《一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法.pdf（7页珍藏版）》请在专利查询网上搜索。
1、10申请公布号CN104041457A43申请公布日20140917CN104041457A21申请号201410319444122申请日20140707A01K67/0220060171申请人中国水产科学研究院长江水产研究所地址430223湖北省武汉市东湖新技术开发区武大园一路8号72发明人邵俭危起伟吴金明孙庆亮74专利代理机构武汉宇晨专利事务所42001代理人王敏锋54发明名称一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法57摘要本发明公开了一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法，步骤是A、筛选成熟、活力强的秦岭细鳞鲑作为亲本；B、亲本强化培育；C、人工催产选择3月底至4月中旬，采用两针注射进行催产；D、人工采精卵注射催。
2、产药物后的亲本分养在催产池，在催产池一端架设进水管，选秦岭细鳞鲑亲鱼采用腹部节律挤压进行活体采精卵；E、人工授精采到卵后，用鱼用生理盐水漂洗，将雄鱼的精液挤于卵上，后用羽毛搅拌，进行人工授精；F、人工孵化将受精卵用纯净水清洗，倒入底部有多空篦子的孵化槽中孵化，待鱼苗冲游出现后，移出孵化设备，转至鱼盆培育。方法易行，操作简便，其受精率和孵化率高，所得子代鱼体健壮、匀称，成活率和饵料利用率高，生长速度快。51INTCL权利要求书1页说明书5页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书5页10申请公布号CN104041457ACN104041457A1/1页21一种秦岭细鳞。
3、鲑人工繁殖方法，其步骤是A、筛选成熟、活力强的秦岭细鳞鲑作为亲本，筛选体重02504KG，34龄的秦岭细鳞鲑作为亲本；B、亲本培育A）按雌雄比例为123，放养量为58尾/M3，投喂黄粉虫或夜间悬挂黑光灯，自2月底开始，加大水流量00501M3/S；B）自3月初开始，每日监测水温，水温达到67，开始减食，后每隔35天进行聚维酮碘水体消毒不停水，在进水口进行泼洒，使用浓度为35MG/L，催产前57天停食，并停止水体消毒，水温接近繁殖温度时，雌雄亲鱼进行分池培育；C、人工催产选择3月底至4月中旬，采用两针注射进行催产，第一针对亲本注射催产药物DOM与LHRHA2的混合物，每1000G秦岭细鳞鲑雌鱼剂。
4、量为DOM24MGLHRHA2710G，秦岭细鳞鲑雄鱼注射剂量减半，2448H注射第二针，每1000G秦岭细鳞鲑雌鱼注射剂量为DOM12MGLHRHA235G维生素B124G，秦岭细鳞鲑雄鱼注射剂量减半或不注射；D、人工采精卵注射催产药物后的亲本分养在催产池，在催产池一端架设进水管，离水面高度0510M，水流量控制在01015M3/S，周围用15M进行圈围，选秦岭细鳞鲑亲鱼采用腹部节律挤压进行活体采精卵，雌雄亲本比例为113；E、人工授精采到卵后，用鱼用生理盐水漂洗23次，将雄鱼的精液挤于卵上，后用羽毛搅拌23分钟，进行人工授精；F、人工孵化将受精卵用纯净水进行23次清洗，每次为30秒，倒入孵。
5、化槽中孵化，所述的孵化密度为8万/M3，采用下端进水，水流以鱼卵不粘黏为度，每日早晚在进水口倒入粗盐23KG，待鱼苗冲游出现后，移出孵化设备，转至鱼盆或网箱进行苗种培育；所述的步骤B中A步骤培育池设计为河渠状水泥池，形成落差，池底铺设砾石和石块，进水口端设置喷水管或扬水设施，进水口下方水深加大，形成人工深潭，每个渠道体积为1620M3，水深为0508M,排水方便，池水水质透明度为0507M,溶氧高于8MG/L；所述的步骤C中催产时水温达到812时，进行人工催产。2根据权利要求1所述的一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法，其特征在于所述的步骤C采用两针注射，DOM与LHRHA2的混合剂，每尾亲本注射量小于。
6、或等于2ML混合剂量，第一针对亲本注射催产药物DOM与LHRHA2的混合剂，每1000G秦岭细鳞鲑雌鱼剂量为DOM3MGLHRHA289G，2448H注射第二针，每1000G秦岭细鳞鲑雌鱼注射剂量为DOM15MGLHRHA24G维生素B124G。3根据权利要求1所述的一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法，其特征在于所述的步骤D中催产池平均水深05M，架设进水管管口高度离水面05M，周围用细网进行圈围。4根据权利要求1所述的一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法，其特征在于所述的步骤F水温为89时，孵化出膜时间为450480H。5根据权利要求1所述的一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法，其特征在于所述的步骤F水温为1012时，。
7、孵化出膜时间为408445H。权利要求书CN104041457A1/5页3一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法技术领域0001本发明属于濒危野生动物种质资源保护技术领域，具体为一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法。其方法适用于秦岭细鳞鲑自然种群恢复及人工保种方面。背景技术0002秦岭细鳞鲑（BRACHYMYSTAXLENOKTSINLINGENSIS）俗称花鱼、五色鱼、梅花鱼，隶属鲑形目（SALONIFORMES）、鲑科（SALMONIDAE）为我国特有种、局部分布的陆封型冷水性鱼类。秦岭细鳞鲑分布范围极为狭窄，栖息水域条件严格，天然种群稀少，仅分布于秦岭太白山峯东麓的黑河，北麓的石头河、南麓的湑水河和太白河，陇。
8、县的千河支流及甘肃渭河上游及支流（陕西省动物所等，1987）。由于自然和人为因素的双重影响，秦岭细鳞鲑栖息与生存环境日趋恶化，种质资源受到严重破坏，已被列入国家二级野生保护动物（乐珮琦和陈宜瑜，1998），对秦岭细鳞鲑的保护已经刻不容缓。随着人工繁殖、苗种培育及各种养殖方式的日趋成熟，加之我国加大对濒危物种保护重视，采用人工繁殖技术保护秦岭细鳞鲑资源成为最行之有效的手段。但由于秦岭细鳞鲑个体小型化严重，性成熟资源量锐减，生境条件苛刻，加之秦岭细鳞鲑性急躁、喜跳善游，体表黏液少，体被细鳞，体内鱼骨相对细小，应激性强等特点，其亲本容易擦伤起病致死（施德亮等，2012）。另外，秦岭细鳞鲑为肉食性冷水。
9、鱼类，雌鱼绝对怀卵量小；在自然环境中受精率、孵化率和成活率低，且生长速度慢、生长周期长、人工驯养较难；性成熟一般需要34年，500G鱼生长周期一般在45年，这增加秦岭细鳞鲑种质资源恢复的难度。近年来，通过多年实践探索，研究出一种成熟、高效的秦岭细鳞鲑亲鱼培育和人工催产技术，提高了受精率、孵化率和苗种成活率。发明内容0003鉴于上述问题，本发明的目的是在于提供了一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法，方法易行，操作简便，亲鱼具有稳定的产卵量和排精量，其受精率和孵化率高，所得子代鱼体健壮、匀称，成活率和饵料利用率高，具有较强的环境耐受性和抗病力，生长速度快。0004为了实现上述的目的，本发明采用以下技术措施一。
10、种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法，其步骤是1）筛选成熟、活力强的秦岭细鳞鲑作为亲本，2）亲本强化培育A）按雌雄比例为123，放养量为58尾/M3，投喂黄粉虫或夜间悬挂黑光灯，自2月底开始，加大水流量（00501M3/S），促进秦岭细鳞鲑亲鱼的性腺发育。0005B）自3月初（28日）开始，每日监测水温，水温达到67，开始减食，后每隔35天进行聚维酮碘水体消毒（不停水，在进水口进行泼洒，使用浓度为35MG/L），催产前57天停食，并停止水体消毒。水温接近繁殖温度（89）时，雌雄亲鱼进行分池培育。00063）人工催产说明书CN104041457A2/5页4选择3月底（2831日）至4月中旬（1317日），采。
11、用两针注射进行催产，第一针对亲本注射催产药物DOM与LHRHA2的混合物，每1000G秦岭细鳞鲑雌鱼剂量为DOM24MGLHRHA2710G，秦岭细鳞鲑雄鱼注射剂量减半。2448H注射第二针，每1000G秦岭细鳞鲑雌鱼注射剂量为DOM12MGLHRHA235G维生素B124G，秦岭细鳞鲑雄鱼注射剂量减半或者不注射。00074）人工采精卵注射催产药物后的亲本分养在催产池，在催产池一端架设进水管，离水面高度0510M，水流量控制在01015M3/S，周围用15M进行圈围，防止亲鱼跳出催产池，待效应期后，选秦岭细鳞鲑亲鱼采用腹部节律挤压进行活体采精卵，雌雄亲本比例为113。00085）人工授精采到卵。
12、后，用鱼用生理盐水漂洗23次，迅速将雄鱼的精液挤于卵上，后用羽毛轻轻搅拌23分钟，进行人工授精。00096）人工孵化将受精卵用纯净水进行多次（23次）清洗，每次为30秒，缓慢倒入底部有多空篦子的孵化槽中孵化。所述的孵化密度为8万/M3，采用下端进水，水流以鱼卵不粘黏为度，每日早晚在进水口倒入粗盐（NACL含量90）23KG，待鱼苗冲游出现后，移出孵化设备，转至鱼盆或网箱进行苗种培育。0010所述的步骤1中筛选体重02504KG，34龄以上性成熟的秦岭细鳞鲑作为亲本。0011所述的步骤2中A步骤中培育池设计为河渠状水泥池，形成落差，池底铺设砾石和石块，进水口端设置喷水管或扬水设施（单相潜水电泵Q。
13、D632/311，口径40MM），进水口下方水深加大，形成人工深潭（1215M），每个渠道体积约为1620M3，平均水深为0508M,排水方便，池水水质透明度为0507M,溶氧高于8MG/L。0012所述的步骤3中催产时水温达到812时，进行人工催产。0013所述的步骤3采用两针注射，DOM与LHRHA2的混合剂，每尾亲本注射量小于或等于2ML混合剂量，第一针对亲本注射催产药物DOM与LHRHA2的混合剂，每1000G秦岭细鳞鲑雌鱼剂量为DOM3MGLHRHA289G，2448H注射第二针，每1000G秦岭细鳞鲑雌鱼注射剂量为DOM15MGLHRHA24G维生素B124G。0014所述的步骤4。
14、中催产池平均水深05M，架设进水管管口高度离水面05M，周围用细网进行圈围，防止鱼体跳出和擦伤。0015所述的步骤5人工采卵后先用鱼用生理盐水漂洗，后迅速将精液挤在卵上用羽毛搅拌。0016所述的步骤6人工授精后，迅速用纯净水淘洗23次，每次为30秒，缓慢倒入底部有多空篦子的孵化槽中孵化，孵化密度为8万/M3，采用下端进水，水流以鱼卵不粘黏为度。0017所述的步骤6每日早晚在进水口倒入粗盐23KG进行水体过滤消毒。0018所述的步骤6水温为89时，孵化出膜时间为450480H。0019所述的步骤6水温为1012时，孵化出膜时间为408445H。0020本发明与现有技术相比，具有以下优点和效果说明。
15、书CN104041457A3/5页5上述一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法，通过人工调控环境因子，使雌雄鱼性腺发育基本同步，保证人工催产顺利进行，方法简单，可操作性强，实践应用性好，其受精率高于9000，孵化率高于8300，成活率高于9000，和其余鲑鳟冷水鱼类繁殖一样，完全适用于苗种的规模化生产，从而用于秦岭细鳞鲑物种资源保护及其自然种群恢复。具体实施方式0021以下结合具体的实施方式，对本发明进一步说明。0022实施例1一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法，其步骤是1亲本选择筛选体重在02504KG成熟、活力强的秦岭细鳞鲑作为亲本。00232亲本强化培育自然条件下，秦岭细鳞鲑生活习性特殊，栖息地条件苛刻，且。
16、其雄鱼性腺发育早于雌鱼。因此，为了促使亲本对人工设施适应，并保证雌雄鱼性腺发育同步，顺利进行人工繁殖，需要对亲本进行仿生态模拟强化培育，并人工调控雌雄亲本的性腺发育。0024A秦岭细鳞鲑亲鱼的强化培育建设仿生态模拟配培育池，培育池设计为河渠状水泥池，形成落差，池底铺设砾石和石块，进水口端设置喷水管或扬水设施，进水口下方水深加大，形成人工深潭（1215M），每个渠道体积约为16或17或18或19或20M3，平均水深为05或06或07或08M，排水方便，池水水质透明度为05或06或07M，溶氧高于8MG/L，放养量为20或25或35或40尾/M3，雌雄比例为12，黄粉虫为亲鱼饵料投喂，同时伴乳酸恩。
17、诺沙星1G/KG饵料，一周内连续投喂3天，每隔一周使用。自2月底，加大水流量进行流水刺激，促进秦岭细鳞鲑亲鱼的性腺发育；B从3月中旬抽用井水进行人工调控，减少极温差值（812），维持日均温稳定（1011），促进秦岭细鳞鲑雌雄亲鱼性腺发育同步；每隔3或4或5天进行聚维酮碘水体消毒，催产前5或6或7天停止投喂，并停止水体消毒。水温接近繁殖温度（89）时雌雄亲鱼分池培育，以避免亲鱼个别自产。00253人工催产（1）雌雄鉴别与配比秦岭细鳞鲑雌鱼在生殖季节胸鳍、腹鳍手摸硬度增加，体色为青褐色，体侧伴有橙红色带状条纹，生殖孔突起呈棕红色；而雄鱼在生殖季节胸鳍、腹鳍手摸较为柔软，体色为黑褐色，体侧伴有绛红色。
18、条纹，生殖孔锥形明显呈红褐色。0026（2）成熟亲鱼的选择秦岭细鳞鲑雌鱼腹部均为膨大，柔软、弹性强，触摸腹壁有丰满和松软感，即为性腺发育良好。秦岭细鳞鲑雄鱼轻压腹部两侧有乳白色黏稠状的精液流出且遇水立即散开。0027（3）注射催产剂与剂量注射方法一般采用胸腔注射，部分为胸鳍基部或腹鳍基部，采用两次注射，药物为马来酸地欧酮（DOM）和促黄体素释放激素A2（LHRHA2）的混合物，第二针剂量减半，添加维生素B12混合；雄鱼剂量均减半使用。0028（4）人工催产的药物使用说明书CN104041457A4/5页6选择3月下旬至4月中旬，分别对两种亲本注射催产药物DOM（马来酸地欧酮，宁波，三生药业有限。
19、公司）与LHRHA2（促黄体素释放激素A2,宁波，三生药业有限公司）的混合物，每1000G秦岭细鳞鲑亲鱼的剂量DOM3MGLHRHA289G混合剂；24或28或32或36或40或44或48H注射第二针，每1000G秦岭细鳞鲑亲鱼注射剂量为DOM15MGLHRHA24G维生素B124G混合剂，以上雄鱼剂量减半。效应时间与水温相关，水温8或9，秦岭细鳞鲑雌鱼效应时间为48或55或62或70或82或88H，雄鱼效应时间为36或39或44或46或48H；水温10或11或12，秦岭细鳞鲑雌鱼效应时间为24或27或29或32或34或36H，雄鱼效应为12或15或18或21或24H，因此雌鱼要早于12H注射。
20、催产药物，不同温度下秦岭细鳞鲑雌鱼的催产效应时间表，见表1。0029表1不同温度下秦岭细鳞鲑雌雄亲鱼的催产效应时间4人工采精卵授精注射催产药物后的亲本分养在催产池中，强流水刺激，亲鱼发情时，极喜跳跃、乱窜，雌雄有时跳跃水面达1M，逆水冲游很明显。此时，筛选秦岭细鳞鲑亲本，按雌雄比例为112采卵授精。00305人工孵化秦岭细鳞鲑的受精卵为半黏性卵，先用鱼用生理盐水2或3次进行脱洗去黏后，采用干法授精，将精液挤于卵，搅动2或3分钟，充分授精，授精在昏暗光线下进行，再放入微流水的孵化槽中孵化，孵化密度为8万/M3水体。受精卵呈橙黄色，若按受精卵发育到神经胚期为受精成功标准，其受精卵为98；若按受精卵。
21、发育到器官形成后期，其受精率为90。水温8或9，若按90受精卵孵化出膜为标准，约经450或460或470或480H孵化出膜；水温10或11或12，若按90受精卵孵化出膜为标准，约经408或415或422或431或438或441或445H孵化出膜。鱼苗孵化9天后，开始出现口裂，当体色加深50鱼苗出现冲游后，进行鸡蛋黄和丰年虫开口；90鱼苗出现冲游行为后，移出孵化设备，移至仔鱼培育网箱进行仔稚鱼培育。0031上述一种秦岭细鳞鲑人工繁殖方法，还具有具有以下优点1具有稳定的产卵量一般情况下秦岭细鳞鲑性腺发育雄鱼较雌鱼早，个体间差异显著，性腺发育不同步，雌鱼绝对怀卵量低，且受精率、孵化率和成活率都较低，。
22、规模化育种困难。本发明根据秦岭细鳞鲑的生物学特性，结合各种人工调控手段，进行人工催产繁殖，其受精率达90，孵化率达8333,鱼种孵化出膜后成活达929，与其它鲑鳟冷水鱼类繁殖一样，完全适用于苗种的规模化生产，从而用于秦岭细鳞鲑物种资源保护及其自然种群恢复。00322具有较强的可操作性本发明通过人工调控技术，使雄鱼的性腺发育基本同步，能保证人工鱼种的顺利进行，其方法相对简单便捷，可操作性强。说明书CN104041457A5/5页700333获得的子代具有的优势相对明显1）孵化鱼苗鱼体健壮、匀称，成活率高，饵料利用率高；2）环境耐受性强，在洪水期和水温变化较大时期具有很好的耐受力，在自然环境中具有良好的适应性。3）鱼苗抗病能力较强，易于人工驯化，经8个月的精心饲养，体长可达910CM，可进行人工放流，有利于种质资源的重建和恢复。说明书CN104041457A。