提高 ABCA-1 的化合物及其用途 本申请要求于 2008 年 2 月 7 日提交的美国临时专利申请序列 No.61/027,016 的 优先权， 该申请的全部公开内容通过引用合并在此。技术领域
本发明涉及对提高哺乳动物中细胞 ABCA-1 产量有用的化合物， 并涉及在治疗冠 状动脉疾病中使用这样的化合物的方法。本发明也涉及含有这样的化合物的药物组合物。 背景技术
胆固醇是高等生物体生长和存活所必需的。它是调节真核细胞膜流动性的脂质， 并且是类固醇激素如孕酮、 睾酮等的前体。 胆固醇可从饮食中获得， 或可在肝和肠中内部合 成。 胆固醇通过脂蛋白在体液中转运到特定靶， 其中脂蛋白可根据增大的密度进行分类。 例 如， 低密度脂蛋白胆固醇 (LDL) 负责将胆固醇转运至肝和转运出肝， 并转运至外周组织细 胞， 在这里 LDL 受体结合 LDL， 并介导它进入细胞。尽管胆固醇对哺乳动物中的许多生物学过程是必不可少的， 但升高的 LDL 胆固醇 血清水平是不期望的， 因为已知它们促进整个身体动脉中的动脉粥样硬化斑块的形成， 这 可导致， 例如， 冠状动脉疾病的发展。 相反地， 基于人临床数据和动物模型系统， 已发现升高 的高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C) 水平可阻止冠脉疾病的发展。
一般地， 过多的胆固醇通过高密度脂蛋白 (HDL) 参与的过程从身体除去。胆固 醇通过两个过程中的一个从细胞流出 - 要么通过被动转移到成熟的 HDL， 要么通过主动转 移到载脂蛋白 A-1。后一个过程是通过称为 ATP 结合盒转运体 1(ABC-1， 或可替换地称为 ABCA-1) 的蛋白介导。在后一个过程中， 贫脂 (lipid-poor)HDL 前体获得磷脂和胆固醇， 这 导致成熟的 HDL 颗粒的血浆水平增大。HDL 胆固醇最终在称为 “胆固醇逆向转运” 的过程中 被转运到肝， 在这里它要么被再循环， 要么作为胆汁被排泄。
旨在降低动脉中动脉粥样硬化斑块形成风险的一种治疗方法涉及降低血浆脂 质水平。这样的方法包括改变饮食， 和 / 或用药物治疗， 其中的药物为例如纤维酸的衍 生物 ( 氯贝丁酯 (clofibrate)、 吉非贝齐 (gemfibrozil) 和非诺贝特 (fenofibrate))、 烟酸和 HMG-CoA 还原酶抑制剂， 例如美非诺林 (mevinolin)、 美伐他汀 (mevastatin)、 普 伐他汀 (pravastatin)、 辛伐他汀 (simvastatin)、 氟伐他汀 (fluvastatin) 和洛伐他汀 (lovastatin)， 它们要么通过抑制胆固醇的细胞内合成， 要么通过抑制经由 LDL 受体的摄 入而降低血浆 LDL 胆固醇水平。另外， 胆汁酸结合树脂， 例如消胆胺 (cholestyrine)、 考来 替泊 (colestipol) 和普罗布可 (probucol) 通过降低肠道吸收和增大肝中 LDL- 胆固醇的 分解代谢来减少 LDL- 胆固醇的水平。
期望提供旨在降低动脉中形成动脉粥样硬化斑块风险的替换疗法， 尤其对于缺乏 经 HDL 途径从动脉壁除去胆固醇能力的个体。假定 HDL 水平一般与 ABCA-1 的表达有关， 增 大 HDL 水平的一种方法增大 ABCA-1 的表达。因此， 期望提供这样的化合物， 其是哺乳动物 中 ABCA-1 表达的有效刺激物， 从而增大胆固醇的流出和提高血液中 HDL 胆固醇的水平。这
将对治疗以低 HDL 水平为特征的各种疾病状态的治疗有用， 特别是对于冠状动脉疾病的治 疗有用。
应当注意， 已表明， 提高巨噬细胞中 ABCA-1 的生产可局部降低冠状动脉中胆固醇 的沉积， 而没有显著提高血浆 HDL 胆固醇。在这种情况下， 即使在没有增加 HDL 胆固醇的情 况下， 提高 ABCA-1 表达也是有利的。 发明内容 因此， 如本文中描述的本发明的典型实例提供了这样的化合物， 其提高 ABCA-1 基 因的细胞表达和 / 或提高 ABCA-1 蛋白表达， 从而增大血浆中高密度脂蛋白胆固醇 (HDL-C) 的水平并降低哺乳动物中的脂质水平。在具体的实施方式中， 本发明涉及式 I 的化合物 ：
式I 其中 ： R 是氢 ； R1 是可选取代的烷基、 可选取代的环烷基、 可选取代的芳基、 或可选取代的杂芳 R 和 YR1 和与它们相连的氮原子一起表示可选取代的杂环基 ； R2 是氢、 卤素、 三氟甲基、 酰基， 或氰基 ； R3 是可选取代的环烷基、 可选取代的芳基、 可选取代的杂芳基， 或可选取代的杂环基； 或
基； R4 和 R5 独立地为氢或酰基 ； 以及
X 和 Y 独立地为共价键或可选取代的亚烷基 ； 前提是当 R1 是甲基且 Y 是共价键时， 当 X 是亚甲基或亚乙基时， R3 不能为苯基。
在某些实施方式中， 本发明涉及一种使用式 I 化合物治疗可用提高 ABCA-1 基因的 细胞表达和 / 或提高 ABCA-1 蛋白表达的化合物有效治疗的哺乳动物的疾病或病症的方法， 该方法包括向需要它的哺乳动物给予治疗有效剂量的式 I 化合物。这样的疾病包括， 但不 局限于， 动脉疾病， 特别是冠状动脉疾病。 在某些实施方式中， 该疾病的特征是低水平的 HDL 胆固醇。 在某些实施方式中， 该疾病或病症可以是糖尿病、 胰岛素抵抗、 血脂异常、 冠状动脉 疾病和炎症中的一种或多种。
在典型的实施方式中， 根据本发明的方法包括使用式 I 化合物治疗可用提高 ABCA-1 基因的细胞表达和 / 或提高 ABCA-1 蛋白的表达、 并且也提高 HDL 胆固醇的血清水平 的化合物有效治疗的哺乳动物的疾病或病症的方法， 该方法包括向需要它的哺乳动物给予 治疗有效剂量的式 I 化合物。这样的疾病包括， 但不局限于， 动脉疾病， 特别是冠状动脉疾 病。在某些实施方式中， 该疾病的特征是低水平的 HDL 胆固醇。在某些实施方式中， 该疾病 或病症可以是糖尿病、 胰岛素抵抗、 血脂异常、 冠状动脉疾病和炎症中的一种或多种。
本发明， 特别是实施方式， 涉及用于治疗可用提高 ABCA-1 基因的细胞表达和 / 或 提高 ABCA-1 蛋白表达的化合物有效治疗的哺乳动物的疾病或病症的药物制剂， 其包含治 疗有效量的式 I 化合物和至少一种药学上可接受的赋形剂。
在一些实施方式中， 本发明涉及制备式 I 化合物的方法。
在本发明的一些实施方式中， R3 是可选取代的芳基或可选取代的杂芳基， 尤其是 2 4 5 在 R、 R、 R 和 R 全为氢的情况下。
在某些实施方式中， R3 是可选取代的芳基 ( 例如， 可选取代的苯基 )， R1 是可选取 代的环烷基， X 是共价键。在一些这样的实施方式中， R3 是卤素， 尤其是氟取代的苯基， 而 R1 是可选取代的环戊基， 尤其是 2- 羟基环戊基。 在其他实施方式中， R1 和 R3 都是可选取代的苯基， X 是共价键， 而 Y 是可选取代的 低级亚烷基， 尤其是其中 Y 是亚乙基、 亚丙基或由苯基取代的亚丙基的那些化合物。 1
在其他实施方式中， R 是可选取代的烷基或可选取代的苯基， R3 是可选取代的苯 基， 而 X 和 Y 都是共价键。在一些这样的实施方式中， R1 是低级烷基或 2- 氟苯基， 而 R3 是 苯基或 2- 氟苯基。
在其他实施方式中， R3 是可选取代的杂芳基， 例如， 可选取代的 1， 3- 噻唑 -2- 基或 1 可选取代的 1， 3- 苯并噁唑 -2- 基。在一些这样的实施方式中， R 是可选取代的环烷基或可 选取代的苯基， X 是共价键， 而 Y 是共价键或亚烷基。在某些实施方式中， R1 是双环烷基， 特 1 别是双环 [2.2.1] 庚 -2- 基， 而 Y 是共价键。在一些实施方式中， R 是单环的， 尤其是环丙 1 基， 而 Y 是亚甲基。在一些其他实施方式中， R 是苯基， 而 Y 是低级亚烷基。 2 4 5
在一些实施方式中， R、 R 和 R 都是氢， 而 R 和 YR1 和与它们相连的氮一起表示含 氮杂环基。某些这样的实施方式包括这样的化合物， 其中 R3 是可选取代的苯基或可选取代 的杂芳基， 而 X 是共价键， 尤其是 R 和 YR1 和与它们相连的氮一起表示吡咯啉 -1- 基。
附图说明 图 1 示出了处理对 ZDF(Zucker 糖尿病肥胖 ) 大鼠的肝中的 ABCA1 基因表达的影 响的时程 (time-cource)。在 0、 2 和 4 小时用式 I 的试验化合物处理大鼠。与用赋形剂处 * ** 理的大鼠有显著性差异 )p ＜ 0.05， )p ＜ 0.01[* 图和实验中的变化 3619*]。
图 2 示出了处理对 ZDF 大鼠中的肝 ABCA1 蛋白质表达的影响的时程。在 0、 2和4 小时用式 I 的试验化合物处理大鼠。随着时间进行， 处理增加 ABCA1 的蛋白表达。与用赋 * ** 形剂处理的大鼠有显著性差异 )p ＜ 0.05， )p ＜ 0.01。ABCA1 蛋白表达通过蛋白质印迹 检测并通过光密度法进行定量， 使用时间点赋形剂对照来对每个时间点的 ABCA1 表达标准 化。
具体实施方式
定义和通用参数
如在本说明书中使用的， 下列术语和词组通常具有下面提供的含义， 除非使用它 们的上下文另有指明。
术语 “烷基” 指的是具有 1 ～ 20 个碳原子的支化或未支化饱和烃链的单价基团。 这个术语可以例举的基团是， 例如甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 正丁基、 异丁基、 叔丁基、 正 己基、 正癸基、 十四烷基等。
术语 “取代的烷基” 指的是 ：
1) 具有 1 ～ 5 个取代基， 优选 1 ～ 3 个取代基的如上定义的烷基， 其中的取代基选 自由以下基团组成的组 ： 烯基、 炔基、 烷氧基、 环烷基、 环烯基、 酰基、 酰氨基、 酰氧基、 氨基、 氨羰基、 烷氧基羰基氨基、 叠氮基、 氰基、 卤素、 羟基、 酮基、 硫代羰基、 羧基、 羧烷基、 芳硫基、 杂芳硫基、 杂环基硫基、 硫醇、 烷硫基、 芳基、 芳氧基、 杂芳基、 氨基磺酰基、 氨基羰基氨基、 杂 芳基氧基、 杂环基、 杂环基氧基、 羟氨基、 烷氧基氨基、 硝基、 -SO- 烷基、 -SO- 芳基、 -SO- 杂 芳基、 -SO2- 烷基、 -SO2- 芳基和 -SO2- 杂芳基。除非定义另有限定， 所有取代基可以可选地 进一步被 1 ～ 3 个选自烷基、 羧基、 羧烷基、 氨羰基、 羟基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的氨 基、 氰基， 和 -S(O)nR( 其中 R 是烷基、 芳基或杂芳基并且 n 是 0、 1 或 2) 的取代基取代 ； 或 2) 被独立选自氧、 硫和 -NRa- 的 1 ～ 5 个原子或基团中断的如上定义的烷基， 其中 Ra 选自氢、 烷基、 环烷基、 烯基、 环烯基、 炔基、 芳基、 杂芳基和杂环基。所有取代基可以可选 地被烷基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的氨基、 氰基， 或 -S(O)nR( 其中 R 是烷基、 芳基或杂 芳基并且 n 是 0、 1 或 2) 进一步取代 ； 或
3) 具有 1 ～ 5 个如上定义的取代基而且还被 1-5 个如上定义的原子或基团中断的 如上定义的烷基。
术语 “低级烷基” 指的是具有 1 ～ 6 个碳原子的支化或未支化饱和烃链的单价基 团。 这个术语可以例举的基团是， 例如甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 正丁基、 异丁基、 叔丁基、 正己基等。
术语 “取代的低级烷基” 指的是具有 1 ～ 5 个取代基， 优选 1 ～ 3 个取代基 ( 如对 取代的烷基限定的 ) 的如上定义的低级烷基， 或者被 1 ～ 5 个原子 ( 如对取代的烷基限定 的 ) 中断的如上定义的低级烷基， 或者具有如上定义的 1 ～ 5 个取代基而且还被如上定义 的 1 ～ 5 个原子中断的如上定义的低级烷基。
术语 “亚烷基” 指的是支化或未支化饱和烃链的二价基团， 优选具有 1 ～ 20 个碳原 子， 优选具有 1 ～ 10 个碳原子， 更优选具有 1 ～ 6 个碳原子。该术语可以例举的基团是， 例 如， 亚甲基 (-CH2-)、 亚乙基 (-CH2CH2-)、 亚丙基异构体 ( 例如， -CH2CH2CH2- 和 -CH(CH3)CH2-) 等。
术语 “低级亚烷基” 指的是具有 1 ～ 6 个碳原子的支化或未支化饱和烃链的二基 (diradical)。
术语 “取代的亚烷基” 指的是 ：
1) 具有 1 ～ 5 个取代基的如上定义的亚烷基， 其中的取代基选自由以下基团组 成的组 ： 烷基、 烯基、 炔基、 烷氧基、 环烷基、 环烯基、 酰基、 酰氨基、 酰氧基、 氨基、 氨羰基、 烷氧基羰基氨基、 叠氮基、 氰基、 卤素、 羟基、 酮基、 硫代羰基、 羧基、 羧烷基、 芳硫基、 杂芳基
硫基、 杂环基硫基、 硫醇、 烷硫基、 芳基、 芳氧基、 杂芳基、 氨基磺酰基、 氨基羰基氨基、 杂芳 基氧基、 杂环基、 杂环基氧基、 羟氨基、 烷氧基氨基、 硝基、 -SO- 烷基、 -SO- 芳基、 -SO- 杂芳 基、 -SO2- 烷基、 -SO2- 芳基和 -SO2- 杂芳基。除非定义另有限定， 所有取代基都可以可选地 进一步被 1 ～ 3 个选自烷基、 羧基、 羧烷基、 氨羰基、 羟基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的氨 基、 氰基， 和 -S(O)nR( 其中 R 是烷基、 芳基或杂芳基并且 n 是 0、 1 或 2) 的取代基取代 ； 或
2) 被独立选自氧、 硫和 -NRa- 的 1 ～ 5 个原子或基团、 或选自羰基、 羧酸酯、 羧基酰 胺和磺酰基的基团中断的如上定义的亚烷基， 其中 Ra 选自氢、 可选取代的烷基、 环烷基、 环 烯基、 芳基、 杂芳基和杂环基 ； 或
3) 具有如上定义的 1 ～ 5 个取代基而且还被如上定义的 1-20 个原子中断的如 上定义的亚烷基。取代的亚烷基的实例是氯代亚甲基 (-CH(Cl)-)、 氨基亚乙基 (-CH(NH2) CH2-)、 甲氨基亚乙基 (-CH(NHMe)CH2-)、 2- 羧基亚丙基异构体 (-CH2CH(CO2H)CH2-)、 乙氧基 乙基 (-CH2CH2O-CH2CH2-)、 乙基甲氨基乙基 (-CH2CH2N(CH3)CH2CH2-)、 1- 乙氧基 -2-(2- 乙氧 基 - 乙氧基 ) 乙烷 (-CH2CH2O-CH2CH2-OCH2CH2-OCH2CH2-) 等。
术语 “芳烷基” 指的是共价连接到亚烷基的芳基， 其中芳基和亚烷基为在本文中定 义的。 “可选取代的芳烷基” 指的是共价连接到可选取代的亚烷基的芳基。这样的芳烷基可 以例举苄基、 3-(4- 甲氧基苯基 ) 丙基等。 术语 “烷氧基” 指的是基团 R-O-， 其中 R 是可选取代的烷基或可选取代的环烷基， 或 R 是 -Y-Z 基团， 其中 Y 是可选取代的亚烷基， 而 Z 是可选取代的烯基、 可选取代的炔基， 或可选取代的环烯基， 其中烷基、 烯基、 炔基、 环烷基和环烯基如在本文中定义的。 优选的烷 氧基是烷基 -O-， 并包括例如甲氧基、 乙氧基、 正丙氧基、 异丙氧基、 正丁氧基、 叔丁氧基、 仲 丁氧基、 正戊氧基、 正己氧基， 1， 2- 二甲基丁氧基等。
术语 “烷硫基” 指的是基团 R-S-， 其中 R 如对烷氧基定义的。
术语 “烯基” 指的是支化或未支化不饱和烃基的单价基团， 优选具有 2 ～ 20 个碳 原子， 更优选具有 2 ～ 10 个碳原子， 甚至优选具有 2 ～ 6 个碳原子， 并且具有 1 ～ 6 个， 优 选 1 个双键 ( 乙烯基 )。优选的烯基包括乙烯基 (-CH ＝ CH2)、 1- 丙烯基或烯丙基 (-CH2CH ＝ CH2)、 异丙烯基 (-C(CH3) ＝ CH2))、 双环 [2.2.1] 庚烯等。在烯基与氮相连的情况下， 双 键不能在氮的 α 位。
术语 “低级烯基” 指的是具有 2 ～ 6 个碳原子的如上定义的烯基。
术语 “取代的烯基” 指的是具有 1 ～ 5 个取代基， 优选 1 ～ 3 个取代基的如上定 义的烯基， 其中的取代基选自由以下基团组成的组 ： 烷基、 烯基、 炔基、 烷氧基、 环烷基、 环烯 基、 酰基、 酰氨基、 酰氧基、 氨基、 氨羰基、 烷氧基羰基氨基、 叠氮基、 氰基、 卤素、 羟基、 酮基、 硫代羰基、 羧基、 羧烷基、 芳硫基、 杂芳基硫基、 杂环基硫基、 硫醇、 烷硫基、 芳基、 芳氧基、 杂 芳基、 氨基磺酰基、 氨基羰基氨基、 杂芳基氧基、 杂环基、 杂环基氧基、 羟氨基、 烷氧氨基、 硝 基、 -SO- 烷基、 -SO- 芳基、 -SO- 杂芳基、 -SO2- 烷基、 -SO2- 芳基和 -SO2- 杂芳基。除非定义 另有限定， 所有取代基都可以可选地进一步被 1 ～ 3 个选自烷基、 羧基、 羧烷基、 氨羰基、 羟 基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的氨基、 氰基， 和 -S(O)nR( 其中 R 是烷基、 芳基或杂芳基并 且 n 是 0、 1 或 2) 的取代基取代。
术语 “炔基” 指的是不饱和烃的单价基团， 优选具有 2 ～ 20 个碳原子， 更优选具有 2 ～ 10 个碳原子和甚至更优选具有 2 ～ 6 个碳原子， 并且具有至少 1 个， 优选 1-6 个乙炔
( 三键 ) 不饱和部位。优选的炔基包括乙炔基 (-C ≡ CH)、 炔丙基 ( 或丙炔基， -C ≡ CCH3) 等。在炔基与氮原子相连的情况下， 三键不能在氮原子的 α 位。
术语 “取代的炔基” 指的是具有 1 ～ 5 个取代基， 优选 1 ～ 3 个取代基的如上定 义的炔基， 其中的取代基选自由以下基团组成的组 ： 烷基、 烯基、 炔基、 烷氧基、 环烷基、 环烯 基、 酰基、 酰氨基、 酰氧基、 氨基、 氨羰基、 烷氧基羰基氨基、 叠氮基、 氰基、 卤素、 羟基、 酮基、 硫代羰基、 羧基、 羧烷基、 芳硫基、 杂芳基硫基、 杂环基硫基、 硫醇、 烷硫基、 芳基、 芳氧基、 杂 芳基、 氨基磺酰基、 氨基羰基氨基、 杂芳基氧基、 杂环基、 杂环基氧基、 羟氨基、 烷氧基氨基、 硝基、 -SO- 烷基、 -SO- 芳基、 -SO- 杂芳基、 -SO2- 烷基、 -SO2- 芳基和 -SO2- 杂芳基。除非定 义另有限定， 所有取代基都可以可选地进一步被 1 ～ 3 个选自烷基、 羧基、 羧烷基、 氨羰基、 羟基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的氨基、 氰基， 和 -S(O)nR( 其中 R 是烷基、 芳基或杂芳基 并且 n 是 0、 1 或 2) 的取代基取代。
术语 “氨羰基” 指的是基团 -C(O)NRR， 其中每个 R 独立地为氢、 烷基、 芳基、 杂芳基、 杂环基， 或其中两个 R 基团连接而形成杂环基 ( 例如， 吗啉代 )。所有取代基都可以可选地 进一步被烷基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的氨基、 氰基， 或 -S(O)nR( 其中 R 是烷基、 芳基， 或杂芳基并且 n 是 0、 1 或 2) 取代。
术语 “酰氨基” 指的是基团 -NRC(O)R， 其中每个 R 均可独立地为氢、 烷基、 芳基、 杂 芳基， 或杂环基。所有取代基都可以可选地进一步被烷基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的 氨基、 氰基， 或 -S(O)nR( 其中 R 是烷基、 芳基， 或杂芳基并且 n 是 0、 1 或 2) 取代。
术语 “酰氧基” 指的是基团 -O(O)C- 烷基、 -O(O)C- 环烷基、 -O(O)C- 芳基、 -O(O) C- 杂芳基， 和 -O(O)C- 杂环基。所有取代基都可以可选地进一步被烷基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的氨基、 氰基， 或 -S(O)nR( 其中 R 是烷基、 芳基， 或杂芳基并且 n 是 0、 1 或 2) 取 代。
术语 “芳基” 指的是具有单环 ( 例如， 苯基 ) 或多环 ( 例如， 联二苯基 )， 或多个稠 ( 稠合 ) 环 ( 例如， 萘基或蒽基 ) 的 6 ～ 20 个碳原子的芳族碳环基团。优选的芳基包括苯 基、 萘基等。
除非对芳基取代基的定义中另有限定， 这样的芳基可以可选地被 1 ～ 5 个取代基， 优选 1 ～ 3 个取代基取代， 该取代基选自由以下基团组成的组 ： 烷基、 烯基、 炔基、 烷氧基、 环 烷基、 环烯基、 酰基、 酰氨基、 酰氧基、 氨基、 氨羰基、 烷氧基羰基氨基、 叠氮基、 氰基、 卤素、 羟 基、 酮基、 硫代羰基、 羧基、 羧烷基、 芳硫基、 杂芳基硫基、 杂环基硫基、 硫醇、 烷硫基、 芳基、 芳 氧基、 杂芳基、 氨基磺酰基、 氨基羰基氨基、 杂芳基氧基、 杂环基、 杂环基氧基、 羟氨基、 烷氧 氨基、 硝基、 -SO- 烷基、 -SO- 芳基、 -SO- 杂芳基、 -SO2- 烷基、 -SO2- 芳基和 -SO2- 杂芳基。除 非定义另有限定， 所有取代基都可以可选地进一步被 1 ～ 3 个选自烷基、 羧基、 羧烷基、 氨羰 基、 羟基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的氨基、 氰基， 和 -S(O)nR( 其中 R 是烷基、 芳基或杂芳 基并且 n 是 0、 1 或 2) 的取代基取代。
术语 “芳氧基” 指的是基团芳基 -O-， 其中芳基是如上所定义的， 并包括也如上所定 义的可选取代的芳基。术语 “芳硫基” 指的是基团 R-S-， 其中 R 如对芳基所定义的。
术语 “氨基” 指的是基团 -NH2。
术语 “取代的氨基” 指的是基团 -NRR， 其中每个 R 均独立地选自由以下基团组成的 组： 氢、 烷基、 环烷基、 羧烷基 ( 例如， 苄氧基羰基 )、 芳基、 杂芳基和杂环基， 前提是两个 R 基团不同时为氢 ； 或 -Y-Z 基团， 其中 Y 是可选取代的亚烷基， 而 Z 是烯基、 环烯基， 或炔基。除 非定义另有限定， 所有取代基都可以可选地进一步被 1 ～ 3 个选自烷基、 羧基、 羧烷基、 氨羰 基、 羟基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的氨基、 氰基， 和 -S(O)nR( 其中 R 是烷基、 芳基或杂芳 基并且 n 是 0、 1 或 2) 取代基取代。
术语 “羧烷基” 指的是基团 -C(O)O- 烷基、 -C(O)O- 环烷基， 其中烷基和环烷基如在 本文中所定义的， 并可以可选地进一步被烷基、 烯基、 炔基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的 氨基、 氰基， 或 -S(O)nR( 其中 R 是烷基、 芳基或杂芳基并且 n 是 0、 1 或 2) 取代。
术语 “环烷基” 指的是具有单个环状环或多个稠环的 3 ～ 20 个碳原子的环状烷 基。 这样的环烷基包括， 例如， 单环结构如环丙基、 环丁基、 环戊基、 环辛基等， 或多环结构如 金刚烷基和双环 [2.2.1] 庚烷， 或与芳基稠合的环状烷基， 例如茚满 (indan) 等。
术语 “取代的环烷基” 指的是具有 1 ～ 5 个取代基， 优选 1 ～ 3 个取代基的环烷 基， 该取代基选自由以下基团组成的组 ： 烷基、 烯基、 炔基、 烷氧基、 环烷基、 环烯基、 酰基、 酰 氨基、 酰氧基、 氨基、 氨羰基、 烷氧基羰基氨基、 叠氮基、 氰基、 卤素、 羟基、 酮基、 硫代羰基、 羧 基、 羧烷基、 芳硫基、 杂芳基硫基、 杂环基硫基、 硫醇、 烷硫基、 芳基、 芳氧基、 杂芳基、 氨基磺 酰基、 氨基羰基氨基、 杂芳基氧基、 杂环基、 杂环基氧基、 羟氨基、 烷氧基氨基、 硝基、 -SO- 烷 基、 -SO- 芳基、 -SO- 杂芳基、 -SO2- 烷基、 -SO2- 芳基和 -SO2- 杂芳基。除非定义另有限定， 所有取代基都可以可选地进一步被 1 ～ 3 个选自烷基、 羧基、 羧烷基、 氨羰基、 羟基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的氨基、 氰基， 和 -S(O)nR( 其中 R 是烷基、 芳基或杂芳基并且 n 是 0、 1 或 2) 的取代基取代。
术语 “卤素” 或 “卤代” 指的是氟代、 溴代、 氯代和碘代。
术语 “酰基” 表示基团 -C(O)R， 其中 R 是氢、 可选取代的烷基、 可选取代的环烷基、 可选取代的杂环基、 可选取代的芳基， 和可选取代的杂芳基。
术语 “杂芳基” 指的是在至少一个环上包含 1 ～ 15 个碳原子和 1 ～ 4 个选自氧、 氮和硫的杂原子的芳族基团 ( 即， 不饱和的 )。
除非对于杂芳基取代基的定义另有限定， 这样的杂环基都可以可选地被 1 ～ 5 个 取代基， 优选 1 ～ 3 个取代基取代， 这里的取代基选自由以下基团组成的组 ： 烷基、 烯基、 炔基、 烷氧基、 环烷基、 环烯基、 酰基、 酰氨基、 酰氧基、 氨基、 氨羰基、 烷氧基羰基氨基、 叠氮 基、 氰基、 卤素、 羟基、 酮基、 硫代羰基、 羧基、 羧基烷基、 芳硫基、 杂芳基硫基、 杂环基硫基、 硫 醇、 烷硫基、 芳基、 芳氧基、 杂芳基、 氨基磺酰基、 氨基羰基氨基、 杂芳基氧基、 杂环基、 杂环基 氧基、 羟氨基、 烷氧基氨基、 硝基、 -SO- 烷基、 -SO- 芳基、 -SO- 杂芳基、 -SO2- 烷基、 -SO2- 芳 基和 -SO2- 杂芳基。除非定义另有限定， 所有取代基都可以可选地进一步被 1-3 个选自烷 基、 羧基、 羧烷基、 氨羰基、 羟基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的氨基、 氰基， 和 -S(O)nR( 其 中 R 是烷基、 芳基或杂芳基并且 n 是 0、 1 或 2) 的取代基取代。这样的杂芳基可具有单环 ( 如， 吡啶基或呋喃基 ) 或多个稠环 ( 如， 氮茚基 (indolizinyl)、 苯并噻唑、 或苯并噻吩 基 )。氮杂环和杂芳基的实例包括， 但不局限于吡咯、 咪唑、 吡唑、 吡啶、 吡嗪、 嘧啶、 哒嗪、 氮茚、 异吲哚、 吲哚、 吲唑、 嘌呤、 喹嗪、 异喹啉、 喹啉、 酞嗪、 萘基吡啶 (naphthylpyridine)、 喹 喔 啉、 喹 唑 啉、 噌 啉 (cinnoline)、 蝶 啶 (pteridine)、 咔 唑、 咔 啉、 菲 啶、 吖 啶、 菲罗啉 (phenanthroline)、 异噻唑、 吩嗪、 异噁唑、 吩噁嗪、 吩噻嗪、 咪唑烷、 咪唑啉等等， 以及含有 N- 烷氧基 - 氮的杂环基化合物。术语 “杂芳基氧基” 指的是基团杂芳基 -O-。
术语 “杂环基” 指的是具有单环或多个稠环的单价饱和或部分不饱和基团， 其在环 上具有 1 ～ 40 个碳原子和 1 ～ 10 个杂原子， 优选 1 ～ 4 个杂原子， 该杂原子选自氮、 硫、 磷 和 / 或氧。
式 I 化合物包括 “R 和 YR’ 和与它们相连的氮原子一起表示可选取代的杂环基” 的 定义。 这样的定义包括在环中仅具有氮的杂环， 例如吡咯烷和哌啶， 并且也包括环中含有一 个以上杂原子的杂环， 例如， 哌嗪、 吗啉等。
除非对于杂环取代基的定义另有限定， 这样的杂环基可选地被 1 ～ 5 个取代基， 优 选 1 ～ 3 个取代基取代， 该取代基选自由以下基团组成的组 ： 烷基、 烯基、 炔基、 烷氧基、 环 烷基、 环烯基、 酰基、 酰氨基、 酰氧基、 氨基、 氨羰基、 烷氧基羰基氨基、 叠氮基、 氰基、 卤素、 羟 基、 酮基、 硫代羰基、 羧基、 羧基烷基、 芳硫基、 杂芳基硫基、 杂环基硫基、 硫醇、 烷硫基、 芳基、 芳氧基、 杂芳基、 氨基磺酰基、 氨基羰基氨基、 杂芳基氧基、 杂环基、 杂环基氧基、 羟氨基、 烷 氧基氨基、 硝基、 -SO- 烷基、 -SO- 芳基、 -SO- 杂芳基、 -SO2- 烷基、 -SO2- 芳基和 -SO2- 杂芳 基。除非定义另有限定， 所有取代基都可以可选地进一步被 1-3 个选自烷基、 羧基、 羧烷基、 氨羰基、 羟基、 烷氧基、 卤素、 CF3、 氨基、 取代的氨基、 氰基， 和 -S(O)nR( 其中 R 是烷基、 芳基或 杂芳基并且 n 是 0、 1 或 2) 的取代基取代。杂环基可具有单环或多个稠环。典型的杂环包 括四氢呋喃基、 吗啉代、 哌啶基等。 术语 “硫醇” 指的是基团 -SH。
术语 “取代的烷硫基” 指的是基团 -S- 取代的烷基。
术语 “杂芳基硫基” 指的是基团 -S- 杂芳基， 其中杂芳基如上所定义， 包括也如上 定义的可选取代的杂芳基。
术语 “亚砜” 指的是基因 -S(O)R， 其中 R 是烷基、 芳基， 或杂芳基。 “取代的亚砜” 指 的是基团 -S(O)R， 其中 R 是取代的烷基、 取代的芳基， 或取代的杂芳基， 如在本文中定义的。
术语 “砜” 指的是基团 -S(O)2R， 其中 R 是烷基、 芳基， 或杂芳基。 “取代的砜” 指的 是基团 -S(O)2R， 其中 R 是取代的烷基、 取代的芳基， 或取代的杂芳基， 如在本文中定义的。
术语 “酮基” 指的是基团 -C(O)-。术语 “硫代羰基” 指的是基团 -C(S)-。术语 “羧 基” 指的是基团 -C(O)-OH。
“可选” 或 “可选地” 意思是随后描述的事件或情况可以发生或可以不发生， 并且该 描述包括其中所述事件或情况发生的情形和不发生的情形。
术语 “式 I 化合物” 用来涵盖如公开的本发明化合物， 和药学上可接受的盐、 药学 上可接受的溶剂化物， 例如， 但不局限于， 药学上可接受的水合物、 药学上可接受的酯， 以及 这样的化合物的前药 (prodrug)。另外， 本发明化合物可具有一个或多个不对称中心， 并可 以作为外消旋混合物或作为单独的对映异构体或非对映异构体生产。任何给出的式 I 化 合物中存在的立体异构体数目都取决于存在的不对称中心数目 ( 当 n 是不对称中心的数 目时， 可能有 2n 个立体异构体 )。单独的立体异构体可通过在合成的某个适当阶段拆分 (resolve) 中间体的外消旋或非外消旋混合物， 或通过用传统方式拆分式 I 化合物而获得。 单独的立体异构体 ( 包括单独的对映异构体和非对映异构体 ) 以及立体异构体的外消旋和 非外消旋混合物都包括在本发明的范围内， 其都将通过本发明的架构进行描述， 除非另有 具体指明。
“异构体” 是具有相同分子式的不同化合物。
“立体异构体” 是仅原子在空间排列方式不同的异构体。
“对映异构体” 是一对不可重叠的互为镜像的立体异构体。一对立体异构体的 1 ∶ 1 混合物是 “外消旋” 混合物。术语 “(±)” 用于在适当时标记外消旋混合物。
“非对映异构体” 是具有至少两个不对称原子的立体异构体， 但它们不互为镜像。
绝对立体化学式根据 Cahn-Ingold-Prelog R-S 系统确定的。 当该化合物是纯的对 映异构体时， 指每个手性碳处的立体化学可表示为 R 或 S。绝对构型未知的拆分化合物， 可 根据它们在钠 D 线波长下使偏振光的平面旋转的方向 ( 右旋或左旋 ) 而标记为 (+) 或 (-)。
术语 “治疗有效量” 指的是式 I 化合物的量， 当给予需要这样的治疗的哺乳动物 时， 其足以达到有效治疗的目的， 如以下所定义。 治疗有效量将根据受治疗的对象和疾病病 况、 对象体重和年龄、 疾病病况的严重性、 给药方式等变化， 这很容易由本领域中普通技术 人员确定。
术语 “冠状动脉疾病” 是指其中存在冠状动脉 “变硬” ( 动脉粥样硬化 ) 的慢性疾 病。
术语 “动脉粥样硬化” 指的是动脉硬化的一种形式， 其中含有胆固醇、 类脂物质和 噬脂细胞的浅黄色斑块在大动脉和中动脉的内膜和内部介质 (inner media) 中形成。 术语 “治疗” 或 “处理” 是指对哺乳动物疾病的任何治疗， 包括 ：
i) 预防疾病， 即， 使疾病的临床症状不发展 ；
ii) 抑制疾病， 即， 遏制临床症状的发展 ； 和/或
iii) 缓解疾病， 即， 使临床症状消退。
在很多情况下， 由于存在氨基和 / 或羧基或与其类似的基团， 本发明化合物能够 形成酸 / 碱式盐。术语 “药学上可接受的盐” 指的是可保留式 I 化合物的生物学效力和性 质的盐， 并且其不是生物学或在其他方面不期望的。药学上可接受的碱加成盐可由无机和 有机碱制备。源于无机碱的盐， 包括， 仅为举例， 钠、 钾、 锂、 铵、 钙和镁盐。源于有机碱的盐 包括， 但不局限于伯胺、 仲胺和叔胺的盐， 例如烷基胺、 二烷基胺、 三烷基胺、 取代的烷基胺、 二 ( 取代的烷基 ) 胺、 三 ( 取代的烷基 ) 胺、 烯基胺、 二烯基胺、 三烯基胺、 取代的烯基胺、 二 ( 取代的烯基 ) 胺、 三 ( 取代的烯基 ) 胺、 环烷基胺、 二 ( 环烷基 ) 胺、 三 ( 环烷基 ) 胺、 取 代的环烷基胺、 二取代的环烷基胺、 三取代的环烷基胺、 环烯基胺、 二 ( 环烯基 ) 胺、 三(环 烯基 ) 胺、 取代的环烯基胺、 二取代的环烯基胺、 三取代的环烯基胺、 芳基胺、 二芳基胺、 三 芳基胺、 杂芳基胺、 二杂芳基胺、 三杂芳基胺、 杂环胺、 二杂环胺、 三杂环胺、 混合的二胺和三 胺， 其中胺上取代基中的至少有两个不同并选自由烷基、 取代的烷基、 烯基、 取代的烯基、 环 烷基、 取代的环烷基、 环烯基、 取代的环烯基、 芳基、 杂芳基、 杂环基等组成的组。 还包括其中 两个或三个取代基与胺基氮一起形成杂环基或杂芳基的胺。
合适的胺的具体实例包括， 仅为举例， 异丙胺、 三甲胺、 二乙胺、 三 ( 异丙基 ) 胺、 三 ( 正丙基 ) 胺、 乙醇胺、 2- 二甲基氨基乙醇、 缓血酸胺 (tromethamine)、 赖氨酸、 精氨酸、 组氨 酸、 咖啡因、 普鲁卡因、 海巴明 (hydrabamine)、 胆碱 (choline)、 甜菜碱 (betaine)、 乙二胺、 葡萄糖胺、 N- 烷基葡糖胺、 可可碱 (theobromine)、 嘌呤、 哌嗪、 哌啶、 吗啉、 N- 乙基哌啶等。
药学上可接受的酸加成盐可由无机酸和有机酸制备。 源于无机酸的盐包括， 盐酸、 氢溴酸、 硫酸、 硝酸、 磷酸等。 源于有机酸的盐包括乙酸、 丙酸、 羟基乙酸、 丙酮酸、 草酸、 苹果
酸、 丙二酸、 琥珀酸、 马来酸、 富马酸、 酒石酸、 柠檬酸、 苯甲酸、 肉桂酸、 扁桃酸、 甲磺酸、 乙磺 酸、 对甲苯磺酸、 水杨酸等的盐。
如本文中使用的， “药学上可接受的运载体 (carrier)” 包括任何和所有溶剂、 分散 介质、 包衣 (coating)、 抗细菌和抗真菌剂、 等渗和吸收延缓剂等。 用于药学活性物质的这样 的介质和药剂的使用是本领域中众所周知的。 除了任何传统介质或药剂与活性成分不相容 之外， 考虑了它们在治疗组合物中的应用。辅助活性成分也可整合到所述组合物中。
命名法
本发明化合物的命名和编号以式 I 的代表性化合物举例说明， 其中 R 是氢， R1 是 2- 羟基环烷基， R2 是氢， R3 是 2- 氟苯基， R4 和 R5 都是氢， 并且 X 和 Y 都是共价键 ：
该化合物被命名为 ：
2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 2R， 3R)-5-[(2- 氟 苯基硫基 ) 甲基 ] 四氢呋喃 (oxolane)-3， 4- 二醇。
合成反应参数
术语 “溶剂” 、 “惰性有机溶剂” 或 “惰性溶剂” 是指在结合它进行描述的反应条件 下惰性的溶剂 [ 包括， 例如， 苯、 甲苯、 乙腈、 四氢呋喃 (“THF” )、 二甲基甲酰胺 (“DMF” )、 氯仿、 亚甲基氯 ( 或二氯甲烷 )、 二乙醚、 甲醇、 吡啶等 ]。除非有与之相反的规定， 本发明反 应中使用的溶剂都是惰性有机溶剂。
术语 “q.s.” 是指添加足以实现所述功能， 例如， 调节溶液至期望体积 ( 即， 100％ ) 的量。
式 I 化合物的合成
式 I 化合物可从 2， 6- 二氯嘌呤开始制备， 如反应图式 I 中所示。
反应图式 I
式I
步骤 1- 式 (2) 的制备式 (1) 原料化合物如之前在美国专利 5,789,416 中描述的方法制备， 该专利的全 部内容通过引用合并在此。
式 (2) 化合物通常是在惰性溶剂， 例如二甲基甲酰胺中， 在催化量的酸性催化剂， 如对甲苯磺酸的存在下， 在约 40 ～ 90℃， 典型地在约 70℃下， 通过与 2， 2- 二甲氧基丙烷反 应约 24 ～ 72 小时， 典型地约 48 小时， 从式 (1) 化合物常规地制备的。当该反应基本完成 时， 式 (2) 产物通过传统方式分离， 例如减压除去溶剂并通过快速层析纯化残余物。
步骤 2- 式 (3) 的制备
式 (2) 化合物然后转化成式 (3) 化合物。在三苯基膦和二乙基偶氮二羧酸酯存在 下， 在惰性溶剂， 如， 醚或四氢呋喃中式 (2) 化合物与式 R3SH 的硫醇化合物反应， 其中 R3 如 上所定义。 该反应典型地在回流下进行约 24-100 小时， 典型地约 72 小时。 当该反应基本完 成时， 式 (3) 的产物可通过传统方式分离， 例如减压除去溶剂并通过快速层析纯化残余物。
步骤 3- 式 (4) 的制备
然后在碱如三乙胺的存在下反应， 通过与式 RR1YNH2 的胺， 式 (3) 化合物中 2- 氯部 分被取代， 其中 Y 是共价键或亚烷基。该反应在惰性质子溶剂如乙醇中， 在约回流的温度下 反应约 14-48 小时， 典型地约 24 小时。当该反应基本完成时， 式 (4) 产物可通过传统方式 分离， 例如减压除去溶剂并接着在硅胶上层析残余物。 步骤 4- 式 I 的制备
然后通过用酸例如有机酸， 如乙酸处理， 对式 (4) 化合物脱保护。该反应在酸和水 的混合物中， 在约 50 ～ 100℃下， 典型地在约 80 ～ 90℃下进行约 10 ～ 48 小时， 典型地约 16 小时。 当该反应基本完成时， 式 I 产物可通过传统方式分离， 例如减压除去溶剂并接着在 硅胶上层析残余物。
应当注意步骤 2 和 3 可以相反的顺序进行。
式 I 化合物的可替换合成
可替换地， 式 I 的化合物可如反应图解 II 中所示进行制备。
反应图式 II
步骤 1- 式 (5) 的制备
式 (5) 的树脂 / 化合物是通过式 (1) 化合物在催化量的酸性催化剂如 10- 樟脑磺 酸 (camphorsulfonic acid) 的存在下， 在惰性溶剂如二甲基乙酰胺中， 在约室温下与二甲 基缩醛 (dimethylacetal) 树脂反应约 1-7 天， 例如约 4 天进行制备的。当该反应基本完成 时， 式 (5) 的树脂 / 化合物可通过传统方式例如过滤进行分离。
步骤 2- 式 (6) 的制备
然后在碱如二异丙基乙胺存在下通过与式 RR1YNH2 的胺反应， 式 (5) 的树脂 / 化合 物中的 2- 氯部分被取代， 其中 Y 是共价键或亚烷基。该反应在惰性质子溶剂， 如 1， 4- 二氧 六环中， 在约 80℃的温度下进行约 14 ～ 96 小时， 典型地约 48 小时。当该反应基本完成时， 式 (6) 的树脂 / 产物可通过传统方式分离。
步骤 3- 式 (7) 的制备
式 (6) 的产物然后转化成式 (7) 的树脂 / 化合物。式 (6) 的树脂 / 化合物起初与 能够形成离去基团的化合物， 例如甲磺酰氯， 在碱， 如二异丙基乙胺的存在下， 在约 0℃下反 应。甲基化的产物然后与式 R3XSH 的硫醇化合物， 在惰性溶剂如乙腈水溶液中反应， 其中 R3 和 X 如上所定义。该反应典型地在回流下进行约 24 ～ 100 小时， ， 例如约 70 小时。当该反 应基本完成时， 式 (7) 产物可通过传统方式例如过滤进行分离。
步骤 4- 式 I 的制备
然后通过用酸如有机酸， 例如 2％三氟乙酸 /5％甲醇 / 二氯甲烷处理， 而使式 (7) 的树脂 / 化合物脱保护。该反应在约室温下进行约 30 分钟～ 10 小时， 例如约 2 小时。当 该反应基本完成时， 式 I 的产物可通过传统方式分离， 例如用惰性溶剂如二氯甲烷萃取， 并 通过减压蒸发除去萃取物中的溶剂。
起始原料
其中 R2 不为氢的式 (1) 化合物可通过本领域中众所周知的方法制备。例如， 其中 2 R 为三氟甲基的式 (1) 化合物的制备如反应图式 III 中所示进行制备。
反应图式 III
其中 R2 为腈的式 (4) 化合物的制备如反应图式 IV 中所示进行制备。 反应图式 IV式 (e) 的起始原料
式 (b) 的起始原料由商购获得 (Aldrich， Milwaukee)。 式 (e) 的产物转化成式 (4) 化合物， 如上所示。
其 中 R2 为 酰 基 的 式 (1) 化 合 物 通 过 2- 甲 锡 烷 基 (stannyl)-6- 氯 -2 ′， 3 ′， 5′ - 三叔丁基二甲基甲硅烷基腺苷 (K.Kato 等人 .J.Org.Chem.1997， 62， 6833-6841) 与酰 基氯反应而获得。
式 I 化合物也可从 6- 氯嘌呤核苷开始制备， 如反应图式 V 中所示， 其中 R1 是 2- 羟 基环戊烷， R2 和 R 是氢， 并且 Y 是共价键 ：
反应图式 V
其中 Ph 是苯基。
步骤 1- 式 (9) 的制备
式 (9) 化合物是通过式 (8) 化合物， 在碱如三乙胺的存在下， 在质子溶剂如乙醇 中， 在约回流的温度下与 2-( 苄氧基 ) 环戊基胺反应约 24 小时制备的。当该反应基本完成 时， 式 (9) 的产物可通过传统方式分离， 例如减压除去溶剂， 使残余物在乙酸乙酯和水之间 分配， 除去有机层中的溶剂， 并通过例如重结晶或从乙酸乙酯 / 己烷中沉淀来纯化残余物。
步骤 2- 式 (10) 的制备
式 (9) 化合物然后转化成式 (10) 化合物。在碱如吡啶的存在下， 向在惰性溶剂如 乙腈中的式 (9) 化合物的悬浮液中， 添加氯化亚砜。该反应典型地在约 0℃下进行约 4 小 时， 然后让其升到室温过夜。当该反应基本完成时， 在减压下浓缩所得悬浮液， 从而获得式 (10) 化合物， 该化合物直接用于下一步骤而无需纯化。
步骤 3- 式 (11) 的制备
式 (11) 化合物从式 (10) 化合物制备， 通过将 (10) 溶解在碱如氢氧化铵和质子溶 剂如甲醇的混合物中进行。该反应在约室温下进行约 30 分钟。当该反应基本完成时， 式 (11) 的产物可通过传统方式分离， 例如减压除去溶剂， 使残余物在乙酸乙酯和水之间分配， 并在减压下除去乙酸乙酯。该残余物直接用于下一步骤而无需进一步纯化。
步骤 4- 式 (12) 的制备
然后通过在催化剂如氢氧化钯存在下， 用部分不饱和的环烷基化合物如环己烯处 理， 使式 (11) 化合物脱保护。可替换地， 甲酸铵可代替不饱和的环烷基化合物使用。该反 应在质子溶剂如乙醇中， 典型地在约回流下进行约 18 小时。当该反应基本完成时， 式 (12) 的产物可通过传统方式分离， 例如通过减压除去溶剂， 接着研碎残余物。
步骤 5- 式 I 的制备
式 (12) 化合物然后与式 R3SH 的化合物， 如 2- 氟苯硫酚反应。 该反应在极性溶剂， 典型地在 N， N- 二甲基甲酰胺中， 在碱如氢氧化钠的存在下， 在约 100℃下进行约 3 ～ 5 小 时。当该反应基本完成时， 式 I 化合物可通过传统方式分离， 例如通过减压除去溶剂， 并用 二乙醚研碎残余物。
起始原料的制备
2-( 苄氧基 )- 环戊胺用作反应图式 V 的步骤 1 中的起始原料。这个化合物， 作为 外消旋混合物或作为单独的异构体， 要么商购获得， 要么通过本领域技术人员众所周知的 方法制取。 例如， 制取 (1R， 2R)-2-( 苄氧基 )- 环戊胺的一种方法示出在以下的反应图式 VI 中。
反应图式 VI
在第一步骤中， 通过传统方式例如通过在惰性溶剂中在 4- 二甲氨基吡啶的存 在下反应， 用 (BOC)2O( 二叔丁基二碳酸酯 ) 对式 (f) 的化合物 ((1R， 2R)-2- 氨基环戊 烷 -1- 醇 ) 进行 N- 保护， 。被保护的环戊醇 (g) 衍生物然后与苄基溴在碱如氢化钠的存在
下反应， 从而形成 (h)， 然后以传统方式， 例如在二氧六环中用盐酸对 (h) 脱保护。
从 (1S， 2S)-2- 氨基环戊烷 -1- 醇出发， 提供了具有与式 (i) 相反立体化学的化合 物， 而从 (1RS， 2RS)-2- 氨基环戊烷 -1- 醇出发， 提供了式 (i) 化合物的外消旋类似物。
本领域中技术人员应当理解， 向核心结构 (core structure) 中添加 R3SY 部分可 在除去 R1 部分上的保护基之前或之后进行， 例如反应图式 V 中示出的 6N 环戊基上的 2- 羟 基的保护基。反应图式 VII 中示出了一种可替换方法利用不同保护基以及反转 R3SY 部分 的加成和 R1 基的脱保护来制备式 I 化合物， 其中 R1 是 2- 羟基环戊烷， R2 和 R 是氢， Y 是共 价键。
反应图式 VII
起 始 受 保 护 的 环 戊 基 衍 生 物 可 来 源 于 (1R， 2R)-2- 氨 基 环 戊 烷 -1- 醇、 (1S， 2S)-2- 氨基环戊烷 -1- 醇， 或 (1RS， 2RS)-2- 氨基环戊烷 -1- 醇。羟基通过本领域中众所周 知的方法， 例如通过在甲醇中与 NH4F 反应， 作为叔丁基二甲基甲硅烷基被保护。
可替换地， 可方便地合成式 I 化合物， 无需使用任何保护基， 如反应图式 VIII 中所 1 2 示， 其中 R 是 2- 羟基环戊烷， R 和 R 是氢， 并且 Y 是共价键。
反应图式 VIII
在无需使用任何保护基， 或无需分离和 / 或纯化中间体的情况下， 制备式 I 化合物 1 2 的一种方法示出在反应图式 IV 中， 其中 R 是 2- 羟基环戊烷， R 和 R 是氢， 并且 Y 是共价键。
反应图式 IV
步骤 1- 式 (19) 的制备
式 (8) 化合物通过与氯化亚砜反应转化成式 (19) 化合物。一般地， 在约 2 ～ 2.5 摩尔当量的碱如吡啶存在下， 将式 (8) 化合物悬浮在惰性溶剂如乙腈中， 并在约 1 小时内缓 慢添加约 5 ～ 5.5 摩尔当量的氯化亚砜。该反应典型地在约 0℃下进行约 3 小时， 然后让其 升到室温过夜。当该反应基本完成时， 减压浓缩所得溶液从而产生式 (19) 化合物， 该化合 物直接用于下一步骤而无需纯化。
步骤 3- 式 (20) 的制备
式 (20) 化合物从式 (19) 化合物制备， 通过将步骤 1 的粗产物溶解在质子溶剂如 甲醇水溶液和碱如氨水的混合物中进行。 该反应在约 0℃下进行约 1 小时， 接着在室温下进 行约 3 小时。当该反应基本完成时， 式 (20) 的产物可通过传统方式分离， 并直接用于下一 步骤而没有进一步纯化。
步骤 4- 式 (18) 的制备
式 (18) 化合物是通过步骤 3 的粗产物 ( 式 (20) 化合物 )， 在约 3 摩尔当量的碱如 三乙胺存在下， 在质子溶剂如异丙醇中， 在约回流的温度下与约 1 ～ 1.1 摩尔当量的 2- 羟 基环戊胺反应约 24 小时制备的。当该反应基本完成时， 式 (18) 的产物可通过传统方式分 离， 例如通过减压除去溶剂并在水中搅拌残余物。
步骤 5- 式 I 的制备
步骤 4 的产物 ( 式 (18) 化合物 ) 然后与约 3 ～ 5 摩尔当量的式 R3SH 化合物例如 2- 氟苯硫酚反应。该反应在极性溶剂， 典型地 N， N- 二甲基甲酰胺中， 在约 5 ～ 6 摩尔当量 的碱例如氢化钠、 氢氧化钠， 或三乙胺， 如三乙胺存在下， 在约室温下进行约 1 ～ 5 天， 典型 地约 3 天。当该反应基本完成时， 式 I 的产物可通过传统方式分离。该产物又可通过从各 种溶剂， 如甲醇、 乙醇、 异丙醇或甲醇和乙醇的混合物中重结晶来另外纯化。 可替换地， 该产 物可通过从乙酸乙酯中重结晶或通过用乙酸乙酯浆化 (slurrying) 来纯化。
效用、 测试和给药
一般效用
式 I 化合物在治疗可用提高 ABCA-1 基因的细胞表达和 / 或提高 ABCA-1 蛋白表达 的化合物有效治疗的哺乳动物中的疾病或病症中有用。 这样的疾病包括， 但不局限于， 动脉 疾病， 特别是冠状动脉疾病。在某些实施方式中， 该疾病的特征是 HDL 胆固醇低。在某些实 施方式中， 该疾病或病症可以是糖尿病、 胰岛素抵抗、 血脂异常、 冠状动脉疾病和炎症中的 一种或多种。
测试
按上面引用的那些专利和参考文献， 及以下实例中所描述的， 并通过对本领域中 技术人员是显而易见的方法进行活性测试。
药物组合物
式 I 的化合物通常以药物组合物形式给药。因此本发明提供了药物组合物， 其含 有作为活性成分的式 I 化合物中的一种或多种， 或其药学上可接受的盐或酯， 以及一种或 多种药学上可接受的赋形剂 (excipient)、 运载体 ( 包括惰性固体稀释剂和填料 )、 稀释剂 ( 包括无菌水溶液和各种有机溶剂 )、 渗透促进剂、 增溶剂和佐剂。式 I 化合物可单独给药 或与其他治疗剂联合给药。这样的组合物可以药学领域中众所周知的方式制备 ( 参见， 例 如， Remington′ sPharmaceutical Sciences， Mace Publishing Co.， Philadelphia， PA th rd 17 Ed.(1985)and″ Modern Pharmaceutics″， Marcel Dekker， Inc.3 Ed.G.S.Banker&C. T.Rhodes， Eds.)。
给药
式 I 化合物可通过具有相似效用的药剂的已接受的给药方式中的任何一种、 以单 剂量或多剂量给药， 例如通过引用合并在本文中的那些专利和专利申请中所描述的， 包括 直肠、 含服、 鼻腔和透皮路径、 通过动脉内注射、 静脉内给药、 腹膜内给药、 肠胃外给药、 肌内 给药、 皮下给药、 口服、 局部地给药， 作为吸入剂， 或经由浸渍或涂布装置， 例如支架， 如插入 动脉的圆柱形聚合物。
一种给药模式是肠胃外给药， 特别是通过注射。本发明新型的组合物可整合的 用于注射给药的形式， 包括水或油悬液、 或乳液， 利用芝麻油、 玉米油、 棉籽油或花生油， 以 及酏剂、 甘露糖醇、 葡萄糖， 或无菌水溶液， 和相似的药物载体 (vehicle)。盐水溶液也通常用于注射。还可采用乙醇、 甘醇、 丙二醇、 液态聚乙二醇等 ( 及其合适的混合物 )、 环糊 精衍生物， 和植物油。例如通过使用诸如卵磷脂的包衣， 在分散的情况下通过维持所需颗 粒大小和通过使用表面活性剂， 可维持适当的流动性。微生物作用的阻止可通过各种抗 细菌剂和抗真菌剂， 例如对羟基苯甲酸脂类 (parabens)、 氯代丁醇、 苯酚、 山梨酸、 硫柳汞 (thimerosal) 等产生。
无菌可注射液可通过根据需要将在适当溶剂中地所需量的式 I 化合物与上面列 举的各种其他成分一起混合并随后过滤灭菌制备。一般地， 分散液可通过将各种经灭菌的 活性成分整合到含有基本分散介质和上面列举的所需其他成分的无菌载体中而制备。 在用 于制备无菌注射液的无菌粉末的情况下， 制备的典型方法是真空干燥和冷冻干燥技术， 该 技术可从它的先前灭菌过滤溶液中产生活性成分粉末和任何另外的期望成分。
口服给药是式 I 化合物给药的另一个路径。可经由胶囊或肠溶片等给药。在制取 包括至少一种式 I 化合物的药物组合物中， 活性成分通常被赋形剂稀释和 / 或被封装在这 样的载体内， 以呈现胶囊、 囊剂 (sachet)、 纸或其他容器的形式。 当赋形剂用作稀释剂时， 它 可以是固体、 半固体或液体材料 ( 如上 )， 其充当活性成分的赋形剂、 载体或介质。因而， 该 组合物的形式可以是片剂、 丸剂、 散剂、 锭剂， 囊剂， 扁囊剂 (cachets)、 酏剂、 悬液、 乳液、 溶 液、 糖浆、 气雾剂 ( 作为固体或在液体介质中 )、 含有例如多达 10 重量％的活性化合物的膏 剂、 软和硬胶囊、 无菌注射液， 和无菌包装粉末。 合适的赋形剂的一些实例包括乳糖、 葡萄糖、 蔗糖、 山梨醇、 甘露醇、 淀粉、 金合欢 树胶、 磷酸钙、 藻酸盐、 黄蓍胶、 明胶、 硅酸钙、 微晶纤维素、 聚乙烯吡咯烷酮、 纤维素、 无菌 水、 糖浆， 和甲基纤维素。制剂可另外包括 ： 润滑剂如滑石粉、 硬脂酸镁和矿物油 ； 润湿剂 ； 乳化剂和悬浮剂 ； 防腐剂如苯甲酸甲酯和苯甲酸羟丙酯 ； 增甜剂 ； 和调味剂。
通过采用本领域中已知的方法， 配制本发明的组合物， 以便在向患者给药之后提 供快速、 持久或延缓释放活性成分。 用于口服给药的控释给药系统， 包括含有聚合物涂布的 容器或药物 - 聚合物基质制剂的渗透泵系统和溶解系统。控释给药系统的实例在美国专利 No.3,845,770、 4,326,525、 4,902514 和 5,616,345 中给出。本发明方法中使用的另一种制 剂采用了透皮递药装置 (“贴剂” )。这样的透皮贴剂可用来提供连续或不连续的灌注受控 量中的本发明化合物。 用于递药的透皮贴剂的构建和用途在本领域中是众所周知的。 参见， 如美国专利 No.5,023,252、 4,992,445 和 5,001,139。 这样的贴剂可构建用于连续、 脉冲， 或 在需要时递送药剂。
组合物典型地配制成单位剂型。术语 “单位剂型” 指的是物理上分离的单位， 适合 作为用于人对象和其他哺乳动物的单一剂量， 每个单位含有经计算以产生期望的治疗效果 的预定量的活性材料， 以及合适的药物赋形剂 ( 如， 片剂、 胶囊和针剂 )。 式 I 化合物在宽剂 量范围内是有效的， 并且通常以药学上有效量给药。典型地， 对于口服给药， 每个剂量单位 含有 10mg ～ 2g， 更典型地含有 10mg ～ 700mg 的式 I 化合物， 而对于肠胃外给药， 每剂量单 位含有 10mg ～ 700mg， 更典型地含有 50mg ～ 200mg 的式 I 化合物。然而， 应当理解， 实际给 予的式 I 化合物的量应当由医师根据相关情形决定， 包括要治疗的病症、 选择的给药路径、 给予的实际化合物及其相对活性、 各个患者的年龄、 体重和反应、 患者症状的严重性等。
为了制备固体组合物， 例如片剂， 将主要活性成分与药物赋形剂混合从而形成含 有本发明化合物的均匀混合物的固体预制剂组合物。当提到这些配制组合物均匀时， 意思
是指活性成分平均地分散在整个组合物中， 以使该组合物可以很容易地细分成等效的单位 剂型， 如片剂、 丸剂和胶囊。
本发明的片剂或丸剂可以进行包衣或通过其他方式再配制， 从而提供作用时间延 长的剂型， 或保护其免受胃的酸性条件的影响。 例如， 片剂或丸剂可包含内部剂量组分和外 部剂量组分， 后者以包封的形式覆盖前者。 该两种组分可用肠溶层隔开， 其中肠溶层用来阻 止组分在胃中崩解并使得内部组分完整地送入十二指肠或延缓释放。 各种各样的材料都可 用于这样的肠溶层或包衣， 这样的材料包括许多聚合物酸以及聚合物酸与这样的材料如紫 胶、 十六烷醇和乙酸纤维素的混合物。
用于吸入或吹入的组合物包括在药学上可接受的水或有机溶剂， 或其混合物中的 溶液、 悬液， 以及粉末。液体和固体组合物可含有合适的药学上可接受的赋形剂， 如上文描 述的。在一些实施方式中， 组合物可通过口或鼻呼吸路径给予， 以产生局部或系统效应。在 药学上可接受溶剂中的组合物可通过使用惰性气体进行雾化。 雾化的溶液可从雾化装置直 接吸入， 或者雾化装置可与面罩吸入器， 或间歇式正压呼吸机相连接。 溶液、 悬液， 或粉末组 合物可从以适当方式递送制剂的装置， 典型地口服或鼻内进行给药。
以下实例用于示例说明本发明的一些典型的实施方式。本领域技术人员应当理 解， 遵照本发明的发明人发现的代表技术的实例中公开的技术， 在本发明的实践中得以很 好发挥作用， 因而可认为其构成用于它的实践的实例。然而， 本领域中技术人员应当理解， 根据本公开内容， 在不偏离本发明的精神和范围的情况下， 可以对公开的具体实施方式中 作出许多改变并仍可获得相同或相似的结果。
实例 1
式 (2) 化合物的制备
A. 式 (2) 化合物的制备， 其中 R3 是氢
向 2-(6- 氯 嘌 呤 -9- 基 )-5- 羟 甲 基 四 氢 呋 喃 -3， 4- 二 醇 ( 式 (1) 化 合 物 ) (4.9g， 17.1mmol) 和 2， 2- 二甲氧基丙烷 (10.5mL， 84.7mmol) 在二甲基甲酰胺 (100mL) 中 的溶液， 加入对甲苯磺酸 (325mg， 1.71mmol)。在 70 ℃下搅拌 24 小时之后， 真空浓缩反应 液并通过快速柱色谱 (70 ％ EtOAc/ 己烷 ) 纯化残余物， 从而得到式 (2) 化合物， 6-(6- 氯 嘌 呤 -9- 基 )-2， 2- 二 甲 基 四 氢 呋 喃 [3， 4-d][1， 3] 二 氧 代 -4- 基 ] 甲 醇， 为灰白色固 体。(3.8g， 68 ％ )1HNMR(CDCl3)δ1.4(s， 3H)， 1.65(s， 3H)， 3.8-4.0(dd， 2H)， 4.6(s， 1H)，5.1-5.3(m， 2H)， 6.0(d， 1H)， 8.25(s， 1H)， 8.8(s， 1H)。
B. 式 (2) 化合物的制备， 改变 R2
类 似 地， 按 照上面 1A 的方法步骤， 但用其 他 的式 (1) 化合 物 代替 2-(6- 氯 嘌 呤 -9- 基 )-5- 羟甲基四氢呋喃 -3， 4- 二醇， 制备其他的式 (2) 化合物。
实例 2
式 (3) 化合物的制备
A. 式 (3) 化合物的制备， 其中 R2 是氢， R3 是 2- 氟苯基， 并且 X 是共价键
向式 (2) 化合物， 6-(6- 氯嘌呤 -9 基 )-2， 2- 二甲基四氢呋喃 [3， 4-d][1， 3] 二 氧代 -4- 基 ] 甲醇 (0.48g， 1.47mmol) 在 20mL 四氢呋喃中的溶液， 加入三苯基膦 (0.77g， 2.94mmol) 和二乙基偶氮二羧酸酯 (0.47mL， 2.94mmol)， 并搅拌该混合物 5 分钟。然后加入 2- 氟苯硫酚 (0.31mL， 2.94mmol)， 回流下搅拌该混合物。回流 72 小时之后， 真空浓缩反应 物并通过快速柱色谱 (20％ EtOAc/ 己烷 ) 纯化残余物， 从而得到式 (3) 化合物， 1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯嘌呤 -9 基 )-7， 7- 二甲基 -3， 6， 8- 三氧杂双环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲 硫基 }-2- 氟苯， 为清澈的粘性油 (3)(0.25g， ～ 40％ )， 1
H NMR(CDCl 3) δ 1.4(s ， 3H) ， 1.6(s ， 3H) ， 3.2(m ， 2H) ， 4.6(t ， 1H) ， 5.1(m ， 1H) ， 5.5(m， 1H)， 6.0(d， 1H)， 7.0(m， 2H)， 7.2(m， 1H)， 7.4(m， 1H)， 8.25(s， 1H)， 8.75(s， 1H)。 2 3
B. 式 (3) 化合物的制备， 改变 R 和 R
类似地， 按照上面 2A 的方法步骤， 但可选地用其他的式 (2) 化合物代替 6-(6- 氯 嘌呤 -9 基 )-2， 2- 二甲基四氢呋喃 [3， 4-d][1， 3] 二氧代 -4- 基 ] 甲醇， 并可选地用其他的 3 式 R XH 化合物代替 2- 氟苯硫酚， 制备了以下的式 (3) 化合物。
1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯 嘌 呤 -9- 基 )-7， 7- 二 甲 基 -3， 6， 8- 三 氧 杂 双 环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲硫基 } 苯 ；
1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯 嘌 呤 -9 基 )-7， 7- 二 甲 基 -3， 6， 8- 三 氧 杂 双 环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲硫基 }-2， 6- 二氯苯 ；
1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯 嘌 呤 -9- 基 )-7， 7- 二 甲 基 -3， 6， 8- 三 氧 杂 双 环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲硫基 }-2， 4- 二氟苯 ；
1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯 嘌 呤 -9 基 )-7， 7- 二 甲 基 -3， 6， 8- 三 氧 杂 双 环
[3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲硫基 }-4- 氟苯 ；
2-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯 嘌 呤 -9 基 )-7， 7- 二 甲 基 -3， 6， 8- 三 氧 杂 双 环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲硫基 }-4- 甲基 -1， 3- 噻唑 ；
2-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯 嘌 呤 -9 基 )-7， 7- 二 甲 基 -3， 6， 8- 三 氧 杂 双 环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲硫基 }-1， 3- 苯并噁唑 ；
1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯 嘌 呤 -9 基 )-7， 7- 二 甲 基 -3， 6， 8- 三 氧 杂 双 环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲硫基 }-2- 甲苯 ；
1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯 嘌 呤 -9 基 )-7， 7- 二 甲 基 -3， 6， 8- 三 氧 杂 双 环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲硫基 )-2- 氯苯 ；
1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯 嘌 呤 -9 基 )-7， 7- 二 甲 基 -3， 6， 8- 三 氧 杂 双 环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲硫基 }-4- 氯苯 ；
1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯 嘌 呤 -9 基 )-7， 7- 二 甲 基 -3， 6， 8- 三 氧 杂 双 环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲硫基 }-2- 氟苯 ；
1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯 嘌 呤 -9 基 )-7， 7- 二 甲 基 -3， 6， 8- 三 氧 杂 双 环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲硫基 }-3- 氟苯 ；
1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯 嘌 呤 -9 基 )-7， 7- 二 甲 基 -3， 6， 8- 三 氧 杂 双 环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲硫基 }-2- 噻吩 ； 和
1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯 嘌 呤 -9 基 )-7， 7- 二 甲 基 -3， 6， 8- 三 氧 杂 双 环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲氧基 }-2- 氟苯。
B. 式 (3) 化合物的制备， 改变 R2 和 R3
类似地， 按照上面 2A 的方法步骤， 但可选地用其他的式 (2) 化合物代替 6-(6- 氯 嘌呤 -9 基 )-2， 2- 二甲基四氢呋喃 [3， 4-d][1， 3] 二氧代 -4- 基 ] 甲醇， 并可选地用其他的 3 式 R XH 化合物代替 2- 氟苯硫酚， 制备了其他的式 (3) 化合物。
实例 3
式 (4) 化合物的制备
A. 式 (4) 化合物的制备， 其中 R 是氢， R1 是环戊基， R2 是氢， R3 是 2- 氟苯基， 并且 X 和 Y 是共价键
向式 3 的化合物， 1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯嘌呤 -9 基 )-7， 7- 二甲基 -3， 6， 8- 三氧杂双环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲硫基 }-2- 氟苯 (0.125g， 2.86mmol) 在 10mL 乙醇和 1mL 三乙胺中的溶液中， 加入过量的环戊胺， 该混合物在氮气下回流 24 小时。减压下除去 溶剂， 并通过用 1 ∶ 1 的 EtOAc ∶己烷通过制备性 TLC 纯化残余物， 从而得到式 (4) 化合物 (9-{(4S， 1R， 2R， 5R)-4-[(2- 氟苯基硫基 ) 甲基 ]-7， 7- 二甲基 -3， 6， 8- 三氧杂双环 [3.3.0] 辛 -2- 基 } 嘌呤 -6- 基 ) 环戊胺， 为黄色的油状物 (80mg， 56％ )。
1H NMR(CDCl 3) δ 1.4(s ， 3H) ， 1.6(s ， 3H) ， 1.6-2.4(m ， 6H) ， 3.15-3.25(m ， 2H) ， 4.1(bs ， 1H) ， 4.4(t ， 1H) ， 5.1(m ， 1H) ， 5.5(m ， 1H) ， 6.0(d ， 1H) ， 6.2(bs ， 1H) ， 7.0(m ， 2H) ， 7.2(m， 1H)， 7.4(m， 1H)， 7.8(s， 1H)， 8.25(s， 1H)。 1
B. 式 (4) 化合物的制备， 改变 R 、 R2、 R3， 和Y
类似地， 按照上面 3A 的方法步骤， 但可选地用其他的式 (3) 化合物代替 1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯嘌呤 -9 基 )-7， 7- 二甲基 -3， 6， 8- 三氧杂双环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲 1 硫基 }-2- 氟苯， 并可选地用其他的式 R YNH2 化合物代替环戊胺， 还制备了以下的式 (4) 化 1 2 合物， 其中 R 是甲基， R 是 2-(3， 4- 二甲氧基苯基 ) 乙基， R 是氢， 并且 X 和 Y 是共价键 ： 3
R 是 2， 6- 二氯苯基 ； 3
R 是 4- 甲基噻唑 -2- 基 ；
R3 是 1， 3- 苯并噁唑 -2- 基 ； 3
R 是 2- 甲基苯基 ；
R3 是 2- 氯苯基 ； 和 3
R 是 4- 氯苯基。
C. 式 (4) 化合物的制备， 改变 R1、 R2、 R3 和 Y
类似地， 按照上面 3A 的方法步骤， 但可选地用其他的式 (3) 化合物代替 1-{[(2S， 1R， 4R， 5R)-4-(6- 氯嘌呤 -9 基 )-7， 7- 二甲基 -3， 6， 8- 三氧杂双环 [3.3.0] 辛 -2- 基 ] 甲 1 硫基 }-2- 氟苯， 并可选地用其他的式 R YNH2 化合物代替环戊胺， 还制备了其他的式 (4) 化 合物。
实例 4
式 I 化合物的制备
A. 式 I 化合物的制备， 其中 R 是氢， R1 是环戊基， R2 是氢， R3 是 2- 氟苯基， 并且 X 和 Y 是共价键
式I
将式 (4) 的化合物 (9-{(4S， 1R， 2R， 5R)-4-[(2- 氟苯硫基 ) 甲基 ]-7， 7- 二甲基 -3， 6， 8- 三氧杂双环 [3.3.0] 辛 -2- 基 } 嘌呤 -6- 基 ) 环戊胺 (50mg) 溶解在乙酸 (8mL) 和水 (2mL) 的混合物中， 并在 90℃下加热 16 小时。减压下除去溶剂， 并用制备性 TLC[ 甲醇 - 二 氯甲烷 (1 ∶ 9)] 纯化残余物， 从而制得式 I 的化合物 (4S， 5S， 3R)-2-[6-( 环戊胺基 ) 嘌 呤 -9- 基 ]-5-[(2- 氟苯硫基 ) 甲基 ] 四氢呋喃 -3， 4- 二醇， 1
H NMR(CDCl3)δ1.6-2.4(m， 6H)， 3.15-3.25(m， 2H)， 4.1(bs， 1H)， 4.4-4.65(m， 4H)， 6.0(d， 1H)， 6.8(bs， 1H)， 7.05(m， 2H)， 7.2(m， 1H)， 7.4(m， 1H)， 7.8(s， 1H)， 8.25(s， 1H)。 1
B. 式 I 化合物的制备， 改变 R
类似地， 按照上面 4A 的方法步骤， 但用其他的式 (4) 化合物代替 (9-{(4S， 1R， 2R， 5R)-4-[(2- 氟苯硫基 ) 甲基 ]-7， 7- 二甲基 -3， 6， 8- 三氧杂双环 [3.3.0] 辛 -2- 基 } 嘌 呤 -6- 基 ) 环戊胺， 制取了以下的式 I 化合物， 其中 R、 R2、 R4 和 R5 是氢， R3 是 2- 氟苯基， X 1 和 Y 是共价键， 而R 是：
环戊基 ；
(R， R)-2- 羟基环戊基 ；
(R， S)-2- 羟基环戊基 ；
双环 [2.2.1] 庚 -2- 基 ；
7， 7- 二甲基双环 [2.2.1] 庚 -2- 基 ；
双环 [2.2.1] 庚 -2- 基 -3- 羧酸乙酯 ；
双环 [2.2.1] 庚 -2- 基 -3- 羧酸 ；
双环 [2.2.1] 庚 -2- 基 -3- 甲醇 ；
环戊基 -2- 羧酸乙酯 ；
环戊基 -2- 羧酸 ；
(R)2- 羟基环己基 ；
(S)2- 羟基环己基 ； (R)-1- 苯基乙基 ； (S)-1- 苯基乙基 ； (4- 氟苯基 ) 甲基 ； 4- 三氟甲氧基苯基甲基 ； 2， 6- 二氟苯基甲基 ； (3- 甲氧基苯基 ) 甲基 ； (4- 甲氧基苯基 ) 甲基 ； 2- 苄氧基环戊基 ； (4- 甲基苯基 ) 乙基 ； 呋喃 -2- 基 ； 苯基环丙基 ； 3- 丙酸乙酯 ； 环己基 ； 1-(4- 甲氧基苯基 ) 乙基 ； 3- 三氟甲基苯基甲基 ； 3， 5- 二氯苯基甲基 ； (3- 氟苯基 ) 甲基 ； (2- 三氟甲基苯基 ) 甲基 ； (4- 氯苯基 ) 甲基 ； (2- 氟苯基 ) 甲基 ； 2- 氯 -4- 氟苯基甲基 ； 2- 氟 -4- 三氟甲基苯基甲基 ； 2， 4- 二氯苯基乙基 ； (R)-2- 苯基丙基 ； (S)-2- 苯基丙基 ； 2-(3- 氟苯基 ) 乙基 ； 2-(2- 氯苯基 ) 乙基 ； 6， 6- 二甲基双环 [3.3.1] 庚 -3- 基 ； 4-( 叔丁基 ) 环己基 ； 2- 氯苯基甲基 ； 1-(4- 甲苯基 ) 乙基 ； (3- 甲苯基 ) 甲基 ； (4- 甲苯基 ) 甲基 ； 2- 三氟甲基 -5- 氟苯基甲基 ； 2- 氯 -3- 三氟甲基苯基甲基 ； 2， 6， 6- 三甲基双环 [3.3.1] 庚 -3- 基 ； 1- 萘基甲基 ； 双环 [3.1.1] 庚 -3- 基 ；2- 异丙基 -4- 甲基环己基 ；
2- 羧酰氨基环己基 ；
(R)-2- 羧基环己基 ；
(S)-2- 羧基环己基 ；
2- 羟甲基环己基 ；
2- 羧酸环己基乙酯 ；
2- 羧基 -4- 苯基环己基 ；
2- 羧基双环 [2.2.1] 庚 -5- 烯 -3- 基 ； 和
2- 羧酸双环 [2.2.1] 庚 -3- 基乙酯。
类似地， 制备了以下的式 I 化合物， 其中 R、 R2、 R4 和 R5 是氢， 并且 X 和 Y 是共价键 ： 3 1
R 是 4- 氟苯基且 R 是环戊基 ；
R3 是 2- 甲基苯基且 R1 是环戊基 ； 和 3 1
R 是 2， 4- 二氟苯基且 R 是环戊基。
C. 式 I 化合物的制备， 改变 R1、 R2、 R3、 R4、 R5、 X和Y
类似地， 按照上面 4A 的方法， 或使用实例 5-8 的组合合成， 但可选地用其他的式 (4) 化合物代替 (9-{(4S， 1R， 2R， 5R)-4-[(2- 氟苯硫基 ) 甲基 ]-7， 7- 二甲基 -3， 6， 8- 三氧 杂双环 [3.3.0] 辛 -2- 基 } 嘌呤 -6- 基 ) 环戊胺， 制取了以下的式 I 化合物。
R3 2， 4- 二氯苯基R、 R1 和与它们相连的 N 原子的组合 哌啶 -1- 基2， 4- 二氯苯基 2， 4- 二氯苯基 2， 4- 二氯苯基 2， 4- 二氯苯基 2， 4- 二氟苯基 2， 4- 二氟苯基 2， 4- 二氟苯基 2， 4- 二氟苯基 2， 4- 二氟苯基 2， 4- 二氟苯基 2， 4- 二氟苯基 2， 4- 二氟苯基 4- 氟苯基 4- 氟苯基 4- 氟苯基 4- 氟苯基 4- 氟苯基 4- 氟苯基 4- 氟苯基 4- 氟苯基 4- 甲基 -1， 3- 噻唑 -2- 基2- 乙基哌啶 -1- 基 4-( 哌啶 -1- 基 ) 哌啶 -1- 基 1， 2， 3， 4- 四氢异喹啉 -2- 基 吗啉 -4- 基 4- 甲基哌嗪 -1- 基 吡咯烷 -1- 基 4- 苄基哌嗪 -1- 基 哌啶 -1- 基 4-( 哌啶 -1- 基 ) 哌啶 -1- 基 1， 2， 3， 4- 四氢异喹啉 -2- 基 吗啉 -4- 基 4- 甲基哌嗪 -1- 基 4- 苄基哌嗪 -1- 基 哌啶 -1- 基 2- 乙基哌啶 -1- 基 4- 苄基哌啶 -1- 基 4-( 哌啶 -1- 基 ) 哌啶 -1- 基 1， 2， 3， 4- 四氢异喹啉 -2- 基 吗啉 -4- 基 4- 苯基哌嗪 -1- 基 吡咯烷 -1- 基4- 甲基 -1， 3 噻唑 -2- 基 4- 甲基 -1， 3- 噻唑 -2- 基 4- 甲基 -1， 3- 噻唑 -2- 基 4- 甲基 -1， 3 噻唑 -2- 基 4- 甲基 -1， 3- 噻唑 -2- 基 4- 甲基 -1， 3- 噻唑 -2- 基 4- 甲基 -1， 3- 噻唑 -2- 基 4- 甲基 -1， 3- 噻唑 -2- 基 1， 3- 苯并噁唑 -2- 基 1， 3- 苯并噁唑 -2- 基 1， 3- 苯并噁唑 -2- 基 1， 3- 苯并噁唑 -2- 基 1， 3- 苯并噁唑 -2- 基 2- 甲苯基 2- 甲苯基 2- 甲苯基 2- 甲苯基 2- 甲苯基 2- 甲苯基 2- 甲苯基 2- 甲苯基4- 苄基哌嗪 -1- 基 哌啶 -1- 基 4- 苄基哌啶 -1- 基 4-( 哌啶 -1- 基 ) 哌啶 -1- 基 1， 2， 3， 4- 四氢异喹啉 -2- 基 吗啉 -4- 基 4- 甲基哌嗪 -1- 基 4- 苯基哌嗪 -1- 基 吡咯烷 -1- 基 2- 乙基哌啶 -1- 基 4- 苄基哌啶 -1- 基 吗啉 -4- 基 4- 甲基哌嗪 -1- 基 吡咯烷 -1- 基 哌啶 -1- 基 2- 乙基哌啶 -1- 基 4- 苄基哌啶 -1- 基 4-( 哌啶 -1- 基 ) 哌啶 -1- 基 1， 2， 3， 4- 四氢 - 异喹啉 -2- 基 吗啉 -4- 基 4-(3， 4- 二氯苯基 ) 哌嗪 -1- 基2- 甲苯基 2- 甲苯基 2- 甲苯基 2- 氯苯基 2- 氯苯基 2- 氯苯基 2- 氯苯基 2- 氯苯基 2- 氯苯基 2- 氯苯基 2- 氯苯基 2- 氯苯基 2- 氯苯基 4- 氯苯基 4- 氯苯基 4- 氯苯基 4- 氯苯基 4- 氯苯基 4- 氯苯基 4- 氯苯基 4- 氯苯基4- 甲基哌嗪 -1- 基 4- 苯基哌嗪 -1- 基 吡咯烷 -1- 基 4- 苄基哌嗪 -1- 基 哌啶 -1- 基 2- 乙基哌啶 -1- 基 4- 苄基哌啶 -1- 基 4-( 哌啶 -1- 基 ) 哌啶 -1- 基 1， 2， 3， 4- 四氢异喹啉 -2- 基 吗啉 -4- 基 4-(3， 4- 二氯苯基 ) 哌嗪 -1- 基 4- 甲基哌嗪 -1- 基 4- 苯基哌嗪 -1- 基 吡咯烷 -1- 基 4- 苄基哌嗪 -1- 基 哌啶 -1- 基 2- 乙基哌啶 -1- 基 4-( 哌啶 -1- 基 ) 哌啶 -1- 基 1， 2， 3， 4， - 四氢异喹啉 -2- 基 吗啉 -4- 基 4- 苯基哌嗪 -1- 基2- 氟苯基 2- 氟苯基 2- 氟苯基 2- 氟苯基 2- 氟苯基 2- 氟苯基 2- 氟苯基 2- 氟苯基 3- 氟苯基 3- 氟苯基 3- 氟苯基 3- 氟苯基 3- 氟苯基 3- 氟苯基 噻吩 -2- 基 噻吩 -2- 基 苯基 苯基 苯基 苯基 . 苯基吡咯烷 -1- 基 4- 苄基哌嗪 -1- 基 哌啶 -1- 基 2- 乙基哌啶 -1- 基 吗啉 -4- 基 4- 苯基哌嗪 -1- 基 吡咯烷 -1- 基 4- 苄基哌嗪 -1- 基 哌啶 -1- 基 4- 苄基哌啶 -1- 基 1， 2， 3， 4- 四氢 - 异喹啉 -2- 基 吗啉 -4- 基 4- 甲基哌嗪 -1- 基 4-( 哌啶 -1- 基 ) 哌啶 -1- 基 4- 苯基哌嗪 -1- 基 2- 乙基哌啶 -1- 基 吡咯烷 -1- 基 4- 苄基哌嗪 -1- 基 哌啶 -1- 基 2- 乙基哌啶 -1- 基 4- 苯基哌啶 -1- 基苯基 苯基 苯基
4-( 哌啶 -1- 基 ) 哌啶 -1- 基 吗啉 -4- 基 4-(3， 4- 二氯苯基 ) 哌嗪 -1- 基还制备了以下的式 I 化合物， 其中 R 是甲基， R1 是 2-(3， 4- 二甲氧基苯基 ) 乙基， 2 R 是氢， 并且 X 和 Y 是共价键 ：
R3 是 2， 6- 二氯苯基 ； 3
R 是 4- 甲基噻唑 -2- 基 ；
R3 是 1， 3- 苯并噁唑 -2- 基 ；
2- 甲苯基 ；
R3 是 2- 氯苯基 ； 和 3
R 是 4- 氯苯基。
D. 式 I 化合物的制备， 改变 R1、 R2、 R3、 R4、 R5、 X和Y
类似地， 按照上面 4A 的方法步骤， 但可选地用其他的式 (4) 化合物代替 (9-{(4S， 1R， 2R， 5R)-4-[(2- 氟苯硫基 ) 甲基 ]-7， 7- 二甲基 -3， 6， 8- 三氧杂双环 [3.3.0] 辛 -2- 基 } 嘌呤 -6- 基 ) 环戊胺， 制取了以下的式 I 化合物。
式 I 化合物可替换地以组合方式制取， 如上文反应图式 II 中所示。实例 5-8 详细 描述了使用这个技术制备单个化合物， 并采用该过程以组合方式提供多个式 I 化合物的平 行合成。
实例 5
式 (5) 化合物的制备
A. 式 (5) 化合物的制备， 其中 R2 是氢
将 对 苄 氧 基 苯 甲 醛 聚 苯 乙 烯 树 脂 (1)(100g， 3.0mmol/g， 0.3mol， 150-300μm， Polymer Labs) 悬浮在干燥的原甲酸三甲酯 (1L) 中。加入对甲苯磺酸一水合物 (5.70g， 0.03mol， 0.1eq)， 并在室温下振荡该悬浮液 48 小时。 加入三乙胺 (60mL)， 并迅速过滤树脂，
用含有 1％三乙胺的二氯甲烷洗涤 4 次， 并真空干燥 24 小时， 从而获得二甲基缩醛树脂。
将二甲基缩醛树脂 (20.0g， 3mmol/g， 60.0mmol) 悬浮在无水 N， N- 二甲基乙酰 胺 (300mL) 中， 并 相 继 用 式 (1) 的 核 苷 (34.4g， 120mmol， 2eq) 和 10- 樟 脑 磺 酸 (2.78g， 12.0mmol， 0.2eq.) 处理。室温下在 200rpm 下振荡该混合物 96 小时。然后加入三乙胺 (4.2mL， 30.0mmol， 0.5eq) 并迅速过滤树脂， 用 N， N- 二甲基乙酰胺洗涤一次， 用含有 1 ％ Et3N 的二氯甲烷和含 1％三乙胺的 MeOH 交替循环洗涤四次， 并最后用含 1％三乙胺的二氯 甲烷洗涤三次。真空干燥回收的树脂 48 小时， 从而提供式 (5) 的树脂结合的核苷。
实例 6
式 (6) 化合物的制备
A. 式 (6) 化合物的制备， 其中 R 和 R2 是氢， Y 是共价键， 并且 R1 是环戊基
在反应容器中放入悬浮在无水 1， 4- 二氧六环 (30mL) 中悬浮的式 (5) 的树脂结合 的核苷 (30mg 树脂 ； 树脂加载 1.5mmol/g)。 然后加入二异丙基乙胺 (2.4mL， 13.5mmol， 20eq) 和过量的环戊胺。在不搅拌或不搅动的情况下于 80℃下加热反应容器 48 小时。在冷却至 室温之后， 除去溶剂， 并加入含有 1％三乙胺 (50mL) 的甲醇以收缩树脂。产物用含 1％三 乙胺的 MeOH 和含有 1％三乙胺的二氯甲烷交替循环洗涤四次， 并真空干燥过夜从而提供式 (6) 的树脂结合的化合物。
实例 7
式 (7) 化合物的制备
A. 式 (7) 化合物的制备， 其中 R 和 R2 是氢， Y 是共价键， R1 是环戊基， 并且 R3 是 2- 氟苯基
将实例 6 的产物悬浮在无水吡啶 (2mL) 中并用二异丙基乙胺 (0.13mL) 处理。在 冷却到 0℃之后， 逐滴加入甲磺酰氯 (0.035mL， 337mmol)。在滴加期间通过手有规律地搅拌 反应混合物。90 分钟之后， 让反应混合物升到室温并振荡 24 小时。在除去反应混合物之 后， 用含有 1％三乙胺的无水二氯甲烷冲洗该产物， 从而提供式 (6) 树脂结合的化合物的甲 磺酰化衍生物。
然后将该甲磺酸酯 ( 甲磺酸盐， mesylate) 悬浮在乙腈 (1.5mL) 中并用过量的二 异丙基乙胺 (0.16mL) 处理和随后用水 (0.7mL) 和 2- 氟苯硫酚 (45mmol) 处理。在不搅拌 的情况下将该反应容器升温到近 80℃， 持续 65 小时。产物用含 1％三乙胺的 MeOH 和含有 1％三乙胺的二氯甲烷交替循环洗涤四次， 并真空干燥过夜， 从而提供式 (7) 树脂结合的化 合物。
实例 8
式 I 化合物的制备
A. 式 I 化合物的制备， 其中 R 是氢， R1 是环戊基， R2 是氢， R3 是 2- 氟苯基， 并且 X 和 Y 是共价键
将式 (7) 的树脂结合的化合物悬浮在 2％三氟乙酸 /5％甲醇 / 二氯甲烷的溶液 中并在室温下振荡 (200rpm)2 小时。除去溶液之后， 用二氯甲烷冲洗残余物 (3×0.5mL)， 并 减 压 下 浓缩 合并 的滤液， 从而 制得 式 I 的化 合 物 (4S， 5S， 3R)-2-[6-( 环戊胺 基 ) 嘌 呤 -9- 基 ]-5-[(2- 氟苯硫基 ) 甲基 ] 四氢呋喃 -3， 4- 二醇。
实例 9
式 (9) 化合物的制备
向 6- 氯 嘌 呤 核 苷 (10.0g， 35mmol) 在 乙 醇 (350mL) 中 的 溶 液 中， 添加三乙胺 (10.0mL， 100mmol) 和 (1R， 2R)-2-( 苄氧基 )- 环戊胺 (5.2g， 52mmol)。 将该混合物回流 24 小 时， 在此期间， 该反应物由悬浮液变成澄清溶液。减压下除去乙醇， 并将残余物分配在乙酸 乙酯和水 (100mL ∶ 200mL) 之间。 分离有机层并用乙酸乙酯洗涤该有机层两次 (2×75mL)。 干燥 ( 硫酸钠 ) 合并的有机层， 并减压下除去溶剂。将残余物溶解在乙酸乙酯 (150mL) 中，通过添加己烷使产物沉淀， 从而制得 2-(6-{[(1R， 2R)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌 呤 -9- 基 )(4S， 3R， 5R)-5-( 羟甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇， 为白色固体。 1
HNMR(CD 3OD) δ1.62-2.16(m ， 6H)， 3.26-3.29(m ， 1H ， NHCH) ， 3.68-3.85(m ， 2H ， CH2-5′ )， 4.03-4.10(m， 1H， CH-4′ )， 4.12-4.16(m， 1H， CHOBn)， 4.16-4.19(m， 1H， 3′ CH)， 4.71(s， 2H， OCH2Ph)， 4.83-4.92(m， 1H， 2′ CH)， 5.98(d， J ＝ 6Hz， 1H， H-1′ )， 7.23-7.35(m， 5H， PhH)， 8.15(S， 1H， C-2H)。
B. 式 (9) 化合物的制备
类似地， 按照上面 9A 的步骤， 但用 2-( 苄氧基 ) 环戊胺的其他异构体代替 (1R， 2R)-2-( 苄氧基 )- 环戊胺， 制备了以下的化合物 ：
2-(6-{[(1S， 2S)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 )(4S， 3R， 5R)-5-( 羟 甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ；
2-(6-{[(1R， 2S)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 )(4S， 3R， 5R)-5-( 羟 甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ；
2-(6-{[(1S， 2R)-2-( 苯甲氢基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 )(4S， 3R， 5R)-5-( 羟 甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ；
2-(6-{[(1RS， 2RS)-2-( 苯 甲 氧 基 ) 环 戊 基 ] 氨 基 } 嘌 呤 -9- 基 )(4S， 3R， 5R)-5-( 羟甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇。
实例 10
式 (10) 化合物的制备
在 0℃下， 向搅拌的 2-(6-{[(1R， 2R)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 ) (4S， 3R， 5R)-5-( 羟 甲 基 ) 四 氢 呋 喃 -3， 4- 二 醇 (2.0g， 4.5mmol) 的 乙 腈 (15mL) 和 吡 啶 (0.728mL， 9mmol) 悬浮液中， 逐滴加入氯化亚砜 (1.7mL， 22.5mmol)。在 0 ℃下搅拌 4 小 时之后， 让该反应液升到室温， 然后搅拌过夜。减压下除去所得悬浮液中的溶剂， 从而制 得 4-(6-{[(1R， 2R)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 )(6S， 3aR， 6aR)-6-( 氯甲 基 )-4H， 6H， 3aH， 6aH- 四氢呋喃并 [3， 4-d]1， 3， 2- 二氧硫杂环戊 (dioxathiolan)-2- 酮， 该 物质无需进一步纯化而直接用于下一步骤。
B. 式 (10) 化合物的制备
类似地， 按照上面 10A 的方法步骤， 但用 2-(6-{[2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌 呤 -9- 基 )(4S， 3R， 5R)-5-( 羟甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇的其他异构体代替 2-(6-{[(1R， 2R)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 )(4S， 3R， 5R)-5-( 羟甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇， 制备了下列化合物 ：
4-(6-{[(1S， 2S)-2-( 苯 甲 氧 基 ) 环 戊 基 ] 氨 基 } 嘌 呤 -9- 基 )(6S， 3aR， 6aR)-6-( 氯甲基 )-4H， 6H， 3aH， 6aH- 四氢呋喃并 [3， 4-d]1， 3， 2- 二氧杂四氢噻吩 -2- 酮 ；
4-(6-{[(1R， 2S)-2-( 苯 甲 氧 基 ) 环 戊 基 ] 氨 基 } 嘌 呤 -9- 基 )(6S， 3aR， 6aR)-6-( 氯甲基 )-4H， 6H， 3aH， 6aH- 四氢呋喃并 [3， 4-d]1， 3， 2- 二氧硫杂环戊 -2- 酮 ；
4-(6-{[(1S， 2R)-2-( 苯 甲 氧 基 ) 环 戊 基 ] 氨 基 } 嘌 呤 -9- 基 )(6S， 3aR， 6aR)-6-( 氯甲基 )-4H， 6H， 3aH， 6aH- 四氢呋喃并 [3， 4-d]1， 3， 2- 二氧硫杂环戊 -2- 酮 ； 和
4-(6-{[(1RS， 2RS)-2-( 苯 甲 氧 基 ) 环 戊 基 ] 氨 基 } 嘌 呤 -9- 基 )(6S， 3aR， 6aR)-6-( 氯甲基 )-4H， 6H， 3aH， 6aH- 四氢呋喃并 [3， 4-d]1， 3， 2- 二氧硫杂环戊 -2- 酮。
实例 11
式 (11) 化合物的制备
将来自实例 10 的 4-(6-{[(1R， 2R)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 ) (6S， 3aR， 6aR)-6-( 氯 甲 基 )-4H， 6H， 3aH， 6aH- 四 氢 呋 喃 并 [3， 4-d]1， 3， 2- 二 氧 硫 杂 环 戊 -2- 酮溶解在甲醇和水 (40mL/2mL) 的混合物中， 然后向该溶液中逐滴加入浓氢氧化铵 (2.2mL， 28％ )。在 23℃下搅拌 30 分钟之后， 减压下除去溶剂并用水 (15mL) 稀释残余物。 用乙酸乙酯 (3×75mL) 萃取混合物水溶液， 用 MgSO4 干燥， 并减压下除去溶剂， 从而提供
2-(6-{[(1R， 2R)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 )(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四 氢呋喃 -3， 4- 二醇， 其无需进一步纯化而直接用于下一步骤。
B. 式 (11) 化合物的制备
类似地， 按照上面 11A 的方法， 但用 4-(6-{[2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌 呤 -9- 基 )(6S， 3aR， 6aR)-6-( 甲 基 )-4H， 6H， 3aH， 6aH- 四 氢 呋 喃 并 [3， 4-d]1， 3， 2- 二 氧 硫杂环戊 -2- 酮的其他异构体代替 4-(6-{[(1R， 2R)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌 呤 -9- 基 )(6S， 3aR， 6aR)-6-( 氯甲基 )-4H， 6H， 3aH， 6aH- 四氢呋喃并 [3， 4-d]1， 3， 2- 二氧硫杂环戊 -2- 酮， 制得了下列化合物 ：
2-(6-{[(1S， 2S)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 )(4S， 5S， 3R)-5-( 氯 甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ；
2-(6-{[(1R， 2S)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 )(4S， 5S， 3R)-5-( 氯 甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ；
2-(6-{[(1S， 2R)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 )(4S， 5S， 3R)-5-( 氯 甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ； 和
2-(6-{[(1RS， 2RS)-2-( 苯 甲 氧 基 ) 环 戊 基 ] 氨 基 } 嘌 呤 -9- 基 )(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇。
实例 12
式 (12) 化合物的制备
将 在 实 例 11 中 获 得 的 2-(6-{[(1R， 2R)-2-( 苯 甲 氧 基 ) 环 戊 基 ] 氨 基 } 嘌 呤 -9- 基 )(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 (22g) 溶解在乙醇 (450mL) 和坏 己烷 (200mL) 中。向该溶液中加入氢氧化钯 (20mol％， 开始加 1g， 6 小时之后加 1g， 及 14 小时之后加 1g)， 并将该反应混合物回流 18 小时。 趁热通过硅藻土过滤， 并减压下除去滤液 中的溶剂。产物用乙醇 (20mL) 研碎， 过滤， 并用乙醇洗涤， 从而制得 2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟 基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇， 为白色粉 末。
其他材料如下回收 ： 将收回的氢氧化钯溶解在甲醇 (200mL) 中， 并在 90 ℃下对 该混合物升温， 持续 1 小时。通过硅藻土过滤该热的混合物， 用热甲醇进一步洗涤该硅藻 土。减压下浓缩滤液， 残余物用乙醇 (20mL) 研碎， 从而制得另外的 8.6g 的 2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9 基 }(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇。 1
H NMR(DMSO-d6)δ1.64-2.18(m， 6H)， 3.26-3.29(m， 1H， NHCH)， 3.83-3.97(m， 2H， CH2C15′ )， 4.03-4.09(m， 1H， CH-4′ )， 4.12-4.17(m， 1H， CHOH)， 4.16-4.19(m， 1H， 3′ CH)， 4.84-4.92(m， 1H， 2′ CH)， 5.96(d， J-6Hz， 1H， H-1′ )， 7.23-7.35(m， 5H， PhH)， 8.15(S， 1H， C-2H)， 8.39(s， 1H， C-8H)。
B. 式 (12) 化合物的制备
类似地， 按照上面 12A 的方法步骤， 但用 2-(6-{[2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌
呤 -9- 基 )(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇的其他异构体代替 2-(6-{[(1R， 2R)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 )(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇， 制得了下列化合物 ：
2-(6-{[(1S， 2S)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 )(4S， 5S， 3R)-5-( 氯 甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ；
2-(6-{[(1R， 2S)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 )(4S， 5S， 3R)-5-( 氯 甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ；
2-(6-{[(1S， 2R)-2-( 苯甲氧基 ) 环戊基 ] 氨基 } 嘌呤 -9- 基 )(4S， 5S， 3R)-5-( 氯 甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ； 和
2-(6-{[(1RS， 2RS)-2-( 苯 甲 氧 基 ) 环 戊 基 ] 氨 基 } 嘌 呤 -9- 基 )(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇。
实例 13
式 I 化合物的制备， 其中 R 是 2- 氟苯基
向 2- 氟 苯 硫 酚 (38mL， 406mmol) 在 2N 氢 氧 化 钠 (100mL) 中 的 溶 液 中， 加入 2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋 喃 -3， 4- 二醇 (15.0g， 40.6mmol) 的 N， N- 二甲基甲酰胺 (120mL) 溶液。将该混合物升温到 100℃， 持续 4 小时， 用 TLC 跟踪反应进展。减压下除去 N， N- 二甲基甲酰胺， 并用水 (200mL) 稀释剩余混合物， 用乙酸中和， 用乙酸乙酯 (3×125mL) 萃取， 用 MgSO4 干燥合并的有机层。 减压下除去溶剂之后， 残余物用二乙醚研磨并过滤， 从而制得 16g 的 2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟 基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟苯基硫基 ) 甲基 ] 四氢呋喃 -3， 4- 二 醇， 为白色粉末。 1
H NMR(DMSO-d6)δ1.66-2.27(m， 6H)， 3.42-3.59(m， 1H， NHCH)， 4.05-4.14(m， 2H)， 4.03-4.09(m， 1H， CH-4′ )， 4.14-4.19(m， 1H)， 4.16-4.19(m， 1H， 3′ CH)， 4.84-4.92(m， 1H， 2′ CH)， 5.97(d， J ＝ 6Hz， 1H， H-1′ )， 7.05-7.55(m， 4H， PhH)， 8.10(S， 1H， C-2H)， 8.15(s， 1H， C-8H)。
B. 式 I 化合物的制备， 其中 R 是 2- 氟苯基
类似地， 按照上面 13A 的方法， 但用 2-{6-[(-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9 基 } (4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇的其他异构体代替 2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟基 环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇， 制得下列化 合物 ：
2-{6-[((1S， 2S)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟苯硫 基 ) 甲基 ] 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ；
2-{6-[((1R， 2S)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟苯硫 基 ) 甲基 ] 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ；
2-{6-[((1S， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟苯硫 基 ) 甲基 ] 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ； 和
2-{6-[((1RS， 2RS)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟苯 基硫基 ) 甲基 ] 四氢呋喃 -3， 4- 二醇。
C. 改变 R 的式 I 化合物的制备
类似地， 按照上面 13A 的方法， 但用式 RSH 的其他苯硫酚代替 2- 氟苯硫酚， 制备了 其他的式 I 化合物。
实例 14
式 (19) 化合物的制备
制备 1
在 55 分钟时间内将氯化亚砜 (SOCl2， 66.0mL， 907mmol) 逐滴加入到 6- 氯嘌呤核苷 (50.0g， 174.4mmol) 在干燥乙腈 (600mL) 和蒸馏过的吡啶 (30mL， 370mmol) 中的冷 (0℃， 冰 浴 ) 悬浮液中。 0℃下搅拌该反应混合物 3 小时然后室温下搅拌 18 小时。 在 40℃下减压浓缩 该黄色溶液， 然后在高真空下干燥 6 小时。 残余物 (6S， 4R， 3aR， 6aR)-6-( 氯甲基 )-4-(6- 氯 嘌呤 -9- 基 )-4H， 6H， 3aH， 6aH- 四氢呋喃并 [3， 4-d]1， 3， 2- 二氧杂四氢噻吩 -2- 酮 (12) 无 需进一步纯化而可用于下一步骤反应。
2. 式 (19) 化合物的可替换制备
将氯化亚砜 (SOCl2， 530mL) 逐滴加入在干燥二氯甲烷 (15 升 ) 中的 6- 氯嘌呤核 苷 (1Kg) 和蒸馏过的吡啶 (850mL) 的混合物中， 在 30 ～ 60 分钟内将温度保持在 30℃以下。
在 30℃下搅拌该反应混合物 4 小时， 然后冷却到 20℃。加入无水乙醇 (1700mL)， 将温度维 持在 20℃， 搅拌该混合物 15 分钟。然后缓慢地添加水 (3.5 升 )， 搅拌该混合物 30 分钟， 在此之后可分离这些内含物。分相， 有机层用 4 升饱和的碳酸氢钠洗涤。该两相分离之后， 有 机层用 2.6 升饱和的氯化钠洗涤， 分离， 并在减压下除去溶剂直至体积达到近 4 升， 提供了 (6S， 4R， 3aR， 6aR)-6-( 氯甲基 )-4-(6- 氯嘌呤 -9- 基 )-4H， 6H， 3aH， 6aH- 四氢呋喃并 [3， 4-d]1， 3， 2- 二氧硫杂环戊 -2- 酮 (12) 溶液， 其无需进一步纯化而可用于下一步骤的反应。
实例 15
式 (20) 化合物的制备
将从实例 14( 制备 1) 获得的式 (19) 化合物溶解在甲醇 (1000mL) 和蒸馏水 (50mL) 中。将该溶液冷却到 0℃并在 25 分钟内逐滴加入浓氨水 (28％， 56mL)。0℃下继续搅拌 1 小时， 然后室温下搅拌 3 小时。在此期间， 加入另外的 10mL 浓氨水 (28％ )( 用 TLC， CH2Cl2/ MeOH， 9 ∶ 1 跟踪反应进展 )。 减压浓缩该反应混合物， 残余物在室温下用 5％柠檬酸水溶液 (1000mL) 水解。用乙酸乙酯 (1×900mL、 1×400mL、 1×200mL、 2×100mL) 萃取水层， 合并的 有机层用饱和的碳酸氢钠 (450mL) 洗涤。碳酸氢钠水溶液层用乙酸乙酯 (3×50mL) 萃取。 合并的有机层用盐水 (400mL) 洗涤， 而氯化钠水溶液层也用乙酸乙酯 (3×50mL) 萃取。合 并的有机层用硫酸钠干燥， 过滤， 并减压浓缩滤液从而获得 41.8g 的式 (13) 化合物 (4S， 5S， 2R， 3R)-5-( 氯甲基 )-2-(6- 氯嘌呤 -9- 基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇。没有进行进一步的纯 化。
制备 2
可替换地， 将氢氧化铵 (500mL) 加入在实例 14 的制备 2 中获得的 (6S， 4R， 3aR， 6aR)-6-( 氯甲基 )-4-(6- 氯嘌呤 -9- 基 )-4H， 6H， 3aH， 6aH- 四氢呋喃并 [3， 4-d]1， 3， 2- 二 氧硫杂环戊 -2- 酮 (12) 溶液中， 并在 25℃下搅拌该混合物 12 小时。滤掉固体， 并用二氯甲 烷 (500mL) 洗涤。合并滤液和洗涤液， 真空将该体积减少到约 6 升。没有进行进一步纯化。
实例 16 式 (18) 化合物的制备制备 1
将 (4S， 5S， 2R， 3R)-5-( 氯 甲 基 )-2-(6- 氯 嘌 呤 -9- 基 ) 四 氢 呋 喃 -3， 4- 二 醇 (36.3g， 118.7mmol) 在 400mL 异丙醇中的溶液逐滴加入 (R， R)-2- 氨基戊醇盐酸盐 (34.2g， 249mmol) 在 脱 气 的 异 丙 醇 (100mL) 和 蒸 馏 过 的 三 乙 胺 ( 用 氢 化 钙 干 燥 的， 95mL， 69g， 226mmol) 中的悬浮液中。室温下搅拌该反应混合物 30 分钟， 然后回流 ( 油浴温度 ：～ 80℃ )20 小时。将反应混合物冷却到室温之后， 减压除去溶剂， 并将 1000mL 水加入残余物 中。室温下搅拌该悬浮液 3.5 小时， 滤出固体物质， 用水 (1×60mL 和 1×90mL) 洗涤， 并真 空下用 P2O5 干燥 3 天， 从而产生 68.0g 的 (81％ )2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇， 为浅褐色粉末。
制备 2
可替换地， 将在实例 15 的制备 2 中获得的溶液冷却到 20 ～ 25 ℃， 加入三乙胺 (1000mL)， 接着加入 (R， R)-2- 氨基戊醇 (530g)。将该混合物回流 8 小时， 然后在大气压下 除去溶剂直至体积到达约 4 升。将混合物冷却到 55 ～ 60℃， 加入水 (15 升 )， 并将混合物 冷却到 20 ～ 25℃。搅拌该混合物约 1 小时， 然后过滤， 用无水乙醇 (1.25 升 ) 洗涤固体， 减 压干燥固体， 不允许温度超过 60℃。
B. 类似地， 按照上面 16A( 制备 1 或制备 2) 的方法， 但用 (S， S)-2- 氨基戊醇盐酸盐 代替 (R， R)-2- 氨基戊醇盐酸盐， 制得 2-{6-[((1S， 2S)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 } (4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇。
C. 类似地， 按照上面 16A( 制备 1 或制备 2) 的方法， 但用 (1R， 2S)-2- 氨基戊醇 盐酸盐代替 (R， R)-2- 氨基戊醇盐酸盐， 制得 2-{6-[((1R， 2S)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌 呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇。
D. 类似地， 按照上面 16A( 制备 1 或制备 2) 的方法， 但用 (1S， 2R)-2- 氨基戊醇 盐酸盐代替 (R， R)-2- 氨基戊醇盐酸盐， 制得 2-{6-[((1S， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌 呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇。
实例 17
式 I 化合物的制备， 其中 R 是 2- 氟苯基
制备 1
每 2 ～ 3 小时将以 38.5mL 部分中的 2- 氟苯硫酚 (190mL， 228g， 1.78mol， 4 当量 ) 加入 2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四 氢呋喃 -3， 4- 二醇 (166.5g， 0.457mol) 和从氢化钙蒸馏的三乙胺 (352mL， 256g， 2.53mol， 4 当量 ) 在脱气的无水 N， N- 二甲基甲酰胺 (1.8 升 ) 中的溶液中。在该溶液中连续鼓入氮 气的情况下室温搅拌该混合物 4 天 ( 通过 1HNMR 监测反应 )。在反应完成之后， 将用 3 升 水洗涤过的反应混合物倒入 7 升乙酸乙酯中。用乙酸乙酯 (2×500mL) 萃取水层， 并用水 (3×2 升 ) 洗涤合并的有机层， 然后将体积减至约 1.8 升， 提供白色固体的悬浮液。室温下 搅拌该悬浮液 9 小时， 滤出白色沉淀， 用二乙醚 (3×200mL) 洗涤， 高真空干燥 24 小时， 从而 获得 131g(63 ％产率 ) 的 2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟苯硫基 ) 甲基 ]- 四氢呋喃 -3， 4- 二醇， 为白色粉末 (93％纯度 )。 1
H NMR(DMSO-d6)δ1.66-2.27(m， 6H)， 3.42-3.59(m， 1H， NHCH)， 4.05-4.14(m， 2H)， 4.03-4.09(m， 1H， CH-4′ )， 4.14-4.19(m， 1H)， 4.16-4.19(m， 1H， 3′ CH)， 4.84-4.92(m， 1H， 2′ CH)， 5.97(d， J ＝ 6Hz， 1H， H-1′ )， 7.05-7.55(m， 4H， PhH)， 8.10(S， 1H， C-2H)， 8.15(s， 1H， C-8H)。
通过在 1 升乙醚 / 乙醇 (50 ∶ 1) 中搅拌过夜进一步纯化产物， 从而获得 127g 纯 的 2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟苯硫基 ) 甲基 ]- 四氢呋喃 -3， 4- 二醇。
制备 2
将实例 16 的制备 2 中的产物 (1Kg) 溶解在 N， N- 二甲基乙酰胺 (2.7 升 ) 中， 并加 入碳酸钾 (560g)。向维持在 25℃以下的该混合物中， 加入 2- 氟苯硫酚 (380g)， 并在 60 ～ 65℃下加热该混合物约 6 小时。 然后将该混合物冷却到 25 ～ 30℃， 加入乙酸乙酯 (10 升 )， 接着加入氯化钠 (260g) 的水 (4.9 升 ) 溶液， 并搅拌该混合物 15 分钟。在将该两层分离之 后， 有机相再次用氯化钠 (260g) 的水 (4.9 升 ) 溶液洗涤， 搅拌该混合物 15 分钟。分离之 后， 在大气压下浓缩有机层至体积为约 5 升， 并加入甲醇 (10 升 )。在大气压下再次浓缩混 合物至体积至约 2.8 升， 将所得溶液冷却到约 35 ～ 40℃。然后加入二氯甲烷 (5 升 )， 将混 合物维持在约 35 ～ 40℃， 持续 1 小时， 接着冷却到 0 ～ 5℃， 持续 30 分钟。滤出固体产物， 用二氯甲烷 (2.8 升 ) 洗涤， 减压干燥至恒重， 不允许温度超过 50℃， 从而提供 2-{6-[((1R，
2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟苯硫基 ) 甲基 ]- 四氢呋 喃 -3， 4- 二醇。
通过在 60 ～ 70 ℃之间将 1Kg 产物 2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌 呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟苯硫基 ) 甲基 ]- 四氢呋喃 -3， 4- 二醇溶解在甲醇 (20 升 ) 中进一步纯化该产物， 维持该温度约 1 小时， 冷却到 45 ～ 50℃， 然后通过 1 微米过滤 器过滤溶液， 将溶液温度维持在 40℃以上。将溶液温度维持在 40℃以上， 浓缩该溶液至约 7 升， 并将所得溶液维持在 50 ～ 55℃ 1 小时。然后在 2 小时内将该溶液冷却到 -5℃， 维持 该温度在 -5℃ 1 小时。 在 -5℃下滤出产物， 用滤出液洗涤固体， 从而提供纯的 2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟苯硫基 ) 甲基 ]- 四氢呋 喃 -3， 4- 二醇。
B. 式 I 化合物的制备， 其中 R 是 2- 氟笨基
类似地， 按照上面 17A( 步骤 1 或 2) 的方法， 但用 2-{6-[(2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇的其他异构体代替 2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-( 氯甲基 ) 四氢呋喃 -3， 4- 二醇， 制得下列化合物 ：
(2-{6-[((1S， 2S)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟苯 硫基 ) 甲基 ]- 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ) ；
(2-{6-[((1R， 2S)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟苯 硫基 ) 甲基 ]- 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ) ；
(2-{6-[((1S， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟苯 硫基 ) 甲基 ]- 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ) ； 和
(2-{6-[((1RS， 2RS)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 3R)-5-[(2- 氟 苯硫基 ) 甲基 ]- 四氢呋喃 -3， 4- 二醇 ) ；
C. 式 I 化合物的制备， 改变 R
类似地， 按照上面 17A( 步骤 1 或 2) 的方法， 但用式 RSH 的其他苯硫酚代替 2- 氟 苯硫酚， 制备了其他化合物。
实例 18
制备了含有下列成分的硬胶囊 ：
混合以上成分并填充进入硬胶囊中。 实例 19 使用下列成分制备片剂 ：
实例 20 制备含有以下成分的干粉吸入制剂 ： 成分 重量％ 活性成分 5 乳糖 95 混合该活性成分与乳糖并将该混合物加入干粉吸入装置。 实例 21 每个含有 30mg 活性成分的片剂制备如下 ：
将活性成分、 淀粉和纤维素通过 20# 美国筛 (No.20 mesh U.S.sieve) 并充分 混合。聚乙烯吡咯烷酮溶液与所得的粉末混合， 然后将其通过 16 目美国筛 (No.16 meshU.S.sieve)。将如此制备的颗粒在 50℃～ 60℃下干燥， 并将其通过 16 目美国筛。将先前 通过 30 目美国筛的羧甲基淀粉钠、 硬脂酸镁和滑石粉加入到颗粒中， 混合后， 在压片机上 对其进行压制从而得到每个重量为 120mg 的片剂。
实例 22
每个含有 25mg 活性成分的栓剂制备如下 ：
成分 量
活性成分 25mg
饱和脂肪酸甘油酯 2,000mg
将活性成分通过 60 目美国筛， 并将其悬浮在使用所需最低热量先前熔化的饱和 脂肪酸甘油酯中。然后将该混合物倒入额定 2.0g 容量的栓剂模具中并让其冷却。
实例 23
每个含有 50mg 活性成分 /5.0mL 剂量的悬液制备如下 ：
成分 量
活性成分 50.0mg
黄原胶 4.0mg
羧甲基纤维素钠 (11％ )
微晶纤维素 (89％ ) 50.0mg
蔗糖 1.75g
苯甲酸钠 10.0mg
香料和着色剂 q.v.
纯水至 5.0mL
混合活性成分、 蔗糖和黄原胶， 并将其通过 10 目美国筛， 然后与先前制备的微晶 纤维素和羧甲基纤维素钠的水溶液混合。用一部分水稀释苯甲酸钠、 香料和着色剂并将它 们在搅拌下加入。然后加入足够的水从而生成所需要的体积。
实例 24
皮下制剂可制备如下 ：
成分 量
活性成分 5.0mg
玉米油 1.0mL
实例 25
制备了具有下列组成的注射制剂 ：
成分 量
活性成分 2.0mg/mL
甘露醇， USP 50mg/mL
葡糖酸， USP q.s.(pH 5 ～ 6)
水 ( 蒸馏， 无菌 ) q.s. 至 1.0mL
氮气， NF q.s.
实例 26
制备了具有下列组成的局部制剂 (topical preparation) ：成分 克
活性成分 0.2-10
司盘 60(Span 60) 2.0
吐温 (tween)60 2.0
矿物油 5.0
矿脂 (petrolatum) 0.10
尼泊金甲酯 (methyl paraben) 0.15
尼泊金丙酯 (propyl paraben) 0.05
BHA( 丁基化羟基苯甲醚 ) 0.01
水 q.s. 至 100
合并除水之外的所有以上组分， 并在搅拌下加热到 60℃。然后在 60℃剧烈搅拌下 加入足量的水， 从而乳化这些成分， 然后加入 q.s. 至 100g 的水。
实例 27
缓释组合物
本发明的缓释剂型制备如下 ： 将化合物和 pH 依赖型粘合剂及任何可选的赋形剂 紧密混合 ( 干混 )。然后， 在强碱水溶液存在的情况下粒化该干混的混合物， 将强碱水溶液 被喷射到混合的粉末中。 颗粒干燥， 筛选， 与可选的润滑剂 ( 例如滑石粉或硬脂酸镁 ) 混合， 并将其压制成片剂。优选的强碱水溶液为碱金属氢氧化物溶液， 例如氢氧化钠或氢氧化钾 水溶液， 优选氢氧化钠水溶液 ( 可选地含有高达 25％的水混溶性溶剂， 如低级醇 >。
所得的片剂可以用可选的成膜剂进行包衣， 以便于鉴别、 掩味目的以及改善吞服 容易度。成膜剂的存在量典型地为片剂重量的 2％和 4％之间。适当的成膜剂在本领域是 已知的， 并包括羟丙基甲基纤维素、 阳离子甲基丙烯酸酯共聚物 ( 甲基丙烯酸二甲基氨基
乙酯 / 甲基丙烯酸甲基 - 丁酯共聚物 -E-Rohm.Pharma) 等。这些成膜剂可以可选地含有着色剂、 增塑剂和其它辅助成分。
压制的片剂优选具有足以承受 8Kp 压缩的硬度。片剂大小将主要取决于片剂中的 化合物量。片剂将包括 300 ～ 1100mg 的复合游离碱 (compound free base)。优选地， 片剂 包括的量的范围在 400-600mg、 650-850mg 和 900-1100mg 的复合游离碱。为了影响溶解速率， 对含粉末的化合物进行湿混 (wet mixed) 的时间进行控制。 优 选地， 整个粉末混合时间， 即粉末暴露于氢氧化钠溶液的时间为 1 ～ 10 分钟， 优选为 2 ～ 5 分钟。在粒化后， 将颗粒从成粒机中移出并放置在流化床干燥器中， 以在约 60℃下进行干 燥。
实例 28
通过定量 PCR 分析 RNA 表达
根据制造商的说明书， 使用 RNAeasy 试剂盒 (Qiagen， USA) 和 DNAse 处理 (Qiagen， USA)， 从细胞、 冷冻的组织或存储在 RNALater(Qiagen) 中的组织分离总 RNA。使用随机六 聚体在 50μL 反应中利用 Taqman 逆转录试剂盒 (ABI， Foster City， CA) 转录 1μg 的总 RNA。 以 1 ∶ 5 稀释 cDNA 并在 MX300xP QPCR 系统 (Stratagene) 中使用 SYBR 化学 (Applied Biosystems， CA) 实施 QPCR。使用 Beacon 设计者软件 (Premier Biosoft， CA) 和从 NCBI 序列数据库中引入的适当序列设计用于大鼠和人 ABCA-1 及大鼠和人 β- 肌动蛋白的引物。 ABCA-1 表达对 β- 肌动蛋白标准化。 使用所描述的测定， 确定处理对 ZDF(Zucker 糖尿病肥 胖 ) 大鼠的肝中 ABCA-1 基因表达的影响。在 0、 2 和 4 小时用测试的式 I 化合物处理大鼠。 结果在图 1 中给出。在图 1 实验中使用的测试的式 I 化合物是 2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟基环 戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 2R， 3R)-5-[(2- 氟苯硫基 ) 甲基 ] 四氢呋喃 -3， 4- 二醇。
实例 29
ABCA-1 蛋白表达的测量 ：
从匀浆来定量细胞 ABCA-1 蛋白在细胞或组织中的表达， 其中该匀浆是从在含 有蛋白酶抑制剂的裂解缓冲液中均匀化的组织或细胞中制备的。裂解物蛋白 (lysate protein) 通过 SDS-PAGE 分离并进行蛋白质印迹， 用于 ABCA1 和管家蛋白。用与人、 大鼠和 小鼠交叉反应的小鼠单克隆抗体检测 ABCA-1。 用适当的商品化抗体检测 β- 肌动蛋白 ( 或 其他通常使用的标准化蛋白 (normalizationprotein))。使用所描述的测定， 确定处理对 ZDF 大鼠中肝 ABCAI 蛋白表达的影响。在 0、 2 和 4 小时用测试的式 I 化合物处理大鼠。结 果示出在图 2 中。该处理随时间增大 ABCA-1 蛋白表达。使用时间点 (time-point) 载体 对照来标准化在每个时间点的 ABCA1 表达。在图 2 的实验中使用的测试的式 I 化合物是 2-{6-[((1R， 2R)-2- 羟基环戊基 ) 氨基 ] 嘌呤 -9- 基 }(4S， 5S， 2R， 3R)-5-[(2- 氟苯硫基 ) 甲基 ] 四氢呋喃 -3， 4- 二醇。
实例 30- 预期
在以下体内测定中确定了 ABCA-1 表达和 HDL 水平之间的关系。
通过腹腔内注射或通过 10％ Cremaphore(BASF)/ 盐水的灌喂， 每天向 7 周大的雄 性 C57B1/6 小鼠以预定剂量给予增大体外 ABCA-1 表达并且是药物活性的以及可在体内获 得的候选化合物。在最后注射后的 3 ～ 4 小时， 收集空腹 EDTA 血浆 (fastedEDTA-plasma) 和适当组织用于分析。通过磷钨酸沉淀 (Sigma) 分离血浆 HDL， 并使用试剂盒 (Roche Diagnostics) 酶法测定 HDL 胆固醇、 总胆固醇和三酰基甘油。使用与酶法检测的洗脱组分 中胆固醇串联连接的两个 Superose 6/30 柱， 通过 FPLC 进一步分析了 HDL 胆固醇和尺寸的 变化。通过从候选组织中分离的 RNA 的 RT-PCR 分析， 进一步证实了 ABCA-1 基因表达的体 内变化。
这个测定用于确定 ABCA-1 表达与 HDL 水平之间的关系。尽管本发明参照其具体实施方式进行了说明， 但是， 本领域的技术人员应当理解， 在不偏离本发明的真实精神和范围的情况下， 可以作出各种改变和进行等价替换。 此外， 可 以进行许多修改是以使具体情形、 材料、 物质的组合物、 工艺、 工艺步骤或多个工艺步骤适 应本发明的目的、 精神和范围。所有这样的变更都落在所附权利要求的范围内。上文引用 的所有专利和出版物都通过引用合并在此。