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苯并吡喃和苯并氧杂
     PI3K 抑制剂化合物和使用方法相关申请的交叉引用
     本申请要求美国临时申请序列号 61/040,827(2008 年 3 月 31 日申请 ) 和美国临 时申请系列号 61/102,220(2008 年 10 月 2 日申请 ) 的权益， 将每个以其整体结合到本文中 作为参考。 发明领域
     本发明通常涉及具有抗癌活性的化合物， 且更具体地说， 涉及可抑制 PI3 激酶活 性的化合物。本发明还涉及使用该化合物的体外、 原位和体内诊断或治疗哺乳动物细胞或 有关的病理性病症的方法。
     发明背景
     磷脂酰肌醇 ( 在下文缩写为 “PI” ) 是在细胞膜中发现的许多磷脂中的一种。近年 来， 人们已经了解 PI 在胞内信号转导中起重要作用。 通过 3′ - 磷酸化磷酸肌醇的细胞信号 涉及各种细胞代谢过程， 例如， 恶变， 生长因子信号， 炎症和免疫 (Rameh 等人 (1999)J.Biol Chem， 274 ： 8347-8350)。 最初， 确定了负责形成这些磷酸化信号产物的酶 ( 磷脂酰肌醇 3- 激 酶 ( 还称为 PI 3- 激酶或 PI3K)) 为与病毒癌基因蛋白质和生长因子受体酪氨酸激酶有关 的活性， 其中生长因子受体酪氨酸激酶将磷脂酰肌醇 (PI) 和其在肌醇环的 3′ - 羟基处的 磷酸化的衍生物磷酸化 (Panayotou 等人 (1992)Trends Cell Biol 2 ： 358-60)。
     磷酸肌醇 3- 激酶 (PI3K) 是将肌醇环的 3- 羟基残基处的脂质磷酸化的脂质激酶 (Whitman 等人 (1988)Nature， 332 ： 664)。通过 PI3- 激酶形成的 3- 磷酸化磷脂 (PIP3s) 起 到第二信使的作用， 这种第二信使可补充具有脂质结合区域 ( 包括 plekstrin 同源 (PH) 区 域 ) 的激酶， 例如 Akt 和磷酸肌醇 - 依赖性激酶 -1(PDK1)。Akt 与膜 PIP3s 的结合导致 Akt 向质膜的迁移， 使得 Akt 与 PDK1 接触， 其负责 Akt 的活化。肿瘤抑制磷酸酶 (PTEN) 使 PIP3 脱去磷酸， 并因此起到 Akt 活化的负调节物的作用。PI3- 激酶 Akt 和 PDK1 在许多细胞代 谢过程 ( 包括细胞周期调节， 增殖， 存活， 细胞程序死亡和活动性 ) 的调节中很重要， 并且是 疾病 ( 例如癌， 糖尿病和免疫性炎症 ) 的分子机制的重要组成部分 (Vivanco 等人 (2002) Nature Rev.Cancer 2 ： 489 ； Phillips 等人 (1998)Cancer 83 ： 41)。
     在 癌 症 中， 主 要 的 PI3- 激 酶 异 构 型 是 I 类 PI3- 激 酶 (p110α(alpha))(US 5824492 ； US 5846824 ； US 6274327)。 其 它 异 构 型 涉 及 心 血 管 并 且 免 疫 - 炎 症 性 疾 病 (Workman P(2004)Biochem Soc Trans32 ： 393-396 ； Patel 等人 (2004)Proceedings of the American Association of Cancer Research(Abstract LB-247)95th Annual Meeting， March 27-31， Orlando， Florida， USA ； Ahmadi K and Waterfield MD(2004)Encyclopedia of Biological Chemistry(Lennarz W J， Lane M Deds)Elsevier/Academic Press)。
     PI3 激酶 /Akt/PTEN 途径是癌症药物开发的有吸引力的靶向， 这是由于预期这种 药剂会抑制增殖、 逆转细胞程序死亡的抑制和克服癌细胞中对细胞毒素药剂的耐受性。已 经报道了 PI3 激酶抑制剂 (Yaguchi 等人 (2006)Jour.of the Nat.Cancer Inst.98(8) ： 545-556 ； US 7173029 ； US 7037915 ； US 6608056 ； US 6608053 ； US 6838457 ； US 6770641 ；US 6653320 ； US6403588 ； US 6703414 ； WO 97/15658 ； WO 2006/046031 ； WO 2006/046035 ； WO 2006/046040 ； WO 2007/042806 ； WO 2007/042810 ； WO 2004/017950 ； US 2004/092561 ； WO 2004/007491 ； WO 2004/006916 ； WO 2003/037886 ； US 2003/149074 ； WO 2003/035618 ； WO 2003/034997 ； US 2003/158212 ； EP 1417976 ； US 2004/053946 ； JP 2001247477 ； JP 08175990 ； JP 08176070).
     包括 p110α 结合活性 (US 2008/0207611 ； US 2008/0039459 ； US2008/0076768 ； WO 2008/073785 ； WO 2008/070740)。
     本发明概述
     本发明通常涉及具有抗癌活性的式 I 的苯并氧杂化合物， 且更具体地说， 具有PI3 激酶抑制活性。某些高增殖性病症的特点在于调节 PI3 激酶功能， 例如， 通过蛋白的突 变或超表达。相应地， 本发明的化合物可以用于治疗高增殖病症， 例如癌症。该化合物可以 抑制哺乳动物的肿瘤生长， 并且可用于治疗人癌症患者。
     本发明还涉及使用式 I 的苯并氧杂 式 I 化合物包括 ：化合物的体外、 原位和体内诊断或治疗哺乳动物细胞、 有机体或有关的病理性病症的方法。
     和其立体异构体、 几何异构体、 互变异构体或可药用盐。各种取代基如本文所定 本发明的另一个方面提供了药物组合物， 其包含式 I 的苯并氧杂 化合物和可药义。
     用载体。药物组合物可以进一步包含一或多种其它治疗剂。
     本发明的另一个方面提供了抑制 PI3 激酶活性的方法， 该方法包括 ： 使 PI3 激酶与 有效抑制数量的式 I 的化合物接触。
     本发明的另一个方面提供了预防或治疗 PI3 激酶所调节的高增殖性疾病或病症 的方法， 该方法包括 ： 给予需要这种治疗的哺乳动物有效量的式 I 的化合物。 这种高增殖性 疾病或病症的例子包括但不局限于癌症。
     本发明的另一个方面提供了预防或治疗高增殖性疾病的方法， 该方法包括 ： 单独 给予或与一或多种具有抗高增殖性能的其它化合物组合给予需要这种治疗的哺乳动物有 效量的式 I 化合物。
     在进一步方面， 本发明提供了使用本发明化合物在哺乳动物中治疗由 PI3 激酶所 调节的高增殖性疾病或症状的方法。
     本发明的另外的方面是本发明化合物用于治疗哺乳动物由 PI3 激酶所调节的癌 症的用途。本发明的另一个方面包括试剂盒， 其包含 ： 式 I 的化合物、 容器和任选的包装说明 书或注明治疗的标签。
     本发明的另一个方面包括式 I 化合物的制备方法、 分离方法和纯化方法。
     本发明的另一个方面包括用于制备式 I 化合物的新中间体。
     本发明还涉及使用式 II 的苯并吡喃和苯并氧杂 式 II 化合物包括 ：化合物的体外、 原位和体内诊断或治疗哺乳动物细胞、 有机体或有关的病理性病症的方法。
     和其立体异构体、 几何异构体、 互变异构体或可药用盐。各种取代基如本文所定 本发明的另一个方面提供了药物组合物， 其包含式 II 的苯并氧杂 化合物和可义。
     药用载体。药物组合物可以进一步包含一或多种其它治疗剂。
     本发明的另一个方面提供了抑制 PI3 激酶活性的方法， 该方法包括 ： 使 PI3 激酶与 有效抑制数量的式 II 的化合物接触。
     本发明的另一个方面提供了预防或治疗 PI3 激酶所调节的高增殖性疾病或病症 的方法， 该方法包括 ： 给予需要这种治疗的哺乳动物有效量的式 II 的化合物。这种高增殖 性疾病或病症的例子包括但不局限于癌症。
     本发明的另一个方面提供了预防或治疗高增殖性疾病的方法， 该方法包括 ： 单独 给予或与一或多种具有抗高增殖性能的其它化合物组合给予需要这种治疗的哺乳动物有 效量的式 II 化合物。
     本发明的另一个方面包括式 II 化合物的制备方法、 分离方法和纯化方法。 本发明的另一个方面包括用于制备式 II 化合物的新中间体。
     在下述的说明书中部分地列出了本发明的其它优越性和新特征， 并且通过参阅下 列说明书， 部分优越性或特征将对本领域技术人员来说变得显而易见， 或可以通过本发明 的实践中获悉。 本发明的优越性可以借助于附加的权利要求中尤其指出的手段、 组合、 组合 物和方法来认识和获得。
     附图的简要说明
     图 1 显示了得到 10- 吡啶并氧杂 图 2 显示了 9- 吡啶并氧杂化合物的常规示范性途径。化合物 315 和 316 的示范性合成路线。图 3 显示了随着时间而发生的平均肿瘤体积变化， 使用带有 MDA-MB-361.1 乳房 肿瘤细胞异种移植物的 Taconic 裸鼠， 21 天的日剂量是 ： MCT 赋形剂 (0.5 ％甲基纤维素/0.2％ Tween 80) ； 50mg/kg 化合物 223 ； 和 100mg/kg 化合物 223。
     图 4 显示了随着时间而发生的平均肿瘤体积变化， 使用带有 MDA-MB-361.1 乳房 肿瘤细胞异种移植物的 Taconic 裸鼠， 21 天的日剂量是 ： MCT 赋形剂 (0.5 ％甲基纤维素 /0.2％ Tween 80) ； 25mg/kg 化合物 328 ； 50mg/kg 化合物 328 ； 和 100mg/kg 化合物 328。
     图 5 显示了随着时间而发生的平均肿瘤体积变化， 使用带有 MDA-MB-361.1 乳房 肿瘤细胞异种移植物的 Taconic 裸鼠， 21 天的日剂量是 ： MCT 赋形剂 (0.5 ％甲基纤维素 /0.2％ Tween 80) ； 12.5mg/kg 化合物 345 ； 25mg/kg 化合物 345 ； 和 50mg/kg 化合物 345。
     示范性实施方案的详细说明
     现在详细地参考本发明的某些实施方案， 用附有的结构和化学式来说明其实施 例。 尽管结合所列举的实施方案来描述本发明， 但应该理解， 不是想用它们来使本发明限制 于那些实施方案。相反， 本发明包括所有替换性方案、 其变体和等效内容， 这些可以包括在 权利要求所定义的本发明范围内。本领域技术人员可以了解， 许多与本文所描述那些方法 和原料类似的、 可以在本发明的实践中使用的方法和原料或等效物。本发明根本不局限于 所描述的方法和原料。如果一个或多个所结合的文献、 专利和类似的材料不同于本申请或 同本申请相矛盾， 包括但不局限于所定义的术语、 术语用法、 所描述的技术， 等等， 那么以本 申请为准。
     定义
     本文使用的术语 “烷基” 是指 1 至 12 个碳原子 (C1-C12) 的饱和直链或支链一价烃 基， 其中的烷基可以独立地任选被一个或多个如下所述的取代基取代。在另一个实施方案 中， 烷基是 1 至 8 个碳原子 (C1-C8)， 或 1 至 6 个碳原子 (C1-C6)。烷基的例子包括但不局限 于： 甲基 (Me， -CH3)， 乙基 (Et， -CH2CH3)， 1- 丙基 (n-Pr， 正丙基， -CH2CH2CH3)， 2- 丙基 (i-Pr， 异丙基， -CH(CH3)2)， 1- 丁基 (n-Bu， 正丁基， -CH2CH2CH2CH3)， 2- 甲基 -1- 丙基 (i-Bu， 异丁 基， -CH2CH(CH3)2)， 2- 丁基 (s-Bu， 仲丁基， -CH(CH3)CH2CH3)， 2- 甲基 -2- 丙基 (t-Bu， 叔丁 基， -C(CH3)3)， 1- 戊基 ( 正戊基， -CH2CH2CH2CH2CH3)， 2- 戊基 (-CH(CH3)CH2CH2CH3)， 3- 戊基 (-CH(CH2CH3)2)， 2- 甲基 -2- 丁基 (-C(CH3)2CH2CH3)， 3- 甲基 -2- 丁基 (-CH(CH3)CH(CH3)2)， 3- 甲 基 -1- 丁 基 (-CH2CH2CH(CH3)2)， 2- 甲 基 -1- 丁 基 (-CH2CH(CH3)CH2CH3)， 1- 己 基 (-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)， 2- 己基 (-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)， 3- 己基 (-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))， 2- 甲 基 -2- 戊 基 (-C(CH3)2CH2CH2CH3)， 3- 甲 基 -2- 戊 基 (-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)， 4- 甲 基 -2- 戊 基 (-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)， 3- 甲 基 -3- 戊 基 (-C(CH3)(CH2CH3)2)， 2- 甲 基 -3- 戊 基 (-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)， 2， 3- 二甲基 -2- 丁基 (-C(CH3)2CH(CH3)2)， 3， 3- 二甲基 -2- 丁基 (-CH(CH3)C(CH3)3)， 1- 庚基， 1- 辛基， 等等。
     本文使用的术语 “亚烷基” 是指 1 至 12 个碳原子 (C1-C12) 的饱和直链或支链二价 烃基， 其中亚烷基可以独立地任选被一个或多个如下所述的取代基取代。在另一个实施方 案中， 亚烷基是 1 至 8 个碳原子 (C1-C8)， 或 1 至 6 个碳原子 (C1-C6)。亚烷基的例子包括但 不局限于 ： 亚甲基 (-CH2-)， 亚乙基 (-CH2CH2-)， 亚丙基 (-CH2CH2CH2-)， 等等。 2
     术语 “烯基” 是指具有至少一个不饱和 ( 即碳 - 碳 sp 双键 ) 位点的 2 至 8 个碳原 子 (C2-C8) 的直链或支链一价烃基， 其中烯基可以独立地任选被一个或多个本文所描述的 取代基取代， 并且包括具有 “顺式” 和 “反式” 取向的原子团， 或者 “E” 和 “Z” 取向。例子包 括但不局限于 ： 乙烯基或 (-CH ＝ CH2)， 烯丙基 (-CH2CH ＝ CH2)， 等等。术语 “亚烯基” 是指具有至少一个不饱和 ( 即碳 - 碳 sp2 双键 ) 位点的 2 至 8 个 碳原子 (C2-C8) 的直链或支链二价烃基， 其中烯基可以任选被取代， 并且包括具有 “顺式” 和 “反式” 取向的原子团， 或者 “E” 和 “Z” 取向。例子包括但不局限于 ： 亚乙烯基或 (-CH ＝ CH-)， 烯丙基 (-CH2CH ＝ CH-)， 等等。
     术语 “炔基” 是指具有至少一个不饱和 ( 即碳 - 碳 sp 三键 ) 位点的 2 至 8 个碳原 子 (C2-C8) 的直链或支链一价烃基， 其中炔基可以独立地任选被一个或多个本文所描述的 取代基取代。实例包括但不局限于 ： 乙炔基 (-C ≡ CH)， 丙炔基 ( 炔丙基， -CH2C ≡ CH)， 等 等。
     术语 “亚炔基” 是指具有至少一个不饱和 ( 即碳 - 碳 sp 三键 ) 位点的 2 至 8 个碳 原子 (C2-C8) 的直链或支链二价烃基， 其中炔基可能是任选地。实例包括但不局限于 ： 亚乙 炔基 (-C ≡ C-)， 亚丙炔基 ( 亚炔丙基， -CH2C ≡ C-)， 等等。
     术语 “碳环” (carbocycle)、 “碳环” (carbocyclyl)、 “碳环” (carbocyclic ring) 和 “环烷基” 指的是具有 3 至 12 个碳原子 (C3-C12) 的单环形式的单价非芳族饱和或部分不 饱和环， 或双环形式的 7 至 12 个碳原子的环。具有 7 至 12 个原子的双环碳环可以排列为 ： 例如， 二环 [4， 5]、 [5， 5]、 [5， 6] 或 [6， 6] 系统， 和具有 9 或 10 个环原子的双环碳环可以排 列为 ： 二环 [5， 6] 或 [6， 6] 系统， 或排列为桥联系统， 例如二环 [2.2.1] 庚烷、 二环 [2.2.2] 辛烷和二环 [3.2.2] 壬烷。 单环碳环的例子包括但不局限于 ： 环丙基， 环丁基， 环戊基， 1- 环 戊 -1- 烯基， 1- 环戊 -2- 烯基， 1- 环戊 -3- 烯基， 环己基， 1- 环己 -1- 烯基， 1- 环己 -2- 烯 基， 1- 环己 -3- 烯基， 环已二烯基， 环庚基， 环辛基， 环壬基， 环癸基， 环十一烷基， 环十二烷 基， 等等。
     “芳基” 是指 6-20 个碳原子 (C6-C20) 的单价芳烃原子团， 其是通过从母体芳香环系 统的单一碳原子上除掉一个氢原子而获得的。一些芳基表示为示范性的结构 “Ar” 。芳基包 括包含与饱和、 部分不饱和环或芳族碳环稠合的芳香环的双环原子团。典型的芳基包括但 不局限于 ： 衍生自下列的原子团 ： 苯 ( 苯基 )， 取代苯， 萘， 蒽， 联苯， 茚基， 茚满基， 1， 2- 二氢 萘， 1， 2， 3， 4- 四氢萘基， 等等。芳基独立地任选被一个或多个本文描述的取代基取代。
     “亚芳基” 是指 6-20 个碳原子 (C6-C20) 的二价芳烃原子团， 其是通过从母体芳香环 系统的两个碳原子上除掉两个氢原子而获得的。一些亚芳基表示为示范性的结构 “Ar” 。亚 芳基包括含有与饱和、 部分不饱和环或芳族碳环稠合的芳香环的双环原子团。典型的亚芳 基包括但不局限于衍生自下列的原子团 ： 苯 ( 亚苯基 )， 取代苯， 萘， 蒽， 亚联苯基， 亚茚基， 亚茚满基， 1， 2- 二氢萘， 1， 2， 3， 4- 四氢萘基， 等等。亚芳基是任选取代的。
     术语 “杂环” 、 “杂环基” 和 “杂环环” 在本文中可互换使用， 并且指的是 3 至大约 20 个环原子的饱和或部分不饱和 ( 即， 在环内具有一个或多个双和 / 或三键 ) 碳环原子团， 其 中至少一个环原子是选自氮、 氧、 磷和硫的杂原子， 剩下的环原子是 C， 其中一个或多个环原 子独立地任选被一个或多个如下所述的取代基取代。杂环可以是具有 3 至 7 个环成员的 单环 (2 至 6 个碳原子和 1 至 4 个杂原子， 杂原子选自 N、 O、 P 和 S)， 或 7 至 10 个环成员的 双环 (4 至 9 个碳原子和 1 至 6 个杂原子， 杂原子选自 N、 O、 P 和 S)， 例如 ： 二环 [4， 5]、 [5， 5]、 [5， 6] 或 [6， 6] 系统。杂环描述在下列中 ： Paquette， Leo A. ； “Principles of Modern Heterocyclic Chemistry” (W.A.Benjamin， New York， 1968)， 尤其是第 1、 3、 4、 6、 7和9章 节“ ；The Chemistry of Heterocyclic Compounds， A series of Monographs” (John Wiley& Sons， New York， 1950 to present)， 尤其是第 13、 14、 16、 19 和 28 卷 ； 和 J.Am.Chem.Soc. (1960)82 ： 5566。 “杂环基” 还包括其中杂环原子团与饱和、 部分不饱和环或芳族碳环或杂 环稠合的原子团。 杂环的例子包括但不局限于 ： 吡咯烷基， 四氢呋喃基， 二氢呋喃基， 四氢噻 吩基， 四氢吡喃基， 二氢吡喃基， 四氢硫代吡喃基， 哌啶基， 吗啉基， 硫代吗啉基， 噻 噻庚烷基， 氧杂氮杂 基， 二氮杂 基， 硫杂氮杂 烷基， 哌嗪基， 高哌嗪基， 氮杂环丁烷基， 氧杂环丁烷基， 硫杂环丁烷基， 高哌啶基， 氧杂环庚烷基， 基， 2- 吡咯啉基， 3- 吡咯啉基， 二氢吲哚 基， 2H- 吡喃基， 4H- 吡喃基， 二 烷基， 1， 3- 二氧戊环基， 吡唑啉基， 二硫杂环己烷基， 二硫杂环戊基， 二氢吡喃基， 二氢噻吩基， 二氢呋喃基， 吡唑烷基咪唑啉基， 咪唑烷基， 3- 氮杂双 环 [3.1.0] 己烷基， 3- 氮杂双环 [4.1.0] 庚基， 氮杂双环 [2.2.2] 己烷基， 3H- 吲哚基喹嗪 基和 N- 吡啶基脲。螺部分也包括在该定义范围内。其中 2 个环碳原子被氧代 ( ＝ O) 部分 取代的杂环基团的例子是嘧啶酮基和 1， 1- 二氧代 - 硫吗啉基。本文的杂环基团独立地任 选被一个或多个本文描述的取代基取代。
     术语 “杂芳基” 是指 5、 6 或 7 元环的单价芳基， 并且包括 5-20 个原子的稠环系统 ( 其中至少一个环是芳香环 )， 含有一个或多个独立地选自氮、 氧和硫的杂原子。杂芳基的 例子是 ： 吡啶基 ( 包括， 例如， 2- 羟基吡啶基 )， 咪唑基， 咪唑并吡啶基， 嘧啶基 ( 包括， 例如， 4- 羟基嘧啶基 )， 吡唑基， 三唑基， 吡嗪基， 四唑基， 呋喃基， 噻吩基， 异 唑基， 噻唑基， 二 唑基， 唑基， 异噻唑基， 吡咯基， 喹啉基， 异喹啉基， 四氢异喹啉基， 吲哚基， 苯并咪唑基， 苯 并呋喃基， 噌琳基， 吲唑基， 吲嗪基， 酞嗪基， 哒嗪基， 三嗪基， 异吲哚基， 喋啶基， 嘌呤基， 二唑基， 三唑基， 噻二唑基， 噻二唑基， 呋咱基， 苯并呋咱基， 苯并噻吩基， 苯并噻唑基， 苯并 唑基， 喹唑啉基， 喹喔啉基， 萘啶基， 和呋喃并吡啶基。 杂芳基独立地任选被一个或多个本 文描述的取代基取代。
     如果合适的话， 杂环或杂芳基可以是碳 ( 碳连接的 ) 或氮 ( 氮连接的 ) 键合的。 例 如 ( 非限制性 )， 碳键合的杂环或杂芳基在吡啶的 2、 3、 4、 5 或 6 位键合， 在哒嗪的 3、 4、 5或 6 位键合， 在嘧啶或 2、 4、 5 或 6 位键合， 在吡嗪的 2、 3、 5 或 6 位键合， 在呋喃、 四氢呋喃、 硫代 呋喃、 噻吩、 吡咯或四氢吡咯的 2、 3、 4 或 5 位键合， 在 在异 唑、 咪唑或噻唑的 2、 4 或 5 位键合， 唑、 吡唑或异噻唑的 3、 4 或 5 位键合， 在氮丙啶的 2 或 3 位键合， 在吖丁啶的 2、 3或4 位键合， 在喹啉的 2、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 位键合， 或在异喹啉的 1、 3、 4、 5、 6、 7 或 8 位键合。
     例如 ( 非限制性 )， 氮键合的杂环或杂芳基在下列的 1 位键合 ： 氮丙啶， 吖丁啶， 吡 咯， 吡咯烷， 2- 吡咯啉， 3- 吡咯啉， 咪唑， 咪唑烷， 2- 咪唑啉， 3- 咪唑啉， 吡唑， 二氢吡唑， 2- 二 氢吡唑， 3- 二氢吡唑， 哌啶， 哌嗪， 吲哚， 二氢吲哚， 1H- 吲唑， 在异吲哚或异二氢吲哚的 2 位 键合， 在吗啉的 4 位键合， 和在咔唑或 β- 咔啉的 9 位键合。 术语 “治疗” 和 “医治” 指的是治疗性处理和预防性或防护性方法， 其中目标是预防 或减缓 ( 减小 ) 发生不希望有的生理变化或病症， 例如癌症的形成或扩散。对本发明来说， 有利的或目标临床效果包括但不局限于 ： 症状减轻， 疾病程度降低， 稳定化的 ( 即未恶化 ) 疾病状态， 延迟或减缓疾病发展， 改善或减缓疾病状态， 和症状缓解 ( 不论是部分的或全部 的 )， 不论是否是可检测或不可检测的。 “治疗” 还可以是指 ： 与不接受医治而预期的存活时 间相比， 延长了存活时间。需要医治的那些患者包括 ： 已经具有症状或病症的那些患者， 以 及有形成症状或病症倾向的那些患者， 或需要预防症状或病症的那些患者。
     短语 “治疗有效量” 是指 ： 本发明的化合物 (i) 治疗或预防具体疾病、 状况或病症 的数量， (ii) 减轻、 改善或消除具体疾病、 状况或病症的一或多种症状的数量， 或 (iii) 预 防或延迟本文所描述的具体疾病、 状况或病症的一或多种症状的发作的数量。在癌症的情 况下， 治疗有效量的药物可以降低癌细胞数目 ； 降低肿瘤大小 ； 抑制 ( 即减缓至某种程度， 优选终止 ) 癌细胞浸透到周围器官中 ； 抑制 ( 即减缓至某种程度， 优选终止 ) 肿瘤转移 ； 在 某种程度上抑制肿瘤生长 ； 和 / 或在某种程度上减轻与癌相关的一或多种症状。在药物可 以预防所存在癌细胞的生长和 / 或将其杀死的程度上， 其可以是细胞生长抑制剂和 / 或细 胞毒素。对于癌治疗， 可以测定效果， 例如， 通过评价疾病发展的时间 (TTP) 和 / 或测定反 应率 (RR)。
     术语 “癌症” 是指或描述了哺乳动物的生理性状况， 其典型地以无限制的细胞生长 为特征。 “肿瘤” 包括一或多种癌性细胞。癌症的例子包括但不局限于 ： 癌瘤， 淋巴瘤， 胚细 胞瘤， 肉瘤和血癌或淋巴恶性肿瘤。这种癌症的更具体的例子包括 ： 鳞状细胞癌 ( 例如， 上 皮细胞的鳞状细胞癌 )， 肺癌 ( 包括小细胞肺癌、 非小细胞肺癌 (“NSCLC” ))， 肺的恶性腺 瘤和肺的鳞状细胞癌， 腹膜癌， 肝细胞癌， 胃癌 ( 包括胃肠癌 )， 胰腺癌， 恶性胶质瘤， 子宫颈 癌， 卵巢癌， 肝癌， 膀胱癌， 肝细胞瘤， 乳腺癌， 结肠癌， 直肠癌， 结肠直肠癌， 子宫内膜或子宫 癌瘤， 唾液腺癌瘤， 肾脏或肾癌， 前列腺癌， 外阴癌， 甲状腺癌， 肝癌， 直肠癌瘤， 阴茎癌瘤， 以 及头和颈癌。 “化学治疗剂”是用于治疗癌的化合物 ( 不考虑作用机理 )。化学治疗剂的种 类包括但不局限于 ： 烷基化剂， 代谢拮抗剂， 纺锤体毒剂植物生物碱， 细胞毒 / 抗肿瘤抗 生素， 局部异构酶抑制剂， 抗体， 光敏剂和激酶抑制剂。化学治疗剂包括用于 “定向治 疗”和常规化学治疗的化合物。化学治疗剂的例子包括 ： 埃洛替尼 ( Genentech/OSI Pharm.)，多 西 他 赛 ( Sanofi-Aventis)， 5-FU( 氟
     尿 嘧 啶， 5- 氟 尿 嘧 啶， CAS No.51-21-8)，吉 西 他 滨 (Lilly)，PD-0325901(CAS No.391210-10-9， Pfizer)， 顺 铂 ( 顺 式 - 二 胺， 二 氯 铂 (II)， CAS No.15663-27-1)，卡 铂 (CAS No.41575-94-4)，太 平 洋 紫 杉 醇 ( Bristol-Myers Squibb Oncology， Princeton， N.J.)， 曲妥单抗( Genentech)， 替 莫 唑 胺 (4- 甲 基 -5- 氧 代 -2， 3， 4， 6， 8- 五 氮 杂 二 环 [4.3.0] 壬 -2， 7， 9- 三 烯 -9- 甲 酰 胺， CAS No.85622-93-1， 胺， Akti-1/2， HPPD， 和雷帕霉素。
     Schering )， 和 多 柔 比 星Plough)， 它 莫 西 芬 ((Z)-2-[4-(1， 2- 二 苯 基 丁 -1- 烯 基 ) 苯 氧 基 ]-N， N- 二 甲 基 乙化学治疗剂的更多例子包括： 奥沙利铂(Sanofi)， 硼替 佐 米 (Bortezomib)( (Millennium Pharm.)，舒 尼 替 尼 (sutent) Novartis) 伊马替尼甲SU11248， Pfizer)， 来曲唑 (磺酸盐 ( Novartis)， XL-518(Mek 抑制剂， Exelixis， WO 2007/044515)， ARRY-886(Mek 抑 制 剂， AZD6244， Array BioPharma， Astra Zeneca)， SF-1126(PI3K 抑 制 剂， Semafore Pharmaceuticals)， BEZ-235(PI3K 抑制剂， Novartis)， XL-147(PI3K 抑制剂， Exelixis)， PTK787/ZK 222584(Novartis)， 氟维司群 ( AstraZeneca)，甲 酰 四 氢 叶 酸 ( 亚 叶 酸 )， 雷 帕 霉 素 ( 西 罗 莫 司 (Sirolimus)， Wyeth)， 拉 帕 替 尼 (lapatinib)(TMGSK572016， Glaxo Smith Kline)， 洛 AstraZeneca)，那法尼 (lonafarnib)(SARASAR ， SCH 66336， Schering Plough)， 索拉非尼 (sorafenib) ( 依立替康 ( BAY43-9006， Bayer Labs)， 吉非替尼 ( CPT-11， Pfizer)， 替吡法尼 (tipifarnib)(ZARNESTRATM，Johnson & Johnson)， ABRAXANETM( 不含聚氧乙烯蓖麻油 (Cremophor-free))， 白蛋白工 程化的太平洋紫杉醇纳米颗粒制剂 (American Pharmaceutical Partners， Schaumberg， Il)， 凡 德 他 尼 (vandetanib)(rINN， ZD6474， AstraZeneca)， 氯 氨 布 西， AG1478， AG1571(SU 5271 ； Sugen)， 坦西莫司 (temsirolimus)( Wyeth)， 帕 唑 帕 尼 (pazopanib)(GlaxoSmithKline)， canfosfamide( Telik)， 硫 替派和环磷酰胺 烷基磺酸盐， 例如白消安， 英丙舒凡 (Improsulfan) 和保释芬 ； 氮丙啶， 例如 benzodopa， 卡波醌， meturedopa 和 uredopa ； 氮丙 啶和甲基蜜胺， 包括六甲蜜胺， 曲他胺， 三亚乙基磷酰胺， 三乙撑硫代磷酰胺和三甲基蜜胺 ； 多聚乙酰 ( 尤其是布拉他辛 (bullatacin) 和布拉它辛酮 (bullatacinone)) ； 喜树碱 ( 包 括合成类似物托泊替康 ) ； 苔藓抑素 ； callystatin ； CC-1065( 包括它的阿多来新、 卡折来新 和比折来新合成类似物 ) ； 自念珠藻环肽 ( 尤其是自念珠藻环肽 1 和自念珠藻环肽 8) ； 多 拉司他汀 (dolastatin) ； duocarmycin( 包括合成类似物， KW-2189 和 CB1-TM1) ； 艾榴塞洛 素； 水鬼蕉碱 (pancratistatin) ； sarcodictyin ； spongistatin ； 氮芥， 例如苯丁酸氮芥， 萘 二氯甲二乙胺氧化物盐酸盐， 苯丙 氮芥， 氯磷酰胺， 雌莫司汀， 异环磷酰胺， 二氯甲二乙胺， 氨酸氮芥， 新氮芥， 苯乙酸氮芥胆甾醇酯， 松龙苯芥， 氯乙环磷酰胺， 尿嘧啶氮芥 ； 亚硝基脲， 例如卡莫司汀， 吡葡亚硝脲， 福莫司汀， 环己亚硝脲， 嘧啶亚硝脲和雷莫司汀 ； 抗生素， 例如 烯二炔抗生素 ( 例如， 刺孢霉素， 刺孢霉素 gamma1I， 刺孢霉素 omegaI1(Angew Chem.Intl. Ed.Engl.(1994)33 ： 183-186) ； 蒽环类抗生素， 蒽环类抗生素 A ； 双磷酸盐类， 例如氯膦酸 盐； 埃斯培拉霉素 (esperamicin) ； 以及新制癌菌素发色团和相关色蛋白烯二炔抗生素发 色团 )， 阿克拉霉素， 放线菌素， authramycin， 偶氮丝氨酸， 博来霉素， 放线菌素 C， 去甲柔红 霉素， 洋红霉素， 嗜癌霉素， 色霉素 (chromomycinis)， 更生霉素， 柔红霉素， 地托比星， 6- 重 氮 -5- 氧代 -L- 正亮氨酸， 吗啉基 - 多柔比星， 氰基吗啉代 - 多柔比星， 2- 吡咯啉基 - 多柔 比星和去氧多柔比星 )， 表柔比星， 依索比星， 伊达比星， 奈莫柔比星， 麻西罗霉素， 丝裂霉素 例如丝裂霉素 C， 霉酚酸， 诺加霉素， 橄榄霉素， 硫酸培洛霉素， 波福霉素， 嘌呤霉素， 三铁阿 霉素， 罗多比星， 链黑菌素， 链脲霉素， 杀结核菌素， 乌苯美司， 净司他丁， 佐柔比星 ； 抗代谢 物， 例如氨甲喋呤和 5- 氟尿嘧啶 (5-FU) ； 叶酸类似物， 例如二甲叶酸， 氨甲喋呤， 蝶罗呤， 三甲曲沙 ； 嘌呤类似物例如氟达拉滨， 6- 巯基嘌呤， 硫咪嘌呤， 硫鸟嘌呤 ； 嘧啶类似物， 例如 安西他滨， 阿扎胞苷， 6- 氮尿苷， 卡莫氟， 阿糖胞苷， 二脱氧尿苷， 去氧氟尿苷， 依诺他滨， 氮 尿苷 ； 雄激素， 例如卡普睾酮， 屈他雄酮丙酸盐， 环硫雄醇， 美雄烷， 睾内酯 ； 抗肾上腺药， 例 如氨鲁米特， 米托坦， 曲洛司坦 ； 叶酸补充剂， 例如甲酰四氢叶酸 (frolinic acid) ； 醋葡醛 内酯 ； 醛磷酰胺糖苷 ； 氨基乙酰丙酸 ； 恩尿嘧啶 ； 安吖啶 ； bestrabucil ； 比生群 ； 依达曲沙 ； defofamine ； 秋水仙胺 ； 地吖醌 ； 依氟鸟氨酸 (elfornithine) ； 依利醋铵 ； 埃坡霉素 ； 依托 格鲁 ； 硝酸镓 ； 羟基脲 ； 蘑菇多糖 ； lonidainine ； 美登素类， 例如美登素和美登木素 ； 丙脒 腙； 米托蒽醌 ； 莫哌达醇 ； 二胺硝吖啶 (nitraerine) ； 喷司他丁 ； 蛋氨氮芥 ； 吡柔比星 ； 洛索蒽醌 ； 鬼臼酸 ； 2- 乙基异烟酰肼 ； 普鲁苄肼 ； 聚糖复合物 (JHS Natural Products， Eugene， OR) ； 丙亚胺 ； 利索新 ； 西佐喃 ； 锗螺胺 ； 细交链孢菌酮酸 ； 三乙撑亚胺苯醌 ； 2， 2’ ， 2” - 三氯三乙胺 ； 单端孢霉烯族毒素类 ( 尤其是 T-2 毒素， 疣孢菌素 (verracurin)A， 杆孢菌 素 A 和蛇形菌素 ) ； 尿烷 ； 去乙酰长春酰胺 ； 达卡巴嗪 ； 甘露醇氮芥 ； 二溴甘露醇 ； 二溴卫矛 醇； 双溴丙基哌嗪 ； gacytosine ； 阿拉伯糖苷 (“Ara-C” )； 环磷酰胺 ； 硫替派 ； 6- 硫代鸟嘌 呤； 巯基嘌呤 ； 氨甲喋呤 ； 铂类似物例如顺铂和卡铂 ； 长春花碱 ； 依托泊苷 (VP-16) ； 异环磷 酰胺 ； 米托蒽醌 ； 长春花新碱 ； 长春瑞宾 诺安托 ； 表鬼臼毒噻吩糖苷 ； Roche) ； 依班膦酸盐 ； CPT-11 ； 依达曲沙 ； 柔毛霉素 ； 氨基蝶呤 ； 卡培他滨 ( 局部异构酶抑制剂 RFS2000 ； 二氟甲基鸟氨酸 (DMFO) ； 类视黄醇， 例如视黄酸 ； 和上述任一 项的可药用盐、 酸和衍生物。
     还包括在 “化学治疗剂” 的定义中的是 ： (i) 起调节或抑制激素对肿瘤的作用的 抗激素药剂， 例如抗雌激素剂和选择性雌激素受体调节剂 (SERMs)， 包括， 例如， 它莫西芬 ( 包括 枸橼酸它莫西芬 )， 雷诺昔酚， 屈洛昔芬， 4- 羟基它莫西芬， 曲 沃昔芬， 雷洛西芬 (keoxifene)， LY117018， 奥那司酮 (onapristone)， 和 ( 枸橼酸托瑞米芬 ) ； (ii) 抑制芳香酶的芳香酶抑制剂， 其调节肾上腺中雌激素的产生， 例如， 4(5)- 咪唑， 氨鲁米特， ( 甲地孕酮 )， ( 依西美坦 ； Pfizer)， 福美坦， 法屈唑， ( 伏氯唑 )， ( 来曲唑 ； Novartis)， 和 ( 阿那曲唑 ； AstraZeneca) ； (iii) 抗雄激素， 例如氟他胺， 尼鲁米特， 比卡 鲁胺， 亮丙瑞林， 和戈舍瑞林 ； 以及曲沙他滨 (1， 3- 二氧戊烷核苷胞嘧啶类似物 ) ； (iv) 蛋 白激酶抑制剂， 例如 MEK 抑制剂 (WO 2007/044515) ； (v) 脂质激酶抑制剂 ； (vi) 反义寡核苷 酸， 尤其是抑制与异常细胞增殖有关的信号路径中基因表达的那些， 例如， PKC-α， Ralf 和 H-Ras， 例如 oblimersen( 抑制剂 ( 例如， 苗， 例 如， rIL-2 ； 局部异构酶 1 抑制剂， 例如 Genta Inc.) ； (vii) 核糖酶， 例如 VEGF 表达 ) 和 HER2 表达抑制剂 ； (viii) 疫苗， 例如基因治疗疫 和 rmRH ； (ix) 抗生成血管剂， 例如贝伐单抗 ( Genentech) ； 和上述任一项的可药用盐、 酸和 衍生物。
     还包括在 “化学治疗剂” 的定义中的是 ： 治疗抗体， 例如阿仑单抗 (Alemtuzumab) (Campath)， 贝伐单抗 ( Imclone) ； 帕 ( 尼 单 Genentech) ； 西妥昔单抗 ( 抗 (panitumumab)( Amgen)， 美 罗 华Genentech/Biogen Idec)， 帕妥珠单抗 (Pertuzumab)(OMNITARGTM， 2C4，Genentech)， 曲妥珠单抗 ( Genentech)， 托 西 莫 单 抗 (tositumomab) (Bexxar， Corixia) 和抗体药物共轭物， 吉妥珠单抗奥唑米星 (gemtuzumab ozogamicin) ( Wyeth)。
     在与本发明的 PI3K 抑制剂的组合中， 具有作为化学治疗剂的治疗潜力的人源 化单克隆抗体包括 ： 阿仑单抗 (Alemtuzumab)， 阿泊珠单抗 (apolizumab)， 阿塞珠单抗 (aselizumab)， atlizumab， bapineuzumab， 贝伐单抗， 比伐单抗 mertansine， cantuzumab mertansine，西 利 珠 单 抗，塞 妥 珠 单 抗 (certolizumab pegol)， cidfusituzumab，cidtuzumab， 达 ( 克 ) 珠单抗， 依库珠单抗 (eculizumab)， 依法利珠 (efalizumab)， 依帕 珠单抗， 厄利珠单抗 (erlizumab)， 非维珠单抗， 芳妥珠单抗 (fontolizumab)， 吉妥珠单 抗 奥 佐 米 星 (gemtuzumab ozogamicin)， inotuzumab 奥 佐 米 星， ipilimumab， 拉贝珠单 抗 (labetuzumab)， 林 妥 珠 单 抗， 马 妥 珠 单 抗 (matuzumab)， 美 泊 珠 单 抗， motavizumab， motovizumab， 那 他 珠 单 抗 (natalizumab)， 尼 妥 珠 单 抗 (nimotuzumab)， nolovizumab， numavizumab， ocrelizumab， 奥 马 珠 单 抗， 帕 利 珠 单 抗， 帕 考 珠 单 抗 (pascolizumab)， pecfusituzumab， pectuzumab， 帕 妥 珠 单 抗 (Pertuzumab)， pexelizumab， ralivizumab， ranibizumab， reslivizumab， 瑞 利 珠 单 抗 (reslizumab)， resyvizumab， 罗维珠单抗 (rovelizumab)， 卢 利 珠 单 抗 (ruplizumab)， 西 罗 珠 单 抗， 希 普 利 珠 单 抗 (siplizumab)， 索 土 珠 单 抗 (sontuzumab)， tacatuzumab tetraxetan， tadocizumab，他 利 珠 单 抗 (talizumab)， tefibazumab， 托珠单抗 (tocilizumab)， 托利珠单抗 (toralizumab)， 曲妥珠 单抗， tucotuzumab 西莫白介素， tucusituzumab， umavizumab， 乌珠单抗 (urtoxazumab)， 和 维西珠单抗 (visilizumab)。
     “代谢物” 是通过具体说明的化合物或其盐在身体内代谢的产物。可以使用本领 域已知的常规技术确定化合物的代谢物， 并且使用例如本文所描述的那些试验来测定它们 的活性。 这种产物可以通过例如所给予化合物的氧化、 还原、 水解、 酰胺化、 脱酰胺、 酯化、 脱 酯、 酶催裂解等等来产生。相应地， 本发明包括本发明化合物的代谢物， 包括通过一定方法 产生的化合物， 该方法包括将本发明的化合物与哺乳动物接触足以产生其代谢产物的一段 时间。
     术语 “包装说明书” 指的是通常包括在治疗产品的商业包装中的说明， 其包括有关 下列的介绍 ： 适应症、 用法、 剂量、 给药、 禁忌症和 / 或涉及使用这种治疗产品的警告。
     术语″手性″是指具有镜象参与者的非重叠性质的分子， 而术语″非手性″是指 就其镜象来说可重叠的分子。
     术语 “立体异构体” 是指具有相同化学组成、 但原子或基团的空间排列方式不同的 化合物。
     “非对映体” 是指具有两个或多个手性中心、 并且分子不是相互镜象的立体异构 体。非对映体具有不同的物理性能， 例如熔点， 沸点， 光谱特性和反应性。可以借助于高分 辨率分析方法例如电泳和色谱方法来分离非对映体的混合物。
     “对映体” 指的是镜像不能相互重叠的化合物的两个立体异构体。
     本 文 使 用 的 立 体 化 学 定 义 和 惯 例 通 常 按 照 S.P.Parker， Ed.， McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company， New York ； and Eliel， E.and Wilen， S.， “Stereochemistry of Organic Compounds” ， John Wiley & Sons， Inc.， New York， 1994。 本发明的化合物可以包含非对称或手性中心， 因此存在不同的立体异构形 式。本发明化合物的所有立体异构形式包括但不局限于 ： 非对映体、 对映体和阻转异构体， 以及其混合物， 例如外消旋混合物， 它们构成本发明的一部分。 许多有机化合物存在旋光活 性形式， 即它们具有转动平面偏光的平面的能力。在描述旋光性化合物时， 前缀 D 和 L 或 R 和 S 用于表示围绕它的手性中心的分子的绝对构型。使用前缀 d 和 l 或 (+) 和 (-)， 以标明 化合物的平面偏光的旋转标记， (-) 或 l 是指化合物是左旋性的。带有 (+) 或 d 前缀的化合 物是右旋的。对于给定的化学结构， 这些立体异构体是相同的， 只不过它们是彼此的镜像。具体立体异构体还可以称为对映体， 这种异构体的混合物常常称为对映体的混合物。对映 体的 50 ∶ 50 混合物称为外消旋混合物或外消旋体， 其可以在化学反应或过程中没有立体 选择性或立体特异性的情况下出现。术语 “外消旋混合物” 和 “外消旋体” 指的是两种对映 体的等摩尔混合物， 无旋光性。
     术语 “互变异构体” 或 “互变异构形式” 是指可通过低能屏障互相转换的不同能量 的结构异构体。例如， 质子互变异构体 ( 亦称质子异变的互变异构体 ) 包括通过质子的迁 移而进行的相互转化， 例如酮 - 烯醇和亚胺 - 烯胺异构化。化合价互变异构体包括通过一 些成键电子的重构而进行的相互转化。
     本文使用的短语 “可药用盐” 是指本发明化合物的可药用有机或无机盐。 示范性的 盐包括但不局限于 ： 硫酸盐， 柠檬酸盐， 醋酸盐， 草酸盐， 盐酸盐， 溴化物， 碘化物， 硝酸盐， 硫 酸氢盐， 磷酸盐， 酸式磷酸盐， 异烟酸盐， 乳酸盐， 水杨酸盐， 酸式柠檬酸盐， 酒石酸盐， 油酸 盐， 丹宁酸盐， 泛酸盐， 酒石酸氢盐， 抗坏血酸盐， 琥珀酸盐， 马来酸盐， 龙胆酸盐， 富马酸盐， 葡糖酸盐， 葡糖醛酸盐， 糖二酸盐， 甲酸盐， 苯甲酸酯， 谷氨酸盐， 甲磺酸盐 “甲磺酸盐” ， 乙磺 酸盐， 苯磺酸盐， 对甲苯磺酸盐和双羟萘酸盐 ( 即， 1， 1′ - 亚甲基 - 双 (2- 羟基 -3- 萘甲酸 盐 ))。可药用盐可以涉及包含另一个分子， 例如醋酸根离子、 琥珀酸根离子或其它反离子。 反离子可以是使母体化合物上的电荷保持稳定的任何有机或无机部分。此外， 可药用盐在 其结构中可以具有一个以上的荷电原子。在多个荷电原子是可药用盐的一部分的情况下， 可以具有多个反离子。由此， 可药用盐可以具有一个或多个荷电原子和 / 或一个或多个反 离子。
     如果本发明的化合物是碱， 那么目标可药用盐可以通过本领域可获得的任何合适 方法制备， 例如， 用无机酸处理游离碱， 例如盐酸， 氢溴酸， 硫酸， 硝酸， 甲磺酸， 磷酸等等， 或 用有机酸处理， 例如乙酸， 三氟乙酸， 马来酸， 琥珀酸， 扁桃酸， 富马酸， 丙二酸， 丙酮酸， 草 酸， 羟基乙酸， 水杨酸， 吡喃糖苷酸， 例如葡糖醛酸或半乳糖醛酸， α 羟基酸， 例如枸橼酸或 酒石酸， 氨基酸， 例如门冬氨酸或谷氨酸， 芳香酸， 例如苯甲酸或肉桂酸， 磺酸， 例如对甲苯 磺酸或乙磺酸， 等等。
     如果本发明的化合物是酸， 那么目标可药用盐可以通过任何合适方法制备， 例如， 用无机或有机碱处理游离酸， 例如胺 ( 伯、 仲或叔胺 )， 碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化 物， 等等。合适盐的说明性例子包括但不局限于 ： 衍生自氨基酸的有机盐， 例如甘氨酸和精 氨酸， 氨盐， 伯、 仲和叔胺盐， 和环胺盐， 例如哌啶， 吗啉和哌嗪， 和衍生自钠、 钙、 钾、 镁、 锰、 铁、 铜、 锌、 铝和锂的无机盐。
     短语 “可药用” 表示物质或组合物必须与制剂所包含的其它组份和 / 或其治疗的 哺乳动物是化学上和 / 或毒理学上相容的。
     “溶剂化物” 是指一个或多个溶剂分子与本发明化合物的结合或复合物。形成溶 剂化物的溶剂的例子包括但不局限于 ： 水， 异丙醇， 乙醇， 甲醇， DMSO， 乙酸乙酯， 乙酸和乙醇 胺。
     术语 “本发明化合物” 和 “本发明的化合物” 和 “式 I 的化合物” 包括式 I 的化合物 和其立体异构体、 几何异构体、 互变异构体、 溶剂化物、 代谢物和可药用盐和前体药物。
     苯并氧杂化合物 化合物和其药物制剂， 其潜在地用于治疗由 PI3 激酶所47本发明提供了苯并氧杂102333779 A CN 102333793说明书12/280 页调节的疾病、 状况和 / 或病症。更具体地说， 本发明提供了式 I 的化合物
     和其立体异构体、 几何异构体、 互变异构体或可药用盐， 其中 ： 1 1
     Z 是 CR 或 N ；
     Z2 是 CR2 或 N ；
     Z3 是 CR3 或 N ；
     Z4 是 CR4 或 N ；
     其中 (i)X1 是 N， 和 X2 是 S， (ii)X1 是 S， 和 X2 是 N， (iii)X1 是 CR7， 和 X2 是 S， 或 1 2 7 (iv)X 是 S， 和 X 是 CR ； 1
     R、 R2、 R3、 R4 和 R7 独立地选自 ： H， F， Cl， Br， I， -CN， -CF3， -CH2OR10， -CH2R10， -(C1-C12 10 11 12 10 10 亚烷基 )NR R ， -(C1-C12 亚烷基 )NR C( ＝ O)R ， -(C1-C12 亚烷基 )C( ＝ O)OR ， -(C1-C12 10 10 10 11 10 11 10 10 亚 烷 基 )OR ， -CO2R ， -C( ＝ O)N(R )OR ， -NO2， -NR R ， -OR ， -S(O)2R ， -C( ＝ O) 10 11 10 10 11 10 NR R ， -C( ＝ O)NR (C1-C12 亚 烷 基 )NR R ， -C( ＝ O)NR (C1-C12 亚 烷 基 )NR10C( ＝ O) OR11， -C( ＝ O)NR10(C1-C12 亚烷基 )NR10C( ＝ O)R11， -C( ＝ O)NR10(C1-C12 亚烷基 )R10， -C( ＝ 10 10 11 12 10 12 11 12 10 11 12 NR )NR R ， -NR C( ＝ O)R ， -NR C( ＝ O)OR ， -NR C( ＝ O)NR R ， -NR C( ＝ O)(C1-C12 亚 10 11 12 10 11 12 10 烷基 )NR R ， -NR (C1-C12 亚烷基 )NR R ， -NR (C1-C12 亚烷基 )OR ， -NR12(C1-C12 亚烷基 ) C( ＝ O)NR10R11， -C ≡ CR10， -CH ＝ CHR10， C2-C20 杂环基， C1-C20 杂芳基和苯基， 其中杂环基、 杂 芳基、 苯基和亚烷基任选被一个或多个选自下列的基团取代 ： F， C1， Br， I， -CH2OH， -(CH2)2OH ， -CH2CO2H， -CN， -CH2NH2， -(CH2)2N(CH3)2， -CH3， -C( ＝ O)CH3， -C( ＝ O)NHCH3， -CO2H， -CH2CO2CH3， -NH2， -OCH3， -S(O)2CH3， 4- 甲基哌嗪 -1- 基和 4- 吗啉基 ；
     A 选 自 -C( ＝ O)NR5R6， C2-C20 杂 环 基 和 C1-C20 杂 芳 基，其 中 C2-C20 杂 环 基 和 C1-C20 杂 芳 基 任 选 被 一 个 或 多 个 独 立 地 选 自 下 列 的 基 团 取 代 ： F， Cl， Br， 10 11 I， -CH2OH， -CH2CO2H， -CH(CH3)CH2OCH3， -CN， C1-C12 烷基， -(C1-C12 亚烷基 )NR R ， -(C1-C12 亚
     烷基 )OR10， -CH3， -C( ＝ O)CH3， -C( ＝ O)NHCH3， -C( ＝ O)N(CH3)2， -CO2H， -CO2CH3， -CH2CO2CH3 ， -NH2， -NHC( ＝ O)CH3， -OCH3， -S(O)2CH3， 1- 甲基哌啶 -4- 基， 4- 甲基哌嗪 -1- 基， 4- 吗啉基， 异丙基， 异丁基， 环丙基， 环丙基甲基， 环丁基， 三唑基甲基， 苄基和苯基， 其中烷基、 亚烷基、 苄基和苯基任选被一个或多个独立地选自下列的基团取代 ： F， Cl， Br， I， -CF3， -CH2OH， -CH2 CO2H， -CN， -CH2NH2， -CH3， -C( ＝ O)CH3， -C( ＝ O)NHCH3， -CO2H， -CH2CO2CH3， -NH2， -OH， -OCH3， -S( O)2CH3， 1- 甲基哌啶 -4- 基， (4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 甲酰胺， -CH2(1H-1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )， 4- 甲基哌嗪 -1- 基和 4- 吗啉基 ；
     R5 选自 H、 任选被一个或多个独立地选自下列的基团取代的 C1-C12 烷基 ： F， Cl， Br， I， -CN， -CO2H， -CONH2， -CONHCH3， -NH2， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH -S(O)2NH2 和 -S(O)2CH3 ； 2CH3，R6 选自 C1-C12 烷基， C3-C12 碳环， C2-C20 杂环基， C1-C20 杂芳基和 C6-C20 芳基， 每个任选 被一个或多个独立地选自下列的基团取代 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2C6H5， -CN， -CF3， -CO2H， 10 11 C( ＝ O)NR R ， -NH2， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2， -S( 10 10 11 O)2CH3， -C( ＝ O)NR (C1-C12 亚烷基 )NR R ， 吗啉 -4- 基， 哌啶 -1- 基， 哌嗪基， 哌嗪 -4- 基 -2- 酮， 哌嗪 -4- 基 -3- 酮， 吡咯烷 -1- 基， 硫吗啉 -4- 基， S- 二氧代硫吗啉 -4- 基， -C ≡ CR13， -CH 13 10 11 ＝ CHR 和 -C( ＝ O)NR R ；
     或 R5 和 R6 与它们相连接的氮原子一起形成吗啉 -4- 基， 哌啶 -1- 基， 哌嗪基， 哌 嗪 -4- 基 -2- 酮， 哌嗪 -4- 基 -3- 酮， 吡咯烷 -1- 基， 硫吗啉 -4- 基或 S- 二氧代硫吗啉 -4- 基， 每个任选被一个或多个选自下列的基团取代 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2C6H5， -CN， -CF3， -CO -CONH2， -CONHCH3， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2 2H， 和 -S(O)2CH3 ；
     R7 选自 H 和 F ；
     R10、 R11 和 R12 独立地选自 ： H， C1-C12 烷基， C1-C12 亚烷基 -C2-C20 杂环基， C1-C12 亚烷 基 -C6-C20 芳基， C2-C8 烯基， C2-C8 炔基， C3-C12 碳环， C2-C20 杂环基， C6-C20 芳基和 C1-C20 杂芳 基， 其中 C1-C12 烷基、 C2-C8 烯基、 C2-C8 炔基、 C3-C12 碳环、 C2-C20 杂环基、 C6-C20 芳基和 C1-C20 杂芳基任选被一个或多个独立地选自下列的基团取代 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2C6H5， -CN， CF3， -CO2H， -CONH2， -CONHCH3， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， 2- 氧 代吡咯烷 -1- 基， -S(O)2NH2 和 -S(O)2CH3 ； 10
     或 R 和 R11 与 它 们 相 连 接 的 氮 原 子 一 起 形 成 C2-C20 杂 环 基 环 或 C1-C20 杂 芳 基， 每个任选被一个或多个独立地选自下列的基团取代 ： F， Cl， Br， I， -CH3， -CH2OH， -CH -CN， -CF3， -CO2H， -CONH2， -CONHCH3， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， 氧 2C6H5， 代， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2 和 -S(O)2CH3 ； 和 13
     R 选自 H， F， Cl， Br， I， -CH3， -CH2CH3， -CN， -CF3， -CH2N(CH3)2， -CH2OH， -CO2H， -CONH2， -CON(CH3)2， -NO2 和 -S(O)2CH3。
     另外， 本发明提供了式 I 的化合物， 其中 ： 1 2 3 4
     R、 R、 R 和 R 独立地选自 ： H， F， Cl， Br， I， -CN， -CF3， -CH2OR10， -CH2R10， -CH2NR10R11， 10 10 10 10 11 10 (C1-C12 亚烷基 )C( ＝ O)OR ， -(C1-C12 亚烷基 )OR ， -CO2R ， -C( ＝ O)N(R )OR ， -NO2， -NR R 11 10 10 10 11 10 10 11 10 ， -OR ， -S(O)2R ， -C( ＝ O)NR R ， -C( ＝ O)NR (C1-C12 亚烷基 )NR R ， -C( ＝ O)NR (C1-C12 10 11 10 10 11 亚烷基 )NR C( ＝ O)OR ， -C( ＝ O)NR (C1-C12 亚烷基 )NR C( ＝ O)R ， -C( ＝ O)NR10(C1-C12 亚烷基 )R10， -NR12C( ＝ O)R10， -NR12C( ＝ O)OR11， -NR12C( ＝ O)NR10R11， -NR12(C1-C12 亚烷基 ) NR10R11， -NR12(C1-C12 亚烷基 )OR10， -NR12(C1-C12 亚烷基 )C( ＝ O)NR10R11， -C ≡ CR10， -CH ＝ 10 CHR ， C2-C20 杂环基， C1-C20 杂芳基和苯基， 其中杂环基、 杂芳基和苯基任选被一个或多个选 自下列的基团取代 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2CO2H， -CN， -CH2NH2， -CH3， -C( ＝ O)CH3， -C( ＝ O)NHCH3， -CO2H， -CH2CO2CH3， -NH2， -OCH3， -S(O)2CH3， 4- 甲基哌嗪 -1- 基和 4- 吗啉基， 和其中 亚烷基任选被一个或多个 F 取代 ；
     A 选自 -C( ＝ O)NR5R6 和任选被一个或多个独立地选自下列的基团取代的 C1-C20 杂 芳基 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2CO2H， -CH(CH3)CH2OCH3， -CN， -CH2NH2， -CH3， -C( ＝ O)CH3， -C( ＝ O)NHCH3， -CO2H， -CH2CO2CH3， -NH2， -OCH3， -S(O)2CH3， 1- 甲基哌啶 -4- 基， 4- 甲基哌嗪 -1- 基， 4- 吗啉基， 异丙基， 异丁基， 苄基和苯基， 其中苄基和苯基任选被下列取代 ： F， Cl， Br， I， -CH49102333779 A CN 1023337932说明书14/280 页OH， -CH2CO2H， -CN， -CH2NH2， -CH3， -C( ＝ O)CH3， -C( ＝ O)NHCH3， -CO2H， -CH2CO2CH3， -NH2， -OCH3， -S(O)2CH3， 1- 甲基哌啶 -4- 基， 4- 甲基哌嗪 -1- 基和 4- 吗啉基 ； 5
     R 选自任选被一个或多个独立地选自下列的基团取代的 C1-C12 烷基 ： F， Cl， Br， I， -CN， -CO2H， -CONH2， -CONHCH3， -NH2， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， S(O)2NH2 和 -S(O)2CH3 ；
     R6 选自 C3-C12 碳环， C2-C20 杂环基， C1-C20 杂芳基和 C6-C20 芳基， 每个任选被一个或 多个独立地选自下列的基团取代 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2C6H5， -CN， -CF3， -CO2H， -CONH2， -CO NHCH3， -NH2， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2， -S(O)2CH3， 吗啉 -4- 基， 哌啶 -1- 基， 哌嗪基， 哌嗪 -4- 基 -2- 酮， 哌嗪 -4- 基 -3- 酮， 吡咯烷 -1- 基， 硫 13 13 10 11 吗啉 -4- 基， S- 二氧代硫吗啉 -4- 基， -C ≡ CR ， -CH ＝ CHR 和 -C( ＝ O)NR R ； 5 6
     或 R 和 R 与它们相连接的氮原子一起形成吗啉 -4- 基， 哌啶 -1- 基， 哌嗪基， 哌 嗪 -4- 基 -2- 酮， 哌嗪 -4- 基 -3- 酮， 吡咯烷 -1- 基， 硫吗啉 -4- 基， S- 二氧代硫吗啉 -4- 基， 每个任选被一个或多个选自下列的基团取代 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2C6H5， -CN， -CF3， -CO -CONH2， -CONHCH3， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2 2H， 和 -S(O)2CH3 ；
     R7 选自 H 和 F ；
     R10、 R11 和 R12 独立地选自 H， C1-C12 烷基， C2-C8 烯基， C2-C8 炔基， C3-C12 碳环， C2-C20 杂环基， C6-C20 芳基和 C1-C20 杂芳基， 其中 C1-C12 烷基、 C2-C8 烯基、 C2-C8 炔基、 C3-C12 碳环、 C2-C20 杂环基、 C6-C20 芳基和 C1-C20 杂芳基任选被一个或多个独立地选自下列的基团取代 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2C6H5， -CN， -CF3， -CO2H， -CONH2， -CONHCH3， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -N HS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2 和 -S(O)2CH3 ； 10 11
     或 R 和 R 与它们相连接的氮原子一起形成任选被一个或多个独立地选自下列的 基团取代的 C2-C20 杂环基环 ： F， Cl， Br， I， -CH3， -CH2OH， -CH2C6H5， -CN， -CF3， -CO2H， -CONH2， -C ONHCH3， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2 和 -S(O)2CH3 ； 和
     R13 选自 H， F， Cl， Br， I， -CH3， -CH2CH3， -CN， -CF3， -CH2N(CH3)2， -CH2OH， -CO2H， -CONH2， -CON(CH3)2， -NO2 和 -S(O)2CH3。
     式 I 化合物的示范性实施方案包括下列结构 ：
     在一个实施方案中， Z1、 Z 2、 Z3、 Z4 是取代的碳 (CR1， CR2， CR3， CR4)。在另一个实施方 案中， Z1、 Z2、 Z 3、 Z4 中的三个是取代的碳， 而 Z1、 Z2、 Z3、 Z4 中的一个是 N。典型地， Z1、 Z 2、 Z3、 Z4 中的至少一个是取代的碳， 即不是所有的 Z1、 Z2、 Z3、 Z4 都是 N。
     式 I 化合物的示范性实施方案包括下列结构 ：
     式 I 化合物的示范性实施方案包括下列结构 ：
     式 I 化合物的示范性实施方案包括下列结构 ：其中 R1、 R3 和 R4 各自是 H ； 和 2
     R 选自 ： F， Cl， Br， I， -CN， -CF3， -CH2OR10， -CH2R10， -CH2NR10R11， -(C1-C12 亚烷基 )C( ＝ 10 10 10 10 11 10 11 O)OR ， -(C1-C12 亚烷基 )OR ， -CO2R ， -C( ＝ O)N(R )OR ， -NO2， -NR R ， -OR10， -S(O)2R10， 10 11 10 10 11 10 10 C( ＝ O)NR R ， -C( ＝ O)NR (C1-C12 亚烷基 )NR R ， -C( ＝ O)NR (C1-C12 亚烷基 )NR C( ＝ O)
     OR11， -C( ＝ O)NR10(C1-C12 亚烷基 )NR10C( ＝ O)R11， -C( ＝ O)NR10(C1-C12 亚烷基 )R10， -NR12C( ＝ O)R10， -NR12C( ＝ O)OR11， -NR12C( ＝ O)NR10R11， -NR12(C1-C12 亚烷基 )NR10R11， -NR12(C1-C12 亚烷 基 )OR10， -NR12(C1-C12 亚烷基 )C( ＝ O)NR10R11， -C ≡ CR10， -CH ＝ CHR10， C2-C20 杂环基， C1-C20 杂芳基和苯基， 其中杂环基、 杂芳基、 苯基和亚烷基任选被一个或多个选自下列的基团取 代： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2CO2H， -CN， -CH2NH2， -CH3， -C( ＝ O)CH3， -C( ＝ O)NHCH3， -CO2H， CH2CO2CH3 ； -NH2， -OCH3， -S(O)2CH3， 4- 甲基哌嗪 -1- 基和 4- 吗啉基。
     示范性的实施方案包括其中 R5 是 CH3 的实施方案。
     示范性的实施方案包括 ： 其中 R6 是被一个或多个独立地选自下列的基团取代的 苯基 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2C6H5， -CN， -CF3， -CO2H， -CONH2， -CONHCH3， -NO2， -N(CH3)2， -NHCO CH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2， -S(O)2CH3， 吗啉 -4- 基， 哌啶 -1- 基， 哌嗪 基， 哌嗪 -4- 基 -2- 酮， 哌嗪 -4- 基 -3- 酮， 吡咯烷 -1- 基， 硫吗啉 -4- 基， S- 二氧代硫吗 13 13 啉 -4- 基， -C ≡ CR 和 -CH ＝ CHR 。
     示范性的实施方案包括其中 A 是选自下列的 C1-C20 杂芳基的实施方案 ： 吡啶基， 异 唑基， 咪唑基， 吡唑基， 吡咯基， 噻唑基， 哒嗪基， 嘧啶基， 吡嗪基， 唑基， 二唑基， 二 唑 -2(3H)- 酮， 呋 喃 基， 噻 吩 基， 1， 2， 3- 三 唑 基， 1， 2， 4- 三 唑 基， 1， 2， 4- 三 1， 3， 4-唑 -5(4H)- 酮， 4， 5- 二氢 -1， 2， 4- 三嗪 -6(1H)- 酮， 四唑基 ； 吡咯并 [2， 3-b] 吡啶基， 吲唑 基， 3， 4- 二氢喹啉基和苯并 [d] 噻唑。
     示范性的实施方案包括其中 A 选自下列杂芳基结构的实施方案 ：
     其 中 R 8 和 R9 独 立 地 选 自 ： H， F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2CO2H， -CH(CH3) CH2OCH3， -CN， -CH2NH2， -CH3， -C( ＝ O)CH3， -C( ＝ O)NHCH3， -CO2H， -CH2CO2CH3， -NH2， -OCH3， -S( O)2CH3， 1- 甲基哌啶 -4- 基， 4- 甲基哌嗪 -1- 基， 4- 吗啉基， 异丙基， 异丁基， 苄基和苯基， 其 中苄基和苯基任选被一个或多个选自下列的基团取代 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2CO2H， -CN， CH2NH2， -CH3， -C( ＝ O)CH3， -C( ＝ O)NHCH3， -CO2H， -CH2CO2CH3， -NH2， -OCH3， -S(O)2CH3， 1- 甲基 哌啶 -4- 基， 4- 甲基哌嗪 -1- 基和 4- 吗啉基。
     示范性的实施方案包括其中 A 选自下列杂芳基结构的实施方案 ：
     其中波形线表示连接位点。 苯并吡喃和苯并氧杂 化合物 化合物， 及其药物制剂， 其潜在地用于治疗 本发明提供了苯并吡喃和苯并氧杂由 PI3 激酶所调节的疾病、 状况和 / 或病症。更具体地说， 本发明提供了式 II 的化合物
     和其立体异构体、 几何异构体、 互变异构体或可药用盐， 其中 ： 1 2 3 4
     R、 R、 R 和 R 独立地选自 ： H， F， Cl， Br， I， -CN， -CF3， -CH2OR10， -CH2R10， -CH2NR10R11， -(C1-C12 亚烷基 )C( ＝ O)OR10， -CO2R10， -C( ＝ O)N(R10)OR11， -NO2， -NR10R11， -OR10， -S(O)2R10， 10 11 10 10 11 10 10 C( ＝ O)NR R ， -C( ＝ O)NR (C1-C12 亚烷基 )NR R ， -C( ＝ O)NR (C1-C12 亚烷基 )NR C( ＝ O) 11 10 10 11 OR ， -C( ＝ O)NR (C1-C12 亚烷基 )NR C( ＝ O)R ， -C( ＝ O)NR10(C1-C12 亚烷基 )R10， -NR12C( ＝ O)R10， -NR12C( ＝ O)OR11， -NR12C( ＝ O)NR10R11， -NR12(C1-C12 亚烷基 )NR10R11， -NR12(C1-C12 亚烷 基 )OR10， -NR12(C1-C12 亚烷基 )C( ＝ O)NR10R11， -C ≡ CR10， -CH ＝ CHR10， C2-C20 杂环基， C1-C20
     杂芳基和苯基， 其中杂环基、 杂芳基和苯基任选被一个或多个选自下列的基团取代 ： -CH2OH ， -CH2CO2H， -CN， -CH2NH2， -C( ＝ O)CH3， -CO2H， -CH2CO2CH3 ； -NH2， -S(O)2CH3， 4- 甲基哌嗪 -1- 基 和 4- 吗啉基 ；
     R5 选自任选被一个或多个独立地选自下列的基团取代的 C1-C12 烷基 ： F， Cl， Br， I， -CN， -CO2H， -CONH2， -CONHCH3， -NH2， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， S(O)2NH2 和 -S(O)2CH3 ；
     R6 选自 C3-C12 碳环， C2-C20 杂环基， C1-C20 杂芳基和 C6-C20 芳基， 每个任选被一个或 多个独立地选自下列的基团取代 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2C6H5， -CN， -CF3， -CO2H， -CONH2， -CO NHCH3， -NH2， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2， -S(O)2CH3， 吗啉 -4- 基， 哌啶 -1- 基， 哌嗪基， 哌嗪 -4- 基 -2- 酮， 哌嗪 -4- 基 -3- 酮， 吡咯烷 -1- 基， 硫吗啉 -4- 基， S- 二氧代硫吗啉 -4- 基， -C ≡ CR13， -CH ＝ CHR13 和 -C( ＝ O)NR10R11 ；
     或 R5 和 R6 与它们相连接的氮原子一起形成吗啉 -4- 基， 哌啶 -1- 基， 哌嗪基， 哌 嗪 -4- 基 -2- 酮， 哌嗪 -4- 基 -3- 酮， 吡咯烷 -1- 基， 硫吗啉 -4- 基， S- 二氧代硫吗啉 -4- 基， 各自任选被一个或多个选自下列的基团取代 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2C6H5， -CN， -CF3， -CO -CONH2， -CONHCH3， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2 2H， 和 -S(O)2CH3 ；
     每个 R7 独立地选自 H， F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH3， -CN， -CF3， -CO2H， -CONH2， -CONHCH3 ， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2 和 -S(O)2CH3 ； 或两个 7 R 一起是＝ O ；
     R8 选自 H 和 F ；
     R10、 R11 和 R12 独立地选自 ： H， C1-C12 烷基， C2-C8 烯基， C2-C8 炔基， C3-C12 碳环， C2-C20 杂环基， C6-C20 芳基和 C1-C20 杂芳基， 其中 C1-C12 烷基、 C2-C8 烯基、 C2-C8 炔基、 C3-C12 碳环、 C2-C20 杂环基、 C6-C20 芳基和 C1-C20 杂芳基任选被一个或多个独立地选自下列的基团取代 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2C6H5， -CN， -CF3， -CO2H， -CONH2， -CONHCH3， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -N HS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2 和 -S(O)2CH3 ； 10 11
     或 R 和 R 与它们相连接的氮原子一起形成任选被一个或多个独立地选自下列的 基团取代的 C2-C20 杂环基环 ： F， Cl， Br， I， -CH3， -CH2OH， -CH2C6H5， -CN， -CF3， -CO2H， -CONH2， -C ONHCH3， -NO2， -N(CH3)2， -NHCOCH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2 和 -S(O)2CH3 ； 13
     R 选自 H， F， Cl， Br， I， -CH3， -CH2CH3， -CN， -CF3， -CH2N(CH3)2， -CH2OH， -CO2H， -CONH2， -CON(CH3)2， -NO2 和 -S(O)2CH3 ；
     n是1或2； 和
     Y 是 O、 S、 N-NR10R11 ；
     条件是 ：
     当 n 是 1、 Y 是 O、 且 R1、 R2、 R3、 R7、 R8 各自是 H 时， 则 R4 不是 H 或 CH3 ； 和 7
     当 n 是 1 时， 则两个 R 一起不是＝ O。
     示范性的实施方案包括其中式 II 化合物具有下列结构的实施方案 ：
     示范性的实施方案包括其中 R5 是 CH3 的实施方案。
     示范性的实施方案包括 ： 其中 R6 是被一个或多个独立地选自下列的基团取代的 苯基 ： F， Cl， Br， I， -CH2OH， -CH2C6H5， -CN， -CF3， -CO2H， -CONH2， -CONHCH3， -NO2， -N(CH3)2， -NHCO
     CH3， -NHS(O)2CH3， -OH， -OCH3， -OCH2CH3， -S(O)2NH2， -S(O)2CH3， 吗啉 -4- 基， 哌啶 -1- 基， 哌嗪 基， 哌嗪 -4- 基 -2- 酮， 哌嗪 -4- 基 -3- 酮， 吡咯烷 -1- 基， 硫吗啉 -4- 基， S- 二氧代硫吗 13 13 啉 -4- 基， -C ≡ CR 和 -CH ＝ CHR 。
     式 I 化合物的制备
     式 I 的苯并氧杂化合物可以利用包含与化学领域熟知的方法， 类似的方法的合成路线尤其是按照本文所包含的说明书来合成。起始原料一般得自于商业渠道， 例如 Aldrich Chemicals(Milwaukee， WI)， 或使用本领域技术人员熟知的方法制备 ( 例 如， 利用描述在下列中的方法来制备 ： Louis F.Fieser and Mary Fieser， Reagents for Organic Synthesis， v.1-23， Wiley， N.Y.(1967-2006ed.)，或 Beilsteins Handbuchder organischen Chemie， 4， Aufl.ed.Springer-Verlag， Berlin，包 括 副 刊 ( 还 可 通 过 Beilstein 联机数据库可获得的方法来制备 )。
     在某些实施方案中， 式 I 的化合物可以容易地使用众所周知的制备苯并氧杂 人 (2004)Biorganic & Med.Chem.Letters 14 ：化 合 物 (Sekhar 等 人 (1989)Sulfur Letters 9(6) ： 271-277 ； Katsura 等 人 (2000J. Med.Chem.43 ： 3315-3321 ； Rueeger 等 2451-2457 ； Reiter 等人 (2007)Biorganic & Med.Chem.Letters 17 ： 5447-5454 ； Banaszak 等人 (2006)Tetrahedron Letters 47 ： 6235-6238 ； ) 及其它杂环的方法来制备， 其描述在 下列中 ： Comprehensive Heterocyclic Chemistry II， Editors Katritzky and Rees， Elsevier， 1997，例 如，第 3 卷 ； Liebigs Annalen der Chemie， (9) ： 1910-16， (1985) ； Helvetica Chimica Acta ， 41 ： 1052-60 ， (1958) ； Arzneimittel-Forschung ， 40(12) ： 1328-31， (1990)。
     可以单独制备式 I 的化合物， 或以包括至少 2 个、 例如 5 至 1,000 个化合物或 10 至 100 个化合物的化合物库形式来制备。式 I 化合物库可以利用组合的 “裂解和混合” 方 法或通过许多平行合成来制备， 其利用本领域技术人员已知的方法、 使用液相或固相化学 过程来进行。由此， 按照本发明的进一步方面， 提供了包括至少 2 个化合物或其可药用盐的 化合物库。
     为了说明目的， 反应路线 1-8 表示了可以用于制备式 I 化合物以及关键中间体的 一般方法。一般方法和实施例部分包括个别反应步骤的更详细说明。本领域技术人员可以 理解， 可以使用其它合成路线来合成本发明的化合物。 尽管在反应路线、 一般方法和实施例 中描述了某些起始原料和途径， 但可以容易地替换为其它起始原料和途径， 以提供各种衍 生物和 / 或反应条件。另外， 利用如下所述方法制备的许多化合物， 可以使用本领域技术人 员熟知的常规化学知识、 按照本公开来进一步修饰。 在式 I 化合物的制备中， 可能需要保护中间体的远端官能团 ( 例如伯或仲胺 )。 对这种保护的需要是变化的， 这取决于远端官能团的性质和制备方法的条件。合适的氨 基 - 保护基包括乙酰基， 三氟乙酰基， 叔丁氧羰基 (BOC)， 苄氧羰基 (CBz) 和 9- 芴基亚甲基 氧基羰基 (Fmoc)。 本领域技术人员容易确定这种保护的必要性。 对于保护基和其使用的概 述， 参见 T.W.Greene， Protective Groups in Organic Synthesis， JohnWiley & Sons， New York， Third Ed.， 1999。
     反应路线 1 反应路线 1 显示了制备 3， 4- 二氢苯并 [b] 氧杂 -5(2H)- 酮中间体 66 的一般方法： 通过酚化合物与 4- 溴丁酸乙酯的 O- 烷基化， 得到 4- 苯氧基丁酸乙酯中间体 67， 而后 进行皂化反应， 在酸性条件下得到羧酸 68， 并进行分子内环化作用。
     反应路线 2 反应路线 2 显示了制备 N， N- 二取代的 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -5(2H)- 酮中间体 66 甲酰化， 得到 5- 氯 -2， 3- 二氢苯并 [b] 氧杂 -4- 甲-2- 甲酰胺中间体 69 的一般方法。用三氯氧磷和二甲基甲酰胺 (DMF) 将 3， 4- 二氢苯 并 [b] 氧杂 醛中间体 70。在碳酸钾和 DMF 中， 70 与巯基乙酸酯 (HSCH2CO2R， 其中 R 是烷基或芳基 ) 进 行环化， 得到 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酸酯中间体 71。在 THF 和 水中， 71 与氢氧化锂进行皂化反应， 得到酸 (R ＝ H)， 在回流条件下， 将其用亚硫酰氯处理， 5 6 而后用仲胺 (HNR R )( 例如 N- 甲基 -2- 氯苯胺 ) 与催化数量的 DMAP(4， 4- 二甲基氨基吡 啶 )、 三乙胺和二氯甲烷处理， 得到 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺中 间体 69。或者， 用草酰氯和催化数量的 DMF 处理酸， 形成酰基氯， 而后在乙腈中与胺和碳酸 1 2 3 4 钾反应， 得到酰胺， 例如 69。如果 R 、 R、 R 或 R 中的一个是溴， 69 的溴或另一个中间体例如 66、 70、 71 的溴可以通过下列方法置换 ： (i) 羰化胺化， 得到酰胺 (-NR12C( ＝ O)R10， (ii) 10 11 甲酰化 (-CHO)， 而后还原胺化为 -CH2NR R ， (iii) 与芳基或杂芳基进行 Suzuki 偶合， (iv) 10 10 11 Sonagoshira 偶合， 得到炔基 (-C ≡ CR )， 或 (v) 胺化 (-NR R )。
     在 Suzuki 偶合步骤形成化合物 ( 其中 R1、 R2、 R3 或 R4 是芳基或杂芳基 ) 期间， 可 以使用各种钯催化剂。 Suzuki 偶合是钯介导的芳基卤化物与硼酸或硼酸酯例如频哪醇酯的 交叉耦合反应。可以使用低价的 Pd(II) 和 Pd(O) 催化剂， 包括
     PdCl2(PPh3)2， Pd(t-Bu)3， PdCl2dppf CH2Cl2， Pd(PPh3)4， Pd(OAc)/PPh3， Cl2Pd[(Pet3)]2， Pd(DIPHOS) 2 ，Cl 2 Pd(Bipy) ，[PdCl(Ph 2 PCH 2 PPh 2 )] 2 ，Cl 2 Pd[P(o-tol) 3 ] 2 ，Pd 2 (dba) 3 / P(o-tol)3， Pd2(dba)/P(furyl)3， Cl2Pd[P(furyl)3]2， Cl2Pd(PMePh2)2， Cl2Pd[P(4-F-Ph)3]2， Cl2Pd[P(C6F6)3]2， Cl2Pd[P(2-COOH-Ph)(Ph)2]2， Cl2Pd[P(4-COOH-Ph)(Ph)2]2， TM
     和包封的催化剂 Pd EnCat 30， Pd EnCatTM TPP30 和 Pd(II)EnCatTMBINAP30(US 2004/0254066)。
     在 Suzuki 偶合步骤之后， 各种固体吸附剂钯清除剂可用于除去钯。钯清除剂的示 范性实施方案包括 和 硫脲。其它钯清除剂包括硅胶， 可控 TM TM 孔度玻璃 (TosoHaas) 和衍生的低交联的聚苯乙烯 QuadraPure AEA， QuadraPure IMDAZ， TM TM QuadraPure MPA， QuadraPure TU(Reaxa Ltd.， Sigma-Aldrich Chemical Co.)。
     反应路线 3 反应路线 3 显示了制备苯并氧杂 噻唑 73 的一般方法。苯并氧杂 酮 (3， 4- 二 -5(2H)- 酮 )66 的溴化， 形成 2- 溴苯并氧杂 酮中间体 72。与硫代酰氢苯并 [b] 氧杂胺的环化， 形成 73(Rueeger 等人 (2004)Bioorganic & Med.Chem.Letters 14 ： 2451-2457 ； US2005/0277630 ； WO 2001/064675 ； US 6222040 ； US 6225330 ； US5314889)。
     反应路线 4 反应路线 4 显示了制备苯并氧杂 并噻吩酰胺 78 的一般方法。在钯催化剂条件 中间体 74。 2 位的溴化， 得到 2- 溴 -4， 5- 二下 ( 参见实施例 8)， 3-(2-(2- 卤代苯氧基 ) 乙基 ) 噻吩中间体 75(X ＝ Br， I， Cl) 的环化， 得到 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 中间体 76， 可以使其与异氰酸芳基酯 (Ar-NCO) 或异硫氰酸芳基酯 (Ar-NCS) 试剂反应， 得到 N- 苯基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺中间体 77(Y ＝ O， S)。可以将 77 的 N-H 基团选择性地烷基化， 得到 78。
     反应路线 5 反应路线 5 显示了 2- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 中间体 76 与杂环基硼酸酯试剂 ( 例如 2-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧杂硼杂环戊烷 -2- 基 ) 吡啶 ) 进行 Suzuki 偶合， 以得到 2-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 的一般方法。
     -2- 基 ) 吡啶 79a
     反应路线 6 反应路线 6 显示了形成噻吩基苯并氧杂 硼酸酯化合物 80 的一般方法 ： 通过 中间体 76 与杂环基硼酸酯试剂 ( 例如2- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂2- 异丙氧基 -4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧杂硼杂环戊烷 ) 的反应。硼酸酯 80 与杂环基 卤化物试剂 ( 例如 3- 碘代吡啶 ) 进行 Suzuki 偶合， 得到 3-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 基 ) 吡啶 79b。
     反应路线 7 反应路线 7 显示了 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 中间体 74 的 2 位取代的一般方法 ： 通过用羧酸例如 2- 苯乙酸酰化， 得到 1-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 基 )-2- 苯乙酮中间体 81。溴化得到 2- 溴 -1-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 基 )-2- 苯乙酮中间体 82。与硫代酰胺化合物进行环化， 得到 4-(4， 5- 二 -2- 基 )-5- 苯基噻唑 83。 3-d] 氧杂
     氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     反应路线 8 反应路线 8 显示了 4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 基 86。 -2- 基中间体 84 的区域专一性烷基化的一般方法 ： 氧化形成 N- 氧化物 85， 进行烷基化， 得到 10- 取代 4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     式 II 化合物的制备 在某些实施方案中， 式 II 的化合物可以容易地使用众所周知的方法进行制 化合物 (Sekhar 等人 (1989)Sulfur Letters 9(6) ： 等人 (2004)备， 以制备苯并吡喃和苯并氧杂271-277 ； Navarro 等人 (2001)Heterocycles55(12) ： 2369-2386 ； MajumdarMonatshefte fur Chemie135(8) ： 1001-1007 ； Potts 等人 (1986)Journal of the Chemical Society， Chemical Communications 7 ： 561-3) 及其它杂环的方法来制备， 其描述在下 列 中： Comprehensive Heterocyclic Chemistry II， Editors Katritzky and Rees， Elsevier， 1997，例 如，第 3 卷 ； Liebigs Annalen der Chemie， (9) ： 1910-16， (1985) ； 41 ： 1052-60 ， (1958) ； Arzneimittel-Forschung ， 40(12) ： Helvetica Chimica Acta ， 1328-31， (1990)。
     为了说明目的， 反应路线 1bp-5bp 表示了可以用于制备苯并吡喃式 I 化合物以及 关键中间体的一般方法。一般方法和实施例部分包括个别反应步骤的更详细说明。本领域 技术人员可以理解， 可以使用其它合成路线来合成本发明的化合物。 尽管在反应路线、 一般 方法和实施例中描述了某些起始原料和途径， 但可以容易地替换为其它起始原料和途径， 以提供各种衍生物和 / 或反应条件。另外， 利用如下所述方法制备的许多化合物， 可以使用 本领域技术人员熟知的常规化学过程、 按照本公开的提示来进一步修饰。
     在式 II 化合物的制备中， 可能需要保护中间体的远端官能团 ( 例如伯或仲胺 )。 对这种保护的需要是变化的， 这取决于远端官能团的性质和制备方法的条件。合适的氨 基 - 保护基包括乙酰基， 三氟乙酰基， 叔丁氧羰基 (BOC)， 苄氧羰基 (CBz) 和 9- 芴基亚甲基 氧基羰基 (Fmoc)。本领域技术人员容易确定这种保护的必要性。对于保护基和其使用的 概述， 参见 T.W.Greene， Protective Groups in Organic Synthesis， John Wiley & Sons， New York， Third Ed.， 1999。
     反应路线 1bp
     反 应 路 线 1bp 显 示 了 由 4- 羟 基 -2H- 苯 并 吡 喃 -2- 酮 化 合 物 51bp 来 制 备 4- 氯 -2H- 苯并吡喃 -2- 酮 52bp 和 4- 氯 -2- 氧代 -2H- 苯并吡喃 -3- 甲醛 53bp 中间体的一 般方法 (Navarro 等人 (2001)Heterocycles55(12) ： 2369-2386)。中间体 52bp 可以与巯基 乙酰基化合物环化， 得到 3- 取代的 4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -4- 酮中间体 54bp。54bp 的噻吩环的 2 位的去质子化和酰化， 得到 2- 酯化的 4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -4- 酮中 间体 55bp。
     反应路线 2bp
     反应路线 2bp 显示了用格氏试剂 (R7)2MgI 将 3- 取代的 4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并 吡喃 -4- 酮中间体 54bp 的苯并吡喃酰基偕二烷基化， 而后用四氯化钛处理， 得到 4， 4- 二 取代的 4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃中间体 56bp(Navarro(2001)Heterocycles55(12) ： 2369-2386)。
     反应路线 3bp 反应路线 3 显示了分别由 4- 氯 -2H- 苯并吡喃 -3- 甲醛 57bp 和 (Z)-5- 氯 -2， -4- 甲醛 60bp、 通过在乙腈和碳酸钾中与巯基乙酸甲酯的环化来制3- 二氢苯并 [b] 氧杂 氧杂
     备 4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酸甲酯 58bp 和 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -2- 甲酸甲酯 59bp 中间体的一般方法 (Sekhar 等人 (1989)Sulfur Letters9(6) ：271-277)。反应路线 4bp
     反应路线 4 显示了制备 2- 取代的 4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -4- 酮中间体 62bp 的一般方法 ： 用烯丙基的卤化物将 4- 巯基 -2H- 苯并吡喃 -2- 酮中间体 60bp 烯丙基化， 得 到 4-( 丁 -2- 烯基硫基 )-2H- 苯并吡喃 -2- 酮中间体 61bp， 并进行热硫代 - 克莱森重排 (Majumdar 等人 (2004)Monatshefte fur Chemie 135(8) ： 1001-1007)。
     反应路线 5bp
     反应路线 5bp 显示了制备 2- 取代的 4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃中间体 63bp 的一般方法 ： 通过 N- 苯基 -2-( 丙 -2- 炔基氧基 ) 苯硫代酰胺化合物 64bp 与 α- 溴代酰 氯 (R ＝烷基或芳基 ) 的反应， 预期形成噻唑翁中间体 65bp， 使其失去异氰酸苯酯， 并进 行 1， 3- 偶极环加成 (Potts 等人 (1986)Journal of the Chemical Society， Chemical Communications7 ： 561-3 ； Potts 等人 (1989)J.Org.Chem.54 ： 1077-1088)。
     分离方法
     在制备本发明化合物的方法中， 将反应产物互相分离和 / 或从起始原料中分离是 有利的。利用本领域普通技术， 将各个步骤或系列步骤的目标产物分离和 / 或纯化 ( 下文 的分离 ) 至目标均匀度。典型地， 这种分离包括多相提取、 从溶剂或溶剂混合物中结晶、 蒸 馏、 升华或色谱。色谱可以包括许多方法， 包括例如 ： 反相和正相色谱 ； 体积排除色谱 ； 离子 交换色谱 ； 高、 中和低压液相色谱法和装置 ； 小型分析 ； 模拟移动床 (SMB) 和制备薄层色谱 法或厚层色谱法， 以及小规模薄层和快速色谱技术。
     另一种分离方法包括 ： 用选择的试剂处理混合物， 以便与目标产物、 未反应的起始 原料、 反应副产品等等结合或使其分离。这种试剂包括吸附剂或吸收剂例如活性碳、 分子 筛、 离子交换介质等等。或者， 在碱性材料的情况下， 试剂可以是酸， 在酸性物质的情况下， 可以是碱， 结合试剂例如抗体、 结合蛋白、 选择性的螯合剂例如冠醚、 液体 / 液体离子提取 试剂 (LIX)， 等等。
     根据所涉及物质的性质选择合适的分离方法。例如， 在蒸馏和升华中的沸点和分 子量， 在色谱中的存在或不存在极性官能团， 在多相提取中的酸性和碱性介质中的物质稳 定性， 等等。本领域技术人员可以应用最合适的技术， 以实现目标分离。
     基于它们的物理化学差异， 利用本领域技术人员熟知的方法， 例如色谱和 / 或分 级结晶， 可以将非对映体混合物分离为其单一非对映体。 对映体可以如下分离 ： 通过与合适 的旋光性化合物 ( 例如手性助剂， 例如手性醇或 Mosher′ s 酰基氯 ) 反应， 将对映体混合物 转化为非对映体混合物， 分离非对映体， 并将单一非对映异构体转化 ( 例如水解 ) 为相应的 纯对映体。同样， 本发明的一些化合物可能是阻转异构体 ( 例如取代的联芳 )， 并且认为其
     是本发明的一部分。还可以使用手性 HPLC 柱分离对映体。
     单一立体异构体， 例如， 基本上不含其立体异构体的对映体， 可以使用旋光活性 拆分试剂、 使用例如形成非对映体的方法、 通过外消旋混合物的拆分来获得 (Eliel， E.and Wilen， S.” Stereochemistry of Organic Compounds， ” John Wiley & Sons， Inc.， New York， 1994 ； Lochmuller， C.H.， (1975)J.Chromatogr.， 113(3) ： 283-302)。通过任何合适 方法， 可以分开和分离本发明手性化合物的外消旋混合物， 包括 ： (1) 与手性化合物形成 离子、 非对映体盐， 通过分级结晶或其它方法进行分离， (2) 与手性衍生化试剂形成非对 映体化合物， 分离非对映体， 并转化为纯立体异构体， 和 (3) 在手性条件下， 直接分离基本 上纯的或富集的立体异构体。参见 ： “Drug Stereochemistry， Analytical Methods and Pharmacology， ” Irving W.Wainer， Ed.， Marcel Dekker， Inc.， New York(1993)。
     在方法 (1) 中， 非对映体盐可以由对映体纯的手性碱例如番木鳖碱、 奎宁、 麻黄 碱、 马钱子碱、 α- 甲基 -β- 苯乙胺 ( 苯丙胺 ) 等等与携带酸性官能团例如羧酸和磺酸的 不对称化合物的反应形成。 可以诱导非对映体盐， 以便通过分级结晶或离子色谱进行分离。 对于氨基化合物的旋光异构体的分离， 加入手性羧酸或磺酸， 例如樟脑磺酸、 酒石酸、 扁桃 酸或乳酸， 可以导致非对映体盐的形成。
     或者， 通过方法 (2)， 使所要拆分的底物与手性化合物的一个对映体反应， 以形成 非对映体对 (E.and Wilen， S.” Stereochemistry of Organic Compounds” ， John Wiley & Sons， Inc.， 1994， p.322)。非对映体化合物可以由不对称化合物与对映体纯的手性 衍生化试剂例如薄荷基衍生物的反应而形成， 而后分离非对映体， 并水解， 产生纯的或富 集的对映体。测定光学纯度的方法涉及 ： 在碱的存在下制备消旋混合物的手性酯， 例如 薄荷基酯， 例如 (-) 氯甲酸薄荷基酯， 或 Mosher 酯， α- 甲氧基 -α-( 三氟甲基 ) 苯基 醋酸酯 (Jacob III.J.Org.Chem.(1982)47 ： 4165)， 分析 1H NMR 光谱， 确定两种阻转异构 体对映体或非对映体的存在。按照分离阻转异构体萘基 - 异喹啉 (WO 96/15111) 的方 法， 通过正和反向色谱法， 可以分开和分离阻转异构体化合物的稳定非对映体。通过方 法 (3)， 可以通过使用手性固定相的色谱法来分离两个对映体的外消旋混合物 (“Chiral Liquid Chromatography” (1989)W.J.Lough， Ed.， Chapman and Hall， New York ； Okamoto， J.Chromatogr.， (1990)513 ： 375-378)。 通过辨别带有不对称碳原子的其它手性分子所使用 的方法 ( 例如旋光和圆二色光谱 )， 可以区别富集或纯对映体。
     生物学评价
     通过许多直接和间接检测方法， 可以测定式 I 或式 II 化合物的 PI3 激酶活性。试 验本文所描述的某些示范性化合物的 p110α(alpha) 及其它异构型的 PI3K 结合活性 ( 实 施例 275) 和针对肿瘤细胞的体外活性 ( 实施例 276)。PI3K 结合活性的范围小于 1nM( 纳 摩尔 ) 至大约 10μM( 微摩尔 )。某些本发明的示范性化合物具有小于 10nM 的 PI3K 结合活 性 IC50 值。某些本发明化合物基于肿瘤细胞的活性的 IC50 值小于 100nM。
     利用下列方法测定式 I 和 II 示范性化合物的细胞毒素或细胞生长抑制活性 ： 在细 胞培养介质中建立增殖哺乳动物肿瘤细胞系， 加入式 I 化合物， 培养细胞大约 6 小时至大约 5 天时间 ； 测定细胞生存力 ( 实施例 276)。基于细胞的体外试验用于测定生存力， 即增殖 (IC50)、 细胞毒性 (EC50) 和细胞程序死亡的诱导 ( 半胱天冬酶 (caspase) 活化 )。通过细胞 增殖试验、 CellTiter荧光细胞寿命试验 ( 可从 Promega Corp.， Madison， WI 商购 )，测定式 I 和 II 示范性化合物的体外效能 ( 实施例 276)。这种均相试验方法基于鞘翅目 荧光素酶的重组表达 (US 5583024 ； US 5674713 ； US 5700670)， 并且基于定量存在的 ATP， 可以测定培养物中的活细胞数目 ( 代谢活性细胞的标志 )(Crouch 等人 (1993)J.Immunol. Meth.160 ： 81-88 ； US 6602677)。在 96 或 384 孔板中进行 CellTiter试验过程包括 ： 将单一试剂 (CellTiter试验， 使用其 可自动化高通量筛选检验 (HTS)(Cree 等人 (1995)AntiCancer Drugs 6 ： 398-404)。均相 试剂 ) 直接加入到在补充血清的介质中培养 物的细胞中。不需要洗涤细胞， 除掉介质， 和多重吸取步骤。加入试剂并混合之后 10 分钟 之内， 该系统可在 384 孔板中检测出少至 15 个细胞 / 孔。
     均相 “加入 - 混合 - 测定” 形式可导致细胞溶解， 并且产生荧光信号， 该信号与 ATP 存在数量成正比。 ATP 的数量与培养物中存在的细胞数目直接成正比。 CellTiter试 验产生由荧光素酶反应所引起的 “辉光型” 荧光信号， 其具有通常大于五小时的半衰期 ( 根 据细胞类型和使用的介质 )。用相对荧光单位 (RLU) 反映活细胞。底物 ( 甲虫莹光素 ) 被 重组荧光虫荧光素酶氧化脱羧基， 同时伴有 ATP 转变为 AMP， 并产生光量子。延长的半衰期 消除了使用试剂注入器的需要， 并且给多板的连续或批处理方式过程提供了灵活性。这种 细胞增殖试验使用各种多孔板， 例如 96 或 384 孔板。可以通过光度计或 CCD 摄像成象装置 记录数据。以随着时间的推移而测定的相对光单位 (RLU) 提供荧光计算结果 (output)。
     通 过 CellTiter-试 验 ( 实 施 例 276)， 针 对 几 个 肿 瘤 细 胞 系， 包 括 PC3、Detroit 562 和 MDAMB361.1， 测定式 I 和 II 示范性化合物的抗增殖效果。确定试验化合物 的 EC50 值。体外细胞效能活性的范围大约为 100nM 至大约 10μM。 利用试验来测定某些示范性化合物的某些 ADME 特性， 包括 ： Caco-2 渗透性 ( 实施 例 277)， 肝细胞廓清率 ( 实施例 278)， 细胞色素 P450 抑制性 ( 实施例 279)， 细胞色素 P450 诱导性 ( 实施例 280)， 血浆蛋白结合 ( 实施例 281) 和 hERG 通道阻断 ( 实施例 282)。
     在肿瘤异种移植的 Taconic 裸鼠模型中， 通过给药剂量的递增研究， 测试某些示 范性化合物的效果 ( 实施例 283)。给予乳腺癌细胞系 MDA-MB-361.1 小鼠模型化合物 223 以及赋形剂 (MCT， 阴性对照 )。 当 21 天的日剂量口服是 50 和 100mg/kg 时， 测定肿瘤生长延 迟 ( 图 3)。 作为安全的指标， 测定体重随着治疗过程的变化。 给予化合物 223(50 和 100mg/ kg) 的组的体重没有显著地不同于赋形剂给予组的体重。用化合物 328 治疗 MDA-MB-361.1 小鼠模型， 当 21 天的日口服剂量是 25、 50 和 100mg/kg 时， 可以导致肿瘤生长抑制 ( 图 4)。 用 25mg/kg 治疗的 10 个小鼠中的至少一个显示了部分响应。给予化合物 328(50 和 100mg/ kg) 的组的体重没有显著地不同于赋形剂给予组的体重。用化合物 345 治疗 MDA-MB-361.1 小鼠模型， 当 21 天的日口服剂量是 12.5、 25 和 50mg/kg 时， 可以导致肿瘤生长抑制 ( 图 5)。 给予化合物 345(12.5、 25 和 50mg/kg) 的组的体重没有显著地不同于赋形剂给予组的体重。 在每个研究中， 化合物 223、 328 和 345 抑制 pAkt( 磷酸 -Akt)， 其是 PI3K 信号转导中断的可 能的生物标志 ( 实施例 284)。
     按 照 本 发 明 的 方 法， 制 备 了 表 1 中 的 示 范 性 式 I 化 合 物 101-533， 鉴定和测 试 了 其 PI3K 活 性， 并 具 有 下 列 结 构 和 相 应 的 命 名 (ChemDraw Ultra， Version 9.0.1， CambridgeSoft Corp.， Cambridge MA)。
     表 1.
     按 照 本 发 明 的 方 法， 制 备 了 表 2 中 的 示 范 性 式 II 化 合 物， 进 行 了 表 征， 并测 试 了 其 PI3K 活 性， 并 具 有 下 列 结 构 和 相 应 的 命 名 (ChemDraw Ultra， Version 9.0.1， CambridgeSoft Corp.， Cambridge MA)。
     表 2.
     式 I 和 II 化合物的给予
     本发明的式 I 和 II 化合物可以通过任何适合于所治疗病症的途径给予。合适的 途径包括口服、 肠胃外 ( 包括皮下、 肌注、 静脉内、 动脉注射、 真皮内、 鞘内和硬膜外 )、 透皮、 直肠、 经鼻、 局部 ( 包括面颊和舌下 )、 阴道、 腹腔内、 肺内、 和鼻内给予。对于局部免疫抑制 治疗， 可以通过病灶内给药的方式给予化合物， 包括在移植之前灌注于移植物或者接触移 植物。应理解， 优选途径可以随例如接受者的病症而变化。如果化合物是口服给予的， 可以 将其与可药用载体或赋形剂配制为丸剂、 胶囊剂、 片剂等等。如果化合物是胃肠外给予的， 可以将其与可药用肠胃外载体一起配制， 并且以下面详述的单位剂量注射形式。
     治疗人患者的剂量可以在大约 10mg 至大约 1000mg 的式 I 或 II 化合物的范围。 典型的剂量可以是大约 100mg 至大约 300mg 化合物。根据具体化合物的药物动力学和药效 特性， 包括吸收， 分布， 代谢和排泄， 可以一天给予一次剂量 (QID)， 每天两次 (BID)， 或更频 繁。另外， 毒性因素可以影响剂量和给药方案 . 当口服给药时， 对于具体期限， 可以每天摄 取丸剂、 胶囊剂或片剂， 或频率更小。对于多循环治疗， 可以重复该方案。
     用式 I 和 II 化合物的治疗方法
     本发明的化合物可有效用于治疗高增殖性疾病、 状况和 / 或病症， 包括但不限于 ： 以脂质激酶例如 PI3 激酶的超表达为特征的那些。相应地， 本发明的另一个方面包括治疗 或预防可以通过抑制脂质激酶 ( 包括 PI3) 来治疗或预防的疾病或状况的方法。在一个实 施方案中， 该方法包括 ： 给予需要其的哺乳动物治疗有效量的式 I 的化合物、 或其立体异构 体、 几何异构体、 互变异构体或可药用盐。在一个实施方案中， 用式 I 的化合物和可药用载 体、 佐剂或赋形剂来治疗人患者， 其中以可测地抑制 PI3 激酶活性的数量来提供所述式 I 化 合物。
     可以按照本发明方法治疗的癌症包括但不局限于 ： 乳房癌， 卵巢癌， 宫颈癌， 前列 腺癌， 睾丸癌， 泌尿生殖道癌， 食道癌， 喉癌， 恶性胶质瘤， 神经母细胞瘤， 胃癌， 皮肤癌， 角化
     棘皮瘤， 肺癌， 鳞状细胞癌， 大细胞癌， 非小细胞肺癌 (NSCLC)， 小细胞癌， 肺恶性腺瘤， 骨癌， 结肠癌， 腺瘤， 胰腺癌， 恶性腺瘤， 甲状腺癌， 毛囊癌， 未分化性癌， 乳头状癌， 精原细胞瘤， 黑 素瘤， 肉瘤， 膀胱癌， 肝癌和胆道癌， 肾癌， 脊髓病症， 淋巴病症， 毛细胞癌， 口腔和咽 ( 口部 ) 癌， 口唇癌， 舌癌， 口腔癌， 咽癌， 小肠癌， 结肠 - 直肠癌， 大肠癌， 直肠癌， 脑和中枢神经系统 癌， Hodgkin′ s 癌瘤和血癌。
     本发明的另一个方面提供了本发明的化合物， 用于治疗哺乳动物 ( 例如， 患有这 种疾病或状况的人 ) 的本文所描述的疾病或状况。还提供的是本发明的化合物在制备药物 中的用途， 该药物用于治疗患有这种病症的温血动物 ( 例如哺乳动物， 例如人 ) 的本文所描 述的疾病和状况。
     药学制剂
     为了使用本发明化合物治疗 ( 包括预防性治疗 ) 哺乳动物 ( 包括人 )， 通常按照标 准药学实践将其配制为药物组合物。按照本发明的该方面， 提供了包含本发明化合物以及 结合使用的可药用稀释剂或载体的药物组合物。
     通过将本发明的化合物与载体、 稀释剂或赋形剂混合， 制备典型的制剂。 本领域技 术人员熟知合适的载体、 稀释剂和赋形剂， 并且包括材料例如碳水化合物， 石蜡， 水溶性和 / 或可膨胀的聚合物， 亲水性或疏水性的材料， 凝胶， 油类， 溶剂， 水等等。 所使用的具体载体、 稀释剂或赋形剂取决于本发明化合物的应用方法和目的。 溶剂的选择一般基于本领域技术 人员认为可安全 (GRAS) 给予哺乳动物的溶剂。通常， 安全溶剂是无毒的含水溶剂， 例如水， 及其它可在水中溶解或互溶的无毒溶剂。合适的含水溶剂包括水、 乙醇、 丙二醇、 聚乙二醇 ( 例如 PEG 400， PEG 300) 等等， 和其混合物。制剂还可以包含一或多种缓冲液， 稳定剂， 表 面活性剂， 湿润剂， 润滑剂， 乳化剂， 悬浮剂， 防腐剂， 抗氧化剂， 遮光剂， 助流剂， 加工助剂， 甜味剂， 芳香剂， 调味剂及其它已知的添加剂， 以提供具有精美外观的药物 ( 即本 着色剂， 发明的化合物或其药物组合物 ) 或帮助制备药学产品 ( 即药物 )。
     可以使用常规溶解和混合方法来制备制剂。例如， 在一或多种上述赋形剂的存在 下， 将本体药物物质 ( 即本发明的化合物或化合物的稳定化形式 ( 例如， 与环糊精衍生物或 其它已知的络合试剂的复合物 )) 溶于合适溶剂中。将本发明的化合物典型地配制为药学 剂型， 以提供容易控制的药物剂量， 并且能够使患者适应处方方案。
     本申请的药物组合物 ( 或制剂 ) 可以以各种方式包装， 这取决于给予药物所使用 的方法。通常， 用于分配的物品可以包括容器， 在其中， 药学制剂以合适的形式放置。合适 容器对于本领域技术人员是熟知的， 并且包括材料例如瓶 ( 塑料和玻璃 )、 小袋、 安瓿、 塑料 袋、 金属筒， 等等。容器还可以包括防干扰系统， 以防止不慎重地使用包装的内含物。另外， 容器上面具有描述容器内含物的标签。标签还可以包括合适的警告。
     可以制备本发明化合物的药学制剂， 用于各种给药途径和类型。 例如， 以冷冻干燥 制剂、 碾碎粉末或水溶液形式， 将具有目标纯度的本发明式 I 化合物任选与可药用稀释剂、 载体、 赋形剂或稳定剂混合 (Remington ′ s Pharmaceutical Sciences(1980) 第 16 版， Osol， A.Ed)。可以通过在环境温度、 在合适的 pH 值下、 和在目标纯度下， 与生理学可接受的 载体 ( 即在使用剂量和浓度下对于接受者是无毒的 ) 一起混合进行配制。制剂的 pH 值主 要取决于化合物的具体用途和浓度， 但可以在大约 3 至大约 8 的范围。在 pH 值 5 的乙酸盐 缓冲液中的制剂是合适的实施方案。优选， 本文使用的本发明的化合物是无菌的。 尤其是， 用于体内给药的制剂必须是 无菌的。通过无菌过滤膜进行过滤， 可以很容易实现这种杀菌。
     化合物通常可以以固体组合物、 冷冻干燥制剂或水溶液的形式储藏。
     按照良好的医疗实践， 以一定方式， 即数量、 浓度、 进度、 历程、 载体和给药途径将 本发明的药物组合物进行配制、 剂量化和给予。在本文中考虑的因素包括所治疗的具体 病症、 所治疗的具体哺乳动物、 个体患者的临床病症、 病症的病因、 药剂的递送位点、 给药方 法、 给药的日程表、 和医学专业人员已知的其它因素。所给予的化合物的 “治疗有效量” 取 决于这些考虑， 并且是预防、 改善或治疗凝固因子介导的病症所需要的最低量。优选， 这种 数量低于对宿主产生毒性或使宿主显著地对出血更敏感的数量。
     作为一般的建议， 每个剂量的胃肠外给予的抑制剂的初始药学有效量在大约 0.01-100mg/kg 范围内， 即每天大约 0.1 至 20mg/kg 患者体重， 所使用化合物的典型初始范 围是 0.3 至 15mg/kg/ 天。
     可接受的稀释剂、 载体、 赋形剂和稳定剂在使用剂量和浓度下对于接受者是非毒 性的， 并且包括缓冲液， 例如磷酸盐、 柠檬酸盐及其它有机酸 ； 抗氧化剂， 包括抗环血酸和甲 硫氨酸 ； 防腐剂 ( 例如十八烷基二甲基苄基氯化铵 ； 氯化六烃季铵 ； 苯扎氯铵， 苄索氯铵 ； 酚， 丁基或苯甲基醇 ； 对羟基苯甲酸烷基酯例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟苯甲酸丙酯 ； 儿 茶酚 ； 间苯二酚 ； 环己醇 ； 3- 戊醇 ； 和间甲酚 ) ； 低分子量 ( 小于大约 10 个残基 ) 多肽 ； 蛋 白， 例如血清清蛋白， 凝胶， 或免疫球蛋白 ； 亲水性聚合物例如聚乙烯吡咯烷酮 ； 氨基酸例 如甘氨酸， 谷酰胺， 天冬酰胺酸， 组氨酸， 精氨酸， 或赖氨酸 ； 单糖、 二糖及其它碳水化合物， 包括葡糖， 甘露糖， 或糊精 ； 螯合剂例如 EDTA ； 糖例如蔗糖， 甘露糖醇， 海藻糖或山梨糖醇 ； 例如钠 ； 金属配合物 ( 例如， Zn- 蛋白配合物 ) ； 和 / 或非离子型表面活性 形成盐的反离子， TM TM 剂例如 TWEEN ， PLURONICS 或聚乙二醇 (PEG)。 活性药学组分还可以收集在微胶囊中， 微胶 囊是例如利用凝聚技术或利用界面聚合来制备的， 例如羟甲基纤维素或凝胶 - 微胶囊和聚 ( 甲基丙烯酸甲酯 ) 微胶囊， 分别在胶体的给药系统 ( 例如脂质体、 白蛋白微球体、 微乳状 液、 纳米颗粒和毫微囊剂 ) 或在乳状液中。 这种技术公开在 Remington′ s Pharmaceutical Sciences 第 16 版， Osol， A.Ed.(1980) 中。
     可以制备式 I 和 II 化合物的缓释制剂。缓释制剂的合适例子包括含有式 I 或 II 化合物的固体疏水性聚合物的半渗透性基质， 该基质是成形的物品形式， 例如膜或微胶囊。 缓释基质的例子包括聚酯、 水凝胶 ( 例如聚 (2- 羟乙基 - 甲基丙烯酸酯 ) 或聚 ( 乙烯醇 ))、 聚交酯 (U.S. 专利 US3,773,919)、 L- 谷氨酸和 γ- 乙基 -L- 谷氨酸酯的共聚物、 不可降解 TM 的乙烯 - 醋酸乙烯基酯、 可降解的乳酸 - 羟基乙酸共聚物例如 LUPRONDEPOT ( 由乳酸 - 羟 基乙酸共聚物和亮丙瑞林乙酸盐组成的可注射的微球体 ) 和聚 D-(-)-3- 羟丁酸。
     制剂包括适合于本文详述给药途径的那些制剂。制剂可以方便地以单位剂 型 存 在， 并 且 可 以 利 用 药 学 领 域 众 所 周 知 的 任 何 方 法 制 备。 通 常 在 Remington ′ s Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Co.， Easton， PA) 中得到技术和制剂。这种 方法包括使活性组分与构成一或多种助剂的载体结合的步骤。 通常， 制剂是如下制备的 ： 使 活性组分与液体载体或细分散的固体载体或两者均匀和密切地结合， 而后， 如果需要的话， 使产品成形。
     适合于口服给药的式 I 或 II 化合物的制剂可以以分散单位例如丸剂、 胶囊剂、 扁囊剂或片剂形式制备， 每个含有预定数量的式 I 或 II 的化合物。
     压制片可以通过在合适机械中压缩自由流动形式的活性组分例如粉末或颗粒来 制备， 任选与粘合剂、 润滑剂、 惰性稀释剂、 防腐剂、 表面活性或分散剂混合。模制片可以如 下制备 ： 在合适的机械中， 将用惰性液体稀释剂湿润的粉末活性组分的混合物进行模压。 可 以任选将片剂包衣或刻痕， 并且任选进行配制， 以便使活性组分从其中缓慢或控制释放。
     可以制备口服使用的片剂， 锭剂， 糖锭， 水或油性混悬剂， 可分散性粉剂或颗粒剂， 乳剂， 硬或软胶囊， 例如明胶胶囊， 糖浆剂或酏剂。口服使用的式 I 和 II 化合物的制剂可以 按照药物组合物制备领域的任何已知的方法制备， 并且为了提供适口的制剂， 这种组合物 可以包含一或多种试剂， 包括 ： 甜味剂， 调味剂， 着色剂和防腐剂。 包含活性组分与无毒的可 药用赋形剂 ( 其适合于制备片剂 ) 的混合物的片剂是可接受的。这些赋形剂可以是例如惰 性稀释剂， 例如碳酸钙或碳酸钠， 乳糖， 磷酸钙或磷酸钠 ； 造粒和崩解剂， 例如玉米淀粉， 或 海藻酸 ； 粘合剂， 例如淀粉， 凝胶或阿拉伯胶 ； 和润滑剂， 例如硬脂酸镁， 硬脂酸或滑石粉。 片剂可以无包衣或可以用已知的技术将它们包衣 ( 包括微囊包封 )， 以便延迟在胃肠道中 的崩解和吸收， 由此提供较长周期的持续作用。例如， 可以使用时间延迟材料， 例如单硬脂 酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯， 单独或与石蜡一起使用。
     对于治疗眼睛或其它外部组织， 例如口腔和皮肤， 优选， 以局部软膏剂或乳膏剂形 式施用制剂， 其中包含例如 0.075 至 20％ w/w 数量的活性组分。 当配制成软膏剂时， 活性组 分可以与石蜡或可与水互溶的软膏基质一起使用。或者， 可以将活性组分与水包油型膏用 底物一起配制成乳膏剂。
     如果需要的话， 膏用底物的水相可以包括多元醇， 即具有两个或多个羟基的醇， 例 如丙二醇， 丁烷 1， 3- 二醇， 甘露糖醇， 山梨糖醇， 甘油和聚乙二醇 ( 包括 PEG 400) 和其混合 物。 局部制剂可以优选包含可增加活性组分通过皮肤或其它被影响区的吸收或渗透的化合 物。这种表皮渗透增强剂的例子包括二甲亚砜和有关的类似物。
     本发明的乳剂的油相可以用已知的方式、 由已知的组分构成。尽管该相可以只包 含乳化剂， 但优选， 包含至少一种乳化剂与油脂或油或与油脂和油两者的混合物。优选， 包 含亲水性的乳化剂以及起稳定剂作用的亲脂性的乳化剂。还优选包含油和油脂两者。同 时， 在有或者没有稳定剂的条件下， 乳化剂构成所谓的乳化蜡， 蜡与油和油脂一起构成所谓 的乳化软膏基质， 其形成乳膏剂的油分散相。适合用于本发明制剂中的乳化剂和乳化稳定 剂包括 ： 60， 80， 十六醇十八醇混合物， 苯甲醇， 十四烷醇， 单硬脂酸甘油 基酯和月桂基磺酸钠。
     式 I 或 II 化合物的水悬剂包含活性物质与赋形剂 ( 适合于制备水悬剂 ) 的混合 物。这种赋形剂包括 ： 悬浮剂， 例如羧甲基纤维素钠， 交联羧甲纤维素， 聚烯吡酮， 甲基纤 维素， 羟丙基甲基纤维素， 海藻酸钠， 聚乙烯吡咯烷酮， 黄芪胶和阿拉伯树胶， 和分散或湿润 剂， 例如天然存在的磷脂 ( 例如， 卵磷脂 )， 氧化烯与脂肪酸的缩合产物 ( 例如， 聚氧乙烯硬 脂酸酯 )， 氧化乙烯与长链脂族醇的缩合产物 ( 例如， 十七烷环氧丙烷鲸蜡醇 )， 氧化乙烯与 衍生自脂肪酸和己糖醇酸酐的偏酯的缩合产物 ( 例如， 聚氧乙烯单油酸山梨醇酐酯 )。 水悬 浮液还可以包含一或多种防腐剂， 例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯， 一或多 种着色剂， 一或多种调味剂和一或多种甜味剂， 例如蔗糖或糖精。
     式 I 化合物的药物组合物可以是无菌注射制剂形式， 例如无菌可注射的水或油混悬剂。可以按照本领域已知的方法配制这种混悬剂， 使用上述那些合适的分散或湿润剂和 悬浮剂。 无菌注射制剂还可以是在无毒胃肠外可接受稀释剂或溶剂中的无菌注射溶液或悬 浮液， 例如在 1， 3- 丁二醇中的溶液， 或制备成冷冻干燥粉末形式。在可接受的载体和溶剂 之中， 可以使用的是水、 林格溶液和等渗氯化钠溶液。另外， 通常可以使用无菌的不挥发油 作为溶剂或悬浮介质。 对于这种目的， 可以使用任何柔和的不挥发油， 包括合成的单或二甘 油脂。另外， 脂肪酸例如油酸也可以用于制备注射制剂。
     可以与载体物质混合以产生单一剂型的活性组分数量可以变化， 这取决于所治疗 的宿主和具体给药模式。例如， 给人口服的缓释剂可以包含大约 1 至 1000mg 活性物质， 其 与合适和方便数量的载体物质混配， 可以从全部组合物的大约 5 至大约 95％之间变化 ( 重 量∶重量 )。可以制备药物组合物， 以便提供容易测量的给药数量。例如， 静脉内输注的水 溶液剂每毫升溶液可以包含大约 3 至 500μg 的活性组分， 以便实现以大约 30mL/ 小时的速 度注入合适的体积。
     适合于肠胃外给药的制剂包括 ： 水和非水无菌注射溶液， 其可以包含抗氧化剂、 缓 冲剂、 抑菌剂和能够使制剂与目标接受者的血液等渗的溶质 ； 和水和非水的无菌混悬剂， 其 可以包含悬浮剂和增稠剂。
     适合于局部给予眼睛的制剂还包括滴眼剂， 其中活性组分溶解或悬浮在适合于活 性组分的载体中， 尤其是水溶剂。 优选， 活性组分以大约 0.5 至 20％ w/w 的浓度存在于这种 制剂中， 例如大约 0.5 至 10％ w/w， 例如大约 1.5％ w/w
     适合于局部给予口腔的制剂包括 ： 糖锭， 其包含活性组分和调味基料 ( 通常是蔗 糖和阿拉伯胶或黄芪胶 ) ； 软锭剂， 其包含活性组分和惰性基料 ( 例如明胶和丙三醇， 或蔗 糖和阿拉伯胶 ) ； 和漱口药， 其包含活性组分和合适的液体载体。
     适合于直肠给予的制剂可以以栓剂形式存在， 其含有合适基料， 包括例如可可脂 或水杨酸酯。
     适于肺内或经鼻给药的制剂具有例如 0.1 至 500 微米范围内的粒径 ( 包括介于 0.1 和 500 微米范围中间的粒径， 增量微米为例如 0.5、 1、 30 微米、 35 微米， 等等 )， 通过使其 快速吸入鼻腔来给予， 或通过吸入口腔来给予， 以便达到肺泡囊中。 合适制剂包括活性组分 的含水或油性溶液。适于气雾剂或干粉给药的制剂可以按照常规方法制备， 并且可以与其 它治疗剂例如迄今用于治疗或预防如下所述病症的化合物一起递送。
     适于阴道给药的制剂可以以阴道栓、 塞、 乳膏、 凝胶剂、 软膏、 泡沫胶或喷雾剂的形 式提供， 除了含有活性组分之外， 还含有本领域已知的合适载体。
     制剂还可以包装在单位剂量或多剂量容器中， 例如密封的安瓿和管瓶， 并且可以 保存在冷冻干燥 ( 冻干 ) 条件下， 在临近使用之前， 只需要加入注射用的无菌的液体载体， 例如水。临时的注射溶液和悬浮液是用先前描述种类的无菌粉末、 颗粒和片剂制备的。优 选的单位剂量制剂是含有活性组分的本文上面列举的日剂量或单位日亚剂量、 或其合适部 分的那些制剂。
     本发明进一步提供了兽用组合物， 其包含至少一种如上所定义的活性组分以及兽 用载体。兽用载体是可用于给予该组合物目的的材料， 并且可以是固体、 液体或气态物质， 其是惰性的或在兽医领域是可接受的， 并且与活性组分不矛盾。这些兽用组合物可以胃肠 外、 口服给予， 或通过任何其它目标途径给予。组合治疗
     可以单独或与用于治疗本文所描述的疾病或病症， 例如高增殖病症 ( 例如， 癌症 ) 的其它治疗剂组合使用式 I 和 II 的化合物。在某些实施方案中， 将式 I 或 II 的化合物合 并在药物组合制剂中或作为组合治疗的给药方案中， 与具有抗高增殖特性或可用于治疗高 增殖病症 ( 例如， 癌症 ) 的第二种化合物组合。优选， 药学组合制剂或给药方案的第二种化 合物对式 I 化合物具有互补的活性， 以使它们不会相互不利地影响。这种化合物可合适地 存在于组合中， 其数量应可有效用于预定目标。 在一个实施方案中， 本发明的组合物包含式 I 或 II 的化合物与本文所描述的化学治疗剂的组合。
     可以以同时或连续的方案来给予组合治疗。当顺序给予时， 可以以两个或多个给 药形式来给予该组合。组合给药包括共同给药 ( 使用独立制剂或单一药物制剂 ) 和任何顺 序的连续给药， 其中优选存在时间段， 在该时间段中， 两个 ( 或所有的 ) 活性剂同时产生其 生物活性。
     上述任何共同给予药剂的合适剂量是目前使用的剂量， 并且可以降低， 这是由于 新确定药剂及其它化学治疗剂或治疗的联合作用 ( 协同作用 )。
     组合治疗可以提供 “协同作用” ， 并且证明是 “协同的” ， 即， 同时使用活性组分时获 得的效果大于由分别使用化合物所产生效果的和。当活性组分通过下列形式递送时， 可以 获得协同效应 ： (1) 在组合的单元剂量制剂中共同配制和同时给予或递送 ； (2) 以独立制剂 形式交替或平行递送 ； 或 (3) 通过其它方案。 当在交替性治疗中递送时， 当化合物是顺序给 予或递送时， 例如， 通过分别的注射器中的不同注射液， 分别的丸剂或胶囊剂， 或分别输液， 可以获得协同效应。通常， 在交替治疗期间， 顺序地给予各个活性组分的有效剂量， 即连续 给予， 而在组合治疗中， 一起给予两种或多种活性组分的有效剂量。
     在抗癌症治疗的具体实施方案中， 式 I 的化合物或其立体异构体、 几何异构体、 互 变异构体、 溶剂化物、 代谢物或可药用盐或前药可以同其它化学治疗剂、 激素或抗体药剂 ( 例如， 本文所描述的那些 ) 相结合， 以及同手术治疗和放射治疗相结合。 由此， 按照本发明 的组合治疗包括 ： 给予至少一种式 I 的化合物或其立体异构体、 几何异构体、 互变异构体、 溶剂化物、 代谢物或可药用盐或前体药物， 并使用至少一种其它癌症治疗方法。 可以选择式 I 化合物和其它药学活性化学治疗剂的数量与给药的相对时机， 以便实现目标组合治疗效 果。
     式 I 和 II 化合物的代谢物
     还属于本发明范围的是本文所描述的式 I 和 II 化合物的体内代谢产物。这种产 物可以通过例如所给予化合物的氧化、 还原、 水解、 酰胺化、 脱酰胺、 酯化、 脱酯、 酶催裂解等 等来产生。相应地， 本发明包括式 I 和 II 化合物的代谢物， 包括通过一定方法产生的化合 物， 该方法包括将本发明的化合物与哺乳动物接触足以产生其代谢产物的一段时间。
     典型地如下鉴定代谢产物 ： 制备本发明化合物的放射性标记的 ( 例如 14C 或 3H) 同位素， 胃肠外给予动物例如大鼠、 小鼠、 豚鼠、 猴子或人可检测的剂量 ( 例如， 大于大约 0.5mg/kg)， 经过足够的发生代谢的时间 ( 典型地是大约 30 秒钟至 30 小时 )， 并将它的转化 产物从尿、 血液或其它生物样品中分离。由于这些产物是标记的， 所以容易分离 ( 利用能够 结合代谢物中残存表位的抗体来分离其它产物 )。代谢物结构是用常规方式例如 MS、 LC/MS 或 NMR 分析来测定的。通常， 代谢物的分析是用和本领域技术人员熟知的常规药物代谢研究一样的方法来进行的。只要没有另外在体内发现代谢物， 这些代谢物就可用于针对本发 明化合物的治疗剂量的诊断试验。
     制品
     在本发明的另一个实施方案中， 提供了含有可用于治疗上述疾病和病症的物质的 制品或 “试剂盒” 。试剂盒包含容器， 容器包含式 I 或 II 的化合物。试剂盒可以在容器上或 与容器相关的地方进一步包括标签或包装说明书。术语 “包装说明书” 指的是通常包括在 治疗产品的商业包装中的说明， 其包括有关下列的介绍 ： 涉及使用这种治疗产品的适应症、 用法、 剂量、 给药、 禁忌症和 / 或警告。合适容器包括例如瓶、 管瓶、 注射器、 泡罩包装， 等等。 容器可以由各种材料例如玻璃或塑料形成。 容器可以容纳有效治疗病症的式 I 或 II 化合物 或其制剂， 并且可以具有无菌的入口 ( 例如， 容器可以是静脉内溶液袋或具有塞子的管瓶， 该塞子可以用皮下注射针刺穿 )。组合物中的至少一种活性剂是式 I 或 II 的化合物。标签 或包装说明书注明组合物用于治疗所选择的病症， 例如癌症。 另外， 标签或包装说明书可以 注明所治疗的患者是具有如下病症的， 例如高增殖病症， 神经变性， 心脏肥大， 疼痛， 偏头痛 或神经外伤性疾病或状况。在一个实施方案中， 标签或包装说明书注明包含式 I 或 II 化合 物的组合物可用于治疗由异常细胞生长引起的病症。 标签或包装说明书还可以注明组合物 可用于治疗其它病症。替代地， 或者附加地， 制品可以进一步包含第二个容器， 其包含可药 用缓冲液， 例如抑菌注射用水 (BWFI)、 磷酸盐缓冲盐水、 林格溶液和葡萄糖溶液。其可以进 一步包含其它合乎需要的材料 ( 从商品和使用者观点来说 )， 包含其它缓冲液、 稀释剂、 过 滤器、 针和注射器。
     试剂盒可以进一步包含给予式 I 或 II 化合物和第二种药学制剂 ( 如果存在的话 ) 的指示。例如， 如果试剂盒包含第一个组合物 ( 包含式 I 或 II 化合物 ) 和第二种药学制 剂， 试剂盒可以进一步包含同时、 顺序或单独给予需要的患者第一和第二种药物组合物的 指示。
     在另一个实施方案中， 试剂盒适合于递送固体口服形式的式 I 或 II 化合物， 例如 片剂或胶囊剂。优选， 这种试剂盒包含许多单位剂量。这种试剂盒可以包含卡片， 其上面表 明了与它们想要的用途有关的剂量。这种试剂盒的例子是 “泡罩包装” 。起泡填充物在包装 工业中为大家所熟知， 并且广泛地用于包装药学单位剂型。 如果需要的话， 可以提供记忆辅 助工具， 例如， 以数目、 字母或其它标志形式， 或用日程表， 在可以给予剂量的治疗日程中标 明日期。
     按照一个实施方案， 试剂盒可以包含 (a) 第一个容器， 在其中含有式 I 或 II 的化 合物 ； 和任选 (b) 第二个容器， 在其中含有第二种药学制剂， 其中第二种药学制剂包括具有 抗高增殖活性的第二种化合物。 替代地或者附加地， 试剂盒可以进一步包含第三个容器， 其 包含药学可接受的缓冲液例如抑菌注射用水 (BWFI)、 磷酸盐缓冲盐水、 林格溶液和葡萄糖 溶液。 其可以进一步包含其它合乎需要的材料 ( 从商品和使用者观点来说 )， 包含其它缓冲 液、 稀释剂、 过滤器、 针和注射器。
     在某些其它实施方案中， 其中试剂盒包含式 I 和第二种治疗剂的组合， 试剂盒可 以包含用于容纳单独组合物的容器， 例如分开的瓶或分开的薄箔包装， 然而， 单独的组合物 还可以包含在单个未分开的容器之内。典型地， 试剂盒包含给予单独组分的指示说明。当 优选以不同剂型 ( 例如口服和肠胃外 ) 给予分开的组分时， 是以不同的剂量间隔给予的， 或当处方医师想要确定联用药的单一组分的剂量时， 试剂盒形式是特别有利的。
     常规制备方法
     一般方法 A
     在 DMF 中， 可以用 N- 溴代琥珀酰亚胺 (NBS) 将苯并氧杂中间体， 4， 5- 二氢苯并[b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酸酯 (A-1) 选择性的溴化， 得到 9- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b]-2 酯 A-2。一般方法 B
     将苯并氧杂羧酸中间体 B-1 转变为酰基氯 B-2， 并使其与伯或仲胺 ( 三乙胺、 -2- 甲酰胺 B-3。DMAP) 在溶剂例如二氯甲烷中反应。与伯胺反应之后可以进行 N- 烷基化， 例如用甲基碘和 氢化钠， 产生 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     例如， 向羧酸 (0.4mmol) 的无水二氯甲烷悬浮液中加入草酰氯 (0.7mmol) 和一滴 二甲基甲酰胺。30 分钟之后， 真空浓缩。将残余物溶于乙腈中， 并加入碳酸钾 (0.9mmol) 和 胺， 例如苯胺 (0.48mmol)。 在室温下搅拌反应混合物过夜， 而后用水和乙酸乙酯稀释。 干燥 (MgSO4) 有机相， 真空浓缩。 或者， 苯并氧杂 羧酸中间体 B-1 的其它活性酯可以被形成为酸酐、 酰基咪唑化 物、 酰基叠氮和 NHS 酯， 以便与胺反应。此外， 借助大量已知的肽系列偶合试剂和方法， 苯并 氧杂 羧酸中间体 B-1 可以与胺通过原位形成活性酯中间体进行偶合。
     例如， 向羧酸 (1eq) 的 DMF(6mL) 溶液中加入胺 (1.3eq)、 HATU(1.3eq) 和二异丙基 乙基胺 ( 对于每个胺的 HCl 盐， 1.3eq+1.3eq)， 并在室温下搅拌反应 16 小时。将混合物在 乙酸乙酯和水之间分配。用盐水 (3x) 洗涤有机层， 干燥 (MgSO4)， 在真空下减少体积， 并在 二氧化硅上纯化， 得到最后的酰胺。
     一般方法 C
     在高压下， 用一氧化碳将 9- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺中间体 C-1 羰基化， 使用钯催化剂， 例如 Pd(OAc)2， 和醇， 例如甲醇， 得到甲酰胺中间体 C-2。用氢氧化锂、 氢氧化钠或其它碱水溶液进行皂化， 得到 8- 甲酸中间体， 而后用偶合试 剂例如 HATU 或 DCC 进行伯或仲胺的偶合， 得到 9- 甲酰胺中间体 C-3。
     或者， 按照 Wannberg 等人 (2003)J.Org.Chem.68 ： 5750-5753 的方法， 通过氨基羰 基化， 可以直接由溴中间体 C-1 制备中间体 C-3。
     一般方法 D
     在甲苯或二烷中， 用伯或仲胺 (HNR10R11) 或酰胺 (H2NC( ＝ O)R10)、 钯复合物例如 -2- 甲酰胺中间体 D-1 胺化， 并加Pd2(dba)3、 催化剂例如氧杂蒽 (xantphos) 和 BINAP、 醇化物例如 NaOt-Bu 或碳酸盐例如碳 酸铯将 9- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 热， 得到胺化产物 D-2。
     一般方法 E
     用丁基锂和二甲基甲酰胺 (DMF) 将 8- 溴 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰 胺中间体 E-1 甲酰化， 得到 E-2， 将其用氢化物例如乙酰氧基硼氢化钠和伯或仲胺 (HNR10R11) 还原胺化。
     一般方法 A-bp
     在 DMF 中， 可以用 N- 溴代琥珀酰亚胺 (NBS) 选择性地将苯并吡喃中间体 A-1bp 溴 化， 得到 8- 溴 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酸酯 A-2bp。
     一般方法 B-bp
     将苯并吡喃羧酸中间体 B-1bp 转变为酰基氯 B-2bp， 并使其与伯或仲胺以及三乙 胺、 DMAP， 在溶剂例如二氯甲烷中反应。与伯胺反应之后， 可以进行 N- 烷基化， 例如用甲基 碘和氢化钠， 产生甲酰胺 B-3bp。
     一般方法 C-bp在高压下， 用一氧化碳将 8- 溴 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺中间体 C-1bp 羰基化， 使用钯催化剂， 例如 Pd(OAc)2， 和醇， 例如甲醇， 得到 8- 甲酸酯 4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺中间体 C-2bp。用氢氧化锂、 氢氧化钠或其它碱水溶液进行皂化， 得到 8- 甲酸中间体， 而后用偶合试剂例如 HATU 或 DCC 进行伯或仲胺的偶合， 得到 8- 甲酰 胺 4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺中间体 C-3bp。
     或者， 按照 Wannberg 等人 (2003)J.Org.Chem.68 ： 5750-5753 的方法， 通过氨基羰 基化， 可以直接由溴中间体 C-1bp 制备中间体 C-3bp。
     一般方法 D-bp
     在甲苯或二烷中， 用伯或仲胺 (HNR10R11) 或酰胺 (H2NC( ＝ O)R10)、 钯复合物例如 Pd2(dba)3、 催化剂例如氧杂蒽和 BINAP、 醇化物例如 NaOt-Bu 或碳酸盐例如碳酸铯将 8- 溴 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺中间体 D-1bp 胺化， 并加热， 得到胺化产物 D-2bp。
     一般方法 E-bp用丁基锂和二甲基甲酰胺 (DMF) 将 8- 溴 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲 酰胺中间体 E-1bp 甲酰化， 得到 E-2bp， 将其用氢化物例如乙酰氧基硼氢化钠和伯或仲胺 10 11 (HNR R ) 还原胺化， 得到 E-3bp。
     实施例 实施例所描述的化学反应可以容易地适合于制备本发明的许多其它 PI3K 抑制 剂， 并且认为制备本发明化合物的替代方法在本发明范围之内。 例如， 利用对本领域技术人 员显而易见的改进， 可以成功地进行未举例说明的按照本发明化合物的合成， 例如， 通过恰 当地保护干扰性基团， 通过使用本领域已知的其它合适试剂 ( 不是所描述的那些试剂 )， 和 / 或通过进行反应条件的常规改进。 或者， 本文公开的或本领域已知的其它反应可被认为可 应用于制备本发明的其它化合物。
     在如下所述实施例中， 除非另有陈述， 所有的温度以摄氏温度列出。试剂是从商 品供应商例如 Sigma Aldrich Chemical Company 购买的， 并且不用进一步纯化就可以使 用， 除非另有陈述。下面列出的反应一般在氮或氩气的正压下进行， 或用干燥管 ( 除非另有 说明 )， 在无水溶剂中， 反应烧瓶典型地配备橡胶隔片， 用于通过针筒引入底物和试剂。玻 璃器皿是烘干的和 / 或加热干燥的。柱色谱是在具有硅胶柱 Biotage 系统 ( 制造商 ： Dyax 1 柱 (Waters) 上进行的。 H NMR 谱是在 400MHz、 Corporation) 上或在二氧化硅 SEP 在氘化的 CDCl3、 d6-DMSO、 CH3OD 或 d6- 丙酮溶液中获得的 ( 以 ppm 报道 )， 使用氯仿作为参 考标准 (7.25ppm)。 当报道峰值多重性时， 使用下列缩写 ： s( 单峰 )， d( 双峰 )， t( 三重峰 )， m( 多重峰 )， br( 宽峰 )， dd( 双二重峰 )， dt( 双三重峰 )。偶合常数 ( 当给出时 ) 以赫兹 (Hz) 报道。
     实施例 1 ： 4-(3- 溴苯氧基 ) 丁酸乙酯 6
     在室温下， 将固体 3- 溴苯酚 (10.0g， 58mmol) 以份额方式加入到 K2CO3 的丙酮 (100mL) 搅拌悬浮液中。加入碘化钠 (NaI， 1.0g)， 而后加入乙基 -4- 溴丁酸酯 (9.2mL， 64mmol)。在 80 ℃加热反应混合物过夜， 冷却至室温， 用水稀释， 用乙酸乙酯提取， 得到 4-(3- 溴苯氧基 ) 丁酸乙酯 6。
     实施例 2 ： 4-(3- 溴苯氧基 ) 丁酸 7
     将实施例 5 的 4-(3- 溴苯氧基 ) 丁酸乙酯 6 接纳在 100mL THF 和 50mL 水中， 并用 氢氧化锂 LiOH( 水合物， 4.9g) 处理。将全部在 50℃加热 2 天。将混合物冷却至室温， 并用 2N HCl 酸化至 pH1。用乙酸乙酯提取水溶液。用盐水洗涤合并的有机物， 用硫酸钠干燥， 得 1 到粗品 4-(3- 溴苯氧基 ) 丁酸 7 粘性的固体。H NMR(DMSO-d6， 500MHz)7.24(m， 1H)， 7.13(m，
     1H)， 7.11(m， 1H)， 6.95(m， 1H)， 3.99(m， 2H)， 2.37(m， 2H)， 1.94(m， 2H)。
     实施例 3 ： 8- 溴 -3， 4- 二氢苯并 [b] 氧杂-5(2H)- 酮 8
     向多磷酸 (PPA， 大约 60g) 和硅藻土 ( 大约 40g) 的 100mL 甲苯搅拌悬浮液中一次 性加入粗品 4-(3- 溴苯氧基 ) 丁酸 7( 大约 58mmol)， 用 10mL 甲苯冲洗。将得到的悬浮液 在 110℃加热 5 小时。 通过硅藻土塞倾析甲苯， 并将剩下的浆液重复地用甲苯和乙酸乙酯洗 涤。浓缩洗脱液， 用快速柱色谱纯化 (4 ∶ 1 己烷∶ EtOAc)， 得到 8- 溴 -3， 4- 二氢苯并 [b]1 -5(2H)- 酮 (7g， 大约 50％产率 )8。 H NMR(DMSO-d6， 500MHz)7.55(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)，氧杂7.37(d， J ＝ 1.5Hz， 1H)， 7.35(dd， J ＝ 8.5， 1.5Hz， 1H)， 4.24(t， J ＝ 6.5Hz， 2H)， 2.79(t， J ＝ 7.0Hz， 2H)， 2.14(m， 2H)。
     实施例 4 ： (Z)-8- 溴 -5- 氯 -2， 3- 二氢苯并 [b] 氧杂-4- 甲醛 9
     在 0℃， 将三氯氧磷 POCl3(1.88mL， 20.8mmol) 逐滴加入到 DMF(5mL) 中。 30 分钟之后， 逐滴加入 8- 溴 -3， 4- 二氢苯并 [b] 氧杂-5(2H)- 酮 8(2.0g， 8..3mmol) 的 8mL DMF溶液。使反应混合物达到室温， 搅拌 2 小时， 然后慢慢地倾倒在快速搅拌的冰水中。用乙酸 乙酯提取水相， 并用盐水洗涤合并的有机物， 用硫酸钠干燥， 浓缩， 得到 9。
     实施例 5 ： 8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酸甲酯
     将 (Z)-8- 溴 -5- 氯 -2， 3- 二氢苯并 [b] 氧杂-4- 甲醛 9 溶于 10mL DMF 中， 并用碳酸钾 (2.20g， 16.6mmol) 和巯基乙酸甲酯 (0.83mL) 顺序处理。将全部在 50℃加热过夜， 冷却至室温， 用水稀释， 用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤合并的有机物， 用硫酸钠干燥， 浓缩。 用快速柱色谱纯化粗品残余物 (20-50％乙酸乙酯 / 己烷 )， 得到 2.20g(78％产率 ) 的 10， 1 500MHz)7.70(s， 1H)， 7.67(d， J ＝ 8.5Hz， 1H)， 7.31-7.28(m， 为无色固体。 H NMR(DMSO-d6， 2H)， 4.32(t， J ＝ 5.0Hz， 2H)， 3.84(s， 3H)， 3.21(t， J ＝ 5.0Hz， 2H)。
     实施例 6 ： 8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酸 11
     将 8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酸甲酯 10 用氢氧化锂水和四氢呋喃 (THF) 溶液处理， 得到 11。
     实施例 7 ： 2- 碘代 -3-(2- 噻吩 -3- 基 - 乙氧基 )- 吡啶 13
     向含有 2- 碘代 -3- 羟基吡啶 12(1.85g， 8.37mmol)、 2-(3- 噻吩基 ) 乙醇 (1.20mL， 10.9mmol) 和三苯基膦 (2.85g， 10.9mmol) 的四氢呋喃 (46.2mL， 5.70mmol) 溶液中逐滴加入 偶氮二羧酸二异丙基酯 (2.14mL， 10.9mmol)。在室温下将反应混合物搅拌 18 小时。浓缩反 应混合物， 用快速色谱纯化 (EtOAc/ 己烷 (0-100％ ))， 在 30％处洗脱出产物， 得到 13( 产率
     190102333779 A CN 102333793说明书14155/280 页90％ )。MS ： (ESI+)332.2
     实施例 8 ： 10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂向 2- 碘代 -3-(2- 噻吩 -3 基 - 乙氧基 )- 吡啶 13(1.15g， 4.05mmol) 的 N， N- 二 甲基甲酰胺 (60.9mL， 787mmol) 溶液中加入碳酸钾 (2.80g， 20.2mmol)、 三苯基膦 (212mg， 0.809mmol)、 氯化四乙铵 (4.05mmol) 和乙酸钯 (90.8mg， 0.405mmol)。在 90℃搅拌反应混 合物 8 小时。用 DCM 稀释反应混合物， 然后通过硅藻土过滤。浓缩滤液， 并用水洗涤。用快 速色谱纯化粗品 (EtOAc/ 己烷 (0-100％ ))， 在 30％处洗脱出产物， 得到 14( 产率 60％ )。 MS ： (ESI+)204.3
     实施例 9 ： 2- 溴 -(10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂)15
     将 10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂14(1.73g， 8.51mmol) 溶于二氯甲烷 (20mL， 400mmol) 和乙酸 (20mL， 400mmol) 中， 并冷却至 0℃。将 N- 溴代琥珀酰 亚胺 (1.67g， 9.36mmol) 分批地加入到混合物中。 将反应搅拌 18 小时。 旋转蒸发溶剂， 将残 余物在乙酸乙酯和饱和碳酸钠水溶液之间分配。用水、 盐水洗涤有机层， 用硫酸钠干燥。旋 转蒸发之后， 在 Isco 上色谱分离粗品 ( 己烷 -EtOAc 梯度， 0-100％ )， 用 20％ EtOAc 洗脱， 得到 15。MS ： (ESI+)283.2
     实施例 10 ： 10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酸 16
     在 -78 ℃， 向 2- 溴 -(10- 氮 杂 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂)15(0.700g， 2.48mmol) 的四氢呋喃 (25.0mL， 308mmol) 溶液中逐滴加入 2.50M 正丁基锂 的己烷 (1.19mL)( 溶液 )。将反应混合物在 -78 ℃搅拌 1 小时。将混合物加入到干冰的 THF(15ml) 浆液中， 然后搅拌 2 小时。用水淬灭反应混合物， 然后略微地碱化， 并用 EtOAc 提取 (2x)。将水层酸化至 pH2， 然后用 DCM 提取 (2x)。浓缩合并的有机层， 得到 16( 产率62％ )。MS ： (ESI+)248.3
     实施例 11 ： N2-(2- 氯苯基 )-N2， N8， N8- 三甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 101 -8- 甲酸甲酯 138 和二甲胺得到 101。MS ： (ESI+)441.1。按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     或者， 将 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 甲酸 (100mg， 0.24mmol) 的 2mL SOCl2 溶液在 80℃加热 2 小时。除掉溶剂之后， -8- 羰基氯。向 (CH3)2NH HCl 盐 (118mg， 1.412mmol) 和吡 -8- 羰基氯 (417mg， 0.966mmol) 的 20mL THF 混合物。氧杂与甲苯一起蒸发残余物， 得到粗品酰基氯 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 啶 (0.2mL) 的 5mL THF 溶液中慢慢地加入 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 在室温下搅拌混合物过夜， 真空浓缩， 溶于乙酸乙酯中， 用水和盐水洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 浓 1 缩， 得到 101(350mg， 产率 ： 82％ )。 H NMR(CDCl3， 400MHz) ： δ6.67-7.59(m， 8H)， 4.16(t， J ＝ 4.8Hz， 2H)， 3.33(s， 1H)， 2.95-2.97(m， 8H)。MS(ESI) ： 441.1
     实施例 12 ： 7- 乙酰氨基 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 102按照实施例 61 和一般方法 C， 7- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酸和乙酰胺反应， 得到 102。MS ： (ESI+)427.1
     实施例 13 ： N2-(2- 氯苯基 )-N8-(3-( 二乙基氨基 ) 丙基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯 并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 103将 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺 150(100mg， 0.22mmol)、 Mo(CO)6(58mg)、 Hermann ′ s 环钯 ( 反式 - 二 (mu- 乙 酸基 ) 二 [O-( 二 -O- 甲苯基膦基 ) 苄基 ] 二钯 (II)， 31mg) 和 N， N- 二乙基 -1， 3- 丙二胺 (58mg) 的 THF(2.0mL) 悬浮液在 10mL 微波管瓶中用 DBU(0.02mL， 0.5 当量 ) 处理， 并立即 密封。将全部在微波中、 在 150℃加热 25 分钟， 冷却至室温， 用乙酸乙酯稀释。通过硅藻土 过滤粗品悬浮液， 浓缩洗脱液， 得到残余物， 将其用快速柱色谱纯化 (1-10％甲醇 / 二氯甲 烷 )， 得到 103 无色固体。MS ： (ESI+) ＝ 526.2。 1
     H NMR(DMSO-d6) δ 8.53(m ， 1H) ， 7.66(m ， 2H) ， 7.55-7.44(m ， 4H) ， 6.55(m ， 1H) ，4.20(m， 2H)， ca 3.2(m， 2H， 被水屏蔽 )， 3.24(s， 3H， 被水屏蔽 )， 2.97(m， 2H)， 2.67-2.56(m， 6H)， 1.69(m， 2H)， 0.99(m， 6H)
     实施例 14 ： 7- 乙酰氨基 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 104 -2- 甲酸与 CuCN -2- 基 ) 吡按照实施例 53， 7- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂反应， 得到 104。MS ： (ESI+)395.1
     实 施 例 15 ： 5-(4， 5- 二 氢 吡 啶 并 [4， 3-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂啶 -2- 胺 105
     按照实施例 52， 2- 溴 -4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂1与 2- 氨DMSO)δ8.79(s， 1H)， 8.27(d， J＝ 基吡啶 -5- 硼酸频哪醇酯反应， 得到 105。H NMR(400MHz， 2.2， 1H)， 8.22(d， J ＝ 5.5， 1H)， 7.67(dd， J ＝ 2.6， 8.6， 1H)， 7.22(s， 1H)， 6.99(d， J ＝ 5.4， 1H)， 6.51(d， J ＝ 8.6， 1H)， 6.25(s， 2H)， 4.37(t， J ＝ 4.8， 2H)， 3.20(t， J ＝ 4.8， 2H)。MS ： (ESI+)296.1
     实施例 16 ： N-(2- 氯苯基 )-N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 杂 -2- 甲酰胺 106
     向 N-(2-( 叔丁基二甲基硅基氧基 ) 乙基 )-2- 氯苯胺 (0.145g， 0.508mmol) 和三 乙胺 (0.113mL， 0.812mmol) 的四氢呋喃 (1mL， 10mmol) 溶液中加入 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻
     吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 羰基氯 (0.107g， 0.406mmol) 的四氢呋喃 (4mL) 溶液。搅拌反应过夜， 真空浓缩。将水溶液后处理， 得到黄色固体， 将其用 MPLC 在硅胶上纯化， 得到 150mg N-(2-( 叔丁基二甲基硅基氧基 ) 乙基 )-N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺。 向 N-(2-( 叔丁基二甲基硅基氧基 ) 乙基 )-N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺 (0.030g， 0.058mmol) 的乙酸 (0.0033mL， 0.058mmol) 和四氢呋喃 (0.3mL， 4mmol) 溶液中加入 1M 四丁基氟化铵水合物的四氢呋喃溶液 (0.058mL)。 在 室温下搅拌反应， 用 w/TLC 和 LC/MS 监控。搅拌过夜之后， 完成脱保护。真空浓缩反应混合 物， 接纳在乙酸乙酯中， 用水 / 盐水洗涤， 浓缩， 得到玻璃状残余物， 将其用 MPLC 纯化， 用乙 酸乙酯 / 己烷洗脱 ( 梯度 0-50％ B)， 得到 22.4mg 的 106( 产率 40％ )。MS ： (ESI+)401
     实施例 17 ： N-(2- 氯 -4- 氟苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺 107
     向 2- 氯 -4- 氟苯胺 (0.110g， 0.755mmol) 和三乙胺 (0.105mL， 0.755mmol) 的四氢 呋喃 (1.5mL， 18mmol) 溶液中以份额方式加入固体 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 羰基氯 (0.100g， 0.378mmol)。在室温下搅拌反应混合物， 监控目标产物的形成。搅拌反应过夜。将包含烷基化产物的混合物真空浓缩， 得到固体残余物， 然后接纳在 N， N- 二 甲基甲酰胺 (1.5mL， 19mmol) 中， 并用氢化钠 (0.0181g， 0.755mmol) 处理， 而后加入甲基碘 (0.0470mL， 0.755mmol)。在室温下搅拌反应大约 1 小时， 同时完全转化为目标 N- 甲基衍生 物。对水溶液后处理之后， 将粗品接纳在 DMF 中 (100mg/1mL)， 用制备 RP-HPLC 纯化， 得到 107。产率＝理论产率的 22％。MS ： (ESI+)375
     实施例 18 ： N-(2， 4- 二氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺 108
     向 N- 甲基 -2， 4- 二氯苯胺 (0.133g， 0.755mmol) 和三乙胺 (0.105mL， 0.755mmol) 的四氢呋喃 (1.5mL， 18mmol) 溶液中以份额方式加入 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 杂 -2- 羰基氯 (0.100g， 0.378mmol) 固体。 在室温下搅拌反应， 监控目标产物的形成。 搅拌反应过夜。对水溶液处理之后， 将粗品接纳在 DMF 中 (100mg/1mL 的浓度 )， 用制备 RP-HPLC 纯化， 得到 108。产率＝理论产率的 30％。MS ： (ESI+)405.5
     实施例 19 ： 5-(6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 )2- 氨基异烟酸甲酯 109
     在 -75 ℃， 将正丁基锂的己烷溶液 (0.7833mL， 1.6M) 逐滴加入到 9- 溴 -6， 7- 二 (0.282g， 1.00mmol) 的四氢呋喃溶液 (7.46mL，氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂91.9mmol) 中。将暗褐色混合物在 -78℃搅拌 20 分钟。逐滴加入 2- 异丙氧基 -4， 4， 5， 5- 四 甲基 -1， 3， 2- 二氧杂硼杂环戊烷 (0.31mL， 1.5mmol) 的 2mL 四氢呋喃 ( 溶液 )， 并将混合物 在 -78℃保持 20 分钟， 逐渐地加温至 -30℃。加入饱和 NH4Cl 水溶液 (10mL)， 并将混合物倒 入 25ml 水中， 用乙酸乙酯提取， 用水、 盐水洗涤有机层， 用 MgSO4 干燥。旋转蒸发溶液， 在硅 胶柱上纯化残余物， 用 18％乙酸乙酯 / 己烷洗脱， 得到 9-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧 杂硼杂环戊烷 )-6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 ( 产率 0.224g， 68％ )。 MS ： (ESI+)330.1
     按照实施例 52， 9-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧杂硼杂环戊烷 )-6， 7- 二氢吡 啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 和 2- 氨基 -5- 溴 - 异烟酸甲基酯反应， 得到 109。1H NMR(400MHz， DMSO)δ8.22(dd， J ＝ 1.4， 4.5， 1H)， 8.14(s， 1H)， 7.40(dd， J ＝ 1.4， 8.1， 1H)， 7.19(dd， J ＝ 4.5， 8.1， 1H)， 6.87(s， 1H)， 6.64(s， 1H)， 6.52(s， 2H)， 4.33(t， J ＝ 4.8， 2H)， 3.76(s， 3H)， 3.20(t， J ＝ 4.8， 2H)。MS ： (ESI+)354.1
     实施例 20 ： 2-(4- 异丙基 -5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 甲酰胺 110 -8- 腈用碳酸钾处理， 然后用过氧化氢处理， 得到在 DMSO 中， 将 2-(4- 异 丙 基 -5- 氧 代 -4， 5- 二 氢 -1H-1， 2， 4- 三 唑 -3- 基 )-4，5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂110。MS ： (ESI+)371.1
     实施例 21 ： 8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲 酸 (2- 氯 -4- 甲基氨基甲酰基 - 苯基 )- 甲基 - 酰胺 111
     在微波中， 在 120℃， 使 3- 氯 -4- 氟代苄腈 (1.0g)、 甲胺 (16mL 2M 甲醇溶液 ) 和二 异丙基乙胺反应 15 分钟。然后在乙酸乙酯 (50mL) 和水 (50mL) 之间分配混合物。用盐水
     (30mL) 洗涤有机层， 干燥 (MgSO4)， 真空浓缩， 得到 3- 氯 -4- 甲基氨基 - 苄腈。 将 3- 氯 -4- 甲 基氨基 - 苄腈 (900mg) 在 2M 氢氧化钠水溶液 (30mL) 中的悬浮液回流加热 3 小时。冷却至 室温后， 用 2M 盐酸水溶液酸化溶液， 并过滤收集得到的固体， 空气干燥， 得到 3- 氯 -4- 甲基 氨基 - 苯甲酸。向 3- 氯 -4- 甲基氨基 - 苯甲酸 (860mg) 的 DMF(20mL) 溶液中加入羰基二咪 唑 (630mg)， 并在室温下搅拌反应 1 小时。 然后， 加入盐酸甲胺 (262mg) 和三乙胺 (1.62mL)， 并在室温下搅拌反应 16 小时。在乙酸乙酯 (50mL) 和水 (50mL) 之间分配反应物。用盐 水 (3x40mL) 洗涤有机层， 干燥 (MgSO4)， 真空浓缩， 并在二氧化硅上纯化， 得到 3- 氯 -N- 甲 基 -4- 甲基氨基 - 苯甲酰胺。
     按照制备 226 的实施例 136， 由 3- 溴苯酚制备 8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸乙酯， 并使用一般方法 B 水解为相应的酸。 向 8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (373mg) 的无水二氯甲 烷 (20ml) 悬浮液中加入草酰氯 (170μl) 和 DMF(1 滴 )。2 小时之后， 真空除去溶剂， 并向 残余物中加入乙腈 (20mL)、 3- 氯 -N- 甲基 -4- 甲基氨基 - 苯甲酰胺 (250mg) 和碳酸氢钠 (105mg)。3 小时后， 将水加入到反应混合物中， 过滤收集得到的沉淀。用乙酸乙酯 / 甲醇 / 己烷将固体重结晶， 得到 111(307mg)。 NMR ： (CDCl3) ： 3.04(3H， d)， 3.31(2H， t)， 3.48(3H， s)， 4.28-4.31(2H， m)， 6.05(1H， sbr.)， 6.91-6.93(2H， m)， 7.15(1H， s)， 7.45(1H， d)， 7.72(1H， dd)， 7.91(1H， s)。MS ： (ESI+)MH+508
     实施例 22 ： 1-(2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻
     吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 基 )-3- 甲基脲 112 -8- 胺与异氰酸甲酯反应， 得到 112。MS ： (ESI+)452.1按照实施例 76 的方法， 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯 实施例 23 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 -8- 基氨基甲酸甲酯 113并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     并 [2， 3-d] 氧杂
     向 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢 - 苯并 [b] 噻吩并 [2，3-d] 氧杂-8- 胺 HCl 盐 (0.2g， 0.464mmol) 在 10mL 干燥 DCM 中的溶液中加入 TEA(0.32mL，2.3mmol)。将混合物在 0℃下搅拌 20 分钟并加入 0.2mL 氯甲酸甲酯。将反应混合物搅拌 10 分钟并将溶液用水淬灭， 蒸发得到粗品， 将其用制备 HPLC 纯化， 得到 113(81mg， 38％ )。 1 HNMR(DMSO-d 6， 400MHz) ： δ 9.78(s ， 1H) ， 8.81(s ， 1H) ， 7.79-7.12(m ， 7H) ， 6.53(s ， 1H) ， 4.15(t， J ＝ 5.2Hz， 2H)， 3.63(s， 3H)， 2.93(t， J ＝ 5.2Hz， 2H)。MS ： (ESI+)453.1
     实施例 24 ： 7- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 杂 -2- 甲酰胺 114 按照实施例 70 和一般方法 B， 由 7- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 实施例 25 ： N-(2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 -8- 基 ) 乙酰胺 115 -2- 甲酸和 2- 氯 -N- 甲基苯胺制备 114。MS ： (ESI+)450.0
     吩并 [2， 3-d] 氧杂
     向 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢 - 苯并 [b] 噻吩并 [2， -8- 胺 HCl 盐 (0.2g， 0.464mmol) 在 10mL 干燥 DCM 中的溶液中加入 TEA(0.32mL，3-d] 氧杂2.3mmol)。将混合物在 0℃下搅拌 20 分钟并加入 0.2mL 乙酸酐。搅拌 10 分钟后， 将溶液 1 用水淬灭， 蒸发得到粗品， 将其用制备 TLC 纯化， 得到 115(80mg， 39％ )。 H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： δ10.02(s， 1H)， 8.81(s， 1H)， 7.79-7.15(m， 7H)， 6.54(s， 1H)， 4.16(t， J ＝ 4.8Hz， 2H)， 2.95(t， J ＝ 4.8Hz， 2H)， 1.99(s， 3H)。MS ： (ESI+)437.1
     实施例 26 ： N-(4-(3- 氨基 -5- 甲基 -1H- 吡唑 -1- 羰基 )-2- 氯苯基 )-N-(2- 羟乙 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 116按照实施例 91， 使 3- 氯 -4-(N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和 3- 氨基 -5- 甲基吡唑反应， 得到 116。得到理论产率的氧杂25％。MS ： (ESI+)523.1
     实施例 27 ： N-(4-(2- 乙酰胺基乙基氨基甲酰基 )-2- 氯苯基 )-N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 117按照实施例 91， 使 3- 氯 -4-(N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸与 N-(2- 氨乙基 ) 乙酰胺反应得到 118。得到理论产率的氧杂35％。MS ： (ESI+)528.2
     实 施 例 28 ： N-(2- 氯 -4-((2-( 二 甲 基 氨 基 ) 乙 基 )( 甲 基 ) 氨 基 甲 酰 基 ) 苯 基 )-N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 118按照实施例 91， 使 3- 氯 -4-(N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸与 N1， N1， N2- 三甲基乙烷 -1， 2- 二胺起反应， 得到 118( 得 实施例 29 ： N2-(2- 氯苯基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 向 N-(2- 氯苯基 )-9- 氰基 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂197氧杂到理论产率的 35％ )。MS ： (ESI+)528.2
     -2， 9- 二甲酰胺 119
     -2- 甲酰胺 (120)(120mg) 和 K2CO3(49mg) 在干燥 DMSO(2mL) 中的混合物中加入 33％过氧化102333779 A CN 102333793说明书162/280 页氢 (40μL)。将得到的物质在室温下搅拌过夜。向得到的溶液中加入冰， 收集形成的固体， 用水洗涤， 干燥， 得到 119。NMR ： (CDCl3) ： 3.04(t， 2H， CH2， J ＝ 5.02Hz)， 3.42(s， 3H， CH3)， 4.28(t， 2H， CH2， J ＝ 5.06Hz)， 5.75(sbr， 2H， NH2)， 6.71(s， H， ArH)， 7.03(d， H， ArH， J＝ 8.44Hz)， 7.39-7.45(m， 3H， 3x ArH)， 7.55-7.60(m， 2H， 2xArH)， 7.99(d， H， ArH， J ＝ 1.81Hz)。 MS ： (ESI+)MH+413.14
     实施例 30 ： N-(2- 氯苯基 )-9- 氰基 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 120向 3- 溴 -4- 羟 基 苄 腈 (15.0g) 的 THF(100mL) 溶 液 中 加 入 2-(3- 噻 吩 基 ) 乙 醇 (7.94mL) 和 三 苯 基 膦 (19.84g)。 将 反 应 冷 却 至 0 ℃， 逐滴加入偶氮二羧酸二乙酯 (11.92mL)。将反应在室温下搅拌 16 小时。然后真空浓缩溶剂， 将残余物再溶解在二乙醚 (100mL) 中。将混合物在 0℃下搅拌 10 分钟， 而后过滤。将滤液用碳酸钠水溶液 (80mL)、 1M 真空浓缩， 在二氧化硅上纯化， 得到 盐酸水溶液 (80mL) 和盐水 (80mL) 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 3- 溴 -4-(2- 噻吩 -3- 基 - 乙氧基 )- 苄腈。
     向 3- 溴 -4-(2- 噻吩 -3- 基 - 乙氧基 )- 苄腈 (4.50g) 的 DMF(20mL) 溶液中加入乙 酸钯 (327mg)， 三苯基膦 (766mg) 和碳酸钾 (4.03g)， 将反应在 90℃加热 16 小时。冷却至室 温后， 将混合物用乙酸乙酯 (60mL) 稀释， 并过滤。 将滤液用盐水 (80mL) 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 真空浓缩， 并用二氧化硅纯化， 得到 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 腈。
     向 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 腈 (4.58g) 的二氯甲烷 (30mL) 和乙酸 (30mL) 的溶液中加入 N- 溴代琥珀酰亚胺 (3.95g)， 将反应在室温下搅拌 16 小时。 然后加入水 (100mL)， 过滤收集固体， 空气干燥， 得到 2- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 腈。
     在 -78℃下向 2- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 腈 (3.0g) 的 THF(80mL) 溶液中加入 N- 丁基锂 (4.31mL)， 使反应在 1 小时内升温至 -10 ℃。然后将反应再冷却至 -78℃， 向溶液中鼓泡通入二氧化碳 15 分钟。然后将反应用 4 小时升温至室 温。将反应用水 (10mL) 淬灭， 并将产物提取到碳酸钠水溶液 (100mL) 中。将水层用乙酸 乙酯 (100mL) 洗涤， 而后用 2M 盐酸水溶液酸化至 pH 值 2-3。然后将产物提取到乙酸乙酯 (2X100mL) 中， 将有机层干燥 (MgSO4)， 真空浓缩， 得到 9- 氰基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸。
     向 9- 氰基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (300mg) 的 二氯甲烷 (10mL) 溶液加入 DMF(1 滴 ) 和草酰氯 (0.165mL)， 将反应在室温下搅拌 30 分钟。 然后真空浓缩溶剂， 将残余物再溶解在乙腈 (10mL) 中。向此溶液中加入 2- 氯 -N- 甲基苯 胺 (0.165mL) 和碳酸钾 (308mg)， 将反应在室温下搅拌 16 小时。将混合物在水 (40mL) 和乙 酸乙酯 (30mL) 之间分配。将有机层干燥 (Na2SO4)， 真空浓缩， 并用二氧化硅纯化， 得到 120。 NMR ： (CDCl3) ： 3.08(t， 2H， CH2， J ＝ 5.00Hz)， 3.41(s， 3H， CH3)， 4.29(t， 2H， CH2， J ＝ 5.02Hz)， 6.92(s， H， ArH)， 7.03(d， H， ArH， J ＝ 8.43Hz)， 7.38-7.47(m， 4H， 4xArH)， 7.57(m， H， ArH)， 7.72(d， H， ArH， J ＝ 1.65Hz)。MS ： (ESI+)MH+395
     实 施 例 31 ： 4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -2- 甲 酸 (2- 氯 -4- 甲基氨基甲酰基 - 苯基 )- 甲基 - 酰胺 121
     按照制备 226 的实施例 136 制备 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸乙酯， 并使用一般方法 B 水解得到相应的酸。向 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (130mg) 在干燥二氯甲烷 (10mL) 中的悬浮液中加 入草酰氯 (78μL) 和 DMF(1 滴 )。1 小时后， 真空浓缩溶剂， 将残余物溶于乙腈 (10ml) 中， 并向其中加入得自实施例 21 的 3- 氯 -N- 甲基 -4- 甲基氨基 - 苯甲酰胺 (116mg) 和碳酸 氢钠 (49mg)。将反应混合物加热至 60℃。3 小时后， 将反应混合物冷却， 用二氯甲烷稀释， 用水洗涤， 干燥 (MgSO4) 并真空除去溶剂。用乙酸乙酯 / 甲醇 / 己烷将残余物重结晶， 得 到 121(132mg)。NMR ： (CDCl3) ： 3.04(3H， d)， 3.31(2H， t)， 3.48(3H， s)， 4.28-4.31(2H， m)， 6.05(1H， sbr.)， 6.81-6.83(1H， m)， 6.96(1H， d)， 7.05-7.15(2H， m)， 7.48(1H， d)， 7.78(1H， dd)， 7.93(1H， s)。MS ： (ESI+)MH+428
     实施例 32 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-( 吡啶 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并
     [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 122 -2- 甲酰胺 150 与 3- 吡啶基硼酸起反应得到 122。MS ：按照实施例 44 和 60 和一般方法 C， 使 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 (ESI+)447.1
     实施例 33 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂199-2- 硫代甲酰胺 在 20mL 闪 烁 管 中， 向 N-(2- 氯 苯 基 )-N- 甲 基 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， -2- 甲酰胺 157(60mg， 0.16mmol) 在干燥甲苯 (2mL) 的悬浮液中加入拉韦松3-d] 氧杂(Lawesson′ s) 试剂 (4- 二 (4- 甲氧基苯基 )-1， 3， 2， 4- 二硫杂二磷杂环丁烷 (-etane)-2， 4- 二硫化物， 49mg， 0.12mmol， 0.75 当量 )。将管瓶密封， 并在 90℃下加热 36 小时。将混合 物冷却至室温， 浓缩并用反相 HPLC 纯化， 得到 123 为黄色固体。1H NMR(CDCl3)δ7.57(m， 1H)， 7.48(m， 1H)， 7.35-7.27(m， 4H)， 7.14(m， 1H)， 6.96(m， 1H)， 6.52(s， 1H)， 4.19(m， 2H)， 3.80(s， 3H)， 2.92(m， 2H)。MS ： (ESI+)386.1
     实施例 34 ： 8-(3- 氨基苯基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 124 -2- 甲酰胺 150 与 3- 氨基苯基硼酸起反应， 得到 124。MS ：按照实施例 44 和 60 和一般方法 C， 使 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 (ESI+)461.1
     实施例 35 ： N-(2- 氯苯基 )-8-(3-( 二甲基氨基 ) 丙 -1- 炔基 )-N- 甲基 -4， 5- 二 -2- 甲酰胺 125氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 43 和 60， 将 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 -2- 甲酰胺 (150) 和 N， N- 二甲基炔丙基胺 Sonagoshira 偶合， 得到 125。 -2- 甲酰胺 126 -2- 甲 酰 胺 (150) 和 3- 炔 丙 醇 Sonagoshira 偶 合， 得 到 126。MS ： -9- 基 )-(2- 氯 实施例 36 ： N-(2- 氯苯基 )-8-(3- 羟基丙 -1- 炔基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b]并 [2， 3-d] 氧杂
     噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 43 和 60， 使 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 并 [2， 3-d] 氧 杂 (ESI+)424.1
     实施例 37 ： 4-(6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂苯基 )-2- 乙酰胺基 -1H- 咪唑 127
     将在多磷酸 (30g， 300mmol) 中的 6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(1016mg， 5.000mmol) 和 (2- 氯苯基 )- 乙酸 (1134mg， 6.650mmol) 的搅拌混合物在 110℃ 下加热 4 小时。加入冰 (200g)， 并摇动混合物， 直到形成均匀的悬浮液为止。滤出沉淀， 用水、 乙酸乙酯洗涤， 并空气干燥。用 100mL 热二200烷重结晶， 得到 6， 7- 二氢吡啶并 [3，102333779 A CN 102333793说明书165/280 页2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 -(2- 氯苯基 ) 乙酮 (1.34g， 70 ％ )。1H NMR(400MHz，DMSO)δ8.30(d， J ＝ 3.8， 1H)， 8.03(s， 1H)， 7.50-7.44(m， 2H)， 7.41(dt， J ＝ 3.7， 7.5， 1H)， 7.37-7.30(m， 3H)， 4.48(s， 2H)， 4.39(t， J ＝ 4.7， 2H)， 3.28(t， J ＝ 4.7， 2H)。 MS(ESI+)356.0
     向 6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 -(2- 氯苯基 ) 乙酮(142mg， 0.400mmol) 在热 1， 4- 二烷 (4mL， 60mmol) 中的溶液中加入溴化铜 (II)(139mg，0.622mmol)， 并将混合物在 110℃下加热 3 小时。然后将混合物冷却至室温， 并在乙酸乙酯 并 和水之间分配。将悬浮液通过硅藻土过滤， 分离有机层， 用水和盐水洗涤， 用 MgSO4 干燥， 蒸干。 将粗品用硅胶柱纯化， 用 20％乙酸乙酯 / 己烷洗脱， 得到 6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻 吩并 [2， 3-d] 氧杂1 -9- 基 -(2- 氯苯基 )-2- 溴乙酮 ( 得到 100mg， 57％ )。 H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(d， J ＝ 4.4， 1H)， 7.75(dd， J ＝ 2.0， 7.4， 1H)， 7.60(s， 1H)， 7.44-7.38(m， 1H)， 7.30(ddd， J ＝ 1.7， 7.8， 9.6， 3H)， 7.16(dd， J ＝ 4.4， 8.2， 1H)， 6.72(s， 1H)， 4.41-4.31(m， 2H)， 3.25(d， J ＝ 3.0， 2H)。MS(ESI+)434.0
     在 乙 腈 (2mL， 50mmol) 中 将 6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-9- 基 -(2- 氯苯基 )-2- 溴乙酮 (87.0mg， 0.200mmol) 和 N- 乙酰基 - 胍 (101mg， 1.00mmol) 混合。将反应用 300 瓦微波在 120℃下加热 20 分钟。将混合物在室温下保持 18 小时， 滤出 晶体产物， 用冷的乙腈洗涤， 在硅胶柱上纯化， 用 2％的甲醇 / 二氯甲烷洗脱， 得到 127( 产量 34mg， 39％ )。MS(ESI+)437.1。
     实施例 38 ： 4-(6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 )-(2- 氯苯基 )-2- 氨基 -1H- 咪唑 128
     由 实 施 例 37，将 4-(6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-9- 基 )-(2- 氯苯基 )-2- 氨基 -1H- 咪唑 127(27mg， 0.062mmol) 加入到包含 1mL10％硫酸 水溶液的乙醇 (2mL， 30mmol) 中。将反应用 300 瓦微波 100℃下加热 15 分钟。将反应混合 物与 10mL1 MNa2CO3 水溶液混合， 并用乙酸乙酯提取两次。用盐水洗涤有机层， 用 K2CO3 干 燥， 蒸发溶剂， 得到 128。(18mg， 74％ )。MS(ESI+)395.1
     实 施 例 39 ： 4-(6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂 唑 129 -9- 基 -(2- 氯-9- 基 )-(5-(2- 氯苯基 ))
     将实施例 37 的 6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂苯基 )-2- 溴乙酮 (65.0mg， 0.150mmol) 悬浮在甲酰胺 (2mL， 50mmol) 中。 将反应用 300 瓦微波在 130℃下加热 20 分钟。加入水， 用乙酸乙酯提取产物。用水 ( 两次 ) 和盐水洗涤有机 层， 用 MgSO4 干燥， 蒸干。在硅胶柱上纯化粗品， 用 25％乙酸乙酯 / 己烷洗脱， 得到 129( 产 率 10mg， 18％ )。MS(ESI+)381.1
     实施例 40 ： N- 甲基 -N-(2-( 三氟甲基 ) 苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 130以 份 额 方 式 向 2-( 三 氟 甲 基 ) 苯 胺 (0.122g， 0.755mmol) 和 三 乙 胺 (0.105mL， 0.756mmol) 的四氢呋喃 (1.5mL， 18mmol) 溶液中加入固体 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 羰基氯 (0.100g， 0.378mmol)。在室温下搅拌反应混合物， 用 LC/MS 监控烷 基化产物的形成， 2 小时之后注意反应完成。 对水溶液处理之后， 真空浓缩反应混合物， 接纳 在 DMF 中， 在室温下用氢化钠 (0.03g， 1mmol) 处理几分钟。加入甲基碘 (0.06g， 0.4mmol)， 并在室温下搅拌反应几小时， 然后真空浓缩。将残余物接纳在 EtOAc 中， 用水和盐水洗涤， 浓缩， 得到固体残余物， 接纳在 DMF 中 ( 浓度 100mg/ml)， 用制备 RP-HPLC 纯化， 得到 130。 产 率＝ 25％理论值。MS ： (ESI+)404.1
     实施例 41 ： N-(2- 氨乙基 )-N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺 131
     在室温下， 向 2-(2- 氯苯基氨基 ) 乙基氨基甲酸叔丁基酯 (0.145g， 0.508mmol) 和 三乙胺 (0.113mL， 0.812mmol) 的四氢呋喃 (1mL， 10mmol) 溶液中加入 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 碳酰氯的四氢呋喃溶液 (4mL)。搅拌反应混合物过夜， 用 LC/MS测定反应完成。真空浓缩反应， 水溶液进行后处理， 得到黄色固体， 将其用 MPLC 纯化， 得到 150mg N-(2-( 叔丁基二甲基硅基氧基 ) 乙基 )-N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺。 -2- 甲酰氨基 )向 2-(N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂乙基氨基甲酸叔丁基酯 (0.022g， 0.36mmol) 的 DCM(0.400mL， 4.93mmol) 溶液中加入 95 ％ TFA/5％水溶液。用 LC/MS 监控反应的目标产物。真空浓缩反应混合物， 接纳在 EA 中， 用 水洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 浓缩， 用制备 RP-HLPC 纯化粗品， 得到 131( 产率为理论值的 98％ )。 MS ： (ESI+)400.1
     实施例 42 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-(1H- 吡唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 132按照实施例 44 和 60， 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并[2， 3-d] 氧杂 1
     -2- 甲酰胺 150 和吡唑 -4- 硼酸频哪醇酯反应， 得到 132。MS ： (ESI+)436，实施例 43 ： N-(2- 氯苯基 )-8- 乙炔基 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 甲酰胺 133 -2- 甲酰胺 150(50mg， 0.11mmol) 的三乙胺 (2mL) 溶液用鼓入3-d] 氧杂
     将包含 CuI(2.1mg， 0.011mmol) 的 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并[b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂氮气进行脱气 10 分钟。加入 Pd(PPh3)4(13mg， 0.011mmol)， 而后加入三甲基甲硅烷基乙炔 (5 当量 )。将反应容器密封， 在微波中、 在 130℃加热 30 分钟。将冷却的混合物用水稀释， 用乙酸乙酯提取。浓缩合并的有机物， 并将残余物溶于 2mL 甲醇中。用碳酸钾 (100mg) 处 理溶液， 在室温下搅拌悬浮液 2 小时。将反应混合物浓缩， 用水稀释， 用乙酸乙酯提取。浓 缩合并的有机物， 用反相 HPLC 纯化残余物， 得到 133。MS ： (ESI+)394.1。
     实施例 44 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-( 吡啶 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 134将 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺 150(50mg， 0.11mmol) 在 1.0mL MeCN 和 1.0mL 1MKOAc 水溶液中的悬浮液在 10mL 微波管瓶中脱气 ( 鼓入氮气 ) 大约 10 分钟。加入 4- 吡啶硼酸 (16mg)， 而后加入 Pd(PPh3)4(13mg)。 将容器密封， 并在微波中、 在 140℃加热 30 分钟。 将反应混合物冷却至室 温， 用水稀释， 用乙酸乙酯提取。浓缩合并的有机物， 用反相 HPLC 纯化残余物， 得到 134。1H NMR(DMSO-d6)δ8.77(m， 2H)， 8.05(m， 2H)， 7.70-7.53(m， 7H)， 6.65(br s， 1H)， 4.25(m， 2H)， 3.31(s， 3H)， 3.02(m， 2H)。MS ： (ESI+)447.1
     实施例 45 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8- 苯基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 135 按照实施例 44 和 60， 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 -2- 甲酰胺 150 和苯基硼酸反应， 得到 135。MS ： (ESI+)446.1 -2- 基 )-1H- 吡咯并 [2，[2， 3-d] 氧杂
     实施例 46 ： 5-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂3-b] 吡啶 136
     使用标准 Suzuki 偶合方法， 使实施例 73 的 2- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 与 7- 氮杂吲哚 -5- 硼酸频哪醇酯反应。在制备 HPLC 上纯化， 得到 136。 1H NMR(400MHz， CDCl3) ： 3.30(2H， t)， 4.40(2H， t)， 6.56-6.58(1H， m)， 7.05-7.07(2H， m)， 7.15-7.18(2H， m)， 7.36(1H， t)， 7.75(1H， d)， 8.16(1H， d)， 8.63(1H， d)。MS ： (ESI+)318
     实施例 47 ： N2-(2- 氯苯基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2， 8- 二甲酰胺 137
     在 20mL 闪烁管中， 向 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] -8- 甲酸甲酯 138(45mg， 0.11mmol) 在 1.0mL THF 和 1.0mL 水中的噻吩并 [2， 3-d] 氧杂溶液中加入 LiOH( 一水合物， 200mg)。密封容器， 并在 50℃加热过夜。将反应混合物冷却 并浓 至室温， 用 2N HCl 酸化至 pH2， 用乙酸乙酯提取。用 Na2SO4 干燥合并的有机提取物， 缩得到粗品 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 杂 -8- 甲酸。向该酸的 2mL DMF 溶液中加入 DIPEA(0.15mL) 和 HATU(N， N， N′， N′ - 四 甲基 -O-(7- 氮杂苯并三唑 -1- 基 ) 脲六氟磷酸盐， 75mg)， 而后加入氯化铵 (34mg)。将全 部在室温下搅拌 2 小时， 用水稀释， 并用乙酸乙酯提取。浓缩合并的有机物， 用反相 HPLC 1 DMSO-d6)δ7.94(brs， 1H)， 7.66(m， 2H)， 纯化残余物， 得到 137 无色固体。 H NMR(500MHz， 7.54-7.46(m， 4H)， 7.35(m， 1H)， 6.59(m， 1H)， 4.21(m， 2H)， 3.26(m， 3H， 被 水 屏 蔽 )， 2.98(m， 2H)。MS ： (ESI+)413.1
     实施例 48 ： 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 甲酸甲酯 138 -2- 甲酰胺 (10g， 0.022mol)、 Pd(OAc)2(2.47g， 0.011mmol)、在 CO(50psi) 氛围中， 在 70℃， 将 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并[b] 噻吩并 [2， 3-d]- 氧杂dppf(10g， 0.018mol)、 TEA(4.45g， 0.044mol) 在 DMF(50mL) 和 MeOH(100mL) 中 的 混 合 物 搅 拌 2 天。 用 硅 藻 土 过 滤 后， 浓 缩 混 合 物， 得 到 粗 品， 将其用快速柱色谱纯化 ( 己 烷∶ EtOAc/5 ∶ 1)， 得到 138。(6.59g， 产率 ： 69％ )。MS(ESI) ： 428.1
     或者， 将 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺 150(113mg， 0.25mmol)、 Mo(CO)6(66mg， 0.25mmol)、 Hermann′ s 环钯 ( 反式 - 二 (mu- 乙酸基 ) 二 [O-( 二 -O- 甲苯基膦基 ) 苄基 ] 二钯 (II)， 23mg) 和三 - 叔丁 基磷鎓四氟硼酸盐 (15mg) 在甲醇 (0.8mL) 和 THF(0.8mL) 中的悬浮液在 10mL 微波管瓶 中用 DBU(0.11mL， 0.75mmol) 处理， 并立即密封。将全部在微波中、 在 110℃加热 20 分钟， 冷却至室温， 用乙酸乙酯稀释。通过硅藻土过滤粗品悬浮液， 浓缩洗脱液， 得到残余物， 将 1 其用快速柱色谱纯化 (10-100 ％乙酸乙酯 / 己烷 )， 得到 138 无色固体。 H NMR(500MHz， DMSO-d6)δ7.69-7.49(m， 7H)， 6.57(m， 1H)， 4.22(m， 2H)， 3.85(s， 3H)， 3.23(s， 3H，被 水 屏 蔽 )， 3.02(m， 2H)。MS ： (ESI+)428.1
     实施例 49 ： 2-(2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 甲酰氨基 ) 乙基 ( 甲基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 139按照实施例 13 的方法和一般方法 C， 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 150 和 N-Boc-N- 甲基 - 乙二胺 (2- 氨基乙基 -2- 基 )-1H- 吲唑 140( 甲基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 ) 反应， 得到 139。MS ： (ESI+)470.2。 实施例 50 ： 4-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂使用标准 Suzuki 偶合方法， 使实施例 73 的 2- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 与吲唑 4- 硼酸频哪醇酯反应。在制备 HPLC 上纯化， 用己烷研磨， 得到 140。3-d] 氧杂1H NMR(400MHz， CDCl3) ： 3.34(2H， t)， 4.42(2H， t)， 7.07-7.11(2H， m)， 7.18-7.22(1H， m)， 7.35(1H， s)， 7.42-7.49(3H， m)， 7.79(1H， dd)， 8.50(1H， s)。MS ： (ESI+)319
     实施例 51 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -(10- 氰基 -4， 5- 二氢吡啶并 -[4， 3-b] 噻吩 并 [2， 3-d] 氧杂
     -2)- 甲酰胺 141
     将间氯过苯甲酸 (88.0mg， 0.36mmol) 加入到 N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢吡 -2- 甲酰胺 162(100mg， 0.27mmol) 的 20mL 二氯甲烷溶啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂液中。 将反应混合物搅拌 18 小时。 真空除去溶剂， 并将残余物在 0.1N Na2CO3 水溶液和乙酸 乙酯之间分配。用水和盐水洗涤有机层， 用 Na2SO4 干燥。真空浓缩， 得到接近纯的 N-(2- 氯 苯基 )-N- 甲基 -(9- 氧代 -4， 5- 二氢吡啶并 -[4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2)- 甲酰胺 (0.112g， 90％ )。MS(ESI+)387.0。
     将 N， N- 二 甲 基 氨 基 甲 酰 氯 (40ul， 0.4mmol) 加 入 到 N-(2- 氯 苯 基 )-N- 甲 基 -(9- 氧 代 -4， 5- 二 氢 吡 啶 并 -[4， 3-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂 -2)- 甲 酰 胺 (56mg， 0.14mmol) 和三乙胺 (24ul， 0.17mmol) 的 2mL 乙腈溶液中。搅拌 5 分钟之后， 加入氰基三甲 基硅烷 (96ul， 0.72mmol)， 并将混合物保持 4 小时。真空浓缩混合物， 并将残余物在乙酸乙 酯和 1MNa2CO3 水溶液之间分配。 用水和盐水洗涤有机层， 用 MgSO4 干燥。 浓缩之后， 在硅胶柱 1 上纯化残余物， 用 45％乙酸乙酯 / 己烷洗脱， 得到 141( 产率 27.2mg， 47％ )。H NMR(400MHz， DMSO)δ8.51(d， J ＝ 5.3， 1H)， 7.72-7.61(m， 2H)， 7.58-7.47(m， 2H)， 7.41(d， J ＝ 5.3， 1H)， 6.82(s， 1H)， 4.48(t， J ＝ 5.8， 2H)， 3.30(s， 3H)， 2.93(t， J ＝ 5.7， 2H)。MS(ESI+)396.1
     实 施 例 52 ： 5-(6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-9- 基 ) 吡啶 -2- 胺 142
     将 9- 溴 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(113mg， 0.400mmol)、2- 氨基吡啶 -5- 硼酸， 频哪醇酯 (96.8mg， 0.440mmol) 和二 ( 三苯基膦 ) 钯 (II) 盐酸盐 (14.0mg， 0.0200mmol) 在 1.0M 碳酸钠水溶液 (0.500mL) 和乙腈 (3mL， 60mmol) 中的混合物 脱气， 并用 300 瓦微波在 140℃加热 20 分钟。 将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配， 从无 机盐中滤出。用水和盐水洗涤有机层， 用 MgSO4 干燥， 蒸干。在硅胶柱上纯化粗品残余物， 用 50％乙酸乙酯 / 二氯甲烷洗脱， 得到 142( 产率 43mg， 36％ )。1H NMR(400MHz， DMSO-d6) δ8.27(d， J ＝ 2.3， 1H)， 8.21(dd， J ＝ 1.4， 4.5， 1H)， 7.68(dd， J ＝ 2.5， 8.6， 1H)， 7.38(dd， J ＝ 1.4， 8.1， 1H)， 7.21(s， 1H)， 7.17(dd， J ＝ 4.5， 8.1， 1H)， 6.50(d， J ＝ 8.7， 1H)， 6.21(s， 2H)， 4.32(t， J ＝ 4.8， 2H)， 3.19(t， J ＝ 4.8， 2H)。MS ： (ESI+)296.1
     实施例 53 ： N-(2- 氯苯基 )-8- 氰基 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 143 在 10mL 微波管瓶中， 向 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 -2- 甲酰胺 150(50mg， 0.11mmol) 的 1mLDMF 溶液中加入 CuCN(30mg)。并 [2， 3-d] 氧杂密封反应容器， 并在微波中加热到 250℃， 保持 20 分钟。将全部冷却至室温， 用饱和氯化铵 水溶液稀释， 用乙酸乙酯提取。浓缩合并的有机提取物， 用反相 HPLC 纯化粗品残余物， 得到 1 143。 H NMR(500MHz， DMSO-d6)δ7.65(m， 2H)， 7.58-7.46(m， 5H)， 6.64(s， 1H)， 4.22(m， 2H)， 3.28(s， 3H)， 3.00(m， 2H)。MS ： (ESI+)395.1
     实施例 54 ： 3-(2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 基 ) 苯甲酸 144 -2- 甲酰胺 150 和 3- 羧基苯基硼酸反应， 得到 144。MS ：按照实施例 44 和 60 和一般方法 C， 使 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(ESI+)490.1
     实施例 55 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-( 吗啉 -4- 羰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 145 -2- 甲酰胺 150 和吗啉反应， 得到 145。MS ： (ESI+)483.1按照实施例 13 的方法和一般方法 C， 使 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢 实施例 56 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-(3-( 甲基磺酰基 ) 苯基 )-4， 5- 二氢苯并 -2- 甲酰胺 146 -2- 甲酰胺 150 和 3- 甲基磺酰基苯基硼酸反应，苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 44 和 60 的方法和一般方法 C， 使 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4，5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 得到 146。MS ： (ESI+)524.1实施例 57 ： 8- 乙酰氨基 -N-(2- 氯 -4-(4- 甲基哌嗪 -1- 羰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， -2- 甲酰胺 1475- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 91 的方法， 向包含 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-(4- 甲基哌嗪 -1- 羰基 ) 苯 -2- 甲酰胺 (0.095g， 0.16mmol) 烷 (2.00mL， 25.6mmol ； ) 溶液中加入 4， 5- 二 ( 二 苯基 膦基 )-9， 9- 二 甲基基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 的 1， 4- 二氧 杂 蒽 (XantPhos， 9.6mg， 0.016mmol ； )、 乙 酰 胺 (15mg， 0.25mmol ； ) 和 碳 酸 铯 (120mg， 0.36mmol)， 然后用氮气脱气 15 分钟。向反应混合物中加入三 ( 二亚苄基丙酮 ) 二钯 (0) 7.6mg， 0.0083mmol ； )。在 100℃加热反应混合物 18 小时。对粗品进行 rHPLC， (Pd2(dba)3， 得到 147(5.5％ )。MS ： (ESI+)553.2
     实施例 58 ： N2-(2- 氯苯基 )-N2， N8- 二甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 148 按照实施例 13 的方法和一般方法 C， 使 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢 -2- 甲酰胺 150 和甲胺反应， 得到 148。MS ： (ESI+)427.1 实施例 59 ： 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -8- 基氨基甲酸甲酯 149 -2- 甲酰胺 150 和氨基甲酸甲酯偶合， 得到 149。MS ： (ESI+)443.1苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     3-d] 氧杂
     按照实施例 61 的方法， 使 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 实施例 60 ： 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧吩并 [2， 3-d] 氧杂
     杂-2- 甲酰胺 150 按照实施例 10 和一般方法 C， 由 8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 实施例 61 ： 8- 乙酰氨基 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 甲酰胺 151 -2- 甲酸 11 和 2- 氯 -N- 甲基苯胺制备 150。MS ： (ESI+)449.9。
     3-d] 氧杂
     将 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 烷 (2mL) 中的悬浮液用鼓入的 N2 进行脱气。加入 Pd2dba3， 并密封 10mL 管， 在-2- 甲酰胺 150(100mg， 0.22mmol)、 Cs2CO3(158mg)、 乙酰胺 (20mg) 和氧杂蒽 (13mg) 在无 水 1， 4- 二 110℃加热 8 小时。冷却至室温后， 用水稀释混合物， 用乙酸乙酯提取。浓缩合并的有机物， 1 用反相 HPLC 纯化获得的粗品残余物， 得到 151。 H NMR(500MHz， DMSO-d6)δ10.03(s， 1H)， 7.65(m， 2H)， 7.62(m， 2H)， 7.35(m， 2H)， 7.17(m， 1H)， 6.51(br s， 1H)， 4.15(m， 2H)， 3.29(s，3H)， 2.91(m， 2H)， 2.03(s， 3H)MS ： (ESI+)427.1
     实施例 62 ： 3-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 ) 吡啶 152使用标准 Suzuki 偶合方法， 使实施例 73 的 2- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 与 3- 吡啶硼酸频哪醇酯反应。在二氧化硅上纯化， 得到 152。1H NMR(400MHz，3-d] 氧杂3.29(2H， t)， 4.39(2H， t)， 7.05-7.10(2H， m)， 7.18-7.22(2H， m)， 7.32-7.35(1H， m)， CDCl3) ： 7.74(1H， dd)， 7.89(1H， dt)， 8.55(1H， dd)， 8.91(1H， s)。MS ： (ESI+)280
     实施例 63 ： 4-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d1 氧杂-2- 基 ) 吡啶 153使用标准 Suzuki 偶合方法， 使实施例 73 的 2- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 与 4- 吡啶硼酸频哪醇酯反应。在二氧化硅上纯化， 得到 153。1H NMR(400MHz，3-d] 氧杂CDCl3) ： 3.29(2H， t)， 4.39(2H， t)， 7.06-7.11(2H， m)， 7.22(1H， dt)， 7.28(1H， s)， 7.49(2H， dd)， 7.75(1H， dd)， 8.62(2H， dd)。MS ： (ESI+)280
     实施例 64 ： N2-(2- 氯苯基 )-N2-(2- 羟乙基 )-N8- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 并 [2， 3-d1 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 154 -2- 甲酰胺 (0.08g， 0.17mmo1)、 六羰基在 环 境 条 件 下， 向 密 封 的 反 应 容 器 中 装 入 8- 溴 -N-(2- 氯 苯 基 )-N-(2- 羟 乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂钼 (0.044g， 0.167mmo1) 的甲醇 (0.5mL， 10mmol)/THF(1mL， 10mmol) 溶液， 而后加入 2M 甲 胺 -THF(0.251mL)/ 反式 -D(mu- 乙酸基 ) 二 [ 二 -O- 甲苯基膦基 ) 苄基 ] 二钯 (II)(32.3mg， 0.0334mmo1)。最后， 加入 DBU(0.025mL， 0.167mmo1)， 并将反应管瓶快速密封。将加料的反 应管瓶在 Biotage Emrys Optimizer 微波上、 在 150℃快速加热 20 分钟。将冷却的反应混 合物用乙酸乙酯稀释， 并通过硅藻土床过滤。浓缩滤液， 得到固体， 用 MPLC 在二氧化硅上纯 化， 得到 3.2mg 154( 产率＝ 4.3％理论值 )。MS ： (ESI+)458.2
     实施例 65 ： N2-(4- 氯代吡啶 -3- 基 )-N2， N8- 二甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 155 -2- 甲酰胺和甲胺得到 155。产率＝ 2.5 ％理论值。MS ：按照实施例 64 的方法， 由 8- 溴 -N-(4- 氯代吡啶 -3- 基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(ESI+)429.1
     实施例 66 ： N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺 156
     按照一般方法 C， 由 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酸和 2， 4- 二氟 -N- 甲基苯胺制备 156。MS ： (ESI+)371.9实施例 67 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 按 照 一 般 方 法 C， 由 4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂 -2- 甲 酸 和-2- 甲酰胺 157
     2- 氯 -N- 甲基苯胺制备 157。MS ： (ESI+)370.1
     实施例 68 ： N-(2- 氯苯基 )-8-(2- 羟基乙酰胺基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 -2- 甲酰胺 158吩并 [2， 3-d] 氧杂
     向 8- 氨基 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺 HCl 盐 (1.0g， 2.37mmol) 在 30mL DCM( 二氯甲烷， 二氯甲烷 ) 中的混合物 中加入三乙胺 (1mL， 7.12mmol)。在 0℃搅拌混合物 10 分钟， 逐滴加入 BnOCH2COCl(0.53g， 2.85mmol)。加入完成之后， 将反应混合物升至室温， 另外搅拌 2 小时。将混合物用水猝灭， 用 EtOAc 提取。 合并有机相， 用 Na2SO4 干燥， 蒸发， 得到大约 0.9g 粗品， 其不用进一步纯化就 可以用于下一步。将 8-(2-( 苄氧基 ) 乙酰胺基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺 (0.6g， 1.13mmol) 在 TFA(5mL) 和 CF3SO3H(2mL) 中的 混合物在 60℃搅拌过夜。除去溶剂之后， 用制备 TLC 纯化粗品， 得到大约 320mg 的 158( 分 1 离产率 ： 64％ )。 H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： δ9.77(s， 1H)， 7.63-7.35(m， 7H)， 6.47(s， 1H)， 5.64(s， 1H)， 4.11(s， 2H)， 3.94(d， J ＝ 5.2Hz， 2H)， 3.23(s， 3H)， 2.88(d， J ＝ 5.2Hz， 2H)。 MS ： (ESI+)443.0
     实施例 69 ： N-(2- 氯 -4-( 甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N-(2- 羟乙基 )-10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 159
     向包含 10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酸 (0.175g，0.708mmol ； ) 的 二 氯 甲 烷 (1.84mL， 28.7mmol ； ) 溶 液 中 加 入 亚 硫 酰 氯 (0.155mL， 2.12mmol ； )。将混合物在 80 ℃搅拌 2 小时， 冷却， 并真空浓缩。向粗品酰基氯 (0.400g， 1.16mmol)( 在四氢呋喃 (5.22mL， 64.4mmol) 中 ) 加入 1.00M 二 ( 三甲基甲硅烷基 ) 胺基钠的四氢呋喃 ( 溶液 )(1.16mL)。 在室温下搅拌反应混合物 1 小时， 然后在 0℃加入 4-(2-( 叔 丁基二甲基硅基氧基 ) 乙胺基 )-3- 氯苯甲酸甲酯。搅拌反应混合物过夜， 用饱和 NH4Cl 淬灭， 用 DCM 提取 (2x)。干燥 (Na2SO4) 合并的有机物， 过滤， 浓缩。用快速色谱纯化粗品 (EtOAc/Hex(0-100％ ))， 在 70％ EtOAc 时洗脱出， 得到 4-(N-(2-( 叔丁基二甲基硅基氧基 ) 乙基 )-10- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 甲酯 ( 产率 58％ )。MS ： (ESI+)573.2
     -2- 甲酰氨基 )-3- 氯苯甲酸
     向 4-(N-(2-( 叔丁基二甲基硅基氧基 ) 乙基 )-10- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 -2- 甲酰 氨基 )-3- 氯 苯甲 酸甲酯 (0.250g， 0.436mmol) 的四 氢 呋吩 并 [2， 3-d] 氧杂喃 (10.2mL， 126mmol ； ) 和水 (10.2mL， 566mmol) 溶液中加入氢氧化锂一水合物 (0.0732g， 1.74mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜。浓缩反应混合物， 用 1M HCl 酸化， 用 DCM 提取 (3X)。干燥 (Na2SO4) 合并的有机物， 过滤， 浓缩， 得到 4-(N-(2-( 叔丁基二甲基硅基氧基 ) 乙基 )-10- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 ( 产率 60％ )。MS ： (ESI+)559.1
     -2- 甲酰氨基 )-3- 氯苯甲酸
     向 4-(N-(2-( 叔丁基二甲基硅基氧基 ) 乙基 )-10- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 -2- 甲酰氨基 )-3- 氯苯甲酸 (0.0710g， 0.127mmol) 的二氯甲烷 (1.8mL，并 [2， 3-d] 氧杂28mmol) 溶液中加入甲胺 (0.254mmol) 和 N， N- 二异丙基乙胺 (0.221mL， 1.27mmol)， 而后 加入 N， N， N′， N′ - 四甲基 -O-(7- 氮杂苯并三唑 -l- 基 ) 脲六氟磷酸盐 (HATU， 0.0966g， 0.254mmol)。在室温下搅拌混合物 2 小时。LCMS 表明反应完成。用饱和 NH4Cl 淬灭反应， 用 DCM 提取 (2x)。干燥 (Na2SO4) 合并的有机物， 过滤， 浓缩。用快速色谱 (MeOH/DCM， 在 5％ MeOH 时洗脱出 ) 纯化粗品 TBDMS- 酰胺产物， 并溶于四氢呋喃 (5.00mL) 和乙酸 (0.007mL， 0.127mmol) 中。加入四正丁基氟化铵的四氢呋喃溶液 (0.127mL， 1.00M， 0.127mmol)。在室 温下将反应混合物搅拌 14 小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释， 用水洗涤。用 rHPLC 纯化 粗品， 得到 159( 产率 22％ )。MS ： (ESI+)558.1实施例 70 ： 160 按 照 实 施 例 69 制 备 159 的 方 法， 使 4-(N-(2-( 叔 丁 基 二 甲 基 硅 基 氧 基 ) 乙 -2- 甲酰氨基 )-3- 氯苯甲酸和基 )-10- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂1- 甲基哌嗪反应， 而后用氟化物处理， 除去 TBDMS 基团， 得到 160。MS ： (ESI+)527.2
     实施例 71 ： N-(2- 氯苯基 )-8-(3-( 二甲基氨基 ) 丙酰胺基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 161 -2- 甲酰胺 HCl 盐和丙烯酰氯反应， 得到 8- 丙烯酰胺 -2- 甲酰胺， 将其按照制备 158 的实施例 68 的方法， 使 8- 氨基 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂基 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 用二甲胺处理， 得到 161。MS ： (ESI+)484.1
     实施例 72 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺 162
     向 4- 氯 -3- 碘 代 - 吡 啶 (4.79g， 20.0mmol) 和 2-(3- 噻 吩 基 ) 乙 醇 (2.43mL， 22.0mmol) 在四氢呋喃 (60mL， 700mmol) 和 N， N- 二甲基甲酰胺 (20mL， 200mmol) 的混合物中 的溶液中， 于 30 分钟内分批加入氢化钠 (0.960g， 24.0mmol)( 其以 60％分散在矿物油中 )。 将混合物搅拌 2 小时， 小心地倾倒到 200mL 的冷水中， 用二乙醚提取两次。将有机提取物 用水和盐水洗涤， 用 MgSO4 干燥。真空浓缩后， 将粗品残余物在硅胶柱上纯化， 用 50％乙酸 乙酯 / 己烷洗脱， 得到 3- 碘代 -4-(2-( 噻吩 -3- 基 ) 乙氧基 ) 吡啶 ( 产率 5.34g， 81％ )。 1 H NMR(400MHz， CDCl3)δ8.75(s， 1H)， 8.35(d， J ＝ 5.6， 1H)， 7.29(dd， J ＝ 3.0， 4.8， 1H)， 7.19(s， 1H)， 7.12(d， J ＝ 4.9， 1H)， 6.70(d， J ＝ 5.6， 1H)， 4.26(t， J ＝ 6.5， 2H)， 3.21(t， J ＝ 6.5， 2H)。MS(ESI+)332.0， 221.9。
     将 3- 碘代 -4-(2-( 噻吩 -3- 基 ) 乙氧基 ) 吡啶 (1.66g， 5.00mmol)， 乙酸钯 (112mg， 0.500mmol)， 三苯基膦 (262mg， 1.00mmol) 和碳酸钾 (1.38g， 10.0mmol) 在 N， N- 二甲基甲 酰胺 (80mL， 1000mmol) 中在 115℃下加热 2 小时。将反应混合物浓缩， 并在乙酸乙酯和水 之间分配。将有机层用水和盐水洗涤， 并用 MgSO4 干燥。将粗品在硅胶柱上纯化， 用 50％乙
     酸乙酯 / 己烷洗脱， 得到 4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂211( 产率 0.86g，102333779 A CN 102333793说明书176/280 页85％ )。1H NMR(400MHz， CDCl3)δ8.93(s， 1H)， 8.25(d， J ＝ 5.5， 1H)， 7.23(d， J ＝ 5.2， 1H)， 6.89(dd， J ＝ 3.6， 5.3， 2H)， 4.43-4.33(m， 2H)， 3.29-3.20(m， 2H)。MS(ESI+)204.0
     在 0℃下， 向 4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(0.250g， 1.23mmol)的二甲基甲酰胺 (4mL， 100mmol 溶液中逐滴加入在二甲基甲酰胺 (4mL) 中的 N- 溴代琥珀酰 亚胺 (0.237g， 1.33mmol)。 将反应混合物在室温下搅拌 18 小时。 将反应混合物与 40mL 水混 合， 并用 20mL 乙酸乙酯提取两次。将合并的有机提取物用水和盐水洗涤， 并用 MgSO4 干燥。 蒸发溶剂， 得到 2- 溴 -4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 (0.227g， 63％ )。 1H)， 8.26(d， J ＝ 5.4， 1H)， 6.90(d， J ＝ 5.5， 1H)， 6.88(s， 1H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.76(s， 1H)， 4.36(t， J ＝ 4.7， 2H)， 3.19(t， J ＝ 4.8， 2H)。MS(ESI+)282.0
     在 -75℃下， 将 1.6M 在己烷 (0.6302mL) 中的正丁基锂逐滴加入到 2- 溴 -4， 5- 二 (0.227g， 0.804mmol) 的 四 氢 呋 喃 (6.00mL，氢 吡 啶 并 [4， 3-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂74.0mmol) 溶液中。将暗褐色混合物在 -78℃下搅拌 20 分钟。逐滴加入在 2mL 四氢呋喃中 的 1- 氯 -2- 异氰酰 - 苯 (0.1421g， 0.9252mmol)， 将混合物在 -78℃下保持 20 分钟。加入 4N HCl 水溶液 (1mL)， 并将混合物倒入到 50mL 饱和 NaHCO3 水溶液中。 将混合物用二氯甲烷 提取两次， 合并， 并用水和盐水洗涤， 用 MgSO4 干燥。 真空浓缩后， 将残余物用乙酸乙酯研磨。 收集的沉淀是 N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰 胺 (0.19g， 产率 66％ )。MS(ESI+)357.0。
     将氢化钠 (80mg， 2.0mmol)(60 ％， 分散在矿物油中 ) 加入到 N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺 (71.4mg， 0.2mmol) 在 10mL 四氢 呋喃中的溶液中。将混合物搅拌 30 分钟， 并与甲基碘 (0.12mL， 2.0mmol) 混合。将反应混 合物搅拌 1 小时。将反应混合物与 50mL 1 冰水混合， 并用乙酸乙酯提取两次。将合并的乙 酸乙酯溶液用盐水洗涤， 用 MgSO4 干燥， 真空浓缩， 并在硅胶柱上纯化， 用 25％的乙酸乙酯 / 1 二氯甲烷洗脱， 得到 162( 产率 50mg， 67％ )。 H NMR(400MHz， DMSO)δ8.57(s， 1H)， 8.25(d，J ＝ 5.5， 1H)， 7.68(t， J ＝ 5.9， 2H)， 7.60-7.50(m， 2H)， 6.98(d， J ＝ 5.5， 1H)， 6.64(s， 1H)， 4.27(m， 2H)， 3.28(s， 3H)， 2.99(m， 2H)。MS(ESI+)371.1
     实施例 73 ： 5-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 ) 嘧啶 -2- 胺 163向搅拌的 2- 碘苯酚 (6.7g， 30.6mmol)， 2-(3- 噻吩基 ) 乙醇 (3.57g， 27.8mol) 和 三苯基膦 (8.00g， 30.6mmol) 的 THF 溶液中， 慢慢地加入 DEAD 溶液 (4.8mL， 30.6mmol)。将 反应混合物在室温下搅拌 3 小时。在二氧化硅上纯化， 得到 3-[2-(2- 碘代 - 苯氧基 )- 乙 基 ]- 噻吩。将 3-[2-(2- 碘代 - 苯氧基 )- 乙基 ]- 噻吩 (1.55g， 4.69mmol)， 乙酸钯 (II) (105mg， 0.47mmol)， 碳酸钾 (3.2g， 23.45mmol)， 三苯基膦 (246mg， 0.94mmol) 和氯化四乙铵 (1.3g， 4.69mmol) 在 DMF 中的混合物在 100℃下微波加热 1 小时。用二氯甲烷稀释反应， 然 后通过硅藻土过滤。将滤液用水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 并真空浓缩。在二氧化硅上纯化， 得到
     4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     在 0℃下， 向搅拌的 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(440mg， 2.2mmol)和乙酸 (10mL) 的二氯甲烷 (10mL) 溶液中， 分几份加入 N- 溴代琥珀酰亚胺。将反应混合物 搅拌 18 小时， 使溶液升温至室温， 而后真空浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯和饱和碳酸钠溶 液中。将有机相用水和盐水洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 真空浓缩， 得到 2- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     使用标准 Suzuki 偶合方法， 使 2- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂与 2- 氨基嘧啶 -5- 硼酸频哪醇酯反应。在二氧化硅上纯化， 用二乙醚研磨， 得到 163。1H NMR(400MHz， CDCl3)， 3.26(2H， t， J ＝ 5.14)， 4.37(2H， t， J ＝ 5.18)， 5.16(2H， Broad s)， 7.02-7.09(3H， m)， 7.16-7.22(1H， m)， 7.70(1H， d， J ＝ 7.91)， 8.56(2H， s)。MS ： (ESI+)396
     实施例 74 ： 3-(6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 164
     按照制备 256 的实施例 166 的方法， 将 N-(2- 氯苯基 )-10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺 (0.167g， 0.504mmol) 溶于 1， 4- 二 烷 (6.2mL) 中。加入 2， 4- 二 (4- 甲氧基苯基 )-2， 4- 二硫代 -1， 3， 2， 4- 二硫杂二磷杂环丁烷 ( 拉韦 松试剂， 0.153g， 0.378mmol)。将反应混合物在 85℃下搅拌过夜。浓缩反应混合物， 得到粗 品硫代酰胺中间体。向包含粗品硫代酰胺中间体的甲醇 (7.3mL) 溶液中加入肼 (1.180mL，37mmol)。 将反应混合物在室温下搅拌， 浓缩， 用二氯甲烷稀释， 用水和盐水洗涤， 并浓缩， 得 到粗品肼中间体。将粗品肼中间体密封在含有氯甲酸乙酯 (2.33mL， 0.014mol) 的管瓶中， 在 95℃下密封 1 天， 冷却至室温并浓缩。将粗品用快速色谱纯化 (50-100％ EtOAc/ 己烷 )， 得到 164( 产率 14％ )。MS ： (ESI+)381.1
     实 施 例 75 ： 4-(6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂 将 得 自 实 施 例 37 的 6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-9- 基 )-(5-(2- 氯苯基 ))- 噻唑 -2- 胺 165
     -9- 基 -(2- 氯苯基 )-2- 溴乙酮 (100.0mg， 0.230mmol) 和硫脲 (20.14mg， 0.264mmol) 在乙 醇 (5mL， 80mmol) 中加热 1 小时。将溶剂蒸发至一半体积， 由此通过静置使产物结晶。过滤 1 收集产物 165， 用冷的乙醇洗涤 ( 产率 43mg， 45％ )。 H NMR(400MHz， DMSO)δ8.15(d， J＝ 3.2， 1H)， 7.66(d， J ＝ 8.2， 1H)， 7.54(t， J ＝ 7.6， 2H)， 7.47(t， J ＝ 7.4， 1H)， 7.36(d， J＝ 8.1， 1H)， 7.16(dd， J ＝ 4.5， 8.1， 1H)， 6.73(s， 1H)， 5.80-4.90(m， 2H)， 4.24(t， J ＝ 4.7， 2H)， 3.04(t， J ＝ 4.7， 2H)。MS(ESI+)412.1
     实施例 76 N-(2- 氯苯基 )-8-(3- 乙基脲基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 166将 固 体 Pd2(dba)3(101mg， 0.11mmol) 和 BINAP(205mg， 0.33mmol) 加 入 到 10mL 烧 瓶中， 并全部用氮气吹扫。向烧瓶中加入 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并
     [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺 (500mg， 1.11mmol)， 二苯酮亚胺 (303mg， 1.67mmol)，NaOtBu(213mg， 2.22mmol) 和甲苯 (30mL)。在搅拌下将混合物加热到 80 ℃， 直到起始原 料已经耗尽为止 ( 用 TLC 分析测定 )。将混合物冷却至室温， 用 EtOAc 稀释， 过滤， 浓缩。 将粗品用柱色谱纯化 (5 ∶ 1 己烷∶乙酸乙酯 )， 得到 N-(2- 氯苯基 )-8-( 二苯亚甲基氨 基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺的黄色固体 (400mg， 产率 65％ )。将 N-(2- 氯苯基 )-8-( 二苯亚甲基氨基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 -2- 甲酰胺 (4.9g， 8.92mmol) 溶于 10mL MeOH 中。向溶液中加入 6mL CH3COCl/MeOH(1 ∶ 10)。将混合物在室温下搅拌 15 分钟， 而后将其真空浓缩。将残余物用 EtOAc 洗涤， 得到 8- 氨基 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 杂1 -2- 甲酰胺白色固体 (3.6g， 产率 95％ )。 H NMR(MeOD， 400MHz) ： δ7.59-6.60(m， 8H)，4.21(t， J ＝ 5.2Hz， 2H)， 3.31(s， 3H)， 2.96(t， J ＝ 4.8Hz， 2H)。
     向 8- 氨基 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺 HCl 盐 (0.25g， 0.593mmol) 的无水 THF(15mL) 溶液中加入 DIPEA(0.52mL，2.97mmol) 和异氰酸乙酯 (0.1g， 1.4mmol)。将溶液在 40℃下搅拌过夜。将反应混合物倒入 到氯化铵水溶液中， 并用 EtOAc 提取。 将有机相用盐水洗涤， 用无水 Na2SO4 干燥。 过滤后， 将 滤液浓缩， 得到粗品， 将其用制备 TLC 纯化， 得到大约 0.113g 的 166( 分离产率 ： 42％ )。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： δ8.56(s， 1H)， 7.64-7.58(m， 2H)， 7.49(t， J ＝ 3.6Hz， 2H)， 7.22(d， J ＝ 4.4Hz， 1H)， 7.15(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 6.92(dd， J ＝ 2.0， 8.4Hz， 1H)， 6.44(s， 1H)， 6.13(t， J ＝ 5.6Hz， 1H)， 4.09(d， J ＝ 4.4Hz， 2H)， 3.22(s， 3H)， 3.06(dd， J ＝ 6.0， 7.2Hz， 2H)， 2.85(s， 2H)， 1.01(t， J ＝ 7.2Hz， 3H)。MS ： (ESI+)456.1
     实施例 77 N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-(3- 甲基脲基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 167 -2- 甲酰胺和异氰酸甲酯， 得到 167。MS ： (ESI+)442.1按照实施例 76 的方法， 用 8- 氨基 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 实施例 78 N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8- 脲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -2- 甲酰胺 168 按照实施例 76 的方法， 使 8- 氨基 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 -2- 甲酰胺与羰基二咪唑和氯化铵反应， 得到 168。MS ： (ESI+)428.1 -2- 甲酰胺 169 实施例 79 N-(2- 氯苯基 )-8-(2-( 二乙基氨基 ) 乙酰胺基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     氧杂
     吩并 [2， 3-d] 氧杂
     苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 147 制备 237 的方法， 使 8-(2- 氯乙酰胺基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲 -2- 甲酰胺和二乙基胺起反应， 得到 169。基 -4， 5- 二氢 - 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂MS ： (ESI+)498.2
     实施例 80 N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-(2- 吗啉基乙酰胺基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 170 -2- 甲酰胺和吗啉反应， 得到 170。MS ：按照实施例 147 制备 237 的方法， 使 8-(2- 氯乙酰胺基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢 - 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(ESI+)512.2
     实施例 81 N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-(2-(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 乙酰胺基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 171按照实施例 147 制备 237 的方法， 使 8-(2- 氯乙酰胺基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢 - 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 171。MS ： (ESI+)525.3
     -2- 甲酰胺和 N- 甲基哌嗪起反应， 得到实 施 例 82 (3- 氯 -4-(3-(4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -4- 基 ) 苯基 )(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 甲酮 172
     使 3- 氯 -4-(3-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -4- 基 ) 苯甲酸 N- 甲基哌嗪按照与实施例 47 中制备 137 相似的方法反应， 得到 172。 MS ： (ESI+)506.2
     实施例 83 N2-(2- 氯苯基 )-N2- 甲基 -N8-( 吡啶 -3- 基甲基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] -2， 8- 二甲酰胺 173 -8- 甲酸甲基酯 138 和 3- 氨基甲基吡啶得到 173。MS ： 按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(ESI+)504.0
     实施例 84 N2-(2- 氯苯基 )-N8-(1-( 羟甲基 ) 环戊基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 174 -8- 甲酸甲基酯 138 和 1- 氨基 -1- 环戊烷甲醇得到 174。按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂MS ： (ESI+)511.0
     实 施 例 85 N2-(2- 氯 苯 基 )-N8-((S)-1- 羟 基 -3， 3- 二 甲 基 丁 -2- 基 )-N2- 甲 基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 175按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二 -8- 甲酸甲基酯 138 和 L- 缬氨醇 (valinol) 得到 175。氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂MS ： (ESI+)513.2
     实施例 86 N-(2- 氯苯基 )-8-(4- 羟基哌啶 -1- 羰基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 176 -8- 甲 酸 甲 基 酯 138 和 4- 羟 基 哌 啶 得 到 176。MS ：按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂(ESI+)497.2
     实施例 87 N2-(2- 氯苯基 )-N8-((S)-2- 羟基丙基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 177按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 177。MS ： (ESI+)471.0
     -8- 甲酸甲基酯 138 和 (S)-(+)-1- 氨基 -2- 丙醇得到实施例 88 N2-(2- 氯苯基 )-N8-((S)-1- 羟基丙 -2- 基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯 -2， 8- 二甲酰胺 178 -8- 甲酸甲基酯 138 和 L- 丙氨醇得到 178。 MS ： (ESI+)471.1 -2， 8- 二甲酰胺 179 按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢 实施例 89 N2-(2- 氯 -4-( 甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N2， N8- 二甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 91， 向 4-(8- 溴 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰氨基 )-3- 氯苯 -2- 甲酰胺。-2- 甲酰氨基 )-3- 氯苯甲酸甲基酯的四氢呋喃和水溶液中加入氢氧化锂 ( 一水合物 )， 得 到 4-(8- 溴 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     甲酸， 将其与甲胺、 HBTU 和 DIEA 在二氯甲烷中偶合， 得到 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-( 甲基氨基甲 向包含 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-( 甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 -2- 甲酰胺和甲胺的四氢呋喃溶液中加入六羰基钼， 反式 - 二[b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(mu- 乙酸基 ) 二 [O-( 二 -O- 甲苯基膦基 ) 苄基 ] 二钯 (II)。然后加入 1， 8- 二氮杂双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (DBU)， 快速加上封盖， 以防 CO 气体逃逸。 将反应混合物在微波中加热， 然后用 EtOAc 稀释。然后通过硅藻土过滤。干燥 (Na2SO4) 合并的有机物， 过滤， 浓缩。将粗 品上 RP HPLC， 得到 179。MS ： (ESI+)484.1
     实施例 90 N-(2- 氯 -4-( 甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-8- 氰基 -N- 甲基 -4， 5- 二氢 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 180
     按照实施例 53， 用 4-(8- 溴 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸甲基酯。-2- 甲酰氨基 )-3- 氯苯甲酸甲基酯和 CuCN， 得到 3- 氯 -4-(8- 氰基 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯 并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 91， 将 3- 氯 -4-(8- 氰基 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸甲基酯用氢氧化锂在 THF 和水中皂化， 然后使羧酸与甲胺、氧杂HBTU、 DIEA 在二氯甲烷中偶合， 得到 180。MS ： (ESI+)452.1
     实施例 91 N2-(2- 氯 -4-(4- 甲基哌嗪 -1- 羰基 ) 苯基 )-N2， N8- 二甲基 -4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 181向包含 3- 氯 -4-( 甲基氨基 ) 苯甲酸甲基酯 (0.184g， 0.922mmol) 的 N， N- 二甲 基甲酰胺 (11.0mL， 142mmol) 溶液中加入氢化钠 (0.0369g， 0.922mmol)。将混合物在室温
     下搅拌 30 分钟， 然后加入 8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 羰基氯用 DCM 提 (0.288g， 0.838mmol)。 将反应混合物搅拌 16 小时。 用饱和 NH4Cl 淬灭反应混合物， 取 (2x)。将合并的有机物干燥 (Na2SO4)， 过滤， 浓缩。将粗品用快速色谱法纯化 (EtOAc/ 己 烷 (0-100％ ))， 得到 4-(8- 溴 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 酰氨基 )-3- 氯苯甲酸甲基酯 ( 产率 65％ )。MS ： (ESI+)508.2
     -2- 甲
     向 4-(8- 溴 -N- 甲 基 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 甲 酰氨 基 )-3- 氯 苯 甲 酸 甲 基 酯 (0.180g， 0.355mmol) 的 四 氢 呋 喃 (6.00mL， 74.0mmol) 和 水 (6.00mL， 333mmol) 溶液中加入氢氧化锂， 一水合物 (0.0596g， 1.42mmol)。将反应混合物 在室温下搅拌过夜。将反应混合物浓缩。将反应混合物用 1M HCl 酸化， 然后用 DCM 提取 (3X)。将合并的有机物干燥 (Na2SO4)， 过滤和浓缩， 得到 4-(8- 溴 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰氨基 )-3- 氯苯甲酸。向 4-(8- 溴 -N- 甲基 -4， 5- 二 -2- 甲酰氨基 )-3- 氯苯甲酸 (175mg， 0.355mmol ； )的 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂二氯甲烷 (5.1mL， 79mmol) 溶液中加入 1- 甲基 - 哌嗪， (0.047mL， 0.43mmol)， N， N- 二异丙 基乙胺 (0.618mL， 3.55mmol)， 然后加入 O-( 苯并三唑 -1- 基 )-N， N， N′， N′ - 四甲基脲六 氟磷酸盐 (0.269g， 0.710mmol)。将混合物在室温下搅拌 2 小时。LCMS 表明反应完成。将 反应用饱和 NH4Cl 淬灭， 用 DCM 提取 (2x)。将合并的有机物干燥 (Na2SO4)， 过滤和浓缩。将 粗品用快速色谱法纯化 (5％ MeOH/DCM)， 得到 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-(4- 甲基哌嗪 -1- 羰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺 ( 产率 82％ )。MS ： (ESI+)576.4
     向包含 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-(4- 甲基哌嗪 -1- 羰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺 (0.075g， 0.13mmol) 的四氢呋喃 (1.50mL， 18.5mmol) 溶 液、 2.00M 甲 胺 的 四 氢 呋 喃 (0.196mL) 溶 液 中 加 入 六 羰 基 钼 (34.4mg， 0.130mmol)， 反 式 - 二 (mu- 乙酸基 ) 二 [O-( 二 -O- 甲苯基膦基 ) 苄基 ] 二钯 (II)(18.3mg， 0.0196mmol)， 然后加入 1， 8- 二氮杂双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (9.75ul， 0.0652mmol)， 快速封盖以防止 CO 气体逃逸。 将反应混合物在 150℃下用微波加热 20 分钟。 用 EtOAc 稀释反应混合物， 然后通 过硅藻土过滤。干燥 (Na2SO4) 合并的有机物， 过滤， 浓缩。将粗品上 RP HPLC， 得到 181( 产 率 32％ )。MS ： (ESI+)553.2
     实施例 92 N-(2- 氯 -4-(4- 甲基哌嗪 -1- 羰基 ) 苯基 )-8- 氰基 -N- 甲基 -4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 182 -2- 甲 酰 胺 和 CuCN， 得 到 182。MS ：按照实施例 53 和 91， 用 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-(4- 甲基哌嗪 -1- 羰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂(ESI+)521.2
     实施例 93 N-(3- 氯代吡啶 -4- 基 )-N- 甲基 -8-(1H- 吡唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 183
     将 8- 溴 -N- 甲基 -(3- 氯代吡啶 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺， (0.050g， 0.100mmol)， 4， 4， 5， 5， - 四甲基 -2-(1H- 吡唑基 -4- 基 )-1， 3，2- 二氧杂硼烷 (0.033g， 0.173mmol)， 四 ( 三苯基膦 ) 钯 (0)0.0133g， 0.0115mmol)， 和 1M 碳酸钠水溶液 (0.2mL， 0.2mmol) 的 1mL DMF 溶液在埃姆里优化器 (Emry Optimizer) 中在 150℃下快速微波加热 10 分钟。然后将反应混合物用 EtOAc 稀释， 用水和盐水洗涤， 浓缩得 到固体残余物， 将其以 100mg/mL 的浓度溶解在 DMF 中， 用制备 RP-HPLC 纯化， 得到 183( 产 率＝理论产率的 25％ )。MS ： (ESI+)437.1
     实施例 94 N-(3- 氯代吡啶 -4- 基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 184
     按照实施例 17， 使 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 碳酰氯和 4- 氨基 -3- 氯吡啶反应， 得到 N-(3- 氯代吡啶 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺。向 N-(3- 氯代吡啶 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲 酰胺 (0.340g， 0.953mmol) 的 DMF(5mL， 60mmol) 溶液中加入氢化钠 (0.0381g， 0.953mmol)。 将反应混合物在室温下搅拌大约 10 分钟。而后加入甲基碘 (65.25ul， 1.048mmol)， 并在室 温下搅拌另外 1 小时。用 LC/MS 分析等分样品， 显示全部转化为目标产物。将反应混合物 用 EtOAc 稀释， 用水 / 盐水洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 然后浓缩， 得到残余物， 将其用 LC/MS 和 1H NMR 分析。将粗品以大约 100mg/mL 溶解在 DMF 中， 但没有完全溶解。将可溶物质用制备的 RP-HPLC 纯化， 得到 184( 产率为理论产率的 30％ )。MS ： (ESI+)372.2
     实施例 95 N8-(2- 氨乙基 )-N2-(2- 氯苯基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 185 -8- 甲酸甲基酯 138 和乙二胺得到 185。MS ： (ESI+)456.0按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢 或者， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d]220苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     102333779 A CN 102333793说明书185/280 页氧杂
     -8- 羰基氯和乙二胺得到 185。MS(ESI)456.0 实施例 96 N8-(2- 乙酰胺基乙基 )-N2-(2- 氯苯基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] -2， 8- 二甲酰胺 186 -8- 甲酸甲基酯 138 和 N- 乙酰基乙二胺得到 186。MS ： 按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 (ESI+)498.0
     或者， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和 N-(2- 氨乙基 ) 乙酰胺得到 186。MS(ESI)498.0 实施例 97 N2-(2- 氯苯基 )-N2- 甲基 -N8-(2-( 甲基氨基 ) 乙基 )-4， 5- 二氢苯并 -2， 8- 二甲酰胺 187 -8- 甲酸甲基酯 138 和 N- 甲基乙二胺得到 187。MS ： 按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氧杂
     [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(ESI+)470.1
     或者， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 羰基氯和 N1- 甲基乙烷 -1， 2- 二胺得到 187。MS(ESI) ： 470.1 实施例 98 N2-(2- 氯苯基 )-N8- 甲氧基 -N2， N8- 二甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 -2， 8- 二甲酰胺 188 -8- 甲酸甲基酯 138 和 N， O- 二甲基羟胺得到 188。MS ： 按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二并 [2， 3-d] 氧杂
     氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(ESI+)457.0
     或者， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 羰基氯和 N， O- 二甲基羟胺盐酸盐得到 188。MS(ESI)457.0 实施例 99 N2-(2- 氯苯基 )-N8- 甲氧基 -N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2， 8- 二甲酰胺 189 -8- 甲 酸 甲 基 酯 138 和 O- 甲 基 羟 胺 得 到 189。MS ： 按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二3-d] 氧杂
     氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂(ESI+)443.1
     或者， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 羰基氯和 O- 甲基盐酸羟胺得到 189。MS(ESI)443.1 实施例 100 N-(2- 氯苯基 )-8-( 羟甲基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 甲酰胺 1903-d] 氧杂
     在 0℃下， 向 2-[(2- 氯 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酰基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -8- 甲酸甲基酯 (1g， 2.3mmol) 的干燥 THF(30mL) 溶液中分批加入氢化 锂铝 (174mg， 4.6mmol)。 将得到的混合物在氮气氛下搅拌 30 分钟。 用 LC-MS 监控反应。 当起 始原料消失时， 将反应混合物通过缓慢加入水和 10％ NaOH 水溶液猝灭。过滤后， 浓缩滤液 得到粗品， 将其用 MeOH 重结晶， 得到 190 的黄色固体 (450mg， 产率 48.9％ )。MS(ESI)399.8
     实施例 101 N-(2- 氯 -4-(1- 羟基丙 -2- 基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 (10- 氮
     杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     )-2- 甲酰胺 191按照实施例 124 制备 214 的方法， 使 3- 氯 -4-(N- 甲基， 10- 氮杂， 4， 5- 二氢苯并 -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸甲酯和 2- 氨基丙 -1- 醇反应得到 191。[b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂MS ： (ESI+)472.1
     实施例 102 N-(2- 氯 -4-(2- 羟基丙基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 (10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     )-2- 甲酰胺 192按照实施例 124 制备 214 的方法， 使 3- 氯 -4-(N- 甲基， 10- 氮杂， 4， 5- 二氢苯并 -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸甲酯和 1- 氨基丙 -2- 醇反应得到 192。[b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂MS ： (ESI+)472.1
     实施例 103 N-(2- 氯 -4-( 哌嗪 -1- 羰基 ) 苯基 )-N- 甲基 (10- 氮杂 -4， 5- 二氢 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     )-2- 甲酰胺 193 -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸甲酯和哌嗪反应得到 193。MS ：按 照 实 施 例 124 制 备 214 的 方 法， 使 3- 氯 -4-(N- 甲 基， 10- 氮 杂， 4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(ESI+)483.2
     实施例 104 N8-(3-(1H- 咪唑 -1- 基 ) 丙基 )-N2-(2- 氯苯基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 194 -8- 甲酸甲基酯 138 和 2-( 咪唑 -1- 基 )- 乙胺得到 194。按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂MS ： (ESI+)520.8
     或者， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 羰基氯和 3-(1H- 咪唑 -1- 基 ) 丙 -1- 胺得到 194。MS(ESI)520.8 实施例 105 N8-(2- 氨基 -2- 甲基丙基 )-N2-(2- 氯苯基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 195 -8- 甲酸甲基酯 138 和 3- 甲基 -1， 3- 丁二胺得到 195。按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂MS ： (ESI+)484.1
     或者， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 羰基氯和 2- 甲基丙烷 -1， 2- 二胺得到 195。MS(ESI) ： 484.1 实施例 106 8-(3-( 氨甲基 ) 苯基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] -2- 甲酰胺 196 -2- 甲酰胺 150 和 (3- 氨基苯基 ) 硼酸 Suzuki 偶合， 得到 196。 -2- 甲酰胺 197 按照实施例 93 的方法， 使 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 实施例 107 N-(2- 氯苯基 )-8-((2-( 二甲基氨基 ) 乙胺基 ) 甲基 )-N- 甲基 -4， 使用实施例 153 的方法， 使 8-( 溴甲基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 -2- 甲酰胺与 N1， N1- 二甲基乙烷 -1， 2- 二胺反应， 得到 197。 实施例 108 2-(3-(2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 -8- 基 ) 苯基 ) 乙酸 198 将 2-(3-(2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -8- 基 ) 苯基 ) 乙酸甲基酯 200 用氢氧化锂在 THF 和水中处理， 得到 198。MS ：噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     吩并 [2， 3-d] 氧杂
     5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     吩并 [2， 3-d] 氧杂
     3-d] 氧杂(ESI+)503.7
     实施例 109 N-(2- 氯苯基 )-8-(3- 氰基苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 199 -2- 甲酰胺 150 和 3- 氰基苯基硼酸 Suzuki 偶合， 得到 199。MS ：按照实施例 93 的方法， 使 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b]噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(ESI+)471.1
     实施例 110 2-(3-(2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 基 ) 苯基 ) 乙酸甲基酯 200
     按照实施例 93 的方法， 使 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 -2- 甲酰胺 150， 2-(3-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧杂硼杂环戊吩并 [2， 3-d] 氧杂烷 -2- 基 ) 苯基 ) 乙酸甲基酯， 乙酸钾， 和 Pd(dppf)Cl2 在乙腈和 DMSO 中在 80℃加热过夜， 得到 200。MS ： (ESI+)518.2
     实施例 111 N-(2- 氯苯基 )-8-(3-( 羟甲基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b]223102333779 A CN 102333793说-2- 甲酰胺 201明书188/280 页噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 93 的方法， 使 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 -2- 甲酰胺 150 和 3- 羟基甲基苯基硼酸反应得到 201。 MS ： (ESI+)476.16 -2- 甲酰胺 202 -8- 甲酸甲酯 138 和 N- 甲基哌嗪得到 202。 MS ： (ESI+)496.2 实施例 112 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-(4- 甲基哌嗪 -1- 羰基 )-4， 5- 二氢苯并并 [2， 3-d] 氧杂
     [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢 或者， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和 1- 甲基哌嗪得到 202。MS(ESI)496.2 实施例 113 ： N2-(2- 氯苯基 )-N2- 甲基 -N8-(2-(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 乙基 )-4， -2， 8- 二甲酰胺 203苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     氧杂
     5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二 -8- 甲酸甲酯 138 和 1-(N- 氨乙基 )-4- 甲基哌嗪得到氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 203。MS ： (ESI+)539.2
     或者， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和 2-(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 乙胺得到 203。MS(ESI)539.2 实施例 114 ： N2-(2- 氯苯基 )-N8-(2-( 二甲基氨基 ) 乙基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢 -2， 8- 二甲酰胺 204 -8- 甲酸甲酯 138 和 N， N′ - 二甲基乙二胺得到 204。MS ： 按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢氧杂
     苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(ESI+)484.0
     或者， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 羰基氯和 N1， N1- 二甲基乙烷 -1， 2- 二胺得到 204。MS(ESI)484.0 实施例 115 ： N2-(2- 氯苯基 )-N8- 异丙基 -N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 -2， 8- 二甲酰胺 205 -8- 甲酸甲酯 138 和异丙胺得到 205。MS ： (ESI+)455.0 按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢 或者， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和异丙胺得到 205。MS(ESI)455.0 实施例 116 ： N2-(2- 氯苯基 )-N8- 乙基 -N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2， 8- 二甲酰胺 206 -8- 甲酸甲酯 138 和乙胺得到 206。MS ： (ESI+)441.0[2， 3-d] 氧杂
     苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     氧杂
     3-d] 氧杂
     按照实施例 47 和一般方法 C， 由 2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢 实施例 117 ： N-(3- 氯代吡啶 -2- 基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -2- 甲酰胺 207224苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     氧杂102333779 A CN 102333793
     说明书189/280 页
     使 冰 水 冷 却 的 2- 氨 基 -3- 氯 吡 啶 (0.200g， 0.755mmol) 的 四 氢 呋 喃 (1.5mL， 18mmol) 溶液与 1M 六甲基二硅氮烷钠的 THF 溶液反应， 得到澄清溶液。将该反应混合物在 冷却的温度下搅拌 30 分钟。接下来， 分批地加入 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 碳酰氯 (0.100g， 0.378mmol) 固体。 在室温下搅拌反应混合物， 监控目标产物的形成，真空浓缩， 得到固体残余物。 将该残余物接纳在乙酸乙酯中， 用水、 然后盐水洗涤有机物， 干 燥 (Na2SO4)。用 MPLC( 在二氧化硅上 ) 纯化粗品， 用 10％至 80％乙酸乙酯 / 己烷洗脱， 得到 128mg N-(3- 氯代吡啶 -2- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 论收率的 34％。
     -2- 甲酰胺， 理 -2- 甲酰向 N-(3- 氯代吡啶 -2- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂胺的乙腈溶液 (0.702mL) 中加入六甲基二硅氮烷 (0.029mL， 0.140mmol)， 并回流加热 3 小 时。 将氯 ( 氯甲基 ) 二甲基甲硅烷 (0.029mL， 0.224mmol) 滴加加到回流溶液中， 并使反应混 合物回流过夜。接下来， 将反应混合物平衡至室温， 浓缩， 得到固体残余物。将该固体接纳 在二甘醇二甲醚 (2mL， 10mmol) 中， 在回流条件下用氟化铯 (0.21g， 1.4mmol) 处理 3 小时。 将反应混合物冷却至室温， 用水和乙酸乙酯稀释。在分液漏斗中， 从水溶液中分离有机物。 用盐水洗涤有机物， 干燥 (Na2SO4)， 浓缩， 得到固体。 将该粗品接纳在甲醇中 (100mg/ml)， 用 RP-HPLC 纯化， 得到 24mg 207， 理论收率的 29％。MS ： (ESI+)371.1
     实施例 118 ： N- 甲基 -N-(4-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 208 -2- 碳按照制备 207 的实施例 X， 使 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂酰氯和 3- 氨基 -4- 三氟甲基吡啶反应， 而后甲基化， 得到 208( 理论产率的 8 ％ )。MS ： (ESI+)344.1
     实 施 例 119 ： 3- 氯 -4-(3-(4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -4- 基 )-N- 甲基苯甲酰胺 209
     利用与实施例 47 中制备 137 相似的方法， 3- 氯 -4-(3-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -4- 基 ) 苯甲酸和甲胺进行反应， 得到 209。MS ： (ESI+)437.1
     实施例 120 ： N-(2- 氯苯基 )-8-(2-( 二甲基氨基 ) 乙酰胺基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 210 -2- 甲酰胺与二甲胺反应， 得到 210。MS ：按照实施例 147 中合成 237 的方法， 使 8-(2- 氯乙酰胺基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 (ESI+)470.2225102333779 A CN 102333793
     说-2- 甲酰胺 211明书190/280 页实施例 121 ： 8-(2- 乙酰胺基乙酰胺基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并[b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 147 中制备 237 的方法， 8-(2- 氯乙酰胺基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲 -2- 甲酰胺和乙酰胺反应， 得到 211。MS ：基 -4， 5- 二氢 - 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 (ESI+)484.1
     实施例 122 ： 3-(8-(1H- 吡唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-4， 5- 二氢 -1， 2， 4- 三嗪 -6(1H)- 酮 212
     按照实施例 44 中制备 134 的方法， 3-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -2- 基 )-4， 5- 二氢 -1， 2， 4- 三嗪 -6(1H)- 酮和 4-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧氧杂杂硼杂环戊烷 -2- 基 )-1H- 吡唑反应， 得到 212。MS ： (ESI+)366.2
     实施例 123 ： N-(2- 氯 -4-( 甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 (10- 氮杂， 4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 213按 照 实 施 例 124 中 制 备 214 的 方 法， 3- 氯 -4-(N- 甲 基， 10- 氮 杂， 4， 5- 二 氢 苯 -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸甲酯和甲胺反应， 得到 213。MS ：并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(ESI+)428.1
     实施例 124 ： N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 (10- 氮杂， 4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     )-2- 甲酰胺 214
     向实施例 10 的 10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酸16(0.350g， 1.42mmol ； ) 的二氯甲烷溶液 (3.68mL， 57.4mmol) 中加入亚硫酰氯 (0.310mL， 4.25mmol ； )。 在 80℃将混合物搅拌 2 小时。 真空浓缩反应混合物。 将粗品酰基氯 (0.424g， 2.12mmol) 溶于四氢呋喃 (10.4mL， 129mmol ； ) 中， 加入 1.00M 二 ( 三甲基甲硅烷基 ) 氨基钠 的四氢呋喃溶液 (2.12mL)。 在室温下搅拌反应混合物 1 小时， 然后在 0℃加入 3- 氯 -4-( 甲基氨基 ) 苯甲酸甲酯。搅拌反应混合物过夜， 用饱和 NH4Cl 淬灭， 用 DCM 提取 (2x)。干燥 (Na2SO4) 合并的有机物， 过滤， 浓缩。用快速色谱 (EtOAc/ 己烷 (0-100％ )) 纯化粗品 ( 在 70 ％ EtOAc 时洗脱出 )， 得到 3- 氯 -4-(N- 甲基， 10- 氮杂， 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸甲酯 ( 产率 77％ )。MS ： (ESI+)430.0将 甲 酯 3- 氯 -4-(N- 甲 基， 10- 氮 杂， 4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸甲酯水解， 并将得到的酸 (53.0mg， 0.128mmol ； ) 溶于二氯甲烷 (1.8mL， 28mmol) 中。 加入盐酸二甲胺 (0.0208g， 0.256mmol)、 N， N- 二异丙基乙胺 (0.222mL， 1.28mmol) 和 N， N， N′， N′ - 四甲基 -O-(7- 氮杂苯并三唑 -1- 基 ) 脲六氟磷酸盐 (0.0972g， 0.256mmol)。在室温下搅拌混合物 2 小时， 由此 LCMS 表明反应完成。用饱和 NH4Cl 淬灭反 应， 用 DCM 提取 (2x)。干燥 (Na2SO4) 合并的有机物， 过滤， 浓缩。用快速色谱 (MeOH/DCM) 纯 化粗品 ( 在 5％ MeOH 时洗脱出 )， 得到 214( 产率 88％ )。MS ： (ESI+)442.1
     实施例 125 ： N-(2- 氯 -4-(4- 甲基哌嗪 -1- 羰基 ) 苯基 )-N- 甲基 (10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     )-2- 甲酰胺 215按照实施例 124 中制备 214 的方法， 使 3- 氯 -4-(N- 甲基， 10- 氮杂， 4， 5- 二氢苯 -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸甲酯和 1- 甲基哌嗪反应， 得到 215。并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂MS ： (ESI+)497.2
     实施例 126 ： 2-(2- 氨基 -5-(2- 氯苯基 ) 噻唑 -4- 基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 甲酰胺 216按照实施例 13 的方法和一般方法 C， 由 4-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 基 )-5-(2- 氯苯基 ) 噻唑 -2- 胺 271 和甲胺 (1.0M， 在四氢呋喃中 ) 得到3-d] 氧杂216。MS ： (ESI+)468.1
     实施例 127 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 甲基 -4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 甲酰胺 217按照实施例 13 的方法和一般方法 C， 由 3-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-5- 甲基 -4H-1， 2， 4- 三唑和甲胺 (1.0M， 在四氢呋喃 -2- 基 )(3， 4- 二氢喹3-d] 氧杂
     中 ) 得到 217。MS ： (ESI+)451.1 实施例 128 ： (4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂啉 -1(2H)- 基 ) 甲酮 218
     向 1， 2， 3， 4- 四氢喹啉 (0.755mmol) 和三乙胺 (0.105mL， 0.755mmol) 的四氢呋喃 (1.5mL， 18mmol) 溶液中分批地加入 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 碳酰 氯 (0.100g， 0.378mmol) 固体。在室温下搅拌反应， 监控目标产物的形成。搅拌反应过夜。 对水溶液处理之后， 将粗品接纳在 DMF 中 (100mg/1mL 的浓度 )， 用制备 RP-HPLC 纯化， 得到 218( 理论产率的 80％ )。MS ： (ESI+)362.2
     实施例 129 ： N- 甲基 -N-(4-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 219按照实施例 117 制备 207 的方法， 使 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 碳酰氯和 3- 氨基 -4- 氯吡啶反应， 而后甲基化， 得到 219( 理论产率的 29 ％ )。MS ： (ESI+)371.2
     实施例 130 ： N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 220按照实施例 91 的方法， 3- 氯 -4-(N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和二甲胺反应， 得到 220( 产率 50％ )。 MS ： (ESI+)471.1 -2- 甲酰胺 221 实施例 131 ： N- 甲基 -N-(4-( 三氟甲基 ) 吡啶 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并3-d] 氧杂
     [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 91， 3- 氯 -4-(N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 实施例 132 ： N2-(2- 氯 -4-( 哌嗪 -1- 羰基 ) 苯基 )-N2， N8- 二甲基 -4， 5- 二氢苯 -2， 8- 二甲酰胺 222杂-2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和 1- 甲基哌嗪反应， 得到 221( 产率 30％ )。MS ： (ESI+)526.2
     并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 91 制备 181 的方法， 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-( 哌嗪 -1- 羰基 ) 苯基 )-N- 甲 -2- 甲 酰 胺 和 甲 胺 反 应， 得 到 222。MS ：基 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂(ESI+)539.2
     实施例 133 ： N2-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N2， N8- 二甲基 -4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 223 -2- 甲酰胺、 甲胺按照实施例 91 制备 181 的方法， 在钯催化剂条件下， 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂和六羰基钼反应， 得到 223。MS ： (ESI+)498.1。
     步骤 1 ： 4- 氨基 -3- 氯 -N， N- 二甲基苯甲酰胺的制备
     将 DIPEA(116mL， 699.5mmol) 加 入 到 盐 酸 二 甲 胺 (28.51g， 349.6mmol) 的 THF(600mL) 悬浮液中。在室温下将混合物搅拌 0.5 小时。然后将 4- 氨基 -3- 氯苯甲酸 (30.00g， 174.8mmol) 和 HATU(86.41g， 227.2mmol) 分别加入到上述悬浮液中。继续搅拌反 应混合物 1.5 小时。然后将其浓缩， 并在 EtOAc(300mL) 和水 (150mL) 之间分配残余物。将 分离的有机相用水洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 真空蒸发。用硅胶色谱纯化粗品， 用己烷∶ EtOAc ＝ 1 ∶ 1 洗脱， 得到 4- 氨基 -3- 氯 -N， N- 二甲基苯甲酰胺 (34.72g， 产率 ： 89％ )。ESI-MS ： 1 199.06。 HNMR(CDCl3， 400MHz) ： δ7.39(s， 1H， ArH)， 7.19(d， J ＝ 8.4Hz， 1H， ArH)， 6.74(d， 2H， NH2)， 3.05(s， 6H， 2CH3)。 J ＝ 8.4Hz， 1H， ArH)， 4.24(br，
     步骤 2 ： 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-4， 5- 二氢 - 苯并 [b] 噻
     吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺的制备
     将 8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 甲 酸 (25.00g，76.9mmol) 的 SOCl2(200mL) 溶液在 90-100 ℃加热 3 小时。浓缩反应混合物， 得到粗品酰 基氯。在 0 ℃， 将酰基氯的 THF(600mL) 悬浮液用 4- 氨基 -3- 氯 -N， N- 二甲基苯甲酰胺 (18.23g， 92.3mmol) 和吡啶 (14mL) 的 THF(200mL) 溶液处理。使混合物达到室温， 搅拌过 夜。浓缩后， 将水 (200mL) 加入到混合物中。过滤收集得到的沉淀， 用水洗涤， 干燥， 得到 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-4， 5- 二氢 - 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲 酰 胺 (29.88g， 产率 ： 77 ％ )。ESI-MS ： 504.99。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： δ10.14(s， 1H， NH)， 7.86(s， 1H， ArH)， 7.67-7.57(m， 3H， ArH)， 7.40-7.25(m， 3H， ArH)， 4.32(t， J ＝ 5.2Hz， 2H， CH2)， 3.21(t， J ＝ 5.2Hz， 2H， CH2)， 2.95(s， 3H， CH3)， 2.92(s， 3H， CH3)。
     步骤 3 ： 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 (5) 的制备
     向 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-4， 5- 二氢 - 苯并 [b] 噻吩并 -2- 甲酰胺 (29.0g， 57.3mmol)、 Cs2CO3(37.40g， 114.7mmol) 的 DMF(600mL)[2， 3-d] 氧杂溶液中慢慢地加入 CH3I(30mL， 479.8mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜。浓缩除去大 约 200mL DMF， 而后将水 (100mL) 加入到混合物中。过滤得到的沉淀， 用水洗涤， 干燥， 得到 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺 (29.50g， 产率 ： 99％ )。ESI-MS ： 519.4。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： δ7.72-7.68(m， 2H， ArH)， 7.52-7.49(m， 1H， ArH)， 7.30-7.20(m， 3H， ArH)， 6.76(s， 1H， ＝ CH)， 4.19(s， 2H， CH2)， 3.29(s， 3H， CH3)， 3.00(s， 3H， CH3)， 2.96(s， 2H， CH2)， 2.93(s， 3H， CH3)。
     步骤 4 ： 2-((2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )( 甲基 )- 氨基甲酰基 )-4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 甲酸甲酯的制备
     在 CO(50psi) 氛围中， 在 70 ℃， 将 8- 溴 -N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯 -2- 甲酰胺 (27.0g， 51.9mmol)、基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂dppf(23.20g ， 41.9mmol) 、 Pd(OAc) 2(5.8g ， 25.8mmol) 、 TEA(27mL) 在 DMF(270mL) 和 MeOH(400mL) 中的混合物搅拌 2 天。 过滤反应混合物， 浓缩滤液。 用硅胶色谱纯化粗品， 用己 烷∶ EtOAc ＝ 1 ∶ 1 洗脱， 得到 2-((2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )( 甲基 )- 氨基甲 酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂1-8- 甲酸甲酯 (23.00g， 89％ )。ESI-MS ：499.1。H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： δ7.74-7.69(m， 2H， ArH)， 7.58-7.47(m， 4H， ArH)， 6.79(s， 1H， ＝ CH)， 4.23(t， J ＝ 4.8Hz， 2H， CH2)， 3.83(s， 3H， CH3)， 3.31(s， 3H， CH3)， 3.01(br， 5H， CH2， CH3)， 2.94(s， 3H， CH3)。
     步骤 5 ： 2-((2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 甲酸的制备
     将 2-((2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )( 甲基 )- 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢 -8- 甲酸甲酯 (25.00g， 50.1mmol) 溶于 THF(50mL) 和水苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂125.3mmol) 处理溶液。在室温下搅拌反应混合物 2 小 (50mL) 中。用 LiOH·H2O(5.26g， 时。浓缩除去溶剂 THF， 并用 2NHCl 酸化混合物。将得到的沉淀过滤， 用水洗涤， 干燥， 得到 2-((2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂 -8- 甲 酸 (20.00g， 82 ％ )。ESI-MS ： 485.1。1HNMR(CDCl3， 400MHz) ： δ7.66-7.60(m， 3H， ArH)， 7.46-7.42(m， 3H， ArH)， 6.99(s， 1H， ＝ CH)， 4.23(t， J ＝ 5.0Hz， 3.39(s， 3H， CH3)， 3.14(s， 3H， CH3)， 3.07(t， J ＝ 5.0Hz， 2H， CH2)， 3.02(s， 3H， CH3)。 2H， CH2)，
     步骤 6 ： N2-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N2， N8- 二甲基 -4， 5- 二氢苯 并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 8- 二甲酰胺 223 的制备将 DIPEA(16.83g， 130.2mmol) 加入到 H2NMe· HCl(5.02g， 74.4mmol) 的 THF(180mL) 悬浮液中， 并在室温下搅拌 0.5 小时。将 2-((2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )( 甲 -8- 甲酸 (9.00g， 18.6mmol)基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂和 HATU(21.22g， 55.8mmol) 分别加入到悬浮液中。在室温下搅拌反应混合物 2 小时。浓 缩除去溶剂， 将得到的混合物溶于 CH2Cl2(200mL) 中， 用 2N HCl(200mL)、 水 (100mL) 洗涤， 用 Na2SO4 干燥。用硅胶色谱纯化粗品， 用 CH2Cl2 ∶ MeOH ＝ 10 ∶ 1(3.70g， 40％ ) 洗脱， 提 1 供 223。ESI-MS ： 498。 H NMR(CDCl3， 400MHz) ： δ7.58(s， 1H， ArH)， 7.42-7.29(m， 4H， ArH)， 6.92(s， 1H， ArH)， 6.34(d， J ＝ 4.0Hz， 1H， NH)， 4.20(t， J ＝ 5.0Hz， 2H， CH2)， 3.37(s， 3H， CH3)， 3.12(s， 3H， CH3)， 3.04-2.98(m， 8H， CH2， 2CH3)。
     实施例 134 ： 3-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-4- 异丙基 -4H-1， 2， 4- 三唑 224
     在氮气氛围中， 向 8- 溴 -N- 异丙基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺 (180mg， 0.49mmol) 的 5mL 甲苯溶液中加入五氯化磷 (0.184g， 0.88mmol)， 并在 80℃加热反应混合物 2 小时。 将混合物冷却， 并小心浓缩。 将粗品残余物溶于 10mL THF 中， 并用甲酰肼 (118mg， 2.0mmol) 和碳酸钾 (0.340g， 2.46mmol) 顺序处理。在室温下搅拌混合 物过夜， 用水稀释， 用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤合并的有机物， 用硫酸钠干燥， 浓缩。将粗 品残余物溶于甲苯 (10mL) 中， 并用对甲苯磺酸 (15mg， 0.087mmol) 处理。将全部密封， 并在 90℃下加热 15 分钟。将反应混合物冷却至室温， 浓缩， 用乙酸乙酯稀释， 用水、 碳酸氢钠和 盐水洗涤。用硫酸钠干燥有机物， 浓缩， 得到 224 粗品， 其不用纯化就可以用于随后的操作 中。 为了分析目的， 用反相 HPLC 将少量物质纯化。 1H NMR(dmso-d6， 400MHz)δ11.98.84(s， 1H)， 7.65(d， 1H)， 7.45(s， 1H)， 7.32-7.27(m， 2H)， 4.75(m， 1H)， 4.34(t， 2H)， 3.25(t， 2H)，1.48(d， 6H)。MS(ESI)392.1
     实施例 135 ： 3-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-4-(1- 甲基哌啶 -4- 基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮 225
     使用与实施例 175 所描述方法相似的方法， 由 N-(1- 甲基哌啶 -4- 基 )-4， 5- 二氢 -2- 甲酰胺制备， 得到 225。MS(ESI)383.2苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     实施例 136 ： 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (2- 氯 - 苯基 )- 甲基 - 酰胺 226向苯酚 (3.16g， 33.6mmol) 的乙腈溶液中加入 4- 溴丁酸乙酯 (4.8mL， 33.6mmol)、 碳酸钾 (4.64g， 33.6mmol) 和碘化四丁铵 (370mg， 1mmol)。大力搅拌反应混合物， 加热到回 流， 保持 2 天， 而后冷却， 过滤， 干燥 (MgSO4)， 真空浓缩， 得到 4- 苯氧基 - 丁酸乙酯。使用氢 氧化钠介导的水解， 将 4- 苯氧基 - 丁酸乙酯水解为其相应的羧酸， 得到 4- 苯氧基 - 丁酸。 向 4- 苯氧基 - 丁酸 (7.67g， 29.6mmol) 的无水二氯甲烷溶液中加入草酰氯 (4.4mL， 50.3mmol) 和一滴二甲基甲酰胺， 并在室温下搅拌反应混合物 30 分钟。真空浓缩反应混合物， 并将残 余物溶于 1， 2- 二氯乙烷 (90mL) 中。 在 0℃， 将此溶液滴加入到三氯化铝 (4.73g， 35.5mmol) 的 1， 2- 二氯乙烷 (50mL) 悬浮液中。在冰浴中搅拌反应混合物， 其过夜升至室温。将反应 混合物倾倒在浓盐酸 (30ml)( 搅拌到 100g 冰中 ) 中， 而后进一步搅拌 90 分钟， 直到冰充分 熔化为止。用二氯甲烷洗涤水相 3 次， 而后合并有机物， 干燥 (Na2SO4)， 真空浓缩。通过用
     二乙醚研磨来纯化， 得到 3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [b] 氧杂
     -5- 酮。
     在 0℃， 向 3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [b] 氧杂-5- 酮 (3.10g， 12.8mmol) 的二乙醚溶 -5- 酮。液中加入溴 (625μl， 12.2mmol)， 并搅拌 2.5 小时， 逐渐地将温度提高至室温。在二氧化硅 上纯化， 使用二乙醚和己烷研磨， 得到 4- 溴 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [b] 氧杂
     向 4- 溴 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [b] 氧杂232-5- 酮 (4.0g， 12.4mmol) 的乙醇溶液102333779 A CN 102333793说明书197/280 页中加入硫基草氨酸乙酯 (5.0g， 37.4mmol)， 并将反应混合物加热至回流， 保持 3 天。在二氧 化硅上纯化， 得到 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸乙酯， 在 THF、 氢氧化钠和水中， 将其水解为羧酸， 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸。使用一般方法 B， 使 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘 菊环 -2- 甲酸与 2- 氯 -N- 甲基苯胺偶合。在二氧化硅上纯化， 得到 226。1H NMR(400MHz， CDCl3) ： 3.24(2H， t)， 3.37(3H， s)， 4.17-4.25(2H， m)， 6.74-6.79(1H， m)， 6.85(1H， dd)， 7.02-7.07(1H， m)， 7.11(1H， dd)， 7.27-7.33(3H， m)， 7.42-7.45(1H， m)。MS ： (ESI+)MH 371
     实施例 137 ： N-(2- 氯 -4-(2- 羟基丙基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯 并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 227通过与实施例 47 中制备 137 相似的方法， 3- 氯 -4-(N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和 1- 氨基丙 -2- 醇反应， 得到 227。MS ：噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 (ESI+)471.1
     实施例 138 ： N-(2- 氯 -4-(1- 羟基丙 -2- 基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二 -2- 甲酰胺 228氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     通过与实施例 47 中制备 137 相似的方法， 3- 氯 -4-(N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和 2- 氨基丙 -1- 醇反应， 得到 228。MS ：噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(ESI+)471.0
     实施例 139 ： N-(4-(3-(1H- 咪唑 -1- 基 ) 丙基氨基甲酰基 )-2- 氯苯基 )-N- 甲 基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 229通过与实施例 47 中制备 137 相似的方法， 3- 氯 -4-(N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和 3-(1H- 咪唑 -1- 基 ) 丙 -1- 胺反应， 得到噻吩并 [2， 3-d] 氧杂229。MS ： (ESI+)521.1
     实施例 140 ： N-(4-(2- 乙酰胺基乙基氨基甲酰基 )-2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 230通过与实施例 47 中制备 137 相似的方法， 3- 氯 -4-(N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和 N-(2- 氨乙基 ) 乙酰胺反应， 得到 230。MS ：吩并 [2， 3-d] 氧杂(ESI+)498.1
     实施例 141 ： N-(2- 氯 -4-( 异丙基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 231通过与实施例 47 中制备 137 相似的方法， 3- 氯 -4-(N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和异丙胺反应， 得到 231。MS ： (ESI+)455.1 -2- 甲酰胺 232 实施例 142 ： N-(2- 氯 -4-( 二丙基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     通过与实施例 47 中制备 137 相似的方法， 3- 氯 -4-(N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和二乙胺反应， 得到 232。MS ： (ESI+)497.0 实施例 143 ： 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2，233噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     102333779 A CN 102333793说明书198/280 页3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 233 -2- 甲酸转按照实施例 16， 使 8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂变为酰基氯， 并与 N-(2-( 叔丁基二甲基硅基氧基 ) 乙基 )-2- 氯苯胺反应。脱甲硅基， 得到 233( 产率 25％ )。MS ： (ESI+)480
     实施例 144 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 -8- 甲酸 234并 [2， 3-d] 氧杂
     按照制备 138 的方法， 将 3-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -8- 甲酸甲酯， 在 50 ℃将其-2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑甲氧基羰基化， 得到 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 用 LiOH/THF 和水处理 2 小时， 冷却， 用 2N HCl 酸化。收集沉淀， 干燥， 得到 234。MS(ESI) ： 424.0
     实施例 145 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 胺 235按照实施例 76 的方法， 将 3-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑转变为 235。MS ： (ESI+)395.2
     实施例 146 ： N-(2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 基 )-2- 吗啉基乙酰胺 236
     按照实施例 147 中制备 237 的方法， 使 2- 氯 -N-(2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三 -8- 基 ) 乙酰胺与吗啉反应， 得到唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 236。MS ： (ESI+)522.3
     实施例 147 ： N-(2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] -8- 基 )-2-( 二甲基氨基 ) 乙酰胺 237234噻吩并 [23-d] 氧杂102333779 A CN 102333793
     说明书199/280 页向 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -8- 胺 HCl 盐 (0.5g， 1.16mmol) 的无水 DCM(30mL) 溶液中加入 DIPEA(0.61mL，3-d] 氧杂3.48mmol)。在 0 ℃搅拌溶液 20 分钟， 并逐滴加入 2- 氯乙酰氯 (0.2g， 1.74mmol)。使混 合物达到室温， 并进一步搅拌 2 小时。将反应溶液倒入到冰水中， 并用 EtOAc 提取。合 并有机物， 用 Na2SO4 干燥， 真空蒸发， 得到粗品 (0.45g， 产率 ： 82 ％ )。在 15mL DCM 中， 将 2- 氯 -N-(2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -8- 基 ) 乙 酰 胺 (0.2g， 0.424mmol) 与 NH(CH3)2 的 HCl 盐 (0.172g， 2.12mmol) 和 2.12mmol) 混合。 在室温下搅拌溶液 4 小时， 用冰水淬灭。 用 EtOAc 提取， 蒸发有 NEt3(0.3mL， 1 机物， 得到粗品。将其用制备 TLC 纯化， 得到 237(40mg， 分离产率 ： 20％ )。 H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： δ9.81(s， 1H)， 8.81(s， 1H)， 7.79-7.38(m， 7H)， 6.55(s， 1H)， 4.16(t， J ＝ 5.2Hz， 2H)， 3.02(s， 3H)， 2.96(t， J ＝ 5.2Hz， 2H)， 2.21(s， 6H)。MS ： (ESI+)480.1
     实 施 例 148 ： N-(2- 氨 基 -2- 甲 基 丙 基 )-2-(4-(2- 氯 苯 基 )-4H-1， 2， 4- 三 唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 甲酰胺 238
     由 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和 2- 甲基丙烷 -1， 2- 二胺得到 238。MS(ESI)494.1 实施例 149 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-N- 乙基 -4， 5- 二氢苯并 -8- 甲酰胺 239氧杂
     [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     由 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和乙胺得到 239。MS(ESI)450.9 实施例 ]50 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 -8- 甲酰胺 240氧杂
     [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     由 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和甲胺得到 240。MS(ESI)436.9 实施例 151 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-((4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 甲基 )-4， 5- 二氢 -2- 甲酰胺 241 -2- 甲酰胺与 N- 甲基哌嗪反应， 得到 241。 MS ： (ESI+)482.0氧杂
     苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     使用实施例 153 制备 243 的方法， 8-( 溴甲基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢 实施例 152 ： N-(2- 氯苯基 )-8-(( 二甲基氨基 ) 甲基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并235苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     102333779 A CN 102333793说-2- 甲酰胺 242明书200/280 页[b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     使用实施例 153 制备 243 的方法， 8-( 溴甲基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二 -2- 甲酰胺与二甲胺反应， 得到 242。MS ： (ESI+)427.0 实施例 153 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-(( 甲基氨基 ) 甲基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] -2- 甲酰胺 243氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     向 CH3NH2 的 EtOH(0.25mL) 溶液中加入 TEA(0.5mL) 和 8-( 溴甲基 )-N-(2- 氯苯 -2- 甲酰胺 (250mg)。在 60℃搅基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂过滤。 拌反应混合物 2 小时， 而后加入水。用 EtOAc(20mLx3) 提取混合物， 用 Na2SO4 干燥， 浓缩滤液， 得到粗品， 将其用制备 TLC 纯化 (CH2Cl2 ∶ Me0H ＝ 10 ∶ 1)， 得到 243 浅黄色固 体 (95.6mg， 42.8％ )。MS ： (ESI+)412.9
     实施例 154 ： 8-( 氨甲基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 244
     将 8-( 叠氮基甲基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -2- 甲酰胺 (100mg， 0.23mmol) 溶于 10mL MeOH 中。向溶液中加入 Pd/C(10mg)，氧杂1真空浓缩， 获得 244(54.1mg， 产率 59 ％ )。 并填充 H2。在 40 ℃搅拌混合物 3 小时。过滤， H NMR(CDCl3， 400MHz)δ8.48-8.52(m， 2H2)， 6.55-7.47(m， 8H)， 4.15(t， J ＝ 4.8Hz， 2H)， 3.91-3.95(m， 2H)， 3.28(s， 3H)， 2.94(t， J ＝ 4.8Hz， 2H)。MS ： (ESI+)382.1
     实 施 例 155 ： 4- 苄 基 -3-(4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮 245
     使用与实施例 175 中制备 265 所描述方法的相似方法， 由 N- 苄基 -4， 5- 二氢苯 -2- 甲酰胺制备， 得到 245。在环化条件下 ( 碳酸钾， 乙醇和并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂水 )， 自发除去乙酰氧基。MS(ESI)376.2
     实施例 156 ： N-(2， 6- 二氯苯基 )-N- 甲基 -(10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 246按照实施例 166 的方法， 将 2- 溴 -10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 0.112g， 0.397mmol) 溶于四氢呋喃 (6.03mL) 中。在 -78℃， 逐滴加入正丁基锂 / 己氧杂烷 ( 溶液 )(2.50M， 0.190mL)。将反应混合物在 -78℃搅拌 1 小时。在 -78℃， 将 2， 6- 二氯 苯基异氰酸酯 (0.149g， 0.794mmol ； ) 加入到混合物中， 然后搅拌过夜。用饱和 NaHCO3 淬 灭反应混合物， 然后用 EtOAc 提取 (2x)。将合并的有机层用 Na2SO4 干燥， 浓缩。用快速色 谱纯化粗品 (0-100 ％ EtOAc/Hex)( 在 40 ％时洗脱出 )， 得到酰胺中间体， 在 0 ℃将其溶于 DMF(5.00mL) 中。加入氢化钠 (19.0mg， 0.794mmol)。搅拌反应混合物 30 分钟， 然后加入甲 基碘 (0.113g， 0.794mmol)， 搅拌 2 小时。用 5mL 水猝灭反应混合物， 然后用 DCM(3x5mL) 提 取。合并有机层， 浓缩， 用 rHPLC 纯化， 得到 246( 产率 30％ )。MS ： (ESI+)405.1
     实施例 157 ： N-(2， 4- 二氯苯基 )-9-(4-( 二甲基氨基 ) 哌啶 -1- 羰基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 247利用一般方法 B， 2-[(2， 4- 二氯 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酰基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧 杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸和 4-( 二甲基氨基 ) 哌啶反应， 得到 247。NMR ： (CDCl3) ： 1.45-1.62(2H， br m)， 1.88-2.01(2H， br， m)， 2.39(6H， s， Me)， 2.50-2.61(1H， br m)， 2.82-3.10(2H， br m)， 3.07-3.09(2H， m)， 3.38(3H， s， Me)， 3.80-4.01(1H， br m)， 4.26-4.29(2H， m)， 4.58-4.79(1H， br m)， 6.85(1H， s， Ar)， 7.02(1H， d， J 8.3， Ar)， 7.25(1H， dd， J 8.2and 2.0， Ar)， 7.28-7.32(1H， m， Ar)， 7.37-7.39(1H， m， Ar)， 7.55(1H， s， Ar) 和 7.60(1H， s， Ar)。MS ： (ESI+)MH+ ＝ 558.14
     实施例 158 ： N-(2- 氯 -4-(2-( 二甲基氨基 ) 乙基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 248利用与实施例 47 中制备 137 相似的方法， 3- 氯 -4-(N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和 N1， N1- 二甲基乙烷 -1， 2- 二胺反应， 得到噻吩并 [2， 3-d] 氧杂248。MS ： (ESI+)484.3
     实施例 159 ： N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰胺 249利用与实施例 47 相似的方法， 3- 氯 -4-(N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和盐酸二甲胺反应， 得到 249。MS ： (ESI+)441.0 -2- 甲酰胺 250 实施例 160 ： N-(2- 氯 -4-( 甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b]3-d] 氧杂
     噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     利用与实施例 47 相似的方法， 3- 氯 -4-(N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和甲胺反应， 得到 250。MS ： (ESI+)427.2 -2- 甲酰胺 251 实施例 161 ： N-(2- 氯 -4-( 吗啉 -4- 羰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻3-d] 氧杂
     吩并 [2， 3-d] 氧杂
     利用与实施例 47 相似的方法， 3- 氯 -4-(N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和吗啉反应， 得到 251。MS ： (ESI+)483.1 -2- 甲酰胺 252 实施例 162 ： N-(2- 氯 -4-(4- 甲基哌嗪 -1- 羰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并3-d] 氧杂
     [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     利用与实施例 47 相似的方法， 3- 氯 -4-(N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和 N- 甲基哌嗪反应， 得到 252。MS ： (ESI+)496.2 -2- 甲酰胺 253 实施例 163 ： N-(2- 氯 -4-( 哌嗪 -1- 羰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻3-d] 氧杂
     吩并 [2， 3-d] 氧杂
     利用与实施例 47 相似的方法， 3- 氯 -4-(N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸和哌嗪反应， 得到 253。MS ： (ESI+)482.1 -2- 基 )-4-(1- 羟基3-d] 氧杂
     实施例 164 ： 3-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂丙 -2- 基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮 254
     使用与实施例 175 相似的方法， 由乙酸 2-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 杂 -2- 甲酰氨基 ) 丙酯制备， 得到 254。MS(ESI)344.2 实施例 165 ： 3-(9- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 基 )-4-(2，
     4- 二氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 255
     实施例 166 ： 4-(2- 氯苯基 )-3-(10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 杂 -2- 基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮 256
     在 -78℃， 向 2- 溴 -10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(0.405g，1.44mmol) 的四氢呋喃 (21.8mL， 269mmol) 溶液中逐滴加入 2.50M 正丁基锂的己烷溶液 (0.689mL)。将反应混合物在 -78℃搅拌 1 小时。在 -78℃， 将 1- 氯 -2- 异氰酰苯 (2- 氯苯 基异氰酸酯 0.346mL， 2.87mmol) 加入到混合物中， 然后搅拌过夜。用饱和 NaHCO3 淬灭反应混合物， 然后用 EtOAc 提取 (2x)。将合并的有机层用 Na2SO4 干燥， 浓缩。用快速色谱纯化 粗品 (0-100％ EtOAc/ 己烷 )( 在 40％时洗脱出 )， 得到 N-(2- 氯苯基 )-10- 氮杂 -4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 ( 产率 82％ )。MS ： (ESI+)357.8
     向 N-(2- 氯苯基 )-10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺 (0.180g， 0.504mmol ； ) 的 1， 4- 二烷 (4.50mL， 57.7mmol) 溶液中加入 2， 4- 二 (4- 甲氧基苯基 )-2， 4- 二硫代 -1， 3， 2， 4- 二硫杂二磷杂环丁烷 (Lawesson ′ s 试剂， 0.153g， 0.378mmol)。将反应混合物在 85 ℃搅拌 3 小时。浓缩反应混合物， 得到粗品硫代酰胺中 间体。向包含粗品硫代酰胺中间体的甲醇 (10.0mL， 247mmol) 溶液中加入肼 (0.80mL， 25mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜。浓缩反应混合物， 得到粗品肼中间体， 将其溶于 THF 中。加入 N， N- 羰二咪唑 (0.164g， 1.01mmol)， 并在室温下快速地搅拌反应混合物 4 小 时。浓缩反应混合物， 用 rHPLC 纯化， 得到 256( 产率 10％ )。MS ： (ESI+)397.1
     实施例 167 ： 3-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-4-(1- 甲氧基丙 -2- 基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮 257
     使用与实施例 175 相似的方法， 由 N-(1- 甲氧基丙 -2- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 吩并 [2， 3-d] 氧杂 混合物的对映体。
     -2- 甲酰胺制备， 得到 257。MS(ESI)358.2. 用制备手性色谱分离消旋实施例 168 ： N-(2- 乙酰胺基乙基 )-N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 甲酰胺 2583-d] 氧杂
     向 N-(2- 氨 乙 基 )-N-(2- 氯 苯 基 )-4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 甲 酰 胺 131(0.300g， 0.6mmol) 的 二 氯 甲 烷 (1.5mL) 溶 液 中 加 入 DIEA(0.262mL， 1.5mmol)。用冰水浴冷却反应混合物， 通过注射器逐滴加入乙酰氯 (0.0944g， 1.2mmol)。 在冷却温度下搅拌反应混合物 30 分钟， 并平衡至室温。用水、 然后盐水洗涤反应混合物， 浓缩， 得到固体。将粗品固体接纳在 DMF 中， 用 RP-HPLC 纯化， 得到 46mg258( 理论产率的 18％ )。MS ： (ESI+)441.1
     实施例 169 ： 2-(4- 异丙基 -5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 腈 259
     按 照 实 施 例 53 的 方 法， 3-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂 实 施 例 170 ： 3-(4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂 -2- 基 )-4- 异 丁-2- 基 )-4- 异丙基 -1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮和 CuCN 反应， 得到 259。MS ： (ESI+)353.1
     基 -1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮 260
     使用与实施例 175 相似的方法， 由 N- 异丁基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺制备， 得到 260。MS(ESI)342.2 实施例 171 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-( 吗啉基甲基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 -2- 甲酰胺 261 -2- 甲酰胺与吗啉反应， 得到 261。MS ： (ESI+)469.0并 [2， 3-d] 氧杂
     按照实施例 153 中合成 243 的方法， 8-( 溴甲基 )-N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     实施例 172 ： 4-(8-(1H- 吡唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-5-(2- 氯苯基 ) 噻唑 -2- 胺 262
     按 照 实 施 例 44 的 方 法， 4-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-5-(2- 氯 苯 基 ) 噻 唑 -2- 胺 和 4-(4， 4， 5， 5- 四 甲 基 -1， 3， 2- 二 氧 杂 硼 杂 环 戊 烷 -2- 基 )-1H- 吡唑反应， 得到 262。MS ： (ESI+)477.1
     实施例 173 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -(10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 263 -2- 甲酰胺甲基化， 得到 263。MS ： (ESI+)371.1按照实施例 156 和 166 的方法， 将 N-(2- 氯苯基 )-10- 氮杂 -4， 5- 二氢苯并 [b]噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     实施例 174 ： 3-(8-(1H- 吡唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-4- 异丙基 -1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮 264
     按 照 实 施 例 44 的 方 法， 3-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4- 异丙基 -1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮和 4-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧杂硼 杂环戊烷 -2- 基 )-1H- 吡唑反应， 得到 264。MS ： (ESI+)394.2
     实施例 175 ： 3-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-4- 异丙基 -1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮 265
     在氮气氛中， 将 8- 溴 -N- 异丙基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺 (200mg， 0.5mmol) 的甲苯 (5mL， 0.05mol) 溶液用一份五氯化磷 (0.182g， 0.87mmol) 处 理。将烧瓶密封， 并在 80℃加热 2 小时， 冷却至室温， 减压浓缩溶剂， 同时避免接触大气。将 粗品残余物接纳在二氯甲烷 (8mL， 0.1mol) 中， 并用肼羧酸甲酯 (0.123g， 1.36mmol) 处理。 将得到的悬浮液在室温下搅拌 2 小时。将反应混合物用饱和碳酸氢钠稀释， 并用二氯甲烷 提取。用盐水洗涤合并的有机物， 用硫酸钠干燥， 浓缩。将粗品残余物溶于乙醇 (5mL) 中， 并加入碳酸钾 (0.2264g， 1.64mmol)。在 80℃将反应混合物搅拌 2 小时。加入 0.5mL 水， 并 继续加热过夜。浓缩混合物， 用水稀释， 用乙酸乙酯提取。用盐水洗涤有机物， 浓缩， 并将得 1 到的残余物用快速柱色谱纯化， 得到 265(75mg)。 H NMR(dmso-d6， 500MHz)δ11.9(s， 1H)， 7.60(m， 1H)， 7.30-7.23(m， 3H)， 4.44(pentet， 1H)， 4.32(t， 2H)， 3.22(t， 2H)， 1.46(d， 6H)。 MS(ESI)408.1
     实施例 176 ： 5-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-1， 3，4-二唑 -2(3H)- 酮 266
     将 8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 碳酰肼 (150mg， 0.44mmol)悬浮在四氢呋喃 (5.0mL) 中， 并加入三乙胺 (0.12mL， 0.88mmol)。加入 N， N- 羰二咪唑 (108mg， 0.66mmol)， 并在室温下将全部搅拌 1 小时。没有观察到反应。将全部密封， 并在 80℃下加热 2 小时。 加入更多的 N， N- 羰二咪唑 (150mg， 0.92mmol)， 并在 85℃下将全部加热 10 分钟。LCMS 表明彻底地转化为目标产物。将反应混合物冷却至室温， 用饱和碳酸氢钠稀 释， 用乙酸乙酯提取。用硫酸钠干燥有机物。浓缩得到 125mg 无色固体。用反相 HPLC 纯化 少量产品， 得到 266 无色固体。1H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ11.99(br s， 1H)， 7.70-7.00( 重 叠峰 m， 4H)， 4.23(t， 2H)， 3.21(t， 2H)。MS ： (ESI+)367.0
     实 施 例 177 ： 3-(9- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4-(2- 氯 -4- 氟苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 267
     向 5- 溴 -2- 羟 苯 乙 酮 (15.29g ； 71mmol) 的 2- 丁 酮 (150mL) 搅 拌 溶 液 中 加 入 K2CO3(21g ； 152mmol)， 然后加入 1， 2- 二溴乙烷 (30mL ； 350mmol)。将反应混合物在回流温度 下加热过夜 (17 小时 )， 冷却， 过滤 ( 丙酮洗涤 )， 蒸发溶剂。用 Et2O/EtOAc(4 ∶ 1 ； 250mL) 的混合物处理残余物， 并过滤除去得到的固体。 用 2M NaOH(150mL) 洗涤滤液， 干燥 (MgSO4)， 浓缩， 得到 1-[5- 溴 -2-(2- 溴 - 乙氧基 )- 苯基 ]- 乙酮类白色结晶固体 (15.99g)。将该固 体溶于无水 THF(300mL) 中， 冷却至 0℃， 用 NaH(2.11g， 60wt％悬浮液， 在矿物油中 ； 53mmol) 处理。将反应混合物小心地加热到回流， 并继续加热过夜 (17 小时 )。将反应混合物冷却， 用 2M HCl(50ml) 淬灭， 并在盐水 (300ml) 和 EtOAc(200ml) 之间分配。干燥 (MgSO4) 有机 层， 浓缩， 用 ISCO( 己烷 /EtOAc) 纯化， 得到 7- 溴 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [b] 氧杂 -5- 酮浅 黄色油 (9.84g ； 57％ )。δH(400MHz， CDCl3)2.24( 五重峰， J ＝ 6.8， 2H)， 2.91(t， J ＝ 6.8， 2H)， 4.25(t， J ＝ 6.8， 2H)， 6.98(d， J ＝ 8.8， 1H)， 7.52(dd， J ＝ 8.8 和 2.8， 1H)， 7.90(d， J ＝ 2.8， 1H)。
     在 0 ℃， 用 10 分 钟 向 7- 溴 -3， 4- 二 氢 -2H- 苯 并 [b] 氧 杂-5- 酮 (9.84g ；41mmol) 的 DMF(50mL) 搅拌溶液中逐滴加入 POCl3(10mL ； 107mmol)。搅拌反应混合物， 同 时升温至室温过夜 (16 小时 )， 接着通过倾倒入较好搅拌的冰 / 水 (500mL) 中来猝灭。将 得到的固体提取到 EtOAc(2×400mL) 中， 干燥 (MgSO4) 合并的有机物， 浓缩， 得到黄色固体 (7- 溴 -5- 氯 -2， 3- 二氢 - 苯并 [b] 氧杂 -4- 甲醛 )。将该固体溶于 DMF(50mL) 中， 依次 51mmol)、 巯基乙酸乙酯 (5.5mL ； 50mmol) 处理。在 70℃加热反应混合物 4 小 用 K2CO3(7g ； 时， 接着将其冷却， 并倒入较好搅拌的冰 / 水 (500ml) 中。过滤收集得到的固体， 干燥， 得到 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸乙酯类白色固体 (13.69g ； 95 ％ )。δH(400MHz， d6-DMSO)1.31(t， J ＝ 7.2， 3H)， 3.23(t， J ＝ 5.2， 2H)， 4.27-4.35(m， 4H)， 7.03(d， J ＝ 8.8， 1H)， 7.42(dd， J ＝ 8.8and 2.4， 1H)， 7.70(s， 1H)， 7.80(d， J ＝ 2.4，1H)。 在室温下， 向 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸乙 酯 (4.24g ； 12mmol) 的 THF(40mL) 搅拌悬浮液中加入 NaOH(0.96g ； 24mmol) 的水 (20mL) 溶 液， 而后加入 EtOH(20mL)。将反应混合物在室温下搅拌 4 小时 ( 现在是澄清溶液 )， 接着将 其用 2M HCl(20mL) 淬灭， 并用水 (50mL) 稀释。过滤收集得到的固体， 用水洗涤， 干燥， 得到 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸白色固体 (3.64g ； 93％ )。 δH(400MHz， d6-DMSO)3.22(t， J ＝ 5.2， 2H)， 4.31(t， J ＝ 5.2， 2H)， 7.02(d， J ＝ 8.4， 1H)， 7.43(dd， J ＝ 8.4and 2.4， 1H)， 7.62(s， 1H)， 7.78(d， J ＝ 2.4， 1H)。
     将 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸乙酯 (7.43g ； 21mmol) 和 N2H4·H2O(5.1mL ； 105mmol) 的 EtOH 搅 拌 溶 液 在 回 流 温 度 下 加 热 过 夜 (18 小 时 )， 并过滤收集得到的固体 (3.68g)。通过用更多的 N2H4·H2O(20mL) 处理滤液， 回流 过夜， 获得又一批中间体酰肼 (2.88g)， 获得 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸酰肼白色针晶 (6.56g ； 92 ％ )。在 140 ℃， 将中间体酰肼在微波中与 p-TsOH(10mol％ ) 和 CH(OMe)3( 每 1g 酰肼 5ml) 一起加热 1 小时 ( 进行 4 批 )。将批料合 并， 用 MeOH 稀释混合物， 过滤， 得到 2-(9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘
     菊环 -2- 基 )-[1， 3， 4]二唑浅黄色针晶 (4.39g ； 65 ％ )。δH(400MHz， CDCl3)3.30(t， J＝ 5.2， 2H)， 4.37(t， J ＝ 5.2， 2H)， 6.96(d， J ＝ 8.8， 1H)， 7.33(dd， J ＝ 8.8and 2.4， 1H)， 7.61(s， 1H)， 7.84(d， J ＝ 2.4， 1H)， 8.44(s， 1H)。
     将 微 波 管 中 装 入 2-(9- 溴 -4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -1- 硫 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -2- 基 )-[1， 3， 4] 二 唑 (0.64g ； 1.83mmol)、 2- 氯 -4- 氟 苯 胺 (0.44mL ； 3.68mmol)、 TFA(0.27mL ； 3.63mmol) 和 甲 苯 (5mL)。 将 混 合 物 在 160 ℃ 用 微 波 加 热 30 分 钟， 用 EtOAc(150ml) 稀释， 用饱和 NaHCO3 洗涤。 干燥 (MgSO4) 有机层， 浓缩， 用 ISCO 纯化， 得到 267 乳色固体 (0.59g ； 68％ )。δH(400MHz， CDCl3)3.14(t， J ＝ 5.2， 2H)， 4.29(t， J ＝ 5.2， 2H)， 6.91(d， J ＝ 8.4， 1H)， 6.93(s， 1H)， 7.22-7.27(m， 2H)， 7.43-7.51(m， 2H)， 7.65(d， J ＝ 2.4， + 1H)， 8.22(s， 1H)。[M+H] ： 478
     实施例 178 ： 2-(2- 氨基 -5-(2- 氯苯基 ) 噻唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 甲酰胺 268
     按照实施例 47， 2-(2- 氨基 -5-(2- 氯苯基 ) 噻唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 -8- 甲酸和氯化铵与 HATU 和 DIPEA 在 DMF 中偶合， 得到 268。吩并 [2， 3-d] 氧杂
     实施例 179 ： 3-(8-(1H- 吡唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-4- 乙基 -1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮 269
     按 照 实 施 例 44 的 方 法， 3-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4- 乙基 -1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮和 4-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧杂硼杂 环戊烷 -2- 基 )-1H- 吡唑反应， 得到 269。MS ： (ESI+)380.2
     实施例 180 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 甲酰胺 270由 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和氯化铵得到 270。(ESI)423.1。 实 施 例 181 ： 4-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂氧杂
     -2- 基 )-5-(2- 氯苯基 ) 噻唑 -2- 胺 271
     通过 2- 氯苯基乙酸与 8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酸甲酯的反应， 制备 1-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-2-(2- 氯苯基 ) 乙酮 (1.0g， 2.3mmol)。在 100mL 圆底烧瓶中， 将 1-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 -2- 基 )-2-(2- 氯苯基 ) 乙酮的乙酸乙酯 (60mL) 溶液用一份溴化铜 (II) (1.3g， 5.8mmol) 处理。加入乙酸 (2mL)， 并密封烧瓶， 在 85℃加热。8 小时后， 将反应除去 加热， 并放置过夜。将反应混合物浓缩至干， 并用 100mL 二乙醚稀释， 通过硅藻土过滤 ( 醚 洗涤 )。使洗脱液再通过相同的硅藻土垫过滤， 浓缩， 得到 2- 溴 -1-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 用。
     -2- 基 )-2-(2- 氯苯基 ) 乙酮粗品固体， 其不用纯化就可以使
     将 2- 溴 -1-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-2-(2- 氯苯基 ) 乙酮 ( 大约 2.3mmol) 悬浮在丙酮 (15mL， 0.20mol) 中， 并用硫脲 (0.26g， 0.0034mol ； ) 处理。将混合物密封， 并在 80 ℃下加热 3 小时。冷却至室温后， 浓缩反应混合物， 悬浮在 水中， 并过滤收集固体。将固体用水冲洗， 得到 953mg 271 浅黄色固体。1H NMR(dmso-d6， 500MHz)δ7.64(m， 1H)， 7.53(m， 2H)， 7.45(m， 1H)， 7.35(m， 1H)， 7.23(m， 1H)， 7.17(m， 1H)， 6.47(s， 1H)， 4.19(t， 2H)， 2.95(t， 2H)。MS(ESI)491.0
     实 施 例 182 ： 3-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-5- 甲基 -4H-1， 2， 4- 三唑 272
     在密封的容器中将粗品 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 肼代酰胺 (carbohydrazonamide)(150mg) 溶液与原乙酸三乙酯在 90℃下加热 3 小时。将混合物冷却至室温， 浓缩， 得到粗品残余物， 将其通过快速柱色谱 (10-100％乙酸 1 400MHz)δ7.86(m， 2H)， 7.48(m， 1H)， 7.69(m， 乙酯 / 己烷 ) 纯化， 得到 272。 H NMR(dmso-d6， 1H)， 7.44(m， 1H)， 7.28-7.23(m， 2H)， 6.57(s， 1H)， 4.22(t， 2H)， 3.00(t， 2H)， 2.18(s， 3H)。 MS(ESI)474.0
     实 施 例 183 ： 3-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 273
     在密封的容器中， 在 90℃， 将粗品 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 肼代酰胺 (carbohydrazonamide)(150mg) 溶液与原甲酸甲酯一起加热 3 小时。将混合物冷却至室温， 浓缩， 得到粗品残余物， 将其通过快速柱色谱 (10-100％乙酸 1 乙酯 / 己烷 ) 纯化， 得到 273。H NMR(dmso-d6， 400MHz)δ8.89(s， 1H)， 7.84(m， 2H)， 7.75(m， 1H)， 7.66(m， 1H)， 7.46(m， 2H)， 7.28-7.23(m， 2H)， 6.66(s， 1H)， 4.23(t， 2H)， 3.02(t， 2H)。 MS(ESI)460.0
     实施例 184 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-1H- 吡唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 甲酰胺 274
     按照实施例 47， 2-(4-(2- 氯苯基 )-1H- 吡唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 -8- 甲酸和氯化铵用 HATU 和 DIPEA 在 DMF 中偶合， 得到 274。 实施例 185 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-1H- 吡唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -8- 腈 275 按照实施例 53 的方法， 由 3-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 实 施 例 186 ： 3-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂[2， 3-d] 氧杂
     3-d] 氧杂
     -2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-1H- 吡唑和 CuCN， 得到 275。MS ： (ESI+)404.1
     -2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-1H- 吡唑 276
     向 1-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-2-(2- 氯 苯基 ) 乙酮 (500mg， 1.15mmol) 的无水甲苯 (10mL) 溶液中加入 1， 1- 二甲氧基 -N， N- 二甲基 甲胺 (1.22mL)。将整个容器密封， 并在 90℃加热过夜， 冷却至室温， 浓缩。获得的化合物 1-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 基 )-2-(2- 氯苯基 )-3-( 二甲基氨基 ) 丙 -2- 烯 -1- 酮粗品可以不用纯化就可以在随后的反应中使用。
     将粗品 1-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂246-2- 基 )-2-(2- 氯苯基 )-3-( 二甲基氨基 ) 丙 -2- 烯 -1- 酮悬浮在甲醇 (5mL) 中， 并用肼 ( 大约 1mL) 处理。小时后， 浓缩混合物， 并通过快速柱色谱纯化残余物， 得到 276 无色固体 (527mg)。 MS(ESI) ： 459.0
     实施例 187 ： 3-(8-(1H- 吡唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮 277
     按 照 实 施 例 44 的 方 法， 3-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮和 4-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧 杂硼杂环戊烷 -2- 基 )-1H- 吡唑反应， 得到 277。MS ： (ESI+)462.1
     实施例 188 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 腈 278按照实施例 53 的方法， 由 (8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 实 施 例 189 ： 3-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂 向粗品 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 肼-2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮和 CuCN 得到 278。MS ： (ESI+)421.1
     -2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮 279
     代酰胺 (carbohydrazonamide)( 大约 1.15mmol) 的无水 THF(10mL) 溶液中加入羰基二咪 唑 (373mg， 2.3mmol)。在室温下搅拌反应混合物， 直到通过 LCMS 判断反应完成为止。加入 碳酸氢钠水溶液， 并用乙酸乙酯提取混合物。用盐水洗涤合并的有机物， 用硫酸钠干燥， 浓 缩， 用快速柱色谱纯化残余物 (10-100％乙酸乙酯 / 己烷 )， 得到 279 无色固体 (308mg)。1H NMR(dmso-d6， 400MHz)δ12.32(s， 1H)， 7.75-7.59(m， 4H)， 7.42(m， 1H)， 7.27-7.21(m， 2H)， 6.53(s， 1H)， 4.21(t， 2H)， 2.97(t， 2H)。MS(ESI)476.0。
     实施例 190 ： 5-(2- 氯苯基 )-4-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )噻唑 -2- 胺 280
     将 粗 品 2- 溴 -2-(2- 氯 苯 基 )-1-(4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 ) 乙酮 (0.21mmol) 的 2mL 丙酮溶液用硫脲 (48mg) 处理， 并将得到的悬浮液在 80℃加 热过夜。将反应混合物冷却至室温， 浓缩。用反相 HPLC 纯化粗品残余物， 得到 280 无色固 1 体。 H NMR(400MHz， DMSO-d6)δ7.65(m， 1H)， 7.55-7.53(m， 2H)， 7.47-7.43(m， 2H)， 7.29(br s， 2H)， 7.14(m， 1H)， 7.02(m， 1H)， 6.45(s， 1H)， 4.17(t， 2H)， 2.95(t， 2H)。MS ： (ESI+)411.1
     实施例 191 ： 2-(4-(2- 氯 -4- 氟苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -9- 甲酰胺 281向 2-[4-(2- 氯 -4- 氟 - 苯基 )-4H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 腈 (90mg ； 0.21mmol) 的 DMSO(3mL) 和 MeOH(5mL) 搅拌溶液中加入 K2CO3(36mg ； 0.26mmol)， 然后加入 H2O2(30μl 的 30％水溶液 )。在室温下搅拌反应混合物 过夜 (16 小时 )， 接着在旋转蒸发器上除去甲醇， 并用水 (40ml) 稀释残余物。 过滤收集得到 的固体， 用水洗涤， 干燥， 得到 281 白色固体 (82mg ； 89％ )。δH(400MHz， CDCl3)3.15(t， J＝ 5.2， 2H)， 4.34(t， J ＝ 5.2， 2H)， 5.50-6.30(br s， 2H)， 6.88(s， 1H)， 7.07(d， J ＝ 8.4， 1H)， + 7.22-7.27(m， 1H)， 7.42-7.63(m， 3H)， 8.06(d， J ＝ 2.0， 1H)， 8.22(s， 1H)。[M+H] ： 441
     实施例 192 ： 5-(2- 氯苯基 )-4-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )嘧啶 -2- 胺 282
     向 粗 品 2-(2- 氯 苯 基 )-1-(4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-3-( 二甲基氨基 ) 丙 -2- 烯 -1- 酮 ( 大约 0.22mmol) 的乙醇 (2mL) 溶液中加入碳 酸钾 (87mg， 0.63mmol)， 而后加入盐酸胍 (40mg， 0.42mmol)。将全部物料密封， 并在 90℃加 热 8 小时， 冷却至室温， 浓缩。将残余物用水稀释， 用乙酸乙酯提取。用反相 HPLC 纯化合并 的有机物， 得到 282。MS(ESI)406.2
     实 施 例 193 ： 4-(2- 氯 苯 基 )-3-(4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-1H- 吡唑 283
     用肼 / 甲醇处理 2-(2- 氯苯基 )-1-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-3-( 二甲基氨基 ) 丙 -2- 烯 -1- 酮， 得到 283。MS(ESI)379.1
     实 施 例 194 ： 4-(2- 氯 苯 基 )-3-(4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮 284
     使用与实施例 196 和 189 所描述的那些方法相似的方法， 由 N-(2- 氯苯基 )-4， -2- 甲酰胺起始制备， 得到 284。MS(ESI)396.1 实施例 195 ： 2-(1-(2- 氯苯基 )-1H- 四唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -8- 甲酰胺 2855- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     3-d] 氧杂
     使用与实施例 205 和 53 相似的方法， 将 8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -2- 基 )-1-(2- 氯苯基 )-1H- 四唑 286 转变为 285。MS ： (ESI+)424.0 实 施 例 196 ： 5-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂氧杂
     -2- 基 )-1-(2- 氯苯基 )-1H- 四唑 286
     向 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺的无水 1， 4- 二烷溶液中加入 Lawesson′ s 试剂。将 50mL 圆底烧瓶密封， 并在 80℃下加热 3 小时。将反应混合物冷却至室温， 浓缩， 得到粗品硫代酰胺。将由此获得的亮黄色粗品 固体接纳在甲醇和二氯甲烷中， 并用肼处理。用 LCMS 监控反应进度。一旦反应完成， 用饱 和碳酸氢钠稀释混合物， 用乙酸乙酯提取。 用盐水洗涤合并的有机物， 用硫酸钠干燥， 浓缩， 得到粗品 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 (carbohydrazonamide) 黄色固体。
     249-2- 肼代酰胺102333779 A CN 102333793说明书214/280 页
     在 0℃， 将粗品 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 肼代酰胺 (carbohydrazonamide)(150mg， 0.334mmol) 的乙酸 (0.5mL) 溶液用亚硝酸钠 (115mg， 1.6mmol) 的水溶液 (0.5mL) 处理。30 分钟后， 加入额外的 50mg 亚硝酸钠。10 分钟 后， 加入 3mL 10％氢氧化钠水溶液。用乙酸乙酯提取混合物， 用硫酸钠干燥有机物， 浓缩。 1 用快速柱色谱将粗品残余物纯化， 得到 286 无色固体 (111mg)。 H NMR(dmso-d6， 400MHz) δ8.00(m， 1H)， 7.98(m， 1H)， 7.85(m， 1H)， 7.56(m， 1H)， 7.46(m， 1H)， 7.26(m， 2H)， 7.13(m， 1H)， 4.27(t， 2H)， 3.11(t， 2H)。MS(ESI)461.1
     实 施 例 197 ： 5-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 胺 287
     在室温下， 将粗品 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 肼代酰胺 (carbohydrazonamide)(195， 0.434) 的甲醇 (5mL) 溶液用溴化氰 (115mg， 1.1mmol) 的甲醇 (1mL) 溶液处理。密封反应容器， 在 45℃加热 2 小时， 冷却至室温， 通过加 入饱和碳酸氢钠来猝灭， 用乙酸乙酯提取。用硫酸钠干燥合并的有机物， 浓缩， 用快速柱色 谱纯化残余物 (1-10％ MeOH/ 二氯甲烷 )， 得到 287(43mg， 21％产率 )。MS(ESI) ： 475.0
     实施例 198 ： N2-(2， 4- 二氯苯基 )-N2， N9， N9- 三甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2， 9- 二甲酰胺 288用常规酰胺偶合方法， 使 2-[(2， 4- 二氯 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酰基 ]-4， 5- 二 氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸和盐酸二甲胺盐反应， 得到 288。NMR ： (CDCl3) ： 2.73-3.04(6H， br m)， 2.95-3.00(2H， m)， 3.29(3H， s， Me)， 4.17-4.20(2H， m)， 6.79(1H， s， Ar)， 6.93(1H， d， J 8.3， Ar)， 7.19-7.29(3H， m， Ar) 和 7.47-7.48(2H， m， Ar)。 MS ： (ESI+)MH+ ＝ 475.04
     实 施 例 199 ： 3-(9- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4-(2- 氯 -4-( 三氟甲基 ) 苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 289
     将装入 2-(9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 基 )-[1， 3， 4] 二唑 (200mg ； 0.57mmol)、 2- 氯 -4- 三氟甲基苯胺 (0.12mL ； 0.86mmol)、 TFA(64μl ； 0.86mmol) 和 甲 苯 (1.5mL) 的 微 波 管 在 160 ℃ 微 波 加 热 30 分 钟。 用 DIPEA(0.2ml) 碱 化反应混合物， 真空除去挥发物， 用制备 LCMS 纯化残余物， 得到 289 白色固体 (109mg ； 36％ )。δH(400MHz， CDCl3)3.13(t， J ＝ 5.2， 2H)， 4.29(t， J ＝ 5.2， 2H)， 6.89-6.93(m， 2H)， 7.24-7.28(m， 1H)， 7.62-7.67(m， 2H)， 7.80-7.83(m， 1H)， 7.98(s， 1H)， 8.26(s， 1H)。[M+H]+ ： 527250102333779 A CN 102333793
     说-2- 甲酰胺 290明书215/280 页实施例 200 ： N-(2- 氯 -4- 氟苯基 )-9- 氰基 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并[2， 3-d] 氧杂
     使 用 标 准 酰 胺 偶 合 条 件 制 备 化 合 物 290， 得 到 白 色 固 体 (198mg， 82 ％ )。 δ H(400MHz ， CDCl 3)3.11(t ， 2H) ， 3.39(s ， 3H) ， 4.31(t ， 2H) ， 6.93(s ， 1H) ， 7.06(d ， 1H) ， + 7.13(m， 1H)， 7.32(dd， 1H)， 7.39(m， 1H)， 7.44(dd， 1H)， 7.77(s， 1H)。[M+H] (453.97)。
     实施例 201 ： 9- 氰基 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 291使 用 标 准 酰 胺 偶 合 条 件 制 备 化 合 物 291， 得 到 白 色 固 体 (151mg， 65 ％ )。 δ H(400MHz ， CDCl 3)3.11(t ， 2H) ， 3.42(s ， 3H) ， 4.32(t ， 2H) ， 6.94(s ， 1H) ， 7.00(t ， 2H) ， + 7.07(d， 1H)， 7.33(m， 1H)， 7.43(dd， 1H)， 7.78(s， 1H)。[M+H] (438.05)。
     实 施 例 202 ： 4-(2- 氯 -6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-9- 基 )-5-(2- 氯苯基 )-2H-1， 2， 3- 三唑 292
     实施例 203 ： 3-(9- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-4-(2，4- 二氟苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 293
     向 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 ( 先前描述的， 396mg) 的二氯甲烷 (10ml) 悬浮液中加入草酰氯 (0.18mL) 和 N， N- 二甲基甲酰胺 (1 滴 )。 ～ 1 小时后， 真空浓缩反应混合物， 并向其中加入氨 / 甲醇 (7N， 10ml)。搅拌过夜后， 加入水， 并过滤收集 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸酰胺 (340mg)。
     将 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸酰胺 (340mg)、 二甲基甲酰胺二甲基缩醛 (3ml) 和甲苯 (2.5ml) 的混合物加热至 100℃， 保持 16 小时。然 后真空浓缩溶剂， 并溶于乙酸 (3ml) 和水 (0.3mL) 中， 向其中加入 2， 4- 二氟苯基盐酸肼 (265mg)。将反应混合物加热至 100℃， 保持 3 小时。然后将反应混合物冷却， 用二氯甲烷稀 释， 用碳酸钠溶液洗涤， 干燥 (MgSO4) 并真空除去溶剂。使用快速色谱纯化， 得到 293。NMR ： (CDCl3) ： 3.15(2H， t)， 4.31(2H， t)， 6.82(1H， d)， 6.86(1H， s)， 7.08-7.13(2H， m)， 一个质子 在氯仿峰下， 7.72(1H， s)， 8.10(1H， s)
     实 施 例 204 ： 5-(2- 氯 -6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-9- 基 )-1-(2， 4- 二氟苯基 )-1， 2， 4- 三唑 294
     实施例 205 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 甲酰胺 295将 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯 -8- 腈 278 的 DMSO 溶液用碳酸钾处理， 并将得到的黄色悬浮并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂液冷却至 0℃。用过氧化氢 (30％ wt， 在水中 ) 逐滴处理反应混合物。将全部溶液加热至 室温， 并用饱和 NaHSO3 淬灭反应。用乙酸乙酯提取， 浓缩， 得到残余物， 将其用反相 HPLC 纯 化， 得到 295 无色固体。
     实施例 206 ： N-(2- 氨乙基 )-2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -8- 甲酰胺 296由 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和 1， 2- 二氨基乙烷得到 296。MS(ESI)465.9氧杂
     实施例 207 ： 8- 氰基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 氮杂 -3- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲 酸 (2- 氯 -(4- 甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )- 甲基 - 酰胺 297
     向 8- 溴 -4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -2- 甲 酸 (2- 氯 -4- 甲基氨基甲酰基 - 苯基 )- 甲基 - 酰胺 111(100mg) 的 DMF(6mL) 溶液中加入氰 化铜 (18mg)， 并在 110℃加热反应混合物过夜。然后冷却反应混合物， 用乙酸乙酯稀释， 用 盐水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 真空除去溶剂， 使用制备 LCMS 纯化残余物， 得到 297。(400MHz， CDCl3)， 3.00(3H， d， J 4.9， NMe)， 3.27-3.29(2H， m)， 3.38(3H， s， Me)， 4.20-4.24(2H， m)， 5.92-5.94(1H， m， NH)， 7.01-7.07(2H， m， Ar)， 7.14(1H， s， Ar)， 7.37(1H， d， J 8.1， Ar)， 7.67-7.70(1H， m， Ar) 和 7.84(1H， d， J 1.8， Ar)
     实施例 208 ： N-(2- 氯 -4-( 甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-9- 氰基 -N- 甲基 -4， 5- 二氢 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 298向 9- 氰基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (300mg) 的甲 苯 (10mL) 溶液中加入亚硫酰氯 (2mL)， 并将反应在 80℃加热 2 小时。 冷却至室温后， 真空浓 缩溶剂， 将残余物再溶解在乙腈 (10mL) 中。 加入碳酸钾 (306mg) 和实施例 21 的 3- 氯 -N- 甲 基 -4- 甲基氨基 - 苯甲酰胺 (263mg)， 并在室温下搅拌反应 16 小时。加入水 (20mL)， 并将 产物提取到乙酸乙酯 (2x20mL) 中。将有机物干燥 (MgSO4)， 真空浓缩， 并用二氧化硅纯化， 得到 298。NMR ： (CDCl3) ： 2.95-2.98(5H， m)， 3.31(3H， s， Me)， 4.19-4.21(2H， m)， 6.10(1H， s， NH)， .76(1H， s， Ar)， 6.96(1H， d， J 8.4， Ar)， 7.31-7.36(2H， m， Ar)， 7.64-7.67(2H， m， Ar) 和 7.87(1H， d， J 1.8， Ar)。MS ： (ESI+)MH+451.25
     实施例 209 ： 8- 甲基氨基甲酰基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 氮杂 -3- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (2- 氯 -(4- 甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )- 甲基 - 酰胺 299
     使 8- 溴 -4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -2- 甲 酸 (2- 氯 -4- 甲基氨基甲酰基 - 苯基 )- 甲基 - 酰胺 111(60mg)、 六羰基钼 (31mg)、 Hermann′ s 催化剂 (22mg)、 甲胺 (2.0M 溶液， 在 THF 中， 0.20mL) 和二氮杂双环十一烷 (DBU， 8.8μl) 的混合物在微波中、 在 150℃反应 20 分钟。然后冷却反应混合物， 用乙酸乙酯稀释， 用盐水 洗涤， 干燥 (MgSO4)， 真空除去溶剂， 使用快速色谱纯化残余物， 得到 299。(400MHz， CDCl3) ： 2.92(3H， d， J 4.8)， 2.98(3H， d， J 4.8)， 3.24-3.26(2H， m)， 3.38(3H， s， Me)， 4.18-4.21(2H， m)， 6.12(2H， s， NH)， 7.04-7.10(2H， m， Ar)， 7.19(1H， s， Ar)， 7.36(1H， d， J 8.1， Ar)， 7.62-7.64(1H， m， Ar) 和 7.83(1H， d， J1.9， Ar)
     实施例 210 ： N2-(2- 氯苯基 )-N9- 乙基 -N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2，
     3-d] 氧杂
     -2， 9- 二甲酰胺 300
     在室温下， 将 N2-(2- 氯苯基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2， 9- 二甲酰胺 119(70mg)、 TFA(37.5μL)、 三乙硅烷 (80μL) 和乙醛 (28μL) 的混合物 在无水 MeCN(Dube 等人 (1999)Tet.Letters40(12) ： 2295-2298) 中搅拌过夜， 然后真空浓 缩。在二氧化硅上纯化， 得到 300。NMR ： (CDCl3δ7.19ppm) ： 1.21(t， 3H， CH3， J ＝ 7.28Hz)， 2.93(t， 2H， CH2， J ＝ 5.07Hz)， 3.32(s， 3H， CH3)， 3.43(m， 2H， CH2)， 4.17(t， 2H， CH2， J ＝ 5.10Hz)， 5.94(m， H， NH)， 6.59(s， H， ArH)， 6.91(d， H， ArH， J ＝ 8.41Hz)， 7.29-7.36(m， 3H， 3xArH)， 7.44-7.47(m， 2H， 2xArH)， 7.81(m， H， ArH)。MS ： (ESI+)MH+482.15
     实施例 211 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-(3-( 吡啶 -2- 基氨基 ) 丙酰胺 )-4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -2- 甲酰胺 301用 常 规 酰 胺 偶 合 方 法， 2-[(2， 4- 二 氯 - 苯 基 )- 甲 基 - 氨 基 甲 酰 基 ]-4， 5- 二 氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸和 1- 丁基 -1- 哌嗪羧酸酯反应， 得到 4-{2-[(2， 4- 二氯 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酰基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 羰基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯。
     向 4-{2-[(2， 4- 二氯 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酰基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 羰基 }- 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯的 THF 溶液中加入盐酸 (2eq 的 2M 二乙醚溶液 )， 并将反应在室温下搅拌 16 小时。 然后将混合物用碳酸氢钠水溶液淬灭， 并提 取到乙酸乙酯中。将有机层干燥 (MgSO4)， 真空浓缩， 并用二氧化硅纯化， 得到标题化合物。 NMR ： (CDCl3) ： 2.72-2.95(4H， br m)， 2.98-3.01(2H， m)， 3.29(3H， s， Me)， 3.38-3.75(4H， br m)， 4.17-4.20(2H， m)， 6.81(1H， s， Ar)， 6.94(1H， d， J8.3， Ar)， 7.16(1H， dd， J 8.9and 1.3， Ar)， 7.23(1H， d， J 8.5， Ar)， 7.28(1H， dd， J 8.4and 2.1， Ar)， 7.44(1H， s， Ar) 和 7.58(1H， d， J 2.2， Ar)。MS ： (ESI+)MH+ ＝ 557.13
     实施例 212N-(2- 乙酰胺基乙基 )-2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂
     -8- 甲酰胺 3022-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和 N-(2- 氨乙基 ) 乙酰胺得到 302。MS(ESI)508.1 实施例 2132-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-N-(2- 吗啉基乙基 )-4， -8- 甲酰胺 303 由 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d]253氧杂

    [1000] 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1001] 102333779 A CN 102333793说明书218/280 页氧杂

    [1002] -8- 羰基氯和 2- 吗啉基乙胺得到 303。MS(ESI)536.2 实施例 2142-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-N-(2-( 二甲基氨基 ) 乙 -8- 甲酰胺 304 由 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和 N1， N1- 二甲基乙烷 -1， 2- 二胺得到 304。MS(ESI)494.2 实 施 例 2152-(4-(2- 氯 苯 基 )-4H-1， 2， 4- 三 唑 -3- 基 )-N-(1， 3- 二 羟 基 -8- 甲酰胺 305 由 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和 2- 氨基 -1， 3- 丙二醇得到 305。MS(ESI)497.3 实施例 216N2-(2- 氯 -4-( 甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] -2， 9- 二甲酰胺 306 -2- 甲酰胺 298(100mg) 和碳酸钾 (37mg) 的 DMSO(3mL) 在 0 ℃下， 向 N-(2- 氯 -4-( 甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-9- 氰基 -N- 甲基 -4， 5- 二基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1003] 氧杂

    [1004] 丙 -2- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1005] 氧杂

    [1006] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1007] 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂溶液中加入过氧化氢 (30ul 33 ％水溶液 )。将反应在室温下搅拌 16 小时。然后加入 水， 过 滤 收 集 得 到 的 固 体， 空 气 干 燥， 得 到 306。NMR ： (DMSO) ： 2.81(3H， d， J 4.5， Me)， 2.91-2.93(2H， m)， 3.68(3H， s， Me)， 4.19-4.22(2H， m)， 6.41(1H， s， NH)， 7.03(1H， d， J8.4， Ar)， 7.35(1H， s)， 7.71-7.77(2H， m， Ar)， 7.92(1H， dd， J 8.3and 2.0， Ar)， 8.03-8.05(3H， m) 和 8.65-8.67(1H， m)。MS ： (ESI+)MH+469.35

    [1008] 实施例 2175-(8-(1H- 吡唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 按 照 实 施 例 93 的 方 法， 5-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 胺 307

    [1009] -2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 胺与 4-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧杂硼 杂环戊烷 -2- 基 )-1H- 吡唑偶合， 得到 307。MS(ESI)461.1

    [1010] 实施例 2185-(6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 )-2- 乙酰 -9- 基 )氨基吡啶 308

    [1011] 在 1mL 乙酸酐中将 5-(6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂吡啶 -2- 胺 142(60mg， 0.2mmol) 在 85℃下加热 60 分钟。然后将反应混合物冷却至室温， 滤 出沉淀， 用冷的乙醇洗涤， 高真空干燥， 得到 308(44mg， 60％ )。MS ： (ESI+)338.1

    [1012] 实施例 219 ： N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -(3- 羟甲基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1013] )-9- 甲酰胺 309

    [1014] 向 5- 羟 基 - 烟 酸 甲 酯 (2.50g， 16.3mmol) 的 四 氢 呋 喃 (50.0mL， 616mmol)/ 水 (50.0mL， 2780mmol) 溶液中加入碳酸钠 (5.19g， 49.0mmol) 和碘 (10.4g， 40.8mmol)。在室温下搅拌反应混合物 4 小时。分离包含产物的水层， 并用己烷洗涤。用 HCl 将有机层中和 至 pH7， 用 EtOAc 提取 4 次。将合并的有机层用 Na2SO4 干燥， 浓缩。用快速色谱纯化粗品 (EtOAc/DCM)( 在 40 ％ EtOAc 时洗脱出 )， 得到 5- 羟基 -6- 碘代烟酸甲酯 (81.2 ％ )。MS ： (ESI+)280.0

    [1015] 向 包 含 5- 羟 基 -6- 碘 代 烟 酸 酯 (3.70g， 13.3mmol ； )、 2-(3- 噻 吩 基 ) 乙 醇 (1.90mL， 17.2mmol) 和三苯基膦 (4.52g， 17.2mmol ； ) 的四氢呋喃 (73.3mL， 903mmol ； ) 溶液 中逐滴加入偶氮二羧酸二异丙基酯 (3.39mL， 17.2mmol ； )。在室温下搅拌反应混合物过夜。 浓缩反应混合物， 用快速色谱纯化 (EtOAc/ 己烷 (0-100％ ))( 在 30％时洗脱出 )， 得到 6- 碘 代 -5-(2-( 噻吩 -3- 基 ) 乙氧基 ) 烟酸甲酯 (93.2％产率 )。MS ： (ESI+)390.1

    [1017] 向 6- 碘 代 -5-(2- 噻 吩 -3- 基 - 乙 氧 基 )- 烟 酸 甲 基 酯 (4.40g， 11.3mmol) 的 N， N- 二甲基甲酰胺 (176mL， 2270mmol) 溶液中加入碳酸钾 (9.37g， 67.8mmol)、 三苯基膦 (1.19g， 4.52mmol) 和乙酸钯 (508mg， 2.26mmol)。在 90℃搅拌反应混合物 8 小时。用 MeOH 稀释反应混合物， 然后通过硅藻土过滤。浓缩滤液。用快速色谱纯化粗品 (EtOAc/ 己烷 (0-100％ ))( 在 30％时洗脱出产物 )， 得到 3- 甲基羧基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并

    [1018] [2， 3-d] 氧杂

    [1019] (52.8％ )。MS ： (ESI+)262.0

    [1020] 在 0 ℃， 向 1.00M 二异丁基氢化铝的甲苯 (4.02mL) 溶液中加入 3- 甲基羧基 -6， (0.420g， 1.61mmol) 的 甲 苯 (17.8mL，7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂167mmol)( 溶液 )。 在 0℃搅拌反应混合物 2 小时。 用 EtOAc 稀释反应， 然后用 1M HCl 淬灭。 用 Na2SO4 干燥有机层， 浓缩， 得到 3- 羟甲基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 杂 将其溶于三乙胺 (0.336mL， 2.41mmol) 和 N， N- 二甲基甲酰胺 (10.5mL， 136mmol) 中。 加入叔丁基二甲基甲硅烷基氯 (0.291g， 1.93mmol)。在室温下搅拌反应 20 分钟。用 EtOAc 稀释反应， 用水和盐水洗涤， 干燥， 浓缩， 得到 3- 叔丁基二甲基硅氧基甲基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂在 0℃将其溶于 DCM/ 乙酸中。加入 N- 溴代琥珀酰亚胺(315mg， 1.77mmol)。在室温下搅拌反应过夜。浓缩反应， 用快速色谱纯化 (EtOAc/ 己烷 ) ( 在 10％时洗脱出 )， 得到 3- 叔丁基二甲基硅氧基甲基 -9- 溴 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1021] (61.3％产率 )。MS ： (ESI+)426.1

    [1022] 在 -78℃， 向 3- 叔丁基二甲基硅氧基甲基 -9- 溴 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 (0.0500g， 0.117mmol ； ) 的四氢呋喃 (1.78mL， 22.0mmol) 溶液中逐滴加入[2， 3-d] 氧杂1.60M 的正丁基锂 / 己烷 (0.0806mL) 溶液。将反应混合物在 -78℃搅拌 1 小时。在 -78℃， 将氯甲酸乙酯 (0.0336mL， 0.352mmol ； ) 加入到混合物中， 然后搅拌 2 小时。用饱和 NaHCO3 淬灭反应混合物， 然后用 EtOAc 提取 (2x)。将合并的有机层用 Na2SO4 干燥， 浓缩。用快速 色谱纯化粗品 (0-50 ％ EtOAc/ 己烷 )( 在 15 ％时洗脱出 )， 得到 3- 叔丁基二甲基硅氧基 甲基 -9- 乙基羧基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 (ESI+)420.1

    [1023] (36 ％产率 )。MS ：

    [1024] 向 3- 叔丁基二甲基硅氧基甲基 -9- 乙基羧基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 (0.100g， 0.238mmol) 的 四 氢 呋 喃 (0.715mL， 8.82mmol) 和 水 (0.715mL，[2， 3-d] 氧 杂39.7mmol) 溶液中加入 1.00M 氢氧化锂水溶液 (0.715mL)。在室温下搅拌反应混合物过夜。 浓缩反应混合物， 用 1MHCl 酸化残余物， 然后用 EtOAc 提取 (3X)。 干燥 (Na2SO4) 合并的有机 物， 过滤， 浓缩， 得到 3- 叔丁基二甲基硅氧基甲基 -9- 羧基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩 并 [2， 3-d] 氧杂 向其中加入 5ml DCM、 三乙胺 (0.166mL， 1.19mmol) 和乙酸酐 (0.112mL， 1.19mmol)。在室温下搅拌反应 1 小时。用 NaHCO3 淬灭反应， 用 EtOAc 洗涤。用 1M HCl 酸 化有机层， 用 EtOAc 提取 (3X)。干燥 (Na2SO4) 合并的有机物， 过滤， 浓缩， 得到 3- 乙酰氧基甲基 -9- 羧基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂将其溶于 5mL DCM 中。 加入 2.0M 草酰氯的二氯甲烷溶液 (DCM， 0.357mL) 和 1 滴 DMF。在室温下搅拌反应 2 小时。浓 缩反应， 得到 3- 乙酰氧基甲基 -9- 氯代羰基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 杂 将其溶于 5mL 乙腈中。加入 3- 氯 -N， N- 二甲基 -4-( 甲基氨基 ) 苯甲酰胺 (0.101g， 0.477mmol ； ) 和碳酸氢钠 (0.040g， 0.47mmol)。在室温下搅拌反应过夜。用水猝灭反应， 用 乙酸乙酯提取三次， 浓缩。用快速色谱纯化粗品 (50-100％ EtOAc/ 己烷 )( 在 100％ EtOAc 时洗脱出产物， 在 75％ EtOAc 时 sm)， 得到 N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲 基 -(3- 乙酰氧基甲基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 )-9- 甲酰胺 (41％ )。MS ： (ESI+)514.3

    [1025] 向 N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -(3- 乙酰氧基甲基 -6， 7- 二 氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 )-9- 甲酰胺 (0.050g， 0.097mmol ； ) 的四氢呋 喃 (2.28mL， 28.0mmol) 和水 (2.28mL， 126mmol) 溶液中加入氢氧化锂一水合物 (0.0163g， 0.389mmol)。在室温下搅拌反应混合物过夜。将反应混合物浓缩， 用 1M HCl 酸化， 然后用 DCM 提取 (3X)。干燥 (Na2SO4) 合并的有机物， 过滤， 浓缩。用快速色谱纯化粗品 (EtOAc/ 己 烷 (0-100％ ))， ( 在 80％时洗脱出 )， 得到 309(87％ )。MS ： (ESI+)472.1

    [1026] 实施例 220 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-(1H- 吡唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻 吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1027] -2- 甲酰胺 310 -2- 甲 酰 胺 与 5-(4， 4， 5， 5- 四 甲 基 -1， 3， 2- 二 氧 杂 硼 杂 环 戊按照实施例 93 的方法， 使 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b]噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂烷 -2- 基 )-1H- 吡唑偶合， 得到 310。MS(ESI)436.1

    [1028] 实 施 例 221 ： 2-(4-(2- 氯 苯 基 )-4H-1， 2， 4- 三 唑 -3- 基 )-N-((R)-2- 羟 基 丙 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1029] -8- 甲酰胺 311由 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和 (R)-1- 氨基丙 -2- 醇得到 311。MS(ESI)481.3 实施例 222 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二 -8- 甲酰胺 312氧杂

    [1030] 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1031] 由 2-(4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -8- 羰基氯和 2- 氨基乙醇得到 312。MS(ESI)467.3 实 施 例 223 ： 4-(2- 氯 苯 基 )-3-(4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂氧杂

    [1032] -2- 基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 313

    [1033] 使用 5％ Pd/ 碳， 在乙醇中， 在 1 大气压的氢气条件下， 将 3-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑氢化， 过滤、 浓缩并用 反相 HPLC 纯化后， 得到 313。MS(ESI)380.1

    [1034] 实 施 例 224 ： 8- 溴 -2-[4-(2- 氯 - 苯 基 )-4H-[1， 2， 4] 三 唑 -3- 基 ]-4， 5- 二 氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 314

    [1035] 向 实 施 例 21 的 8- 溴 -4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊环 -2- 甲酸乙酯 (518mg) 的四氢呋喃 (10mL) 溶液中加入氢氧化钠 (117mg) 水溶液 (2mL)。 还加入甲醇 (5mL)， 以便帮助溶解。2 小时后， 用 HCl(2M) 酸化反应混合物， 然后用二氯甲 烷提取反应混合物， 干燥 (MgSO4)， 真空除去溶剂， 得到 8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸。

    [1036] 向 8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (396mg) 的无水二氯甲烷 (20mL) 悬浮液中加入草酰氯 (180μl) 和 DMF(1 滴 )。3 小时后， 真空除 去溶剂， 并向残余物中加入乙腈 (20mL)、 2- 氯苯胺 (140μl) 和碳酸氢钠 (111mg)。3 小时 后， 将水加入到反应混合物中， 过滤收集得到的沉淀， 得到 8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (2- 氯 - 苯基 )- 酰胺 (467mg)。

    [1037] 将 8- 溴 -4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -2- 甲 酸 (2- 氯 - 苯基 )- 酰胺 (260mg)、 Lawesson ′ s 试剂 (193mg) 和甲苯 (10mL) 的混合物加热 至回流。5 小时后， 冷却反应混合物， 过滤收集沉淀， 得到相应的硫代酰胺， 8- 溴 -4， 5- 二 氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 硫代羧酸 (2- 氯 - 苯基 )- 酰胺 (160mg)。

    [1038] 将 8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 硫代羧酸 (2- 氯 - 苯基 )- 酰胺 (160mg)、 甲醇 (10mL) 和水合肼 (170μl) 的混合物加热至回流， 保持 6 小时。然后冷却反应混合物， 过滤收集固体。将该固体 (144mg) 和原甲酸三乙酯 (5ml) 的混合物加热至 90℃， 保持 2 小时， 而后加热至 130℃， 保持 2 小时。然后冷却反应混合物， (CDCl3) ： 3.32(2H， t)， 真空除去溶剂， 使用快速色谱法纯化残余物， 得到 314(55mg)。NMR ： 4.36(2H， t)， 6.96(1H， dd)， 7.11-7.16(2H， m)， 7.49-7.68(4H， m)， 8.30(1H， s)。MS ： (ESI+) MH+461

    [1039] 实施例 225 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -(8- 氨基 -4， 5- 二氢吡啶并 -[4， 3-b] 噻吩 并 [2， 3-d] 氧杂

    [1040] -2)- 甲酰胺 315

    [1041] 将 间 氯 过 苯 甲 酸 (1.55g， 6.29mmol) 分 批 地 加 入 到 1.0g(3.02mmol)3- 碘 代 -4-(2-( 噻吩 -3- 基 ) 乙氧基 ) 吡啶的 150mL 二氯甲烷溶液中。搅拌混合物 18 小时， 然 后与 100ml 1M 碳酸钠水溶液混合。 分离有机层， 用 10ml 二氯甲烷提取含水层 2 次。 用盐水 洗涤合并的有机提取物， 用硫酸钠干燥。真空浓缩溶液， 得到 3- 碘代 -4-(2-( 噻吩 -3- 基 ) 乙氧基 ) 吡啶 1- 氧化物 (1.01g， 92％ )。MS ： (ESI+)348.0

    [1042] 在 0 ℃， 将 对 甲 苯 磺 酸 的 酸 酐 (1.47g， 4.49mmol) 的 15mL 氯 仿 溶 液 逐 滴 加 入 到 0.78g(2.25mmol)3- 碘 代 -4-(2-( 噻 吩 -3- 基 ) 乙 氧 基 ) 吡 啶 1- 氧 化 物 和 1.18mL(11.2mmol) 叔丁胺在 15mL 氯仿中的搅拌混合物中。30 分钟后， 加入同样数量的对 甲苯磺酸酐， 重复加入叔丁胺， 以便完成反应。浓缩反应混合物， 并在 100ml 二乙醚和 1M 碳

    [1043] 酸钠水溶液之间分配。用 50ml 二乙醚再次提取水层， 用水、 盐水洗涤合并的有机提取物， 用 硫酸钠干燥， 真空浓缩。 用快速色谱纯化残余物， 用 10％乙酸乙酯 / 己烷洗脱， 得到 N- 叔丁 1 基 -5- 碘代 -4-(2-(2 噻吩 -3- 基 ) 乙氧基 ) 吡啶 -2- 胺 (0.473g， 52％ )。 H NMR(400MHz， CDCl3)δ8.15(s， 1H)， 7.28(dd， J ＝ 3.0， 4.8， 1H)， 7.18(s， 1H)， 7.12(d， J ＝ 4.9， 1H)， 5.85(s， 1H)， 4.44(s， 1H)， 4.15(t， J ＝ 6.5， 2H)， 3.18(t， J ＝ 6.5， 2H)， 1.39(s， 9H)。MS ： (ESI+)403.2

    [1044] 按 照 反 应 路 线 4， 在 乙 酸 钯 (II) 和 三 苯 基 膦 的 存 在 下， 将 N- 叔 丁 基 -5- 碘 代 -4-(2-( 噻吩 -3- 基 ) 乙氧基 ) 吡啶 -2- 胺环化， 得到 N- 叔丁基 -4， 5- 二氢吡啶并

    [1045] [4， 3-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-8- 胺 (42 ％ )。1H NMR(400MHz， CDCl3)δ8.44(s， 1H)，7.04(d， J ＝ 5.2， 1H)， 6.81(d， J ＝ 5.2， 1H)， 6.07(s， 1H)， 4.59(s， 1H)， 4.35-4.29(m， 2H)， 3.21-3.07(m， 2H)， 1.42(s， 9H)。MS ： (ESI+)275.1

    [1046] 在 80℃， 将 N- 叔丁基 -4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-8- 胺(115mg， 0.42mmol) 和二碳酸二叔丁基酯 (275mg， 1.26mmol) 在 3mL 叔丁醇中的混合物加热 4 小时。真空浓缩混合物， 用快速色谱纯化残余物， 用 10％乙酸乙酯 / 己烷洗脱， 得到叔丁 基 (4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -8- 基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (120mg， 76％ )。1H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.80(s， 1H)， 7.26(s， 1H)， 7.23(d， J ＝ 5.1， 1H)， 6.90(d， J ＝ 5.2， 1H)， 6.69(s， 1H)， 4.39(t， J ＝ 4.8， 2H)， 3.25(t， J ＝ 4.8， 2H)， 1.40(s， 9H)， 1.37(s， 9H)。MS ： (ESI+)375.4

    [1048] 将 N- 溴代琥珀酰亚胺 (59mg， 0.33mmol) 的 1mL 二甲基甲酰胺溶液逐滴加入到叔 -8- 基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (120mg，丁基 (4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂0.32mmol) 的 2mL 二甲基甲酰胺 (DMF) 溶液中。搅拌反应混合物 18 小时， 真空浓缩， 并在水和乙酸乙酯之间分配。用水、 盐水洗涤有机层， 用硫酸钠干燥， 真空浓缩， 得到 2- 溴 -4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1050] -8- 基 ( 叔丁基 ) 氨基甲酸叔丁基酯， 其不用进一步纯化就可以用于下一步。MS ： (ESI+)453.2

    [1051] 按照反应路线 4， 2- 溴 -4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-8- 基( 叔丁基 ) 氨基甲酸叔丁基酯和 2- 氯苯基异氰酸酯反应， 得到叔丁基 (2-(2- 氯苯基氨基 甲酰基 )-4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 (61％ )。MS ： (ESI+)528-2

    [1052] -8- 基 ) 氨基甲酸叔丁基酯

    [1053] 按照反应路线 4， 叔丁基 (2-(2- 氯苯基氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] -8- 基 ) 氨基甲酸叔丁基酯、 甲基碘和氢化钠反应， 得到叔丁基噻吩并 [2， 3-d] 氧杂(2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -8- 基 ) 氨基甲酸叔丁基酯 (78％ )。MS ： (ESI+)542.3

    [1054] 将 0.10g(0.185mmol) 叔丁基 (2-((2- 氯苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢 吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -8- 基 ) 氨基甲酸叔丁基酯的 3mL 三氟乙酸溶液 在室温下搅拌 30 分钟， 而后在 70℃加热 45 分钟。真空浓缩混合物， 用乙醚研磨残余物， 滤 出沉淀， 用乙醚洗涤。通过在饱和碳酸氢钠水溶液和乙酸乙酯之间分配， 将得到的三氟乙 酸盐转变为游离碱。用水、 盐水洗涤乙酸乙酯提取物， 用硫酸钠干燥， 浓缩， 得到 315(46mg， 1 63 ％ )。 H NMR(500MHz， DMSO)δ8.01(s， 1H)， 7.67(d， J ＝ 9.4， 1H)， 7.63(d， J ＝ 8.6， 1H)， 7.56-7.48(m， 2H)， 6.47(s， 1H)， 6.21(s， 2H)， 5.94(s， 1H)， 4.14(s， 2H)， 3.26(s， 3H)， 2.87(s， 2H)。MS ： (ESI+)386.1

    [1055] 实施例 226 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -(8- 乙酰胺基 -4， 5- 二氢吡啶并 -[4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1056] -2)- 甲酰胺 316在 75℃， 将 N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -(8- 氨基 -4， 5- 二氢吡啶并 -[4， 3-b] 噻吩并[2， 3-d] 氧杂-2)- 甲酰胺 315(18mg， 0.047mmol) 在 3mL 乙酸酐中的混合物加热 45 分钟。真空浓缩混合物， 将残余物再溶解在 3ml 甲醇中， 并与 0.3ml 28％氨水混合。在 5 分钟内， 将混合物倾倒在 5ml 水中， 并用乙酸乙酯提取。用水、 盐水洗涤有机提取物， 用硫酸钠干燥， 真空浓缩。用快速色谱纯化残余物， 用 50％乙酸乙酯 / 己烷洗脱， 得到 316(13mg， 65％ )。 H NMR(500MHz， DMSO)δ10.59(s， 1H)， 8.35(s， 1H)， 7.71-7.62(m， 3H)， 7.58-7.49(m， 2H)， 6.42(s， 1H)， 4.25(s， 2H)， 3.27(s， 3H)， 2.93(s， 2H)， 2.08(s， 3H)。MS ： (ESI+)428.1

    [1057] 实施例 227 ： N-(2- 氯 -4-( 哌嗪 -1- 羰基 ) 苯基 )-N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1058] 1-2- 甲酰胺 317

    [1059] 在室温下， 以份额方式向预先用 1M 六甲基二硅胺钠的 THF(3.46ml) 溶液处理的 3- 氯 -4-(2-( 叔丁基二甲基硅基氧基 ) 乙胺基 ) 苯甲酸甲酯 (1.3g 3.78mmol) 的四氢呋 -2- 羰基氯 (1.00g，喃 (12.2mL) 溶液中加入 4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂3.79mmol)。 在氮气氛围中， 在室温下搅拌反应混合物 1 小时。 真空浓缩反应混合物， 将残余 物接纳在乙酸乙酯中， 用水、 然后盐水洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 得到 1.37 克粗品 4-(N-(2-( 叔丁 基二甲基硅基氧基 ) 乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 苯甲酸甲酯。MS ： (ESI+) ＝ 572.1

    [1060] -2- 甲酰氨基 )-3- 氯

    [1061] 将 4-(N-(2-( 叔丁基二甲基硅基氧基 ) 乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 甲酰氨基 )-3- 氯苯甲酸甲酯 (1.37 克， 2.39mmol) 和氢氧化锂 (0.229g，3-d] 氧杂0.68mmol) 的 5mL 水 和 20mL THF 溶 液 在 室 温 下 搅 拌， 得 到 预 期 的 羧 酸， 用 LC/MS 确 定 (59025-71)。除去反应混合物中的 THF， 并用水稀释， 用浓 HCl 酸化。用乙酸乙酯提取水溶液， 用水洗涤有机物， 用盐水洗涤， 真空浓缩， 得到固体。将固体物质接纳在 20mL THF 中， 加 入乙酸 (0.135mL， 2.4mmol)。接下来， 通过注射器将 1M TBAF/THF( 溶液 ) 加入到反应混合 物中， 在室温下将溶液搅拌过夜。然后用大量乙酸乙酯稀释反应混合物。用水、 然后盐水洗 涤此溶液， 干燥 (Na2SO4)， 然后真空浓缩， 得到固体。用 MPLC 纯化粗品 ( 在 120g 二氧化硅 柱上 )， 用 20-90％乙酸乙酯 / 己烷洗脱， 得到 1 克 3- 氯 -4-(N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯 并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 ＝ 443.1

    [1062] -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸。产率＝理论值的 90％。MS ： (ESI+) -2- 甲向 3- 氯 -4-(N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂酰氨基 ) 苯甲酸 (0.100g， 0.225mmol) 的 1mL THF 溶液中加入 HATU(0.094g， 0.248mmol) 和 DIEA(0.078mL， 0.450mmol)( 以整体形式加入 )。在室温下搅拌反应混合物 30 分钟。接 下来， 将哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.12g， 0.22mmol) 加入到反应混合物中， 并在室温下搅拌 1 小时。将反应混合物接纳在大量的乙酸乙酯中， 用水、 然后盐水洗涤， 干燥 (Na2SO4)。然 后真空浓缩有机物， 得到固体残余物， 将其用 RP-HPLC 纯化， 得到 4-(3- 氯 -4-(N-(2- 羟乙 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酰基 ) 哌嗪 -1- 甲酸 叔丁基酯。

    [1063] 在室温下， 将 4-(3- 氯 -4-(N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 杂 -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酰基 ) 哌嗪 -1- 甲酸叔丁基酯 (0.04g， 0.6mmol) 的 0.500mL DCM 溶液用 TFA(0.1g， 1mmol) 处理， 用 TLC 监控起始原料的损耗。1 小时后， 反应完成。真空浓 缩反应混合物， 得到 317 固体， 用 RP-HPLC 纯化， 产率＝理论值的 22％。 MS ： (ESI+) ＝ 512.5

    [1064] 实施例 228 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -8-(3- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯 并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1065] -2- 甲酰胺 318按照实施例 93 的方法， 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 -2- 甲酰胺与 5- 甲基 -4-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -1， 3， 2- 二氧杂硼杂环戊 -9- 基 ) 吡并 [2， 3-d] 氧杂

    [1066] 烷 -2- 基 )-1H- 吡唑偶合， 得到 318。MS(ESI)450.1 实 施 例 229 ： 5-(6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂啶 -2- 甲胺 319

    [1067] 将 80mg(0.3mmol)9- 溴 -6， 7- 二 氢 - 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂78.3(0.34mmol)2- 氰基吡啶 -5- 硼酸频哪醇酯和 10mg(0.014mmol) 二 ( 三苯基膦 ) 氯化钯 (II) 在 0.35mL(0.35mmol)1M 碳酸钠水溶液和 4mL 乙腈中的混合物脱气， 并在 200Wt 微波 中、 在 140℃加热 30 分钟。将反应混合物通过硅藻土过滤， 并在乙酸乙酯和水之间分配。将 有机层用水和盐水洗涤， 用硫酸钠干燥， 真空浓缩。 在 4g 二氧化硅柱上纯化残余物， 用 10％ 甲醇 / 二氯甲烷洗脱， 得到 5-(6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 吡啶 -2- 腈。产率 27mg(30％ )。MS ： (ESI+)306.1

    [1068] -9- 基 ) -9- 基 )将 25mg(0.082mmol)5-(6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂吡啶 -2- 腈的 3mL 乙酸和 3mL 四氢呋喃溶液用 40mg 的 5 ％钯 / 炭氢化 4 小时。滤出催 化剂， 并真空浓缩母液。用乙醚研磨残余物， 得到沉淀， 收集， 真空干燥， 得到 319。产率 1 24mg(79％ )。MS ： (ESI+)310.0。 H NMR(400MHz， DMSO)δ8.82(s， 1H)， 8.25(dd， J ＝ 4.4，1.1， 1H)， 8.06(dd， J ＝ 8.1， 1.9， 1H)， 7.50(d， J ＝ 9.9， 2H)， 7.42(dd， J ＝ 8.1， 1.1， 1H)， 7.23(dd， J ＝ 8.1， 4.5， 1H)， 4.35(t， J ＝ 4.6， 1H)， 3.86(s， 2H)， 3.24(t， J ＝ 4.6， 2H)。

    [1069] 实 施 例 230 ： 3-(4， 5- 二 氢 吡 啶 并 [4， 3-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 320

    [1070] 按照反应路线 4， 2- 溴 -4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂和 2- 氯苯基异硫氰酸酯反应， 得到 N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 硫代甲酰胺 (carbothioamide)(66％ )。MS ： (ESI+)357.0

    [1072] 将 肼 (0.32mL， 10mmol) 加 入 到 N-(2- 氯 苯 基 )-4， 5- 二 氢 吡 啶 并 [4， 3-b] 噻 吩 -2- 硫代甲酰胺 (carbothioamide)(90mg， 0.2mmol) 的 3mL 甲醇悬浮液 -2- 肼代酰胺 (carbohydrazonamide)(94mg， -2- 肼代酰并 [2， 3-d] 氧杂中， 并搅拌反应混合物 24 小时。过滤沉淀， 用甲醇洗涤， 真空干燥， 得到 N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 90％ )。MS ： (ESI+) ＝ 371.1

    [1074] 将 N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂胺 (carbohydrazonamide)(44mg， 0.12mmol) 和 3mL 原甲酸三乙酯的混合物在 85℃加热 4 小 时。 将混合物真空浓缩， 用二乙醚研磨。 收集沉淀， 用二乙醚洗涤， 用快速色谱纯化， 用 60％ 乙酸乙酯 / 己烷洗脱， 得到 320(17mg， 38％ )。MS ： (ESI+)381.1

    [1075] 实 施 例 231 ： 3-(4， 5- 二 氢 吡 啶 并 [4， 3-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮 321

    [1076] 在 65 ℃， 将实施例 230 的 N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 肼代酰胺 (carbohydrazonamide)(42mg， 0.11mmol) 和 92mg(0.57mmol)N， N- 羰二咪唑在 3mL 二甲基甲酰胺中的混合物加热 18 小时。 将混合物真空浓缩， 用二乙醚研 磨。收集沉淀， 用乙醚洗涤， 用快速色谱纯化， 用 5％甲醇 / 二氯甲烷洗脱， 得到 321(14mg， 31％ )。MS ： (ESI+)397.0263102333779 A CN 102333793

    [1077] 说-2- 甲酰胺 322明书228/280 页实施例 232 ： N-(4- 氨甲酰基 -2- 氯苯基 )-N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1078] 向实施例 227 的 3- 氯 -4-(N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -2- 甲酰氨基 ) 苯甲酸 (0.08g， 0.20mmol) 的 72mL THF 溶液中以整体形式加入氧杂HATU(0.082g， 0.22mmol) 和 DIEA(0.12mL， 0.72mmol)。在室温下搅拌反应混合物 30 分钟。 接下来， 将氯化铵 (0.12g， 0.22mmol) 加入到反应混合物中， 并在室温下搅拌 1 小时。将反 应混合物接纳在大量的乙酸乙酯中， 用水、 然后盐水洗涤， 干燥 (Na2SO4)。然后真空浓缩有 机物， 得到 322 固体残余物， 用 RP-HPLC 纯化。产率＝理论值的 25％。MS ： (ESI+) ＝ 442.1

    [1079] 实施例 233 ： N2-(2， 4- 二氯苯基 )-N2， N8- 二甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1080] -2， 8- 二甲酰胺 323实 施 例 234 ： 4-(4， 5- 二 氢 吡 啶 并 [4， 3-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-5-(2- 氯苯基 )-2H-1， 2， 3- 三唑 324

    [1081] 将 实 施 例 72 的 2- 溴 -4， 5- 二 氢 吡 啶 并 [4， 3-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂(140mg， 0.5mmol)、 1- 氯 -2- 乙 炔 苯、 18mg(0.025mmol) 二 ( 三 苯 基 膦 ) 氯 化 钯 (II) 和 1mL(7.17mmol) 三 乙 胺 在 4mL 乙 腈 中 的 混 合 物 脱 气。 然 后 加 入 碘 化 铜 (I)(2.4mg， 0.012mmol)， 并将混合物在 85℃加热 3 小时。将混合物与 20mL 水混合， 并用 10ml 乙酸乙酯 提取两次。用 1％氨水、 水、 盐水洗涤合并的提取物， 用硫酸钠干燥。真空浓缩溶液， 用快速 色谱纯化残余物， 用 30％乙酸乙酯 / 己烷洗脱， 得到 2-((2- 氯苯基 ) 乙炔基 )-4， 5- 二氢吡 啶并 [4， 3-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1083] (137mg， 81％ )。MS ： (ESI+)338.1在 90 ℃， 将 68mg(0.2mmol)2-((2- 氯苯基 ) 乙炔基 )-4， 5- 二氢吡啶并 [4， 3-b] 和 52mg(0.8mmol) 叠氮化钠在 4mL 二甲亚砜中的混合物加热 36 小噻吩并 [2， 3-d] 氧杂时。 将水 (20mL) 加入到混合物中， 用 10mL 乙酸乙酯提取 6 次。 用水和盐水洗涤合并的有机 提取物， 用硫酸钠干燥。真空除去溶剂， 用乙酸乙酯将粗品重结晶， 得到 324(14mg， 18％ )。 1 H NMR(400MHz， DMSO)δ8.68(s， 1H)， 8.24(d， J ＝ 5.5， 1H)， 7.73-7.46(m， 4H)， 6.98(d， J＝ 5.5， 1H)， 6.77(s， 1H)， 4.31(t， J ＝ 4.7， 2H)， 3.08(t， J ＝ 4.7， 2H)。MS ： (ESI+)381.1

    [1084] 实施例 235 ： 2-(1-(2- 氯苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 并 [2， 3-d] 氧杂

    [1085] 264-8- 腈

    [1086] 将 8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺悬浮在无水甲苯中， 并用二甲基甲酰胺二甲缩醛处理反应混合物。将全部溶液在 90℃加热大约 8 小时， 粗品彻底地转化为预期的酰基脒中间体。将在乙酸和水 冷却至室温， 浓缩。1H NMR 表明， 中的 (2- 氯苯基 ) 肼一次性加入到粗品残余物中。将全部物料密封， 并在 95℃加热， 得到 亮黄色悬浮液。经过 8 小时， LCMS 表明形成大量产物。将反应混合物浓缩， 用二氯甲烷和 饱和碳酸氢钠稀释， 用二氯甲烷提取。用盐水洗涤合并的有机物， 用硫酸钠干燥， 浓缩， 用 快速柱色谱纯化粗品残余物， 得到 5-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 基 )-1-(2- 氯苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑。

    [1087] 按照实施例 53 的方法， 在 DMF 中， 使 5-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] -2- 基 )-1-(2- 氯苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑与 CuCN 反应， 用反相 HPLC 纯化后， 得到氧杂325 无色固体。MS ： (ESI+)405.1

    [1089] 实施例 236 ： 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 -3- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (2- 氯 - 苯基 )- 甲基 - 酰胺 326

    [1090] 在 0 ℃， 向 4- 苯并二氢吡喃 -4- 酮 (1eq， 16.8mmol， 2.5g) 的无水二乙醚 (70mL) 溶液中逐滴加入三氟化硼乙醚化物 (1.1eq， 18.6mmol， 2.4mL)， 而后逐滴加入 2M TMS 重氮 甲烷 / 醚 (1.1eq， 18.6mmol， 9.2mL)， 并在 0℃、 在 N2 氛围中搅拌 1 小时。小心地加入饱和 NaHCO3 水溶液 (100ml)， 将反应物提取到二乙醚中， 然后用水洗涤有机层， 而后用 MgSO4 干 燥， 过滤， 吸附到二氧化硅上。 然后在 ISCOcompanion 系统上纯化粗品， 运行梯度为 0％乙酸

    [1091] 乙酯 / 汽油至 20％乙酸乙酯 / 汽油。得到 2， 3- 二氢 -5H- 苯并 [b] 氧杂265-4- 酮黄色油102333779 A CN 102333793说明书230/280 页(1.15g， 产率 42％ )。

    [1092] 向 2， 3- 二氢 -5H- 苯并 [b] 氧杂-4- 酮 (1eq， 1.6mmol， 260mg， ) 的无水二乙醚(10ml) 溶液中逐滴加入溴 (1.1eq， 1.76mmol， 90ul)， 并搅拌反应一小时。将反应物吸附到 二氧化硅上， 在 ISCO companion 上纯化， 运行梯度为 0％乙酸乙酯 / 汽油至 15％乙酸乙酯 / 汽油， 在 9％乙酸乙酯时看到产物。得到 5- 溴 -2， 3- 二氢 -5H- 苯并 [b] 氧杂 (270mg， 产率 70％ )。

    [1094] -4- 酮油

    [1095] 将 5- 溴 -2， 3- 二氢 -5H- 苯并 [b] 氧杂-4- 酮 (1eq， 4.1mmol， 1g) 和硫代草氨酸乙酯 (1.5eq， 6.15mmol， 818mg) 的乙醇溶液回流 16 小时。将反应物冷却， 并吸附到二氧 化硅上， 在 ISCO companion 上纯化， 运行梯度为 0％乙酸乙酯 / 汽油至 40％乙酸乙酯 / 汽 油， 得到 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 -3- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸乙酯油 (530mg， 产率 47％ )。

    [1096] 将 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 -3- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸乙酯 (1eq， 1.9mmol， 530mg) 和氢氧化钠 (5eq， 9.6mmol， 385mg) 的 THF(5mL) 和水 (5ml) 溶液在室温下 搅拌 3 小时。真空浓缩反应， 用水洗涤固体， 得到 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 -3- 氮杂 - 苯 并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (290mg， 产率 58％ )。

    [1097] 向 4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -1- 硫 杂 -3- 氮 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -2- 甲 酸 (1eq， 0.38mmol， 101mg) 的 无 水 DCM(3mL) 悬 浮 液 中 加 入 1 滴 DMF， 而 后 逐 滴 加 入 2M 草 酰 氯 / DCM(1.7eq， 0.65mmol， 330ul)。看到冒泡， 在室温下搅拌反应 40 分钟， 而后真空蒸发。将粗 品溶于 DCM(3mL) 中， 加入 2- 氯 -N- 甲基苯胺 (2eq， 0.76mmol， 94ul)。在室温下搅拌反应 16 小时， 并提取到 DCM 中， 用 K2CO3 水溶液洗涤， 用 MgSO4 干燥有机层， 过滤， 在二氧化硅上 纯化 (ISCO， 梯度 0％乙酸乙酯 / 汽油至 25％乙酸乙酯 / 汽油 )， 得到 326 白色固体 (42mg， 产率 30％ )。1H NMRDMSO， 2.89-2.92(2H， m)， 3.43(3H， s)， 4.23(2H， br。m)， 7.02(1H， d， J ＝ 8.4)， 7.08(1H， t， J ＝ 7.6)， 7.26(1H， t， J ＝ 8)， 7.38-7.41(2H， m)， 7.48-7.51(2H， m)， 7.58(1H， d， J ＝ 8.4)。MS ： (ESI+) ： MH+371， 纯度＞ 95％。

    [1098] 实施例 237 ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [3， 2-d] 氧杂-2- 甲酰胺 327

    [1099] 在 0℃， 向 4- 苯并二氢吡喃 -4- 酮 (9.54g， 64.3mmol) 的二乙醚溶液中慢慢地加入 三氟化硼乙醚化物 (16.3ml， 128.6mmol)， 而后逐滴加入 2M TMSCHN2/ 二乙醚。在 0℃搅拌 混合物 1 小时， 而后用饱和碳酸氢钠溶液和二乙醚稀释。干燥有机相， 浓缩， 在二氧化硅上 纯化， 得到 2， 3- 二氢 -5H- 苯并 [b] 氧杂

    [1100] -4- 酮。

    [1101] 在 0℃， 将三氯氧磷 (1.4mL， 15.2mmol) 逐滴加入到无水 DMF(5mL) 中。30 分钟后， -4- 酮 (980mg， 6.04mmol) 的无水 DMF(5ml) 溶 -5- 甲醛。逐滴加入 2， 3- 二氢 -5H- 苯并 [b] 氧杂液， 并将其在室温下搅拌 2 天。然后将反应混合物加入到冰水中， 使冰熔化， 而后提取到乙 酸乙酯中， 用水和盐水洗涤， 得到 4- 氯 -2， 3- 二氢 - 苯并 [b] 氧杂

    [1102] 在 0℃， 向 4- 氯 -2， 3- 二氢 - 苯并 [b] 氧杂-5- 甲醛 (605mg， 5.8mmol) 的二甲基甲酰胺 (8mL) 溶液中加入 2- 巯基乙酸乙酯 (640μl， 5.8mmol) 和碳酸钾 (800mg， 5.8mmol)。 在室温下搅拌反应混合物 30 分钟， 然后在 70℃搅拌 2 小时。冷却反应混合物， 用水和乙酸 乙酯稀释， 用盐水洗涤有机相， 干燥 (MgSO4)， 真空浓缩。在二氧化硅上纯化， 得到 4， 5- 二 氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸乙酯。

    [1104] 将 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸乙酯水解为其相应的羧 酸， 得到 4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸， 使其与 2- 氯 -N- 甲基苯 胺偶合。在二氧化硅上纯化粗品， 得到 327。1HNMR(400MHz， CDCl3) ： 3.12(2H， t)， 3.33(3H， s)， 4.22(2H， t)， 9.91-6.96(2H， m)， 7.05-7.09(1H， m)， 7.19-7.24(1H， m)。7.31-7.36(3H， m)， 7.45-7.49(1H， m)。MS ： (ESI+)MH 370

    [1105] 实施例 238 ： 2-(1-(2， 4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1106] -8- 甲酰胺 328

    [1107] 按 照 实 施 例 47 和 235 的 方 法，使 2-(1-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-1H-1， 2， 4- 三 -8- 甲酸与氯化铵、 HATU 和 DIPEA唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1108] 在 THF 中反应， 进行反相 HPLC 后， 得到 328 无色固体。MS ： (ESI+)425.0 实 施 例 239 ： 2-(4-(2- 氯 -4-( 甲 基 氨 基 甲 酰 基 ) 苯 基 )-4H-1， 2， 4- 三 -8- 甲酰胺 329 唑 -3- 基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1109] 按 照 实 施 例 47 和 235 的 方 法， 使 2-(4-(4- 羧 基 -2- 氯 苯 基 )-4H-1， 2， 4- 三 -8- 甲酸与过量的甲胺、 HATU 和唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂DIPEA 在 THF 中反应， 进行反相 HPLC 后， 得到 329 无色固体。MS ： (ESI+)494.1

    [1110] 实施例 240 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-N- 甲 基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1111] -8- 甲酰胺 330 -8- 甲酸与甲胺、 HATU 和 DIPEA按照实施例 47 和 235 的方法， 使 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2，4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂在 THF 中反应， 进行反相 HPLC 后， 得到 330 无色固体。MS ： (ESI+)453.0

    [1112] 实施例 241 ： N-(2- 乙酰胺基乙基 )-2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1113] -8- 甲酰胺 331 -8- 甲酸与 N-(2- 氨乙基 ) 乙按照实施例 47 和 235 的方法， 使 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2，4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂酰胺、 HATU 和 DIPEA 在 THF 中反应， 进行反相 HPLC 后， 得到 331 无色固体。MS ： (ESI+)524.0

    [1114] 实 施 例 242 ： N-(2- 氨 基 -2- 甲 基 丙 基 )-2-(4-(2- 氯 苯 基 )-5- 氧 代 -4， 5- 二 氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1115] -8- 甲酰胺 332按照实施例 47 和 235 的方法， 使 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， -8- 甲酸与 2- 甲基丙烷 -1， 2- 二4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂胺、 HATU 和 DIPEA 在 THF 中反应， 进行反相 HPLC 后， 得到 332 无色固体。MS ： (ESI+)510.0

    [1116] 实 施 例 243 ： N8-(2- 乙 酰 胺 基 乙 基 )-N2-(2- 氯 -4-( 二 甲 基 氨 基 甲 酰 基 ) 苯 基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1117] -2， 8- 二甲酰胺 333 -8- 甲酸与 N-(2- 氨乙基 ) 乙按照实施例 47 和 235 的方法， 使 2-((2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂酰胺、 HATU 和 DIPEA 在 THF 中反应， 进行反相 HPLC 后， 得到 333 无色固体。MS ： (ESI+)569.1

    [1118] 实施例 244 ： N2-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N8-(2-( 二甲基氨基 ) 乙 基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂268-2， 8- 二甲酰胺 按照实施例 47 和 235 的方法， 使 2-((2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )( 甲 -8- 甲酸与 N1， N1- 二甲基基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂乙烷 -1， 2- 二胺、 HATU 和 DIPEA 在 THF 中反应， 进行反相 HPLC 后， 得到 334 无色固体。MS ： (ESI+)555.2

    [1120] 实 施 例 245 ： 5-(6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-9- 基 )苯 -2- 甲胺 335

    [1121] 按 照 反 应 路 线 5， 2- 溴 -6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂和4-(N-Boc- 氨甲基 )- 苯基硼酸反应， 得到 4-(6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 杂 -9- 基 ) 苄基氨基甲酸叔丁基酯。MS ： (ESI+) ＝ 409.1。将盐酸 / 二 烷 (4mL， 4N) 加 -9- 基 ) 苄基氨 入到 67mg(0.16mmol)4-(6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂基甲酸叔丁基酯的 6mL 二氯甲烷溶液中， 并搅拌混合物 2 小时。收集沉淀， 用二氯甲烷和乙 醚洗涤， 真空干燥， 得到 335(34mg， 55％ )。MS ： (ESI+)309.1。

    [1123] 实施例 246 ： 9- 氰基 -N-(2， 4- 二氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1124] -2- 甲酰胺 336向 9- 氰基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (300mg) 的二 氯甲烷 (10mL) 溶液中加入 DMF(1 滴 ) 和草酰氯 (0.165mL)， 将反应在室温下搅拌 30 分钟。 然后真空浓缩溶剂， 将残余物再溶解在乙腈 (10ml) 中。向此溶液中加入 2， 4- 二氯 -N- 甲 基苯胺 (0.16mL) 和碳酸钾 (308mg)， 将反应在室温下搅拌 16 小时。将混合物在水 (40mL) 和乙酸乙酯 (30mL) 之间分配。将有机层干燥 (Na2SO4)， 真空浓缩， 并用二氧化硅纯化， 得到 336。(CDCl3) ： 3.11(2H， t)， 3.39(3H， s)， 4.32(2H， t)， 6.91(1H， s)， 7.07(1H， d)， 7.32(1H， d)， 7.37-7.44(2H， m)， 7.58(1H， s)， 7.79(1H， s)。MH+429 ∶ 431 ∶ 433(3 ∶ 2 ∶ 1)

    [1125] 实施例 247 ： 3-(8-( 吡唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 氮杂 -3- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 337

    [1126] 使 用 Suzuki 偶 合 反 应 条 件， 使 8- 溴 -2-[4-(2- 氯 - 苯 基 )-4H-[1， 2， 4] 三 唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 314 的混合物与 4， 4， 5， 5- 四 甲 基 -2-(1H- 吡 唑 -4- 基 )-1， 3， 2- 二 氧 杂 硼 杂 环 戊 烷 反 应， 得 到 337。NMR ： (CDCl3) ： 3.38(2H， t)， 4.39(2H， t)， 6.96(1H， dd)， 7.18(1H， d)， 7.28(1H， d)， 7.51-7.54(2H，m)， 7.61-7.66(2H， m)， 7.85(2H， s)， 8.30(1H， s)。MS ： (ESI+)MH+447

    [1127] 实施例 248 ： N2-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N8-(2- 羟乙基 )-N2- 甲 基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1128] -2， 8- 二甲酰胺 338 -8- 甲酸与 2- 氨基乙醇、 HATU按照实施例 47 和 235 的方法， 使 2-((2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1129] 和 DIPEA 在 THF 中反应， 进行反相 HPLC 后， 得到 338 无色固体。MS ： (ESI+)528.0 实施例 249 ： N2-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N8- 异丙基 -N2- 甲基 -4， -2， 8- 二甲酰胺 339 -8- 甲酸与异丙胺、 HATU 和 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1130] 按照实施例 47 和 235 的方法， 使 2-((2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂DIPEA 在 THF 中反应， 进行反相 HPLC 之后， 得到 339 无色固体。MS ： (ESI+)526.1

    [1131] 实施例 250 ： N8-(2- 氨基 -2- 甲基丙基 )-N2-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯 基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1132] -2， 8- 二甲酰胺 340 -8- 甲酸与 2- 甲基丙烷 -1， 2- 二按照实施例 47 和 235 的方法， 使 2-((2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )( 甲基 )氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂胺、 HATU 和 DIPEA 在 THF 中反应， 进行反相 HPLC 之后， 得到 340 无色固体。MS ： (ESI+)555.3

    [1133] 实 施 例 251 ： 2-(1-(2- 氯 -4-( 二 甲 基 氨 基 甲 酰 基 ) 苯 基 )-1H-1， 2， 4- 三 唑 -5- 基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1134] -8- 甲酰胺 341

    [1135] 按照实施例 89 的羰化胺化方法， 使 4-(5-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， -2- 基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基 )-3- 氯 -N， N- 二甲基苯甲酰胺与甲胺和六羰3-d] 氧杂

    [1136] 基钼反应， 进行反相 HPLC 之后， 得到 341。MS ： (ESI+)508.1 实 施 例 252 ： 4-(5-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂 按照实施例 235 的方法， 使 8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 甲-2- 基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -1- 基 )-3- 氯 -N， N- 二甲基苯甲酰胺 342

    [1137] 酰胺与 3- 氯 -4- 肼基 -N， N- 二甲基苯甲酰胺在乙酸中反应， 用快速柱色谱纯化 (50-100％ 乙酸乙酯 / 己烷 ) 之后， 得到 342 无色固体。MS ： (ESI+)531.0

    [1138] 实施例 253 ： N-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-9- 氰基 -N- 甲基 -4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1139] -2- 甲酰胺 343通过将甲胺气体流鼓入 3- 氯 -4- 氟代苄腈的乙腈溶液中来制备 3- 氯 -4- 甲基氨基 - 苄腈。将 3- 氯 -4- 甲基氨基 - 苄腈 (1.29g) 的混合物在 2M 氢氧化钠溶液 (43ml) 中 加热至回流。4 小时之后， 冷却反应混合物， 而后小心地酸化 (HCl， 2N) 至 pH5， 产生白色沉 淀， 将其过滤收集， 得到 3- 氯 -4- 甲基氨基 - 苯甲酸 (1.10g)

    [1140] 向 3- 氯 -4- 甲基氨基 - 苯甲酸 (387mg) 的无水 N， N- 二甲基甲酰胺 (10ml)( 溶液 ) 中加入羰基二咪唑 (440mg)。一个小时之后， 加入二甲胺 HCl(221mg) 和三乙胺 (0.38mL)。 搅拌反应混合物过夜， 然后用乙酸乙酯稀释， 用盐水洗涤， 干燥 (MgSO4) 并真空除去溶剂。 使 用快速色谱纯化， 得到 3- 氯 -N， N- 二甲基 -4- 甲基氨基 - 苯甲酰胺。

    [1141] 使用一般方法 B， 用相应的酸 ( 先前所描述的 ) 和 3- 氯 -N， N- 二甲基 -4- 甲基氨 基 - 苯甲酰胺制备化合物 343。NMR ： (CDCl3) ： 3.10-3.20(8H， m)， 3.39(3H， s)， 4.31(2H， t)， 7.02(1H， d)， 7.19(1H， s)， 7.42(1H， d)， 7.47(2H， s)， 7.63(2H， s)。MS ESI+420(MH+)

    [1142] 实施例 254 ： 2-(9- 氰基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 氮杂 -3- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊 环 )-N-(2- 氯 -4-( 甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 - 甲酰胺 344

    [1143] 在 0℃， 向 7- 溴 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [b] 氧杂-5- 酮 (700mg) 的二乙醚 (20mL)溶液中逐滴加入溴 (0.14mL)， 并在室温下搅拌反应 16 小时。然后用硫代硫酸钠水溶液 (30mL) 淬灭反应， 并将产物提取到二乙醚 (2x 30mL) 中。干燥 (MgSO4) 合并的有机物， 真空 浓缩， 用二氧化硅纯化， 得到 4， 7- 二溴 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [b] 氧杂

    [1144] -5- 酮。向 4， 7- 二溴 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [b] 氧杂-5- 酮 (852mg) 的乙醇 (20mL) 溶液中加入硫代草氨酸乙酯 (1.06g)， 并将反应回流加热 4 天。冷却至室温后， 过滤固体， 用 二乙醚洗涤， 空气干燥， 得到 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊 环 -2- 甲酸乙酯。

    [1145] 将 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸乙酯 (500mg)、 亚铁氰化钾 ( 干燥， 104mg)、 碘化铜 (I)(27mg) 和 1- 丁基咪唑 (0.37mL) 在甲苯 (3mL) 中的混合物在 160℃、 在微波中反应 4 小时。然后在二氯甲烷 (30mL) 和水 (20mL) 之 间分配混合物。干燥 (MgSO4) 有机层， 真空浓缩， 用二氧化硅纯化， 得到 9- 氰基 -4， 5- 二 氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸乙酯。

    [1146] 向 9- 氰基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸乙 酯 (80mg) 的 THF(6mL) 和乙醇 (3mL) 悬浮液中加入氢氧化钠溶液 (18mg， 在 3ml 水中 )， 并 在室温下搅拌反应 16 小时。然后用 2M 盐酸酸化反应， 并将得到的固体过滤， 空气干燥， 得 到 9- 氰基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸。 向 9- 氰基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (72mg) 的二氯甲烷 (10mL) 和 DMF(1 滴 ) 溶液中加入草酰氯 (0.04mL)， 并在室温下搅拌反 应 3 小时。然后真空浓缩溶剂， 将残余物再溶解在乙腈 (10mL) 中。加入碳酸氢钠 (24mg) 和 3- 氯 -N- 甲基 -4- 甲基氨基 - 苯甲酰胺 (58mg)， 并在室温下搅拌反应 16 小时。加入水 (20mL)， 并将产物提取到乙酸乙酯 (2x20mL) 中。将有机物干燥 (MgSO4)， 真空浓缩， 并用二 氧化硅纯化， 得到 344。NMR ： (CDCl3) ： 2.95(3H， d， J 4.8， Me)， 3.26-3.29(2H， m)， 3.42(3H， s， Me)， 4.21-4.36(2H， m)， 6.85-6.86(1H， m， NH)， 6.94(1H， d， J 8.4， Ar)， 7.29(1H， dd， J 8.4and 2.1， Ar)， 7.43(1H， d， J 8.1， Ar)， 7.54(1H， d， J 2.0， Ar)， 7.76(1H， dd， J 8.1and 1.8， Ar) 和 7.93(1H， d， J 1.7， Ar)

    [1148] 实施例 255 ： 2-(1- 异丙基 -1H-1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并

    [1147] 271102333779 A CN 102333793说-8- 甲酰胺 345明书236/280 页[2， 3-d] 氧杂

    [1149] 实施例 256 ： N2-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N8- 异丁基 -N2- 甲基 -4， -2， 8- 二甲酰胺 3465- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1150] 实施例 257 ： N2-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N8- 乙基 -N2- 甲基 -4， -2， 8- 二甲酰胺 3475- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1151] 将 2-((2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4， 5- 二氢苯 -8- 甲酸 (0.15g， 0.31mmol) 溶于 SOCl2(10mL) 中。将溶液并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂在 90-100℃加热 3 小时。除去剩余的 SOCl2， 得到粗品。在 0℃， 将粗品酰基氯的 THF(12mL) 溶液用乙胺 (0.14g， 3.1mmol) 和吡啶 (0.3mL) 的 THF(8mL) 溶液处理。使反应混合物达到 室温， 搅拌过夜。 浓缩， 除去 THF， 得到粗品， 将其用制备 TLC 纯化， 获得 347(48.5mg， 31％ )。 1 ESI-MS ： 512。 H NMR(CDCl3， 400MHz) ： δ7.59(s， 1H， ArH)， 7.44-7.32(m， 5H， ArH)， 6.95(s， 1H， ＝ CH)， 6.12(s， 1H， NH)， 4.23(t， J ＝ 5.0Hz， 2H， CH2)， 3.51-3.44(m， 2H， CH2)， 3.39(s， 3H， CH3)， 3.13(s， 3H， CH3)， 3.05(t， J ＝ 5.0Hz， 2H， CH2)， 3.02(s， 3H， CH3)， 1.24(t， J ＝ 7.2Hz， 3H， CH3)。

    [1153] 实施例 258 ： N2-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N8- 异丁基 -N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1154] -2， 8- 二甲酰胺 348按 照 实 施 例 133， 用 异 丁 胺 制 备 化 合 物 348。 产 率 ： 25 ％。ESI-MS ： 540。1H NMR(CDCl3， 400MHz) ： δ7.59(s， 1H， NH)， 7.45-7.26(m， 5H， ArH)， 6.94(s， 1H， ArH)， 6.17(d， J ＝ 4.0Hz， 1H， ArH)， 4.24(t， J ＝ 4.8Hz， 2H， CH2)， 3.39(s， 3H， CH3)， 3.28(t， J ＝ 6.0Hz， 2H， CH2)， 3.13(s， 3H， CH3)， 3.06-3.02(m， 5H， CH2， CH3)， 1.91-1.85(m， 1H， CH)， 0.97(d， J＝ 2.8Hz， 6H， C(CH3)2)

    [1155] 实施例 259 ： 5-(3- 甲基氨基甲酰基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 杂 -9- 基 ) 吡啶 -2- 胺 349 按照 454 的方法， 用 9- 溴 -6， 7- 二氢 - 吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1156] -3- 甲酸甲基酰胺和 2- 氨基吡啶 -5- 硼酸频哪醇酯制备化合物 349。MS ： (ESI+)353.0

    [1157] 实施例 260 ： 4-(3- 甲基氨基甲酰基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 杂 -9- 基 )-5-(2- 氯苯基 )-2H-1， 2， 3- 三唑 350 实施例 261 ： N2-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并272

    [1158] 102333779 A CN 102333793说明书237/280 页[b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1159] -2， 8- 二甲酰胺 351 -8- 甲酸的酰基氯和氨得到 351。产率 ：按照实施例 257， 由 2-((2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰1基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂400MHz) ： δ7.60(s， 1H， NH)， 7.47-7.37(m， 5H， ArH)， 31 ％。ESI-MS ： 484。 H NMR(CDCl3， 6.94(s， 1H， ArH)， 6.10(br， 1H， 0.5NH2)， 5.62(br， 1H， 0.5NH2)， 4.24(s， 2H， CH2)， 3.39(s， 3H， CH3)， 3.13-3.02(m， 8H， CH2， 2CH3)。

    [1160] 实施例 262 ： N8-(2- 氨乙基 )-N2-(2- 氯 -4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N2- 甲 基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1161] -2， 8- 二甲酰胺 3521 按照实施例 133， 用 1， 2- 二氨基乙烷制备化合物 352。 产率 ： 28％。 ESI-MS ： 527。 H NMR(CDCl3， 400MHz) ： δ7.66-7.56(m， 2H， 2NH)， 7.40-7.26(m， 5H， ArH)， 6.80(s， 1H， ＝ CH)， 4.10(s， 2H， CH2)， 3.58(s， 3H， CH3)， 3.38-2.93(m， 13H， 2CH2， 3CH3)

    [1162] 实施例 263 ： N-(2- 氯 -4-(2- 羟基丙基氨基甲酰基 ) 苯基 )-9- 氰基 -N- 甲基 -4，5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1163] -2- 甲酰胺 353使 用 标 准 酰 胺 偶 合 条 件 制 备 化 合 物 353， 得 到 浅 黄 色 固 体 (80mg， 10 ％ )。 CDCl3)1.30(d， J ＝ 6.2， 3H)， 2.37(m， 1H)， 3.11(t， J ＝ 4.7， 2H)3.28(m， δH(400MHz， 1H)， 3.42(s， 3H)， 3.78(m， 1H)， 4.09(m， 1H)， 4.31(t， J ＝ 4.9H， 2H)， 6.69(m， 1H)， 7.06(m， 2H) ， 7.41(dd ， 1H) ， 7.47(d ，J ＝ 8.02 ， 1H) ， 7.68(s ， 1H) ， 7.80(m ， 1H) ， 8.02(m ， 1H) 。 + [M+H] (406.07)。

    [1164] 实 施 例 264 ： 3-(9- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 354

    [1165] 2- 氯苯胺与 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 羰基氯 ( 使 用草酰氯， 用催化量的 N， N- 二甲基甲酰胺， 由相应的羧酸制备 ) 进行反应， 得到 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (2- 氯 - 苯基 )- 酰胺。

    [1166] 将 9- 溴 -4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -1- 硫 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -2- 甲 酸 (2- 氯 - 苯 基 )- 酰胺 (235mg) 和 Lawesson′ s 试剂 (175mg) 的混合物在邻二甲苯 (10mL) 中加热至回 流。加热过夜后， 将反应混合物冷却， 并小心地加入醚和己烷， 产生相应的硫代酰胺沉淀橙 黄色固体， 将其过滤收集 (196mg)。将 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊 环 -2- 硫代羧酸 (2- 氯 - 苯基 )- 酰胺 (196mg)、 甲醇 (10ml) 和水合肼 (0.21ml) 的混合物 加热至回流。5 小时之后， 将反应混合物冷却， 过滤收集得到的沉淀。然后将沉淀 (99mg) 在 原甲酸三甲基酯 (5mL) 中加热到 90℃。22 小时之后， 冷却反应混合物， 真空除去挥发物， 使 用快速色谱纯化残余物， 得到 354。NMR ： (CDCl3) ： 3.10(2H， t)， 4.30(2H， t)， 6.85-6.90(2H， d)， 7.25(1H， dd)， 7.46-7.72(5H， m)， 8.25(1H， s)。MS.ESI+460(MH+)

    [1167] 实施例 265 ： 2-(4-(2- 氯 -4- 氟苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1168] -9- 腈 355向 微 波 管 中 装 入 3-(9- 溴 -4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -1- 硫 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -2- 基 )-4-(2- 氯 -4- 氟 - 苯 基 )-4H-[1， 2， 4] 三 唑 (0.57g ； 1.2mmol)、 K4[Fe(CN)6] (101mg ； 0.24mmol)、 CuI(23mg ； 0.12mmol)、 1- 丁基咪唑 (0.32mL ； 2.4mmol) 和甲苯 (5mL)。用氩气吹扫混合物， 并在 160℃、 在微波中加热 4 小时。LCMS 显示大约 40％转化， 因此再次 加入相同量的 K4[Fe(CN)6]、 CuI 和 1- 丁基咪唑， 并在微波中、 在 170℃将反应混合物进一步 加热 4 小时。将反应混合物在 CH2Cl2 和水之间分配， 干燥 (Na2SO4) 有机层， 用 ISCO 纯化， 然后用制备 LCMS 纯化， 得到 355 白色固体 (154mg ； 30 ％ )。δH(400MHz， CDCl3)3.19(t， J ＝ 5.2， 2H)， 4.36(t， J ＝ 5.2， 2H)， 7.08-7.11(m， 2H)， 7.23-7.32(m， 1H)， 7.43-7.52(m， 3H)， + 7.81(d， J ＝ 2.0， 1H)， 8.23(s， 1H)。[M+H] ： 423

    [1169] 实施例 266 ： 9- 溴 -N-(2， 4- 二氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1170] -2- 甲酰胺 356向 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (911mg) 的二 氯甲烷 (20mL) 和 DMF(1 滴 ) 溶液中加入草酰氯 (0.42mL)， 并在室温下搅拌反应 3 小时。然 后真空浓缩溶剂， 将残余物再溶解在乙腈中。加入碳酸氢钠 (259mg) 和 2， 4- 二氯 -N- 甲 基苯胺 (546mg)， 并在室温下搅拌反应 16 小时。加入水 (20mL)， 并将产物提取到乙酸乙酯 (2x20mL) 中。 将有机物干燥 (MgSO4)， 真空浓缩， 并用二氧化硅纯化， 得到 356。 NMR ： (CDCl3) ： 2.95-2.98(2H， m)， 3.29(3H， s， Me)， 4.13-4.16(2H， m)， 6.72(1H， s， Ar)， 6.78(1H， d， J 8.6， Ar)， 7.16(1H， dd， J 8.6and 2.3， Ar)， 7.22(1H， d， J 8.5， Ar)， 7.29(1H， dd， J 8.4and 2.2， Ar) 和 7.48-7.52(1H， m， Ar)

    [1171] 实施例 267 ： N-(2- 氯 -4- 氰基苯基 )-9- 氰基 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩 并 [2， 3-d] 氧杂

    [1172] -2- 甲酰胺 357通过将甲胺气体流鼓入 3- 氯 -4- 氟代苄腈的乙腈溶液中来制备 3- 氯 -4- 甲基氨 基 - 苄腈。使用一般方法 B， 用相应的酸 ( 先前所描述的 ) 和 3- 氯 -4- 甲基氨基 - 苄腈制 备化合物 357。NMR ： (CDCl3) ： 3.05(2H， t)， 3.39(3H， s)， 4.31(2H， t)， 6.80(1H， s)， 7.05(1H， d)， 7.42-7.51(2H， m)， 7.70(1H， dd)， 7.80(1H， s)， 7.88(1H， s)。痕量分析显示 MH+420

    [1173] 实施例 268 ： N-(2- 氯 -4-( 三氟甲基 ) 苯基 )-9- 氰基 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1174] -2- 甲酰胺 358使 用 标 准 酰 胺 偶 合 条 件 制 备 化 合 物 358， 得 到 类 白 色 固 体 (94mg， 37 ％ )。 δ H(400MHz ， CDCl 3)3.08(t ， 2H) ， 3.43(s ， 3H) ， 4.31(t ， 2H) ， 8.84(s ， 1H) ， 7.06(d ， 1H) ， + 7.43(dd， 1H)， 7.52(d， 1H)， 7.67(d， 1H)， 7.77(s， 1H)， 7.84(s， 1H)。[M+H] (504.00)。

    [1175] 实施例 269 ： N-(2， 4- 二氯苯基 )-N- 甲基 -9-(4- 甲基哌嗪 -1- 羰基 )-4， 5- 二氢 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1176] -2- 甲酰胺 359在微波中， 在 130℃， 使 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲 酸 (2， 4- 二氯 - 苯基 )- 甲基 - 酰胺 (1.0g)、 六羰基钼 (550mg)、 Cataxium C(190mg)、 三丁基 膦四氟硼酸盐 (120mg) 和 1， 8- 二氮杂双环十一 -7- 烯 (0.90mL) 在甲醇 (6mL) 和 THF(6mL) 中的混合物反应 30 分钟。然后在二氯甲烷 (40mL) 和水 (40mL) 之间分配混合物。干燥 (MgSO4) 有机层， 真空浓缩， 用二氧化硅纯化， 得到 2-[(2， 4- 二氯 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酰 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸甲酯。

    [1177] 向 2-[(2， 4- 二氯 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酰基 ]-4， 5 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯 并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸甲基酯 (700mg) 的 THF(8mL) 和乙醇 (4mL) 溶液中加入氢氧化钠溶 液 (121mg， 在 4mL 水中 )， 并在室温下搅拌反应 16 小时。然后用 2M 盐酸酸化反应， 将得到的固体过滤， 空气干燥， 得到 2-(2， 4- 二氯 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酰基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧 杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸。

    [1178] 用一般方法 B， 使 2-[(2， 4- 二氯 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酰基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧 杂 -1- 硫 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -9- 甲 酸 和 N- 甲 基 哌 嗪 反 应， 得 到 359。NMR ： (CDCl3) ： 2.40(3H， s， Me)， 2.49-2.58(4H， br m)， 3.06-3.09(2H， m)， 3.38(3H， s， Me)， 3.49-3.90(4H， br m)， 4.26-4.29(2H， m)， 6.83(1H， s， Ar)， 7.02(1H， d， J 8.2， Ar)， 7.25(1H， dd， J 8.3and 1.9， Ar)， 7.31(1H， d， J8.4， Ar)， 7.37(1H， dd， J 8.4and 2.2， Ar) 和 7.55-7.57(2H， m， Ar). MS ： (ESI+)MH+ ＝ 530.13

    [1179] 实施例 270 ： N-(2， 4- 二氯苯基 )-9-((3S， 5R)-3， 5- 二甲基哌嗪 -1- 羰基 )-N- 甲 基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1180] -2- 甲酰胺 360用一般方法 B， 使 2-[(2， 4- 二氯 - 苯基 )- 甲基 - 氨基甲酰基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧 杂 -1- 硫 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -9- 甲 酸 和 2， 6- 二 甲 基 哌 嗪 反 应， 得 到 360。NMR ： (CDCl3) ： 1.01-1.20(6H， br m， Me)， 2.40-2.62(2H， br， m)， 2.73(2H， s)， 2.82-2.87(1H， br， m)， 2.98-3.00(2H， m)， 3.29(3H， s， Me)， 3.52-3.60(1H， br m)， 4.18-4.21(2H， m)， 4.45-4.55(1H， br， s， NH)， 6.76(1H， s， Ar)， 6.94(1H， d， J 8.3， Ar)， 7.15(1H， dd， J 8.3and 1.9， Ar)， 7.23(1H， d， J 8.4， Ar)， 7.28(1H， dd， J 8.5and 2.2， Ar) 和 7.44-7.48(2H， m， Ar)。 (ESI+)MH+ ＝ 544.11 MS ：

    [1181] 实施例 271 ： N2-(2， 4- 二氯苯基 )-N9-(2- 羟乙基 )-N2- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1182] -2， 9- 二甲酰胺 361用 一 般 方 法 B， 使 2-[(2， 4- 二 氯 - 苯 基 )- 甲 基 - 氨 基 甲 酰 基 ]-4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -1- 硫 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -9- 甲 酸 和 乙 醇 胺 反 应， 得 到 361。NMR ： (CDCl3) ： 2.70-2.73(1H， m， OH)， 3.04-3.07(2H， m)， 3.38(3H， s， Me)， 3.66-3.70(2H， m)， 3.89-3.91(2H， m)， 4.26-4.29(2H， m)， 6.48-6.51(1H， m， NH)， 6.73(1H， s， Ar)， 7.02(1H， d， J 8.4， Ar)， 7.32(1H， d， 8.4， Ar)， 7.38(1H， dd， J 8.4and 2.2， Ar)， 7.56-7.61(2H， m， Ar) 和 7.94(1H， s， Ar)。MS ： (ESI+)MH+ ＝ 532.08

    [1183] 实施例 272 ： N-(4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -(2- 氯 -6， 7- 二氢吡啶 并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1184] )-9- 甲酰胺 362

    [1185] 向 N-(4- 羧基苯基 )-N- 甲基 -(2- 氯 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d]氧杂)-9- 甲酰胺 (0.082g， 0.20mmol ； ) 的二氯甲烷 (2.8mL， 44mmol ； ) 溶液中加入盐酸二甲胺 (0.0322g， 0.395mmol ； )、 N， N- 二异丙基乙胺 (0.344mL， 1.98mmol ； )， 然后加入 N， N， N′， N′ - 四甲基 -O-(7- 氮杂苯并三唑 -1- 基 ) 脲六氟磷酸盐 (0.150g， 0.395mmol)。在 室温下搅拌混合物 2 小时。LCMS 表明反应完成。用饱和 NH4Cl 淬灭反应， 用 DCM 提取 (2x)。 干燥 (Na2SO4) 合并的有机物， 过滤， 浓缩。用快速色谱 (MeOH/DCM) 纯化粗品 ( 在 5％ MeOH 时洗脱出 )， 得到 362( 产率 61％ )。MS ： (ESI+) ＝ 442.2

    [1186] 实 施 例 273 ： 2-(4-(2- 氯 苯 基 )-1- 甲 基 -5- 氧 代 -4， 5- 二 氢 -1H-1， 2， 4- 三 唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1187] -8- 甲酰胺 363

    [1188] 向 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯 -8- 甲酸 (1.50g， 3.41mmol)、 Cs2CO3(3.33g， 10.23mmol) 和并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂DMF(30mL) 的混合物中加入 CH3I(0.5mL)。在室温下将全部混合物搅拌过夜。用水稀释， 用 水洗涤固体， 真空干燥， 得到 2-(4-(2- 氯苯基 )-1- 甲基 -5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三 唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -8- 甲酸甲酯 (1.45g， 产率 91％ )。 ESI-MS ： 468.07。

    [1189] 将 2-(4-(2- 氯苯基 )-1- 甲基 -5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -8- 甲酸甲酯 (1.45g， 3.10mmol) 溶于 20mL THF 和 20mL 水中， 并用 LiOH(0.325g， 一水合物 ) 处理。将全部物料在 50℃加热 2 小时， 冷却至室 温， 酸化。 将得到的沉淀过滤， 用水洗涤。 真空干燥滤饼至恒重 (1.30g， 产率 92％ )。 ESI-MS ： 1 400MHz) ： δ13.09(s， 1H， OH)， 7.79-7.46(m， 7H， ArH)， 6.53(s， 1H， 454.4。 H NMR(DMSO-d6， ＝ CH)， 4.22(t， J ＝ 5.2Hz， 2H， CH2)， 3.60(s， 1H， CH3)， 3.01(t， J ＝ 5.2Hz， 2H， CH2)。

    [1190] 将 2-(4-(2- 氯苯基 )-1- 甲基 -5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -8- 甲酸 (300mg， 0.66mmol) 的 10mL SOCl2 溶液 -8- 羰基氯， 在 在 80℃加热 3 小时。浓缩， 得到粗品酰基氯， 2-(4-(2- 氯苯基 )-1- 甲基 -5- 氧代 -4， 5- 二 氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 0℃， 将其慢慢地加入 ( 大约 312mg， 大约 0.66mmol， 在 10mL THF 中 ) 到 NH3( 饱和溶液， 在 THF 中 ) 和吡啶 (0.5mL) 的 5mL THF 溶液中。在室温下搅拌混合物过夜， 用水稀释， 用水洗 涤固体， 真空干燥。用 HPLC 纯化粗品， 分离， 得到 160.1mg 的 363， 分离产率 ： 54％。ESI-MS ： 1 453。 H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： δ7.98-7.41(m， 9H， ArH， NH2)， 6.49(s， 1H， ＝ CH)， 4.20(s， 2H， CH2)， 3.49(s， 3H， CH3)， 2.99(s， 2H， CH2)。

    [1191] 实 施 例 274 ： 2-(4-(2- 氯 苯 基 )-1- 甲 基 -5- 氧 代 -4， 5- 二 氢 -1H-1， 2， 4- 三276102333779 A CN 102333793说明书-8- 甲酰胺 364241/280 页唑 -3- 基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1192] 按 照 实 施 例 273， 用 甲 胺 制 备 化 合 物 364。 产 率 ： 52 ％。ESI-MS ： 467。1H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： δ8.46(t， J ＝ 4.4Hz， 1H， NH)， 7.79-7.45(m， 7H， ArH)， 6.49(s， 1H， ＝ CH)， 4.22(t， J ＝ 5.2Hz， 2H， CH2)， 3.50(s， 3H， CH3)， 3.01(t， J ＝ 5.2Hz， 2H， CH2)， 2.76(d， J ＝ 4.4Hz， 3H， NCH3)

    [1193] 实施例 275 ： p110α(alpha)PI3K 结合试验

    [1194] 结合试验 ： 用 Analyst HT 96-384(Molecular Devices Corp， Sunnyvale， CA.) 进 行初始偏振实验。通过通过加入 1 ∶ 3 系列稀释液 p110αPI3K(Upstate Cell Signaling Solutions， Charlottesville， VA) 制备用于荧光偏振亲合性测定的样品， 起始于 20ug/ mL 的最后浓度 ( 在偏振缓冲液 (10mM tris， pH7.5， 50mM NaCl， 4mM MgCl2， 0.05％ Chaps 和 1mM DTT) 中 )， 至 10mM PIP2 的最后浓度 (Echelon-Inc.， Salt Lake City， UT.)。在 室温下培养 30 分钟之后， 通过加入 GRP-1 和 PIP3-TAMRA 探针 (Echelon-Inc.， Salt Lake City， UT.)( 分别为 100nM 和 5nM 的最后浓度 ) 来中止反应。在 384 孔黑色低容量 Proxi 平皿 (PerkinElmer， Wellesley， MA.) 中， 用标准截止滤波器 ( 用于若丹明荧光团 (λex ＝ 530nm ； λem ＝ 590nm)) 读数。将荧光偏振值作为蛋白浓度的函数来进行制图， 使用 通过将数据与 4 参数方程拟合， 获得 KaleidaGraph 软件 (Synergysoftware， Reading， PA)， EC50 值。该实验还确定了用于随后的抑制剂的竞争性实验的合适蛋白浓度。

    [1195] 如下测定抑制剂 IC50 值 ： 将 0.04mg/mL p110αPI3K( 最后浓度 )( 同 PIP2(10mM 最 后浓度 ) 相结合 ) 加入到包含 1 ∶ 3 系列稀释的拮抗剂 ( 在最后浓度为 25mM 的 ATP(Cell Signaling Technology， Inc.， Danvers， MA) 中， 在偏振缓冲液中 ) 的孔中。 在室温下培养 30 分钟之后， 通过加入 GRP-1 和 PIP3-TAMRA 探针 (Echelon-Inc.， Salt Lake City， UT.)( 分别 为 100nM 和 5nM 的最后浓度 ) 来中止反应。 在 384 孔黑色低容量 Proxi 平皿 (PerkinElmer， Wellesley， MA.) 中， 用 标 准 截 止 滤 波 器 ( 用 于 若 丹 明 荧 光 团 (λex ＝ 530nm ； λem ＝ 590nm)) 读数。 将荧光偏振值作为拮抗剂浓度的函数来进行制图， 使用 AssayExplorer 软件 (MDL， San Ramon， CA)， 通过将数据与 4 参数方程拟合， 获得 IC50 值。

    [1196] 或者， 用辐射测量的试验来测定 PI3K 的抑制， 使用纯化的重组酶和 ATP( 浓度 1uM)。将式 I 化合物连续稀释在 100％ DMSO 中。将激酶反应在室温下培养 1 小时， 并通过 加入 PBS 来终止反应。随后使用 S 形的剂量反应曲线拟合法 ( 可变斜率 )， 测定 IC50 值。

    [1197] 实施例 276 ： 体外细胞增殖试验

    [1198] 使 用 下 列 方 案， 利 用 细 胞 增 殖 试 验， 测 定 式 I 化 合 物 的 效 果 (Promega Corp. Technical Bulletin TB288 ； Mendoza 等人 (2002)Cancer Res.62 ： 5485-5488) ： 4

    [1199] 1. 将包含大约 10 个细胞 (PC3， Detroit562 或 MDAMB361.1) 的 100μl 细胞培养 物的样品 ( 在介质中 ) 沉积在 384 孔不透明屏障的平皿的每个孔中。

    [1200] 2. 制备对照孔， 其包含介质， 没有细胞。

    [1201] 3. 将化合物加入到实验孔中， 并培养 3-5 天。

    [1202] 4. 将平皿平衡至室温， 保持大约 30 分钟。

    [1203] 5. 加入 CellTiter-Glo 试剂， 其体积等于存在于每个孔中细胞培养物介质的体 积。

    [1204] 6. 在定轨振荡器上使内含物混合 2 分钟， 以便引起细胞溶解。7. 将平皿在室温下培养 10 分钟， 以便稳定荧光信号。

    [1206] 8. 记录荧光， 并以 RLU ＝相对荧光单位的形式报道图形。

    [1207] 或者， 以最佳密度将细胞播种在 96 孔平皿中， 并在试验化合物的存在下培养 4 天。 TM 随后将 Alamar Blue 加入到试验介质中， 并培养细胞 6 小时， 而后在 544nm 激发波长、 590nm 发射波长处读数。使用 S 形剂量响应曲线拟合法， 计算 EC50 值。

    [1208] 实施例 277 ： Caco-2 渗透性

    [1209] 将 Caco-2 细胞以 1x105 个细胞 /cm2 的密度播种到 Millipore Multiscreen 平皿 上， 并培养 20 天。随后进行化合物渗透性的评价。将化合物施加于细胞单层的顶表面 (A) 上， 并测定渗透到基底外侧 (basolateral)(B) 部分的化合物渗透情况。用反向 (B-A) 方式 进行这种过程， 以便研究主动转运。计算每个化合物的渗透系数值 Papp， 测定化合物通过膜 6 的渗透率。化合物集聚到低 (Papp ＜ / ＝ 1.0x10 cm/s) 或高 (Papp ＞ / ＝ 1.0x106cm/s) 吸 收电位处 ( 基于与已建立人吸收的对照化合物的比较 )。

    [1210] 为了评价化合物进行主动流通的能力， 测定基底外侧 (B) 至顶端 (A) 转运的比例 ( 与 A 至 B 相比较 )。B-A/A-B ＞ / ＝ 1.0 的值表明存在主动细胞流通。

    [1211] 实施例 278 ： 肝细胞廓清率

    [1212] 使用低温保持的人肝细胞的悬浮液。在 1mM 或 3μM 的化合物浓度下， 以 0.5x106 个活细胞 /mL 的细胞密度进行培养。培养物中的最终 DMSO 浓度大约为 0.25％。在没有细 胞的情况下还进行对照组培养， 以便显示任何非酶催降解。在 0、 5、 10、 20、 40 和 60 分钟时 ( 只在 60 分钟时有对照样品 )， 从培养混合物中除去双份样品 (50μL)， 并加入到包含内标 (100μL) 的甲醇中， 以便终止反应。甲苯磺丁脲、 7- 羟基香豆素和睾酮可以用作对照化合 物。 将样品离心， 并收集每个时点的上清液， 利用 LC-MSMS 进行分析。 由 ln 峰面积比 ( 母体 化合物峰面积 / 内标峰面积 ) 对时间的制图， 计算内部廓清率 (CLint) 如下 ： CLint(μl/min/ 百万个细胞 ) ＝ Vxk， 其中 k 是消除速度常数， 由 ln 浓度的梯度对时间的斜率获得 ； V 是源 6 -1 于培养体积的体积术语， 并且用 uL10 个细胞 来表示。

    [1213] 实施例 279 ： 细胞色素 P450 抑制

    [1214] 可以针对 CYP450 靶向 (1A2， 2C9， 2C19， 2D6， 3A4) 筛选式 I 化合物， 大约 10 个浓度， 一式两份， 最高浓度大约 100uM。标准抑制剂 ( 呋拉茶碱 (furafylline)， 磺胺苯吡唑， 反苯 环丙胺， 奎尼丁， 酮康唑 ) 可以用作对照组。 可以使用 BMG LabTechnologies PolarStar、 以 荧光模式将平皿读数。

    [1215] 实施例 280 ： 细胞色素 P450 诱导

    [1216] 将新分离的人肝细胞 ( 得自于单一供体 ) 培养大约 48 小时， 而后加入三个浓度的 式 I 化合物， 并培养 72 小时。加入 CYP3A4 和 CYP1A2 的探针底物， 保持 30 分钟和 1 小时， 而 后结束培养。在 72 小时， 除去细胞和介质， 通过 LC-MS/MS 测定每个探针底物的代谢程度。 通过使用以一个浓度培养的单独的 P450s 的诱导剂来控制实验 ( 一式三份 )。

    [1217] 实施例 281 ： 血浆蛋白结合

    [1218] 在缓冲液和 10％血浆 (v/v， 在缓冲液中 ) 中制备式 I 化合物的溶液 (5um， 0.5％ 最终 DMSO 浓度 )。组装 96 孔 HT 渗析平皿， 用半渗透性的纤维素膜将每个孔分为两部分。 将缓冲溶液加入到膜的一边， 将血浆溶液加入到另一边 ； 然后在 37℃培养 2 小时， 一式三 份。随后排出细胞， 将每批化合物的溶液合并成两组 ( 不含血浆组和包含血浆组 )， 然后用LC-MSMS 分析， 对于不含血浆的溶液 (6 个点 ) 和包含血浆的溶液 (7 个点 )， 使用两套校正 标准。计算化合物未结合部份的值。

    [1219] 实施例 282 ： hERG 通道阻断

    [1220] 使用已经建立的通量方法， 用稳定表达 hERG 钾通道的 HEK-294 细胞， 评价式 I 化 合物调节铷流量的能力。 在包含 RbCl 的介质中制备细胞， 并涂覆到 96 孔平皿上， 培育过夜， 形成单层。通过吸出介质来引发流量实验， 并在室温下用 3x100μL 的预培养缓冲液 ( 包含 + 低水平的 [K ]) 洗涤每个孔。最后抽吸之后， 将 50μL 的工作原料 (2x) 化合物加入到每个 孔中， 并在室温下培养 10 分钟。然后将激励缓冲液 50μL( 包含高水平的 [K+]) 加入到每 个孔中， 得到最后试验化合物浓度。然后将细胞平皿在室温下进一步培养 10 分钟。然后将 每个孔中的上清液 80μL 转入 96 孔平皿的等效孔中， 并通过原子发射光谱法分析。 以 10pt 双份 IC50 值曲线 (n ＝ 2) 的形式， 从 100μM 的最高浓度开始， 筛选化合物。

    [1221] 实施例 283 ： 体内肿瘤异种移植物

    [1222] 可以从标准商业渠道获得适合于转基因实验的动物。在 Taconic 裸鼠组的后肋， 皮下植入 MDA-MB-361.1(PI3K 突变体 ) 乳腺癌细胞。每天给予小鼠异种移植物药物或赋 形剂 ( 给予 21 天 )。在研究期间， 每周两次记录肿瘤大小。每周两次还记录小鼠体重， 并 有规律地观察小鼠。使用 Ultra Cal-IV 卡钳 (Model 54-10-111 ； Fred V.Fowler Co.， Inc. ； Newton， MA) 测定二维空间 ( 长和宽 ) 的肿瘤体积， 并使用 Excelv.11.2(Microsoft Corporation ； Redmond， WA) 进 行 分 析。 使 用 KaleidaGraph Version 3.6(Synergy Software ； Reading， PA)， 绘出肿瘤抑制曲线。用下式计算肿瘤体积 ： 肿瘤尺寸 (mm3) ＝ ( 长 度测量数据 x 宽度测量数据 2)x0.5

    [1223] 使用 Adventurera Pro AV812 天平 (Ohaus Corporation ； Pine Brook， NJ)， 测定 动物体重。使用 KaleidaGraph Version 3.6， 制出曲线。使用下式计算重量变化百分数 ： 群组重量变化百分数＝ (1-( 初重 / 新重量 ))x100。

    [1224] 按照管理规则， 将肿瘤体积超过 2000mm3 或体重损失＞其初重的 20％的小鼠立即 安乐死。

    [1225] 在研究的最后 (EOS)， 使用下式计算肿瘤生长抑制百分比 ( ％ INH) ：％ INH ＝ 100x( 给予赋形剂的动物的 EOS 平均肿瘤体积 - 给予药物的动物的 EOS 平均肿瘤体积 )/ 给 予赋形剂的动物的 EOS 平均肿瘤体积。

    [1226] 基于研究的最后保留在每个群组中的可测肿瘤数目， 测定肿瘤发生率 (TI)。将部 分响应 (PR) 定义为 ： 与起始肿瘤体积相比较， 在研究的任何一天所观察到的肿瘤体积的减 小＞ 50％但＜ 100％。将完全响应 (CR) 定义为 ： 与起始肿瘤体积相比较， 在研究的任何一 天所观察到的肿瘤体积减小 100％。分析数据， 并使用 Dunnett′ s 试验 ( 具有 JMP 统计 软件， version 5.1.2(SAS Institute ； Cary， NC)) 测定 p- 值。使用 JMP 统计软件 version 5.1.2， 计算研究结束时的单独的肿瘤体积和平均肿瘤体积 ±SEM 值。基于初始体重变化的 百分比平均值 ±SEM， 将体重数据制成曲线。

    [1227] 实施例 284 ： 磷酸 AKT 诱导试验 在 6 孔组织培养平皿中， 将细胞以每个孔 5x105 个细胞的密度进行播种， 过夜。用 式 I 或式 II 化合物 ( 包括 223、 328 和 345) 的 EC80 处理细胞。处理之后， 用冷的 PBS 洗涤细 胞一次， 并溶解在 1X 细胞提取缓冲液 ( 得自于 Biosource(Carlsbad， CA)) 中， 缓冲液补充

    [1228] 有蛋白酶抑制剂 (Roche， Mannheim， Germany)、 1mM PMSF 和磷酸酶抑制剂混合物 1 和 2( 得 自于 Sigma(St.Louis， MO))。使用 Pierce BCA 蛋白试验试剂盒 (Rockford， IL)， 进行蛋白 浓度的测定。使用珠粒试剂盒 ( 得自于 Biosource(Carlsbad， CA)) 和 Luminex Bio-Plex 473 系统 (Bio-Rad， Hercules， CA)， 评价 pAkt(Ser ) 和全部 Akt 的水平。

    [1229] 实施例 285 ： (2-(4-(2， 4- 二氟苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1230] -9- 基 )(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 甲酮 374在微波中， 在 130 ℃， 使 3-(9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊 环 -2- 基 )-4-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-4H-[1， 2， 4] 三唑 (600mg)、 六羰基钼 (344mg)、 Cataxium C(122mg)、 三丁基膦四氟硼酸盐 (76mg) 和 1， 8- 二氮杂双环十一 -7- 烯 (0.58mL) 在甲醇 (5mL) 和 THF(5mL) 中的混合物反应 30 分钟。然后在二氯甲烷 (30mL) 和水 (30mL) 之间分 配混合物。干燥 (MgSO4) 有机层， ， 真空浓缩， 以二氧化硅纯化， 得到 2-[4-(2， 4- 二氟 - 苯 基 )-4H[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸甲 酯。

    [1232] 向 2-[4-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-4H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸甲酯 (210mg) 的 THF(4mL) 和乙醇 (2mL) 溶液中加入氢氧化 钠溶液 (38mg， 在 2mL 水中 )， 并在室温下搅拌反应 16 小时。然后用 2M 盐酸酸化反应， 并将 得到的固体过滤， 空气干燥， 得到 2-[4-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-4H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸。

    [1233] 用常规酰胺偶合方法， 2-[4-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-4H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二 氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸和 N- 甲基哌嗪反应， 得到 374。 NMR ： (CDCl3) ： 2.37(3H， s， Me)， 2.37-2.51(4H， m)， 3.13-3.17(2H， m)， 3.51-3.78(4H， m)， 4.32-4.35(2H， m)， 6.98(1H， s， Ar)， 7.05(1H， d， J 8.3， Ar)， 7.12-7.17(2H， m， Ar)， 7.24-7.27(1H， m， Ar)， 7.42-7.48(1H， m， Ar)， 7.61-7.62(1H， m， Ar) 和 8.24(1H， s， Ar)。MS ： (ESI+)MH+ ＝ 508.22

    [1234] 实施例 286 ： 2-(4-(2， 4- 二氟苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-N-(2- 羟乙基 )-4，

    [1231] 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1235] -9- 甲酰胺 375用常规酰胺偶合方法， 2-[4-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-4H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二 氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸和乙醇胺反应， 得到 375。NMR ： (CDCl3) ： 2.72(1H， s， OH)， 3.01-3.04(2H， m)， 3.57-3.61(2H， m)， 3.72-3.81(2H， m)， 4.20-4.23(2H， m)， 6.68-6.72(1H， m， NH)， 6.79(1H， s， Ar)， 6.94(1H， d， J 8.4， Ar)， 7.02-7.06(2H， m， Ar)， 7.33-7.40(1H， m， Ar)， 7.50-7.53(1H， m， Ar)， 7.89-7.90(1H， m， Ar) 和 8.16(1H， s， Ar)。MS ： (ESI+)MH+ ＝ 469.04

    [1236] 实 施 例 287 ： 2-(4-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-4H-1， 2， 4- 三 唑 -3- 基 )-N-(2- 羟 乙280102333779 A CN 102333793说明书-9- 甲酰胺 376245/280 页基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1237] 用常规酰胺偶合方法， 2-[4-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-4H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸和 2-( 甲基氨基 ) 乙醇反应， 得到 376。NMR ： (CDCl3) ： (400MHz， CDCl3) ： 3.13(3H， s， Me)， 3.13-3.16(2H， m)， 3.74-3.78(2H， m) ， 3.90-3.95(2H ， m) ， 4.31-4.34(2H ， m) ， 6.93(1H ， s， Ar) ， 7.05(1H ， d， J 8.3 ， Ar) ， 7.12-7.16(2H， m， Ar)， 7.31-7.33(1H， m， Ar)， 7.43-7.48(1H， m， Ar)， 7.69-7.70(1H， m， Ar) 和 8.24(1H， s， Ar)。MS ： (ESI+)MH+ ＝ 483.08

    [1238] 实施例 288 ： 5-(9- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-1-(2，4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 384

    [1239] 将装有 2-(9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 基 )-[1， 3， 4] 二唑 (200mg ； 0.57mmol)、 2， 4- 二氟苯胺 (0.11mL ； 1.1mmol)、 TFA(82μl ； 1.1mmol) 和 甲苯 (1.5mL) 的微波管在 140℃微波加热 30 分钟。 用 CH2Cl2(20ml) 稀释反应混合物， 用饱和 NaHCO3(20ml) 洗涤， 分离 ( 疏水性的玻璃料 ) 有机层， 浓缩， 用 ISCO 纯化， 得到 384 浅黄色固 体 (191mg ； 70％ )。 δH(400MHz， CDCl3)3.15(t， J ＝ 5.2， 2H)， 4.30(t， J ＝ 5.2， 2H)， 6.91(d， J ＝ 8.8， 1H)， 6.97(s， 1H)， 7.02-7.18(m， 2H)， 7.25-7.28(m， 1H)， 7.43-7.49(m， 1H)， 7.66(d， J + ＝ 2.4， 1H)， 8.25(s， 1H)。[M+H] ： 461

    [1240] 实施例 289 ： 5-(9- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-1- 异丙基 -1H-1， 2， 4- 三唑 385

    [1241] 将 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸酰胺 (1.01g)、 二甲基甲酰胺二甲基缩醛 (9mL) 和甲苯 (7.5mL) 的混合物加热至 100℃， 保持 16 小时。然 后真空浓缩溶剂， 并溶于乙酸 (9ml) 和水 (1mL) 中， 向其中加入异丙基酰肼盐酸盐 (482mg)。 将反应混合物加热至 100℃， 保持 7 小时。 然后将反应混合物冷却， 用乙酸乙酯稀释， 用碳酸 钠溶液洗涤， 干燥 (MgSO4) 并真空除去溶剂。使用快速色谱纯化， 得到 385。NMR ： (CDCl3) ： 1.61(6H， d)， 3.25(2H， t)， 4.33(2H， t)， 4.99(1H， 七重峰 )， 6.90(1H， d)， 7.28-7.31(2H， m)， 7.85(1H， s)， 7.92(1H， s)。MS.ESI+432(MH++MeCN)

    [1242] 实施例 290 ： 1-(2， 4- 二氟苯基 )-5-(4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 397

    [1243] 按 照 本 文 的 方 法 制 备 化 合 物 397。NMR ： (CDCl3) ： 3.13(2H， t)， 4.31(2H， t)， + 6.99-7.21(6H， m)， 7.51-7.58(2H， m)， 8.01(1H， s)。MS.ESI+423(MH +MeCN)

    [1244] 实施例 291 ： 2-(1-(2， 4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-N-(2- 羟乙基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1245] -9- 甲酰胺 398将 5-(9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 基 )-1-(2， 4- 二 氟 - 苯基 )-1H-[1， 2， 4] 三唑 (847mg)、 六羰基钼 (485mg)、 Herman′ s 催化剂 (173mg)、 三丁 基膦四氟硼酸盐 (106mg)、 甲醇 (8ml)、 THF(8ml) 和 1， 8- 二氮杂双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (0.82ml) 的混合物在 130℃微波加热 30 分钟。 将反应混合物冷却， 而后用二氯甲烷稀释， 用 水洗涤， 干燥 (MgSO4) 并真空除去溶剂。 使用快速色谱纯化， 得到相应的甲酯， 2-[2-(2， 4- 二 氟 - 苯基 )-2H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸甲酯。使用氢氧化钠在甲醇 /THF/ 水中进行标准水解， 得到相应的羧酸， 2-[2-(2， 4- 二 氟 - 苯基 )-2H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲 酸。

    [1246] 将 2-[2-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-2H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸 (53mg)、 HATU(61mg) 和二异丙基乙胺 (0.028ml) 和乙醇胺 的混合物在 N， N- 二甲基甲酰胺 (3ml) 中搅拌。将反应混合物搅拌过夜， 而后用乙酸乙酯 稀释， 用水洗涤， 干燥 (MgSO4) 并真空除去溶剂。使用快速色谱纯化， 得到 398(24mg)。NMR ： (CDCl3) ： 2.30(1H， t， br.)， 3.05(2H， t)， 3.51-3.55(2H， m)， 3.7-3.75(2H， m)， 4.31(2H， t)， 6.40(1H， br.)， 6.80(1H， s)， 6.99(1H， d)， 7.05-7.12(2H， m)， 7.42-7.52(2H， m)， 7.90(1H， + s)， 8.01(1H， s)。MS.ESI+510(MH +MeCN)

    [1247] 实施例 292 ： 9- 溴 -2-[2-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-2H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二 氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 399

    [1248] 在室温下， 向 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲 酸 (3.75g ； 11.5mmol) 的 CH2Cl2(80mL) 搅拌悬浮液中加入 (COCl)2(2.6mL ； 30mmol)， 然后加 入 DMF(3 滴 )。在室温下搅拌反应混合物 3 小时， 接着真空除去所有的挥发物。使得到的残 70mmol) 处理。 搅拌反 余物在 THF(60ml) 中成浆， 冷却至 0℃， 并用 NH3(10ml 7M MeOH 溶液 ； 应混合物， 同时用 1.5 小时升温至室温。用水 (200mL) 稀释反应混合物， 并过滤收集得到的 固体， 获得 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸酰胺白 色固体 (3.09g ； 83％ )。δH(400MHz， d6-DMSO)3.30(t， J ＝ 5.2， 2H)， 4.29(t， J ＝ 5.2， 2H)， 6.98(d， J ＝ 8.8， 1H)， 7.39(dd， J ＝ 8.8and 2.4， 1H)， 7.42(br s， 1H)， 7.62(s， 1H)， 7.71(d， J ＝ 2.4， 1H)， 7.96(br s， 1H)。

    [1249] 将 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸酰胺 (0.70g ； 2.2mmol) 和二甲基甲酰胺二甲缩醛 (DMF·DMA， 6mL) 的甲苯 (5mL) 搅拌悬浮液在 100℃加热过夜 (16 小时 )， 接着浓缩反应混合物。向得到的残余物中加入乙酸 (5mL)、 水 (0.5ml) 和 2， 4- 二氟苯基盐酸肼 (0.56g ； 3.1mmol)， 并将得到的溶液在 100℃加热 3 小时。 浓缩反应混合物， 将残余物溶于 CH2Cl2(50ml) 中， 用饱和 NaHCO3(50ml) 洗涤。分离 ( 疏水 性的玻璃料 ) 有机层， 浓缩， 用 ISCO 纯化， 得到 399 乳色固体 (0.31g ； 31％ )。δH(400MHz， CDCl3)3.41(t， J ＝ 5.2， 2H)， 4.36(t， J ＝ 5.2， 2H)， 6.89(d， J ＝ 8.8， 1H)， 7.14-7.20(m， 2H)， + 7.27-7.30(m， 1H)， 7.55-7.6l(m， 1H)， 7.69(d， J ＝ 2.8， 1H)， 8.16(s， 1H)。[M+H] ： 462

    [1250] 或者， 向 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 乙酯 (4.55g) 的乙醇 (50mL) 悬浮液中加入肼一水合物 (5mL)， 并将反应回流加热 16 小时。 冷却至室温后， 过滤固体， 用二乙醚洗涤， 空气干燥， 得到 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸酰肼。

    [1251] 向 9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸酰肼 (400mg) 的原甲酸三甲酯 (10mL) 溶液中加入对甲苯磺酸 (100mg)， 并在 100℃加热反应 16 小时。 冷却至室温后， 真空浓缩溶剂， 并加入二乙醚 (10mL)。 将得到的固体过滤， 空气干燥， 得到 9- 溴 -2-[1， 3， 4] 菊环。

    [1252] 二唑 -2- 基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘 二唑 -2- 基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫在微波中， 在 110℃， 使 9- 溴 -2-[1， 3， 4]杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 (250mg)、 2， 4- 二氟苯胺 (0.15mL) 和三氟乙酸 (0.11mL) 的 混合物在甲苯 (5mL) 中反应 20 分钟。然后在二氯甲烷 (20mL) 和碳酸氢钠水溶液 (20mL) 之间分配混合物。将有机层干燥 (MgSO4)， 真空浓缩， 并用二氧化硅纯化， 得到 399。NMR ： (CDCl3) ： 3.38-3.41(2H， m)， 4.33-4.36(2H， m)， 6.89(1H， d， J 8.6， Ar)， 7.15-7.21(2H， m， Ar)， 7.25-7.28(1H， m， Ar)， 7.47-7.53(1H， m， Ar)， 7.61(1H， d， J2.4， Ar) 和 8.32(1H， s， Ar)。 MS ： (ESI+)MH+ ＝ 460.97

    [1253] 实施例 293 ： 5-(9-(1H- 吡唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-1-(2， 4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 400

    [1254] 使用标准 Suzuki 条件， 用 4- 吡唑硼酸频哪醇酯处理 5-(9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧 杂 -1- 硫 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -2- 基 )-1-(2， 4- 二 氟 - 苯 基 )-1H-[1， 2， 4] 三 唑， 得到 400。NMR ： (CDCl3) ： 3.15(2H， t)， 4.31(2H， t)， 6.82(1H， s)， 7.01(1H， d)， 7.08-7.18(2H， m) ， 7.31(1H ，d) ， 7.51-7.55(1H ，m) ， 7.72(1H ，s) ， 7.90(2H ，s ，br.) ， 8.18(1H ，s) 。 + MS.ESI+489(MH +MeCN)

    [1255] 实施例 294 ： 2-(1-(2， 4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1256] -9- 甲酰胺 401使相应的羧酸与氯化铵反应， 得到 401。NMR ： (DMSO) ： 3.15(2H， t)， 4.31(2H， t)， 6.80(1H， s)， 7.01(1H， d)， 7.25(1H， s， br.)， 7.37-7.40(1H， m)， 7.65-7.75(2H， m)， 7.90(1H， + m)， 7.99(1H， s， br.)， 8.05(1H， s)， 8.28(1H， s)。MS.ESI+466(MH +MeCN)

    [1257] 实施例 295 ： (2-(1-(2， 4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1258] -9- 基 )( 哌嗪 -1- 基 ) 甲酮 402使相应的羧酸与 1-BOC- 哌嗪反应。使用 HCl/ 醚将 BOC 基团断裂， 得到 402 盐酸 + 盐。MS.ESI+493(MH )

    [1259] 实施例 296 ： 2-[4-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-4H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧 杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸酰胺 407

    [1260] 向 9- 溴 -2-[4-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-4H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 (250mg) 的 甲 醇 (0.50mL) 溶 液 中 加 入 乙 酸 钯 (6mg)、 氧杂蒽 (31mg) 和三乙胺 (2mL)， 并在 70℃、 在一氧化碳的气球条件下加热反应 16 小 时。冷却至室温后， 通过硅藻土过滤混合物， 用乙酸乙酯洗涤。真空浓缩滤液， 并再溶解在 THF(8mL) 和乙醇 (4mL) 中。加入氢氧化钠溶液 (43mg， 在 4mL 水中 )， 并在室温下搅拌反 应 16 小时。然后用 2M 盐酸酸化反应， 将得到的固体过滤， 空气干燥， 得到 2-[4-(2， 4- 二 氟 - 苯基 )-4H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘 菊环 -9- 甲酸。

    [1261] 用常规酰胺偶合方法， 2-[4-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-4H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸和氯化铵反应， 得到 407。 NMR ： (CDCl3) ： 3.32-3.35(2H， m)， 4.32-4.30(2H， m)， 6.96-6.99(1H， m， Ar)， 7.09-7.14(1H， m， Ar)， 7.48-7.50(1H， m， Ar)， 7.54-7.58(1H， m， Ar)， 8.09-8.11(1H， m， Ar) 和 8.35(1H， s， Ar)。MS ： (ESI+)MH+ ＝ 425.95

    [1262] 实施例 297 ： 3-(2-(1-(2， 4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢苯并[b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1263] -9- 基 ) 吡啶 408使用标准 Suzuki 条件， 用 3- 吡啶硼酸频哪醇酯处理 5-(9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧 杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 基 )-1-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-1H-[1， 2， 4] 三唑， 得到 408。 NMR ： (CDCl3) ： 3.15(2H， t)， 4.31(2H， t)， 6.82(1H， s)， 7.03-7.18(3H， m)， 7.32-7.38(2H， m)， 7.51-7.55(1H， m)， 7.72(1H， s)， 7.82(1H， d)， 8.05(1H， s)， 8.55(1H， d)， 8.80(1H， s)。 + MS.ESI+500(MH +MeCN)

    [1264] 实 施 例 298 ： 2-(5- 环 丙 基 -[1， 2， 3] 三 唑 -1- 基 )-4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -8- 甲酸酰胺 414

    [1265] 步骤 1 ： 8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 基胺

    [1266] 向 8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 甲酸 (12.5g， 38.3mmol) 的叔丁醇 (250mL) 溶液中加入三乙胺 (5.5mL， 40mmol) 和二苯基膦酰基 - 叠氮 化物 (8.6mL， 40mmol)。将反应混合物在 95℃搅拌 16 小时， 然后使之冷却至室温， 并真空 浓缩。将得到的残余物溶于乙酸乙酯中， 依次用水、 饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 真空浓缩。将得到的残余物溶于 DCM(150mL) 中， 并用三氟乙酸 (50mL) 处理。在室 温下搅拌反应混合物 3 小时， 然后真空浓缩。 用 20％乙酸乙酯 / 环己烷研磨得到的残余物， 过滤， 得到标题化合物类白色固体 (7.94g， 70％ )。LCMS( 方法 A) ： RT ＝ 3.13min， [M+H]+ ＝ 1 297and 299。 H NMR(DMSO-d6) ： 8.01(1H， d， J ＝ 8.6Hz)， 7.30-7.25(1H， d， J ＝ 8.6， 2.1Hz)， 7.19(1H， d， J ＝ 2.1Hz)， 4.27(2H， t， J ＝ 5.1Hz)， 3.08(2H， t， J ＝ 5.1Hz)。

    [1268] 步骤 2 ： 2- 叠氮基 -8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊 环

    [1267] 在 0℃， 向 8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 基 胺 (2.38g， 8mmol) 的乙腈悬浮液中加入亚硝酸叔丁基酯 (1.43mL， 12mmol)， 而后逐滴加入 三甲基甲硅烷基叠氮化物 (1.26mL， 9.6mmol)。将反应混合物在 0℃搅拌 90 分钟， 加热至室 温， 并真空浓缩。用快速色谱将得到的残余物纯化 (SiO2， 10％乙酸乙酯 / 环己烷 )， 得到标 1 题化合物红色油， 其静置时凝固 (956mg， 37％ )。 H NMR(CDCl3) ： 8.21(1H， d， J ＝ 8.6Hz)， 7.24(1H， dd， J ＝ 8.6， 2.1Hz)， 7.20(1H， d， J ＝ 2.1Hz)， 4.34(2H， t， J ＝ 5.1Hz)， 3.21(2H， t， J ＝ 5.1Hz)。

    [1271] 步骤 3 ： 8- 溴 -2-(5- 环丙基 -[1， 2， 3] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫

    [1270] 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环

    [1272] 在氮气氛围下， 向 1M 乙基溴化镁的 THF(1.3mL， 1.3mmol) 溶液中逐滴加入环丙基 乙炔 (70 ％， 在甲苯中， 0.154mL， 1.3mmol)。在 50 ℃加热反应混合物 15 分钟， 然后使之冷 却至室温。然后逐滴加入 2- 叠氮基 -8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 (425mg， 1.3mmol) 的 THF(1.5mL) 溶液。将反应混合物在室温下搅拌 2 小时， 用 饱和氯化铵水溶液淬灭， 并用乙酸乙酯稀释。用盐水洗涤有机层， 干燥 (Na2SO4)， 真空浓缩。 用 20％乙酸乙酯 / 环己烷研磨得到的残余物， 过滤， 得到标题化合物浅黄色固体 (373mg， 1 64％ )。 LCMS 110142391( 方法 B) ： RT ＝ 4.40min， [M+H]+ ＝ 390。 H NMR(DMSO-d6) ： 8.20(1H， d， J ＝ 8.6Hz)， 7.71(1H， d， J ＝ 0.7Hz)， 7.36(1H， dd， J ＝ 8.6， 2.1Hz)， 7.30(1H， d， J＝ 2.1Hz)， 4.40(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 3.41(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 2.70-2.63(1H， m)， 1.21-1.15(2H， m)， 0.91-0.86(2H， m)。

    [1273] 步骤 4 ： 2-(5- 环丙基 -[1， 2， 3] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -8- 甲酸酰胺

    [1275] 向 8- 溴 -2-(5- 环 丙 基 -[1， 2， 3] 三 唑 -1- 基 )-4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 (224mg， 0.58mmol)、 盐酸羟胺 (81mg， 1.16mmol)、 六羰基钼 (77mg， 0.29mmol)、 三 - 叔丁基膦四氟硼酸盐 (17mg， 0.058mmol)、 反式 - 二 -μ- 乙酸基二

    [1274] [2-( 二 -O- 甲苯基膦基 ) 苄基 ] 二钯 (II)(27mg， 0.029mmol) 的二烷 (7mL) 悬浮液中加入 1， 8- 二氮杂双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (86μL， 0.58mmol) 和 DIPEA(197μL， 1.16mmol)。 在微波辐射条件下， 在 150℃加热反应混合物 30 分钟， 并用乙酸乙酯稀释。将有机层依次 用水、 饱和氯化铵水溶液、 饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤， 干燥 (Na2SO4)， 真空浓缩。将 得到的残余物用快速色谱纯化 (SiO2， 3％ MeOH/DCM)， 得到类白色固体， 将其溶于 DMSO/ 水 中。在室温下静置混合物 7 天， 过滤， 用乙酸乙酯和水稀释滤液。用盐水洗涤有机层， 干 燥 (Na2SO4)， 真空浓缩， 得到 414 类白色固体 (42mg， 21％ )。LCMS( 方法 C) ： RT ＝ 8.65min， + 1 [M+H] ＝ 354。 HNMR(DMSO-d6) ： 8.32(1H， d， J ＝ 8.3Hz)， 7.99(1H， bs)， 7.72(1H， d， J＝ 0.7Hz)， 7.66(1H， dd， J ＝ 8.3， 1.8Hz)， 7.57(1H， d， J ＝ 1.8Hz)， 7.40(1H， bs)， 4.41(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 3.45(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 2.74-2.66(1H， m)， 1.23-1.15(2H， m)， 0.93-0.87(2H， m)。

    [1276] 实施例 299 ： (2-(1-(2， 4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1277] -9- 基 )((R)-3-( 二甲基氨基 ) 吡咯烷 -1- 基 ) 甲酮 418向 2-[2-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-2H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸 (82mg ； 0.19mmol) 的 DMF(5mL) 搅拌溶液中加入 HATU(103mg ； 0.27mmol)、 DIPEA(50μl ； 0.27mmol) 和 (R)-(+)-3-( 二 甲 基 氨 基 ) 吡 咯 烷 (50μl ； 0.38mmol)。 将反应混合物在室温下搅拌 4 小时， 接着将其用 EtOAc(20ml) 稀释， 并依次用饱和 NaHCO3(20ml) 和盐水 (2×20ml) 洗涤。 干燥 (Na2SO4) 有机层， 浓缩， 用制备 LCMS 纯化， 得 到 418 类白色固体 (53mg ； 53％ )。δH(400MHz， CDCl3)1.80-1.95(m， 1H)， 2.03-2.15(br m， 1H)， 2.24(br s， 3H)， 2.35(br s， 3H)， 2.62-2.85(br m， 1H)， 3.16(br s， 2H)， 3.30-4.00(m， 4H)， 4.33(br s， 2H)， 6.92-7.20(m， 4H)， 7.40(br s， 1H)， 7.51-7.61(m， 1H)， 7.77(s， 1H)， + 8.11(s， 1H)。[M+H] ： 522

    [1278] 实施例 300 ： 2-(1- 异丙基 -1H-1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1279] -9- 甲酰胺 419将 5-(9- 溴 -4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -1- 硫 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -2- 基 )-1- 异 丙 基 -1H-[1， 2， 4] 三唑 (290mg)、 六羰基钼 (196mg)、 Herman ′ s 催化剂 (70mg)、 三丁基膦 的 四 氟 硼 酸 盐 (43mg)、 甲 醇 (3mL)、 THF(3mL) 和 1， 8- 二 氮 杂 双 环 [5.4.0] 十 一 -7- 烯 (0.33mL) 的混合物在 130 ℃微波加热 30 分钟。冷却反应混合物， 而后用二氯甲烷稀释， 用水洗涤， 干燥 (MgSO4)， 真空除去溶剂， 得到 2-(2- 异丙基 -2H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸甲酯。使用氢氧化钠在水 / 甲醇 / THF 中将其水解， 得到相应的酸。在无水 DMF 中， 用 HATU、 二异丙基乙胺和氯化铵处理， 得到 5.09(1H， septet)， 7.02(1H， d)， 419。NMR ： (DMSO) ： 1.51(6H， d)， 3.25(2H， t)， 4.38(2H， t)， 7.33(1H， br， s)， 7.51(1H， s)， 7.75(1H， dd)， 8.00(1H， s)， 8.04(1H， s， br.)， 8.18(1H， s)。 + MS.ESI+3396(MH +MeCN)

    [1280] 实施例 301 ： ((2-(1-(2， 4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1281] -9- 基 )((S)-3-( 二甲基氨基 ) 吡咯烷 -1- 基 ) 甲酮 420向 2-[2-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-2H-[1， 2， 4] 三唑 -3- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸 (70mg ； 0.16mmol) 的 DMF(5mL) 搅拌溶液中加入 HATU(103mg ； 0.27mmol)、 DIPEA(50μl ； 0.27mmol) 和 (S)-(-)-3-( 二 甲 基 氨 基 ) 吡 咯 烷 (50μl ； 0.38mmol)。 将反应混合物在室温下搅拌 4 小时， 接着将其用 EtOAc(20ml) 稀释， 并依次用饱 和 NaHCO3(20ml) 和盐水 (2×20ml) 洗涤。 干燥 (Na2SO4) 有机层， 浓缩， 用制备 LCMS 纯化， 得 到 420 类白色固体 (50mg ； 58％ )。δH(400MHz， CDCl3)1.77-1.92(br m， 1H)， 2.06-2.17(m， 1H)， 2.24(br s， 3H)， 2.35(br s， 3H)， 2.60-2.83(m， 1H)， 3.16(br s， 2H)， 3.29-3.98(m， 4H)， 4.33(br s， 2H)， 6.94-7.20(m， 4H)， 7.32-7.39(m， 1H)， 7.50-7.60(m， 1H)， 7.77(s， 1H)， + 8.11(s， 1H)。[M+H] ： 522

    [1283] 实施例 302 ： 2-[5-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-[1， 2， 3] 三唑 -1- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧 杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -8- 甲酸酰胺 427

    [1282] 步骤 1 ： 8- 溴 -2-[5-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-[1， 2， 3] 三唑 -1- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧 杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环按照制备 414 的步骤 3 的方法， 使 2- 叠氮基 -8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环使与 1- 乙炔基 (ethylnyl)-2， 4- 二氟代苯反应， 得到标 1 题 化 合 物 米 色 固 体。 H NMR(DMSO-d6) ： 8.26(1H， s)， 7.73(1H， m)， 7.58-7.52(1H， m)， 7.36-7.30(2H， m)， 7.24(1H， d， J ＝ 2.0Hz)， 7.18-7.10(1H， m)， 4.35(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 3.38(2H， t， J ＝ 5.0Hz)。

    [1287] 步骤 2 ： 2-[5-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-[1， 2， 3] 三唑 -1- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -8- 甲酸酰胺

    [1288] 按照制备 414 的步骤 4 的方法， 使 8- 溴 -2-[5-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-[1， 2， 3] 三 唑 -1- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环与盐酸羟胺反应， 得到 427 白色固体。LCMS( 方法 C) ： RT ＝ 9.67min， [M+H]+ ＝ 426。1H NMR(DMSO-d6) ： 8.27(1H， s)， 7.99(1H， bs)， 7.75(1H， td， J ＝ 8.5， 6.4Hz)， 7.59-7.51(2H， m)， 7.46-7.31(4H， m)， 4.36(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 3.41(2H， t， J ＝ 5.0Hz)。

    [1289] 实 施 例 303 ： 2-(5- 叔 丁 基 -[1， 2， 3] 三 唑 -1- 基 )-4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 434

    [1290] 步骤 1 ： 8- 溴 -2-(5- 叔丁基 -[1， 2， 3] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环

    [1286] 按照制备 414 的步骤 3 的方法， 使 2- 叠氮基 -8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环与 3， 3- 二甲基 -1- 丁炔反应， 得到标题化合物浅黄色固体。 + 1 LCMS( 方 法 A) ： RT ＝ 4.95min， [M+H] ＝ 405 和 407。 H NMR(CDCl3) ： 8.16(1H， dd， J＝ 8.1， 0.9Hz)， 7.55(1H， s)， 7.28(2H， m)， 4.42(2H， t， J ＝ 5.1Hz)， 3.37(2H， t， J ＝ 5.1Hz)， 1.54(9H， s)。

    [1293] 步骤 2 ： 2-(5- 叔丁基 -[1， 2， 3] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮 杂 - 苯并 [e] 甘菊环

    [1294] 将 8- 溴 -2-(5- 叔丁基 -[1， 2， 3] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮

    [1292] 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 (101mg， 0.25mmol) 和 10％ Pd/C(250mg) 的 MeOH(5mL) 悬浮液在室温 下、 在氢气氛围下搅拌 16 小时。用氮气吹扫反应混合物， 通过硅藻土过滤， 用乙酸乙酯洗 涤， 真空浓缩。用快速色谱将得到的残余物纯化 (SiO2， 20％乙酸乙酯 / 环己烷 )， 得到 434 + 1 白色固体 (54mg ； 66 ％ )。LCMS( 方法 C) ： RT ＝ 13.19min， [M+H] ＝ 327。 H NMR(CDCl3) ： 8.30(1H， dd， J ＝ 7.9， 1.8Hz)， 7.55(1H， s)， 7.29(1H， m)， 7.17-7.12(1H， m)， 7.08(1H， dd， J ＝ 8.0， 1.4Hz)， 4.43(2H， t， J ＝ 5.1Hz)， 3.39(2H， t， J ＝ 5.1Hz)， 1.55(9H， s)。

    [1295] 实 施 例 304 ： 2-(5- 叔 丁 基 -[1， 2， 3] 三 唑 -1- 基 )-4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -8- 甲酸酰胺 435

    [1296] 按照制备 414 的步骤 4 的方法， 使 8- 溴 -2-(5- 叔丁基 -[1， 2， 3] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环与盐酸羟胺反应， 得到 435 浅黄色固 + 1 体。LCMS( 方法 C) ： RT ＝ 9.29min， [M+H] ＝ 370。 HNMR(DMSO-d6) ： 8.25(1H， d， J ＝ 8.3Hz)， 8.00(1H， bs)， 7.83(1H， s)， 7.67(1H， dd， J ＝ 8.3， 1.8Hz)， 7.59(1H， d， J ＝ 1.8Hz)， 7.42(1H， bs)， 4.43(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 3.48(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 1.48(9H， s)。

    [1298] 实 施 例 305 ： 2-(5- 异 丙 基 -[1， 2， 3] 三 唑 -1- 基 )-4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -8- 甲酸酰胺 436

    [1299] 步骤 1 ： 8- 溴 -2-(5- 异丙基 -[1， 2， 3] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环

    [1297] 按照制备 414 的步骤 3 的方法， 使 2- 叠氮基 -8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环与 3- 甲基 -1- 丁炔反应， 得到标题化合物米色固体。 LCMS( 方 + 1 法 A) ： RT ＝ 4.88min， [M+H] ＝ 391 和 393。HNMR(CDCl3) ： 8.12(1H， d， J ＝ 8.5Hz)， 7.59(1H， s)， 7.30-7.25(2H， m)， 4.41(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 3.98-3.90(1H， m)， 3.36(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 1.44(3H， s)， 1.42(3H， s).。

    [1302] 步骤 2 ： 2-(5- 异丙基 -[1， 2， 3] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -8- 甲酸酰胺

    [1303] 按照制备 414 的步骤 4 的方法， 使 8- 溴 -2-(5- 异丙基 -[1， 2， 3] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环与盐酸羟胺反应， 得到 436 浅黄色固

    [1301] 体。LCMS( 方法 C) ： RT ＝ 9.07min， [M+H]+ ＝ 356.1HNMR(DMSO-d6) ： 8.26(1H， d， J ＝ 8.3Hz)， 8.00(1H， bs)， 7.91(1H， d， J ＝ 0.7Hz)， 7.68(1H， dd， J ＝ 8.3， 1.8Hz)， 7.58(1H， d， J＝ 1.8Hz)， 7.41(1H， bs)， 4.41(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 3.91-3.82(1H， sept， J ＝ 6.8Hz)， 3.44(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 1.39(3H， s)， 1.38(3H， s)。

    [1304] 实施例 306 ： 2-[5-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧 杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -8- 甲酸酰胺 449

    [1305] 步骤 1 ： 4， 8- 二溴 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [b] 氧杂-5- 酮

    [1307] 在氮气氛围中， 在 0 ℃， 向 8- 溴 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [b] 氧杂-5- 酮 (1.2g，5mmol) 的二乙醚 (20mL) 溶液中逐滴加入溴 (257μL， 5mmol)。将反应混合物在 0℃搅拌 1 小时， 加热至室温， 搅拌 3 小时。进一步加入溴 (50μL， 0.97mmol)， 并继续搅拌 16 小时。真 空除去溶剂， 将得到的残余物用快速色谱纯化 (SiO2， 10％乙酸乙酯 / 环己烷 )， 得到标题化 合物白色固体 (1.55g， 97％ )。1H NMR(CDCl3) ： 7.62(1H， m)， 7.26(2H， m)， 4.94(1H， dd， J＝ 7.7， 6.7Hz)， 4.43(1H， ddd， J ＝ 12.7， 5.6， 4.8Hz)， 4.25-4.15(1H， m)， 2.97-2.86(1H， m)， 2.51(1H， ddt， J ＝ 14.7， 7.7， 4.6Hz)。

    [1308] 步骤 2 ： (8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 基 )- 肼

    [1309] 将 4， 8- 二 溴 -3， 4- 二 氢 -2H- 苯 并 [b] 氧 杂-5- 酮 (1.5g， 4.7mmol) 和 氨 基硫脲 (455mg， 5mmol) 的 IMS(15mL) 溶液在 85 ℃搅拌 2 小时， 冷却至室温， 过滤， 得到标题 + 化合物米色固体 (1.03g， 70 ％ )。LCMS( 方法 B) ： RT ＝ 3.06min， [M+H] ＝ 312 和 314。1H NMR(DMSO-d6) ： 10.10(2H， bs)， 9.80(1H， bs)， 8.27(1H， d， J ＝ 8.6Hz)， 7.34(1H， dd， J ＝ 8.6， 2.1Hz)， 7.22(1H， d， J ＝ 2.1Hz)， 4.31(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 3.19(2H， t， J ＝ 5.0Hz)。

    [1311] 步骤 3 ： N-[1- 二甲基氨基 - 甲 (E)- 亚基 ]-2， 4- 二氟 - 苯甲酰胺

    [1312] 将 2， 4- 二氟苯甲酰胺 (5g， 32mmol) 的 DMF-DMA(10mL) 悬浮液在 120℃加热 2.5 小 时， 冷却至室温， 过滤， 得到标题化合物白色固体 (6.16g， 91％ )。1H NMR(CDCl3) ： 8.60(1H， s)， 8.19-8.12(1H， m)， 6.91-6.79(2H， m)， 3.19(6H， m)。

    [1313] 步骤 4 ： 8- 溴 -2-[5-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧 杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环将 (8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 基 )- 肼 (312mg， 1mmol) 和 N-[1- 二 甲 基 氨 基 - 甲 (E)- 亚 基 ]-2， 4- 二 氟 - 苯 甲 酰 胺 (232mg， 1.1mmol) 的乙酸 (6mL) 悬浮液在 90℃加热 3 小时， 冷却至室温， 过滤。用二乙醚洗涤沉淀， 干燥， 得到标题化合物米色固体 (300mg， 65 ％ )。LCMS( 方法 B) ： RT ＝ 4.51min， [M+H]+ ＝ 461 和 463。1HNMR(DMSO-d6) ： 8.50(1H， s)， 7.82(1H， td， J ＝ 8.4， 6.4Hz)， 7.57(1H， ddd， J ＝ 10.4， 9.4， 2.5Hz)， 7.39-7.30(2H， m)， 7.23(1H， d， J ＝ 2.0Hz)， 7.13(1H， dd， J ＝ 8.6， 2.0Hz)， 4.33(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 3.34(2H， t， J ＝ 5.0Hz)。

    [1317] 步骤 5 ： 2-[5-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -8- 甲酸酰胺

    [1318] 按照制备 414 的步骤 4 的方法， 使 8- 溴 -2-[5-(2， 4- 二氟 - 苯基 )-[1， 2， 4] 三 唑 -1- 基 ]-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环与盐酸羟胺反应， 得 到 449 白 色 固 体。LCMS( 方 法 C) ： RT ＝ 9.22min， [M+H]+ ＝ 426。1H NMR(DMSO-d6) ： 8.51(1H， m)， 7.98(1H， bs)， 7.88-7.80(1H， m)， 7.60-7.53(1H， m)， 7.51(1H， d， J ＝ 1.7Hz)， 7.46-7.34(4H， m)， 4.34(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 3.38(2H， t， J ＝ 5.0Hz)。

    [1316] 实施例 307 ： 5-(2- 氨甲酰基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 )-6-(2， 4- 二氟苯基 ) 吡啶 -2- 胺 454

    [1320] 步骤 1 ： 2- 氯 -6， 7- 二氢 - 吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 硼酸 的 100mL在 -76 ℃，将 4.77mL(12mmol)2.5M 正 丁 基 锂 的 己 烷 溶 液 逐 滴 加 入 到3166mg(10.0mmol)2- 氯 -6， 7- 二氢 -9- 溴吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂四氢呋喃溶液中。搅拌 10 分钟之后， 加入 3.21mL(14.0mmol) 硼酸三异丙基酯。将混合物 在 -76℃保持 20 分钟， 然后加入 10ml 饱和氯化铵水溶液， 并将混合物与 360ml 水混合。用 150ml 乙酸乙酯提取产物。用 100ml 水和 100ml 盐水洗涤有机层， 用无水硫酸钠干燥。过滤 溶液， 真空浓缩， 得到残余物， 然后将其用己烷和乙醚的混合物 (1 ∶ 1) 研磨。过滤沉淀， 用 冷乙醚、 己烷洗涤， 真空干燥， 得到 2- 氯 -6， 7- 二氢 - 吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 硼酸。产率 2.20g(78％ )。MS ： (ESI+) ＝ 282.1。

    [1323] 按照 WO 2005/100353 中的方法合成 5， 6- 二溴吡啶 -2- 胺。步骤 2 ： 5- 溴 -6-(2， 4- 二氟苯基 ) 吡啶 -2- 胺。

    [1327] 将 5， 6- 二溴吡啶 -2- 胺 (315mg， 1.25mmol)、 2， 4- 二氟苯基硼酸硼酸频哪醇酯 (197mg， 1.25mmol ； ) 和二 ( 三苯基膦 ) 氯化钯 (II)(44.0mg， 0.063mmol ； ) 在 1.0M 碳酸钠 水溶液 (1.5mL， 1.5mmol)) 和 4mL 乙腈中的混合物脱气， 并在 130℃用 200 瓦微波加热 30 分 钟。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配， 从无机盐中过滤。用水和盐水洗涤有机层， 用 蒸干。将粗品残余物在硅胶柱上纯化， 用 0.4％甲醇 / 二氯甲烷洗脱产物。产 MgSO4 干燥， 率 150mg(42％ )。MS ： (ESI+) ＝ 285.0。

    [1326] 将 140mg(0.49mmol)5- 溴 -6-(2 ， 4- 二氟苯基 ) 吡啶 -2- 胺、 -9- 硼酸和146mg(0.52mmol)2- 氯 -6， 7- 二氢 - 吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 (1 ∶ 1) 在 0.86mL(0.86mmol)1M 碳酸钠水溶液和 4mL 二20mg(0.0025mmol)[1， 1′ - 二 ( 二苯基膦基 ) 二茂铁 ] 二氯钯 (II) 与二氯甲烷的复合物 烷中的混合物脱气， 并在 130℃ 用 200 瓦微波加热 30 分钟。将反应混合物在二氯甲烷和水之间分配， 从无机盐中过滤。用 水和盐水洗涤有机层， 用 MgSO4 干燥， 蒸干。将粗品残余物在硅胶柱上纯化， 用 35-40％乙酸 乙酯洗脱产物。产率 110mg(51％ )。MS ： (ESI+)442.2

    [1330] 将 75mg(0.168mmol) 上 述 产 物、 59mg(0.5mmol) 氰 化 锌、 33mg(0.5mmol) 锌 和 20mg(0.02mmol)[1， 1 ′ - 二 ( 二苯基膦基 ) 二茂铁 ] 二氯钯 (II) 与二氯甲烷的复合物 (1 ∶ 1) 的 3mL 二甲基甲酰胺悬浮液脱气， 并在 180℃用 200 瓦微波加热 30 分钟。将反应 混合物与 30mL 3％氢氧化铵水溶液混合， 并用 20mL 乙酸乙酯提取三次。用水、 盐水洗涤合 并的有机提取物， 用无水硫酸钠干燥， 真空浓缩。用二氯甲烷研磨残余物， 得到沉淀， 收集， 用冷的二氯甲烷洗涤， 真空干燥。产率 47mg(64％ )。MS ： (ESI+)432.2

    [1331] 将 47mg(0.11mmol) 上述腈、 61mg(0.44mmol) 碳酸钾和 27ul(0.44mmol)50％过氧 化氢的混合物搅拌 4 小时。加入另一份 27uM 的过氧化氢， 并继续搅拌混合物 2 小时。将反 应混合物与 30mL 水混合， 并用 30ml 乙酸乙酯提取三次。用水、 盐水洗涤合并的有机提取 物， 用无水硫酸钠干燥， 真空浓缩。用反相 HPLC 纯化残余物 ( 乙腈梯度 )， 得到 454。产率 1 19mg(38％ )。 MS ： (ESI+)451.1 H NMR(400MHz， DMSO)δ8.19(s， 1H)， 7.74(d， J ＝ 8.2， 6H)， 7.51-7.41(m， 4H)， 7.29-7.19(m， 4H)， 7.14(td， J ＝ 8.5， 2.4， 2H)， 6.66(s， 2H)， 6.57(d， J＝ 8.6， 2H)， 6.42(s， 4H)， 4.31(t， J ＝ 4.6， 4H)， 3.06(t， J ＝ 4.6， 5H)。

    [1334] 实施例 308 ： 8-(1H- 吡唑 -4- 基 )-(4H-4- 异丁基 -1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-4， 5- 二 氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 455

    [1335] 步骤 1 ： (1B) 的制备。

    [1333] 向 (1A)(2.5g， 7.7mmol) 中加入 DCM(20mL)。用 20 分钟向该混合物中逐滴加入溶 于 DCM(20mL) 中的 ( 异氰基亚氨基 ) 三苯基正膦 (2.3g， 7.7mmol)。在室温下搅拌反应 5 小时。 将反应混合物用水稀释， 用乙酸乙酯提取。 用水和盐水顺序洗涤合并的有机提取物。 用 MgSO4 干燥有机层， 过滤， 并减压浓缩。用硅胶柱色谱纯化粗品， 用 60％ EtOAc/ 己烷洗脱， 提供 0.66g(25％ ) 目标产物 (1B) ： LC/MS(APCI) ： m/z 352.0(M+H)。

    [1338] 步骤 2 ： (1C) 的制备

    [1339] 在密封管瓶中， 向 (1B)(0.236g， 0.674mmol) 和异丁胺 (0.2mL， 2mmol) 中加入甲 苯 (2mL) 和 TFA(0.3mL)， 并在 65 ℃搅拌和加热 24 小时。用 LCMS 监控反应。在密封的管 瓶中， 向反应混合物中加入异丁胺 (0.2mL， 2mmol) 和 TFA(0.3mL)， 并在 65℃搅拌和加热 24 小时。冷却至室温， 加入 EtOAc， 过滤， 减压浓缩滤液， 提供 0.273g( 定量产率 ) 目标产物 8- 溴 -(4H-4- 异丁基 -1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 (1C) ： LC/MS(APCI) ： m/z405.0(M+H)。

    [1340] 步骤 3 ： 455 的制备

    [1342] 向 8- 溴 -(4H-4- 异丁基 -1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 (1C)(0.273g， 0.674mmol)、 4- 吡 唑 硼 酸 (0.060g， 0.808mmol)、 乙酸 钾 (0.264g， 2.69mmol) 和四 ( 三苯基膦 ) 钯 (O)(39mg， 0.03mmol) 中加入 DMF(10mL) 和水 (1mL)。 向反应混合物中鼓入氮气 5 分钟。 将反应混合物在 105℃搅拌并加热 24 小时。 减压浓 缩反应混合物， 用反相 HPLC 纯化， 提供 0.023g(9％ )455 ： LC/MS(APCI) ： m/z 393.1(M+H)。

    [1343] 实 施 例 309 ： 2-(5- 异 丙 基 -[1， 2， 4] 三 唑 -1- 基 )-4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -8- 甲酸酰胺 478

    [1344] 步骤 1 ： [1- 二甲基氨基 - 甲 (E)- 亚基 ]- 异丁酰胺

    [1341] 1按照制备 449 的步骤 3 的方法， 使异丁酰胺与 DMF-DMA 反应， 得到标题化合物黄色油。 H NMR(CDCl3) ： 8.39(1H， s)， 3.10(3H， m)， 3.07(3H， d， J ＝ 0.67Hz)， 2.68-2.56(1H， m)， 1.17(3H， s)， 1.18-1.11(3H， s)。

    [1347] 步骤 2 ： 8- 溴 -2-(5- 异丙基 -[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环

    [1348] 按照制备 449 的步骤 4 的方法， 使 (8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯 并 [e] 甘菊环 -2- 基 )- 肼与 [1- 二甲基氨基 - 甲 (e)- 亚基 ]- 异丁酰胺反应， 得到标题化合 + 1 物米色固体。LCMS( 方法 D) ： RT ＝ 5.09min， [M+H] ＝ 391 和 393。 H NMR(CDCl3) ： 8.14(1H， d， J ＝ 8.5Hz)， 7.89(1H， s)， 7.31-7.24(2H， m)， 4.40(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 4.15-4.07(1H， m)， 3.33(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 1.50(3H， s)， 1.48(3H， s)。

    [1350] 步骤 3 ： 2-(5- 异丙基 -[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -8- 甲酸酰胺

    [1351] 按照制备 414 的步骤 4 的方法， 使 8- 溴 -2-(5- 异丙基 -[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环与盐酸羟胺反应， 得到 478 白色固体。 + 1 LCMS( 方 法 C) ： RT ＝ 8.56min， [M+H] ＝ 356。 HNMR(DMSO-d6) ： 8.26(1H， d， J ＝ 8.3Hz)，

    [1349] 8.17(1H， s)， 7.99(1H， bs)， 7.69(1H， dd， J ＝ 8.3， 1.8Hz)， 7.57(1H， d， J ＝ 1.8Hz)， 7.41(1H， bs)， 4.39(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 4.10-4.00(1H， m)， 3.41(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 1.42(3H， s)， 1.41(3H， s)。

    [1352] 实施例 310 ： 2-(2- 氨甲酰基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 )-3-(2， 4- 二氟苯基 )-5- 氨基吡嗪 480

    [1353] 按照制备 454 的方法， 制备化合物 480。MS ： (ESI+)452.0。1HNMR(400MHz， DMSO) δ8.49(d， 1H)， 7.99(s， 2H)， 7.77(d， J ＝ 8.3， 5H)， 7.57(dd， J ＝ 15.0， 8.5， 4H)， 7.49(d， J ＝ 8.3， 2H)， 7.38(d， J ＝ 12.1， 4H)， 7.27(t， J ＝ 9.9， 3H)， 6.96(s， 4H)， 6.34(s， 2H)， 4.30(t， J ＝ 4.6， 3H)， 3.00(t， J ＝ 4.4， 3H)

    [1354] 实施例 311 ： 2-(5- 异丙基 -[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 )-8-(1H- 吡唑 -4- 基 )-4， 5- 二 氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 484

    [1355] 将 8- 溴 -2-(5- 异丙基 -[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮 杂 - 苯并 [e] 甘菊环 (84mg， 0.21mmol)、 4， 4， 5， 5- 四甲基 -2-(1H- 吡唑 -4- 基 )-1， 3， 2- 二氧 杂硼杂环戊烷 (62mg， 0.32mmol)、 四 ( 三苯基膦 ) 钯 (O)(24mg， 0.021mmol) 和碳酸钠 (45mg， 0.42mmol) 的乙腈 (6mL) 和水 (3mL) 悬浮液在微波辐射下、 在氮气氛围中、 在 140℃加热 25 分钟。 加入更多的四 ( 三苯基膦 ) 钯 (O)(24mg， 0.021mmol)， 并在 150℃继续加热 30 分钟。 将 反应混合物用乙酸乙酯和水稀释。 用盐水洗涤有机层， 干燥 (Na2SO4)， 真空浓缩， 用快速色谱 纯化两次 (SiO2， 梯度 50 至 75％乙酸乙酯 / 环己烷， 然后 60％乙酸乙酯 / 环己烷 )， 得到 484 + 1 类白色固体 (16mg， 20％ )。LCMS( 方法 C) ： RT ＝ 10.30min， [M+H] ＝ 379。 HNMR(DMSO-d6) ： 12.98(1H， bs)， 8.28(1H， bs)， 8.18(1H， d， J ＝ 8.3Hz)， 8.16(1H， s)， 7.99(1H， bs)， 7.46(1H， dd， J ＝ 8.3， 1.8Hz)， 7.34(1H， d， J ＝ 1.8Hz)， 4.38(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 4.13-4.01(1H， m)， 3.37(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 1.43(3H， s)， 1.41(3H， s)。

    [1356] 实施例 312 ： 2-(5- 异丙基 -[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 )-9-(1H- 吡唑 -4- 基 )-4， 5- 二294102333779 A CN 102333793说明书-5- 酮259/280 页氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 489

    [1357] 步骤 1 ： 4， 7- 二溴 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [b] 氧杂

    [1359] 按照制备 449 的步骤 1 的方法， 使 7- 溴 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [b] 氧杂-5- 酮与溴反应， 得到标题化合物白色固体。1H NMR(CDCl3) ： 7.86(1H， d， J ＝ 2.6Hz)， 7.53(1H， dd， J ＝ 8.7， 2.6Hz)， 6.96(1H， d， J ＝ 8.7Hz)， 4.94(1H， dd， J ＝ 7.6， 6.7Hz)， 4.43(1H， ddd， J＝ 12.7， 5.6， 4.7Hz)， 4.18(1H， ddd， J ＝ 12.7， 9.7， 4.4Hz)， 2.97-2.87(1H， m)， 2.51(1H， ddt， J ＝ 14.7， 7.6， 4.6Hz)。

    [1360] 步骤 2 ： (9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 基 )- 肼

    [1361] 按照制备 449 的步骤 2 的方法， 使 4， 7- 二溴 -3， 4- 二氢 -2H- 苯并 [b] 氧杂-5- 酮与氨基硫脲反应， 得到标题化合物米色固体。LCMS( 方法 E) ： RT ＝ 3.85min， [M+H]+ ＝ 312 和 314。1H NMR(DMSO-d6) ： 10.13(2H， bs)， 9.80(1H， bs)， 8.49(1H， d， J ＝ 2.6Hz)， 7.37(1H， dd， J ＝ 8.6， 2.6Hz)， 6.97(1H， d， J ＝ 8.6Hz)， 4.29(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 3.21(2H， t， J ＝ 5.0Hz)。

    [1363] 步骤 3 ： 9- 溴 -2-(5- 异丙基 -[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环

    [1364] 按照制备 449 的步骤 4 的方法， 使 (9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯 并 [e] 甘菊环 -2- 基 )- 肼与 [1- 二甲基氨基 - 甲 (E)- 亚基 ]- 异丁酰胺反应， 得到标题 + 1 化合物米色固体。LCMS( 方法 E) ： RT ＝ 5.22min， [M+H] ＝ 391 和 393。 H NMR(DMSO-d6) ： 8.32(1H， d， J ＝ 2.6Hz)， 8.17(1H， s)， 7.44(1H， dd， J ＝ 8.6， 2.6Hz)， 7.04(1H， d， J ＝ 8.6Hz)， 4.37(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 4.01-3.93(1H， m)， 3.38(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 1.43(3H， s)， 1.41(3H， s)。

    [1365] 步骤4： 2-(5- 异 丙 基 -[1， 2， 4] 三 唑 -1- 基 )-9-(1H- 吡 唑 -4- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环

    [1367] 按照制备 484 的步骤 4 的方法， 使 9- 溴 -2-(5- 异丙基 -[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环与 4-(4， 4， 5， 5- 四甲基 -[1， 3， 2] 二氧 杂硼杂环戊烷 -2- 基 )-1H- 吡唑反应， 得到 489 白色固体。LCMS( 方法 C) ： RT ＝ 10.17min， + 1 [M+H] ＝ 379。 H NMR(DMSO-d6) ： 12.95(1H， bs)， 8.42(1H， d， J ＝ 2.3Hz)， 8.18(1H， s)， 8.07(1H， bs)， 7.81(1H， bs)， 7.51(1H， dd， J ＝ 8.3， 2.3Hz)， 7.06(1H， d， J ＝ 8.3Hz)， 4.36(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 4.12-4.04(1H， m)， 3.38(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 1.47(3H， s)， 1.46(3H， s)。

    [1368] 实 施 例 313 ： 2-(5- 异 丙 基 -[1， 2， 4] 三 唑 -1- 基 )-4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸酰胺 490

    [1369] 按照制备 414 的步骤 4 的方法， 使 9- 溴 -2-(5- 异丙基 -[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环与盐酸羟胺反应， 得到 490 白色固体。 + 1 LCMS( 方 法 C) ： RT ＝ 8.44min， [M+H] ＝ 356。 HNMR(DMSO-d6) ： 8.82(1H， d， J ＝ 2.3Hz)， 8.17(1H， s)， 7.91(1H， bs)， 7.75(1H， dd， J ＝ 8.4， 2.3Hz)， 7.24(1H， bs)， 7.09(1H， d， J＝ 8.4Hz)， 4.40(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 4.10-4.02(1H， m)， 3.39(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 1.43(3H， s)， 1.41(3H， s)。

    [1370] 实 施 例 314 ： 2-(5- 异 丙 基 -[1， 2， 4] 三 唑 -1- 基 )-4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -8- 甲酸 (2- 羟基 - 乙基 )- 酰胺 498

    [1371] 按照制备 414 的步骤 4 的方法， 使 8- 溴 -2-(5- 异丙基 -[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环与 2- 氨基乙醇反应， 得到 498 类白 + 1 色固体。LCMS( 方法 C) ： RT ＝ 8.12min， [M+H] ＝ 400。 HNMR(DMSO-d6) ： 8.45(1H， t， J＝ 5.6Hz)， 8.27(1H， d， J ＝ 8.3Hz)， 8.17(1H， s)， 7.67(1H， dd， J ＝ 8.3， 1.8Hz)， 7.56(1H， d， J ＝ 1.8Hz)， 4.71(1H， t， J ＝ 5.6Hz)， 4.39(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 4.10-4.02(1H， m)， 3.51(2H， q， J ＝ 6.0Hz)， 3.41(2H， t， J ＝ 5.0Hz)， 3.34(2H， q， J ＝ 6.0Hz)， 1.42(3H， s)， 1.40(3H， s)。

    [1372] 实 施 例 315 ： 2-(5- 异 丙 基 -[1， 2， 4] 三 唑 -1- 基 )-4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -9- 甲酸 (2- 羟基 - 乙基 )- 酰胺 499

    [1373] 按照制备 414 的步骤 4 的方法， 使 9- 溴 -2-(5- 异丙基 -[1， 2， 4] 三唑 -1- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环与 2- 氨基乙醇反应， 得到 499 类白 + 色 固 体。LCMS( 方 法 C) ： RT ＝ 8.02min， [M+H] ＝ 400。HNMR(DMSO-d6) ： 8.81(1H， d， J＝ 2.3Hz)， 8.35(1H， t， J ＝ 5.6Hz)， 8.17(1H， s)， 7.75(1H， dd， J ＝ 8.4， 2.3Hz)， 7.11(1H， d， J ＝ 8.4Hz)， 4.71(1H， t， J ＝ 5.6Hz)， 4.40(2H， t， J ＝ 4.9Hz)， 4.11-4.01(1H， m)， 3.52(2H， q， J ＝ 6.0Hz)， 3.40(2H， t， J ＝ 4.9Hz)， 3.34(2H， q， J ＝ 6.1Hz)， 1.44(3H， s)， 1.42(3H， s)。

    [1374] 实施例 316 ： 8-( 吗啉基甲酰亚胺基 )-2- 异丙基 -2H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 -4， 5- 二 氢 -6- 氢杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 501

    [1375] 按照制备 512 的方法， 在配备磁性搅拌棒的圆底烧瓶中， 使 8- 甲硫基酰胺 -(2- 异 丙基 -2H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 (162mg， 0.42 毫摩尔 ) 与吗啉 (73.3μL， 0.84 毫摩尔， 2 当量 )、 乙酸 (48.1μL， 0.84 毫摩 尔， 2 当量 ) 和甲醇 (2.1mL) 反应， 并在室温下搅拌 2 小时。 将混合物浓缩至干， 用反相 HPLC 纯化， 获得 119.8mg 的 501 无色固体， 产率 67％。实施例 317 ： 2-(2- 氨甲酰基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 )-5- 氨基吡嗪 503

    [1377] 按照制备 454 的方法， 制备化合物 503。MS ： (ESI+)340.0。1HNMR(400MHz， DMSO) δ8.50(d， J ＝ 1.2， 1H)， 7.89(d， J ＝ 1.3， 1H)， 7.79(d， J ＝ 8.3， 1H)， 7.68(s， 1H)， 7.56(s， 1H)， 7.51(d， J ＝ 8.3， 1H)， 7.48(s， 1H)， 6.70(s， 2H)， 4.40(t， J ＝ 4.5， 2H)， 3.24(t， J＝ 4.6， 2H)。

    [1378] 实施例 318 ： 8-( 吗啉基甲酰亚胺基 )-2- 异丙基 -2H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 -4， 5- 二 氢 -6- 氢杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 511

    [1379] 按照制备 512 的方法， 在配备磁性搅拌棒的圆底烧瓶中， 使 8- 甲硫基酰胺 -(2- 异 丙基 -2H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 (150mg， 0.39 毫摩尔 ) 与乙酸铵 (749.8mg， 9.73 毫摩尔， 25 当量 ) 和甲醇 (1.95mL) 反应。 在室温下搅拌反应混合物 4 小时。加入饱和 Na2CO3， 并用二氯甲烷提取反应混合物 (3x)。 合并有机相， 用 MgSO4 干燥， 浓缩。用反相 HPLC 纯化产物， 获得 11.5mg(8.3％产率 ) 的 511 无色固体。

    [1380] 实施例 319 ： 8-( 甲基甲脒基 )-2- 异丙基 -2H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 -4， 5- 二氢 -6- 氧 杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 512

    [1381] 将 8- 溴 -2- 异丙基 -2H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 (330mg， 0.84mmol) 和 脱 气 的 二 甲 基 甲 酰 胺 (4.2mL) 加 入 到 CEM 微 波 管 瓶 中。 用 氮 气 充 分 地 吹 扫 混 合 物。 将 氰 化 锌 (99.0mg， 0.84mmol， 1.0 当 量 ) 和 Pd(PPh3)4(48.7mg， 0.04mmol， 0.05 当量 ) 一次性地加入到反应混合物中， 立即密封管瓶。 对 反应进行 MW 照射 (60W)15 分钟 (T ＝ 175℃ )。用二氯甲烷稀释混合物， 通过硅藻土过滤， 用饱和 NH4Cl 洗涤。合并有机层， 用 MgSO4 干燥， 浓缩。将粗品混合物装填到硅胶上， 用快速 色谱纯化 (0-100％ EtOAc/ 己烷 )， 得到 202mg(71.3％产率 )8- 氰基 -2- 异丙基 -2H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环黄色固体。

    [1382] 在配备磁性搅拌棒的圆底烧瓶中， 将硫化氢鼓入 8- 氰基 -2- 异丙基 -2H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 (750mg， 2.22 毫 摩尔 ) 的吡啶 (10.0mL) 和三乙胺 (1.11mL) 溶液中 20 分钟。在室温下搅拌反应混合物过 夜， 浓缩， 在 5％甲醇 / 二氯甲烷和水之间分配。用盐水洗涤合并的有机物， 用 MgSO4 干燥， 浓缩， 得到 8- 硫代酰胺 -(2- 异丙基 -2H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫 杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环。LCMS 显示彻底转化为产物， 将产物转入下一步， 粗品不用进 一步纯化 ( 获得黄色固体 )。

    [1383] 在配备磁性搅拌棒的圆底烧瓶中， 通过注射器向 8- 硫代酰胺 -(2- 异丙基 -2H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环 (820mg， 2.21 毫 摩尔 ) 的丙酮 (5.52mL) 溶液中加入甲基碘 (0.69mL， 11.04 毫摩尔， 5 当量 )。 在室温下搅拌 混合物过夜。 LCMS 显示彻底转化为 8- 甲硫基酰胺 -(2- 异丙基 -2H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -3- 硫杂 -1- 氮杂 - 苯并 [e] 甘菊环。将溶液浓缩至干， 并作为粗品用在 配备磁性搅拌棒、 装有一甲铵 (2M 在甲醇中， 0.39mL， 0.78 毫摩尔， 2 当量 ) 和乙酸 (45μl， 0.78 毫摩尔， 2 当量 ) 的甲醇 (1.95mL) 混合物的圆底烧瓶中。将混合物加入到硫代亚胺酸 甲基酯 (150mg， 0.39 毫摩尔 ) 中， 并在室温下搅拌 4 小时。将混合物浓缩至干， 用反相 HPLC 纯化， 获得 32.8mg 的 512 无色固体 (22.9％产率 )。 实施例 320 ： 5-(2- 氨甲酰基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1386] -9- 基 )-2- 氨基 -6- 乙基吡啶 521

    [1387] 按照制备 454 的方法， 制备化合物 521。MS ： (ESI+)367.0。1HNMR(400MHz， DMSO) δ7.79(d， J ＝ 8.3， 1H)， 7.65(s， 1H)， 7.52(d， J ＝ 8.4， 2H)， 7.40(d， J ＝ 8.4， 1H)， 6.94(s， 1H)， 6.34(d， J ＝ 8.4， 1H)， 6.09(s， 2H)， 4.40(t， J ＝ 4.5， 2H)， 3.25(t， J ＝ 4.5， 2H)， 2.73(q， J ＝ 7.5， 2H)， 1.17(t， J ＝ 7.5， 3H)。

    [1388] 实 施 例 321 ： 3-(9- 溴 -4， 5- 二 氢 -6- 氧 杂 -1- 硫 杂 - 苯 并 [e] 甘 菊 环 -2- 基 )-4-(2， 4- 二氯 - 苯基 )-4H-[1， 2， 4] 三唑 532

    [1389] 将装有 2-(9- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 基 )-[1， 3， 4] 二唑 (200mg ； 0.57mmol)、 2， 4- 二氯苯胺 (139mg ； 0.86mmol)、 TFA(64μl ； 0.86mmol) 和 甲苯 (1.5mL) 的微波管在 160℃微波加热 30 分钟。用 DIPEA(0.2ml) 碱化反应混合物， 真空 除去挥发物， 用制备 LCMS 纯化残余物， 得到 532 浅黄色固体 (129mg ； 46％ )。δH(400MHz， CDCl3)3.14(t， J ＝ 5.2， 2H)， 4.29(t， J ＝ 5.2， 2H)， 6.89-6.92(m， 2H)， 7.25-7.28(m， 1H)， 7.42(d， J ＝ 8.4， 1H)， 7.52(dd， J ＝ 8.4and 2.4， 1H)， 7.66(d， J ＝ 2.4， 1H)， 7.71(d， J＝ 2.0， 1H)， 8.22(s， 1H)。[M+H]+ ： 493

    [1390] 实施例 322 ： N-(2- 氨乙基 )-2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三 唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1391] -8- 甲酰胺 533 -2- 硫步骤 1 ： 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂代甲酰胺 (carbothioamide) 的制备

    [1392] 将 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺(10g， 0.023mol) 的无水 1， 4- 二烷 (400mL) 溶液用 Lawesson′ s 试剂 (7.44g， 0.018mol) -2- 硫代甲 -2- 肼而 处理， 并在 85℃加热 4 小时。将橙黄色溶液冷却至室温， 真空浓缩。用 CH2Cl2 洗涤粗品， 后干燥， 得到 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 酰胺 (carbothioamide) 黄色固体 (9.41g， 产率 91％ )。ESI-MS ： 449.9。

    [1394] 步骤 2 ： 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂代酰胺 (carbohydrazonamide) 的制备

    [1395] 将 8- 溴 -4， 5- 二氢 -6- 氧杂 -1- 硫杂 - 苯并 [e] 甘菊环 -2- 硫代羟酸 (2- 氯 - 苯 基 )- 甲基 - 酰胺 (9g， 19.96mmol) 悬浮在乙醇 (150mL) 中， 并与 85 ％肼水溶液 (30mL) 混 合， 回流加热 3 小时。 在这时候， 观察到悬浮液褪色。 冷却至室温后， 过滤固体， 用乙醇洗涤， 真空浓缩， 得到 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -2- 肼代酰胺 (carbohydrazonamide) 黄色固体 (7.41g， 产率 83％ )。ESI-MS ： 447.98

    [1397] 步骤 3 ： 3-(8- 溴 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮的制备

    [1398] 将 8- 溴 -N-(2- 氯苯基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂299-2- 肼代酰胺102333779 A CN 102333793说明书264/280 页(carbohydrazonamide)(200mg， 0.45mmol) 的无水 THF(8mL) 溶液用 CDI(145mg， 0.89mmol) 处理， 并在室温下搅拌过夜， 用水稀释。用水洗涤固体， 真空干燥， 得到 3-(8- 溴 -4， 5- 二 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1400] -2- 基 )-4-(2- 氯苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5(4H)- 酮(195mg， 产率 ： 92％ )。ESI-MS ： 473.96 步骤 4 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二 -8- 甲酸甲酯的制备 氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1401] 在 CO(50psi) 氛 围 中， 在 70 ℃， 将 3-(8- 溴 -4， 5- 二 氢 苯 并 [b] 噻 吩 并 [2， -2- 基 )-4-(2- 氯 苯 基 )-1H-1， 2， 4- 三 唑 -5(4H)- 酮 (6.5g， 13.7mmol)、3-d] 氧 杂Pd(OAc) 2(1.54g ， 6.85mmol) 、 dppf(6.1g ， 11.0mmol) 、 TEA(3.8mL) 在 DMF(30mL) 和 MeOH(60mL) 中的混合物搅拌 2 天。 过滤， 浓缩， 用柱色谱纯化粗品 ( 己烷∶ EtOAc ＝ 2 ∶ 1 ～ 1 ∶ 1)， 得到 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢 苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1403] -8- 甲酸甲酯 (5.83g， 产率 94％ )。ESI-MS ： 454.2。 -8- 甲酸的制备步骤 5 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1404] 将 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 -8- 甲酸甲酯 (5.83g， 12.8mmol) 溶于 25mL THF 和 25mL 水中， 并[b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂用 LiOH(1.35g， 一水合物 ) 处理。将全部溶液在 50℃加热 3 小时， 冷却至室温， 酸化。将得 到的沉淀过滤， 用水洗涤。真空干燥滤饼至恒重， 得到 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二 氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂1-8- 甲酸 (5.47g，产率 97％ )。ESI-MS ： 440.2。 H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： δ12.34(s， 1H， NH)， 7.74-7.42(m， 7H， ArH)， 6.50(s， 1H， ＝ CH)， 4.18(t， J ＝ 5.2Hz， 2H， CH2)， 2.98(t， J ＝ 5.2Hz， 2H， CH2)。步骤 6 ： 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二 -8- 羰基氯的制备氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1407] 将 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢 -8- 甲酸 (carboxylate acid)(400mg， 0.91mmol) 的 20mL -8- 羰基氯。苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂SOCl2 溶液在 80℃加热 3 小时。浓缩， 得到 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1409] 在 0℃， 向乙烷 -1， 2- 二胺 (82mg， 1.36mmol) 和吡啶 (0.5mL) 的 5mL THF 溶液中慢 慢地加入 2-(4-(2- 氯苯基 )-5- 氧代 -4， 5- 二氢 -1H-1， 2， 4- 三唑 -3- 基 )-4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -8- 羰基氯 ( 大约 417mg， ca.0.91mmol) 的 20mL THF( 溶液 )。 在室温下搅拌混合物过夜， 用水稀释， 用制备 HPLC 纯化， 得到 66mg 的 533， 分离产率 ： 20％。 1 ESI-MS ： 482。 H NMR(DMSO-d6， 400MHz) ： δ8.74(s， 1H， NH)， 8.37(s， 1H， NH)， 7.74-7.47(m， 7H， ArH)， 6.47(s， 1H， ＝ CH)， 4.19(t， J ＝ 4.8Hz， 2H， CH2)， 3.40-3.36(m， 4H， 2CH2)， 2.98(t， J ＝ 5.2Hz， 2H， CH2)， 2.86(t， J ＝ 6.0Hz， 2H， CH2)。

    [1410] 实 施 例 323 ： 3-(2- 氰 基 -6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂 将包含 3-(2- 氯 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂 -9- 基 )-2-(2，-9- 基 )-2-(2， 4- 二氟苯基 )-2H-1， 2， 4- 三唑 366

    [1411] 4- 二氟苯基 )-2H-1， 2， 4- 三唑 (0.030g， 0.072mmol)、 氰化锌 (16.9mg， 0.144mmol) 和四 ( 三 苯基膦 ) 钯 (O)(4.16mg， 0.00360mmol) 的 N， N- 二甲基甲酰胺 (1.00mL， 12.9mmol) 溶液排 气， 然后用氮气反填充。将反应混合物微波加热至 200℃， 保持 10 分钟。用饱和 NH4Cl 淬灭 反应混合物， 然后用 EtOAc 提取 (3X)。用柱色谱 (EtOAc/Hex) 纯化粗品 ( 在 50％ EtOAc 时 洗脱出 )， 得到 366( 产率 60％ )。MS ： (ESI+) ＝ 408.0

    [1412] 实 施 例 324 ： 4-(2- 氰 基 -6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-9- 基 )-5-(2， 4- 二氟苯基 )-2H-1， 2， 3- 三唑 367

    [1413] 将包含 4-(2- 氯 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 )-5-(2，4- 二氟苯基 )-2H-1， 2， 3- 三唑 (0.085g， 0.20mmol)、 氰化锌 (47.9mg， 0.408mmol ； ) 和四 ( 三 苯基膦 ) 钯 (O)(11.8mg， 0.0102mmol ； ) 的 N， N- 二甲基甲酰胺 (2.83mL， 36.6mmol ； ) 溶液 排气， 然后用氮气反填充。将反应混合物微波加热至 200℃， 保持 10 分钟。用饱和 NH4Cl 淬 灭反应混合物， 然后用 EtOAc 提取 (3X)。用柱色谱 (EtOAc/Hex) 纯化粗品， 得到 367( 产率 84％ )。MS ： (ESI+) ＝ 408.2

    [1415] 实施例 325 ： N-(4-( 二甲基氨基甲酰基 ) 苯基 )-N- 甲基 -(2- 氰基 -6， 7- 二氢吡 啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1416] )-9- 甲酰胺 378按照制备 366 的方法， 使化合物 362、 氰化锌和四 ( 三苯基膦 ) 钯 (O) 在 N， N- 二 甲基甲酰胺中反应， 得到 378。产率 38％。MS ： (ESI+) ＝ 433.2

    [1417] 实施例 326 ： 4-(2- 氨甲酰基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 )-5-(2， 4- 二氟苯基 )-2H-1， 2， 3- 三唑 379

    [1418] 向 367(70.0mg， 0.172mmol) 的 二 甲 亚 砜 (0.439mL， 6.18mmol) 溶 液 并 用 碳 酸 钾 (65.5mg， 0.474mmol ； ) 的水溶液 (0.433mL， 24.0mmol ； ) 处理。 在 0℃冷却后， 慢慢地加入过 氧化氢 (0.540mL， 7.04mmol)。在 15 分钟时， 由 LCMS 确定反应完成。加入饱和亚硫酸氢钠 (0.894g， 8.59mmol)， 并将反应混合物提取到乙酸乙酯中。用盐水洗涤有机物， 用硫酸钠干 燥， 浓缩， 得到粗品 C， 对其进行反相 HPLC， 得到 379(27％产率 )。MS ： (ESI+) ＝ 426.1

    [1419] 实施例 327 ： 3-(2- 氨甲酰基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 )-4-(2， 4- 二氟苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 392

    [1420] 按照制备 379 的方法， 使在水和 DMSO 中的化合物 393、 过氧化氢、 碳酸钾反应， 得到 392。产率 38％。MS ： (ESI+) ＝ 426.2

    [1421] 实 施 例 328 ： 3-(2- 氰 基 -6， 7- 二 氢 吡 啶 并 [3， 2-b] 噻 吩 并 [2， 3-d] 氧 杂-9- 基 )-4-(2， 4- 二氟苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑 393

    [1422] 按照得到 366 的方法， 使 4-(2- 氯 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧 -9- 基 )-4-(2， 4- 二氟苯基 )-4H-1， 2， 4- 三唑、 氰化锌和四 ( 三苯基杂-9- 基 )-5-(2， 4- 二氟苯基 )-2H-1， 2， 3- 三唑、 3-(2- 氯 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1424] 膦 ) 钯 (O)( 在 N， N- 二甲基甲酰胺中 ) 反应， 得到 393。产率 80％。MS ： (ESI+) ＝ 408.0 实施例 329 ： 5-(2- 氨甲酰基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 )-1-(2， 4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 432

    [1425] 按照制备 379 的方法， 使在水和 DMSO 中的化合物 366、 过氧化氢、 碳酸钾反应， 得到 432。产率 38％。MS ： (ESI+) ＝ 426.1

    [1426] 实施例 330 ： (9-(1-(2， 4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 -5- 基 )-6， 7- 二氢吡啶并 -2- 基 )(4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 甲酮 433[3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1427] 将 5-(2- 羧基 -6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 )-1-(2，4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 (0.052g， 0.12mmol) 溶于 N， N- 二甲基甲酰胺 (0.904mL， 0.0117mol) 中， 并用 N， N- 二异丙基乙胺 (0.127mL， 0.732mmol)、 1- 甲基 - 哌嗪， (0.0541mL， 0.488mmol)， 然后用 N， N， N′， N′ - 四甲基 -O-(7- 氮杂苯并三唑 -1- 基 ) 脲六氟磷酸盐 (HATU， 0.0556g， 0.146mmol) 顺序处理。 在室温下搅拌反应过夜。 加入饱和碳酸氢钠， 并用乙 酸乙酯提取。用硫酸钠干燥有机物， 并浓缩。对粗品进行 HPLC 纯化， 得到 433(32％产率 )。 MS ： (ESI+) ＝ 509.3

    [1429] 实施例 331 ： 5-(2-(2- 甲基吡啶 -3- 基 )-6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1430] -9- 基 )-1-(2， 4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 474

    [1431] 将 5-(2-( 氯 )-6， 7- 二氢吡啶并 [3， 2-b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-9- 基 )-1-(2，4- 二氟苯基 )-1H-1， 2， 4- 三唑 (50mg， 0.1mmol) 溶于含有乙酸钾 (39.9mg， 0.406mmol) 的 1mL 乙腈和 1mL 水中。通过鼓入氮气 (5 分钟 ) 将溶液脱气。加入 2- 甲基吡啶 -3- 基硼酸 (21.4mg， 0.156mmol)， 然后加入四 ( 三苯基膦 ) 钯 (O)(19mg， 0.016mmol)。将反应在 140℃ 微波 (300 瓦 ) 加热 20 分钟， 冷却至室温， 并用乙酸乙酯提取。浓缩合并的有机物， 用反相 HPLC 纯化， 得到 474(70％产率 )。MS ： (ESI+) ＝ 474.0

    [1432] 实施例 2bp ： 8- 溴 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酸甲酯 2bp按照一般方法 A， 在 24 ℃， 用 5 分钟向 4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酸甲 酯 1bp(Sigma Aldrich， CAS Reg.126522-01-8 ； Sekhar 等人 (1989)Sulfur Letters 9(6) ： 271-7 ； 2.00g， 8.12mmol， 1 当量 ) 的 N， N- 二甲基甲酰胺 (31mL) 溶液中加入 N- 溴代琥珀酰 亚胺 (1.91g， 10.7mmol， 1.32 当量 )。20 小时后， 用水 (100mL) 稀释反应混合物。将得到的 1 悬浮液通过布氏漏斗过滤。 将得到的褐色固体空气干燥， 得到 2bp(2.77g)。 H NMR(500MHz， CDCl3)， ： 7.52(s， 1H)， 7.45(d， J ＝ 2.3Hz， 1H)， 7.29(dd， J ＝ 8.6， 2.3Hz， 1H)， 6.83(d， J＝ 8.6Hz， 1H)， 5.26(s， 2H)， 3.91(s， 3H)。

    [1435] 实施例 3bp ： 8- 溴 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酸 3bp

    [1434] 在 24℃， 向 8- 溴 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酸甲酯 2(2.64g， 8.12mmol， 1 当量 ) 的 4 ∶ 1 四氢呋喃 / 水 (80mL) 悬浮液中加入氢氧化钾水溶液 (24mL， 24mmol， 3.0 当量， 1.0M 水溶液 )。15 小时之后， 真空 ( ＜ 20mm Hg) 除去四氢呋喃。将得到的水悬浮液 用水稀释， 直到所有的固体溶解为止。 向得到的溶液中加入浓盐酸， 直到溶液达到 pH 值＝ 1 为止。过滤收集得到的固体， 真空 ( ＜ 1mm Hg) 干燥， 得到 3bp 黄色固体 (2.36g， 93％ )。1H NMR(500MHz， CDCl3)， δ： 13.28(br s， 1H)， 7.64(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 7.60(s， 1H)， 7.40(dd， J ＝ 8.7， 2.4Hz， 1H)， 6.94(d， J ＝ 8.7Hz， 1H)， 5.30(s， 3H)。

    [1437] 实施例 4bp ： 8- 溴 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 羰基氯 4bp按 照 一 般 方 法 B， 在 24 ℃， 向 8- 溴 -4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -2- 甲 酸 3bp(1.50g， 4.82mmol， 1 当 量 ) 的 二 氯 甲 烷 (45mL) 悬 浮 液 中 顺 序 加 入 草 酰 氯 (3.1mL， 6.3mmol， 1.3 当量， 2.0M， 在二氯甲烷中 ) 和 N， N- 二甲基甲酰胺 (56μl， 0.72mmol， 0.15 当 量 )。2 小时之后， 将澄清的黄色溶液真空 ( ～ 20mm Hg) 浓缩， 得到粗品 4bp。

    [1441] 实施例 5bp ： 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 5bp

    [1440] 按照一般方法 B-bp， 使 8- 溴 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 羰基氯 4bp 与 2， 4- 二氟苯胺反应， 得到 5bp。

    [1444] 实施例 6bp ： (R)-N-(2， 4- 二氟苯基 )-8-(3- 羟基哌啶 -1- 羰基 )-N- 甲基 -4H- 噻 吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 105bp

    [1443] 在一氧化碳氛围中， 将 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -2- 甲 酰 胺 160bp(3.0g， 6.9mmol)、 乙 酸 钯 (II)(1.5g， 6.9mmol)、 dppf(7.6g， 13.8mmol) 和三乙胺 (1.38g， 13.8mmol) 的 N， N- 二甲基甲酰胺 (50mL) 和甲醇 (50mL) 溶液 在 70℃搅拌 48 小时。过滤反应混合物， 真空浓缩滤液。将得到的黑色残余物用快速柱色谱 纯化， 得到 1.2g 的 2-((2， 4- 二氟苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡 喃 -8- 甲酸甲酯。LCMS(ESI)m/z ： 416。

    [1447] 将 2-((2， 4- 二氟苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -8- 甲 酸甲酯、 氢氧化钠 (115mg， 2.9mmol) 的乙醇 (20mL)、 四氢呋喃 (20mL) 和水 (20mL) 溶液在室 温下搅拌 16 小时。用浓盐酸将反应混合物酸化至 pH ＝ 2， 真空除去有机溶剂。用乙酸乙 酯提取得到的水溶液。用无水硫酸钠干燥收集的有机物， 过滤， 浓缩， 得到 2-((2， 4- 二氟苯 基 )( 甲基 ) 氨基甲酰基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -8- 甲酸 (1.0g)。LCMS(ESI)m/z ： 402。

    [1449] 将 2-((2， 4- 二 氟 苯 基 )( 甲 基 ) 氨 基 甲 酰 基 )-4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -8- 甲酸 (0.100g， 0.250mmol)、 (R)-3- 羟基哌啶 (50.5mg， 0.500mmol)、 O-(7- 氮杂苯并 三唑 -1- 基 )-N， N， N′， N′ - 四甲基脲六氟磷酸盐 (114mg， 0.3mmol)、 N， N- 二异丙基乙胺 (39mg， 0.3mmol) 的 N， N- 二甲基甲酰胺 (2mL) 溶液在室温下搅拌过夜。 用乙酸乙酯稀释反应 混合物， 并用水洗涤得到的溶液。 将收集的有机物浓缩。 用制备薄层色谱纯化 (3 ∶ 1 石油醚 1 CDCl3)δ7.19-7.24(m， 2H)， 7.14-7.17(m， / 乙酸乙酯 )， 得到 105bp(50mg)。H NMR(400MHz， 1H)， 6.88-6.92(m， 2H)， 6.78-6.82(m， 2H)， 5.08(s， 1H)， 3.70-3.9(br s， 1H)， 3.26-3.5(br s， 5H)， 1.75-1.94(m， 2H)， 1.46-1.68(m， 4H)。LCMS(ESI)m/z ： 485.0

    [1450] 实施例 7bp ： N2-(2， 4- 二氟苯基 )-N8-(2-( 二甲基氨基 ) 乙基 )-N2- 甲基 -4H- 噻 吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2， 8- 二甲酰胺 109bp

    [1451] 按 照 实 施 例 15 的 方 法 和 一 般 方 法 C， 2-((2， 4- 二 氟 苯 基 )( 甲 基 ) 氨 基 甲 酰 基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -8- 甲酸和 N1， N1- 二甲基 -1， 2- 乙二胺偶合， 得到 1 109bp。 H NMR(400MHz， CDCl3)δ8.28(br s， 1H)， 7.67(s， 1H)， 7.56(m， 1H)， 7.25(m， 1H)， 6.88(m， 2H)， 6.78(m， 1H)， 6.69(s， 1H)， 5.07(s， 2H)， 3.78(m， 2H)， 3.31(s， 3H)， 3.27(m， 2H)， 2.84(s， 6H)。LCMS(ESI)m/z ： 472.2

    [1452] 实施例 8bp ： (S)-N-(2， 4- 二氟苯基 )-8-(3- 羟基哌啶 -1- 羰基 )-N- 甲基 -4H- 噻 吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 110bp

    [1453] 按 照 实 施 例 15 的 方 法 和 一 般 方 法 C， 2-((2， 4- 二 氟 苯 基 )( 甲 基 ) 氨 基 甲 酰 基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -8- 甲酸与 (S)-3- 羟基哌啶偶合， 得到 110bp。 LCMS(ESI) m/z ： 485.0

    [1454] 实施例 9bp ： N2-(2， 4- 二氟苯基 )-N2， N8， N8- 三甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并 吡喃 -2， 8- 二甲酰胺 111bp

    [1455] 按 照 实 施 例 15 的 方 法 和 一 般 方 法 C， 2-((2， 4- 二 氟 苯 基 )( 甲 基 ) 氨 基 甲 酰 基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -8- 甲酸与二甲胺偶合， 得到 111bp。1H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.15-7.31(m， 3H)， 6.82-7.00(m， 4H)， 5.13(s， 2H)， 3.33(m， 3H)， 2.94-3.13(m， 6H)。LCMS(ESI)m/z ： 429.1。

    [1456] 实 施 例 10bp ： N-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-N- 甲 基 -8-(4-(4- 甲 基 哌 嗪 -1- 基 ) 哌

    [1448] 啶 -1- 基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 112bp

    [1457] 在氮气氛围中， 将 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡 喃 -2- 甲酰胺 160bp(250mg， 0.57mmol)、 1- 甲基 -4-(4- 哌啶基 ) 哌嗪 (157mg， 0.86mmol)、 叔 丁醇钠 (82mg， 0.86mmol)、 三 ( 二亚苄基丙酮 ) 二钯 (O)(25mg， 0.3mmol) 和 2， 2′ - 二 ( 二 苯基膦基 )-1， 1′ - 联二萘 (1.14mmol， 2.00 当量 ) 的甲苯 (10mL) 溶液回流 1 小时。将反 应混合物冷却至室温， 并通过硅胶过滤， 浓缩滤液。 用快速柱色谱纯化， 而后进行 HPLC， 得到 1 112bp(100mg)。H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.22(m， 1H)， 6.90-6.93(m， 2H)， 6.78-6.88(m， 3H)， 6.63(m， 1H)， 4.97(s， 2H)， 3.51-3.57(m， 2H)， 3.40-3.56(m， 8H)， 3.32(s， 3H)， 2.71-2.85(m， 6H)， 2.12-2.16(m， 2H)， 1.96-2.01(m， 2H)。LCMS(ESI)m/z ： 539.3。

    [1458] 实 施 例 11bp ： N-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-8-(2-( 二 甲 基 氨 基 ) 乙 基 氨 基 )-N- 甲 基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 113bp

    [1459] 按照实施例 70 和一般方法 C， 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 160bp 和 N1， N1- 二甲基 -1， 2- 乙二胺反应， 得到 113bp。1H NMR(400MHz， CDCl3)， δ： 7.23(m， 1H)， 6.87-6.92(m， 2H)， 6.67-6.74(m， 2H)， 6.47-6.54(m， 2H)， 4.93(s， 2H)， 3.84(m， 2H)， 3.31-3.39(m， 5H)， 2.86(s， 6H)。LCMS(ESI)m/z ： 444.0

    [1460] 实施例 12bp ： (R)-N-(2， 4- 二氟苯基 )-8-((3- 羟基吡咯烷 -1- 基 ) 甲基 )-N- 甲 基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 115bp

    [1461] 在 -78℃， 在氮气氛围下， 向 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 (1.0g， 2.3mmol) 的四氢呋喃 (20mL) 溶液中加入 n-BuLi(2.2mL， 5.5mmol， 2.5M， 在己烷中 )。3 小时之后， 加入 N， N- 二甲基甲酰胺 (2mL)。然后将溶液温热 至 -60℃。 3 小时之后， 将氯化铵水溶液 (1mL， 10％ ) 加入到反应混合物中， 并用二氯甲烷提 取得到的溶液。用无水硫酸钠干燥收集的有机物， 过滤， 浓缩， 得到粗品醛， N-(2， 4- 二氟苯 基 )-8- 甲酰基 -N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 (800mg)。LCMS(ESI)m/ z： 386。

    [1463] 将 粗 品 醛 N-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-8- 甲 酰 基 -N- 甲 基 -4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -2- 甲 酰 胺 (0.20g， 0.52mmol)、 (3R)- 羟 基 吡 咯 烷 (1.04mmol) 和 乙 酸 (37.4mg， 0.62mmol) 的 1， 2- 二氯乙烷 (15mL) 溶液搅拌 3 小时。加入三乙酰氧基硼氢化钠 (0.50g， 2.3mmol)， 并将得到的悬浮液在室温下搅拌过夜。真空浓缩反应混合物。用制备薄层色谱 和 HPLC 连续纯化， 得到 115bp(25mg)。1H NMR(* 表示微小的旋转异构体峰， 400MHz， CDCl3)， δ： 7.71*(m， 1H)， 7.51(m， 1H)， 7.31-7.38*(m， 3H)， 7.11-7.19(m， 3H)， 6.84-6.93(m， 3H)， 5.09(s， 2H)， 4.52(m， 1H)， 4.45(m， 2H)， 4.33(m， 2H)， 3.44*(s， 3H)， 3.40(s， 3H)， 2.20(m， 1H)， 2.00(m， 1H)。LCMS(ESI)m/z ： 457.2。

    [1464] 实施例 13bp ： N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -8-( 吗啉基甲基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c]

    [1462] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 116bp

    [1465] 按 照 实 施 例 25 和 70 和 一 般 方 法 E， 由 N-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-8- 甲 酰 基 -N- 甲 基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺和吗啉的还原胺化， 得到 116bp。1H NMR(* 表示微小的旋转异构体峰， 400MHz， CDCl3)， δ： 7.69*(m， 1H)， 7.53(m， 1H)， 7.31-7.39*(m， 3H) ， 7.12-7.23(m ， 3H) ， 6.99-7.05*(m ， 2H) ， 6.88-6.93(m ， 2H) ， 6.83(s ， 1H) ， 5.10(s ， 2H) ， 4.23*(m ， 4H) ， 3.82(m ， 4H) ， 3.67*(m ， 4H) ， 3.48*(s ， 3H) ， 3.42(s ， 3H) ， 3.00(m ， 4H) 。 LCMS(ESI)m/z ： 458.2。

    [1466] 实施例 14bp ： N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -8-( 吡咯烷 -1- 基甲基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 117bp

    [1467] 按 照 实 施 例 25 和 70 和 一 般 方 法 E， 由 N-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-8- 甲 酰 基 -N- 甲 基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺和吡咯烷的还原胺化， 得到 117bp。1H NMR(* 表示微小的旋转异构体峰， 400MHz， CDCl3)， δ： 7.65*(m， 1H)， 7.45(m， 1H)， 7.28-7.30*(m， 3H)， 7.04-7.24(m， 3H)， 6.89-6.96*(m， 3H)， 6.80-6.87(m， 3H)， 5.04(s， 2H)， 4.27(m， 2H)， 3.65(m， 2H)， 3.40*(s， 3H)， 3.38(s， 3H)， 2.62*(m， 4H)， 1.96(m， 4H)。LCMS(ESI)m/z ： 441.2

    [1468] 实施例 15bp ： N-(2， 4- 二氟苯基 )-8-(4- 羟基哌啶 -1- 羰基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩 并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 118bp

    [1469] 按 照 实 施 例 15 的 方 法 和 一 般 方 法 C， 2-((2， 4- 二 氟 苯 基 )( 甲 基 ) 氨 基 甲 酰 基 )-4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -8- 甲 酸 与 4- 羟 基 哌 啶 偶 合， 得 到 118bp。1H NMR(400MHz ， DMSO-d 6) ， δ： 7.68(m ， 1H) ， 7.46(m ， 1H) ， 7.21-7.25(m ， 3H) ， 6.93(m ， 1H) ， 6.69(m， 1H)， 5.16(s， 2H)， 3.65(m， 3H)， 3.29(s， 3H)， 3.17(m， 2H)， 1.73(m， 2H)， 1.36(m， 2H)。 LCMS(ESI)m/z ： 485.1

    [1470] 实施例 16bp ： N2-(2， 4- 二氟苯基 )-N2- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2， 8- 二甲酰胺 119bp

    [1471] 按 照 实 施 例 15 的 方 法 和 一 般 方 法 C， 2-((2， 4- 二 氟 苯 基 )( 甲 基 ) 氨 基 甲 酰 基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -8- 甲酸与氯化铵偶合， 得到 119bp。LCMS(ESI)m/z ： 401.1

    [1472] 实施例 17bp ： 8-(4- 乙酰基哌嗪 -1- 基 )-N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩 并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 120bp

    [1473] 按照实施例 70 和一般方法 D， 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 160bp 和 1- 乙酰基哌嗪反应， 得到 120bp。1H NMR(400MHz， CDCl3)δ7.23(m， 1H)， 6.82-6.93(m， 5H)， 5.99(s， 1H)， 5.01(s， 2H)， 3.86(m， 2H)， 3.73(m， 2H)， 3.32(s， 3H)， 3.21(m， 2H)， 3.16(m， 2H)， 2.13(s， 3H)。LCMS(ESI)m/z ： 484.1

    [1474] 实施例 18bp ： 8- 乙酰氨基 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯 并吡喃 -2- 甲酰胺 121bp

    [1475] 按照实施例 70 和一般方法 D， 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 160bp 和乙酰胺反应， 得到 121bp。1H NMR(400MHz， CDCl3) δ6.84-7.31(m， 6H)， 6.76(s， 1H)， 5.05(s， 2H)， 3.40(s， 3H)， 2.16(s， 3H)。LCMS(ESI)m/z ： 414.9

    [1476] 实施例 19bp ： N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -8-(4- 吗啉基哌啶 -1- 基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 127bp

    [1477] 按照实施例 70 和一般方法 D， 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 160bp 和 4-(4- 哌啶基 ) 吗啉反应， 得到 127bp。1H NMR(400MHz， CDCl 3) δ 7.20(m ， 1H) ， 7.05-7.10(m ， 2H) ， 6.84-6.93(m ， 3H) ， 6.74(m ， 1H) ， 5.05(s ， 2H) ， 4.00(m， 4H)， 3.63-3.68(m， 3H)， 3.29-3.50(m， 5H)， 3.18(m， 2H)， 3.05(m， 2H)， 2.47(m， 2H)， 2.21(m， 2H)。LCMS(ESI)m/z ： 526.1

    [1478] 实施例 20bp ： N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -8-(4- 甲基哌嗪 -1- 基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 128bp

    [1479] 按照实施例 70 和一般方法 D， 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 160bp 和 N- 甲基哌嗪反应， 得到 128bp。1H NMR(400MHz， CDCl 3) δ 7.30(m ， 1H) ， 6.94-7.00(m ， 2H) ， 6.85(m ， 1H) ， 6.75-6.82(m ， 2H) ， 6.68(s ， 1H) ， 5.03(s， 2H)， 3.69(m， 2H)， 3.46(m， 2H)， 3.39(s， 3H)， 3.30(m， 2H)， 3.07(m， 2H)， 2.90(s， 3H)。 LCMS(ESI)m/z ： 456.2。

    [1480] 实施例 21bp ： N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -8- 吗啉基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并 吡喃 -2- 甲酰胺 129bp

    [1481] 按照实施例 70 和一般方法 D， 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 1 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 160bp 和吗啉反应， 得到 129bp。 HNMR(400MHz， CDCl3)δ ： 7.27(m， 1H)， 7.11-7.14(m， 2H)， 6.90-6.98(m， 3H)， 6.75(s， 1H)， 5.09(s， 2H)， 4.04(m， 2H)， 3.38(s， 3H)， 3.32(m， 2H)。LCMS(ESI)m/z ： 442.9

    [1482] 实施例 22bp ： N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -8-((4- 甲基哌嗪 -1- 基 ) 甲基 )-4H- 噻 吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 136bp

    [1483] 按照实施例 25 和 70 的方法和一般方法 E， 2-((2， 4- 二氟苯基 )( 甲基 ) 氨基甲酰 基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -8- 甲酸与 1- 甲基哌嗪偶合， 得到 136bp。

    [1484] 实施例 23bp ： N-(2- 氯苯基 )-N， 4， 4- 三甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲 酰胺 140bp

    [1485] 向 2， 4- 二氟苯胺 (0.03936g， 0.2750mmol) 在 1.2M 吡啶 / 二氯甲烷 (0.8333mL) 中 的溶液中加入催化数量的 DMAP， 而后加入 4， 4- 二甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 羰 基氯 (70.2mg， 0.250mmol)。在 N2 氛围中， 在室温下搅拌反应， 用 LC/MS 监控。用二氧化硅 纯化粗品， 得到 38mg 140bp。产率＝理论值的 40％。MS ： (ESI+) ＝ 386

    [1487] 实施例 24bp ： N-(2- 氯苯基 )-N， 4， 4- 三甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲 酰胺 141bp

    [1488] 向 2- 氯 -N- 甲基苯胺 (32.10ul， 0.2750mmol) 在 1.2M 吡啶 / 二氯甲烷 (0.8333mL) 中的溶液中加入少量 DMAP， 而后加入 4， 4- 二甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 羰基

    [1486] 氯 (70.2mg， 0.250mmol)。在 N2 氛围中， 在室温下搅拌反应， 用 LC/MS 监控。用二氧化硅纯 化粗品， 得到 30mg 141bp。产率＝理论值的 31％。MS ： (ESI+) ＝ 385

    [1489] 实施例 25bp ： N-(2- 氯苯基 )-6， 8- 二氟 -N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡 喃 -2- 甲酰胺 142bp

    [1490] 按照实施例 70 的方法和一般方法 B， 由 6， 8- 二氟 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡 喃 -2- 甲酸和 2- 氯 -N- 甲基苯胺制备 142bp。MS ： (ESI+) ＝ 392.1

    [1491] 实施例 26bp ： N2-(2， 4- 二氟苯基 )-N2， N8- 二甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡 喃 -2， 8- 二甲酰胺 152bp

    [1492] 按照 Wannberg 等人 (2003)J.Org.Chem.68 ： 5750-5753 的方法， 在 24 ℃， 向装有 在 四 氢 呋 喃 (1mL) 中 的 8- 溴 -N-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-N- 甲 基 -4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -2- 甲 酰 胺 160bp(0.100g， 0.229mmol， 1 当 量 )、 甲 胺 (0.34mL， 0.68mmol， 3.0 当 量， 2.0M， 在四氢呋喃中 )、 六羰基钼 (60.5mg， 0.229mmol， 1.00 当量 ) 和反式 - 二 (mu- 乙酸 基 ) 二 [O-( 二 -O- 甲苯基膦基 ) 苄基 ] 二钯 (II)(0.15 当量 ) 的微波反应容器中加入 1， 8- 二氮杂双环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (15.4μL， 0.103mmol， 0.450 当量 )。将反应混合物在 150℃微波加热 15 分钟， 并通过硅藻土过滤。将得到的滤液真空浓缩。用快速柱色谱纯化 CDCl3)， δ： 7.62(d， (95 ∶ 5 二氯甲烷 / 甲醇 )， 得到 152bp(58mg， 61％ )。1H NMR(500MHz， J ＝ 2.1Hz， 1H)， 7.50(dd， J ＝ 8.4， 2.2Hz， 1H)， 7.30(m， 1H)， 6.95-6.99(m， 2H)， 6.88(d， J＝ 8.4Hz， 1H)， 6.84(br s， 1H)， 6.08(br s， 1H)， 5.16(s， 2H)， 3.38(s， 3H)， 3.00(d， J ＝ 4.8Hz， 3H)。LCMS(ESI)m/z ： 415.2

    [1493] 实施例 27bp ： N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -8-(4- 甲基哌嗪 -1- 羰基 )-4H- 噻吩 并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 153bp

    [1494] 按照实施例 62， 由 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯 1 并吡喃 -2- 甲酰胺 160bp 和 1- 甲基哌啶， 得到 153bp。 H NMR(500MHz， CDCl3)δ7.29(m， 1H)， 7.26(m， 1H)， 7.18(dd， J ＝ 8.3， 2.0Hz， 1H)， 6.95-6.98(m， 2H)， 6.87(d， J ＝ 8.3Hz， 1H)， 6.86(s， 1H)， 5.14(s， 2H)， 3.65(br s， 4H)， 3.38(s， 3H)， 2.42(br s， 4H)， 2.33(s， 3H)。 LCMS(ESI)m/z ： 484.2。

    [1495] 实 施 例 28bp ： (S)-N-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-8-(3- 羟 基 吡 咯 烷 -1- 羰 基 )-N- 甲 基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 154bp

    [1496] 按照实施例 62， 由 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡 1 喃 -2- 甲酰胺 160bp 和 S-3- 羟基吡咯烷， 得到 154bp。 H NMR(500MHz， DMSO-d6)δ7.68(m， 1H)， 7.47(m， 1H)， 7.38-7.40(m， 2H)， 7.25(m， 1H)， 6.94(d， J ＝ 8.6Hz， 1H)， 6.71(br s， 1H)， 5.18(s， 2H)， 4.95(m， 1H)， 4.27(m， 1H)， 3.20-3.61(m， 3H)， 3.30(s， 3H)， 1.90(m， 1H)， 1.79(m， 1H)。

    [1497] 实 施 例 29bp ： (R)-N-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-8-(3- 羟 基 吡 咯 烷 -1- 羰 基 )-N- 甲 基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 155bp

    [1498] 按照实施例 62， 由 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并 1 吡喃 -2- 甲酰胺 160bp 和 R-3- 羟基吡咯烷得到 155bp。 H NMR(500MHz， DMSO-d6)δ7.68(m， 1H)， 7.47(m， 1H)， 7.38-7.40(m， 2H)， 7.25(m， 1H)， 6.94(d， J ＝ 8.6Hz， 1H)， 6.71(br s， 1H)， 5.18(s， 2H)， 4.95(m， 1H)， 4.27(m， 1H)， 3.20-3.61(m， 3H)， 3.30(s， 3H)， 1.90(m， 1H)，1.79(m， 1H)。LCMS(ESI)m/z ： 471.2。

    [1499] 实施例 30bp ： N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -8-( 吗啉 -4- 羰基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 158bp

    [1500] 按照实施例 62， 由 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并 1 吡喃 -2- 甲酰胺 160bp 和吗啉得到 158bp。H NMR(500MHz， DMSO-d6)δ7.68(m， 1H)， 7.47(m， 1H)， 7.23-7.30(m， 2H)， 6.96(d， J ＝ 8.3Hz， 1H)， 6.71(br s， 1H)， 5.17(s， 2H)， 3.59(m， 4H)， 3.48(m， 4H)， 3.30(s， 3H)。LCMS(ESI)m/z ： 471.0。

    [1501] 实施例 31bp ： N-(2， 4- 二氟苯基 )-8-( 羟甲基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯 并吡喃 -2- 甲酰胺 159bp

    [1502] 在 -78 ℃， 向 8- 溴 -N-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-N- 甲 基 -4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -2- 甲酰胺 160bp(19.6mg， 0.0449mmol， 1 当量 ) 的四氢呋喃 (1mL) 溶液中逐滴加入正丁 基锂 (54μl， 0.14mmol， 3.0 当量， 2.5M， 在己烷中 )。15 分钟之后， 加入 N， N- 二甲基甲酰 胺 (35μL， 0.45mmol， 10 当量 )。40 分钟之后， 将反应混合物温热至 24℃， 保持 50 分钟。将 饱和氯化铵水溶液 (5mL) 加入到反应混合物中， 并将得到的溶液用乙酸乙酯 (3x3mL) 提取。 用无水硫酸钠干燥收集的有机物， 过滤， 浓缩， 得到相应的醛， N-(2， 4- 二氟苯基 )-8- 甲酰 基 -N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺。LCMS(ESI)m/z ： 386。

    [1503] 向冰冷却的 N-(2， 4- 二氟苯基 )-8- 甲酰基 -N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡 喃 -2- 甲酰胺的乙醇 (1mL) 溶液中加入硼氢化钠 (10mg， 0.3mmol， 6 当量 )。3 小时之后， 用饱和氯化铵水溶液 (3mL) 淬灭过量的硼氢化钠。真空除去乙醇， 并将得到的水溶液用乙 酸乙酯 (3x3mL) 提取。用无水硫酸钠干燥收集的有机物， 过滤， 浓缩。用快速柱色谱纯化 1 (3 ∶ 2 己烷 / 乙酸乙酯 )， 提供 159bp(5.2mg， 30％ )。H NMR(500MHz， CDCl3)δ7.26(m， 1H)， 7.15(m， 1H)， 7.05(m， 1H)， 6.86-6.93(m， 4H)， 5.25(s， 2H)， 4.55(d， J ＝ 6.7Hz， 2H)， 4.06(m， 1H)， 3.40(s， 3H)。LCMS(ESI)m/z ： 388.1。

    [1504] 实施例 32bp ： 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡 喃 -2- 甲酰胺 160bp

    [1505] 在 24℃， 向粗品 8- 溴 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 羰基氯 4( ～ 4.82mmol)、 N- 甲基 -2， 4- 二氟苯胺 (1.03g， 7.23mmol， 1.50 当量 ) 和三乙胺 (3.36mL， 24.1mmol， 5.00 当量 ) 的二氯甲烷 (46mL) 溶液中加入 N， N- 二甲基 -4- 氨基吡啶 (118mg， 0.964mmol， 0.200 当量 )。在加入 N， N- 二甲基 -4- 氨基吡啶的 5 分钟之内， 反应混合物变成黄色 / 橙黄色悬 浮液。22 小时后， 用二氯甲烷 (50mL) 稀释反应混合物， 用饱和碳酸氢钠水溶液 (30mL) 洗 涤得到的溶液。用无水硫酸钠干燥收集的有机物， 过滤， 浓缩。用快速柱色谱纯化 (5 ∶ 2 己烷 / 乙酸乙酯 )， 提供 160bp 黄色固体 (1.59g， 76％ )。1H NMR(500MHz， CDCl3)δ7.30(m， 1H)， 7.26(m， 1H)， 7.23(dd， J ＝ 8.6， 2.4， 1H)， 6.95-7.00(m， 2H)， 6.81(s， 1H)， 6.76(d， J＝ 8.6Hz， 1H)， 5.10(s， 2H)， 3.39(s， 3H)。LCMS(ESI)m/z ： 436。

    [1506] 或者， 可以通过用甲基碘和氢化钠将 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 5 甲基化来制备 160bp。

    [1507] 实施例 33bp ： 8- 氰基 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡 喃 -2- 甲酰胺 161bp

    [1508] 将 8- 溴 -N-(2， 4- 二氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 160bp(33.7mg， 0.0772mmol， 1 当量 ) 和氰化铜 (22mg， 0.24mmol， 3.2 当量 ) 的 N， N- 二甲 基甲酰胺 (1mL) 溶液在 250℃微波加热 30 分钟。用 9 ∶ 1 饱和氯化铵水溶液 / 氢氧化铵 (10mL) 稀释反应混合物。用二氯甲烷 (3x5mL) 提取得到的混合物。用无水硫酸钠干燥收集 的有机物， 过滤， 浓缩。用快速柱色谱纯化 (11 ∶ 4/ 己烷∶乙酸乙酯 )， 提供 161bp 白色固 1 体 (23.4mg， 79％ )。 H NMR(500MHz， CDCl3)δ7.40-7.42(m， 2H)， 7.32(m， 1H)， 6.99(t， J＝ 8.1Hz， 1H)， 6.92(m， 1H)， 6.88(s， 1H)， 5.23(s， 2H)， 3.40(s， 3H)。LCMS(ESI)m/z ： 383.1

    [1509] 实施例 34bp ： N-(2- 溴苯基 )-8- 氟 -N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲 酰胺 162bp

    [1510] 向 装 入 8- 氟 -4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -2- 羰 基 氯 (0.05g， 0.2mmol) 和 2- 溴 -N- 甲基苯胺 (0.044g， 0.24mmol) 的反应管瓶中加入催化数量的 DMAP。加入吡啶的 二氯甲烷 ( 溶液 )(1.2M， 0.66mL)， 并在室温下搅拌反应， 用 LC/MS 监控。在二小时左右 (in a couple hours) 反应完成。在含水后处理之后， 将反应混合物真空浓缩， 接纳在 DMF 中 (100mg/ml)， 用制备 RP-HPLC 纯化， 得到 162bp。 产率＝理论值的 24％。 MS ： (ESI+) ＝ 419.5

    [1511] 实施例 35bp ： N-(2， 4- 二氟苯基 )-8- 氟 -N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡 喃 -2- 甲酰胺 163bp

    [1512] 向装入 8- 氟 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 羰基氯 (0.120g， 0.447mmol) 和 2， 4- 二氟苯胺 (0.0959g， 0.670mmol) 的反应管瓶中加入催化数量的 DMAP。 加入吡啶的二氯 甲烷 ( 溶液 )(1.2M， 1.49mL)。在室温下搅拌反应， 用 LC/MS 监控。在二小时左右反应完成。 在含水后处理之后， 将反应真空浓缩， 接纳在 DMF 中 (100mg/ml 的浓度 )， 用制备 RP-HPLC 纯 化， 得到 163bp。产率＝理论值的 31％。MS ： (ESI+) ＝ 376.4

    [1513] 实施例 36bp ： N-(2.4- 二氯苯基 )-8- 氟 -N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡 喃 -2- 甲酰胺 164bp

    [1514] 按照实施例 75， 由 8- 氟 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 羰基氯和 2， 4- 二 氯 -N- 甲基苯胺得到 164bp。MS ： (ESI+) ＝ 408.0

    [1515] 实施例 37bp ： N-(2- 氯苯基 )-8- 氟 -N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲 酰胺 165bp

    [1516] 向 装 入 8- 氟 -4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -2- 羰 基 氯 (0.05g， 0.2mmol) 和 2- 氯 -N- 甲基苯胺 (0.034g， 0.24mmol) 的反应管瓶中加入催化数量的 DMAP。加入吡啶的 二氯甲烷 ( 溶液 )(1.2M， 0.66mL)， 并在室温下搅拌反应， 用 LC/MS 监控。 在二小时左右反应 完成。在含水后处理之后， 将反应真空浓缩， 接纳在 DMF 中 (100mg/ml)， 用制备 RP-HPLC 纯 化， 得到 165bp。产率＝理论值的 28％。MS ： (ESI+) ＝ 374.8

    [1517] 实施例 38bp ： N-(2- 氯 -5- 氰基苯基 )-8- 氟 -N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并 吡喃 -2- 甲酰胺 166bp

    [1518] 向 装 入 8- 氟 -4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -2- 羰 基 氯 (0.08g， 0.3mmol) 和 3- 氯 -2- 氨基苄腈 (0.054g， 0.36mmol) 的反应管瓶中加入催化数量的 DMAP。加入吡啶的 二氯甲烷 ( 溶液 )(1.2M， 1mL)， 在室温下搅拌反应， 用 LC/MS 监控。 在二小时左右反应完成。 在含水处理之后， 真空浓缩反应混合物， 接纳在 DMF 中， 在室温下用氢化钠 (0.03g， 1mmol) 处理几分钟。而后加入甲基碘 (0.06g， 0.4mmol)100mg/mL。在室温下搅拌反应混合物几小 时， 然后真空浓缩， 第二次含水后处理之后， 用制备 RP-HPLC 纯化， 得到 166bp。产率＝理论 值的 32％。MS ： (ESI+) ＝ 385.8

    [1520] 实 施 例 39bp ： N-(2， 4- 二 氟 苯 基 )-N， 8- 二 甲 基 -4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -2- 甲酰胺 167bp

    [1521] 按照实施例 3， 将 8- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酸转变为酰基氯， 然后在 24℃用 N- 甲基 -2， 4- 二氟苯胺 (1.5 当量 ) 和三乙胺 (5 当量 )( 在二氯甲烷中 ) 和 N， N- 二甲基 -4- 氨基吡啶 (0.2 当量 ) 处理。大约 24 小时后， 用二氯甲烷稀释反应混合物， 用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤得到的溶液。用无水硫酸钠干燥收集的有机物， 过滤， 浓缩。用 1 快速柱色谱纯化 (5 ∶ 2 己烷 / 乙酸乙酯 )， 提供 167bp。 H NMR(500MHz， CDCl3)δ7.29(m， 1H)， 6.95-6.98(m， 4H)， 6.78(d， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 5.04(s， 2H)， 3.39(s， 3H)， 2.27(s， 3H)。 LCMS(ESI)m/z ： 372.1。

    [1523] 实施例 40bp ： N-(2- 氯苯基 )-N， 8- 二甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲 酰胺 168bp

    [1524] 按照实施例 3， 将 8- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酸转变为酰基氯， 然后在 24℃用 N- 甲基 -2- 氯苯胺 (1.5 当量 ) 和三乙胺 (5 当量 )( 在二氯甲烷中 ) 和 N， N- 二甲基 -4- 氨基吡啶 (0.2 当量 ) 处理。大约 24 小时后， 用二氯甲烷稀释反应混合物， 用饱和碳酸氢钠水溶液洗涤得到的溶液。用无水硫酸钠干燥收集的有机物， 过滤， 浓缩。用 1 快速柱色谱纯化 (5 ∶ 2 己烷 / 乙酸乙酯 )， 提供 168bp。 H(500MHz， CDCl3)δ7.53(d， J＝ 7.7Hz， 1H)， 7.35-7.41(m， 3H)， 6.97(s， 1H)， 6.94(d， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 6.76(d， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 6.56(s， 1H)， 5.00(s， 2H)， 3.39(s， 3H)， 2.26(s， 3H)。LCMS(ESI)m/z ： 370.1

    [1525] 实施例 41bp ： N-(2- 氟苯基 )-N， 8- 二甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲 酰胺 169bp

    [1526] 按照实施例 3， 将 8- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酸转变为酰基氯， 然后在 24℃用 N- 甲基 -2- 氟苯胺 (1.5 当量 ) 和三乙胺 (5 当量 )( 在二氯甲烷中 ) 和 N， N- 二甲基 -4- 氨基吡啶 (0.2 当量 ) 处理。大约 24 小时后， 用二氯甲烷稀释反应混合物， 用 饱和碳酸氢钠水溶液洗涤得到的溶液。用无水硫酸钠干燥收集的有机物， 过滤， 浓缩。用快 1 速柱色谱纯化 (5 ∶ 2 己烷 / 乙酸乙酯 )， 提供 169bp。H NMR(500MHz， CDCl3)δ7.40(m， 1H)，

    [1522] 7.31(m， 1H)， 7.18-7.22(m， 2H)， 6.80(s， 1H)， 6.94(d， J ＝ 8.3Hz， 1H)， 6.77(d， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 6.60(s， 1H)， 5.00(s， 2H)， 3.42(s， 3H)， 2.26(s， 3H)。LCMS(ESI)m/z ： 354.1

    [1527] 实施例 42bp ： (8- 氟 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 基 )( 吗啉基 ) 甲酮 170bp

    [1528] 向吗啉的 DCE 冷却溶液 ( 冰 / 水 ) 中慢慢地逐滴加入 2 当量的二甲基氯化铝。搅 拌反应 30 分钟以上， 直到达到环境温度为止。接下来再次冷却 ( 冰 / 水 ) 反应， 并以固体、 分批方式加入 8- 氟 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酸酯。将反应平衡至环境温度， 用 LC/MS 监控。用酒石酸钠、 酒石酸钾的水溶液 (20％ wt/wt) 淬灭完成的反应。用 EtOAc 提取该混合物， 用盐水洗涤有机物， 干燥 (MgSO4)。真空浓缩干燥的有机物， 得到残余物。该 残余物不溶于 DMF 中， 用真空抽滤收集 170bp 白色固体， 产率＝理论值的 40％。MS ： (ESI+) ＝ 320.5

    [1529] 实 施 例 43bp ： 8- 氟 -N- 甲 基 -N-( 吡 啶 -2- 基 )-4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -2- 甲酰胺 171bp

    [1530] 向 2- 氟苯胺的 DCE 冷却溶液 ( 冰 / 水 ) 中慢慢地逐滴加入 2 当量的二甲基氯化 铝。然后搅拌反应 30 分钟以上， 直到达到环境温度为止。接下来再次冷却 ( 冰 / 水 ) 反应， 并以固体、 分批方式加入 8- 氟 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酸乙酯。将反应平衡 至环境温度， 用 LC/MS 监控。用酒石酸钠、 酒石酸钾的水溶液 (20％ wt/wt) 淬灭反应。用 EtOAc 提取该混合物， 用盐水洗涤有机物， 干燥 (MgSO4)。真空浓缩干燥的有机物， 得到残余 物。将该残余物接纳在最小量的 DMF 中， 过滤， 用制备 RP-HPLC 纯化， 得到 98mg 171bp TFA 盐。产率＝理论值的 40％。MS ： (ESI+) ＝ 341.4

    [1532] 实施例 44bp ： 8- 氟 -N-(2- 氟苯基 )-N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲 酰胺 172bp

    [1531] 将 N-(2- 氟 苯 基 )-7- 氟 -4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -2- 甲 酰 胺 (0.200g， 0.582mmol) 接纳在二氯甲烷 (DCM) 中， 并在氮气氛围 (N2) 中放置。加入固体碳酸铯， 并搅 拌几分钟成为溶液。将此溶液用 ( 冰 / 水 ) 冷却， 并慢慢地逐滴加入甲基碘 (MeI)。立即除去冷却浴， 用 LC/MS 监控反应的起始原料的损耗。用 EtOAc 稀释完成的反应， 用水 (x 2) 洗 涤有机相， 而后用盐水 (x 1) 洗涤， 然后干燥 (MgSO4)。真空浓缩干燥的有机相， 并将得到的 残余物接纳在 DMF 中 ( 浓度 100mg/mL)， 用制备 RP-HPLC 纯化， 得到 172bp。MS ： 产率＝理论 值的 25％。(ESI+) ＝ 358.4

    [1535] 实施例 45bzOH ： N-(2- 氯苯基 )-4- 羟基 -N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1536] -2- 甲酰胺 191bzOH -2- 甲酰胺 193bzO(38mg， 0.1mmol) 的 2mL 甲醇溶液中。将硼氢化钠 (8mg， 0.2mmol) 加入到 N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4- 氧代 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂搅拌混合物 30 分钟， 倒入 4ml 水中， 并用 3ml 乙酸乙酯提取。用水、 盐水洗涤乙酸乙酯层， 用硫酸镁干燥。用正相柱色谱纯化粗品， 使用二氯甲烷 / 乙酸乙酯流动相 ( 乙酸乙酯梯度 0-20％ )， 得到 191bzOH(0.022g， 57％ )。MS ： (ESI+)MH+ ＝ 386.1

    [1537] 实施例 46bp ： N-(2- 氯苯基 )-3- 氟 -N- 甲基 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲 酰胺 192bp

    [1538] 在 -78 ℃， 向 4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -2- 甲 酸 (1.65g， 7.10mmol)( 在 THF(70mL) 中 ) 加入 1.5M 叔丁基锂的戊烷溶液 (15mL)。 在 -78℃将得到的溶液搅拌 1 小时。 加入 N- 氟 -N-( 苯磺酰 ) 苯磺酰胺 (7.2g， 23mmol)， 并用 2 小时将反应温热至室温。通过加 入 1M HCl( 达到 pH3) 来猝灭反应。将水层用 CH2Cl2 提取。用 Na2SO4 干燥合并的有机物， 过 滤， 真空浓缩， 得到 3- 氟 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酸， 其包含小于 40％的 4H- 噻 吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酸， 其不用纯化就可以在下一步使用 (1.0g)。 MS(Q1)249(M)+

    [1539] 向 3- 氟 -4H- 噻 吩 并 [3， 2-c] 苯 并 吡 喃 -2- 甲 酸 (1.0g， ＞ 60 ％ 纯 度 )( 在 CH2Cl2(17mL) 中 ) 加入亚硫酰氯 (0.6mL)， 而后加入几滴 DMF。将反应加热至回流， 保持几 小时。真空浓缩粗品反应混合物。向残余物中加入 CH2Cl2(50mL)、 2- 氯苯胺 (1.1mL) 和 催化数量的 4- 二甲基氨基吡啶。接下来， 吡啶 (5mL)， 并在室温下搅拌反应。4 小时之后， 真空浓缩反应， 用硅胶色谱部分地纯化 ( 己烷 / 乙酸乙酯作为洗脱液 )， 提供 N-(2- 氯苯 基 )-3- 氟 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺以及未鉴定的副产物。 MS(Q1)360(M)+

    [1542] 向 N-(2- 氯苯基 )-3- 氟 -4H- 噻吩并 [3， 2-c] 苯并吡喃 -2- 甲酰胺 ( 在 DMF 中 )

    [1541] 加入氢化钠 (0.16g)， 然后加入甲基碘 (0.37mL)。将得到的溶液在室温下搅拌 45 分钟。通 过倾倒入冰水中来猝灭反应。用 EtOAc 提取水层。将合并的有机物用盐水洗涤， 用 Na2SO4 干燥， 过滤， 真空浓缩。用硅胶色谱部分纯化 (CH2Cl2/EtOAc) 之后， 用反相 HPLC 纯化产物， 得到 192bp(18mg)。MS(Q1)374(M)+

    [1543] 实施例 47bzO ： N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4- 氧代 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1544] -2- 甲酰胺 193bzO

    [1545] 将 N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺、 N- 溴代琥珀酰亚胺 (157mg， 0.88mmol) 和过氧苯甲酰 (2mg， 0.008mmol) 在 90℃加热 6 小时。 过滤混合物， 蒸干溶剂， 并将残余物在 10ml 乙酸乙酯和 20ml 水之间分配。 用水、 盐水 洗涤有机层， 用硫酸镁干燥。用正相柱色谱纯化粗品， 使用二氯甲烷 - 乙酸乙酯混合物 ( 乙 酸乙酯梯度 0-20％ )， 得到 0.16g 4， 4- 二溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂

    [1546] -2- 甲酰胺 (76％ )。MS ： (ESI+)MH+ ＝ 525.9将 4， 4- 二溴 -N-(2- 氯苯基 )-N- 甲基 -4， 5- 二氢苯并 [b] 噻吩并 [2， 3-d] 氧杂-2- 甲酰胺 (0.16g， 0.3mmol) 和乙酸银 (0.15g， 0.9mmol) 在甲苯中的混合物在 60℃加热 14 小时。过滤混合物， 蒸干。将残余物溶于 10ml 甲醇中， 并加入 1ml 0.5％氢氧化钠水溶液。 搅拌混合物 10 分钟， 并通过加入 1N 盐酸水溶液进行中和。真空蒸发溶剂， 用正相柱色谱纯 化残余物， 使用二氯甲烷 / 乙酸乙酯流动相 ( 乙酸乙酯梯度 0-20％ )， 得到 193bzO(0.064g， 42％ )。MS ： (ESI+)MH+ ＝ 384.1

    [1547] 上述说明书只是举例说明本发明的原理。进一步的， 由于许多的变体和变化对本 领域技术人员是显而易见的， 因此本发明不局限于上述的确切实施例。 相应地， 可以认为所 有合适的变体和等效内容在下述权利要求所定义的本发明的范围之内。

    [1548] 当在该说明书中和下面的权利要求中使用时， 单词 “包含” 和 “包括” ( “comprise” 、 “comprising” ， “include” ， “including” 和 “includes” ) 意欲具体说明存在所述的特征、 整 数、 组分或步骤， 并不妨碍存在或增加一个或多个其它特征、 整数 (integers)、 组分、 步骤或 其组合。