甘薯提取物及其应用.pdf

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摘要
申请专利号:

CN200910089215.4

申请日:

2009.07.09

公开号:

CN101940284A

公开日:

2011.01.12

当前法律状态:

授权

有效性:

有权

法律详情:

授权|||实质审查的生效IPC(主分类):A23L 1/216申请日:20090709|||公开

IPC分类号:

A23L1/216; A23L1/28; A23L1/29

主分类号:

A23L1/216

申请人:

中国农业科学院农产品加工研究所

发明人:

木泰华; 李鹏高; 熊志冬

地址:

100193 北京市海淀区圆明园西路2号中国农业科学院农产品加工研究所

优先权:

专利代理机构:

北京纪凯知识产权代理有限公司 11245

代理人:

关畅;任凤华

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内容摘要

本发明公开了甘薯提取物及其在制备预防和/或治疗肥胖的保健食品中的应用。本发明的保健食品不仅营养丰富,而且对肥胖症具有很好的预防和/或治疗作用:能通过抑制食欲、减少食物吸收、抑制脂肪细胞生成、抑制脂肪细胞增大、减轻体内脂肪堆积等作用来预防和/或治疗肥胖、降低体重。同时,对血清总胆固醇、甘油三酯的升高及高密度脂蛋白胆固醇水平的降低具有明显的抑制和逆转作用,可以使血脂水平恢复正常,并降低患动脉粥样硬化的危险性。本发明的保健食品既适用于普通人群,起到补充营养和强身健体的作用,也适用于具有某些特殊疾病(如肥胖症、糖尿病等)的人群,起到防病治病的作用。

权利要求书

1: 甘薯提取物在制备预防和 / 或治疗肥胖的保健食品中的应用。
2: 根据权利要求 1 所述的应用, 其特征在于 : 所述甘薯提取物, 其制备方法包括以下步 骤: 1) 将甘薯的块根和 / 或茎和 / 或叶置于如下溶液中打碎, 取上清液 ; 所述溶液为水或可溶性亚硫酸氢盐的水溶液 ; 2) 调节步骤 1) 的上清液的 pH 值至 4-6, 取沉淀 ; 3) 将步骤 2) 的沉淀用水溶解, 得到溶解液, 将溶解液进行透析、 干燥, 得到甘薯提取 物。
3: 根据权利要求 2 所述的应用, 其特征在于 : 所述步骤 1) 中, 所述可溶性亚硫酸氢盐 为亚硫酸氢钠或亚硫酸氢钾 ; 所述可溶性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠, 所述亚硫酸氢钠水溶 液中, 亚硫酸氢钠的质量百分含量为 0.1% -0.5%。
4: 根据权利要求 2 或 3 所述的应用, 其特征在于 : 所述步骤 2) 中, 所述 pH 值为 4.0 ; 所述步骤 3) 中, 所述透析的截留分子量为 8000, 所述透析的透析液为水。
5: 一种预防和 / 或治疗肥胖的保健食品, 其活性成分为下述 a) 或 b) : a) 甘薯提取物 ; b) 甘薯提取物和啤酒酵母。
6: 根据权利要求 5 所述的保健食品, 其特征在于 : 所述甘薯提取物, 其制备方法包括以 下步骤 : 1) 将甘薯的块根和 / 或茎和 / 或叶置于如下溶液中打碎, 取上清液 ; 所述溶液为水或可溶性亚硫酸氢盐的水溶液 ; 2) 调节步骤 1) 的上清液的 pH 值至 4-6, 取沉淀 ; 3) 将步骤 2) 的沉淀用水溶解, 得到溶解液, 将溶解液进行透析、 干燥, 得到甘薯提取 物。
7: 根据权利要求 6 所述的保健食品, 其特征在于 : 所述步骤 1) 中, 所述可溶性亚硫酸 氢盐为亚硫酸氢钠或亚硫酸氢钾 ; 所述可溶性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠, 所述亚硫酸氢钠 水溶液中, 亚硫酸氢钠的质量百分含量为 0.1% -0.5%。
8: 根据权利要求 6 或 7 所述的保健食品, 其特征在于 : 所述步骤 2) 中, 所述 pH 值为 4.0 ; 所述步骤 3) 中, 所述透析的截留分子量为 8000, 所述透析的透析液为水。
9: 根据权利要求 5-8 中任一所述的保健食品, 其特征在于 : 所述活性成分为甘薯提取 物和啤酒酵母, 所述甘薯提取物和所述啤酒酵母的质量比为 (2-3) ∶ 1。
10: 根据权利要求 9 所述的保健食品, 其特征在于 : 所述保健食品中还包括辅料, 所述 辅料为甲壳素、 钙质、 糊精、 纤维素、 硬脂酸镁、 木糖醇、 绿茶、 桑叶提取物和食用香料中的至 少一种。

说明书


甘薯提取物及其应用

    【技术领域】
     本发明涉及甘薯提取物及其应用。背景技术 甘薯 (Ipomoea batatas) 营养丰富, 富含淀粉和可溶性糖, 还含有蛋白质、 脂肪酸、 多种维生素、 多酚类物质及钙、 磷、 铁等矿物质。甘薯中可溶性蛋白的必需氨基酸含量高于 其它大多数植物蛋白, 其氨基酸组成模式符合 WHO/FAO 的推荐标准, 生物价比较高, 因此具 有较高的营养价值, 可与牛奶、 肉类相媲美。据报道, 甘薯中的 sporamin 蛋白是甘薯中主要 的可溶性蛋白, 占甘薯可溶性蛋白总量的 60% -80%, sporamin 蛋白具有胰蛋白酶抑制剂 活性、 抗坏血酸酶活性及单脱氢抗坏血酸还原酶活性, 同时还具有很强的抗氧化活性, 具有 潜在的促进健康的作用。
     啤酒酵母 (Saccharomyces cerevisiae) 是一种营养丰富且均衡的食用微生物, 啤 酒酵母中几乎不含脂肪、 淀粉和糖, 但却含有人体必需的 8 种必需氨基酸、 完整的 B 族维生 素群、 14 种必需矿物质和膳食纤维。 其营养成分的构成特别适合人体的需求, 能够平衡由于 饮食结构不合理而带来的营养失衡, 并消除和缓解由此而引发的健康问题, 可用于治疗消 化不良、 腹泻、 肠胃胀气及多发性神经炎、 糙皮病、 脚气病等。
     发明内容
     本发明的目的是提供甘薯提取物的一种新用途。
     本发明所提供的甘薯提取物的新用途, 是甘薯提取物在制备预防和 / 或治疗肥胖 的保健食品中的应用。
     上述甘薯提取物的新用途中, 所述甘薯提取物, 其制备方法包括以下步骤 :
     1) 将甘薯的块根和 / 或茎和 / 或叶置于如下溶液中打碎, 取上清液 ;
     所述溶液为水或可溶性亚硫酸氢盐的水溶液 ;
     2) 调节步骤 1) 的上清液的 pH 值至 4-6, 取沉淀 ;
     3) 将步骤 2) 的沉淀用水溶解, 得到溶解液, 将溶解液进行透析、 干燥, 得到甘薯提 取物。
     所述步骤 1) 中, 所述可溶性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠或亚硫酸氢钾 ; 所述可溶 性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠, 所述亚硫酸氢钠水溶液中, 亚硫酸氢钠的质量百分含量为 0.1% -0.5%。
     所述步骤 2) 中, pH 值具体可为 4.0。
     所述步骤 3) 中, 所述透析的截留分子量为 8000, 所述透析的透析液为水。
     当所用甘薯为甘薯的块根时, 为了防止甘薯块根氧化变色, 可以先将甘薯块根加 入到可溶性亚硫酸氢盐的水溶液中, 再将甘薯块根打碎。
     本发明的另一个目的是提供一种预防和 / 或治疗肥胖的保健食品。
     本发明所提供的预防和 / 或治疗肥胖的保健食品, 其活性成分为下述 a) 或 b) :a) 甘薯提取物 ; b) 甘薯提取物和啤酒酵母。 上述保健食品中, 所述甘薯提取物, 其制备方法包括以下步骤 : 1) 将甘薯的块根和 / 或茎和 / 或叶置于如下溶液中打碎, 取上清液 ; 所述溶液为水或可溶性亚硫酸氢盐的水溶液 ; 2) 调节步骤 1) 的上清液的 pH 值至 4-6, 取沉淀 ; 3) 将步骤 2) 的沉淀用水溶解, 得到溶解液, 将溶解液进行透析、 干燥, 得到甘薯提取物。 所述步骤 1) 中, 所述可溶性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠或亚硫酸氢钾 ; 所述可溶 性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠, 所述亚硫酸氢钠水溶液中, 亚硫酸氢钠的质量百分含量为 0.1% -0.5%。
     所述步骤 2) 中, pH 值具体可为 4.0。
     所述步骤 3) 中, 所述透析的截留分子量为 8000, 所述透析的透析液为水。
     当所用甘薯为甘薯的块根时, 为了防止甘薯块根氧化变色, 可以先将甘薯块根加 入到可溶性亚硫酸氢盐的水溶液中, 再将甘薯块根打碎。
     上述保健食品中, 所述活性成分为甘薯提取物和啤酒酵母, 所述甘薯提取物和所 述啤酒酵母的质量比为 (2-3) ∶ 1。
     为了增加上述保健食品的功能和口感, 还可以在其中加入甲壳素、 钙质、 糊精、 纤 维素、 硬脂酸镁、 木糖醇、 绿茶、 桑叶提取物或食用香料等成分。
     上述保健食品也可以仅由所述甘薯提取物组成。
     上述保健食品中, 所述甘薯可为任意的甘薯品种, 具体可为甘薯 “55-2” 、 “密选一 号” 或 “西蒙一号” 。
     所述甘薯可以为甘薯的块根、 茎和叶等各个部位。 所述甘薯既可以为新鲜的甘薯, 也可以为甘薯干。
     本发明的预防和 / 或治疗肥胖的保健食品可以制成各种剂型, 如片剂、 胶囊、 粉 剂、 冲剂等。
     本发明的预防和 / 或治疗肥胖的保健食品可以采用各种包装, 如罐装、 瓶装、 袋装 等。
     本发明的预防和 / 或治疗肥胖的保健食品充分利用了甘薯中的水溶性物质。例 如, 在传统的甘薯淀粉加工过程中, 甘薯水溶性蛋白通常作为废液随废水排放 ; 而啤酒厂的 啤酒酵母废料也主要作为动物饲料 ; 但这两者都具有广泛的营养和保健作用, 因此本发明 将它们结合在一起, 制成一种含有丰富的蛋白质、 维生素和矿物质的保健食品。
     本发明的保健食品不仅营养丰富, 而且对肥胖症具有很好的预防和 / 或治疗作 用: 能通过抑制食欲、 减少食物吸收、 抑制脂肪细胞生成、 抑制脂肪细胞增大、 减轻体内脂肪 堆积等作用来预防和 / 或治疗肥胖、 降低体重。同时, 对血清总胆固醇、 甘油三酯的升高及 高密度脂蛋白胆固醇水平的降低具有明显的抑制和逆转作用, 可以使血脂水平恢复正常, 并降低患动脉粥样硬化的危险性。
     本发明的保健食品既适用于普通人群, 起到补充营养和强身健体的作用, 也适用 于具有某些特殊疾病 ( 如肥胖症、 糖尿病等 ) 的人群, 起到防病治病的作用。
     附图说明
     图 1 为本发明保健食品片剂的制备工艺流程图。 图 2 为本发明的保健食品对 3T3-L1 前脂肪细胞分化的抑制作用。 图 3 为本发明的保健食品对 3T3-L1 前脂肪细胞增殖的抑制。 图 4 为本发明的保健食品对小鼠肝功能的影响。 图 5 为本发明的保健食品对肥胖小鼠体重的影响。 图 6 为本发明的保健食品对小鼠血脂水平的影响。 图 7 为用本发明的保健食品饲喂小鼠 45 天后各组小鼠的体重。 图 8 为实验期间各组小鼠的平均日摄食量。 图 9 为喂饲本发明的保健食品 45 天后各组小鼠的胰腺重量。 图 10 为喂饲本发明的保健食品 45 天后对各组小鼠血脂的影响。具体实施方式
     下述实施例中所述实验方法, 如无特殊说明, 均为常规方法 ; 所述试剂和生物材 料, 如无特殊说明, 均可从商业途径获得。下面以保健食品片剂的制备过程为例, 阐述本发 明的保健食品的制备过程。保健食品片剂的制备工艺流程如图 1 所示。
     实施例 1、 保健食品的制备
     1) 选择无病虫害、 表面光滑的甘薯 “55-2” ( 购自北京菁阳禾田农产品加工有限公 司 ) 的块根, 用自来水清洗至表面无泥土残留, 将洗净的甘薯块根置于干净的地方沥干。
     2) 将步骤 1) 的甘薯块根切块, 为了防止薯块褐变, 在其中加入质量百分含量为 0.1% -0.5%的亚硫酸氢钠水溶液。
     3) 使用打浆机, 将步骤 2) 的薯块打成浆状、 过滤, 使淀粉充分沉淀。
     4) 将步骤 3) 的上清液用柠檬酸或醋酸调 pH 值至 4.0, 离心, 取沉淀, 将沉淀用蒸 馏水溶解, 将溶解液封闭在截留分子量为 8000 的透析袋中, 将透析袋放入蒸馏水中透析 12 小时, 每 4 小时换透析液一次。将透析后得到的溶液置于低温冰箱中冷冻, 再用真空冷冻干 燥机冻干成粉, 得到甘薯提取物。
     5) 将啤酒酵母 ( 购自北京顺义燕京啤酒集团公司 ) 粉碎后置于 80℃烘箱内干燥 1 小时, 待温度降至室温时取出, 过 80 目筛, 收集筛分下来的细粉, 备用。
     6) 将上述步骤 4) 的甘薯提取物和步骤 5) 的啤酒酵母粉按照 (2-3) ∶ 1 的质量比 混合, 得到混合物。
     8) 在上述步骤 7) 的混合物中加入低取代羟丙基纤维素 (L-HPC) 和羧甲基纤维素 钠 (CMC-Na), 混合均匀, 使上述步骤 7) 的混合物、 低取代羟丙基纤维素和羧甲基纤维素钠 的质量比为 100 ∶ 4 ∶ 1。
     9) 将上述步骤 8) 的混合物与体积百分含量为 30%的乙醇按照 4 ∶ 1 的配比混合 均匀, 烘干, 得到保健食品粉剂。
     将上述制备的保健食品粉剂分别过 20 目筛和 80 目筛, 称量粒径在 20 目 -80 目之 间的保健食品粉剂的总重量, 然后在其中加入硬脂酸镁, 混合均匀, 使保健食品粉剂和硬脂 酸镁的质量比为 200 ∶ 1, 手工填料, 调节保健食品片的重量为 0.35g, 选择合适的压力, 机械压片得到保健食品片剂。
     将上述制备的保健食品粉剂加入到胶囊中, 即可得到保健食品的胶囊剂。
     保健食品制备过程中的注意事项如下 :
     1、 甘薯提取物和啤酒酵母粉的吸湿性均较强, 在制备保健食品的过程中要严格控 制环境的湿度在 30%以下。
     2、 低取代羟丙基纤维素 (L-HPC)、 羧甲基纤维素钠 (CMC-Na) 等辅料与甘薯提取物 和啤酒酵母粉要混合均匀, 保证大批量制备时成品的性质均一。
     实施例 2、 保健食品预防肥胖的动物试验
     采用昆明小鼠, 体重 16-20g, 购自中国军事医学科学院。将 40 只昆明雌性小鼠随 机分为 4 组, 分别为 : 1) 正常饮食组, 饲喂基础饲料 + 蒸馏水 ; 2) 肥胖模型组, 喂饲高脂饲料 + 蒸馏水 ; 3) 保健食品低剂量预防组, 喂饲高脂饲料 +600mg/kg 体重·d 上述实施例 1 制备 的保健食品, 自由饮水 ; 4) 保健食品高剂量预防组, 喂饲高脂饲料 +2000mg/kg 体重· d 上述 实施例 1 制备的保健食品, 自由饮水。
     基础饲料 : 常规的小鼠饲料, 由军事医学科学院提供 ; 高脂饲料 : 每 100g 高脂饲料 由 70g 基础饲料、 10g 奶粉、 10g 猪油、 10 蛋黄粉和 10 滴鱼肝油组成, 将上述物质混合均匀, 烘干制成高脂饲料。 实验开始后, 各组小鼠每 4 天称重一次, 记录各组小鼠的摄食量。 喂饲 45 天后实验 结束, 将各组小鼠禁食 24h 后测量体长、 体重, 眼球取血分离血清 ( 血液静置 30min, 3000r/ min 离心 15min, 取上清液 ), 测定血清中总胆固醇、 甘油三脂、 高密度脂蛋白胆固醇、 血糖、 胰岛素、 谷草转氨酶 (AST) 和谷丙转氨酶 (ALT) 的含量。然后脱颈处死小鼠, 立即取小鼠的 肝、 肾、 胰腺并称重。
     实验设三次重复, 饲喂 45 天后各组小鼠的体重情况如图 7 所示。从图 7 中可以 看出, 喂饲 45 天后, 以高脂饲料为食的肥胖模型组小鼠的体重显著高于正常饮食组小鼠, 说明肥胖模型造模成功。但是, 如果小鼠在饲喂高脂饲料的同时, 还饲喂上述实施例 1 制 备的保健食品, 45 天后小鼠体重的增长就不如单纯饲喂高脂饲料的小鼠 ; 而且, 随着上述 实施例 1 制备的保健食品饲喂剂量的增加, 小鼠体重呈下降趋势 ; 与正常饮食组相比, 高剂 量预防组与正常饮食组小鼠的体重无显著性差异, 并显著地低于肥胖模型组小鼠的体重 (p < 0.05), 这说明上述实施例 1 制备的保健食品具有预防由食物导致的营养性肥胖的作用。
     实验期间各组小鼠的每日平均摄食量如图 8 所示。从图 8 中可以看出, 实验期间, 喂饲上述实施例 1 制备的保健食品的两组小鼠每日平均的摄食量均显著低于正常饮食组 和肥胖模型组, 说明上述实施例 1 制备的保健食品使小鼠体重降低的原因与其每日摄食量 减少有一定的关系, 这可能是由于上述实施例 1 制备的保健食品抑制了小鼠的食欲, 从而 使其摄食量减少, 体重降低。
     上述实施例 1 制备的保健食品对小鼠胰腺重的影响如图 9 所示。从图 9 中可以看 出, 喂饲上述实施例 1 制备的保健食品对小鼠的肝脏和胰腺都没有损害作用, 胰腺也没有 肥大。
     上述实施例 1 制备的保健食品对小鼠血脂水平的影响如图 10 所示。其中, 图 10A 为保健食品对小鼠血清中谷草转氨酶 (AST) 和谷丙转氨酶 (ALT) 水平的影响, 图 10B 为保 健食品对小鼠血清中甘油三酯含量的影响, 图 10C 为保健食品对小鼠血清中低密度脂蛋白
     胆固醇 (LDL- 胆固醇 ) 含量的影响, 图 10D 为保健食品对小鼠血清中高密度脂蛋白胆固醇 (HDL- 胆固醇 ) 含量的影响。
     从图 10 中可以看出, 喂饲高脂饲料 45 天后, 小鼠血清中转氨酶水平没有明显升 高, 甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇水平明显升高, 高密度脂蛋白胆固醇水平显著下降 ; 但 是, 喂饲上述实施例 1 制备的保健食品后, 甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平显著降低, 而高密度脂蛋白胆固醇水平显著升高 (p < 0.05), 这表明上述实施例 1 制备的保健食品具 有预防由食物导致的高脂血症的作用。
     以上实验结果说明, 喂饲上述实施例 1 制备的保健食品能减少动物的摄食量, 降 低由于摄入高热量饲料所导致的体重增加和血脂异常, 而对于肝功能和胰腺都没有损害, 说明上述实施例 1 所制备的保健食品有预防肥胖的作用。
     实施例 3、 保健食品的制备
     1) 选择无病虫害、 表面光滑的甘薯 “55-2” ( 购自北京菁阳禾田农产品加工有限公 司 ) 的块根, 用自来水清洗至表面无泥土残留, 将洗净的甘薯块根置于干净的地方沥干。
     2) 将步骤 1) 的甘薯块根切块, 为了防止薯块褐变, 在其中加入质量百分含量为 0.1% -0.5%的亚硫酸氢钠水溶液。 3) 使用打浆机, 将步骤 2) 的薯块打成浆状、 过滤, 使淀粉充分沉淀。
     4) 将步骤 3) 的上清液用柠檬酸或醋酸调 pH 值至 4.0, 离心, 取沉淀, 将沉淀用蒸 馏水溶解, 将溶解液封闭在截留分子量为 8000 的透析袋中, 将透析袋放入蒸馏水中透析 12 小时, 每 4 小时换透析液一次。将透析后得到的溶液置于低温冰箱中冷冻, 再用真空冷冻干 燥机冻干成粉, 得到保健食品粉剂。
     实施例 4、 保健食品的功能实验
     1、 保健食品抑制 3T3-L1 前脂肪细胞分化的细胞试验
     将前脂肪细胞 ( 中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库 ) 培养于 DMEM 培养基
     (美国 Invitrogen 公司 ) 中, 2 天 ( 直至前脂肪细胞生长至完全融合 ) 后, 将培养基换成 DM 分化培养基, 并在 DM 分化培养基中加入上述实施例 3 制备的保健食品, 使其在培养 基中的浓度分别为 0mg/ml、 0.25mg/ml 和 0.5mg/ml, 继续培养 5 天后采用油红 0 染色法测定 细胞内的脂肪滴。油红 0 染色的具体操作过程如下 : 将用上述实施例 3 制备的保健食品处 理过的前脂肪细胞用 PBS 冲洗两次, 10%体积百分含量甲醛固定 1h, 然后用 0.5%质量百分 含量的油红 0 在室温下染色 1h, 最后用 60%体积百分含量异丙醇溶液冲洗 3 次, 以除去未 结合的染料, 倒置显微镜下放大 200 倍进行观察并拍摄照片。随后, 用含有终浓度为 4%的 NP-40 的异丙醇溶液洗脱已染色的细胞中的油红 0, 用酶标仪在 492nm 下测定洗脱液的吸光 度值 (OD492 值 ), 以定量判断细胞内积累的脂肪滴的多少, 以此判断上述实施例 3 制备的保 健食品对前脂肪细胞分化为脂肪细胞的抑制作用是否存在。
     实验设三次重复, 上述实施例 3 制备的保健食品对 3T3-L1 前脂肪细胞分化的抑 制作用效果如图 2 所示。其中, a 为 3T3-L1 前脂肪细胞内脂肪滴的积累情况。b 为油红 0 洗脱液在 492nm 处的 OD 值。结果表明, 脂肪滴被油红 0 染成深褐色, 随着上述实施例 3 制 备的保健食品浓度的增加, 3T3-L1 前脂肪细胞的分化被抑制, 细胞内脂肪滴减少, 且随培养 基中保健食品浓度的增加而降低。以上结果说明, 上述实施例 3 制备的保健食品具有抑制 3T3-L1 前脂肪细胞分化成脂肪细胞的作用。2、 保健食品抑制 3T3-L1 前脂肪细胞增殖的试验
     将 3T3-L1 前脂肪细胞以每孔 5×103 的浓度接种于 96 孔板中, 待细胞贴壁后 在培养基中加入上述实施例 3 制备的保健食品, 使其在培养基中的浓度分别为 0mg/ml、 0.025mg/ml、 0.125mg/ml、 0.25mg/ml、 0.5mg/ml 和 1.0mg/ml, 24 小时后, 每孔加入终浓度为 5mg/ml 的 MTT 溶液 20μL, 继续孵育 4 小时, 终止培养, 小心倒去孔内的液体, 在每孔加入 150μL DMSO, 震荡 10 分钟, 使结晶物充分融解。 在酶标仪上 492nm 下测定各孔的吸光度值, 记录结果。
     实验设三次重复, 上述实施例 3 制备的保健食品对 3T3-L1 前脂肪细胞增殖的抑制 作用效果如图 3 所示。MTT 试验结果表明, 随着上述实施例 3 制备的保健食品浓度的增加, 3T3-L1 前脂肪细胞的增殖被抑制。
     从上述图 2 和图 3 的实验可以得出, 上述实施例 3 制备的保健食品一方面通过抑 制前脂肪细胞的分化, 减少脂肪细胞的形成 ; 另一方面通过抑制前脂肪细胞的增殖, 减少前 脂肪细胞的数量。说明上述实施例 3 制备的保健食品具有潜在的减肥作用。
     3、 保健食品减轻肥胖小鼠腹部脂肪及体重的试验
     试验动物 : 采用昆明小鼠, 体重 16-20g, 购自中国军事医学科学院。将 40 只昆明 雌性小鼠随机分为 4 组, 分别为空白组、 肥胖模型对照组、 保健食品高剂量组和保健食品低 剂量组。 基础饲料 : 常规的小鼠饲料, 由军事医学科学院提供 ; 高脂饲料 : 每 100g 高脂饲料 由 70g 基础饲料、 10g 奶粉、 10g 猪油、 10 蛋黄粉和 10 滴鱼肝油组成, 将上述物质混合均匀, 烘干制成高脂饲料。
     实验开始后的第 1-45 天, 空白组小鼠饲喂基础饲料, 其余各组均饲喂高脂饲料。 饲喂剂量均为 0.1ml/10g 体重, 经口灌胃给样, 各组均自由饮水。45 天建立小鼠肥胖模型 后, 各组小鼠均按照 0.1ml/10g 体重饲喂基础饲料, 且空白组和肥胖模型对照组每天上午 8:00 灌胃蒸馏水, 保健食品高剂量组按照 2000mg/kg 体重·d 饲喂上述实施例 3 制备的保 健食品, 保健食品低剂组按照 600mg/kg 体重·d 饲喂上述实施例 3 制备的保健食品。每只 小鼠每五天称重一次, 45 天后试验结束, 小鼠空腹称重, 测体长 ( 鼻尖至肛门长度 ), 眼球取 血, 并将其脱颈处死。解剖取肝、 肾以及腹部全部脂肪合并称重。将取得的血液离心分离出 血清, 测定血清总胆固醇、 甘油三脂、 高密度脂蛋白胆固醇, 按照下述公式计算 Lee’ s 指数 : 1/3 3
     Lee’ s 指数= ( 体重 (g) ×10 )/ 体长 (cm)。
     实验设三次重复, 上述实施例 3 制备的保健食品对各组小鼠肝功能的影响结果如 图 4 所示。从图 4 中可以看出, 饲喂上述实施例 3 制备的保健食品 45 天后, 肥胖模型小鼠 血浆中的谷草转氨酶 (AST) 水平降低, 谷丙转氨酶 (ALT) 水平没有明显变化, 表明饲喂上述 实施例 3 制备的保健食品可以使肥胖小鼠的肝功能恢复正常, 对肝脏有保护作用。
     上述实施例 3 制备的保健食品对各组小鼠体重的影响如图 5 所示。从图 5 可以看 出, 在试验开始时, 各组小鼠的体重无显著差异。随着时间的延长, 各组小鼠的体重不断增 长, 到达第 45 天时, 饲喂高脂饲料的三组 ( 肥胖模型组、 保健食品高剂量组和保健食品低剂 量组 ) 小鼠的体重与空白组相比, 体重明显增加, 这表明小鼠肥胖模型已经建立。然后开始 给予上述实施例 3 制备的保健食品, 再经过 45 天后, 保健食品高剂量组和保健食品低剂量 组小鼠的体重与肥胖模型对照组相比, 均明显降低 (p < 0.05), 表明上述实施例 3 制备的保
     健食品具有减肥作用。
     上述实施例 3 制备的保健食品对各组小鼠 Lee’ s 指数的影响结果如表 1 所示。
     表 1、 保健食品对各组小鼠 Lee’ s 指数的影响
     组别 空白组 肥胖模型对照组 保健食品低剂量组 保健食品高剂量组
     体长 (cm) 9.12±0.59b 10.02±0.35a 9.86±0.53a 9.95±0.43aLee’ s 指数 349.93±17.84b 385.66±19.50a 320.88±14.57c 308.39±8.01c从 表 1 可 以 看 出, 90 天 后, 肥 胖 模 型 对 照 组 与 空 白 组 相 比, 体 长 明 显 增 加 (p < 0.05), 而肥胖模型对照组和保健食品低剂量组相比体长无显著差异 (p > 0.05), 这表明 上述实施例 3 制备的保健食品对营养性肥胖小鼠的体长无影响。此外, 保健食品高剂量组 与肥胖模型对照组相比, Lee’ s 指数差异显著 (p < 0.05), 表明上述实施例 3 制备的保健 食品能够降低肥胖模型小鼠的 Lee’ s 指数, 降低小鼠患动脉粥样硬化的危险性。
     保健食品对各组小鼠腹部脂肪垫总重和脂肪系数的影响结果如表 2 所示。
     表 2、 保健食品对各组小鼠腹部脂肪垫总重和脂肪系数的影响
     组别 空白组 肥胖模型对照组 保健食品低剂量组 保健食品高剂量组
     腹部脂肪总重 (g) 0.875±0.261b 2.278±0.562a 1.052±0.386b 0.830±0.381b脂肪系数 (% ) 2.79±0.93b 6.85±1.31a 3.35±1.22b 2.71±1.15b由表 2 可以看出, 90 天后, 空白组与肥胖模型对照组小鼠的腹部脂肪总重之间存 在显著差异 (p < 0.05), 且保健食品低剂量组、 保健食品高剂量组小鼠的腹部脂肪总重均 显著低于肥胖模型对照组小鼠的腹部脂肪总重, 其差异显著 (p < 0.05)。 同样的, 与肥胖模 型对照组相比, 空白组以及保健食品低剂量组的脂肪系数也有明显的降低 (p < 0.05), 说 明上述实施例 3 制备的保健食品具有减少腹部脂肪的作用。
     上述实施例 3 制备的保健食品对小鼠血脂水平的影响如图 6 所示。其中, 图 6A 为 保健食品对小鼠血液中总胆固醇含量的影响, 图 6B 为保健食品对小鼠血液中甘油三酯含 量的影响, 图 6C 为保健食品对小鼠血液中高密度脂蛋白胆固醇含量的影响, 图 6D 为保健食 品对小鼠致动脉粥样硬化指数的影响。 图中直方图上所标不同的小写字母表示组间比较具有显著性差异 (p < 0.05), 所标小写字母相同表示组间比较无显著性差异 (p > 0.05)。
     从图 6 可以得出, 上述实施例 3 制备的保健食品可降低肥胖小鼠血液中的甘油三 酯 (TG) 和总胆固醇含量, 并提高高密度脂蛋白胆固醇水平。说明上述实施例 3 制备的保健 食品具有降血脂的作用, 可降低发生动脉粥样硬化的危险性。

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1、10申请公布号CN101940284A43申请公布日20110112CN101940284ACN101940284A21申请号200910089215422申请日20090709A23L1/216200601A23L1/28200601A23L1/2920060171申请人中国农业科学院农产品加工研究所地址100193北京市海淀区圆明园西路2号中国农业科学院农产品加工研究所72发明人木泰华李鹏高熊志冬74专利代理机构北京纪凯知识产权代理有限公司11245代理人关畅任凤华54发明名称甘薯提取物及其应用57摘要本发明公开了甘薯提取物及其在制备预防和/或治疗肥胖的保健食品中的应用。本发明的保健食品不。

2、仅营养丰富,而且对肥胖症具有很好的预防和/或治疗作用能通过抑制食欲、减少食物吸收、抑制脂肪细胞生成、抑制脂肪细胞增大、减轻体内脂肪堆积等作用来预防和/或治疗肥胖、降低体重。同时,对血清总胆固醇、甘油三酯的升高及高密度脂蛋白胆固醇水平的降低具有明显的抑制和逆转作用,可以使血脂水平恢复正常,并降低患动脉粥样硬化的危险性。本发明的保健食品既适用于普通人群,起到补充营养和强身健体的作用,也适用于具有某些特殊疾病如肥胖症、糖尿病等的人群,起到防病治病的作用。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书8页附图7页CN101940287A1/1页21甘薯提取物在制备预。

3、防和/或治疗肥胖的保健食品中的应用。2根据权利要求1所述的应用,其特征在于所述甘薯提取物,其制备方法包括以下步骤1将甘薯的块根和/或茎和/或叶置于如下溶液中打碎,取上清液;所述溶液为水或可溶性亚硫酸氢盐的水溶液;2调节步骤1的上清液的PH值至46,取沉淀;3将步骤2的沉淀用水溶解,得到溶解液,将溶解液进行透析、干燥,得到甘薯提取物。3根据权利要求2所述的应用,其特征在于所述步骤1中,所述可溶性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠或亚硫酸氢钾;所述可溶性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠,所述亚硫酸氢钠水溶液中,亚硫酸氢钠的质量百分含量为0105。4根据权利要求2或3所述的应用,其特征在于所述步骤2中,所述PH值为40;。

4、所述步骤3中,所述透析的截留分子量为8000,所述透析的透析液为水。5一种预防和/或治疗肥胖的保健食品,其活性成分为下述A或BA甘薯提取物;B甘薯提取物和啤酒酵母。6根据权利要求5所述的保健食品,其特征在于所述甘薯提取物,其制备方法包括以下步骤1将甘薯的块根和/或茎和/或叶置于如下溶液中打碎,取上清液;所述溶液为水或可溶性亚硫酸氢盐的水溶液;2调节步骤1的上清液的PH值至46,取沉淀;3将步骤2的沉淀用水溶解,得到溶解液,将溶解液进行透析、干燥,得到甘薯提取物。7根据权利要求6所述的保健食品,其特征在于所述步骤1中,所述可溶性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠或亚硫酸氢钾;所述可溶性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠。

5、,所述亚硫酸氢钠水溶液中,亚硫酸氢钠的质量百分含量为0105。8根据权利要求6或7所述的保健食品,其特征在于所述步骤2中,所述PH值为40;所述步骤3中,所述透析的截留分子量为8000,所述透析的透析液为水。9根据权利要求58中任一所述的保健食品,其特征在于所述活性成分为甘薯提取物和啤酒酵母,所述甘薯提取物和所述啤酒酵母的质量比为231。10根据权利要求9所述的保健食品,其特征在于所述保健食品中还包括辅料,所述辅料为甲壳素、钙质、糊精、纤维素、硬脂酸镁、木糖醇、绿茶、桑叶提取物和食用香料中的至少一种。权利要求书CN101940284ACN101940287A1/8页3甘薯提取物及其应用技术领域。

6、0001本发明涉及甘薯提取物及其应用。背景技术0002甘薯IPOMOEABATATAS营养丰富,富含淀粉和可溶性糖,还含有蛋白质、脂肪酸、多种维生素、多酚类物质及钙、磷、铁等矿物质。甘薯中可溶性蛋白的必需氨基酸含量高于其它大多数植物蛋白,其氨基酸组成模式符合WHO/FAO的推荐标准,生物价比较高,因此具有较高的营养价值,可与牛奶、肉类相媲美。据报道,甘薯中的SPORAMIN蛋白是甘薯中主要的可溶性蛋白,占甘薯可溶性蛋白总量的6080,SPORAMIN蛋白具有胰蛋白酶抑制剂活性、抗坏血酸酶活性及单脱氢抗坏血酸还原酶活性,同时还具有很强的抗氧化活性,具有潜在的促进健康的作用。0003啤酒酵母SAC。

7、CHAROMYCESCEREVISIAE是一种营养丰富且均衡的食用微生物,啤酒酵母中几乎不含脂肪、淀粉和糖,但却含有人体必需的8种必需氨基酸、完整的B族维生素群、14种必需矿物质和膳食纤维。其营养成分的构成特别适合人体的需求,能够平衡由于饮食结构不合理而带来的营养失衡,并消除和缓解由此而引发的健康问题,可用于治疗消化不良、腹泻、肠胃胀气及多发性神经炎、糙皮病、脚气病等。发明内容0004本发明的目的是提供甘薯提取物的一种新用途。0005本发明所提供的甘薯提取物的新用途,是甘薯提取物在制备预防和/或治疗肥胖的保健食品中的应用。0006上述甘薯提取物的新用途中,所述甘薯提取物,其制备方法包括以下步骤。

8、00071将甘薯的块根和/或茎和/或叶置于如下溶液中打碎,取上清液;0008所述溶液为水或可溶性亚硫酸氢盐的水溶液;00092调节步骤1的上清液的PH值至46,取沉淀;00103将步骤2的沉淀用水溶解,得到溶解液,将溶解液进行透析、干燥,得到甘薯提取物。0011所述步骤1中,所述可溶性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠或亚硫酸氢钾;所述可溶性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠,所述亚硫酸氢钠水溶液中,亚硫酸氢钠的质量百分含量为0105。0012所述步骤2中,PH值具体可为40。0013所述步骤3中,所述透析的截留分子量为8000,所述透析的透析液为水。0014当所用甘薯为甘薯的块根时,为了防止甘薯块根氧化变色,可以先。

9、将甘薯块根加入到可溶性亚硫酸氢盐的水溶液中,再将甘薯块根打碎。0015本发明的另一个目的是提供一种预防和/或治疗肥胖的保健食品。0016本发明所提供的预防和/或治疗肥胖的保健食品,其活性成分为下述A或B说明书CN101940284ACN101940287A2/8页40017A甘薯提取物;0018B甘薯提取物和啤酒酵母。0019上述保健食品中,所述甘薯提取物,其制备方法包括以下步骤00201将甘薯的块根和/或茎和/或叶置于如下溶液中打碎,取上清液;0021所述溶液为水或可溶性亚硫酸氢盐的水溶液;00222调节步骤1的上清液的PH值至46,取沉淀;00233将步骤2的沉淀用水溶解,得到溶解液,将溶。

10、解液进行透析、干燥,得到甘薯提取物。0024所述步骤1中,所述可溶性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠或亚硫酸氢钾;所述可溶性亚硫酸氢盐为亚硫酸氢钠,所述亚硫酸氢钠水溶液中,亚硫酸氢钠的质量百分含量为0105。0025所述步骤2中,PH值具体可为40。0026所述步骤3中,所述透析的截留分子量为8000,所述透析的透析液为水。0027当所用甘薯为甘薯的块根时,为了防止甘薯块根氧化变色,可以先将甘薯块根加入到可溶性亚硫酸氢盐的水溶液中,再将甘薯块根打碎。0028上述保健食品中,所述活性成分为甘薯提取物和啤酒酵母,所述甘薯提取物和所述啤酒酵母的质量比为231。0029为了增加上述保健食品的功能和口感,还可以在。

11、其中加入甲壳素、钙质、糊精、纤维素、硬脂酸镁、木糖醇、绿茶、桑叶提取物或食用香料等成分。0030上述保健食品也可以仅由所述甘薯提取物组成。0031上述保健食品中,所述甘薯可为任意的甘薯品种,具体可为甘薯“552”、“密选一号”或“西蒙一号”。0032所述甘薯可以为甘薯的块根、茎和叶等各个部位。所述甘薯既可以为新鲜的甘薯,也可以为甘薯干。0033本发明的预防和/或治疗肥胖的保健食品可以制成各种剂型,如片剂、胶囊、粉剂、冲剂等。0034本发明的预防和/或治疗肥胖的保健食品可以采用各种包装,如罐装、瓶装、袋装等。0035本发明的预防和/或治疗肥胖的保健食品充分利用了甘薯中的水溶性物质。例如,在传统的。

12、甘薯淀粉加工过程中,甘薯水溶性蛋白通常作为废液随废水排放;而啤酒厂的啤酒酵母废料也主要作为动物饲料;但这两者都具有广泛的营养和保健作用,因此本发明将它们结合在一起,制成一种含有丰富的蛋白质、维生素和矿物质的保健食品。0036本发明的保健食品不仅营养丰富,而且对肥胖症具有很好的预防和/或治疗作用能通过抑制食欲、减少食物吸收、抑制脂肪细胞生成、抑制脂肪细胞增大、减轻体内脂肪堆积等作用来预防和/或治疗肥胖、降低体重。同时,对血清总胆固醇、甘油三酯的升高及高密度脂蛋白胆固醇水平的降低具有明显的抑制和逆转作用,可以使血脂水平恢复正常,并降低患动脉粥样硬化的危险性。0037本发明的保健食品既适用于普通人群。

13、,起到补充营养和强身健体的作用,也适用于具有某些特殊疾病如肥胖症、糖尿病等的人群,起到防病治病的作用。说明书CN101940284ACN101940287A3/8页5附图说明0038图1为本发明保健食品片剂的制备工艺流程图。0039图2为本发明的保健食品对3T3L1前脂肪细胞分化的抑制作用。0040图3为本发明的保健食品对3T3L1前脂肪细胞增殖的抑制。0041图4为本发明的保健食品对小鼠肝功能的影响。0042图5为本发明的保健食品对肥胖小鼠体重的影响。0043图6为本发明的保健食品对小鼠血脂水平的影响。0044图7为用本发明的保健食品饲喂小鼠45天后各组小鼠的体重。0045图8为实验期间各组。

14、小鼠的平均日摄食量。0046图9为喂饲本发明的保健食品45天后各组小鼠的胰腺重量。0047图10为喂饲本发明的保健食品45天后对各组小鼠血脂的影响。具体实施方式0048下述实施例中所述实验方法,如无特殊说明,均为常规方法;所述试剂和生物材料,如无特殊说明,均可从商业途径获得。下面以保健食品片剂的制备过程为例,阐述本发明的保健食品的制备过程。保健食品片剂的制备工艺流程如图1所示。0049实施例1、保健食品的制备00501选择无病虫害、表面光滑的甘薯“552”购自北京菁阳禾田农产品加工有限公司的块根,用自来水清洗至表面无泥土残留,将洗净的甘薯块根置于干净的地方沥干。00512将步骤1的甘薯块根切块。

15、,为了防止薯块褐变,在其中加入质量百分含量为0105的亚硫酸氢钠水溶液。00523使用打浆机,将步骤2的薯块打成浆状、过滤,使淀粉充分沉淀。00534将步骤3的上清液用柠檬酸或醋酸调PH值至40,离心,取沉淀,将沉淀用蒸馏水溶解,将溶解液封闭在截留分子量为8000的透析袋中,将透析袋放入蒸馏水中透析12小时,每4小时换透析液一次。将透析后得到的溶液置于低温冰箱中冷冻,再用真空冷冻干燥机冻干成粉,得到甘薯提取物。00545将啤酒酵母购自北京顺义燕京啤酒集团公司粉碎后置于80烘箱内干燥1小时,待温度降至室温时取出,过80目筛,收集筛分下来的细粉,备用。00556将上述步骤4的甘薯提取物和步骤5的啤。

16、酒酵母粉按照231的质量比混合,得到混合物。00568在上述步骤7的混合物中加入低取代羟丙基纤维素LHPC和羧甲基纤维素钠CMCNA,混合均匀,使上述步骤7的混合物、低取代羟丙基纤维素和羧甲基纤维素钠的质量比为10041。00579将上述步骤8的混合物与体积百分含量为30的乙醇按照41的配比混合均匀,烘干,得到保健食品粉剂。0058将上述制备的保健食品粉剂分别过20目筛和80目筛,称量粒径在20目80目之间的保健食品粉剂的总重量,然后在其中加入硬脂酸镁,混合均匀,使保健食品粉剂和硬脂酸镁的质量比为2001,手工填料,调节保健食品片的重量为035G,选择合适的压力,机说明书CN101940284。

17、ACN101940287A4/8页6械压片得到保健食品片剂。0059将上述制备的保健食品粉剂加入到胶囊中,即可得到保健食品的胶囊剂。0060保健食品制备过程中的注意事项如下00611、甘薯提取物和啤酒酵母粉的吸湿性均较强,在制备保健食品的过程中要严格控制环境的湿度在30以下。00622、低取代羟丙基纤维素LHPC、羧甲基纤维素钠CMCNA等辅料与甘薯提取物和啤酒酵母粉要混合均匀,保证大批量制备时成品的性质均一。0063实施例2、保健食品预防肥胖的动物试验0064采用昆明小鼠,体重1620G,购自中国军事医学科学院。将40只昆明雌性小鼠随机分为4组,分别为1正常饮食组,饲喂基础饲料蒸馏水;2肥胖。

18、模型组,喂饲高脂饲料蒸馏水;3保健食品低剂量预防组,喂饲高脂饲料600MG/KG体重D上述实施例1制备的保健食品,自由饮水;4保健食品高剂量预防组,喂饲高脂饲料2000MG/KG体重D上述实施例1制备的保健食品,自由饮水。0065基础饲料常规的小鼠饲料,由军事医学科学院提供;高脂饲料每100G高脂饲料由70G基础饲料、10G奶粉、10G猪油、10蛋黄粉和10滴鱼肝油组成,将上述物质混合均匀,烘干制成高脂饲料。0066实验开始后,各组小鼠每4天称重一次,记录各组小鼠的摄食量。喂饲45天后实验结束,将各组小鼠禁食24H后测量体长、体重,眼球取血分离血清血液静置30MIN,3000R/MIN离心15。

19、MIN,取上清液,测定血清中总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇、血糖、胰岛素、谷草转氨酶AST和谷丙转氨酶ALT的含量。然后脱颈处死小鼠,立即取小鼠的肝、肾、胰腺并称重。0067实验设三次重复,饲喂45天后各组小鼠的体重情况如图7所示。从图7中可以看出,喂饲45天后,以高脂饲料为食的肥胖模型组小鼠的体重显著高于正常饮食组小鼠,说明肥胖模型造模成功。但是,如果小鼠在饲喂高脂饲料的同时,还饲喂上述实施例1制备的保健食品,45天后小鼠体重的增长就不如单纯饲喂高脂饲料的小鼠;而且,随着上述实施例1制备的保健食品饲喂剂量的增加,小鼠体重呈下降趋势;与正常饮食组相比,高剂量预防组与正常饮食组小鼠的体重。

20、无显著性差异,并显著地低于肥胖模型组小鼠的体重P005,这说明上述实施例1制备的保健食品具有预防由食物导致的营养性肥胖的作用。0068实验期间各组小鼠的每日平均摄食量如图8所示。从图8中可以看出,实验期间,喂饲上述实施例1制备的保健食品的两组小鼠每日平均的摄食量均显著低于正常饮食组和肥胖模型组,说明上述实施例1制备的保健食品使小鼠体重降低的原因与其每日摄食量减少有一定的关系,这可能是由于上述实施例1制备的保健食品抑制了小鼠的食欲,从而使其摄食量减少,体重降低。0069上述实施例1制备的保健食品对小鼠胰腺重的影响如图9所示。从图9中可以看出,喂饲上述实施例1制备的保健食品对小鼠的肝脏和胰腺都没有。

21、损害作用,胰腺也没有肥大。0070上述实施例1制备的保健食品对小鼠血脂水平的影响如图10所示。其中,图10A为保健食品对小鼠血清中谷草转氨酶AST和谷丙转氨酶ALT水平的影响,图10B为保健食品对小鼠血清中甘油三酯含量的影响,图10C为保健食品对小鼠血清中低密度脂蛋白说明书CN101940284ACN101940287A5/8页7胆固醇LDL胆固醇含量的影响,图10D为保健食品对小鼠血清中高密度脂蛋白胆固醇HDL胆固醇含量的影响。0071从图10中可以看出,喂饲高脂饲料45天后,小鼠血清中转氨酶水平没有明显升高,甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇水平明显升高,高密度脂蛋白胆固醇水平显著下降;但是,喂。

22、饲上述实施例1制备的保健食品后,甘油三酯和低密度脂蛋白胆固醇水平显著降低,而高密度脂蛋白胆固醇水平显著升高P005,这表明上述实施例1制备的保健食品具有预防由食物导致的高脂血症的作用。0072以上实验结果说明,喂饲上述实施例1制备的保健食品能减少动物的摄食量,降低由于摄入高热量饲料所导致的体重增加和血脂异常,而对于肝功能和胰腺都没有损害,说明上述实施例1所制备的保健食品有预防肥胖的作用。0073实施例3、保健食品的制备00741选择无病虫害、表面光滑的甘薯“552”购自北京菁阳禾田农产品加工有限公司的块根,用自来水清洗至表面无泥土残留,将洗净的甘薯块根置于干净的地方沥干。00752将步骤1的甘。

23、薯块根切块,为了防止薯块褐变,在其中加入质量百分含量为0105的亚硫酸氢钠水溶液。00763使用打浆机,将步骤2的薯块打成浆状、过滤,使淀粉充分沉淀。00774将步骤3的上清液用柠檬酸或醋酸调PH值至40,离心,取沉淀,将沉淀用蒸馏水溶解,将溶解液封闭在截留分子量为8000的透析袋中,将透析袋放入蒸馏水中透析12小时,每4小时换透析液一次。将透析后得到的溶液置于低温冰箱中冷冻,再用真空冷冻干燥机冻干成粉,得到保健食品粉剂。0078实施例4、保健食品的功能实验00791、保健食品抑制3T3L1前脂肪细胞分化的细胞试验0080将前脂肪细胞中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库培养于DMEM培养基美国。

24、INVITROGEN公司中,2天直至前脂肪细胞生长至完全融合后,将培养基换成DM分化培养基,并在DM分化培养基中加入上述实施例3制备的保健食品,使其在培养基中的浓度分别为0MG/ML、025MG/ML和05MG/ML,继续培养5天后采用油红0染色法测定细胞内的脂肪滴。油红0染色的具体操作过程如下将用上述实施例3制备的保健食品处理过的前脂肪细胞用PBS冲洗两次,10体积百分含量甲醛固定1H,然后用05质量百分含量的油红0在室温下染色1H,最后用60体积百分含量异丙醇溶液冲洗3次,以除去未结合的染料,倒置显微镜下放大200倍进行观察并拍摄照片。随后,用含有终浓度为4的NP40的异丙醇溶液洗脱已染色。

25、的细胞中的油红0,用酶标仪在492NM下测定洗脱液的吸光度值OD492值,以定量判断细胞内积累的脂肪滴的多少,以此判断上述实施例3制备的保健食品对前脂肪细胞分化为脂肪细胞的抑制作用是否存在。0081实验设三次重复,上述实施例3制备的保健食品对3T3L1前脂肪细胞分化的抑制作用效果如图2所示。其中,A为3T3L1前脂肪细胞内脂肪滴的积累情况。B为油红0洗脱液在492NM处的OD值。结果表明,脂肪滴被油红0染成深褐色,随着上述实施例3制备的保健食品浓度的增加,3T3L1前脂肪细胞的分化被抑制,细胞内脂肪滴减少,且随培养基中保健食品浓度的增加而降低。以上结果说明,上述实施例3制备的保健食品具有抑制3。

26、T3L1前脂肪细胞分化成脂肪细胞的作用。说明书CN101940284ACN101940287A6/8页800822、保健食品抑制3T3L1前脂肪细胞增殖的试验0083将3T3L1前脂肪细胞以每孔5103的浓度接种于96孔板中,待细胞贴壁后在培养基中加入上述实施例3制备的保健食品,使其在培养基中的浓度分别为0MG/ML、0025MG/ML、0125MG/ML、025MG/ML、05MG/ML和10MG/ML,24小时后,每孔加入终浓度为5MG/ML的MTT溶液20L,继续孵育4小时,终止培养,小心倒去孔内的液体,在每孔加入150LDMSO,震荡10分钟,使结晶物充分融解。在酶标仪上492NM下测。

27、定各孔的吸光度值,记录结果。0084实验设三次重复,上述实施例3制备的保健食品对3T3L1前脂肪细胞增殖的抑制作用效果如图3所示。MTT试验结果表明,随着上述实施例3制备的保健食品浓度的增加,3T3L1前脂肪细胞的增殖被抑制。0085从上述图2和图3的实验可以得出,上述实施例3制备的保健食品一方面通过抑制前脂肪细胞的分化,减少脂肪细胞的形成;另一方面通过抑制前脂肪细胞的增殖,减少前脂肪细胞的数量。说明上述实施例3制备的保健食品具有潜在的减肥作用。00863、保健食品减轻肥胖小鼠腹部脂肪及体重的试验0087试验动物采用昆明小鼠,体重1620G,购自中国军事医学科学院。将40只昆明雌性小鼠随机分为。

28、4组,分别为空白组、肥胖模型对照组、保健食品高剂量组和保健食品低剂量组。0088基础饲料常规的小鼠饲料,由军事医学科学院提供;高脂饲料每100G高脂饲料由70G基础饲料、10G奶粉、10G猪油、10蛋黄粉和10滴鱼肝油组成,将上述物质混合均匀,烘干制成高脂饲料。0089实验开始后的第145天,空白组小鼠饲喂基础饲料,其余各组均饲喂高脂饲料。饲喂剂量均为01ML/10G体重,经口灌胃给样,各组均自由饮水。45天建立小鼠肥胖模型后,各组小鼠均按照01ML/10G体重饲喂基础饲料,且空白组和肥胖模型对照组每天上午800灌胃蒸馏水,保健食品高剂量组按照2000MG/KG体重D饲喂上述实施例3制备的保健。

29、食品,保健食品低剂组按照600MG/KG体重D饲喂上述实施例3制备的保健食品。每只小鼠每五天称重一次,45天后试验结束,小鼠空腹称重,测体长鼻尖至肛门长度,眼球取血,并将其脱颈处死。解剖取肝、肾以及腹部全部脂肪合并称重。将取得的血液离心分离出血清,测定血清总胆固醇、甘油三脂、高密度脂蛋白胆固醇,按照下述公式计算LEES指数0090LEES指数体重G1/3103/体长CM。0091实验设三次重复,上述实施例3制备的保健食品对各组小鼠肝功能的影响结果如图4所示。从图4中可以看出,饲喂上述实施例3制备的保健食品45天后,肥胖模型小鼠血浆中的谷草转氨酶AST水平降低,谷丙转氨酶ALT水平没有明显变化,。

30、表明饲喂上述实施例3制备的保健食品可以使肥胖小鼠的肝功能恢复正常,对肝脏有保护作用。0092上述实施例3制备的保健食品对各组小鼠体重的影响如图5所示。从图5可以看出,在试验开始时,各组小鼠的体重无显著差异。随着时间的延长,各组小鼠的体重不断增长,到达第45天时,饲喂高脂饲料的三组肥胖模型组、保健食品高剂量组和保健食品低剂量组小鼠的体重与空白组相比,体重明显增加,这表明小鼠肥胖模型已经建立。然后开始给予上述实施例3制备的保健食品,再经过45天后,保健食品高剂量组和保健食品低剂量组小鼠的体重与肥胖模型对照组相比,均明显降低P005,表明上述实施例3制备的保说明书CN101940284ACN1019。

31、40287A7/8页9健食品具有减肥作用。0093上述实施例3制备的保健食品对各组小鼠LEES指数的影响结果如表1所示。0094表1、保健食品对各组小鼠LEES指数的影响0095组别体长CMLEES指数空白组912059B349931784B肥胖模型对照组1002035A385661950A保健食品低剂量组986053A320881457C保健食品高剂量组995043A30839801C0096从表1可以看出,90天后,肥胖模型对照组与空白组相比,体长明显增加P005,而肥胖模型对照组和保健食品低剂量组相比体长无显著差异P005,这表明上述实施例3制备的保健食品对营养性肥胖小鼠的体长无影响。此。

32、外,保健食品高剂量组与肥胖模型对照组相比,LEES指数差异显著P005,表明上述实施例3制备的保健食品能够降低肥胖模型小鼠的LEES指数,降低小鼠患动脉粥样硬化的危险性。0097保健食品对各组小鼠腹部脂肪垫总重和脂肪系数的影响结果如表2所示。0098表2、保健食品对各组小鼠腹部脂肪垫总重和脂肪系数的影响0099组别腹部脂肪总重G脂肪系数空白组08750261B279093B肥胖模型对照组22780562A685131A保健食品低剂量组10520386B335122B保健食品高剂量组08300381B271115B0100由表2可以看出,90天后,空白组与肥胖模型对照组小鼠的腹部脂肪总重之间存在。

33、显著差异P005,且保健食品低剂量组、保健食品高剂量组小鼠的腹部脂肪总重均显著低于肥胖模型对照组小鼠的腹部脂肪总重,其差异显著P005。同样的,与肥胖模型对照组相比,空白组以及保健食品低剂量组的脂肪系数也有明显的降低P005,说明上述实施例3制备的保健食品具有减少腹部脂肪的作用。0101上述实施例3制备的保健食品对小鼠血脂水平的影响如图6所示。其中,图6A为保健食品对小鼠血液中总胆固醇含量的影响,图6B为保健食品对小鼠血液中甘油三酯含量的影响,图6C为保健食品对小鼠血液中高密度脂蛋白胆固醇含量的影响,图6D为保健食品对小鼠致动脉粥样硬化指数的影响。图中直方图上所标不同的小写字母表示组间比较具说。

34、明书CN101940284ACN101940287A8/8页10有显著性差异P005,所标小写字母相同表示组间比较无显著性差异P005。0102从图6可以得出,上述实施例3制备的保健食品可降低肥胖小鼠血液中的甘油三酯TG和总胆固醇含量,并提高高密度脂蛋白胆固醇水平。说明上述实施例3制备的保健食品具有降血脂的作用,可降低发生动脉粥样硬化的危险性。说明书CN101940284ACN101940287A1/7页11图1图2说明书附图CN101940284ACN101940287A2/7页12图3图4说明书附图CN101940284ACN101940287A3/7页13图5图6A说明书附图CN101940284ACN101940287A4/7页14图6B图6C说明书附图CN101940284ACN101940287A5/7页15图6D图7图8说明书附图CN101940284ACN101940287A6/7页16图9图10A图10B说明书附图CN101940284ACN101940287A7/7页17图10C图10D说明书附图CN101940284A。

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