蜂花粉无糖活性速溶颗粒.pdf

本发明提供一种蜂花粉活性成分速溶颗粒的制备方法及产品，是采用复合酶酶解破壁方法进行蜂花粉破壁后与常用赋型剂制备成颗粒。植物复合水解酶酶解蜂花粉是现今最新的工艺方法，与其它方法相比较，该方法具有简单、条件温和、容易操作、反应过程耗时短、破壁率高等显著特点。蜂花粉经酶解后，其中的主要活性成分含量显著提高，所含致敏物质被酶解分解，从而既大幅度提高了产品的营养价值，又提高了花粉产品的食用安全性，提升产品品质。

1、  一种蜂花粉活性成分速溶颗粒的制备方法，其特征在于，主要包括以下步骤：
A.配制柠檬酸缓冲溶液：将柠檬酸5.50-50.50g和柠檬酸钠14.70-60.00溶于150-200ml去离子水中，调整缓冲溶液的pH值至2.5-6.8，取60-120ml缓冲溶液倒入250ml的锥形瓶中；
B.将所述缓冲溶液在灭菌锅中0.05-0.50Mpa，灭菌15-45min，取出冷却后备用；
C.取植物复合水解酶80-400μl，将其加入到上述冷却的缓冲溶液中至溶解，再称取经干热灭菌的蜂花粉5-45g加入到该锥形瓶中，混和均匀；
D.摇床培养：在转速120-250rpm，反应温度30-45℃，提取时间2-10h，pH2.5-6.8的条件下，确保花粉酶解破壁充分；
E.反应混合液经减压过滤得提取液，冷冻干燥得到浓缩液；
F.将过滤后的不溶性固形物在40-120℃恒温烘箱烘干至恒重；
G.制粒：将所述浓缩液、所述不溶性固形物与药物学常用无糖型赋型剂、溶剂混合后制成颗粒。

2、  根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述植物复合水解酶选自纤维素酶、果胶酶、蛋白酶中的两种及两种以上任意比例混合物。

3、  根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于所述植物复合水解酶为纤维素酶1-5份，果胶酶1-5份，蛋白酶1-5份，均为重量份。

4、  根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于所述植物复合水解酶为纤维素酶、果胶酶、蛋白酶的重量比为1:1:1的混合物。

5、  根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述摇床培养的条件优选为反应温度45℃，提取时间6h，pH3.4。

6、  根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述制粒包括以下步骤，分别称取如下重量份数的原料：所述浓缩液20-80份、可溶性淀粉20-50份、不溶性固形物10-90份、木糖醇2-10份、羧甲基纤维素2-10份和麦芽糊精10-50份混合均匀，加入30-100ml乙醇溶液和食用香精适量活成团状，于20目筛上搓成颗粒，散开，30-60℃烘干1-4小时。

7、  根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于所述制粒包括以下步骤，分别称取如下重量份数的原料：所述浓缩液50份、可溶性淀粉30份、不溶性固形物20份、木糖醇3份、羧甲基纤维素4份和麦芽糊精25份混合均匀，加入50ml乙醇溶液和占原料总重0.5-1％的食用香精活成团状，于20目筛上搓成颗粒，散开，40℃烘干2小时。

8、  根据权利要求6或7所述的制备方法，其特征在于所述乙醇溶液为蒸馏水和无水乙醇按体积比1:4-4:1配制而成。

9、  一种蜂花粉活性成分速溶颗粒，其特征在于，其是根据权利要求1-8所述的方法制备得到的。

10、  权利要求9所述的蜂花粉活性成分速溶颗粒作为食品添加剂或医药保健品的用途。

蜂花粉无糖活性速溶颗粒
技术领域
本发明涉及一种蜂花粉无糖活性速溶颗粒及其制备方法，属于医药、保健食品领域。
背景技术
自《本草纲目》以来，蜂花粉的全面复合型营养和神奇功效，一直受到国人追捧，在中国民间具有广泛的药用和食用群体。近年来，在部分功能性食品和药品不断出现安全事故的背景下，追求平衡健康、重视食疗食补以及回归天然的科学理念再度回归。近年来，蜂花粉其产品的开发利用研究在国内外已再次引起广泛地开展，已引起人们的重视。欧、美一些国家兴起花粉热，利用花粉食品，提高食品业营养价值。我国也利用花粉作食品添加剂和医药保健品，提高食品的营养价值和防病治病。
蜂花粉是蜜蜂从种子植物的花朵上采集花粉过程中形成的花粉团，含有人体所必需的蛋白质(SOD、多种氨基酸)、脂类、碳水化合物、多种维生素(维生素C、E、A、D、P、B₁、B₆)和微量元素(K、P、Fe、Cu、Mn、Mg、Ca、Zn等等)，以及对人体生理机能有特殊功效的黄酮类、核酸、天然植物激素、性激素和促性腺激素等多种生物活性物质，在国际上其被称为“完全营养品”。具有明显的增强人体免疫力、抗疲劳、延缓衰老、美容以及治疗前列腺疾病等作用。
我国幅员辽阔，蜂花粉资源丰富，特别是近年来，我国油菜的栽种面积增加，因而油菜蜂花粉是高产价廉的蜂花粉，虽然油菜蜂花粉对人体有许许多多的益处，但其固有的腥涩气味以及一定的致敏性往往使部分消费者避而远之。
根据花粉的结构可知，成熟的花粉壁分为明显的2层，即内壁和外壁。外壁较厚、硬而缺乏弹性，主要成分是纤维素，具有抗酸、抗生物分解的特性。外壁通常有萌发孔或沟缝，为外壁最薄弱的地方，花粉粒萌发时由此伸出花粉壁。其外壁结构中的孢粉素具有耐酸、耐碱、耐温、耐压以及对胃酸和其他消化系统酶非常稳定的理化特性，不少研究表明当花粉进入人体的消化道时，虽然可以通过表面的萌发孔释放一些营养成分，但为数极少，因此为了提高花粉的开发利用价值，对其进行特殊的破壁处理就显得尤为重要。
花粉破壁是指花粉的细胞受到不同程度的损伤，以便花粉内含营养物质的释放、吸收和利用。它是花粉加工中的一个关键技术。
目前国内外报道的花粉破壁方法包括湿法破壁和干法破壁。湿法破壁方法主要有：温差破壁法、机械破壁法、有机溶剂破壁法、发酵酶解破壁法等；干法破壁主要有微波辐射破壁法和气流粉碎法。现有的破壁方法各有其优点，但是缺点同样明显，或者处理周期长，对花粉的营养成分破坏较大；或者破壁过程中产生大量热量，导致花粉酶活的丧失；或者工艺复杂且成本昂贵，增加产品成本，在生产中不易推广使用。
发明内容
为了解决上述问题，本发明的目的在于提供一种蜂花粉活性成分速溶颗粒的制备方法及产品，是采用复合酶酶解破壁方法进行蜂花粉破壁后与常用赋型剂制备成颗粒。植物复合水解酶酶解蜂花粉是现今最新的工艺方法，与其它方法相比较，该方法具有简单、条件温和、容易操作、反应过程耗时短、破壁率高等显著特点。蜂花粉经酶解后，其中的主要活性成分含量显著提高，所含致敏物质被酶解分解，从而既大幅度提高了产品的营养价值，又提高了花粉产品的食用安全性，提升产品品质。
为了达到所述目的，本发明提供一种蜂花粉活性成分速溶颗粒的制备方法，其主要包括以下步骤：
1.配制柠檬酸缓冲溶液：将柠檬酸5.50-50.50g和柠檬酸钠14.70-60.00g溶于150-200ml去离子水中，调整缓冲溶液的pH值为2.5-6.8，取60-120ml缓冲溶液倒入250ml的锥形瓶中；
2.将所述缓冲溶液在灭菌锅中0.05-0.50Mpa，灭菌15-45min，取出冷却后备用；
3.取植物复合水解酶80-400μl，将其加入到上述冷却的缓冲溶液中至溶解，再称取经干热灭菌的蜂花粉5-45g加入到该锥形瓶中，混和均匀；
4.摇床培养：在转速120-250rpm，反应温度30-45℃，提取时间2-10h，pH2.5-6.8的条件，确保花粉酶解破壁充分；
5.反应混合液经减压过滤得提取液，测量提取液总体积，并测其总黄酮、SOD酶活力，再取50ml冷冻干燥得到浓缩液，计算蜂花粉提取率。
6.将过滤后的不溶性固形物(其主要成分包括纤维素、半纤维素、花粉多糖、脂肪、蛋白质和矿物质)取样，在40-120℃恒温干燥箱烘干，至含水量2.5-12.5％。
7.制粒：将上述浓缩液、不溶性固形物与药物学常用赋型剂(无糖型)、溶剂混合后制成颗粒。
其中，所述植物复合水解酶选自纤维素酶、果胶酶、蛋白酶中的一种以上任意比例混合物，优选含纤维素酶:果胶酶:蛋白酶的重量比为1-5:1-5:1-5，更优选纤维素酶:果胶酶:蛋白酶的重量比为1:1:1。
所述摇床培养的条件优选为反应温度45℃，提取时间6h，pH3.4。
所述步骤7中的制粒例如可以采用药典所述的配方和方法。在本发明的较佳实施例中，采用如下方法：
分别称取如下重量份数的原料：所述浓缩液20-80份、可溶性淀粉20-50份、不溶性固形物10-90份、木糖醇2-10份、羧甲基纤维素2-10份和麦芽糊精10-50份混合均匀，加入乙醇溶液30-100ml和食用香精适量活成团状，于20目筛上搓成颗粒，散开，30-60℃烘干1-4小时。通风冷却，装袋。
其中，优选的，是将所述浓缩液50份、可溶性淀粉30份、不溶性固形物20份、木糖醇3份、羧甲基纤维素4份和麦芽糊精25份混合均匀，加入50ml乙醇溶液和占原料总重0.5-1％的食用香精活成团状，于20目筛上搓成颗粒，散开，40℃烘干2小时。
其中，所述乙醇溶液为蒸馏水和无水乙醇按体积比1:4-4:1配制而成，优选体积比1:1。
经本发明方法制备得到的提取液总体积为200-280ml，蜂花粉提取率为25-55％，不溶性固形物含水量为2.5-12.5％。所制得的油菜蜂花粉颗粒按中国药典2005版颗粒剂进行理化质量检查。
本发明得到的酶解蜂花粉颗粒破壁率高，活性成分含量大大提高，花粉黄酮含量平均提高了2.07倍，花粉SOD酶活力也有较高的保留。酶解花粉其感官指标亦有显著提升：颜色由酶解前因花源差异导致的花粉颗粒自然色差，改善为均一柔和淡黄色；口感由酶解前微涩味，改善为具有植物自然清新及低度甜味。花粉经酶解后，过敏原被水解破坏，提高了产品生物安全度。
附图说明
图1为蜂花粉速溶颗粒剂展示图；
图2为蜂花粉速溶颗粒剂5min溶解图；
图3为蜂花粉速溶颗粒剂展示图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明，应该理解的是，这些实施例仅用于例证的目的，决不限制本发明的保护范围。
[对照例1]本例为空白对照组。
配制柠檬酸缓冲溶液，将柠檬酸5.50-50.50g和柠檬酸钠14.70-60.00g溶于200ml去离子水中，调整缓冲溶液的pH值至2.5-6.8，取80ml缓冲溶液倒入250ml的锥形瓶中；将所述缓冲溶液在灭菌锅中0.1Mpa，灭菌20min，取出冷却后备用；
将20g经干热灭菌的蜂花粉加入到上述缓冲液中，上摇床培养，在转速为120rpm，反应温度45℃，提取时间6h，pH3.4的条件下，充分破壁。反应混合液经减压抽滤后，测量得到的提取液体积为200ml，之后取50ml浓缩，液冷冻干燥，测得其总黄酮含量为247.249mg/100g，其SOD酶活力为203.160U/mL。
将抽滤后的不溶性固形物取样，在40-120℃恒温烘箱烘干至恒重计算含水量为4.5％。
将上述浓缩液50g、可溶性淀粉30g、不溶性固形物20g、木糖醇3g、羧甲基纤维素4g和麦芽糊精25g混合均匀，加入50ml乙醇溶液(蒸馏水和无水乙醇按体积比1:1配置而成)和食用香精(占原料总重的0.6％)活成团状，于20目筛上搓成颗粒，散开，40℃烘干2小时即得本发明颗粒。
[实施例1]
缓冲溶液的制备同对照例1。取80μl植物复合水解酶(纤维素酶:果胶酶:蛋白酶的重量比为1:1:1)，和20g蜂花粉同时加入到缓冲液中，在转速为120rpm，反应温度45℃，提取时间6h，pH3.4的条件下，充分破壁。反应混合液经减压抽滤后，测量得到的提取液体积为250ml，之后取50ml浓缩，冷冻干燥，测得其总黄酮含量为335.520mg/100g，其SOD酶活力为149.96U/mL。
将抽滤后的不溶性固形物取样，在40-120℃恒温烘箱烘干至恒重计算含水量为5.0％。
将上述浓缩液50g、可溶性淀粉30g、不溶性固形物20g、木糖醇3g、羧甲基纤维素4g和麦芽糊精25g混合均匀，加入50ml乙醇溶液(蒸馏水和无水乙醇按体积比1:1配置而成)和食用香精(占原料总重的0.6％)活成团状，于20目筛上搓成颗粒，散开，40℃烘干即得本发明颗粒。
[实施例2]
缓冲溶液的制备同对照例1。取80μl植物复合水解酶(纤维素酶∶果胶酶∶蛋白酶的重量比为2:1:1)，和20g蜂花粉同时加入到缓冲液中，在转速为150rpm，反应温度45℃，提取时间6h，pH3.4的条件下，充分破壁。反应混合液经减压抽滤后，测量得到的提取液体积为280ml，之后取50m浓缩，冷冻干燥，测得其总黄酮含量为352.603mg/100g，其SOD酶活力为203.15U/mL。
将抽滤后的不溶性固形物取样，在60℃恒温烘箱烘干至恒重计算含水量为2.5％。
将上述浓缩液20g、可溶性淀粉50g、不溶性固形物50g、木糖醇7g、羧甲基纤维素6g和麦芽糊精25g混合均匀，加入70ml乙醇溶液(蒸馏水和无水乙醇按体积比1:4配置而成)和食用香精(占原料总重的1％)活成团状，于20目筛上搓成颗粒，散开，40℃烘干即得本发明颗粒。
[实施例3]
缓冲溶液的制备同对照例1。取100μl植物复合水解酶(纤维素酶:果胶酶:蛋白酶的重量比为5:3:1)，和40g蜂花粉同时加入到缓冲液中，在转速为150rpm，反应温度45℃，提取时间10h，pH6.8的条件下，充分破壁。反应混合液经减压抽滤后，测量得到的提取液体积为250ml，之后取50ml提取液冷冻干燥得到浓缩液，测得其总黄酮含量为389.063mg/100g，其SOD酶活力为214.14U/mL。
将抽滤后的不溶性固形物取样，在100℃恒温烘箱烘干至恒重计算含水量为10.0％。
将上述浓缩液80g、可溶性淀粉40g、不溶性固形物10g、木糖醇8g、羧甲基纤维素4g和麦芽糊精15g混合均匀，加入80ml乙醇溶液(蒸馏水和无水乙醇按体积比4:1配置而成)和食用香精(占原料总重的0.7％)活成团状，于20目筛上搓成颗粒，散开，60℃烘干2小时即得本发明颗粒。
[实施例4]
缓冲溶液的制备同对照例1。取200μl植物复合水解酶(纤维素酶:果胶酶:蛋白酶的重量比为1:4:2)，和30g蜂花粉同时加入到缓冲液中，在转速为150rpm，反应温度40℃，提取时间4h，pH3.4的条件下，充分破壁。反应混合液经减压抽滤后，测量得到的提取液体积为210ml，之后取50ml提取液冷冻干燥得到浓缩液，测得其总黄酮含量为439.063mg/100g，其SOD酶活力为256.61U/mL。
将抽滤后的不溶性固形物取样，在80℃恒温烘箱烘干至恒重计算含水量为6.0％。
将上述浓缩液20g、可溶性淀粉20g、不溶性固形物90g、木糖醇8g、羧甲基纤维素10g和麦芽糊精40g混合均匀，加入100ml乙醇溶液(蒸馏水和无水乙醇按体积比1:1配置而成)和食用香精(占原料总重的0.8％)活成团状，于20目筛上搓成颗粒，散开，40℃烘干4小时即得本发明颗粒。
[实施例5]
缓冲溶液的制备同对照例1。取300μl植物复合水解酶(纤维素酶:果胶酶:蛋白酶的重量比为2:4:3)，和10g蜂花粉同时加入到缓冲液中，在转速为150rpm，反应温度35℃，提取时间6h，pH4.5的条件下，充分破壁。反应混合液经减压抽滤后，测量得到的提取液体积为270ml，之后取50ml提取液冷冻干燥得到浓缩液，测得其总黄酮含量为472.190mg/100g，其SOD酶活力为267.30U/mL。
将抽滤后的不溶性固形物取样，在120℃恒温烘箱烘干至恒重计算含水量为5.8％。
将上述浓缩液50g、可溶性淀粉30g、不溶性固形物60g、木糖醇2g、羧甲基纤维素10g和麦芽糊精15g混合均匀，加入40ml乙醇溶液(蒸馏水和无水乙醇按体积比2:1配置而成)和食用香精(占原料总重的0.9％)活成团状，于20目筛上搓成颗粒，散开，20℃烘干3小时即得本发明颗粒。
[实施例6]
缓冲溶液的制备同对照例1。取400μl植物复合水解酶(纤维素酶:果胶酶:蛋白酶的重量比为5:2:4)，和20g蜂花粉同时加入到缓冲液中，在转速为120rpm，反应温度45℃，提取时间5h，pH3.4的条件下，充分破壁。反应混合液经减压抽滤后，测量得到的提取液体积为240ml，之后取50ml提取液冷冻干燥得到浓缩液，测得其总黄酮含量为512.813mg/100g，其SOD酶活力为320.77U/mL。
将抽滤后的不溶性固形物取样，在105℃恒温烘箱烘干至恒重计算含水量为11.2％。
将上述浓缩液50g、可溶性淀粉40g、不溶性固形物10g、木糖醇3g、羧甲基纤维素10g和麦芽糊精25g混合均匀，加入50ml乙醇溶液(蒸馏水和无水乙醇按体积比1:3配置而成)和食用香精(占原料总重的0.5％)活成团状，于20目筛上搓成颗粒，散开，40℃烘干1小时即得本发明颗粒。
以上所述仅为本发明的较佳实施例，对本发明而言仅仅是说明性的，而非限制性的。本专业技术人员理解，在本发明权利要求所限定的精神和范围内可对其进行许多改变，修改，甚至等效，但都将落入本发明的保护范围内。