检测波长：254nm
M.p.129-130℃(乙酸乙酯/正-己烷重结晶)
1H-NMR谱(CDCl3)：1.12(3H，t，J＝7Hz，CHCH3)，2.57(1H，dd，J＝12，7Hz)，2.81(2H，d，J＝7Hz，CH2CH)，2.91-3.09(2H，m)，3.95(3H，s，OCH3)，4.59(1H，dd，J＝8，4Hz，CHOH)，6.64(1H，d，J＝8Hz)，6.95(1H，d，J＝2Hz)，7.03(1H，t，J＝8Hz)，7.10-7.24(4H，m)，7.32(1H，m)，8.25(1H，s，吲哚-NH)化合物(1-A-b)
HPLC的保留时间为24.5分钟(光学纯度：＞99％d.e.)
HPLC的分离条件：与化合物(1-A-a)中那些条件相同
M.p.86-87℃(乙酸乙酯/正-己烷重结晶)
1H-NMR谱(CDCl3)：1.12(3H，d，J＝7Hz，CHCH3)，2.62(1H，dd，J＝12，9Hz)，2.82(2H，d，J＝7Hz，CH2CH)，2.87(1H，dd，J＝12，4Hz)，3.05(1H，m，CHCH3)，3.96(3H，s，OCH3)，4.49(1H，dd，J＝9，4Hz，CHOH)，6.65(1H，d，J＝8Hz)，6.99(1H，d，J＝2Hz)，7.04(1H，t，J＝8Hz)，7.12-7.25(4H，m)，7.33(1H，m)，8.26(1H，s，吲哚-NH)实施例22-[3-(7-乙氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-1-(3-氯苯基)乙醇的制备：
将(3-氯苯基)环氧乙烷(0.92g)和3-(2-氨基丙基)-7-乙氧基吲哚(2.18g)采用和实施例1，方法(a)相同的方式处理，得到所要化合物(1.16g)，为油状产物。
1H-NMR谱(CDCl3)：1.12(3H，d，J＝6Hz，CHCH3)，1.48(3H，t，J＝7Hz，CH2CH3)，2.4(2H，br，NH，OH)，2.60(1H，d，t，J＝12，8Hz)，2.77-2.96(3H，m)，3.04(1H，m)，4.20(2H，q，J＝7Hz，CH2CH3)，4.55(1H，dd，J＝9.4Hz，CHOH)，6.63(1H，d，J＝7Hz)，6.91-7.06(2H，m)，7.10-7.25(4H，m)，7.32(1H，m)，8.27(1H，s，吲哚-NH)实施例2-A2-[3-(7-乙氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-(1R)-1-(3-氯苯基)乙醇的制备：
将(R)-(3-氯苯基)环氧乙烷和前面参考实施例3中所得的3-(2-氨基丙基)-7-乙氧基吲哚采用和实施例1-A同样的方法处理，得到所要化合物，为油状产物。
MS(m/z)：373(MH+)实施例3-12
采用参考实施例2和4-12中制得的相应吲哚化合物替代实施例1中的3-(2-氨基丙基)-7-甲氧基吲哚，通过与实施例1，方法(a)相同的方式，可以得到表9中所列化合物。
表9实施 例 R1 R2 酸加成盐 M.p. (℃) 重结晶 溶剂 MS(m/z) (MH+) 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 6-OCH3 7-OCH2Ph 6-CH3 7-CH3 6-OCH2- COOCH3 6-COOCH3 4-OCH3 4-CH3 6-SO2N- (CH3)2 6-OCH3 H H H H H H H H H 7-OCH3 - - 3/4HCl. 1/2H2O - - 3/4HCl. 1/2H2O 1/2富马酸盐 Oil Oil 103-107 97-104 55-65 118-123 Oil 134-139 109-114 203-207 CF/M DE/H CF/DE EA/H DE/H E/DE E/DE 359 435 343 343 417 387 359 343 436 389实施例132-[3-(6-羧基甲氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-1-(3-氯苯基)乙醇钠盐的制备：
将实施例7的化合物(0.42g)和氢氧化钠(0.3g)加到甲醇水溶液(甲醇/水＝2∶1，9ml)中，并回流混合物4小时。其后，将混合物0℃放置2小时，过滤收集沉淀出的结晶，得到所要化合物(0.24g)，为1/2水合物。
M.p.236-242℃实施例42-[3-(7-甲氧基羰基甲氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-(1R)-1-(3-氯苯基)乙醇的制备：
将(R)-(3-氯苯基)环氧乙烷和前面参考实施例13中所得的3-(2-氨基丙基)-7-甲氧基羰基甲氧基吲哚采用和实施例1-A同样的方法处理，得到所要化合物，为油状产物。
MS(m/z)：417(MH+)
1H-NMR谱(CDCl3)：1.13(3H，d，J＝6Hz，CHCH3)，2.62(1H，dt，J＝12，8Hz)，2.77-3.13(4H，m)，3.81(3H，s，CO2CH3)，4.47-4.68(1H，m，CHOH)，4.75(2H，s，OCH2)，6.57(1H，d，J＝8Hz)，6.92-7.06(2H，m)，7.11-7.36(5H，m)，8.77(1H，s，吲哚-NH)实施例152-[3-(7-羧基甲氧基吲哚-3-基)-2-丙基氨基]-(1R)-1-(3-氯苯基)乙醇的制备：
将实施例14中所得化合物和氢氧化钠加到甲醇水溶液中(甲醇/水＝2∶1)，混合物采用和实施例13同样的方法处理，得到所要化合物。
MS(m/z)：403(MH+)实施例16(制备片剂)
用常规方法混合并捏合下述各组分，并将混合物成粒，所得颗粒进一步压制成片，得到1,000片(每片100mg)。
实施例1化合物 5g
玉米淀粉 25g
乳糖 54g
结晶纤维素 11g
羟丙基纤维素 3g
轻质无水硅酸 1g
硬脂酸镁 1g
工业实用性
本发明化合物作为哺乳动物(包括人)用的药物，特别是作为β3-肾上腺素能受体兴奋剂是有用的，并可用于治疗糖尿病和肥胖症。
序列表SEQ ID NO：1：长度：47对碱基对类型：核酸链(STRANDEDNESS)：双链拓扑结构：线性分子类型：其它核酸，化学合成DNA其它：第5至43碱基对具有互补链，它含有TCGA作为第44至47碱基对。序列：AGCTCCTGCA GGCGCGCCGA TATCTCGAGC GGCCGCGGTACCA 43SED ID NO：2长度：27对碱基对类型：核酸链(STRANDEDNESS)：单链拓扑结构：线性分子类型：其它核酸，化学合成DNA反义：否序列：CCACCTGCAG GTGATTTGGG AGACCCC 27SED ID NO：3长度：27对碱基对类型：核酸链(STRANDEDNESS)：单链拓扑结构：线性分子类型：其它核酸，化学合成DNA反义：是序列：TTCTCGAGCC GGGGAATCCC ATGGGAC 27SED ID NO：4长度：29对碱基对类型：核酸链(STRANDEDNESS)：单链拓扑结构：线性分子类型：其它核酸，化学合成DNA反义：否序列：ACACCTGCAG GTGAGGCTTC CAGGCGTCC 29SED ID NO：5长度：29对碱基对类型：核酸链(STRANDEDNESS)：单链拓扑结构：线性分子类型：其它核酸，化学合成DNA反义：是序列：TGTAAGCTTC TGCTTTACAG CAGTGAGTC 29