蛋壳蛋清进行花粉破壁的方法.pdf

花粉，以其营养成份全面而享有“食物营养之王”的美称，既是极好的药源，又能用于化妆品中。因此，花粉的用途，已越来越引起国内外专家的高度重视。花粉有着初生、中生和次生三层坚硬的壁，破壁方法的好坏，会直接影响花粉的利用。目前，国内外所采用的花粉破壁方法多种多样。已知技术，日本专利曾公开的发酵破壁法和蜂粮酶介破壁法，破壁率高，能杀菌，但操作复杂，时间长;西德专利和瑞士专利曾公开的变温湿法破壁以及我国辽宁、江苏报导的变温干法破壁，操作简单，但破壁率只达90%左右，某些营养成份易破坏，且需低温设施，工艺要求较高;广西采用混合溶剂法，破壁率高，工艺简单，但未解决杀菌脱敏。湖南省临湘县蜂产品研究所公开了一种用蜂粮处理花粉的方法，将花粉与酿制25～30小时的蜂粮拌匀，加30℃以下“南刺五加”蜂蜜催化液，拌匀后，平铺发酵盘中，35℃左右培养36～48小时。此法虽然简便易行，但不能很好地保证破壁率及杀菌脱敏。
    本发明的目的在于提供一种既能完全破壁，又能杀菌脱敏的简易可行的花粉破壁方法，本发明的特征在于从蛋壳蛋清中提取引发子液，进行花粉破壁和杀菌脱敏，再通过加入蒜素液，保鲜贮存，花粉破壁全过程只需二小时左右，破壁效果好，破壁率达100%。

    本发明的目的是这样实现的：将去蛋黄后的蛋壳蛋清，和予热至30°～50℃的（0.08～0.19）MNaCl-（0.01～0.07）MHCl溶液按1∶0.5～1∶4的比例混合，捣碎、用1NNaOH或2NHCl调节PH4～7，30°～50℃下水浴抽提5～60分钟，间歇搅动。然后用10～20目尼龙布过滤，收集滤液。固体物再分别按上述比例加入（0.08～0.19）MNaCl-（0.01～0.07）MHCl溶液重复抽提二次，合并三次的滤液。用10～30%的HAC，调滤液PH3.5～6.5，置沸水浴中升温至60°～80℃，全过程持续2～5分钟，立即冷却，再以3000转/分离心10～40分钟，所得上清液即为蛋壳蛋清引发子液。破壁时，先将花粉与（0.08～0.19）MNaCl-（0.01～0.07）MHCl溶液按1∶1～1∶3的比例润湿1～3小时，再按花粉与蛋壳蛋清引发子液为1∶1～1∶5的比例立即加入蛋壳蛋清引发子液，20°～40℃让其作用1～4小时，每隔5分钟搅动一次，即可使花粉完全破壁。破壁后地花粉以2500转/分离心或过滤，可得破壁花粉液。按破壁液体积的5～15%加入蒜素液，能防止霉变，保存期4个月。蒜素液的制备采用发芽处理二天的蒜，与（0.07～0.01）MNaCl溶液按1∶1的比例混合，研磨匀浆，过滤或3000转/分离心15分钟，取上清液即可。

    本发明所用化学试剂为市售分析纯级品，蛋壳蛋清来自市售新鲜蛋或冷冻贮藏蛋。

    附图一为未破壁的花粉粒电子显微照片（1500X）。

    附图二为用本发明破壁后的花粉粒电子显微照片（1200X）。

    以下通过实施例进一步说明本发明。

    实施例1：

    将0.08MNaCl～0.05MHCl溶液125毫升，在恒温水浴锅中予热至40℃后，称取鸡蛋壳蛋清50克与其混合，捣碎，用2NHCl调PH6，40℃下水浴抽提10分钟，间歇搅动，然后用15目尼龙布过滤，收集滤液。固体物再分别加50毫升和25毫升40℃的0.08MNaCl～0.05MHCl溶液，按此法重复抽提二次，合并三次的滤液。用20%的HAC调滤液PH至4·6，置沸水浴中保温至75℃，持续时间3·5分钟，立即用流水冷却，以3000转/分离心20分钟，收集上清液，即为蛋壳蛋清引发子液。

    称取花粉5克，加入0.08MNaCl～0.05MHCl溶液10毫升，润湿1小时，立即加蛋壳蛋清引发子液5毫升，30℃恒温箱中作用2小时，每5分钟搅动一次。取样在显微镜下以16×10、16×40放大倍数观察破壁情况，花粉破壁率达100%。经有关部门检验，杀菌脱敏均达到标准。检验结果符合规定。按花粉破壁液体积的10%的比例加入蒜素液，4个月后未发现霉变。

    实施例2：

    具体操作步骤同实施例1。实验条件有所改变。0.12MNaCl～0.6MHCl溶液予热至35℃，100毫升加鹌鹑蛋壳蛋清50克，35℃水浴抽提20分钟，调PH5.5。滤液用10%HAC调PH5，沸水浴升温至60℃，持续4.5分钟，离心时间为15分钟。按花粉破壁液体积的5%的比例加入蒜素液花粉破壁率达100%，杀菌脱敏均达到实施例1的标准。

    实施例3：

    具体操作步骤同实施例1。实验条件有所改变。0.04MNaCl～0.01MHCl溶液予热至45℃，150毫升加蛇蛋壳蛋清50克，45℃水浴抽提8分钟，调PH6.5，滤液用25%的HAC调PH5.5，沸水浴升温至80℃，持续时间为2.5分钟，离心时间为30分钟。按花粉破壁液体积的15%的比例加入蒜素，花粉破壁率达100%，杀菌脱敏均达到实施例1的标准。

    以下是本发明破壁花粉液检验结果。

    1）杀菌情况的检验：

    细菌总数    大肠杆菌菌落    葡萄球菌、沙门氏菌、

    （个/毫升）    （个/升）    志贺氏菌

    处理前1＃    4100    9    未检出

    2＃    4000    9    ″

    处理后3＃    2700    9    ″

    4＃    2300    4    ″

    原粉5＃    3400    25    ″

    2）毒性检验：单位：ppm

    样品名称

    未破壁液    破壁液    花粉

    检验项目

    铅    未检出    未检出    未检出

    砷    ＜0.2    ＜0.2    0.3

    六六六    0.0035    0.0049    0.039

    DDT    0.0015    0.0001    0.712

    有机磷    未检出    未检出    阳性