刺参优质苗种的高强度选择培育方法 技术领域：
本发明属于水产动物苗种选育技术，尤其是一种可对不同地理群体亲参进行培育、促其产卵、排精、杂交，使所培育的刺参苗种具有生长速度快，抗逆性强等优点、适合大规模工厂化的刺参优质苗种的高强度选择培育方法。
背景技术：
刺参Apostichopus japonicus(Selenka)体壁厚而柔软，富含胶元蛋白、酸性粘多糖以及海参皂苷，具有很高的营养价值和药用价值，位列“海产八珍”之一，是我国最主要的经济种类。近几年，随着人们对刺参需求量的增加，采捕强度逐渐增大，造成我国刺参资源量急剧下降，为此刺参的人工养殖规模也在不断扩大。但是目前养殖所用参苗多数是没有经过系统选育的品种，只是一般的育苗方法，出苗周期长且出苗率低。同时经过累代养殖，出现了刺参苗种的生长速度减慢、抗逆性降低以及养殖病害日趋严重等一系列问题，制约着刺参产业的发展。
杂交育种和选择育种等方法是常用的遗传改良手段，杂交育种的亲本经过人工选择育种后其杂种优势较高；选择育种是以数量遗传学为理论依据的“数量遗传学方法”，即根据数量遗传学的原理和方法，对动物进行适当的选种选配，以提高育种群体的优良基因频率，降低不良基因频率，从而达到从遗传上改良动物经济性状的目的。目前，杂交育种和选择育种方法在鲤鱼、罗非鱼、鲶鱼、虹鳟鱼、鲑鱼、贝类、蟹类和虾类等甲壳动物中都有成功的报道，但是迄今为止，对于刺参还未发现可以实现持续健康发展且技术系统成熟，适合大规模工厂化育种育苗的方法。
发明内容：
本发明是为了解决现有技术所存在的上述问题，提供一种可对不同地理群体亲参进行培育、促其产卵、排精、杂交，使所培育的刺参苗种具有生长速度快，抗逆性强等优点的刺参优质苗种的高强度选择培育方法。
本发明的技术解决方案是：一种刺参优质苗种的高强度选择培育方法，其特征在于按如下步骤进行：
a.亲参的收集
收集至少4个地理群体的2龄半以上亲参，亲参个体鲜活体重不小于300g，采捕数量为每个地理群体至少100头；
b.亲参的蓄养
亲参运回后进行人工蓄养，蓄养池采用水泥水槽，容积30m3，水深1.5m，盐度29～32，PH值7.8～8.5，光照300～1000lx，溶解氧5mg/l以上，暂养密度在10头/立方米以下；亲参进入暂养池后，每日按亲参体重的4％投喂饲料，饲料中蛋白质的重量百分比为20％～25％；蓄养的水温0～2℃并遵循逐渐升温的原则经过低温期、中温期和高温期三个过程，2～5℃时每上升1℃保持1天，6～7℃时每上升1℃保持2天，8～9℃时每上升1℃保持3天，10～11℃时每上升1℃保持4天，12～13℃时每上升1℃保持6天，14～16℃时每上升1℃保持7天，再提高温度至17℃保持2天；水温在10℃以下每天全部换水1次，10天倒池1次；水温在10～15℃每天全部换水2次，7天倒池1次；16℃后，每次换水时留30cm深的水，7天倒池1次。
c.亲参的选择
取相同数量的不同地理群体的亲参，选择比例为1/10～1/3；
d.采卵、受精与孵化
采用阴干、流水刺激各30min，促其产卵、排精，产卵的水温为20℃，将精子、卵子在池中混匀，精子与卵子的比例是在显微镜下观察卵子的一个视野面上有3～5个精子，受精卵的孵化温度是20～22℃，孵化密度为小于10个/ml；
e.选育与分池
当胚体发育至原肠期，进行选育、分池，选育的方法选用拖选法，拖选收集的幼体经定量后，按幼体0.2～0.5个/ml的密度分入各培育池，选育比例低于50％；
f.浮游幼体培育
水温22～24℃，投喂单胞藻类，辅以酵母粉，混合投喂，每天投喂2次；
g.幼体的变态、附着和培育
当幼体长成樽形幼虫阶段，投放附着基，樽形幼虫的密度为0.1～0.2个/ml；稚参附着后，每天换水2次，投喂硅藻、鼠尾藻磨碎液、海泥和干酵母，直至长成苗种。
所述b步骤对亲参进行强化培育，产卵前45～20天用组合饲料A进行强化培育，组合饲料A的各组分及重量百分比是海泥70～90％，成虾料6～10％，鼠尾藻粉2～5％，酵母粉0.5～1％，螺旋藻粉0.5～1％，产卵前20～15天，用组合饲料B进行强化培育，组合饲料B的各组分及重量百分比是海泥60～80％，成虾料10～15％，鼠尾藻粉5～10％，酵母粉1～1.5％，螺旋藻粉1～1.5％。
本发明同现有技术相比，具有如下优点：
1.本发明是对不同地理群体亲参进行培育、促其产卵、排精、杂交，再根据数量遗传学方法在不同时期进行不同程度的选择育种。结合杂交育种和选择育种两种传统而有效的方法，即保存了优良性状又可以避免近交，培育的刺参由于具有不同群体的优良性状从而具有生长速度快，抗逆性强等优点，实现了刺参的提前育苗，可以提前满足市场需求，同时延长了刺参在一年内的有效生长周期，缩短了养殖时间，提高了经济效益，适合于大规模工厂化生产；
2.整个育种育苗过程中，通过采取对亲参和后代进行合理的饵料强化和科学管理的方式，提高了不同地理群体亲参的成活率、受精率、孵化率，实现了整个过程中无药物参与的健康育苗育种，可以避免环境污染，培育出安全优质的刺参苗种。
具体实施方式：
实施例1：
a.亲参的收集
1月份采集来自11个地理群体的刺参，分别为獐子岛、交流岛、复州湾、庄河石城岛、旅顺、长兴岛、广鹿岛、烟台、锦州、营口和丹东沿海，亲参为2龄半以上的个体，总数量3000头左右，平均体重为456g，具体见表1。
根据运输距离、时间以及气温等条件确定运输方法。运输时间在3～4h以内直接用保温箱干运；运输时间较长，用聚乙烯袋中加约1/3海水，每升海水装2～4头刺参，后扎紧袋口，装入泡沫保温箱中运输，必要时加冰袋控制水温。
b.亲参地蓄养
亲参运回后进行人工蓄养，蓄养池采用水泥水槽，容积30m3，水深1.5m，盐度29～32，PH值7.8～8.5，光照300～1000lx，溶解氧5mg/l以上，暂养密度在10头/立方米以下；亲参进入暂养池后，每日按亲参体重的4％投喂鼠尾藻、螺旋藻粉和海泥等饲料，饲料中蛋白质的重量百分比为20％～25％；蓄养的水温0～2℃并遵循逐渐升温的原则经过低温期、中温期和高温期三个过程，2～5℃时每上升1℃保持1天，6～7℃时每上升1℃保持2天，8～9℃时每上升1℃保持3天，10～11℃时每上升1℃保持4天，12～13℃时每上升1℃保持6天，14～16℃时每上升1℃保持7天，再提高温度至17℃保持2天；水温在10℃以下每天全部换水1次，同时清除残饵粪便，10天倒池1次；水温在10～15℃每天全部换水2次，7天倒池1次；16℃后，每次换水时留30cm深的水，避免亲参干露，7天倒池1次。
c.亲参的选择
根据强化后的亲参的发育情况进行选择优亲参用于产卵、排精，按每地理群体亲参的1/10～1/3的比例进行选择，从每个地理群体中选择100头亲参。
d.采卵、受精与孵化
采用阴干、流水刺激各30min，促其产卵、排精，产卵选择在晚7时进行，刺参产卵的水温为20℃，随时监测其产卵情况，产卵后即用显微镜检查精子与卵子数量质量；精子的浓度维持在卵子的一个视野面上3～5个精子即可，每隔半小时搅拌一次，使受精卵在池中混匀，搅动时应不留死角且不能向一个方向旋转，以避免将胚体旋向池中心聚集。胚体孵出后，给予微充气。受精卵的孵化温度控制在20℃，孵化密度控制在10个/ml。1100头亲参的产卵总量达到14亿，受精率和孵化率达到95％以上。
e.选育与分池
当胚体发育至原肠期，进行选育、分池，选育前镜检所浮出的幼体是否正常、健壮，选育的方法选用拖选法，利用事先已制备好的拖选专用网箱进行反复拖选，拖选收集的幼体经定量后，按幼体0.2～0.5个/ml的密度分入各培育池，选育比例低于50％。通过对亲参、幼体不同阶段的高强度的选择，达到选择性状优良个体的目的，使得优良性状的频率不断得到提高，同时结合了不同地理亲参群体杂交的优势，从而使得后代具有生长速度快，抗逆性强等优点。
f.浮游幼体培育
水温22～24℃，投喂盐藻、小新月菱形藻、牟氏角毛藻、三角褐指藻等单孢藻类，辅以海洋红酵母、干酵母粉等饵料，混合投喂，每天投喂2次。浮游幼体单泡藻类的投喂量为小耳幼体1万细胞/毫升，中耳幼体2万/毫升，大耳幼体3万细胞/毫升，换水量为1/4～1/2。
g.幼体的变态、附着和培育
选育后第7天幼体进入樽形幼虫阶段，及时投放附着基，附着基为透明聚乙烯波纹板及框架，聚乙烯波纹板规格为35cm*40cm，每框架内插入20片，樽形幼虫的密度为0.1～0.2个/ml；樽形幼虫附着后，每天换水2次，投喂硅藻、鼠尾藻、海泥和干酵母，直至长成稚参苗种。此阶段的成活率高达80％。
共育成优质苗种达9亿头，出苗可以达到250g/m3，明显高出一般育苗的50g/m3；稚参苗种的规格为10～30万头/kg，直接经济效益300百万元。
整个育苗周期为50天，可以在5月10日即可进行苗种的销售养殖，比正常水温育苗提前了40天、生长速度提高30％以上，苗种规格整齐，一致度好，产量高，经济效益大
实施例2：
其他均同实施例1，只是在b步骤中对亲参进行强化培育，产卵前45～20天用组合饲料A进行强化培育，组合饲料A的各组分及重量百分比是海泥70～90％，成虾料6～10％，鼠尾藻粉2～5％，酵母粉0.5～1％，螺旋藻粉0.5～1％，产卵前20～15天，用组合饲料B进行强化培育，组合饲料B的各组分及重量百分比是海泥60～80％，成虾料10～15％，鼠尾藻粉5～10％，酵母粉1～1.5％，螺旋藻粉1～1.5％。
在整个亲参的强化培育过程中，不使用任何一种药物，通过科学的管理和合理的营养配比来满足亲参的健康强化培育。营养强化后的亲参体重和性腺比都得到了提高，具体情况见表2。
表2亲参强化后用于产卵的11个不同地理群体刺参情况
本方法可提前向养殖单位提供个体大的刺参苗种，延长了刺参在一年内的有效生长周期，缩短了养殖时间，提高了经济效益。