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1、10申请公布号CN101940113A43申请公布日20110112CN101940113ACN101940113A21申请号201010217113922申请日20100705A01G1/00200601A01N63/02200601A01P21/00200601C12N1/20200601C12R1/0120060171申请人沈阳化工大学地址110142辽宁省沈阳市经济技术开发区11号72发明人邵双王泓金飙74专利代理机构沈阳技联专利代理有限公司21205代理人张志刚54发明名称叶面喷施微生物提高苣荬菜耐铅性的方法57摘要叶面喷施微生物提高苣荬菜耐铅性的方法，涉及一种改善土壤的方法，该方法。
2、微生物为球形红假单孢菌RHODOPSEUDOMONASSPHEROIDESSH7，厌氧光照培养45天，获得浓度为12108个活菌/ML的菌剂，于苣荬菜播种前，取菌剂稀释10倍浸种，此后菌剂稀释200500倍，在苣荬菜生长时期叶面喷施。本发明增加叶绿素、类胡萝卜素含量，干重、鲜重、光合作用均大幅度提高，叶片肥大、浓绿，丙二醛、脯氨酸、POD酶等抗性指标含量提高，使苣荬菜能耐受1200MGPB/KG土壤的铅污染土壤，有效缓解因铅中毒引起的根量少，生长缓慢，地上部分弱小等现象，增产效果显著。51INTCL19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页CN101940116A。
3、1/1页21叶面喷施微生物提高苣荬菜耐铅性的方法，其特征在于该方法微生物为球形红假单孢菌RHODOPSEUDOMONASSPHEROIDESSH7，厌氧光照培养45天，获得浓度为12108个活菌/ML的菌剂，于苣荬菜播种前，取菌剂稀释10倍浸种，此后菌剂稀释200500倍，在苣荬菜生长时期叶面喷施。2根据权利要求1所述的叶面喷施微生物提高苣荬菜耐铅性的方法，其特征在于菌剂制备的培养基为NH4CL10G，CACL2002G，MGSO47H2O02G，NAHCO330G，K2HPO404G，NACL10G，蛋白胨10G，水1000ML，PH中性，121灭菌30分钟，厌氧光照培养45天，获得浓度为1。
4、2108个活菌/ML的菌剂。3根据权利要求1所述的叶面喷施微生物提高苣荬菜耐铅性的方法，其特征在于菌剂施用方法是苣荬菜播种前，取菌剂稀释10倍浸种，此后菌剂稀释200500倍，自两叶期开始，每23周叶面喷施1次，直至采收结束；或植株刚刚显示生长缓慢时起，每周叶面喷施1次，连续喷施2次停止。权利要求书CN101940113ACN101940116A1/3页3叶面喷施微生物提高苣荬菜耐铅性的方法技术领域0001本发明涉及一种改善土壤的方法，特别是涉及一种对苣荬菜利用促生微生物抵抗土壤铅污染的方法。背景技术0002铅在土壤中的溶解度小，滞留时间长，是一种不可降解的环境污染物。我国土壤铅污染量大而广，。
5、随着高速公路建设的迅猛发展，含铅汽油的大量使用，城市污水及垃圾处理不当，工业生产所产生的“三废”的不合理排放，农药、除草剂和化肥的使用，以及因采矿造成的废弃地等原因，使土壤铅污染日趋严重。0003铅并不是动、植物生长发育的必需元素。铅被动进入植物根，皮或叶片并积累，使植物受害。PB对植物根系生长的影响是显著的，减少根细胞的有丝分裂速度，根量减少，根冠膨大、变黑、腐烂，植物地上部分生物量随后下降，叶片失绿明显，严重时逐渐枯萎、死亡；铅的积累也直接影响细胞的代谢作用，引起活性氧代谢酶系统的破坏。高浓度PB还使种子萌发率和胚根长度、上胚轴长度降低，甚至出现胚根组织坏死。更受关注的是，铅会进入食物链，。
6、危及人类的健康。铅对机体损伤呈多系统性、多器官性和不可逆性，其作为中枢神经系统毒物，对儿童的身体和智能的危害更为严重。0004对铅污染土壤的治理和开发利用主要包括两方面，其一是铅污染土壤的治理，其二是充分挖掘和利用植物的耐铅遗传特性，即筛选耐铅品种和克隆抗铅相关基因。目前采用的物理化学方法修复铅污染土壤，费用昂贵，破坏环境，容易造成二次污染，且往往并不能达到真正清除铅的目的，近十年出现的植物修复技术，在不破坏环境的条件下使土壤铅得以清除，是一种绿色环保技术。用于修复土壤铅污染的植物包括圆叶遏蓝菜、香蒲、向日葵、一枝黄花、羊茅、玉米、苣荬菜、东南景天等，其中经济作物因生物量相对较大和创造经济价值。
7、而成为首选。但是，无论在铅浓度较高的污染土壤中进行植物修复，还是在铅浓度较低的土壤中种植耐受铅的经济作物以获得产量，植株生长缓慢、长势弱、生物量小都是限制效果的最主要因素之一。如果能探索到行之有效的处理方法，使作物在铅污染土壤中仍能快速、大量的生长，则对于污染治理和作物增收都大有裨益。0005苣荬菜是广泛分布于我国北部地区的野生叶菜，近年来，因其具有清凉解毒等保健功效和苦中有甜、甜中有香的独特味道而倍受人们的青睐，成为春夏餐桌上必备佳肴，已经大面积人工栽培。苣荬菜是铅富集植物，可通过植物萃取的方式去除土壤中的铅，然而，铅的毒害作用使苣荬菜根量少，生长缓慢，生物量小。如果能提高苣荬菜的耐铅能力，。
8、使之保持较高富集系数的同时，增大生物量，则增加了土壤铅的萃取总量，加快治理进程，并可收获较高的产量，创造经济和社会价值。发明内容0006本发明的目的在于提供一种对苣荬菜利用促生微生物抵抗土壤铅污染的方法。该方法对铅污染土壤中苣荬菜生长有高效促进性，增加叶绿素、类胡萝卜素含量，有效缓解因说明书CN101940113ACN101940116A2/3页4铅中毒引起的根量少，生长缓慢，地上部分弱小等现象，增产效果显著。0007本发明的目的是通过以下技术方案实现的0008叶面喷施微生物提高苣荬菜耐铅性的方法，该方法微生物为球形红假单孢菌RHODOPSEUDOMONASSPHEROIDESSH7，厌氧光照。
9、培养45天，获得浓度为12108个活菌/ML的菌剂，于苣荬菜播种前，取菌剂稀释10倍浸种，此后菌剂稀释200500倍，在苣荬菜生长时期叶面喷施。0009所述的叶面喷施微生物提高苣荬菜耐铅性的方法，其菌剂制备的培养基为NH4CL10G，CACL2002G，MGSO47H2O02G，NAHCO330G，K2HPO404G，NACL10G，蛋白胨10G，水1000ML，PH中性，121灭菌30分钟，厌氧光照培养45天，获得浓度为12108个活菌/ML的菌剂。0010所述的叶面喷施微生物提高苣荬菜耐铅性的方法，其菌剂施用方法是苣荬菜播种前，取菌剂稀释10倍浸种，此后菌剂稀释200500倍，自两叶期开始。
10、，每23周叶面喷施1次，直至采收结束；或植株刚刚显示生长缓慢时起，每周叶面喷施1次，连续喷施2次停止。0011本发明的优点与效果是0012本菌剂使用方法简便，生产成本低，生产过程安全，使用后环境友好，对铅污染土壤中苣荬菜生长有高效促进性。极显著增加叶绿素、类胡萝卜素含量，干重、鲜重、光合作用均大幅度提高，叶片肥大、浓绿，丙二醛、脯氨酸、POD酶等抗性指标含量提高，使苣荬菜能耐受1200MGPB/KG土壤的铅污染土壤，有效缓解因铅中毒引起的根量少，生长缓慢，地上部分弱小等现象，增产效果显著。具体实施方式0013球形红假单孢菌能在有光照缺氧的环境中进行不产氧光合作用，同高等植物相比，它也含有类似的。
11、捕光色素，但只有一个光系统，即PSI，而且原始供氢体不是水，而是H2S或一些有机物。球形红假单孢菌在自身的同化代谢过程中，又完成了产氢、固氮、分解有机物三个自然界物质循环中极为重要的化学过程。球形红假单孢菌的这些特征弥补了苣荬菜在土壤铅污染逆境中因根系吸收营养不足而导致的地上部光合作用减弱的现象，大大提高叶片叶绿素和类胡萝卜素含量，增强光合速率，并反过来促进苣荬菜根系的生长，从而达到提高抗性，增产增效的目的。球形红假单孢菌厌氧光照培养，因此不需要一般菌剂生产所需的发酵罐等大型仪器设备，生产成本很低，生产过程安全，使用后环境友好，又高效，操作简单，是解决铅污染土壤种植苣荬菜问题的首选办法。001。
12、4高效微生物的筛选与菌剂制备首先筛选适合于苣荬菜叶面喷施、增产显著的微生物群，再从该微生物群体中逐一筛选，获得一株显著促进苣荬菜在铅污染土壤中生长的菌株球形红假单孢菌RHODOPSEUDOMONASSPHEROIDESSH7。菌剂制备的培养基为NH4CL10G，CACL2002G，MGSO47H2O02G，NAHCO330G，K2HPO404G，NACL10G，蛋白胨10G，水1000ML，PH中性，121灭菌30分钟。厌氧光照培养45天，获得浓度为12108个活菌/ML的菌剂。下面详细介绍本发明的具体实施例。0015实施例10016苣荬菜播种前，取菌剂稀释10倍浸种，此后菌剂稀释500倍，自两叶期开始，每2周叶面喷施1次，连续喷施4次，此后，每3周叶面喷施1次，直至采收结束。说明书CN101940113ACN101940116A3/3页50017实施例20018在较高浓度铅污染土壤如1200MGPB/KG土壤中，以植株刚刚显示生长缓慢、叶片较小时起，取菌剂稀释200倍，每周叶面喷施1次，连续喷施2次停止，至再次发生生长缓慢时，取菌剂稀释500倍，每周叶面喷施1次，连续喷施2次停止。0019其它水肥等管理正常。说明书CN101940113A。