一种水产用微生态复合菌制剂及其制备方法 【技术领域】
本发明属于水产领域，涉及一种改善水质、促进水产品生长、防病的水产用微生态复合菌制剂及其制备方法。
背景技术
随着人们生活水平提高，食品安全意识的提高，以及加入WHO后对动物源产品的要求愈来愈规范，在生产和使用渔药时，必不可少地需要考虑该渔药是否符合食品安全的要求，否则不能生产或使用，这是与过去的渔药生产与使用最大的区别之所在。过去只考虑药物对鱼类的治疗效果，而不顾及对环境、药残对人类的影响；过去普遍使用的渔药，如孔雀石绿能有效地杀灭水霉等，但因有“三致”(致癌、致畸、致突变)作用被列入了禁用药之列。随着技术的进步及认识的深化，在充分论证的基础上，还会禁用某些影响食品安全的药物。
随着人工养殖规模的不断扩大，养殖环境日趋恶化，疾病的暴发日渐频繁，极大地抑制了水产养殖产量的增长和水产贸易的发展。抗生素作为饲料添加剂已用多年，在抑制病原微生物的繁殖，减少代谢毒素对动物的毒害作用等方面均起到了积极作用。但由于抗生素得长期使用和滥用，其种种弊端逐渐显露出来。如导致动物胃肠道正常菌群失调、对动物机体免疫力产生不良影响、产生耐药性和药物残留等副作用，给养殖业和消费者的人类健康带来了潜在危害。因此开发安全、优质、营养的无公害绿色水产品已成为当今社会的共识；而且，微生态制剂是符合可持续发展，也是实现绿色产业，促进水产养殖业发展的安全有效途径。微生态制剂通过刺激机体的免疫系统，调节机体内微生态平衡，拮抗致病微生物，降解养殖过程中有机废物等来达到提高免疫力、抗病、促生长和净化水质等作用，该产品的问世弥补了国内厌氧菌、需氧菌有机配合的空白。
通过检索，发现了一篇专利文献：(CN101406489)微生态复合菌剂及微生态复合菌剂的制备方法，它解决现有的微生态制剂只能够在短时间内、暂时性的增加和补充人体肠道内益生菌的数量，竞争力差、生存能力差，往往停止服用一段时间后益生菌便消磨殆尽的问题。微生态复合菌剂主要由纳豆芽孢杆菌、乳酸克鲁维酵母菌、嗜酸乳杆菌和大豆低聚糖组成；制备方法为培养；扩大培养；转入高菌浓度培养液继续培养、离心；加入辅料，预冻、真空冷冻干燥，之后加入大豆低聚糖，即得到微生态复合菌剂。该发明微生态复合菌剂中有益菌活菌总数为1.0×1010～9.9×1010个/克，不仅单位数量巨大且2年后活菌存活率仍高于98％。微生态复合菌剂，其特征在于微生态复合菌剂主要由纳豆芽孢杆菌、乳酸克鲁维酵母菌、嗜酸乳杆菌和大豆低聚糖组成；每克微生态复合菌剂中纳豆芽孢杆菌、乳酸克鲁维酵母菌和嗜酸乳杆菌的活菌总数为1.0？010～9.9？010个，纳豆芽孢杆菌、乳酸克鲁维酵母菌与嗜酸乳杆菌的菌落数比为1～3∶1～3∶1～3；微生态复合菌剂中大豆低聚糖的质量占微生态复合菌剂总质量的10％～30％。
通过对比，申请人认为该专利申请文件的技术内容与本专利申请有较大差异。
【发明内容】
本发明目的是克服现有技术的不足之处，提供一种活菌含量高、保质期长、具有良好的微生态调节、增强免疫力和促生长作用的水产用微生态复合菌制剂及其制备方法。
本发明实现目的的技术方案是：
一种水产用微生态复合菌制剂，其成分包括乳酸菌、硝化细菌、枯草芽孢杆菌。
而且，还包括琼脂、碳源、氯化钠或氮源之一或两者以上混合物。
而且，所述乳酸菌浓度为107-109个/ml、硝化细菌浓度为107-109个/ml、枯草芽孢杆菌浓度为107-109个/ml。
一种水产用微生态复合菌制剂的制备方法，制备的步骤是：
(1)分别称取配方量的氯化钠、氮源、琼脂、碳源并依次溶解到纯化水中；
(2)取含枯草芽孢杆菌、乳酸菌、硝化细菌的菌液混合后投入到上述溶液中，在3637℃恒温培养24-48小时，乳酸菌、硝化细菌、枯草芽孢杆菌检测浓度达到107-109个/ml时停止培养，即得到微生态复合菌制剂；
(3)将上述得到的微生态复合菌制剂灌装、贴签、最后包装成品。
而且，所述配方量的氯化钠、氮源、琼脂、碳源的质量比为氯化钠∶氮源∶琼脂∶碳源＝3-6∶1-4∶300∶2-4。
本发明的优点和有益效果为：
1、本发明含三种高质量的有效菌，其菌种是严格按微生态学规律选种、育种，保证菌种的优良，活菌含量高，保质期长达24个月，具有良好的微生态调节和增强免疫力、促生长作用，且质量稳定，安全，可靠，绿色、环保、无污染。
2、本发明克服国内市面上同类产品中的活菌含量低、保质期短、作用范围单一、生产成本高等不足，是专门改善水质、增加免疫力及防止水产类病害发生的理想复合菌制剂。
【具体实施方式】
下面通过具体实施例对本实用新型作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本实用新型的保护范围。
实施例1：
一种水产用微生态复合菌制剂，其原料构成及其重量(或浓度)是：
浓度为枯草芽孢杆菌1×103个/ml、乳酸菌1×104个/ml、硝化细菌1×106个/ml各50ml，琼脂：30g，纯化水：850ml，碳源：葡萄糖0.3g，氯化钠：0.5g，氮源：酵母浸出粉：0.3g。
一种水产用微生态复合菌制剂的制备方法，步骤是：
(1)按重量分别称取氯化钠0.5g；酵母浸出粉0.3g，琼脂30g，葡萄糖0.3g，依次溶解到850ml纯化水中；
(2)取检测浓度分别为枯草芽孢杆菌1×103个/ml、乳酸菌1×104个/ml、硝化细菌1×106个/ml各50ml混合投入到上述溶液中，在36-37℃恒温培养24-48小时，乳酸菌检测浓度达到3×108个/ml、硝化细菌检测浓度达到6×108个/ml、枯草芽孢杆菌检测浓度达到1×108个/ml时停止培养，即得到微生态复合菌制剂；
(3)将上述得到微生态复合菌制剂灌装、贴签、最后包装成品。
实施例2：
一种水产用微生态复合菌制剂，其原料构成及其重量(或浓度)是：
浓度为乳酸菌3×103个/ml、乳酸菌1×104个/ml、硝化细菌2×106个/ml各50ml，琼脂：30g、纯化水：850ml，碳源：葡萄糖0.3g，氯化钠：0.5g，氮源：牛肉浸出粉：0.2g。
本实施例制备方法的步骤同实施例1。
本发明各种菌的作用是：
乳酸菌：该菌在生长过程中可以产生一些抑菌物质，如有机酸等，细菌素及类细菌素可以抑制肠道中有害微生物生长繁殖，如致病性大肠杆菌和金黄色葡萄球菌；能杀死许多有害细菌，如白色念珠菌、大肠杆菌等，起到平衡肠道菌群的作用；并能产生B族维生素，包括叶酸、生物素、维生素B6和维生素K3等，分泌各种有益物质，如乳酸、乙酸，降低肠道pH值。
枯草芽孢杆菌：调节肠道菌群，维持微生态平衡。能抑制水产动物消化道中的大肠杆菌、沙门氏菌和促进乳酸菌生长地作用。枯草芽孢杆菌代谢产生的多肽类物质(枯草菌素)对某些有害菌也有抑制或杀灭作用。能分泌大量细胞外酶如蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶、卵磷脂酶等，同时也分泌活性抗菌物质及挥发性代谢产物，提高饲料转化率和氨的利用率，减少氨和吲哚类化合物的生成，净化养殖池塘的水质，且能促进水产动物维生素D的吸收。
硝化细菌：鱼的排泄物及残饵在水族箱中会衍生出氨。其中分子态的氨(NH3)是亲脂性分子，而且分子较小，因此很容易就能够穿透脂质性的细胞膜，由鱼体表皮细胞外渗透到鱼体细胞内，从而使鱼发生不同程度的氨中毒症状，严重时可导致鱼急性中毒死亡。硝化细菌能将有毒的氨转换为无毒性的硝酸盐，并可抑制病原菌生长，提高水体透明度，减少换水，创造优质的水体环境，绿化水源。