一种静注人免疫球蛋白的制备工艺.pdf

摘要
申请专利号：	CN201010534828.7	申请日：	2010.11.08
公开号：	CN101972479A	公开日：	2011.02.16
当前法律状态：	授权	有效性：	有权
法律详情：	专利权人的姓名或者名称、地址的变更IPC(主分类):A61K 39/395变更事项:专利权人变更前:江西博雅生物制药股份有限公司变更后:博雅生物制药集团股份有限公司变更事项:地址变更前:344000 江西省抚州市赣东大道161号变更后:344000 江西省抚州市高新技术产业园区惠泉路333号\|\|\|授权\|\|\|实质审查的生效IPC(主分类):A61K 39/395申请日:20101108\|\|\|公开
IPC分类号：	A61K39/395; A61K47/26; A61K47/16; C07K16/00; A61P37/04	主分类号：	A61K39/395
申请人：	江西博雅生物制药股份有限公司
发明人：	徐建新; 尧振; 梁小明; 姜国亮; 何淑琴
地址：	344000 江西省抚州市赣东大道161号
优先权：
专利代理机构：	南昌新天下专利商标代理有限公司 36115	代理人：	施秀瑾
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内容摘要

本发明涉及一种静注人免疫球蛋白的制备工艺，属于生物制药领域。本发明在传统的5%低蛋白浓度的静注人免疫球蛋白的制备工艺的基础上，在提取过程中采用压滤法代替离心法；超滤时，将蛋白浓度调整至3%～6%，用0.5mol/L的NaOH调pH至6.4～6.6，然后加1mol/L磷酸－NaOH缓冲液调节电导率在T=19℃时测为0.175s/m～0.205s/m，调节好后，采用层析法，用离子交换柱进行上柱层析纯化；能够有效地去除杂蛋白，提高蛋白纯度，并且能够提高产品得率；使用麦芽糖或甘氨酸为保护剂，有利于提高静注人免疫球蛋白稳定性，甘氨酸作保护剂可满足了糖尿病患者临床使用；本发明可得到5-11%蛋白浓度的静注人免疫球蛋白。

权利要求书

1：一种静注人免疫球蛋白的制备工艺，其特征是制备工艺如下：（1）将符合药典要求的去除冷沉淀的血浆输送至蛋白分离反应罐；控制该血浆的温度在 1 ～ 3℃之间，按不超过 1.0 升 / 分钟的流速加入 pH4.0 缓冲液调节 pH 值至 6.80 ～ 7.00 ；再加入低于－ 15℃的 95％乙醇或 50％乙醇，流速不超过 1.5 升 / 分，使乙醇体积比终浓度至 8％，温度控制在－ 1 ～－ 3℃，加完乙醇后的 pH 值为 6.80 ～ 7.20 ；搅拌 30 分钟以上，进行离心，离心过程中出液流速不超过 4 升∕分∕台，出液温度控制在－ 1 ～－ 3℃，离心得组分 I 沉淀和组分Ⅰ上清液；（2）取上述组分Ⅰ上清液，加 pH4.0 缓冲液调节组分 I 上清液的 pH 值为 6.80 ～ 6.85，控制流速不超过 1.0 升 / 分钟，添加低于－ 15℃的 95％乙醇至乙醇体积比浓度为 20％，温度控制在－ 4 ～－ 6℃；加完乙醇后， pH 为 6.80 ～ 7.00 ；搅拌 120 分钟以上后，静置 60 分钟以上，再开启搅拌，按每升反应液加入 18g 硅藻土，进行压滤，进液压力最高不超过 0.20Mpa，压滤后得组分Ⅱ + Ⅲ沉淀和组分Ⅱ + Ⅲ上清液；（3）取 10 ～ 15 倍上述组分Ⅱ + Ⅲ沉淀的重量的注射用水，用氯化钠调整注射用水的钠离子浓度为 0.01mol/L ；加入搅拌机中开启搅拌，降温至 0℃～ 3℃时，将上述组分Ⅱ + Ⅲ 沉淀倒入搅拌机中搅拌溶解；待沉淀完全溶解，在搅拌过程中以不大于 0.5 升 / 分钟的流量缓慢加入 pH4.0 缓冲液到反应液中，调整反应液的 pH 至 5.20±0.1，控制反应液温度为 0℃～ -1℃，加完 pH4.0 缓冲液，继续搅拌至少 10 分钟；开启制冷循环，加低于 -15℃的 95% 乙醇，控制流速不大于 1.5 升 / 分钟，使反应液最终的乙醇体积比浓度为 17% ；反应液最终温度控制在 -4℃～ -6℃，加完乙醇继续搅拌 2 小时，静置 4 小时以上进行压缩过滤；先用 -4℃以下的压缩空气吹出滤器中的水，启动反应罐搅拌器，按每升反应液加入 18g 硅藻土，使硅藻土与反应液混合均匀 10 分钟以上边搅拌边过滤，在过滤过程中保持出液温度为 -4 ～ -6℃，过滤压力不超过 0.2 Mpa，得压滤液上清；（4）上述压滤液上清计量后，启动反应罐搅拌器和制冷循环，控制温度为 -4 ～ -6℃，进行深层过滤，过滤出液温度控制在 -4 ～ -6℃，过滤后用 1mol/L 的 HCl 调节 pH 为 3.8 ～ 4.0，输入超滤透析罐中进行下道工序的脱醇、纯化；（5）开始对上述调节完毕 pH 值的过滤液进行超滤，浓缩至 5% 以上，用 5 倍体积的 2 ～ 8℃的注射用水进行透析；将蛋白浓度调整至 3% ～ 6%，用 0.5mol/L 的 NaOH 调 pH 至 6.4 ～ 6.6，然后加 1mol/L 磷酸－ NaOH 缓冲液调节电导率在 T=19℃时测为 0.175 s / m ～ 0.205s / m ，调节好后用离子交换柱进行上柱层析纯化；层析完毕用 1mol/L 的 HCl 调节 pH 为 3.8 ～ 4.0，开启超滤机浓缩至 5% 以上 , 用 5 倍体积 2 ～ 8℃注射用水进行透析，使乙醇含量≤ 0.025%，然后将蛋白液浓缩至 6% 以上，将麦芽糖或甘氨酸加入蛋白液内，用 1mol/L 的 HCl 调节 pH 值，使麦芽糖含量为 10±1% 或甘氨酸含量为 2±0.2%， pH 为 3.8 ～ 4.4，蛋白含量为 8±3％，得配制后的蛋白液；（6）配制后的蛋白液经 0.2μm 除菌滤芯过滤，放置在孵放室，经 24℃ ±1℃在孵放 21 天；孵放结束后用 DV50 滤芯除病毒过滤，并根据蛋白含量调整过滤液，过滤液蛋白含量符合生产要求；用 0.2μm 除菌滤芯过滤分装，分装后的制品送检、灯检，检验合格后包装、入库；所述 pH4.0 缓冲液是由乙酸钠与冰乙酸组成的水溶液，每升水中添加 244.9ml 冰乙酸和 65.6g 乙酸钠； 2 所述磷酸－ NaOH 缓冲液为每升水中添加 1.6ml 磷酸和 1.2gNaOH ；以上百分比除特别说明，其余均为重量百分比。

说明书

一种静注人免疫球蛋白的制备工艺
    【技术领域】
     本发明涉及一种静注人免疫球蛋白的制备工艺，属于生物制药领域。背景技术静注人免疫球蛋白的活性成份为蛋白质，其中 95% 以上为免疫球蛋白。由健康人血浆，经低温乙醇蛋白分离法（压滤分离法）分离纯化，去除抗补体活性并经病毒灭活处理制成。目前，静注人免疫球蛋白生产品种一般都为 5% 低蛋白浓度的静注人免疫球蛋白，因此，现有静注人免疫球蛋白临床使用时，输注的剂量相对较大，相对高浓度制品输注时间相对较长；此外，达到血药浓度的时间相对较长。由于其生产方法为低温乙醇离心法，产品得率低，稳定性不好，同时使用糖作为保护剂，不利于临床忌糖患者使用。为了使静注人免疫球蛋白的产品得率进一步提高、稳定性增强、适应人群更广，开发出一种能制备出 5-11% 蛋白浓度的性能更好的静注人免疫球蛋白的制备工艺显得十分必要。
     发明内容本发明的目的是提供一种采用低温乙醇压滤法与层析法相结合，同时针对临床使用需求选用麦芽糖或甘氨酸作为保护剂制备出 5-11% 蛋白浓度的静注人免疫球蛋白的制备工艺。
     本发明的目的是这样实现的：在传统的 5% 低蛋白浓度的静注人免疫球蛋白的制备工艺的基础上，在提取过程中采用压滤法代替离心法；超滤时，将蛋白浓度调整至 3% ～ 6%，用 0.5mol/L 的 NaOH 调 pH 至 6.4 ～ 6.6，然后加 1mol/L 磷酸－ NaOH 缓冲液调节电导率在 T=19℃时测为 0.175 s / m ～ 0.205s / m ，调节好后，采用层析法，用离子交换柱进行上柱层析纯化；能够有效地去除杂蛋白，提高蛋白纯度，并且能够提高产品得率；同时使用麦芽糖或甘氨酸都为保护剂，优选方案为：（1）按《中国药典》 2010 年版三部要求采集，且经复检合格并通过检疫期检疫合格的原料血浆，在预融间，用 75％乙醇消毒、再用低于 35℃注射用水冲洗尽乙醇后，进行破袋；破袋后输送到融浆罐，用 30 ～ 35℃的循环水进行夹层循环融浆；血浆融化后，及时停止热水循环，把血浆温度控制在 0 ～ 4℃之间，取样送质检进行抗 -HIV、 HBsAg、抗 -HCV、梅毒、 ALT、抗 -HBs 等检测；经过滤或离心，离心速度不大于 4L/min/ 台，出液温度控制在 0 ～ 4℃，分离冷沉淀，冷沉淀用于Ⅷ因子生产；将去除冷沉淀的血浆取样进行蛋白含量、组分分析、细菌内毒素检测；将符合药典要求的去除冷沉淀的血浆输送至蛋白分离反应罐；控制该血浆的温度在 1 ～ 3℃之间，按不超过 1.0 升 / 分钟的流速加入 pH4.0 缓冲液调节 pH 值至 6.80 ～ 7.00 ；再加入低于－ 15℃的 95％乙醇或 50％乙醇，流速不超过 1.5 升 / 分，使乙醇体积比终浓度至 8％，温度控制在－ 1 ～－ 3℃，加完乙醇后的 pH 值为 6.80 ～ 7.20 ；搅拌 30 分钟以上，进行离心，离心过程中出液流速不超过 4 升∕分∕台，出液温度控制在－ 1 ～－ 3℃，离心得组分 I 沉淀和组分Ⅰ上清液；
     （2）取上述组分Ⅰ上清液，加 pH4.0 缓冲液调节组分 I 上清液的 pH 值为 6.80 ～ 6.85，控制流速不超过 1.0 升 / 分钟，添加低于－ 15℃的 95％乙醇至乙醇体积比浓度为 20％，温度控制在－ 4 ～－ 6℃；加完乙醇后， pH 为 6.80 ～ 7.00 ；搅拌 120 分钟以上后，静置 60 分钟以上，再开启搅拌，按每升反应液加入 18g 硅藻土，进行压滤，进液压力最高不超过 0.20Mpa，压滤后得组分Ⅱ + Ⅲ沉淀和组分Ⅱ + Ⅲ上清液；（3）取 10 ～ 15 倍上述组分Ⅱ + Ⅲ沉淀的重量的注射用水，用氯化钠调整注射用水的钠离子浓度为 0.01mol/L ；加入搅拌机中开启搅拌，降温至 0℃～ 3℃时，将上述组分Ⅱ + Ⅲ 沉淀倒入搅拌机中搅拌溶解；待沉淀完全溶解，在搅拌过程中以不大于 0.5 升 / 分钟的流量缓慢加入 pH4.0 缓冲液到反应液中，调整反应液的 pH 至 5.20±0.1，控制反应液温度为 0℃～ -1℃，加完 pH4.0 缓冲液，继续搅拌至少 10 分钟；开启制冷循环，加低于 -15℃的 95% 乙醇，控制流速不大于 1.5 升 / 分钟，使反应液最终的乙醇体积比浓度为 17% ；反应液最终温度控制在 -4℃～ -6℃，加完乙醇继续搅拌 2 小时，静置 4 小时以上进行压缩过滤；先用 -4℃以下的压缩空气吹出滤器中的水，启动反应罐搅拌器，按每升反应液加入 18g 硅藻土，使硅藻土与反应液混合均匀 10 分钟以上边搅拌边过滤，在过滤过程中保持出液温度为 -4 ～ -6℃，过滤压力不超过 0.2 Mpa，得压滤液上清；（4）上述压滤液上清计量后，启动反应罐搅拌器和制冷循环，控制温度为 -4 ～ -6℃，进行深层过滤，过滤出液温度控制在 -4 ～ -6℃，过滤后用 1mol/L 的 HCl 调节 pH 为 3.8 ～ 4.0，输入超滤透析罐中进行下道工序的脱醇、纯化；（5）开始对上述调节完毕 pH 值的过滤液进行超滤，浓缩至 5% 以上，用 5 倍体积的 2 ～ 8℃的注射用水进行透析；将蛋白浓度调整至 3% ～ 6%，用 0.5mol/L 的 NaOH 调 pH 至 6.4 ～ 6.6，然后加 1mol/L 磷酸－ NaOH 缓冲液调节电导率在 T=19℃时测为 0.175 s / m ～ 0.205s / m ，调节好后用离子交换柱进行上柱层析纯化；层析完毕用 1mol/L 的 HCl 调节 pH 为 3.8 ～ 4.0，开启超滤机浓缩至 5% 以上 , 用 5 倍体积 2 ～ 8℃注射用水进行透析，使乙醇含量≤ 0.025%，然后将蛋白液浓缩至 6% 以上，将麦芽糖或甘氨酸加入蛋白液内，用 1mol/L 的 HCl 调节 pH 值，使麦芽糖含量为 10±1% 或甘氨酸含量为 2±0.2%， pH 为 3.8 ～ 4.4，蛋白含量为 8±3％，得配制后的蛋白液；（6）配制后的蛋白液经 0.2μm 除菌滤芯过滤，放置在孵放室，经 24℃ ±1℃在孵放 21 天；孵放结束后用 DV50 滤芯除病毒过滤，并根据蛋白含量调整过滤液，过滤液蛋白含量符合生产要求；用 0.2μm 除菌滤芯过滤分装，分装后的制品送检、灯检，检验合格后包装、入库；所述 pH4.0 缓冲液是由乙酸钠与冰乙酸组成的水溶液，每升水中添加 244.9ml 冰乙酸和 65.6g 乙酸钠；所述磷酸－ NaOH 缓冲液为每升水中添加 1.6ml 磷酸和 1.2gNaOH ；以上百分比除特别说明，其余均为重量百分比。
     组分Ⅰ上清液，组分 I 沉淀，组分Ⅱ + Ⅲ沉淀，组分Ⅱ + Ⅲ上清液为所属技术领域的通用分类方法，在本发明中是对特定物质的名称的命名；并不是指单纯的序号。
     本发明具有积极的意义： 1、采用压滤法代替离心法，产品得率显著提高，得率提高 15-20% ； 2、超滤时，将蛋白浓度调整至 3% ～ 6%，用 0.5mol/L 的 NaOH 调 pH 至 6.4 ～ 6.6，然后加 1mol/L 磷酸－ NaOH 缓冲液调节电导率在 T=19℃时测为 0.175 s / m ～ 0.205s / m ，调节好后，采用层析法，用离子交换柱进行上柱层析纯化；能够有效地去除杂蛋白，提高蛋白纯度，并且能够提高产品得率； 3、麦芽糖或甘氨酸都为保护剂，有利于提高静注人免疫球蛋白稳定性，甘氨酸作保护剂可满足了糖尿病患者临床使用； 4、本发明可得到 5-11% 蛋白浓度的静注人免疫球蛋白。具体实施方式
     本发明具体实施方式在发明内容中得以体现，发明内容可以直接用于实施例。6

资源描述

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1、10申请公布号CN101972479A43申请公布日20110216CN101972479ACN101972479A21申请号201010534828722申请日20101108A61K39/395200601A61K47/26200601A61K47/16200601C07K16/00200601A61P37/0420060171申请人江西博雅生物制药股份有限公司地址344000江西省抚州市赣东大道161号72发明人徐建新尧振梁小明姜国亮何淑琴74专利代理机构南昌新天下专利商标代理有限公司36115代理人施秀瑾54发明名称一种静注人免疫球蛋白的制备工艺57摘要本发明涉及一种静注人免疫球蛋白的。

2、制备工艺，属于生物制药领域。本发明在传统的5低蛋白浓度的静注人免疫球蛋白的制备工艺的基础上，在提取过程中采用压滤法代替离心法；超滤时，将蛋白浓度调整至36，用05MOL/L的NAOH调PH至6466，然后加1MOL/L磷酸NAOH缓冲液调节电导率在T19时测为0175S/M0205S/M，调节好后，采用层析法，用离子交换柱进行上柱层析纯化；能够有效地去除杂蛋白，提高蛋白纯度，并且能够提高产品得率；使用麦芽糖或甘氨酸为保护剂，有利于提高静注人免疫球蛋白稳定性，甘氨酸作保护剂可满足了糖尿病患者临床使用；本发明可得到511蛋白浓度的静注人免疫球蛋白。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12。

3、发明专利申请权利要求书2页说明书3页CN101972479A1/2页21一种静注人免疫球蛋白的制备工艺，其特征是制备工艺如下（1）将符合药典要求的去除冷沉淀的血浆输送至蛋白分离反应罐；控制该血浆的温度在13之间，按不超过10升/分钟的流速加入PH40缓冲液调节PH值至680700；再加入低于15的95乙醇或50乙醇，流速不超过15升/分，使乙醇体积比终浓度至8，温度控制在13，加完乙醇后的PH值为680720；搅拌30分钟以上，进行离心，离心过程中出液流速不超过4升分台，出液温度控制在13，离心得组分I沉淀和组分上清液；（2）取上述组分上清液，加PH40缓冲液调节组分I上清液的PH值为6806。

4、85，控制流速不超过10升/分钟，添加低于15的95乙醇至乙醇体积比浓度为20，温度控制在46；加完乙醇后，PH为680700；搅拌120分钟以上后，静置60分钟以上，再开启搅拌，按每升反应液加入18G硅藻土，进行压滤，进液压力最高不超过020MPA，压滤后得组分沉淀和组分上清液；（3）取1015倍上述组分沉淀的重量的注射用水，用氯化钠调整注射用水的钠离子浓度为001MOL/L；加入搅拌机中开启搅拌，降温至03时，将上述组分沉淀倒入搅拌机中搅拌溶解；待沉淀完全溶解，在搅拌过程中以不大于05升/分钟的流量缓慢加入PH40缓冲液到反应液中，调整反应液的PH至52001，控制反应液温度为01，加完P。

5、H40缓冲液，继续搅拌至少10分钟；开启制冷循环，加低于15的95乙醇，控制流速不大于15升/分钟，使反应液最终的乙醇体积比浓度为17；反应液最终温度控制在46，加完乙醇继续搅拌2小时，静置4小时以上进行压缩过滤；先用4以下的压缩空气吹出滤器中的水，启动反应罐搅拌器，按每升反应液加入18G硅藻土，使硅藻土与反应液混合均匀10分钟以上边搅拌边过滤，在过滤过程中保持出液温度为46，过滤压力不超过02MPA，得压滤液上清；（4）上述压滤液上清计量后，启动反应罐搅拌器和制冷循环，控制温度为46，进行深层过滤，过滤出液温度控制在46，过滤后用1MOL/L的HCL调节PH为3840，输入超滤透析罐中进行下。

6、道工序的脱醇、纯化；（5）开始对上述调节完毕PH值的过滤液进行超滤，浓缩至5以上，用5倍体积的28的注射用水进行透析；将蛋白浓度调整至36，用05MOL/L的NAOH调PH至6466，然后加1MOL/L磷酸NAOH缓冲液调节电导率在T19时测为0175S/M0205S/M，调节好后用离子交换柱进行上柱层析纯化；层析完毕用1MOL/L的HCL调节PH为3840，开启超滤机浓缩至5以上,用5倍体积28注射用水进行透析，使乙醇含量0025，然后将蛋白液浓缩至6以上，将麦芽糖或甘氨酸加入蛋白液内，用1MOL/L的HCL调节PH值，使麦芽糖含量为101或甘氨酸含量为202，PH为3844，蛋白含量为83。

7、，得配制后的蛋白液；（6）配制后的蛋白液经02M除菌滤芯过滤，放置在孵放室，经241在孵放21天；孵放结束后用DV50滤芯除病毒过滤，并根据蛋白含量调整过滤液，过滤液蛋白含量符合生产要求；用02M除菌滤芯过滤分装，分装后的制品送检、灯检，检验合格后包装、入库；所述PH40缓冲液是由乙酸钠与冰乙酸组成的水溶液，每升水中添加2449ML冰乙酸和656G乙酸钠；权利要求书CN101972479A2/2页3所述磷酸NAOH缓冲液为每升水中添加16ML磷酸和12GNAOH；以上百分比除特别说明，其余均为重量百分比。权利要求书CN101972479A1/3页4一种静注人免疫球蛋白的制备工艺技术领域0001。

8、本发明涉及一种静注人免疫球蛋白的制备工艺，属于生物制药领域。背景技术0002静注人免疫球蛋白的活性成份为蛋白质，其中95以上为免疫球蛋白。由健康人血浆，经低温乙醇蛋白分离法（压滤分离法）分离纯化，去除抗补体活性并经病毒灭活处理制成。目前，静注人免疫球蛋白生产品种一般都为5低蛋白浓度的静注人免疫球蛋白，因此，现有静注人免疫球蛋白临床使用时，输注的剂量相对较大，相对高浓度制品输注时间相对较长；此外，达到血药浓度的时间相对较长。由于其生产方法为低温乙醇离心法，产品得率低，稳定性不好，同时使用糖作为保护剂，不利于临床忌糖患者使用。为了使静注人免疫球蛋白的产品得率进一步提高、稳定性增强、适应人群更广，开。

9、发出一种能制备出511蛋白浓度的性能更好的静注人免疫球蛋白的制备工艺显得十分必要。发明内容0003本发明的目的是提供一种采用低温乙醇压滤法与层析法相结合，同时针对临床使用需求选用麦芽糖或甘氨酸作为保护剂制备出511蛋白浓度的静注人免疫球蛋白的制备工艺。0004本发明的目的是这样实现的在传统的5低蛋白浓度的静注人免疫球蛋白的制备工艺的基础上，在提取过程中采用压滤法代替离心法；超滤时，将蛋白浓度调整至36，用05MOL/L的NAOH调PH至6466，然后加1MOL/L磷酸NAOH缓冲液调节电导率在T19时测为0175S/M0205S/M，调节好后，采用层析法，用离子交换柱进行上柱层析纯化；能够有效。

10、地去除杂蛋白，提高蛋白纯度，并且能够提高产品得率；同时使用麦芽糖或甘氨酸都为保护剂，优选方案为（1）按中国药典2010年版三部要求采集，且经复检合格并通过检疫期检疫合格的原料血浆，在预融间，用75乙醇消毒、再用低于35注射用水冲洗尽乙醇后，进行破袋；破袋后输送到融浆罐，用3035的循环水进行夹层循环融浆；血浆融化后，及时停止热水循环，把血浆温度控制在04之间，取样送质检进行抗HIV、HBSAG、抗HCV、梅毒、ALT、抗HBS等检测；经过滤或离心，离心速度不大于4L/MIN/台，出液温度控制在04，分离冷沉淀，冷沉淀用于因子生产；将去除冷沉淀的血浆取样进行蛋白含量、组分分析、细菌内毒素检测；将。

11、符合药典要求的去除冷沉淀的血浆输送至蛋白分离反应罐；控制该血浆的温度在13之间，按不超过10升/分钟的流速加入PH40缓冲液调节PH值至680700；再加入低于15的95乙醇或50乙醇，流速不超过15升/分，使乙醇体积比终浓度至8，温度控制在13，加完乙醇后的PH值为680720；搅拌30分钟以上，进行离心，离心过程中出液流速不超过4升分台，出液温度控制在13，离心得组分I沉淀和组分上清液；说明书CN101972479A2/3页5（2）取上述组分上清液，加PH40缓冲液调节组分I上清液的PH值为680685，控制流速不超过10升/分钟，添加低于15的95乙醇至乙醇体积比浓度为20，温度控制在4。

12、6；加完乙醇后，PH为680700；搅拌120分钟以上后，静置60分钟以上，再开启搅拌，按每升反应液加入18G硅藻土，进行压滤，进液压力最高不超过020MPA，压滤后得组分沉淀和组分上清液；（3）取1015倍上述组分沉淀的重量的注射用水，用氯化钠调整注射用水的钠离子浓度为001MOL/L；加入搅拌机中开启搅拌，降温至03时，将上述组分沉淀倒入搅拌机中搅拌溶解；待沉淀完全溶解，在搅拌过程中以不大于05升/分钟的流量缓慢加入PH40缓冲液到反应液中，调整反应液的PH至52001，控制反应液温度为01，加完PH40缓冲液，继续搅拌至少10分钟；开启制冷循环，加低于15的95乙醇，控制流速不大于15升。

13、/分钟，使反应液最终的乙醇体积比浓度为17；反应液最终温度控制在46，加完乙醇继续搅拌2小时，静置4小时以上进行压缩过滤；先用4以下的压缩空气吹出滤器中的水，启动反应罐搅拌器，按每升反应液加入18G硅藻土，使硅藻土与反应液混合均匀10分钟以上边搅拌边过滤，在过滤过程中保持出液温度为46，过滤压力不超过02MPA，得压滤液上清；（4）上述压滤液上清计量后，启动反应罐搅拌器和制冷循环，控制温度为46，进行深层过滤，过滤出液温度控制在46，过滤后用1MOL/L的HCL调节PH为3840，输入超滤透析罐中进行下道工序的脱醇、纯化；（5）开始对上述调节完毕PH值的过滤液进行超滤，浓缩至5以上，用5倍体积。

14、的28的注射用水进行透析；将蛋白浓度调整至36，用05MOL/L的NAOH调PH至6466，然后加1MOL/L磷酸NAOH缓冲液调节电导率在T19时测为0175S/M0205S/M，调节好后用离子交换柱进行上柱层析纯化；层析完毕用1MOL/L的HCL调节PH为3840，开启超滤机浓缩至5以上,用5倍体积28注射用水进行透析，使乙醇含量0025，然后将蛋白液浓缩至6以上，将麦芽糖或甘氨酸加入蛋白液内，用1MOL/L的HCL调节PH值，使麦芽糖含量为101或甘氨酸含量为202，PH为3844，蛋白含量为83，得配制后的蛋白液；（6）配制后的蛋白液经02M除菌滤芯过滤，放置在孵放室，经241在孵放2。

15、1天；孵放结束后用DV50滤芯除病毒过滤，并根据蛋白含量调整过滤液，过滤液蛋白含量符合生产要求；用02M除菌滤芯过滤分装，分装后的制品送检、灯检，检验合格后包装、入库；所述PH40缓冲液是由乙酸钠与冰乙酸组成的水溶液，每升水中添加2449ML冰乙酸和656G乙酸钠；所述磷酸NAOH缓冲液为每升水中添加16ML磷酸和12GNAOH；以上百分比除特别说明，其余均为重量百分比。0005组分上清液，组分I沉淀，组分沉淀，组分上清液为所属技术领域的通用分类方法，在本发明中是对特定物质的名称的命名；并不是指单纯的序号。0006本发明具有积极的意义1、采用压滤法代替离心法，产品得率显著提高，得率提高1520；2、超滤时，将蛋白浓度调整至36，用05MOL/L的NAOH调PH至6466，然后说明书CN101972479A3/3页6加1MOL/L磷酸NAOH缓冲液调节电导率在T19时测为0175S/M0205S/M，调节好后，采用层析法，用离子交换柱进行上柱层析纯化；能够有效地去除杂蛋白，提高蛋白纯度，并且能够提高产品得率；3、麦芽糖或甘氨酸都为保护剂，有利于提高静注人免疫球蛋白稳定性，甘氨酸作保护剂可满足了糖尿病患者临床使用；4、本发明可得到511蛋白浓度的静注人免疫球蛋白。具体实施方式0007本发明具体实施方式在发明内容中得以体现，发明内容可以直接用于实施例。说明书。

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