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用于治疗GPR38受体介导的疾病的哌嗪基衍生物
本发明涉及具有药理学活性的新的苄基哌嗪衍生物，它们的制备方法，含有它们的药物组合物，以及它们在治疗多种疾病中的用途。
GPR38为7-跨膜，G-蛋白偶联的受体，对于肽促胃动素具有高亲和性[Feighner等人，Science 1999，284，2184]，这表明内源性促胃动素的全部或大多数活性通过该受体产生。
促胃动素为22个氨基酸的肽，其在胃肠道(尤其在十二指肠-空肠区域中)的内分泌素样细胞中大量出现。禁食期间，已知该肽与胃中的III期迁移复合物活性(Phase III migrating complex activity)的发作有关[Boivin等人，Dig.Dis.Sci.1992，37，1562]，这表明其在促运动活性机理中的作用。促胃动素也在进食、假饲期间、胃扩张期间或通过口服或静脉营养物施用期间从肠道释放[Christofides等人，Gut 1979，20，102；Bormans等人，Scand.J.Gastroenterol.1987，22，781]，这表明该肽在禁食期间运动性模型的调节中的其它作用。
在动物或在人中，早已已知在禁食或进食条件下，促胃动素增加胃肠蠕动，且促进胃排空和肠向肛门方向的推进。认为该活性主要至少是由于肠道胆碱能兴奋作用[Van Assche等人，Eur.J.Pharmacol.1997，337，267]，可能还涉及迷走神经的激活[Mathis & Malbert，Am.J.Physiol.1998，274，G80]。而且，较高浓度的促胃动素直接引起小型的肌肉收缩[Van Assche等人，Eur.J.Pharmacol.1997，337，267]。
抗生素红霉素表现出模拟促胃动素的胃肠活性，以及其已被描述的抗生素性质[参见Peeters，in Problems of the Gastrointestinal Tract in AnaesthesiaEd.，Herbert MK等人Springer-Verlag，Berlin，Heidelberg 1999，pp39-51]。最近，表明红霉素激活GPR38受体，这证明了其模拟促胃动素功能的能力[Carreras等人，Analyt.Biochem.2002，300，146]。而且，为了检测促胃动素受体激动剂的临床潜力，已经允许至少在一些临床研究中进行该非-肽促胃动素受体激动剂的有效性。这些研究已经一致证明了在伴随胃轻瘫，如机能性消化不良和糖尿病性胃轻瘫的多种疾病中增加胃排空的能力。而且，还表明红霉素增加人食管下端括约肌压，其伴随胃排空的增加，这表明其在治疗胃食管反流疾病(GERD)中有作用。最后，红霉素已经用于促进肠推进活性，发现了其在治疗假梗阻和在伴随结肠运动性不良的病症中的临床用途[Peeters，Problems of the Gastrointestinal Tract in Anaesthesia Ed.，Herbert MK等人Springer-Verlag，Berlin，Heidelberg 1999，pp39-51]。
因此，希望对GPR38受体的激动剂将模拟促胃动素或其它作用于该受体的物质(如红霉素)的活性，并发现其在治疗伴随运动不足的胃肠疾病，尤其是功能性肠紊乱，如GERD、机能性消化不良(FD)和肠易激综合征(IBS)中的临床用途。该化合物也将用于治疗其它原因已知且GI运动性降低的GI病症。这些病症包括便秘，其由多种疾病引起，如伴随神经病和/或通过给予其它药物引起的疾病、假性肠梗塞、手术或一些其它操作后麻痹性肠梗阻、多种疾病如糖尿病和/或给予其它药物或在肠内进食病人中引起的胃潴留或运动不足。有趣地是，促胃动素或红霉素激活迷走神经的能力，该神经与进食行为改变的关系[如，Furness等人，Auton.Neurosci.2001，92，28]和在与肥胖相关的位置的标记中(D13S257-13q14.11至D13S258，13q21.33)GPR38的染色体定位[基于Ensembl：13q21.1(58.46-59.46Mb)][Feitosa等人，Am.J.Hum.Genet.2002，70，72]也表明对GPR38受体具有活性的激动剂将有效地除促进胃肠蠕动外，还至少在一些程度的食欲减退或出现恶病质的患者中促进饮食行为。这些活性表明对该受体的激动剂将具有治疗与例如治疗癌症或癌症本身相关的症状的临床用途。
除促胃动素受体激动剂具有促进胃肠蠕动的能力外，促胃动素基因多形态性与节段性回肠炎的关系[Annese等人，Dig.Dis.Sci.1998，43，715-710]和结肠炎期间促胃动素受体密度的改变[Depoortere等人，Neurogastroenterol.Motil.2001，13，55]表明对促胃动素受体的激动剂在治疗一般炎性肠病中的用途。
最后，在胃肠道外面的区域也发现了GPR38。这些区域包括脑垂体、脂肪组织、膀胱和脑的一些区域。前者表明在促进脑垂体功能中的临床用途，例如释放生长激素促泌素，在脂肪组织中的存在再次表明其控制体重的作用，且在膀胱中的存在表明对该受体的激动剂治疗失禁的作用。在脑中GPR38的存在支持了所述的胃肠和进食作用，但同时还表明在更广谱的迷走神经-下丘脑功能中涉及该受体。
WO9410185、EP838469、WO9823629、DE19805822和US6165985要求保护靶向GPR38的红霉素衍生物，其用于与胃肠蠕动有关的疾病。WO9921846、WO0185694、WO0168620、WO0168621和WO0168622公开了一系列的GPR38受体的小分子拮抗剂。JP07138284和EP807639公开了肽激动剂。JP09249620、WO02092592、WO05027637、US2005065156和Li等人，(2004，Journal of Medicinal Chemistry，47(7)p1704-1708)公开了一系列小分子激动剂。WO 05012331和WO 05012332公开了大环化合物，其为哺乳动物促胃动素或ghrelin受体的激动剂或拮抗剂。WO 06127252公开了红霉素衍生物。
WO07/007018公开了式(A)化合物，其具有作为GPR38受体激动剂的活性

WO07/012479描述了式(B)化合物，其具有作为GPR38受体激动剂的活性

现在已经发现了一系列结构新颖的化合物，其提供了GPR38受体的激动剂。
因此，本发明提供了式(I)化合物及其盐(下文称作“本发明化合物”)：

其中
A为苯基或6-元杂芳环，其任选被选自卤素、C_(1-4)烷基和C_(1-4)烷氧基的一个取代基所取代；
R¹和R²独立地为H或C_(1-4)烷基；
R³为任选被取代的苯基、杂芳环、或杂环；
B为任选被取代的苯基、6-元杂芳环或6-元杂环，其通过碳原子连接到酰胺碳上；
Y为化学键、NH、N-C_(1-4)烷基、O、C＝O或CH₂；
R⁴为氢、C_(1-4)烷基或C_(1-4)烷氧基烷基。
本发明也提供了式(IA)化合物或其药学上可接受的盐或溶剂合物：

其中
A为苯基或6-元杂芳环，其任选被卤素、C_(1-4)烷基或C_(1-4)烷氧基取代；
R¹和R²独立地为H或C_(1-4)烷基；
R³为任选被取代的苯基、杂芳环、或杂环；
B为任选被取代的苯基、6-元杂芳环或6-元杂环，其通过碳原子与酰胺碳相连；
Y为化学键、NH、N-C_(1-4)烷基、O、C＝O或CH₂；
R⁴为氢或C_(1-4)烷基。
当R³或B被取代时，其可以具有1、2或3个取代基，每个独立地选自卤素、C_(1-4)烷基、C_(1-4)烷氧基、C_(3-7)环烷基、羟基、三氟甲氧基、三氟甲基、硝基、氰基、苯基、NH₂、NHR⁵、NR⁵R⁶、NHCOR⁵、NHSO₂R⁵、C(O)CF₃、C(O)C_(1-4)烷基、C(O)C_(3-7)环烷基、C(O)OC_(1-4)烷基、C(O)OC_(3-7)环烷基、OC(O)C_(1-4)烷基、OC(O)C_(3-7)环烷基、CONH₂、CONHR⁵、CONR⁵R⁶、SOR⁶、SO₂CF₃、SO₂R⁶、OSO₂R⁶、OSO₂CF₃、SO₂NH₂、SO₂NHR⁵、SO₂NR⁵R⁶，其中R⁵和R⁶可相同或不同，且表示C_(1-4)烷基、任选被卤素取代的苯基、或任选被卤素取代的5或6元杂芳基。
在一个实施方案中，R³被氟、氯、氰基、CONH₂、甲基、甲氧基或三氟甲氧基取代。
在一个实施方案中，B被甲基取代。
作为基团或基团(如，烷氧基或羟基烷基)的一部分的术语“烷基”是指所有异构形式的直链或支链的烷基。术语“C_(1-4)烷基”是指上述定义的烷基，其含有至少1个且至多4个碳原子。这些烷基的实例包括甲基、乙基、丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基或叔丁基。这些烷氧基的实例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、丁氧基、异丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。
合适的C_(3-7)环烷基包括环丙基、环丁基、环戊基和环己基、环庚基。
本文所用的术语“卤素”是指氟(F)、氯(Cl)、溴(Br)或碘(I)且术语“卤代”是指卤素：氟(-F)、氯(-Cl)、溴(-Br)和碘(-I)。
术语“杂芳环”表示5或6元不饱和芳环，其包含一个或多个杂原子。当术语杂芳基表示5元基团时，其含有选自O、N或S的杂原子，且可任选再含有1-3个氮原子。当杂芳基表示6-元基团时，其包含1-3个氮原子。这些5或6元杂芳环的实例包括：吡咯基、三唑基、噻二唑基、四唑基、咪唑基、吡唑基、异噻唑基、噻唑基、异噁唑基、噁唑基、噁二唑基、呋咱基、呋喃基、噻吩基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基和三嗪基。
术语“杂环”表示饱和的或部分饱和的5或6元环，其包含一个或多个选自氮、氧和硫的杂原子。这些杂环基团的实例包括吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和吗啉基。
在本发明的一个实施方案中，A为任选被取代的苯基或吡啶基。
在本发明的一个实施方案中，R¹为氢或甲基。
在本发明的一个实施方案中，R²为氢或甲基。
在本发明的一个实施方案中，R³为任选被取代的苯基、吗啉基、哌啶基、噁二唑基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、吡咯基。在另一个实施方案中，R3为任选被取代的苯基、吗啉基或哌啶基。
在本发明的一个实施方案中，B为任选被取代的苯基、哌啶基、嘧啶基或吡啶基。
在本发明的一个实施方案中，Y为NH、O、CH₂、C＝O或化学键。
在本发明的一个实施方案中，R⁴为氢、甲基、乙基、甲氧基乙基或异丙基。在另一个实施方案中，R⁴为甲基。
在本发明的一个实施方案中，
A为任选被取代的苯基或吡啶基；和/或
R¹为氢或甲基；和/或
R²为氢或甲基；和/或
R³为任选被取代的苯基、吗啉基或哌啶基；和/或
B为任选被取代的苯基、哌啶基、嘧啶基或吡啶基；和/或
Y为NH、O、CH₂、C＝O或化学键；和/或
R⁴为甲基；及其盐。
在本发明的另一个实施方案中，
A为任选被取代的苯基或吡啶基；和/或
R¹为氢或甲基；和/或
R²为氢或甲基；和/或
R³为任选被取代的苯基、吗啉基、哌啶基、噁二唑基、吡啶基、嘧啶基、咪唑基、吡咯基；和/或
B为任选被取代的苯基、哌啶基、嘧啶基或吡啶基；和/或
Y为NH、O、CH₂、C＝O或化学键；和/或
R⁴为氢、甲基、乙基、甲氧基乙基或异丙基；及其盐。
应该理解，本发明包括了上述取代基的所有组合。
在本发明的另一个实施方案中，(哌嗪基)亚甲基和[-N(R⁴)-C(＝O)-B-Y-R³]基团在环A上彼此处于对位，且其中B表示任选被取代的苯基或吡啶基，[(哌嗪基)亚甲基-A-N(R⁴)-C(＝O)-]基团和[-Y-R³]基团在环B上彼此处于对位或间位。
在一些式(I)化合物中，根据取代基的性质，可以有手性碳原子，如标有＂*＂的碳原子，且因此式(I)化合物可以作为立体异构体存在。本发明包括式(I)化合物的所有光学异构体，如立体异构形式，包括对映异构体、非对映异构体及其混合物，如外消旋体。不同的立体异构形式可以通过常规方法将一个从其它中分离或拆分出来，或任何给定的异构体可以通过常规立体选择性或不对称合成得到。其中R¹和R²均为甲基的优选的式(I)化合物为那些其中哌嗪C^*碳具有3R，5S-构型的化合物。其中R¹和R²中的一个为甲基且另一个为氢的优选的式(I)化合物为那些其中哌嗪C^*碳具有S-构型的化合物。
本文中的一些化合物能以不同互变异构形式存在，且应该理解本发明包括所有这些互变异构形式。
合适的本发明化合物为：
6-(3-氟苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E1)
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E2)
1-(4-氟苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-哌啶甲酰胺(E3)
6-(4-氟苯基)-N，2-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E4)
6-(4-氟苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E5)
N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-6-(4-吗啉基)-3-吡啶甲酰胺(E6)
4′-氟-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-联苯甲酰胺(E7)
6-(4-氟苯基)-2-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E8)
1-[(3-氟苯基)羰基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-哌啶甲酰胺(E9)
1-[(3-氟苯基)甲基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-哌啶甲酰胺(E10)
1-(4-氯苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-哌啶甲酰胺(E11)
N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-6-(1-哌啶基)-3-吡啶甲酰胺(E12)
6-(2-氟苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E13)
6-(2，4-二氟苯基)-N，2-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E14)
6-(3，4-二氟苯基)-N，2-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E15)
6-(3-氟苯基)-N，2-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E16)
4-[(3-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)苯甲酰胺(E17)
6-(3-氰基苯基)-N，2-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E18)
6-(4-氰基苯基)-N，2-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E19)
4-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)苯甲酰胺(E20)
N-(4-{[(3R，5S)-3，5-二甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-6-(4-氟苯基)-N，2-二甲基-3-吡啶甲酰胺(E21)
2-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)苯甲酰胺(E22)
N-(4-{[(3R，5S)-3，5-二甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-6-(4-氟苯基)-N-甲基-3-吡啶甲酰胺(E23)
4-[(2-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)苯甲酰胺(E24)
3-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)苯甲酰胺(E25)
3-[(3-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)苯甲酰胺(E26)
6-[(4-氟苯基)氨基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E27)
2-(4-氟苯基)-N，4-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-5-嘧啶甲酰胺(E28)
2-(4-氟苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-5-嘧啶甲酰胺(E29)
6-(4-氟苯基)-N，2-二甲基-N-(4-{[(3R)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E30)
6-(4-氟苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3R)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E31)
4′-氟-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-联苯甲酰胺(E32)
4′-氟-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-联苯甲酰胺(E33)
6-(3-氟苯基)-N-甲基-N-[4-(1-哌嗪基甲基)苯基]-3-吡啶甲酰胺(E34)
6-[(3-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E35)
6-[(2-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E36)
6-(3-氟苯基)-N，2-二甲基-N-[4-(1-哌嗪基甲基)苯基]-3-吡啶甲酰胺(E37)
6-(2-氰基苯基)-N，2-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E38)
6-[2-(氨基羰基)苯基]-N，2-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E39)
6-(2-氰基苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E40)
6-(3-氟苯基)-N-甲基-N-(3-甲基-4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E41)
6-(3-氰基苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E42)
6-[(3-氰基苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E43)
N-(2-氟-4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-6-(3-氟苯基)-N-甲基-3-吡啶甲酰胺(E44)
5-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E45)
5-[(3-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E46)
N-(2-氟-4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-3-吡啶甲酰胺(E47)
5-[(3-氰基苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E48)
5-[(4-氟苯基)氨基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E49)
1-[(3，4-二氟苯基)甲基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-哌啶甲酰胺(E50)
1-[(4-氟苯基)甲基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-哌啶甲酰胺(E51)
N-(3-氟-4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-6-(3-氟苯基)-N-甲基-3-吡啶甲酰胺(E52)
N-(3-氟-4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-3-吡啶甲酰胺(E53)
1-[(3-氰基苯基)甲基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-哌啶甲酰胺(E54)
1-[(4-氰基苯基)甲基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-哌啶甲酰胺(E55)
6-(3-氟苯基)-N-(1-甲基乙基)-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E56)
N-乙基-6-(3-氟苯基)-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E57)
6-(3-氟苯基)-N-[2-(甲氧基)乙基]-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E58)
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(3-甲基-4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E59)
6-(3-氟苯基)-N-甲基-N-(5-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}-2-吡啶基)-3-吡啶甲酰胺(E60)
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(5-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}-2-吡啶基)-3-吡啶甲酰胺(E61)
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E62)
6-(4-氟-1-哌啶基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E63)
6-(3-氟苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E64)
N-甲基-4-(3-甲基-1，2，4-噁二唑-5-基)-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)苯甲酰胺(E65)
N-乙基-6-[(4-氟苯基)氧基]-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E66)
N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-6-(3-吡啶基氧基)-3-吡啶甲酰胺(E67)
6-[(3-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E68)
6-(4，4-二氟-1-哌啶基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E69)
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(6-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}-3-吡啶基)-3-吡啶甲酰胺(E70)
5-(4-氟苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E71)
5-(3-氰基苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E72)
N-甲基-5-[3-(甲氧基)苯基]-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E73)
N-甲基-5-[4-(甲氧基)苯基]-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E74)
5-(3-氟苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E75)
6-(4-氟苯基)-N-甲基-N-(6-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}-3-吡啶基)-3-吡啶甲酰胺(E76)
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-甲基-5-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}-2-吡啶基)-3-吡啶甲酰胺(E77)
N，2′-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3，4′-联吡啶-6-甲酰胺(E78)
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-[2-(甲氧基)乙基]-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E79)
N-(3-氯-4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-3-吡啶甲酰胺(E80)
N，2′-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2，4’-联吡啶-5-甲酰胺(E81)
N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-(2-吡啶基)苯甲酰胺(E82)
N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-(2-嘧啶基)苯甲酰胺(E83)
N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-(1H-吡唑-1-基)苯甲酰胺(E84)
N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-6-(1H-吡咯-1-基)-3-吡啶甲酰胺(E85)
N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-{[4-(三氟甲基)苯基]羰基}苯甲酰胺(E86)
5-(4-氰基苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E87)
6-(4-氟苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-2-吡啶甲酰胺(E88)
N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-(6-甲基-3-吡啶基)苯甲酰胺(E89)
N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-(2-吡嗪基)苯甲酰胺(E90)
6-(4-氟苯基)-N-甲基-N-(5-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}-2-吡啶基)-2-吡啶甲酰胺(E91)
6-(3-氟苯基)-N-甲基-N-(5-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}-2-吡啶基)-2-吡啶甲酰胺(E92)
2-[(3-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)苯甲酰胺(E93)
及其盐。
本发明的一个实施方案为6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺或其盐。
本发明的另一个实施方案为6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺富马酸盐。
本发明的一个实施方案为6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-甲基-5-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}-2-吡啶基)-3-吡啶甲酰胺或其盐。
“本发明化合物”范围内包括式(I)化合物的所有盐、溶剂合物、水合物、复合物、多晶型物、前药、放射标记的衍生物、立体异构体和光学异构体。
式(I)化合物可以形成其酸加成盐。应该理解对于在药物中使用，式(I)化合物的盐应该为药学上可接受的。合适的药学上可接受的盐对于本领域技术人员是显而易见的，且包括J.Pharm.Sci.，1977，66，1-19中描述的那些，如与下述酸形成的酸加成盐，无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸或磷酸；和有机酸如琥珀酸、马来酸、乙酸、富马酸、柠檬酸、酒石酸、苯甲酸、对甲苯磺酸、甲磺酸或萘磺酸。一些式(I)化合物可与一当量或多当量的酸形成酸加成盐。本发明包括在其范围内的所有可能的化学计量和非化学计量形式。
式(I)化合物及其盐可以以结晶或非结晶形式制备，且如果为结晶可任选被水合或溶剂合。本发明包括其范围内的化学计量的水合物或溶剂合物，以及含有适量水和/或溶剂的化合物。
具有非药学上可接受的反离子或相关溶剂的盐和溶剂合物包括在本发明的范围内，例如，用作制备其它式(I)化合物及其药学上可接受的盐的中间体。
而且，式(I)化合物可以作为前药给药。本文中所用的式(I)化合物的＂前药＂为该化合物的官能衍生物，当向患者给药后，最后在体内释放式(I)化合物。作为前药给药式(I)化合物使技术人员能够进行一种或多种下述方案：(a)改变化合物在体内的起始状态；(b)改变化合物在体内的作用时间；(c)改变化合物在体内的运输和分布；(d)改变化合物在体内的溶解度；和(e)克服该化合物带来的副作用或其它困难。一般用作制备前药的官能衍生物包括化合物的修饰，其在体内被化学或酶裂解。这些修饰，包括制备磷酸酯、酰胺、酯、硫代酯(thioester)、碳酸酯和氨基甲酸酯，对于本领域技术人员来说是公知的。
本发明也包括同位素标记的化合物，其与本文所述的化合物相同，除了一个或多个原子被原子量或原子序数与天然中常见的原子量或原子序数不同的原子置换。可掺入本发明化合物的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟、碘和氯的同位素，如³H、¹¹C、¹⁴C、¹⁸F、¹²³I和¹²⁵I。含有上述同位素和/或其它原子的其它同位素的本发明化合物包括在本发明的范围内。本发明的同位素标记的化合物，例如掺入的放射性同位素，如³H、¹⁴C，用于药物和/或底物组织分布实验中。对于易于制备和可检测性，氚即³H，和碳-14即¹⁴C同位素是尤其优选的。¹¹C和⁸F同位素尤其用于PET(正电子发射断层摄影术)，且¹²⁵I同位素尤其用于SPECT(单光子发射计算机控制断层摄影术)，所有都用于脑成像。而且，用更重的同位素如氘即²H取代能够产生一些治疗优点，因为其具有更好的代谢稳定性，例如体内半衰期增加或剂量需要降低，且因此在一些情况下是优选的。同位素标记的本发明化合物通常能够通过进行下列方案和/或实施例中公开的方法，然后用方便可用的同位素标记的试剂替代非同位素标记的试剂而制备。
在另一方面，本发明提供了制备如上定义的式(I)化合物或其盐的方法，该方法包括使用适于形成酰胺键的条件，使式(II)化合物与R³-Y-B-C(＝O)-L¹化合物反应

在式(II)中，R¹、R²、A和R⁴如上定义，且Q为氢或合适的氮保护基团，如叔丁氧基羰基(Boc)或苄氧基羰基(Cbz)，在式R³-Y-B-C(＝O)-L¹中，R³、B和Y如上定义，且L¹为离去基团如卤素、烷酰氧基或磺酰氧基。例如，当L¹表示卤素时，该反应使用合适的碱，如三乙胺，在惰性溶剂如二氯甲烷中进行。
且之后，任选进行一个或多个下述反应：
a)将一种式(I)化合物转化为另一种式(I)化合物；
b)除去任一保护基；
c)形成所得化合物的合适的药学上可接受的盐或溶剂合物。
或者，如上定义的式(I)化合物或其盐可以通过下述方法制备，该方法包括使上述定义的式(II)化合物与式R³-Y-B-C(＝O)-OH化合物反应，在式R³-Y-B-C(＝O)-OH中，R³、B和Y如上定义，该反应的条件为在合适的偶联试剂，如N，N’-二环己基碳二亚胺(DCC)、N-苄基-N′-环己基碳二亚胺树脂或1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺(EDC)存在下；任选在1-羟基苯并三唑(HOBt)存在下；在合适的溶剂，如二氯甲烷、二甲基甲酰胺或其混合物中。
且之后任选进行下述一个或多个反应：
a)将一种式(I)化合物转化为另一种式(I)化合物；
b)除去任一保护基；
c)形成所得化合物的合适的药学上可接受的盐或溶剂合物。
式(II)化合物(其中A表示1，4-亚苯基)可以通过使用适合还原胺化的条件，使式(III)化合物与合适的醛、酮或烯醇醚反应得到R⁴而制备；所述条件例如在合适的还原剂如硼氢化钠存在下，并在合适的溶剂如甲醇中且任选在合适的碱如甲醇钠存在下，

在式(III)中，R¹和R²如上定义，R⁷表示对于上述A定义的亚苯基部分中任选的取代基，且Q为氢或合适的氮保护基团，如叔丁氧基羰基(Boc)或苄氧基羰基(Cbz)。
式(III)化合物可以通过使用适合还原的条件，使式(IV)化合物反应而制备，

在式(IV)中，R¹、R²、R⁷和Q如上定义；所述反应例如当Q为Boc时，在合适的催化剂(如钯/碳或铂/碳)存在下，在合适的溶剂(如甲醇)中，且任选在合适的碱(如氢氧化钾或三乙胺)存在下氢化。或者，当Q为Boc或Cbz时，所述还原可以使用合适的金属还原剂(如铁粉)，在合适的质子源(如氯化铵)且在合适的溶剂(如含水甲醇)中进行。
式(IV)化合物可以通过式(V)化合物与式(VI)化合物的反应制备，

在式(V)中，R⁷如上定义，

在式(VI)中，R¹、R²和Q如上定义，所述反应使用适合还原胺化的反应条件，例如在还原剂(如三(乙酰氧基)硼氢化钠)存在下，在合适的溶剂(如二氯甲烷或1，2-二氯乙烷)中进行。
或者，式(IV)化合物可以通过式(VII)化合物与如上定义的式(VI)化合物的反应制备，

在式(VII)中，R⁷如上定义，且L²表示离去基团，如卤素、烷基磺酰氧基或芳基磺酰氧基，所述反应使用适合烷基化反应的条件，例如使用合适的溶剂，如N，N-二甲基甲酰胺和合适的碱如Hunig’s碱进行。
式(VII)化合物是市售的或通过与文献(参见例如WO 03/053972，WO03/037898)中所述相似的方法制备。
如上定义的式R³-Y-B-C(＝O)-L¹化合物可以从式R³-Y-B-C(＝O)-OH化合物，通过与引入离去基团的合适的试剂反应而制备，例如当L¹为氯时，在催化剂N，N-二甲基甲酰胺存在下，用亚硫酰氯或草酰氯处理。
制备式(I)化合物的另一种方法包括：使式(VIII)化合物与式M¹-Y-R³化合物反应，

在式(VIII)中，R¹、R²、R⁴、A、B和Q如上定义，且L³表示离去基团，如卤素或三氟甲基磺酰氧基，在式M¹-Y-R³中，R³和Y如上定义，且M¹表示氢、金属残基(如，碱金属盐、三烷基甲锡烷基)或硼酸(boronic acid)，任选在合适的碱(如碳酸钾、碳酸铯、碳酸钠、氢化钠或三乙胺)存在下，且任选使用合适的过渡金属催化剂体系，如乙酸钯/BINAP、氯化铜(I)/2，2，6，6-四甲基-3，5-庚二酮或四(三苯基膦)合钯(0)。
且之后，任选进行下述的一个或多个反应：
a)将一种式(I)化合物转化为另一种式(I)化合物；
b)除去任一保护基；
c)形成所得化合物的合适的药学上可接受的盐或溶剂合物。
式(VIII)化合物可以通过使用与上述方法相似和/或类似的方法，使上述定义的式(II)化合物与式L³-B-C(＝O)-L¹或L³-B-C(＝O)-OH化合物(其中L¹、L³和B如上定义)反应而制备。
制备式(III)化合物的另一种方法包括在上述适合还原胺化的条件下，使上述定义的式(VI)化合物与式(IX)化合物反应，然后进行合适的脱保护步骤以除去Q¹：

(IX)
在式(IX)中，R⁷如上定义且Q¹为合适的保护基团(如乙酰基)。
式(IX)化合物是市售的或可以从相应的羧酸，使用羧酸转化为醛的常用方法而制备。参见，例如，M.B.Smith & J.March，Advanced Organic Chemisty，5th Edition，J Wiley & Sons，2001，Chapter 19，p.1506-1604。
制备式(II)化合物(其中A表示任选被取代的1，4-亚苯基，任选被取代的2，5-吡啶基或任选被取代的3，6-吡啶基)的另一种方法包括在上述适于还原胺化的条件下，使上述定义的式(VI)化合物与式(X)化合物反应：

在式(X)中，A和R⁴如上定义。
式(X)化合物(其中A表示任选被取代的1，4-亚苯基或任选被取代的2，5-吡啶基，且R⁴如上定义)可以通过在合适的过渡金属体系如三(二亚苄基丙酮)合二钯(0)/xantphos存在下，在合适的碱如碳酸铯存在下，且在合适的溶剂如二噁烷存在下，使式(XI)化合物与式R⁴NHQ¹化合物的反应，然后进行合适的脱保护步骤而制备：

在式(XI)中，A表示任选被取代的1，4-亚苯基或任选被取代的2，5-吡啶基，且L³如上定义，在式R⁴NHQ¹中，R⁴如上定义，且Q¹为合适的氮保护基团，如叔丁氧基羰基(Boc)。
式(XI)化合物(其中A表示任选被取代的1，4-亚苯基或任选被取代的2，5-吡啶基)是市售的或可以通过式(XII)化合物与合适的还原剂如二异丁基氢化铝，在合适的溶剂如甲苯中反应而制备：

在式(XII)中，A表示任选被取代的1，4-亚苯基或任选被取代的2，5-吡啶基，且L³如上定义。
式(X)化合物(其中A表示任选被取代的3，6-吡啶基)可以通过式(XIII)化合物与合适的还原剂如二异丁基氢化铝，在合适的溶剂如甲苯中反应而制备：

在式(XIII)中，R⁴如上定义，且R⁷表示吡啶部分中的任选取代基。
式(XIII)化合物(其中R⁴如上定义，且R⁷表示对吡啶部分用C_(1-4)烷基或C_(1-4)烷氧基任选取代)可以通过式(XIV)化合物与式R⁴NH₂化合物，在合适的溶剂如THF中，且任选在合适的碱存在下反应而制备：

在式(XIV)中，R⁷表示对于吡啶部分用C_(1-4)烷基或C_(1-4)烷氧基任选取代，且L³如上定义。
制备式(III)化合物的另一种方法(其中A表示任选被取代的3，6-吡啶基)包括在上述适于还原胺化的条件下使上述定义的式(VI)化合物与式(XV)化合物反应：

在式(XV)中，R⁷表示对于吡啶部分用C_(1-4)烷基或C_(1-4)烷氧基任选取代。
式(XV)化合物可以通过式(XVI)化合物与合适的还原剂如镍/铝合金，在甲酸存在下且在合适的溶剂如水中反应而制备：

在式(XVI)中，R⁷表示对于吡啶部分用C_(1-4)烷基或C_(1-4)烷氧基任选取代，且Q¹为合适的保护基团如三氟乙酰基。
式(XVI)化合物可以通过式(XVII)化合物与氰化铜(I)在合适的溶剂如DMF中反应，然后通过合适的氨基保护而制备：

在式(XVII)中，R⁷表示对于吡啶部分用C_(1-4)烷基或C_(1-4)烷氧基的任选取代。
当Q¹为三氟乙酰基时，所述保护可以使用三氟乙酸酐，在合适的碱如2，6-二甲基吡啶存在下且在合适的溶剂如二氯甲烷中进行。
式(V)、(VI)、(XII)、(XIV)和(XVII)化合物是市售的，描述于文献中或可以通过类似或相似方法制备。
式R³-Y-B-C(＝O)-OH化合物是市售的，描述于文献中，或可以通过类似或相似方法制备(例如，参见WO2003/068749、WO2004/072069、WO2005/016928、WO2003/027061、WO2005/016915、WO1997/025309、WO2005/047278、WO2002/016356、WO2007/041634和WO2005/073210)。
式L³-B-C(＝O)-L¹化合物是市售的，描述于文献中，或可以通过类似或相似方法制备。
本领域技术人员会理解，在上述方法中可能需要保护某些活性取代基。标准的保护和脱保护技术，可以按Greene T.W.& Wuts P.G.M.，Protectivegroups in organic synthesis，2^nd Edition，New York，Wiley(1991)中所述。例如，伯胺和仲胺可以保护为邻苯二甲酰亚胺、三氟乙酰基、苄基、叔丁氧基羰基、苄氧基羰基或三苯甲基衍生物。羧酸基团可以保护为酯。醛或酮可以保护为缩醛、缩酮、硫代缩醛或硫代缩酮。这些基团的脱保护使用本领域公知的常规方法实现。例如，保护基团如叔丁氧基羰基可以使用酸如盐酸或三氟乙酸，在合适的溶剂如二氯甲烷、乙醚、1，4-二噁烷、异丙醇或其混合物中除去。
盐可以通过与适合酸或酸衍生物的反应常规地制备。
本发明也提供了上述的式(II)和(VIII)化合物，其中R¹、R²、R⁴、A和B如式(I)的定义，Q为氢或合适的保护基团如叔丁氧基羰基(BOC)或苄氧基羰基(CBZ)，且L³为离去基团如卤素或三氟甲基磺酰氧基。这些化合物用作制备本发明化合物的中间体。
如本文所述，本发明化合物对于GPR38的作用和功效可以通过对人克隆受体进行的FLIPR测试而测定。使用本文所述的FLIPR(FluorometricImaging Plate Reader)功能测试，式(I)化合物已经证明了在GPR38受体的部分或全部激动活性(agonist activtiy)。
因此，式(I)化合物及其药学上可接受的盐用于治疗通过GPR38受体介导的病症或疾病。尤其是，式(I)化合物及其药学上可接受的盐用于治疗一些胃肠道疾病，如胃食管反流疾病(gastroesophageal reflux disorder)、机能性消化不良(functional dyspepsia)、肠易激综合征、便秘、假性肠梗塞(intestinalpseudo-obstruction)、手术或其它操作后麻痹性肠梗阻(paralytic ileus)、呕吐、多种疾病如糖尿病和/或给予其它药物或在肠内进食病人中引起的胃潴留(gastric stasis)或运动不足(hypomotility)、节段性回肠炎、结肠炎、伴随严重疾病如癌症和/或其治疗的恶病质，和其它疾病如失禁(下文中称作“本发明的疾病”)。
应该理解本文所用的＂治疗＂包括预防以及减轻产生的症状。
因此，本发明也提供了式(I)化合物及其药学上可接受的盐，其用作治疗物质，尤其用于治疗通过GPR38受体介导的病症或疾病。尤其是，本发明提供了式(I)化合物及其药学上可接受的盐，其用作治疗下述疾病的治疗物质，所述疾病为胃肠道疾病如胃食管反流疾病、机能性消化不良、肠易激综合征、便秘、假性肠梗塞、手术或其它操作后麻痹性肠梗阻、呕吐、多种疾病如糖尿病和/或给予其它药物或在肠内进食病人中引起的胃潴留或运动不足、节段性回肠炎、结肠炎、伴随严重疾病如癌症和/或其治疗的恶病质，和其它疾病如失禁。
本发明还提供了治疗哺乳动物(包括人)中可通过GPR38受体介导的病症或疾病的方法，该方法包括向患者给药治疗安全且有效量的式(I)化合物或其药学上可接受的盐。
在另一方面，本发明提供了式(I)化合物及其药学上可接受的盐在制备用于治疗通过GPR38受体介导的病症或疾病的药物中的用途。
为了在治疗中使用式(I)化合物及其药学上可接受的盐，通常将它们配制成符合标准药学实践的药物组合物。本发明也提供了药物组合物，其包含式(I)化合物或其药学上可接受的盐，和药学上可接受的载体或赋形剂。
在另一方面，本发明提供了制备药物组合物的方法，该方法包括将式(I)化合物或其药学上可接受的盐与药学上可接受的载体或赋形剂混合。
本发明的药物组合物(其可以通过混合而制备，其适合在环境温度和大气压下进行)通常适合口服、胃肠外或直肠给药，且这样可以制成片剂、胶囊、口服液体制剂、粉末、颗粒、锭剂、重构粉末、注射或输注溶液或混悬剂或栓剂形式。可口服给药的组合物通常是优选的。
口服给药的片剂和胶囊可以为单位计量形式，且可以含有常规的赋形剂，如粘合剂(如预凝胶玉米淀粉，聚乙烯吡咯烷酮或羟基丙基甲基纤维素)；填充剂(如乳糖、微晶纤维素或磷酸氢钙)；压片润滑剂(如硬脂酸镁、滑石或二氧化硅)；崩解剂(如土豆淀粉或淀粉羟乙酸钠)；和可接受的润湿剂(如十二烷基硫酸钠)。片剂可以根据常规药学实践中公知的方法包衣。
口服液体制剂可以为，例如，水性或油性混悬液、溶液、乳液、糖浆或酏剂，或可以为使用前用水或其它合适的溶媒重构的干燥产品。这些液体制剂可以含有常规添加剂，如助悬剂(如山梨醇糖浆、纤维素衍生物或氢化的可食用脂肪)、乳化剂(如卵磷脂或阿拉伯胶)、非水性溶媒(其可以包括可食用油如杏仁油、油性酯、乙醇或分馏植物油)、防腐剂(如，甲基或丙基-对羟基苯甲酸酯或山梨酸)，且如果需要，常规香味剂或着色剂，视需要，缓冲盐和甜味剂。可以适当地配制口服给药的制剂以实现控释活性化合物或其药学上可接受的盐的释放。
对于胃肠外给药，使用式(I)化合物或其药学上可接受的盐和无菌溶媒制备流体单位剂型。注射制剂可以以单位剂型存在(例如在安瓿)或多剂量的形式存在，所述注射制剂使用式(I)化合物或其药学上可接受的盐和无菌溶媒，任选添加防腐剂。组合物可以采用在油性或水性溶媒中的混悬液、溶液或乳液形式，且可以含有配制试剂如助悬剂、稳定剂和/或分散剂。或者，活性成分可以为粉末形式，其在使用前用合适的溶媒(如无菌无热原水)重构。化合物，根据所用的溶媒和浓度，可以混悬或溶解在溶媒中。在制备溶液中，为了注射可以将化合物溶解，并过滤除菌，然后填充到合适的小瓶或安瓿中并密封。有利地，将助剂如局麻药、防腐剂和缓冲剂溶解在溶媒中。为了增加溶解度，在装入小瓶和真空下除去水后，可以将组合物冻干。以基本上相同的方式制备胃肠外混悬剂，除了将化合物混悬到溶媒而不是溶解到其中，且不能通过过滤除菌。通过将化合物与环氧乙烷接触而除菌，然后混悬到无菌溶媒中。有利地，在组合物中包括表面活性剂或润湿剂以促进化合物的均匀分布。
洗液可以用水性或油性基质配制，且通常也将含有一种或多种乳化剂、稳定剂、分散剂、助悬剂、增稠剂或着色剂。滴剂可以用水性或非水性基质配制，也包含一种或多种分散剂、稳定剂、助溶剂或助悬剂。它们也可以含有防腐剂。
式(I)化合物或其药学上可接受的盐也可以配制为直肠组合物，如栓剂或保留灌肠剂(retention enemas)，如含有常规的栓剂基质如可可脂或其它甘油酯。
式(I)化合物或药学上可接受的盐也可以配制成储存(depot)制剂。这些长效制剂可以通过植入给药(例如，皮下或肌内)或通过肌内注射给药。因此，例如，式(I)化合物或药学上可接受的盐可以用合适的聚合的或疏水的材料(例如在可接受的油中的乳剂)或离子交换树脂制备，或作为微溶的衍生物，例如，作为微溶的盐。
对于臂内给药，式(I)化合物或其药学上可接受的盐可以通过计量或单一剂量设备配制为用于给药的溶液，或使用合适的递送设备与用于给药的适合载体混合为粉末。因此，式(I)化合物或其药学上可接受的盐可以配制为用于口服、含服、胃肠外、局部(包括眼用和鼻用)、储存或直肠给药，或配制为适合通过吸入或或吹入(通过口或鼻)给药的形式。
式(I)化合物及其药学上可接受的盐可以配制为用于局部给药的软膏、乳膏、凝胶、洗液、阴道栓剂、气雾剂或滴剂(如眼、耳或鼻滴剂)形式。软膏和乳膏可以，例如，用水性或油性基质配制，并添加合适的增稠剂和/或凝胶剂。用于眼部给药的软膏可以使用无菌成分以无菌方式制备。
根据给药方法，组合物可以含有0.1％-99％重量，优选10-60％重量的活性物质。在治疗上述疾病中使用的化合物的剂量将以通常的方式根据疾病的严重程度、患者体重和其它类似因素改变。然而，通常合适的单位剂量可以为0.05-1000mg，更适合地为1.0-500mg或1.0-200mg，且该单位剂量可以每天给药一次以上，例如每次2或3次。
式(I)化合物及其药学上可接受的盐可以用于组合制剂中。例如，式(I)化合物及其药学上可接受的盐可以用于与下述化合物组合：一种或多种具有降低胃酸活性的化合物；一种或多种具有降低胃-食管反流活性的化合物；一种或多种具有降低食管-胃刺激或炎症活性的化合物，尤其当用于减轻侵蚀性或非侵蚀性食管炎时；一种或多种具有止痛活性的化合物；和/或一种或多种对运动性(motility)和疼痛具有混合活性的化合物。
具有降低胃酸活性的化合物的实例包括H2受体拮抗剂、酸泵拮抗剂和质子泵抑制剂。具有降低胃-食管反流活性的化合物的实例包括GABA-B的激动剂。具有止痛活性的化合物的实例包括在Neurokinin受体(NK1，2，3)、TRPV1和钠通道具有活性的化合物。对运动性和疼痛具有混合活性的化合物的实例包括CRF2拮抗剂、5-HT3拮抗剂或奥曲肽或其它在sst2受体有活性的分子。
本说明书中引用的所有的出版物，包括但不限于专利和专利申请，均作为参考并入本文中，如同每篇单独的出版物都具体地和单独地作为参考并入本文，如同在本文中完全地引用。
下述说明和实施例说明了本发明化合物的制备。
分析LCMS体系的条件、硬件和软件
(I)
硬件
Agilent 1100梯度泵
Agilent 1100自动进样器
Agilent 1100DAD检测器
Agilent 1100脱气器
Agilent 1100烘箱
Agilent 1100 控制器
Waters ZQ 质谱仪
Sedere Sedex 55，Sedere Sedex 85或Polymer Labs PL-ELS-2100
软件
Waters MassLynx版本4.0SP2
柱
所用的柱为Waters Atlantis，大小为4.6mm x 50mm。固定相粒径为3μm。
溶剂
A：含水溶剂＝水+0.05％甲酸
B：有机溶剂＝乙腈+0.05％甲酸
方法
所用的一般方法为5分钟的运行时间。
时间/分钟   ％B
0           3
0.1         3
4           97
4.8         97
4.9         3
5.0         3
流速
上述方法的流速为3mL/分钟
(II)
硬件
Waters Acquity Binary溶剂管理器
Waters Acquity样品管理器
Waters Acquity PDA
Waters ZQ质谱仪
Sedere Sedex 85，Sedere Sedex 75，Polymer Labs PL-ELS-2100
软件
Waters MassLynx版本4.1
柱
所用的柱为Waters Acquity BEH UPLC C18，其大小为2.1mm x 50mm。固定相粒径为1.7μm。
溶剂
A：含水溶剂＝水+0.05％甲酸
B：有机溶剂＝乙腈+0.05％甲酸
弱极性洗＝1:1 甲醇:水
强极性洗＝水
方法
所用的一般方法为2分钟运行时间。
 

时间/分钟％B030.131.5971.9972.03
·上述方法的流速为1ml/分钟。
·对于一般方法的注射体积为0.5ul
·柱温为40度
·UV检测范围为220-330nm
Open Access Mass Directed Auto Prep体系(MDAP)的条件
硬件
Open Access Mass Directed Prep仪器由下述设备组成：
1 Waters 600梯度泵
1 Waters 2767注射/控制器
1 Waters试剂管理器
1 MicroMass ZQ质谱仪
1 Gilson Aspec-废料控制器
1 Gilson 115后馏分UV检测器
1 计算器系统
软件
MicroMass MassLynx v4.0
柱
所用的柱通常为Supelco LCABZ++柱，其大小为20mm内径x100mm长。固定相粒径为5μm。
溶剂
A：.含水溶剂＝水+0.1％甲酸
B：.有机溶剂＝MeCN:水 95:5+0.05％甲酸
后处理溶剂＝MeOH:水 80:20+50mMol乙酸铵
针冲洗溶剂＝MeOH:水:DMSO 80:10:10
方法
根据所关注的化合物的保留时间，可以使用5种方法中的一种。
所有的为15-分钟运行时间，其包含10-分钟梯度，然后5-分钟柱冲洗和再平衡步骤。
MDP 1.5-2.2＝0-30％B
MDP 2.0-2.8＝5-30％B
MDP 2.5-3.0＝15-55％B
MDP 2.8-4.0＝30-80％B
MDP 3.8-5.5＝50-90％B
流速
所有的上述方法的流速为20mL/分钟。
(II)
硬件
Waters 2525二元梯度组件
Waters 515后处理泵
Waters泵控制组件
Waters 2767注射控制器
Waters柱流控管理器
Waters 2996二极管阵列检测器
Waters ZQ质谱仪
Gilson 202馏分控制器
Gilson Aspec废料控制器
软件
Waters MassLynx版本4SP2
柱
所用的柱为Waters Atlantis，其大小为19mm x 100mm(小规模)和30mmx 100mm(大规模)。固定相粒径为5μm。
溶剂
A：含水溶剂＝水+0.1％甲酸
B：有机溶剂＝乙腈+0.1％甲酸
后处理溶剂＝甲醇:水 80:20
针冲洗溶剂＝甲醇
方法
根据所关注化合物的分析保留时间，有5种采用的方法。它们为13.5-分钟运行时间，其包含10-分钟梯度，然后3.5分钟柱冲洗和再平衡步骤。
大/小规模1.0-1.5＝5-30％B
大/小规模1.5-2.2＝15-55％B
大/小规模2.2-2.9＝30-85％B
大/小规模2.9-3.6＝50-99％B
大/小规模3.6-5.0＝80-99％B(在6分钟中，然后7.5分钟冲洗和再平衡)
流速
所有上述MDAP方法的流速为20mls/分钟(小规模)或40mls/分钟(大规模)。
浅梯度(shallow gradients)
大规模1.5-2.3分钟＝13-29％ B
大规模1.9-2.3分钟＝25-41％ B
大规模2.3-2.6分钟＝37-53％ B
大规模2.6-3.1分钟＝49-65％ B
大规模3.1-3.6分钟＝61-77％ B
NMR所用的条件
硬件
Bruker 400MHz Ultrashield
Bruker B-ACS60自动进样器
Bruker Advance 400控制台
Bruker DPX250
Bruker AVANCE 500
Bruker DRX600
软件
User interface-NMR Kiosk
控制软件-XWin NMR版本3.0
色谱仪
除另有说明，所有柱色谱使用二氧化硅柱进行。
缩写
BINAP-       (±)-2，2’-双(二苯基膦)-1，1’-联萘
BOC-         叔丁氧基羰基
tBuOH-       叔丁醇
CCl₄-        四氯化碳
CDCl₃-       氘代氯仿
CuCl-        氯化铜(I)
1，2-DCE-    1，2-二氯乙烷，
DCM-         二氯甲烷
Dibal-H-     二-异丁基氢化铝
DME-         1，2-二甲氧基乙烷
DMF-         N，N-二甲基甲酰胺
DMSO-        二甲基亚砜
DMSO-d₆-     二甲基亚砜-d6
Et₂O-      乙醚
EtOAc-     乙酸乙酯
EtOH-      乙醇
HCl-       盐酸，氢氯酸
HOBt-      1-羟基苯并三唑
H₂SO₄-     硫酸
KOH-       氢氧化钾
MeOH-      甲醇
MgSO₄-     硫酸镁
MnO₂-      二氧化锰
NaCl-      氯化钠
NaHCO₃-    碳酸氢钠
NaIO₄-     高碘酸钠
NaOH-      氢氧化钠
Na₂SO₄-    硫酸钠
NH₃-       氨
Pd/C-      钯/碳
PS-        三羟甲基氨基甲烷(Trisamine)
Pt/C-      铂/碳
SCX-       强阳离子交换
TFA-       三氟乙酸
THF-       四氢呋喃
THMD-      2，2，6，6-四甲基3，5-庚二酮
Xantphos-  4，5-双(二苯基膦)-9，9-二甲基呫吨
描述1
(2S)-2-甲基-4-[(4-硝基苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D1)

将4-硝基苯甲醛(15.1g，0.1mol)、(2S)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯盐酸盐(21.3g，0.09mol)、三乙胺(15mL，0.108mol)和三(乙酰氧基)硼氢化钠(42.4g，0.2mol)在1，2-DCE(500mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。加入饱和的NaHCO₃水溶液(200mL)，并搅拌混合物20-30分钟。分离各相，将水相用DCM洗涤。合并的有机相用盐水洗涤，干燥并浓缩。柱色谱用0-20％EtOAc/己烷洗脱，得到标题化合物，为淡黄色油状物，静置结晶(25.61g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.19(2H，d)，7.53(2H，d)，4.21(1H，br.s)，3.83(1H，d)，3.62(1H，d)，3.50(1H，d)，3.13(1H，td)，2.74(1H，m)，2.54(1H，m)，2.20(1H，dd)，2.08(1H，m)，1.46(9H，s)，1.25(3H，d)。
描述1：其它方法(A)
(2S)-2-甲基-4-[(4-硝基苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D1)
将4-硝基苯甲醛(30.22g，0.2mol)、(2S)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1-二甲基乙基酯(40.06g，0.2mol)和三(乙酰氧基)硼氢化钠(85g，0.4mol)在1，2-DCE(1L)中的混合物在室温下搅拌过周末。经～2小时将反应混合物用NaHCO₃溶液(400mL)分批处理。再30分钟后，分离有机层，用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粘稠的淡黄色油状物。通过柱色谱用0％，10％然后20％ EtOAc/己烷洗脱来纯化，得到标题化合物，为黄色结晶固体(61.1g)。
描述2
(2S)-4-[(4-氨基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D2)

向在MeOH(100mL)中的(2S)-2-甲基-4-[(4-硝基苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D1)(4.62g，13.78mmol)和KOH(7.79g，138.8mmol)中加入湿的(50％w/w水)10％ Pd/C催化剂(4g)，将混合物在室温和大气压下氢化40分钟。过滤除去催化剂且滤液在真空中浓缩。将残余物在DCM和水之间分配，将水层进一步用DCM(x2)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到标题化合物，为无色胶状物(4.14g)，其没有进一步纯化就用于下一步骤。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.10(2H，d)，6.64(2H，d)，4.16(1H，br.s)，3.78(1H，d)，3.62(2H，s)，3.42(1H，d)，3.28(1H，d)，3.08(1H，td)，2.74(1H，m)，2.58(1H，m)，2.06(1H，dd)，1.95(1H，m)，1.46(9H，s)，1.21(3H，d)。
描述2：其它方法(A)
(2S)-4-[(4-氨基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D2)
于80℃向在MeOH(150mL)和水(150mL)中的(2S)-2-甲基-4-[(4-硝基苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D1)(15g，44.8mol)中加入氯化铵(11.9g，0.224mol)和铁粉(7.5g，0.134mol)，并剧烈搅拌。反应于80℃搅拌2小时，然后趁热通过过滤，且滤饼再用DCM洗涤。分离滤液层，将水层用DCM(x3)洗涤。合并DCM层，干燥(Na₂SO₄)并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用20-70％ EtOAc/石油醚洗脱，得到标题化合物，为白色固体(9.46g)。
描述2：其它方法(B)
(2S)-4-[(4-氨基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D2)
在室温和大气压下，将(2S)-2-甲基-4-[(4-硝基苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D1)(21.62g，0.0644mol)、三乙胺(40mL)和5％ Pt/C催化剂(21g，56％ w/w水)在MeOH(400mL)中的混合物氢化过夜。过滤除去催化剂，且再用MeOH洗涤。浓缩滤液，再溶于DCM(200mL)中，并用2M的NaOH溶液洗涤。水相用DCM(x2，100mL)再次萃取，且合并所有有机相，用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到标题化合物(19.53g)，其没有进一步纯化就用于下一步骤。
描述3
(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D3)

于50℃氩气氛下，向在无水MeOH(80mL)中的(2S)-4-[(4-氨基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D2)(4.14g，13.56mmol)中加入多聚甲醛(paraformaldehyde)(1.22g，40.67mmol)和甲醇钠(3.65g，67.78mmol)。搅拌混合物～24小时，然后分批加入硼氢化钠(1.54g，40.67mmol)，且于50℃搅拌反应过夜。冷却至室温后，加入丙酮(10mL)，且在真空除去溶剂。将残余物在DCM和水之间分配，将有机相用盐水洗涤，然后干燥并浓缩。经柱色谱得到标题化合物，为无色结晶固体(3.73g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.13(2H，d)，6.57(2H，d)，4.16(1H，br.s)，3.78(1H，d)，3.67(1H，br.s)，3.42(1H，d)，3.30(1H，d)，3.08(1H，td)，2.83(3H，s)，2.75(1H，m)，2.59(1H，m)，2.06(1H，dd)，1.94(1H，m)，1.45(9H，s)，1.21(3H，d)。
描述3：其它方法(A)
(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D3)
在氩气氛下，将(2S)-4-[(4-氨基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D2)(7.45g，24.43mmol)、多聚甲醛(2.202g，73.28mmol)和甲醇钠(6.597g，122.13mmol)在甲醇(150mL)中的混合物在50℃下加热过周末。冷却后，加入硼氢化钠(1.848g，48.85mmol)，且于50℃加热反应混合物1小时，然后冷却至室温。加入丙酮直到观察不到气泡，然后浓缩混合物。将残余物在DCM和水之间分配，将水相用DCM再次萃取。合并的有机相用MeOH(约20mL)稀释以促进溶解，干燥并浓缩，得到标题化合物，为灰白色固体(7.77g)。
描述3：其它方法(B)
(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D3)
在氩气氛和在室温下，将在无水MeOH(300mL)中的(2S)-4-[(4-氨基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D2)(19.53g，0.0639mol)用多聚甲醛(5.76g，0.1918mol)和甲醇钠(17.27g，0.3197mol)处理。反应混合物于50℃加热，搅拌过夜，然后冷却至室温。分批加入硼氢化钠(7.26g，0.1918mmol)，然后将反应混合物再加热至50℃，并搅拌2天。反应混合物冷却至室温，并再搅拌24小时，然后浓缩，并再溶解于DCM(200mL)中。分批加入饱和的NaHCO₃水溶液(200mL)，同时搅拌，且加入完成后，混合物在室温下再搅拌0.5小时。分离DCM相，用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩，得到黄色油状物，将其通过柱色谱纯化，用0％、10％然后20％ EtOAc/己烷洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物，静置结晶(16.7g)。
描述4
(2R)-2-甲基-4-[(4-硝基苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D4)

使用与描述1中对于D1所述相似的方法，由4-硝基苯甲醛和(2R)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯盐酸盐制备标题化合物。MS(ES⁺)：280.2，236.3，没有观察到分子离子(MH⁺)。
描述5
(2R)-4-[(4-氨基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D5)

使用与描述2中对于D2所述相似的方法(除了用2M的KOH水溶液代替固体KOH，和反应时间为40分钟外)，由(2R)-2-甲基-4-[(4-硝基苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D4)制备标题化合物。MS(ES)：MH⁺ 306.2，MNa⁺328.2。
描述6
(2R)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D6)

使用与描述3A中对于D3所述相似的方法(除加入硼氢化钠前，反应在50℃加热48小时外)，由(2R)-4-[(4-氨基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D5)制备标题化合物。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.13(2H，d)，6.57(2H，d)，4.16(1H，m)，3.78(1H，d)，3.42(1H，d)，3.29(1H，d)，3.08(1H，td)，2.83(3H，s)，2.75(1H，m)，2.59(1H，m)，2.07(1H，dd)，1.94(1H，m)，1.45(9H，s)，1.21(3H，d)。MS(ES⁺)：342.3(MNa⁺)，220.2，没有观察到分子离子(MH⁺)。
描述7
(2R，6S)-2，6-二甲基-4-[(4-硝基苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D7)
使用对于D1所述相似的方法制备标题化合物。
描述7：其它方法(A)
(2R，6S)-2，6-二甲基-4-[(4-硝基苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D7)

将(3R，5S)-1-[(4-硝基苯基)甲基]-3，5-二甲基哌嗪(D82)(4.278g，17.17mmol)溶解于二噁烷(180mL)中，并加入Boc酸酐(7.494g，34.34mmol)和饱和的NaHCO₃水溶液(60mL)。混合物在室温下搅拌过夜；过滤混合物，且滤饼用DCM洗涤。真空下浓缩滤液，且将残余物在DCM和水之间分配。分离DCM层，将水层用DCM(x2)萃取。合并DCM层并干燥，得到黄色油状物(9.614g)。通过SCX柱纯化混合物，得到黄色油状物(4.787g)，其为标题化合物和未反应的D82的混合物。将其全部溶于DCM(60mL)中，并加入三乙胺(2.936mL)，然后加入Boc酸酐(4.612g，21.13mmol)。混合物在室温下在氩气下搅拌过夜。加入PS (6g)，并搅拌混合物30分钟；滤出聚合物，且除去溶剂得到黄色油状物(6.5621g)。通过柱色谱用0-50％ Et₂O/石油醚洗脱来纯化，得到淡黄色固体(5.245g)。将该固体溶于MeOH中，并通过SCX柱(70g)，其用MeOH冲洗，然后用2M NH₃的MeOH溶液冲洗。除去溶剂得到黄色固体(3.833g)，将其通过柱色谱进一步纯化。用0-50％ Et₂O/石油醚洗脱，得到标题化合物，为带白色膏状固体(2.624g)。MS(ES⁺)：294.3，250.3，没有观察到分子离子(MH⁺)。
描述8
(2R，6S)-4-[(4-氨基苯基)甲基]-2，6-二甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D8)

向加热至80℃的(2R，6S)-2，6-二甲基-4-[(4-硝基苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D7)(2.62g，7.53mmol)在MeOH(25mL)和水(25mL)中的溶液中加入铁粉(1.26g，22.54mmol)和氯化铵(2.01g，37.58mmol)。反应于80℃剧烈搅拌1.5小时，然后通过过滤除去铁粉残余物。浓缩滤液，并将残余物在DCM和水之间分配。水层进一步用DCM(x2)萃取，且将合并的有机相干燥并浓缩，得到粗产物，为黄色泡沫(2.01g)。通过用0-100％ Et₂O/石油醚洗脱的柱色谱，得到标题化合物(1.694g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.12(2H，d)，6.64(2H，d)，4.05(2H，m)，3.64(2H，br s)，3.36(2H，s)，2.59(2h，d)，2.06(2H，dd)，1.46(9H，s)，1.27(6H，d)。MS(ES)：MH⁺ 320.3，MNa⁺342.3。
描述9
(2R，6S)-2，6-二甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D9)

使用与描述3A中对于D3所述相似的方法(除加入硼氢化钠前，反应于50℃加热48小时，然后加入后加热1小时外)，由(2R，6S)-4-[(4-氨基苯基)甲基]-2，6-二甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D8)制备标题化合物。进一步加入多聚甲醛(1当量)和甲醇钠(1当量)；反应于50℃加热12小时；进一步加入硼氢化钠(1当量)，且反应于50℃加热1小时。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.16(2H，d)，6.57(2H，d)，4.05(2H，m)，3.70(1H，br s)，3.36(2H，s)，2.82(3H，s)，2.59(2H，d)，2.06(2H，dd)，1.49(9H，s)，1.27(6H，d)。MS(ES⁺)：356.3(MNa⁺)，234.3，没有观察到分子离子(MH⁺)。
描述10
4-[(4-硝基苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D10)

使用与描述1A中对于D1所述相似的方法(除产物通过柱色谱纯化，然后通过SCX柱用MeOH然后用2M NH₃的MeOH溶液洗脱来纯化外)，由4-硝基苯甲醛和1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯制备标题化合物。MS(ES⁺)：266.1，222.2，没有观察到分子离子(MH⁺)。
描述11
4-[(4-氨基苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D11)

使用与描述8中对于D8所述相似的方法(除不需要柱色谱外)，由D10制备标题化合物。MS(ES)：MH⁺ 292.1，MNa⁺314.2。
描述12
4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D12)

使用与描述3A中对于D3所述相似的方法(除加入硼氢化钠前，反应于50℃加热过夜，且不需要柱色谱外)，由D11制备标题化合物。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.11(2H，d)，6.57(2H，d)，3.69(1H，br.s)，3.40(6H，m)，2.83(3H，s)，2.36(4H，m)，1.45(9H，s)[对于不准确的参照TMS，在光谱0.58ppm处校正δ]。MS(ES⁺)：206.2，没有观察到分子离子(MH⁺)。
描述13
6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶甲酸乙酯(D13)

在氩气下，将氢化钠(0.653g，60％在矿物油中，16.338mmol)悬浮于DMF(10mL)中，然后分两批加入4-氟苯酚(0.915g，8.169mmol)。搅拌混合物20分钟，然后加入6-氯-3-吡啶甲酸乙酯(1.515g，8.169mmol)，同时再加入DMF(4mL)以促进溶解。将混合物加热至80℃，保持2.5小时。将反应混合物冷却至室温，并加入水(30mL)。将溶液用2M的HCl酸化至pH3，并用乙酸乙酯(x3)萃取。将合并的乙酸乙酯层干燥并浓缩，得到褐色油状物。将粗产物通过色谱纯化。用0-25％ Et₂O/石油醚梯度洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(0.284g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.81(1H，dd)，8.28(1H，dd)，7.11(4H，m)，6.95(1H，d)，4.37(2H，q)，1.38(3H，t)。MS(ES)：MH⁺ 262.2。
描述14
6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶甲酸(D14)

将6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶甲酸乙酯(D13)(0.275g，1.054mmol)溶于1，4-二噁烷(5mL)中，并将氢氧化锂(0.050g，2.109mmol)溶于水中。合并两种溶液，且在室温下搅拌2小时。将混合物用2M的HCl酸化至pH5，并浓缩。将残余物溶于乙酸乙酯，干燥并浓缩，得到标题化合物，为膏状/白色固体(0.233g)。δ_H(DMSO-d₆，400MHz)13.20(1H，bs)，8.65(1H，dd)，8.28(1H，dd)，7.26(4H，m)，7.12(1H，d)。MS(ES)：MH⁺234.2，(M-H⁺)232.1。
描述14：其它方法(A)
6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶甲酸(D14)
搅拌4-氟苯酚(96.8g)、6-氯吡啶-3-甲酸甲酯(30g)和碳酸铯(285.3g)在DMSO(875mL)中的混合物，并经1.75小时加热至130℃，然后冷却过夜。经1.5小时，将反应混合物再加热至～150℃，在该温度保持～1小时，然后冷却至～40℃，并倒入水(4L)中。水溶液用乙醚(1.0L)萃取，然后通过加入2M的HCl调节pH7-8。溶液再用乙醚(2 x 1.0L)萃取，然后通过加入2M的HCl调节pH2，得到固体沉淀。通过过滤收集沉淀，用水洗涤，并于40℃真空中干燥过夜，得到标题化合物，为米色/粉色固体(36.7g)。
描述15
(2R，6S)-4-({4-[{[6-(4-氟苯基)-2-甲基-3-吡啶基]羰基}(甲基)氨基]苯基}甲基)-2，6-二甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D15)

步骤1：将6-(4-氟苯基)-2-甲基-3-吡啶甲酸(0.2g，0.866mol)悬浮于DCM(14mL)中，并加入DMF(1滴)。混合物在冰浴中冷却，并经5分钟分批加入草酰氯(0.226mL，2.598mmol)。将混合物加热至40℃，保持90分钟。使混合物冷却，且真空下除去溶剂，得到6-(4-氟苯基)-2-甲基-3-吡啶甲酰氯，为黄色固体(0.270g)，其直接用于步骤2。
步骤2：将来自步骤1的酰氯溶于DCM(3mL)中，并加入到(2R，6S)-2，6-二甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D9)(0.23g，0.693mmol)在DCM(2mL)中的溶液中。加入三乙胺(0.193mL，1.386mmol)，且将混合物在室温下搅拌过夜。反应混合物用DCM稀释并用水洗涤。水层用DCM(x2)再次萃取，且将合并的有机相干燥并浓缩。粗产物通过柱色谱纯化。用0-50％ EtOAc/石油醚洗脱，得到标题化合物，为白色泡沫(0.331g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.89(2H，m)，7.36(1H，m)，7.26(1H，m)，7.19(2H，m)，7.10(2H，t)，6.99(2H，m)，4.00(2H，m)，3.53(3H，s)，3.34(2H，s)，2.58(3H，s)，2.44(2H，d)，2.05(2H，m)，1.44(9H，s)，1.18(6H，d)。MS(ES)：MH⁺5473。
描述16
(2S)-4-({4-[({6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D16)

步骤1：将6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶甲酸(D14)(0.232g，0.994mmol)溶于1，4-二噁烷(6mL)中，并滴加亚硫酰氯(0.363mL，4.972mmol)。加热回流混合物3.5小时，然后冷却并在真空中浓缩。将DCM加入到残余物中，然后再浓缩，得到6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶甲酰氯，为黄色油状物(0.252g)，其直接用于步骤2中。
步骤2：将来自步骤1的酰氯溶于DCM(3mL)中，并加入到(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D3)(0.288g，0.904mmol)在DCM(3mL)中的溶液中。加入三乙胺(0.251mL，1.808mmol)，将混合物在室温下搅拌过夜。反应混合物用DCM稀释并用水洗涤。水层用DCM(x2)萃取，且将合并的有机层干燥并浓缩。粗产物通过柱色谱纯化。用0-50％ EtOAc/石油醚梯度洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(0.518g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.07(1H，m)，7.65(1H，dd)，7.24(2H，d)，7.03(6H，m)，6.70(1H，d)，4.18(1H，br.s)，3.80(1H，d)，3.48(3H，s)，3.46(1H，d)，3.34(1H，d)，3.08(1H，td)，2.70(1H，d)，2.50(1H，d)，2.10(1H，dd)，2.00(1H，m)，1.46(9H，s)，1.20(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 535.3。
描述16：其它方法(A)
(2S)-4-({4-[({6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D16)
将6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶甲酸(D14)(20.1g，0.0862mol)溶于1，4-二噁烷(400mL)中，并小心加入亚硫酰氯(28.5mL，4.972mmol)。将混合物缓慢加热至回流，并搅拌4.5小时。冷却反应混合物并浓缩。加入二噁烷(200mL)，且将溶液再浓缩(x2)得到粗制的6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶甲酰氯，其再溶解于DCM(250mL)中。将其滴加至(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D3)(25g，0.0783mol，根据方法D3B以3个不同的批次制备，并固化)和三乙胺(14mL，0.1004mol)在DCM(250mL)中的溶液中，在冰/水浴中冷却30分钟。将反应混合物温热至室温并搅拌～15小时。反应混合物用2M的NaOH溶液(2 x 200mL)和盐水洗涤，然后经MgSO₄干燥，在真空中浓缩，得到褐色泡沫/胶状物。粗产物通过色谱纯化，得到标题化合物，为无色泡沫(32.39g)。
表内的化合物D17、D40和D41使用与描述15中所述相似的方法，使用合适的苯胺前体和合适的羧酸制备。
表内的化合物D18-D53(除了D40和D41)使用与描述16中所述相似的方法，使用合适的苯胺前体和合适的羧酸制备。










描述54
(2S)-4-({4-[[(6-氯-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D54)

在氩气下，将(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪-甲酸1，1-二甲基乙基酯(D3)(0.4g，1.254mmol)溶于DCM(4mL)中。加入在DCM(4mL)中的6-氯-3-吡啶甲酰氯(0.243g，1.379mmol)和三乙胺(0.348mL，2.508mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。混合物用DCM稀释并用水洗涤。水层用DCM(x2)萃取，且将合并的有机相干燥并浓缩，得到淡黄色油状物。粗产物通过柱色谱纯化。用0-50％ EtOAc/石油醚梯度洗脱，得到标题化合物，为白色泡沫/胶状物(0.601g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.21(1H，d)，7.61(1H，dd)，7.25(2H，d)，7.16(1H，d)，6.99(2H，d)，4.18(1H，br.s)，3.80(1H，d)，3.50(3H，s)，3.47(1H，d)，3.34(1H，d)，3.10(1H，td)，2.70(1H，d)，2.49(1H，d)，2.10(1H，dd)，2.00(1H，m)，1.46(9H，s)，1.20(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 459.2。
描述55
(2S)-4-({4-[({6-[(2-氟苯基)氧基]-3-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D55)

将(2S)-4-({4-[[(6-氯-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D54)(0.1g，0.218mmol)和2-氟苯酚(0.025g，0.436mmol)溶于DMF(5mL)中。加入碳酸钾(0.06g，0.436mmol)，且将混合物加热至80℃过夜，然后于130℃保持7小时。混合物在室温静置过夜，且真空下除去溶剂。将残余物在EtOAc和水之间分配。将有机层干燥并浓缩，得到褐色油状物。将粗产物通过MDAP纯化，得到甲酸盐。将该盐溶于DCM，并用饱和NaHCO₃洗涤。将DCM层干燥并浓缩，得到标题化合物，为无色油状物(0.038g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.02(1H，d)，7.68(1H，dd)，7.23(2H，d)，7.15(4H，m)，6.98(2H，d)，6.78(1H，d)，4.18(1H，br.s)，3.80(1H，d)，3.48(3H，s)，3.46(1H，d)，3.33(1H，d)，，3.08(1H，td)，2.69(1H，d)，2.51(1H，d)，2.10(1H，dd)，1.98(1H，m)，1.46(9H，s)，1.20(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 535.3。
描述56
(2S)-4-({4-[({6-[(3-氟苯基)氧基]-3-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D56)

由(2S)-4-({4-[[(6-氯-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D54)和3-氟苯酚，以与描述55中对于D55所述相似的方法制备标题化合物，得到标题化合物，为淡黄色油状物(0.057g)。MS(ES)：MH⁺ 535.3。
描述57
(2S)-4-({4-[({6-[(3-氰基苯基)氧基]-3-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D57)

使用与描述55中对于D55所述相似的方法，除了反应温度/时间为130℃，24小时，且纯化通过柱色谱进行，由(2S)-4-({4-[[(6-氯-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基(D54)和3-氰基苯酚，制备标题化合物。得到标题化合物，为无色油状物(0.184g)。MS(ES)：MH⁺ 542.3。
描述58
(2S)-4-({4-[({6-[(4-氟苯基)氨基]-3-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D58)

将BINAP(0.041g，0.0654mmol)、碳酸铯(0.213g，0.654mmol)和乙酸钯(0.009g，0.0436mmol)混合到二噁烷(1mL)中，且在氩气氛下超声1小时。向该红色混合物中加入4-氟苯胺(0.053g，0.479mmol)和(2S)-4-({4-[[(6-氯-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D54)(0.2g，0.436mmol)。混合物于60℃搅拌1小时，真空下除去溶剂，且将残余物在EtOAc和水之间分配。将EtOAc层干燥并浓缩。粗产物通过色谱纯化。用0-70％ EtOAc/石油醚梯度洗脱，得到标题化合物，为淡黄色油状物(0.110g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.10(1H，m)，7.40(1H，dd)，7.25(3H，m)，7.02(4H，m)，6.92(1H，s)，6.43(1H，d)，4.18(1H，br.s)，3.80(1H，d)，3.48(3H，s)，3.48(1H，d)，3.36(1H，d)，3.10(1H，td)，2.70(1H，d)，2.52(1H，d)，2.10(1H，m)，1.98(1H，m)，1.85(1H，br.s)，1.45(9H，s)，1.20(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 534.3。
描述59
(2S)-4-({4-[{[1-(4-氟苯基)-4-哌啶基]羰基}(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D59)

步骤1：将1-(4-氟苯基)-4-哌啶羧酸(0.1g，0.45mmol)在二噁烷(5mL)中搅拌，并滴加亚硫酰氯(0.165mL，2.25mmol)。搅拌1小时后，蒸发除去溶剂，将DCM加入到残余物中，然后再浓缩，得到1-(4-氟苯基)-4-哌啶甲酰氯，其直接用于步骤2中。
步骤2：将来自步骤1的酰氯溶于DCM(2.5mL)中，并滴加至(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D3)(0.121g，0.38mmol)在DCM(2.5mL)中的溶液中，然后加入三乙胺(0.080mL，0.57mmol)。将反应混合物在氩气下搅拌3小时，然后蒸发除去溶剂。将残余物在DCM(30mL)和水(30mL)之间分配。水相用DCM(30mL)再次萃取，且将合并的有机层干燥并浓缩，得到标题化合物，为黄色油状物。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.40(2H，d)，7.15(2H，d)，6.89(2H，m)，6.80(2H，m)，4.20(1H，br.s)，3.82(1H，d)，3.50(4H，m)，3.27(3H，s)，3.10(1H，m)，2.76(1H，d)，2.58(1H，d)，2.35(3H，m)，2.17(1H，m)，2.00(3H，m)，1.70(2H，d)，1.46(9H，s)，1.22(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 525.4。
描述60
(2S)-4-({4-[{[6-(3-氟苯基)-3-吡啶基]羰基}(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D60)

步骤1：将6-(3-氟苯基)-3-吡啶甲酸(82mg，0.376mmol)在二噁烷(4mL)中搅拌，并滴加亚硫酰氯(0.137mL，1.88mmol)。将反应混合物加热回流40分钟，然后在真空中浓缩，得到6-(3-氟苯基)-3-吡啶甲酰氯，为白色固体(0.088g)，其直接用于步骤2中。
步骤2：将来自步骤1的酰氯溶于DCM中，并滴加至(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D3)(0.1g，0.313mmol)和三乙胺(0.065mL，0.47mmol)在DCM(5mL)中的混合物中。将反应混合物在室温下在氩气下搅拌～15小时，然后用水和DCM稀释。将有机层干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用EtOAc/石油醚洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物(0.127g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.51(1H，d)，7.75(1H，dd)，7.67(2H，m)，7.55(1H，d)，7.40(1H，m)，7.24(2H，d)，7.08(1H，m)，7.03(2H，d)，4.15(1H，br.s)，3.78(1H，d)，3.53(3H，s)，3.45(1H，d)，3.32(1H，d)，3.06(1H，td)，2.69(1H，d)，2.49(1H，d)，2.09(1H，dd)，1.98(1H，m)，1.44(9H，s)，1.16(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 519.3。
描述61
(2S)-4-({4-[{[6-(4-氟苯基)-2-甲基-3-吡啶基]羰基}(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D61)

向在DMF(1mL)中的1-羟基苯并三唑(63.4mg，0.47mmol)和N-苄基-N′-环己基碳二亚胺树脂(351.6mg，1.6mmol/g)中加入在DMF(1mL)中的6-(4-氟苯基)-2-甲基-3-吡啶甲酸(72.3mg，0.313mmol)。在氩气氛下将混合物搅拌30分钟，并加入在DCM(2mL)中的(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D3)(100mg，0.313mmol)。将混合物在室温下搅拌过夜。加入PS-TRISAMINE树脂(2当量，相对于酸)、PS-异氰酸酯树脂(2当量，相对于胺)和MP-碳酸酯树脂(5当量，相对于HOBt)，且将混合物在室温下搅拌过夜。过滤混合物以除去树脂，然后再用DCM洗涤。浓缩滤液得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用乙醚/石油醚梯度洗脱，得到标题化合物(35.2mg)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.00(2H，s)，7.37(1H，d)，7.27(1H，m)，7.12(4H，m)，6.98(2H，s)，4.14(1H，bm)，3.75(2H，d)，3.52(3H，s)，3.40(1H，d)，3.25(1H，d)，3.03(1h，t)，2.58(4H，m)，2.41(1H，d)，2.04(1H，m)，1.95(1H，m)，1.44(9H，s)，1.13(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 533.3。
描述62
(2S)-4-[(3-氟-4-硝基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D62)

将4-(溴甲基)-2-氟-1-硝基苯(232mg，1mmol)和Hunig’s碱(0.192mL，1.1mmol)在DMF(3mL)中的溶液用在DMF(3mL)中的(2S)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(200mg，1mmol)处理，且在室温下搅拌20分钟。浓缩反应混合物，再溶解于DCM中，并用水和盐水洗涤，然后干燥并浓缩。粗产物通过柱色谱纯化。用EtOAc/戊烷洗脱，得到标题化合物，为无色胶状物(327mg)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.03(1H，m)，7.34(1H，dd)，7.27(1H，m)，4.22(1H，br.s)，3.84(1H，d)，3.58(1H，d)，3.47(1H，d)，3.13(1H，td)，2.72(1H，m)，2.54(1H，m)，2.22(1H，dd)，2.09(1H，m)，1.46(9H，s)，1.26(3H，d)[对于不准确的参照TMS，在光谱0.62ppm处校正δ值]。
描述63
(2S)-4-[(4-氨基-3-氟苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D63)

使用与描述2中对于D2所述相似的方法，除了反应在H-Cube^TM连续流氢化器上进行，且使用三乙胺代替固体KOH，由(2S)-4-[(3-氟-4-硝基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D62)制备标题化合物。δ_H(CDCl₃，400MHz)6.99(1H，dd)，6.86(1H，dd)，6.71(1H，dd)，4.17(1H，br.s)，3.79(1H，d)，3.67(2H，br.s)，3.40(1H，d)，3.27(1H，d)，3.09(1H，td)，2.73(1H，m)，2.56(1H，m)，2.08(1H，dd)，1.96(1H，m)，1.45(9H，s)，1.22(3H，d)。
描述64
(2S)-4-{[3-氟-4-(甲基氨基)苯基]甲基}-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D64)

使用与在描述3A中对于D3所述相似的方法，除了在加入硼氢化钠之前和之后将反应在50℃加热过夜，由(2S)-4-[(4-氨基-3-氟苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D63)制备标题化合物。δ_H(CDCl₃，400MHz)6.96(2H，m)，6.61(1H，m)，4.17(1H，br.s)，3.89(1H，br.s)，3.79(1H，d)，3.41(1H，d)，3.28(1H，d)，3.08(1H，td)，2.87(3H，s)，2.74(1H，m)，2.57(1H，m)，2.08(1H，dd)，1.95(1H，m)，1.45(9H，s)，1.22(3H，d)。
描述65
(2S)-4-[(2-氟-4-硝基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D65)

步骤1：将2-氟-4-硝基甲苯(1.55g，10mmol)、N-溴琥珀酰亚胺(1.96g，11mmol)和过氧化苯甲酰(0.121g，0.5mmol)在CCl₄(60mL)中的混合物用500W灯照射过夜。过滤反应混合物，浓缩并通过二氧化硅柱用EtOAc/戊烷洗脱，得到粗产物混合物(2.34g)，其用于步骤2中。
步骤2：将来自步骤1的粗制的4-(溴甲基)-3-氟-1-硝基苯(2.11g)、Hunig’s碱(1.9mL，10.913mmol)和(2S)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(2g，10mmol)在DMF(15mL)中的混合物在室温下搅拌40分钟。浓缩反应混合物，再溶于DCM中，并用水(x2)和盐水洗涤，然后干燥并浓缩。粗产物通过柱色谱纯化。用EtOAc/戊烷洗脱，得到标题化合物，为黄色胶状物，静置结晶(2.11g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.03(1H，dd)，7.91(1H，dd)，7.70(1H，m)，4.22(1H，br.s)，3.84(1H，d)，3.61(2H，m)，3.12(1H，td)，2.74(1H，m)，2.57(1H，m)，2.27(1H，dd)，2.11(1H，m)，1.46(9H，s)，1.25(3H，d)。MS(ES)：MH⁺354.1。
描述66
(2S)-4-[(4-氨基-2-氟苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D66)

将(2S)-4-[(2-氟-4-硝基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D65)(2.05g，5.801mmol)溶于甲醇(50mL)中，并加入湿的(50％ w/w水)5％铂/碳(2g)和三乙胺(8mL，58.01mmol)。混合物在大气压和室温下氢化2.5-3小时。过滤混合物，并浓缩滤液得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用EtOAc/戊烷洗脱，得到标题化合物，为几乎无色的胶状物(1.15g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.11(1H，t)，6.42(1H，dd)，6.35(1H，dd)，4.17(1H，br.s)，3.79(1H，d)，3.72(2H，s)，3.43(2H，m)，3.07(1H，td)，2.74(1H，m)，2.58(1H，d)，2.14(1H，dd)，1.99(1H，m)，1.45(9H，s)，1.20(3H，d)。
描述67
(2S)-4-{[2-氟-4-(甲基氨基)苯基]甲基}-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D67)

使用与描述3A中对于D3所述相似的方法，除了在加入硼氢化钠之前将反应于50℃下加热过夜和之后于50℃下加热24小时，由(2S)-4-[(4-氨基-2-氟苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D66)制备标题化合物。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.11(1H，t)，6.35(1H，dd)，6.27(1H，dd)，4.17(1H，br.s)，3.78(2H，m)，3.44(2H，m)，3.07(1H，td)，2.82(3H，s)，2.75(1H，m)，2.59(1H，m)，2.14(1H，dd)，1.99(1H，m)，1.44(9H，s)，1.21(3H，d)。
描述68
(2S)-4-({4-[[(6-氯-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]-3-氟苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D68)

使用与描述54中对于D54所述相似的方法，除了不用水溶液后处理，由(2S)-4-{[2-氟-4-(甲基氨基)苯基]甲基}-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D64)制备标题化合物。浓缩反应混合物并直接用于下一步骤。MS(ES)：MH⁺ 477.11。
描述69
(2S)-4-({3-氟-4-[({6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D69)

使用与描述55中对于D55所述相似的方法，除了仅起始加入1当量4-氟苯酚，反应于130℃加热过周末，再加入4-氟苯酚(2当量)和碳酸钾(4当量)，且反应于130℃加热过夜，由(2S)-4-({4-[[(6-氯-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]-3-氟苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D68)和4-氟苯酚制备标题化合物。产物通过柱色谱纯化。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.07(1H，s)，7.73(1H，dd)，7.04(7H，m)，6.74(1H，d)，4.19(1H，br.s)，3.80(1H，d)，3.43(4H，m)，3.33(1H，d)，3.08(1H，td)，2.67(1H，d)，2.49(1H，d)，2.13(1H，dd)，2.00(1H，m)，1.45(9H，s)，1.21(3H，d)。
描述70
(2S)-4-({4-[[(6-氯-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]-2-氟苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D70)

使用与描述54中对于D54所述相似的方法，除了不用水溶液后处理，由(2S)-4-{[2-氟-4-(甲基氨基)苯基]甲基}-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D67)制备标题化合物。浓缩反应混合物并直接用于下一步骤。MS(ES)：MH⁺ 477.1。
描述71
(2S)-4-({2-氟-4-[({6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D71)

使用与描述55中对于D55所述相似的方法，除了反应温度/时间为130℃，8小时，且通过柱色谱进行纯化，由(2S)-4-({4-[[(6-氯-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]-2-氟苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D70)和4-氟苯酚制备标题化合物。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.07(1H，dd)，7.70(1H，dd)，7.33(1H，t)，7.05(4H，m)，6.78(3H，m)，4.19(1H，br.s)，3.81(1H，d)，3.47(5H，m)，3.07(1H，td)，2.71(1H，d)，2.53(1H，d)，2.18(1H，dd)，2.04(1H，m)，1.46(9H，s)，1.20(3H，d)。
描述72
(2S)-4-({4-[[(5-溴-2-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D72)

步骤1：将5-溴-2-吡啶甲腈(1g，5.464mmol)溶于EtOH(20mL)和水(20mL)中，并用氢氧化钾(1.53g，27.32mmol)处理。反应混合物加热至80℃，保持24小时。真空下除去溶剂，将残余物溶于水，并用2M的HCl酸化至pH4。水层用乙酸乙酯(x3)萃取，且将合并的有机层干燥并浓缩，得到5-溴-2-吡啶羧酸(0.704g)，为橙色固体，其用于步骤2中。
步骤2：在氩气下，将来自步骤1的酸(0.702g，3.475mmol)悬浮于DCM(40mL)中，加入DMF(1滴)，将混合物在冰浴中冷却。经5分钟滴加草酰氯，然后将混合物加热至40℃，保持90分钟。冷却后，除去溶剂得到5-溴-2-吡啶甲酰氯(0.801g)，为褐色固体，其用于步骤3中。
步骤3：将在DCM(10mL)中的来自步骤2的酰氯(0.801g，3.633mmol)加入到(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D3)(0.928g，2.906mmol)在DCM(20mL)中的溶液中。加入三乙胺(1.009mL，7.266mmol)，将混合物在室温下搅拌过夜。反应混合物用DCM稀释并用水洗涤。水层用DCM(x2)再次萃取，且将合并的有机相干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用0-50％乙酸乙酯/石油醚梯度洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物(1.432g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.34(1H，br.s)，7.72(1H，br.d)，7.38(1H，br.d)，7.18(2H，br.m)，6.98(2H，br.s)，4.17(1H，br.s)，3.79(1H，d)，3.51(3H，s)，3.46(1H，d)，3.32(1H，d)，3.07(1H，td)，2.68(1H，d)，2.47(1H，d)，2.10(1H，dd)，1.98(1H，m)，1.45(9H，s)，1.19(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 503/505。
描述73
(2S)-4-({4-[({5-[(4-氟苯基)氧基]-2-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D73)

在氩气下，将(2S)-4-({4-[[(5-溴-2-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D72)(0.2g，0.397mmol)、4-氟苯酚(0.089g，0.794mmol)、碳酸铯(0.259g，0.794mmol)和2，2，6，6-四甲基-3，5-庚二酮(TMHD)(0.008g，0.040mmol)混合到NMP(3mL)中。加入氯化铜(I)(0.02g，0.199mmol)，且将混合物于120℃加热过夜。加入第二批4-氟苯酚、氯化铜(I)、碳酸铯和TMHD，且于120℃继续加热过夜。冷却至室温后，部分浓缩混合物，将残余物溶于EtOAc中，并用饱和的NaHCO₃水溶液和水洗涤。将有机层干燥并浓缩，得到粗产物，且通过柱色谱纯化。用0-50％乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物(0.161g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.04(1H，br.s)，7.49(1H，br.d)，7.20(2H，d)，7.00(7H，m)，4.17(1H，br.s)，3.79(1H，d)，3.51(3H，s)，3.47(1H，d)，3.33(1H，d)，3.08(1H，td)，2.69(1H，d)，2.51(1H，d)，2.10(1H，dd)，1.99(1H，m)，1.46(9H，s)，1.19(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 535.4。
描述74
(2S)-4-({4-[({5-[(3-氟苯基)氧基]-2-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D74)

使用与描述73中对于D73相似的方法，除了使用1当量的CuCl和0.25当量的THMD，由(2S)-4-({4-[[(5-溴-2-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D72)和3-氟苯酚制备标题化合物。MS(ES)：MH⁺ 535.3。
描述75
(2S)-4-({4-[({5-[(3-氰基苯基)氧基]-2-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D75)

使用与描述73中对于D73所述相似的方法，除了在第一次加热过夜后将反应后处理，由(2S)-4-({4-[[(5-溴-2-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D72)和3-氰基苯酚制备标题化合物。MS(ES)：MH⁺ 542.3。
描述76
(2S)-4-({4-[({5-[(4-氟苯基)氨基]-2-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D76)

使用与描述58中对于D58相似的方法，除了反应时间为18小时，由(2S)-4-({4-[[(5-溴-2-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D72)和4-氟苯胺制备标题化合物。MS(ES)：MH⁺ 534.2。
描述77
N-[4-(羟基甲基)-3-甲基苯基]乙酰胺(D77)

将4-(乙酰基氨基)-2-甲基苯甲酸(2g，10.4mmol)悬浮于THF(50mL)中，并经～15分钟滴加硼烷-THF复合物(1M在THF中，26mL，26mmol)。反应混合物在室温下在氩气下搅拌过夜，然后用水(52mL)终止，并用乙酸乙酯(x3)萃取。将合并的有机相干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用0-100％乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物，为膏状固体(0.379g)。δ_H(MeOD，400MHz)7.36(2H，m)，7.25(1H，d)，4.57(2H，s)，2.31(3H，s)，2.10(3H，s)。MS(ES)：MH⁺ 180.2。
描述78
N-(4-甲酰基-3-甲基苯基)乙酰胺(D78)

将N-[4-(羟基甲基)-3-甲基苯基]乙酰胺(D77)(0.36g，2mmol)和二氧化锰(0.875g，10mmol)混合于乙腈(16mL)中，且在微波中加热至120℃，保持7分钟。滤出MnO₂，且浓缩反应混合物得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用0-100％乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物，为膏状固体(0.326g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)10.17(1H，s)，7.77(1H，d)，7.51(1H，d)，7.45(1H，s)，7.36(1H，br.s)，2.66(3H，s)，2.22(3H，s)。MS(ES)：MH⁺ 178.2。
描述79
(2S)-4-{[4-(乙酰基氨基)-2-甲基苯基]甲基}-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D79)

将N-(4-甲酰基-3-甲基苯基)乙酰胺(D78)(326mg，1.8mmol)、(2S)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯盐酸盐(436mg，1.8mmol)、三乙胺(0.282mL，2mmol)和三(乙酰氧基)硼氢化钠(781mg，3.7mmol)一起在DCE(15mL)中搅拌17小时。加入饱和的NaHCO₃水溶液(15mL)，并搅拌反应混合物1小时。分离有机层，并用水和盐水洗涤，然后干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过色谱纯化。用0-100％乙酸乙酯/石油醚洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(573mg)。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.27(2H，m)，7.16(1H，d)，7.11(1H，br.s)，4.17(1H，m)，3.78(1H，m)，3.36(2H，s)，3.02(1H，m)，2.70(1H，m)，2.56(1H，m)，2.36(3H，s)，2.17(4H，m)，1.95(1H，m)，1.45(9H，s)，1.18(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 362.3。
描述80
(2S)-4-[(4-氨基-2-甲基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D80)

将在KOH(1M水溶液，5mL)中的(2S)-4-{[4-(乙酰基氨基)-2-甲基苯基]甲基}-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D79)(497mg，1.4mmol)和甲醇(5mL)在微波反应器中于140℃加热1小时。反应混合物用甲醇(5mL)稀释，并在微波中于130℃总共加热4小时55分钟。浓缩反应混合物以除去甲醇，并在DCM和水之间分配。将有机层干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过色谱纯化。用0-100％乙醚/石油醚洗脱，然后用在DCM中的10％(2M NH₃的甲醇溶液)冲洗该柱，得到标题化合物，为黄色油状物(223mg)。δ_H(CDCl₃，400MHz)6.97(1H，d)，6.52(1H，d)，6.46(1H，dd)，4.17(1H，br.s)，3.76(1H，d)，3.57(2H，br.s)，3.29(2H，m)，3.01(1H，td)，2.70(1H，d)，2.56(1H，d)，2.30(3H，s)，2.10(1H，dd)，1.90(1H，m)，1.45(9H，s)，1.18(3H，d)。MS(AP⁺)：MNa⁺342.3(MNa⁺)，没有观察到分子离子(MH⁺)。
描述81
(2S)-2-甲基-4-{[2-甲基-4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D81)

使用与描述3A中对于D3所述相似的方法，除了在加入硼氢化钠之前将反应于50℃下加热16小时和加入后于50℃下加热5.5小时，由(2S)-4-[(4-氨基-2-甲基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D80)制备标题化合物。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.00(1H，d)，6.45(1H，d)，6.39(1H，dd)，4.17(1H，br.s)，3.76(1H，d)，3.57(1H，br.s)，3.33(1H，d)，3.27(1H，d)，3.01(1H，td)，2.82(3H，s)，2.71(1H，d)，2.58(1H，d)，2.32(3H，s)，2.11(1H，dd)，1.90(1H，m)，1.45(9H，s)，1.17(3H，d)。MS(AP⁺)：356.2(MNa⁺)，234.2，没有观察到分子离子(MH⁺)。
描述81：其它方法(A)
(2S)-4-{[2-甲基-4-(甲基氨基)苯基]甲基}-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D81)
向2-甲基-4-(甲基氨基)苯甲醛(D93)(0.397g)和(2S)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(0.533g，2.66mmol)在1，2-DCE(35mL)中的混合物中加入三(乙酰氧基)硼氢化钠(0.847g，4.00mmol)，将反应在室温下搅拌过夜。加入饱和的NaHCO3(30mL)水溶液，且搅拌混合物4小时。反应混合物用DCM萃取，且将有机相干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用乙醚/石油醚洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(0.328g)。
描述82
(3R，5S)-1-[(4-硝基苯基)甲基]-3，5-二甲基哌嗪(D82)

使用与描述1A中对于D1所述相似的方法，由4-硝基苯甲醛和(2R，6S)-2，6-二甲基哌嗪制备标题化合物。MS(ES)：MH⁺ 250.2。
描述83
甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(D83)

向Boc酸酐(7.5g，34.36mmol)在DCM(40mL)中的溶液中加入甲胺(173mL，2M的THF溶液，345mmol)，且将反应混合物在室温下搅拌过夜。真空除去溶剂和过量的甲胺，并加入稀的2M的HCl(10mL)。水层用DCM(x2)萃取，且将合并的有机相干燥并浓缩，得到标题化合物，为黄色油状物(3.791g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)4.58(1H，br.s)，2.73(3H，d)，1.44(9H，s)。
描述84
(6-甲酰基-3-吡啶基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(D84)

将5-溴-2-吡啶甲醛(1.5g，8.064mmol)、甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(D83)(1.267g，9.677mmol)、三(二亚苄基丙酮)合二钯(0)(0.148g，0.161mmol)、xantphos(0，373g，0.645mmol)和碳酸铯(3.678g，11.289mmol)在二噁烷(35mL)中的混合物于110℃在氩气氛下加热过夜。冷却后，真空除去溶剂，且将残余物在EtOAc和水之间分配。分离有机层，用水和盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用0-50％乙醚/石油醚洗脱，得到标题化合物，为褐色油状物(0.977g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)10.01(1H，s)，8.79(1H，d)，7.94(1H，d)，7.86(1H，dd)，3.40(3H，s)，1.53(9H，s)。MS(ES⁺)：259.1(MNa⁺)，181.2，没有观察到分子离子(MH⁺)。
描述85
5-(甲基氨基)-2-吡啶甲醛和6-[二(甲氧基)甲基]-N-甲基-3-吡啶胺(D85)

向(6-甲酰基-3-吡啶基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(D84)(0.977g，4.139mmol)在DCM(80mL)中的溶液中加入TFA(20mL)，且将反应混合物在室温下搅拌2小时。真空除去溶剂，且将残余物溶于甲醇，并通过SCX(10g)柱用甲醇然后用2M NH₃的甲醇溶液洗脱。浓缩含氨馏分得到黄色油状物(0.622g)，其为大约1:1的标题化合物的混合物。该物质直接用于下一步骤。MS(ES⁺)：醛-137(MH⁺)；缩醛-151.MS(AP⁺)：醛-137(MH⁺)；缩醛-205(MNa⁺)，151。
描述86
(2S)-2-甲基-4-{[5-(甲基氨基)-2-吡啶基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D86)

将5-(甲基氨基)-2-吡啶甲醛和6-[二(甲氧基)甲基]-N-甲基-3-吡啶胺(D85)(0.622g)，(2S)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(0.910g，4.552mmol)和三乙胺(0.418g，4.139mmol)在1，2-DCE(40mL)中的混合物在室温下搅拌过夜。加入三(乙酰氧基)硼氢化钠(1.14g，5.38mmol)，将反应在室温下搅拌过夜。反应混合物用DCM稀释，并用饱和的NaHCO₃水溶液和水洗涤。将有机层干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用0-100％ EtOAc/石油醚洗脱，得到标题化合物，为黄色/褐色油状物(0.542g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.96(1H，d)，7.23(1H，d)，6.88(1H，dd)，4.17(1H，br.s)，3.80(2H，d)，3.58(1H，d)，3.45(1H，d)，3.12(1H，td)，2.86(3H，s)，2.76(1H，m)，2.58(1H，m)，2.18(1H，dd)，2.07(1H，m)，1.45(9H，s)，1.23(3H，d)。MS(ES)：MH^＝321.4。
描述87
(2S)-2-甲基-4-({4-[(1-甲基乙基)氨基]苯基}甲基)-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D87)

向搅拌的(2S)-4-[(4-氨基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D2)(0.30g，1mmol)在无水1，2-DCE(5mL)中的溶液中依次加入2-甲氧基丙烯(0.141mL，1.5mmol)、乙酸(0.056mL，1mmol)和三乙酰氧基硼氢化钠(0.313g，1.5mmol)。再加入1，2-DCE(5mL)，且反应混合物在氩气下在室温下搅拌16小时。加入饱和的NaHCO₃(15mL)，且将反应混合物再搅拌1小时。然后水层用DCM(x3)萃取，且将合并的有机层干燥(Na₂SO₄)，并在真空中浓缩。粗产物通过柱色谱用0-100％乙醚/石油醚洗脱来纯化，得到标题化合物(0.265g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.09(2H，d)，6.54(2H，d)，4.16(1H，br.s)，3.78(1H，d)，3.61(1H，sp)，3.49(1H，s)，3.42(2H，m)，3.28(1H，d)，3.08(1H，td)，2.75(1H，d)，2.59(1H，d)，1.95(1H，dd)，1.94(1H，m)，1.45(9H，s)，1.20(9H，m)。MS(AP⁺)：370.3(MNa⁺)，248.3，没有观察到分子离子(MH⁺)。描述88
(2S)-4-{[4-(乙基氨基)苯基]甲基}-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D88)

在在氩气和室温下，将(2S)-4-[(4-氨基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D2)(0.30g，1mmol)、乙醛(0.055mL，1mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(0.417g，2mmol)和三乙胺(0.151mL，1.1mmol)混合到无水1，2-DCE(15mL)中，且搅拌48小时。加入饱和的NaHCO₃(15mL)，且再搅拌反应混合物2小时。然后水层用DCM(x3)萃取，且将合并的有机层干燥(Na₂SO₄)，并在真空中浓缩。粗产物通过柱色谱用0-100％乙醚/石油醚洗脱来纯化，得到标题化合物(0.239g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.11(2H，d)，6.56(2H，dd)，4.16(1H，br.s)，3.78(1H，d)，3.51(1H，br.s)，3.42(1H，d)，3.29(1H，d)，3.15(2H，q)，3.08(1H，td)，2.75(1H，d)，2.59(1H，d)，2.06(1H，dd)，1.93(1H，m)，1.45(9H，s)，1.25(3H，t)，1.21(3H，d)。MS(ES⁺)：234.2，没有观察到分子离子(MH⁺)。
描述89
(甲氧基)乙醛(D89)

向搅拌的色谱级硅胶(3.8g)在无水DCM(25mL)中的混悬液中滴加NaIO₄(3.8mL，0.65M水溶液)。加入3-(甲氧基)-1，2-丙二醇(200mg，1.9mmol)在1，2-DCE中的溶液，且将反应混合物在室温下搅拌。2小时后，tlc表明完全反应，过滤反应混合物，将滤饼再用1，2-DCE洗涤。将含标题化合物的滤液直接用于下一步骤(D90)。
描述90
(2S)-2-甲基-4-[(4-{[2-(甲氧基)乙基]氨基}苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D90)

将(2S)-4-[(4-氨基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D2)(0.30g，1mmol)、(甲氧基)乙醛(D89)、三(乙酰氧基)硼氢化钠(0.417g，2mmol)和三乙胺(0.165mL，1.2mmol)在1，2-DCE(15mL)中的混合物在氩气下在室温下搅拌19小时。加入饱和的NaHCO₃(20mL)，且将反应混合物再搅拌1小时。反应混合物进一步用DCM(25mL)和水(10mL)稀释。然后，水层用DCM(x3)萃取，并将合并的有机层干燥(Na₂SO₄)，并在真空中浓缩。粗产物通过在二氧化硅上用0-50％ EtOAc/石油醚洗脱的柱色谱来纯化，得到标题化合物(0.310g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.12(2H，d)，6.59(2H，d)，4.15(1H，m)，3.99(1H，br.s)，3.78(1H，d)，3.61(2H，t)，3.40(3H，s)，3.28(3H，m)，3.08(1H，td)，2.74(1H，d)，2.58(1H，d)，2.06(1H，m)，1.94(1H，m)，1.45(9H，s)，1.21(3H，d)。MS(ES⁺)：264.2，没有观察到分子离子(MH⁺)。
描述91
4-溴-2-甲基苯甲醛(D91)

在氩气下，向冷却到5℃的在甲苯(60mL)中的4-溴-2-甲基苯甲腈(2g，10.2mmol)中滴加Dibal-H(11.2mL，1M的甲苯溶液，11.2mmol)。反应于5℃搅拌30分钟，然后滴加MeOH(3mL)和2M的H₂SO₄(10mL)。搅拌混合物～19小时，然后在真空中浓缩。将残余物再溶解于水/EtOAc中。将有机层干燥并浓缩，得到粗制标题化合物，为褐色油状物(1.81g)，其没有进一步纯化就用于下一步骤。δ_H(CDCl₃，400MHz)10.20(1H，s)，7.65(1H，d)，7.50(1H，dd)，7.43(1H，m)，2.64(3H，s)。
描述92
(4-甲酰基-3-甲基苯基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(D93)

使用与描述84中对于D84相似的方法，由粗制的4-溴-2-甲基苯甲醛(D91)和甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(D83)制备标题化合物。δ_H(CDCl₃，400MHz)10.20(1H，s)，7.76(1H，d)，7.28(1H，dd)，7.19(1H，d)，3.31(3H，s)，2.66(3H，s)，1.49(9H，s)。
描述93
2-甲基-4-(甲基氨基)苯甲醛(D93)

在室温和氩气下，向在DCM(60mL)中的(4-甲酰基-3-甲基苯基)甲基氨基甲酸1，1-二甲基乙基酯(D92)(0.614g，2.47mmol)中滴加TFA(15mL)。将混合物搅拌0.5小时，然后浓缩。将残余物再溶解于DCM和水中，将水层用NaOH溶液碱化。分离DCM层，干燥(Na₂SO₄)并浓缩，得到粗制标题化合物，为黄色油状物(0.397g)，其没有进一步纯化就用于下一步骤。δ_H(CDCl₃，400MHz)9.98(1H，s)，7.63(1H，d)，6.47(1H，dd)，6.35(1H，d)，4.35(1H，br.s)，2.91(3H，d)，2.60(3H，s)。MS(ES)：MH⁺ 150.1。
描述94
6-(甲基氨基)-3-吡啶甲腈(D94)

将4批在甲胺(16mL，2M的THF溶液)中的6-氯-3-吡啶甲腈(0.40g，2.89mmol)各自在微波反应器中于80℃下加热30分钟。合并反应混合物，且在真空中浓缩。将残余物再溶解于EtOAc/水，并分离有机层，干燥(Na₂SO₄)并浓缩。粗产物通过柱色谱纯化；用EtOAc/石油醚洗脱，得到标题化合物，为白色固体(1.46g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.37(1H，d)，7.59(1H，dd)，6.39(1H，dd)，5.19(1H，br.s)，2.99(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 134.2。
描述95
6-(甲基氨基)-3-吡啶甲醛(D95)

在氩气下，向冷却至-78C的在甲苯(10mL)中的6-(甲基氨基)-3-吡啶甲腈(D94)(0.1g，0.752mmol)中滴加Dibal-H(1.88mL，1M的甲苯溶液，11.2mmol)。于-78℃搅拌反应，然后温热至室温过夜。加入MeOH(0.47mL)和2M的H₂SO₄(1.42mL)，且搅拌混合物1.5小时，然后在真空中浓缩。残余物在水和EtOAc之间分配。水层用EtOAc萃取，且将合并的有机层干燥并浓缩，得到标题化合物(0.067g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)9.78(1H，s)，8.52(1H，d)，7.92(1H，dd)，6.45(1H，d)，5.38(1H，br.s)，3.04(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 137.1。
描述96
(2S)-2-甲基-4-{[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D96)

使用与描述D81A中对于D81所述相似的方法，由6-(甲基氨基)-3-吡啶甲醛(D95)和(2S)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯制备标题化合物。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.97(1H，d)，7.44(1H，dd)，6.38(1H，d)，4.51(1H，m)，4.17(1H，br.s)，3.79(1H，d)，3.38(1H，d)，3.26(1H，d)，3.07(1H，td)，2.92(3H，d)，2.74(1H，m)，2.57(1H，m)，2.09(1H，dd)，1.96(1H，m)，1.45(9H，s)，1.20(3H，d)。MS(ES⁺)：343.2(MNa⁺)，265.2，没有观察到分子离子(MH⁺)。
描述97
6-氨基-4-甲基-3-吡啶甲腈(D97)

将5-溴-4-甲基-2-吡啶胺(0.50g，2.7mmol)和氰化铜(I)(0.263g，2.9mmol)在DMF(12mL)中的混合物在微波反应器中于200℃加热总共1.75小时。反应混合物用EtOAc和水稀释。滤出所得粘稠的深色沉淀。滤液用EtOAc(x3)萃取，且将合并的萃取液干燥并浓缩，得到深黄色固体(0.115g)。滤饼用1:1DCM/MeOH(1L)洗涤，浓缩，得到第二批深黄色固体(0.047g)。滤饼用2MNH₃的MeOH(200mL)溶液洗涤，浓缩，得到深绿色固体(0.533g)。将3批固体通过柱色谱使用0-100％ EtOAc/己烷作为洗脱液纯化，得到标题化合物，为白色固体(总产量：0.213g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.28(1H，s)，6.36(1H，s)，4.87(2H，br.s)，2.40(3H，s)。MS(ES)：MH⁺ 134.1。
描述98
N-(5-氰基-4-甲基-2-吡啶基)-2，2，2-三氟乙酰胺(D98)

在氩气下，向冷却至0℃的6-氨基-4-甲基-3-吡啶甲腈(D97)(0.213g，1.6mmol)和2，6-二甲基吡啶(0.37mL，3.2mmol)在DCM(20mL)中的溶液中加入三氟乙酸酐(0.22mL，1.6mmol)的DCM溶液。搅拌反应混合物17小时，逐渐温热至室温。将反应混合物再冷却至0℃，并再加入2，6-二甲基吡啶(0.37mL)和三氟乙酸酐(0.22mL)。反应在室温下搅拌4小时，然后用10％柠檬酸溶液稀释，并用DCM萃取。将DCM层用盐水洗涤，干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用0-100％ EtOAc/己烷洗脱，得到标题化合物，为白色固体(0.299g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.68(1H，br.s)，8.55(1H，s)，8.21(1H，s)，2.62(3H，s)。
描述99
6-氨基-4-甲基-3-吡啶甲醛(D99)

将N-(5-氰基-4-甲基-2-吡啶基)-2，2，2-三氟乙酰胺(D98)(0.050g，0.22mmol)在甲酸(1.35mL)中的溶液用水(0.48mL)稀释，并加入镍/铝合金(0.122g)。在氩气下，将反应混合物加热回流2小时，然后趁热过滤，再用甲酸(3x5mL)洗涤。浓缩滤液和洗涤液，用甲苯(5mL)稀释，并再浓缩，得到粗制标题化合物，为淡黄色固体(0.053g)，其没有进一步纯化就用于下一步骤。δ_H(CDCl₃，400MHz)9.91(1H，s)，8.34(1H，s)，6.31(1H，s)，5.49(2H，br.s)，2.57(3H，s)。MS(ES)：MH⁺ 137.2。
描述100
(2S)-4-[(6-氨基-4-甲基-3-吡啶基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D100)

将6-氨基-4-甲基-3-吡啶甲醛(D99)(0.053g，0.39mmol)、(2S)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(0.117g，0.58mmol)和三(乙酰氧基)硼氢化钠(0.206g，0.97mmol)在1，2-DCE(10mL)中的混合物超声以促进起始物质的溶解，然后在室温下搅拌过夜。加入饱和的NaHCO₃(30mL)水溶液，并搅拌混合物24小时。反应混合物用DCM(3 x 10mL)萃取，且将有机相干燥并浓缩，得到粗制的标题化合物，为油状物(0.067g)，其没有进一步纯化就用于下一步骤。MS(ES)：MH⁺321.3，MNa⁺ 343.3。
描述101
(2S)-2-甲基-4-{[4-甲基-6-(甲基氨基)-3-吡啶基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D101)

在氩气氛下，向在无水MeOH(4mL)中的(2S)-4-[(6-氨基-4-甲基-3-吡啶基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D100)(0.067g，0.21mmol)中加入多聚甲醛(0.019g，0.63mmol)和甲醇钠(0.057g，1.00mmol)。于50℃搅拌混合物过夜，然后加入硼氢化钠(0.024g，0.63mmol)，将反应于50℃下搅拌24小时。真空浓缩反应混合物。将残余物在DCM和饱和的NaHCO₃水溶液之间分配，并搅拌0.5小时。水相用DCM(3 x 5mL)萃取，且将合并的有机相干燥并浓缩，得到粗制的无色油状物。柱色谱用0-10％ MeOH/DCM洗脱，得到粗制的标题化合物，为无色油状物(0.037g)，其没有进一步纯化就用于下一步骤。MS(ES)：MH⁺ 335.3。
描述102
1-(溴甲基)-2-氯-4-硝基苯(D102)

将2-氯-4-硝基甲苯(0.20g，1.17mmol)、N-溴琥珀酰亚胺(0.228g，1.28mmol)和过氧化苯甲酰(0.014g，0.058mmol)在四氯甲烷(7mL)中的混合物于回流下照射(500W灯)过夜。浓缩反应混合物得到黄色油状物/固体(0.391g)，其没有进一步纯化就直接用于下一步骤。
描述103
(2S)-4-[(2-氯-4-硝基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D103)

将粗制的1-(溴甲基)-2-氯-4-硝基苯(D102)(0.391g)、(2S)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯盐酸盐(0.407g，1.72mmol)和Hunig’s碱(0.625mL，3.59mmol)在无水DMF(3mL)中的混合物在室温下搅拌10分钟。浓缩反应混合物得到橙色油状物，将其溶于DCM中，并用水(x2)和盐水洗涤，然后干燥并浓缩，得到橙色油状物。通过柱色谱用0-30％ EtOAc/戊烷洗脱来纯化，得到标题化合物，为黄色油状物(0.199g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.24(1H，d)，8.12(1H，dd)，7.77(1H，d)，4.24(1H，br.s)，3.85(1H，d)，3.63(2H，s)，3.14(1H，td)，2.76(1H，m)，2.59(1H，m)，2.33(1H，dd)，2.18(1H，m)，1.47(9H，s)，1.28(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 370/372。
描述104
(2S)-4-[(4-氨基-2-氯苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D104)

将(2S)-4-[(2-氯-4-硝基苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D103)(0.199g，0.538mmol)、三乙胺(0.75mL，5.38mmol)和5％ Pt/C催化剂(0.134g)在MeOH(5mL)中的混合物在室温和大气压下氢化3小时。过滤除去催化剂，并浓缩滤液得到无色油状物，将其溶于DCM中。将DCM溶液用水(x2)和盐水洗涤，然后干燥并浓缩，得到粗产物。通过柱色谱用10-40％EtOAc/戊烷洗脱来纯化，得到标题化合物，为无色油状物(0.125g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.19(1H，d)，6.69(1H，d)，6.54(1H，dd)，4.18(1H，br.s)，3.79(1H，d)，3.70(2H，br.s)，3.45(2H，m)，3.07(1H，td)，2.74(1H，m)，2.60(1H，m)，2.19(1H，dd)，2.03(1H，m)，1.45(9H，s)，1.22(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 340/342。
描述105
(2S)-4-{[2-氯-4-(甲基氨基)苯基]甲基}-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D105)

使用与描述3A中对于D3所述相似的方法，除了在加入硼氢化钠(3当量)之前将反应于50℃下加热过夜和加入后于50℃下加热24小时，由(2S)-4-[(4-氨基-2-氯苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D104)制备标题化合物。MS(ES)：MH⁺ 354/356。
描述106
(2S)-4-({6-[[(6-氯-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]-3-吡啶基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D106)

在氩气下，向在DCM(7mL)中的(2S)-2-甲基-4-{[6-(甲基氨基)-3-吡啶基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D96)(0.150g，0.469mmol)和三乙胺(0.098mL，0.703mmol)中加入6-氯-3-吡啶甲酰氯(0.099g，0.562mmol)。混合物在室温下搅拌～0.3小时，然后用DCM和水稀释。将有机层干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用EtOAc/DCM洗脱，得到标题化合物，为白色无色胶状物(0.139g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.33(1H，d)，8.19(1H，d)，7.70(1H，dd)，7.57(1H，dd)，7.23(1H，d)，6.86(1H，d)，4.20(1H，br.s)，3.82(1H，d)，3.58(3H，s)，3.49(1H，d)，3.37(1H，d)，3.08(1H，td)，2.70(1H，d)，2.49(1H，d)，2.16(1H，dd)，2.04(1H，m)，1.46(9H，s)，1.19(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 460/462。
描述107
(2S)-4-({4-[[(6-氯-2-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D107)

步骤1：将6-溴-2-吡啶羧酸(0.348g，1.72mmol)溶于无水二噁烷(15mL)中，并加入亚硫酰氯(0.570mL，7.84mmol)。将反应混合物在回流下搅拌3小时，然后在真空中浓缩，再溶解于二噁烷(15mL)中，并再浓缩，得到6-氯-2-吡啶甲酰氯，为淡黄色固体，将其直接用于步骤2中。
步骤2：将来自步骤1的酰氯溶于DCM(15mL)中，并加入至(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D3)(0.500g，1.57mmol)和三乙胺(0.284mL，2.04mmol)在DCM(15mL)中的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后用水(x2)和盐水洗涤。将有机层干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用20-60％ EtOAc/戊烷洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物/固体(0.658g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.56(1H，m)，7.46(1H，m)，7.17(2H，m)，6.99(2H，m)，4.16(1H，br.s)，3.79(1H，d)，3.50(3H，s)，3.46(1H，d)，3.32(1H，d)，3.07(1H，m)，2.69(1H，d)，2.50(1H，d)，2.08(1H，m)，1.97(1H，m)，1.46(9H，s)，1.19(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 459/461。
描述108
(2S)-4-({4-[[(6-溴-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D108)

向在DMF(15mL)中的1-羟基苯并三唑(0.967g，7.16mmol)和N-苄基-N′-环己基碳二亚胺树脂(4.48g，1.6mmol/g，7.16mmol)中加入在DMF(15mL)中的6-溴-3-吡啶甲酸(0.964g，4.77mmol)。在氩气氛下将混合物搅拌30分钟，并加入在DCM(15mL)中的(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D3)(1.52g，4.77mmol)。将混合物在室温下搅拌65小时。加入PS-Trisamine树脂(2当量，相对于酸)、PS-异氰酸酯树脂(2当量，相对于胺)和MP-碳酸酯树脂(5当量，相对于HOBt)，且将混合物在室温下搅拌4小时。过滤混合物以除去树脂，然后将其再用DCM洗涤。浓缩滤液得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用EtOAc/石油醚梯度洗脱，得到标题化合物，为白色固体(1.43g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.18(1H，d)，7.51(1H，dd)，7.32(1H，d)，7.25(2H，d)，6.98(2H，d)，4.18(1H，br.s)，3.80(1H，d)，3.49(3H，s)，3.47(1H，d)，3.34(1H，d)，3.08(1H，td)，2.69(1H，d)，2.49(1H，d)，2.11(1H，dd)，1.98(1H，m)，1.46(9H，s)，1.20(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 503/505。
表内的化合物D109-D110使用与描述15中所述相似的方法，使用合适的苯胺前体和合适的羧酸制备。


表内的化合物D111-D117使用与描述16中所述相似的方法，使用合适的苯胺前体和合适的羧酸制备。



描述118
(2S)-4-({6-[({6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]-4-甲基-3-吡啶基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D118)

步骤1：将6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶甲酸(D14)(0.032g，0.14mmol)溶于无水二噁烷(2mL)中。滴加亚硫酰氯(0.081mg，0.14mmol)，将反应混合物加热回流1.25小时。浓缩反应混合物，然后从DCM中再浓缩，得到6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶甲酰氯，将其直接用于步骤2中。
步骤2：将(2S)-2-甲基-4-{[4-甲基-6-(甲基氨基)-3-吡啶基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D101)(0.038g，0.11mmol)溶于无水DCM(2mL)中。滴加三乙胺(0.016g，0.16mmol)，5分钟后滴加来自步骤1的酰氯在无水DCM(2mL)中的溶液。然后在氩气下在室温下将反应混合物搅拌过夜。加入饱和的NaHCO₃水溶液(15mL)，将水层用DCM(3x5mL)萃取。将有机相干燥(Na₂SO₄)，将粗产物通过柱色谱纯化。用0-100％ EtOAc/石油醚梯度洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(0.026g)。MS(ES)：MH⁺ 550.4。
表内的化合物D119-D122使用与描述16中所述相似的方法，使用合适的苯胺前体和合适的羧酸制备。


描述123
(2S)-2-甲基-4-[(4-{甲基[(4-{[4-(三氟甲基)苯基]羰基}苯基)羰基]氨基}苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D123)

步骤1：将4-{[4-(三氟甲基)苯基]羰基}苯甲酸(200mg，0.68mmol)在二噁烷(5mL)中搅拌，并加入亚硫酰氯(0.496mL，6.8mmol)。将反应混合物加热回流1小时。加入另外的亚硫酰氯(0.496mL，6.8mmol)，并继续加热3小时。冷却后，真空浓缩反应混合物，得到4-{[4-(三氟甲基)苯基]羰基}苯甲酰氯，为油状白色液体(0.286g)，其直接用于步骤2中。
步骤2：将来自步骤1的酰氯溶于DCM(2mL)中，并滴加到(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D3)(0.170g，0.53mmol)和三乙胺(0.11mL)在DCM(2mL)中的混合物中。将反应混合物在室温下在氩气下搅拌过夜，然后用水(20mL)和DCM(20mL)稀释。水层用DCM(20mL)萃取，并将合并的有机层干燥，浓缩并通过柱色谱纯化。用0-30％EtOAc/戊烷洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(0.244g)。MS(ES)：MH⁺ 596.2。
描述124
(2S)-4-({6-[({6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]-3-吡啶基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D124)

在氩气氛下，向在DMF(4mL)中的(2S)-4-({6-[[(6-氯-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]-3-吡啶基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D106)(0.139g，0.303mmol)中加入碳酸钾(0.293g，0.212mmol)和4-氟苯酚(0.169g，1.51mmol)。搅拌反应混合物，并于130℃加热5小时，然后在真空中浓缩。将残余物再溶解于DCM/水中。将有机层用2M NaOH溶液和盐水洗涤，然后干燥(Na₂SO₄)并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用EtOAc/DCM洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(0.054g)。MS(ES)：MH⁺ 536.2。
描述125
(2S)-4-({4-[({6-[(4-氟苯基)氧基]-2-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D125)

向在DMF(4mL)中的氢化钠(0.0174g，60％分散液，在矿物油中，0.436mmol)中加入4-氟苯酚(0.0488g，0.436mmol)，并在氩气氛下将混合物搅拌20分钟。加入(2S)-4-({4-[[(6-氯-2-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D107)(0.100g，0.218mmol)，将反应混合物在微波中于190℃加热1.5小时。浓缩反应混合物，且将残余物在DCM和水之间分配。水层进一步用DCM萃取，将合并的有机相经Na₂SO₄干燥，并浓缩，得到黄色油状物，将其通过柱色谱纯化，得到标题化合物，为无色油状物(0.0539g)。MS(ES)：MH⁺ 535.4。
描述126
(2S)-4-({4-[({6-[(3-氟苯基)氧基]-2-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D126)

使用与描述125中对于D125所述相似的方法，除了反应时间为3.3小时，由(2S)-4-({4-[[(6-氯-2-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D107)和3-氟苯酚制备标题化合物。MS(ES)：MH⁺535.4。
描述127
(2S)-4-({4-[{[6-(4-氟-1-哌啶基)-3-吡啶基]羰基}(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D127)

将(2S)-4-({4-[[(6-溴-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D108)(0.050g，0.0993mmol)、4-氟哌啶(0.055g，0.397mmol)和三乙胺(0.069mL，0.497mmol)在乙腈(4mL)中的混合物于85℃加热过夜，然后在微波中于140℃下加热10小时。加入另一部分的4-氟哌啶(5当量)和三乙胺(5当量)，且反应于170℃加热2小时。浓缩反应混合物，且将残余物溶于DCM/水中。水层进一步用DCM(x3)萃取，且将合并的有机相干燥(Na₂SO₄)，并浓缩，得到标题化合物，为黄色油状物(0.0538g)。MS(ES)：MH⁺ 526.2。
描述128
(2S)-4-({4-[{[6-(4，4-二氟-1-哌啶基)-3-吡啶基]羰基}(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D128)

将(2S)-4-({4-[[(6-溴-3-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D108)(0.050g，0.0993mmol)、4，4-二氟哌啶(0.141g，0.894mmol)和三乙胺(0.138mL，0.993mmol)在乙腈(4mL)中的混合物在微波中于150℃加热12小时。再加入另一部分的4，4-二氟哌啶(4当量)和三乙胺(5当量)，且将反应于150℃加热1小时。浓缩反应混合物，将残余物溶于DCM/水中。水层进一步用DCM(x3)萃取，并将合并的有机相干燥(Na₂SO₄)，并浓缩，得到黄色胶状物，将其通过柱色谱纯化。用0-100％ EtOAc/己烷洗脱，得到无色胶状物，其为标题化合物和未反应的D109的混合物(～9:1)(0.0485g)。MS(ES)：MH⁺ 544.2。
描述129
(2S)-4-({4-[{[6-(3-氟苯基)-2-吡啶基]羰基}(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D129)

将(2S)-4-({4-[[(6-氯-2-吡啶基)羰基](甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D107)(0.0825g，0.179mmol)、3-氟苯硼酸(0.0302g，0.216mmol)、四-(三苯基膦)合钯(0)(0.0104g，0.009mmol)和碳酸钠(0.0762g，0.719mmol)在DME/水(4mL，1:1)中的混合物在微波中于140℃加热10分钟。将反应混合物用DCM/水稀释，将水层进一步用DCM(x3)萃取。将合并的有机相干燥并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用0-100％ EtOAc/己烷洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(0.0781g)。MS(ES)：MH⁺ 519.3。
表内的化合物D130-D136使用与描述129中对于D129所述相似的方法，由所示的合适的溴-吡啶前体和合适的硼酸制备。


描述137
(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基{[4-(2-吡啶基)苯基]羰基}氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D137)

向在DMF(3mL)中的4-(2-吡啶基)苯甲酸(0.0624g，0.313mmol)中加入N-苄基-N′-环己基碳二亚胺树脂(0.294g，1.6mmol/g，0.47mmol)、1-羟基苯并三唑(0.064g，0.47mmol)和DCM(1mL)，且将混合物振荡30分钟。然后加入(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪-甲酸1，1-二甲基乙基酯(D3)(100mg，0.313mmol)、DMF(3mL)和DCM(1mL)，将混合物在室温振荡～2天，过滤反应混合物以除去树脂，然后将其进一步用DMF/DCM(3:1)洗涤。浓缩滤液得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用乙醚/戊烷梯度洗脱，得到标题化合物(0.055g)。MS(ES)：MH⁺ 501.2。
表内的化合物D138-D140使用与描述137中对于D137所述相似的方法，由(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸二甲基乙基酯(D3)和合适的羧酸制备。

描述141
(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基{[4-(3-甲基-1，2，4-噁二唑-5-基)苯基]羰基}氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D141)

向在DMF(3mL)中的(2S)-2-甲基-4-{[4-(甲基氨基)苯基]甲基}-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D3)(100mg，0.313mmol)中加入N-苄基-N′-环己基碳二亚胺树脂(0.294g，1.6mmol/g，0.47mmol)、1-羟基苯并三唑(0.064g，0.47mmol)和DCM(1mL)。将混合物搅拌30分钟，并加入4-(3-甲基-1，2，4-噁二唑-5-基)苯甲酸(0.064g，0.313mmol)、DCM(2mL)和DMF(6mL)。在室温下搅拌反应混合物22小时。加入PS-TRISAMINE树脂(0.179g，0.626mmol)、PS-异氰酸酯树脂(0.298g，0.626mmol)和MP-碳酸酯树脂(0.788g，2.35mmol)，并在室温下搅拌混合物2小时。过滤混合物以除去树脂，并浓缩滤液得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用10-60％ EtOAc/戊烷洗脱，得到标题化合物。MS(ES)：MH⁺ 506.2。
实施例1
6-(3-氟苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E1)

将(2S)-4-({4-[{[6-(3-氟苯基)-3-吡啶基]羰基}(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D60)(0.127g，0.245mmol)在DCM(10mL)中搅拌，并滴加TFA(2.5mL)。搅拌反应混合物～1小时，然后在真空中浓缩，并用DCM和水再稀释。将分离的水层用浓NaOH溶液碱化至pH14，然后用DCM萃取，干燥(Na₂SO₄)并浓缩，得到标题化合物，为黄色油状物(0.091g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.52(1H，d)，7.75(1H，dd)，7.67(2H，m)，7.54(1H，d)，7.40(1H，m)，7.25(2H，d)，7.09(1H，m)，7.03(2H，d)，3.53(3H，s)，3.41(2H，s)，2.83(3H，m)，2.66(2H，d)，1.96(1H，td)，1.62(1H，m)，1.55(br.s)，0.97(3H，d)，没有观察到NH.MS(ES)：MH⁺ 419.2。
将其全部溶于MeOH中，并用1M HCl的Et₂O溶液(0.218mL)处理，得到标题化合物的盐酸盐，为灰白色固体(0.092g)。MS(ES)：MH⁺ 419.2。
实施例2
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E2)

将(2S)-4-({4-[({6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D16)(0.518g，0.97mmol)溶于DCM(19.2mL)中，并加入TFA(4.8mL)。搅拌溶液1.5小时，然后真空除去溶剂。产物溶于甲醇，并通过SCX(10g)柱用2M NH₃的甲醇溶液洗脱。除去溶剂得到无色油状物，将其通过柱色谱纯化。用0-5％(2M NH₃的甲醇溶液)/DCM梯度洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(0.379g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.07(1H，dd)，7.65(1H，dd)，7.22(2H，d)，7.04(6H，m)，6.70(1H，d)，3.48(3H，s)，3.43(2H，s)，3.13(br.s)，2.95(3H，m)，2.70(2H，d)，2.04(1H，m)，1.74(1H，m)，1.05(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 435.3。
将其全部溶于DCM中，并用1M HCl的Et₂O溶液(0.873mL)处理，得到标题化合物的盐酸盐，为浅黄色固体(0.345g)。MS(ES)：MH⁺ 435.2。
实施例2：其它方法(A)
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E2)
将(2S)-4-({4-[({6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D16)(32.39g，0.0606mol)在DCM(150mL)中的溶液在冰/水浴中冷却，并经10分钟滴加TFA(80mL)。将反应混合物在室温下搅拌过夜，然后浓缩，得到黄色胶状物。将胶状物溶于MeOH(100mL)中，并加到SCX树脂上(150g，用MeOH预洗涤)。用MeOH(750mL)洗脱，得到稳定的标题化合物的TFA盐，且用2M NH₃的MeOH溶液(750mL)洗脱，得到标题化合物的游离碱。将回收的TFA盐用与上述相似的方法处理，再使用SCX树脂(100g)得到另一批标题化合物的游离碱。将两批游离碱合并到DCM中，并浓缩，得到标题化合物，为淡黄色胶状物(26.78g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.07(1H，d)，7.65(1H，dd)，7.22(2H，d)，7.04(6H，m)，6.70(1H，d)，3.48(3H，s)，3.42(2H，s)，2.89(3H，m)，2.68(2H，d)，1.97(1H，m)，1.64(1H，t)，1.49(1H bs)，1.00(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 435.1。
在室温下，将E2游离碱(25.74g，0.0592mol)的溶液溶于MeOH(250mL)中，用氩气除气，用1M HCl的Et₂O(59.2mL)溶液处理。溶液在真空中浓缩，得到浅褐色泡沫，于60℃下真空中干燥过夜。将26.4g该物质溶于DCM(175mL)中，并在氩气氛下经30分钟滴加至剧烈搅拌的己烷(2.65L)中。停止搅拌，在氩气下过滤分离沉淀，用己烷(2 x 2L)洗涤，在含氩气的轻微真空下过滤，然后于80℃真空干燥过夜。所得固体溶于水(220mL)中，冻干过周末，磨成粉末，并于80-82℃真空干燥过夜。将粉末再溶解于水(150mL)，冻干过夜，然后磨成粉末得到标题化合物的盐酸盐，为膏状固体(24.13g)。
实施例2B：方法1
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺富马酸盐(E2B)
将E2游离碱(57.5mg)在甲基异丁基酮(0.5mL)中的溶液加入到富马酸(13.4mg)中。再加入甲基异丁基酮(0.5mL)，将混合物用热空气枪加热。用刮刀刮所得的黄色胶状物，有少量白色固体出现在胶状物中。将样品置于振荡器装置(shaker block)中，并进行温度循环(在1小时的单元(block)中0-40℃)过周末。向所得黄色胶状物的无色溶液中加入1，4-二噁烷(0.5mL)，且将混合物加热以溶解胶状物。冷却后，形成胶状物，且将样品进行如上述温度的循环。～6周后，形成白色固体浆液。将混合物重新置于振荡器装置中，且如上述的温度循环过夜。然后将混合物静置至室温，过滤收集白色固体。于40℃真空干燥过夜后，得到标题化合物，为白色，主要为结晶粉末(38.7mg)。M.pt.起始～150℃。
实施例2B：方法2
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺富马酸盐(E2B)
将E2游离碱(413.7mg)和富马酸(107.4mg)在甲基异丁基酮(8mL)和1，4-二噁烷(4mL)中的混合物用热空气枪加热，得到黄色溶液。冷却后，形成白色胶状物沉淀，再次加热混合物以溶解胶状物，然后将由上述方法1中得到的富马酸盐种晶(seed)。冷却后，形成胶状物，再加入1，4-二噁烷(2mL)，将混合物加热以溶解胶状物。再于～60℃加入晶种，且将混合物进行温度循环(在1小时单元中0-40℃，但于40℃开始)过周末。向所得‘乳状’浆液中再加入1，4-二噁烷(1.5mL)，刮容器的边缘，然后如上将混合物进行温度循环。9天后，滤出浆液，且将滤饼经～90分钟去除液体(de-liquored)得到白色固体，其于40℃真空下干燥。20小时后，得到标题化合物，为白色，主要为结晶粉末(377.2mg)。
热分析
使用TA Q1000量热仪(序列号1000-0126)得到产物的DSC热分析图。将样品称重至铝盘中，将盘盖置于顶部并轻微地弯折而不密封该盘。使用加热速度为10℃分钟^-1进行实验。熔解起始141℃。
X-射线粉末衍射(XPRD)
XRPD数据在PANalytical X’Pert Pro粉末衍射仪上获得，型号PW3040/60，序列号DY1850，使用XCelerator检测器。检测条件：辐射：CuKα，发生器电压：40kV，发生器电流：45mA，起始角度：2.0°2θ，终止角度：40.0°2θ，步长：0.0167°2θ，每步时间：31.75秒。样品通过下述方法制备，将几毫克的样品置于Si晶片(无反射)样品架上，得到薄层粉末。特征的XPRD角度和d-间距记录在下表中。
峰位置使用Highscore软件测量。
 特征XPRD峰位置      2θ/°            d-间距/A4.519.58.910.09.89.012.27.313.06.814.66.116.05.616.75.317.75.018.94.720.24.421.14.222.14.023.53.824.13.725.23.526.33.427.03.3
实施例2B：方法3
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺富马酸盐(E2B)
将E2游离碱(201.9mg)和富马酸(53.9mg)在EtOAc(2mL)中的混合物在室温下搅拌。5分钟后，开始生成乳白色胶状沉淀，再加入EtOAc(2mL)，同时加入上述方法2中得到的富马酸盐的晶种。1小时后，沉淀变得浓稠和凝胶状，因而加入另外的EtOAc(2ml)和晶种。将混合物在室温下搅拌0.5小时，然后温热至40℃，保持0.5小时。再加入EtOAc(5mL)并于40℃继续搅拌10分钟，然后于60℃搅拌2小时。将混合物冷却至50℃，保持～1小时，然后至40℃保持～1小时，然后至室温过夜。氩气下滤出固体，用EtOAc洗涤，氩气下半干燥，然后于60℃真空下干燥得到标题化合物(164mg)。
实施例2B：方法4
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺富马酸盐(E2B)
搅拌精细粉碎的富马酸(267mg)在EtOAc(10mL)中的部分混悬液/溶液，并于60℃加热。将其分批加入至E2游离碱(0.9997g)在EtOAc(20ml)中的溶液中，于70℃加热。任何开始的浑浊/胶状物快速消失，但当继续添加时，溶液保持轻微浑浊。这时，溶液用上述方法3得到的富马酸盐种晶，且在几分钟内开始生成大量结晶沉淀。用～3小时继续加入富马酸混悬液/溶液。反应混合物于70℃下再搅拌1小时，然后缓慢冷却至室温，同时搅拌过夜。过滤收集的固体，用EtOAc洗涤，氩气下干燥，然后于60℃真空下进一步干燥过夜，得到标题化合物(1.077g)。δ_H(CD₃OD，400MHz)7.95(1H，d)，7.74(1H，dd)，7.31(2H，d)，7.17(2H，d)，7.14(2H，t)，7.05(2H，dd)，6.78(1H，d)，6.68(2H，s)，3.56(2H，s)，3.46(3H，s)，3.30(2H+MeOH，m)，3.11(1H，m)，2.89(2H，m)，2.32(1H，m)，2.10(1H，dd)，1.25(3H，d)(没有观察到NH)。
热分析
使用TA Q1000量热仪(序列号Q1000-0264)得到产物的DSC热分析图。将样品称重至铝盘中，将盘盖置于顶部并轻微地弯折而不密封该盘。使用加热速度为10℃分钟^-1进行实验。熔解起始153℃。
X-射线粉末衍射(XPRD)
对于实施例2B的XRPD数据：在PANalytical X’Pert MPD粉末衍射仪上获得方法4，型号PW3040/60，序列号DY667，使用XCelerator检测器。检测条件：辐射：CuKα，发生器电压：40kV，发生器电流：45mA，起始角度：2.0°2θ，终止角度：40.0°2θ，步长：0.0167°2θ，每步时间：48.26秒。样品通过下述方法制备，将几毫克的样品置于Si晶片(无反射)样品架上，得到一薄层粉末。特征的XPRD角度和d-间距记录在下表中。峰位置使用Highscore软件测量。
 特征XPRD峰位置      2θ/°    d-间距/A        9.09.99.79.112.27.213.76.515.45.715.85.616.15.516.75.317.15.218.04.918.34.919.14.619.44.619.74.520.34.420.94.322.54.022.93.925.23.525.63.5
实施例2B：方法5
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺富马酸盐(E2B)
搅拌精细粉碎的富马酸(13.84g)在EtOAc(10mL)中的混悬液，并于70℃下加热。将其分批加入至搅拌的E2游离碱(57.80g)在EtOAc(1L)中的溶液中，于70℃下加热。当加入～80-100mL富马酸混悬液时，用上述得到的富马酸盐(40mg)(使用与实施例2B，方法4中所述相似方法制备)种晶。向所得稍浑浊的溶液中再加入富马酸混悬液(～50mL)，得到浑浊溶液。再加入晶种(40mg)后开始结晶。以8-10mL份经～4小时加入剩余的富马酸混悬液。使用另外的EtOAc(～30mL)以促使富马酸的最终固体残余物转移到反应容器中。反应混合物于70℃再搅拌4小时，然后缓慢冷却至室温，搅拌过夜。过滤收集结晶固体，用EtOAc洗涤，并在氩气下干燥；然后于60℃真空下进一步干燥过夜，得到标题化合物(60.8g)。
δ_H(CD₃OD，400MHz)7.95(1H，d)，7.74(1H，dd)，7.31(2H，d)，7.17(2H，d)，7.13(2H，t)，7.05(2H，dd)，6.78(1H，d)，6.68(2H，s)，3.56(2H，s)，3.46(3H，s)，3.30(2H+MeOH，m)，3.11(1H，m)，2.89(2H，m)，2.32(1H，m)，2.10(1H，dd)，1.25(3H，d)(没有观察到NH)。
δ_H(DMSO-d₆，400MHz)7.97(1H，d)，7.65(1H，dd)，7.16-7.25(6H，m)，7.10(2H，dd)，6.87(1H，d)，6.46(2H，s)，3.45(2H，s)，3.36(3H，s)，3.08(2H，m)，2.85(1H，m)，2.68(2H，m)，2.16(1H，m)，1.93(1H，dd)，1.09(3H，d)(没有观察到NH)。
MS(ES)：MH⁺ 435.3
实施例3
1-(4-氟苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-哌啶甲酰胺(E3)

向冰浴冷却的(2S)-4-({4-[{[1-(4-氟苯基)-4-哌啶基]羰基}(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D59)(0.19g，0.36mmol)的DCM(5mL)溶液中加入TFA(1.5mL)，然后将反应混合物在室温下搅拌3小时。除去溶剂，将粗产物通过SCX柱用甲醇然后用2M NH₃的甲醇溶液洗脱，得到黄色油状物，将其通过柱色谱进一步纯化。用0-5％(2M NH₃的甲醇溶液)/DCM洗脱，得到标题化合物，为黄色油状物(0.13g)。δ_H(MeOD，250MHz)7.48(2H，d)，7.30(2H，d)，7.13(2H，d)，6.84(2H，d)，3.59(4H，m)，3.23(3H，s)，3.18(2H，d)，3.01(1H，m)，2.90(2H，t)，2.31(4H，m)，2.02(1H，m)，1.85(2H，m)，1.70(2H，d)，1.17(3H，d)[没有观察到NH]。MS(ES)：MH⁺ 425.2。
将其全部溶于DCM中，并用1M HCl的Et₂O溶液(0.337mL)处理得到标题化合物的盐酸盐，为白色固体(0.1g)。MS(ES)：MH⁺ 425.1。
下述表内的实施例E4-E37是使用与对于实施例1、2或3所述相似的方法，由表中所示的合适的Boc-保护的中间体制备。








实施例38和实施例39
6-(2-氰基苯基)-N，2-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E38)

和
6-[2-(氨基羰基)苯基]-N，2-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E39)

将(2S)-4-({4-[{[6-(2-氰基苯基)-2-甲基-3-吡啶基]羰基}(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D44)(0.309g，0.573mmol)在DCM(20mL)中搅拌，并滴加TFA(5mL)。搅拌反应混合物～1小时，然后在真空中浓缩，且再用DCM和水稀释。分离的水层用浓NaOH溶液碱化至pH为14，然后用DCM萃取，干燥(Na₂SO₄)并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用0-10％ MeOH/DCM洗脱，得到E38，为粉色油状物(0.219g)。MS(ES)：MH⁺ 440.3。
将全部溶于MeOH中，并加入1M HCl的Et₂O(0.598mL)溶液。除去溶剂得到粗产物混合物，将其通过MDAP纯化，得到标题化合物E38和E39的粗制甲酸盐。E38甲酸盐通过SCX柱用甲醇、然后用2M NH₃的甲醇溶液洗脱，得到E38游离碱(0.051g)，为白色固体。δ_H(CDCl₃，400MHz)7.75(2H，m)，7.64(1H，m)，7.43(3H，m)，7.16(2H，d)，6.98(2H，d)，3.65(3H，s)，3.36(2H，s)，2.83(3H，m)，2.63(5H，m)，1.91(1H，m)，1.59(1H，m)，1.35(br.s)0.95(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 440.3。
E39甲酸盐通过SCX柱用甲醇然后用2M NH₃的甲醇溶液洗脱，得到粗制的E39游离碱(0.026g)，为无色油状物，将其通过柱色谱进一步纯化。用0-10％(2M NH₃的甲醇溶液)/DCM洗脱，得到E39游离碱，为无色油状物(0.024g)。δ_H(MeOH，400MHz)7.50(5H，br.d)，7.23(3H，m)，7.16(2H，m)，3.51(3H，s)，3.14(2H，s)，3.35(3H，s)，2.82(3H，m)，2.64(2H，m)，2.51(3H，s)，1.96(1H，m)，1.56(1H，m)，0.95(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 458.1。
将E39游离碱溶于MeOH中，并用1M HCl的Et₂O溶液(0.058mL)处理，得到E39的盐酸盐，为浅黄色固体(0.011g)。MS(ES)：MH⁺ 458.1。
实施例40
6-(2-氰基苯基)-N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E40)

将(2S)-4-({4-[{[6-(2-氰基苯基)-3-吡啶基]羰基}(甲基)氨基]苯基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D49)(0.091g，0.173mmol)在DCM(10mL)中搅拌，并滴加TFA(2.5mL)。搅拌反应混合物～1小时，然后在真空中浓缩，并再用DCM和水稀释。将分离的水层用浓NaOH溶液碱化至pH为14，然后用DCM萃取，干燥(Na₂SO₄)并浓缩，得到粗产物，将其通过柱色谱纯化。用0-10％ MeOH/DCM洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(0.054g)。δ_H(CDCl₃，400MHz)8.59(1H，s)，7.83(1H，dd)，7.78(2H，m)，7.67(1H，m)，7.50(1H，m)，7.23(2H，d)，7.05(2H，d)，3.54(3H，s)，3.45(2H，s)，2.89-3.02(3H，m)，2.71(2H，m)，2.09(1H，t)，1.79(1H，t)，1.75(br.s)1.07(3H，d)。MS(ES)：MH⁺ 426.2。
将标题化合物(0.054g)溶于MeOH(0.54mL)中。将部分该溶液(0.20mL)用1M HCl的Et₂O溶液处理，但导致部分分解成相应的2-伯酰胺化合物。将残余的MeOH溶液(0.34mL)再浓缩，并真空干燥得到标题化合物，为灰白色固体。
下表内的实施例E41-E53是使用对于实施例1、2或3所述相似的方法，由表中所示的合适的Boc-保护的中间体制备。










实施例77
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-甲基-N-(4-甲基-5-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}-2-吡啶基)-3-吡啶甲酰胺(E77)

将(2S)-4-({6-[({6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶基}羰基)(甲基)氨基]-4-甲基-3-吡啶基}甲基)-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D118)(26mg，0.047mmol)溶于无水DCM(4mL)中。加入TFA(1mL)，将反应混合物在室温下在氩气下搅拌。浓缩反应混合物，再溶于甲醇(2mL)中，并装载到1g SCX柱上。用甲醇(20mL)洗脱，然后用2M NH₃的甲醇(20mL)溶液洗脱，得到无色油状物。产物通过MDAP进一步纯化。将所得油状物溶于甲醇(1mL)中，并加到1g SCX柱上，并用甲醇(20mL)洗脱，然后用2M NH₃的甲醇(20mL)溶液洗脱，得到标题化合物，为无色油状物(15mg)。MS(ES)：MH⁺ 450.1。
将全部溶于MeOH(1mL)中，并用1M HCl的Et₂O溶液(0.037mL)处理，得到标题化合物的盐酸盐，为白色固体(13.6mg)。MS(ES)：MH⁺ 450.3。
实施例78
N，2′-二甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3，4′-联吡啶-6-甲酰胺(E78)

使用与实施例1中对于E1所述相似的方法，除了盐酸盐的制备在DCM/MeOH(1:1)中进行，由(2S)-2-甲基-4-[(4-{甲基[(2′-甲基-3，4′-联吡啶-6-基)羰基]氨基}苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D130)制备标题化合物。δ_H(MeOD，400MHz)8.96(1H，br.m)，8.76(1H，d)，8.39(1H，br.m)，8.33(1H，s)，8.23(1H，d)，7.81(1H，br.d)，7.58(2H，br.s)，7.36(2H，br.s)，3.86(1H，br.s)，3.58-3.71(4H，m)，3.54(3H，s)，3.44(1H，m)，3.34(2H，s)，3.30(1H，m)，2.85(3H，s)，1.40(3H，d)，没有观察到NH。MS(ES⁺)：316.1，没有观察到分子离子(MH⁺)。
实施例79
6-[(4-氟苯基)氧基]-N-[2-(甲氧基)乙基]-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-3-吡啶甲酰胺(E79)

将(2S)-4-[(4-{({6-[(4-氟苯基)氧基]-3-吡啶基}羰基)[2-(甲氧基)乙基]氨基}苯基)甲基]-2-甲基-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D119)(0.077g，0.13mmol)溶于4M HCl的二噁烷(5mL)中。加入几滴水，并搅拌反应2小时。真空除去溶剂，且将所得黄色油状物溶于MeOH中，并加到SCX柱上，用DCM、MeOH和2M NH₃的MeOH溶液洗脱。合并含氨馏分，并浓缩，得到标题化合物，为黄色油状物(0.0667g)。MS(ES)：MH⁺ 479.4。
将全部溶于DCM/MeOH(1:1，2mL)中，并用1M HCl的Et₂O溶液(0.15mL)处理。放置10分钟后，除去溶剂得到标题化合物的盐酸盐(0.053g)，为淡黄色固体。MS(ES)：MH⁺ 479.4。
下述表内的实施例E80-E85是使用对于实施例79所述相似的方法，由表中所示的合适的Boc-保护的中间体制备。


实施例86
N-甲基-N-(4-{[(3S)-3-甲基-1-哌嗪基]甲基}苯基)-4-{[4-(三氟甲基)苯基]羰基}苯甲酰胺(E86)

将(2S)-2-甲基-4-[(4-{甲基[(4-{[4-(三氟甲基)苯基]羰基}苯基)羰基]氨基}苯基)甲基]-1-哌嗪羧酸1，1-二甲基乙基酯(D123)(0.244g，0.41mmol)溶于4MHCl的二噁烷(5mL)溶液中，且搅拌反应2小时。真空除去溶剂得到标题化合物的二盐酸盐，为灰白色固体(0.203g)，其在真空中进一步干燥。MS(ES)：MH⁺ 496.1。
下述表内的实施例E87-E93是使用对于实施例E1、E2、E3或E79所述相似的方法制备的。


GPR38 FLIPR功能激动测试方案
测试前24小时，将稳定表达GPR38受体的CHO-K1细胞接种(10,000细胞/孔)到聚-D-赖氨酸涂覆的384-孔黑壁透明底微量滴定板(Greiner)中。测试当天，使用细胞冲洗器从细胞板抽取培养基(剩余10ul培养基)。将细胞即刻加到加样缓冲液[Tyrodes(Elga水+145mM NaCl+5mM KCl+20mMHEPES+10mM葡萄糖+1mM MgCl₂)+1.5mM CaCl₂+0.714mg/mLProbenicid(预先溶解在1M NaOH中)+0.25mM亮黑+2uM Fluo 4染料]中，并于37.5℃孵育1小时。
然后将板在荧光成像读板仪(Fluorometric Imaging Plate Reader，FLIPR，Molecular Devices)上测试。
母化合物板在100％ DMSO中制备。使用3mM的高浓度(在测试中得到12μM最终浓度)，并连续稀释1/4。将来自母板的1ul转移到子板，向其中加入50μl化合物稀释缓冲液(Tyrodes+1mg/mL BSA+1.5mM CaCl₂)。在FLIPR中，将10ul测试化合物加入到细胞中，经1分钟时帧测量荧光的改变。将对于荧光对于基线的最大改变用于确定激动响应，并使用4-参数对数方程推导浓度响应曲线。
在其它方案中，加样缓冲液为HBSS{Elga水+137mM NaCl+5mMKCl+0.41mMa KH2PO4(无水)+20mM HEPES+5mM葡萄糖+0.81mMMgSO4(无水)+1.3mM CaCl2+4.16mM NaHCO3}+0.25mM亮黑+2uMFluo4染料和从冷冻的等分部分解冻的CHO-K1细胞，且试验前24小时接种。
本发明的实施例1至86在一个或多个上述FLIPR测试中具有pEC50≥6.0。