一种用于治疗心脑血管疾病的药物 技本领域
本发明涉及一种用于治疗心脑血管疾病的药物。
背景技术
中药三七，味甘、微苦，性温。归肝、胃、心、肺、大肠经。具有止血散瘀，消肿定痛之功效。《本草纲目》记载三七：止血、散血、定痛。《医便》记载三七：专治血，归经络。《本草新编》记载三七：三七根，止血之神药也。无论上、中、下之血，凡有外越者，一味独用有效。《本草求真》中指出：三七气味苦温，能用于血分化其血瘀。《医学衷中参西录》中记载：三七，善于瘀血，又善止血妄行。三七之功以止血、散瘀、消肿止痛为长，临床广泛应用。早期跌打损伤用之为消肿止痛之“圣药”。后又发现其既能止血，又有活血的双相作用。现代药理又证实，该药用于高血脂及血脑血管的血瘀症疗效非凡，不断扩大使用范围。近年来，在三七总皂苷治疗心血管疾病方面进行了较多的基础与临床研究，结果表明三七总皂苷具有多方面的生物活性，是防治心血管疾病的一种有效药物，其作用主要表现在强心、扩张冠状动脉、增加冠脉血流量、改善心肌代谢、抗自由基、抗凝、钙拮抗等方面。中药灯盏细辛，味辛、微苦，温。归肺、胃、肝经。具有散寒解表，祛风除湿，活络止痛，消积之功能。药理学研究表明，灯盏花素具有扩张脑血管作用，能降低脑血管阻力，增加脑血流量，改善微循环，抑制血小板聚集，用于心脑血管疾病。任勇等临床实验研究表明，灯盏花素注射液缓解冠心病心绞痛的效果非常明显，尤其在缓解胸闷痛、心悸、气短等症状上较为突出；周瑞求等用灯盏花素片作治疗脑血栓的临床实验研究，结果表明效果也非常突出。灯盏花素片通过扩张血管降低脑收缩力，促进病变部位侧枝循环的建立，恢复缺血区脑组织的血流灌注，来恢复大脑皮质、中枢之间正常机能活动。因此，无论从古医籍记载，还是临床应用及现代药理、药效学研究都提示三七与灯盏细辛及其制剂对心脑血管疾病应有较好的功效。国内已有三七总皂苷制作治疗心血管疾病药物的专利(CN1067244C)和灯盏花素制作治疗心血管疾病药物的专利(CN1049121C)。但是，利用三七总皂苷与灯盏花素的互相作用，配伍组方制作治疗心脑血管疾病的药物，还未见报道。
【发明内容】
本发明的目的是提供一种用于治疗心脑血管疾病的药物，尤其是提供一种由三七总皂苷与灯盏花素为主要成份的药物，所述药物可以制成注射用粉针剂、水针剂、胶囊或缓释胶囊、片剂及缓释片剂，以及含有三七总皂苷及灯盏花素的复方制剂。
本发明的技术方案是：
一种用于治疗心脑血管疾病的药物，主要由以下成份制成地药剂(重量组份)：三七总皂苷1.5～100份，灯盏花素1份；优选组份为三七总皂苷10～50份，灯盏花素1份，其余为药用辅料。
本发明所述的药剂，为采用药物学常规方法制成的粉针剂，由以下组份组成：三七总皂苷10～50份，灯盏花素1份，右旋糖酐1～20份。
本发明所述的药剂，为采用药物学常规方法制成的胶囊，由以下组份组成：三七总皂苷10～50份，灯盏花素1份，其余为70％乙醇或其他辅料如乳糖、淀粉、糊精、微晶纤维素适量。
本发明所述的药剂，为采用药物学常规方法制成的缓释胶囊，由以下组份组成：三七总皂苷10～50份，灯盏花素1份，微晶纤维素1～50份，乳糖1～25份，其余为丸核及羟丙甲基纤维素或其他药用缓释制剂辅料。
本发明所述的药剂，为采用药物学常规方法制成的片剂，由以下组份组成：三七总皂苷1～50份，灯盏花素1份，淀粉、糊精、微晶纤维素适量，其余为低取代羟丙基纤维素或其他药用辅料。
本发明所述的药剂，为采用药物学常规方法制成的颗粒剂，由以下组份组成：三七总皂苷1～50份，灯盏花素1份，淀粉、糊精、微晶纤维素适量，其余为低取代羟丙基纤维素或其他药用辅料。
本发明所述的药剂，为采用药物学常规方法制成的水针剂，由以下组份组成：三七总皂苷1～50份，灯盏花素1份，EDTA适量，其余为注射用水。
本发明的药物可以采用现有制药领域中的常规方法生产，需要的时候可以添加各种药学上可接受的载体。所述载体包括药学领域常规的稀释剂、赋形剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体、润滑剂等。
本发明经过药理学研究和药效动物试验研究结果证明，由三七总皂苷与灯盏花素为主要成份制成的药物，在所选择的剂量范围内，可显著改善麻醉犬的血流动力学各项指标，改善麻醉犬结扎冠脉后的心肌缺血，显著改善急性血瘀模型大鼠的血液流变学指标，显著抑制血小板粘附和聚集，并有效抗血栓、延长小鼠尾出血时间。本发明试验研究结果证明，三七总皂苷与灯盏花素合并用药呈协同作用，药效明显增强。
本发明经过急性毒性动物试验研究结果表明，由三七总皂苷与灯盏花素为主要成份制成的药物，在所选择的剂量范围内给药，小鼠的LD50及95％可信限为534.4±120.9mg/kg；单方三七总皂苷LD50及95％可信限为531.8±113.7mg/kg；单方灯盏花素在溶解度范围内受试小鼠无死亡，无毒副作用。
本发明的优点在于：对已知的三七总皂苷与灯盏花素的相互作用、配伍组方进行研究，采用三七总皂苷与灯盏花素合理配伍后合并用药，经药理学实验证明，药效优于三七总皂苷单独用药或灯盏花素单独用药，药效提高，三七总皂苷与灯盏花素合并用药呈协同作用，急性毒理试验表明，无毒副作用，具有广泛的应用前景。
【具体实施方式】
实施例1：三七总皂苷和灯盏花素合并用药药效的研究
取受试动物小鼠，雄性，体重22±29g，数量240只，每组10只。
将小鼠在饲养观察室内观察一周，观察室内温度20±3℃，相对湿度30～70％，12小时光照，喂沈阳药科大学实验动物中心提供的机制料块，饮自来水。
受试动物随机分为24组，各组受试用药及剂量，详见表1。
表1：三七总皂苷和灯盏花素合并用药研究分组一览表 编组序号 受试药物 剂量(mg/kg) 1 灯盏 花素 0.65 2 1.30 3 2.60 4 5.20 5 三七 总 皂苷 8.0 6 16.0 7 32.0 8 64.0 9 灯盏花素/三七总 皂苷 0.65/8.0 10 0.65/16.0 11 0.65/32.0 12 065/64.0 13 1.30/8.0 14 1.30/16.0 15 1.30/32.0 16 1.30/64.0 17 2.60/8.0 18 2.60/16.0 19 2.60/32.0 20 2.60/64.0 21 5.20/8.0 22 5.20/16.0 23 5.20/32.0 24 5.20/64.0
静脉注射给药后，观察5分钟内死亡情况，并以死亡保护率(死亡保护率＝对照组死亡数—给药组死亡数/对照组死亡数)为指标，按公式
q＝EAB/(EA+EB-EA.EB)求出各组q值，其中三七总皂苷/灯盏花素16.00/0.65mg/kg组的q值最大，q＝2。
在三七总皂苷和灯盏花素组成的复方中，三七总皂苷为16.00mg/kg，灯盏花素为0.65mg/kg，对胶原-肾上腺素诱导的小鼠肺血栓死亡保护作用，用金氏概率相加法证明，三七总皂苷与灯盏花素按此比例配伍，药效增强，呈现协同作用。详见表2。
表2灯盏花素(A)、三七总皂苷(B)合并用药效果分析
(对胶原-肾上腺素诱导的小鼠肺血栓死亡的保护作用)n＝10 组别剂量(mg/kg) 保护率 q值 对照组 0 1/2A 0.65 0 A 1.30 0.4 2A 2.60 0.4 4A 5.20 0.4 1/2B 8.00 0 B 16.0 0.2 2B 32.0 0.4 4B 64.0 0.4灯盏花素/三七总皂苷(A/B) 1/2A/1/2B 0.65/8.0 0.2 0 1/2A/B 0.65/16.0 0.4 2 1/2A/2B 0.65/32.0 0.4 1 1/2A/4B 0.65/64.0 0.6 1.5 A/1/2B 1.30/8.0 0.2 0.5 A/B 1.30/16.0 0.2 0.38 A/2B 1.30/32.0 0.6 0.94 A/4B 1.30/64.0 0.6 0.94 2A/1/2B 2.60/8.0 0.4 1 2A/B 2.60/16.0 0.4 0.76 2A/2B 2.60/32.0 0.4 0.625 2A/4B 2.60/64.0 0.2 0.31 4A/1/2B 5.20/8.0 0.2 0.5 4A/B 5.20/16.0 0.2 0.76 4A/2B 5.20/32.0 0.6 0.94 4A/4B 5.20/64.0 0.4 0.625
实施例2：三七总皂苷与灯盏花素胶囊的制备
1、处方：三七总皂苷与灯盏花素胶囊由以下组份组成：三七总皂苷25份，灯盏花素1份，余量为70％乙醇。
2、具体制备工序：取三七总皂苷250g、灯盏花素10g，分别过100目筛，然后将其混合再过40目筛3次，使其混合均匀，加入70％乙醇作为湿润剂，再过20目筛制粒，将颗粒在60℃条件下烘干，再过20目筛整粒，然后装入2号胶囊壳中，此原料量可制成三七总皂苷与灯盏花素胶囊1000粒。
实施例3：三七总皂苷与灯盏花素缓释胶囊的制备
一、处方：
1、含药丸芯处方：
三七总皂苷 250g，
灯盏花素 10g，
微晶纤维素 47.5g，
乳糖 22.5g，
丸核 适量，
羟丙甲基纤维素 适量。
制成药粒1000粒，每粒含三七总皂苷250mg、灯盏花素10mg。
2、含药微丸包衣液处方：(每500g含药微丸用量)
丙烯酸树脂(Eudragit L 30D-55)水分散体 220g，
枸橼酸三乙酯(TEC) 26.6g，
滑石粉 68.2g，
十二烷基硫酸钠 0.55g，
水 262ml。
二、制备工序：
1、起模：称取微晶纤维素置于离心包衣造粒机内，开动离心包衣造粒机，并采取如下工艺参数：主机转速200rpm，鼓风流量20×20L/分钟，喷气流量15～20L/分钟，喷气压力0.5Mpa，喷浆泵转速65rpm。以5％羟丙甲基纤维素(5CP)水溶液为粘合剂喷浆，时间为4分钟，抛光时间为2分钟，抛光时维持泵速2rpm，出锅后经60℃烘干，然后筛分选取40～60目颗粒状母核。将40～60目颗粒状母核继续加微晶纤维素放大为28～26目丸核。
2、含药丸芯的制备：称取28～26目母核400g，置于离心包衣造粒机的料室内，另将120目的三七总皂苷250g、灯盏花素粉10g、120目的微晶纤维素47.5g和乳糖22.5g的混合粉末置于固体加料斗中，另加以5％羟丙甲基纤维素水溶液为粘合剂，开动离心包衣造粒机，并采取如下工艺参数：主机转速150～200rpm，喷浆泵转速15～25rpm，供粉速度15～35rpm，抛光时间6分钟，其余参数与起模工序相同。待药丸生长至18～24目大小时出锅，经60℃烘干2小时后即得含药微丸。
3、含药微丸的包衣：称取18～24目的含药微丸500g，置于离心包衣造粒机内，另外加丙烯酸树脂(Eudragit L 30D-55)水分散体220g、加枸橼酸三乙酯(TEC)26.6g、1250目滑石粉68.2g、十二烷基硫酸钠0.55g和水262ml，搅拌均匀作为包衣液。然后开动离心包衣锅进行包衣，并采取如下工艺参数：喷浆泵转速10～25rpm，主机转速150rpm，其余参数与起模工序相同，待包衣液喷完后停机。包衣量为13.0％～13.4％，优选13.2％。出锅后在40℃烘箱中老化24小时即可。
4、装胶囊：将上述含药包衣微丸素丸测定含量后填充2号普通胶囊即可。
实施例4：三七总皂苷与灯盏花素片剂的制备
一、处方：
三七总皂苷 35g
灯盏花素 1g
低取代羟丙基纤维素 68g
硬脂酸镁 1g
淀粉 适量
糊精 适量
微晶纤维素 适量
制成三七总皂苷与灯盏花素片剂1000片。
二、制备工序：
以上各组分除硬脂酸镁及低取代羟丙基纤维素外混和均匀，加入5～10％聚维酮乙醇溶液，制软材，然后过12～16目筛制成湿颗粒，将湿颗粒经40～60℃烘干后，加入低取代羟丙基纤维素及硬脂酸镁压片，即得。
实施例5：三七总皂苷与灯盏花素颗粒剂的制备
一、处方：
三七总皂苷 35g
灯盏花素 1g
低取代羟丙基纤维素 68g
硬脂酸镁 1g
淀粉 适量
糊精 适量
微晶纤维素 适量
二、制备工序：
以上各组分除硬脂酸镁及低取代羟丙基纤维素外混和均匀，加入5～10％聚维酮乙醇溶液，制软材，然后过12～16目筛制成湿颗粒，将湿颗粒经40～60℃烘干，即得。
实施例6：三七总皂苷与灯盏花素水针剂的制备
一、处方：
三七总皂苷 35g
灯盏花素 1g
EDTA 0.1g
注射用水加至 1000ml
二、制备工序：
取灯盏花素加入200ml注射用水混悬均匀，加入适量EDTA或其他抗氧化剂如亚硫酸氢钠，加Na2CO3溶液适量搅拌使其溶解，控制PH值为8.0～9.0；另取三七总皂苷加注射用水，加热使其溶解；将二种溶液混和，用10％HCl或2％Na2CO3溶液调节PH值至7.5～9.0，冲氮，灌封10ml、5ml、2ml，再经100℃高温45min灭菌即得。
实施例7：三七总皂苷与灯盏花素粉针剂的制备
一、处方：三七总皂苷 1000g
灯盏花素 40g
右旋糖酐 160g
制成粉针剂 8000支。
二、制备工序：
取处方量的灯盏花素，加注射用水6000ml，加2％的Na2CO3水溶液调节pH至8.5～9.0，搅拌使其溶解；另取处方量三七总皂苷加注射用水6000ml，加热使其溶解；再取右旋糖酐S40160g，加注射用水4000ml，加热至沸使其溶解。将上述三种溶液混合，用盐酸(1到10)溶液调节pH至7.5。加20g活性炭，搅拌吸附30分钟，滤过除炭，加注射用水至20000ml。0.22μm微孔滤膜过滤，测定含量，分装，每支2.5ml。冷冻干燥即得。冻干条件：真空度750mmHg，预冻温度-40℃，预冻时间2小时；升华温度-20℃，升华时间10小时；第一次干燥温度20℃，干燥时间4小时；第二次干燥温度40℃，干燥时间6～8小时，即得。
实施例8：三七总皂苷与灯盏花素注射液静脉给药对麻醉开胸犬血流动力学的影响
取30只杂种犬，体重在11.0～13.0公斤，每组5只，雌雄兼用，随机分为6组，第1组为0.9％NaCl对照组；第2～4组为三七总皂苷与灯盏花素注射液静脉给药3个剂量组，剂量分别为28mg/kg、14mg/kg、7mg/kg；第5组为血塞通14mg/kg经十二指肠给药组；第6组为灯盏花素14mg/kg经十二指肠给药组。各给药组在给药前用0.9％NaCl配制所需浓度药液，各组给药容积均为2ml/kg体重。
受试动物在戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉注射麻醉后，采取右侧卧位正压人工呼吸下，于左4～5胁间开胸，于距迷走神经2cm处打开心包，壁层做悬床将其缝合于胸壁，使心脏充分暴露。分离主动脉，在主动脉根部套入电磁流量计探头(10-12mm)，测量心输出量(CO)；在冠状动脉左前降支根部，分离心外膜，分离出约1cm冠状动脉，套入电磁流量计探头(2～3mm)，测量冠脉流量(CBF)；将此二探头连于LMTC-621型电磁流量计上，分离一侧颈总动脉，插管，连接压力换能器，记录动脉血压(AP)及平均动脉压(MAP)；将内径为1.5mm的心导管从心尖插入左心室，通过YZ-1型压力换能器经载波放大左室内压(LVP)，LVP电讯号经直流放大器放大10倍，记录左室舒张末期压(LVEDP)，以LVP电讯号再经BMI型微分器微分记录左室内压变化速率(dp/dtmax)，用针型电极插入受试动物四肢皮下，记录标II导联心电图(ECG-II)，以测量心率(HR)。上述各项指标变化均同步记录于RM-6300生理多导仪。
分离股动脉抽动脉血，经颈外静脉插管至冠状静脉窦抽取静脉血，根据CY-2型测氧仪使用说明书，用新鲜配制的无氧溶液(0.01M硼砂溶液加入无水亚硫酸钠结晶配制成2％的亚硫酸钠溶液)调零，用与空气平衡温度恒定的蒸馏水作灵敏度调节。待仪器稳定后用测氧仪测定血氧含量。试验结束后计算心肌耗氧量。
手术结束后，观察上述各项指标，稳定后将记录值作为给药前的指标，静脉给药后于1′，3′，5′，10′，20′，30′采集上述各项指标，并以给药后各时间点的各项指标变化率(％)，与对照组各对应时间点的各项指标的变化率(％)做组间显著性成对资料的t-test处理。
试验结果表明：在所选择剂量范围内静注三七总皂苷与灯盏花素注射液对受试犬心率(HR)，平均动脉压(MBP)、左室内压(LVP)及心室肌收缩力(dp/dtmax)均有降低作用。心肌耗氧量于给药后1分钟即开始降低，最大值达18.7％，作用时间达30分钟以上，与对照组比较有非常显著差异(P＜0.01)，但十二指肠给药组起效缓慢。
实施例9：三七总皂苷与灯盏花素注射液对麻醉犬急性心肌缺血的影响
取30只杂种犬，体重在11.0～13.0公斤，每组5只，雌雄兼用，随机分为6组，第1组为0.9％NaCl对照组；第2～4组为三七总皂苷与灯盏花素注射液静脉给药3个剂量组，剂量分别为28mg/kg、14mg/kg、7mg/kg；第5组为血塞通14mg/kg经十二指肠给药组；第6组为灯盏花素14mg/kg经十二指肠给药组。各给药组在给药前用0.9％NaCl配制所需浓度药液。
受试动物在戊巴比妥钠(30mg/kg)静脉注射麻醉后，先剖开一侧股静脉，准备给药用；再进行气管插管，人工呼吸，呼吸频率为30次/分，呼吸时间比为1.5∶1，潮气量为300ml。动物在右侧卧位人工呼吸条件下，于左侧第4～5胁间开胸，在距迷走神经2cm处，沿迷走神经剪开心包，壁层做悬床将其缝合于胸壁，使心脏充分暴露，在冠状动脉左前降支近1/2处，从冠状动脉下引线准备结扎用。将心外膜电极缝于心外膜上，经波段开关连于EK10型单道自动心电图机上，记录心外膜电图，计算30个导联ST移位的总和(∑ST)，及ST移位超过1mV的导联数(N-ST)，以结扎后15分钟时为给药前的值。各组犬从股静脉分别滴入相应剂量的受试药物，给药容积为3ml/kg体重，给药速度为2ml/分。同时记录给药后30分钟、60分钟、120分钟、180分钟心外膜电图，计算∑ST，N-ST及其变化率；于冠状动脉结扎前、结扎后60分钟，120分钟和180分钟，分别从股静脉采血，化验肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)活力。给药后3小时，取下心脏称重后，剪除心房及右室，称左室重，冰冻30～40分钟，于冠脉结扎点下，与冠状沟平行将心室肌切成等厚的5片，将5片心室肌置于37℃的1％N-BT染液中，振摇染色15分钟取出，梗死区染成浅红色，非梗死区为暗红色，计算梗死区占缺血心室、心脏重量的百分比。
试验结果表明，三七总皂苷与灯盏花素注射液，静脉给药对冠状动脉结扎犬心肌缺血有明显的改善作用，表现为：1.各给药组给药后，心外膜电图ST段位移总和(ZST)，及ST移位超过1mV导联数(N-ST)的变化率，明显低于对照组，有非常显著或显著的差异。2.各给药组，于结扎冠状动脉后，给药的不同时间点的血清肌酸激酶(CK)的变化率，与对照组比较明显下降，低于对照组，有非常显著或显著的差异；与对照组比较，乳酸脱氢酶(LDH)的变化率，也有非常明显的下降趋势，比对照组有非常显著或显著的差异。3.心肌梗死范围的定量组织学测定结果表明：各给药组梗死心肌重量/心室重量百分比、梗死心肌重量/全心重量百分比，均明显低于对照组，其间有非常显著或显著的差异。
实施例10：三七总皂苷与灯盏花素注射液对大鼠体外血小板粘附的影响
取大鼠70只，体重250～380g，雌雄各半。按体重随机分为七组，第1组为0.9％NaCl对照组；第2组为模型对照组；第3～5组为三七总皂苷与灯盏花素注射液静脉给药3个剂量组，剂量分别为100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg；第6组为血塞通50mg/kg静脉给药组；第7组为灯盏花50mg/kg静脉给药组。各给药组在给药前用0.9％NaCl配制所需浓度药液，各组给药容积均为10ml/kg体重。
连续7天静脉注射给药，最后一次给药后10分钟，在水合氯醛(350mg/kg)麻醉状态下，将大鼠仰卧，固定于固定板上，剪开胸腔，用一次性注射器从心脏取血2ml，以3.8％枸橼酸钠(1∶9)抗凝，500rpm/min离心5分钟，取10μL血浆加0.38ml草酸铵稀释液混匀后，取血小板悬液一滴注入记数池内，静置10～15分钟，使血小板下沉，用10×40显微镜记数中央一个大方格内血小板数，乘以0.2×109即为每升血液中血小板数。另取1ml血浆置于粘附瓶内，置于粘附仪中，17rpm/min离心15分钟，取出10μL，以上述同样方法记数血小板数，计算出血小板粘附率，血小板粘附率＝(粘附前血小板数—粘附后血小板数)/粘附前血小板数×100％。
试验结果表明：大鼠静脉注射三七总皂苷与灯盏花素注射液，对大鼠体外血小板粘附有明显的抑制作用，与对照组和等剂量单方组比较，均有非常显著性的差异。
实施例11：三七总皂苷与灯盏花素注射液对ADP诱导的家兔血小板聚集性的影响
取家兔36只，体重2.0～3.0kg，雌雄兼用。随机分为6组：第1组为正常对 照组；第2～4组为三七总皂苷与灯盏花素注射液静脉给药高、中、低三个剂量组，剂量分别为60mg/kg、30mg/kg、15mg/kg；第5组为血塞通30mg/kg给药组；第6组为灯盏花30mg/kg静脉给药组。各组动物分别静脉注射相应药物，给药后10分钟，耳缘静脉取血2ml，用3.8％构橼酸钠(1∶9)抗凝。对照组血小板聚集率为50±10％，聚集剂ADP浓度为2.2μM，常规制备PRP、PPP，用PAM-3型双通道血小板聚集仪测定各组血小板聚集率，并求出聚集抑制率。
聚集抑制率％＝(对照组聚集％—给药组聚集％)/对照组聚集％×100％以聚集率为指标进行组间比较显著性检验。
试验结果表明：家兔静脉注射三七总皂苷与灯盏花素注射液后，与对照组比较，对ADP诱导的家兔血小板聚集，有非常显著的抑制作用，而且其作用明显强于单方各组。
实施例12：三七总皂苷与灯盏花素注射液对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响
取大鼠70只，体重250～380g，雌雄各半，随机分成7组，第1组为对照组；第2组为急性血瘀模型组；第3～5组为三七总皂苷与灯盏花素注射液静脉给药高、中、低三个剂量组，剂量分别为100mg/kg、50mg/kg、25mg/kg；第6组为血塞通50mg/kg给药组；第7组为灯盏花50mg/kg静脉给药组。对照组和急性血瘀模型组每天静脉注射0.9％氯化钠溶液，给药容积为1ml/kg体重，其余各组按等容积注射给相应药物，连续给药7天。第六天，除对照组外，其余各组均在皮下注射肾上腺素0.08ml/kg，共注射两次，间隔6小时。最后一次给药后1分钟，在水合三氯乙醛麻醉条件下，固定，开胸，心脏取血5ml，测各组各只动物血液流变学各项指标。
试验结果表明：大鼠静脉注射三七总皂苷与灯盏花素注射液后，能显著降低全血粘度及血浆粘度，缩短红细胞电泳时间，与模型组比较，有显著或非常显著性差异。
实施例13：三七总皂苷与灯盏花素注射液对家兔颈总动脉血栓的作用
取家兔36只，体重2.0～2.7kg，雌雄兼用，随机分为6组：第1组为对照组；第2～4组为三七总皂苷与灯盏花素注射液静脉给药高、中、低三个剂量组，剂量分别为60mg/kg、30mg/kg、15mg/kg；第5组为血塞通30mg/kg给药组；第6组为灯盏花30mg/kg静脉给药组。对照组静脉注射0.9％氯化钠溶液，给药容积为5ml/kg体重，其余各组按相等容积静脉注射给相应药物。
连续七天给药，最后一次给药后10分钟，按文献方法对家兔实施颈总动脉血栓手术，术后2小时取出并称量所形成血栓的湿重。
试验结果表明：家兔静脉注射三七总皂苷与灯盏花素注射液，中、高剂量实验组动物，形成的血栓重量明显减少，显著抑制了家兔穿线法颈总动脉血栓的形成，与对照组比较，有非常显著性的差异，而且其作用强于等剂量的单方组。
实施例14：三七总皂苷与灯盏花素注射液对小鼠尾出血时的影响
取小鼠60只，体重19～23g，雌雄各半，实验前禁食6小时，随机分为6组：第1组为对照组；第2～4组为三七总皂苷与灯盏花素注射液静脉给药高、中、低三个剂量组，剂量分别为140mg/kg、70mg/kg、35mg/kg；第5组为血塞通70mg/kg给药组；第6组为灯盏花70mg/kg给药组。对照组静脉注射0.9％氯化钠溶液，给药容积为20ml/kg体重，其余各组按相等容积静脉注射给相应药物。给药后10分钟，用手术刀片于小鼠尾尖3mm处快速切去尾尖，即用秒表计时，每隔30s用滤纸吸一下，当滤纸上无出血点时，记下从切尾出血到滤纸上无出血点的时间，即小鼠尾出血时。
试验结果表明：小鼠静脉注射三七总皂苷与灯盏花素注射液后，与对照组比较，对小鼠体外凝血时间均有显著或非常显著的延长作用，而且其作用强于单方组。