益生菌（婴儿）食品.pdf

本发明涉及食品，如婴儿和儿童食品和用于婴儿和儿童的食品添加物。本发明提供一种包含脂质来源、碳水化合物来源和蛋白质来源的组合物，其特征在于组合物还包含保藏号为ATCC 27536的乳双歧杆菌(B.lactis)菌株和保藏号为ATCC 55544的类干酪乳杆菌(L.casei)菌株。所述组合物促进一般抗性，特别针对不希望有的病原体的传代和呼吸性疾病在儿童中的发病率。

1、  一种组合物，优选地婴儿食品，包含脂质来源，碳水化合物来源和含有最大为3000道尔顿的肽的低-变应原的酪蛋白水解产物，其特征在于所述组合物还包含保藏号为ATCC 27536的乳双歧杆菌(B.lactis)菌株和保藏号为ATCC 55544的类干酪乳杆菌(L.casei)菌株。

2、  如权利要求1所述的组合物，其中酪蛋白水解产物是一种非变应原的低脂肪深度水解酪蛋白水解产物。

3、  一种组合物，包含脂质来源、碳水化合物来源和蛋白质来源，其特征在于所述组合物还包含保藏号为ATCC 27536的乳双歧杆菌菌株和保藏号为ATCC55544的类干酪乳杆菌菌株，其中所述组合物不是权利要求1或2所述的组合物。

4、  如权利要求3所述的组合物，其中蛋白质来源选自由乳蛋白、脱脂乳、酪蛋白、脱盐或未脱盐乳清、乳清蛋白、富含α-乳白蛋白的(乳清)蛋白、乳铁蛋白和部分水解的乳蛋白、植物蛋白以及它们的水解产物组成的组。

5、  根据权利要求1-4中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含10³-10⁹，优选最少10⁶-10⁷个菌落形成单位/细菌菌株/克干燥产品。

6、  根据权利要求1-5中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含耐受性-诱导乳蛋白或乳蛋白水解产物。

7、  根据权利要求6所述的组合物，其中所述乳蛋白(水解产物)为乳清蛋白(水解产物)，优选低-乳脂α-乳白蛋白水解产物。

8、  根据权利要求1-7中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含有助于氨处理的添加组分，优选精氨酸。

9、  根据权利要求1-8中任一项所述的组合物，其中所述脂质来源涉及一种或多种选自甘油三酯、甘油二酯和甘油单酯、磷脂和鞘脂类、脂肪酸、以及它们的酯或盐的组分。

10、  根据权利要求1-9中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含至少一种多不饱和脂肪酸，优选地选自γ亚麻酸(GLA)，二聚γ亚麻酸(DHGLA)，花生四烯酸(AA)，十八碳四烯酸(SA)，二十碳五烯酸(EPA)，二十二碳六烯酸(DHA)，二十二碳五烯酸(DPA)和共轭亚油酸(CLA)，更优选至少DHA和AA。

11、  根据权利要求1-10中任一项所述的组合物，其包括益生元，优选选自短链或长链果糖-寡糖和/或半乳糖-寡糖、菊粉、含岩藻糖寡糖、β聚糖、角豆粉、树胶、果胶、唾液酸寡糖、唾液酸乳糖、短链或长链半乳聚糖和核苷酸。

12、  根据权利要求1-11中任一项所述的组合物，包括至少一种乳双歧杆菌菌株和一种或多种用于该菌株的益生元的组合，所述益生元优选地选自核苷酸、唾液酸寡糖、果糖寡糖(FOS)、葡萄糖寡糖(GOS)和唾液酸乳糖。

13、  根据权利要求1-12中任一项所述的组合物，其中所述组合物包含以最终组合物为基础，最大为0.1wt.％，优选最大为0.05wt.％，更优选最大为0.01wt.％的含植烷酸的脂肪。

14、  权利要求1或2，和从属于权利要求1或2的权利要求5-13所述组合物作为治疗或预防反刍动物乳蛋白质变态反应相关症状的食品或治疗组合物的用途。

15、  权利要求13所述的组合物用于制备食品或治疗组合物的用途，所述组合物用于患有植烷酸代谢疾病的婴儿或儿童，优选地用于患有雷弗素姆病的儿童。

16、  用权利要求1-13中任一项所述的组合物作为治疗或预防儿童呼吸性疾病的食品或治疗组合物的用途。

17、  保藏号为ATCC 27536的乳双歧杆菌菌株与保藏号为ATCC 55544的类干酪乳杆菌菌株联合制备预防或治疗组合物的用途，所述组合物用于预防或治疗胃肠道、气道、窦腔、耳朵或耳腔、眼睛、泌尿系统、生殖器内部和外表面、人皮肤的普通传染性疾病，尤其是婴儿和儿童的呼吸性疾病。

18、  权利要求14-17任一项所述的用途，其中所述食品或组合物意欲长期使用，优选至少3-6个月时间。

19、  保藏号为ATCC 27536的乳双歧杆菌菌株和保藏号为ATCC 55544的类干酪乳杆菌菌株的混合物。

20、  如权利要求19所述的混合物，其中所述菌株相对比率为3∶1-1∶3之间，优选2∶1-1∶2，更优选约1∶1，以菌落形成单位表示。

21、  如权利要求19或20所述的混合物，还包含可食载体物质，优选粉末状载体物质。

22、  权利要求19-21中任一项所述的混合物作为食品添加物的用途。

益生菌(婴儿)食品
本发明涉及食品组合物，如婴儿食品和适用于儿童的食品添加物。尤其是，本发明涉及的配方可长期使用，适合于对反刍动物乳成分过敏(如具有牛乳变态反应的婴儿和儿童)或具有增加的发展所述敏感性危险的婴儿或儿童。本发明还涉及对一般抗性有积极贡献的配方，尤其是针对婴儿和儿童中的呼吸道感染。
在荷兰，用牛乳喂养的婴儿中2-3％发展成对牛乳蛋白的变态反应。牛乳变态反应产生的根本原因是遗传和环境的综合因素。来自有变态反应性疾病如哮喘、异位性湿疹、枯草热和/或食物变态反应发生的家族的儿童具有发展成牛乳变态反应的较高危险。通常，婴儿在出生后对食物蛋白形成耐受力。人们发现在有牛乳变态反应的婴儿中还没有形成良好的建立机制。
除遗传之外，其他因素也扮演了重要的角色。因此，在婴儿时期蛋白质的消化能力还没有达到最佳。这是由胃中相对低水平的蛋白质裂解酶和相对高pH引起的。此外，肠通常还增加渗透性，以致蛋白质分子能够通过肠壁并于再吸收后被认为是异质的。这些因素说明牛乳变态反应在婴儿时期相对广泛流行。
此外，人们发现在免疫系统的发育和成熟过程中，由微生物引起的刺激在生命的第一年中具有重要的作用。在无变态反应儿童的粪便中含有比变态反应儿童更多的双歧杆菌(bifidobacteria)和较少的梭菌(clostridia)。值得注意的是，肠菌群方面的变化在变态反应症状发展之前，这就暗示肠菌群的组成可能影响变态反应发展(的风险)。
在儿童中，牛乳变态反应的症状一般显现在皮肤、胃肠道以及呼吸道。这些症状都没有明确的针对或特异于牛乳变态反应，这就导致了诊断困难。在幼年儿童中的最大共同症状是腹泻、食物问题(如饮用困难)、呕吐、急腹痛、湿疹、荨麻疹、呼吸困难、咳嗽或在进食后喘气。
有阳性家族病史的婴儿推荐进行预防：这些是其父母、兄弟或姐妹证实患有牛乳变态反应的婴儿。到目前为止，对有阳性家族病史的儿童而言，建议饮食以部分或大量乳蛋白水解产物为基础；抗原性的蛋白表位已经被部分破坏(部分水解产物)或实际上完全由酶处理(彻底水解产物)。
已知的牛乳蛋白水解产物是乳清蛋白和酪蛋白水解产物。对于用于对反刍动物乳脂肪过敏的儿童，例如婴儿雷弗素姆病(IRD)患者，优选使用的是包含低乳脂含量起始原料的乳蛋白，如酪蛋白或酪蛋白酸盐。
深度水解(extensively hydrolyzed)乳蛋白产品，还被认为是第一代产品，主要包含分子量小于1500道尔顿的肽。人们发现，其有利于变应原性的极大降低。以大量酪蛋白水解产物为基础的食物证实对反刍动物蛋白质敏感的儿童有良好作用。例如，关于所述低变应原性产品的安全性，申请人公开了基于对牛乳变态反应儿童的双盲研究法，(已知的商标名为Frisolac(Terheggen-Lagro等.BMC Pediatrics(BMC儿科)(2002)，2：10)。
尽管产品对目标群而言是安全的，但它仍然有许多缺点，特别是其需要长期使用如至少使用几个月才能显效。因而，血液里存在较高浓度的尿素，是氨基酸代谢超负荷的一种迹象。与脂肪酸和葡萄糖形成对比的是，氨基酸不能贮存。氨基酸也不能被分泌。在蛋白质(氨基酸)的新陈代谢中，二氧化碳和氨被释放。尿素循环从氨和二氧化碳中产生尿素，并且允许过量氮以无毒且易溶解的形式通过尿以尿素的形式排泄。
此外，大量的水解产物没有或只有非常低的诱导(口腔的)乳蛋白耐受性的能力(参见JP-03-181681；EP 629350；Schmidt等，Intestinal Immunology and FoodAllergy(肠免疫学和食品变态反应)，34th NestléNutrition Workshop(营养研讨会)，24-28页)。口腔耐受性的发展可能与所谓的肠壁紧密连接以延迟方式闭合和/或未及时闭合，以及相关的肠壁对变应原的渗透性相关。
尤其对于儿童，并且对于少年、成年人和老年人(男性和女性)来说重要的是通过健康的饮食增强一般抗性。特别是关于病原体穿过肠壁的风险，和关于对发生的胃肠道症状和呼吸性疾病，以及各种感染，如眼睛感染、皮肤感染、耳朵感染和/或耳朵炎症，以及皮肤、内和/或外生殖器和泌尿系统感染的增加抗性更是如此。
微生物穿过肠壁传播不仅意味着在血液中感染，也被称为脓毒症，而且通过肠壁传播后，感染可能引发脑膜炎，或体液中其他种类的感染。
胃肠道感染包含肠胃炎，其特征为胃、肠粘膜感染和/或炎症，急性和慢性腹泻。急性腹泻的特征为突然出现背离一般的排便模式，即排便频率以及粪便数量增加且粪便比平常包含更多水分，对个人而言最长持续时间达14天。慢性腹泻具有急性腹泻的症状，而且通常持续时间比14天更长。要理解胃肠症状还意味着腹痛、绞痛和特殊的疾病诸如例如幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)感染。
呼吸性疾病包括涉及由(尤其是)细菌或病毒(尤其是普通感冒和流行性感冒病毒)感染或它们联合引起的小气道炎症(支气管炎)的感染。要理解这还意味着：由A、B或C型流感(病毒)引起的流行性感冒：传染性病毒引起的传染性疾病，其常常以流行病的形式出现。其他的实例有由于各种微生物引起的严重的肺组织炎症，以及局限性肺炎，通常用于形容轻度肺炎阶段的术语。这些炎症往往能由急性，高烧，胸腔、侧面和/或背部疼痛，冷颤，呼吸苦难，呕痰，由于缺氧导致的白色-带青色的皮肤又称发绀，以及鼻孔呼吸鉴定出。尤其后者发生在儿童中。要理解呼吸性疾病还指气管的疾病或感染，又称气管炎。还包括由于气管通道的收缩导致呼吸变得更加困难，和感染、梗阻、和过量难以排出的肺部粘液可能引发(非常严重的)呼吸困难。此外，这还包括普通感冒，其实际上是一种头部的鼻腔和咽和/或鼻旁窦(上颌窦和窦腔)的粘膜炎症，特别是由小核糖核酸病毒所引起的，以及与CNSLD(慢性非特异性肺病)相关的疾病如哮喘、慢性支气管炎和肺气肿。哮喘的特点在于周期性发生呼吸困难时期，伴随着艰难的呼气且往往在幼年时期就已经显现。慢性支气管炎是一种出现有规律咳嗽和/或呕出粘液并伴随着肺气肿、肺泡组织弹性降低症状的疾病。由于工业造成的大气污染的结果，并且由于气管频繁的感染以及主动/被动的吸烟，尤其是后者疾病会在较晚的时期显现。实际上，上述表明：身体上或身体内的所有部位可发生天然存在的无害微生物区系的不平衡。这种不平衡可能以天然存在的微生物区系变化的结果发生或作为从身体外部受到感染的结果发生。这通常涉及疾病，为了变得健康或免于感染或再次不平衡，机体需要免疫学上的抗性。气道疾病还被理解为指鼻窦炎。这是一种鼻旁窦炎症，包括窦腔、上颌窦、蝶窦和眼睛中间的筛状细胞。在上文中所描述的气道、胃肠道、皮肤、眼睛、内和/或外生殖器、泌尿系统和耳朵的感染可能是由细菌的、病毒的、寄生虫的或真菌起源的致病微生物所引起的。
本发明预计提供一种食品，尤其是儿童食品，其不会出现上述一种或多种缺点。本发明目的尤其在于提供一种最适食品，其适于对反刍动物乳蛋白过敏的儿童长期使用，或该最优食品适合于具有增加的发展该敏感性危险的婴儿和儿童预防性长期使用。此外，该食品优选适用于对反刍动物乳脂过敏的婴儿和儿童，如患有IRD的儿童。更具体地说，本发明的目的在于加强婴儿、儿童、少年、成年人和老年人的一般抗性。尤其是，本发明的目的在于通过食物的方式，降低在上文中所描述的呼吸性疾病和其他感染的危险，尤其针对婴儿和儿童，还有少年、成年人以及老年人。
申请人发现在食品中添加益生菌特定组合至少部分地消除上述缺陷，且长期食用该食品能够提高所述结果。
因此本发明提供一种适合作为儿童食品或(治疗的)食品添加物的食品组合物，其包含脂质来源、碳水化合物来源和含有最高3000道尔顿肽的低-变应原的酪蛋白水解产物，其特征在于该组合物还包含保藏号为ATCC 27536的乳双歧杆菌(B.lactis)菌株和保藏号为ATCC 55544的类干酪乳杆菌(L.easel)菌株。所述酪蛋白水解产物，例如是一种非变应原性的低脂的深度水解的酪蛋白水解产物。
本发明人意外地发现在婴儿营养品中，这些乳双歧杆菌和类干酪乳杆菌菌株独特的组合对儿童一般抗性、免疫体质和呼吸性疾病的发病率具有有利的影响。实际上，这种发病率可能达到70％或甚至更高。更特别地是，据观察，服用包含上述益生菌组合的食品组合物(配方)的儿童与食用同样配方但不含益生菌的儿童相比，气道感染的发病率减少。
因此，本发明还提供一种食品组合物，该组合物包含脂质来源、碳水化合物来源和蛋白质源，同时其还包含保藏号为ATCC 27536的乳双歧杆菌菌株和保藏号为ATCC 55544的类干酪乳杆菌菌株，条件是所述蛋白质来源为含有最高3000道尔顿的肽的无，低变应原性酪蛋白水解产物。其是例如这样的儿童食品，其本身已知以(部分水解的)乳牛的乳蛋白为基础，如酪蛋白、乳清蛋白或它们的混合物，并且以植物蛋白如来自谷类和豆类的蛋白质为基础，所述儿童食品至少补充有上述涉及的益生菌特定组合。
因此，本发明提供一种低变应原的食品和一种标准化食品。所述的食品组合物适于预防和治疗使用。
保藏号为ATCC 55544的类干酪乳杆菌类干酪亚种菌株(L.paracasei strain ssp.Paracasei)也是已知的，其制造商为Chr.Hansen，商品号为CRL 431。
已经发现，双歧杆菌适于减少氨负荷，特别是动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalis，ssp.Lactis)，保藏号为ATCC 27536(乳双歧杆菌27536)。后者由Chr.Hansen制造，商品号为BB12。体外分析表明BB12菌株显示内皮细胞生长因子B在树突细胞中表达增加。本发明人认为该菌株对改善或修复肠壁的屏障功能是有利的。
对婴儿施用12个月的ATCC 55544和ATCC 27536的组合，导致特异性T-细胞亚型，即CD3⁺和CD3⁺CD4⁺群体的改变。
并不希望受限于任何理论，本发明人认为，在儿童中观察到的对不希望受到的感染的抵抗力增强是由益生菌菌株类干酪乳杆菌CRL431和乳双歧杆菌BB-12在胃肠道、粘膜屏障和气道中水平的联合效应导致的。
除能减少身体氨负荷的益生菌菌株外，该组合物还可包含其他组分，其能促进过量氨如氨基酸精氨酸的处理，从而在尿素循环中具有重要作用。
本发明组合物中益生菌的量可以变化，并且可取决于预计使用的益生菌种类和/或该组合物所需性质。优选地，该组合物包含至少10³，优选10³-10⁹，如10⁶-10⁷菌落形成单位(cfu)/克产乳酸益生菌菌株。该组合物包含，如10⁶-10⁸个菌落形成单位的类干酪乳杆菌(L.paracasei)ATCC-55544和10⁶-10⁸个菌落形成单位的乳双歧杆菌ATCC-27536/克。上述菌株之间的相对比率，如10∶1-1∶10，优选5∶1-1∶5，如2∶1-1∶2。每株菌株的量大约相等的混合物获得好的效果。
根据本发明所述的组合物优选地包含至少一种组分，其对存在于该组合物中的一种或多种益生菌具有益生元作用。适宜益生元的实例有短链或长链果糖-寡糖和/或半乳糖-寡糖、菊粉、含岩藻糖的寡糖、β聚糖、角豆粉、树胶、果胶、唾液酸寡糖、唾液酸乳糖、短链或长链半乳聚糖和核苷酸。
令人惊讶地是，本发明所述组合物中的低-变应原的蛋白质水解产物还被发现能够刺激肠道中产乳酸益生菌菌株的生长。因此，该水解产物具有营养和益生元的作用。
由于口服摄入包含上述益生菌的组合物和来自低变应原蛋白质水解产物的肽的益生元效果，在具有牛乳蛋白变态反应的儿童肠菌群中的不平衡可以至少部分被修复。
低-变应原的酪蛋白水解产物优选为低-脂的。其优选主要包含具有低于1500道尔顿分子量的肽。尤其合适的是包含至少约80mol％最多3个氨基酸的肽和/或不包含长度超过6个氨基酸的肽的水解产物。分子量小于0.5道尔顿的肽的含量是，如40-60％，而游离氨基酸由于它们的苦味，比例优选尽可能低的。尤其适合的是具有如Terheggen-Lagro等.(BMC Pediatrics(BMC儿科)(2002))，2：10)中所述肽长度分布的水解产物。
考虑到紧密连接的最佳闭合和/或预防不希望的肠的渗透性(从而患变态反应的风险增加)，此外，可以添加一种或多种非必需氨基酸以提供对此的额外支持。为此，凭借申请人在WO01/58283，NL-1025900和NL-1027262中所述，尤其适合的有谷氨酰胺、谷氨酸、精氨酸和脯氨酸。这里，谷氨酸优于谷氨酰胺，因为谷氨酰胺典型地降低产品的稳定性，而且在肠的酶催化水解之后，还有助于不希望有的氨负载。
按上文规定的，深度水解的酪蛋白水解产物中不存在变应原性的肽，不再包含或几乎没有任何耐受性-诱导肽。为了全部或部分地“修复”耐受性-诱导性质，根据本发明所述组合物，除益生菌之外，还包含耐受性-诱导乳蛋白，如以乳蛋白或乳清蛋白水解产物的形式存在。当生物负载有抗原性的表位时，耐受性诱导典型地在诱导和维持平衡的免疫系统中显示。这例如，用T-细胞平衡表示，如T-辅助细胞的相对量(Th1、Th2和Th3细胞)。
优选地，耐受性-诱导乳蛋白为低-乳脂部分水解的乳清蛋白水解产物。尤其是，乳清蛋白水解产物富含或来自α-乳白蛋白-丰富的乳清蛋白。适宜的乳清蛋白水解产物具有如可以在约5-25％之间变化的水解(DH)度。这还导致该组合物的氨基酸模式变得更类似于人乳。
作为碳水化合物来源，可以使用通常用于儿童食品配方的任何种类的碳水化合物，或不同碳水化合物的混合物。适宜的碳水化合物来源有二糖如乳糖和蔗糖、单糖如葡萄糖、以及麦芽糖糊精、淀粉和具有益生元效果的碳水化合物来源。
根据本发明所述的组合物中的脂质来源可以是适用于儿童食品的任何种类的脂质或脂质的联合。适宜的脂质来源的实例是甘油三酯、甘油二酯和甘油单酯、磷脂、鞘脂类、脂肪酸，以及它们的酯或盐。脂质可以具有动物、植物、微生物来源或合成来源。特别是多不饱和脂肪酸如γ亚麻酸(GLA)、二聚γ亚麻酸(DHGLA)、花生四烯酸(AA)、十八碳四烯酸(SA)、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)、二十二碳五烯酸(DPA)和共轭亚油酸(CLA)。CLA对抵抗儿童中的湿疹和呼吸性疾病有重要保护作用。尤其包括CLA的顺式-9、反式-11和顺式-12异构体。AA可能被添加于用于最适耐受性诱导的组合物中。
此外，该组合物可以包含一种或多种常用的微量元素，如维生素、抗氧化剂、矿物质、游离氨基酸、核苷酸、氨基乙磺酸、肉碱和多胺。适宜的抗氧化剂如BHT、抗坏血酸棕榈酸酯、生育酚、α和β胡萝卜素、叶黄素、玉米黄素、番茄红素和磷脂。
在一个实施方案中，该组合物涉及一种适合于婴儿的食品或食品添加物。在一个特定形式中，其涉及一种针对最大6个月婴儿的完全婴儿食品。另一种特定形式涉及一种适合于6个月以上婴儿的(改进型)婴儿食品。该组合物蛋白质含量典型地少于3.5克/100千卡。在另一个的具体情形中，其涉及一种适合1-3岁年龄组儿童的成长乳。在另外一个特定的情形中，其涉及一种适合于3-6岁年龄组儿童的成长乳。在另一个特定情形中，其涉及一种适合于3-10岁年龄组儿童的膳食乳(dietary milk)和/或产品，或适合于10-20岁年龄组少年，适合于20-65岁成年人或65-110岁老年人的膳食乳和/或产品。
如上文所述，本发明尤其预期提供一种低变应原的组合物，从长期来看，适于对反刍动物乳脂敏感的儿童。例如，对于患有IRD的儿童，对其长期使用该乳脂导致脂肪组织特别是神经组织中的植烷酸的累积。
乳脂中的植烷酸是来自叶绿素的具有支链的C20脂肪酸，其由食草或食用经提取的粗饲料的反刍动物吸收。由于发生在过氧化物酶体中的植烷酸的降解障碍，比如由于一种或多种酶缺乏或无活性和/或缺乏或缺少过氧化物酶体，植烷酸在体内堆积。
这个问题特别在患有雷弗素姆病，一种过氧化物酶体代谢疾病的患者中是已知。在雷弗素姆病的婴儿型(又名“植烷酸蓄积病”(PASD))中，由于缺乏过氧化物酶体导致血液和组织中不同的脂肪酸堆积。最初的症状在出生时就存在。这些症状为智力下降、容貌略微异常、耳聋、骨质疏松症和生长缓慢。视网膜的损害引发夜盲症和视力日益下降(色素性视网膜炎)。肝脏增大、血液中胆固醇含量提升(高胆固醇血症)。对于婴儿型的雷弗素姆病，没有治愈的可能。雷弗素姆病的治疗由严格遵循不含植烷酸的饮食组成，其目的在于尽可能减轻症状。
在一个具体实施方案中，本发明提供一种组合物，其适合作为患有植烷酸代谢病如婴儿型雷弗素姆病的儿童的食品或有疗效的食品添加物。所述“IRD组合物”包含低-植烷酸脂质来源、碳水化合物来源和具有最高为3000道尔顿的肽的非-变应原的酪蛋白水解产物，其特征在于该组合物包含至少一种摄入身体后会诱发对乳蛋白耐受性的产乳酸益生菌菌株和/或包含至少一种可减少氨负荷的产乳酸益生菌菌株。优选地，该脂质来源为不含植烷酸。该组合物包含如最多0.1wt.％，优选至多0.05wt.％，更优选至多0.01wt.％的含植烷酸的(牛乳)脂肪。
已经显示，雷弗素姆病患者除植烷酸累积外，在他们的循环中还含有低含量的二十二碳六烯酸(DHA)和花生四烯酸(AA)(Moser等，Neurochem.Res.(神经化学研究)1999，187-197)。因此，推荐通过食品补充DHA和AA，尤其是在儿童中。为此，IRD组合物优选包含DHA和/或AA，更优选包含DHA和AA两者。由于DHA和AA对氧化作用敏感，这些长链多不饱和脂肪酸优选与抗氧化剂联合使用于根据本发明所述组合物中。
本发明还提供一种如本发明所述的食品或治疗组合物的用途，其用于治疗或预防与对反刍动物乳蛋白质的变态反应有关的症状。所制备的食品或组合物尤其适合长期使用，优选至少几个月时间。
与对反刍动物乳蛋白的变态反应有关的症状各种各样，尤其包括肠壁紧密连接闭合延缓、肠菌群失调和/或血液尿素水平提升。
由于本发明组合物的增加的营养价值，故其能够有利地用于改善儿童的生长，特别适合作为用于具有对反刍动物乳蛋白变态反应儿童的(长期)治疗剂或作为用于发展所述变态反应风险增加的儿童的(长期)预防剂。
此外，由于使用该组合物，具有变态反应(风险)儿童的缓解百分比可能提高。缓解百分比意思指：随长期使用消除的变态反应，表示为被监测的“问题儿童”的百分比。作为该参数的参考点，实际上认为，大多数母乳喂养的婴儿最终消除变态反应，第一年约为50％，第二年约70％，第三年约85％。使用本发明所述的组合物，第一年后的缓解百分比可以至少提高5％，优选地至少10％。
本发明所述的非变应原组合物可对氨负荷、肠壁闭合、病原体吸附肠壁的预防和/或肠菌群修复具有良好的作用，因此，其尤其适用于有变态反应家族病史的儿童，即发展对乳蛋白变态反应的风险增加的儿童长期预防使用。
本发明的另一方面提供保藏号为ATCC 27536的乳双歧杆菌菌株和保藏号为ATCC 55544的类干酪乳杆菌菌株的组合用于制备组合物的用途，所述组合物用于预防或治疗儿童中呼吸性疾病、胃肠感染或症状、以及眼睛和/或耳朵感染、皮肤感染、内和/或外生殖器感染以及泌尿系统感染，尤其是直到12个月大的儿童，如1-6个月，还有1-10岁的儿童、10-20岁的少年、20-65岁的成年人和65-110岁的老年人。本发明还提供一种用于治疗疾病的方法，包括施用含有有效量适合于治疗感染如呼吸性疾病的预防或治疗组合物的组合物。
本发明还提供一种保藏号为ATCC 27536的乳双歧杆菌菌株和保藏号为ATCC 55544的类干酪乳杆菌菌株的混合物。这些菌株的相对比例，如在10∶1-1∶10之间，优选3∶1-1∶3，如2∶1-1∶2，更优选约1∶1，以菌落形成单位表示。任选地，该混合物包括其他的(益生菌)微生物。该混合物还可以包含可食载体物质，优选地粉末状载体物质如麦芽糖糊精。由上述可知，本发明的益生菌混合物可以有利地用作食品添加物。在一个具体实施方案中，本发明提供一种包含保藏号为ATCC 27536的乳双歧杆菌菌株和保藏号为ATCC 55544的类干酪乳杆菌菌株的食品添加物，其相对比例约为1∶1，用粉末状载体物质稀释。食品添加物如用于制备食品，随着正常摄入该产品，摄取的这些菌株总量在10³-10¹⁰cfu之间。这可以用来预防和治疗人体内部和人体上的感染。
本发明基于以下实施例举例说明。
实施例：
实施例1通过深度水解的酪蛋白水解产物刺激产乳酸益生菌的生长
从适合生长的基本培养基开始，研究非变应原深度水解的酪蛋白水解产物是否对合适的产乳酸益生菌的生长有促进作用。基本培养基每升包含：
35g的乳糖，25g的醋酸钠，954mg的咪唑，100mg的L-天冬酰胺，200mg的L-胱氨酸，200mg的DL-色氨酸，10mg的尿嘧啶，10mg的鸟嘌呤，10mg腺嘌呤，10mg黄嘌呤，200mg丙氨酸，10mg氯化钠，200mg核黄素，200mg盐酸硫胺，10微克叶酸，600微克烟酸，1.2mg吡多胺.2HCl，200微克泛酸钙，10mg对氨基苯甲酸，5微克生物素，21g L-氨基酸Sigma LAA21，10ml盐溶液。
该酪蛋白水解产物是BMC Pediatrics(儿科)2002(2)10公开的分子量和肽长度分布图的类型。
对于优选菌株类干酪乳杆菌ATCC-55544和乳双歧杆菌ATCC-27536，确定了从上述酪蛋白水解产物起始，对生长明显的益生元作用。
实施例2 适合于遭受变态反应或发展变态反应风险增强的婴儿和儿童的食品或治疗剂的基本处方
以深度水解酪蛋白、葡萄糖浆、麦芽糖糊精、植物油、精氨酸和微量成分为基础制备食品，此外所述食品富含益生菌类干酪乳杆菌ATCC-55544和乳双歧杆菌ATCC-27536。
酪蛋白水解产物中肽最大分子量为2.5kDa。根据实施例1的试验，该酪蛋白水解产物刺激两种益生菌的生长。
该食品包含两种益生菌的2×10⁷菌落形成单位/克粉末。
粉末状益生菌水解产物食品的组成为每一百克粉末(单位都为克)：
酪蛋白水解产物        12
脂肪(植物)            27
葡萄糖浆+麦芽糖糊精   55.7
L-精氨酸              0.3
微量成分              2
流体                  3
实施例3婴儿试验结果
用实施例2食品进行对比试验，在有和没有添加益生菌的情况下，用于患有变态反应的婴儿，结果显示益生菌对一般抗性、免疫状况和呼吸性疾病有良好的效果。
该试验包括119位研究开始时为1.4-6个月(平均4.2个月)龄的婴儿：55％为男性。
该组被随机分成益生菌组和安慰剂组。在12个月期间，安慰剂组喂养已知的婴儿食品Friso 1 Allergy Care(变态反应护理)(Friesland Nutrition(弗里斯兰营养))。该益生菌组喂养补充有类干酪乳杆菌CRL431和乳双歧杆菌Bb-12(10⁷cfu/株/克配方)的Friso 1 Allergy Care(变态反应护理)。
12个月之后，观察CD3⁺淋巴细胞的明显变化，判定益生菌组是有利的。在安慰剂组中，在6个月的时期内，相比益生菌组发展了更多的呼吸性疾病。
富含两种培养物的食品被有利地推荐且用于有变态反应家族病史儿童的预防没有任何特别的风险。
实施例4 低变应原的基本配方
制备100克适用于IRD儿童或婴儿的水解产物食品，包含类干酪乳杆菌ATCC-55544+乳双歧杆菌ATCC-27536，以及下列组分(均为克)：
 酪蛋白水解产物                    12
植物+动物+微生物+合成脂质         27
(包含0.04％AA+0.02％DHA+0.3％CLA)
牛乳脂肪                          0
葡萄糖浆+麦芽糖糊精               55.7
精氨酸                            0.3
微量成分                          2
流体                              3
蛋白质当量％(计算的；Nx6.25)      11.7
牛乳脂肪％(计算的)                ＜0.06
实施例5以乳蛋白为基础的预防性婴儿食品或营养品
制备按表1所示标准配方(Ffiso 1)。该配方包含非-水解乳蛋白，其中酪蛋白与乳清蛋白的重量比为40∶60，此外，还包含来源于乳脂之外来源的脂肪、碳水化合物、益生元纤维(GOS)、维生素、矿物质和核苷酸。益生菌混合物按照实施例3制备。该益生菌按表2规定的浓度添加到Friso 1中
表1：Friso 1组成(每100ml)



表2：益生菌的量以每克粉末形式配方中菌落形成单位(cfu)表示添加于Friso1中。

实施例6：食品添加物
制备类干酪乳杆菌类干酪亚种(Lactobacillus paracasei subspecies paracaseiCRL431(约1×10¹³CFU/g)和动物双歧杆菌乳亚种(Bifidobacterium animalissubspecies lactis)BB12(约1×10¹³CFU/g)(来自CHR Hansen，Copenhagen，丹麦)为1∶1比率的混合物。接着益生菌混合物以麦芽糖糊精作为载体物质或载体被稀释(如1∶4但取决于其使用)。因此产生的益生菌食品添加物可以加入用于人或动物的食品中，特别地，加入用于0-6，6-12个月婴儿，1-3，3-6和1-10岁儿童，10-20岁少年，20-65岁成年人，65-110岁老人年龄组的人，用于男性和女性的食品中。
实施例7：益生菌混合物对抵抗感染的效果
除母乳喂养作为参照组外，从出生起，包括两组健康的儿童，一组获得常规起始食品Friso 1(对比处方)，另一组则为Friso 1+益生菌。Friso 1婴儿食品的组成如表1所述。添加到Friso 1中的益生菌(类干酪乳杆菌类干酪亚种CRL431和动物双歧杆菌乳亚种BB 12)的浓度如表2所规定。该内含物为随机化的且用双盲法介入。从婴儿出生后1周起观察6个月。在介入期间，收集儿童的antropometric信息，调查粪便的微生物菌群组成，以及在儿童中使用的抗生素。此外，调查儿童中发现感染的性质、等级和严重程度。
已经发现，类干酪乳杆菌类干酪亚种CRL431和动物双歧杆菌乳亚种BB 12的益生菌混合物使用安全，并观察到其对感染有积极作用。