一种麦冬总皂苷的制备方法 【技术领域】
本发明涉及麦冬提取技术，具体地说，涉及一种麦冬总皂苷的制备方法。
背景技术
麦冬为百合科沿阶草属植物Ophiopogon japonicus(L.f.)ker-Gawl的干燥块根，是一味常用滋阴中药，《中国药典》2005版收载中药制剂中约有40多种药剂处方含有麦冬。麦冬具有养阴生津，润肺清心的功能，可用于热病伤津，心烦口渴等证。现代研究发现：麦冬含有甾体皂苷、高异黄酮、多糖、氨基酸等成分。皂苷类成分是其有效成分之一，具有改善心肌收缩力、保护心肌细胞、抗心肌缺血、抗心律失常作用，临床用于冠心病心绞痛，并取得了一定的疗效。其主要苷元是薯蓣苷元和鲁斯可苷元。
《中国药典》2005版中缺乏对麦冬皂苷类成分的提取方法的记载，而文献报道提取麦冬总皂苷方法则主要为醇提法和水提法。
《中成药》2005年第27卷第5期的论文“正交设计研究麦冬皂苷提取工艺”中，优选出60℃下，50％乙醇提取三次，每次2h的提取工艺。虽然其提取温度比较低，但是提取时间长，一共需要提取6个小时，能耗大，提取效率低。
《中草药》2002年第33卷第12期的论文“麦冬总皂苷提取工艺的研究”中，优选出了一种醇提方法，是用5~10目药材，加10倍量80％乙醇，回流提取3次，每次1h。同样显示出是提取次数多，时间长的缺点，一共需要提取3个小时。
综合上述文献，发现所用方法提取基本完全，但同时存在消耗溶剂多，提取次数多，总提取时间长的缺点，为了更能节省溶剂和能源的消耗，缩短提取的时间，有必要改进麦冬总皂苷的提取方法。
【发明内容】
本发明的目的是克服现有技术存在的不足，提供一种提取效率高，消耗溶剂少的麦冬总皂苷的制备方法。
为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
一种麦冬总皂苷的制备方法，包括如下步骤：将麦冬药材粉碎成粗粉，置于超声提取器中，用水或醇溶液作为溶剂，麦冬药材与溶剂的重量体积比为1∶5~1∶40(相当于1kg药材加5~40L的溶剂)，在超声频率为20~150kHz，温度为20~80℃下，提取时间20~200min后出料，滤过，清液浓缩，经正丁醇萃取制备后得稠膏干燥，即得麦冬总皂苷。
在上述麦冬总皂苷的制备方法中，所述醇溶液优选为甲醇或乙醇溶液。
在上述麦冬总皂苷的制备方法中，所述乙醇溶液体积浓度优选为75％~85％。
在上述麦冬总皂苷的制备方法中，所用麦冬药材粗粉粒度优选为10~40目。由于麦冬干燥药材比较坚硬，而超声提取时间短，温度低，所以有必要对药材进行粉碎，增加药材与溶剂接触的面积，提高总皂苷的提取率。但是粉碎过细又会造成过筛、过滤等操作的困难，同时会使杂质增多，加大后续纯化工作的难度。所以本发明中药材粒度选择10~40目。
在上述麦冬总皂苷的制备方法中，麦冬药材与溶剂的重量体积比优选为1∶15~1∶20。
在上述麦冬总皂苷的制备方法中，超声频率优选为26~40kHz。
在上述麦冬总皂苷的制备方法中，温度优选为50~70℃。
在上述麦冬总皂苷的制备方法中，提取时间优选为90~120min。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
1.本发明在提取过程中，利用超声波的空化效应、机械效应及热效应等增强溶剂对药材的穿透力，有助于药材中有效成分的溶出，从而提高有效成分的提取率，相应缩短提取时间，降低提取温度，降低能耗，提高提取效率。
2.本发明的制备工艺中溶剂用量少，既节约溶剂又节约能源，降低生产成本。
由于麦冬在《中国药典》2005版中缺乏含量测定项，所以参考文献报道，麦冬皂苷主要苷元是薯蓣苷元和鲁斯可苷元，并结合实验验证，确定麦冬总皂苷的质量指标以薯蓣皂苷元为对照品，采用的测定方法为分光光度法。具体方法为：取2g药材的提取液，浓缩至干，10ml水溶解，用水饱和正丁醇萃取4次，洗涤萃取液，合并正丁醇液，浓缩至干，用甲醇定容至10ml。取甲醇液0.5ml，水浴挥干，加高氯酸10ml，65℃水浴15min，冰水冷却终止反应，制得样品液。以高氯酸(分析纯)为空白，在409nm下测定吸光度。
本发明所说的麦冬总皂苷得率＝(总皂苷重量/投入的药材重量)×100％
麦冬总皂苷提取率＝(麦冬总皂苷提取物中的总皂苷含量×总皂苷重量/投入的麦冬药材总皂苷含量×投入的药材重量)×100％
下面通过具体实施例进一步阐述本发明的技术方案。
【具体实施方式】
以下实施例所用的麦冬总皂苷含量为3.06‰。
如下乙醇百分比均为体积百分比。
实施例1提取工艺条件的选择
(1)超声时间对麦冬总皂苷提取效果的影响
实验方法：取500g粉碎过10~20目的麦冬药材粉末，置于超声提取器中，加入80％乙醇作为提取溶剂，药材与溶剂的重量体积比为1∶10，超声频率40kHz，提取温度70℃，选择不同的超声时间提取一次，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓缩，正丁醇萃取制备后得稠膏，干燥，即得麦冬提取物。考察不同提取时间下麦冬总皂苷的提取效果。结果如表1所示：
表1
时间 提取率(％)
20min 64.1
40min 70.9
60min 77.5
90min 83.7
120min 83.0
实验结果显示延长超声时间能增加总皂苷的提取率，90min时含量就已经达到最高。所以选取90min作为最佳提取时间。
(2)提取温度对麦冬总皂苷提取效果的影响
实验方法：取500g粉碎过10~20目的麦冬药材粉末，置于超声提取器中，加入80％乙醇作为提取溶剂，药材与溶剂的重量体积比为1∶10，超声频率40kHz，超声温度60min，选择不同的提取温度提取一次，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓缩，正丁醇萃取制备后得稠膏，干燥，即得麦冬提取物。考察不同提取时间下麦冬总皂苷地提取效果。结果如表2所示：
表2
温度 提取率(％)
30℃ 68.3
40℃ 70.3
50℃ 70.9
60℃ 74.5
70℃ 77.5
实验结果显示，随着提取温度的升高，麦冬总皂苷的提取率也不断提高，综合考虑成本，故选取70℃作为最佳超声提取温度。
(3)提取溶剂对麦冬总皂苷提取效果的影响
实验方法：取500g粉碎过10~20目的麦冬药材粉末，置于超声提取器中，选择加入不同的溶剂作为提取溶剂，药材与溶剂的重量体积比为1∶10，超声频率40kHz，超声温度60min，提取温度70℃下提取一次，超声提取后的提取液经过抽滤和离心，清液进行浓缩，正丁醇萃取制备后得稠膏，干燥，即得麦冬提取物。考察不同提取时间下麦冬总皂苷的提取效果。结果如表3所示：
表3
溶剂 提取率(％)
水 52.7
50％乙醇 63.4
60％乙醇 70.9
70％乙醇 76.5
80％乙醇 77.5
90％乙醇 69.6
甲醇 76.5
实验结果显示，选择70％乙醇、80％乙醇和甲醇作为提取溶剂都具有较好的提取效果。但甲醇毒性较大，不利于工业化生产，而70％乙醇提取出杂质相对较多，过滤比较困难，所以综合生产成本等因素，选取80％乙醇作为提取溶剂。
(4)提取溶剂体积对麦冬总皂苷提取效果的影响
实验方法：取500g粉碎过10~20目的麦冬药材粉末，置于超声提取器中，加入80％乙醇作为提取溶剂，超声频率40kHz，超声温度90min，提取温度70℃，选取不同的药材与溶剂的重量体积比，提取一次，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓缩，正丁醇萃取制备后得稠膏，干燥，即得麦冬提取物。考察不同提取时间下麦冬总皂苷的提取效果。结果如表4所示：
表4
溶剂 提取率(％)
10倍 83.7
20倍 91.8
实验结果显示，使用药材与溶剂的重量体积比1∶20的时候，提取率能得到较大的提高。因此选取1∶20作为最佳药材与溶剂的重量体积比。
(5)药材目数对麦冬总皂苷提取效果的影响
实验方法：取500g粉碎经过不同目筛的麦冬药材粉末，置于超声提取器中，加入80％乙醇作为提取溶剂，超声频率40kHz，超声温度90min，提取温度70℃，药材与溶剂的重量体积比为1∶20，提取一次，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓缩，正丁醇萃取制备后得稠膏，干燥，即得麦冬提取物。考察不同提取时间下麦冬总皂苷的提取效果。结果如表5所示：
表5
目数 提取率(％)
10目 91.6
40目 99.3
实验结果显示，利用经过40目筛的药材粉末进行超声提取比10目粉末的提取率更高，而超过40目则过筛困难，不利于工业化生产，所以选定40目作为最佳粉碎目数。
最后，归纳超声法提取最佳提取工艺为：取粉碎过40目筛的麦冬药材粉末，置于超声提取器中，乙醇浓度为80％，药材与溶剂的重量体积比为1∶20，超声频率40kHz，提取温度70℃，提取时间90min，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓缩，正丁醇萃取制备后得稠膏，干燥，得到麦冬总皂苷。
实施例2
取500g粉碎过40目筛的麦冬药材粉末，置于超声提取器中，乙醇浓度为80％，药材与溶剂的重量体积比为1∶20，超声频率40kHz，提取温度70℃，提取时间90min，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓缩，正丁醇萃取制备后得稠膏，干燥，即得麦冬总皂苷。结果：干膏得率为2.0％，含量15.0％，提取率99.3％。
实施例3
同实施例2所示，不同的是：实施例2中药材与溶剂的重量体积比为1∶20，而实施例3中药材与溶剂的重量体积比为1∶10。结果：干膏得率为1.8％，含量15.4％，提取率91.8％。
实施例4
同实施例3所示，不同的是：实施例3中药材粉碎过40目筛，而实施例4中药材粉碎过10目筛。结果：干膏得率为1.8％，含量14.6％，提取率83.7％。
实施例5
同实施例4所示，不同的是：实施例4中乙醇浓度为80％，提取时间为90min，而实施例5中乙醇浓度为70％，提取时间为60min。结果：干膏得率为1.9％，含量12.6％，提取率76.5％。
实施例6
同实施例4所示，不同的是：实施例4中提取时间为90min，而实施例6中提取时间为40min。结果：干膏得率为1.7％，含量12.6％，提取率70.3％。
实施例7
取500g粉碎过10目筛的麦冬药材，置于超声提取器中，乙醇浓度为85％，药材与溶剂的重量体积比为1∶12，超声频率40kHz，提取温度30℃，提取时间30min，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓缩，正丁醇萃取制备后得稠膏，干燥，即得麦冬总皂苷。结果：干膏得率为1.1％，含量17.9％，提取率63.3％。
实施例8
同实施例3所示，不同的是：实施例3使用超声提取一次，实施例8使用水浴热回流提取3次，每次60min。结果：干膏得率为2.1％，含量14.4％。
由以上实施例可知，超声提取麦冬药材，其最优条件为：粉碎过40目筛的麦冬药材，置于超声提取器中，乙醇浓度为75~85％，药材与溶剂的重量体积比为1∶15~1∶20，超声频率26~40kHz，提取温度50~70℃，提取时间90~120min，超声提取后的提取液经过抽滤或离心，清液进行浓缩，正丁醇萃取制备后得稠膏，干燥，即得麦冬总皂苷。而常规回流提取则需要在较高提取温度下长时间和多次数地进行提取，才能达到超声一次提取的效果。因此，超声提取具有减少提取溶剂用量，降低提取温度，缩短提取时间，快速高效地提取麦冬总皂苷的特点。