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治疗抑郁症和其它相关的失调的草药配方及其制备方法
技术领域
本发明有关于一草药配方，特别地为一治疗抑郁症和其它相关的失调的配方。本发明并涉及有关于预备所述草药配方的方法。
背景技术
一般而言，抑郁症是指一个悲伤的状态，而受其影响的个体因依其情况的严重性而会体验到不同程度的社交机能及其日常活动力崩溃。常见症状可包括失去兴趣，感觉到无法抵抗的悲伤或恐惧，胃口改变与及显着的体重改变，和自信降低。
药物治疗和心理疗法是用于治疗抑郁症的两种典型方法，而这两种方法通常联合使用。三环类抗抑郁药(TCA)，选择性血清素再吸收抑制剂(SSRI)和单胺氧化酶抑制剂(MAOI)是广泛治疗抑郁症的药物。但是，使用这些药物会产生副作用如性功能障碍和药物倚赖，然后导致药物滥用。
发明内容
基于上述背景，本发明目的是提供一草药配方作为治疗抑郁症和其它相关的失调的替代。
因此，本发明在一方面提供一草药配方，其包含以下成份：淮小麦，百合，生地，首乌藤，大枣，合欢花，茯神，和生姜。
在一个更优选的实施方案中，所述草药配方进一步包括最少一额外成份如生龙骨，生牡蛎，竹茹，或炙甘草。
本发明在一个优选实施方案中，所述草药配方用以治疗抑郁症或焦虑症。
在另一个优选实施方案中，所述草药配方的组合物在表2中列明，其中所述配方的成份提供治疗抑郁症或焦虑症最佳效力的份量。
本发明另一方面提供了含有如上述成分的所述草药配方的制备方法，包括以开水萃取所述成份和浓缩所述萃取成分以形成口服配方。
在上述方法的其中一个实施方式，提供进一步的萃取步骤，其中一最初草药混合物包括生龙骨和生牡蛎首先煮沸，蒸煮并循环萃取1到2小时，接着以另一步骤，与所述最初草药混合物一起煮沸，蒸煮并循环萃取余下成份包括淮小麦，百合，生地，首乌藤，大枣，合欢花，炙甘草，茯神，竹茹，和生姜的草药混合物1到3小时。
在所述方法的另一个实施方式中，所述草药混合物进一步煮沸，蒸煮并循环萃取0.5到2小时。
在所述方法的一个最优选的实施方式中，所述浓缩步骤进一步包括在减压情况下浓缩所述萃取物；混合所述浓缩萃取物与赋形剂；真空干燥所述混合物；研磨所述已干燥的混合物成粉末；和筛分所述粉末以得到幼细的粉末。在最优选的实施方案中，所述赋形剂是糊精。
在本发明方法的另一个实施方式中，提供制备包括前述成份的所述草药配方的方法，所述方法包括煮沸，蒸煮并循环萃取包括生龙骨和生牡蛎的最初草药混合物1.5小时；与最初草药混合物一起煮沸，蒸煮并循环萃取所述余下成份包括淮小麦，百合，生地，首乌藤，大枣，合欢花，炙甘草，茯神，竹茹，和生姜的草药混合物2小时；煮沸，蒸煮并循环萃取所述草药混合物1小时；在减压情况下浓缩所述萃取物；混合所述浓缩萃取物与糊精；真空干燥所述混合物；研磨所述已干燥的混合物成粉末；和筛分所述粉末以得到幼细的粉末。
附图说明
图1和2根据本发明其中一个实施方案，分别地勾勒出所述萃取和浓缩程序以制备所述用以治疗抑郁症和其它相关的失调的草药配方。
图3是在紫外光下以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸(40∶4∶3)为展开剂崩解本发明配方的薄层透析片影像。
图4是显示所述草药配方在小鼠中的抗抑郁活性的条形图。
具体实施方式
如本说明书和权利要求书所用，″包括″是指包括跟随的成份但不排除其它成份。所述“煮沸”是指将草药与水加热至高温的步骤，通常是加热至100℃±5℃。所述“蒸煮”是指将草药与水加热并维持热度在90℃与100℃之间。
本发明提供一草药配方，所述配方包括下列表1所列明的其中一个最优选实施方案的成分，以药名，相对的炮制形式，常用名，相关草药和别名排列。
表1

  药名  相对的炮制  形式  常用名  相关草药  别名  1  生龙骨  Os Draconis  煅龙骨  Os Draconis  (calcined)  龙骨  Os Draconis  龙齿  Dens  Draconis  及炮制品  --  2  生牡蛎  Concha Ostreae  煅牡蛎  Concha  Ostreae  (calcined)  牡蛎  Concha  Ostreae  --  --  3  淮小麦  Fructus Tritici  Aestivi  --  小麦  Fructus  Tritici  Aestivi  浮小麦  Fructus  Tritici  Levis  --  4  百合  Bulbus Lilii  蜜百合/炙  百合  Bulbus Lilii  (Stir baked  with honey)  百合  Bulbus Lilii  --  --  5  生地  Radix Rehmanniae  熟地/熟地  黄  Radix  Rehmanniae  Preparata  地黄  Radix  Rehmanniae  --  鲜地黄/生地  黄/干地黄  Radix  Rehmanniae  6  首乌藤  Caulis Polygoni  Multiflori  --  首乌藤  Caulis  Polygoni  Multiflori  --  夜交藤  Caulis  Polygoni  Multiflori
  7  大枣  Fructus Jujubae  --  大枣  Fructus  Jujubae  --  --  8  合欢花  Flos Albiziae  --  合欢花  Flos  Albiziae  合欢皮  Cortex  Albiziae  --  9  炙甘草  Radix et.Rhizoma  Glycyrrhizae  Praeparata Cum Melle  --  炙甘草  Radix et.  Rhizoma  Glycyrrhizae  Praeparata  Cum Melle  甘草/甘草粉  Radix et.  Rhizoma  Glycyrrhizae  蜜甘草  Radix  Glycyrrhizae  Praeparata  10  茯神  Sclerotium Poriae  Circum Radicem Pini  --  茯神  Sclerotium  Poriae  Circum  Radicem Pini  茯神/茯苓皮  Poria  --  11  竹茹  Caulis Bambusae in  Taenia  姜竹茹  Caulis  Bambusae in  Taenia(Stir  backed with  ginger  juice)  竹茹  Caulis  Bambusae in  Taenia  --  淡竹茹  Caulis  Bambusae in  Taenia  12  生姜  Rhizoma Zingiberis  Recens  干姜  Rhizoma  Zingiberis  炮姜Rhizoma  Zingiberis  Praeparatum  生姜  Rhizoma  Zingiberis  Recens  生姜  Rhizoma  Zingiberis  --
本发明优选实施方案中，所述配方和如权利要求书所用的个别成份一般是草药本身的药名(表1第2栏)，但亦可以使用炮制形式(表1第3栏)和相关草药(表1第5栏)作替代物或等价物。
(*成份9中的名称，炙甘草是由中华人民共和国2005年版药典中取得。成份9中的另外一个名称，蜜甘草，是由较旧版的中华人民共和国药典中取得。同样地，蜜甘草的未炮制形式在较旧版的中华人民共和国药典中的名称是甘草。这种未炮制形式可以作为替代物或等价物，而炙甘草应该理解为以炮制形式或未炮制形式。)
在更优选的实施方案中，所述草药配方的组合物采用如表1第2栏所列明的并在下述表2列明。
表2
  编号  草药  成分(kg)  重量百分比％  1  生龙骨  30  10  2  生牡蛎  30  10  3  淮小麦  60  20  4  百合  30  10  5  生地  30  10  6  首乌藤  30  10  7  大枣  30  10  8  合欢花  18  5  9  炙甘草  18  5  10  茯神  12  4  11  竹茹  9  3  12  生姜  9  3  总数  306  100
图1与2描述制备本发明所述草药配方的主要步骤。
依照图1，提供上述草药的萃取步骤。在第一个萃取方法20a的起首步骤，根据萃取程序将生龙骨粉和生牡蛎粉分别放置在布袋中并放进过滤器里。然后以1∶6(总成份：水)的比例将水注入所述过滤器，并且加热至煮沸(换言之，每100千克总成份，要使用600公升水)。然后将所述已加热的最初草药混合物在90℃与100℃之间蒸煮，并循环萃取1.5小时。当冷却至50℃时，将余下的草药，即是淮小麦，百合，生地，首乌藤，大枣，合欢花，炙甘草，茯神，竹茹，和生姜放进所述过滤器并浸泡30分钟，如第一个萃取方法的最后一个步骤20b所示。所述草药混合物然后再加热至煮沸并在90℃与100℃之间蒸煮，和循环萃取2小时。在循环萃取程序时，所述草药混合物每15分钟循环一次，每个循环10分钟。然后，所述草药混合物过滤成第一次滤出液和第一次残渣。
在第二个萃取方法的步骤22，所述第一次残渣以1∶5(总成份：水)的比例加热至煮沸(换言之，每100千克总成份，要使用500公升水)，在90℃与100℃之间蒸煮，和循环萃取1小时。接着在这加热程序中，将所述混合物每15分钟循环一次，每个循环10分钟。然后，所述混合物过滤并将滤出液和第一次滤出液混合。
图2显示出由上述萃取方法制成的萃取物的浓缩步骤。在浓缩步骤30中，根据浓缩程序将所述混合滤出液在减压情况下浓缩成一潮湿糊状物，相对密度在55℃至65℃时介乎于1.10和1.30之间。在一更优选的实施方案中，所述潮湿糊状物的相对密度是介乎1.25和1.30之间。接着所述潮湿糊状物与一赋形剂(步骤32)混合，搞拌并真空干燥(步骤34)。在一更优选的实施方案中，所述赋形剂是糊精。收集湿度少于5％的已干燥的糊状物。然后，所述已干燥的糊状物以锤式粉碎机压碎(步骤36)，接着的筛分步骤38将所述糊状物通过一80网孔筛成幼粉成为口服配方的最后产品。
如下实施例进一步详细说明本发明，但不代表限定本发明。
实施例1
薄层透析分析
成份列明在表2的三批所述草药配方各取5克，加入40mL甲醇。混合溶液然后以超声波萃取15分钟并过滤。将滤出液蒸发。滤出物残渣以10mL乙酸乙酯溶解并再过滤。当滤出液蒸发后，滤出物残渣进一步以1mL乙酸乙酯溶解，最后得出的溶液为分析样本。使用1mg/1mL在甲醇中的大黄素参考溶液为对照。根据中华人民共和国2000年版药典，卷I，附录VIB进行薄层透析分析。将三个样本和对照溶液各10μL，分别点在一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上。薄层板上的样本以甲苯∶乙酸乙酯∶甲酸(40∶4∶3)的上层溶液为展开剂。晾干后，将薄层版在紫外光灯波长365nm下检视。
结果在图3显示，其中，所述三个样本分别标记为1-3，而所述对照为4。观察所得，全部三个样本在与对照在薄层版相应的位置上显示相同颜色的荧光，这表示所述三个样本有高的可重复性和良好的稳定性。
实施例2
口服急性毒性测试
四十只ICR小鼠，雌雄各半，在测试开始时重18-20g，由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。实验前小鼠先禁食十四小时。
将小鼠分为对照组和测试组。测试组小鼠每只以0.4mL/10g体重(BW)的草药配方以灌胃方式给予。给予小鼠的溶液，是以去离子水溶解所述草药配方(成份于表2列明)配制成浓度为0.357g/mL。对照组只以相同给药途径接受相同容量的去离子水。给药后立刻观察小鼠的反应，外观，四肢活动，食物摄取，饮水和排泄。小鼠每天观察一次，隔日称重一次，连续观察7天。小鼠的反应详细记录在下述表3。
表3

备注：“-”代表正常
结果显示，连续7天的观察后，给药后的动物并没有出现异常性反应，包括外观，四肢活动，食物摄取，饮水和排泄。所有小鼠健康存活，体重有上升。测试组和对照组的差别不显着(P＞0.05)；毒性反应不能以肉眼观察。
实施例3
杀虫剂残余物测试
本测试以SGS香港有限公司用TCM PEST1-001方法进行，使用溶剂萃取所述草药配方样本(含表2列明的成份)，然后以气相色谱-质量色谱分析。本方法为香港实验所认可计划认可，等同于国际实验所标准ISO 17025。
表4
  杀虫剂残余物  结果  (mg/kg，or ppm)  最高可接受  标准  (mg/kg)  艾氏剂和狄氏剂  ＜0.02  0.05  氯丹(cis，trans和氧氯丹总和)  ＜0.03  0.05  DDT(p，p’-DDT，o，p’-DDT，p，p’-DDE和p，p’-TDE总和)  ＜0.10  1.00  异狄氏剂  ＜0.01  0.05  七氯(七氯和环氧七氯)  ＜0.02  0.05  六氯(代)苯  ＜0.02  0.10  六氯环已烷异构体(除gamma外)  ＜0.21  0.30  林丹  ＜0.06  0.60  五氯硝基苯(五氯硝基苯，五氯苯胺和methyl  pentachlorophenyl sulphide总和)  ＜0.06  1.00
上述表4显示本测试的结果指出，萃取浓缩的所有杀虫剂残余物在分析下低于香港特别行政区政府卫生处参照国际标准订明的最高可接受标准。
实施例4
重金属与有毒成份测试
本测试以SGS香港有限公司用TCM HM1-001方法进行，使用在酸性混合物中的所述草药配方样本的消化物(含表2列明的成份)，然后以感应藕合氩电浆原子发射光谱仪量度。本方法为香港实验所认可计划认可，等同于国际实验所标准ISO 17025。
表5

数值基于客户给予的最高剂量计算出：500mg/unit，2unit/dose，3dose/day
上述表5显示本测试的结果指出，萃取浓缩的所有重金属与有毒成份在分析下低于香港特别行政区政府卫生处参照国际标准订明的最高可接受标准。
实施例5
微生物测试
本分析测试参照中华人民共和国2000版药典，卷1，附录XIIIC，使用由含表2列明的成份的所述草药配方抽取的样本进行。本方法为香港实验所认可计划认可，等同于国际实验所标准ISO 17025。
表6


备注：“-”表示不在每克或每毫升检定
上述表6显示本测试的结果指出，微生物数量低于香港特别行政区政府卫生处参照国际标准订明的最高可接受标准
实施例6
抗抑郁活性：小鼠的强逼游泳测试
强逼小鼠在不能逃走的挟长圆筒内游泳能引发抑郁。经过最初时段的强烈活动，所述小鼠能明显识别出会采用一典型不动的体位。使用不同的抗抑郁剂治疗后，这种不动的体位减少。因为本测试程序简单，而且可重复性非常高，所以本测试方法是药理学上标准的抗抑郁剂测试。
本测试药品是如表2所描述的所述草药配方，根据如图1和2所示的方法制备成粉状。对照药品是丙咪嗪(Imipramine HCl)由Sigma-AldrichQuimica，S.A提供。
55只在测试开始时重20-25克的雄性CD1小鼠由Charles RiverLaboratories(Barcelona，Spain)得到。在实验开始前，这些小鼠经过六天的预先适应环境时段，其时这些小鼠亦会经过兽医检查以确保健康。
所述小鼠随机地分为五组，每组包含十只动物。余下的动物(每组一只)留下作为储备(这些动物并没有计算在最后结果中)。实验设计如表7描述。
表7
  组别  治疗方式  剂量  给药途径  颜色码  A  对照  -  口服  白  B  丙咪嗪  30mg/kg  腹膜内  黄  C  草药配方  100mg/kg  口服  蓝  D  草药配方  200mg/kg  口服  绿  E  草药配方  300mg/kg  口服  红
所述小鼠在治疗前先要经过大约6小时的禁食时段。在实验初期，对应治疗以10mL/kg的份量，在预先指定的给药途径施予。所述测试项目以三种剂量，100，200和300mg/kg以口服方式给予(灌胃或口服)。对照项目以30mg/kg的剂量经腹膜内给药。对照组只接受经口服灌胃给药的载体(可注射水)。
给药后6分钟，将每只小鼠丢进装了水的圆筒(强逼游泳)，实验时间为6分钟。记录动物的不动体位时间。当小鼠停止挣扎和只维持仅有活动令头部于水上漂浮时，小鼠被视为不动。因为最初的两分钟只有很少的不动情况被观察到，所以最后四分钟的不动才被量度。最后，当实验完结时，所述动物会以颈椎脱位处死。
表8显示体重和不动时间的全部数值。图4是图示不动时间。表9(体重)和10(不动时间)显示相对的个别数值。
表8

单因素方差分析        N.S        p＜0.01
S-N-K分析(p＜0.05)               B D C E A
*差异相对对照组别
表9
小鼠的强逼游泳测试
体重(g)个别数值


表10
小鼠的强逼游泳测试
不动时间(s)个别数值


在不同治疗组之间，所得的体重数值并无统计学上明显的差异(单因素方差分析，p＜0.01)。
相比起对照组，将对照药品以剂量为30mg/kg从腹膜内给药会引起不动时间的显着减少(56.2％)，而这些差异相比所述对照组是统计学上有意义的(S-N-K分析，p＜0.05)。
相比于对照组，测试药品以剂量为100，200和300mg/kg从口服方式给药会产生不动时间有分别为11.5％，21.9％和10.1％的减少。相比于对照组，唯一在统计学上有明显的差异是剂量为200mg/kg的测试药品组。然而，所述不动时间的减少是明显地低于对照药品治疗组(以SNK分析的出两组的明显差异，p＜0.05)。因对照药品是从腹膜内的给药途径给药，所以与测试药品组(经口服)相比剂量是较高的。
总结来说，在实验情况之下，剂量为200mg/kg的测试药品组(经口服)有着某些抗抑郁活性，尽管对比剂量为30mg/kg的对照药品组为少(经腹膜内给药)。
此外，在给予剂量分别为100，200和300mg/kg的测试药品后所得的平均数值，在统计学上没有明显差异，而在实验情况下并没有观察到一个清晰的剂量-效果关系。另一方面，不动时间的结果显示出最佳剂量是200mg/kg。
实施例7
临床观察以表2配方治疗的病人
两个患有抑郁症或与焦虑相关失调的病人参与研究，病人详细资料如表11所示。
表11
  病人  1  2  年纪  35  38  性别  女性  女性  病历  因婚姻问题产生的抑郁症  无外表原因的瘙痒症但推测为与焦虑  有关的  治疗剂量  每两日两胶囊  每日两胶囊  治疗期  三个星期  三个星期
在本研究中，病人服用的胶囊是根据含有表2列明的成份的所述草药配方。经治疗后，第一个病人完全恢复至正常，而第二个病人的瘙痒症有明显改善。
实施例8
草药配方的替代成份
在一个如上述最优选实施方案的变化中，表12列明所述草药配方的替代成份，其中炙甘草并不包括在此成分内。
表12
  编号  草药  成分(kg)  重量百分比％  1  生龙骨  4.500  17.86  2  生牡蛎  3.150  12.50  3  淮小麦  4.500  17.86  4  百合  2.250  8.93  5  生地  2.250  8.93  6  首乌藤  2.250  8.93  7  大枣  2.250  8.93  8  合欢花  1.350  5.36  9  茯神  1.350  5.36  10  竹茹  0.675  2.67  111  生姜  0.675  2.67  总数  25.200  100.00
除所述第一个萃取方法的步骤20b有一个额外步骤之外，所述制备有替代成份的草药配方的方法和制备包含表2列明成份的配方的方法几乎相同。在将混合物煮沸和蒸煮之前，先将含有生龙骨和生牡蛎最初草药混合物放进过滤器，然后将余下的草药如淮小麦，百合，生地，首乌藤，大枣，合欢花，茯神，竹茹和生姜放进所述过滤器，将过滤器以总成份：水(1∶2)的比例注满水(换言之，每100kg总成份，使用200公升水)。
实施例9
临床观察以表12配方治疗的病人
20位患有创伤后压力心理障碍症或季节性情绪失调的病人参与本研究。病人详细资料如表13所示。
表13
  病人年龄  ＞45  病人性别  11女性/9男性  病人病历  5/20从来没有使用过抗抑郁剂  15/20以前用过SSRIs  大部分病人失眠或睡眠过量  12/20疲劳  10/20感觉一无是处或内疚  15/20难以集中精神  20％-4/20有想过自杀  治疗剂量  每日三次每次一颗胶囊  治疗时期  两星期  同时给与西药  没有
在这项研究中，病人所服用的胶囊为含有实施例8表12列明的成份的草药配方。
表14显示了本研究的结果，而所述观察是治疗后两星期所作出的。简而言之，大约75％的病人体验到能力有所改善以应付日常生活的活动，而90％的病人有动力上/活力上有改善。
表14
  治疗后两星期观察  1.70％的病人对情绪失调困扰有改善(14/20)  2.75％的病人体验到能力有所改善以应付日常生活的活动(15/20)  3.90％的病人有动力上/活力上有改善(18/20)  4.20％的病人性欲有改善(4/20)  5.90％的病人普通外观有改善(18/20)
本发明的优选实施方案在此完全描述。尽管本说明书提及个别实施例，本发明所属领域的技术人员清楚知道本发明可在本发明范围内对其加以修改。因此，本发明不应被理解为仅限于上述实施例所载。
例如，本配方可以不同型式口服如粉剂，胶囊或液体。所以，制备粉剂的所述浓缩和干燥步骤是优选但并不是本发明的必要部分。在优选的实施方案中，所述第一萃取方法(如图1所示的步骤20a和20b)描述生龙骨和生牡蛎首先被萃取，但本发明也可在单一萃取中同时将全部成份萃取。此外，所述配方使用糊精为赋形剂，但其它黏合剂和/或填充剂亦可使用。