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用于治疗病毒感染的鸟苷核苷类化合物的磷酰胺酯衍生物
    相关申请的交叉引用
     本申请权利要求了提交于 2009 年 6 月 6 日的美国临时申请第 61/185,426 号和提 交于 2009 年 1 月 9 日的美国临时申请第 61/143,527 号的优先权， 通过引述上述申请都合 并于本文中。
     发明领域
     该申请涉及新的核苷磷酰胺酯及其作为治疗病毒性疾病的药物的使用方法。这 类化合物是 RNA 依赖的 RNA 病毒复制的抑制剂， 具体地， 丙型肝炎病毒 NS5B 聚合酶的抑制 剂。作为丙型肝炎病毒复制的抑制剂， 这种化合物可有效治疗哺乳动物体内丙型肝炎病毒 感染。
     发明背景
     丙型肝炎病毒是影响动物和人类的 RNA 病毒的黄病毒家族成员之一。基因组是一 种单一 9.6 千碱基的 RNA 链， 并且由一个开放阅读框组成， 这个开放阅读框编码大约 3000 个氨基酸的多聚蛋白， 两侧 5′端和 3′端非翻译区 (5′ - 和 3′ -UTR)。多聚蛋白起到前 躯体的作用， 至少 10 个独立病毒蛋白是复制和组合子代病毒颗粒的关键。
     丙型肝炎病毒 (HCV) 感染是导致慢性肝病如肝硬化、 肝细胞癌的主要健康问题， 相当多的感染个体， 估计为世界人口的 2-15％。 根据美国疾病控制中心报告， 单美国就估有 计 450 万受感染人群。根据世界卫生组织， 全世界有 2 亿以上感染个体， 每年至少 3-4 百万 人被感染。一旦感染， 约 20％的人清除掉病毒， 而其余的人在其今后都携带丙型肝炎病毒。
     慢性感染个体的 10-20％最终发展成肝损伤肝硬化或肝癌。病毒疾病通过血液或 血制品、 污染针头、 或者性肠胃外传播， 以及通过受感染母亲或携带者母亲直接传播给其后 代。
     目前， 慢性丙型肝炎病毒 (HCV) 的标准治疗法是干扰素 α(IFN-α) 联合利巴韦 林， 需要至少六个 (6) 月的治疗。然而， 使用干扰素治疗丙型肝炎病毒 (HCV) 频繁发生相关 联的不良副作用如疲劳、 发热、 畏寒、 头痛、 肌痛、 关节痛、 轻度脱发、 精神影响、 病症相关的 自身免疫现象， 以及病症相关的甲状腺功能障碍。
     利巴韦林， 肌苷 5′ - 单磷酸脱氢酶 (IMPDH) 抑制剂， 提高了 IFN-α 在治疗丙型肝 炎病毒 (HCV) 的功效。尽管导入利巴韦林， 采用干扰素 -α 和利巴韦林的当前标准治疗法， 50％以上的患者没有消除病毒。目前为止， 慢性丙型肝炎的标准治疗法已经改变为联合聚 乙二醇化的干扰素 -α+ 利巴韦林。然而， 仍有一定数量的患者有显著的副作用， 主要与利 巴韦林有关。
     按照在当前推荐剂量治疗的 10％ -20％的患者中， 利巴韦林导致显著溶血， 该药 物具有致畸作用和胚胎毒性。即使最近进行改进， 相当部分的患者没有响应病毒载量持续 降低， 明显需要更有效的丙型肝炎病毒 (HCV) 感染的抗病毒疗法。
     多种其他途径被用于抗击病毒。 它们包括， 举例来说， 反义寡核苷酸或核酶用于抑 制丙型肝炎病毒 (HCV) 复制。此外， 低分子量化合物， 直接抑制丙型肝炎病毒 (HCV) 蛋白并且干扰病毒复制， 被视为控制丙型肝炎病毒 (HCV) 具有吸引力的解决方案。病毒靶之间， NS3/4A 蛋白酶 / 解旋酶和 NS5B RNA- 依赖的 RNA 聚合酶被认为最有前途的病毒靶点的新药 物。
     许 多 专 利 公 开 并 权 利 要 求 了 涉 及 CV NS5B 抑 制 剂 的 发 明。 举 例 来 说， WO2006/046039、 WO2006/046030 和 WO 2006/029912， 通过引述合并于本文中， 涉及四环吲 哚化合物及其制药用盐， 用于治疗或预防丙型肝炎病毒感染。 WO 2005/080399， 通过引述合 并于本文中， 涉及稠合杂四环化合物， 其制药用盐， 在辅助治疗丙型肝炎病毒 (HCV) 中作为 有效的聚合酶抑制剂。WO 2003007945， 通过引述合并于本文中， 涉及 HCVNS5B 抑制剂。进 一步， WO 2003010140， 通过引述合并于本文中， 涉及 RNA- 依赖的 RNA 聚合酶的特异性抑制 剂， 尤其是黄病毒 (flavivirida) 科家族里的病毒聚合酶， 更尤其是丙型肝炎聚合酶。WO 200204425， 通过引述合并于本文中， 涉及 RNA- 依赖的 RNA 聚合酶的特异性抑制剂， 尤其 是黄病毒 (flavivirida) 科家族里的病毒聚合酶， 更尤其是丙型肝炎的 NS5B 聚合酶。WO 200147883， 通过引述合并于本文中， 涉及特异性稠环化合物或者其类似化合物或者其制药 用盐。 这种化合物及其盐具有抗 -HCV( 丙型肝炎病毒 ) 活性， 由于其抗丙型肝炎病毒 (HCV) 聚合酶的抑制活性， 因此可用作治疗或预防丙型肝炎的有效药剂。 然而， 鉴于世界流行的丙型肝炎病毒和黄病毒科家族病毒的其它成员， 进一步由 于有限的治疗方案， 强烈需要新的有效药物用于治疗由这些病毒引发的感染。
     发明内容 本发明关注的是有效治疗至少部分由黄病毒科家族中的一种病毒介导的哺乳动 物体内病毒感染的新型化合物。 根据一些实施方案， 本发明提供了具有下列结构的通式 (I) 的新型化合物 ：
     其中 Ar 选自 苯基、 萘基、
     其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苄基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自氢、 苯基、 芳基、 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢、 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基、 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基、 任选由一个或多个卤素、
     C1-C6 烷基、 或者
     C1-C6 烷氧基取代的苯基 ；
     R6 选自
     C1-C10 烷基、
     C3-C8 环烷基、
     C3-C8 环烷基 - 烷基 -、
     任选由 C1-C6 烷基、
     C1-C6 烷氧基、 和
     卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、
     茚满基和
     杂环烷基 ；
     以及其制药用盐。
     根据其他实施方案， 本发明延伸至一种药物组合物， 其包括通式 I 的一种或多种 化合物和一种药物用载体、 赋形剂或稀释剂。 药物用载体、 赋形剂或稀释剂可能是纯净的无 菌水、 磷酸盐缓冲生理盐水或葡萄糖水溶液。此外， 通式 I 所反映的化合物包括其多晶型。
     还提供了用于治疗哺乳动物病毒感染的方法， 哺乳动物至少部分由黄病毒家族中 的一种病毒介导， 其中即时方法包括对已确诊为上述病毒感染的哺乳动物给药包括通式 I 化合物的一种药物组合物。
     还提供了用于治疗人类或动物患者病毒感染的方法， 人或动物患者至少部分由黄 病毒家族中的一种病毒介导， 其中即时方法包括对已确诊为病毒感染的人或动物患者给药 包括通式 I 化合物的一种药物组合物。
     在一个实施方案中， 该病毒是丙型肝炎病毒 (HCV)。本方法进一步延伸至联合治 疗， 包括施药治疗有效量的抗丙型肝炎病毒的一种或多种药物。这种抗丙型肝炎病毒的有 效药物可能包括单独给药或与病毒唑或 levovirin 联合给药的干扰素 -α 或聚乙二醇化干 扰素 -α。
     如下所述， 提供了根据本发明的其他化合物， 预期这些另外的化合物在黄病毒家 族感染的治疗方法中也有效， 包括由丙型肝炎病毒引起的感染。 方法、 药物组合物和联合治 疗， 如本文中提到公式 I 那些化合物， 也与本文提到的附加化合物相关。 具体实施方式
     本发明涉及化学化合物、 其制备方法和在治疗病毒感染的使用方法， 尤其是治疗 哺乳动物病毒感染。尤其是， 虽然不完全是， 本发明涉及作为有效抗丙型肝炎病毒 (HCV) 药 物的化学化合物。
     具体地讲， 本发明描述了某些核苷类芳基磷酰胺酯， 其合成方法， 及其作为 RNA 依 赖的 RNA 病毒聚合酶抑制剂的前药的应用， 尤其作为丙型肝炎病毒 (HCV)NS5-B 聚合酶抑制 剂的前药的应用， 作为丙型肝炎病毒复制抑制剂的前药的应用， 用于治疗丙型肝炎感染。
     本发明的目的是提供有效治疗哺乳动物病毒感染的新型化合物， 具体用于治疗哺 乳动物丙型肝炎病毒感染。根据本发明的一个实施方案， 提供了一种通式 (I) 化合物 ：
     其中 Ar 选自 苯基、 萘基、
     其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的一些基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苯甲基、 取代的苯甲基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 - 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自氢、苯基、 芳基、 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢， 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 (C1-C6) 烷基、 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第二个实施方案， 提供了一种上述通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 萘基、
     任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苄基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自氢、 苯基、 芳基， 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢， 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第三个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自苯基、 萘基、
     其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 为氧 ； R1 选自 C1-C6 烷基、 苯甲基、 取代的苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自 氢、 苯基、 芳基， 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢、 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基、 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者C1-C6 烷氧基取代的苄基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第四个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 苯基、 萘基、
     其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基， R2 选自 氢、苯基、 芳基、 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢， 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基， 苯基， 其任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -， 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第五个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 苯基、 萘基、
     其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苄基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 为氢， R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢， 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、 茚满基和杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第六个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 苯基、 萘基、
     其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苄基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自 氢、 苯基、 芳基， 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 为羟基 ； R4 和 R5 独立选自氢、 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第七个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 苯基、 萘基、
     其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苄基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自 氢、 苯基、 芳基、 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢、 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基、 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第八个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 苯基、萘基、
     任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； R1 选自 C1-C6 烷基、 苄基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自 氢、 苯基、 芳基、 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 选自 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基、 和 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ；R5 为氢 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -， 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第九个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 苯基， 萘基，
     任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苯基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和C1-C6 烷基取代 ； R2 选自 氢、 苯基、 芳基， 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢、 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基、 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基 ； 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 苯基 (C1-C6) 烷基 -， 任选由卤素取代、 和 杂环烷基取代 ； 以及其制药用盐。 每种情况下， 上述化合物具有多晶型和磷非对映异构体。 根据本发明， 提供了上述化合物的下列具体实施方案 ：
     根据本发明， 提供了上述化合物的下列具体实施方案 ：
     2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟 基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸苯甲酯 ；
     1(S)- 苯 乙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 甲基 2-(6-((((2R， -3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )((S)-1-( 新戊氧基 )-1- 氧丙基 -2- 基氨基 ) 磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙酸酯 ；
     2， 4- 二 氟 苄 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟 基 -4- 甲 基 四 氢 呋 喃 -2- 基 ) 甲 氧 基 ( 萘 -1- 氧 基 ) 磷 酰 化 氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4-( 甲硫基 ) 丁酸酯 ；
     (2S)- 苄基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯 酯；
     2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 乙 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     1(S)- 苯 乙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟 基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸苯甲酯 ；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     1(S)- 苯 乙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 丙基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-3， 3- 二 甲 基 丁 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 异丁基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (S)-P 2， 2- 二甲基丙基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (R)-P 2， 2- 二甲基丙基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 异丙基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 环戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 环己基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；(2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 - 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(6-((S)-1- 甲氧基 -1- 氧 丙基 -2- 基 ) 萘 -2- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 甲基 2-(6-((((2R， -3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )((S)-1-( 新戊氧基 )-1- 氧丙基 -2- 基氨基 ) 磷酰氧基 ) 萘 -2- 基氧基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 甲基 2-(6-((((2R， -3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )((S)-1- 氧代 -1-( 四氢 -2H- 吡喃 -4- 氧基 ) 丙烷 -2- 基氨基 ) 磷酰氧基 ) 萘 -2- 基氧基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， -3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 苯氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(6-((S)-1- 甲氧基 -1- 氧丙基 -2- 基 ) 萘 -2- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸 酯；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苯 甲 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；(2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸 酯；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -8- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸 酯；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R))-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(2- 甲基萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲 基丁酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(3- 叔丁基萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲 基丁酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     苄基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     2， 4- 二 氟 苯 甲 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)-((S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟 基 -4- 甲 基 四 氢 呋 喃 -2- 基 ) 甲 氧 基 )( 萘 -1- 基 氧 基 ) 磷 酰 胺 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)-((S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 甲基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 环丙甲基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸 酯；
     (2S)- 环丁酯 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸环戊酯 ；
     2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟 基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸环己酯 ；
     (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 苄基 2-(((((2R， 3R， 4R-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯酯 ；
     (2S)- 甲基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯酯 ；
     (2S)- 丙基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯 酯；
     (2S)- 环己基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯酯 ；
     (2S)- 苄基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苯 甲 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 乙 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2-((((2R， -3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 乙 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 乙 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 异丙基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 乙 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6-( 甲氨基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6-( 甲 氨 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6-( 甲 氨 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 苄 氨 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6-( 苯 乙 基 氨 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6-( 甲 硫 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6-( 甲硫基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6-( 甲 硫 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 苄基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-4- 羟基 -4- 甲 基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-4- 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙 酸酯 ；
     (2S)- 新 戊 基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-4- 羟 基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 环 己 基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-4- 羟 基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     苄基 (2S)- 苄基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-4- 羟 基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘基 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ； 和
     (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2-(4- 氟 苄 基 氨 基 )-6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     再次， 前述特定化合物的每种情况下， 假定本发明包括多晶型和磷非对映异构体。
     在本发明的另一个实施方案中， 提供了下列另一个化合物， 假定在如本文提到的 本发明所述治疗方法中有效 ：
     和其制药用盐。 上述通式 II-VI 的化合物， 也被认为是根据本发明具有抗病毒活性的新型化合物， 因此在本发明的抗病毒方法中是有效的， 还可作为如上面所述通式 (I) 化合物制备的 有效中间体。这些化合物还包括其多晶型和非对映异构体， 可按照本文中阐述的相同方式 制成药物组合物。
     在本发明的进一步实施方案中， 另一个化合物提供如下 ：
     通式 (XL) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构 ：
     其中 X、 R1、 R2、 R3、 和 R6 如通式 (I) 所描述的。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XL) 化合物， 其中 ： 6 R 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 X、 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。下列通式 (XLI) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构 ：
     (XLI) 其中 Ar、 X、 R1、 R2、 R3、 和 R6 如上文通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLI) 化合物， 其中 ： Ar 是选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基、 喹啉 -8- 基， 和 苯基 ； 并且 X、 R1、 R2、 R3、 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLI) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 是选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 )- 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基， 2- 萘基， 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基、 喹啉 -8- 基， 和 苯基 ； R6 选自 苄基、(S)-1-(2- 溴 )- 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 X、 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLII) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构 ：
     其中 Ar、 X、 R1、 R2、 R3、 和 R6 如通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLII) 化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 -3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 X、 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 为 1- 萘基 ； 并且 1 2 3 X、 R、 R、 R、 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 为 1- 萘基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 X、 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLIII) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构：
     其中 Ar、 X、 R1、 R2、 R3、 和 R6 如通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLIII) 化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 -3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、(S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； X、 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLIII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 为 1- 萘基 ； 并且 1 2 3 X、 R、 R、 R、 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLIII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 为 1- 萘基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基， 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 X、 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLIV) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构 ：
     其中 Ar、 和 R1-R6 如通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLIV) 化合物， 其中 ： 4 5 R 和 R 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基、 和 苯基 ； Ar、 R1、 R2、 R3、 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLIV) 的另一个化合物， 其中 ： 1 R 为乙基 ； 并且 Ar、 R2-R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLIV) 的另一个化合物， 其中 ： 1 R 为乙基 ； Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 -3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基、 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基， 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLV) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构 ：
     其中 Ar、 和 R1-R6 如通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLIV) 化合物， 其中 ：Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLVI) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构 ：
     其中 Ar、 和 R1-R6 如通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLVI) 化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLVII) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构：
     其中 Ar、 X、 和 R1、 R2、 R4、 R5 和 R6 如通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLVII) 化合物， 其中 ： 4 5 R 和 R 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； 和 Ar、 R1、 R2、 R3 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLVII) 的另一个化合物， 其中 ： X 为氧 ； 并且 Ar、 R1、 R2、 R4、 R5 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLVII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R1 为甲基 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； 和 R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 X 和 R2 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLVII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； X 为氧 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 1 2 R 和 R 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLVII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； X 为氧 ； R1 为甲基 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 R2 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLVIII) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构：

    [1016] 其中， R2 不是氢 ； 并且 Ar、 R1、 R3、 R4、 R5 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 也提供了通式 (XLVIII) 化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 -3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R1 为甲基 ； R2 不是氢 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、正丙基、

    [1048] 3， 3- 二甲基丁基、

    [1049] 2- 甲基丙基、

    [1050] 2， 2- 二甲基丙基、

    [1051] 异丙基、

    [1052] 环丙甲基、

    [1053] 环丁基、

    [1054] 环戊基、

    [1055] 环己基、 和

    [1056] 四氢吡喃 -4- 基 ；

    [1057] 并且

    [1058] R3 如通式 (I) 所述。

    [1059] 再次， 上述化合物的每种情况下， 假定本发明包括其多晶型和磷非对映异构体。 此 外， 上述化合物在上文阐述的药物组合物中有效， 并且这些化合物和组合物在抗病毒药物 治疗方法中非常有效。

    [1060] 依据本发明的另一个实施方案， 根据上述通式 (I) 的化合物可以包括不同的磷非 对映异构体， 如下列实施例中阐述的 ：

    [1061] 依据本发明的另一个实施方案， 化合物也可以为包括上文阐述的两种磷非对映异 构体的混合物， 其比例为 1 ∶ 99 至 99 ∶ 1 之间的任何比例， 例如 10 ∶ 90、 25 ∶ 75、 40 ∶ 60、 50 ∶ 50、 60 ∶ 40、 75 ∶ 25、 90 ∶ 10， 等等。在上文的实施例中， 混合物将包括所需百分比 的 (S)-P 形式和剩余百分率的 (R)-P 形式。

    [1062] 根据本发明的其他实施方案， 提供了黄病毒科病毒家族病毒感染的治疗方法中使 用的具有上述通式 (I-VI) 的化合物， 举例来说， 丙型肝炎病毒治疗。根据本发明的其他实 施方案， 提供了一种药物组合物， 其包括与制药用载体、 稀释剂或赋形剂组合的通式 (I-VI) 化合物。

    [1064] 依据本发明所述的化合物令人惊讶地被发现增强了抗病毒活性。尤其是， 依据本 发明所述的化合物已被发现增强了丙型肝炎病毒的效力。此外， 依据本发明所述的化合物 令人惊讶地发现增强了其在啮齿类动物血浆中的稳定性。尤其是， 根据本发明所述的化合 物已被发现在小鼠血浆中具有超过 4 个小时的稳定性。

    [1065] 定义

    [1066] 本文所使用的术语 “烷基” 是指直链或支链饱和单价环状或无环烃基， 具有规定数

    [1063] 量的碳原子 ( 或不指明， 无环烃基优选具有 1-20 个碳原子， 更有选具有 1-6 个碳原子， 更优 选具有 1-4 个碳原子， 环烷基优选具有 3-20 个碳原子， 优选具有 3-10 个碳原子， 更优选具 有 3-7 个碳原子 )， 任选被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基独立选自上文阐述的 基团。 通过非限制性的实施例， 适宜的烷基包括甲基、 乙基、 丙基、 丁基、 戊基、 己基、 辛基、 壬 基、 异丙基、 2- 丁基、 环丙基、 环己基、 环戊基和十二烷基。术语 “C3-C8 环烷基” 是指包括从 约 3 至 8 个碳原子的环烷基。术语 “C3-C8 环烷基 - 烷基” 是指由包括约 3 至 8 个碳原子的 环烷基取代的无环烷基。

    [1067] 本文所使用的术语 “烯基” 是指直链或支链不饱和单价无环或环状烃基， 具有一个 或多个 C ＝ C 双键， 并具有规定数量的碳原子 ( 或不指明， 无环烯基优选具有 2-20 个碳原 子， 更优选具有 2-6 个碳原子， 更优选具有 2-4 个碳原子， 并且环状烯基优选具有 4-20 个碳 原子， 更优选具有 4-6 个碳原子 )， 任选被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基独立 选自上文阐述的基团。 通过非限制性的实施例， 适宜的烯基包括乙烯基、 丙烯基、 丁烯基、 戊 烯基和己烯基。

    [1068] 本文所使用的术语 “炔基” 是指有直链或支链不饱和单价无环或环状烃基， 具有一 个或多个 C/C 三键， 并具有指明数量的碳原子 ( 或不指明， 非环状炔基优选具有 2-20 个碳 原子， 更优选具有 2-6 个碳原子， 更优选具有 2-4 个碳原子， 并且环状炔基优选具有 7-20 个 碳原子， 更优选具有 8-20 个碳原子 )， 任选被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基独 立选自上文阐述的基团。

    [1069] 本文所使用的术语 “烷氧基” 或 “烷氧基” 是指烷基 -O-， 烷基如上述定义， 烷基可 任选被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基如上文阐述的烷基。通过非限制性的实 施例， 适宜的烷氧基包括甲氧基、 乙氧基、 正丙氧基、 异丙氧基、 正丁氧基、 叔丁氧基、 仲丁氧 基、 正戊氧基， 正己氧基和 1， 2- 二甲基丁氧基。术语 “环烷氧基” 是指环烷基 -O-， 其中环烷 基如上述定义， 并且环烷基可能任选被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基如上文 阐述的烷基。

    [1070] 本文所使用的术语 “烷硫基” 是指烷基 -S-， 烷基如是上文定义， 烷基可任选被一 个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基如上文阐述的烷基。 通过非限制性的实施例， 适宜 的烷硫基包括甲硫基、 乙硫基、 正丙硫基、 异丙硫基、 正丁硫基、 叔丁硫基、 仲丁硫基、 正戊硫 基， 正己氧基和 1， 2- 二甲基丁硫基。

    [1071] 本文所使用的术语 “芳氧基” 是指芳基 -O-， 芳基如下文定义， 芳基可任选被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基如上文阐述的芳基。

    [1072] 本文所使用的术语 “烷氧基烷基” 是指具有烷氧基取代基的烷基。通过烷基键合。 烷基和烷氧基分别如本文所定义的烷基和烷氧基。 烷氧基和烷基可分别被一个、 两个、 三个 或多个取代基取代， 取代基如上文阐述的烷基定义。

    [1073] 本文所使用的术语 “烷硫烷基” 是指具有烷硫基取代基的烷基。通过烷基键合。烷 基和烷硫基分别如本文所定义的烷基和烷硫基。 烷硫基和烷基可分别被一个、 两个、 三个或 多个取代基取代， 取代基如上文阐述的烷基定义。

    [1074] 本文所用的术语 “烷氧基芳基” 是指具有烷氧基取代基的芳基。通过烷基键合。烷 氧基和芳基分别如本文所定义的烷氧基和芳基。 烷氧基和芳基可分别被一个、 两个、 三个或 多个取代基取代， 取代基如上文定义的烷氧基和芳基的定义。本文所使用的术语 “环烷基芳基” 是指具有环烷氧基取代基的芳基。通过芳基键 合。环烷基和芳基分别如本文所定义的环烷基和芳基。

    [1076] 本文所使用的术语 “芳基 (C1-C6) 烷基 -” 是指在任何碳原子上被芳基取代的 C1-C6 烷基。通过芳基键合。芳基和烷基分别如本文所定义的芳基和烷基。通过非限制性的实 施例， 适宜的芳基 (C1-C6) 烷基 - 包括苄基、 1- 苯乙基、 3- 苯丙基、 4- 氯苄基、 4- 氟苄基、 2， 4- 二氟苄基和类似基团。

    [1077] 本文所使用的术语 “烷基羧基 (C1-C6) 烷基 -” 是指在任何碳原子上被烷基羧基 [ 烷基 -C( ＝ O)O-] 取代的 C1-C6 烷基。烷基如上文定义。通过非限制性的实施例， 适宜的 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 包括乙酰氧基甲基 [CH3C( ＝ O)O-CH2-]、 丙酰氧基 [CH3CH2C( ＝ O) O-CH2CH2-]、 新戊氧基丙基 [(CH3)3CCH2C( ＝ O)O-CH2CH2CH2-] 和类似基团。

    [1078] 环烷基和芳基可分别被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基如上文阐述的 烷基和芳基定义。

    [1079] 本文中所使用的术语 “芳基” ， 是指具有 1、 2、 3、 4、 5、 6 个环的单价不饱和芳香碳 环自由基， 优选 1、 2 或 3 个环， 可能是稠合或是双环的。芳基可任选由如上文阐述的任选 取代基的 1 个、 2 个、 3 个或多个取代基取代， 任选取代基可能在芳基上。优选的芳基是 ： 含 有 6 个碳原子的芳香单环 ； 包含 7、 8、 9 或 10 个碳原子的芳香双环体系或芳香稠环体统 ； 或 含有 10、 11、 12、 13 或 14 个碳原子的芳香三环系统。芳基的非限制性实施例包括苯基和萘 基。这些化合物可能包括取代基， 优选独立选自羟基 (-OH)、 酰基 (R′ -C( ＝ O))、 酰氧基 (R ′ -C(O)-O-)、 硝基 (-NO2)、 氨基 (-NH2)、 羧基 (-COOH)、 氰基 (-CN)、 C1-C6 单烷基氨基、 C1-C6 二烷基氨基、 硫基、 氯、 溴、 氟、 碘、 SO3H、 -SH、 -SR′， 其中 R′独立选自卤素、 C1-C6 烷氧 基、 和 C1-C6 烷基。

    [1080] 本文所使用的术语 “杂环烷基” 是指饱和的或部分不饱和的杂环体统， 具有 1、 2、 3、 4、 5、 6 个环， 优选具有 1 个、 2 个或 3 个环， 可能为稠合的或是双环的， 在环内或多环内包含 至少一个成员选自 N、 O 和 S 组成的组。杂环烷基之前分别采用前置式 “C5-C20” 或 “C5-C10” ， 是指 5 至 20 元环或 5 至 10 元环体系， 这些成员中至少一个成员选自 N、 O 和 S 组成的组。 优选的杂环烷基体系是 ： 具有 5 元的单环体系， 其中至少一员是 N、 O 和 S， 可任选包含一个 附加的氧原子或 1 个、 2 个或 3 个附加氮原子 ； 具有六个成员的单环， 其中 1 个、 2 个或 3 个 成员是 N 或 O 原子 ； 具有九个成员的双环系统， 其中至少一个成员是 N、 O 或 S 原子， 可以任 选包含 1 个、 2 个或 3 个附加的氮原子 ； 或具有十个成员的双环系统， 其中 1 个、 2 个或 3 个 成员是氮原子。通过非限制性的实施例， 适宜的杂环烷基包括四氢呋喃基、 四氢吡喃基、 吡 咯烷基、 吗啉基、 四氢噻喃基、 硫代吗啉基和哌啶基。

    [1081] 当自由基为一种结构， 例如 如本文中使用的术语 “茚满基” 是指稠合双环自由基结构， 其中自由基

    [1082] 与分子剩余部分的连接点在任何可用的非芳香族碳原子上。

    [1083] 上文描述的 “杂环烷基” 环系统的碳原子和 / 或杂原子可能由一个或多个杂原子 在环上被取代。环 ( 多个环 ) 由一个或多个杂原子取代， 杂原子取代基选自氧、 氮、 硫和卤 素 ( 氟、 氯、 溴和碘 )。环 ( 多个环 ) 由一个或多个杂原子取代， 优选有选自氧、 氮和 / 或卤素组成组的 1 个、 2 个、 3 个或 4 个杂原子取代。优选取代基独立选自羟基、 酰基、 酰氧基、 硝基、 氨基、 SO3H、 SH、 SR′， 其中 R’ 独立选自与 R 相同的基团 ； 羧基、 氰基、 (C1-C6) 烷氨基、 (C1-C6) 二烷基氨基、 巯基、 氯、 溴、 氟和碘。

    [1084] 此外， 本发明的化合物包含一个或多个手性中心。因此， 必要时， 这种化合物可以 制备成纯净的立体异构体或分离成纯净的立体异构体， 例如， 个体对映异构体或非对映异 构体， 或富集立体异构体的混合物。所有这些立体异构体 ( 和富集立体异构体的混合物 ) 包括在本发明的范围内。纯净立体异构体 ( 和富集立体异构体的混合物 )， 可被制备， 举例 来说， 采用本领域众所周知的光学活性起始原料或立体选择性试剂。 或者， 这种化合物的外 消旋混合物可以被分离， 举例来说， 使用手性柱色谱法、 手性解析试剂和类似方法。

    [1085] 本发明的化合物可能包含一个或多个不对称中心， 根据所需的多种取代基的位置 和性质而定。不对称碳原子或磷原子可能会存在于 (R) 或 (S) 构型中或 (R， S) 构型中。在 某些情况下， 不对称也可能存在， 由于围绕给定化学键限制性旋转， 举例来说， 邻近指定化 合物的两个取代芳环的中心化学键。环上的取代基也可能以顺式或反式形式存在， 双键上 取代基可以 Z 或 E 形式存在。所有这些构型 ( 包括对映异构体和非对映异构体 ) 希望包括 在本发明的范围内。优选的化合物是具有本发明化合物绝对构型内的那些， 产生更理想的 生物活性。本发明化合物的分离、 纯化或部分纯化的异构体或外消旋混合物也包括在本发 明的范围内。 这类化合物可以制备成纯净立体异构体或分离成纯净立体异构体， 例如， 个体 对映异构体或非对映异构体， 或富集立体异构体的混合物。所有这类立体异构体 ( 和富集 立体异构体的混合物 ) 包括在本发明的范围内。纯净立体异构体 ( 或富集立体异构体的混 合物 )， 可被制备， 例如， 使用本领域众所周知的光学活性的起始原料或立体选择性试剂。 或 者， 这类化合物的外消旋混合物可以被分离， 例如， 使用手性柱色谱、 手性解析试剂和类似 方法， 在下面试验实施例中示例。

    [1086] 术语 “制药用盐” ， 是指化合物的制药用盐， 盐源自本领域众所周知的多种有机和 无机反离子， 包括， 仅作为实施例， 钠、 钾、 钙、 镁、 铵、 四烷基铵基， 和类似盐 ； 当分子中含有 碱性官能团时， 有机酸或无机酸的盐， 如盐酸盐、 氢溴酸盐、 酒石酸盐、 甲磺酸盐、 醋酸盐、 马 来酸盐、 草酸盐和类似酸的盐。

    [1087] 术语 “制药用部分盐” 包括在术语 “制药用盐” ， 是指具有取代基的化合物， 该取代 基能够具有一个以上形成盐的基团， 但小于实际形成盐的这种基团最大数量。 举例来说， 二 膦酸基可以形成多元化的盐， 如果只有部分电离， 得到的基团在本文中有时也称为局部的 盐。应了解， 在上文定义的所有取代基中， 聚合物被另一些取代基取代 ( 例如， 取代的芳基 具有作为取代基的被取代芳基， 其本身就是被一个取代芳基取代 ) 不是针对本文中包含的 那些取代基。在这种情况下， 这种取代基的最大数目为 3。这就是说， 上文定义的每一个受 到制约， 举例来说， 取代的芳基限于 - 取代芳基 -( 取代芳基 )- 取代芳基。同样地， 应了解， 上述定义目的不是包括不允许的取代模式 ( 例如， 5 个氟基或侧基于烯基或炔基不饱和碳 原子的羟基取代的甲基 )。这种不允许取代模式是专业人员众所周知的。

    [1088] 术语 “多晶型” 是指任何多晶型物， 通式 (I) 化合物可以存在的多晶型物， 本领域 专业人员认可的。 如本领域中周知的， 多晶型是化合物结晶成一种以上不同的结晶或 “多晶 型” 种类的能力。 “多晶型” 是一种具有至少有两种不同排列的化合物的固体结晶相， 或者 固态化合物分子的多晶型物。任何给定化合物的多晶型用同一化学通式或组合物定义， 像两种不同化合物的晶体结构一样在化学结构上截然不同。

    [1089] 一般合成方法

    [1090] 本发明的化合物可以按照下列的一般方法和工艺并采用现成的起始材料来制备。 应了解， 给出了典型的或优选的工艺条件 ( 例如， 反应温度、 时间、 反应物摩尔比、 溶剂、 压 力等 )， 其他工艺条件除非另有说明， 也可以使用。最佳反应条件可能随所使用的特定反应 物或溶剂有所不同， 但这种情况下， 可以由本领域的专业人员按照常规优化程序来决定。

    [1091] 此外， 本领域专业人员将显而易见， 传统的保护基可能是阻止不必要反应的某些 功能基团是必要的。多种功能基团的适宜保护基， 以及特定功能基团的保护和去保护的适 宜条件是本领域专业人员众所周知的。 举例来说， 许多保护基团在 T.W.Greene 和 G.M.Wuts 撰写的 1999 年出版的有机合成中的保护基团第三版 (Wiley 出版社， New York) 进行了描 述， 并在本文中引用参考。

    [1092] 下列反应的起始材料通常是已知的化合物， 或者可以通过已知的方法制备得到， 或者是对其进行显而易见的改性。举例来说， 许多起始原料购自商业供应商， 如 Aldrich 化 学公司 ( 美国威斯康星州密尔沃基市 )、 Bachem 公司 ( 美国加州托兰斯市 )、 Emka-Chemce 公 司或 Sigma 公司 ( 美国密苏里州圣路易斯市 )。 其他原料可采用一些方法制备得到， 或是对 其进行显而易见的改性， 在标准参考文本中进行了描述， 如 Fieser 与 Fieser′ s 试剂和有 机合成， 第 1-15 卷 (John Wiley 和 Sons， 1991)， Rodd′ s 碳化合物化学， 第 1-5 卷， 和补充版 (Elsevier 科学出版社， 1989)， 有机反应， 第 1-40 卷 (John Wiley 和 Sons， 1991)， March′ s 高级有机化学， (John Wiley 和 Sons， 第 4 版 )， 以及 Larock′ s 综合有机转化 (VCH 出版公 司， 1989)。具体地讲， 本发明的化合物可能通过一般有机化学尤其核苷和核苷类似物合成 领域中周知的多种方法制备得到。核苷和核苷酸似物制备综述， 包括 1)Michelson A.M.， “核苷化学和核苷” ， 学术出版社， 纽约， 1963 ； 2)Goodman L.， “核酸化学的基本原理” ， 学术 出版社， 纽约， 1974 年， 第 1 卷， 第2章； 3)“核酸化学合成工艺” ， Eds.Zorbach W.& Tipson R.， Wiley， 纽约， 1973 年， 第 1 卷和第 2 卷。

    [1093] 适于本发明化合物的合成方案在下面合成方案中举例说明。举例来说， 反应方案 3 1 说明了制备通式 (Ia) 化合物的一般方法 [( 通式 (I)， R 为 OH。] 3

    [1094] 反应方案 1(R ＝ OH)

    [1095] 步骤 1 ：

    [1096] 步骤 2 ：

    [1099] 步骤 3 ：

    [1101] 步骤 4 ：

    [1103] 在这个方案中， 采用通式 R6OH 的醇与通式 (X) 的受保护的氨基酸进行酯化反应， 加入试剂如 EDCI 和 DMAP 加速反应， 反应在惰性溶剂如二氯甲烷中进行， 制备式 (XI) 的化 合物。或者， 许多酯形成试剂， 如 DCC/DMAP、 三氟乙酸酐、 N， N’ - 羰基二咪唑基和三苯基膦 / 四氯化碳可以被使用。在适宜的溶剂中， 如乙酸乙酯， 从化合物 (XI) 去除 BOC 保护基， 转 化成通式 (XII) 的盐的形式通过与有机酸反应如 PTSA 来完成。或者， BOC 基团可以使用其 他酸如三氟乙酸和盐酸 (HCl) 除去， 得到三氟乙酸或盐酸的相应的盐。步骤 2 中， 使用非亲核碱， 如 DBU， 和路易斯酸如三氟甲磺酸三甲基硅酯极性溶剂 ( 极性溶剂如乙腈 )， 通式 (XIII) 的受保护糖衍生物与 2- 氨基 -6- 氯嘌呤发生反应， 生产 通式 (XIV) 化合物。该反应可以在 0℃至 100℃下进行， 但最优选在 60℃下进行。或者， 其 他核苷偶联试剂如 BSA/SnCl4， 或 HMDS/TMSOTf 可以使用或在硅烷化之前使用。或者， 其他 已知核苷偶联试剂可被使用， 如 Helmut Vorbruggen 和 Carmen Ruh-Pohlenz 编写的核苷合 成手册中描述的 (John Wiley & Sons， 有机反应， 版权 2001)。核苷偶联反应可在其他极性 或非极性非质子溶剂中进行， 但不限于， 二氯乙烷、 甲苯、 邻二甲苯、 间二甲苯或对二甲苯或 1 1 二氯甲烷。 使用醇盐 (R O-)， 母体醇 (R OH) 作为溶剂使用， 氧亲核试剂取代连接分子嘌呤部 位的氯， 制备通式 (XV) 中间体， 其中 X 为 O。按照通式 (XIV) 与通式 R1NH2 氮亲核试剂的反 应同样制备通式 (XV) 化合物， 其中 X 为 NH。R1NH2 作为溶剂， 或 R1NH2 作为溶剂中的试剂， 例 如， 但不限于， 乙醇、 异丙醇、 四氢呋喃、 乙腈或 DMF， 可以完成这些反应。按照通式 (XIV) 与 1 R SH 硫亲核试剂的反应， 同样制备式 (XV) 的化合物， 其中 X 为 S。R1SH 作为溶剂， R1SH 作为 溶剂中的试剂， 例如， 但不限于， 乙醇、 异丙醇、 四氢呋喃、 乙腈或 DMF， 可以完成这些反应。

    [1105] 通过还原胺化反应实施通式 (XVI) 的化合物转化反应， 其中， 在选择性还原剂存 在下， 例如十硼烷亲质子性溶剂， 亲质子性溶剂如甲醇， 芳醛， 任选由卤素在芳基部分上取 代， 与通式 (XV) 化合物反应。 这种反应可在 0℃至 100℃下运行， 最优化在 -25℃下进行。 或 者， 其他还原剂可被使用， 例如氰基硼氢化钠或硼氢化钠， 或其他还原胺化试剂可被使用， 如 Eds.B.M.Trost 和 I.Fleming 编写 “Comprehensive Organic Synthesis” ， 第 8 卷第 1.2 章第 25 页中描述的 ( 佩加蒙， 牛津大学 (1991 年 ))。

    [1106] 步骤 3 中， 通式 (XIX) 的芳基氯化酰胺化物通过以下反应制得， 非亲核碱如三乙胺 存在下， 通式 (XVII) 的羟基化芳基化合物与氧氯化磷反应， 得到通式 (XVIII) 的中间体。 低温下， 优选 0℃至 -78℃， 最优选 -25℃， 该反应可以在非质子溶剂中进行， 非质子溶剂如 二氯甲烷、 乙醚或 MTBE。除了三乙胺之外， 许多其他非亲核碱可以使用， 如 DIEA 或 DBU 可 以使用。 在下一步反应中直接使用该反应的产物， 或者该反应中产生的胺盐， 如三乙基铵盐 酸盐， 可在下一步之前滤掉。该反应应在任何时候进行防潮保护， 因为磷酰二氯产品， 对潮 湿非常敏感。碱存在下， 通式 (XVIII) 与通式 (XII) 的氨基酸酯盐进行后续反应得到通式 (XIX) 的化合物。该反应可在 0℃至 -78℃下进行， 最优选在 -25℃下进行。多种非极性非 质子溶剂可被采用， 如乙醚、 MTBE 和二氯甲烷。碱可能选自多种非亲核有机胺， 例如， 但不 限于， 三乙胺、 DIEA、 或 DBU。该反应应在任何时候进行防潮保护。一旦反应完成， 关键要除 去相应的有机胺盐， 如三乙基胺盐酸盐， 或三乙基对甲苯磺酸铵。 通过浓缩反应混合物并且 使用乙酸乙酯和正己烷沉淀盐产物， 将其过滤掉， 粗产品通过硅胶塞。操作过程中， 除去溶 剂必须在 25℃或低于 25℃温度下进行， 以避免氯磷酸分解。

    [1107] 步骤 4 中， 采用亲核催化剂如 NMI 惰性有机溶剂， 惰性有机溶剂如四氢呋喃， 来完 成通式 (XIX) 和通式 (XV) 或通式 (XVI) 化合物偶联反应得到通式 (Ia) 化合物 [ 通式 (I)， R3 是 OH]。其他的亲核催化剂如 DMAP、 三甲胺、 吡啶、 或 4-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶， 以及其他 非质子溶剂如乙醚、 MTBE 氯仿或二氯甲烷， 可被使用。这些反应可在 0℃和 50℃之间进行， 最优化在 25℃下进行。或者， 一种强大的非亲核碱， 例如， 叔丁基氯化镁， 可以在溶剂中使 用， 溶剂如四氢呋喃、 乙醚、 或 MTBE。其他强质子选择性的有机或无机碱可被使用， 例如正 丁基锂、 叔丁醇钾、 2， 4， 6- 三甲基吡啶、 DBU， 或者双 ( 三甲基硅烷 ) 酰胺化锂。该反应可以在 -78℃到 40℃之间进行， 最优化在 0-25℃之间进行。

    [1108] 反应方案 2 说明在步骤 4 中制备的磷非对映异构体， 可以使用手性色谱分离。

    [1109] 反应方案 2( 磷非对映异构体的分离 )

    [1110] 在 这 个 方 案 中， 可 以 在 多 种 不 同 的 手 性 树 脂 中 进 行 手 性 色 谱， 手性树脂如 CHIRALPAK AD CHIRALPAK AS CHIRALCEL OD CHIRALCEL OJ CHIRALCEL OB 和 CHIRALCEL OC AD-H AS-H OD-H OJ-H OB-H 和 OC-H 或者， 手性树脂可以选自 从下面列表 ：

    [1112] CHIRALPAK IATM

    [1113] CHIRALPAK IA-3

    [1114] CHIRALPAK AD-H

    [1115] CHIRALPAK AD

    [1116] CHIRALPAK AD-3

    [1117] CHIRALPAK AD-3R

    [1118] CHIRALPAK AS-H

    [1119] CHIRALPAK AS

    [1120] CHIRALPAK AY-H

    [1121] CHIRALPAK AY

    [1122] CHIRALPAK AZ-H

    [1123] CHIRALPAK AZ

    [1124] CHIRALPAK IBTM

    [1125] CHIRALCEL OD-H

    [1126] CHIRALCEL ODCHIRALCEL OD-3

    [1128] CHIRALCEL OD-3R

    [1129] CHIRALCEL OD-I

    [1130] CHIRALPAK ICTM

    [1131] CHIRALPAK IC-3

    [1132] CHIRALCEL OC-H

    [1133] CHIRALCEL OC

    [1134] CHIRALCEL OA

    [1135] CHIRALCEL OB-H

    [1136] CHIRALCEL OB

    [1137] CHIRALCEL OG

    [1138] CHIRALCEL OJ-H

    [1139] CHIRALCEL OJ

    [1140] CHIRALCEL OF

    [1141] CHIRALCEL OK

    [1142] CHIRALCEL OZ-H

    [1143] CHIRALCEL OZ

    [1144] 任选地， Chiral PakAD 柱可采用比例为 1 ∶ 1 的乙醇∶正己烷作为移动相。其他 溶剂如乙酸乙酯、 异丙醇、 乙腈和甲醇可用作移动相， 或者采用其他本领域专业人员熟悉的 试剂。

    [1145] 反应方案 3 举例说明了制备通式 (I) 化合物的一般方法， 其中 R3 为 H( 本文中也 称为 “通式 1b” )。

    [1146] 反应方案 3(R3 ＝ H)

    [1147] 试剂 ： a)TBDPSCl、 DMAP、 嘧啶 ； b)TSCl、 DMAP ； c) 红 铝、 乙 醇、 甲苯 ； d)2， 2- 二 甲 氧基丙烷、 5 ％ PTSA、 二氯甲烷 ； e) 三乙基硼氢化锂、 四氢呋喃 ； f) 三苯基磷、 咪唑、 碘、 甲苯 ； g) 三丁基锡氢化物、 AIBN、 甲苯 ； h)TBAF、 四氢呋喃 ； i) 苯甲酰氯、 嘧啶、 DMAP ； j)(i)70％乙酸， (ii) 乙酸酐、 DMAP、 嘧啶 ； k)BSA、 TMSOTf、 乙腈 ； l) 甲醇氨 ；m)

    [1150] 叔丁基氯化镁 / 四氢呋喃。在此方案中， 通式 (XX) 化合物中的伯醇基团选择被保护， 举例来说， 选择丁基二 苯基氯硅烷保护， 得到通式 (XXI) 的中间体。保护仲醇基团， 例如采用 TsCl 保护， 得到双重 保护的通式 (XXII) 的中间体。采用还原剂如红铝， 将内酯还原成通式 (XXIII) 乳醇， 然后， 通过丙酮二甲基缩醛和 PTSA 反应， 二醇转化为通式 (XXIV) 安奈德。使用如 Li(Et)3BH， 其 中保护基团是 Ts， 仲醇选择性去保护， 得到通式 (XXV) 的中间体。采用， 例如三苯基膦、 咪 唑、 和碘， 羟基转变为碘基， 得到通式 (XXVI) 的化合物。使用三丁基锡氢化物去除碘基， 得 到通式 XXVII 的中间体。进行一系列去保护 / 保护步骤 (h、 i 和 j)， 制备通式 (XXX) 的中 间体。该化合物类似于先前描述的通式 (XIII) 的中间体， 与适宜的鸟嘌呤衍生物反应， 随 后脱保护， 可分别制备出通式 (XXXI) 和 (XXXII) 的化合物。使用上述方法 B， 与通式 (XIX) 的化合物反应， 通式 (XXXII) 化合物转化为通式 (Ib) 的化合物 [ 通式 (I)， 其中 R3 ＝ H]。

    [1151] 上文的通用方案优选在适宜溶剂存在下进行。适宜的溶剂包括烃类溶剂如苯、 甲苯 ； 醚类溶剂如二乙基醚、 四氢呋喃、 二苯醚、 苯甲醚、 二甲氧基苯 ； 卤代烃溶剂如二氯甲 烷、 氯仿、 氯苯 ； 酮类溶剂如丙酮、 甲乙酮和甲基异丁基酮 ； 醇类溶剂如甲醇、 乙醇、 丙醇、 异 丙醇、 正丁醇和叔丁醇 ； 腈类溶剂如乙腈、 丙腈、 苄腈 ； 酯型溶剂如醋酸乙酯、 醋酸丁酯 ； 碳 酸酯类溶剂如碳酸乙烯酯和碳酸丙烯酯 ； 和类似溶剂。这些可以在混合物中单独或两个或 更多个使用。惰性溶剂优选用于本发明的方法中。术语 “惰性溶剂” 是指被描述的反应条 件下溶剂具有惰性， 包括， 举例来说、 苯、 甲苯、 乙腈、 四氢呋喃、 二甲基甲酰胺、 氯仿、 二氯甲 烷 ( 或二氯甲烷 )、 乙醚、 乙酸乙酯、 丙酮、 甲基乙基酮、 甲醇、 乙醇、 正丙醇、 异丙醇、 叔丁醇、 二氧六环、 吡啶、 和类似溶剂。

    [1152] 给药剂量和途径

    [1153] 通常， 通过相似效用药剂按照任一可接受给药方式， 本发明的化合物按照有效量 给药。 本领域技术人员应了解， 有效剂量应为提供治疗功效的本发明化合物的用量， 例如活 性成分， 因此取决于众多因素如被治疗疾病的严重性、 患者的年龄和相关健康、 所有化合物 的药效、 给药的路线和方式、 以及其它因素。 药物可一天给药一次以上， 以优选的方式， 每天 给药一次或两次。如上文指明， 应在临床医生或卫生保健专业人员经验内考虑所有因素来 确定有效剂量。

    [1154] 举 例 来 说， 通 式 I 化 合 物 的 治 疗 有 效 剂 量 可 按 照 受 者 体 重 从 约 0.05mg/kg/ day-50mg/kg/day ； 优选约 0.1mg/kg/day-25mg/kg/day， 更优选从约 0.5mg/kg/day-10mg/ kg/day。 因此， 对一位体重 70kg 患者给药， 药物用量范围将最优选约 35mg/day-700mg/day。 通常， 本发明的化合物会作为药物组合物以下列途径中的任一种途径给药 ： 口服、 全身给药 ( 例如， 透皮、 鼻内或栓剂给药 )， 或肠胃外给药 ( 例如， 肌肉注射、 皮下给药、 或静脉注射 )。 优选的给药方式为口服给药， 使用方便的日剂量给药方案， 可以根据病痛程度调整。 组合物可以采用片剂、 丸剂、 胶囊剂、 散剂、 半固态、 缓释制剂、 溶液、 悬浮液、 酏剂、 气雾剂、 或任何 其它适宜的组合物。另一优选的本发明化合物的给药方式是吸入。这是将治疗药剂直接输 送到呼吸道的有效方法 ( 参见， 美国专利第 5,607,915 号， 上述专利通过引述合并于本文 中 )。

    [1155] 制剂选择依赖于多种因素如给药方式、 药物的生物药效率。 经吸入输送药物， 化合 物可配制为溶液、 悬浮液、 气溶胶推进剂或干粉， 装进适宜的分配器用于给药。有多种类型 的吸入装置 - 药物吸入器、 计量剂量吸入器 (MDI) 和干粉吸入器 (DPI)。 雾化器装置产生高 速空气流， 使所配制的治疗剂 ( 液体形式配制 ) 喷成薄雾， 携带到患者的呼吸道内。计量剂 量吸入器 (MDI) 通常与压缩气体一起装填制剂。一经驱动， 该装置通过压缩气体释放出测 量剂量的治疗剂， 因此提供了以设定剂量药物给药的可靠方法。干粉吸入器 (DPI) 以自由 流动的粉末形式分配治疗剂， 在患者呼吸过程中用该装置分散在患者呼吸气流中。为了获 得自由流动的粉末， 治疗剂采用赋形剂如乳糖配制。 测量剂量的治疗剂以胶囊形式存储， 在 每次驱动下分布药物。

    [1156] 最近， 已经开发的药物制剂显示出生物药效率差， 增加比表面积， 例如减小颗粒尺 寸， 可以提高生物效率。举例来说， 美国专利第 4,107,288 号描述了一种药物制剂， 其颗 粒尺寸范围在 10nm 至 1,000nm 之间， 其活性材料负载在高分子交联基体上。美国专利第 5,145,684 号描述了一种药物制剂的生产， 其中表面改性剂存在下， 药物研磨成纳米粉体 ( 平均粒径为 400nm)， 并分散在液体介质中， 得到一种药物制剂， 其显示出显著较高的生物 药效率。这些专利通过引述合并于本文中。

    [1157] 如上文指明， 按照本发明所述的组合物通常包括一种通式化合物， 如上文引用的 那些之一， 以及至少一种制药用载体、 赋形剂或稀释剂。 可利用的赋形剂的一些实施例是无 毒的那些， 将辅助给药， 且不会严重影响本发明化合物的治疗效果。 这种赋形剂可以是任何 固体、 液体、 半固体或者气溶胶组合物， 本领域专业人员通常采用气态赋形剂。

    [1158] 用于本发明的固体药物赋形剂包括淀粉、 纤维素、 滑石粉、 葡萄糖、 乳糖、 蔗糖、 明 胶、 麦芽、 大米、 面粉、 粉笔、 硅胶、 硬脂酸镁、 硬脂酸钠、 甘油单硬脂酸酯、 氯化钠、 脱脂乳粉 和类似物质。 液体和半固体赋形剂可以选自甘油、 丙二醇、 水、 乙醇、 各种油， 包括那些石油、 动物油、 植物油或合成的那些， 例如、 花生油、 大豆油、 矿物油、 芝麻油等。优选的液体载体， 尤其用于注射溶液， 包括水、 盐水、 葡萄糖水、 和乙二醇。 压缩气体可以用于分散气溶胶形式 的本发明化合物。适用于此目的的惰性气体是氮气、 二氧化碳等。其它适宜的制药赋形剂 和其制剂在 E.W.Martin 编辑的雷明顿药物科学中进行了描述 ( 麦克出版公司， 第 18 版， 1990 年 )。制剂中化合物的剂量可以在本领域专业人员采用的范围内改变。举例来说， 制 剂应包含， 以重量百分比 (wt％ ) 计， 从约 0.01％ -99.99wt％， 其中化合物是基于整个制剂 的通式 I 化合物， 余量为一种或多种适宜的制药用赋形剂。优选地， 该化合物的百分比为约 1wt％ -80wt％。包含本发明所述化合物的药物制剂在下文中进行进一步描述。

    [1159] 此外， 本发明针对药物组合物， 其包括治疗有效剂量的本发明化合物， 以及治疗有 效剂量的一种或多种抗 RNA- 依赖的 RNA 病毒的药物， 尤其， 抗 HCV。 抗 HCV 活性药物包括， 但 不限于， 利巴韦林、 levovirin、 viramidine、 胸腺素 α-1、 丙型肝炎病毒 NS3 丝氨酸蛋白酶 抑制剂、 干扰素 -α、 聚乙二醇化干扰素 -α( 聚乙二醇干扰素 -α)、 干扰素 -α 和利巴韦林 的组合、 聚乙二醇干扰素 -α 和利巴韦林的组合、 干扰素 -α 和 levovirin 的组合、 聚乙二醇干扰素 -α 和 levovirin 的组合。 干扰素 -α 包括， 但不限于， 重组干扰素 -α2a( 如购自 Hoffman-LaRoche 的 Roferon interferon， Nutley， N.J.)、 干扰素 -α2b( 如购自 Schering Corp. 的 Intron-A interferon， Kenilworth， N.J.， USA)、 复合干扰素、 和纯化的干扰素 -α 产物。讨论利巴韦林和其抗 HCV 的活性， 参见 J.O.Saunders 和 S.A.Raybuck， “Inosine Monophosphate Dehydrogenase ： Consideration of Structure， Kinetics 和 Therapeutic Potential， ” Ann.Rep.Med.Chem.， 35 ： 201-210(2000)。

    [1160] 进一步， 本发明针对一种药物组合物， 该药物组合物包括有效剂量的本发明化合 物， 以及抗丙型肝炎病毒具有活性的制药有效剂量的一种或多种药物。这类药物包括抑制 丙型肝炎病毒蛋白酶、 丙型肝炎病毒聚合酶、 丙型肝炎病毒解旋酶、 丙型肝炎病毒 NS4B 蛋 白、 丙型肝炎病毒进入、 丙型肝炎病毒活动、 丙型肝炎病毒出现、 丙型肝炎病毒 NS5A 蛋白、 和 5′ - 次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶的那些药物。其他药物包括治疗丙型肝炎病毒感染的 核苷类似物。还有其他的化合物， 包括在 WO 2004/014313 和 WO 2004/014852 和本文中提 及的参考资料中披露的那些。专利申请 WO 2004/014313 和 WO 2004/014852 通过引述全 部合并于本文中。具体的抗病毒药物包括 Omega IFN( 生物医药公司 )、 BILN-2061( 勃林 格殷格翰公司 )、 Summetrel( 远藤制药控股公司 )、 干扰素 α-2a(F. 霍夫曼罗氏公司 )、 Pegasys(F. 霍夫曼罗氏公司 )、 Pegasys/Ribaravin(F. 霍夫曼罗氏公司 )、 CellCep(F. 霍 夫 曼 罗 氏 公 司 )、 惠 福 仁 ( 葛 兰 素 史 克 )、 Albuferon-α( 人 类 基 因 组 科 学 公 司 )、 Levovirin(ICN 制 药 公 司 )、 IDN-6556(Idun 制 药 公 司 )、 IP-501(Indevus 制 药 公 司 )、 Actimmune(InterMune 公司 )、 Infergen A(InterMune 公司 )、 ISIS 14803(ISIS 制药公司 )、 JTK-003( 日本烟草公司 )、 Pegasys/Ceplene(Maxim 制药公司 )、 Ceplene(Maxim 制药公 司 )、 Civacir(Nabi 生物制药公司 )、 Intron A/Zadaxin(RegeneRx)、 Levovirin(Ribapharm 公司 )、 Viramidine(Ribapharm 公司 )、 Heptazyme( 核酶制药公司 )、 Intron A( 先灵葆雅 公司 )、 PEG-Intron( 先灵葆雅公司 )、 Rebetron( 先灵葆雅公司 )、 利巴韦林 ( 先灵葆雅公 司 )、 PEG-Intron/Ribavirin( 先灵葆雅公司 )、 Zadazim(SciClone 公司 )、 Rebif(Serono 公 司 )、干 扰 素 -β/EMZ701(Transition Therapeutics 公 司 )、 T67(Tularik 公 司 )、 VX-497(Vertex 制药公司 )、 VX-950/LY-5703 10(Vertex 制药公司 )、 Omniferon(Viragen 公 司 )、 XTL-002(XTL 生物制药公司 )、 SCH 503034( 先灵葆雅公司 )、 isatoribine 及其前体药 物 ANA971 和 ANA975(Anadys 公司 )、 R1479( 罗氏生物科学公司 )、 Valopicitabine(Idenix 公司 )、 NIM811( 诺华制药公司 )、 和 Actilon(Coley 制药公司 )。

    [1161] 在一些实施方案中， 本发明的组合物和方法包含上文中阐述的通式化合物， 和干 扰素。在一些方面， 干扰素选自干扰素 α2B、 聚乙二醇化干扰素 α、 干扰素、 干扰素 α2A 和 类淋巴母细胞干扰素 τ 组成的组。

    [1162] 在其它实施方案中， 本发明的组合物和方法利用上文中阐述的通式化合物和具有 抗丙型肝炎病毒活性的化合物 ( 如选自由白细胞介素 2、 白细胞介素 6、 白细胞介素 12 组成 的组的那些 )、 增强 1 型辅助性 T 细胞应答的化合物、 干涉 RNA、 反义 RNA、 咪奎莫特、 利巴韦 林、 5′ - 次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶抑制剂、 金刚烷胺、 和金刚乙胺。

    [1163] 抗丙型肝炎活性测试

    [1164] 通过抑制丙型肝炎聚合酶， 抑制复制周期中所需的其它酶， 或通过其它途径， 化 合物可以表现出抗丙型肝炎活性。一些公开的测试方法用于评估这些活性。评估培养基中丙型肝炎病毒的总量增长的一般方法在 Miles et al. 提出的美国专利第 5,738,985 号 中披露， 上述专利通过引述合并于本文中。体外测试在 Ferrari et al.J.of Vir.， 73 ： 1649-1654， 1999、 Ishii et al.， Hepatology， 29 ： 1227-1235， 1999、 Lohmann et al.， J.Bio. Chem.， 274 ： 10807-10815， 1999、 和 Yamashita et al.， J.of Bio.Chem.， 273 ： 15479-15486， 1998 中进行了报道。

    [1165] WO97/12033 涉及丙型肝炎聚合酶测试， 可用于评价本文中描述的化合物的活性， 该专利申请通过引述合并于本文中。其他丙型肝炎聚合酶测试已经在 Bartholomeusz， et al.， Hepatitis C Virus(HCV)RNA polymerase assay using cloned HCV non-structural proteins， Antiviral Therapy 1996 ： 1(Supp 4)18-24 中进行了报道。

    [1166] 测量丙型肝炎病毒药物激酶活性减少的筛选方法在 Katze 等人提出的美国专利 第 6,030,785 号、 Delvecchio 提出的美国专利第 6,228,576 号、 和 Jubin 等人提出的美 国专利第 5,759,795 号中被披露。测量提议的丙型肝炎病毒药物的蛋白酶抑制活性的筛 选方法在 Su 等人提出的美国专利第 5,861,267 号、 De Francesco 等人提出的美国专利第 5,739,002 号和 Houghton 等人提出的美国专利第 5,597,691 号中被披露， 通过引述上述专 利都合并于本文中。

    [1167] 本发明还在下列非限制性实施例中进行了举例说明。

    [1168] 实施例

    [1169] 本发明的实施例目前将在仅与下列实施例相关的实施例中进行了描述。 使用适宜 核苷， 或改性前药， 与氯磷酸反应制备靶向化合物。 后者试剂采用公开方法由芳基二氯磷酸 酯与氨基酸酯盐酸盐制备得到。

    [1170] 一般程序

    [1171] 涉及水敏性化合物的所有试验在严格干燥条件下进行。无水四氢呋喃 (THF) 和二氯甲烷购自 aldrich 公司并直接使用。糖衍生物 (2S， 3R， 4R， 5R)-5-( 苯甲酰氧基 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -2， 3， 4- 三基三苯甲酰氧基或等同物 ： 2， 3， 4， 5- 四 -O- 苯甲酰 基 -2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖购自 CarboSynth 有限公司， 8&9 Old Station Business Park， Compton， Berkshire， RG20 6NE， UK。 嘌 呤 衍 生 物 2- 氨 基 -6- 氯 嘌 呤 或 等 同 物、 6- 氯 -9H- 嘌呤 -2- 胺购自 aldrich 公司。2’ -C- 甲基鸟苷 2-(2- 氨基 -9-((3R， 4R， 5R)-3， 4- 二羟基 -5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -2- 基 )-1H- 嘌呤 -6(9H)- 酮 ) 为商业试剂， 购 自 CarboSynth 有限公司， 8&9 Old Station Business Park， Compton， Berkshire， RG206NE， UK。叔丁基氯化镁的 1.0M 溶液购自 aldrich 公司。该 1.0M 溶液在实验过程中使用。柱层 析是指快速柱色谱， 采用 Merck 硅凝胶 60(40μm-60μm) 作为固定相。质子谱、 碳谱、 磷核 1 13 31 磁共振谱 ( H、 C、 P NMR) 记录在 Bruker Avance 光谱仪上， 或者在 500MHz、 125MHz、 202MHz 下操作， 或者在 300MHz、 121MHz、 75MHz 下操作， 或在 400MHz、 100MHz、 161.9MHz 条件下操作 13 记录在瓦里安 Unity Inova 仪器上。 所用溶剂指出每种化合物。 C 和 31P 谱质子去耦记录。 四甲基硅烷的 1H 和 13C 谱化学位移向低场位移几个 ppm。耦合常数称为 J 值。信号裂分方 式描述为单峰 (s)、 双峰 (d)、 三重峰 (t)、 四重锋 (q)、 宽信号 (br)、 双二重峰 (dd)、 双重三 31 峰 (dt)、 或多峰 (m)。相对于外部磷酸标准物， P 谱的化学位移为几个 ppm。由于样品中存 在非对映异构体， 许多质子和碳 NMR 信号出现裂分。对于许多化合物， MNOBA( 间硝基苄醇 ) 作为介质， 质谱电离模式是快原子轰击。LCT 飞行时间质谱仪串联 Waters M600 高效液相质谱泵泵， 得到电喷雾质谱。样品溶解在甲醇溶剂中， 通过 Rheodyne 进样阀注射进流动相。 流动相采用甲醇， 流速 200μL/min。 电喷雾离子源在温度 130℃、 脱溶剂气温度 300℃、 毛细 管电压 3kV、 锥孔电压 30V 条件下操作。以连续模式在 100-2000amu 质量范围内收集数据， 使用 Masslynx 软件处理数据。与样品同时向电喷雾离子源引入已知元素成分的锁定化合 物便于精确质量测量。

    [1172] 实施例 1.

    [1173] (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 氯 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 苄酰氧基甲基 )-3- 甲 基四氢呋喃 -3， 4- 二苯甲酸酯

    [1174] 向 (2S， 3R， 4R， 5R)-5-( 苄酰氧基甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -2， 3， 4- 三苯甲酸酯 ( 或 2， 3， 4， 5- 四 -O- 苯甲酰 -2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖 )( 购自 CarboSynth 有限公司， 10.0g， 17.22mmol)、 2- 氨基 -6- 氯嘌呤 ( 购自 Aldrich 公司， 3.2g， 18.87mmol) 和 1， 8- 二氮杂双 环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (DBU)(7.7mL， 51mmol) 的 200mL 无水乙腈的预冷却 (0℃ ) 溶液中逐 滴加入三甲硅烷基三氟甲基磺酸盐 (12.5mL， 68.8mmol)。然后， 反应混合物 65℃下加热 4 至 6 个小时， 冷却至室温， 注入到 300mL 饱和碳酸氢钠水溶液中， 每次用 150mL 二氯甲烷萃 取， 萃取三次。合并有机相用硫酸钠干燥， 在减压下蒸发。残留物从二氯甲烷和甲醇中沉淀 下来， 过滤， 固体用甲醇洗涤 2 次， 干燥得到预期的化合物白色固体 (8.5g， 79％ )( 生成物从 65％ ( 柱 ) 至 90％ ( 沉淀 ))。

    [1176] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1177] H NMR(500MHz ，CDCl 3 ) δ 8.13(dd ，J ＝ 1.2 ， 8.3 ， 2H) ， 8.02-7.94(m ， 5H) ， 7.65-7.60(m， 1H)， 7.58-7.45(m， 4H)， 7.35(q， J ＝ 7.7， 4H)， 6.65(s， 1H)， 6.40(d， J ＝ 6.7， 1H)， 5.31(s， 2H)， 5.08(dd， J ＝ 4.2， 11.6， 1H)， 4.79(dd， J ＝ 6.4， 11.6， 1H)， 4.74(td， J＝ 4.2， 6.5， 1H)， 1.60(s， 3H).

    [1175] C NMR(126MHz， CDCl3)δ166.31(C ＝ O)， 165.38(C ＝ O)， 165.32(C ＝ O)， 159.13(C2)， 152.87(C6)， 152.06(C4)， 141.42(C8)， 133.77(C-HBn)， 133.69(C-H Bn)， 133.28(C-H Bn)， 129.90(C-H Bn)， 129.82(C-H Bn)， 129.78(C Bn)， 129.70(C-H Bn)， 129.41(C Bn) ， 128.78(C Bn) ， 128.61(C-HBn) ， 128.50(C-H Bn) ， 128.41(C-H Bn) ， 126.00(C5) ， 88.84(C1’) ， 85.68(C2’) ， 79.43(C4’) ， 76.07(C3’) ， 63.57(C5’) ， 17.77(2’ -Me).

    [1179] 实施例 2.

    [1180] (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基 四氢呋喃 -3， 4- 二醇

    [1178] 890 ℃ 下， 向 含 有 (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6- 氯 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 苄 酰 氧基甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二苯甲酸 (3.0g， 4.78mmol) 的 36mL 甲醇悬浮液加 入 5ml 含有甲醇钠的甲醇溶液 (5.4mL， 25％ w/w)。混合物在室温下搅拌 24h， 然后加入加 + amberlite(H ) 结束反应。 将混合物过滤， 然后减压下除去甲醇。 所得残留物溶解于 50mL 水 中， 用 50mL 正己烷萃取。然后， 用 50mL 水萃取有机层， 合并的水组分减压下被浓缩。残留 物经硅胶色谱 (CHCl3/MeOH ＝ 85 ∶ 15) 纯化， 得到纯净白色固体的化合物 (1.125g， 76％ )。

    [1183] 下列是分析合成化合物的核磁共振、 高效液相色谱、 CHN 元素分析结果 ： 1

    [1184] HNMR(500MHz， CD3OD)δ8.26(s， 1H)， 5.99(s， 1H)， 4.24(d， J ＝ 9.1， 1H)， 4.08(s， 3H)， 4.04(ddd， J ＝ 2.3， 5.7， 8.6， 2H)， 3.87(dd， J ＝ 3.0， 12.4， 1H)， 0.96(s， 3H). 13

    [1185] C NMR(126MHz， CD3OD)δ162.75(C6)， 161.86(C2)， 154.50(C4)， 139.35(C8)， 115.36(C5) ， 93.00(C1’ )， 84.15(C4 ′ ) ， 80.34(C2’ )， 73.57(C3’ )， 61.17(C5’ )， 54.25(6-OMe)， 20.35(2’ -Me).

    [1186] HPLC ： tR ＝ 9.00min ； 柱： Varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm

    [1187] 该方法是 ： 线性梯度 H2O/ 乙腈 ： 30min 内， 乙腈从 0％至 100％

    [1188] 元素分析 ： calculated for C12H17N5O5+ 0.75 H2O ： C： 44.37， H： 5.74， N： 21.56 ； Found ： C： 44.24， H： 5.49， N： 20.83

    [1189] 实施例 3.

    [1190] 萘 -1- 基二氯磷酸酯

    [1182] 三氯氧磷 (1.94mL， 1 当量 ) 和 α- 萘酚 ( 购自 aldrich 公司， 3g， 1 当量 ) 在 20mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78℃下加入 (2.90mL， 1 当量 )， 25 分钟后， 溶液温降至 室温。三乙胺盐酸盐被滤掉， 溶剂在减压下被除去， 得到透明浅黄色油 (4.88g， 90％ )。

    [1192] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.11(d， J ＝ 8.4， 1H.H8)， 7.90(d， J ＝ 7.5， 1H， H 5) ， 7.80(d， J ＝ 8.3， 1H， H4)， 7.65-7.53(m， 3H， H2， H6， H7)， 7.46(t， J ＝ 8.0， 1H， H3). 31

    [1194] P NMR(202MHz， CDCl3)δ3.69.

    [1195] 实施例 4.

    [1196] 合成萘 -2- 基二氯磷酸酯 ：

    [1193] 1三氯氧磷 (3.23mL， 1 当量 ) 和 β- 萘酚 ( 购自 aldrich 公司， 5g， 1 当量 ) 在 25mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78℃下加入 (4.84mL， 1 当量 )， 25 分钟后， 溶液温度降 至室温。三乙胺盐酸盐被滤掉， 溶剂在减压下被除去， 得到透明浅黄色油 (7.95g， 88％ )。 ( 油在冷冻箱内固化 )。

    [1199] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1200] H NMR(500MHz ， CDCl 3) δ 7.86-7.77(m ， 2H) ， 7.70(s ， 1H) ， 7.52-7.45(m ， 2H) ， 7.37(m， 1H). 31

    [1201] P NMR(202MHz， CDCl3)δ2.71.

    [1202] 实施例 5

    [1203] 合成 (S)- 甲基 2-(6-( 二氯磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙酸酯 ：

    [1198] 三氯氧磷 (0.202mL， 1 当量 ) 和 (S)- 甲基 2-(6- 羟基萘 -2- 基 ) 丙酸酯 ( 购自 aldrich 公司， 500mg， 1 当量 ) 在 25mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78 ℃下加入 (0.302mL， 1 当量 )， 25 分钟后， 溶液温度降至室温。三乙胺盐酸盐被滤掉， 溶剂在减压下被 除去， 得到透明浅黄色油 (750mg， 95％ )。

    [1206] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31

    [1207] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ4.49

    [1208] 实施例 6

    [1209] 合成喹啉 -5- 基二氯磷酸酯 ：

    [1205] 三 氯 氧 磷 (0.385mL， 4.14mmol.) 和 喹 啉 -5- 醇 ( 购 自 aldrich 公 司， 600mg， 4.14mmol.) 在 25mL 无 水 四 氢 呋 喃 中 搅 拌。 无 水 三 乙 胺 在 -78 ℃ 下 加 入 (0.576mL， 4.14mmol.)， 溶液温度降至室温。采用 31PNMR 监测反应混合物三氯氧磷反应完 ( 约 30 分 钟 )， 该混合物直接被使用。

    [1212] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31

    [1213] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ4.58.

    [1214] 实施例 7

    [1215] 合成喹啉 -6- 基二氯磷酸酯 ：

    [1211] 三 氯 氧 磷 (0.385mL， 4.14mmol.) 和 喹 啉 -5- 醇 ( 购 自 aldrich 公 司， 600mg， 4.14mmol.) 在 25mL 无 水 四 氢 呋 喃 中 搅 拌。 无 水 三 乙 胺 在 -78 ℃ 下 加 入 (0.576mL， 4.14mmol.)， 溶液温度降至室温。采用 31PNMR 监测反应混合物三氯氧磷反应完 ( 约 30 分 钟 )， 该混合物直接被使用。

    [1218] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31

    [1219] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ4.61.

    [1220] 实施例 8

    [1221] 合成喹啉 -8- 基二氯磷酸酯 ：

    [1217] 三氯氧磷 (0.58mL， 1 当量 ) 和喹啉 -8- 醇 ( 购自 aldrich 公司， 900mg， 1 当量 ) 在 25mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78℃下加入 (0.86mL， 1 当量 )， 25 分钟后， 溶 液温度降至室温。三乙胺盐酸盐被滤掉， 溶剂在减压下被除去， 得到透明浅黄色油 (870mg， 54％ )。粗产物直接用于下一步。

    [1224] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31

    [1225] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ4.53.

    [1226] 实施例 9

    [1227] 合成 2- 甲基萘 -1- 基二氯磷酸酯 ：

    [1223] 三氯氧磷 (0.176mL， 1 当量 ) 和 2- 甲基萘 -1- 醇 ( 购自 aldrich 公司， 0.3g， 1当 量 ) 在 10mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78℃下加入 (0.264mL， 1 当量 )， 搅拌 30 31 分钟。二氯化物室温下非常不稳定。采用 P NMR 监测反应进程。粗产物被认为 100％转

    [1229] 化为二氯化物， 并直接使用。

    [1230] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31

    [1231] P NMR(80MHz， CDCl3)δ4.20

    [1232] 实施例 10

    [1233] 合成 3- 叔丁基萘 -1- 基二氯磷酸酯 ：

    [1234] 三 氯 氧 磷 (0.143mL， 1 当 量 ) 和 3- 叔 丁 基 萘 -1- 醇 ( 参 见 J.Org.Chem.1995， 60， 2909-2911， 0.308g， 1 当量 ) 在 8mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78 ℃下加入 (0.214mL， 1 当量 )， 搅拌 30 分钟。二氯化物室温下非常不稳定。采用 31P NMR 监测反应。 粗产物被认为 100％转化为二氯化物， 并直接使用。

    [1236] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31

    [1237] P NMR(80MHz， CDCl3)δ4.46

    [1238] 实施例 11

    [1239] 合成 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 二氯磷酸酯 ：

    [1235] 三氯氧磷 (0.145mL， 1 当量 ) 和 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 醇 ( 参见 J.Org.Chem.1995， 60， 2909-2911， 0.4g， 1 当量 ) 在 10mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78 ℃下加入 (0.217mL， 1 当量 )， 搅拌 30 分钟。二氯化物室温下非常不稳定。采用 31P NMR 监测反应进 程。粗产物被认为 100％转化为二氯化物， 并直接使用。

    [1242] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31

    [1243] P NMR(80MHz， CDCl3)δ4.45

    [1244] 实施例 12

    [1245] 合成苯基二氯磷酸酯 ：

    [1241] 三氯氧磷 (3.23mL， 1 当量 ) 和苯酚 (g， 1 当量 ) 在 25mL 无水二乙醚中搅拌。无水 三乙胺在 -78℃下加入 (4.84mL， 1 当量 )， 25 分钟后， 溶液温度降至室温。三乙胺盐酸盐被 滤掉， 溶剂在减压下被除去， 得到透明浅黄色油 (g，％ )。( 油在冷冻箱内固化 )。

    [1248] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ：

    [1249] 氨基酸酯或者购买， 或者采用本领域专业人员所熟悉的文献工艺制备得到。 通常， 使用 EDCI(1-(3- 二甲基氨基丙基 )-3- 乙基碳二亚胺盐酸盐， Aldrich 公司 ) 和 DMAP(4- 二 甲氨基吡啶， aldrich 公司 )， BOC( 叔丁氧基羰基 ) 保护的氨基酸与二氯甲烷中相应的醇耦 合。使用 PTSA( 对甲苯磺酸 ) 去掉 BOC 基团， 分离出对甲苯磺酸盐。

    [1250] 萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯通过本领域专业人员已知的技术制备得到。一般来

    [1247] 说， 萘二氯磷酸酯 (1 当量 ) 和作为 PTSA 盐 (1 当量 ) 的适宜的氨基酸酯悬浮在无水二氯甲 烷 (20mL/g 二氯磷酸酯 ) 中。在 -78℃下， 1 小时后， 无水三乙胺 (2 当量 ) 逐滴加入， 反应 温度升至室温， 搅拌 2 至 4 个小时 ( 通过 P-NMR 监控该反应 )。减压条件下， 低于 25℃， 罗 托蒸发器加热池除去溶剂， 粗残留物在硅胶上经快速层析纯化 ( 己烷 / 乙酸乙酯＝ 1 ∶ 1)。 然后， 低于 25℃， 罗托蒸发器加热池， 小心去除乙酸乙酯。同样工艺用于取代萘酚衍生物和 取代喹啉和异喹啉衍生物。

    [1251] 核苷衍生物而非 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤按 照实施例中下列描述的方法合成得到。

    [1252] 通过本领域技术人员可利用的工艺， 包括方法 A 和方法 B， 合成得到 2- 氨基 -6- 甲 氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ - 磷酰胺酯。

    [1253] 方法 A ： 向含有 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤 (1 当 量 ) 的四氢呋喃 (20mL/g) 中加入 N- 甲基咪唑 (NMI， Aldrich 公司， 5 当量 )， 随即加入溶解 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基酸衍生物 (3 当量 ) 的 20mL 四氢呋喃。混合物搅拌过夜， 减压下除去该溶剂。残留物在硅胶 (CHCl3/MeOH ＝ 95 ∶ 5) 上纯化， 得到收率 20％ -30％的 纯净的磷酰胺酯。在某些情况下， 一些痕量 N- 甲基咪唑留下 ： 为除去 N- 甲基咪唑， 磷酰胺 酯溶解在氯仿中， 用盐酸 (HCl 0.1N) 洗涤 3 次。然后， 有机层用硫酸钠烘干， 减压蒸发得到 纯净的化合物。在一些情况下， 后者需纯化第二次 (100％ CHCl3 ： CHCl3/MeOH ＝ 95 ∶ 5)。

    [1255] 方 法 B. 向 含 有 2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9-(2-C- 甲 基 -β-D- 呋 喃 核 糖 基 ) 嘌 呤 (aldrich 公司， 1 当量 ) 的无水四氢呋喃溶液 (4mL/mmol) 中加入 1M 含有叔丁基氯化镁的 四氢呋喃溶液 (aldrich 公司， 2 当量 )。搅拌 15 分钟后， 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 酸衍生物 (2 当量 ) 的 30mL 四氢呋喃溶液中逐滴加入到反应混合物中， 然后溶液温度降至 室温， 搅拌过夜。TLC 监测该反应。使用 300mL 饱和 NH4Cl 溶液和 100mL 盐水洗涤反应混合

    [1254] 物。有机层用无水硫酸钠干燥， 并被浓缩。使用 CH2Cl2/MeOH(96 ∶ 4)， 用硅胶柱层析提纯 粗材料， 得到磷酰胺酯， 收率在 10％ -50％。

    [1256] 实施例 13

    [1257] 按 照 以 下 步 骤 合 成 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸苄酯 ：

    [1258] 步骤 1 ： (2S)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 )- 磷酰化氨基 )- 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， 苄氧基 -L- 丙氨酸的甲苯磺 酸盐 (1.5g) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (1.10g)、 三乙胺 (1.14mL)、 和二氯甲烷 (20mL) 合并得到 (2S)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 )- 磷酰化氨基 )- 丙酸酯， 收率 89 ％ (1.53g)， 呈淡黄色粗油状。

    [1261] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1263] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.08(m， 1H， H8-napht)， 7.90(m， 1H， H5-napht)， 7.75(d， J ＝ 8.2， 1H， H4-napht)， 7.58(m， 3H， H6， H7， H2-napht)， 7.48-7.42(m， 1H， H3-napht)， 7.36(m， 5H， phe)， 5.31-5.16(m， 2H， CH2 酯 )， 4.59-4.48(m， 0.5H， NH)， 4.38(m， 1.5H.NH 和 H3)， 1.59(d， J ＝ 7.1， 1.5H， CH3ala)， 1.57(d， J ＝ 6.9， 1.5H， CH3ala). 31

    [1264] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.16， 7.89.

    [1265] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1266] 采用 ( 方法 A) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的通用方法， 向含有 1.12g(1.6mmol) 核 苷 的 25mL 四 氢 呋 喃 中， 加 入 1.44mL(0.018mmol)N- 甲 基 咪 唑， 随后加入含有 4.38g(0.11mmol)(2S)- 苄基 2- 氯 -( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 25mL 四氢呋 喃。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 68mg 纯净的蛋白肽， 收率 28％， 呈白色固体。

    [1267] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1268] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.20-8.13(m， 1H)， 7.98， 7.95(2x s， 1H)， 7.83-7.77(m， 1H)， 7.63， 7.62(2x d， J ＝ 7.7， 1H)， 7.54-7.49(m， 1H)， 7.49-7.40(m， 2H)， 7.32(t， J ＝ 7.5， 1H)， 7.27-7.16(m， 5H)， 6.04， 6.02(2x s， 1H)， 5.03， 4.93(AB， J AB ＝ 12.00Hz， 2H)， 4.67-4.57(m ， 2H) ， 4.34-4.24(m ， 2H) ， 4.16-4.06(m ， 1H ， 4.01 ， 4.00(2x s ， 3H) ， 1.30 ， 1.29(2x d， J ＝ 7.1， 3H)， 0.97， 0.95(s， 3H). 3 3

    [1269] )δ174.85(d， JC-C-N-P ＝ 4.4)， 174.62(d， JC-C-N-P ＝ 5.5， )， 162.74， 161.83， 154.56， 2 2 154.51， 147.99(d， JC-O-P ＝ 1.9)， 147.93(d， JC-O-P ＝ 1.7)， 139.31， 139.04， 137.08， 136.24， 3 136.22， 129.54， 129.26， 129.25， 129.17， 129.12， 128.87， 128.83， 127.90(d，JC-C-O-P ＝ 3 4.1)， 127.85(d， JC-C-O-P ＝ 4.2)， 127.77， 127.53， 126.56， 126.53， 126.00， 122.83， 122.76， 3 3 116.28， 116.27， 115.68， 115.65， 93.30， 93.12， 82.29(d， JC-C-O-P ＝ 8.0)， 82.12(d， JC-C-O-P ＝

    [1262] 2 8.4)， 80.03， 79.99， 79.53， 74.96， 74.64， 68.03(d， JC-O-P ＝ 4.7)， 67.98， 67.96， 67.48(d， 2 3 3 JC-O-P ＝ 4.9)， 51.84， 51.75， 20.67(d， JC-C-N-P ＝ 6.1)， 20.48(d， JC-C-N-P ＝ 4.6)， 20.44.

    [1270] )δ4.28， 4.27.

    [1271] 实施例 14

    [1272] (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯按照如下步骤合成 ：

    [1273] 步骤 1 ： (2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， 2， 4- 二氟苄基 -L- 丙氨酸 (4g) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (2.69g)、 三乙胺 (2.9mL)、 和二氯甲烷 (52mL) 合 并得到 2.77g 萘 -1- 基 -(2， 4- 二氟苄基 -L- 丙氨酰基 ) 氯化磷酸酯， 下一步骤中直接使用。

    [1277] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31

    [1278] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.10， 7.92.

    [1279] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1280] 采用 ( 方法 A) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的通用方法， 向含有 300mg 核苷的 3.6mL 四氢呋喃溶液中， 加入 384μL N- 甲基咪唑， 随后加入含有 1.27g(2S)2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 3.6mL 四氢呋喃。Workup 和硅胶柱层析之

    [1276] 后， 得到 217mg 纯净的蛋白肽， 收率 30％， 为白色固体。HPLC ： tR ＝ 20.56、 20.89min。( 柱 ： varian Pursuit XRs5， C18， 150x4.6mm。该方法是 ： 线性梯度 H2O/ 乙腈 ： 30min 内， 乙腈从 0％至 100％。)

    [1281] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1282] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.14(m， 1H)， 8.00 和 7.97(2s， 1H)， 7.82(m， 1H)， 7.65(d， J ＝ 7.7， 1H)， 7.52-7.41(m， 3H)， 7.38-7.26(m， 2H)， 6.89-6.77(m， 2H)， 6.01 和 6.00(2s， 1H)， 5.09-4.95(m， 2H)， 4.67-4.57(m， 2H)， 4.36-4.22(m， 2H)， 4.08(m， 1H， 4.02 和 4.01(2s， 3H)， 1.29(d， J ＝ 7.1， 3H)， 0.97 和 0.95(2s， 3H).96102348712 A CN 102348731

    [1283] 31说明书67/198 页P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.21

    [1284] 实施例 15

    [1285] 1(S)- 苯 乙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯按照如下步骤合成 ：

    [1286] 步骤 1 ： (2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯采 用 合 成 萘 ( 氨 基 酸 酯 ) 氯 化 磷 酸 酯 的 一 般 方 法， 10g 的 (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2- 氨基丙酸酯的甲苯磺酸盐、 7.14g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 7.60mL 三乙胺、 和 120mL 二氯 甲烷， 合并得到 9.7g 萘 -1- 基 ((S)-1- 苯基乙氧基 -L- 丙氨酰基 ) 氯化磷酸酯， 收率 85％， 为浅黄色粗油。

    [1290] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1291] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.08(m， 1H， H8-napht)， 7.89(m， 1H， H5-napht)， 7.74(m， 1H， H4-napht)， 7.63-7.50(m， 3H， H7， H 6， H2-napht)， 7.49-7.27(m， 6H， H3-napht 和 phe)， 5.96(dd， J ＝ 6.7， 13.3， 0.5H， CH 酯 )， 5.93(dd， J ＝ 6.6， 13.2， 0.5H， CH 酯 )， 4.40-4.21(m， 2H， NH 和 CHα)， 1.61(d， J ＝ 6.6， 1.5H， CH3Ala)， 1.57(d， J ＝ 6.6， 1.5H， CH3Ala)， 1.52(d， J ＝ 6.8， 1.5H， CH3 酯 )， 1.49(d， J ＝ 6.8， 1.5H， CH3 酯 ). 31

    [1292] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.17， 7.86.

    [1293] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1294] 采用 ( 方法 A) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的通用方法， 向含有 1.5g(4.82mmol) 核 苷 的 30mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 1.9mL(24.10mmol)N- 甲 基 咪 唑， 随后加入含有 6.04g(14.5mmol)(2S)-((S)-1- 苯基乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 的 20mL 四氢呋喃。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 571mg 纯净的蛋白肽， 收率 17％， 为白 + 色固体。Ms(ES+)m/e ： 693.25(MH 、 100％ ) ； 精确质量 ： C33H38N6O9P1 calculated 693.2438， found 693.2468，

    [1295] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ：

    [1289] 97102348712 A CN 102348731

    [1296] 1说明书68/198 页H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.20-8.16(m， 1H)， 7.98， 7.94(2x s， 1H)， 7.92-7.85(m， 1H) ， 7.71-7.69(m ， 1H) ， 7.54-7.46(m ， 3H) ， 7.41-7.35(m ， 1H) ， 7.29-7.22(m ， 5H) ， 6.00 ， 5.99(2x s， 1H)， 5.74， 5.68(2x q， J ＝ 6.7Hz， 1H)， 4.65-4.59(m， 1H)， 4.57-4.55(m， 1H)， 4.36-4.28(m， 1H)， 4.28-4.21(m， 1H)， 4.06-4.01(m， 4H)， 1.40， 1.41(2x d， J ＝ 6.1Hz， 3H)， 1.26(2x s， 3H)， 0.98， 0.96(2x s， 3H). 31

    [1297] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.30， 4.27.

    [1298] 实施例 16

    [1299] (2S)-2， 3- 二 氢 -1H- 茚 -2- 基 -2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷 酰化氨基 ) 丙酸酯按照如下步骤合成 ：

    [1300] 步骤 1 ： (2S)-2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯

    [1302] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)-2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基 2- 氨基丙酸酯 (2.00g， 5.30mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (1.38g， 5.30mmol)、 含有三乙胺 (1.48mL， 10.60mmol) 的 30mL 干燥的二氯甲烷， 合并得到 1.48g (2S)-2， 3- 二 氢 -1H- 茚 -2- 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯， 收率 65％， 呈黄色稠油状。

    [1304] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1305] H NMR(500MHz ，CDCl 3 ) δ 8.08-8.05(m ， 1H ，H 8 -napht) ， 7.90-7.88(m ， 1H ， H5-napht)， 7.75(d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H4-napht)， 7.62-7.52(m， 3H， H7 ， H 6， H2-napht)， 7.45， 7.44(2x t， J ＝ 8.0Hz， 1H， H3-napht)， 7.29-7.20(m， 4H， 4x CH Ar 酯 )， 5.68-5.65， 5.63-5.59(2x m ， 1H ， CH 酯 ) ， 4.51 ， 4.25(2x bs ， 1H ， NH) ， 4.31-4.22(m ， 1H ， CHa) ， 3.42-3.32(m， 2H， 2x CH 酯 )， 3.11-3.00(m， 2H， 2x CH 酯 )， 1.54， 1.52(2x d， J ＝ 7.0Hz， 3H， CH3). 31

    [1306] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.16， 7.90

    [1303] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1308] 采用 ( 方法 B) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向含有 250mg(0.803mmol) 核 苷 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 1.61mL(1.61mmol) 叔 丁 基 氯 化 镁， 随后加入含有 690mg(1.60mmol)(2S)-2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸 酯的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 255mg 纯净的蛋白肽， 收率 45％， 为类白色固体。

    [1309] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1310] H NMR(500MHz ， CD 3OD) δ 8.17-8.10(m ， 1H ， H 8-napht) ， 7.95 ， 7.93(2x s ， 1H ， H8)7.81(d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H 5-napht)， 7.65， 7.63(2x d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H 4-napht)， 7.50-7.42(m， 3H， H7 ， H 6， H2-napht)， 7.37-7.33(m， 1H， H3-napht)， 7.15-7.08(m， 4H， 4x CH 酯 )， 6.00(s， 1H， H1’)， 5.34-5.31(m， 1H， CH 酯 )， 4.59-4.51(m， 2H， H5’)， 4.33-4.21(m， 2H， H3’ 和 H4’)， 4.02， 4.01(2xs， 3H， 6OCH3)， 3.98-3.95(m， 1H， H)， 3.20-3.01(m， 2H， 2x CH 酯 )， 2.85-2.78(m， 2H， 2x CH 酯 )， 1.26， 1.25(2x d， J ＝ 7.00Hz， 3H， CH3Ala)， 0.97， 0.94(2x s， 3H， 2’ -CH3). 13 3

    [1311] C NMR(126MHz ， CD 3OD) δ 174.97 ， 174.73(d ， J C-C-N-P ＝ 3.8 ， C ＝ O 酯 )， 2 162.73(C6)， 161.83(C2)， 154.53， 154.48(C4)， 147.97， 147.91(d， JC-O-P ＝ 3.8Hz， ipso Naph)， 141.52， 141.48， 141.36， 141.35， 139.28， 138.97， 136.24， 136.22， 128.87， 128.83， 127.88， 127.82， 127.81， 127.77， 127.52， 126.55， 126.51， 125.99， 125.60， 125.57， 125.52， 3 122.81， 122.75(Naph， C9-Naph， 2xipso 酯 和 4x CH 酯 )， 116.24， 16.22(d， JC-C-O-P ＝ 3.8， 3 C2-Naph)， 115.67， 115.65(C5)， 93.32， 93.11(C1’ )， 82.28， 82.08(2x d，JC-C-O-P ＝ 8.8， C4’ )， 79.98， 79.96(C2’ )， 77.73， 77.69(CH 酯 )， 74.91， 74.57(C3’ )， 67.97， 67.34(2x d， 2 JC-O-P ＝ 5.0， C5’ )， 54.36， 54.34(6OCH3)， 51.82， 51.71(C Ala)， 40.49， 40.44， 40.33， 40.25(2x CH2 酯 )， 20.63， 20.49(CH3Ala)， 26.9， 28.8， 28.7(3x CH3 酯 )20.4， 20.3(2’ CCH3)， 31

    [1312] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.26

    [1313] 实施例 17

    [1314] (2S)- 丙基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯按照如下 步骤合成 ：

    [1315] 步骤 1 ： (2S)- 丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯采用合成萘 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)- 丙基 2- 氨基丙酸酯 (2.00g， 11.93mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (3.11g， 11.93mmol)、 含有三乙胺 (3.32mL， 23.86mmol) 的 30mL 干二氯甲烷， 合并得到 1.48g (2S)- 丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯， 收率 82％， 呈澄清黄色稠油状。

    [1319] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1320] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.13-8.04(m， 1H， H8-napht)， 7.89， 7.88(2x d， J ＝ 7.5Hz， 1H， H5-napht)， 7.75(d， J ＝ 8.0Hz， 1H， H4-napht)， 7.64-7.55(m， 3H， H7， H6， H2-napht)， 7.45(t， J ＝ 8.0Hz， 1H， H3-napht)， 4.51， 4.25(2x bs， 1H， NH)， 4.28-4.27(m， 1H， CHa)， 4.15， 4.14(2x q， J ＝ 7.0Hz， 2H， O-CH2 酯 )， 1.76-1.65(m， 2H， O-CH2-CH2 酯 )， 1.59， 1.56(2x d， J ＝ 7.0Hz， 3H， CH3Ala)， 0.99， 0.96(2x t， J ＝ 6.5Hz， 3H， CH3 酯 ).

    [1318] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.29， 8.04

    [1322] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1323] 采用 ( 方法 B) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向含有 250mg(0.803mmol) 核 苷 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 1.61mL(1.61mmol) 叔 丁 基 氯 化 镁， 随后加入含有 571mg(1.60mmol)(2S)- 丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 5mL 四氢呋喃 溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 163mg 纯净的蛋白肽， 收率 32％， 为类白色固体。

    [1324] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1325] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.19-8.15(m， 1H， H8-naph)， 7.99， 7.97(2x s， 1H， H8)， 7.90-7.82(m， 1H， H5-napht)， 7.68， 7.65(2x d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H4-napht)， 7.54-7.45(m， 3H， H2， H7， H6-napht)， 7.38， 7.36(2x t， J ＝ 8.0Hz， 1H， H3-napht)， 6.04， 6.03(2x s， 1H， H1’)， 4.70-4.61(m， 2H， H5’)， 4.37-4.26(m， 2H， H3’ ， H4’)， 4.10-4.04(m， 1H， H)， 4.03(s， 3H， 6OCH3)， 3.95-3.84(m， 2H， OCH2 酯 )， 1.53-1.45(m， 2H， OCH2CH2 酯 )， 1.31(d， J ＝ 7.0Hz， 3H， CH3Ala)， 0.99， 0.97(2x s， 3H， 2’ CCH3)， 0.82(t， J ＝ 7.5Hz， 3H， CH3 酯 ).

    [1321] 3 C NMR(126MHz， CD3OD)δ175.13， 174.89(2x d， JC-C-N-P ＝ 5.0Hz， C ＝ O 酯 )， 2 162.75(C6)， 161.84(C2)， 156.56， 154.52(C4)， 148.02， 147.96(2xd，JC-O-P ＝ 3.0Hz， ipso Naph)， 139.33， 139.07(CH8)， 136.25， 136.22(C10-Naph)， 128.86， 128.82， (CH-napht)， 3 127.85， 127.76(2x d，JC-C-O-P ＝ 6.3Hz， C9-Naph)， 127.49， 126.55， 126.51， 125.97， 125.95， 3 122.81， 122.76(CH-Naph)， 116.24， 116.17(2x d，JC-C-O-P ＝ 4.5Hz， C2-Naph)， 115.67， 3 115.66(C5)， 93.32， 93.17(C1’ )， 82.30， 82.16(2x d，JC-C-O-P ＝ 8.8Hz， C4’ )， 80.04， 2 80.01(C2’ )， 74.94， 74.71(C3’ )， 68.00(OCH2 酯 )， 67.87， 67.54(d， JC-O-P ＝ 5.0Hz， C5’ )， 3 54.36(6OCH3)， 51.77， 51.17(C Ala)， 20.84， 20.62(2x d， JC-C-N-P ＝ 6.3Hz， CH3 Ala)， 20.46， 20.44(2’ CCH3)， 10.67， 10.65(CH3 酯 ). 31

    [1327] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.33， 4.22.31

    [1326] 13实施例 18

    [1329] (2S)-3， 3- 二 甲 基 丁 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯按照如下步骤合成 ：

    [1330] 步骤 1 ： (2S)-3， 3- 二甲基丁基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)-3， 3- 二甲基丁基 2- 氨 基丙酸酯 (2.00g， 5.79mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (1.51g， 5.79mmol)、 含有 三乙胺 (1.61mL， 11.58mmol) 的 30mL 干燥的二氯甲烷， 合并得到 2.10g(2S)-3， 3- 二甲基丁 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯， 收率 91％， 呈澄清黄色稠油状。

    [1334] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1335] H NMR(500MHz ，CDCl 3 ) δ 8.11 ， 8.09(2x d ，J ＝ 7.5Hz 1H ，H 8 -napht) ， 7.90-7.89(m， 1H， H5-napht)， 7.75(d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H4-napht)， 7.64-7.55(m， 3H， H6， H7， H2-napht)， 7.46(t， J ＝ 7.5Hz， 1H， H3-napht)， 4.56-4.45(m， 1H， NH)， 4.32-4.26(m， 2H， OCH2 酯 )， 4.25-4.21(m， 1H， CHa)， 1.64-1.60(m， 2H， CH2 酯 )， 1.58， 1.55(2x d， J ＝ 7.0Hz， CH3Ala)， 0.98， 0.96(2x s， 9H， 3x CH3 酯 ). 31

    [1336] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.46， 8.02

    [1337] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1338] 采用 ( 方法 A) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向含有 250mg(0.803mmol) 核 苷 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 1.61mL(1.61mmol) 叔 丁 基 氯 化 镁， 随后加入含有 640mg(1.60mmol)(2S)-3， 3- 二甲基丁基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 190mg 纯净的蛋白肽， 收率 35％， 为类 白色固体。

    [1339] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1340] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.20-8.16(m， 1H， H8-naph)， 8.00， 7.98(2x s， 1H， H8)，

    [1333] 7.85-7.81(m， 1H， H5-napht)， 7.66， 7.64(2x d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H4-napht)， 7.54-7.45(m， 3H， H2， H7， H6-napht)， 7.39， 7.37(2x t， J ＝ 8.0Hz， 1H， H3-napht)， 6.04， 6.03(2x s， 1H， H1’)， 4.71-4.61(m， 1H， H5’)， 4.36-4.27(m， 1H， H3’ ， H4’)， 4.03(s， 3H， 6OCH3)， 4.02-3.91(m， 2H， H.and OCH2 酯 )， 1.39-1.29(m， 5H， CH3Ala 和 OCH2CH2 酯 )， 0.99， 0.97(2x s， 3H， 2’ CCH3)， 0.82， 0.81(2x s， 9H， 3x CH3 酯 ). 13 3

    [1341] C NMR(126MHz， CD3OD)δ175.06， 174.80(2x d， JC-C-N-P ＝ 5.0Hz， C ＝ O 酯 )， 2 162.73(C6)， 161.86(C2)， 154.55， 154.51(C4)， 148.00， 147.95(d， JC-O-P ＝ 3.8Hz， ipso Naph) ， 139.36 ， 139.08(CH8) ， 136.27 ， 136.25(C10-Naph) ， 128.86 ， 128.80(CH-Naph) ， 3 127.88 ， 127.73(2x d ，J C-C-O-P ＝ 6.3Hz ， C9-Naph) ， 127.78 ， 127.76 ， 127.51 ， 126.51 ， 3 125.53 ， 125.98 ， 125.93 ， 122.83 ， 122.79(CH-Naph) ， 116.22 ， 116.09(2x d ，J C-C-O-P ＝ 3 3.8Hz， C2-Naph)， 115.67(C5)， 93.30， 93.16(C1’ )， 82.29， 82.15(2x d， JC-C-O-P ＝ 8.8Hz， 2 C4’ )， 80.06， 80.03(C2’ )， 74.90， 74.67(C3’ )， 67.97， 67.50(2x d， JC-O-P ＝ 5.0Hz， C5’ )， 64.01， 63.99(OCH2 酯 )， 54.37， 54.35(6OCH3)， 51.74， 51.71(C Ala)， 42.67， 42.60(OCH2CH2 3 酯 )， 30.08， 30.00(3x CH3 酯 )， 20.73， 20.52(2x d，JC-C-N-P ＝ 6.3Hz， CH3Ala)， 20.46， 20.44(2’ CCH3). 31

    [1342] P NMR(202MHz， CDCl3)δ4.33， 4.29.

    [1343] 实施例 19

    [1344] (2S)- 异丁基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯按照如下 步骤合成 ：

    [1345] 步骤 1 ： (2S)- 异丁基 2- 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯采用合成萘 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 2.5g(2S)- 异丁基 2- 氨基丙酸 酯的甲苯磺酸盐、 2.06g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 2.19mL 三乙胺和 50mL 二氯甲烷， 合并得到 (2S)- 异丁基 2- 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯， 呈粗产物浅黄色稠油状。粗产 物化合物在没有进一步纯化情况下使用。

    [1349] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ：

    [1348] 102102348712 A CN 102348731

    [1350] 31说明书73/198 页P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.27， 7.96

    [1351] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1352] 采用 ( 方法 B) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向含有 205mg 核苷的 4mL 四氢呋喃溶液中， 加入 1.31mL 叔丁基氯化镁， 随后加入含有 730mg(2S)- 异丁基 2- 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 2.6mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之 后， 得到 66mg 纯净的蛋白肽， 收率 16％。HPLC tR ＝ 27.61、 28.29min( 柱 ： varian Pursuit XRs5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： 30min 内， 水中甲醇线性梯度从 0％至 100％。

    [1353] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1354] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.21-8.14(m， 1H)， 7.98 和 7.95(2s， 1H)， 7.91-7.84(m， 1H) ， 7.73-7.66(m ， 1H) ， 7.56-7.36(m ， 4H) ， 6.02 和 5.98(2s ， 1H) ， 4.67-4.52(m ， 2H) ， 4.36-4.21(m， 2H)， 4.09-3.98(m， 4H)， 3.80-3.64(m， 2H)， 1.84-1.74(m， 1H)， 1.32(d， J ＝ 7.1， 3H)， 0.98 和 0.96(2s， 3H)， 0.87-0.82(m， 6H). 31

    [1355] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.30， 4.19

    [1356] 实施例 20

    [1357] 2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯按照如下步骤合成 ：

    [1358] 步骤 1 ： (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯采 用 合 成 萘 基 ( 氨 基 酸 酯 ) 氯 化 磷 酸 酯 的 一 般 方 法， 1.5g(2， 2- 二 甲 基 丙 氧 基 )-L- 丙氨酸的甲苯磺酸盐， 与 1.18g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 1.26mL 三乙胺和 20mL 二氯甲 烷合并， 得到 1.4g(2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯， 收率 81％， 呈粗产物浅黄色稠油状 ：

    [1362] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1363] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.11(m， 1H， H8-napht)， 7.89(m， 1H， H5-napht)， 7.76(m， 1H， H4-napht)， 7.66-7.53(m， 3H， H6， H7， H2-napht)， 7.46(td， J ＝ 2.0， 8.0， 1H， H3-napht)， 4.54(m， 0.5H， NH)， 4.46(m， 0.5H， NH)， 4.41-4.30(m， 1H， Hα)， 3.99-3.84(m， 2H， CH2 酯 )，

    [1361] 1.61(d， J ＝ 7.1， 1.5H， CH3ala)， 1.59(d， J ＝ 7.0， 1.5H， CH3ala)， 1.00(s， 4.5H， tBu)， 0.98(s， 4.5H， tBu). 31

    [1364] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.25， 7.96.

    [1365] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1366] 采用 ( 方法 A) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 在 -78 ℃， 向含有核苷 (6.0g， 19.29mmol) 的 50mL 无水四氢呋喃溶液中， 加入 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧 基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 (14.8g， 38.58mmol) 的溶液， 随后加入 N- 甲基咪唑 (7.65mL， 96.45mmol)。反应混合物室温下温热， 并搅拌过夜。标准 Workup 之后， 采用比例为 96 ∶ 4 的 CH2Cl2/MeOH， 经硅胶柱层析纯化粗产物， 得到 3.5g 类白色固体蛋白肽， 收率 27.5％。

    [1367] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1368] H NMR(200MHz， CDCl3)δ8.18-8.10(m， 1H)， 7.93(d， J ＝ 5.0Hz， 1H)， 7.87-7.62(m， 1H)， 7.65(t， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 7.52-7.31(m， 4H)， 5.96(d， J ＝ 3.0Hz， 1H)， 4.63-4.53(m， 2H)， 4.33-4.19(m， 2H)， 4.07-3.96(m， 1H)， 4.02(s， 3H)， 3.76-3.52(m， 2H)， 1.30(d， J ＝ 7.2Hz， 3H)， 0.95-0.91(2s， 3H)， 0.84-0.82(2s， 9H). 31

    [1369] P NMR(50MHz， CDCl3)δ5.37， 5.32.

    [1370] 改 进 合 成 2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [1371] 步骤 1 ： 制备 (S)- 新戊基 2-( 叔丁氧基甲酰胺基 ) 丙酸酯

    [1372] 在装有机械搅拌装置、 内部热电偶、 使用冰 / 盐冷却的冷水浴、 和氮气入口的 22L 三 口 烧 瓶 中 加 入 N- 叔 丁 氧 羰 基 -L- 丙 氨 酸 (900g， 4.75mol， 纯 度 等 级 99 ％， 产品 编 号 01322， Chem-Impex 公 司 ) 和 含 有 新 戊 醇 (502.4g， 5.70mol， 纯 度 等 级 99 ％， 产品 编 号 N7206， Aldrich 公 司 ) 的 9L 无 水 二 氯 甲 烷 溶 液。 向 该 混 合 物 溶 液 中， 加入单份 EDCI(1.37kg， 7.12mol， 1.5 当量， 产品编号 00050， Chem-Impex 公司 )， 随后 0 ℃下分批添 加 DMAP(58g， 0.475mmol， 纯度等级 99 ％， 产品编号 107700， Aldrich 公司 )。混合物在冰 浴中缓慢温热， 并在室温下搅拌 15 小时。用 TLC 监测反应进程 (Rf ＝ 0.4， 正己烷∶乙酸 乙酯 (85 ∶ 15)， 茚三酮染色 )。反应混合物用 2L 二氯甲烷稀释， 并依次用 2L 饱和 NaHCO3 溶液洗涤 2 次， 用 2L 盐水洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥 (EMD 级 )， 过滤， 减压下浓缩。 使用正己烷∶乙酸乙酯 (85 ∶ 15) 恒定梯度混合物， 经硅胶柱层析纯化 (4kg， Silicycle， SiliaFlash P60)， 真空浓缩后， 得到 903g(3.48mol， 74％ ) 化合物 2， 呈淡黄色油状。

    [1373] 步骤 2. 制备 (S)- 新戊基 2- 氨基丙酸酯对甲苯磺酸

    [1374] 转化反应在装有机械搅拌装置和内部热电偶的 22L 三口烧瓶中进行。向含有 (S)- 新戊基 2-( 叔丁氧基甲酰胺基 ) 丙酸酯 (900g， 3.47mol) 的 14L 乙酸乙酯的搅拌溶液 中加入 PTSA.H2O(660g， 3.47mol， 试剂级 98％， 产品编号 161993， Aldrich 公司 )， 65℃加热 10 个小时。 混合物被冷却至室温得到白色固体， 过滤之前， 在冰浴中冷却 30 分钟。 混合溶液 过滤， 真空炉中干燥 15 个小时 (40℃， Welch Model 2034， ca.10mmHg)， 得到 907g(2.74mol， 收率 79％ ) 的预期产物。

    [1375] 步骤 3 ： 制备萘 -1- 基二氯磷酸酯室温下， 在装有机械搅拌装置、 内部热电偶、 使用干冰 / 丙酮冷却的冷水浴、 附加 漏斗和氮气入口的 22L 三口烧瓶中加入含有 1- 萘酚 (780g， 5.41mol， 491g， 来自 Aldrich 公 司， 试剂级 99％， 产品编号 A11862) 的 10L MTBE。5 分钟内， 氮气压力下， 从另一个漏斗中 滴加入 POCl3(495mL， 5.41mol， ReagentPlus 99％， 产品编号 201170， Aldrich 公司 )( 注 意： 没有观察到发热现象 )。-25℃下， 向这种溶液 ( 内部温度 ) 缓慢加入三乙胺 (754mL， 5.41mol， 试剂级≥ 99.5％， 产品编号 471283， Aldrich 公司 )， 用时 1 小时 ( 注意 ： 观察到发 热现象 )， 滴加完成后， 移去冷浴。室温， 氮气压力下， 反应混合物被陈化 3 小时。用 3L 烧 结漏斗 ( 中等尺寸 ) 过滤三乙胺盐酸盐， 减压下， 在＜ 20℃的水浴中， 浓缩滤液得到所需产 物， 为透明的暗黄色油 (1219g， 收率 86.3％ )， 使用时无需进一步纯化。

    [1377] 步骤 4. 制备 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯

    [1378] 装有机械搅拌装置、 内部热电偶、 使用干冰 / 丙酮冷却的冷水浴、 附加漏斗和氮气 入口的 22L 三口烧瓶中， 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (1219g， 4.67mol) 和 (S)- 新戊基 2- 氨基丙 酸酯对甲苯磺酸 (1547g， 4.67mol) 悬浮在 15L 无水二氯甲烷中。25℃， 无水三乙胺 (1.3L， 9.34mmol， 试剂级≥ 99.5％， 产品编号 471283， Aldrich 公司 ) 被缓慢加入， 用时 1 小时。之 31 后， 反应混合物被加温至室温， 搅拌过夜， 用 P NMR 监测反应。反应完成后， 减压下除去溶 剂， 所得粗残留物用比例 1 ∶ 1 的乙酸乙酯 (2L)/ 正己烷 (2L) 使用短垫硅胶 (Silicycle， SiliaFlash P60， 3 英寸高， 漏斗 ： 3L 中等尺寸 ) 过滤， 并且使用乙酸乙酯 / 己烷 (3L ∶ 3L) 洗脱， 随后用乙酸乙酯 / 正己烷混合物 (1.5L ∶ 1.5L) 漂洗。一经浓缩， 用 3L 四氢呋喃稀 释黑油， 减压下再被浓缩， 得到 1700g( 收率 94％ ) 产品， 使用时不需进一步纯化。

    [1379] 步骤 5. 合成 (2S)- 异丁基 2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基 - 四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯

    [1380] 在装有机械搅拌装置、 内部热电偶、 冷浴、 附加漏斗和氮气入口的 22L 三口烧瓶 中， 向 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢 呋喃 -3， 4- 二醇 (450g， 1.45mol， 1.0 当量 ) 的溶液中， 氮气气氛下， 用时大于 45 分钟， 干 冰 / 丙酮冰浴， 缓慢加入含有 1.0M 叔丁基氯化镁的四氢呋喃溶液 (Aldrich 公司， 2.89L， 2.89mol， 2.0 当量 )。搅拌 30 分钟后， 所得反应混合物为白色悬浮液， 用时大于 40 分钟， 逐 滴加到含有 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 (1.11kg， 2.895mol， 2.0 当量 ) 的 1.6L 四氢呋喃溶液中。混合物被加温至室温， 搅拌过夜。用 TLC(DCM ∶ MeOH ＝ 97 ∶ 3， λ254nm， Rf ＝ 0.3， 参见下文典型的薄层色谱图 ) 和 LC/MS 监测反应进程。反应 混合物用冰浴冷却， 用时大于约 20 分钟， 逐滴加入 7L 饱和 NH4Cl 溶液逐滴终止反应， 剧烈 搅拌 20 分钟。反应混合物 ( 四氢呋喃层 ) 从 NH4Cl 水溶液中分离出来。水层用 3L 四氢呋 喃萃取。合并的有机层 ( 四氢呋喃 ) 用 2L 盐水漂洗， 用无水硫酸钠干燥， 在低于 39±1℃ 温度下， 减压下， 浓缩。1600g 粗产物用硅胶柱层析和 Biotage 色谱纯化。1600g 粗产物溶 于 1.2L 二氯甲烷被加载到装填硅胶 (13kg， Silicycle， SiliaFlash P60) 的玻璃柱 ( 高 11″ x 20″ ) 内， 用 300L 含有 1％ MeOH 的二氯甲烷至含有 4％ MeOH 的二氯甲烷的洗脱液 提纯， 收集馏分 (55x 4L 琥珀瓶 )， 得到三个馏分， 总计 730g。需要进一步提纯该材料。

    [1381] A 部分纯化 1 ： 用 Biotage( 柱 F75L， 800g) 再 次 提 纯 溶 液 在 300mL 的 第 一 批 A(140g)， 得到 92g 纯净产物。用含有 0.5％甲醇的 60L 二氯甲烷至含有 3％甲醇的 60L 二氯甲烷的混合物洗提， 收集馏分 (20x 1L 和 20x 2L 锥形瓶 )。HPLC 得到非对映异构体的比 例 68 ∶ 32。提纯之前， 粗混合物的非对映异构体比例约为 50 ∶ 50。

    [1382] B 部分纯化 2 ： 420g 主料 B 溶解于 1L 二氯甲烷再用 Biotage( 柱 F150M， 2.5kg) 提 纯， 得到 296g 纯净产物。用含有 0.5％甲醇的 200L 二氯甲烷至含有 3％甲醇的 200L 二氯 甲烷的混合物洗提， 收集馏分 (45x4L 小瓶 )。HPLC 得到非对映异构体的比例 49 ∶ 51。合 并不纯的馏分并在 “运行 3” 中一起提纯。

    [1383] C 部分纯化 2 ： 采用 50L 二氯甲烷， 用 Biotage(F75L， 800g) 再次提纯 500mL 溶解最 后一批 C(170g) 的二氯甲烷溶液。用含有 1％甲醇的二氯甲烷至含有 3％甲醇的二氯甲烷 的混合物洗提， 收集馏分 (45x4L 小瓶 )。遗憾的是， 收集的馏分未达到所需纯度。溶解在 600mL 二氯甲烷中的来自部分 1、 2 和 3 的所有被合并的不纯物质 ( 总量计 220g 粗产物 ) 装 载到具有硅胶 (11kg， Silicycle， SiliaFlash P60) 的玻璃柱 ( 高 11’ x 20’ ) 上。使用 含有 1％甲醇的 200L 二氯甲烷至含有 3％甲醇的 200L 二氯甲烷的洗提混合物， 得到 152g 纯净产物。通过 HPLC 测定非对映异构体比例是 41 ∶ 59。

    [1384] 很明显， 非对映异构体比例可通过选择正确色谱馏分来进行控制。

    [1385] 总之， 730g 粗产物的提纯运行提供了总计 540g 纯净产物。为除去痕量的二氯甲 烷， 540g 溶于 3L(x 2) 甲醇中， 然后在 20L 旋转蒸发烧瓶中蒸发。产物由 20L 旋转蒸发烧瓶 于 39℃ ±1℃下完全干燥 15 小时， 得到白色粉末状固体。产物放在玻璃托盘内在烘箱中干 燥 (3 天， 39℃ ±1℃， ＜ 5-10mmHg)， 直至恒重， 得到 517g(0.785mol， 54.3％， ＜ 2000ppm 甲 醇 ) 类白色固体。

    [1386] 发明领域
     该申请涉及新的核苷磷酰胺酯及其作为治疗病毒性疾病的药物的使用方法。这 类化合物是 RNA 依赖的 RNA 病毒复制的抑制剂， 具体地， 丙型肝炎病毒 NS5B 聚合酶的抑制 剂。作为丙型肝炎病毒复制的抑制剂， 这种化合物可有效治疗哺乳动物体内丙型肝炎病毒 感染。
     发明背景
     丙型肝炎病毒是影响动物和人类的 RNA 病毒的黄病毒家族成员之一。基因组是一 种单一 9.6 千碱基的 RNA 链， 并且由一个开放阅读框组成， 这个开放阅读框编码大约 3000 个氨基酸的多聚蛋白， 两侧 5′端和 3′端非翻译区 (5′ - 和 3′ -UTR)。多聚蛋白起到前 躯体的作用， 至少 10 个独立病毒蛋白是复制和组合子代病毒颗粒的关键。
     丙型肝炎病毒 (HCV) 感染是导致慢性肝病如肝硬化、 肝细胞癌的主要健康问题， 相当多的感染个体， 估计为世界人口的 2-15％。 根据美国疾病控制中心报告， 单美国就估有 计 450 万受感染人群。根据世界卫生组织， 全世界有 2 亿以上感染个体， 每年至少 3-4 百万 人被感染。一旦感染， 约 20％的人清除掉病毒， 而其余的人在其今后都携带丙型肝炎病毒。
     慢性感染个体的 10-20％最终发展成肝损伤肝硬化或肝癌。病毒疾病通过血液或 血制品、 污染针头、 或者性肠胃外传播， 以及通过受感染母亲或携带者母亲直接传播给其后 代。
     目前， 慢性丙型肝炎病毒 (HCV) 的标准治疗法是干扰素 α(IFN-α) 联合利巴韦 林， 需要至少六个 (6) 月的治疗。然而， 使用干扰素治疗丙型肝炎病毒 (HCV) 频繁发生相关 联的不良副作用如疲劳、 发热、 畏寒、 头痛、 肌痛、 关节痛、 轻度脱发、 精神影响、 病症相关的 自身免疫现象， 以及病症相关的甲状腺功能障碍。
     利巴韦林， 肌苷 5′ - 单磷酸脱氢酶 (IMPDH) 抑制剂， 提高了 IFN-α 在治疗丙型肝 炎病毒 (HCV) 的功效。尽管导入利巴韦林， 采用干扰素 -α 和利巴韦林的当前标准治疗法， 50％以上的患者没有消除病毒。目前为止， 慢性丙型肝炎的标准治疗法已经改变为联合聚 乙二醇化的干扰素 -α+ 利巴韦林。然而， 仍有一定数量的患者有显著的副作用， 主要与利 巴韦林有关。
     按照在当前推荐剂量治疗的 10％ -20％的患者中， 利巴韦林导致显著溶血， 该药 物具有致畸作用和胚胎毒性。即使最近进行改进， 相当部分的患者没有响应病毒载量持续 降低， 明显需要更有效的丙型肝炎病毒 (HCV) 感染的抗病毒疗法。
     多种其他途径被用于抗击病毒。 它们包括， 举例来说， 反义寡核苷酸或核酶用于抑 制丙型肝炎病毒 (HCV) 复制。此外， 低分子量化合物， 直接抑制丙型肝炎病毒 (HCV) 蛋白并且干扰病毒复制， 被视为控制丙型肝炎病毒 (HCV) 具有吸引力的解决方案。病毒靶之间， NS3/4A 蛋白酶 / 解旋酶和 NS5B RNA- 依赖的 RNA 聚合酶被认为最有前途的病毒靶点的新药 物。
     许 多 专 利 公 开 并 权 利 要 求 了 涉 及 CV NS5B 抑 制 剂 的 发 明。 举 例 来 说， WO2006/046039、 WO2006/046030 和 WO 2006/029912， 通过引述合并于本文中， 涉及四环吲 哚化合物及其制药用盐， 用于治疗或预防丙型肝炎病毒感染。 WO 2005/080399， 通过引述合 并于本文中， 涉及稠合杂四环化合物， 其制药用盐， 在辅助治疗丙型肝炎病毒 (HCV) 中作为 有效的聚合酶抑制剂。WO 2003007945， 通过引述合并于本文中， 涉及 HCVNS5B 抑制剂。进 一步， WO 2003010140， 通过引述合并于本文中， 涉及 RNA- 依赖的 RNA 聚合酶的特异性抑制 剂， 尤其是黄病毒 (flavivirida) 科家族里的病毒聚合酶， 更尤其是丙型肝炎聚合酶。WO 200204425， 通过引述合并于本文中， 涉及 RNA- 依赖的 RNA 聚合酶的特异性抑制剂， 尤其 是黄病毒 (flavivirida) 科家族里的病毒聚合酶， 更尤其是丙型肝炎的 NS5B 聚合酶。WO 200147883， 通过引述合并于本文中， 涉及特异性稠环化合物或者其类似化合物或者其制药 用盐。 这种化合物及其盐具有抗 -HCV( 丙型肝炎病毒 ) 活性， 由于其抗丙型肝炎病毒 (HCV) 聚合酶的抑制活性， 因此可用作治疗或预防丙型肝炎的有效药剂。 然而， 鉴于世界流行的丙型肝炎病毒和黄病毒科家族病毒的其它成员， 进一步由 于有限的治疗方案， 强烈需要新的有效药物用于治疗由这些病毒引发的感染。
    发明内容 本发明关注的是有效治疗至少部分由黄病毒科家族中的一种病毒介导的哺乳动 物体内病毒感染的新型化合物。 根据一些实施方案， 本发明提供了具有下列结构的通式 (I) 的新型化合物 ：
    
    
    
    
    其中 Ar 选自 苯基、 萘基、
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苄基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自氢、 苯基、 芳基、 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢、 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基、 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基、 任选由一个或多个卤素、
     C1-C6 烷基、 或者
     C1-C6 烷氧基取代的苯基 ；
     R6 选自
     C1-C10 烷基、
     C3-C8 环烷基、
     C3-C8 环烷基 - 烷基 -、
     任选由 C1-C6 烷基、
     C1-C6 烷氧基、 和
     卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、
     茚满基和
     杂环烷基 ；
     以及其制药用盐。
     根据其他实施方案， 本发明延伸至一种药物组合物， 其包括通式 I 的一种或多种 化合物和一种药物用载体、 赋形剂或稀释剂。 药物用载体、 赋形剂或稀释剂可能是纯净的无 菌水、 磷酸盐缓冲生理盐水或葡萄糖水溶液。此外， 通式 I 所反映的化合物包括其多晶型。
     还提供了用于治疗哺乳动物病毒感染的方法， 哺乳动物至少部分由黄病毒家族中 的一种病毒介导， 其中即时方法包括对已确诊为上述病毒感染的哺乳动物给药包括通式 I 化合物的一种药物组合物。
     还提供了用于治疗人类或动物患者病毒感染的方法， 人或动物患者至少部分由黄 病毒家族中的一种病毒介导， 其中即时方法包括对已确诊为病毒感染的人或动物患者给药 包括通式 I 化合物的一种药物组合物。
     在一个实施方案中， 该病毒是丙型肝炎病毒 (HCV)。本方法进一步延伸至联合治 疗， 包括施药治疗有效量的抗丙型肝炎病毒的一种或多种药物。这种抗丙型肝炎病毒的有 效药物可能包括单独给药或与病毒唑或 levovirin 联合给药的干扰素 -α 或聚乙二醇化干 扰素 -α。
     如下所述， 提供了根据本发明的其他化合物， 预期这些另外的化合物在黄病毒家 族感染的治疗方法中也有效， 包括由丙型肝炎病毒引起的感染。 方法、 药物组合物和联合治 疗， 如本文中提到公式 I 那些化合物， 也与本文提到的附加化合物相关。 具体实施方式
     本发明涉及化学化合物、 其制备方法和在治疗病毒感染的使用方法， 尤其是治疗 哺乳动物病毒感染。尤其是， 虽然不完全是， 本发明涉及作为有效抗丙型肝炎病毒 (HCV) 药 物的化学化合物。
     具体地讲， 本发明描述了某些核苷类芳基磷酰胺酯， 其合成方法， 及其作为 RNA 依 赖的 RNA 病毒聚合酶抑制剂的前药的应用， 尤其作为丙型肝炎病毒 (HCV)NS5-B 聚合酶抑制 剂的前药的应用， 作为丙型肝炎病毒复制抑制剂的前药的应用， 用于治疗丙型肝炎感染。
     本发明的目的是提供有效治疗哺乳动物病毒感染的新型化合物， 具体用于治疗哺 乳动物丙型肝炎病毒感染。根据本发明的一个实施方案， 提供了一种通式 (I) 化合物 ：
    
    
    
    其中 Ar 选自 苯基、 萘基、
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的一些基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苯甲基、 取代的苯甲基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 - 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自氢、苯基、 芳基、 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢， 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 (C1-C6) 烷基、 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第二个实施方案， 提供了一种上述通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 萘基、
    
    任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苄基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自氢、 苯基、 芳基， 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢， 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第三个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自苯基、 萘基、
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 为氧 ； R1 选自 C1-C6 烷基、 苯甲基、 取代的苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自 氢、 苯基、 芳基， 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢、 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基、 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者C1-C6 烷氧基取代的苄基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第四个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 苯基、 萘基、
    
    
    
    
    
    
    
    其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基， R2 选自 氢、苯基、 芳基、 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢， 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基， 苯基， 其任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -， 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第五个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 苯基、 萘基、
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苄基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 为氢， R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢， 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、 茚满基和杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第六个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 苯基、 萘基、
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苄基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自 氢、 苯基、 芳基， 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 为羟基 ； R4 和 R5 独立选自氢、 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基， 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第七个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 苯基、 萘基、
    
    其任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苄基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自 氢、 苯基、 芳基、 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢、 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基、 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -、 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第八个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 苯基、萘基、
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； R1 选自 C1-C6 烷基、 苄基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R2 选自 氢、 苯基、 芳基、 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 选自 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基、 和 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ；R5 为氢 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 C3-C8 环烷基、 C3-C8 环烷基 - 烷基 -、 任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 和 卤素取代的苯基 (C1-C6) 烷基 -， 茚满基和 杂环烷基 ； 以及其制药用盐。 根据本发明的第九个实施方案， 提供了一种通式 (I) 的化合物 ： 其中 Ar 选自 苯基， 萘基，
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    任选由 C1-C6 烷基、 C1-C6 烷氧基、 双 (C1-C6) 烷氨基或 C1-C6 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 取代的任一基团 ； X 选自 S、 NH 和 O ； 1 R 选自 C1-C6 烷基、 苯基、 取代苄基 ； 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和C1-C6 烷基取代 ； R2 选自 氢、 苯基、 芳基， 和 芳基 (C0-C6) 烷基 -， 其中芳基任选由卤素、 C1-C6 烷氧基、 和 C1-C6 烷基取代 ； R3 选自氢和羟基 ； R4 和 R5 独立选自 氢、 任选由烷硫基取代的 C1-C6 烷基、 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苄基 ； 任选由一个或多个 卤素、 C1-C6 烷基、 或者 C1-C6 烷氧基取代的苯基 ； R6 选自 C1-C10 烷基、 苯基 (C1-C6) 烷基 -， 任选由卤素取代、 和 杂环烷基取代 ； 以及其制药用盐。 每种情况下， 上述化合物具有多晶型和磷非对映异构体。 根据本发明， 提供了上述化合物的下列具体实施方案 ：
    
    根据本发明， 提供了上述化合物的下列具体实施方案 ：
     2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟 基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸苯甲酯 ；
     1(S)- 苯 乙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 甲基 2-(6-((((2R， -3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )((S)-1-( 新戊氧基 )-1- 氧丙基 -2- 基氨基 ) 磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙酸酯 ；
     2， 4- 二 氟 苄 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟 基 -4- 甲 基 四 氢 呋 喃 -2- 基 ) 甲 氧 基 ( 萘 -1- 氧 基 ) 磷 酰 化 氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4-( 甲硫基 ) 丁酸酯 ；
     (2S)- 苄基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯 酯；
     2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 乙 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     1(S)- 苯 乙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟 基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸苯甲酯 ；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     1(S)- 苯 乙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 丙基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-3， 3- 二 甲 基 丁 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 异丁基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (S)-P 2， 2- 二甲基丙基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (R)-P 2， 2- 二甲基丙基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 异丙基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 环戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 环己基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；(2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 - 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(6-((S)-1- 甲氧基 -1- 氧 丙基 -2- 基 ) 萘 -2- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 甲基 2-(6-((((2R， -3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )((S)-1-( 新戊氧基 )-1- 氧丙基 -2- 基氨基 ) 磷酰氧基 ) 萘 -2- 基氧基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 甲基 2-(6-((((2R， -3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )((S)-1- 氧代 -1-( 四氢 -2H- 吡喃 -4- 氧基 ) 丙烷 -2- 基氨基 ) 磷酰氧基 ) 萘 -2- 基氧基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， -3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 苯氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(6-((S)-1- 甲氧基 -1- 氧丙基 -2- 基 ) 萘 -2- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸 酯；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苯 甲 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；(2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸 酯；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -8- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸 酯；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R))-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(2- 甲基萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲 基丁酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(3- 叔丁基萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲 基丁酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     苄基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     2， 4- 二 氟 苯 甲 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)-((S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟 基 -4- 甲 基 四 氢 呋 喃 -2- 基 ) 甲 氧 基 )( 萘 -1- 基 氧 基 ) 磷 酰 胺 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)-((S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 甲基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 环丙甲基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸 酯；
     (2S)- 环丁酯 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸环戊酯 ；
     2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟 基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸环己酯 ；
     (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 苄基 2-(((((2R， 3R， 4R-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯酯 ；
     (2S)- 甲基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯酯 ；
     (2S)- 丙基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯 酯；
     (2S)- 环己基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 乙酸苯酯 ；
     (2S)- 苄基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-2， 4- 二 氟 苯 甲 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 乙 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2-((((2R， -3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 乙 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 乙 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 异丙基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 乙 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6-( 甲氨基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6-( 甲 氨 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6-( 甲 氨 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 苄 氨 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6-( 苯 乙 基 氨 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6-( 甲 硫 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6-( 甲硫基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6-( 甲 硫 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 苄基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-4- 羟基 -4- 甲 基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-4- 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙 酸酯 ；
     (2S)- 新 戊 基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-4- 羟 基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     (2S)- 环 己 基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-4- 羟 基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ；
     苄基 (2S)- 苄基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-4- 羟 基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘基 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ； 和
     (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2-(4- 氟 苄 基 氨 基 )-6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ；
     再次， 前述特定化合物的每种情况下， 假定本发明包括多晶型和磷非对映异构体。
     在本发明的另一个实施方案中， 提供了下列另一个化合物， 假定在如本文提到的 本发明所述治疗方法中有效 ：
    
    
    和其制药用盐。 上述通式 II-VI 的化合物， 也被认为是根据本发明具有抗病毒活性的新型化合物， 因此在本发明的抗病毒方法中是有效的， 还可作为如上面所述通式 (I) 化合物制备的 有效中间体。这些化合物还包括其多晶型和非对映异构体， 可按照本文中阐述的相同方式 制成药物组合物。
     在本发明的进一步实施方案中， 另一个化合物提供如下 ：
     通式 (XL) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构 ：
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    其中 X、 R1、 R2、 R3、 和 R6 如通式 (I) 所描述的。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XL) 化合物， 其中 ： 6 R 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 X、 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。下列通式 (XLI) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构 ：
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    (XLI) 其中 Ar、 X、 R1、 R2、 R3、 和 R6 如上文通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLI) 化合物， 其中 ： Ar 是选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基、 喹啉 -8- 基， 和 苯基 ； 并且 X、 R1、 R2、 R3、 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLI) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 是选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 )- 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基， 2- 萘基， 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基、 喹啉 -8- 基， 和 苯基 ； R6 选自 苄基、(S)-1-(2- 溴 )- 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 X、 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLII) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构 ：
    
    
    
    
    
    
    
    其中 Ar、 X、 R1、 R2、 R3、 和 R6 如通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLII) 化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 -3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 X、 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 为 1- 萘基 ； 并且 1 2 3 X、 R、 R、 R、 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 为 1- 萘基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 X、 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLIII) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构：
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    其中 Ar、 X、 R1、 R2、 R3、 和 R6 如通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLIII) 化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 -3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、(S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； X、 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLIII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 为 1- 萘基 ； 并且 1 2 3 X、 R、 R、 R、 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLIII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 为 1- 萘基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基， 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 X、 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLIV) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构 ：
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    其中 Ar、 和 R1-R6 如通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLIV) 化合物， 其中 ： 4 5 R 和 R 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基、 和 苯基 ； Ar、 R1、 R2、 R3、 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLIV) 的另一个化合物， 其中 ： 1 R 为乙基 ； 并且 Ar、 R2-R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLIV) 的另一个化合物， 其中 ： 1 R 为乙基 ； Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 -3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基、 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基， 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLV) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构 ：
    
    其中 Ar、 和 R1-R6 如通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLIV) 化合物， 其中 ：Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLVI) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构 ：
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    其中 Ar、 和 R1-R6 如通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLVI) 化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 R1、 R2、 和 R3 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLVII) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构：
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    其中 Ar、 X、 和 R1、 R2、 R4、 R5 和 R6 如通式 (I) 所述。 在另一个实施方案中， 提供了通式 (XLVII) 化合物， 其中 ： 4 5 R 和 R 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； 和 Ar、 R1、 R2、 R3 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLVII) 的另一个化合物， 其中 ： X 为氧 ； 并且 Ar、 R1、 R2、 R4、 R5 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLVII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R1 为甲基 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； 和 R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 X 和 R2 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLVII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； X 为氧 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 1 2 R 和 R 如通式 (I) 所述。 此外， 提供了通式 (XLVII) 的另一个化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； X 为氧 ； R1 为甲基 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、 正丙基、 3， 3- 二甲基丁基、 2- 甲基丙基、 2， 2- 二甲基丙基、 异丙基、 环丙甲基、 环丁基、 环戊基、 环己基、 和 四氢吡喃 -4- 基 ； 并且 R2 如通式 (I) 所述。 下列通式 (XLVIII) 化合物也作为依据本发明所述的抗病毒化合物， 具有下列结构：[1016][1017] [1018] [1019] [1020] [1021] [1022] [1023] [1024] [1025] [1026] [1027] [1028] [1029] [1030] [1031] [1032] [1033] [1034] [1035] [1036] [1037] [1038] [1039] [1040] [1041] [1042] [1043] [1044] [1045] [1046]其中， R2 不是氢 ； 并且 Ar、 R1、 R3、 R4、 R5 和 R6 如通式 (I) 所述。 此外， 也提供了通式 (XLVIII) 化合物， 其中 ： Ar 选自 (S)-2-(3- 甲氧基 -3- 丁氧 -2- 基 ) 萘 -6- 基、 2- 甲基萘 -1- 基、 3- 叔丁基萘 -1- 基、 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 基、 1- 萘基、 2- 萘基、 喹啉 -5- 基、 喹啉 -6- 基 喹啉 -8- 基、 和 苯基 ； R1 为甲基 ； R2 不是氢 ； R4 和 R5 独立选自氢、 甲基、 异丙基、 2- 硫代甲乙基、 2- 甲丙基、 1- 甲丙基， 和 苯基 ； R6 选自 苄基、 (S)-1-(2- 溴 ) 苄基、 2， 4- 二氟苄基、 (S)-1- 苯乙基、 (S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基、 (S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基、 2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基、 甲基、正丙基、 [1048] 3， 3- 二甲基丁基、 [1049] 2- 甲基丙基、 [1050] 2， 2- 二甲基丙基、 [1051] 异丙基、 [1052] 环丙甲基、 [1053] 环丁基、 [1054] 环戊基、 [1055] 环己基、 和 [1056] 四氢吡喃 -4- 基 ； [1057] 并且 [1058] R3 如通式 (I) 所述。 [1059] 再次， 上述化合物的每种情况下， 假定本发明包括其多晶型和磷非对映异构体。 此 外， 上述化合物在上文阐述的药物组合物中有效， 并且这些化合物和组合物在抗病毒药物 治疗方法中非常有效。 [1060] 依据本发明的另一个实施方案， 根据上述通式 (I) 的化合物可以包括不同的磷非 对映异构体， 如下列实施例中阐述的 ：[1061]依据本发明的另一个实施方案， 化合物也可以为包括上文阐述的两种磷非对映异 构体的混合物， 其比例为 1 ∶ 99 至 99 ∶ 1 之间的任何比例， 例如 10 ∶ 90、 25 ∶ 75、 40 ∶ 60、 50 ∶ 50、 60 ∶ 40、 75 ∶ 25、 90 ∶ 10， 等等。在上文的实施例中， 混合物将包括所需百分比 的 (S)-P 形式和剩余百分率的 (R)-P 形式。[1062]根据本发明的其他实施方案， 提供了黄病毒科病毒家族病毒感染的治疗方法中使 用的具有上述通式 (I-VI) 的化合物， 举例来说， 丙型肝炎病毒治疗。根据本发明的其他实 施方案， 提供了一种药物组合物， 其包括与制药用载体、 稀释剂或赋形剂组合的通式 (I-VI) 化合物。 [1064] 依据本发明所述的化合物令人惊讶地被发现增强了抗病毒活性。尤其是， 依据本 发明所述的化合物已被发现增强了丙型肝炎病毒的效力。此外， 依据本发明所述的化合物 令人惊讶地发现增强了其在啮齿类动物血浆中的稳定性。尤其是， 根据本发明所述的化合 物已被发现在小鼠血浆中具有超过 4 个小时的稳定性。 [1065] 定义 [1066] 本文所使用的术语 “烷基” 是指直链或支链饱和单价环状或无环烃基， 具有规定数[1063] 量的碳原子 ( 或不指明， 无环烃基优选具有 1-20 个碳原子， 更有选具有 1-6 个碳原子， 更优 选具有 1-4 个碳原子， 环烷基优选具有 3-20 个碳原子， 优选具有 3-10 个碳原子， 更优选具 有 3-7 个碳原子 )， 任选被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基独立选自上文阐述的 基团。 通过非限制性的实施例， 适宜的烷基包括甲基、 乙基、 丙基、 丁基、 戊基、 己基、 辛基、 壬 基、 异丙基、 2- 丁基、 环丙基、 环己基、 环戊基和十二烷基。术语 “C3-C8 环烷基” 是指包括从 约 3 至 8 个碳原子的环烷基。术语 “C3-C8 环烷基 - 烷基” 是指由包括约 3 至 8 个碳原子的 环烷基取代的无环烷基。 [1067] 本文所使用的术语 “烯基” 是指直链或支链不饱和单价无环或环状烃基， 具有一个 或多个 C ＝ C 双键， 并具有规定数量的碳原子 ( 或不指明， 无环烯基优选具有 2-20 个碳原 子， 更优选具有 2-6 个碳原子， 更优选具有 2-4 个碳原子， 并且环状烯基优选具有 4-20 个碳 原子， 更优选具有 4-6 个碳原子 )， 任选被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基独立 选自上文阐述的基团。 通过非限制性的实施例， 适宜的烯基包括乙烯基、 丙烯基、 丁烯基、 戊 烯基和己烯基。 [1068] 本文所使用的术语 “炔基” 是指有直链或支链不饱和单价无环或环状烃基， 具有一 个或多个 C/C 三键， 并具有指明数量的碳原子 ( 或不指明， 非环状炔基优选具有 2-20 个碳 原子， 更优选具有 2-6 个碳原子， 更优选具有 2-4 个碳原子， 并且环状炔基优选具有 7-20 个 碳原子， 更优选具有 8-20 个碳原子 )， 任选被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基独 立选自上文阐述的基团。 [1069] 本文所使用的术语 “烷氧基” 或 “烷氧基” 是指烷基 -O-， 烷基如上述定义， 烷基可 任选被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基如上文阐述的烷基。通过非限制性的实 施例， 适宜的烷氧基包括甲氧基、 乙氧基、 正丙氧基、 异丙氧基、 正丁氧基、 叔丁氧基、 仲丁氧 基、 正戊氧基， 正己氧基和 1， 2- 二甲基丁氧基。术语 “环烷氧基” 是指环烷基 -O-， 其中环烷 基如上述定义， 并且环烷基可能任选被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基如上文 阐述的烷基。 [1070] 本文所使用的术语 “烷硫基” 是指烷基 -S-， 烷基如是上文定义， 烷基可任选被一 个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基如上文阐述的烷基。 通过非限制性的实施例， 适宜 的烷硫基包括甲硫基、 乙硫基、 正丙硫基、 异丙硫基、 正丁硫基、 叔丁硫基、 仲丁硫基、 正戊硫 基， 正己氧基和 1， 2- 二甲基丁硫基。 [1071] 本文所使用的术语 “芳氧基” 是指芳基 -O-， 芳基如下文定义， 芳基可任选被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基如上文阐述的芳基。 [1072] 本文所使用的术语 “烷氧基烷基” 是指具有烷氧基取代基的烷基。通过烷基键合。 烷基和烷氧基分别如本文所定义的烷基和烷氧基。 烷氧基和烷基可分别被一个、 两个、 三个 或多个取代基取代， 取代基如上文阐述的烷基定义。 [1073] 本文所使用的术语 “烷硫烷基” 是指具有烷硫基取代基的烷基。通过烷基键合。烷 基和烷硫基分别如本文所定义的烷基和烷硫基。 烷硫基和烷基可分别被一个、 两个、 三个或 多个取代基取代， 取代基如上文阐述的烷基定义。 [1074] 本文所用的术语 “烷氧基芳基” 是指具有烷氧基取代基的芳基。通过烷基键合。烷 氧基和芳基分别如本文所定义的烷氧基和芳基。 烷氧基和芳基可分别被一个、 两个、 三个或 多个取代基取代， 取代基如上文定义的烷氧基和芳基的定义。本文所使用的术语 “环烷基芳基” 是指具有环烷氧基取代基的芳基。通过芳基键 合。环烷基和芳基分别如本文所定义的环烷基和芳基。 [1076] 本文所使用的术语 “芳基 (C1-C6) 烷基 -” 是指在任何碳原子上被芳基取代的 C1-C6 烷基。通过芳基键合。芳基和烷基分别如本文所定义的芳基和烷基。通过非限制性的实 施例， 适宜的芳基 (C1-C6) 烷基 - 包括苄基、 1- 苯乙基、 3- 苯丙基、 4- 氯苄基、 4- 氟苄基、 2， 4- 二氟苄基和类似基团。 [1077] 本文所使用的术语 “烷基羧基 (C1-C6) 烷基 -” 是指在任何碳原子上被烷基羧基 [ 烷基 -C( ＝ O)O-] 取代的 C1-C6 烷基。烷基如上文定义。通过非限制性的实施例， 适宜的 烷基羧基 (C1-C6) 烷基 - 包括乙酰氧基甲基 [CH3C( ＝ O)O-CH2-]、 丙酰氧基 [CH3CH2C( ＝ O) O-CH2CH2-]、 新戊氧基丙基 [(CH3)3CCH2C( ＝ O)O-CH2CH2CH2-] 和类似基团。 [1078] 环烷基和芳基可分别被一个、 两个、 三个或多个取代基取代， 取代基如上文阐述的 烷基和芳基定义。 [1079] 本文中所使用的术语 “芳基” ， 是指具有 1、 2、 3、 4、 5、 6 个环的单价不饱和芳香碳 环自由基， 优选 1、 2 或 3 个环， 可能是稠合或是双环的。芳基可任选由如上文阐述的任选 取代基的 1 个、 2 个、 3 个或多个取代基取代， 任选取代基可能在芳基上。优选的芳基是 ： 含 有 6 个碳原子的芳香单环 ； 包含 7、 8、 9 或 10 个碳原子的芳香双环体系或芳香稠环体统 ； 或 含有 10、 11、 12、 13 或 14 个碳原子的芳香三环系统。芳基的非限制性实施例包括苯基和萘 基。这些化合物可能包括取代基， 优选独立选自羟基 (-OH)、 酰基 (R′ -C( ＝ O))、 酰氧基 (R ′ -C(O)-O-)、 硝基 (-NO2)、 氨基 (-NH2)、 羧基 (-COOH)、 氰基 (-CN)、 C1-C6 单烷基氨基、 C1-C6 二烷基氨基、 硫基、 氯、 溴、 氟、 碘、 SO3H、 -SH、 -SR′， 其中 R′独立选自卤素、 C1-C6 烷氧 基、 和 C1-C6 烷基。 [1080] 本文所使用的术语 “杂环烷基” 是指饱和的或部分不饱和的杂环体统， 具有 1、 2、 3、 4、 5、 6 个环， 优选具有 1 个、 2 个或 3 个环， 可能为稠合的或是双环的， 在环内或多环内包含 至少一个成员选自 N、 O 和 S 组成的组。杂环烷基之前分别采用前置式 “C5-C20” 或 “C5-C10” ， 是指 5 至 20 元环或 5 至 10 元环体系， 这些成员中至少一个成员选自 N、 O 和 S 组成的组。 优选的杂环烷基体系是 ： 具有 5 元的单环体系， 其中至少一员是 N、 O 和 S， 可任选包含一个 附加的氧原子或 1 个、 2 个或 3 个附加氮原子 ； 具有六个成员的单环， 其中 1 个、 2 个或 3 个 成员是 N 或 O 原子 ； 具有九个成员的双环系统， 其中至少一个成员是 N、 O 或 S 原子， 可以任 选包含 1 个、 2 个或 3 个附加的氮原子 ； 或具有十个成员的双环系统， 其中 1 个、 2 个或 3 个 成员是氮原子。通过非限制性的实施例， 适宜的杂环烷基包括四氢呋喃基、 四氢吡喃基、 吡 咯烷基、 吗啉基、 四氢噻喃基、 硫代吗啉基和哌啶基。[1081]当自由基为一种结构， 例如 如本文中使用的术语 “茚满基” 是指稠合双环自由基结构， 其中自由基[1082]与分子剩余部分的连接点在任何可用的非芳香族碳原子上。 [1083] 上文描述的 “杂环烷基” 环系统的碳原子和 / 或杂原子可能由一个或多个杂原子 在环上被取代。环 ( 多个环 ) 由一个或多个杂原子取代， 杂原子取代基选自氧、 氮、 硫和卤 素 ( 氟、 氯、 溴和碘 )。环 ( 多个环 ) 由一个或多个杂原子取代， 优选有选自氧、 氮和 / 或卤素组成组的 1 个、 2 个、 3 个或 4 个杂原子取代。优选取代基独立选自羟基、 酰基、 酰氧基、 硝基、 氨基、 SO3H、 SH、 SR′， 其中 R’ 独立选自与 R 相同的基团 ； 羧基、 氰基、 (C1-C6) 烷氨基、 (C1-C6) 二烷基氨基、 巯基、 氯、 溴、 氟和碘。 [1084] 此外， 本发明的化合物包含一个或多个手性中心。因此， 必要时， 这种化合物可以 制备成纯净的立体异构体或分离成纯净的立体异构体， 例如， 个体对映异构体或非对映异 构体， 或富集立体异构体的混合物。所有这些立体异构体 ( 和富集立体异构体的混合物 ) 包括在本发明的范围内。纯净立体异构体 ( 和富集立体异构体的混合物 )， 可被制备， 举例 来说， 采用本领域众所周知的光学活性起始原料或立体选择性试剂。 或者， 这种化合物的外 消旋混合物可以被分离， 举例来说， 使用手性柱色谱法、 手性解析试剂和类似方法。 [1085] 本发明的化合物可能包含一个或多个不对称中心， 根据所需的多种取代基的位置 和性质而定。不对称碳原子或磷原子可能会存在于 (R) 或 (S) 构型中或 (R， S) 构型中。在 某些情况下， 不对称也可能存在， 由于围绕给定化学键限制性旋转， 举例来说， 邻近指定化 合物的两个取代芳环的中心化学键。环上的取代基也可能以顺式或反式形式存在， 双键上 取代基可以 Z 或 E 形式存在。所有这些构型 ( 包括对映异构体和非对映异构体 ) 希望包括 在本发明的范围内。优选的化合物是具有本发明化合物绝对构型内的那些， 产生更理想的 生物活性。本发明化合物的分离、 纯化或部分纯化的异构体或外消旋混合物也包括在本发 明的范围内。 这类化合物可以制备成纯净立体异构体或分离成纯净立体异构体， 例如， 个体 对映异构体或非对映异构体， 或富集立体异构体的混合物。所有这类立体异构体 ( 和富集 立体异构体的混合物 ) 包括在本发明的范围内。纯净立体异构体 ( 或富集立体异构体的混 合物 )， 可被制备， 例如， 使用本领域众所周知的光学活性的起始原料或立体选择性试剂。 或 者， 这类化合物的外消旋混合物可以被分离， 例如， 使用手性柱色谱、 手性解析试剂和类似 方法， 在下面试验实施例中示例。 [1086] 术语 “制药用盐” ， 是指化合物的制药用盐， 盐源自本领域众所周知的多种有机和 无机反离子， 包括， 仅作为实施例， 钠、 钾、 钙、 镁、 铵、 四烷基铵基， 和类似盐 ； 当分子中含有 碱性官能团时， 有机酸或无机酸的盐， 如盐酸盐、 氢溴酸盐、 酒石酸盐、 甲磺酸盐、 醋酸盐、 马 来酸盐、 草酸盐和类似酸的盐。 [1087] 术语 “制药用部分盐” 包括在术语 “制药用盐” ， 是指具有取代基的化合物， 该取代 基能够具有一个以上形成盐的基团， 但小于实际形成盐的这种基团最大数量。 举例来说， 二 膦酸基可以形成多元化的盐， 如果只有部分电离， 得到的基团在本文中有时也称为局部的 盐。应了解， 在上文定义的所有取代基中， 聚合物被另一些取代基取代 ( 例如， 取代的芳基 具有作为取代基的被取代芳基， 其本身就是被一个取代芳基取代 ) 不是针对本文中包含的 那些取代基。在这种情况下， 这种取代基的最大数目为 3。这就是说， 上文定义的每一个受 到制约， 举例来说， 取代的芳基限于 - 取代芳基 -( 取代芳基 )- 取代芳基。同样地， 应了解， 上述定义目的不是包括不允许的取代模式 ( 例如， 5 个氟基或侧基于烯基或炔基不饱和碳 原子的羟基取代的甲基 )。这种不允许取代模式是专业人员众所周知的。 [1088] 术语 “多晶型” 是指任何多晶型物， 通式 (I) 化合物可以存在的多晶型物， 本领域 专业人员认可的。 如本领域中周知的， 多晶型是化合物结晶成一种以上不同的结晶或 “多晶 型” 种类的能力。 “多晶型” 是一种具有至少有两种不同排列的化合物的固体结晶相， 或者 固态化合物分子的多晶型物。任何给定化合物的多晶型用同一化学通式或组合物定义， 像两种不同化合物的晶体结构一样在化学结构上截然不同。 [1089] 一般合成方法 [1090] 本发明的化合物可以按照下列的一般方法和工艺并采用现成的起始材料来制备。 应了解， 给出了典型的或优选的工艺条件 ( 例如， 反应温度、 时间、 反应物摩尔比、 溶剂、 压 力等 )， 其他工艺条件除非另有说明， 也可以使用。最佳反应条件可能随所使用的特定反应 物或溶剂有所不同， 但这种情况下， 可以由本领域的专业人员按照常规优化程序来决定。 [1091] 此外， 本领域专业人员将显而易见， 传统的保护基可能是阻止不必要反应的某些 功能基团是必要的。多种功能基团的适宜保护基， 以及特定功能基团的保护和去保护的适 宜条件是本领域专业人员众所周知的。 举例来说， 许多保护基团在 T.W.Greene 和 G.M.Wuts 撰写的 1999 年出版的有机合成中的保护基团第三版 (Wiley 出版社， New York) 进行了描 述， 并在本文中引用参考。 [1092] 下列反应的起始材料通常是已知的化合物， 或者可以通过已知的方法制备得到， 或者是对其进行显而易见的改性。举例来说， 许多起始原料购自商业供应商， 如 Aldrich 化 学公司 ( 美国威斯康星州密尔沃基市 )、 Bachem 公司 ( 美国加州托兰斯市 )、 Emka-Chemce 公 司或 Sigma 公司 ( 美国密苏里州圣路易斯市 )。 其他原料可采用一些方法制备得到， 或是对 其进行显而易见的改性， 在标准参考文本中进行了描述， 如 Fieser 与 Fieser′ s 试剂和有 机合成， 第 1-15 卷 (John Wiley 和 Sons， 1991)， Rodd′ s 碳化合物化学， 第 1-5 卷， 和补充版 (Elsevier 科学出版社， 1989)， 有机反应， 第 1-40 卷 (John Wiley 和 Sons， 1991)， March′ s 高级有机化学， (John Wiley 和 Sons， 第 4 版 )， 以及 Larock′ s 综合有机转化 (VCH 出版公 司， 1989)。具体地讲， 本发明的化合物可能通过一般有机化学尤其核苷和核苷类似物合成 领域中周知的多种方法制备得到。核苷和核苷酸似物制备综述， 包括 1)Michelson A.M.， “核苷化学和核苷” ， 学术出版社， 纽约， 1963 ； 2)Goodman L.， “核酸化学的基本原理” ， 学术 出版社， 纽约， 1974 年， 第 1 卷， 第2章； 3)“核酸化学合成工艺” ， Eds.Zorbach W.& Tipson R.， Wiley， 纽约， 1973 年， 第 1 卷和第 2 卷。 [1093] 适于本发明化合物的合成方案在下面合成方案中举例说明。举例来说， 反应方案 3 1 说明了制备通式 (Ia) 化合物的一般方法 [( 通式 (I)， R 为 OH。] 3 [1094] 反应方案 1(R ＝ OH) [1095] 步骤 1 ：[1096][1097] [1098]步骤 2 ：[1099] [1100]步骤 3 ：[1101] [1102]步骤 4 ：[1103]在这个方案中， 采用通式 R6OH 的醇与通式 (X) 的受保护的氨基酸进行酯化反应， 加入试剂如 EDCI 和 DMAP 加速反应， 反应在惰性溶剂如二氯甲烷中进行， 制备式 (XI) 的化 合物。或者， 许多酯形成试剂， 如 DCC/DMAP、 三氟乙酸酐、 N， N’ - 羰基二咪唑基和三苯基膦 / 四氯化碳可以被使用。在适宜的溶剂中， 如乙酸乙酯， 从化合物 (XI) 去除 BOC 保护基， 转 化成通式 (XII) 的盐的形式通过与有机酸反应如 PTSA 来完成。或者， BOC 基团可以使用其 他酸如三氟乙酸和盐酸 (HCl) 除去， 得到三氟乙酸或盐酸的相应的盐。步骤 2 中， 使用非亲核碱， 如 DBU， 和路易斯酸如三氟甲磺酸三甲基硅酯极性溶剂 ( 极性溶剂如乙腈 )， 通式 (XIII) 的受保护糖衍生物与 2- 氨基 -6- 氯嘌呤发生反应， 生产 通式 (XIV) 化合物。该反应可以在 0℃至 100℃下进行， 但最优选在 60℃下进行。或者， 其 他核苷偶联试剂如 BSA/SnCl4， 或 HMDS/TMSOTf 可以使用或在硅烷化之前使用。或者， 其他 已知核苷偶联试剂可被使用， 如 Helmut Vorbruggen 和 Carmen Ruh-Pohlenz 编写的核苷合 成手册中描述的 (John Wiley & Sons， 有机反应， 版权 2001)。核苷偶联反应可在其他极性 或非极性非质子溶剂中进行， 但不限于， 二氯乙烷、 甲苯、 邻二甲苯、 间二甲苯或对二甲苯或 1 1 二氯甲烷。 使用醇盐 (R O-)， 母体醇 (R OH) 作为溶剂使用， 氧亲核试剂取代连接分子嘌呤部 位的氯， 制备通式 (XV) 中间体， 其中 X 为 O。按照通式 (XIV) 与通式 R1NH2 氮亲核试剂的反 应同样制备通式 (XV) 化合物， 其中 X 为 NH。R1NH2 作为溶剂， 或 R1NH2 作为溶剂中的试剂， 例 如， 但不限于， 乙醇、 异丙醇、 四氢呋喃、 乙腈或 DMF， 可以完成这些反应。按照通式 (XIV) 与 1 R SH 硫亲核试剂的反应， 同样制备式 (XV) 的化合物， 其中 X 为 S。R1SH 作为溶剂， R1SH 作为 溶剂中的试剂， 例如， 但不限于， 乙醇、 异丙醇、 四氢呋喃、 乙腈或 DMF， 可以完成这些反应。 [1105] 通过还原胺化反应实施通式 (XVI) 的化合物转化反应， 其中， 在选择性还原剂存 在下， 例如十硼烷亲质子性溶剂， 亲质子性溶剂如甲醇， 芳醛， 任选由卤素在芳基部分上取 代， 与通式 (XV) 化合物反应。 这种反应可在 0℃至 100℃下运行， 最优化在 -25℃下进行。 或 者， 其他还原剂可被使用， 例如氰基硼氢化钠或硼氢化钠， 或其他还原胺化试剂可被使用， 如 Eds.B.M.Trost 和 I.Fleming 编写 “Comprehensive Organic Synthesis” ， 第 8 卷第 1.2 章第 25 页中描述的 ( 佩加蒙， 牛津大学 (1991 年 ))。 [1106] 步骤 3 中， 通式 (XIX) 的芳基氯化酰胺化物通过以下反应制得， 非亲核碱如三乙胺 存在下， 通式 (XVII) 的羟基化芳基化合物与氧氯化磷反应， 得到通式 (XVIII) 的中间体。 低温下， 优选 0℃至 -78℃， 最优选 -25℃， 该反应可以在非质子溶剂中进行， 非质子溶剂如 二氯甲烷、 乙醚或 MTBE。除了三乙胺之外， 许多其他非亲核碱可以使用， 如 DIEA 或 DBU 可 以使用。 在下一步反应中直接使用该反应的产物， 或者该反应中产生的胺盐， 如三乙基铵盐 酸盐， 可在下一步之前滤掉。该反应应在任何时候进行防潮保护， 因为磷酰二氯产品， 对潮 湿非常敏感。碱存在下， 通式 (XVIII) 与通式 (XII) 的氨基酸酯盐进行后续反应得到通式 (XIX) 的化合物。该反应可在 0℃至 -78℃下进行， 最优选在 -25℃下进行。多种非极性非 质子溶剂可被采用， 如乙醚、 MTBE 和二氯甲烷。碱可能选自多种非亲核有机胺， 例如， 但不 限于， 三乙胺、 DIEA、 或 DBU。该反应应在任何时候进行防潮保护。一旦反应完成， 关键要除 去相应的有机胺盐， 如三乙基胺盐酸盐， 或三乙基对甲苯磺酸铵。 通过浓缩反应混合物并且 使用乙酸乙酯和正己烷沉淀盐产物， 将其过滤掉， 粗产品通过硅胶塞。操作过程中， 除去溶 剂必须在 25℃或低于 25℃温度下进行， 以避免氯磷酸分解。 [1107] 步骤 4 中， 采用亲核催化剂如 NMI 惰性有机溶剂， 惰性有机溶剂如四氢呋喃， 来完 成通式 (XIX) 和通式 (XV) 或通式 (XVI) 化合物偶联反应得到通式 (Ia) 化合物 [ 通式 (I)， R3 是 OH]。其他的亲核催化剂如 DMAP、 三甲胺、 吡啶、 或 4-( 吡咯烷 -1- 基 ) 吡啶， 以及其他 非质子溶剂如乙醚、 MTBE 氯仿或二氯甲烷， 可被使用。这些反应可在 0℃和 50℃之间进行， 最优化在 25℃下进行。或者， 一种强大的非亲核碱， 例如， 叔丁基氯化镁， 可以在溶剂中使 用， 溶剂如四氢呋喃、 乙醚、 或 MTBE。其他强质子选择性的有机或无机碱可被使用， 例如正 丁基锂、 叔丁醇钾、 2， 4， 6- 三甲基吡啶、 DBU， 或者双 ( 三甲基硅烷 ) 酰胺化锂。该反应可以在 -78℃到 40℃之间进行， 最优化在 0-25℃之间进行。 [1108] 反应方案 2 说明在步骤 4 中制备的磷非对映异构体， 可以使用手性色谱分离。 [1109] 反应方案 2( 磷非对映异构体的分离 )[1110][1111]在 这 个 方 案 中， 可 以 在 多 种 不 同 的 手 性 树 脂 中 进 行 手 性 色 谱， 手性树脂如 CHIRALPAK AD CHIRALPAK AS CHIRALCEL OD CHIRALCEL OJ CHIRALCEL OB 和 CHIRALCEL OC AD-H AS-H OD-H OJ-H OB-H 和 OC-H 或者， 手性树脂可以选自 从下面列表 ： [1112] CHIRALPAK IATM [1113] CHIRALPAK IA-3 [1114] CHIRALPAK AD-H [1115] CHIRALPAK AD [1116] CHIRALPAK AD-3 [1117] CHIRALPAK AD-3R [1118] CHIRALPAK AS-H [1119] CHIRALPAK AS [1120] CHIRALPAK AY-H [1121] CHIRALPAK AY [1122] CHIRALPAK AZ-H [1123] CHIRALPAK AZ [1124] CHIRALPAK IBTM [1125] CHIRALCEL OD-H [1126] CHIRALCEL ODCHIRALCEL OD-3 [1128] CHIRALCEL OD-3R [1129] CHIRALCEL OD-I [1130] CHIRALPAK ICTM [1131] CHIRALPAK IC-3 [1132] CHIRALCEL OC-H [1133] CHIRALCEL OC [1134] CHIRALCEL OA [1135] CHIRALCEL OB-H [1136] CHIRALCEL OB [1137] CHIRALCEL OG [1138] CHIRALCEL OJ-H [1139] CHIRALCEL OJ [1140] CHIRALCEL OF [1141] CHIRALCEL OK [1142] CHIRALCEL OZ-H [1143] CHIRALCEL OZ [1144] 任选地， Chiral PakAD 柱可采用比例为 1 ∶ 1 的乙醇∶正己烷作为移动相。其他 溶剂如乙酸乙酯、 异丙醇、 乙腈和甲醇可用作移动相， 或者采用其他本领域专业人员熟悉的 试剂。 [1145] 反应方案 3 举例说明了制备通式 (I) 化合物的一般方法， 其中 R3 为 H( 本文中也 称为 “通式 1b” )。 [1146] 反应方案 3(R3 ＝ H)[1147][1148][1149]试剂 ： a)TBDPSCl、 DMAP、 嘧啶 ； b)TSCl、 DMAP ； c) 红 铝、 乙 醇、 甲苯 ； d)2， 2- 二 甲 氧基丙烷、 5 ％ PTSA、 二氯甲烷 ； e) 三乙基硼氢化锂、 四氢呋喃 ； f) 三苯基磷、 咪唑、 碘、 甲苯 ； g) 三丁基锡氢化物、 AIBN、 甲苯 ； h)TBAF、 四氢呋喃 ； i) 苯甲酰氯、 嘧啶、 DMAP ； j)(i)70％乙酸， (ii) 乙酸酐、 DMAP、 嘧啶 ； k)BSA、 TMSOTf、 乙腈 ； l) 甲醇氨 ；m)[1150]叔丁基氯化镁 / 四氢呋喃。在此方案中， 通式 (XX) 化合物中的伯醇基团选择被保护， 举例来说， 选择丁基二 苯基氯硅烷保护， 得到通式 (XXI) 的中间体。保护仲醇基团， 例如采用 TsCl 保护， 得到双重 保护的通式 (XXII) 的中间体。采用还原剂如红铝， 将内酯还原成通式 (XXIII) 乳醇， 然后， 通过丙酮二甲基缩醛和 PTSA 反应， 二醇转化为通式 (XXIV) 安奈德。使用如 Li(Et)3BH， 其 中保护基团是 Ts， 仲醇选择性去保护， 得到通式 (XXV) 的中间体。采用， 例如三苯基膦、 咪 唑、 和碘， 羟基转变为碘基， 得到通式 (XXVI) 的化合物。使用三丁基锡氢化物去除碘基， 得 到通式 XXVII 的中间体。进行一系列去保护 / 保护步骤 (h、 i 和 j)， 制备通式 (XXX) 的中 间体。该化合物类似于先前描述的通式 (XIII) 的中间体， 与适宜的鸟嘌呤衍生物反应， 随 后脱保护， 可分别制备出通式 (XXXI) 和 (XXXII) 的化合物。使用上述方法 B， 与通式 (XIX) 的化合物反应， 通式 (XXXII) 化合物转化为通式 (Ib) 的化合物 [ 通式 (I)， 其中 R3 ＝ H]。 [1151] 上文的通用方案优选在适宜溶剂存在下进行。适宜的溶剂包括烃类溶剂如苯、 甲苯 ； 醚类溶剂如二乙基醚、 四氢呋喃、 二苯醚、 苯甲醚、 二甲氧基苯 ； 卤代烃溶剂如二氯甲 烷、 氯仿、 氯苯 ； 酮类溶剂如丙酮、 甲乙酮和甲基异丁基酮 ； 醇类溶剂如甲醇、 乙醇、 丙醇、 异 丙醇、 正丁醇和叔丁醇 ； 腈类溶剂如乙腈、 丙腈、 苄腈 ； 酯型溶剂如醋酸乙酯、 醋酸丁酯 ； 碳 酸酯类溶剂如碳酸乙烯酯和碳酸丙烯酯 ； 和类似溶剂。这些可以在混合物中单独或两个或 更多个使用。惰性溶剂优选用于本发明的方法中。术语 “惰性溶剂” 是指被描述的反应条 件下溶剂具有惰性， 包括， 举例来说、 苯、 甲苯、 乙腈、 四氢呋喃、 二甲基甲酰胺、 氯仿、 二氯甲 烷 ( 或二氯甲烷 )、 乙醚、 乙酸乙酯、 丙酮、 甲基乙基酮、 甲醇、 乙醇、 正丙醇、 异丙醇、 叔丁醇、 二氧六环、 吡啶、 和类似溶剂。 [1152] 给药剂量和途径 [1153] 通常， 通过相似效用药剂按照任一可接受给药方式， 本发明的化合物按照有效量 给药。 本领域技术人员应了解， 有效剂量应为提供治疗功效的本发明化合物的用量， 例如活 性成分， 因此取决于众多因素如被治疗疾病的严重性、 患者的年龄和相关健康、 所有化合物 的药效、 给药的路线和方式、 以及其它因素。 药物可一天给药一次以上， 以优选的方式， 每天 给药一次或两次。如上文指明， 应在临床医生或卫生保健专业人员经验内考虑所有因素来 确定有效剂量。 [1154] 举 例 来 说， 通 式 I 化 合 物 的 治 疗 有 效 剂 量 可 按 照 受 者 体 重 从 约 0.05mg/kg/ day-50mg/kg/day ； 优选约 0.1mg/kg/day-25mg/kg/day， 更优选从约 0.5mg/kg/day-10mg/ kg/day。 因此， 对一位体重 70kg 患者给药， 药物用量范围将最优选约 35mg/day-700mg/day。 通常， 本发明的化合物会作为药物组合物以下列途径中的任一种途径给药 ： 口服、 全身给药 ( 例如， 透皮、 鼻内或栓剂给药 )， 或肠胃外给药 ( 例如， 肌肉注射、 皮下给药、 或静脉注射 )。 优选的给药方式为口服给药， 使用方便的日剂量给药方案， 可以根据病痛程度调整。 组合物可以采用片剂、 丸剂、 胶囊剂、 散剂、 半固态、 缓释制剂、 溶液、 悬浮液、 酏剂、 气雾剂、 或任何 其它适宜的组合物。另一优选的本发明化合物的给药方式是吸入。这是将治疗药剂直接输 送到呼吸道的有效方法 ( 参见， 美国专利第 5,607,915 号， 上述专利通过引述合并于本文 中 )。 [1155] 制剂选择依赖于多种因素如给药方式、 药物的生物药效率。 经吸入输送药物， 化合 物可配制为溶液、 悬浮液、 气溶胶推进剂或干粉， 装进适宜的分配器用于给药。有多种类型 的吸入装置 - 药物吸入器、 计量剂量吸入器 (MDI) 和干粉吸入器 (DPI)。 雾化器装置产生高 速空气流， 使所配制的治疗剂 ( 液体形式配制 ) 喷成薄雾， 携带到患者的呼吸道内。计量剂 量吸入器 (MDI) 通常与压缩气体一起装填制剂。一经驱动， 该装置通过压缩气体释放出测 量剂量的治疗剂， 因此提供了以设定剂量药物给药的可靠方法。干粉吸入器 (DPI) 以自由 流动的粉末形式分配治疗剂， 在患者呼吸过程中用该装置分散在患者呼吸气流中。为了获 得自由流动的粉末， 治疗剂采用赋形剂如乳糖配制。 测量剂量的治疗剂以胶囊形式存储， 在 每次驱动下分布药物。 [1156] 最近， 已经开发的药物制剂显示出生物药效率差， 增加比表面积， 例如减小颗粒尺 寸， 可以提高生物效率。举例来说， 美国专利第 4,107,288 号描述了一种药物制剂， 其颗 粒尺寸范围在 10nm 至 1,000nm 之间， 其活性材料负载在高分子交联基体上。美国专利第 5,145,684 号描述了一种药物制剂的生产， 其中表面改性剂存在下， 药物研磨成纳米粉体 ( 平均粒径为 400nm)， 并分散在液体介质中， 得到一种药物制剂， 其显示出显著较高的生物 药效率。这些专利通过引述合并于本文中。 [1157] 如上文指明， 按照本发明所述的组合物通常包括一种通式化合物， 如上文引用的 那些之一， 以及至少一种制药用载体、 赋形剂或稀释剂。 可利用的赋形剂的一些实施例是无 毒的那些， 将辅助给药， 且不会严重影响本发明化合物的治疗效果。 这种赋形剂可以是任何 固体、 液体、 半固体或者气溶胶组合物， 本领域专业人员通常采用气态赋形剂。 [1158] 用于本发明的固体药物赋形剂包括淀粉、 纤维素、 滑石粉、 葡萄糖、 乳糖、 蔗糖、 明 胶、 麦芽、 大米、 面粉、 粉笔、 硅胶、 硬脂酸镁、 硬脂酸钠、 甘油单硬脂酸酯、 氯化钠、 脱脂乳粉 和类似物质。 液体和半固体赋形剂可以选自甘油、 丙二醇、 水、 乙醇、 各种油， 包括那些石油、 动物油、 植物油或合成的那些， 例如、 花生油、 大豆油、 矿物油、 芝麻油等。优选的液体载体， 尤其用于注射溶液， 包括水、 盐水、 葡萄糖水、 和乙二醇。 压缩气体可以用于分散气溶胶形式 的本发明化合物。适用于此目的的惰性气体是氮气、 二氧化碳等。其它适宜的制药赋形剂 和其制剂在 E.W.Martin 编辑的雷明顿药物科学中进行了描述 ( 麦克出版公司， 第 18 版， 1990 年 )。制剂中化合物的剂量可以在本领域专业人员采用的范围内改变。举例来说， 制 剂应包含， 以重量百分比 (wt％ ) 计， 从约 0.01％ -99.99wt％， 其中化合物是基于整个制剂 的通式 I 化合物， 余量为一种或多种适宜的制药用赋形剂。优选地， 该化合物的百分比为约 1wt％ -80wt％。包含本发明所述化合物的药物制剂在下文中进行进一步描述。 [1159] 此外， 本发明针对药物组合物， 其包括治疗有效剂量的本发明化合物， 以及治疗有 效剂量的一种或多种抗 RNA- 依赖的 RNA 病毒的药物， 尤其， 抗 HCV。 抗 HCV 活性药物包括， 但 不限于， 利巴韦林、 levovirin、 viramidine、 胸腺素 α-1、 丙型肝炎病毒 NS3 丝氨酸蛋白酶 抑制剂、 干扰素 -α、 聚乙二醇化干扰素 -α( 聚乙二醇干扰素 -α)、 干扰素 -α 和利巴韦林 的组合、 聚乙二醇干扰素 -α 和利巴韦林的组合、 干扰素 -α 和 levovirin 的组合、 聚乙二醇干扰素 -α 和 levovirin 的组合。 干扰素 -α 包括， 但不限于， 重组干扰素 -α2a( 如购自 Hoffman-LaRoche 的 Roferon interferon， Nutley， N.J.)、 干扰素 -α2b( 如购自 Schering Corp. 的 Intron-A interferon， Kenilworth， N.J.， USA)、 复合干扰素、 和纯化的干扰素 -α 产物。讨论利巴韦林和其抗 HCV 的活性， 参见 J.O.Saunders 和 S.A.Raybuck， “Inosine Monophosphate Dehydrogenase ： Consideration of Structure， Kinetics 和 Therapeutic Potential， ” Ann.Rep.Med.Chem.， 35 ： 201-210(2000)。 [1160] 进一步， 本发明针对一种药物组合物， 该药物组合物包括有效剂量的本发明化合 物， 以及抗丙型肝炎病毒具有活性的制药有效剂量的一种或多种药物。这类药物包括抑制 丙型肝炎病毒蛋白酶、 丙型肝炎病毒聚合酶、 丙型肝炎病毒解旋酶、 丙型肝炎病毒 NS4B 蛋 白、 丙型肝炎病毒进入、 丙型肝炎病毒活动、 丙型肝炎病毒出现、 丙型肝炎病毒 NS5A 蛋白、 和 5′ - 次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶的那些药物。其他药物包括治疗丙型肝炎病毒感染的 核苷类似物。还有其他的化合物， 包括在 WO 2004/014313 和 WO 2004/014852 和本文中提 及的参考资料中披露的那些。专利申请 WO 2004/014313 和 WO 2004/014852 通过引述全 部合并于本文中。具体的抗病毒药物包括 Omega IFN( 生物医药公司 )、 BILN-2061( 勃林 格殷格翰公司 )、 Summetrel( 远藤制药控股公司 )、 干扰素 α-2a(F. 霍夫曼罗氏公司 )、 Pegasys(F. 霍夫曼罗氏公司 )、 Pegasys/Ribaravin(F. 霍夫曼罗氏公司 )、 CellCep(F. 霍 夫 曼 罗 氏 公 司 )、 惠 福 仁 ( 葛 兰 素 史 克 )、 Albuferon-α( 人 类 基 因 组 科 学 公 司 )、 Levovirin(ICN 制 药 公 司 )、 IDN-6556(Idun 制 药 公 司 )、 IP-501(Indevus 制 药 公 司 )、 Actimmune(InterMune 公司 )、 Infergen A(InterMune 公司 )、 ISIS 14803(ISIS 制药公司 )、 JTK-003( 日本烟草公司 )、 Pegasys/Ceplene(Maxim 制药公司 )、 Ceplene(Maxim 制药公 司 )、 Civacir(Nabi 生物制药公司 )、 Intron A/Zadaxin(RegeneRx)、 Levovirin(Ribapharm 公司 )、 Viramidine(Ribapharm 公司 )、 Heptazyme( 核酶制药公司 )、 Intron A( 先灵葆雅 公司 )、 PEG-Intron( 先灵葆雅公司 )、 Rebetron( 先灵葆雅公司 )、 利巴韦林 ( 先灵葆雅公 司 )、 PEG-Intron/Ribavirin( 先灵葆雅公司 )、 Zadazim(SciClone 公司 )、 Rebif(Serono 公 司 )、干 扰 素 -β/EMZ701(Transition Therapeutics 公 司 )、 T67(Tularik 公 司 )、 VX-497(Vertex 制药公司 )、 VX-950/LY-5703 10(Vertex 制药公司 )、 Omniferon(Viragen 公 司 )、 XTL-002(XTL 生物制药公司 )、 SCH 503034( 先灵葆雅公司 )、 isatoribine 及其前体药 物 ANA971 和 ANA975(Anadys 公司 )、 R1479( 罗氏生物科学公司 )、 Valopicitabine(Idenix 公司 )、 NIM811( 诺华制药公司 )、 和 Actilon(Coley 制药公司 )。 [1161] 在一些实施方案中， 本发明的组合物和方法包含上文中阐述的通式化合物， 和干 扰素。在一些方面， 干扰素选自干扰素 α2B、 聚乙二醇化干扰素 α、 干扰素、 干扰素 α2A 和 类淋巴母细胞干扰素 τ 组成的组。 [1162] 在其它实施方案中， 本发明的组合物和方法利用上文中阐述的通式化合物和具有 抗丙型肝炎病毒活性的化合物 ( 如选自由白细胞介素 2、 白细胞介素 6、 白细胞介素 12 组成 的组的那些 )、 增强 1 型辅助性 T 细胞应答的化合物、 干涉 RNA、 反义 RNA、 咪奎莫特、 利巴韦 林、 5′ - 次黄嘌呤单核苷酸脱氢酶抑制剂、 金刚烷胺、 和金刚乙胺。 [1163] 抗丙型肝炎活性测试 [1164] 通过抑制丙型肝炎聚合酶， 抑制复制周期中所需的其它酶， 或通过其它途径， 化 合物可以表现出抗丙型肝炎活性。一些公开的测试方法用于评估这些活性。评估培养基中丙型肝炎病毒的总量增长的一般方法在 Miles et al. 提出的美国专利第 5,738,985 号 中披露， 上述专利通过引述合并于本文中。体外测试在 Ferrari et al.J.of Vir.， 73 ： 1649-1654， 1999、 Ishii et al.， Hepatology， 29 ： 1227-1235， 1999、 Lohmann et al.， J.Bio. Chem.， 274 ： 10807-10815， 1999、 和 Yamashita et al.， J.of Bio.Chem.， 273 ： 15479-15486， 1998 中进行了报道。 [1165] WO97/12033 涉及丙型肝炎聚合酶测试， 可用于评价本文中描述的化合物的活性， 该专利申请通过引述合并于本文中。其他丙型肝炎聚合酶测试已经在 Bartholomeusz， et al.， Hepatitis C Virus(HCV)RNA polymerase assay using cloned HCV non-structural proteins， Antiviral Therapy 1996 ： 1(Supp 4)18-24 中进行了报道。 [1166] 测量丙型肝炎病毒药物激酶活性减少的筛选方法在 Katze 等人提出的美国专利 第 6,030,785 号、 Delvecchio 提出的美国专利第 6,228,576 号、 和 Jubin 等人提出的美 国专利第 5,759,795 号中被披露。测量提议的丙型肝炎病毒药物的蛋白酶抑制活性的筛 选方法在 Su 等人提出的美国专利第 5,861,267 号、 De Francesco 等人提出的美国专利第 5,739,002 号和 Houghton 等人提出的美国专利第 5,597,691 号中被披露， 通过引述上述专 利都合并于本文中。 [1167] 本发明还在下列非限制性实施例中进行了举例说明。 [1168] 实施例 [1169] 本发明的实施例目前将在仅与下列实施例相关的实施例中进行了描述。 使用适宜 核苷， 或改性前药， 与氯磷酸反应制备靶向化合物。 后者试剂采用公开方法由芳基二氯磷酸 酯与氨基酸酯盐酸盐制备得到。 [1170] 一般程序 [1171] 涉及水敏性化合物的所有试验在严格干燥条件下进行。无水四氢呋喃 (THF) 和二氯甲烷购自 aldrich 公司并直接使用。糖衍生物 (2S， 3R， 4R， 5R)-5-( 苯甲酰氧基 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -2， 3， 4- 三基三苯甲酰氧基或等同物 ： 2， 3， 4， 5- 四 -O- 苯甲酰 基 -2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖购自 CarboSynth 有限公司， 8&9 Old Station Business Park， Compton， Berkshire， RG20 6NE， UK。 嘌 呤 衍 生 物 2- 氨 基 -6- 氯 嘌 呤 或 等 同 物、 6- 氯 -9H- 嘌呤 -2- 胺购自 aldrich 公司。2’ -C- 甲基鸟苷 2-(2- 氨基 -9-((3R， 4R， 5R)-3， 4- 二羟基 -5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -2- 基 )-1H- 嘌呤 -6(9H)- 酮 ) 为商业试剂， 购 自 CarboSynth 有限公司， 8&9 Old Station Business Park， Compton， Berkshire， RG206NE， UK。叔丁基氯化镁的 1.0M 溶液购自 aldrich 公司。该 1.0M 溶液在实验过程中使用。柱层 析是指快速柱色谱， 采用 Merck 硅凝胶 60(40μm-60μm) 作为固定相。质子谱、 碳谱、 磷核 1 13 31 磁共振谱 ( H、 C、 P NMR) 记录在 Bruker Avance 光谱仪上， 或者在 500MHz、 125MHz、 202MHz 下操作， 或者在 300MHz、 121MHz、 75MHz 下操作， 或在 400MHz、 100MHz、 161.9MHz 条件下操作 13 记录在瓦里安 Unity Inova 仪器上。 所用溶剂指出每种化合物。 C 和 31P 谱质子去耦记录。 四甲基硅烷的 1H 和 13C 谱化学位移向低场位移几个 ppm。耦合常数称为 J 值。信号裂分方 式描述为单峰 (s)、 双峰 (d)、 三重峰 (t)、 四重锋 (q)、 宽信号 (br)、 双二重峰 (dd)、 双重三 31 峰 (dt)、 或多峰 (m)。相对于外部磷酸标准物， P 谱的化学位移为几个 ppm。由于样品中存 在非对映异构体， 许多质子和碳 NMR 信号出现裂分。对于许多化合物， MNOBA( 间硝基苄醇 ) 作为介质， 质谱电离模式是快原子轰击。LCT 飞行时间质谱仪串联 Waters M600 高效液相质谱泵泵， 得到电喷雾质谱。样品溶解在甲醇溶剂中， 通过 Rheodyne 进样阀注射进流动相。 流动相采用甲醇， 流速 200μL/min。 电喷雾离子源在温度 130℃、 脱溶剂气温度 300℃、 毛细 管电压 3kV、 锥孔电压 30V 条件下操作。以连续模式在 100-2000amu 质量范围内收集数据， 使用 Masslynx 软件处理数据。与样品同时向电喷雾离子源引入已知元素成分的锁定化合 物便于精确质量测量。 [1172] 实施例 1. [1173] (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 氯 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 苄酰氧基甲基 )-3- 甲 基四氢呋喃 -3， 4- 二苯甲酸酯[1174]向 (2S， 3R， 4R， 5R)-5-( 苄酰氧基甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -2， 3， 4- 三苯甲酸酯 ( 或 2， 3， 4， 5- 四 -O- 苯甲酰 -2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖 )( 购自 CarboSynth 有限公司， 10.0g， 17.22mmol)、 2- 氨基 -6- 氯嘌呤 ( 购自 Aldrich 公司， 3.2g， 18.87mmol) 和 1， 8- 二氮杂双 环 [5.4.0] 十一 -7- 烯 (DBU)(7.7mL， 51mmol) 的 200mL 无水乙腈的预冷却 (0℃ ) 溶液中逐 滴加入三甲硅烷基三氟甲基磺酸盐 (12.5mL， 68.8mmol)。然后， 反应混合物 65℃下加热 4 至 6 个小时， 冷却至室温， 注入到 300mL 饱和碳酸氢钠水溶液中， 每次用 150mL 二氯甲烷萃 取， 萃取三次。合并有机相用硫酸钠干燥， 在减压下蒸发。残留物从二氯甲烷和甲醇中沉淀 下来， 过滤， 固体用甲醇洗涤 2 次， 干燥得到预期的化合物白色固体 (8.5g， 79％ )( 生成物从 65％ ( 柱 ) 至 90％ ( 沉淀 ))。 [1176] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1177] H NMR(500MHz ，CDCl 3 ) δ 8.13(dd ，J ＝ 1.2 ， 8.3 ， 2H) ， 8.02-7.94(m ， 5H) ， 7.65-7.60(m， 1H)， 7.58-7.45(m， 4H)， 7.35(q， J ＝ 7.7， 4H)， 6.65(s， 1H)， 6.40(d， J ＝ 6.7， 1H)， 5.31(s， 2H)， 5.08(dd， J ＝ 4.2， 11.6， 1H)， 4.79(dd， J ＝ 6.4， 11.6， 1H)， 4.74(td， J＝ 4.2， 6.5， 1H)， 1.60(s， 3H).[1175]C NMR(126MHz， CDCl3)δ166.31(C ＝ O)， 165.38(C ＝ O)， 165.32(C ＝ O)， 159.13(C2)， 152.87(C6)， 152.06(C4)， 141.42(C8)， 133.77(C-HBn)， 133.69(C-H Bn)， 133.28(C-H Bn)， 129.90(C-H Bn)， 129.82(C-H Bn)， 129.78(C Bn)， 129.70(C-H Bn)， 129.41(C Bn) ， 128.78(C Bn) ， 128.61(C-HBn) ， 128.50(C-H Bn) ， 128.41(C-H Bn) ， 126.00(C5) ， 88.84(C1’) ， 85.68(C2’) ， 79.43(C4’) ， 76.07(C3’) ， 63.57(C5’) ， 17.77(2’ -Me). [1179] 实施例 2. [1180] (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基 四氢呋喃 -3， 4- 二醇[1178] [1181] 890 ℃ 下， 向 含 有 (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6- 氯 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 苄 酰 氧基甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二苯甲酸 (3.0g， 4.78mmol) 的 36mL 甲醇悬浮液加 入 5ml 含有甲醇钠的甲醇溶液 (5.4mL， 25％ w/w)。混合物在室温下搅拌 24h， 然后加入加 + amberlite(H ) 结束反应。 将混合物过滤， 然后减压下除去甲醇。 所得残留物溶解于 50mL 水 中， 用 50mL 正己烷萃取。然后， 用 50mL 水萃取有机层， 合并的水组分减压下被浓缩。残留 物经硅胶色谱 (CHCl3/MeOH ＝ 85 ∶ 15) 纯化， 得到纯净白色固体的化合物 (1.125g， 76％ )。 [1183] 下列是分析合成化合物的核磁共振、 高效液相色谱、 CHN 元素分析结果 ： 1 [1184] HNMR(500MHz， CD3OD)δ8.26(s， 1H)， 5.99(s， 1H)， 4.24(d， J ＝ 9.1， 1H)， 4.08(s， 3H)， 4.04(ddd， J ＝ 2.3， 5.7， 8.6， 2H)， 3.87(dd， J ＝ 3.0， 12.4， 1H)， 0.96(s， 3H). 13 [1185] C NMR(126MHz， CD3OD)δ162.75(C6)， 161.86(C2)， 154.50(C4)， 139.35(C8)， 115.36(C5) ， 93.00(C1’ )， 84.15(C4 ′ ) ， 80.34(C2’ )， 73.57(C3’ )， 61.17(C5’ )， 54.25(6-OMe)， 20.35(2’ -Me). [1186] HPLC ： tR ＝ 9.00min ； 柱： Varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm [1187] 该方法是 ： 线性梯度 H2O/ 乙腈 ： 30min 内， 乙腈从 0％至 100％ [1188] 元素分析 ： calculated for C12H17N5O5+ 0.75 H2O ： C： 44.37， H： 5.74， N： 21.56 ； Found ： C： 44.24， H： 5.49， N： 20.83 [1189] 实施例 3. [1190] 萘 -1- 基二氯磷酸酯[1182] [1191]三氯氧磷 (1.94mL， 1 当量 ) 和 α- 萘酚 ( 购自 aldrich 公司， 3g， 1 当量 ) 在 20mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78℃下加入 (2.90mL， 1 当量 )， 25 分钟后， 溶液温降至 室温。三乙胺盐酸盐被滤掉， 溶剂在减压下被除去， 得到透明浅黄色油 (4.88g， 90％ )。[1192]H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.11(d， J ＝ 8.4， 1H.H8)， 7.90(d， J ＝ 7.5， 1H， H 5) ， 7.80(d， J ＝ 8.3， 1H， H4)， 7.65-7.53(m， 3H， H2， H6， H7)， 7.46(t， J ＝ 8.0， 1H， H3). 31 [1194] P NMR(202MHz， CDCl3)δ3.69. [1195] 实施例 4. [1196] 合成萘 -2- 基二氯磷酸酯 ：[1193] [1197]1三氯氧磷 (3.23mL， 1 当量 ) 和 β- 萘酚 ( 购自 aldrich 公司， 5g， 1 当量 ) 在 25mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78℃下加入 (4.84mL， 1 当量 )， 25 分钟后， 溶液温度降 至室温。三乙胺盐酸盐被滤掉， 溶剂在减压下被除去， 得到透明浅黄色油 (7.95g， 88％ )。 ( 油在冷冻箱内固化 )。 [1199] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1200] H NMR(500MHz ， CDCl 3) δ 7.86-7.77(m ， 2H) ， 7.70(s ， 1H) ， 7.52-7.45(m ， 2H) ， 7.37(m， 1H). 31 [1201] P NMR(202MHz， CDCl3)δ2.71. [1202] 实施例 5 [1203] 合成 (S)- 甲基 2-(6-( 二氯磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙酸酯 ：[1198] [1204]三氯氧磷 (0.202mL， 1 当量 ) 和 (S)- 甲基 2-(6- 羟基萘 -2- 基 ) 丙酸酯 ( 购自 aldrich 公司， 500mg， 1 当量 ) 在 25mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78 ℃下加入 (0.302mL， 1 当量 )， 25 分钟后， 溶液温度降至室温。三乙胺盐酸盐被滤掉， 溶剂在减压下被 除去， 得到透明浅黄色油 (750mg， 95％ )。 [1206] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31 [1207] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ4.49 [1208] 实施例 6 [1209] 合成喹啉 -5- 基二氯磷酸酯 ：[1205] [1210]三 氯 氧 磷 (0.385mL， 4.14mmol.) 和 喹 啉 -5- 醇 ( 购 自 aldrich 公 司， 600mg， 4.14mmol.) 在 25mL 无 水 四 氢 呋 喃 中 搅 拌。 无 水 三 乙 胺 在 -78 ℃ 下 加 入 (0.576mL， 4.14mmol.)， 溶液温度降至室温。采用 31PNMR 监测反应混合物三氯氧磷反应完 ( 约 30 分 钟 )， 该混合物直接被使用。 [1212] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31 [1213] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ4.58. [1214] 实施例 7 [1215] 合成喹啉 -6- 基二氯磷酸酯 ：[1211] [1216]三 氯 氧 磷 (0.385mL， 4.14mmol.) 和 喹 啉 -5- 醇 ( 购 自 aldrich 公 司， 600mg， 4.14mmol.) 在 25mL 无 水 四 氢 呋 喃 中 搅 拌。 无 水 三 乙 胺 在 -78 ℃ 下 加 入 (0.576mL， 4.14mmol.)， 溶液温度降至室温。采用 31PNMR 监测反应混合物三氯氧磷反应完 ( 约 30 分 钟 )， 该混合物直接被使用。 [1218] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31 [1219] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ4.61. [1220] 实施例 8 [1221] 合成喹啉 -8- 基二氯磷酸酯 ：[1217] [1222]三氯氧磷 (0.58mL， 1 当量 ) 和喹啉 -8- 醇 ( 购自 aldrich 公司， 900mg， 1 当量 ) 在 25mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78℃下加入 (0.86mL， 1 当量 )， 25 分钟后， 溶 液温度降至室温。三乙胺盐酸盐被滤掉， 溶剂在减压下被除去， 得到透明浅黄色油 (870mg， 54％ )。粗产物直接用于下一步。 [1224] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31 [1225] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ4.53. [1226] 实施例 9 [1227] 合成 2- 甲基萘 -1- 基二氯磷酸酯 ：[1223] [1228]三氯氧磷 (0.176mL， 1 当量 ) 和 2- 甲基萘 -1- 醇 ( 购自 aldrich 公司， 0.3g， 1当 量 ) 在 10mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78℃下加入 (0.264mL， 1 当量 )， 搅拌 30 31 分钟。二氯化物室温下非常不稳定。采用 P NMR 监测反应进程。粗产物被认为 100％转[1229]化为二氯化物， 并直接使用。 [1230] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31 [1231] P NMR(80MHz， CDCl3)δ4.20 [1232] 实施例 10 [1233] 合成 3- 叔丁基萘 -1- 基二氯磷酸酯 ：[1234]三 氯 氧 磷 (0.143mL， 1 当 量 ) 和 3- 叔 丁 基 萘 -1- 醇 ( 参 见 J.Org.Chem.1995， 60， 2909-2911， 0.308g， 1 当量 ) 在 8mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78 ℃下加入 (0.214mL， 1 当量 )， 搅拌 30 分钟。二氯化物室温下非常不稳定。采用 31P NMR 监测反应。 粗产物被认为 100％转化为二氯化物， 并直接使用。 [1236] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31 [1237] P NMR(80MHz， CDCl3)δ4.46 [1238] 实施例 11 [1239] 合成 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 二氯磷酸酯 ：[1235] [1240]三氯氧磷 (0.145mL， 1 当量 ) 和 3， 7- 二 - 叔丁基萘 -1- 醇 ( 参见 J.Org.Chem.1995， 60， 2909-2911， 0.4g， 1 当量 ) 在 10mL 无水二乙醚中搅拌。无水三乙胺在 -78 ℃下加入 (0.217mL， 1 当量 )， 搅拌 30 分钟。二氯化物室温下非常不稳定。采用 31P NMR 监测反应进 程。粗产物被认为 100％转化为二氯化物， 并直接使用。 [1242] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31 [1243] P NMR(80MHz， CDCl3)δ4.45 [1244] 实施例 12 [1245] 合成苯基二氯磷酸酯 ：[1241] [1246]三氯氧磷 (3.23mL， 1 当量 ) 和苯酚 (g， 1 当量 ) 在 25mL 无水二乙醚中搅拌。无水 三乙胺在 -78℃下加入 (4.84mL， 1 当量 )， 25 分钟后， 溶液温度降至室温。三乙胺盐酸盐被 滤掉， 溶剂在减压下被除去， 得到透明浅黄色油 (g，％ )。( 油在冷冻箱内固化 )。 [1248] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： [1249] 氨基酸酯或者购买， 或者采用本领域专业人员所熟悉的文献工艺制备得到。 通常， 使用 EDCI(1-(3- 二甲基氨基丙基 )-3- 乙基碳二亚胺盐酸盐， Aldrich 公司 ) 和 DMAP(4- 二 甲氨基吡啶， aldrich 公司 )， BOC( 叔丁氧基羰基 ) 保护的氨基酸与二氯甲烷中相应的醇耦 合。使用 PTSA( 对甲苯磺酸 ) 去掉 BOC 基团， 分离出对甲苯磺酸盐。 [1250] 萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯通过本领域专业人员已知的技术制备得到。一般来[1247] 说， 萘二氯磷酸酯 (1 当量 ) 和作为 PTSA 盐 (1 当量 ) 的适宜的氨基酸酯悬浮在无水二氯甲 烷 (20mL/g 二氯磷酸酯 ) 中。在 -78℃下， 1 小时后， 无水三乙胺 (2 当量 ) 逐滴加入， 反应 温度升至室温， 搅拌 2 至 4 个小时 ( 通过 P-NMR 监控该反应 )。减压条件下， 低于 25℃， 罗 托蒸发器加热池除去溶剂， 粗残留物在硅胶上经快速层析纯化 ( 己烷 / 乙酸乙酯＝ 1 ∶ 1)。 然后， 低于 25℃， 罗托蒸发器加热池， 小心去除乙酸乙酯。同样工艺用于取代萘酚衍生物和 取代喹啉和异喹啉衍生物。 [1251] 核苷衍生物而非 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤按 照实施例中下列描述的方法合成得到。 [1252] 通过本领域技术人员可利用的工艺， 包括方法 A 和方法 B， 合成得到 2- 氨基 -6- 甲 氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ - 磷酰胺酯。[1253]方法 A ： 向含有 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤 (1 当 量 ) 的四氢呋喃 (20mL/g) 中加入 N- 甲基咪唑 (NMI， Aldrich 公司， 5 当量 )， 随即加入溶解 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基酸衍生物 (3 当量 ) 的 20mL 四氢呋喃。混合物搅拌过夜， 减压下除去该溶剂。残留物在硅胶 (CHCl3/MeOH ＝ 95 ∶ 5) 上纯化， 得到收率 20％ -30％的 纯净的磷酰胺酯。在某些情况下， 一些痕量 N- 甲基咪唑留下 ： 为除去 N- 甲基咪唑， 磷酰胺 酯溶解在氯仿中， 用盐酸 (HCl 0.1N) 洗涤 3 次。然后， 有机层用硫酸钠烘干， 减压蒸发得到 纯净的化合物。在一些情况下， 后者需纯化第二次 (100％ CHCl3 ： CHCl3/MeOH ＝ 95 ∶ 5)。 [1255] 方 法 B. 向 含 有 2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9-(2-C- 甲 基 -β-D- 呋 喃 核 糖 基 ) 嘌 呤 (aldrich 公司， 1 当量 ) 的无水四氢呋喃溶液 (4mL/mmol) 中加入 1M 含有叔丁基氯化镁的 四氢呋喃溶液 (aldrich 公司， 2 当量 )。搅拌 15 分钟后， 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 酸衍生物 (2 当量 ) 的 30mL 四氢呋喃溶液中逐滴加入到反应混合物中， 然后溶液温度降至 室温， 搅拌过夜。TLC 监测该反应。使用 300mL 饱和 NH4Cl 溶液和 100mL 盐水洗涤反应混合[1254]物。有机层用无水硫酸钠干燥， 并被浓缩。使用 CH2Cl2/MeOH(96 ∶ 4)， 用硅胶柱层析提纯 粗材料， 得到磷酰胺酯， 收率在 10％ -50％。 [1256] 实施例 13 [1257] 按 照 以 下 步 骤 合 成 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸苄酯 ：[1258][1259] [1260]步骤 1 ： (2S)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 )- 磷酰化氨基 )- 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， 苄氧基 -L- 丙氨酸的甲苯磺 酸盐 (1.5g) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (1.10g)、 三乙胺 (1.14mL)、 和二氯甲烷 (20mL) 合并得到 (2S)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 )- 磷酰化氨基 )- 丙酸酯， 收率 89 ％ (1.53g)， 呈淡黄色粗油状。[1261]下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1263] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.08(m， 1H， H8-napht)， 7.90(m， 1H， H5-napht)， 7.75(d， J ＝ 8.2， 1H， H4-napht)， 7.58(m， 3H， H6， H7， H2-napht)， 7.48-7.42(m， 1H， H3-napht)， 7.36(m， 5H， phe)， 5.31-5.16(m， 2H， CH2 酯 )， 4.59-4.48(m， 0.5H， NH)， 4.38(m， 1.5H.NH 和 H3)， 1.59(d， J ＝ 7.1， 1.5H， CH3ala)， 1.57(d， J ＝ 6.9， 1.5H， CH3ala). 31 [1264] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.16， 7.89. [1265] 步骤 2 ： 合成蛋白肽 [1266] 采用 ( 方法 A) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的通用方法， 向含有 1.12g(1.6mmol) 核 苷 的 25mL 四 氢 呋 喃 中， 加 入 1.44mL(0.018mmol)N- 甲 基 咪 唑， 随后加入含有 4.38g(0.11mmol)(2S)- 苄基 2- 氯 -( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 25mL 四氢呋 喃。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 68mg 纯净的蛋白肽， 收率 28％， 呈白色固体。 [1267] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1268] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.20-8.13(m， 1H)， 7.98， 7.95(2x s， 1H)， 7.83-7.77(m， 1H)， 7.63， 7.62(2x d， J ＝ 7.7， 1H)， 7.54-7.49(m， 1H)， 7.49-7.40(m， 2H)， 7.32(t， J ＝ 7.5， 1H)， 7.27-7.16(m， 5H)， 6.04， 6.02(2x s， 1H)， 5.03， 4.93(AB， J AB ＝ 12.00Hz， 2H)， 4.67-4.57(m ， 2H) ， 4.34-4.24(m ， 2H) ， 4.16-4.06(m ， 1H ， 4.01 ， 4.00(2x s ， 3H) ， 1.30 ， 1.29(2x d， J ＝ 7.1， 3H)， 0.97， 0.95(s， 3H). 3 3 [1269] )δ174.85(d， JC-C-N-P ＝ 4.4)， 174.62(d， JC-C-N-P ＝ 5.5， )， 162.74， 161.83， 154.56， 2 2 154.51， 147.99(d， JC-O-P ＝ 1.9)， 147.93(d， JC-O-P ＝ 1.7)， 139.31， 139.04， 137.08， 136.24， 3 136.22， 129.54， 129.26， 129.25， 129.17， 129.12， 128.87， 128.83， 127.90(d，JC-C-O-P ＝ 3 4.1)， 127.85(d， JC-C-O-P ＝ 4.2)， 127.77， 127.53， 126.56， 126.53， 126.00， 122.83， 122.76， 3 3 116.28， 116.27， 115.68， 115.65， 93.30， 93.12， 82.29(d， JC-C-O-P ＝ 8.0)， 82.12(d， JC-C-O-P ＝[1262] 2 8.4)， 80.03， 79.99， 79.53， 74.96， 74.64， 68.03(d， JC-O-P ＝ 4.7)， 67.98， 67.96， 67.48(d， 2 3 3 JC-O-P ＝ 4.9)， 51.84， 51.75， 20.67(d， JC-C-N-P ＝ 6.1)， 20.48(d， JC-C-N-P ＝ 4.6)， 20.44. [1270] )δ4.28， 4.27. [1271] 实施例 14 [1272] (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯按照如下步骤合成 ：[1273][1274] [1275]步骤 1 ： (2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， 2， 4- 二氟苄基 -L- 丙氨酸 (4g) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (2.69g)、 三乙胺 (2.9mL)、 和二氯甲烷 (52mL) 合 并得到 2.77g 萘 -1- 基 -(2， 4- 二氟苄基 -L- 丙氨酰基 ) 氯化磷酸酯， 下一步骤中直接使用。 [1277] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31 [1278] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.10， 7.92. [1279] 步骤 2 ： 合成蛋白肽 [1280] 采用 ( 方法 A) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的通用方法， 向含有 300mg 核苷的 3.6mL 四氢呋喃溶液中， 加入 384μL N- 甲基咪唑， 随后加入含有 1.27g(2S)2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 3.6mL 四氢呋喃。Workup 和硅胶柱层析之[1276]后， 得到 217mg 纯净的蛋白肽， 收率 30％， 为白色固体。HPLC ： tR ＝ 20.56、 20.89min。( 柱 ： varian Pursuit XRs5， C18， 150x4.6mm。该方法是 ： 线性梯度 H2O/ 乙腈 ： 30min 内， 乙腈从 0％至 100％。) [1281] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1282] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.14(m， 1H)， 8.00 和 7.97(2s， 1H)， 7.82(m， 1H)， 7.65(d， J ＝ 7.7， 1H)， 7.52-7.41(m， 3H)， 7.38-7.26(m， 2H)， 6.89-6.77(m， 2H)， 6.01 和 6.00(2s， 1H)， 5.09-4.95(m， 2H)， 4.67-4.57(m， 2H)， 4.36-4.22(m， 2H)， 4.08(m， 1H， 4.02 和 4.01(2s， 3H)， 1.29(d， J ＝ 7.1， 3H)， 0.97 和 0.95(2s， 3H).96102348712 A CN 102348731 [1283]31说明书67/198 页P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.21 [1284] 实施例 15 [1285] 1(S)- 苯 乙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯按照如下步骤合成 ：[1286][1287] [1288]步骤 1 ： (2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯采 用 合 成 萘 ( 氨 基 酸 酯 ) 氯 化 磷 酸 酯 的 一 般 方 法， 10g 的 (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2- 氨基丙酸酯的甲苯磺酸盐、 7.14g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 7.60mL 三乙胺、 和 120mL 二氯 甲烷， 合并得到 9.7g 萘 -1- 基 ((S)-1- 苯基乙氧基 -L- 丙氨酰基 ) 氯化磷酸酯， 收率 85％， 为浅黄色粗油。 [1290] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1291] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.08(m， 1H， H8-napht)， 7.89(m， 1H， H5-napht)， 7.74(m， 1H， H4-napht)， 7.63-7.50(m， 3H， H7， H 6， H2-napht)， 7.49-7.27(m， 6H， H3-napht 和 phe)， 5.96(dd， J ＝ 6.7， 13.3， 0.5H， CH 酯 )， 5.93(dd， J ＝ 6.6， 13.2， 0.5H， CH 酯 )， 4.40-4.21(m， 2H， NH 和 CHα)， 1.61(d， J ＝ 6.6， 1.5H， CH3Ala)， 1.57(d， J ＝ 6.6， 1.5H， CH3Ala)， 1.52(d， J ＝ 6.8， 1.5H， CH3 酯 )， 1.49(d， J ＝ 6.8， 1.5H， CH3 酯 ). 31 [1292] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.17， 7.86. [1293] 步骤 2 ： 合成蛋白肽 [1294] 采用 ( 方法 A) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的通用方法， 向含有 1.5g(4.82mmol) 核 苷 的 30mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 1.9mL(24.10mmol)N- 甲 基 咪 唑， 随后加入含有 6.04g(14.5mmol)(2S)-((S)-1- 苯基乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 的 20mL 四氢呋喃。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 571mg 纯净的蛋白肽， 收率 17％， 为白 + 色固体。Ms(ES+)m/e ： 693.25(MH 、 100％ ) ； 精确质量 ： C33H38N6O9P1 calculated 693.2438， found 693.2468， [1295] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ：[1289] 97102348712 A CN 102348731 [1296]1说明书68/198 页H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.20-8.16(m， 1H)， 7.98， 7.94(2x s， 1H)， 7.92-7.85(m， 1H) ， 7.71-7.69(m ， 1H) ， 7.54-7.46(m ， 3H) ， 7.41-7.35(m ， 1H) ， 7.29-7.22(m ， 5H) ， 6.00 ， 5.99(2x s， 1H)， 5.74， 5.68(2x q， J ＝ 6.7Hz， 1H)， 4.65-4.59(m， 1H)， 4.57-4.55(m， 1H)， 4.36-4.28(m， 1H)， 4.28-4.21(m， 1H)， 4.06-4.01(m， 4H)， 1.40， 1.41(2x d， J ＝ 6.1Hz， 3H)， 1.26(2x s， 3H)， 0.98， 0.96(2x s， 3H). 31 [1297] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.30， 4.27. [1298] 实施例 16 [1299] (2S)-2， 3- 二 氢 -1H- 茚 -2- 基 -2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷 酰化氨基 ) 丙酸酯按照如下步骤合成 ：[1300][1301]步骤 1 ： (2S)-2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯[1302]采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)-2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基 2- 氨基丙酸酯 (2.00g， 5.30mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (1.38g， 5.30mmol)、 含有三乙胺 (1.48mL， 10.60mmol) 的 30mL 干燥的二氯甲烷， 合并得到 1.48g (2S)-2， 3- 二 氢 -1H- 茚 -2- 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯， 收率 65％， 呈黄色稠油状。 [1304] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1305] H NMR(500MHz ，CDCl 3 ) δ 8.08-8.05(m ， 1H ，H 8 -napht) ， 7.90-7.88(m ， 1H ， H5-napht)， 7.75(d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H4-napht)， 7.62-7.52(m， 3H， H7 ， H 6， H2-napht)， 7.45， 7.44(2x t， J ＝ 8.0Hz， 1H， H3-napht)， 7.29-7.20(m， 4H， 4x CH Ar 酯 )， 5.68-5.65， 5.63-5.59(2x m ， 1H ， CH 酯 ) ， 4.51 ， 4.25(2x bs ， 1H ， NH) ， 4.31-4.22(m ， 1H ， CHa) ， 3.42-3.32(m， 2H， 2x CH 酯 )， 3.11-3.00(m， 2H， 2x CH 酯 )， 1.54， 1.52(2x d， J ＝ 7.0Hz， 3H， CH3). 31 [1306] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.16， 7.90[1303] 步骤 2 ： 合成蛋白肽 [1308] 采用 ( 方法 B) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向含有 250mg(0.803mmol) 核 苷 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 1.61mL(1.61mmol) 叔 丁 基 氯 化 镁， 随后加入含有 690mg(1.60mmol)(2S)-2， 3- 二氢 -1H- 茚 -2- 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸 酯的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 255mg 纯净的蛋白肽， 收率 45％， 为类白色固体。 [1309] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1310] H NMR(500MHz ， CD 3OD) δ 8.17-8.10(m ， 1H ， H 8-napht) ， 7.95 ， 7.93(2x s ， 1H ， H8)7.81(d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H 5-napht)， 7.65， 7.63(2x d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H 4-napht)， 7.50-7.42(m， 3H， H7 ， H 6， H2-napht)， 7.37-7.33(m， 1H， H3-napht)， 7.15-7.08(m， 4H， 4x CH 酯 )， 6.00(s， 1H， H1’)， 5.34-5.31(m， 1H， CH 酯 )， 4.59-4.51(m， 2H， H5’)， 4.33-4.21(m， 2H， H3’ 和 H4’)， 4.02， 4.01(2xs， 3H， 6OCH3)， 3.98-3.95(m， 1H， H)， 3.20-3.01(m， 2H， 2x CH 酯 )， 2.85-2.78(m， 2H， 2x CH 酯 )， 1.26， 1.25(2x d， J ＝ 7.00Hz， 3H， CH3Ala)， 0.97， 0.94(2x s， 3H， 2’ -CH3). 13 3 [1311] C NMR(126MHz ， CD 3OD) δ 174.97 ， 174.73(d ， J C-C-N-P ＝ 3.8 ， C ＝ O 酯 )， 2 162.73(C6)， 161.83(C2)， 154.53， 154.48(C4)， 147.97， 147.91(d， JC-O-P ＝ 3.8Hz， ipso Naph)， 141.52， 141.48， 141.36， 141.35， 139.28， 138.97， 136.24， 136.22， 128.87， 128.83， 127.88， 127.82， 127.81， 127.77， 127.52， 126.55， 126.51， 125.99， 125.60， 125.57， 125.52， 3 122.81， 122.75(Naph， C9-Naph， 2xipso 酯 和 4x CH 酯 )， 116.24， 16.22(d， JC-C-O-P ＝ 3.8， 3 C2-Naph)， 115.67， 115.65(C5)， 93.32， 93.11(C1’ )， 82.28， 82.08(2x d，JC-C-O-P ＝ 8.8， C4’ )， 79.98， 79.96(C2’ )， 77.73， 77.69(CH 酯 )， 74.91， 74.57(C3’ )， 67.97， 67.34(2x d， 2 JC-O-P ＝ 5.0， C5’ )， 54.36， 54.34(6OCH3)， 51.82， 51.71(C Ala)， 40.49， 40.44， 40.33， 40.25(2x CH2 酯 )， 20.63， 20.49(CH3Ala)， 26.9， 28.8， 28.7(3x CH3 酯 )20.4， 20.3(2’ CCH3)， 31 [1312] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.26 [1313] 实施例 17 [1314] (2S)- 丙基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯按照如下 步骤合成 ：[1315][1316] [1317]步骤 1 ： (2S)- 丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯采用合成萘 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)- 丙基 2- 氨基丙酸酯 (2.00g， 11.93mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (3.11g， 11.93mmol)、 含有三乙胺 (3.32mL， 23.86mmol) 的 30mL 干二氯甲烷， 合并得到 1.48g (2S)- 丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯， 收率 82％， 呈澄清黄色稠油状。 [1319] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1320] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.13-8.04(m， 1H， H8-napht)， 7.89， 7.88(2x d， J ＝ 7.5Hz， 1H， H5-napht)， 7.75(d， J ＝ 8.0Hz， 1H， H4-napht)， 7.64-7.55(m， 3H， H7， H6， H2-napht)， 7.45(t， J ＝ 8.0Hz， 1H， H3-napht)， 4.51， 4.25(2x bs， 1H， NH)， 4.28-4.27(m， 1H， CHa)， 4.15， 4.14(2x q， J ＝ 7.0Hz， 2H， O-CH2 酯 )， 1.76-1.65(m， 2H， O-CH2-CH2 酯 )， 1.59， 1.56(2x d， J ＝ 7.0Hz， 3H， CH3Ala)， 0.99， 0.96(2x t， J ＝ 6.5Hz， 3H， CH3 酯 ).[1318]P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.29， 8.04 [1322] 步骤 2 ： 合成蛋白肽 [1323] 采用 ( 方法 B) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向含有 250mg(0.803mmol) 核 苷 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 1.61mL(1.61mmol) 叔 丁 基 氯 化 镁， 随后加入含有 571mg(1.60mmol)(2S)- 丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 5mL 四氢呋喃 溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 163mg 纯净的蛋白肽， 收率 32％， 为类白色固体。 [1324] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1325] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.19-8.15(m， 1H， H8-naph)， 7.99， 7.97(2x s， 1H， H8)， 7.90-7.82(m， 1H， H5-napht)， 7.68， 7.65(2x d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H4-napht)， 7.54-7.45(m， 3H， H2， H7， H6-napht)， 7.38， 7.36(2x t， J ＝ 8.0Hz， 1H， H3-napht)， 6.04， 6.03(2x s， 1H， H1’)， 4.70-4.61(m， 2H， H5’)， 4.37-4.26(m， 2H， H3’ ， H4’)， 4.10-4.04(m， 1H， H)， 4.03(s， 3H， 6OCH3)， 3.95-3.84(m， 2H， OCH2 酯 )， 1.53-1.45(m， 2H， OCH2CH2 酯 )， 1.31(d， J ＝ 7.0Hz， 3H， CH3Ala)， 0.99， 0.97(2x s， 3H， 2’ CCH3)， 0.82(t， J ＝ 7.5Hz， 3H， CH3 酯 ).[1321]3 C NMR(126MHz， CD3OD)δ175.13， 174.89(2x d， JC-C-N-P ＝ 5.0Hz， C ＝ O 酯 )， 2 162.75(C6)， 161.84(C2)， 156.56， 154.52(C4)， 148.02， 147.96(2xd，JC-O-P ＝ 3.0Hz， ipso Naph)， 139.33， 139.07(CH8)， 136.25， 136.22(C10-Naph)， 128.86， 128.82， (CH-napht)， 3 127.85， 127.76(2x d，JC-C-O-P ＝ 6.3Hz， C9-Naph)， 127.49， 126.55， 126.51， 125.97， 125.95， 3 122.81， 122.76(CH-Naph)， 116.24， 116.17(2x d，JC-C-O-P ＝ 4.5Hz， C2-Naph)， 115.67， 3 115.66(C5)， 93.32， 93.17(C1’ )， 82.30， 82.16(2x d，JC-C-O-P ＝ 8.8Hz， C4’ )， 80.04， 2 80.01(C2’ )， 74.94， 74.71(C3’ )， 68.00(OCH2 酯 )， 67.87， 67.54(d， JC-O-P ＝ 5.0Hz， C5’ )， 3 54.36(6OCH3)， 51.77， 51.17(C Ala)， 20.84， 20.62(2x d， JC-C-N-P ＝ 6.3Hz， CH3 Ala)， 20.46， 20.44(2’ CCH3)， 10.67， 10.65(CH3 酯 ). 31 [1327] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.33， 4.22.31[1326]13实施例 18 [1329] (2S)-3， 3- 二 甲 基 丁 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯按照如下步骤合成 ：[1330][1331] [1332]步骤 1 ： (2S)-3， 3- 二甲基丁基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)-3， 3- 二甲基丁基 2- 氨 基丙酸酯 (2.00g， 5.79mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (1.51g， 5.79mmol)、 含有 三乙胺 (1.61mL， 11.58mmol) 的 30mL 干燥的二氯甲烷， 合并得到 2.10g(2S)-3， 3- 二甲基丁 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯， 收率 91％， 呈澄清黄色稠油状。 [1334] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1335] H NMR(500MHz ，CDCl 3 ) δ 8.11 ， 8.09(2x d ，J ＝ 7.5Hz 1H ，H 8 -napht) ， 7.90-7.89(m， 1H， H5-napht)， 7.75(d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H4-napht)， 7.64-7.55(m， 3H， H6， H7， H2-napht)， 7.46(t， J ＝ 7.5Hz， 1H， H3-napht)， 4.56-4.45(m， 1H， NH)， 4.32-4.26(m， 2H， OCH2 酯 )， 4.25-4.21(m， 1H， CHa)， 1.64-1.60(m， 2H， CH2 酯 )， 1.58， 1.55(2x d， J ＝ 7.0Hz， CH3Ala)， 0.98， 0.96(2x s， 9H， 3x CH3 酯 ). 31 [1336] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.46， 8.02 [1337] 步骤 2 ： 合成蛋白肽 [1338] 采用 ( 方法 A) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向含有 250mg(0.803mmol) 核 苷 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 1.61mL(1.61mmol) 叔 丁 基 氯 化 镁， 随后加入含有 640mg(1.60mmol)(2S)-3， 3- 二甲基丁基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 190mg 纯净的蛋白肽， 收率 35％， 为类 白色固体。 [1339] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1340] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.20-8.16(m， 1H， H8-naph)， 8.00， 7.98(2x s， 1H， H8)，[1333] 7.85-7.81(m， 1H， H5-napht)， 7.66， 7.64(2x d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H4-napht)， 7.54-7.45(m， 3H， H2， H7， H6-napht)， 7.39， 7.37(2x t， J ＝ 8.0Hz， 1H， H3-napht)， 6.04， 6.03(2x s， 1H， H1’)， 4.71-4.61(m， 1H， H5’)， 4.36-4.27(m， 1H， H3’ ， H4’)， 4.03(s， 3H， 6OCH3)， 4.02-3.91(m， 2H， H.and OCH2 酯 )， 1.39-1.29(m， 5H， CH3Ala 和 OCH2CH2 酯 )， 0.99， 0.97(2x s， 3H， 2’ CCH3)， 0.82， 0.81(2x s， 9H， 3x CH3 酯 ). 13 3 [1341] C NMR(126MHz， CD3OD)δ175.06， 174.80(2x d， JC-C-N-P ＝ 5.0Hz， C ＝ O 酯 )， 2 162.73(C6)， 161.86(C2)， 154.55， 154.51(C4)， 148.00， 147.95(d， JC-O-P ＝ 3.8Hz， ipso Naph) ， 139.36 ， 139.08(CH8) ， 136.27 ， 136.25(C10-Naph) ， 128.86 ， 128.80(CH-Naph) ， 3 127.88 ， 127.73(2x d ，J C-C-O-P ＝ 6.3Hz ， C9-Naph) ， 127.78 ， 127.76 ， 127.51 ， 126.51 ， 3 125.53 ， 125.98 ， 125.93 ， 122.83 ， 122.79(CH-Naph) ， 116.22 ， 116.09(2x d ，J C-C-O-P ＝ 3 3.8Hz， C2-Naph)， 115.67(C5)， 93.30， 93.16(C1’ )， 82.29， 82.15(2x d， JC-C-O-P ＝ 8.8Hz， 2 C4’ )， 80.06， 80.03(C2’ )， 74.90， 74.67(C3’ )， 67.97， 67.50(2x d， JC-O-P ＝ 5.0Hz， C5’ )， 64.01， 63.99(OCH2 酯 )， 54.37， 54.35(6OCH3)， 51.74， 51.71(C Ala)， 42.67， 42.60(OCH2CH2 3 酯 )， 30.08， 30.00(3x CH3 酯 )， 20.73， 20.52(2x d，JC-C-N-P ＝ 6.3Hz， CH3Ala)， 20.46， 20.44(2’ CCH3). 31 [1342] P NMR(202MHz， CDCl3)δ4.33， 4.29. [1343] 实施例 19 [1344] (2S)- 异丁基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯按照如下 步骤合成 ：[1345][1346] [1347]步骤 1 ： (2S)- 异丁基 2- 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯采用合成萘 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 2.5g(2S)- 异丁基 2- 氨基丙酸 酯的甲苯磺酸盐、 2.06g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 2.19mL 三乙胺和 50mL 二氯甲烷， 合并得到 (2S)- 异丁基 2- 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯， 呈粗产物浅黄色稠油状。粗产 物化合物在没有进一步纯化情况下使用。 [1349] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ：[1348] 102102348712 A CN 102348731 [1350]31说明书73/198 页P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.27， 7.96 [1351] 步骤 2 ： 合成蛋白肽 [1352] 采用 ( 方法 B) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向含有 205mg 核苷的 4mL 四氢呋喃溶液中， 加入 1.31mL 叔丁基氯化镁， 随后加入含有 730mg(2S)- 异丁基 2- 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 2.6mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之 后， 得到 66mg 纯净的蛋白肽， 收率 16％。HPLC tR ＝ 27.61、 28.29min( 柱 ： varian Pursuit XRs5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： 30min 内， 水中甲醇线性梯度从 0％至 100％。 [1353] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1354] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.21-8.14(m， 1H)， 7.98 和 7.95(2s， 1H)， 7.91-7.84(m， 1H) ， 7.73-7.66(m ， 1H) ， 7.56-7.36(m ， 4H) ， 6.02 和 5.98(2s ， 1H) ， 4.67-4.52(m ， 2H) ， 4.36-4.21(m， 2H)， 4.09-3.98(m， 4H)， 3.80-3.64(m， 2H)， 1.84-1.74(m， 1H)， 1.32(d， J ＝ 7.1， 3H)， 0.98 和 0.96(2s， 3H)， 0.87-0.82(m， 6H). 31 [1355] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.30， 4.19 [1356] 实施例 20 [1357] 2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯按照如下步骤合成 ：[1358][1359] [1360]步骤 1 ： (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯采 用 合 成 萘 基 ( 氨 基 酸 酯 ) 氯 化 磷 酸 酯 的 一 般 方 法， 1.5g(2， 2- 二 甲 基 丙 氧 基 )-L- 丙氨酸的甲苯磺酸盐， 与 1.18g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 1.26mL 三乙胺和 20mL 二氯甲 烷合并， 得到 1.4g(2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯， 收率 81％， 呈粗产物浅黄色稠油状 ： [1362] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1363] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.11(m， 1H， H8-napht)， 7.89(m， 1H， H5-napht)， 7.76(m， 1H， H4-napht)， 7.66-7.53(m， 3H， H6， H7， H2-napht)， 7.46(td， J ＝ 2.0， 8.0， 1H， H3-napht)， 4.54(m， 0.5H， NH)， 4.46(m， 0.5H， NH)， 4.41-4.30(m， 1H， Hα)， 3.99-3.84(m， 2H， CH2 酯 )，[1361] 1.61(d， J ＝ 7.1， 1.5H， CH3ala)， 1.59(d， J ＝ 7.0， 1.5H， CH3ala)， 1.00(s， 4.5H， tBu)， 0.98(s， 4.5H， tBu). 31 [1364] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.25， 7.96. [1365] 步骤 2 ： 合成蛋白肽 [1366] 采用 ( 方法 A) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 在 -78 ℃， 向含有核苷 (6.0g， 19.29mmol) 的 50mL 无水四氢呋喃溶液中， 加入 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧 基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 (14.8g， 38.58mmol) 的溶液， 随后加入 N- 甲基咪唑 (7.65mL， 96.45mmol)。反应混合物室温下温热， 并搅拌过夜。标准 Workup 之后， 采用比例为 96 ∶ 4 的 CH2Cl2/MeOH， 经硅胶柱层析纯化粗产物， 得到 3.5g 类白色固体蛋白肽， 收率 27.5％。 [1367] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1 [1368] H NMR(200MHz， CDCl3)δ8.18-8.10(m， 1H)， 7.93(d， J ＝ 5.0Hz， 1H)， 7.87-7.62(m， 1H)， 7.65(t， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 7.52-7.31(m， 4H)， 5.96(d， J ＝ 3.0Hz， 1H)， 4.63-4.53(m， 2H)， 4.33-4.19(m， 2H)， 4.07-3.96(m， 1H)， 4.02(s， 3H)， 3.76-3.52(m， 2H)， 1.30(d， J ＝ 7.2Hz， 3H)， 0.95-0.91(2s， 3H)， 0.84-0.82(2s， 9H). 31 [1369] P NMR(50MHz， CDCl3)δ5.37， 5.32. [1370] 改 进 合 成 2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ： [1371] 步骤 1 ： 制备 (S)- 新戊基 2-( 叔丁氧基甲酰胺基 ) 丙酸酯 [1372] 在装有机械搅拌装置、 内部热电偶、 使用冰 / 盐冷却的冷水浴、 和氮气入口的 22L 三 口 烧 瓶 中 加 入 N- 叔 丁 氧 羰 基 -L- 丙 氨 酸 (900g， 4.75mol， 纯 度 等 级 99 ％， 产品 编 号 01322， Chem-Impex 公 司 ) 和 含 有 新 戊 醇 (502.4g， 5.70mol， 纯 度 等 级 99 ％， 产品 编 号 N7206， Aldrich 公 司 ) 的 9L 无 水 二 氯 甲 烷 溶 液。 向 该 混 合 物 溶 液 中， 加入单份 EDCI(1.37kg， 7.12mol， 1.5 当量， 产品编号 00050， Chem-Impex 公司 )， 随后 0 ℃下分批添 加 DMAP(58g， 0.475mmol， 纯度等级 99 ％， 产品编号 107700， Aldrich 公司 )。混合物在冰 浴中缓慢温热， 并在室温下搅拌 15 小时。用 TLC 监测反应进程 (Rf ＝ 0.4， 正己烷∶乙酸 乙酯 (85 ∶ 15)， 茚三酮染色 )。反应混合物用 2L 二氯甲烷稀释， 并依次用 2L 饱和 NaHCO3 溶液洗涤 2 次， 用 2L 盐水洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥 (EMD 级 )， 过滤， 减压下浓缩。 使用正己烷∶乙酸乙酯 (85 ∶ 15) 恒定梯度混合物， 经硅胶柱层析纯化 (4kg， Silicycle， SiliaFlash P60)， 真空浓缩后， 得到 903g(3.48mol， 74％ ) 化合物 2， 呈淡黄色油状。 [1373] 步骤 2. 制备 (S)- 新戊基 2- 氨基丙酸酯对甲苯磺酸 [1374] 转化反应在装有机械搅拌装置和内部热电偶的 22L 三口烧瓶中进行。向含有 (S)- 新戊基 2-( 叔丁氧基甲酰胺基 ) 丙酸酯 (900g， 3.47mol) 的 14L 乙酸乙酯的搅拌溶液 中加入 PTSA.H2O(660g， 3.47mol， 试剂级 98％， 产品编号 161993， Aldrich 公司 )， 65℃加热 10 个小时。 混合物被冷却至室温得到白色固体， 过滤之前， 在冰浴中冷却 30 分钟。 混合溶液 过滤， 真空炉中干燥 15 个小时 (40℃， Welch Model 2034， ca.10mmHg)， 得到 907g(2.74mol， 收率 79％ ) 的预期产物。 [1375] 步骤 3 ： 制备萘 -1- 基二氯磷酸酯室温下， 在装有机械搅拌装置、 内部热电偶、 使用干冰 / 丙酮冷却的冷水浴、 附加 漏斗和氮气入口的 22L 三口烧瓶中加入含有 1- 萘酚 (780g， 5.41mol， 491g， 来自 Aldrich 公 司， 试剂级 99％， 产品编号 A11862) 的 10L MTBE。5 分钟内， 氮气压力下， 从另一个漏斗中 滴加入 POCl3(495mL， 5.41mol， ReagentPlus 99％， 产品编号 201170， Aldrich 公司 )( 注 意： 没有观察到发热现象 )。-25℃下， 向这种溶液 ( 内部温度 ) 缓慢加入三乙胺 (754mL， 5.41mol， 试剂级≥ 99.5％， 产品编号 471283， Aldrich 公司 )， 用时 1 小时 ( 注意 ： 观察到发 热现象 )， 滴加完成后， 移去冷浴。室温， 氮气压力下， 反应混合物被陈化 3 小时。用 3L 烧 结漏斗 ( 中等尺寸 ) 过滤三乙胺盐酸盐， 减压下， 在＜ 20℃的水浴中， 浓缩滤液得到所需产 物， 为透明的暗黄色油 (1219g， 收率 86.3％ )， 使用时无需进一步纯化。 [1377] 步骤 4. 制备 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 [1378] 装有机械搅拌装置、 内部热电偶、 使用干冰 / 丙酮冷却的冷水浴、 附加漏斗和氮气 入口的 22L 三口烧瓶中， 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (1219g， 4.67mol) 和 (S)- 新戊基 2- 氨基丙 酸酯对甲苯磺酸 (1547g， 4.67mol) 悬浮在 15L 无水二氯甲烷中。25℃， 无水三乙胺 (1.3L， 9.34mmol， 试剂级≥ 99.5％， 产品编号 471283， Aldrich 公司 ) 被缓慢加入， 用时 1 小时。之 31 后， 反应混合物被加温至室温， 搅拌过夜， 用 P NMR 监测反应。反应完成后， 减压下除去溶 剂， 所得粗残留物用比例 1 ∶ 1 的乙酸乙酯 (2L)/ 正己烷 (2L) 使用短垫硅胶 (Silicycle， SiliaFlash P60， 3 英寸高， 漏斗 ： 3L 中等尺寸 ) 过滤， 并且使用乙酸乙酯 / 己烷 (3L ∶ 3L) 洗脱， 随后用乙酸乙酯 / 正己烷混合物 (1.5L ∶ 1.5L) 漂洗。一经浓缩， 用 3L 四氢呋喃稀 释黑油， 减压下再被浓缩， 得到 1700g( 收率 94％ ) 产品， 使用时不需进一步纯化。 [1379] 步骤 5. 合成 (2S)- 异丁基 2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基 - 四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 [1380] 在装有机械搅拌装置、 内部热电偶、 冷浴、 附加漏斗和氮气入口的 22L 三口烧瓶 中， 向 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢 呋喃 -3， 4- 二醇 (450g， 1.45mol， 1.0 当量 ) 的溶液中， 氮气气氛下， 用时大于 45 分钟， 干 冰 / 丙酮冰浴， 缓慢加入含有 1.0M 叔丁基氯化镁的四氢呋喃溶液 (Aldrich 公司， 2.89L， 2.89mol， 2.0 当量 )。搅拌 30 分钟后， 所得反应混合物为白色悬浮液， 用时大于 40 分钟， 逐 滴加到含有 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 (1.11kg， 2.895mol， 2.0 当量 ) 的 1.6L 四氢呋喃溶液中。混合物被加温至室温， 搅拌过夜。用 TLC(DCM ∶ MeOH ＝ 97 ∶ 3， λ254nm， Rf ＝ 0.3， 参见下文典型的薄层色谱图 ) 和 LC/MS 监测反应进程。反应 混合物用冰浴冷却， 用时大于约 20 分钟， 逐滴加入 7L 饱和 NH4Cl 溶液逐滴终止反应， 剧烈 搅拌 20 分钟。反应混合物 ( 四氢呋喃层 ) 从 NH4Cl 水溶液中分离出来。水层用 3L 四氢呋 喃萃取。合并的有机层 ( 四氢呋喃 ) 用 2L 盐水漂洗， 用无水硫酸钠干燥， 在低于 39±1℃ 温度下， 减压下， 浓缩。1600g 粗产物用硅胶柱层析和 Biotage 色谱纯化。1600g 粗产物溶 于 1.2L 二氯甲烷被加载到装填硅胶 (13kg， Silicycle， SiliaFlash P60) 的玻璃柱 ( 高 11″ x 20″ ) 内， 用 300L 含有 1％ MeOH 的二氯甲烷至含有 4％ MeOH 的二氯甲烷的洗脱液 提纯， 收集馏分 (55x 4L 琥珀瓶 )， 得到三个馏分， 总计 730g。需要进一步提纯该材料。 [1381] A 部分纯化 1 ： 用 Biotage( 柱 F75L， 800g) 再 次 提 纯 溶 液 在 300mL 的 第 一 批 A(140g)， 得到 92g 纯净产物。用含有 0.5％甲醇的 60L 二氯甲烷至含有 3％甲醇的 60L 二氯甲烷的混合物洗提， 收集馏分 (20x 1L 和 20x 2L 锥形瓶 )。HPLC 得到非对映异构体的比 例 68 ∶ 32。提纯之前， 粗混合物的非对映异构体比例约为 50 ∶ 50。 [1382] B 部分纯化 2 ： 420g 主料 B 溶解于 1L 二氯甲烷再用 Biotage( 柱 F150M， 2.5kg) 提 纯， 得到 296g 纯净产物。用含有 0.5％甲醇的 200L 二氯甲烷至含有 3％甲醇的 200L 二氯 甲烷的混合物洗提， 收集馏分 (45x4L 小瓶 )。HPLC 得到非对映异构体的比例 49 ∶ 51。合 并不纯的馏分并在 “运行 3” 中一起提纯。 [1383] C 部分纯化 2 ： 采用 50L 二氯甲烷， 用 Biotage(F75L， 800g) 再次提纯 500mL 溶解最 后一批 C(170g) 的二氯甲烷溶液。用含有 1％甲醇的二氯甲烷至含有 3％甲醇的二氯甲烷 的混合物洗提， 收集馏分 (45x4L 小瓶 )。遗憾的是， 收集的馏分未达到所需纯度。溶解在 600mL 二氯甲烷中的来自部分 1、 2 和 3 的所有被合并的不纯物质 ( 总量计 220g 粗产物 ) 装 载到具有硅胶 (11kg， Silicycle， SiliaFlash P60) 的玻璃柱 ( 高 11’ x 20’ ) 上。使用 含有 1％甲醇的 200L 二氯甲烷至含有 3％甲醇的 200L 二氯甲烷的洗提混合物， 得到 152g 纯净产物。通过 HPLC 测定非对映异构体比例是 41 ∶ 59。 [1384] 很明显， 非对映异构体比例可通过选择正确色谱馏分来进行控制。 [1385] 总之， 730g 粗产物的提纯运行提供了总计 540g 纯净产物。为除去痕量的二氯甲 烷， 540g 溶于 3L(x 2) 甲醇中， 然后在 20L 旋转蒸发烧瓶中蒸发。产物由 20L 旋转蒸发烧瓶 于 39℃ ±1℃下完全干燥 15 小时， 得到白色粉末状固体。产物放在玻璃托盘内在烘箱中干 燥 (3 天， 39℃ ±1℃， ＜ 5-10mmHg)， 直至恒重， 得到 517g(0.785mol， 54.3％， ＜ 2000ppm 甲 醇 ) 类白色固体。 [1386]
     实施例 21

    [1387] 分 离 非 对 映 异 构 体 体 ( 峰 1)(S)-p 2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧 基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯按照如下所述从非对映体混合物中提纯出来 ：

    [1388] 2， 2- 二甲基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 (10.0g) 比例为 1 ∶ 1 的非对映异构体的混合物被吸收在比例为 1 ∶ 1 的己烷∶乙醇中， 加载到 Chiral pak AD 手性色谱柱内， 用同一溶剂洗脱。 300nm 处进行紫外检测。 馏分分析在 Chiral Pak AD(5um， 4.6mm ID x 250mm ； S/N ADHOCE-LD001) 上进行， 流速为 1mL/min， 在 300nM 处 检测。得到完全分离的两种非对映异构体 ( 参见下图 )。

    [1390] 图 1. 手性色谱法分离非对映异构体

    [1389] 分析柱上峰 1 停留时间 6min， 提供 4.75g( 收率 95.9％ )99.9％ ee( 对映体过量 值 ) 的单一非对映异构体。

    [1393] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1394] H NMR(500MHz， MeOD)δ8.16(d， J ＝ 8.50Hz， 1H， H8-naph)， 7.97(s， 1H， H 8) ， 7.85(d， J ＝ 7.50Hz， 1H， H5-napht)， 7.67(d， J ＝ 8.00Hz， 1H， H4-napht)， 7.52-7.45(m， 3H，

    [1392] H2， H7， H6-napht)， 7.38(t， J ＝ 8.00Hz， 1H， H3-napht)， 6.00(s， 1H， H1’)， 4.68-4.57(m， 1H， H5’ )， 4.31-4.25(m， 2H， H3’ ， H4’ )， 4.09-4.03(m， 4H， H..6OCH3)， 3.76， 3.64(AB， JAB ＝ 10.50Hz， 2H， CH2 酯 )， 1.33(d， J ＝ 7.50Hz， 3H， CH3Ala)， 0.96(s， 3H， 2’ CCH3)， 0.87(s， 9H， 3xCH3 酯 ) 13 3

    [1395] C NMR(126MHz， MeOD)δ175.05(d， JC-C-N-P ＝ 5.00Hz， C ＝ O 酯 )， 162.73(C6)， 2 161.87(C2) ， 154.55(C4) ， 147.97(d ，J C-O-P ＝ 6.30Hz ，ipso Naph) ， 139.09(CH8) ， 3 136.26(C10-Naph)， 128.78(CH-Naph)， 127.89(d，JC-C-O-P ＝ 6.30Hz， C9-Naph)， 127.71， 3 127.46 ， 126.46 ， 125.93 ， 122.80(CH-Naph) ， 116.17(d ，J C-C-O-P ＝ 2.50Hz ， C2-Naph) ， 3 115.58(C5)， 93.21(C1’ )， 82.16(d， JC-C-O-P ＝ 8.80Hz， C4’ )， 79.97(C2’ )， 75.36(CH2 酯 )， 2 74.69(C3’ )， 67.64(d， JC-O-P ＝ 5.00Hz， C5’ )， 54.23(6OCH3)， 51.78(C Ala)， 32.24(C 酯 )， 3 26.69(3x CH3 酯 )， 20.60(d， JC-C-N-P ＝ 6.30Hz， CH3Ala)， 20.30(2’ CCH3) 31

    [1396] P NMR(202MHz， CDCl3)δ4.22

    [1397] 峰 1 产物的绝对构型由振动圆二色谱确定为 (S)-p

    [1398] 振动圆二色谱的试验测量 ： 6mg 峰 1 化合物的样品溶解在 125LCDCl3 中， 放置在配 有 BaF2 窗口的 100m 路径长度样品池。红外和振动圆二色谱已被记录在 Chiral IR 振动圆 二色谱仪 (BioTools， Inc.， Jupiter， FL) 上， 配备 DualPEM， 分辨率 4cm-1， 8-h 收集样品和溶 -1 剂， 在 1400cm 处仪器最佳。

    [1399] 理论计算 ： 上文所示 (S)-P 和 (R)-P 非对映异构体构型使用 Hyperchem 分子建模 软件绘制的 (Hypercube， Inc.， Gainesville， FL)。使用 Spartan 06 分子理论水平进行构 型搜索。构型搜索很好地鉴别每个非对映异构体确定了超过 100 个可能的构型。使用高斯 03 软件 (Gaussian Inc.， Wallingford， CT)， 在 DFT 水平 (B3LYP functional/6-31G(d) 基 组 ) 计算构型搜索中所确定的每种非对映异构体的 9 种低能量构型的几何形状、 频率、 和 IR 与振动圆二色谱强度。所计算出的频率被缩放 0.97 倍， IR 和振动圆二色谱强度转换成具 -1 有 6-cm 半宽的 Lorentzian 带， 用于试验对比。

    [1400] 分析 ： 两种非对映异构体的计算出来的振动圆二色谱显示出～ 1000cm-1 频带处几乎呈镜像的振动圆二色谱强度， 对应于～ 1030cm-1 处观察到的特征 ( 对比于计算出来的谱 图， 所观察谱图中高频处也出现了该区域不同红外特征 )。这些频带对应 H2C-O-P 键的反对 称拉伸 ( 动画计算正常模式所确定 )。 这种拉伸模式作为磷手性的标记， 配置峰 1-(S)-P 和 -1 -1 峰 2-(R)-p 构型。1000cm 和 1300cm 之间， 光谱的几个其它区域， 计算出来的 (S)-P 振动 圆二色谱显示比 (R)-P 圆二色谱更正的振动圆二色谱强度。这些差值通常反映了试验光谱 之间的差异。这两个非对映异构体的振动圆二色谱分析提供了磷手性配置的峰 1 非对映体 (S)-P 和峰 2 非对映异构体 (R)-P， 与 5 元环中 4 个手性碳的 R- 构型和蛋白肽 S- 构型一致。

    [1401] 图 观察到和计算出的峰 1( 橙色 ) 和峰 2( 蓝色 ) 的振动圆二色谱

    [1402] 实施例 22

    [1404] 分 离 非 对 映 异 构 体 ( 峰 2)(R)-P 2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧 基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯按照如下所述从非对映体混合物中提纯出来 ：

    [1403] 如上所述， 峰 2， 分析柱上停留时间为 10.7 分钟， 提供 5.29g( 收率 100％ )99.8％ 对映体过量值的单一非对映异构体， 99.9％ ee( 对映体过量值 ) 的单一非对映异构体。振动圆二色谱确定峰 2 非对映异构体的绝对构型， 如上述 (R)-P。

    [1407] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1408] H NMR(500MHz ，MeOD) δ 8.20-8.18(m ， 1H ，H 8 -naph) ， 7.95(s ， 1H ，H 8 ) ， 7.89-7.87(m， 1H， H5-napht)， 7.70(d， J ＝ 8.50Hz， 1H， H4-napht)， 7.54-7.50(m， 3H， H2， H7， H6-napht)， 7.41(t， J ＝ 7.00Hz， 1H， H3-napht)， 5.99(s， 1H， H1’)， 4.63-4.55(m， 1H， H5’)， 4.34(d， J ＝ 9.00Hz， 1H， H3’)， 4.28-4.23(m， 1H， H4’)， 4.08-4.03(m， 4H， H..6OCH3)， 3.72， 3.59(AB， JAB ＝ 10.50Hz， 2H， CH2 酯 )， 1.33(d， J ＝ 7.50Hz， 3H， CH3 Ala)， 0.98(s， 3H， 2’ CCH3)， 0.85(s， 9H， 3x CH3 酯 ) 13 3

    [1409] C NMR(126MHz， MeOD)δ174.78(d， JC-C-N-P ＝ 6.00Hz， C ＝ O 酯 )， 162.72(C6)， 2 161.89(C2) ， 154.51(C4) ， 148.00(d ，J C-O-P ＝ 7.00Hz ，ipso Naph) ， 139.38(CH8) ， 3 136.30(C10-Naph)， 128.84(CH-Naph)， 127.88(d，JC-C-O-P ＝ 6.30Hz， C9-Naph)， 127.74， 3 127.46 ， 126.51 ， 125.95 ， 122.76(CH-Naph) ， 116.21(d ，J C-C-O-P ＝ 3.20Hz ， C2-Naph) ， 3 115.60(C5)， 93.37(C1’ )， 82.32(d， JC-C-O-P ＝ 8.00Hz， C4’ )， 79.91(C2’ )， 75.34(CH2 酯 )， 2 74.94(C3’ )， 68.12(d， JC-O-P ＝ 5.00Hz， C5’ )， 54.21(6OCH3)， 51.71(C Ala)， 32.21(C 酯 )， 3 26.66(3x CH3 酯 )， 20.81(d， JC-C-N-P ＝ 6.30Hz， CH3Ala)， 20.27(2’ CCH3) 31

    [1410] P NMR(202MHz， CDCl3)δ4.28

    [1411] 实施例 23

    [1412] 按照如下所述， 合成 (2S)- 异丙基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ：

    [1413] 步骤 1 ： (2S)- 异丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯采用合成萘基磷酰氨基氯化物的通用方法， 异丙基氧基 -L- 丙氨酸的盐酸盐 (5g)、 萘 -1- 基 二 氯 磷 酸 酯 (7.30g)、 三 乙 胺 (8.31mL)、 和 二 氯 甲 烷 (146mL)， 合并得到 (2S)- 异丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯， 收率 61％ (6.52g)， 呈淡黄色 粗油状。HPLC ： tR ＝ 18.71、 18.95min。( 柱 ： Varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm。该 方法是 ： 线性梯度 H2O/ 乙腈 ： 30min 内乙腈从 0％至 100％ )

    [1416] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1418] H NMR(500MHz ， CDCl 3) δ 8.14-8.08(m ， 1H) ， 7.91-7.87(m ， 1H) ， 7.75(d ， J ＝ 8.3 ， 1H) ， 7.65-7.54(m ， 3H) ， 7.48-7.43(m ， 1H) ， 5.17-5.05(m ， 1H) ， 4.60-4.45(m ， 1H) ， 4.32-4.21(m， 1H)， 1.57 和 1.55(2d， J ＝ 7.1， 3H)， 1.34 和 1.26(2s， 3H) 31

    [1419] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.31， 8.01.

    [1420] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1421] 采 用 合 成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲 基 )-3- 甲 基 四 氢 呋 喃 -3， 4- 二 醇 的 5’ - 磷 酰 胺 酯 的 通 用 方 法 ( 方 法 A)， 向含 有 1.2g(3.85mmol) 核 苷 和 1.53mL(19.25mmol)NMI 的 12mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中，加 入 4.10g(11.55mmol)(2S)- 异丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯的 12mL 四 氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 505mg 纯净的蛋白肽， 收率 21％， 为类白色固 体。HPLC tR ＝ 18.27、 18.81min。( 柱 ： Varian Pursuit XRs 5、 C18、 150x4.6mm。该方法 是： 线性梯度 H2O/ 乙腈 ： 30min 内乙腈从 0％至 100％。)

    [1422] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1423] H NMR(500MHz， CD 3OD)δ8.19-8.165(m， 1H， H 8-napht)， 8.03， 8.00(2x s， 1H， H 8) ， 7.89-7.85(m， 1H， H5-napht)， 7.71-7.67(m， 1H， H4-napht)， 7.56-7.46(m， 3H， H 2， H 7， H6-napht)， 7.42-7.37(m， 1H， H3-napht)， 6.00， 5.99(2x s， 1H)， 4.93-4.88(m， 1H， CH 酯 )， 4.64-4.59(m， 1H， H5’)， 4.37-4.23(m， 2H， H3’andH4’)， 4.05(s， 3H， 6OCH3)， 3.98-3.92(m， 1H， CH)， 1.32(d， J ＝ 7.20Hz， 3H， CH3Ala)， 1.16-1.12(m， 6H， 2x CH3 酯 )， 0.98， 0.97(2x s， 3H， 2’ CCH3). 31

    [1424] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.35， 4.25.

    [1425] 实施例 24

    [1426] 按照如下所述， 合成 (2S)- 环戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ：

    [1427] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 环戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 )- 磷酰化氨基 )- 丙酸酯

    [1429] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， (S)- 环戊基 2- 氨基丙酸 酯的甲苯磺酸盐 (4.00g， 12.14mmol)、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (3.17g， 12.14mmol)、 三乙胺 (1.60mL， 24.28mmol) 的 30mL 干燥的二氯甲烷， 合并得到 (2S)- 环戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧 基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯， 收率 65％ (3.01g)， 为澄清、 黄色、 粗油。

    [1430] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ：

    [1428] 110102348712 A CN 102348731

    [1431] 1说明书81/198 页H NMR(500MHz ，CDCl 3 ) δ 8.13-8.09(m ， 1H ，H 8 -napht) ， 7.95-7.88(m ， 1H ， H 5-napht) ， 7.74(d ， J ＝ 8.0Hz ， 1H ， H 4-napht) ， 7.64-7.54(m ， 3H ， H 7， H 6， H 2-napht) ， 7.50-7.40(m， 1H， H3-napht)， 5.30-5.28， 5.25-5.23(2x m， 1H， CH 酯 )， 4.63-4.57(m， 1H， NH)， 4.28-4.25(s， 1H， CHa)， 1.94-1.85(m， 2H， 2xCH2a 酯 )， 1.79-1.69(m， 4H， 2x CH2b 酯， 2x CH2c 酯 )， 1.66-1.59(m， 2H， 2xCH2d 酯 )1.57， 1.54(2x d， J ＝ 7.0Hz， 3H， CH3Ala). 31

    [1432] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.38， 8.13.

    [1433] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1434] 采 用 合 成 2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9-(2-C- 甲 基 -β-D- 呋 喃 核 糖 基 ) 嘌 呤 的 5’ - 磷酰 胺 酯的 通用 方法 ( 方法 A)， 向含有 250mg(0.80mmol) 核苷 的 5mL 四氢 呋喃 和 0.47mL(4.02mmol)NMI 溶液中， 加入 920mg(2.40mmol)(2S)- 环戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 75mg 纯净的 蛋白肽， 收率 14％， 为类白色固体。 HPLC ： tR ＝ 19.52、 19.96min。 (柱 ： Varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm。该方法是 ： 线性梯度 H2O/ 乙腈 ： 30min 内乙腈从 0％至 100％。)

    [1435] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1436] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.19-8.15(m， 1H， H8-naph)， 7.98， 7.96(2x s， 1H， H8) ， 7.86-7.82(m， 1H， H5-napht)， 7.68， 7.65(2x d， J ＝ 8.0Hz， 1H， H4-napht)， 7.53-7.44(m， 3H， H2， H7， H6-napht)， 7.39， 7.37(2x t， J ＝ 8.0Hz， 1H， H3-napht)， 6.02， 6.00(2x s， 1H， H1’)， 5.00-4.97(m， 1H， CH 酯 )， 4.66-4.58(m， 2H， H5’)， 4.37-4.24(m， 2H， H3’ ， H4’)， 4.04(s， 3H， 6OCH3)， 4.01-3.93(m， 1H， CH.Ala)， 1.78-1.69(m， 2H， 2x CH2a， 2x CH2 酯 )， 1.60-1.47(m， 6H， 2x CH2b， 2x CH2 酯 )， 1.28(d， J ＝ 7.0Hz， 3H， CH3 Ala)， 0.98， 0.96(2x s， 3H， 2’ CCH3). 13 3

    [1437] C NMR(126MHz， CD3OD)δ174.87， 174.62(2x d， JC-C-N-P ＝ 5.0Hz， C ＝ O 酯 )， 2 162.73(C6)， 161.86(C2)， 154.55， 154.50(C4)， 148.01， 147.95(d， JC-O-P ＝ 3.8Hz， ipso Naph) ， 139.38 ， 139.08(CH8) ， 136.27 ， 136.24(C10-Naph) ， 128.86 ， 128.81(CH-Naph) ， 3 127.86， 127.78(2x d， JC-C-O-P ＝ 5.0Hz， C9-Naph)， 127.73， 127.47， 126.52， 126.48， 125.96， 3 125.93， 122.78， 122.74(CH-Naph)， 116.21， 116.13(2x d，JC-C-O-P ＝ 3.8Hz， C2-Naph)， 3 115.63， 115.60(C5)， 93.37， 93.19(C1’ )， 82.31， 82.16(2x d， JC-C-O-P ＝ 8.8Hz， C4’ )， 80.00， 2 79.96(C2’ )， 79.52， 79.50(CH 酯 )， 74.95， 74.71(C3’ )， 68.06， 67.59(2x d， JC-O-P ＝ 5.0Hz， C5’ )， 54.30， 54.29(6OCH3)， 51.81， 51.75(C Ala)33.52， 33.39(2x CH2-2 和 5 酯 )， 24.60， 3 24.58(2x CH2-3 和 4 酯 )， 20.67， 20.63(2xd， JC-C-N-P ＝ 6.3Hz， CH3Ala)， 20.44， 20.36(CH3). 31

    [1438] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.36， 4.20.

    [1439] 实施例 25

    [1440] 按照如下所述， 合成 (2S)- 环己基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ：

    [1441] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 环己基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， 2g 环己基 -L- 丙氨酸的盐酸 盐， 与 2.54g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 2.7mL 三乙胺和 55mL 二氯甲烷合并， 得到 2.64g(2S)- 环 己基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯， 收率 69％， 为浅黄色粗油。

    [1444] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1446] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.11(m， 1H， H8-napht)， 7.89(m， 1H， H5-napht)， 7.76(m， 1H， H 4-napht)， 7.60(m， 3H， H7， H 6， H2-napht)， 7.46(td， J ＝ 2.4， 7.9， 1H， H3-napht)， 4.93-4.83(m， 1H， CH 酯 )， 4.51-4.42(m， 0.5H， NH)， 4.40-4.33(m， 0.5H， NH)， 4.28(s， 1H， CHα)， 1.82(m， 4H， CH2 cyclohexyl)， 1.58(d， J ＝ 7.1， 1.5H， CH3Ala)， 1.56(d， J ＝ 6.9， 1.5H， CH3Ala)， 1.61-1.31(m， 6H， CH2cyclohexyl). 31

    [1447] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.29， 7.94.

    [1448] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1449] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法 ( 方法 A)， 向含有 980mg(3.15mmol) 核苷和 1.25mL(15.74mmol)NMI 的 30mL 四氢呋喃溶液中， 加入 3.82g(9.44mmol)(2S)- 环己基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰 化氨基 )- 丙酸酯的 20mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 730mg 纯净的蛋 + 100％ ) ； 精确质量 ： C31H40N6O9P1， 白肽， 收率 14％， 为类白色固体。Ms(ES+)m/e ： 671.26(MH ， calculated 671.2594， found 671.2584，

    [1445] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1451] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.19-8.15(m， 1H， H8-naph)， 7.98， 7.96(2x s， 1H， H8)， 7.84-7.82(m， 1H， H5-napht)， 7.67， 7.65(2x d， J ＝ 8.00Hz， 1H， H4-napht)， 7.53-7.44(m， 3H， H2， H7， H6-napht)， 7.41-7.36(m， 1H， H3-napht)， 6.02， 6.00(2x s， 1H， H1’)， 4.69-4.60(m， 3H， CH 酯 和 H5’)， 4.35-4.29(m， 2H， H3’ ， H4’)， 4.04(s， 3H， 6OCH3)， 4.00(q， J ＝ 7.77Hz， 1H， CH.Ala)， 1.69-1.60(m， 4H， 2x CH2 酯 )， 1.31-1.19(m， 9H， 3x CH2 酯和 CH3Ala)， 0.98， 0.96(2x s， 3H， 2’ CCH3). 13 3

    [1452] C NMR(126MHz， CD3OD)δ174.51， 174.25(2x d， JC-C-N-P ＝ 5.00Hz， C ＝ O 酯 )，

    [1450] 2 162.72(C6)， 161.86(C2)， 154.55， 154.50(C4)， 148.03， 148.01(d， JC-O-P ＝ 3.80Hz， ipso Naph) ， 139.33 ， 139.05(CH8) ， 136.28 ， 136.25(C10-Naph) ， 128.85 ， 128.79(CH-Naph) ， 3 127.88， 127.73(2x d， JC-C-O-P ＝ 6.3Hz， C9-Naph)， 127.46， 126.82， 126.53， 126.48， 125.95， 3 125.91 ， 122.81 ， 122.76 ， 122.27(CH-Naph) ， 116.21 ， 116.12(2x d ，J C-C-O-P ＝ 3.80Hz ， 3 C2-Naph)， 115.62， 115.59(C5)， 93.35， 93.17(C1’ )， 82.31， 82.15(2x d， JC-C-O-P ＝ 8.80Hz， C4’ )， 79.99， 79.96(C2’ )， 74.94， 74.92(CH 酯 )， 74.95， 74.71(C3’ )， 68.05， 67.56(2x d， 2 JC-O-P ＝ 5.00Hz， C5’ )， 54.29(6OCH3)， 51.85， 51.79(C Ala)， 32.35， 32.39(2x CH2-2 和 6 3 酯 )， 26.35(2x CH2-3 和 4 酯 )， 24.57(CH2-5 酯 )， 20.81， 20.60(2x d， JC-C-N-P ＝ 6.30Hz， CH3Ala)， 20.36， 20.33(CH3). 31

    [1453] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.34， 4.26.

    [1454] 实施例 26

    [1455] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲氧基 -9H 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [1456] 步骤 1. 合成 (2S)- 四氢 -2H- 吡喃 -4- 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯

    [1458] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， (S)- 四氢 --2H- 吡喃 -4- 基 2- 氨基丙酸酯 (1.00g， 2.90mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (0.76g， 2.90mmol)、 三乙胺 (0.80mL， 5.79mmol) 的 30mL 干燥的二氯甲烷， 合并得到 (2S)- 四氢 -2H- 吡喃 -4- 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯， 收率 70％ (0.84g)， 为澄清、 黄色、 粗油。

    [1460] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1461] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.11， 8.08(2x d， J ＝ 8.00Hz， 1H， H8-napht)， 7.91， 7.89(2x d， J ＝ 8.50Hz， 1H， H5-napht)， 7.72， 7.66(2x d， J ＝ 8.0Hz， 1H， H4-napht)， 7.61-7.51(m， 3H， H 7， H6， H2， )， 7.47(t， J ＝ 8.00Hz， 1H， H3-napht)， 5.12-4.99(m， 1H， CH 酯 )， 4.57(bs， 1H， NH)， 4.31-4.22(m， 1H， CH Ala)， 3.98-3.80(m， 2H， 2x CH2a 酯 )， 3.53-3.45(m，

    [1459] 2H， CH2b 酯 )， 1.97-1.88(m， 2H， CH2c 酯 )， 1.71-1.62(m， 2H， CH2d 酯 )， 1.54， 1.51(2xd， J＝ 7.00Hz， 3H， CH3Ala). 31

    [1462] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.19， 8.00

    [1463] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1464] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法 ( 方法 B)， 向含有 250mg(0.80mmol) 核苷的 3mL 四氢呋喃溶液中， 加入 1.60mL(1M) 叔丁基氯化镁的四氢呋喃溶液， 随即加入 640mg(1.6mmol)(2S)- 四氢 --2H- 吡 喃 -4- 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯的 3mL 四氢呋喃溶液。 标准 Workup 和硅胶柱层析得到 142mg 纯净的蛋白肽， 为类白色固体， 收率 26 ％。HPLC ： tR ＝ 16.72、 17.08min。( 柱 ： Varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm。该方法是 ： 线性梯度 H2O/ 乙腈 ： 30min 内乙腈从 0％至 100％。)

    [1465] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1466] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.19-8.15(m， 1H)， 7.99， 7.97(2x s， 1H)， 7.87-7.83(m， 1H) ， 7.69-7.65(m ， 1H) ， 7.54-7.44(m ， 3H) ， 7.42-7.36(m ， 1H) ， 6.02 ， 6.00(2x s ， 1H) ， 4.81-4.73(m， 1H)， 4.67-4.59(m， 2H)， 4.36-4.24(m， 2H)， 4.06-4.03(m， 4H)， 3.79-3.72(m， 2H)， 3.47-3.37(m， 2H)， 1.80-1.70(m， 2H)， 1.54-1.49(m， 2H)， 1.32， 1.30(2x d， J ＝ 5.45Hz， 3H)， 0.98， 0.97(2x s). 13 3

    [1467] C NMR(126MHz， CD3OD)δ174.31， 174.07(2x d， JC-C-N-P ＝ 5.0Hz， C ＝ O 酯 )， 162.73(C6) ， 161.89 ， 161.87(C2) ， 154.58 ， 154.53(C4) ， 148.00 ， 147.96(ipso Naph) ， 139.39 ， 139.11(CH8) ， 136.28 ， 136.25(C10-Naph) ， 128.85 ， 128.79(CH-Naph) ， 127.86 ， 3 127.77(2x d ，J C-C-O-P ＝ 5.0Hz ， C9-Naph) ， 127.49 ， 127.25 ， 126.97 ， 126.69 ， 126.54 ， 3 126.51， 125.98， 125.92， 122.79， 122.74(CH-Naph)， 116.24， 116.12(2x d， JC-C-O-P ＝ 3.8Hz， 3 C2-Naph)， 115.61(C5)， 93.37， 93.20(C1’ )， 82.34， 82.16(2x d，JC-C-O-P ＝ 8.8Hz， C4’ )， 2 79.99， 79.95(C2’ )， 74.96， 74.73(CH 酯 )， 71.33(C3’ )， 68.14， 67.65(2x d， JC-O-P ＝ 5.0Hz， C5’ )， 66.04， 66.02(2x CH2O 酯 )， 54.29(6OCH3)， 51.85， 51.76(CAla)， 32.52， 32.48(2x CH2 3 酯 )， 20.67， 20.50(2x d， JC-C-N-P ＝ 6.3Hz， CH3Ala)， 20.35， 20.31(CH3) 31

    [1468] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.25， 4.12.

    [1469] 实施例 27

    [1470] 按 照 如 下 所 述， 合 成 蛋 白 肽 (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟 基 -4- 甲 基 四 氢 呋 喃 -2- 基 ) 甲 氧 基 ) (6-((S)-1- 甲氧基 -1- 氧代丙烷 -2- 基 ) 萘 -2- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 ：

    [1471] 步骤 1 ： 合成 (2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 (6-((S)-1- 甲氧基 -1- 氧代丙烷 -2- 基 ) 萘 -2- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， (S)-2- 氨基丙酸 2， 4- 二氟 苄酯的甲苯磺酸盐 (1.0g， 2.6mmol)、 (S)- 甲基 2-(6-( 二氯磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙酸酯 (900mg， 2.6mmol)、 三乙胺 (0.73mL， 5.19mmol) 和 20mL 二氯甲烷， 合并得到 1.25g 预期的氯 化磷酸酯， 收率 91％， 呈半固体状。

    [1475] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1476] H NMR(200MHz ， CDCl 3) ： δ 7.83-7.68(m ， 4H) ， 7.5-7.28(m ， 3H) ， 6.84(m ， 2H) ， 5.21(m， 2H)， 4.3(m， 1H)， 5.67(d， J ＝ 1.2Hz， 3H)， 1.55(m， 6H)， 1.36(m， 1H).

    [1474] P NMR(80MHz， CDCl3)δ8.94， 8.63

    [1478] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1479] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ - 磷酰 胺酯的通用方法 ( 方法 B)， 含有 (370mg， 1.19mmol) 核苷的 20mL 四氢呋喃溶液， 与 (1.25mg， 2.37mmol)(2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 -(6-((S)-1- 甲氧基 -1- 氧代丙烷 -2- 基 ) 萘 -2- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯和叔丁基氯化镁 (2.9mL， 2.96mmol) 合并。正常 work-up 之后， 采用比例为 95 ∶ 5 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 240mg 蛋白肽， 收率 25％。

    [1480] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1481] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ7.94(d， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 7.8-7.66(m， 4H)， 7.44-7.2(m， 3H)， 6.92-6.76(m， 2H)， 5.95(d， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 5.06-4.95(m， 2H)， 4.55-4.59m， 2H)， 4.32-4.15(m， 2H)， 4.03(d， J ＝ 4.4Hz， 3H)， 3.92(m， 2H)， 3.64(d， J ＝ 1.8Hz， 3H)， 1.54(dd， J ＝ 2.6Hz， J ＝ 2.4Hz， 3H)， 1.30(d， J ＝ 7.2Hz， 3H)， 0.9(d， J ＝ 19Hz， 9H). 31

    [1482] P NMR(80MHz， CD3OD) ： 5.14

    [1483] 实施例 28

    [1484] 按照如下所述， 合成蛋白肽 (2S)- 甲基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )((S)-1-( 新戊氧 基 )-1- 氧代丙烷 -2- 氨基 ) 磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙酸酯 ：

    [1477] 31步骤 1 ： 合成 (2S)- 甲基 2-(6-( 氯 ((S)-1-( 新戊氧基 )-1- 氧代丙烷 -2- 基氨基 ) 磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙酸酯

    [1486] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， (S)- 新戊基 2- 氨基丙酸酯的 甲苯磺酸盐 (1.0g， 2.8mmol)、 (S)- 甲基 2-(6-( 二氯磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙酸酯 (990mg， 2.8mmol)、 三乙胺 (0.8mL， 5.6mmol) 和 20mL 二氯甲烷， 合并得到 1.13g 预期的 (2S)- 甲基 2-(6-( 氯 ((S)-1-( 新戊氧基 )-1- 氧代丙烷 -2- 基氨基 ) 磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙酸酯， 收率 83％， 呈胶质浆状。

    [1488] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1490] H NMR(200MHz ，CDCl 3 ) ： δ 7.9-7.68(m ， 4H) ， 7.52-7.3(m ， 2H) ， 4.3(m ， 1H) ， 3.97-3.8(m， 3H)， 3.67(s， 3H)， 1.6(m， 6H)， 1.45(dd， J ＝ 4.0Hz， J ＝ 4.2Hz， 1H)， 0.96(d， J ＝ 3.2Hz， 9H). 31

    [1491] P NMR(80MHz， CDCl3)δ9.13， 8.77

    [1492] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1493] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ - 磷酰 胺酯的通用方法 ( 方法 A)， 含有 (250mg， 0.801mmol) 核苷的 20mL 四氢呋喃溶液， 与 (2S)- 甲 基 2-(6-( 氯 ((S)-1-( 新戊氧基 )-1- 氧代丙烷 -2- 基氨基 ) 磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙酸 酯 (1.13g， 2.4mmol) 和 N- 甲基咪唑 (0.32mL， 4.0mmol) 合并。 正常 work-up 之后， 采用比例 为 96 ∶ 4 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 200mg 蛋白肽， 收率 33％。

    [1494] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1495] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ7.94(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 7.83-7.6(m， 4H)， 7.4(m， 2H)， 5.96(d， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 4.56(m， 2H)， 4.22(m， 2H)， 4.02(d， J ＝ 3.0Hz， 3H)， 3.94(m， 1H)， 3.8-3.62(m， 6H)， 1.53(dd， J ＝ 2.4Hz， J ＝ 3.0Hz， 3H)， 1.33(d， J ＝ 7.4Hz， 3H)， 0.95-0.8(m， 12H). 31

    [1496] P NMR(80MHz， CD3OD)δ5.23

    [1497] 实施例 29

    [1498] 按照如下所述， 合成蛋白肽 (2S)- 甲基 2-(6-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )((S)-1- 氧代 -1-( 四

    [1489] 氢 -2H- 吡喃 -4- 基氧基 ) 丙烷 -2- 基氨基 ) 磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙酸酯 ：

    [1499] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 甲基 2-(6-( 氯 ((S)-1- 氧代 -1-( 四氢 -2H- 吡喃 -4- 基氧基 ) 丙烷 -2- 基氨基 ) 磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， (S)-2- 氨基丙酸四氢吡 喃 -4- 基氧基酯 (892mg， 2.6mmol) 的甲苯磺酸盐， 6-[(S)-1- 甲氧基羰基乙基 ] 萘 -2- 基二 氯磷酸酯 (900mg， 2.6mmol)、 三乙胺 (0.73mL， 5.19mmol) 和 20mL 二氯甲烷， 合并得到 683mg 预期的氯化磷酸酯， 收率 55％， 呈胶质浆状。

    [1503] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1504] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ7.85-7.7(m， 4H)， 7.52-7.44(dd， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 7.36(m， 1H)， 5.02(m， 1H)， 4.22(m， 1H)， 4.0-3.8(m， 3H)， 3.67(s， 3H)， 3.55(m， 2H)， 1.91(m， 2H)， 1.8-1.5(m， 9H). 31

    [1505] P NMR(80MHz， CDCl3)δ9.07， 8.72

    [1506] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1507] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法 ( 方法 B)， 含有核苷 (200mg， 0.64mmol) 的 20mL 无水四氢呋喃溶液， 与 (2S)- 甲基 2-(6-( 氯 ((S)-1- 氧代 -1-( 四氢 -2H- 吡喃 -4- 基氧基 ) 丙烷 -2- 基氨基 ) 磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙酸酯 (680mg， 1.48mmol) 和叔丁基氯化镁 (1.6mL， 1.6mmol) 合并。 标准 work-up 之后， 采用比例为 95 ∶ 5 的 DCM/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 140mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 29％。

    [1502] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1509] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ7.96(s， 1H)， 7.83-7.68(m， 4H)， 7.45-7.35(m， 2H)， 5.98(d， J ＝ 3.6Hz， 1H)， 4.85-4.5(m， 3H)， 4.32-4.15(m， 2H)， 4.04(d， J ＝ 2.2Hz， 3H)， 3.98-3.86(m， 2H)， 3.8-3.67(m， 2H)， 3.65(d， J ＝ 2.6Hz， 3H)， 3.46-3.34(m， 2H)， 1.7(m， 2H)， 1.55-1.36(m， 6H)， 1.3(d， J ＝ 7.0Hz， 3H)， 0.94(d， J ＝ 15.2Hz， 3H).

    [1508] 117102348712 A CN 102348731

    [1510] 31说明书88/198 页P NMR(80MHz， CD3OD) ： 5.26， 5.08

    [1511] 实施例 30

    [1512] 按 照 如 下 所 述， 合 成 蛋 白 肽 (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹 啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 ：

    [1513] 步骤 1 ： 合成 (2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯

    [1515] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， (S)-2- 氨基丙酸 2， 4- 二氟 苄酯 (1.4g， 3.45mmol) 的甲苯磺酸盐， 喹啉 -5- 基氧基二氯磷酸酯 (904mg， 3.45mmol)、 三乙 胺 (0.96mL， 6.9mmol) 和 40mL 二氯甲烷， 合并得到 400mg 预期的氯化磷酸酯， 收率 25％， 呈 浅黄色厚浆状。

    [1517] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1518] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ9.0(d， J ＝ 4.0Hz， 1H)， 8.6(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.26(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.8-7.6(m， 3H)， 7.4-7.2(m， 1H)， 6.8(m， 2H)， 5.0-5.3(m， 2H)， 4.7(m， 1H)， 4.3(m， 1H)， 1.6-1.4(m， 3H). 31

    [1519] P NMR(80MHz， CDCl3)δ9.51， 9.3

    [1520] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1521] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法 ( 方法 B)， 含有核苷 (125mg， 0.4mmol) 的 25mL 无水四氢呋喃溶液， 与 (2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 (407mg， 0.88mmol) 和叔丁基氯化镁 (0.881mL， 0.881mmol) 合并。标准 work-up 之后， 采用比例为 95 ∶ 5 的 DCM/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 72mg 蛋白肽， 白色固体， 收率 25％。

    [1522] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1523] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.87-8.79(dd dd， J ＝ 1.6Hz， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 8.63-8.5(m ， 1H) ， 7.92(s ， 1H) ， 7.81(m ， 1H) ， 7.7-7.2(m ， 4H) ， 6.8(m ， 2H) ， 5.95(d ， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 5.0(m， 2H)， 4.6(m， 2H)， 4.4-4.0(m， 6H)， 1.3(dddd， J ＝ 1.0Hz， J ＝ 1.4Hz， J＝

    [1516] 1.2Hz， 3H)， 0.95(d， J ＝ 5.6Hz， 3H). 31

    [1524] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ5.43， 5.16

    [1525] 实施例 31

    [1526] 按照如下所述， 合成蛋白肽 (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 ：

    [1527] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， (S)-2- 氨基丙酸 2， 2- 二甲 基丙酯 (1.068g， 3mmol) 的甲苯磺酸盐， 喹啉 -5- 基氧基二氯磷酸酯 (800mg， 3mmol)、 三乙胺 (0.85mL， 6mmol) 和 30mL 二氯甲烷， 合并得到 450mg 预期的氯化磷酸酯， 收率 36％， 呈浅黄 色厚油状。

    [1531] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1532] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.94(m， 1H)， 8.6-8.45(m， 1H)， 8.0-7.9(m， 1H)， 7.62(m， 2H)， 7.45(m， 1H)， 4.12(m， 1H)， 3.7(m， 3H)， 1.4(dd， J ＝ 6.8Hz， J ＝ 7.0Hz， 3H)， 0.91(d， J＝ 2.6Hz， 9H). 31

    [1533] P NMR(80MHz， CDCl3)δ9.29

    [1534] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1535] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法 ( 方法 B)， 含有核苷 (100mg， 0.32mmol) 的 25mL 无水四氢呋喃溶液， 与 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 (400mg， 0.96mmol) 和叔丁 基氯化镁 (0.96mL， 0.96mmol) 合并。标准 work-up 之后， 采用比例为 95 ∶ 5 的 DCM/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 40mg 蛋白肽， 收率 20％。

    [1536] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1537] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.87-8.80(dddd， J ＝ 1.6Hz， J ＝ 1.8Hz， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 8.65-8.53(m， 1H)， 7.94(d， J ＝ 0.8Hz， 1H)， 7.83(m， 1H)， 7.72-7.4(m， 3H)， 5.95(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 4.62(m， 2H)， 4.3(m， 2H)， 4.1-3.96(m， 4H)， 3.76-3.52(m， 3H)， 1.34(dddd， J+0.8Hz， J ＝ 1.2Hz， 3H)， 0.95(d， J ＝ 3.8Hz， 3H)， 0.82(d， J ＝ 1.2Hz， 9H).

    [1530] 119102348712 A CN 102348731

    [1538] 31说明书90/198 页P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ5.5， 5.2

    [1539] 实施例 32

    [1540] 按 照 如 下 所 述，合 成 蛋 白 肽 (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲 氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 ：

    [1541] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 四氢 -2H- 吡喃 -4- 基 2-( 氯 ( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )- 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， (S)-2- 氨基丙酸 4- 基氧基四 氢吡喃酯 (1.18g， 3.4mmol) 的甲苯磺酸盐， 喹啉 -5- 基氧基二氯磷酸酯 (900mg， 3.4mmol)、 三乙胺 (0.95mL， 6.87mmol) 和 40mL 二氯甲烷， 合并得到 350mg 预期的氯化磷酸酯， 收率 26％， 呈浅黄色厚浆状。

    [1545] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1546] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ9.0(d， J ＝ 3.0Hz， 1H)， 8.5(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.1(d， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 7.76-7.6(m， 2H)， 7.5(dddd， J ＝ 2.6Hz， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 5.0(m， 1H)， 4.7(m， 1H)， 4.3(m， 1H)， 3.9(m， 2H)， 3.5(m， 2H)， 1.9(m， 2H)， 1.7(m， 2H)， 1.55(dd， J ＝ 4.4Hz， J ＝ 4.4Hz， 3H).

    [1544] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ9.5， 9.33

    [1548] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1549] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法 ( 方法 B)， 含有核苷 (133mg， 0.426mmol) 的 20mL 无水四氢呋喃溶液， 与 喹啉 -5- 基氧基四氢吡喃 -4- 基氧基丙氨酰基氯化磷酸酯 (338mg， 0.852mmol) 和叔丁基氯 化镁 (0.851mL， 0.851mmol) 合并。标准 work-up 之后， 采用比例为 95 ∶ 5 的 DCM/MeOH， 经 柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 52mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 19％。

    [1550] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1551] H NMR(200MHz ，CD 3 OD) ： δ 8.9-8.8(dddd ，J ＝ 1.8Hz ，J ＝ 1.4Hz ， 1H) ，

    [1547] 1208.67-8.55(m， 1H)， 7.94(d， J ＝ 1.0Hz， 1H)， 7.9-7.8(m， 1H)， 7.74-7.42(m， 3H)， 5.95(d， J＝ 4.0Hz， 1H)， 4.8-4.5(m， 4H)， 4.4-4.1(m， 2H)， 4.02(d， J+1.2Hz， 3H)， 3.8(m， 2H)， 3.2(m， 2H)， 1.8(m， 2H)， 1.5(m， 2H)， 1.35-1.28(dddd， J ＝ 1.2Hz， J ＝ 1.4Hz， j ＝ 0.8Hz， J ＝ 1.0Hz， 3H)， 0.95(d， J ＝ 3.2Hz， 3H). 31

    [1552] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ5.46， 5.19

    [1553] 实施例 33

    [1554] 按照如下所述， 合成蛋白肽 (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 ：

    [1555] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， (S)-2- 氨基丙酸 2， 2- 二甲 基丙酯 (870mg， 2.6mmol) 的甲苯磺酸盐， 喹啉 -6- 基氧基二氯磷酸酯 (698mg， 2.6mmol)、 三 乙胺 (0.73mL， 5.2mmol) 和 20mL 二氯甲烷， 合并得到 250mg 预期的氯化磷酸酯， 收率 24％， 呈浅黄色厚油状。

    [1559] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1560] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.92(d， J ＝ 3.2Hz， 1H)， 8.2(d， J ＝ 8.8Hz， 2H)， 7.82(dd， J ＝ 3.0Hz， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 7.6(m， 1H)， 7.51-7.45(dd， J ＝ 4.0Hz， J ＝ 4.0Hz， 1H)， 4.5(m， 1H)， 4.3(m， 1H)， 3.9(m， 2H)， 1.56(dd， J ＝ 3.2Hz， J ＝ 3.2Hz， 3H)， 0.96(d， J＝ 2.6Hz， 9H). 31

    [1561] P NMR(80MHz， CDCl3)δ9.26， 8.92

    [1562] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1563] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法 ( 方法 B)， 含有核苷 (100mg， 0.32mmol) 的 25mL 无水四氢呋喃溶液， 与 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 (250mg， 0.64mmol) 和叔丁基 氯化镁 (0.64mL， 0.64mmol) 合并。标准 work-up 之后， 采用比例为 95 ∶ 5 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 72mg 蛋白肽， 收率 34％。

    [1564] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ：

    [1558] 121102348712 A CN 102348731

    [1565] 1说明书92/198 页H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.75-8.8(dt， J ＝ 1.8Hz， J ＝ 4.4Hz， 1H)， 8.23(m， 1H)， 8.0(m， 1H)， 7.93(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 7.79(m， 1H)， 7.7-7.64(m， 1H)， 7.44-7.54(dddd， J ＝ 2.6Hz， J ＝ 4.4Hz， 1H)， 5.95(d， J ＝ 1.4Hz， 1H)， 4.62-4.53(m， 2H)， 4.34-4.2(m， 2H)， 4.039d， J ＝ 2.2Hz， 3H)， 3.79-3.55(m， 3H)， 1.4-1.32(dddd， J ＝ 0.8Hz， J ＝ 1.0Hz， 3H)， 0.95(d， J ＝ 13.2Hz， 3H)， 0.86(d， J ＝ 6.6Hz， 9H). 31

    [1566] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ5.19， 5.10

    [1567] 实施例 34

    [1568] 按 照 如 下 所 述，合 成 蛋 白 肽 (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲 氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 ：

    [1569] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 四氢 -2H- 吡喃 -4- 基 2-( 氯 ( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )- 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， (S)-2- 氨基丙酸四氢吡 喃 4- 基氧基酯 (880mg， 2.62mmol) 的甲苯磺酸盐， 喹啉 -6- 基氧基二氯磷酸酯 (682mg， 2.62mmol)、 三乙胺 (0.74mL， 5.2mmol) 和 40mL 二氯甲烷， 合并得到 300mg 预期的 (2S)- 四 氢 -2H- 吡喃 -4- 基 2-( 氯 ( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯， 收率 29％， 呈浅黄色 厚油状。

    [1573] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1574] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.96(d， J ＝ 3.2Hz， 1H)， 8.31(m， 2H)， 7.88-7.84(dd， J ＝ 2.6Hz， J ＝ 2.4Hz， 1H)， 7.64(m， 1H)， 7.55(dd， J ＝ 4.0Hz， J ＝ 4， 4Hz， 1H)， 5.0(m， 1H)， 4.6-4.1(m， 2H)， 3.9(m， 2H)， 3.5(m， 2H)， 1.9(m， 2H)， 1.7(m， 2H)， 1.59(dd， J ＝ 2.8Hz， J ＝ 2.6Hz， 3H). 31

    [1575] P NMR(80MHz， CDCl3)δ9.18， 9.88

    [1576] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1572] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法 ( 方法 B)， 含有核苷 (120mg， 0.38mmol) 的 25mL 无水四氢呋喃溶液， 与 (2S)- 四氢 -2H- 吡喃 -4- 基 2-( 氯 ( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 (300mg， 0.76mmol) 和叔丁基氯化镁 (0.76mL， 0.76mmol) 合并。标准 work-up 之后， 采用比例为 95 ∶ 5 的 DCM/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 52mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 20％。

    [1578] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1579] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.81-8.76(dt， J ＝ 1.8Hz， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 8.24(m， 1H) ， 8.02-7.97(dd ， J ＝ 2.2Hz ， J ＝ 9.2Hz ， 1H) ， 7.94(d ， J ＝ 2.8Hz ， 1H) ， 7.78(m ， 1H)， 7.64-7.72(m， 1H)， 7.5(m， 1H)， 5.96(d， J ＝ 2.6Hz， 1H)， 4.8(m， 1H)， 4.58(m， 2H)， 4.4-4.2(m， 2H)， 4.03(d， J ＝ 1.8Hz， 3H)， 3.95(m， 1H)， 3.8-3.7(m， 2H)， 3.4-3.5(m， 2H)， 1.8(m， 2H)， 1.6-1.4(m， 2H)， 1.3(dddd， J ＝ 1.2Hz， J ＝ 1.0Hz， J ＝ 0.8Hz， 3H)， 0.95(d， J＝ 11.4Hz， 9H). 31

    [1580] P NMR(80MHz， CD3OD) ： 5.18， 5.06

    [1581] 实施例 35

    [1582] 按照如下所述， 合成蛋白肽 (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 苯氧基 ) 磷酰化 氨基 )- 丙酸酯 ：

    [1583] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 苯氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， (S)- 新戊基 2- 氨基丙酸酯 (2.00g， 6.03mmol) 的甲苯磺酸盐、 苯基二氯磷酸酯 (0.90mL， 12.06mmol)、 三乙胺 (1.68mL， 12.06mmol) 合并在 66mL 干燥的二氯甲烷中， 得到产物 1.91g(2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 苯氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯， 收率 95％， 呈澄清、 厚油状。

    [1587] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1588] H NMR(500MHz ，CDCl 3 ) δ 7.40-7.23(m ， 5H ，phe) ， 4.53-4.43(m ， 1H ，NH) ， 4.30-4.18(m， 1H， CHa)， 3.94， 3.92， 3.88， 3.85(2x AB， JAB ＝ 10.5Hz， 2H， CH2 酯 )， 1.56， 1.55(2x d， J ＝ 5.5Hz， 3H， CH3Ala)， 0.98， 0.97(2x s， 9H， 3x CH3 酯 ).

    [1586] 123102348712 A CN 102348731

    [1589] 31说明书94/198 页P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.02， 7.73.

    [1590] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1591] 采用合成 5’ - 磷酰胺酯的通用方法， 向 0.803mmol(3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲 氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇、 NMI(0.32mL， 4.01mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液中加入 0.804g(2.41mmol)(2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 苯氧基 ) 磷酰化氨 基 )- 丙酸酯。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 97.2mg 蛋白肽， 收率 20 ％， 为类白色固 + 体。Ms(ES+)m/e ： 609.23(MH ， 100％ ) ； 精确质量 ： C26H38N6O9P1calculated 609.2438， found 609.2443

    [1592] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1593] H NMR(500MHz ， CD 3OD) δ 7.96 ， 7.95(2x s ， 1H ， H 8) ， 7.36-7-32(m ， 2H ， Ph) ， 7.28-7.26(m， 2H， Ph)， 7.19-7.15(m， 1H， Ph)， 6.03， 6.00(2x s， 1H， H1’)， 4.63-4.50(m， 1H， H5’)， 4.30-4.20(m， 1H， H3’ ， H4’)， 4.07， 4.06(2x s， 3H， 6OCH3)， 4.03-4.06(m， 1H， H)， 3.83， 3.80， 3.72， 3.66(2x AB， JAB ＝ 10.50Hz， 2H， CH2 酯 )， 1.36， 1.35(2x d， J ＝ 7.50Hz， 3H， CH3Ala)， 0.99， 0.96(2x s， 3H， 2’ CCH3)， 0.91， 0.88(2x s， 9H， 3xCH3 酯 ). 13 3

    [1594] C NMR(126MHz， CD3OD)δ175.07， 174.85(2x d， JC-C-N-P ＝ 5.00Hz， C ＝ O 酯 )， 2 162.75(C6) ， 161.93 ， 161.89(C2) ， 154.63(C4) ， 152.21 ， 152.15(d ，J C-O-P ＝ 3.80Hz ， ipsoPh) ， 139.26 ， 138.92(CH8) ， 130.28 ， 130.78(C3and C 5Ph) ， 126.15(C 4Ph) ， 121.50 ， 3 121.47(C2and C6Ph)， 115.59， 115.47(C5)， 93.24， 92.91(C1’ )， 82.23， 82.03(2x d， JC-C-O-P ＝ 8.8Hz， C4’ )， 80.04， 19.97(C2’ )， 75.42， 75.39(CH2 酯 )， 74.77， 74.28(C3’ )， 67.71， 2 66.80(2x d， JC-O-P ＝ 5.00Hz， C5’ )， 54.29(6OCH3)， 51.73， 51.60(C Ala)， 32.32， 32.25(C 3 酯 )， 26.77， 26.73(3x CH3 酯 )， 20.86， 20.65(2x d， JC-C-N-P ＝ 6.3Hz， CH3Ala)， 20.33(2’ CCH3) 31

    [1595] P NMR(202MHz， CDCl3)δ4.04， 3.89.

    [1596] 实施例 36

    [1597] 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟 基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸苄酯按 照以下步骤合成 ：

    [1598] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 )- 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， 1.5g 苄氧基 -L- 丙氨酸的甲 苯磺酸盐， 与 1.03g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 1.09mL 三乙胺、 和 22mL 二氯甲烷合并， 得到 1.23g 萘 -1- 基 ( 苄氧基 -L- 缬氨酰基 ) 氯化磷酸酯， 收率 72％， 呈淡黄色厚油状 ：

    [1602] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1603] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.07(m， 1H， H8-napht)， 7.90(m， 1H， H5-napht)， 7.76(m， 1H， H 4-napht)， 7.65-7.54(m， 3H， H7， H 6， H2-napht)， 7.46(d， J ＝ 8.1， 1H， H3-napht)， 7.42-7.31(m， 5H， phe)， 5.20(m， 2H， CH2 酯 )， 4.15(m， 2H， NH 和 CH)， 2.28-2.15(m， 1H， CHβ)， 1.05(d， J ＝ 6.8， 1.2H， CH3val)， 1.02(d， J ＝ 6.8， 1.7H， CH3val)， 0.96(d， J ＝ 6.9， 1.3H， CH3val)， 0.91(d， J ＝ 6.9， 1.8H， CH3val). 31

    [1604] P NMR(202MHz， CDCl3)δ9.78， 9.29.

    [1605] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1606] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法 ( 方法 A)。向含有核苷 (6.0g， 19mmol， 1 当量 ) 的 50mL 无水四氢呋喃悬 浮液中， -78℃， 加入 (2S)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 )- 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯溶 液 (18.2g， 42mmol)， 随后加入 1- 甲基咪唑 (7.63mL， 96mmol)。反应混合物温热至室温并搅 拌过夜。标准 Workup 和纯化， 得到 3.3g 预期的蛋白肽， 收率 25％， 为类白色固体。

    [1607] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1608] H NMR(200MHz ， CDCl 3) δ 8.1(m ， 1H) ， 7.9(d ， J ＝ 2.4Hz ， 1H) ， 7.84(m ， 1H) ， 7.64(dd， J ＝ 4.8Hz， 4.8Hz， 1H)， 7.2-7.5(m， 9H)， 5.95(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 4.9-5.0(m， 2H)， 4.56(m， 2H)， 4.2-4.4(m， 2H)， 4.0(s， 3H)， 3.75(m， 1H)， 2.0(m， 1H)， 0.93(d， J ＝ 9.6Hz， 3H)， 0.73-0.80(m， 6H). 31

    [1609] P NMR(50MHz， CDCl3)δ6.1， 6.0

    [1610] 实施例 37

    [1611] 2， 4- 二 氟 苄 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯按照如下步骤合成 ：

    [1612] 步骤 1 ： (2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯的合成

    [1614] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的通用方法， 2- 氨基 -3- 甲基 (2， 4- 二氟 苄基 ) 丁酸酯的甲苯磺酸盐 (5.65g， 1.36mmol)、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (3.55g， ， 1.36mmol)、 三乙胺 (3.8mL， 1.36mmol)、 和二氯甲烷 (75mL) 合并得到 4.1g 预期氯化磷酸酯， 浅黄色稠 油， 收率 65％。

    [1616] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1617] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.0-8.6(m， 1H)， 7.8-7.9(m， 1H)， 7.7-7.75(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.3-7.6(m， 5H)， 6.7-6.9(m， 2H)， 4.9-5.3(m， 2H)， 4.2-4.3(m， 1H)， 2.0(m， 1H)， 0.88-1.03(m， 6H) 31

    [1618] P NMR(80MHz， CDCl3)δ10.83， 10.30

    [1619] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1620] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法 ( 方法 A)， 含有核苷 (500mg， 1.6mmol) 的 70mL 无水四氢呋喃溶液， 与萘 -1- 基氧基 2， 4- 二氟苄氧基缬氨酰基氯化磷酸酯 (3.6g， 7.7mmol) 和 N- 甲基咪唑 (0.76mL， 9.6mmol) 合并。标准 work-up 和纯化后， 采用比例为 97 ∶ 3 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱 层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 400mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 50％。

    [1621] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1622] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.1-8.2(m， 1H)， 7.95(s， 1H)， 7.8(m， 1H)， 7.6-7.7(m， 1H) ， 7.2-7.54(m ， 5H) ， 6.7-6.9(m ， 2H) ， 5.95(s ， 1H) ， 4.9-5.1(m ， 2H) ， 4.6(m ， 2H) ， 4.2-4.4(m ， 2H) ， 4.0(s ， 3H) ， 3.65-3.8(m ， 1H) ， 2.0(m ， 1H) ， 0.95(d ， J ＝ 8.6Hz ， 3H) ， 0.7-0.85(m， 6H) 31

    [1623] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ6.14， 6.04

    [1624] 实施例 38

    [1625] (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯按照如下步骤合成 ：

    [1615] 步骤 1 ： (2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯

    [1628] 采用合成萘 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 2g(S)-((S)-1- 苯乙基 )2- 氨 基 -3- 甲基丁酸酯的甲苯磺酸盐、 1.33g 的萘 -1- 基二氯磷酸酯、 1.41mL 三乙胺、 和 60mL 二 氯甲烷， 合并得到 2.17g(2S)-((S)-1- 苯乙基 )-2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲 基丁酸酯， 收率 96％， 呈浅黄色厚油状。

    [1630] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1631] H NMR(500MHz ， CDCl 3) δ 8.15-8.08(m ， 1H) ， 7.91-7.86(m ， 1H) ， 7.74(d ， J ＝ 8.3 ， 1H) ， 7.70-7.52(m ， 3H) ， 7.47-7.26(m ， 6H) ， 6.04-5.93(m ， 1H) ， 4.56-4.42(m ， 1H) ， 0.86 和 4.19-4.08(m， 1H)， 2.25-2.15(m， 1H)， 1.62 和 1.58(2d， J ＝ 6.6， 3H)， 1.01， 0.97， 0.79(4d， J ＝ 6.8， 6H) 31

    [1632] P NMR(202MHz， CDCl3)δ10.03， 9.50.

    [1633] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1634] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法， 向含有 420mg 核苷的 5mL 四氢呋喃溶液中， 加入 0.54mL NMI， 随后加入 1.81g(2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯的 5mL 四 氢呋喃。 标准 Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 427mg 纯净的蛋白肽， 收率 44％， 为类白色固 体。 HPLC ： tR ＝ 26.33min( 柱 ： Varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： 线性梯度 H2O/ 乙腈 ： 30min 内乙腈从 0％至 100％。)

    [1635] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1636] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.21-8.14(m， 1H)， 7.94 和 7.93(2s， 1H)， 7.90-7.83(m， 1H) ， 7.75-7.64(m ， 1H) ， 7.56-7.20(m ， 9H) ， 5.99 和 5.97(2s ， 1H) ， 5.80-5.65(m ， 1H) ， 4.60-4.54(m， 2H)， 4.40-4.19(m， 2H)， 4.05(s， 3H)， 3.81-3.74(m， 1H)， 2.07-1.90(m， 1H)， 1.41 和 1.39(2d， J ＝ 6.5， 3H)， 0.99 和 0.95(2s， 3H)， 0.79， 0.75， 0.71 和 0.70(4d， J ＝ 6.8， 6H)

    [1629] P NMR(202MHz， CD3OD)δ5.15， 5.05

    [1638] 实施例 39

    [1639] (2S)-((S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯按照如下步骤合成 ：

    [1637] 31步骤 1 ： (2S)-((S)-1-(4- 溴 苯 基 ) 乙 基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基 氧 基 ) 磷 酰 化 氨 基 )-3- 甲基丁酸酯

    [1641] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 1.2g(S)-4- 溴 -- 甲基苄 基 -2- 氨基 -3- 甲基丁酸酯的甲苯磺酸盐、 660mg 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 0.7mL 三乙胺和 20mL 二氯甲烷合并得到 1.0g 预期的氯化磷酸酯， 呈浅黄色厚油状。

    [1644] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1645] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δδ8.02-8.1(m， 1H)， 7.85-7.89(m， 1H)， 7.71-7.75(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.38-7.64(m， 7H)， 7.20-7.27(m， 2H)， 5.9(m， 1H)， 4.0-4.4(m， 2H)， 2.1(m， 1H)， 1.5(dd， J ＝ 6.6Hz， 8.4Hz， 3H)， 0.97(t， J ＝ 6.6Hz， 3H)， 0.75-0.85(dd， J ＝ 7.0Hz， 7.0Hz， 3H). 31

    [1646] P NMR(80MHz， CDCl3)δ11.00， 10.47

    [1647] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1648] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法 ( 方法 A)， 含有核苷 (300mg， 0.928mmol) 的 15mL 无水四氢呋喃溶液， 与 (2S)-((S)-1-(4- 溴苯基 ) 乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 (1.0g， 1.92mmol) 和 N- 甲基咪唑 (0.3mL， 3.64mmol) 合并。标准 work-up 之后， 采用比例为 97 ∶ 3 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 126mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 16％。

    [1649] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1650] H NMR(200MHz ， CD 3OD) ： δ 8.1-8.15(m ， 1H) ， 7.96(s ， 1H) ， 7.78-7.87(m ， 1H) ， 7.60-7.67(m， 1H)， 7.30-7.52(m， 5H)， 7.15-7.23(m， 2H)， 5.97(s， 1H)， 5.66(m， 1H)， 4.56(d， J ＝ 5.4Hz， 2H)， 4.22-4.38(m， 2H)， 4.02(s， 3H)， 3.74(m， 1H)， 2.0(m， 1H)， 1.34(dd， J ＝ 3.0Hz， 3.0Hz， 3H)， 0.94(d， J ＝ 9.2Hz， 3H)， 0.70(m， 6H). 31

    [1651] P NMR(80MHz， CDCl3)δ6.2， 6.08

    [1643] 实施例 40

    [1653] (2S)-((S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯按照如下步骤合成 ：

    [1654] 步骤 1 ： 合成 (2S)-((S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 1.5g(S)-2- 溴 -- 甲基苄 基 -2- 氨基 -3- 甲基丁酸酯的甲苯磺酸盐、 0.826g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 0.885mL 三乙胺和 20mL 二氯甲烷合并得到 0.793g 预期的氯化磷酸酯， 呈浅黄色厚油状。

    [1658] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1659] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.1(m， 1H)， 7.86(m， 1H)， 7.72(d， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 7.64to 7.0(m， 8H)， 6.3(pentate， J ＝ 6.6Hz， 1H)， 4.3(bs， 1H)， 4.1(m， 1H)， 2.2(m， 1H)， 1.55(dd， J ＝ 6.6Hz， J ＝ 8.2Hz， 3H)， 1.0(dd， J ＝ 7.2Hz， J ＝ 7.4Hz， 3H)， 0.85(dd， J＝ 6.8Hz， J ＝ 7.0Hz， 3H). 31

    [1660] P NMR(80MHz， CDCl3)δ11.07， 10.58.

    [1661] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1662] 采 用 合 成 2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9-(2-C- 甲 基 -β-D- 呋 喃 核 糖 基 ) 嘌 呤 的 5’ - 磷 酰 胺 酯 的 通 用 方 法， 含 有 核 苷 (314mg， 1mmol) 的 30mL 无 水 四 氢 呋 喃 溶 液， 与 (2S)-((S)-1-(2- 溴苯基 ) 乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 (793.6mg， 1.51mmol) 和 N- 甲基咪唑 (248.72mg， 3.03mmol) 合并。标准 work-up 后， 采用比 例为 97 ∶ 3 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 105mg 蛋白肽， 类白色 固体， 收率 13％。

    [1663] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1664] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.13(m， 1H)， 7.97(bs， 1H)， 7.8(m， 1H)， 7.68to 7.06(m，

    [1657] 9H)， 5.97(s， 1H)， 4.6(m， 2H)， 4.25(m， 2H)， 4.0(s， 3H)， 3.8(m， 1H)， 2.0(m， 1H)， 1.3(m， 3H)， 0.8(m， 6H). 31

    [1665] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ6.33， 6.04.

    [1666] 实施例 41

    [1667] (2S)- 甲基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯按 照如下步骤合成 ：

    [1668] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 甲基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， L- 缬氨酸甲基酯 (2.00g， 11.93mmol) 的 盐 酸 盐、 萘 -1- 基 二 氯 磷 酸 酯 (0.77g， 11.93mmol)、 三 乙 胺 (4.11mL， 23.85mmol) 的 20mL 干燥的二氯甲烷， 合并得到 2.63g(2S)- 甲基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯， 收率 62％， 呈澄清、 黄色、 厚油状。

    [1672] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1673] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.12， 8.10(2x d， J ＝ 7.50Hz， 1H， H8-napht)， 7.88(d， J ＝ 8.00Hz， 1H， H5-napht)， 7.74(d， J ＝ 8.00Hz， 1H， H4-napht)， 7.65-7.52(m， 3H， H7， H6， H2-napht)， 7.50， 7.45(2x t， J ＝ 8.00Hz， 1H， H3-napht)， 4.59(bs， 1H， NH)， 4.09-4.06(m， 1H， H.Val)， 3.81， 3.76(2xs， 3H， CH3 酯 )， 2.25-2.18(m， 1H， H Val)， 1.06， 1.03(2x d， J＝ 6.50Hz， 3H， CH3Val)， 0.99， 0.96(2x d， J ＝ 6.50Hz， 3H， CH3Val). 31

    [1674] P NMR(202MHz， CDCl3)δ10.02， 9.56.

    [1675] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1676] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法， 向含有 250mg(0.80mmol) 核苷的 5mL 四氢呋喃溶液中， 加入 0.32mL NMI(4.02mmol)， 随后加入 860mg(2.41mmol)2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲 基丁酸甲酯的 5mL 四氢呋喃。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 78.4mg 纯净的蛋白肽， 收率 + 15％， 为类白色固体。Ms(ES+)m/e ： 631.23(MH ， 100％ ) ； 精确质量 ： C28H36N6O9P1calculated 631.2281， found 631.2252。

    [1671] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1678] H NMR(500MHz ，CD 3 OD) δ 8.19-8.15(m ， 1H ，H 8 -napht) ， 8.00(s ， 1H ，H 8 ) ， 7.90-7.82(m， 1H， H5-napht)， 7.68， 7.65(2x d， J ＝ 7.7Hz， 1H， H4-napht)， 7.57-7.43(m， 3H， H7， H6， H2-napht)， 7.40-7.34(m， 1H， H3-napht)， 6.01(s， 1H， H1’)， 4.64-4.61(m， 2H， H5’)， 4.41-4.26(m， 2H， H3’ 和 H4’)， 4.04(s， 3H， 6OCH3)， 3.76-3.72(m， 1H， CH)， 3.53， 3.50(2x s， 3H， CH3 酯 )， 2.03-1.92(m， 1H， CH Val)， 1.00， 0.96(2x s， 3H， 2’ CCH3)， 0.88-0.79(m， 6H， 2x CH3Val). 13 3

    [1679] C NMR(126MHz， CD3OD)δ174.74， 174.41(2x d， JC-C-N-P ＝ 2.5Hz， C ＝ O 酯 )， 162.64(C6) ， 161.88 ， 161.87(C2) ， 154.39(C4) ， 148.03 ， 147.97(ipso Naph) ， 139.33 ， 139.07(CH8) ， 136.27 ， 136.22(C10-Naph) ， 128.81 ， 128.75 ， 128.52 ， 127.87 ， 127.82 ， 127.74 ， 127.70 ， 127.41 ， 126.56 ， 126.50 ， 126.43 ， 125.90 ， 122.79(Naph) ， 116.16 ， 3 116.14(C2-Naph)， 115.38， 115.30(C5)， 93.47， 93.33(C1’ )， 82.37， 82.23(2x d，JC-C-O-P ＝ 2 8.8Hz， C4’ )， 79.93， 79.91(C2’ )， 74.88， 74.75(C3’ )， 68.18， 67， 70(d， JC-O-P ＝ 6.3Hz， C5’ )， 61.97， 61.92(OCH3 酯 )54.31， 54.29(6OCH3)， 52.43， 52.39， 52.03(C Val)， 33.27， 33.03(2x 3 d， JC-C-N-P ＝ 8.8Hz， C Val)， 20.35， 20.32(2’ CCH3)， 19.45， 19.42， 18.45， 18.39(2x CH3Val). 31

    [1680] P NMR(202MHz， CD3OD)δ5.15， 4.95.

    [1681] 实施例 42

    [1682] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [1683] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)- 新戊基 -2- 氨基 -3- 甲 基丁酸酯 (4.2g， 1.18mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (3.1g， 1.18mmol)、 三乙胺 (3.31mL， 2.37mmol) 和 60mL 二氯甲烷， 合并得到 3.8g 预期的氯化磷酸酯， 呈浅黄色稠油状， 收率 77％。

    [1687] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1688] H NMR(200MHz ， CDCl 3) ： δ 8.06-8.1(m ， 1H) ， 7.85-7.89(m ， 1H) ， 7.73(d ， J ＝

    [1686] 8.6Hz， 1H)， 7.39-7.62(m， 4H)， 4.15(m， 1H)， 3.89(s， 1H)， 3.86(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 2.2(m， 1H)， 0.8-1.1(m， 15H). 31

    [1689] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ10.9， 10.4.

    [1690] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1691] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ - 磷酰 胺酯的通用方法， 含有核苷 (1.0g， 3.2mmol) 的 75mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 (3.8g， 9.92mmol) 和 N- 甲基咪唑 (1.45mL， 18.3mmol) 合并。标准 Workup 之后， 采用比例为 97 ∶ 3 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法在硅胶 上提纯粗产物， 得到 750mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 34％。

    [1692] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1693] H NMR(200MHz ， CD 3OD) ： δ 8.1-8.17(m ， 1H) ， 7.96(s ， 1H) ， 7.8-7.87(m ， 1H) ， 7.61-7.68(m， 1H)， 7.3-7.54(m， 4H)， 5.95(s， 1H)， 4.6(m， 2H)， 4.24-4.37(m， 2H)， 4.0(s， 3H)， 3.55-3.8(m， 3H)， 2.0(m， 1H)， 0.95(d， J ＝ 7.4Hz， 3H)， 0.8-0.86(m， 15H) 31

    [1694] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ6.21， 6.03.

    [1695] 实施例 43

    [1696] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2S)- 环 丙 甲 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [1697] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 环丙甲基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯

    [1699] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 2.92g 环丙基甲烷 2- 氨 基 -3- 甲基丁酸酯的甲苯磺酸盐、 2.3g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 2.47mL 三乙胺和 60mL 二氯甲 烷， 合并得到 2.35g 预期的氯化磷酸酯， 呈浅黄色厚油状。

    [1701] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1702] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.1(m， 1H)， 7.87(m， 1H)， 7.74(d， J ＝ 7.8Hz， 1H)， 7.62to 7.39(m， 4H)， 4.2to 3.98(m， 4H)， 2.2(m， 1H)， 1.08to0.98(m， 7H)， .6(m， 2H)， .3(m， 2H).

    [1700] 132102348712 A CN 102348731

    [1703] 31说明书103/198 页P NMR(80MHz， CDCl3)δ10.87， 10.34

    [1704] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1705] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法， 含有核苷 (400mg， 1.28mmol) 的 40mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)- 环丙甲基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 (735.6mg， 1.92mmol) 和 N- 甲基咪唑 (316.8mg， 3.85mmol) 合并。标准 work-up 后， 采用比例为 97 ∶ 3 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析 法在硅胶上提纯粗产物， 得到 380mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 45％。

    [1706] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1707] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.16(m， 1H)， 7.95(s， 1H)， 7.84(m， 1H)， 7.66(m， 1H)， 7.52 to 7.3(m， 4H)， 5.96(d， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 4.6(m， 2H)， 4.23(m， 2H)， 4.0(s， 3H)， 3.86to 3.64(m， 3H)， 3.5(dd， J ＝ 7.0Hz， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 2.0(m， 1H)， 1.0to 0.8(m， 10H)， 0.45(m， 2H)， 0.15(m， 2H). 31

    [1708] P NMR(80MHz， CDCl3)δ6.24， 6.08.

    [1709] 实施例 44

    [1710] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2S)- 环 丁 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [1711] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 环丁基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)- 环丁基 -2- 氨基 -3- 甲 基丁酸酯 (2.67g， 7.8mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (2.03g， 7.8mmol)、 三乙胺 (2.17mL， 15.6mmol) 和 20mL 二氯甲烷， 合并得到 2.13g 预期的氯化磷酸酯， 呈浅黄色稠油 状， 收率 69％。

    [1715] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1716] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.1(m， 1H)， 7.88(m， 1H)， 7.7(m， 1H)， 7.38-7.64(m， 4H)， 5.12(m， 1H)， 4.0(m， 2H)， 2.3(m， 2H)， 2.0(m， 2H)， 1.6-1.95(m， 3H)， 0.85-1.08(m， 6H). 31

    [1717] P NMR(80MHz， CDCl3)δ10.90， 10.47

    [1714] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1719] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法， 含有核苷 (200mg， 0.64mmol) 的 15mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)- 环丁基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 (0.303g， 0.77mmol) 和 N- 甲基咪唑 (0.1mL， 1.29mmol) 合并。标准 work-up 后， 采用比例为 97 ∶ 3 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法 在硅胶上提纯粗产物， 得到 106mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 25％。

    [1720] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1721] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.1-8.17(m， 1H)， 7.8(m， 1H)， 7.7(m， 1H)， 7.2-7.65(m， 5H)， 5.9(s， 1H)， 4.95(m， 1H)， 4.6-4.9(m， 2H)， 4.2-4.5(m， 2H)， 4.0(s， 3H)， 3.6-3.7(m， 1H)， 1.8-2.4(m， 4H)， 1.4-1.8(m， 2H)， 0.92-0.96(d， J ＝ 8.3Hz， 3H)， 0.79-0.85(m， 6H). 31

    [1722] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ6.22， 6.06.

    [1723] 实施例 45

    [1724] 按 照 如 下 所 述， 合 成 环 戊 基 2(S)-2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷 酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [1726] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 环戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 )- 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸 酯

    [1725] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)- 环戊基 -2- 氨基 -3- 甲 基丁酸酯 (2.58g， 7.2mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (1.88g， 7.2mmol)、 三乙 胺 (2.014mL， 14.4mmol) 和 20mL 二氯甲烷， 合并得到 2.12g 预期的 (2S)- 环戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 )- 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯， 呈浅黄色稠油状， 收率 72％。

    [1729] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1730] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.1(m， 1H)， 7.2-7.9(m， 6H)， 5.26(m， 1H)， 3.8-4.1(m， 2H)， 2.15(m， 1H)， 1.6-1.92(m， 8H)， 0.9-1.1(m， 6H). 31

    [1731] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ10.98， 10.5.

    [1728] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1733] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ - 磷酰 胺酯的通用方法 ( 方法 A)， 含有核苷 (200mg， 0.64mmol) 的 15mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)- 环 戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 (0.92g， 2.25mmol) 和 N- 甲基 咪唑 (263mg， 3.2mmol) 合并。标准 work-up 后， 采用比例为 97 ∶ 3 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层 析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 60mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 14％。

    [1734] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1735] H NMR(200MHz ，CD 3 OD) ： δ 8.1-8.17(m ， 1H) ， 8.0(s ， 1H) ， 7.8-7.9(m ， 1H) ， 7.6-7.7(m， 1H)， 7.3-7.5(m， 4H)， 5.95(s， 1H)， 4.95(m， 1H)， 4.6(m， 2H)， 4.2-4.4(m， 2H)， 4.0(s， 3H)， 3.6-3.7(m， 1H)， 2.0(m， 1H)， 1.4-1.8(m， 8H)， 0.92-0.96(d， J ＝ 8.4Hz， 3H)， 0.79-0.85(m， 6H) 31

    [1736] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ6.3， 6.0

    [1737] 实施例 46

    [1738] 按照如下所述， 合成 2(S)-2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸环己酯 ：

    [1739] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 环己基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 )- 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯

    [1741] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 1.8g 环己氧基 -L- 缬氨 酸的盐酸盐， 与 1.99g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 2.12mL 三乙胺和 25mL 二氯甲烷， 合并得到 2.34g(2S)- 环己基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 )- 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯， 呈浅黄色厚油 状， 收率 72％。

    [1743] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1744] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.11(m， 1H， H8-napht)， 7.90(m， 1H， H5-napht)， 7.75(dd， J ＝ 0.6， 8.3， 1H， H 4-napht)， 7.66-7.54(m， 3H， H 7， H 6， H2-napht)， 7.46(t， J ＝ 8.0，

    [1742] 1H， H3-napht)， 4.89(s， 1H， CH 酯 )， 4.27(t， J ＝ 11.1， 0.4H， NH)， 4.23(t， J ＝ 10.5， 0.6H ， NH) ， 4.09-3.99(m ， 1H ， CH α ) ， 2.22(m ， 1H ， CH β ) ， 1.89(m ， 2H ， CH 2cyclohexyl) ， 1.76(s， 2H， CH2cyclohexyl)， 1.63-1.53(m， 2H)， 1.50(m， 2H， CH2cyclohexyl)， 1.41(m， 2H， CH2cyclohexyl)， 1.08(d， J ＝ 6.8， 1.3H， CH3val)， 1.05(d， J ＝ 6.8， 1.7H， CH3val)， 1.01(d， J ＝ 6.9， 1.3H， CH3val)， 0.97(d， J ＝ 6.9， 1..7H， CH3val). 31

    [1745] P NMR(202MHz， CDCl3)δ9.88， 9.42.

    [1746] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1747] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法 ( 方法 A)， 向 150mg(0.48mmol) 含有核苷的 5mL 四氢呋喃溶液中， 加入 0.32mL(4.02mmol)NMI， 随后加入含有 633mg(1.44mmol)(2S)- 环己基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧 基 )- 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯的 5mL 四氢呋喃。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 45mg 纯净蛋白肽， 类白色固体， 收率 11％。

    [1748] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1749] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.21-8.14(m， 1H， H8-napht)， 7.96， 7.94(s， 1H， H8) ， 7.89-7.82(m， 1H， H5-napht)， 7.69， 7.65(2x d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H4-napht)， 7.55-7.42(m， H 6， H2-napht)， 7.42-7.33(m， 1H， H3-napht)， 5.99(s， 1H， H1’)， 4.66-4.54(m， 3H， CH 3H， H 7， 酯， H5’)， 4.39-4.22(m， 2H， H3’和 H4’)， 4.05， 4.04(s， 3H， 6OCH3)， 3.75-3.68(m， 1H， H Val)， 2.06-1.93(m ， 1H ， H Val) ， 1.70-1.57(m ， 4H ， 2x CH2cyclohexyl) ， 1.39-1.15(m ， 6H ， 3x CH2cyclohexyl)， 0.99， 0.95(s， 3H， 2’ CCH3)， 0.89-0.82(m， 6H， CH3 Val). 13 3 3

    [1750] C NMR(126MHz， CD3OD)δ173.67(d， JC-C-N-P ＝ 2.8， C ＝ O 酯 )， 173.39(d， JC-C-N-P 2 ＝ 3.4， C ＝ O 酯 )， 162.73(C6)， 161.89， 161.86(C2)， 154.53， 154.49(C4)， 148.06(d， JC-O-P 2 ＝ 1.6， napht-C1)， 148.00(d，JC-O-P ＝ 1.2， napht-C1)， 139.44， 139.15(CH8)， 136.30， 3 136.25(napht-C10)， 128.81， 128.75(CH-napht)， 127.88(d，JC-C-O-P ＝ 6.6， napht-C9)， 3 127.86(d，JC-C-O-P ＝ 6.4， napht-C9)， 127.72， 127.67(CH-napht)， 127.39(CH-napht)， 126.49， 126.42(CH-napht)， 125.85(CH-napht)， 122.85， 122.83(CH-napht)， 116.12(d， 3 3 JC-C-O-P ＝ 3.1， napht-C2)， 116.07(d， JC-C-O-P ＝ 3.2， napht-C2)， 115.67， 115.62(C5)， 93.48， 3 3 93.29(C1’ )， 82.41(d， JC-C-O-P ＝ 8.0， C4’ )， 82.22(d， JC-C-O-P ＝ 8.3， C4’ )， 79.89(C2’ )， 2 2 74.98， 74.93(C3’ )， 74.86， 74.81(CH 酯 )， 68.36(d， JC-O-P ＝ 5.5， C5’ )， 67.82(d， JC-O-P ＝ 6 3 5.4， C5’ )， 62.05， 62.01(C Val)， 54.23， 54.22(O -CH3)， 33.34(d， JC-C-N-P ＝ 6.9， C Val)， 3 33.16， (d， JC-C-N-P ＝ 7.4， C Val)， 32.46， 32.39(CH2 cyclohexyl)， 26.35(CH2 cyclohexyl)， 24.62， 24.58(CH2 cyclohexyl)， 20.32， 20.28(2’ -CH3)， 19.46， 19.46， 19.44(CH3 Val)， 18.35， 18.23(CH3 Val) 31

    [1751] P NMR(202MHz， CD3OD)δ5.15， 4.91

    [1752] 实施例 47

    [1753] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [1754] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 四氢 -2H- 吡喃 -4- 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 )- 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯

    [1756] 采 用 合 成 萘 ( 氨 基 酸 酯 ) 氯 化 磷 酸 酯 的 一 般 方 法， (S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 -2- 氨基 -3- 甲基丁酸酯 (3.76g， 10.0mmol) 的甲苯磺酸盐， 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (2.62g， 10.0mmol)、 三乙胺 (2.81mL， 2.0mmol) 和 54mL 二氯甲烷， 合并得到 2.89g 预期的 (2S)- 四氢 -2H- 吡喃 -4- 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯， 呈浅黄 色稠油状， 收率 67％。

    [1757] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1758] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.05(m， 1H)， 7.85(m， 1H)， 7.7(m， 1H)， 7.4-7.6(m， 4H)， 5.05(m， 1H)， 4.2(m， 1H)， 3.8-4.18(m， 3H)， 3.6-3.8(m， 2H)， 2.1-2.3(m， 1H)1.6-2.0(m， 4H)， 0.85-1.08(m， 6H). 31

    [1759] P NMR(80MHz， CDCl3)δ10.91， 10.36

    [1760] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1761] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ - 磷酰 胺酯的通用方法 ( 方法 A)， 含有核苷 (400mg， 1.28mmol) 的 40mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)- 四 氢 -2H- 吡喃 -4- 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 (0.82g， 1.93mmol) 和 N- 甲基咪唑 (0.3mL， 3.86mmol) 合并。标准 work-up 后， 采用比例为 97 ∶ 3 的 CH2Cl2/ MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 480mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 53％。

    [1762] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1763] H NMR(200MHz ，CD 3 OD) ： δ 8.1-8.17(m ， 1H) ， 7.96(s ， 1H) ， 7.8-7.9(m ， 1H) ， 7.6-7.7(m， 1H)， 7.3-7.6(m， 4H)， 5.95(s， 1H)， 4.65-4.8(m， 1H)， 4.6(m， 2H)， 4.2-4.4(m， 2H) ， 4.0(s ， 3H) ， 3.6-3.8(m ， 2H) ， 3.3-3.5(m ， 1H) ， 1.96(m ， 1H) ， 1.58-1.83(m ， 5) ， 0.92-0.96(d， J ＝ 8.25Hz， 3H)， 0.79-0.85(m， 6H)

    [1755] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ6.19， 6.15， 5.95， 5.91

    [1765] 实施例 48

    [1766] 按照如下所述， 合成蛋白肽 (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(6-((S)-1- 甲氧 基 -1- 氧代丙 -2- 基 ) 萘 -2- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [1764] 31步骤 1 ： 合成 (2S)- 新戊基 2-( 氯 (6-((S)-1- 甲氧基 -1- 氧代丙 -2- 基 ) 萘 -2- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯

    [1768] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 776mg(S)- 新戊基 -2- 氨 基 -3- 甲基丁酸酯的甲苯磺酸盐， 和 750mg(S)- 甲基 2-(6-( 二氯磷酰氧基 ) 萘 -2- 基 ) 丙 酸 酯、 0.6mL 三 乙 胺 和 15mL 二 氯 甲 烷， 合 并 得 到 580mg 预 期 的 (2S)- 新 戊 基 2-( 氯 (6-((S)-1- 甲氧基 -1- 氧代丙 -2- 基 ) 萘 -2- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯， 胶质 固体。

    [1771] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1772] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ7.84-7.72(m， 4H)， 7.49-7.44(dd， J ＝ 1.8Hz， 8.4Hz， 1H)， 7.36(m， 1H)， 4.2-3.9(m， 3H)， 3.6(s， 3H)， 2.2(m， 1H)， 1.6(d， J ＝ 7.2Hz， 3H)， 1.5(dd， J ＝ 5.4， 6.6Hz， 3H)， 0.95(m， 12H). 31

    [1773] P NMR(80MHz， CDCl3)δ10.65， 10.19

    [1774] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1775] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ - 磷酰 胺酯的通用方法 ( 方法 A)， 含有核苷 (150mg， 0.48mmol) 的 20mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)- 新 戊基 2-( 氯 (6-((S)-1- 甲氧基 -1- 氧代丙 -2- 基 ) 萘 -2- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基 丁酸酯 (580mg， 0.96mmol) 和 N- 甲基咪唑 (0.2mL， 2.4mmol) 合并。标准 work-up 后， 采用 比例为 97 ∶ 3 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 83mg 蛋白肽， 类白色 固体， 收率 22％。

    [1776] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1777] H NMR(200MHz ， CD 3OD) ： δ 8.2-7.9(m ， 1H) ， 7.8-7.6(m ， 4H) ， 7.5-7.3(m ， 2H) ， 5.96(s， 1H)， 4.57(dd， J ＝ 3.4， 3.2Hz， 2H)， 4.35-4.1(m， 2H)， 4.01(s， 3H)， 3.95-3.7(m， 2H)， 3.66(s， 3H)， 3.6-3.4(m， 1H)， 3.3(m， 1H)， 2.0(m， 1H)， 1.5(dd， J ＝ 3.0， 7.0Hz， 3H)， 0.7-0.95(m， 18H). 31

    [1778] P NMR(80MHz， CD3OD) ： 6.24， 5.90

    [1779] 实施例 49

    [1780] 按照如下所述， 合成 (2S)-2， 4- 二氟苄基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧

    [1770] 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 甲基丁酸酯 ：

    [1781] 步骤 1 ： (2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯

    [1783] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)-2， 4- 二氟苄基 2- 氨 基 -3- 甲基丁酸酯 (1.7g， 4.1mmol) 的甲苯磺酸盐， 喹啉 -5- 基氧基二氯磷酸酯 (1.08g， 4.01mmol)、 三乙胺 (1.15mL， 8.2mmol) 和 20mL 二氯甲烷， 合并得到 770mg 预期的氯化磷酸 酯， 浅黄色厚浆状， 收率 40％。

    [1785] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1786] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.96(d， J ＝ 3.4Hz， 1H)， 8.45(d， J ＝ 8.6Hz， 1H)， 8.07(d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.65(m， 2H)， 7.27-7.52(m， 2H)， 6.8(m， 2H)， 5.2(m， 2H)， 4.5(bq， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 4.0(m， 1H)， 2.2(m， 1H)， 0.9(m， 6H). 31

    [1787] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ11.08， 10.62.

    [1788] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1789] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ - 磷酰 胺酯的通用方法 ( 方法 B)， 含有核苷 (256mg， 0.82mmol) 的 30mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 甲基丁酸酯 (770mg， 1.64mmol) 和叔 丁基氯化镁 (1.645mL， 1.645mmol) 合并。标准 work-up 后， 采用比例为 94 ∶ 6 的 CH2Cl2/ MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 169mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 28％。

    [1790] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1791] H NMR(200MHz ，CD 3 OD) ： δ 8.84(m ， 1H) ， 8.61(m ， 1H) ， 7.78-7.9(m ， 1H) ， 7.78-7.85(m， 1H)， 7.26-7.69(m， 4H)， 6.75-6.92(m， 2H)， 5.94(s， 1H)， 5.0(m， 2H)， 4.6(dd， J ＝ 4.0Hz， J ＝ 4.4Hz， 2H)， 4.15-4.41(m， 2H)， 4.0(s， 3H)， 3.73(dd， J ＝ 6.2Hz， J ＝ 6.2Hz，

    [1784] 1H)， 2.0(m， 1H)， 0.8-1.0(m， 9H). 31

    [1792] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ6.34， 5.94.

    [1793] 实施例 50

    [1794] 按照如下所述， 合成蛋白肽 (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [1795] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 2- 氨基 -3- 甲基丁酸新戊酯 (1.1g， 3.06mmol) 的甲苯磺酸盐， 喹啉 -5- 基氧基二氯磷酸酯 (800mg， 3.06mmol)、 三乙胺 (0.85mL， 6.1mmol) 和 30mL 二氯甲烷， 合并得到 802mg 预期的氯化磷酸酯， 浅黄色厚油状， 收 率 64％。

    [1798] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1799] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.98-8.96(d， J ＝ 4.0Hz， 1H0， 8.44(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 8.02(d， J ＝ 6.6Hz， 1H)， 7.7(m， 2H)， 7.59m， 1H)， 4.38(m， 1H)， 4.09m， 1H)， 3.899m， 2H)， 2.1(m， 2H)， 1.09-0.85(m， 15H). 31

    [1800] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ11.11， 10.7.

    [1801] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1802] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ - 磷酰 胺酯的通用方法 ( 方法 A)， 含有核苷 (168mg， 0.53mmol) 的 25mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)- 新 戊基 2-( 氯 ( 喹啉 -5- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 (650mg， 1.61mmol)、 三乙胺 (0.12mL， 0.538mmol) 和 N- 甲基咪唑 (0.25mL， 2.7mmol) 合并。标准 work-up 后， 采用比例 为 94 ∶ 6 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 38mg 蛋白肽， 收率 10％。

    [1803] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1804] H NMR(200MHz ，CD 3 OD) ： δ 8.86-8.8(dd ，J ＝ 4.4Hz ，J ＝ 6.6Hz ， 1H) ， 8.64-8.53(dd， J ＝ 7.6Hz， J ＝ 8.4hz， 1H)， 7.94-7.92(d， J ＝ 4.4Hz， 1H)， 7.82(m， 1H)， 7.639m， 1H)， 7.55-7.49(dd， J ＝ 4.4Hz， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.45-7.38(dd， J ＝ 4.4Hz， J＝ 8.4Hz， 1H)， 5.95(s， 1H)， 4.62(m， 2H)， 4.42-4.21(m， 2H)， 4.11-4.0(d， J ＝ 2.2Hz， 3H)， 3.8-3.54(m， 3H)， 2.09m， 1H)， 0.97-0.81(m， 18H). 31

    [1805] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ6.41， 5.94.

    [1806] 实施例 51

    [1807] 按照如下所述， 合成 (2S)-2， 4- 二氟苄基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧

    [1797] 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 甲基丁酸酯 ：

    [1808] 步骤 1 ： (2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯

    [1810] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)-2， 4- 二氟苄基 2- 氨 基 -3- 甲基丁酸酯 (1.7g， 4.1mmol) 的甲苯磺酸盐、 喹啉 -6- 基氧基二氯磷酸酯 (1.08g， 4.01mmol)、 三乙胺 (1.15mL， 8.2mmol) 和 30mL 二氯甲烷合并， 短硅胶色谱后得到 462mg 预 期的 (2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯， 浅黄色 胶质浆状， 收率 24％。

    [1812] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1813] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.95(d， J ＝ 4.0Hz， 1H)， 8.3(dd， J ＝ 5.0Hz， J ＝ 8.3Hz， 2H)， 7.84(m， 1H)， 7.6(m， 2H)， 7.38(m， 1H)， 6.84(m， 2H)， 5.2(m， 2H)， 4.3(m， 2H)， 2.2(m， 1H)， 0.8(m， 6H). 31

    [1814] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ10.66， 10.2

    [1815] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1816] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰 胺 酯 的 通 用 方 法 ( 方 法 B)， 含 有 核 苷 (154mg， 0.493mmol) 的 20mL 无 水 四 氢 呋 喃， 与 462mg(2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯、 叔丁基 氯化镁 (1.0mL， 0.987mmol) 合并。标准 work-up 后， 采用比例为 92 ∶ 8 的 CH2Cl2/MeOH， 经 柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 55mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 15％。

    [1817] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1818] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.78(ddd， J ＝ 1.8Hz， J ＝ 1.4Hz， J ＝ 1.6Hz， 1H)，

    [1811] 8.24(m， 1H)， 7.94(m， 2H)， 7.72(s， 1H)， 7.62(m， 1H)， 7.25-7.5(m， 2H)， 6.88(m， 2H)， 5.93(d， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 5.0(m， 2H)， 4.56(m， 2H)， 4.2-4.4(m， 2H)， 3.62-3.88(m， 2H)， 2.0(m， 1H)， 0.8-1.0(m， 9H). 31

    [1819] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ5.98， 5.81.

    [1820] 实施例 52

    [1821] 按照如下所述， 合成蛋白肽 (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [1822] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯

    [1824] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 1.9g(S)- 新戊基 -2- 氨 基 -3- 甲基丁酸酯的甲苯磺酸盐， 1.4g 喹啉 -6- 基二氯磷酸酯、 1.49mL 三乙胺和 20mL 二氯 甲烷， 合并得到 600mg 预期的 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲 基丁酸酯， 呈厚油状。

    [1826] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1827] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δδ8.9-8.93(dd， J ＝ 1.4Hz， 3.0Hz， 1H)， 8.13(m， 2H)， 7.78(dd， J ＝ 2.6Hz， 4.8Hz， 1H)， 7.56-7.62(ddd， J ＝ 1.2， 2.6， 9.2Hz， 1H)， 7.45(dd， J＝ 4.0Hz， 8.4Hz， 1H)， 4.0-4.2(m， 2H)， 3.88(d， 2H， J ＝ 2.8Hz)， 2.2(m， 1H)， 1.0(m， 15H). 31

    [1828] P NMR(80MHz， CDCl3)δ10.74， 10.27

    [1829] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1830] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ - 磷酰 胺酯的通用方法 ( 方法 A)， 含有核苷 (150mg， 0.48mmol) 的 20mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)- 新 戊基 2-( 氯 ( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 (600mg， 1.44mmol)、 N- 甲基 咪唑 (0.2mL， 2.40mmol) 和三乙胺 (0.07mL， 0.48mmol) 合并。标准 work-up 后， 采用比例为 94 ∶ 6 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 126mg 蛋白肽， 呈类白色固 体， 收率 38％。

    [1831] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ：

    [1825] 142102348712 A CN 102348731

    [1832] 1说明书113/198 页H NMR(200MHz ， CD 3OD) ： δ 8.76(m ， 1H) ， 8.2(m ， 1H) ， 7.9(m ， 2H) ， 7.75(d ， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 7.62-7.68(dd， J ＝ 2.6， 9.2Hz， 1H)， 7.46(m， 1H)， 5.92(s， 1H)， 4.6(m， 2H)， 4.2(m， 2H)， 4.01(s， 3H)， 3.74-3.82(dd， J ＝ 5.8Hz， 5.2Hz， 1H)， 3.74-3.5(m， 3H)， 2.0(m， 1H)， 0.75-0.95(m， 18H). 31

    [1833] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ6.12， 5.85

    [1834] 实施例 53

    [1835] 按照如下所述， 合成蛋白肽 (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -8- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [1836] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 喹啉 -8- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯

    [1838] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 2- 氨基 -3- 甲基丁酸新戊 酯的甲苯磺酸盐 (1.2g， 3.4mmol)， 喹啉 -8- 基氧基二氯磷酸酯 (900mg， 3.4mmol)、 三乙 胺 (0.96mL， 6.9mmol) 和 30mL 二氯甲烷， 合并得到 3.1g 预期的 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 喹 啉 -8- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯， 直接用于下一步。

    [1840] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1841] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰 胺 酯 的 通 用 方 法 ( 方 法 A)， 含 有 核 苷 (160mg， 0.52mmol) 的 25mL 无 水 四 氢 呋 喃， 与 3.1g(2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 喹啉 -8- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯和 N- 甲基咪唑 (0.2mL， 2.56mmol) 合并。标准 work-up 后， 采用比例为 94 ∶ 6 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法 在硅胶上提纯粗产物， 得到 8mg 蛋白肽， 呈类白色固体， 收率 3％。

    [1842] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1843] H NMR(200MHz ，CD 3 OD) ： δ 8.92-8.89(dd ，J ＝ 1.4Hz ，J ＝ 1.8Hz ， 1H) ， 8.37-8.32(dd， J ＝ 1.8Hz， J ＝ 1.8Hz， 1H)， 7.89(s， 1H)， 7.75(m， 2H)， 7.55(m， 2H)， 5.9(s， 1H)， 4.6(m， 2H)， 4.2(m， 2H)， 4.02-3.9(m， 4H)， 3.86(s， 1H)， 3.7-3.67(m， 2H)， 2.03(m， 1H)， 1.0-0.81(m， 18H).

    [1839] 31P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ6.48.实施例 54

    [1846] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(2- 甲基萘 -1- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [1847] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 新戊基 2-( 氯 (2- 甲基萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯

    [1849] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)- 新戊基 -2- 氨基 -3- 甲 基丁酸酯 (680mg， 1.89mmol) 的甲苯磺酸盐、 2- 甲基萘 -1- 基氧基二氯磷酸酯 (523.38mg， 1.89mmol)、 三乙胺 (0.528mL， 3.79mmol) 和 10mL 二氯甲烷， 合并得到预期产物， 直接用于下 一步。

    [1851] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31

    [1852] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ10.48， 9.89

    [1853] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1854] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法， 含有核苷 (393mg， 1.26mmol) 的 30mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)- 新戊基 2-( 氯 (2- 甲基萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 (805.9mg， 1.89mmol) 和 N- 甲 基咪唑 (415.21mg， 5.05mmol) 合并。标准 Workup 之后， 采用比例为 98 ∶ 2 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 450mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 51％。

    [1855] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1856] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.2(m， 1H)， 7.89(d， J ＝ 3.6Hz， 1H)， 7.82to 7.25(m， 5H)， 5.92(d， J ＝ 4.0Hz， 1H)， 4.5(m， 1H)， 4.4(m， 1H)， 4.15(m， 2H)， 4.03(s， 3H)， 3.8to 3.7(m， 2H)， 2.53(m， 3H)， 2.0(m， 1H)， 0.98 to 0.7(m， 18H). 31

    [1857] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ6.8， 6.4

    [1858] 实施例 55

    [1859] 按照如下所述， 合成蛋白肽 (2S)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(3- 叔丁基萘 -1- 基

    [1850] 氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [1860] 步骤 1 ： 合成 (2S)- 新戊基 2-((3- 叔丁基萘 -1- 基氧基 ) 氯磷酰化氨基 )-3- 甲 基丁酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)- 新戊基 2- 氨基 -3- 甲 基 丁 酸 酯 (552mg， 1.54mmol) 的 甲 苯 磺 酸 盐、 3- 叔 丁 基 萘 -1- 基 二 氯 磷 酸 酯 (486mg， 1.54mmol)、 三乙胺 (0.43mL， 3.08mmol) 和 20mL 二氯甲烷， 合并得到预期氯化磷酸酯， 呈浅 黄色厚浆状， 直接用于下一步。

    [1864] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31

    [1865] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ10.83， 10.31.

    [1866] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1867] 采用合成 2- 氨基 -6- 甲氧基 -9-(2-C- 甲基 -β-D- 呋喃核糖基 ) 嘌呤的 5’ -磷 酰胺酯的通用方法， 含有核苷 (239mg， 0.77mmol) 的 20mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)- 新戊基 2-((3- 叔丁基萘 -1- 基氧基 ) 氯磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 (719mg， 1.54mmol) 和 N- 甲 基咪唑 (0.35mL， 3.85mmol) 合并。标准 Workup 之后， 采用比例为 97 ∶ 3 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 388mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 68％。

    [1868] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1869] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.06(m， 1H)， 7.96(d， J ＝ 2.6Hz， 1H)， 7.89(s， 1H)， 7.8(m， 1H)， 7.62(m， 2H)， 7.4(m， 2H)， 5.98(d， J ＝ 2.6Hz， 1H)， 4.6(m， 2H)， 4.37-4.25(m， 2H)， 4.02(s， 3H)， 3.82-3.56(m， 3H)， 2.0(m， 1H)， 1.34(d， J ＝ 8.2Hz， 9H)， 0.95(d， J ＝ 4.6Hz， 3H)， 0.86-0.81(m， 15H). 31

    [1870] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ6.12， 6.02.

    [1871] 实施例 56

    [1872] 按照如下所述， 合成蛋白肽 (2S)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲 氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )(3， 7- 二叔丁基 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [1863] 步骤 1 ： 合 成 (2S)- 新 戊 基 2-( 氯 (3， 7- 二 叔 丁 基 萘 -1- 基 氧 基 ) 磷 酰 化 氨 基 )-3- 甲基丁酸酯

    [1874] 采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)- 新戊基 2- 氨基 -3- 甲基 丁酸酯 (560mg， 1.56mmol) 的甲苯磺酸盐、 3， 7- 二叔丁基萘 -1- 基氧基二氯磷酸酯 (581mg， 1.56mmol)、 三乙胺 (0.43mL， 3.12mmol) 和 20mL 二氯甲烷， 合并得到预期氯化磷酸酯， 呈浅 黄色厚浆状， 未经纯化直接用于下一步。

    [1877] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31

    [1878] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ10.71， 10.04.

    [1879] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1880] 采用 ( 方法 A) 合成 5’ - 磷酰胺酯的通用方法， 含有 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲 基 )-3- 甲 基 四 氢 呋 喃 -3， 4- 二 醇 (243mg， 0.78mmol) 的 20mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)- 新戊基 2-( 氯 (3， 7- 二叔丁基萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-3- 甲基丁酸酯 (817mg， 1.56mmol) 和 N- 甲基咪唑 (0.31mL， 3.9mmol) 合并。 标准 Workup 之后， 采用比例为 97 ∶ 3 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物， 得到 393mg 蛋 白肽， 类白色固体， 收率 65％。

    [1881] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1882] H NMR(200MHz ，CD 3 OD) ： δ 8.03(m ， 1H) ， 7.95(m ， 1H) ， 7.89(s ， 1H) ， 7.74(m ， 1H)， 7.62-7.57(m， 2H)， 5.96(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 4.57(m， 2H)， 4.28(m， 2H)， 4.03(s， 3H)， 3.83-3.5(m， 3H)， 2.0(m， 1H)， 1.37(m， 18H)， 0.97-0.77(m， 18H). 31

    [1883] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ6.14， 6.10.

    [1884] 实施例 57

    [1885] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2R)- 新 戊 基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [1876] 步骤 1 ： (2R)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 3g(R)- 新戊基 2- 氨基丙酸 酯、 2.36g 萘 -1- 基二氯磷酸酯的甲苯磺酸盐、 2.52mL 三乙胺、 和 90mL 二氯甲烷合并得到 (2R)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯， 呈浅黄色厚油状。粗产物化合 物在没有进一步纯化情况下使用。

    [1890] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1891] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.18， 7.88

    [1892] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1893] 采用 ( 方法 B) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向含有 250mg 核苷的 5mL 四氢呋喃溶液中， 加入 1.61mL 叔丁基氯化镁， 随后加入含有 925mg(2R)- 新戊基 -2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 3mL 四氢呋喃溶液。Workup、 硅胶柱层析和制备型 高效液相色谱之后， 得到 57.9mg 纯净的蛋白肽， 收率 11％。 HPLC tR ＝ 27.61、 28.29min( 柱 ： varian Pursuit XRs5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： MeOH 线性梯度 ： 30min 内水中甲醇从 0％ 至 100％。

    [1894] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1895] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.21-8.15(m， 1H)， 8.01 和 7.98(2s， 1H)， 7.91-7.85(m， 1H)， 7.71 和 7.69(2d， J ＝ 8.0， 1H)， 7.56-7.46(m， 3H)， 7.42 和 7.39(2t， J ＝ 8.0， 1H)， 6.00 和 5.98(2s， 1H)， 4.67-4.53(m， 2H)， 4.41-4.20(m， 2H)， 4.09-4.00(m， 4H)， 3.81， 3.79， 3.68， 3.66(2x AB， JAB ＝ 10.5， 2H)， 1.32 和 1.27(2d， J ＝ 7.2， 3H)， 1.00 和 0.99(2s， 3H)， 0.88 和 0.86(2s， 9H) 13

    [1896] C NMR(126MHz， CD3OD)δ175.20 和 174.90(2d， 3J C-C-N-P ＝ 5.1)， 162.64， 162.62， 161.95， 161.93， 154.49， 154.48， 148.00， 147.95(d， 2JC-O-P ＝ 6.7)， 139.46， 139.05， 136.31， 136.28， 129.17， 128.83， 127.91 和 127.84(2d， 3JC-C-O-P ＝ 6.3)， 127.77， 127.54， 127.46， 126.50， 125.99， 125.94， 122.83， 122.70， 116.28， 116.26， 116.11， 116.08， 93.39， 93.20， 82.32 和 82.10(2d， 3JC-C-O-P ＝ 8.3)， 79.97， 79.90， 75.38， 74.77， 74.54， 67.82 和 67.38(2d， 2JC-O-P ＝ 5.0)， 54.29， 54.27， 51.78， 51.67， 32.24， 26.69， 26.66，

    [1889] 20.70 和 20.43(2d， 3JC-C-N-P ＝ 7.2)， 20.31， 20.29 31

    [1897] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.48， 4.09

    [1898] 实施例 58

    [1899] 按照如下所述， 合成 (2S)- 苄基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-4-( 甲硫基 ) 丁酸酯 ：

    [1900] 步骤 1 ： (2S)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4-( 甲硫基 ) 丁酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (2S)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 )-4-( 甲硫基 ) 丁酸酯 (2.00g， 4.70mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯 磷酸酯 (1.23g， 4.70mmol)、 三乙胺 (1.31mL， 9.40mmol) 合并在 30mL 干燥的二氯甲烷中， 得 到 1.67g(2S)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4-( 甲硫基 ) 丁酸酯， 呈澄清、 黄色厚油状， 收率 74％。

    [1904] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1905] H NMR(500MHz ，CDCl 3 ) δ 8.13-8.08(m ， 1H ，H 8 -napht) ， 7.90-7.88(m ， 1H ， H5-napht)， 7.75(d， J ＝ 9.00Hz， 1H， H4-napht)， 7.64-7.54(m， 3H， H7， H6， H2-napht)， 7.44(t， J ＝ 8.20Hz， 1H， H3-napht)， 7.35-7.31(m， 5H， Ph)， 5.25， 5.22(AB， JAB ＝ 8.50Hz， 2H， CH2 酯 )， 4.75-4.69(m， 1H， NH)， 4.48-4.41(m， 1H， CHa)， 2.62-2.52(m， 2H， CH2-S)， 2.18-1.96(m， 2H，

    [1903] CH-CH2 Met)， 2.03， 2.01(2x s， 3H， CH3Met). 31

    [1906] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.72， 8.63

    [1907] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1908] 采用 ( 方法 B) 合成 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲 氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇、 250mg(0.803mmol) 核 苷 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 1.61mL(1.61mmol) 叔 丁 基 氯 化 镁， 随后加入含有 742mg(1.60mmol)(2S)- 苄基 -2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4-( 甲硫基 ) 丁酸酯 的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 246mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固 体， 收率 42％。下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1910] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.19， 8.16(2x d， J ＝ 7.80Hz， 1H， H8-napht)， 7.98， 7.94(2x s， 1H， H8)7.86， 7.84(2x d， J ＝ 9.00Hz， 1H， H5-napht)， 7.68， 7.66(2x d， J ＝ 8.20Hz， 1H， H4-napht)， 7.53-7.44(m， 3H， H7， H6， H2-napht)， 7.36， 7.35(2x t， J ＝ 8.00Hz， 1H， H3-napht)， 7.26-7.25(m， 5H， Ph)， 6.00， 5.99(2x s， 1H， H1’)， 5.08-4.95(m， 2H， CH2 酯 )， 4.66-4.58(m， 2H， H5’)， 4.35， 4.29(2x d， J ＝ 9.0Hz， 1H， H3’)， 4.26-4.22(m， 1H， H4’)， 4.18-4.13(m， 1H， H Met)， 4.03， 4.02(2x s， 3H， 6O-CH3)， 2.35， 2.24(2x t， J ＝ 7.50Hz， 2H， CH2-S)， 1.98-1.77(m， 5H， CHCH2Met 和 CH3Met)0.98， 0.96(2x s， 3H， 2’ -CH3). 13 3 3

    [1911] C NMR(126MHz， CD3OD)δ174.21(d， JC-C-N-P ＝ 3.8Hz， C ＝ O 酯 )， 173.89(d， JC-C-N-P ＝ 3.8Hz， C ＝ O 酯 )， 162.72(C6)， 161.85(C2)， 154.56， 154.51(C4)， 148.00， 147.94(ipso Naph)， 139.34， 139.09(CH8)， 137.08， 137.06(ipso Ph)， 136.28， 136.25(napht-C10)， 3 129.53， 129.36， 129.31， 128.85， 128.83(Naph， Ph)， 127.89(d， JC-C-O-P ＝ 3.8Hz， naph-C9)， 3 127.80(d，JC-C-O-P ＝ 5.0Hz， naph-C9)， 127.54， 127.52， 126.52， 126.03， 125.97， 122.86， 3 3 122.82(Naph， Ph)， 116.35， 116.25(d，JC-C-O-P ＝ 3.8Hz， C2-Naph)， 116.15(d，JC-C-O-P ＝ 3 2.5Hz， C2-Naph)， 115.64， 115.60(C5)， 93.35， 93.16(C1’ )， 82.32(d， JC-C-O-P ＝ 8.8Hz， C4’ )， 3 2 JC-C-O-P ＝ 8.8Hz， C4’ )， 79.98， 79.93(C2’ )， 74.91， 74.63(C3’ )， 68.17(d，JC-O-P 82.13(d， 2 ＝ 5.0Hz， C5’ )， 68.04(d， JC-O-P ＝ 6.25Hz， C5’ )， 67.59， 67.55(CH2 酯 )， 55.23， 55.11(C 3 3 Met)， 54.26(6OCH3)， 34.35(d， JC-C-N-P ＝ 6.25Hz， C Met)， 34.13(d， JC-C-N-P ＝ 7.5Hz， C Met)， 30.74， 30.72(CH2S Met)， 20.36(2’ CCH3)， 15.13， 15.09(CH3Met) 31

    [1912] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.54， 4.42

    [1913] 实施例 59

    [1914] (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-4-( 甲硫基 ) 丁酸酯按照如下步骤合成 ：

    [1915] 步骤 1 ： (2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4-( 甲硫 基 ) 丁酸酯

    [1916] 采 用 合 成 萘 基 ( 氨 基 酸 酯 ) 氯 化 磷 酸 酯 的 一 般 方 法， (S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2- 氨基 -4-( 甲硫基 ) 丁酸酯 (2.00g， 4.70mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸 酯 (1.23g， 4.70mmol)、 三 乙 胺 (1.31mL， 9.40mmol) 的 30mL 干 燥 的 二 氯 甲 烷， 合并得到 1.67g(2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4-( 甲硫基 ) 丁酸酯， 呈澄清、 黄色厚油状， 收率 74％。

    [1919] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1920] H NMR(500MHz ，CDCl 3 ) δ 8.12 ， 8.10(2x d ，J ＝ 8.00Hz ， 1H ，H 8 -napht) ， 7.91-7.88(m， 1H， H5-napht)， 7.76(d， J ＝ 8.50Hz， 1H， H4-napht)， 7.65-7.55(m， 3H， H 7， H6， H2-napht)， 7.46， 7.45(2x t， J ＝ 8.00Hz， 1H， H3-napht)， 7.40-7.31(m， 5H， Ph)， 6.00， 5.97(2x q， J ＝ 7.50Hz， 1H， CH 酯 )， 4.58-4.47(m， 1H， NH)， 4.47-4.40(m， 1H， CHa)， 2.55-2.34(m， 2H， CH2-S)， 2.18-1.96(m， 5H， CH2 和 CH3Met)， 1.64， 1.60(2x d， J ＝ 7.50Hz，

    [1918] 3H， CH3 酯 ). 31

    [1921] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.64， 8.59

    [1922] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1923] 采用 ( 方法 B) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向 250mg(0.803mmol) 核 苷 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 1.61mL(1.61mmol) 叔 丁 基 氯 化 镁， 随后加入含有 768mg(1.60mmol)(2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4-( 甲硫 基 ) 丁酸酯的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 226mg 纯净的蛋白肽， 呈 类白色固体， 收率 37％。

    [1924] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1925] H NMR(500MHz ， CD 3OD) δ 8.22-8.17(m ， 1H ， H 8-napht) ， 7.99 ， 7.96(2x s ， 1H ， H8)7.86-7.82(m， 1H， H5-napht)， 7.67， 7.65(2x d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H4-napht)， 7.55-7.46(m， 3H， H7， H6， H2-napht)， 7.37， 7.35(2x t， J ＝ 8.0Hz， 1H， H3-napht)， 7.29-7.26(m， 5H， Phe)， 6.03， 6.01(2x s， 1H， H1’)， 5.77， 5.69(2x q， J ＝ 5.0Hz， CH 酯 )， 4.68-4.54(m， 2H， H5’)， 4.35， 4.31(2x d， J ＝ 9.0Hz， 1H， H3’)， 4.28-4.23(m， 1H， H4’)， 4.16-4.12(m， 1H， H Met)， 4.04， 4.03(2xs， 3H， 6O-CH3)， 2.33-2.11(m， 1H， CH2-S)， 1.93-1.86， 1.80-1.72(2x m， 2H， CHCH2Met)， 1.82， 1.81(2x s， 3H， S-CH3)， 1.40， 1.39(2x d， J ＝ 5.0Hz， 3H， CH3 酯 )， 0.98， 0.97(2x s， 3H， 2’ -CH3). 13 3

    [1926] C NMR(126MHz， CD3OD)δ173.63(d， JC-C-N-P ＝ 3.8Hz， C ＝ O 酯 )， 173.33(d， 3 JC-C-N-P ＝ 3.8Hz， C ＝ O 酯 )， 162.75(C6)， 161.87(C2)， 154.58， 154.54(C4)， 147.98， 2 147.95(2x d，JC-O-P ＝ 6.3Hz， ipso Naph)， 139.42， 139.12(CH8)， 137.68(ipso Ph)， 136.29， 136.25(napht-C10)， 129.68， 129.57， 129.55， 129.08， 128.88， 128.86， (Naph， 3 3 Ph)， 127.89(d， JC-C-O-P ＝ 3.8Hz， naph-C9)， 127.79(d， JC-C-O-P ＝ 3.8Hz， naph-C9)， 127.55，127.53， 127.25， 126.53， 126.00， 122.86， 122.83(Naph， Ph)， 116.27， 116.25(C2-Naph)， 3 3 115.67， 115.62(C5)， 93.37， 93.17(C1’ )， 82.36(d，JC-C-O-P ＝ 7.5Hz， C4’ )， 82.15(d， JC-C-O-P ＝ 8.8Hz， C4’ )， 80.00， 79.94(C2’ )， 75.03， 74.96(C3’ )， 74.92， 74.70(CH 酯 )， 68.26， 2 67.66(2x d， JC-O-P ＝ 6.25Hz， C5’ )， 55.20， 55.12(C Met)， 55.02， 54.32(6OCH3)， 34.34， 3 34.17(2x d， JC-C-N-P ＝ 7.5Hz， C Met)， 30.65， 30.61(CH2S Met)， 22.47， 22.41(CH3 酯 )20.40， 20.38(2’ CCH3)， 15.13， 15.11(CH3Met). 31

    [1927] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.53， 4.44

    [1928] 实施例 60

    [1929] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2S)- 新 戊 基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4-( 甲硫基 ) 丁酸酯 ：

    [1930] 步骤 1 ： (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4-( 甲硫基 ) 丁酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)- 新戊基 2- 氨基 -4-( 甲 硫基 ) 丁酸酯 (2.00g， 5.11mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (1.30g， 5.11mmol) 和三乙胺 (1.42mL， 10.22mmol) 的 30mL 干二氯甲烷， 合并得到 0.92g(2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4-( 甲硫基 ) 丁酸酯， 呈澄清、 黄色厚油状， 收率 41％。

    [1934] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1935] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.15-8.11(m， 1H， H8-napht)， 7.87(d， J ＝ 8.20Hz， 1H， H5-napht)， 7.73(d， J ＝ 8.85， 1H， H4-napht)， 7.67-7.52(m， 3H， H7， H6， H2-napht)， 7.43(t， J ＝ 8.00Hz， 1H， H3-napht)， 4.97(bs， 1H， NH)， 4.48-4.41(m， 1H， CHa)， 3.93， 3.90， 3.89， 3.86(AB， JAB ＝ 10.50Hz， 2H， CH2 酯 )2.65-2.58(m， 2H， CH2-S)， 2.25-2.07(m， 5H， CH2 和 CH3Met)， 0.99， 0.96(2x s， 9H， 3x CH3 酯 ). 31

    [1936] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.92， 8.74

    [1937] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1938] 采用 ( 方法 B) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟

    [1933] 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向 250mg(0.803mmol) 核 苷 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 1.61mL(1.61mmol) 叔 丁 基 氯 化 镁， 随后加入含有 713mg(1.61mmol)(2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4-( 甲硫基 ) 丁酸酯 的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 214mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固 体， 收率 37％。

    [1939] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1940] H NMR(500MHz ， CD 3OD) δ 8.23-8.16(m ， 1H ， H 8-napht) ， 7.99 ， 7.97(2x s ， 1H ， H8)7.88-7.8.(m， 1H， H5-napht)， 7.69， 7.66(2x d， J ＝ 8.6Hz， 1H， H4-napht)， 7.55-7.45(m， 3H， H7， H6， H2-napht)， 7.41， 7.37(2x t， J ＝ 8.0Hz， 1H， H3-napht)， 6.01， 6.00(2x s， 1H， H1’ )， 4.72-4.59(m， 2H， H5’)， 4.35-4.23(m， 2H， H3’andH4’)， 4.18-4.13(m， 1H， Ha)， 4.05， 4.04(2x s， 3H， 6O-CH3)， 3.75， 3.71， 3.66， 3.62(2x AB， JAB ＝ 10.0Hz， 2H， CH2 酯 )， 2.47-2.38， 2.32-2.29(2x m， 1H， CH2-S)， 2.02-1.81(m， 5H， S-CH3 和 CH2Met)， 0.98， 0.97(2x s， 3H， 2’ -CH3)， 0.88， 0.85(2x s， 9H， 3x CH3). 13 3

    [1941] C NMR(126MHz ， CD 3OD) δ 174.52(d ， J C-C-N-P ＝ 3.8 ， C ＝ O 酯 )， 174.2(d ， 3 JC-C-N-P ＝ 3.8， C ＝ O 酯 )， 162.7(C6)， 161.9， 161.8(C2)， 154.5， 154.5(C4)， 148.00(d， 2 2 JC-O-P ＝ 6.3， napht-C1)， 147.95(d， JC-O-P ＝ 6.3， napht-C1)， 139.4， 139.2(CH8)， 136.3， 3 136.25(napht-C10) ， 128.9 ， 128.8(napht-C5) ， 127.9(d ，J C-C-O-P ＝ 3.8 ， napht-C9) ， 3 127.8(d ，J C-C-O-P ＝ 5.0 ，napht-C9) ， 127.7(CH-napht) ， 127.6 ， 127.5(CH-napht) ， 3 126.5(CH-napht) ， 126.0(CH-napht) ， 122.8(CH-napht) ， 116.3(d ， J C-C-O-P ＝ 3.8 ， 3 napht-C2)， 116.1(d，JC-C-O-P ＝ 2.5， napht-C2)， 115.7， 115.6(C5)， 93.3， 93.2(C1’ )， 3 3 82.3(d，JC-C-O-P ＝ 7.5， C4’ )， 82.2(d，JC-C-O-P ＝ 8.8， C4’ )， 80.0， 79.9(C2’ )， 75.6(CH2 2 2 酯 )， 74.9， 74.8(C3’ )， 68.2(d， JC-O-P ＝ 5.0， C5’ )， 67.8(d， JC-O-P ＝ 3.8， C5’ )， 55.2， 6 3 3 55.1(CaMet)， 54.2， 54.0(O -CH3)， 34.5(d， JC-C-N-P ＝ 6.3， CbMet)， 34.3， (d， JC-C-N-P ＝ 7.5， CbMet)， 32.2， 32.1(C- 酯 )， 31.0， 30.9(CH2S ？ Met)， 26.9， 28.8， 28.7(3x CH3 酯 )20.4， 20.3(2’ -CH3)， 15.2， 15.1(CH3Met). 31

    [1942] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.50， 4.44

    [1943] 实施例 61

    [1944] 按照如下所述， 合成 (2S)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4- 甲基戊酸酯 ：

    [1945] 步骤 1 ： (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4- 甲基戊酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 2.33g(S)- 新戊基 2- 氨 基 -4- 甲基戊酸酯的甲苯磺酸盐、 1.63g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 1.74mL 三乙胺和 70mL 二氯 甲烷， 合并得到 2.04g(2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4- 甲基戊酸酯， 呈浅黄色厚油状， 收率 77％。

    [1949] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1950] H NMR(500MHz ， CDCl 3) δ 8.15-8.08(m ， 1H) ， 7.91-7.86(m ， 1H) ， 7.74(d ， J ＝ 7.9 ， 1H) ， 7.66-7.42(m ， 4H) ， 4.52-4.40(m ， 1H) ， 4.32-4.23(m ， 1H) ， 3.96-3.83(m ， 2H) ， 1.92-1.62(m， 3H)， 1.04-0.87(m， 15H) 31

    [1951] P NMR(202MHz， CDCl3)δ8.70， 8.48

    [1952] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1953] 采用 ( 方法 B) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向 250mg 核苷的 5mL 四氢呋喃溶液中， 加入 1.61mL 叔丁基氯化镁， 随后加入含有 1.03g(2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4- 甲基戊酸酯的 3mL 四氢呋喃溶液。Workup、 硅胶柱 层析和制备型液相色谱之后， 得到 39.4mg 纯净的蛋白肽， 收率 7 ％。HPLC tR ＝ 32.79、 33.31min( 柱 ： varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： MeOH 线性梯度 ： 45min 内 水中 MeOH 从 50％至 100％。

    [1954] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1955] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.22-8.13(m， 1H)， 7.98 和 7.96(2s， 1H)， 7.92-7.83(m， 1H) ， 7.73-7.65(m ， 1H) ， 7.58-7.34(m ， 4H) ， 5.99 和 5.98(2s ， 1H) ， 4.68-4.54(m ， 2H) ， 4.37-4.20(m ， 2H) ， 4.06 和 4.05(2s ， 3H) ， 4.00-3.90(m ， 1H) ， 3.75-3.60(m ， 2H) ， 1.70-1.60(m， 1H)， 1.53-1.41(m， 2H)， 1.01-0.70(m， 18H) 31

    [1956] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.51， 4.40

    [1957] 实施例 62

    [1958] 按照如下所述， 合成 (2S， 3R)- 新戊基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基戊酸酯 ：

    [1948] 步骤 1 ： (2S， 3R)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基戊酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 2.5g(2S， 3R)- 新戊基 2- 氨 基 -3- 甲基戊酸酯的甲苯磺酸盐、 1.75g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 1.86mL 三乙胺和 50mL 二氯 甲烷， 合并得到 1.06g(2S， 3R)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基戊酸 酯， 呈浅黄色厚油状， 收率 37％。

    [1963] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1964] H NMR(500MHz ， CDCl 3) δ 8.14-8.08(m ， 1H) ， 7.92-7.87(m ， 1H) ， 7.76(d ， J ＝ 8.3 ， 1H) ， 7.65-7.43(m ， 4H) ， 4.43-4.28(m ， 1H) ， 4.24-4.15(m ， 1H) ， 3.96-3.83(m ， 2H) ， 2.02-1.92(m， 1H)， 1.62-1.47(m， 1H)， 1.33-1.18(m， 1H)， 1.08-0.93(m， 15H) 31

    [1965] P NMR(202MHz， CDCl3)δ9.49， 9.07

    [1966] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1967] 采用 ( 方法 B) 合成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向 243mg 核苷的 5mL 四氢呋喃溶液中， 加入 1.56mL 叔丁基氯化镁， 随后加入含有 1g(2S， 3R)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-4- 甲基戊酸酯的 2.8mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱 层析之后， 得到 98mg 纯净的蛋白肽， 收率 18％。HPLC tR ＝ 24.63min( 柱 ： varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： 30min 内水中乙腈线性梯度从 10％至 100％。

    [1968] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1969] H NMR(500MHz ， CD 3OD) δ 8.21-8.13(m ， 1H) ， 7.95(s ， 1H) ， 7.90-7.83(m ， 1H) ， 7.72-7.65(m， 1H)， 7.56-7.34(m， 4H)， 5.98(s， 1H)， 4.65-4.55(m， 2H)， 4.40-4.22(m， 2H)， 4.05(s， 3H)， 3.90-3.82(m， 1H)， 3.72-3.57(m， 2H)， 1.78-1.67(m， 1H)， 1.48-1.37(m， 1H)， 1.14-1.02(m， 1H)， 1.02-0.75(m， 18H) 31

    [1970] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.97， 4.80

    [1971] 实施例 63

    [1972] 按照如下所述， 合成 (2S)- 苄基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨

    [1962] 基 )-2- 苯基乙酸酯 ：

    [1973] 步骤 1 ： (2S)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)- 苄基 2- 氨基 -2- 苯基 乙酸酯 (1.11mg， 2.69mmol) 的甲苯磺酸盐与萘 -1- 基二氯磷酸酯 (0.72mg， 2.74mmol) 溶解 在 5mL 无水二氯甲烷中。该溶液冷却至 -78℃， 0.76mL 三乙胺 (5.45mmol) 被逐滴加入。然 后， -78℃下， 混合物搅拌 1 小时， 然后室温下搅拌 30 分钟。减压下除去溶剂， 采用正己烷 / 乙酸乙酯 (1 ∶ 1) 作为洗脱液， 残留物经快速柱色谱纯化， 得到 (2S)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯， 收率 74％。

    [1977] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1978] H NMR(CDCl 3) ： 8.11-8.01ppm(m ， 1H ， H8-naphtyl) ， 7.82ppm(d ， J ＝ 8.0Hz ， H5-naphtyl)， 7.68ppm(d， J ＝ 8.0Hz， H4-naphtyl)， 7.55-7.46ppm(m， H2， H6， H7-naphtyl)， 7.40-7.08ppm(m， 12H， Phenyl， Phenylglycine & H3-naphthyl)， 5.31-4.91ppm(m， 5H， NH & CH phenylglycine & CH2 酯 ). 31

    [1979] P NMR(CDCl3) ： 7.50ppm(s)， 7.24ppm(s)

    [1980] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1981] 采用合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法 ( 方法 B)， 叔丁基氯化镁 (1.49mL， 2 当量 ) 逐滴加入到 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 (234.7mg， 0.75mmol) 的 1.5mL 无水四氢呋喃中。溶液搅拌 20 分钟， 加入 (2S)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯的 1.5mL 无水四氢 呋喃。该溶液室温下搅拌过夜， 减压下除去溶剂， 采用氯仿 / 甲醇， 残留物在硅胶上纯化， 得 到 0.16g(2S)- 苄基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯 (0.22mmol， 32％ )， 类白色固体。

    [1976] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ：155102348712 A CN 102348731

    [1983] 1说明书126/198 页H NMR(CDCl3) ： 8.02-8.00ppm(dd， J ＝ 8Hz， 1H， H8naphthyl)， 7.85ppm(td， J ＝ 9.5Hz， 2H， H5naphthyl & H8)， 7.66ppm(d， J ＝ 8.5Hz， 1H， H4naphthyl)， 7.58-7.13ppm(m， 14H ， naphthyl & phenyl) ， 5.81ppm(s ， 1H ， H 1’ )， 5.18-5.07ppm(m ， 4H ， CH 2 酯 & CH phenylglycine)， 4.53-4.49ppm(m， 1H， H5’ )， 4.36-4.34ppm(m， 1H)， 4.30-4.25ppm(m， 1H， H4’ )， 4.18-4.16(m， 1H， H3’)， 4.1ppm(s， 3H， 6OCH3)， 0.90ppm(2x s， 3H， 2’ CH3) 31

    [1984] P NMR(CDCl3) ： 3.82ppm(s)， 3.41ppm(s)

    [1985] 实施例 64

    [1986] 按照如下所述， 合成 (2S)- 甲基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-2- 苯基乙酸酯 ：

    [1987] 步骤 1 ： (2S)- 甲基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 2g(S)- 甲基 2- 氨基 -2- 苯 基乙酸酯的盐酸盐、 2.59g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 2.76mL 三乙胺和 60mL 二氯甲烷， 合并得到 (2S)- 甲基 2- 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯， 呈浅黄色厚油。粗产物化 合物在没有进一步纯化情况下使用。

    [1991] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 31

    [1992] P NMR(202MHz， CDCl3)δ7.64， 7.46

    [1993] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [1994] 采 用 ( 方 法 B) 合 成 核 苷 5’ - 磷 酰 胺 酯 的 一 般 方 法， 向 含 有 250mg(3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二 醇的 5mL 四氢呋喃中， 加入 1.61mL 叔丁基氯化镁， 随后加入含有 0.94g(2S)- 甲基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2 苯基乙酸酯的 5mL 四氢呋喃溶液。 Workup 和硅胶柱层析之 后， 得到 314mg(2S)- 甲基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙 酸酯， 收率 59％。HPLC tR ＝ 16.24、 16.50min( 柱 ： varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： 30min 内水中乙腈线性梯度从 10％至 100％ )。

    [1990] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [1996] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.00-7.88(m， 2H)， 7.87-7.81(m， 1H)， 7.79-7.62(m， 1H)， 7.53-7.18(m， 9H)， 5.99 和 5.97(2s， 1H)， 5.10 和 5.05(2d， J ＝ 9.4， 1H)， 4.67-4.48(m， 2H)， 4.31-4.19(m， 2H)， 4.06 和 4.05(2s， 3H)， 3.56 和 3.51(2s， 3H)， 0.97 和 0.95(2s， 3H) 31

    [1997] P NMR(202MHz， CD3OD)δ3.95， 3.92

    [1998] 实施例 65

    [1999] 按照如下所述， 合成 (2S)- 丙基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-2- 苯基乙酸酯 ：

    [2000] 步骤 1 ： (2S)- 丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 1g(S)- 丙基 2- 氨基 -2- 苯 基乙酸酯的盐酸盐、 1.14g 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 1.21mL 三乙胺和 30mL 二氯甲烷， 合并得到 1.51g(2S)- 丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯， 呈浅黄色厚油状， 收率 83％。

    [2004] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2005] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.13-8.00(m， 1H)， 7.95-7.86(m， 1H)， 7.73 和 7.68(2d， J ＝ 8.2， 1H)， 7.62-7.33(m， 9H)， 5.38-5.19 和 5.07-4.99(2m， 2H)， 3.80-3.77(2s， 3H 31

    [2006] P NMR(202MHz， CDCl3)δ7.62， 7.36.

    [2007] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [2008] 采 用 ( 方 法 B) 合 成 核 苷 5’ - 磷 酰 胺 酯 的 一 般 方 法， 向 含 有 250mg(3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二 醇的 5mL 四氢呋喃中， 加入 1.61mL 叔丁基氯化镁， 随后加入含有 1.01g(2S)- 丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基 氧 基 ) 磷 酰 化 氨 基 )-2- 苯 基 乙 酸 酯 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液。Workup 和 硅 胶 柱 层 析 之 后， 得 到 150mg(2S)- 丙 基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨

    [2003] 基 )-2- 苯基乙酸酯， 收率 22 ％。HPLC tR ＝ 17.53min( 柱 ： varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ：： 30min 内水中乙腈线性梯度从 10％至 100％。

    [2009] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2010] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.10-7.89(m， 2H)， 7.83-7.77(m， 1H)， 7.59-7.65(m， 1H)， 7.49-7.14(m， 9H)， 6.01 和 5.99(2s， 1H)， 5.10 和 5.05(2d， J ＝ 9.3， 1H)， 4.68-4.50(m， 2H)， 4.30-4.22(m， 2H)， 4.05 和 4.04(2s， 3H)， 3.97-3.77(m， 2H)， 1.48-1.35(m， 2H)， 0.96 和 0.95(2s， 3H)， 0.72-0.64(m， 3H) 31

    [2011] P NMR(202MHz， CD3OD)δ3.98， 3.89

    [2012] 实施例 66

    [2013] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2S)- 新 戊 基 2-(((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯 ：

    [2014] 步骤 1 ： (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)- 新戊基 2- 氨基 -2- 苯 基乙酸酯 (1.92g， 4.86mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基氧基二氯磷酸酯 (1.27g， 4.86mmol)、 三乙胺 (1.36mL， 9.77mmol) 和 50mL 二氯甲烷， 合并得到预期的二氯磷酸酯， 呈浅黄色厚油 状， 收率 74％。

    [2018] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2019] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.01-7.12(m， 24H)， 5.38-5.20(m， 1H)， 5.07(m， 1H)， 3.92(m， 2H)， 3.80(m， 2H)， 0.78(m， 9H)， 0.70(m， 9H) 31

    [2020] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ8.81， 8.50

    [2021] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [2022] 采用 ( 方法 B) 合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 含有 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲 基 )-3- 甲 基 四 氢 呋 喃 -3， 4- 二 醇 (560mg， 1.19mmol) 的 25mL 四氢呋喃的溶液， 与含有 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨

    [2017] 基 )-2 苯基乙酸酯 (1.6g， 3.6mmol) 和叔丁基氯化镁 (3.6mL， 3.6mmol) 合并。标准 Workup 之后， 使用 CH2Cl2/MeOH(95 ∶ 5)， 然后使用乙酸乙酯 / 甲醇 (97 ∶ 3)， 粗产物在硅胶上经柱 层析法提纯 2 次， 得到 498mg 蛋白肽， 呈类白色固体， 收率 38％。

    [2023] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 1

    [2024] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ7.96-7.86(m， 3H)， 7.64-7.15(m， 10H)， 5.94(d， J ＝ 2.6Hz， 1H)， 5.96(d， J ＝ 2.6Hz， 1H)， 5.05(dd， J ＝ 9.6Hz， 9.6Hz， 1H)， 4.57(m， 2H)， 4.21(m， 2H)， 4.03(s， 3H)， 3.73(m， 1H)， 0.93(d， J ＝ 3.6Hz， 3H)， 0.62(m， 9H). 31

    [2025] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ5.06

    [2026] 实施例 67

    [2027] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2S)- 环 己 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯 ：

    [2028] 步骤 1 ： (2S)- 环己基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， 1g(S)- 环己基 2- 氨基 -2- 苯 基乙酸酯的盐酸盐、 967mg 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 1.03mL 三乙胺和 30mL 二氯甲烷， 合并得到 1.32g(2S)- 环己基 -2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯， 呈浅黄色厚油 状， 收率 78％。

    [2032] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 1

    [2033] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.13-8.00(m， 1H)， 7.94-7.86(m， 1H)， 7.74 和 7.68(2d， J ＝ 8.2， 1H)， 7.62-7.30(m， 9H)， 5.34-5.13 和 5.01-4.92(2m， 2H)， 4.91-4.83(m， 1H)， 1.90-1.20(m， 10H) 31

    [2034] P NMR(202MHz， CDCl3)δ7.72， 7.47

    [2035] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [2036] 采 用 ( 方 法 B) 合 成 核 苷 类 5’ - 磷 酰 胺 酯 的 一 般 方 法， 向 含 有 250mg(3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇

    [2031] 的 5mL 四氢呋喃的溶液中， 加入 1.61mL 叔丁基氯化镁， 随后加入含有 1.10g(2S)- 环己基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅 胶柱层析之后， 得到 310mg(2S)- 环己基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-2- 苯基乙酸酯， 收率 53％。HPLC tR ＝ 21.47、 21.65min( 柱 ： varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： 30min 内水中乙腈线性梯度从 10％至 100％。

    [2037] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 1

    [2038] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.00-7.81(m， 3H)， 7.69-7.62(m， 1H)， 7.54-7.17(m， 9H)， 6.00 和 5.97(2s， 1H)， 5.04 和 5.00(2d， J ＝ 9.4， 1H)， 4.68-4.50(m， 3H)， 4.28-4.20(m， 2H)， 4.07 和 4.06(2s， 3H)， 1.69-1.09(m， 10H)， 0.96 和 0.95(2s， 3H) 31

    [2039] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.00， 3.84

    [2040] 实施例 68

    [2041] 按照如下所述， 合成 (2R)- 苄基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-2- 苯基乙酸酯 ：

    [2042] 步骤 1 ： (2R)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (R)- 苄基 2- 氨基 -2- 苯基 乙酸酯 (1.50g， 3.63mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (0.95g， 3.63mmol)、 含有 三乙胺 (1.01mL， 7.26mmol) 的 20mL 干燥的二氯甲烷， 合并得到 1.21g(2R)- 苄基 -2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯， 呈澄清、 黄色、 厚油状， 收率 72％。

    [2046] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 1

    [2047] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.11-8.01(m， 1H， H8-napht)， 7.87， 7.81(2x d， J ＝ 8.50Hz， 1H， H5-napht)， 7.72， 7.67(2x d， J ＝ 8.0Hz， 1H， H4-napht)， 7.58-7.48(m， 3H， H7， H6， H2， )， 7.40-7.19(m， 11H， Ph， PhG 和 H3-napht)， 5.42-5.09(m， 2H， NH 和 CH PhG). 31

    [2048] P NMR(202MHz， CDCl3)δ7.60， 7.42

    [2049] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [2045] 采用 ( 方法 B) 合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向含有 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲 基 )-3- 甲 基 四 氢 呋 喃 -3， 4- 二 醇 (250mg， 0.803mmol) 的 5mL 四氢呋喃的溶液中， 加入叔丁基氯化镁 (1.61mL， 1.61mmol)， 随后加入含 有 (2R)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2 苯基乙酸酯 (932mg， 1.60mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 286mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固体， 收率 48％。

    [2051] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 1

    [2052] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.02， 7.99(2x d， J ＝ 7.50Hz， 1H， H8-napht)， 7.95， 7.94(2x s， 1H， H8)7.83， 7.81(2x d， J ＝ 8.50Hz， 1H， H5-napht)， 7.65， 7.62(2x d， J ＝ 8.00Hz， 1H， H4-napht)， 7.49-7.06(m， 14H， H7， H6， H 2， H3-napht， Ph， )， 5.99， 5.98(2x s， 1H， H1’ )， 5.15-5.04(m， 2H， CH2 酯 )， 5.00， 4.97(2x d， J ＝ 5.00Hz， 1H， H， PhG)， 4.65-4.51(m， 2H， H5’)， 4.35-4.21(m， 2H， H3’和 H4’)， 4.05(s， 3H， 6O-CH3)， 0.97， 0.95(2x s， 3H， 2’ -CH3) 13 3

    [2053] C NMR(126MHz， CD3OD)δ172.81(d， JC-C-N-P ＝ 6.3Hz， C ＝ O 酯 )， 172.55(d， 3 JC-C-N-P ＝ 6.3Hz， C ＝ O 酯 )， 162.75， 162.71(C6)， 161.81(C2)， 154.59， 154.49(C4)， 147.87 ， 147.82(ipso Naph) ， 139.44 ， 139.98(CH8) ， 138.90(ipso Ph) ， 136.82 ， 136.76(napht-C10)， 136.18(ipso-Ph)， 129.85， 129.69， 129.47， 129.41， 129.30， 129.16， 129.14， 128.98， 128.89， 128.83， 128.75， 128.26， 127.84， 127.78， 127.71， 127.52， 127.43， 3 126.45， 126.40， 126.00， 125.96， 122.85， 122.76(Naph， 2x Ph)， 116.37(d，JC-C-O-P ＝ 3.8Hz， 3 C2-Naph)， 116.03(d， JC-C-O-P ＝ 2.5Hz， C2-Naph)， 115.72， 115.65(C5)， 93.38， 93.06(C1’ )， 3 3 82.32(d， JC-C-O-P ＝ 7.50Hz， C4’ )， 81.98(d， JC-C-O-P ＝ 7.50Hz， C4’ )， 80.02(C2’ )， 75.00， 2 2 74.56(C3’ )， 68.24(d， JC-O-P ＝ 5.00Hz， C5’ )， 68.15(d， JC-O-P ＝ 6.25Hz， C5’ )， 67.24(CH2 酯 )， 60.00， 59.79(C.PhG)， 54.38(6OCH3)， 20.48(2’ CCH3) 31

    [2054] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.37， 3.65

    [2055] 实施例 69

    [2056] 按照如下所述， 合成 (2R)- 丙基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 )-2- 苯基乙酸酯 ：

    [2057] 步骤 1 ： (2R)- 丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (R)- 丙基 2- 氨基 -2- 苯 基乙酸酯 (2.00g， 8.71mmol) 的盐酸盐、 萘 -1- 基二氯磷酸酯 (2.27， 8.71mmol)、 三乙胺 (2.42mL， 17.41mmol) 合并在 20mL 干燥的二氯甲烷， 得到 2.15g(2R)- 丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯， 呈澄清、 黄色、 厚油状， 收率 59％。

    [2061] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 1

    [2062] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.06-8.04(m， 1H， H8-napht)， 7.87， 7.81(2x d， J ＝ 6.00Hz， 1H， H5-napht)， 7.81， 7.67(2x d， J ＝ 8.0Hz， 1H， H4-napht)， 7.57-7.44(m， 4H， H7， H 6， H 2， H3-napht)， 7.40-7.37(m， 5H， PhG)， 5.37-5.24(m， 1H， NH)， 5.18-4.991(m， 1H， CH)， 4.15(q， J ＝ 7.00Hz， 2H， O-CH2 酯 )， 1.65-1.59(m， 2H， O-CH2-CH2 酯 )， 0.84(t， J ＝ 7.00Hz， 3H， CH3 酯 ). 31

    [2063] P NMR(202MHz， CDCl3)δ7.72， 7.52

    [2064] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [2065] 采用 ( 方法 B) 合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向含有 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲 基 )-3- 甲 基 四 氢 呋 喃 -3， 4- 二 醇 (250mg， 0.803mmol) 的 5mL 四氢呋喃的溶液中， 加入叔丁基氯化镁 (1.61mL， 1.61mmol)， 随后加入含 有 (2R)- 丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2 苯基乙酸酯 (670mg， 1.60mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 395mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固体， 收率 71％。

    [2066] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 1

    [2067] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.00-7.96(m， 2H， H8-naph 和 H8)， 7.84， 7.81(2x d， J＝ 8.00Hz， 1H， H5-napht)， 7.65， 7.62(2x d， J ＝ 8.50Hz， 1H， H4-napht)， 7.50-7.37(m， 3H， H2， H 7， H6-napht)， 7.31-7.30(m， 1H， H3-napht)， 7.28-7.18(m， 5H， PhG)， 6.01， 5.99(2x s， 1H， H1’)， 5.05， 5.01(2xd， J ＝ 9.00Hz， 1H， CH PhG)， 4.66-4.53(m， 2H， H5’)， 4.36， 4.29(2x d， J ＝ 9.00Hz， 1H， H3’)， 4.27-4.20(m， 1H， H4’)， 4.06(s， 3H， 6OCH3)， 3.98-3.88(m， 2H， OCH2 酯 )， 1.49-1.39(m， 2H， OCH2CH2 酯 )， 0.98， 0.97(2x s， 3H， 2’ CCH3)， 0.71， 0.69(2x t， J ＝ 7.50Hz， 3H， CH3 酯 ) 13 3

    [2068] C NMR(126MHz， CD3OD)δ173.05， 172.75(2x d， JC-C-N-P ＝ 5.0Hz， C ＝ O 酯 )， 162.77 ， 162.70(C6) ， 161.91 ， 161.85(C2) ， 154.65 ， 154.50(C4) ， 147.89 ， 147.84(ipso 3 3 Naph)， 139.45， 139.09(CH8)， 139.29(d， JC-C-N-P ＝ 6.30Hz， ipso Ph， PhG)， 139.20(d， JC-C-N-P ＝ 5.0Hz， ipso Ph， PhG)， 136.23， 136.20(C10-Naph)， 129.61， 129.19， 128.72， 128.69， 3 128.16， 128.14， (CH-napht 和 Ph)， 127.86， 127.76(2x d，JC-C-O-P ＝ 6.3Hz， C9-Naph)， 127.67， 127.43， 127.37， 126.40， 126.34， 125.93， 125.89， 122.82， 122.76(CH-Naph 和 Ph)， 3 116.25， 115.95(2x d， JC-C-O-P ＝ 2.5Hz， C2-Naph)， 115.64， 115.56(C5)， 93.40， 93.08(C1’ )， 3 3 82.32(d， JC-C-O-P ＝ 7.55Hz， C4’ )， 82.00(d， JC-C-O-P ＝ 8.8Hz， C4’ )， 79.97， 79.93(C2’ )，

    [2060] 2 2 74.96， 74.60(C3’ )， 68.24(d， JC-O-P ＝ 2.5Hz， C5’ )， 68.15(d， JC-O-P ＝ 5.0Hz， C5’ )， 67.29， 2 67.25(OCH2 酯 )， 59.93， 59.73(d， JC-N-P ＝ 5.0Hz， C5’ ， C PhG)， 54.27， 54.22(6OCH3)， 22.80， 22.77(O-CH2-CH2 酯 )， 20.33， 20.28(2’ CCH3)， 10.43， 10.41(CH3 酯 ) 31

    [2069] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.38， 3.68

    [2070] 实施例 70

    [2071] Th 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2R)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯 ：

    [2072] 步骤 1 ： (2R)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (R)- 新戊基 2- 氨基 -2- 苯基 乙酸酯 (0.81g， 2.08mmol) 的甲苯磺酸盐、 萘 -1- 基氧基二氯磷酸酯 (0.54g， 2.08mmol)、 三 乙胺 (0.58mL， 4.16mmol) 和 10mL 二氯甲烷， 合并得到预期的 (2R)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯， 呈浅黄色厚油状， 收率 58％。

    [2076] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 1

    [2077] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.1-7.25(m， 12H)， 5.3(m， 1H)， 5.2(m， 1H)， 3.8(m， 2H)， 0.79(s， 9H) 31

    [2078] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ8.36， 8.52

    [2079] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [2080] 采 用 合 成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲 基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 5’ - 磷酰胺酯的一般方法 ( 方法 B)， 含有核苷 (361mg， 1.16mmol) 的 10mL 无 水 四 氢 呋 喃， 与 (2R)- 新 戊 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基 氧 基 ) 磷 酰 化 氨 基 )-2- 苯基乙酸酯 (0.51g， 1.16mmol)、 和叔丁基氯化镁 (1.61mL， 1.61mmol) 合并， 搅拌 12 小时。标准 Workup 之后， 采用比例为 96 ∶ 4 的 CH2Cl2/MeOH， 经柱层析法在硅胶上提纯粗 31 产物， 得到 153mg 蛋白肽， 类白色固体， 收率 19％。 P NMR 数据显示在氨基酸位异构化， 材 料为～ 10％ L- 苯基甘氨酸衍生物。

    [2075] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 1

    [2082] H NMR(200MHz， CDCl3) ： 7.9(m， 1H)， 7.8(m， 1H)， 7.6(m， 1H)， 7.5-7.15(m， 10H)， 5.97(s， 1H)， 5.92(s， 1H)， 5.1(m， 1H)， 4.6(m， 2H)， 4.2(m， 2H)， 4.02(s， 3H)， 3.9-3.6(m， 2H)， 3.44-3.6(m， 1H)， 0.9(m， 3H)， 0.78(s， 3H)， 0.65(m， 6H) 31

    [2083] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ5.608.5.065， 4.80

    [2084] 实施例 71

    [2085] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2R)- 环 己 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯 ：

    [2086] 步骤 1 ： (2R)- 环己基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (R)- 环己基 2- 氨基 -2- 苯 基乙酸酯 (2.00g， 7.41mmol) 的盐酸盐、 萘 -1- 基氧基二氯磷酸酯 (1.94g， 7.41mmol 和三乙 胺 (2.06mL， 14.83mmol) 合并在 15mL 干燥的二氯甲烷中， 得到 2.75g(2R)- 环己基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2- 苯基乙酸酯， 呈澄清、 黄色、 厚油状， 收率 60％。

    [2090] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 1

    [2091] H NMR(500MHz， CDCl3)δ8.05， 7.88(2x d， J ＝ 8.00Hz， 1H， H8-napht)， 7.87(d， J ＝ 8.50Hz， 1H， H5-napht)， 7.72， 7.66(2x d， J ＝ 8.0Hz， 1H， H4-napht)， 7.58-7.45(m， 4H， H7， H 6， H 2， H3-napht)， 7.40-7.37(m， 5H， PhG)， 5.38-5.31(m， 1H， NH)， 5.25-5.17(m， 1H， CH PhG)， 4.89-4.85(m， 1H， CH 酯 )， 1.88-1.67(m， 2H， CH2cyclohexyl)， 1.56-1.48(m， 2H， CH2cyclohexyl)， 1.46-1.33(m， 6H， 3x CH2 cyclohexyl). 31

    [2092] P NMR(202MHz， CDCl3)δ7.82， 7.64

    [2093] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [2094] 采用 ( 方法 B) 合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法， 向含有 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲 基 )-3- 甲 基 四 氢 呋 喃 -3， 4- 二 醇 (250mg， 0.803mmol) 的 5mL 四氢呋喃的溶液中， 加入叔丁基氯化镁 (1.61mL， 1.61mmol)， 随后加入含

    [2089] 有 (2R)- 环己基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-2 苯基乙酸酯 (735mg， 1.60mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 360mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固体， 收率 61％。

    [2095] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2096] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.00-7.95(m， 2H， H8-naph 和 H8)， 7.83， 7.80(2x d， J ＝ 8.00Hz 1H， H5-napht)， 7.64， 7.62(2x d， J ＝ 8.00Hz， 1H， H4-napht)， 7.50-7.38(m， 3H， H2， H7， H6-napht)， 7.33-7.18(m， 6H， H3-napht 和 5H PhG)， 6.02， 5.99(2x s， 1H， H1’)， 5.03， 4.99(2x d， J ＝ 9.00Hz， 1H， CH PhG)， 4.67-4.55(m， 3H， CH 酯 和 H5’)， 4.36-4.27(m， 2H， H3’ ， H4’)， 4.06(s， 3H， 6OCH3)， 1.68-1.49(m， 4H， 2x CH2 酯 )， 1.40-1.28(m， 4H， 2x CH2 酯 )， 1.18-1.13(m， 2H， CH2 酯 )， 0.97， 0.97(2x s， 3H， 2’ CCH3). 13 3

    [2097] C NMR(126MHz， CD3OD)δ172.40， 172.09(2x d， JC-C-N-P ＝ 5.0Hz， C ＝ O 酯 )， 162.70 ， 162.70(C6) ， 161.91 ， 161.84(C2) ， 154.65 ， 154.51(C4) ， 147.90 ， 147.86(ipso Naph)， 139.44， 139.03(CH8)， 139.33， 139.29(ipso PhPhG)， 136.24， 136.21(C10-Naph)， 129.79 ， 129.60 ， 129.15 ， 128.74 ， 128.70 ， 128.16 ， 128.14(CH-Naph 和 Ph) ， 127.86 ， 3 127.77(2x d，JC-C-O-P ＝ 6.30Hz， C9-Naph)， 127.67， 127.44， 127.37， 126.42， 126.35， 3 JC-C-O-P ＝ 3.80Hz， 125.93， 125.89， 122.84， 122.77(CH-Naph 和 Ph)， 116.24， 115.94(2x d， 3 C2-Naph)， 115.65， 115.57(C5)， 93.39， 93.05(C1’ )， 82.32， 81.98(2x d， JC-C-O-P ＝ 8.80Hz， C4’ )， 79.98， 79.96(C2’ )， 75.26， 75.20(CH 酯 )， 74.97， 74.78(C3’ )， 68.16， 67.25(2x d， 2 2 JC-O-P ＝ 5.0Hz， C5’ )， 60.02， 59.83(d， JC-N-P ＝ 3.50Hz， C5’ ， CPhG)， 54.30， 54.24(6OCH3)， 32.37， 32.23， 32.19， 32.00(2x CH2-2 和 6 酯 )， 26.37， 26.29(2x CH2-3 和 4 酯 )， 24.29， 24.21(CH2-5 酯 )， 20.36， 20.30(2’ CCH3) 31

    [2098] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.41， 3.70

    [2099] 实施例 72

    [2100] 按 照 如 下 所 述，合 成 核 苷 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6- 乙 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇

    [2101] 室温下， 向含有 2- 氨基 -6- 氯 -9-(2-C- 甲基 -2， 3， 5- 三 -O- 苄氧基 --D- 呋喃核 糖基 ) 嘌呤 (2.0g， 3.19mmol) 的 24mL 无水乙醇悬浮液中加入含有乙醇钠 (4.9mL 中具有 1.95g， 9 当量 ) 的乙醇溶液。混合物于 50℃下搅拌 5 小时， 冷却至室温， 用棉花过滤， 加入 + 离子交换树脂 (H ) 终止反应。然后， 混合物被过滤掉， 减压下除去乙醇。残留物经硅胶层 析 (CHCl3/MeOH ＝ 85 ∶ 15) 提纯， 得到 0.87g 纯净化合物， 呈白色固体， 收率 87％。HPLC ： tR ＝ 10.55min( 柱 ： varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： H2O/ 乙腈线性梯度 ：

    [2102] 30min 内乙腈从 0％至 100％。

    [2103] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2104] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.25(s， 1H)， 5.99(s， 1H)， 4.56(q， J ＝ 7.1)， 4.23(d， J ＝ 9.1， 1H)， 4.06-4.02(m， 2H)， 3.87(dd， J ＝ 3.0， 12.4， 1H)， 1.46(t， J ＝ 7.1， 3H)， 0.96(s， 3H).

    [2105] 实施例 73

    [2106] 按照如下所述， 合成 (2S)- 苄基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯 ：

    [2107] 采用合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法 ( 方法 A)， 向含有 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6- 乙 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲 基 )-3- 甲 基 四 氢 呋 喃 -3， 4- 二 醇 (250mg， 0.768mmol) 和 NMI(0.31mL， 3.54mmol) 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 (2S)- 苄 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯， 和 (931mg， 2.31mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液。 Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 68.7mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固体， 收率 13 ％。Ms(ES+)m/e ： + 693.25(MH ， 100％ ) ； 精确质量 ： C33H38N6O9P1 calculated 693.2438， found 693.2452

    [2109] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2110] H NMR(500MHz ， CD 3OD) δ 8.17-8.15(m ， 1H ， H 8-napht) ， 7.96 ， 7.92(2x s ， 1H ， H 8) ， 7.85， 7.84(2x d， 1H， J ＝ 8.00Hz， H5-napht)， 7.67， 7.66(2x d， J ＝ 8.00Hz， 1H， H4-napht)， 7.51-7.43(m， 3H， H2， H7， H6-napht)， 7.36， 7.35(2x t， J ＝ 8.00Hz， 1H， H3-napht)， 7.27-7.22(m， 5H， phe)， 6.00， 5.99(2x s， 1H， H1’)， 5.05-4.95(m， 2H， CH2 酯 )， 4.61-4.57(m， 2H， H5’)， 4.51， 4.50(2xq， J ＝ 7.00Hz， 2H， 6OCH2CH3)4.34， 4.27(2x d， J ＝ 9.00Hz， 1H， H3’)， 4.25-4.22(m， 1H， H4’)， 4.12-4.05(m， 1H， CH.， 1.42， 1.41(2x t， J ＝ 7.0Hz， 3H， 6OCH2CH3)， 1.30(d， J ＝ 7.50Hz， CH3Ala)， 0.98， 0.95(2x s， 3H， 2’ CCH3). 13 3

    [2111] C NMR(126MHz， CD3OD)δ174.80， 174.61(d， JC-C-N-P ＝ 5.0Hz， C ＝ O 酯 )， 162.39， 162.38(C6)， 161.85(C2)， 154.58， 154.52(C4)， 147.98(ipso Naph)， 139.26， 138.98(CH8)， 137.13(ipso Ph)， 136.26， 136.24(napht-C10)， 129.51， 129.22， 129.15， 129.11， 128.93， 3 128.79(Naph， Ph)， 127.91， 127.88(2x d， JC-C-O-P ＝ 6.3Hz， napht-C9)， 127.74， 127.72， 127.48， 126.51， 126.48， 125.95， 122.83， 122.75(Naph， Ph)， 116.25， 116.23(C2-Naph)， 3 115.64， 115.62(C5)， 93.32， 93.14(C1’ )， 82.29， 82.11(2x d， JC-C-O-P ＝ 8.8Hz， C4’ )， 79.96， 2 79.92(C2’ )， 74.94， 74.62(C3’ )， 68.02， 67.91(2x d，JC-O-P ＝ 3.7Hz， C5’ )， 67.49， 67.45(CH2 酯 )， 63.58， 63.56(6OCH2CH3)， 51.81， 51.72(C Ala)， 20.59， 20.54， 20.39(CH3Ala)， 20.36，

    [2108] 20.34(2’ CCH3)， 14.89， 14.88(6OCH2CH3) 31

    [2112] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.31， 4.26

    [2113] 实施例 74

    [2114] 按 照 如 下 所 述， 合 成 蛋 白 肽 (2S)-2， 4- 二 氟 苄 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 ：

    [2115] 采用合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法 ( 方法 A)， 向含有 330mg 核苷 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二 醇的 3.8mL 四氢呋喃溶液中， 加入 404μL NMI， 随后加入 1.34g(2S)-2， 4- 二氟苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 3.8mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之 后， 得到 122mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固体， 收率 17％。HPLC ： tR ＝ 21.65、 21.95min( 柱 ： varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： H2O/ 乙腈线性梯度 ： 30min 内乙腈从 0％ 至 100％。

    [2117] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2118] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.18-8.12(m， 1H)， 7.93 和 7.91(2s， 1H)， 7.90-7.84(m， 1H)， 7.72 和 7.66(m， 1H)， 7.56-7.29(m， 5H)， 6.93-6.81(m， 2H)， 5.98 和 5.97(2s， 1H)， 5.11-4.97(m， 2H)， 4.62-4.49(m， 4H)， 4.40-4.20(m， 2H)， 4.12-4.03(m， 1H)， 1.46-1.41(2t， J ＝ 7.1， 3H)， 1.32 和 1.31(2d， J ＝ 7.2， 3H)， 0.99 和 0.96(2s， 3H) 31

    [2119] P NMR(202MHz， CD3OD-d4)δ4.22 和 4.19.

    [2120] 实施例 75

    [2121] 蛋白肽 (2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯按照如下步骤合成 ：

    [2116] 采用合成 5’ - 磷酰胺酯的一般方法 ( 方法 A)， 向含有 250mg(0.768mmol)(3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二 醇和 (0.31mL， 3.54mmol)NMI 的 5mL 四氢呋喃溶液中， 加入 (2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 (963mg， 2.31mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 120mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固体， 收率 22％。

    [2124] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2125] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.19-8.16(m， 1H， H8-napht)， 8.05， 8.01(2x s， 1H， H8)， 7.84-7.78(m， 1H， H5-napht)， 7.65， 7.63(2x d， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 7.55-7.45(m， 3H， H2 ， H 7， H6-napht)， 7.38-7.32(m， 1H， H3-napht)， 7.27-7.19(m， 5H， Phe)， 6.02， 6.01(2x s， 1H)， 5.73， 5.69(2x q， J ＝ 6.50Hz， 1H， CH 酯 )， 4.67-4.56(m， 1H， H5’)， 4.49(q， J ＝ 7.00Hz， 2H， 6OCH2CH3)， 4.32-4.22(m， 2H， H3’ 和 H4’ )， 4.10-4.03(m， 1H， CH)， 1.41-1.37(6OCH2CH3 和 CH3 酯 )， 1.25(d， J ＝ 8.00Hz， 3H， CH3Ala)， 0.98， 0.96(2x s， 3H， 2’ CCH3). 13 3

    [2126] C NMR(126MHz， CD3OD)δ174.26， 174.00(d， JC-C-N-P ＝ 5.0Hz， C ＝ O 酯 )， 162.24， 162.21(C6) ， 161.82 ， 161.75(C2) ， 154.25(C4) ， 147.99 ， 147.97 ， 147.92(ipso Naph) ， 3 142.84， 142.80(ipso Ph)， 139.19， 138.88(CH8)， 136.23， 136.21(2x d， JC-C-O-P ＝ 3.7Hz， napht-C10)， 129.74， 129.55， 129.51， 128.97， 128.88， 128.84， 128.63(Naph， Ph)， 127.87， 3 127.81(2x d，JC-C-O-P ＝ 6.3Hz， napht-C9)， 127.76， 127.50， 127.31， 127.15， 127.02， 126.98， 126.79， 126.72， 126.55， 126.52， 126.38， 126.01， 125.99， 124.22， 123.49， 122.81， 3 122.75(Naph， Ph)， 116.30， 116.24(2x d，JC-C-O-P ＝ 3.7Hz， C2-Naph)， 115.06， 114.94(C5)， 3 93.38， 93.22(C1’ )， 82.39， 82.24(2x d， JC-C-O-P ＝ 8.8Hz， C4’ )， 80.00， 79.94(C2’ )， 74.91， 2 74.86， 74.77， 74.64， 74.50(C3’ 和 CH 酯 )， 68.01， 67.53(2x d， JC-O-P ＝ 5.0Hz， C5’ )， 63.86， 63.81(6OCH2CH3)， 51.91， 51.82(C Ala)， 22.66， 22.60(CH3 酯 )， 20.60， 20.55(CH3Ala)， 20.41， 20.35(2’ CCH3)， 14.92(6OCH2CH3) 31

    [2127] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.32， 4.29

    [2128] 实施例 76

    [2129] 蛋白肽 2， 2- 二甲丙基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨 基 ) 丙酸酯按照如下步骤合成 ：

    [2123] 采 用 合 成 核 苷 5’ - 磷 酰 胺 酯 的 一 般 方 法 ( 方 法 A)， 向 含 有 500mg(3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇的 6mL 四氢呋喃溶液中， 加入 614μL NMI， 随即加入含有 1.77g(2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基 氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 6mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 285mg 纯净的蛋白肽， 呈浅白色固体， 收率 28％。 HPLC tR ＝ 22.92、 23.16min( 柱 ： varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： H2O/ 乙腈线性梯度 ： 30min 内乙腈从 0％至 100％。

    [2132] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2133] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.20-8.14(m， 1H)， 7.96 和 7.94(2s， 1H)， 7.90-7.84(m， 1H)， 7.71 和 7.78(2d， J ＝ 8.2， 1H)， 7.56-7.36(m， 4H)， 5.99 和 5.98(2s， 1H)， 4.65-4.56(m， 2H)， 4.56-4.51(AB system， J ＝ 7.1 和 14.2， 2H)， 4.36-4.21(m， 2H)， 4.06-4.02(m， 1H， 3.78-3.57(4d， J ＝ 10.5， 2H)， 1.44(2t， J ＝ 7.1， 3H)， 1.33(2d， J ＝ 7.1， 3H)， 0.98 和 0.96(2s， 3H)， 0.88 和 0.86(2s， 9H) 31

    [2134] P NMR(202MHz， CD3OD-d4)δ4.28 和 4.21.

    [2135] 实施例 77

    [2136] 按照如下所述， 合成蛋白肽 (2S)- 异丙基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 乙氧 基 -9H 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷 酰化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [2131] 采 用 合 成 核 苷 5’ - 磷 酰 胺 酯 的 一 般 方 法 ( 方 法 A)， 向 含 有 250mg(3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇 的 3.3mL 四氢呋喃溶液中， 加入 306μL NMI， 随即加入含有 819.6mg(2S)- 异丙基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯的 3.3mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之 后， 得到 277mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固体， 收率 56％。HPLC tR ＝ 20.39、 20.65min( 柱 ： varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： H2O/ 乙腈线性梯度 ： 30min 内乙腈从 0％

    [2138] 至 100％。

    [2139] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2140] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.21-8.14(m， 1H)， 8.04 和 8.02(2s， 1H)， 7.91-7.83(m， 1H)， 7.71 和 7.68(2d， J ＝ 8.3， 1H)， 7.56-7.36(m， 4H)， 5.99 和 5.98(2s， 1H)， 4.85(m， 1H)， 4.66-4.57(m， 2H)， 4.54(AB system， J ＝ 7.1 和 14.2， 2H)， 4.38-4.21(m， 2H)， 4.02-3.91(m， 1H， 1.47-1.42(2t， J ＝ 7.1， 3H)， 1.29(d， J ＝ 7.1， 3H)， 1.17-1.11(m， 6H)， 0.99 和 0.97(2s， 3H) 31

    [2141] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.39 和 4.29.

    [2142] 实施例 78

    [2143] 按 照 如 下 所 述，合 成 蛋 白 肽 (2S)- 四 氢 -2H- 吡 喃 -4- 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲 氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [2144] 采用合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法 ( 方法 A)， 向含有 250mg(0.77mmol)(3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二 醇的 3mL 四氢呋喃溶液中， 加入 (0.30mL， 3.6mmol)N- 甲基咪唑， 随即加入含有 (2S)- 四 氢 -2H- 吡喃 -4- 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 (825mg， 2.1mmoL) 的 3mL 四氢呋喃溶液。 标准 Workup 和提纯后， 得到 72mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固体， 收率 14％。 HPLCtR ＝ 17.85、 18.24min( 柱 ： varian Pursuit XRs 5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： H2O/ 乙 腈线性梯度 ： 30min 内乙腈从 0％至 100％。

    [2146] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2147] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.20-8.15(m， 1H)， 8.00， 7.98(2x s， 1H)， 7.89-7.81(m， 1H) ， 7.71-7.67(m ， 1H) ， 7.58-7.45(m ， 3H) ， 7.43-7.37(m ， 1H) ， 6.00 ， 5.99(2x s ， 1H) ， 4.81-4.73(m， 1H)， 4.65-4.55(m， 2H)， 4.55， 4.52(2x d， J ＝ 6.70， 2H)， 4.35-4.22(m， 2H)， 4.08-3.99(m， 1H)， 3.80-3.75(m， 2H)， 3.48-3.37(m， 2H)， 1.80-1.69(m， 2H)， 1.54-1.49(m， 2H)， 1.44(t， J ＝ 7.20Hz， 3H)， 1.32， 1.30(2x d， J ＝ 6.35Hz， 3H)， 0.98， 0.97(2x s). 31

    [2148] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.26， 4.12.

    [2149] 实施例 79

    [2150] 按照如下所述， 合成蛋白肽 (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 乙氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [2145] 采 用 合 成 核 苷 5’ - 磷 酰 胺 酯 的 一 般 方 法 ( 方 法 A)， 向 含 有 300mg(3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 乙氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇 的 4mL 四氢呋喃溶液中， 加入 368μL N- 甲基咪唑， 随即加入含有 1.14g(2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )-3- 甲基丁酸酯的 4mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层 析之后， 得到 77.3mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固体， 收率 13％。HPLC tR ＝ 27.96min( 柱 ： varian Pursuit XRs5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： H2O/ 乙腈线性梯度 ： 30min 内乙腈从 0％ 至 100％。

    [2153] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2154] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.20-8.13(m， 1H)， 7.96 和 7.95(2s， 1H)， 7.90-7.83(m， 1H)， 7.70 和 7.66(2d， J ＝ 8.1， 1H)， 7.59-7.34(m， 4H)， 5.98 和 5.97(2s， 1H)， 4.65-4.58(m， 2H)， 4.57-4.51(2x AB system， J ＝ 7.0 和 14.2， 2H)， 4.40-4.21(m， 2H)， 3.82-3.74(m， 1H， 3.72-3.59(4d， J ＝ 10.5， 2H)， 2.09-1.93(m， 1H)， 1.47-1.42(2t， J ＝ 7.1， 3H)， 0.99 和 0.95(2s， 3H)， 0.90-0.82(m， 15H) 31

    [2155] P NMR(202MHz， CD3OD)δ5.11 和 4.90.

    [2156] 实施例 80

    [2157] 按 照 如 下 所 述，合 成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6-( 甲 氨 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ：

    [2152] 向含有 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 氯 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 苯甲酰基 )-3- 甲 基四氢呋喃 -3， 4- 二基二苯甲酸酯 (150mg， 0.239mmol) 的乙醇溶液中加入甲胺 (1mL， 1.2mmol) 和三乙胺 (0.17mL， 1.2mmol)， 在封闭试管内加热至 85 ℃， 过夜。冷却和蒸发之 后， 采用比例为 93 ∶ 7 的二氯甲烷 / 甲醇， 经柱层析法提纯粗产物， 得到 68mg(3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6-( 甲氨基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二 醇， 类白色固体， 收率 92％。

    [2160] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ：

    [2159] 171102348712 A CN 102348731

    [2161] 1说明书142/198 页H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.06(s， 1H)， 5.9(s， 1H)， 4.25(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 4.0(m， 2H)， 3.859dd， J ＝ 3.2Hz， J ＝ 3.2Hz， 1H)， 3.6(s， 1H)， 3.04(s， 3H)， 0.92(s， 3H).

    [2162] 实施例 81

    [2163] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6-( 甲 氨 基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [2164] 采用合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的通用方法 ( 方法 B)， 含有 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6-( 甲氨基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇 (150mg， 0.48mmol) 的 25mL 四氢呋喃， 与 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸 酯 (463mg， 1.21mmol)， 和叔丁基氯化镁 (1.645mL， 1.645mmol) 合并。标准 Workup 之后， 采 用比例为 96 ∶ 4 的二氯甲烷 / 甲醇， 经柱层析法在硅胶提纯粗产物， 得到 51mg 蛋白肽， 收 率 17％， 呈亮黄色固体。

    [2166] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2167] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.15(m， 1H)， 7.85(m， 2H)， 7.65(m， 1H)， 7.3-7.54(m， 4H)， 5.93(d， J ＝ 4.0Hz， 1H)， 4.52(m， 2H)， 4.22(s， 2H)， 4.0(dd， J ＝ 7.4Hz， J ＝ 6.8Hz， 1H)， 3.6(m， 2H)， 3.0(s， 3H)， 1.3(d， J ＝ 7.0Hz， 3H)， 0.95(d， J ＝ 2.6Hz， 3H)， 0.84(d， J ＝ 3.2Hz， 9H). 31

    [2168] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ5.4.

    [2169] 实施例 82

    [2170] 按照如下步骤合成 (2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6-( 甲 氨基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [2165] 步骤 1 ： (2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯采用合成萘基 ( 氨基酸酯 ) 氯化磷酸酯的一般方法， (S)-((S)-1- 苯乙基 )2- 氨基 丙酸酯 (1.05g， 2.85mmol)、 2.85mmol 萘 -1- 基二氯磷酸酯、 三乙胺 (0.76mL， 5.56mmol) 和 20mL 二氯甲烷合并得到 610g 预期的 (2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰 化氨基 ) 丙酸酯， 收率 26％， 呈浅黄色油状。

    [2175] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2176] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.07(m， 1H)， 7.86(m， 1H)， 7.71(d， J ＝ 8.4Hz， 1H)， 7.30-7.61(m， 9H)， 5.94(m， 1H)， 4.33(m， 2H)， 1.60-1.46(m， 6H) 31

    [2177] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ9.07， 9.34

    [2178] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [2179] 采 用 合 成 核 苷 5’ - 磷 酰 胺 酯 的 通 用 方 法 ( 方 法 B)， 向 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6-( 甲氨基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇 (190mg， 0.613mmol) 的 25mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰 化氨基 ) 丙酸酯 (610mg， 1.41mmol) 和叔丁基氯化镁 (1.41mL， 1.41mmol) 合并。 标准 Workup 之后， 采用比例为 95 ∶ 5 的二氯甲烷 / 甲醇， 然后使用比例为 97 ∶ 3 的乙酸乙酯 / 甲醇， 经柱层析法在硅胶上提纯粗产物两次， 得到 210mg 蛋白肽， 收率 50％， 呈类白色固体。

    [2180] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果。 1

    [2181] H NMR(200MHz ， CD 3OD) ： δ 8.2(m ， 1H) ， 7.85(m ， 1H) ， 7.5(m ， 5H) ， 7.2(m ， 5H) ， 5.92(d， J ＝ 4.0Hz， 1H)， 5.66(m， 1H)， 4.54(m， 1H)， 4.2(d， J ＝ 2Hz， 1H)， 4.02(m， 1H)， 3.01(s， 3H)， 2.01(s， 1H)， 1.35(m， 3H)， 1.21(m， 3H)， 0.94(s， 3H) 31

    [2182] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ5.36， 5.35.

    [2183] 实施例 83

    [2184] 按照如下所述， 合成 (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6-( 甲氨 基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧 基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [2174] 采用合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的通用方法 ( 方法 B)， (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6-( 甲 氨基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇 (200mg， 0.645mmol) 的 25mL 无水四氢呋喃， 与 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 )- 丙酸酯 (650mg， 1.801mmol) 和叔丁基氯化镁 (1.8mL， 1.8mmol) 合并。标准 Workup 之后， 采用比例 为 96 ∶ 4 的二氯甲烷 / 甲醇， 然后使用比例为 9 ∶ 1 的乙酸乙酯 / 甲醇， 经柱层析法在硅 胶上提纯粗产物两次， 得到 110mg 蛋白肽， 收率 26％， 呈类白色固体。

    [2187] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2188] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8， 77(ddd， J ＝ 1.8Hz， J ＝ 2.0Hz， J ＝ 1.6Hz， 1H)， 8.2(t， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 8.0(d， J ＝ 9.2Hz， 1H)， 7.63-7.8(m， 3H)， 7.45(m， 1H)， 5.92(s， 1H)， 4.6(m， 2H)， 4.23(m， 2H)， 4.05(m， 1H)， 3.55-3.8(m， 2H)， 3.0(d， J ＝ 2.4Hz， 3H)， 1.35(m， 3H)， 0.85-0.95(m， 12H). 31

    [2189] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ5.16， 5.06.

    [2190] 实施例 84

    [2191] 按 照 如 下 所 述，合 成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6-( 苄 氨 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ：

    [2192] 步骤 1 合成 (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6-( 苄氨基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 苯 甲酰氧基甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二基二苯甲酸酯

    [2194] 室温下， 向含有 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 氯 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 苯甲酰氧 基甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二基二苯甲酸酯 (1.0g， 1.60mmol) 的 100mL 无水乙醇悬 浮液中加入苄胺 (1.75mL， 10 当量 )。混合物回流下搅拌过夜， 冷却至室温， 减压下除去甲 醇。 然后， 残留物从 CHCl3/MeOH 中沉淀出来， 得到纯净的 (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6-( 苄 氨基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 苯甲酰氧基甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二基二苯甲酸酯 (1.12g， 100％ )， 呈白色固体。

    [2195] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2196] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.15(d， J ＝ 7.20Hz， 2H， CH Ph)， 8.05(d， J ＝ 7.20Hz， 2H， CH Ph)， 7.96(d， J ＝ 7.30Hz， 2H， CH Ph)， 7.93(s， 1H， H8)， 7.65(t， J ＝ 7.20Hz， 1H， CH

    [2193] Ph)， 7.58(d， J ＝ 7.20Hz， 2H， CH Ph)， 7.52(t， J ＝ 7.80Hz， 2H， CH Ph)， 7.46-7.39(m， 4H， CH Ph)， 7.35(dd， J ＝ 7.80Hz， 19.1， 4H， CH Ph)， 7.26(s， 1H， CH Ph)， 6.68(s， 1H， H1’)， 6.30(d， J ＝ 5.60Hz， 1H， H3’)， 5.03(dd， J ＝ 5.00Hz， 11.7， 1H， H5’)， 4.84(m， 3H， CH2benzyl 和 H5’)， 4.75(dd， J ＝ 5.50Hz， 10.8， 1H， H4’)， 1.65(s， 3H， 2’ -CH3).

    [2197] 步 骤 2.(3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6-( 苄 氨 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲 基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇

    [2198] 室 温 下， 向受保护的核苷 ： (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6-( 苄 氨 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 苯 甲 酰 氧 基 甲 基 )-3- 甲 基 四 氢 呋 喃 -3， 4- 二 基 二 苯 甲 酸 酯 (1.12g， 1.29mmol) 的 18mL 无水甲醇溶液中加入甲醇钠 (0.29g， 3.2 当量 )。搅拌 2 小时之后， 减压 下除去溶剂， 采用比例为 92 ∶ 8 的三氯甲烷 / 甲醇洗提液， 硅胶上提纯粗产物， 得到纯净的 去保护核苷 (0.574g， 89％ )， 呈白色固体。 HRMS(ESI) ： calculated C18H22N6O4+Na+409.1600， found 409.1593

    [2199] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2200] H NMR(500MHz， DMSO)δ8.03(s， 1H， H8)， 7.36(d， J ＝ 7.3， 2H， phe)， 7.30(t， J＝ 7.5， 2H， phe)， 7.21(t， J ＝ 7.1， 1H， phe)， 5.86(s， 2H， NH2)， 5.80(s， 1H， H1’)， 5.16(m， 2H， OH3’ )， 5.01(s， 1H， OH2’)， 4.64(bs， 2H， CH2Bn)， 4.02(d， J ＝ 8.1， 1H， H3’)， 3.86(m， 2H， H4’和 和 OH5’ H5’)， 3.75-3.58(m， 1H， H5’)， 0.81(s， 3H， CH3)

    [2201] 实施例 85

    [2202] 2， 2- 二 甲 基 丙 基 2(S)-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨 基 -6- 苄 氨 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯按照如下步骤合成 ：

    [2203] 采用合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法 ( 方法 A)， 向含有 150mg(0.388mmol)(3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6-( 苄氨基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇和 (0.15mL， 1.94mmol)NMI 的 5mL 四氢呋喃溶液中， 加入萘 -1- 基 (2， 2- 二甲基丙氧 基 ) 氯化磷酸酯 (477mg， 1.16mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 32.3mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固体， 收率 11％。

    [2205] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2206] H NMR(500MHz ，CD 3 OD) δ 8.19-8.17(m ， 1H) ， 7.87(s ， 1H) ， 7.86-7.81(m ， 1H)7.70-7.65(m ， 1H) ， 7.54-7.50(m ， 3H) ， 7.46-7.36(m ， 3H) ， 7.32-7.29(m ， 2H) ， 7.25-7.22(m ， 1H) ， 5.98 ， 5.97(2x s ， 1H) ， 4.75-4.72(m ， 2H) ， 4.68-4.57(m ， 2H) ， 4.30-4.23(m， 2H)， 4.10-4.03(m， 1H)， 3.76， 3.71， 3.63， 3.59(2x AB， JAB ＝ 10.45Hz， 2H)， 1.32(d， J ＝ 7.40Hz， 1H)， 0.99， 0.98(2x s， 3H)， 0.85， 0.84(2x s， 9H)

    [2204] 175102348712 A CN 102348731

    [2207] 13说明书146/198 页3 C NMR(126MHz， CD3OD)δ175.06(d， JC-C-N-P ＝ 4.70Hz， C ＝ O 酯 )， 174.82(d， 3 2 JC-C-N-P ＝ 5.80Hz， C ＝ O 酯 )， 162.15(C6)， 156.46(C4)， 148.02(d， JC-O-P ＝ 2.00Hz， 2 napht-C1)， 147.96(d， JC-O-P ＝ 2.00Hz， napht-C1)， 140.61(C1phe)， 137.17， 136.87(CH8)， 136.30(napht-C10) ， 129.53(CH-phe) ， 129.52(CH-phe) ， 128.86 ， 128.80(CH-phe) ， 3 128.65(CH-phe) ， 128.64(CH-phe) ， 128.15(CH-napht) ， 127.91(d ，J C-C-O-P ＝ 2.50Hz ， 3 napht-C9) ， 127.86(d ，J C-C-O-P ＝ 2.50Hz ，napht-C9) ， 127.77 ， 127.75(CH-napht) ， 127.50 ， 127.49(CH-napht) ， 126.53 ， 126.47(CH-napht) ， 125.97(CH-napht) ， 122.81 ， 3 3 122.74(CH-napht)， 116.20(d， JC-C-O-P ＝ 3.3， napht-C2)， 116.17(d，JC-C-O-P ＝ 4.50Hz， 3 napht-C2)， 114.78， 114.75(C5)， 92.98， 92.79(C1’ )， 82.13(d， JC-C-O-P ＝ 8.10Hz， C4’ )， 3 81.98(d，JC-C-O-P ＝ 8.50Hz， C4’ )， 79.98， 79.90(C2’ )， 75.37， 75.35(CH2 酯 )， 74.82， 2 2 74.51(C3’ )， 67.87(d，JC-O-P ＝ 5.2， C5’ )， 67.29(d，JC-O-P ＝ 5.00Hz， C5’ )， 51.78(C 3 Ala)， 44.91(CH2-NH)， 32.24， 32.21(Ct-Bu)， 26.70， 26.69(3xCH3t-Bu)， 20.84(d，JC-C-N-P ＝ 3 6.20Hz， CH3Ala)， 20.62(d， JC-C-N-P ＝ 7.10Hz， CH3Ala)， 20.38， 20.35(2’ -CH3) 31

    [2208] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.43， 4.23

    [2209] 实施例 86

    [2210] 按 照 如 下 所 述，合 成 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6-( 苯 乙 胺 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇

    [2211] 步骤 1(2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6-( 苯乙胺基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 苯甲酰 氧基甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二基二苯甲酸酯

    [2213] 室温下， 含有 (2R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 氯 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 苯甲酰氧基 甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二基二苯甲酸酯 (1.0g， 1.60mmol) 的 100mL 无水乙醇悬浮 液中加入苯乙胺 (2.02mL， 10 当量 )。回流情况下， 混合物搅拌过夜， 冷却至室温， 减压下除 去乙醇。然后， 从 CHCl3/MeOH 中沉淀出残留物， 得到纯净化合物 (0.63g， 55％ )， 呈白色固 体。

    [2212] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2215] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.12(d， J ＝ 7.20Hz， 2H， CH Ph)， 8.03(d， J ＝ 7.20Hz， 2H， CH Ph)， 7.96(d， J ＝ 7.30Hz， 2H， CH Ph)， 7.90(s， 1H， H8)， 7.65(t， J ＝ 7.50Hz， 1H， CH Ph)， 7.58-7.52(m， 2H， CH Ph)， 7.53(t， J ＝ 7.80Hz， 2H， CH Ph)， 7.43(t， J ＝ 7.80Hz， 2H， CH Ph)， 7.39(t， J ＝ 7.80Hz， 2H， CHPh)， 7.35-7.26(m， 5H， CH Ph)， 6.65(s， 1H， H1’)， 6.28(d， J ＝ 6.00Hz， 1H， H3’)， 5.03(dd， J ＝ 4.90Hz， 12.00Hz， 1H， H5’)， 4.84-4.67(m， 3H， H5’ ， H4’)， 3.95-3.89(m， 2H， NH-CH2-CH2-Bn)， 3.01(t， J ＝ 7.00Hz， 2H， NH-CH2-CH2-Bn)1.65(s， 3H， 2’ -CH3).

    [2216] 步骤 2 ： 合成蛋白肽

    [2217] 室温下， 含有 (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6-( 苯乙胺基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 苯 甲酰氧基甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二基二苯甲酸酯 (0.63g， 0.88mmol) 的 15mL 无 水甲醇溶液中加入甲醇钠 (0.15g， 3.2 当量 )。搅拌 2 小时之后， 减压下除去乙醇， 采用 比例为 92 ∶ 8 的三氯甲烷 / 甲醇洗提液， 硅胶提纯残留物， 得到去保护核苷、 (2R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6-( 苯乙胺基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二 + 醇 (0.33g， 94％ )， 呈白色固体。 HRMS(ESI) ： calculated for C19H24N6O4+Na 423.1757， found C： 49.24， H： 6.74， N： 18.13 ； 423.1763。 元 素 分 析 ： calculated for C19H24N6O4+3.5H2O ： found ： C： 49.13， H： 5.83， N： 18.05。

    [2218] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2219] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.20(s， 1H， H8)， 7.32-7.19(m， 5H， Ph)， 5.96(s， 1H， H1’)， 4.29(d， J ＝ 8.00Hz， 1H， H3’ )， 4.13-4.05(m， 3H， H4’ )， 3.95-3.85(m， 2H， NH-CH2-CH2-Bn)， 和 H5’ 3.04(t， J ＝ 7.00Hz， 2H， NH-CH2-CH2-Bn)0.97(s， 3H， 2’ CH3).

    [2220] 实施例 87

    [2221] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6-( 苯 乙 胺 基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [2222] 采用合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法 ( 方法 B)， 向含有 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6-( 苯乙胺基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇 (200mg， 0.50mmol) 的 5mL 四氢呋喃的溶液中， 加入叔丁基氯化镁 (1.00mL， 1.00mmol)， 随后加入含 有萘 -1- 基 (2， 2- 二甲基丙氧基 ) 氯化磷酸酯 (383mg， 1.00mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液。 Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 246.5mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固体， 收率 24％。

    [2224] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ：

    [2223] 177102348712 A CN 102348731

    [2225] 1说明书148/198 页H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.19(d， J ＝ 8.50Hz， 1H， H8-naph)， 7.87-7.81(m， 2H， H8 和 H5-naph)， 7.69， 7.67(2x d， J ＝ 8.50Hz， 1H， H4-naph)， 7.54-7.47(m， 3H， H7， H6， H2-naph)， 7.42-7.37(m， 1H， H3-naph)， 7.27-7.16(m， 5H， Ph)， 5.98， 5.97(2x s， 1H， H1’ )， 4.69-4.58(m， 2H， H5’)， 4.27-4.22(m， 2H， H3’ 和 H4’)， 4.11-4.03(m， 1H， H， Ala)， 3.78-3.58(m， 4H， CH2 酯 和 CH2-CH2-Bn)， 2.94(t， J ＝ 7.70Hz， 2H， CH2-CH2-Bn)， 1.33， 1.32(2x d， J ＝ 7.00Hz， 3H， CH3Ala)， 0.98， 0.96(2x s， 3H， 2’ CH3)， 0.86， 0.84(2x s， 9H， 3x CH3 酯 ) 13 3 3

    [2226] C NMR(126MHz， CD3OD)δ175.06(d， JC-C-N-P ＝ 4.7， C ＝ O 酯 )， 174.83(d， JC-C-N-P ＝ 5.8， C ＝ O 酯 )， 162.12(C6)， 156.51(C4)， 148.01(ipsoNaph)， 140.69(ipso Ph)， 137.04， 136.76(CH8)， 136.30， 136.28(napht-C10)， 129.91， 129.50， 128.87， 128.82(CH-napht 和 Ph)， 127.93， 127.76(C9-naph)， 127.52， 127.50， 127.31， 126.53， 126.49， 125.98， 122.82， 122.75(CH-napht 和 Ph)， 116.22， 116.20(C2-naph)， 114.81(C5)， 92.95， 92.77(C1’ )， 3 3 82.11(d，JC-C-O-P ＝ 7.70Hz， C4’ )， 81.97(d，JC-C-O-P ＝ 8.5， C4’ )， 79.98， 79.91(C2’ )， 2 75.38， 75.36(CH2 酯 )， 74.80， 74.49(C3’ )， 67.83， 67.27(d， JC-O-P ＝ 5.00Hz， C5’ )， 51.79， 51.73(C Ala)， 44.52(CH2-NH)， 36.82(C 酯 )， 32.26， 32.23(CH2-Bn)， 26.72， 26.71(3x CH3 3 3 酯 )， 20.87(d，JC-C-N-P ＝ 6.20Hz， CH3Ala)， 20.64(d，JC-C-N-P ＝ 7.70Hz， CH3Ala)， 20.39， 20.37(2’ CCH3) 31

    [2227] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.25

    [2228] 实施例 88

    [2229] 按 照 如 下 所 述，合 成 (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6-( 甲 硫 基 )-9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ：

    [2230] 向 含 有 (3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨 基 -6- 氯 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 苯 甲 酰 氧 基 甲 基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二基二苯甲酸酯 (100mg， 0.16mmol) 的 10mL 乙醇悬浮液中， 加入甲硫醇钠 (56mg， 0.8mmol)， 室温下， 搅拌过夜。用酸性树脂中和混合物， 蒸发溶剂至干 燥状态。采用比例为 92 ∶ 8 的二氯甲烷 / 甲醇， 柱层析提纯残留物， 得到 45mg(2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6-( 甲硫基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二 醇， 呈类白色固体， 收率 87％。

    [2232] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2233] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.31(s， 1H)， 5.98(s， 1H)， 4.2(d， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 4.08-3.96(m， 2H)， 3.9-3.8(dd， J ＝ 3.2Hz， J ＝ 3.4Hz， 1H)， 3.6(s， 1H)， 2.6(s， 3H)， 0.93(s， 3H).

    [2234] 实施例 89

    [2235] 按照如下步骤合成 (2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨基 -6-( 甲 硫基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧

    [2231] 基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [2236] 采 用 合 成 核 苷 5’ - 磷 酰 胺 酯 的 一 般 方 法 ( 方 法 B)， 向 含 有 (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6-( 甲硫基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇 (200mg， 0.611mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液中， 加入叔丁基氯化镁 (1.55mL， 2.3 当量 )， 随后 加入 (2S)-((S)-1- 苯乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 (610mg， 1.4mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 160mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固 体， 收率 37％。

    [2238] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2239] H NMR(200MHz ， CD 3OD) ： δ 8.2(m ， 2H) ， 8.0(d ， J ＝ 6.6Hz ， 1H) ， 7.8(m ， 1H) ， 7.7-7.25(m， 8H)， 5.97(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 5.65(m， 1H)， 4.55(m， 2H)， 4.35-3.95(m， 3H)， 2.59(s， 3H)， 1.4-1.1(m， 9H)， 0.95(d， J ＝ 5.0Hz， 3H). 31

    [2240] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ5.35

    [2241] 实施例 90

    [2242] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R)-5-(2- 氨 基 -6-( 甲 硫 基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [2237] 采 用 合 成 核 苷 5’ - 磷 酰 胺 酯 的 一 般 方 法 ( 方 法 B)， 向 含 有 (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6-( 甲硫基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二 醇 (150mg， 0.459mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液中， 加入叔丁基氯化镁 (1.14mL， 2.5 当量 )， 随 后加入 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 (440mg， 1.146mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 58mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固体， 收 率 19％。

    [2245] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ：

    [2244] 179102348712 A CN 102348731

    [2246] 1说明书150/198 页H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.15(m， 1H)， 8.0(d， J ＝ 5.0Hz， 1H)， 7.85(m， 1H)， 7.65(m， 1H)， 7.52-7.3(m， 4H)， 5.96(d， J ＝ 2.2Hz， 1H)， 4.6(m， 2H)， 4.27(m， 2H)， 4.0(m， 1H)， 3.78-3.52(m， 2H)， 2.59(s， 3H)， 1.3(d， J ＝ 7.0Hz， 3H)， 0.95(d， J ＝ 4.0Hz， 3H)， 0.83(d， J ＝ 3.6Hz， 9H). 31

    [2247] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ5.36， 5.31.

    [2248] 实施例 91

    [2249] 按照如下所述， 合成 (2S)- 新戊基 2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2- 氨基 -6-( 甲硫 基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-3， 4- 二羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 喹啉 -6- 基氧 基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [2250] 采 用 合 成 核 苷 5’ - 磷 酰 胺 酯 的 一 般 方 法 ( 方 法 B)， 向 含 有 (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6-( 甲硫基 )-9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二 醇 (120mg， 0.367mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液中， 加入叔丁基氯化镁 (1.03mL， 2.5 当量 )， 随 后加入 (2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 喹啉 -6- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 (395mg， 1.027mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 101mg 纯净的蛋白肽， 呈类白色固 体， 收率 41％。

    [2252] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2253] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.8(ddd， J ＝ 2.0Hz， J ＝ 2.0Hz， J ＝ 1.2Hz， 1H)， 8.2(bt， J ＝ 8.8Hz， 1H)， 8.09m， 2H)， 7.77(m， 1H)， 7.65(dd， J ＝ 1.8Hz， J ＝ 2.6Hz， 1H)， 7.48(dddd， J ＝ 4.4Hz， J ＝ 1.4Hz， J ＝ 1.8Hz， J ＝ 4.4Hz， 1H)， 5.95(s， 1H)， 4.56(m， 2H)， 4.38-4.2(m， 2H)， 4.05(m， 1H)， 3.8-3.55(m， 3H)， 2.59(d， J ＝ 1.8Hz， 3H)， 1.35(m， 3H)， 1.0-0.8(m， 12H). 31

    [2254] P NMR(80MHz， CD3OD) ： δ5.17， 5.09.

    [2255] 实施例 92

    [2256] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2-(4- 氟 苄 氨 基 )-6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ：

    [2251] 前 躯 体 核 苷 进 行 还 原 性 氨 化 反 应 得 到 标 题 化 合 物。1.5g 核 苷 (2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基 - 四氢呋喃 -3， 4- 二 醇溶解在 50mL 甲醇中， 加入 0.48mL 对氟苯甲醛， 随即加入催化剂量的癸硼烷 (0.17g)。室 温下， 溶液搅拌 12 小时。 蒸发易挥发物， 提纯得到 73％ (1.48g) 的标题化合物， 呈白色粉末 状。

    [2259] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2260] H NMR(200MHz， CD3OD) ： δ8.25(s， 1H)， 7.4(m， 2H)， 7.03(m， 2H)， 6.01(s， 1H)， 4.55(s， 2H)， 4.02(s， 3H)， 4.2-3.8(m， 4H)， 0.9(s， 3H)

    [2261] 实施例 93

    [2262] 按 照 如 下 所 述， 合 成 (2S)- 新 戊 基 2-((((2R， 3R， 4R， 5R)-5-(2-(4- 氟 苄 氨 4- 二 羟 基 -4- 甲 基 四 氢 呋 喃 -2- 基 ) 甲 氧 基 ) 基 )-6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-3， ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [2258] 采 用 合 成 核 苷 5’ - 磷 酰 胺 酯 的 一 般 方 法 ( 方 法 B)， 100mg(2R， 3R， 4R， 5R)-2-(2-(4- 氟苯氨基 )-6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基 - 四氢呋 喃 -3， 4- 二醇溶解在四氢呋喃中， 冷却至 0 ℃。向该溶液加入 183mg(2S)- 新戊基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯， 随即逐滴加入 0.47mL 叔丁基氯化镁， 室温下， 搅拌 18 个小时。Workup 之后， 柱层析提纯残留物， 得到产率 53％ (96mg) 的蛋白肽， 呈类白色固 体。

    [2265] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2266] H NMR(200MHz， CDCl3) ： δ8.0-8.2(m， 1H)， 7.9-7.95(d， 1H)， 7.8-7.9(m， 1H)， 7.6-7.7(m ， 1H) ， 7.2-7.5(m ， 6H) ， 6.85-7.02(m ， 2H) ， 5.95(d ， 1H) ， 4.45-4.6(m ， 2H) ， 4.1-4.3(m， 2H)， 3.99(s， 3H)， 3.4-3.7(m， 3H)， 1.28(d， 3H)， 0.9(d， 3H)， 0.81(d， 9H). 31

    [2267] P NMR(80MHz， CDCl3) ： δ5.25， 5.14

    [2268] 实施例 94

    [2269] 按照如下所述， 合成核苷 (3R， 5S)-2-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲基 )-3- 甲基 - 四氢呋喃 -3- 醇

    [2264] 步骤 1 ： 制备 (3R， 4R， 5R)-5-(( 叔丁基二苯基硅氧基 ) 甲基 )-3， 4- 二羟基 -3- 甲 基 - 二氢呋喃 -2(3H)- 酮

    [2271] 圆底烧瓶中装入 2- 甲基 -D- 核糖内酯 (22g， 0.136mol) 和 200mL 无水嘧啶。混合 物冷却至 0℃， 缓慢加入 TBDPSCl(34.97mL， 0.136mol)， 随后加入 DMAP(5mol％ )。反应混合 物温热至室温， 搅拌 12 小时。TLC 监测反应进程。全部转化之后， 真空下除去嘧啶。剩余 并用 1N HCl 洗涤， 随即用饱和 NaHCO3 和盐水洗涤。合并有机层用无 残留物用 CH2Cl2 稀释， 水硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。采用正己烷 / 乙酸乙酯作为梯度混合物， 经柱层析提纯， 得到 48g 较厚粘稠的标题化合物， 收率 88％。

    [2274] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2275] H NMR(200MHz， CDCl3)δ7.63-7.71(m， 4H)， 7.36-7.5(m， 6H)， 4.3(td， J ＝ 3.2Hz， 6.4Hz， 1H)， 4.1-4.2(dd， J ＝ 8.0Hz， 1H)， 3.85-4.04(dq， J ＝ 3.2Hz， 11.8Hz， 2H)， 3.4(bs， 13 1H， -OH)， 2.9(bs， 1H， -OH)， 1.5(s， 3H)， 1.05(s， 9H) ； C(50MHz， CDCl3)δ176.1， 135.9， 135.8， 133.0， 132.7， 130.2， 128.1， 83.9， 72.9， 72.5， 62.0， 27.0， 22.0， 19.5.

    [2276] 步骤 2 ： 制 备 (2R， 3R， 4R)-2-(( 叔 丁 基 二 苯 基 硅 氧 基 ) 甲 基 )-4- 羟 基 -4- 甲 基 -5- 氧代 - 四氢呋喃 -3- 基 -4- 甲基苯磺酸盐

    [2273] 向搅拌的 (3R， 4R， 5R)-5-(( 叔丁基二苯基硅氧基 ) 甲基 )-3， 4- 二羟基 -3- 甲 基 - 二氢呋喃 -2(3H)- 酮 ( 来自步骤 1)(48g， 0.12mol) 的 250mL 无水嘧啶溶液中， 30 分钟 内加入小部分的对甲苯磺酰氯 (45.825g， 0.24mol)， 随后加入 DMAP( 催化剂量 5mol％ )。 然 后， 反应混合物缓慢温热至室温， 搅拌 48 小时。全部转化后， 真空下除去吡啶， 剩余残留物 用 1N HCl 洗涤， 随即用饱和 NaHCO3 和盐水洗涤， 采用 CH2Cl2 萃取。有机层用无水硫酸钠干 燥， 过滤并浓缩。采用正己烷 / 乙酸乙酯作为梯度混合物， 经柱层析提纯， 得到 58.1g 标题 化合物， 收率 87％。

    [2279] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2280] H NMR(200MHz， CDCl3)δ7.8(d， J ＝ 8.2Hz， 2H)， 7.59-7.7(m， 4H)， 7.32-7.5(m， 6H)， 7.2-7.28(d， J ＝ 8.4Hz， 2H)， 5.1(d， J ＝ 6.6Hz， 1H)， 4.5(td， J ＝ 2.4Hz， 6.4Hz， 1H)，

    [2278] 3.9(dd， J ＝ 2.2Hz， 12.2Hz， 1H)， 3.8(s， 1H)， 3.7(dd， J ＝ 2.4Hz， 12.2Hz， 1H)， 2.38(s， 3H)， 13 1.39(s， 3H)， 1.05(s， 9H) ；C(50MHz， CDCl3)δ174.1， 146.2， 135.9， 135.8， 133.0， 132.7， 132.4， 130.4， 130.3， 128.8， 128.4， 128.2， 80.4， 77.9， 72.7， 60.9， 27.0， 22.2， 22.0， 19.5.

    [2281] 步骤 3 ： 制备 (2R， 3R， 4R)-2-(( 叔丁基二苯基硅氧基 ) 甲基 )-4， 5- 二羟基 -4- 甲 基 - 四氢呋喃 -3- 基 -4- 甲基苯磺酸盐

    [2282] 含有红铝 (70.08mL， 0.2298mol) 的 350mL 无水甲苯溶液冷却至 0℃， 加入 13.31mL 无水乙醇， 搅拌 15 分钟。-5℃下， 通过插管将原液缓慢加入到含有 (2R， 3R， 4R)-2-(( 叔丁 基二苯基硅氧基 ) 甲基 )-4- 羟基 -4- 甲基 -5- 氧代 - 四氢呋喃 -3- 基 -4- 甲基 - 苯磺酸 盐 ( 来自步骤 2)(58.1g， 0.105mol) 的 700mL 无水甲苯的溶液中。TLC 监测反应进程。全部 转化之后， 加入 18mL 丙酮， 随即加入 200mL 水和 200mL 1N HCl， 停止反应混合物。 混合物缓 慢温热至室温。有机层用 1N HCl(200mL) 和盐水 (100mL) 洗涤， 用无水硫酸钠干燥， 过滤并 浓缩干燥。采用正己烷 / 乙酸乙酯作为梯度混合物， 经柱层析提纯， 得到 58g 标题化合物， 收率 99％。

    [2284] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2285] H NMR(200MHz， CDCl3)δ7.26-7.82(m， 6H)， 7.3-7.5(m， 6H)， 7.2(m， 2H)， 5.0(m， 1H)， 4.8(d， J ＝ 5.5Hz， 1H)， 4.2(m， 1H)， 3.44-3.82(m， 2H)， 2.95(bs， 1H)， 2.4(s， 3H)， 1.3(s， 3H)， 1.15(s， 9H).

    [2286] 步骤 4 ： 制 备 (5R， 6R， 6aR)-5-(( 叔 丁 基 二 苯 基 硅 氧 基 ) 甲 基 )-2， 2， 6a- 三 甲 基 - 四氢呋喃 [3， 2-d][1， 3] 二氧杂环戊烯 -6- 基 -4- 甲基苯磺酸盐

    [2283] 0 ℃ 下， 向 化 合 物 (2R， 3R， 4R)-2-(( 叔 丁 基 二 苯 基 硅 氧 基 ) 甲 基 )-4， 5- 二 羟 基 -4- 甲基 - 四氢呋喃 -3- 基 -4- 甲基苯磺酸盐 ( 来自步骤 3)(58g， 0.104mol)、 2， 2- 二甲 氧基丙烷 (25.7mL， 0.209mol) 的 500mL 无水 CH2Cl2 的混合物中， 加入 PTSA 并于室温下搅 拌 2 小时。反应混合物注入到饱和 NaHCO3 溶液中， 有机层用盐水洗涤， 用无水硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。采用正己烷 / 乙酸乙酯作为梯度混合物， 经柱层析提纯， 得到 57.2g 标题化合 物， 收率 92％。

    [2289] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2290] H NMR(200MHz， CDCl3)δ7.8(d， J ＝ 8.1， 2H)， 7.62-7.72(m， 4H)， 7.32-7.52(m， 6H)， 7.2(d， J ＝ 8.1Hz， 2H)， 5.45(s， 1H)， 4.9(d， J ＝ 8.2Hz， 1H)， 4.2(td， J ＝ 2.0Hz， 8.2Hz， 1H)， 3.85(dd， J ＝ 2.0Hz， 12.3Hz， 1H)， 3.6(dd， J ＝ 2.8， 12.3Hz， 1H)， 2.4(s， 3H)， 1.52(s， 13 3H)， 1.44(s， 3H)， 1.35(s， 3H)， 1.05(s， 9H) ；C(50MHz， CDCl3)δ145.3， 136.0135.9， 133.8， 133.7， 133.3， 130.1， 130.0， 128.3， 128.0， 127.9， 114.1， 108.9， 86.4， 80.9， 80.2， 61.5，

    [2288] 29.5， 28.2， 27.0， 21.9， 21.9， 21.8， 19.6.

    [2291] 步骤 5 ： 制 备 (5R， 6R， 6aR)-5-(( 叔 丁 基 二 苯 基 硅 氧 基 ) 甲 基 )-2， 2， 6a- 三 甲 基 - 四氢呋喃并 [3， 2-d][1， 3] 二氧杂环戊烯 -6- 醇

    [2292] (5R， 6R， 6aR)-5-(( 叔丁基二苯基硅氧基 ) 甲基 )-2， 2， 6a- 三甲基 - 四氢呋喃并 [3， 2-d][1， 3] 二氧杂环戊烯 -6- 醇 ( 来自步骤 4)(56g， 0.094mol) 和 Li(Et)3BH(376.4mL， 0.376mol) 的 800mL 四氢呋喃溶液 (1M) 的混合物回流 12 小时。反应混合物冷却至室温， 用 200mL 饱和氯化铵小心停止反应。用 500mL 乙酸乙酯稀释， 用 1N HCl(500mL) 和 300mL 盐水 洗涤。 有机层用无水硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。 粗残留物溶解在乙酸乙酯中， 通过 celite 垫 除去盐。采用正己烷 / 乙酸乙酯作为梯度混合物， 经柱层析提纯， 得到 38.4g 标题化合物， 收率 93％。

    [2294] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2295] H NMR(200MHz ，CDCl 3 ) δ 7.6-7.7(m ， 4H) ， 7.26-7.4(m ， 6H) ， 5.47(s ， 1H) ， 3.74-3.95(m， 4H)， 5.47(s， 1H)， 3.74-3.95(m， 4H)， 2.3(m， 1H， -OH)， 1.46(s， 6H)， 1.4(s， 13 3H)， 1.0(s， 9H) ； C(50MHz， CDCl3)δ136.0， 135.9， 133.7， 133.5， 129.9， 128.0， 127.9， 113.2， 108.9， 87.0， 83.3， 76.1， 62.9， 29.5， 28.2， 27.0， 21.8， 19.6.

    [2296] 步骤 6 ： 制备叔丁基 (((5R， 6R， 6aS)-6- 碘代 -2， 2， 6a- 三甲基 - 四氢呋喃并 [3， 2-d][1， 3] 二氧杂环戊烯 -5- 基 ) 甲氧基 ) 二苯基硅烷

    [2293] 在 30 多分钟内， 向 (5R， 6R， 6aR)-5-(( 叔丁基二苯基硅氧基 ) 甲基 )-2， 2， 6a- 三 甲基 - 四氢呋喃并 [3， 2-d][1， 3] 二氧杂环戊烯 -6- 醇 ( 来自步骤 5)(32.4g， 0.0736mol)、 三苯基磷 (57.9g， 0.2209mol)、 咪唑 (15.03g， 0.2209mol) 的 400mL 无水甲苯的混合物中加 入部分碘 (42.96g， 0.169mol) 并回流 12 小时。该混合物用 300mL 甲苯稀释， 用饱和 NaHCO3

    [2298] 溶液和饱和硫代硫酸钠洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。采用正己烷 / 乙酸 乙酯作为梯度混合物， 经柱层析提纯， 得到 32.08g 标题化合物， 收率 80％。

    [2299] 下列是分析合成化合物 6 的核磁共振结果 ： 1

    [2300] H NMR(200MHz， CDCl3)δ7.6-7.8(m， 4H)， 7.3-7.44(m， 6H)， 5.56(s， 1H)， 4.5(d， J ＝ 1.4Hz ， 1H) ， 3.6-4.0(m ， 3H) ， 1.8(s ， 3H) ， 1.48(s ， 3H) ， 1.43(s ， 3H) ， 1.06(s ， 9H) ； 13 C(50MHz， CDCl3)δ135.9， 135.8， 133.6， 133.5， 130.0， 128.0， 113.4， 108.4， 91.9， 80.3， + 69.0， 40.9， 29.3， 28.4， 27.0， 25.1， 19.5 ； FAB ： [M+H] 537.2.

    [2301] 步骤 7 ： 制备叔丁基二苯基 (((5S， 6aR)-2， 2， 6a- 三甲基 - 四氢呋喃并 [3， 2-d][1， 3] 二氧杂环戊烯 -5- 基 ) 甲氧基 ) 硅烷

    [2302] 叔丁基 (((5R， 6R， 6aS)-6- 碘代 -2， 2， 6a- 三甲基 - 四氢呋喃并 [3， 2-d][1， 3] 二 氧杂环戊烯 -5- 基 ) 甲氧基 ) 二苯基硅烷 ( 来自步骤 6)(10.3g， 0.0186mo)、 Bu3SnH(5.9mL， 0.0224mol) 和 AIBN(5mol％ ) 的 120mL 无水甲苯的溶液回流 7 小时。反应混合物冷却至室 温， 加入 100mL 的 1N NaOH， 搅拌 1 小时。然后， 混合物用盐水洗涤， 并用乙酸乙酯萃取。有 机层用无水硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。采用正己烷 / 乙酸乙酯作为梯度混合物， 经柱层析提 纯， 得到 6.8g 标题化合物， 收率 86％。

    [2304] 下列是分析合成化合物 7 的核磁共振结果 ： 1

    [2305] H NMR(200MHz ， CDCl 3) δ 7.6-7.72(m ， 4H) ， 7.25-7.32(m ， 6H) ， 5.48(s ， 1H) ， 4.3-4.44(m， 1H)， 3.65-3.85(m， 2H)， 2.08-2.22(dd， J ＝ 5.0Hz， 13.2Hz， 1H)， 1.74-1.90(dd， 13 J ＝ 10.2Hz， 12.8Hz， 1H)， 1.5(s， 6H)， 1.42(s， 3H)， 1.0(s， 9H) ；C(50MHz， CDCl3)δ135.9， 135.8， 133.6， 129.9， 127.9， 112.1， 110.1， 90.0， 79.5， 65.2， 41.7， 29.5， 28.6， 27.0， 23.8， + 19.5 ； FAB ： [M+H] 411.32.

    [2306] 步骤 8 ： 制备 ((5S， 6aR)-2， 2， 6a- 三甲基 - 二氢 -5H- 呋喃并 [3， 2-d][1， 3] 二氧 杂环戊烯 -5- 基 ) 甲醇

    [2303] 0℃下， 向叔丁基二苯基 (((5S， 6aR)-2， 2， 6a- 三甲基 - 四氢呋喃并 [3， 2-d][1， 3] 二氧杂环戊烯 -5- 基 ) 甲氧基 ) 硅烷 ( 来自步骤 7)(7.2g， 0.0169mol) 的 50mL 无水四氢呋 喃溶液中， 加入 TBAF(20.28mL， 0.0203mol)， 室温下搅拌 3 小时。反应混合物用乙酸乙酯稀 释， 用水和盐水洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥， 过滤并浓缩干燥。采用正己烷 / 乙酸乙酯 作为梯度混合物， 经柱层析提纯， 得到 2.72g 标题化合物， 收率 82％。

    [2309] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2310] H NMR(200MHz， CDCl3)δ5.5(s， 1H)， 4.4(m， 1H)， 3.8-3.9(m， 1H)， 3.46-3.6(m， 1H)， 2.0-2.15(dd， J ＝ 5.2Hz， 13.2Hz， 1H)， 1.8(m， 2H)， 1.5(s， 6H)， 1.44(s， 3H).

    [2311] 步骤 9 ： 制备 ((5S， 6aR)-2， 2， 6a- 三甲基 - 二氢 -5H- 呋喃并 [3， 2-d][1， 3] 二氧 杂环戊烯 -5- 基 ) 甲基苯甲酸盐

    [2308] 0 ℃ 下， 苯 甲 酰 氯 (1.92mL， 0.0166mol) 加 入 到 ((5S， 6aR)-2， 2， 6a- 三 甲 基 - 二 氢 -5H- 呋喃并 [3， 2-d][1， 3] 二氧杂环戊 -5- 基 ) 甲醇的 20mL 无水吡啶的溶液中。向该 混合物中， 加入 5mol％ DMAP， 室温下搅拌 3 小时。真空下除去吡啶 ； 残留物用乙酸乙酯稀 释， 用 1N HCl、 饱和碳酸氢钠和盐水洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。采用正 己烷 / 乙酸乙酯作为梯度混合物， 化合物经柱层析提纯， 得到 4.1g 标题化合物， 收率 97％。

    [2313] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2315] H NMR(200MHz ，CDCl 3 ) δ 8.0-8.2(m ， 2H) ， 7.4-7.65(m ， 3H) ， 5.5(s ， 1H) ， 4.2-4.65(m， 3H)， 2.2-2.36(dd， J ＝ 5.0Hz， 4.8Hz， 1H)， 1.62-1.75(dd， J ＝ 10.8Hz， 13.2Hz)， 1.54(s， 6H)， 1.46(s， 3H).

    [2316] 步骤 10 ： 制备 ((2S， 4R)-4， 5- 二乙酰氧基 -4- 甲基 - 四氢呋喃 -2- 基 ) 甲基苯甲 酸盐

    [2317] 3.8g((5S， 6aR)-2， 2， 6a- 三甲基 - 二氢 -5H- 呋喃并 [3， 2-d][1， 3] 二氧杂环戊 烯 -5- 基 ) 甲基苯甲酸盐的 25mL70％乙酸的混合物在 70℃下加热 48 个小时。反应混合物 用乙酸乙酯稀释， 用水和饱和碳酸氢钠洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。采 用乙酸酐 (0.03373mol， 3.18mL) 和 20mL 具有催化剂量的 DMAP(5mol％ ) 的无水嘧啶， 制得 的粗二醇进行乙酰化反应。TLC 监测反应进程。真空下除去嘧啶， 残留物用乙酸乙酯稀释， 过滤并浓缩。经柱层析提纯， 得到 用 1N HCl、 饱和 NaHCO3 洗涤。有机层用无水硫酸钠干燥， 3.3g 标题化合物， 收率 88％， 0.55g 起始材料安奈德被回收。

    [2319] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2320] H NMR(200MHz， CDCl3)δ8.0-8.1(m， 2H)， 7.36-7.64(m， 3H)， 6.3-6.4(s， 1H)， 4.65-4.24(m， 3H)， 2.6-2.8(m， 1H)， 1.9-2.22(m， 7H)， 1.62(s， 3H).

    [2321] 步 骤 11 ：制 备 ((2S， 4R)-4- 乙 酰 氧 基 -5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-4- 甲基 - 四氢呋喃 -2- 基 ) 甲基苯甲酸盐

    [2318] 6-O- 甲基鸟嘌呤 (0.516g， 3.125mmol)、 BSA(1.99g， 9.821mmol)、 含有 0.5g 的 3A0 分子筛的 8mL 无水 CH3CN 的混合物在 60℃加热 45 分钟制备均一溶液， 然后冷却至 0℃。向 该混合物中加入 ((2S， 4R)-4， 5- 二乙酰氧基 -4- 甲基 - 四氢呋喃 -2- 基 ) 甲基苯甲酸盐 ( 来自步骤 10)(1g， 2.976mmol)， 随即加入 TMSOTf(1.077mL， 5.95mmol)， 60℃下加热 2 小时。 TLC 监测反应进程。反应混合物用 25mL 乙酸乙酯稀释， 注入到 20mL 冰冷的饱和 NaHCO3 中， 搅拌 3 小时。有机层用水、 盐水洗涤， 用无水硫酸钠干燥， 过滤并浓缩。采用正己烷 / 乙酸 乙酯作为梯度混合物， 经柱层析提纯， 得到 0.71g 标题化合物， 收率 54％。

    [2324] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2325] H NMR(200MHz， CDCl3)δ8.0-8.1(m， 2H)， 7.7(s， 1H)， 7.4-7.6(m， 3H)， 6.3(s， 1H)， 4.8-5.0(m， 3H)， 4.6-4.76(m， 2H)， 4.0(s， 3H)， 2.7-2.8(dd， J ＝ 4.8Hz， 13.6Hz， 1H)，

    [2323] 2.52-2.64(dd， J ＝ 10.4Hz， 13.6Hz， 1H)， 2.1(s， 3H)， 1.36(s， 3H) ； 13

    [2326] C(50MHz ， CDCl 3) δ 170.7 ， 166.7 ， 159.6 ， 138.4 ， 133.6 ， 129.9 ， 128.8 ， 128.6 ， 91.5， 90.3， 77.9， 65.3， 54.1， 39.2， 22.4， 18.8.

    [2327] 步 骤 12 ： 制 备 (3R， 5S)-2-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲 基 )-3- 甲基 - 四氢呋喃 -3- 醇

    [2328] 甲 醇 氨 (7N， 20mL) 加 入 到 1.53g((2S， 4R)-4- 乙 酰 氧 基 -5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-4- 甲基 - 四氢呋喃 -2- 基 ) 甲基苯甲酸盐 ( 来自步骤 11)， 室温下 于封闭试管内搅拌 24 小时。真空下蒸发易挥发物， 所得残留物直接加载到柱上， 用 CH2Cl2/ MeOH(10 ∶ 1) 作为梯度混合物洗脱残留物， 得到 0.802g 化合物 ( 收率 79 ％ )。熔点 ： 140℃ -142℃。

    [2330] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2331] H NMR(200MHz， DMSO-d6)δ8.2(s， 1H)， 6.4(bs， 2H)， 5.78(s， 1H)， 5.4(s， 1H)， 5.1(t， J ＝ 5.0Hz， 1H)， 4.26-4.4(m， 1H)， 3.9(s， 3H)， 3.72-3.84(m， 1H)， 3.52-3.66(m， 1H)， 2.04-2.22(dd， J ＝ 12.6Hz， 10.8Hz， 1H)， 1.76-1.90(dd， J ＝ 5.2Hz， 12.6Hz， 1H)， 0.8(s， 3H) 13

    [2332] C(50MHz， DMSO-d6)δ161.3， 160.5， 154.5， 138.0， 144.3， 92.4， 81.4， 81.1， 62.0， 53.8， 39.4， 22.8 ；

    [2333] FAB[M+H]+296.02.

    [2334] 实施例 95

    [2335] 按 照 如 下 所 述， 合 成 蛋 白 肽 (2S)- 苄 基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-4- 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰 化氨基 ) 丙酸酯 ：

    [2329] 采用合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法 ( 方法 A)， 向含有 (3R， 5S)-2-(2- 氨 基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基 - 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 (100mg， 0.339mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液中， 加入叔丁基氯化镁 (0.68mL， 0.68mmol)， 随后加入 (2S)- 苄基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 (273mg， 0.68mmol) 的 5mL 四氢呋 喃溶液。 Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 131mg(2S)- 苄基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-4- 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰 化氨基 ) 丙酸酯， 呈类白色固体， 收率 58％。MS(ES+)m/e ： 663.23(MH+， 100％ ) ； calculated C32H36N6O8P 为 663.2332， found 663.2341

    [2338] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2339] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.19-8.16(m， 1H， H8-naph)， 7.99， 7.96(2x s， 1H， H8)， 7.84-7.81(m， 1H， H5-naph)， 7.66， 7.64(2x d， J ＝ 8.00Hz， 1H， H4-naph)， 7.51-7.43(m， 3H， H7， H6， H2-naph)， 7.36(t， J ＝ 8.00Hz， 1H， H3-naph)， 7.25-7.22(m， 5H， Ph)， 5.95(s， 1H， H1’)， 5.06-4.98(m， 2H， CH2 酯 )， 4.67-4.59(m， 1H， H4’)， 4.51-4.41(m， 2H， H5’)， 4.14-4.07(m， 1H， H.Ala)， 4.03， 4.01(2x s， 3H， 6OCH3)， 2.30， 2.11(2x t， J ＝ 12.00Hz， 1H， H3’a)， 2.00， 1.93(dd， J ＝ 5.00Hz， J ＝ 12.00Hz， 1H， H3’b)， 1.31(d， J ＝ 7.50Hz， 3H， CH3， Ala)， 0.99， 0.93(2x s， 3H， 2’ CH3). 13 3

    [2340] C NMR(126MHz， CD3OD)δ174.85(d， JC-C-N-P ＝ 4.40Hz， C ＝ O 酯 )， 174.58(d， 3 JC-C-N-P ＝ 5.50Hz， C ＝ O 酯 )， 162.72(C6)， 161.84， 161.80(C2)， 154.64， 154.59(C4)， 148.01 ， 147.96(ipso Naph) ， 139.03 ， 138.73(CH8) ， 137.13 ， 137.11(ipso Ph) ， 136.25(C10-napht) ， 129.56 ， 129.55 ， 129.28 ， 129.27 ， 129.20 ， 129.17 ， 128.88 ， 128.85(CH-napht 和 Ph)， 127.98， 127.92(C9-naph)， 127.87， 127.79， 127.60， 127.54， 3 126.55， 126.06， 126.01， 122.84， 122.76(CH-napht 和 Ph)， 116.42， 116.32(2x d，JC-C-O-P ＝ 4.40Hz C2-naph)， 115.62， 115.55(C5)， 94.89， 94.56(C1’ )， 82.14， 82.09(C2’ )， 80.11， 3 2 2 79.97(2xd， JC-C-O-P ＝ 8.50Hz， C4’ )， 68.84(d， JC-O-P ＝ 7.50Hz， C5’ )， 68.64(d， JC-O-P ＝ 5.00Hz， C5’ )， 67.97， 67.95(CH2 酯 )， 54.33， 54.30(6OCH3)， 51.87， 51.76(C Ala)， 41.21， 3 40.63(C3’ )， 22.58(2’ CCH3)， 20.63， 20.39(2x d， JC-C-N-P ＝ 7.50Hz， CH3Ala) 31

    [2341] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.45， 4.29

    [2342] 实施例 96

    [2343] 蛋 白 肽 (2S)-((S)-1- 苯 乙 基 )2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-4- 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙 酸酯按照如下步骤合成 ：

    [2344] 采用合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法 ( 方法 A)， 向含有 (3R， 5S)-2-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲 基 )-3- 甲 基 - 四 氢 呋 喃 -3， 4- 二 醇 (93mg， 0.315mmol) 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 叔 丁 基 氯 化 镁 (0.63mL， 0.63mmol)， 随后加 入 (2S)-((S)-1- 苯 基 乙 基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基 氧 基 ) 磷 酰 化 氨 基 ) 丙 酸 酯 (282mg， 0.63mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 40mg(2S)-((S)-1- 苯

    [2345] 基乙基 )2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-4- 羟基 -4- 甲基四氢 呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯， 呈类白色固体， 收率 19％。 + MS(ES+)m/e ： 677.25(MH ， 100 ％ ) ； 精确质量： C33H38N6O8P calculated 677.2489， found 677.2511

    [2346] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2347] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.20-8.18(m， 1H， H8-naph)， 7.99， 7.97(2x s， 1H， H8)， 7.86-7.84(m， 1H， H5-naph)， 7.69， 7.67(2x d， J ＝ 8.00Hz， 1H， H4-naph)， 7.53-7.47(m， 3H， H7， H6， H2-naph)， 7.40， 7.36(2x t， J ＝ 7.50Hz， 1H， H3-naph)， 7.29-7.22(m， 5H， Ph)， 5.95(s， 1H)， 5.77， 5.72(2x q， J ＝ 7.10Hz， 1H， CH 酯 )， 4.66-4.58(m， 1H， H4’ )， 4.56-4.38(m， 2H， H5’ )， 4.09-4.06(m， 1H， H.Ala)， 4.05， 4.04(2x s， 3H， 6OCH3)， 2.32， 2.12(2x t， J ＝ 11.50Hz， 1H， H3’a)， 1.99， 1.92(dd， J ＝ 5.00Hz， J ＝ 12.00Hz， 1H， H3’b)， 1.41(d， J ＝ 7.00Hz， 3H， CH3 酯 )， 1.28(d， J ＝ 7.00Hz， 3H， CH3， Ala)， 1.01， 0.95(2x s， 3H， 2’ CH3) 13 3 3

    [2348] C NMR(126MHz， CD3OD)δ174.25(d， JC-C-N-P ＝ 4.40Hz， C ＝ O 酯 )， 173.97(d， JC-C-N-P ＝ 5.50Hz， C ＝ O 酯 )， 162.74(C6)， 161.85(C2)， 154.66， 154.63(C4)， 148.03， 147.97(ipso Naph)， 142.87， 142.84(ipso Ph)， 139.10， 138.75(CH8)， 136.28(C10-napht)， 129.57， 129.53， 128.96， 128.87， 128.84(CH-napht 和 Ph)， 127.97， 127.93(C9-naph)， 127.88， 127.77， 127.65， 127.50， 127.06， 127.02， 126.52， 126.01， 122.83， 122.76(CH-napht 和 3 J C-C-O-P ＝ 5.50Hz C2-naph) ， 115.58 ， 115.52(C5) ， 94.90 ， Ph)， 116.35 ， 116.30(2x d， 3 94.59(C1’ )， 82.11， 82.05(C2’ )， 80.11， 79.99(2x d，JC-C-O-P ＝ 8.50Hz， C4’ )， 74.82， 2 74.75(CH 酯 )， 68.82， 68.65(2x d， JC-O-P ＝ 5.00Hz， C5’ )， 54.26(6OCH3)， 51.85， 51.75(C 3 Ala)， 41.22， 40.73(C3’ )， 22.63(CH3 酯 )， 22.52(2’ CCH3)， 20.47， 20.28(2x d，JC-C-N-P ＝ 7.50Hz， CH3Ala) 31

    [2349] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.43， 4.30

    [2350] 实施例 97

    [2351] 按 照 如 下 所 述， 合 成 蛋 白 肽 (2S)- 新 戊 基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-4- 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰 化氨基 )- 丙酸酯 ：

    [2352] 采用合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法 ( 方法 B)， 向含有 100mg(3R， 5S)-2-(2- 氨 基 -6- 甲氧基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-5-( 羟甲基 )-3- 甲基 - 四氢呋喃 -3- 醇的 3mL 四氢呋 喃溶液中， 加入 0.68mL 叔丁基氯化镁， 随后加入 260.2mg(2S)-((S)-1- 苯基乙基 )2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 (282mg， 0.63mmol) 的 1.5mL 四氢呋喃溶液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 156mg 蛋白肽， 收率 72％。 HPLC tR ＝ 22.94、 23.10min。 (柱 ： varian

    [2353] Pursuit XRs5， C18， 150x4.6mm ； 该方法是 ： 30min 内水中乙腈线性梯度从 10％至 100％。

    [2354] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2355] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.22-8.15(m， 1H)， 7.99 和 7.97(2s， 1H)， 7.92-7.84(m， 1H)， 7.74-7.67(m， 1H)， 7.58-7.46(m， 3H)， 7.45-7.38(m， 1H)， 5.94(s， 1H)， 4.72-4.46(m， 3H)， 4.12-4.03(m， 4H)， 3.78， 3.74， 3.68， 3.63(2AB system， JAB ＝ 10.5， 2H)， 2.36 和 2.20(2t， J ＝ 12.2， 1H)， 2.01 和 1.96(2A-B system， J ＝ 4.3 和 J ＝ 12.9， 1H)， 1.37-1.32(m， 3H)， 1.02 和 0.96(2s， 3H)， 0.89 和 0.87(6s， 9H) 31

    [2356] P NMR(202MHz， CD3OD-d4)δ4.40， 4.33

    [2357] 实施例 98

    [2358] 按 照 如 下 所 述， 合 成 蛋 白 肽 (2S)- 环 己 基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H 嘌呤 -9- 基 )-4- 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化 氨基 ) 丙酸酯 ：

    [2359] 采用合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法 ( 方法 A)， 向含有 (3R， 5S)-2-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲 基 )-3- 甲 基 - 四 氢 呋 喃 -3- 醇 (100mg， 0.339mmol) 的 5mL 四氢呋喃溶液中， 加入叔丁基氯化镁 (0.68mL， 0.68mmol)， 随后加入 (2S)- 环己基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰化氨基 ) 丙酸酯 (268mg， 0.68mmol) 的 5mL 四氢 呋喃溶液。Workuip 和硅胶柱层析之后， 得到 131mg 纯净蛋白肽， 收率 52％。MS(ES+)m/e ： + 655.26(MH ， 100％ ) ； 精确质量 ： C31H41N6O8P calculated 655.2645， found 655.2640下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2362] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.20-8.18(m， 1H， H8-naph)， 7.99， 7.98(2x s， 1H， H8)， 7.88-7.83(m， 1H， H5-naph)， 7.69， 7.67(2x d， J ＝ 8.00Hz， 1H， H4-naph)， 7.53-7.47(m， 3H， H6， H2-naph)， 7.41， 7.39(2x t， J ＝ 8.00Hz， 1H， H3-naph)， 5.95(s， 1H， H1’ )， 4.68-4.57(m， H7， 3H， H4’ 和 H5’ )， 4.54-4.47(m， 1H， CH 酯 )， 4.04(s， 3H， 6OCH3)， 4.03-4.00(m， 1H， H.Ala)， 2.36， 2.17(2x t， J ＝ 12.00Hz， 1H， H3’a)， 1.98， 1.96(dd， J ＝ 5.00Hz， J ＝ 12.00Hz， 1H， H3’b)， 1.71-1.63(m， 4H， 2x CH2 酯 )， 1.48-1.22(m， 9H， 3x CH2 酯和 CH3Ala)， 1.01， 0.95(2x s， 3H， 2’ CH3) 13 3

    [2363] C NMR(126MHz， CD3OD)δ174.52(d， JC-C-N-P ＝ 4.40Hz， C ＝ O 酯 )， 174.25(d， 3 JC-C-N-P ＝ 5.50Hz， C ＝ O 酯 )， 162.72(C6)， 161.84(C2)， 154.65， 154.60(C4)， 148.05， 148.00(ipso Naph) ， 139.08 ， 138.78(CH8) ， 136.30 ， 136.28(C10-napht) ， 128.87 ， 128.83(CH-napht)， 127.98， 127.91(C9-naph)， 127.77， 127.55， 127.49， 126.53， 125.98， 122.82， 122.77(CH-naph)， 116.27(C2-naph)， 115.59， 115.50(C5)， 94.94， 94.60(C1’ )，

    [2361] 3 82.11， 82.09(C2’ )， 80.18， 80.02(2x d， JC-C-O-P ＝ 8.50Hz， C4’ )， 74.92(CH 酯 )， 68.88， 2 68.72(2x d，JC-O-P ＝ 5.00Hz， C5’ )， 54.27， 54.24(6OCH3)， 51.89， 51.81(C Ala)， 41.24， 40.74(C3’ )， 32.38， 32.34， 32.32(2x CH2-2 和 6 酯 )， 26.36(2x CH2-3 和 4 酯 )， 24.57(CH2-5 3 3 酯 )， 22.51(2’ CCH3)， 20.77(d， JC-C-N-P ＝ 6.30Hz， CH3Ala)， 20.54(d， JC-C-N-P ＝ 7.50Hz， CH3 Ala) 31

    [2364] P NMR(202MHz， CD3OD)δ4.39

    [2365] 实施例 99

    [2366] 按照如下所述， 合成蛋白肽苄基 (2S)- 苄基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-4- 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰 化氨基 )-3- 甲基丁酸酯 ：

    [2367] 采用合成核苷 5’ - 磷酰胺酯的一般方法 ( 方法 A)， 向含有 (3R， 5S)-2-(2- 氨 基 -6- 甲 氧 基 -9H- 嘌 呤 -9- 基 )-5-( 羟 甲 基 )-3- 甲 基 - 四 氢 呋 喃 -3- 醇 (150mg， 0.508mmol) 和 NMI(0.20mL， 2.54mmol) 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液 中， 加 入 (2S)- 苄 基 2-( 氯 ( 萘 -1- 基 氧 基 ) 磷 酰 化 氨 基 )-3- 甲 基 丁 酸 酯 (658mg， 1.52mmol) 的 5mL 四 氢 呋 喃 溶 液。Workup 和硅胶柱层析之后， 得到 30mg(2S)- 苄基 2-((((2S， 4R)-5-(2- 氨基 -6- 甲氧 基 -9H- 嘌呤 -9- 基 )-4- 羟基 -4- 甲基四氢呋喃 -2- 基 ) 甲氧基 )( 萘 -1- 基氧基 ) 磷酰 化氨基 )-3- 甲基丁酸苄酯， 收率 9％， 呈类白色固体。

    [2369] 下列是分析合成化合物的核磁共振结果 ： 1

    [2370] H NMR(500MHz， CD3OD)δ8.19-8.16(m， 2H， H8-naph 和 H8)， 7.86， 7.83(2x d， J＝ 7.50Hz， 1H， H5-naph)， 7.68， 7.66(2x d， J ＝ 8.50Hz， 1H， H4-naph)， 7.52-7.45(m， 3H， H7， H6， H2-naph)， 7.37， 7.36(2x t， J ＝ 8.00Hz， 1H， H3-naph)， 7.28-7.24(m， 5H， Ph)， 5.95， 5.94(s， 1H， H1’)， 5.06， 4.98(2x d， J ＝ 12.00Hz， 2H， CH2 酯 )， 4.69-4.62(m， 1H， H4’)， 4.58-4.42(m， 2H， H5’)， 4.06， 4.05(2x s， 3H， 6OCH3)， 3.82， 3.77(2x dd， J ＝ 6.00Hz， J ＝ 10.00Hz， 1H， H.Val)， 2.38-2.33(m， 1H， H3’a)， 2.15-2.11(m， 1H， H3’b)， 2.07-1.92(m， 1H， CH Val)， 1.02， 0.96(2x s， 3H， 2’ CH3)， 0.85-0.80(m， 6H， 2x CH3， Val) 13

    [2371] C NMR(126MHz， CD3OD)δ174.11， 173.78(C ＝ O 酯 )， 162.17(C6)， 162.11， 162.08(C2) ， 153.98(C4) ， 148.01 ， (ipso Naph) ， 147.95 ， 146.50(ipso Ph) ， 138.80 ， 138.45(CH8) ， 136.28 ， 136.24(C10-napht) ， 130.79 ， 129.51 ， 129.45 ， 129.43 ， 129.31 ， 3 129.16 ， 128.86 ， 128.80(CH-napht 和 Ph) ， 127.90(d ，J C-C-O-P ＝ 6.30Hz ， C9-naph) ， 3 127.81(d， JC-C-O-P ＝ 8.80Hz， C9-naph)， 127.75， 127.51， 126.52， 126.47， 126.03， 125.97， 3 122.83， 122.78(CH-napht 和 Ph)， 116.43， 116.24(2x d，JC-C-O-P ＝ 4.40Hz， C2-naph)， 3 113.71， 113.41(C5)， 95.27， 94.93(C1’ )， 82.06， 82.04(C2’ )， 80.35， 80.23(2x d， JC-C-O-P

    [2368] 2 ＝ 8.50Hz， C4’ )， 68.97， 68.67(2x d， JC-O-P ＝ 7.50Hz， C5’ )， 67.84， 67.77(CH2 酯 )， 3 62.11(6OCH3)， 54.58， 54.51(C Val)， 41.14， 40.59(C3’ )， 33.27， 33.04(2x d， JC-C-N-P ＝ 8.8Hz， C Val)， 22.50， 22.32(2’ CCH3)， 19.51， 19.46， 18.41， 18.19(2x CH3 Val) 31

    [2372] P NMR(202MHz， CD3OD)δ5.22， 5.13

    [2373] 进一步上述实施例， 代表性化合物， 根据实施例所述的制备， 测试丙型肝炎病毒活 性测试 ( 基因型 1b) 中细胞毒性 (CC50) 和抗病毒活性 (EC50) 的功效。结果在下面列出。

    [2374] Huh7 复制子细胞系和细胞培养条件 ： 萤光素酶报告基因型 1b 亚基因复制子细胞 系、 和基因型 1a 全长复制子细胞系来自 Apath， LLC， Brooklyn， NY ： 所有细胞系一周传代 传代两次， 裂解 4 或 6 倍。细胞维持在 DMEM- 高葡萄糖培养基 (HyClone， Logan， UT)， 该 培养基添加了 9 ％ FBS (HyClonefb)、 2mM 谷氨酰胺 (Invitrogen， Carlsbad， CA)、 100U/ ml PenStrep(invitrogen)。介质还包含 0.25mg/ml 抗生素 G-418， 保持复制子稳定表达 (invitrogen)。在 37℃下， 孵育在 5％ CO2 气氛下进行。细胞从冻存重新启动之后， 复制子 细胞系被使用， 直到其累积 15 至 18 代。种子细胞计数采用自动 Cedex HiRes 细胞计数器 ( 美国威斯康星洲麦迪逊市 Flownomics 分析仪器公司 ) 或手动使用 INCYTO C-ChipTM 一次 性血球计 ( 飞世尔科技， Pittsburg， PA) 按照常规方法确定。

    [2375] 抗丙型肝炎病毒的检测按照如下进行 ：

    [2376] 荧光素酶基因型 1b 复制子功效测定。复制子细胞接种到 white 96 孔板 (Nunc/ VWR)， 没有 G-418 介质中密度为 2x104 细胞 / 孔。 Stacker Multidrop Liquid Dispenser(MTX Lab Systems， Vienna， VA) 被用来确保均匀、 快速细胞播种到多个培养板内。细胞值板后 18-24 小时后， 加入抑制剂， 细胞再孵育 24、 48 或 72 小时 ( 按规定 )。化合物稀释三倍或四 倍， 浓缩范围在 0.0001 至 10μM， 测试三组和四组。 采用荧光素酶报告基因 ( 美国威斯康星 洲麦迪逊市 Promega 公司 ) 和 Veritas 光度计 ( 加利福尼亚州尼维尔 Turner Biosystems 公司 )， Renilla 荧光素酶报告基因活性试验监测丙型肝炎病毒复制。50％和 90％抑菌浓 度 (IC 50 和 IC90) 值被计算为化合物浓度， 该化合物浓度对比未处理细胞， 相应降低报告因子 表达 50％和 90％。通过非线性回归 ( 四参数 S 形曲线拟合 ) 分析确定该数值。

    [2377] 细胞毒性测试数据按照如下描述获取 ：

    [2378] 毒性试验。细胞接种到 96 孔板内， 密度为每孔 2x104 个细胞。细胞培植后 24 小 时， 11 个系列 2 倍化合物稀释， 起始浓度 100M， 应用于测试板 ( 每种化合物稀释重复 3 次 )。 各测试板进行 “无化合物” 对照试验。在 37℃下， 孵育在 5％ CO2 气氛下进行 72 小时。确定 细胞活力， 根据制造商协议操作 CellTiter-Glo 测试 ( 美国威斯康星洲麦迪逊市 Promega 公司 )。产生 50％发光信号的化合物浓度记为 CC50 浓度。

    [2379] IC50(μM) 和 CC50(μM) 测试结果列在表 1 中 ：

    [2380] 表 1 给出 IC50(μM) 和 CC50(μM) 测试结果 ：

    [2381] 抗其他病毒活性 . 代表性化合物， 实施例 20， 化合物 F， 测试抗一组其他 RNA 和 DNA 病毒。化合物 F 按照试验部分描述合成。培养细胞和病毒的试验条件列在下文。除非另外 指出， 细胞和病毒来自美国模式培养物保藏所 ( 美国马里兰州罗克韦尔市美国典型培养物 保藏中心 )。

    [2403] 使用腺病毒 1 型和黄热病毒株 17D， Hela 细胞 ( 人子宫颈上皮， Homo sapiens) 被 用于测定细胞保护剂测试。它们培养在达尔伯克改良伊格尔培养基 (DMEM) 内， 添加 5％胎 牛血清 (FBS)、 2.0mM L- 谷氨酰胺、 100units/ml 青霉素、 100μg/ml 链霉素和 0.1mM 非必需 氨基酸。

    [2402] 使用牛病毒性腹泻病毒 NADL 株， MDBK 细胞 ( 牛肾， Bos 280nocul) 被用于测定 细胞保护剂测试， 并培养在达尔伯克改良伊格尔培养基内， 添加 5％胎马血清 (FHS)、 2.0mM L- 谷氨酰胺、 100units/ml 青霉素、 100μg/ml 链霉素和 0.1mM 非必需氨基酸。

    [2405] 使 用 Hong Kong A 型 流 感 株 和 Lee B 型 流 感 株， 狗 肾 细 胞 ( 狗 肾， Canis familiaris) 被用于测定细胞保护剂测试。它们培养在具有 Earle’ s BSS 的 Engle 氏最低 必需培养基 (EMEM) 内， 添加 10％胎牛血清 (FBS)、 2.0mM L- 谷氨酰胺、 100units/ml 青霉素 和 100μg/ml 链霉素。

    [2406] 使 用 人 类 巨 细 胞 病 毒 (HCMV)AD169 株 (ATCC VR-538)， 人胚肺成纤维细胞 (MRC-5cells， (ATCC CCL-171) 胚胎肺成纤维细胞， 二倍体， 男性， 人 ) 用在蚀斑减少法检测 中和使用鼻病毒菌株 1B 的细胞保护剂测试中。 它们培养在 Engle 氏最低必需培养基 (EMEM) 内， 添加 10％胎牛血清 (FBS)、 0.1mM 非必需氨基酸、 1.0mM 丙酮酸钠、 2.0mM L- 谷氨酰胺、 100units/ml 青霉素和 100μg/ml 链霉素。

    [2407] MT-4 细胞 (( 目录号 #120) 人 T 细胞白血病 ) 购自美国国立卫生研究院艾滋病参 考试剂， 用在使用 HIV-1 Strain IIIB( 南方研究公司 ) 的细胞保护剂测试中。它们培养在 RPMI-1640 培养基内， 添加了 10％胎牛血清 (FBS)。

    [2408] Vero 细胞 ( 非洲绿猴肾， Cercopithecus aethiops) 被用于细胞保护剂测试中， 使 用柯萨奇病毒细胞株 B4、 HSV-1 菌株 HF、 脊髓灰质炎病毒株 Chat、 RSV 病毒株 Long 和西尼 罗病毒株 NY-99。它们培养在 DMEM 培养基中， 添加了 10％胎牛血清 (FBS)、 2.0mM L- 谷氨 酰胺、 100units/ml 青霉素和 100μg/ml 链霉素。

    [2409] Vero E6 细胞 ((ATCC CRL-1586) 非洲绿猴肾， Cercopithecus aethiops， 克隆 ) 被 用在使用牛痘 W 酯 n Reserve 的蚀斑减少法检测中和使用登革病毒 2 型菌株 New Guinea 的 细胞保护剂测试中。它们培养在 EMEM 培养基中， 添加了 10％胎牛血清 (FBS)、 2.0mM L- 谷 氨酰胺、 100units/ml 青霉素和 100μg/ml 链霉素。

    [2410] 通用细胞保护测试 ： 病毒和细胞与测试化合物混合， 孵育 7 天 (HSV-1 和 WNV 孵育 5天； 黄热病孵育 10 天 )。病毒预先测定浓度， 对照孔显示损失细胞活力的 85％至 95％， 由 于在感染后第 6-7 天进行病毒复制 (HSV-1 和 WNV 第 5 天进行病毒复制 ； 黄热病第 7-10 天 进行病毒复制 )。 当化合物防止病毒复制时， 观察到抗病毒效果或细胞保护。 每个测试板包 含细胞对照孔 ( 仅有细胞 )、 病毒对照孔 ( 细胞 + 病毒 )、 化合物毒性对照孔 ( 仅有细胞 + 化 合物 )、 化合物比色对照孔 ( 仅有化合物 )， 以及试验孔 ( 化合物 + 细胞 + 病毒 )。MTS 还原 染料评估细胞保护和化合物毒性 ( 美国威斯康星洲麦迪逊市 Promega 公司的 CellTiter 96 Reagent)。 使用 Molecular Devices Vmax 读板机或 SpectraMax Plus plate reader 在 490-650nm 处分光光度读取培养板。病毒细胞病变效应 (CPE) 减少被确定并且如下记录 ： IC50( 抑制病毒复制的浓度的 50％ )、 TC50( 导致细胞死亡的浓度的 50％ ) 和计算 TI( 治 疗指数 TC50/IC50)。使用 half-log 稀释的 6 种浓度， 一式三份测量评价样品的抗病毒功 效， 复制测量确定细胞的细胞毒性。每种测试包括抗病毒阳性对照化合物， 适于下列列出 的病毒问题 ： 腺病毒利巴韦林 (RBV)、 登革病毒、 A&B 型流感、 和 RSV ； 用于 BVDV 的干扰素 α(IFN-α)、 黄热病、 和西尼罗病毒 (WNV) ； 用于柯萨奇病毒、 脊髓灰质炎病毒、 鼻病毒的恩 韦肟 (ENV) ； 用于单纯疱疹病毒 (HSV) 的阿昔洛韦 (ACV)。

    [2411] HIV 细胞保护测试 ： MT-4 细胞在测试之前预培养一天。细胞培植在 96 孔细胞培养板内， 接种密度 6x105 个细胞 /ml(3x104 个细胞 / 孔 )。HIV-1 IIIB 病毒预先测定浓度， 对 照孔显示损失细胞活力的 85％至 95％， 由于在感染后第 5 天进行病毒复制。病毒和细胞与 系列稀释的测试化合物混合， 37℃下， 5％ CO2 气氛下， 孵育 5 天。每个测试板包含细胞对照 孔 ( 仅有细胞 )、 病毒对照孔 ( 细胞 + 病毒 )、 化合物毒性对照孔 ( 仅有细胞 + 化合物 )， 以 及试验孔 ( 化合物 + 细胞 + 病毒 )。XTT 测试 (Cat#11-465-015-001， Roche Diagnostics) 评估细胞保护和化合物毒性。使用分子仪器 SpectraMax M2 plate reader 在 450/650 处 分光光度读取培养板。病毒细胞病变效应 (CPE) 减少被确定并且如下记录 IC50、 CC50 和计 算 TI。使用 2 倍稀释的 9 种浓度， 一式三份测量评价样品的抗病毒功效和细胞毒性。每种 测试包括抗病毒阳性对照化合物的 Raltegravir(MK0518)。

    [2412] HCMV 空斑减数实验 ： MRC-5 细胞接种 24 孔板中， 75,000 个细胞 / 孔。37℃下， 5％ CO2 气氛下， 培养板孵育过夜。 第二天， 抽走介质， 约 100 个 HCMV AD169 噬斑形成单位 (pfu) 被添加到每个培养板的 21 个孔内 200μL 体积的测试介质 ( 含有 2％ FBS 而非 10％ FBS 的 MRC-5 生长培养基 )。每个培养板的剩余三个孔作为细胞对照孔并加入 200μL 无病毒的测 试介质。37℃下， 5％ CO2 气氛下， 病毒被吸附到细胞上 1 小时。将其在含有 0.5％甲基纤维 素的测试介质中稀释制备化合物。 孵育期后， 1mL 每种药物稀释液加到培养板的 triplicate wells 内 ( 不吸走病毒接种 )。含有 0.5％的甲基纤维素的测试介质 ( 无药物 ) 被添加到每 个培养板的三个细胞对照孔内和三个病毒对照孔内。培养板被孵育 7-10 天诱导斑块形成。 化合物沉淀和毒性被标记。 然后， 从孔内吸走介质， 细胞被固定， 使用 用显微镜检查培养物， 含有结晶紫的 20％甲醇染色。显微检查列举斑块， 数据绘制成病毒对照百分比。为了评估 细胞毒性， 使用 MRC-5 生长培养基， MRC-5 细胞被接种， 96 孔培养板中每孔 2,500 个细胞。 37℃下， 5％ CO2 气氛下， 培养板孵育过夜。第二天， 化合物在测试介质中制备得到。生长介 质从培养板中除去， 用制备的测试化合物替换。 每种化合物稀释液测试三次。 每个毒性培养 板包含必需细胞对照和复合色对照。六天后孵育期后， 使用 CellTiter 96 Aqueous 单溶液 (Promega 公司 )， 确定细胞活力。 溶液加到 96 孔培养板的孔内， 体积是导致每个孔内最终浓 度的 10％ ( 体积 ： 体积 )。培养板在 37℃下又孵育 4 小时。粘合板密封盖替代盖子， 密封板 倒置几次， 混合可溶性 formazan 产物， 分子仪器 SpectraMax M2 plate reader 在 450/650 处分光光度读取培养板。计算出减少斑块形成的最小抑制药物浓度的 50％ (IC50)， 抑制细 胞生长的最小抑制药物浓度的 50％ (TC50)。每种活性化合物的治疗指数 (TI)( 选择性 ) 通过 TC50/IC50 确定。

    [2413] 牛痘病毒空斑减数实验 ： 使用 Vero E6 细胞生长培养基， Vero E6 细胞接种在 12 孔培养板上， 200,000 个细胞 / 孔。37 ℃下， 5 ％ CO2 气氛下， 孵育 5 天。第二天， 介质被倒 出， 约 150 个牛痘病毒 ( 稀释在 DMEM+2 ％胎牛血清 (FBS)+2 ％ L- 谷氨酰胺 ) 噬斑形成单 位 (pfu) 被添加到每个培养板的 10 个孔内 100μL 体积的测试介质。每个培养板的剩余三 个孔作为细胞对照孔并加入 200μL 无病毒的测试介质。通过将其稀释在测试介质中并将 100μL 分配到包含牛痘病毒的每个测试孔内制备化合物。 化合物的每个稀释液在测试孔内 运行两次。轻轻摇晃培养板混合化合物和病毒。37℃下， 5％ CO2 气氛下， 病毒 / 化合物混合 物被吸收到细胞上 1 小时， 伴随每隔 10-15 分钟轻微摇晃。孵育过程中， 制备得到覆盖介质 DMEM+2％ FBS+2％ L- 谷氨酰胺 +0.5％甲基纤维素。在单独试管内， 化合物的适宜稀释液与 覆盖介质混合 ( 每个化合物稀释液的覆盖介质 )。 确保， 覆盖介质中化合物浓度与培养板每个测试孔中的化合物浓度相同。孵育期之后， 1mL 每种药物稀释液 / 覆盖介质混合物加入 到培养板的复制孔内 ( 不吸走病毒 / 化合物接种体 )。包含 0.5％甲基纤维素的测试介质 ( 无药物 ) 加入到培养板上两个细胞对照孔内和两个病毒对照孔内。培养板孵育约 72 小 时， 形成斑块。用显微镜检查培养物， 化合物沉淀和毒性被标记。然后， 从孔内吸走介质， 细 胞被固定， 使用含有 0.1％结晶紫溶液的 20％甲醇染色。采用灯箱肉眼检验计数斑块， 数据 绘制成病毒对照百分比。为了确定细胞毒性， 使用 Vero E6 细胞生长培养基， Vero E6 细胞 接种在 96 孔培养板上， 10,000 个细胞 / 孔。37℃下， 5％ CO2 气氛下， 培养板孵育过夜。第 二天， 化合物在测试介质中制备得到。 生长介质从培养板中除去， 用制备得到的测试化合物 替换。每种化合物稀释液测试三次。每个毒性培养板包含必需的细胞对照和复合色对照。 72 小时孵育期后， 使用 CellTiter 96 Aqueous 单溶液 (Promega 公司 )， 确定细胞活力。溶 液包含 MTS- 四唑， 活细胞转变为光吸收 formazan 产物。溶液加到 96 孔培养板的孔内， 加 入体积导致每个孔内浓度为最终浓度的 10％ ( 体积 ： 体积 )。培养板在 37℃下又孵育 4 小 时。粘合板密封盖替代盖子， 密封板倒置几次， 混合可溶性 formazan 产物， 分子仪器 Vmax plate reader 在 490/650 处分光光度读取培养板。 计算出减少斑块形成的最小抑制药物浓 度的 50％ (IC50)， 抑制细胞生长的最小抑制药物浓度的 50％ (TC50)。治疗指数 (TI)( 选 择性 ) 通过 TC50/IC50 确定。

    [2414] 表 2. 抗其他 RNA 和 DNA 病毒的化合物 F 的活性

    [2415] *ND ＝不能确定 ； 该测试中观察到空斑形成减少与细胞活力减少完全平行。 下文列出化合物 F 的结构 ( 实施例 20)代表性蛋白肽或核苷 5’ - 磷酰胺酯转变成推定的活性物种 2’ -C- 甲基鸟苷三磷 酸在原代培养人肝细胞中检查出。在这些细胞中生产 2’ -C- 甲基鸟苷 5’ - 磷酰胺酯的方 6 面， O - 甲基化 2’ -C- 甲基鸟苷 5’ - 磷酰胺酯和 2’ -C- 甲基鸟苷 5’ - 磷酰胺酯之间进行对 比。

    [2421] 人原发性肝细胞分析 ： 采用超低温诱导肝细胞进行肝细胞测试。分离自人 ( 男性 供体 ) 的超低温肝细胞购自 Xenotech 公司， 根据协议解冻。 简而言之， 细胞在 37℃水浴中解 冻， 放置于生物安全柜内。 使用 vendor’ s 肝细胞分离试剂盒 (Xenotech 公司 )， 根据协议分 离细胞。随后， 使用 Cedex 自动细胞计数器或血球计， 通过台盼蓝排斥法确定生存力和细胞 计数。细胞重悬浮在肝细胞培养介质内 (Xenotech 公司 )， 并且转移到涂覆胶原质的 12 孔 6 培养板内， 1x 10 活细胞 / 孔。37℃下， 培养板放置在 5％ CO2 孵育器内 3-6 个小时， 使细胞 附着。然后， 除去培养板， 以 0.25mg/mL matrigel( 基质膜， 无酚红， BD Biosciences) 的基 质膜覆盖恢复喂食， 放回孵育箱内 48 小时。在新鲜的肝细胞培养基内制备化合物， 最终浓 度 2μM 至 10μM， 加入到孔内。培养板轻微旋转， 放回孵育箱内。在标明的时间点， 除去培 养板， 上清液转移至微型管内， 高速离心分离除去沉淀， 并储存在 -20℃， 直到进行 LC-LC/ MS 分析时。细胞刮到 1mL 70％冷甲醇溶液中振荡。然后， 细胞在 -20℃放置过夜， 便于取出 代谢物。第二天， 采用离心分析法， 4℃下， 10,000rpm 转速， 离心分离 15 分钟， 制粒细胞球， 通过 LC-LC/MS 分析除去细胞提取物， 进行 2’ -C- 甲基鸟苷 5’ - 磷酰胺酯定量化。

    [2422] 本研究中使用的化合物 E( 实施例 2)、 化合物 F( 实施例 20)、 化合物 C( 实施例 42) 和化合物 H( 实施例 38) 按照试验步骤描述方法合成得到。化合物 D 购自 CarboSynth Ltd

    [2420] 公司。本研究中使用的化合物 A、 B、 C 采用 McGuigan et al. 提交于 2007 年 11 月 23 日公 布于 2008 年 5 月 29 日的 PCT/GB07/004480， 也是 WO2008062206 中描述的方法合成得到。

    [2423] 在人原发性肝细胞研究中， 化合物 A-H 转化 2’ -C- 甲基鸟苷三磷酸如下图表所示

    [2424] 人原发性肝细胞研究中的化合物 A-H 如下图所示 ：37℃， 30min 和 90min 时间点， 选取的核苷 5’ - 磷酰胺酯检查在人、 cynomolgous 猴 子、 老鼠、 小鼠血浆内是稳定的。该研究中使用的化合物 C( 实施例 42)、 化合物 F( 实施例 20)、 化合物 I( 实施例 13)、 化合物 J( 实施例 47)、 化合物 K( 实施例 36) 和化合物 L( 实施 例 54) 按照上述实施例描述的方法合成得到。化合物 A 和 B 采用 McGuigan et al. 提交于 2007 年 11 月 23 日公布于 2008 年 5 月 29 日的 PCT/GB07/004480， 也是 WO2008062206 中描 述的方法合成得到， 通过引述合并于本文中。

    [2428] 正常血浆中蛋白肽稳定性 ： 用于如下分析制备血浆样品。50μl 测试样品分布在 96 孔 V- 形底培养板内。含有 10ng/ml 内标物的 200μl 乙腈添加到每个血浆样品中。4℃ 下， 使用 Sorvall RT6000S 离心分离机， 沉淀样品以 2500rpm 转速离心分离 20 分钟 (Thermo Scientific， Waltham MA)， 每个样品的 100μl 上清液转入 96 深孔培养板内， 随即向每个

    [2427] 样品添加 100μl 水。样品被盖上， 经振荡混合每个孔， 分析之前和分析期间在 2-8℃下保 存。15μl 每种测试样品通过液相色谱串联质谱 (LC-MS/MS) 分析蛋白肽浓度。Agilent 1100 Series HPLC system， 装有 Synergi 4μm Polar-RP、 30x2.0mm column(Phenomenex， Torrance， CA)， 执 行 液 相 色 谱 分 析。HPLC system 串 联 API 4000 三 重 四 极 杆 质 谱 仪 (Applied Biosystems， Framingham， MA)。质谱仪在正离子模式下操作， 采用 Analyst v1.4.2 软件 (Applied Biosystems， Framingham， MA) 分析数据。数据表现为相对于 0 时间 点对照组， 回收化合物的百分比。

    [2429] 表3： 37℃下， 多种物种内蛋白肽的血浆稳定性

    [2430] 血浆稳定性研究中使用的化合物如下图所示 ：选取化合物在小鼠 PK 试验中检查确定肝脏内 2’ -C- 甲基鸟苷 5’ - 三磷酸的水平。 2’ -C- 甲基鸟苷 5’ - 三磷酸购自 TriLink Biotechnologies， San Diego， CA 92121， 用于 得到确定肝脏浓度的标准曲线。该研究中使用的化合物 C( 实施例 42)、 化合物 F( 实施例 20)、 化合物 K( 实施例 36)、 化合物 E( 实施例 2) 和化合物 H( 实施例 38) 按照试验部分描述 的方法合成得到。化合物 A、 G、 M 和 N 采用 McGuigan et al. 提交于 2007 年 11 月 23 日公 布于 2008 年 5 月 29 日的 PCT/GB07/004480， 也是 WO2008062206 中描述的方法合成得到。

    [2435] 小鼠 PK 分析 ： 化合物设计了 5 ％二甲基乙酰胺 (DMA)、 20 ％聚乙二醇硬脂酸酯 15(Solutol HS15)、 20％聚乙二醇 400(PEG)、 50mM 乙酸钠， pH ＝ 4。在定量给药之前制备制 剂。20-30 克雌性 ICR 小鼠 (Taconic Farm) 经口服填喂法定量给药。给药体积基于每个 动物体重， 给药时间， 获得预期 mg/kg 目标剂量。异氟醚气体麻醉中， 于眼眶后静脉丛处取

    [2434] 血， 收集在装有 EDTA 的试管内。取样 30 分钟内， 通过离心分离机以 1500RCF 转速离心分离 10 分钟从血液样品中分离出血浆。吸入 CO2/O2， 丧失意识之后， 颈椎脱位处死动物。取出干 燥， 切成小段， 每个小鼠分成 3 管。记录组织重量， 样品在乙醇 / 干冰浴中闪冻， 于 -80℃下 储存。

    [2436] 为了定量啮齿动物肝脏样品中的 2’ -C- 甲基 -D- 鸟苷 5’ - 三磷酸， 4 ℃下， 珠 磨 机 (ThermoSavantFastPrep 120) 中， 搅 拌 速 度 30 秒 6-2 个 循 环， 采 用 1mm 碳 化 硅 珠 (biospec)， 组织被均质在 3 当量的甲醇中 ( 例如， 3ml 甲醇对应 1g 组织 )。 4℃下， 使用离心 分离机， 以 15000rpm 转速， 匀浆液被离心分离 30min。收集上清液， 来自每个样品的 200μl 上清液在氮气分氛下干燥。干提取物与 50μl 的 10mM 二甲基己胺和 3mM 甲酸铵水溶液重 组。使用已知量的 2’ -C- 甲基 -D- 鸟苷 5’ - 三磷酸， 由对照动物肝脏基质绘制校准曲线。 正常肝样品按照上述被均质化。4℃下， 使用离心分离机， 以 15,000rpm 转速， 匀浆液被离心 分离 30min。三磷酸标准原液的系列稀释液由标准储备溶液 (10mM 二甲基己胺和 3mM 甲酸 铵水溶液中浓度 1mg/mL， pH ＝ 9， 储存在 -20℃ ) 制得， 使用回收的上清液作为稀释液。含 有标准稀释液的上清液在氮气气氛下干燥。 干标准样品与 50μl 的 10mM 二甲基己胺和 3mM 甲酸铵水溶液重组。经 LC-MS/MS 分析测定三磷酸水平。以每分钟 300μl 流速， 10μl 注射 量， 重组后样品在 Waters’ XTerra MS C18 2.1x 50mm 3.5μm 柱上 (Waters， Milford， MA) 被分离。 使用下列缓冲液进行梯度洗脱 ： A ＝ 10mM 二甲基己胺和 3mM 甲酸铵水溶液， pH ＝ 9， 7 分钟， ％ B ＝ 100％， B ＝ 20mM 二甲基己胺和 6mM 甲酸铵的乙腈溶液 ( 时间 0， ％ B ＝ 0， 9 分钟，％ B ＝ 100％， 在 9.5 分钟，％ B ＝ 0％， 13 分钟，％ B ＝ 0％ )。采用 Sciex API 4000 三重四极杆仪器进行 MS/MS 分析， 设置检测 m/z 过渡 535.94/438.00( 负离子模式 )。

    [2437] 表4： 50mg/kg PO 定量给药之后， 小鼠肝脏中 2’ -C- 甲基鸟苷三磷酸水平

    [2438] 下表所示， 小鼠 po 定量给药 50mg/kg 5％二甲基乙酰胺 (DMA)、 20％聚乙二醇硬脂 酸酯 15(Solutol HS15)、 20％聚乙二醇 400(PEG)、 50mM 乙酸钠， pH ＝ 4.0

    [2439] 小鼠肝脏 PK 研究中使用的化合物如下所示 ：本发明参照尤其优选实施方案进行描述时， 本领域技术人员认识到在不背离本发 明的精神和保护范围的情况下对本发明作出许多其它修改。

    [2443] 所有上述本说明书中提到和 / 或申请数据手册中列出的美国专利、 美国专利申请

    [2442] 出版物、 美国专利申请、 国外专利、 国外专利申请和非专利出版物， 通过引述全部合并于本 文中。

    [2444] 前述部分中， 许多缩写词和首字母缩写词被使用， 全部描述提供如下 ：

    [2445] 228