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用于治疗趋化因子受体5介导的疾病的哌啶衍生物
技术领域
本发明涉及具有药物活性的哌啶化合物，涉及制备这种化合物的方法，涉及含有这种化合物的药物组合物，并且涉及这种化合物作为活性治疗药的用途。
背景技术
趋化因子(chemokine)是由很多种细胞释放的趋化细胞因子(chemotacticcytokine)，用于将巨噬细胞、T细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜中性粒细胞吸引至炎症部位，而且趋化因子在免疫系统细胞成熟中也发挥作用。趋化因子在各种疾病和病症的免疫应答和炎性反应中起重要作用，这些疾病和病症包括哮喘和变应性疾病及自身免疫病理(autoimmunepathology)如类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)和动脉粥样硬化(atherosclerosis)。所分泌的这些小分子属于8-14kDa蛋白质的不断增加的超家族，该超家族的特征为保守的四半胱氨酸基序。可将趋化因子超家族分成显示出特征性结构基序的两个主要组，即Cys-X-Cys(C-X-C或α)家族和Cys-Cys(C-C或β)家族。根据NH末端的半胱氨酸残基对之间的单个氨基酸插入和序列相似性来区分这两个家族。
C-X-C趋化因子包括嗜中性粒细胞的几种强效化学引诱物和活化剂，例如白细胞介素-8(IL-8)和嗜中性粒细胞活化肽2(NAP-2)。
C-C趋化因子包括单核细胞和淋巴细胞(但不包括嗜中性粒细胞)的强效化学引诱物，例如人单核细胞趋化蛋白1-3(MCP-1、MCP-2和MCP-3)、RANTES(调节活化正常T细胞表达和分泌的趋化因子(regulated onactivation normal T-cell expressed and secreted))、嗜酸性粒细胞活化趋化因子(eotaxin)和巨噬细胞炎症蛋白1α和1β(MIP-1α和MIP-1β)。
研究已经表明，趋化因子的作用是通过G蛋白偶联受体的亚家族介导的，在这些受体中有称为如下的受体：CCR1、CCR2、CCR2A、CCR2B、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR3和CXCR4。由于调节这些受体的药物可用于治疗例如以上提及的那些病症和疾病，因此这些受体是药物开发的良好目标。
CCR5受体表达在T淋巴细胞、单核细胞、巨噬细胞、树突细胞、小胶质细胞和其它细胞类型上。这些细胞甄别出数种趋化因子并对其产生应答，所述趋化因子主要是“调节活化正常T细胞表达和分泌的趋化因子”(RANTES)、巨噬细胞炎症蛋白(MIP)MIP-1α和MIP-1β以及单核细胞趋化蛋白-2(MCP-2)。
这导致免疫系统细胞募集到疾病部位。在多种疾病中，正是表达CCR5的细胞直接或间接地促成了组织损伤。因此，对这些细胞的募集进行抑制在很多种疾病中是有益的。
CCR5也是HIV-1和其它病毒的共同受体，其允许这些病毒进入细胞。通过用CCR5拮抗剂阻断所述受体或用CCR5激动剂诱导受体内化(receptorinternalisation)来保护细胞免受病毒感染。
在PCT/SE2005/000574(WO 2005/101989)中公开了具有药物活性的哌啶衍生物。所公开的化合物之一是4-{(1R，3S/R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-异丙基-5-甲基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶，其被公开为两种分离的非对映异构体(比较例化合物A)。本发明化合物具有特别有利的功效和/或DMPK性质(例如在物种例如但不限于大鼠和狗中的清除率和生物利用度)，其优于比较例化合物A的活性非对映异构体。
发明内容
本发明提供4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶(I)或其可药用盐：

合适的可药用盐包括酸加成盐(加成物)，例如盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐、乙酸盐、延胡索酸盐、琥珀酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐、草酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐或甲酸盐。
本发明化合物可按溶剂化物(例如水合物)的形式存在，并且本发明涵盖所有这样的溶剂化合物。
可通过在PCT/SE2005/000574(WO 2005/101989)中公开的任何合适的方法来制备本发明化合物。
例如，本发明化合物可如下制备：在合适的三唑(例如1，2，3-三唑或苯并三唑)存在下使式(II)化合物与式(III)化合物反应，然后与合适的有机金属试剂(例如甲基溴化镁)反应，
式(II)化合物为：

式(III)化合物为：

式(III)化合物可通过从式(IV)化合物除去保护基(PG)来制备，
式(IV)化合物为：

例如，当PG为苄氧羰基或苄基时，除去保护基可通过氢化(例如在钯/炭催化剂存在下的氢气)来实现；当PG为叔丁氧羰基时，除去保护基可通过用酸(例如盐酸或三氟乙酸)处理来实现。
式(IV)化合物可使用“一锅”两步法(“one-pot”，two-step procedure)由式(V)化合物制备：

其中R为异丙基或乙基，
所述“一锅”两步法如下：首先用例如五氯化磷对所述酰胺(式(V)化合物)进行活化，并使由此形成的产物与合适的酰基肼(acyl hydrazide)反应，然后在酸存在下在高温(例如乙酸的回流甲苯溶液)进行环化。
本发明化合物可如下制备：在合适的碱(例如碳酸钾或三乙胺)存在下，在合适的溶剂(例如乙腈或THF)中，在室温(例如10-30℃)使式(VI)化合物与式(III)化合物进行烷基化反应，
式(VI)化合物为：

其中LG为离去基团。
本发明化合物可如下制备：在还原剂(例如NaBH(OAc)₃，其中Ac为C(O)CH₃)和合适的路易斯酸(Lewis acid)(例如Ti(OPr)₄)存在下，在合适的溶剂(EtOH)中，使式(VII)化合物与式(III)化合物进行还原性氨化反应，
式(VII)化合物为：

用于这些制备方法的起始原料为商购的，或可通过文献方法、调整文献方法或调整本发明描述的方法来制备。
本发明化合物具有作为药物的活性，特别是具有作为趋化因子受体(例如CCR5)活性调节剂(例如激动剂、部分激动剂、反向激动剂或拮抗剂)的活性，并且本发明化合物可用于治疗如下疾病：自身免疫性疾病(autoimmunedisease)、炎性疾病(inflammatory disease)、增殖性疾病(proliferative disease)或高增殖性疾病(hyperproliferative disease)或免疫介导的疾病(immunologically-mediated diseases)(包括移植器官排斥或移植组织排斥和获得性免疫缺陷综合征(AIDS))。
本发明化合物在抑制病毒(例如人免疫缺陷病毒(HIV))进入靶标细胞中也是有价值的，并因此在预防病毒(例如HIV)感染、治疗病毒(例如HIV)感染和预防和/或治疗获得性免疫缺陷综合征(AIDS)中是有价值的。
根据本发明另一个特征，其提供4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐，其用在通过治疗(包括预防)来处置温血动物(例如人)的方法中。
根据本发明另一个特征，其提供在需要调节趋化因子受体活性(例如CCR5受体活性)这种治疗的温血动物例如人中调节趋化因子受体活性(例如CCR5受体活性)的方法，所述方法包括向所述动物给药有效量的4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐。
本发明还提供4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐作为药物的用途，所述药物为例如用于治疗如下疾病的药物：移植排斥(transplant rejection)、呼吸系统疾病(respiratory disease)、牛皮癣(psoriasis)或类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis)(例如类风湿性关节炎(rheumatoidarthritis))。[呼吸系统疾病为例如COPD(慢性阻塞性肺病)、哮喘{例如支气管哮喘、过敏性哮喘、内源性哮喘、外源性哮喘或粉尘性哮喘，特别是慢性哮喘或顽固性哮喘(例如迟发性哮喘或气道高反应性)}或鼻炎{急性鼻炎、过敏性鼻炎、萎缩性鼻炎或慢性鼻炎，包括干酪性鼻炎、肥厚性鼻炎、化脓性鼻炎、干燥性鼻炎或药物性鼻炎；膜性鼻炎，包括格鲁布性鼻炎、纤维性鼻炎或假膜性鼻炎或腺病性鼻炎；季节性鼻炎，包括神经性鼻炎(花粉症)或血管运动性鼻炎}；并且特别是哮喘或鼻炎]。
在另一个方面，本发明提供4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐在制备用于治疗(例如在温血动物例如人中调节趋化因子受体活性(例如CCR5受体活性(例如类风湿性关节炎)))的药物中的用途。
本发明也提供了4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐，其用作药物，所述药物为例如用于治疗类风湿性关节炎的药物。
本发明还提供4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐在制备用于在温血动物例如人中治疗如下疾病的药物中的用途：
(1)呼吸道：气道阻塞性疾病，包括慢性阻塞性肺病(COPD)(例如不可逆COPD)；哮喘{例如支气管哮喘、过敏性哮喘、内源性哮喘、外源性哮喘或粉尘性哮喘，特别是慢性哮喘或顽固性哮喘(例如迟发性哮喘或气道高反应性)}；支气管炎{例如嗜酸性支气管炎}；急性鼻炎、过敏性鼻炎、萎缩性鼻炎或慢性鼻炎，包括干酪性鼻炎、肥厚性鼻炎、化脓性鼻炎、干燥性鼻炎或药物性鼻炎；膜性鼻炎，包括格鲁布性鼻炎、纤维性鼻炎或假膜性鼻炎或腺病性鼻炎；季节性鼻炎，包括神经性鼻炎(花粉症)或血管运动性鼻炎；结节病；农民肺(farmer’s lung)及相关疾病；鼻息肉病；肺纤维化或特发性间质性肺炎；
(2)骨和关节：关节炎，包括风湿性关节炎、感染性关节炎、自身免疫性关节炎、血清阴性脊柱关节病(例如强直性脊柱炎、牛皮癣性关节炎或莱特病(Reiter’s disease))、贝切特病(Behcet’s disease)、斯耶格伦综合征(Sjogren’s syndrome)或全身性硬化；
(3)由损伤(例如运动损伤)或疾病引起的疼痛和结缔组织再造的肌肉骨骼疾病：关节炎(例如类风湿性关节炎、骨关节炎、痛风或晶体性关节病)、其它关节疾病(例如椎间盘变性或颞下颌关节变性)、骨再造疾病(例如骨质疏松、佩吉特病(Paget’s disease)或骨坏死)、多软骨炎、硬皮病、混合性结缔组织病、脊椎关节病或牙周病(例如牙周炎)；
(4)皮肤和眼睛：牛皮癣、特应性皮炎、接触性皮炎或其它湿疹性皮肤病、脂溢性皮炎、扁平苔癣、天疱疮(Phemphigus)、大疱性天疱疮(bullousPhemphigus)、大疱性表皮松解、荨麻疹、血管性水肿、血管炎、红斑、皮肤嗜酸粒细胞增多、葡萄膜炎、斑秃或春季结膜炎；
(5)胃肠道：腹部疾病、直肠炎、嗜酸性胃肠炎、肥大细胞增多症、克罗恩病(Crohn’s disease)、溃疡性结肠炎、应激性肠病(irritable bowel disease)或具有远离肠作用的食物相关变态反应(例如偏头痛、鼻炎或湿疹)；
(6)同种异体移植物排斥：在例如肾脏、心脏、肝脏、肺脏、骨髓、皮肤或角膜移植后的急性和慢性同种异体移植物排斥；或慢性移植物抗宿主病；和/或
(7)其它组织或疾病：阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease)、多发性硬化、动脉粥样硬化、获得性免疫缺陷综合征(AIDS)、狼疮病(Lupus disorder)(例如红斑狼疮或系统性狼疮(systemic lupus))、全身性红斑狼疮(erythematosus)、桥本甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis)、重症肌无力、I型糖尿病、肾病综合征、嗜酸性筋膜炎(eosinophilia fascitis)、高IgE综合征、麻风病(例如瘤型麻风)、牙周病、塞扎里综合征(Sezary syndrome)、特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenia pupura)或月经周期失调。
本发明还提供在温血动物例如人中治疗趋化因子介导的病症(例如CCR5介导的病症)的方法，所述方法包括向需要这种治疗的哺乳动物给药有效量的4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐。
为了将4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐用于对温血动物例如人进行治疗性处置，特别是调节趋化因子受体(例如CCR5受体)活性，通常根据标准药物实践将所述成分配制成药物组合物。
因此，在另一个方面，本发明提供药物组合物，其包含4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐(活性成分)和可药用助剂、稀释剂或载体。在另一个方面，本发明提供制备所述组合物的方法，所述方法包括对4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶与可药用助剂、稀释剂或载体进行混合。基于给药模式，所述药物组合物可包含例如0.05至99％w(重量百分比)，例如0.05至80％w，例如0.10至70％w(例如0.10至50％w)的4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶，所有重量百分比都是基于总组合物。
可按标准方式给药本发明的药物组合物用于期望进行治疗的疾病病症，例如通过局部给药(例如给药至肺和/或气道或给药至皮肤)、口服给药、直肠给药或非经肠给药。为了这些目的，可通过本领域已知的方式将本发明化合物配制成如下形式：例如气雾剂、干粉制剂、片剂、胶囊剂、糖浆剂、散剂、颗粒剂、水性溶液剂或混悬剂或油性溶液剂或混悬剂、(脂质)乳剂、可分散散剂、栓剂、软膏剂、乳膏剂、滴剂和无菌可注射水性溶液剂或混悬剂或油性溶液剂或混悬剂。
本发明合适的药物组合物是适于以单位剂量形式口服给药的组合物，所述单位剂量形式为例如片剂或胶囊剂，该片剂或胶囊剂含有0.1mg至1g的4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶。
在另一个方面，本发明的药物组合物是适于静脉内注射、关节内注射、皮下注射或肌内注射的组合物。
每名患者可例如接受0.01mg·kg^-1至100mg·kg^-1所述化合物(例如0.1mg·kg^-1至20mg·kg^-1本发明化合物)的静脉内、关节内、皮下或肌内剂量，所述组合物每天给药1至4次。可通过推注(bolus injection)的方式给予静脉内、关节内、皮下或肌内剂量。可选择地，可通过历时一段时间连续输注(infusion)来给予静脉内剂量。可选择地，每名患者可接受的每日口服剂量约等于每日非经肠剂量，所述组合物每天给药1至4次。
下面说明含有4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐或其溶剂化物(下文称为化合物X)的代表性药物剂型，其用于在人类中的治疗性用途或预防性用途：
(a)

  片剂I  mg/片剂  化合物X  100  乳糖(欧洲药典(Ph.Eur.))  179  交联羧甲纤维素钠  12.0  聚乙烯吡咯烷酮  6  硬脂酸镁  3.0  片剂I  mg/片  化合物X  100  乳糖(欧洲药典(Ph.Eur.))  179  交联羧甲纤维素钠  12.0  聚乙烯吡咯烷酮  6  硬脂酸镁  3.0
(b)
  片剂II mg/片  化合物X  50  乳糖(欧洲药典(Ph.Eur.))  229  交联羧甲纤维素钠  12.0  聚乙烯吡咯烷酮  6  硬脂酸镁  3.0
(c)
  片剂III mg/片  化合物X  1.0  乳糖(欧洲药典(Ph.Eur.))  92  交联羧甲纤维素钠  4.0  聚乙烯吡咯烷酮  2.0  硬脂酸镁  1.0
(d)
  胶囊剂  mg/胶囊  化合物X  10  乳糖(欧洲药典(Ph.Eur.))  389  交联羧甲纤维素钠  100  硬脂酸镁  1.0
(e)
 注射剂I  (50mg/mL) 化合物X  5.0％w/v
  等渗水溶液 至100％
可使用缓冲液、可药用共溶剂(例如聚乙二醇、聚丙二醇、甘油或EtOH)或络合剂(例如羟基-丙基β-环糊精)来辅助配制。
可通过药学领域公知的常规方法来得到上述制剂。可通过常规方式对片剂(a)-(c)进行肠溶性包衣(enteric coat)，例如得到醋酸邻苯二甲酸纤维素包衣。
本发明还涉及联合治疗或联用组合物，其中将4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐，或将包含4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐的药物组合物与用于治疗上述任何一种病症的药物同时(可能在同一组合物中)或顺序给药。
具体地，为了治疗炎性疾病、类风湿性关节炎、牛皮癣、炎性肠病、COPD、哮喘和过敏性鼻炎，将本发明化合物与下列药物组合：TNF-α抑制剂(例如抗TNF单克隆抗体(例如英夫利昔单抗(Remicade)、CDP-870和D₂E₇)或TNF受体免疫球蛋白分子(例如依那西普(Enbrel.reg.))，非选择性COX-1/COX-2抑制剂(例如吡罗昔康或双氯芬酸；丙酸类，例如萘普生、氟比洛芬、非诺洛芬、酮洛芬或布洛芬；芬那酸类(fenamate)，例如甲芬那酸、吲哚美辛、舒林酸或阿扎丙宗；吡唑酮类，例如保泰松；水杨酸盐(酯)，例如阿司匹林)，COX-2抑制剂(例如美洛昔康、塞来考昔、罗非考昔、伐地考昔或艾托考昔)，低剂量氨甲蝶呤，来氟米特(lefunomide)，环索奈德，羟氯喹，右旋青霉胺(d-penicillamine)，或金诺芬或非经肠给药的金或口服给药的金。
本发明还涉及4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐与下列药物的组合：
·白三烯生物合成抑制剂、5-脂肪氧化酶(5-LO)抑制剂或5-脂肪氧化酶活化蛋白(FLAP)拮抗剂，例如齐留通，ABT-761，芬留顿，替泊沙林，Abbott-79175，Abbott-85761，N-(5-取代的)-噻吩-2-烷基磺酰胺，2，6-二叔丁基苯酚腙，甲氧基四氢吡喃，例如Zeneca ZD-2138，SB-210661，吡啶基取代的2-氰基萘化合物，例如L-739，010；2-氰基喹啉化合物，例如L-746，530；或吲哚或喹啉化合物，例如MK-591，MK-886或BAY×1005；
·白三烯LTB₄、LTC₄、LTD₄或LTE₄的受体拮抗剂，选自吩噻嗪-3-酮，例如L-651，392；脒基化合物，例如CGS-25019c；苯并噁胺(benzoxalamine)，例如昂唑司特；苯甲脒(benzenecarboximidamide)，例如BIIL 284/260；或化合物，例如扎鲁司特、阿鲁司特、孟鲁司特、普仑司特、维鲁司特(MK-679)、RG-12525、Ro-245913、伊拉司特(CGP 45715A)或BAY×7195；
·PDE4抑制剂，包括同工型PDE4D的抑制剂；
·抗组胺性H₁受体拮抗剂，例如西替利嗪、氯雷他定、地氯雷他定、非索非那定、阿司咪唑、氮斯汀或氯苯那敏；
·胃保护性H₂受体拮抗剂；
·α₁-和α₂-肾上腺素受体激动剂、血管收缩药、拟交感神经药，例如丙己君、苯福林、苯丙醇胺、伪麻黄碱、盐酸萘甲唑啉、盐酸羟甲唑啉、盐酸四氢唑啉、盐酸木甲唑啉或盐酸乙基去甲肾上腺素；
·抗胆碱能药，例如异丙托溴铵、噻托溴铵、氧托溴铵、哌仑西平或替仑西平；
·β₁-至β₄-肾上腺素受体激动剂，例如间羟异丙肾上腺素(metaproterenol)、异丙肾上腺素(isoproterenol)、异丙去甲肾上腺素(isoprenaline)、阿布叔醇(albuterol)、沙丁胺醇(salbutamol)、福莫特罗、沙美特罗、特布他林、奥西那林、甲磺酸比托特罗或吡布特罗；甲基黄嘌呤(methylxanthanine)，包括茶碱和氨茶碱；色甘酸钠；或毒蕈碱受体(M1、M2和M3)拮抗剂；
·I型胰岛素样生长因子(IGF-1)模拟物；
·全身性副作用减小的吸入性糖皮质激素，例如泼尼松、泼尼松龙、氟尼缩松、曲安奈德、二丙酸倍氯美松、布地奈德、丙酸氟替卡松或糠酸莫米松；
·基质金属蛋白酶(MMP)的抑制剂，所述基质金属蛋白酶(MMP)为例如溶基质蛋白酶(stromelysin)、胶原酶或明胶酶或蛋白聚糖酶(aggrecanase)；例如胶原酶-1(MMP-1)、胶原酶-2(MMP-8)、胶原酶-3(MMP-13)、溶基质蛋白酶-1(MMP-3)、溶基质蛋白酶-2(MMP-10)和溶基质蛋白酶-3(MMP-11)或MMP-12；
·趋化因子受体功能的调节剂，所述趋化因子受体为例如CCR1、CCR2、CCR2A、CCR2B、CCR3、CCR4、CCR5、CCR6、CCR7、CCR8、CCR9、CCR10和CCR11(对于C-C家族)；CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4和CXCR5(对于C-X-C家族)；和CX₃CR1(对于C-X₃-C家族)；
·抗骨质疏松药，例如雷洛昔芬(roloxifene)、屈洛昔芬、拉索昔芬或fosomax；
·免疫抑制药，例如FK-506、雷帕霉素、环胞霉素(cyclosporine)、硫唑嘌呤或氨甲喋呤；
·可用于治疗AIDS和/或HIV感染的化合物，例如预防或抑制病毒蛋白组120(viral protein gp120)与宿主细胞CD4结合(engage)的药物{例如可溶性CD4(重组的)；抗CD4抗体(或修饰的/重组的抗体)，例如PRO542；抗组120抗体(或修饰的/重组的抗体)；或另一种药物，该药物干扰组120与CD4的结合，例如BMS806}；预防与被HIV病毒使用的非CCR5的趋化因子受体结合的药物{例如CXCR4激动剂或拮抗剂或抗CXCR4抗体}；干扰HIV病毒包膜(HIV viral envelope)与细胞膜融合的化合物{例如抗组41抗体；恩夫韦地(enfuvirtide)(T-20)或T-1249}；DC-SIGN的抑制剂(也称作CD209){例如抗DC-SIGN抗体或DC-SIGN结合的抑制剂}；核苷/核苷酸类似物反转录酶抑制剂{例如齐多夫定(AZT)、奈韦拉平、去羟肌苷(ddI)、扎西他滨(ddC)、司他夫定(d4T)、拉夫米定(3TC)、阿巴卡韦、阿德福韦或替诺福韦(例如呈游离碱的形式或呈富马酸替诺福韦(disoproxil fumarate)的形式)}；非核苷反转录酶抑制剂{例如奈韦拉平、地位韦啶或依法韦仑}；蛋白酶抑制剂{例如利托那韦、茚地那韦、沙奎那韦(例如呈游离碱的形式或呈甲磺酸盐的形式)、奈非那韦(例如呈游离碱的形式或呈甲磺酸盐的形式)、氨普奈韦、洛匹那韦或阿扎那韦(atazanavir)(例如呈游离碱的形式或呈硫酸盐的形式)}；核糖核苷酸还原酶抑制剂{例如羟基脲}；或抗逆转录病毒药(antiretroviral){例如恩曲他滨(emtricitabine)}；或
·用于治疗骨关节炎的现有治疗药物，例如非甾类抗炎药(下文称为NSAID’s)，例如吡罗昔康或双氯芬酸；丙酸类，例如萘普生、氟比洛芬、非诺洛芬、酮洛芬或布洛芬；芬那酸类，例如甲芬那酸、吲哚美辛、舒林酸或阿扎丙宗；吡唑酮类，例如保泰松；水杨酸盐(酯)，例如阿司匹林；COX-2抑制剂，例如塞来考昔、伐地考昔、罗非考昔或艾托考昔；止痛药或关节内治疗药，例如皮质类固醇或透明质酸，例如海尔根(hyalgan)或欣维可(synvisc)；或P2X7受体拮抗剂。
本发明还涉及4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶或其可药用盐与如下药物在一起的组合：(i)类胰蛋白酶(tryptase)抑制剂；(ii)血小板活化因子(PAF)拮抗剂；(iii)白介素转化酶(ICE)抑制剂；(iv)IMPDH抑制剂；(v)粘附分子抑制剂，包括VLA-4拮抗剂；(vi)组织蛋白酶；(vii)MAP激酶抑制剂；(viii)葡萄糖-6磷酸脱氢酶抑制剂；(ix)激肽B₁受体和激肽B₂受体拮抗剂；(x)抗痛风药，例如秋水仙碱；(xi)黄嘌呤氧化酶抑制剂，例如别嘌醇；(xii)排尿酸药，例如丙磺舒、磺吡酮或苯溴马隆；(xiii)生长激素促分泌剂；(xiv)转化生长因子(TGFβ)；(xv)血小板源性生长因子(PDGF)；(xvi)成纤维细胞生长因子，例如基本的成纤维细胞生长因子(bFGF)；(xvii)粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)；(xviii)辣椒素油(capsaicin cream)；(xix)速激肽NK₁受体和速激肽NK₃受体拮抗剂，选自NKP-608C；SB-233412(他奈坦(talnetant))；和D-4418；(xx)弹性酶抑制剂，选自UT-77和ZD-0892；(xxi)TNF-α转化酶抑制剂(TACE)；(xxii)诱导的一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂；或(xxiii)TH2细胞上表达的化学引诱物受体同源分子(CRTH2拮抗剂)。
现通过下列非限制性实施例对本发明进行说明，其中除非另有说明：
(i)温度以摄氏度(℃)给出；操作在室温或环境温度进行，即在范围为18-25℃的温度进行；
(ii)通过无水硫酸镁对有机溶液进行干燥；使用旋转蒸发仪在减压(600-4000帕斯卡；4.5-30mm Hg)下对溶剂进行蒸发，浴温高至60℃；
(iii)除非另有说明，色谱法是指在硅胶上的快速色谱法；薄层色谱法(TLC)在硅胶板上进行；当提到“Bond Elut”柱时，其是指含有10g或20g、粒径为40微米的硅胶的柱，所述硅胶装在60mL一次性注射器中并通过多孔盘(porous disc)支撑，所述柱是以名称“Mega Bond Elut SI”从Varian，HarborCity，California，USA获得的。当提到″Isolute^TM SCX柱″时，其是指从International Sorbent Technology Ltd.，1st House，Duffryn Industial Estate，Ystrad Mynach，Hengoed，Mid Glamorgan，UK获得的含有苯磺酸的(非封端的)柱。当提到″Argonaut^TM PS-三胺净化剂树脂(PS-tris-amine scavengerresin)″时，其是指从Argonaut Technologies Inc.，887Industrial Road，Suite G，San Carlos，California，USA获得的三(2-氨基乙基)胺聚苯乙烯树脂；
(iv)通常，通过TLC跟踪反应过程，给出的反应时间仅用于说明；
(v)收率(当给出时)仅用于说明，并且不必是可通过努力的工艺开发所得到的那些收率，如果需要更多的物质，则重复制备；
(vi)当给出时，引用¹H NMR数据，并且¹H NMR数据的形式为主要特征质子(diagnostic proton)的δ值，其相对于作为内标的四甲基硅烷(TMS)以百万分之几(ppm)给出，除非另有说明，使用全氘代DMSO(perdeuterioDMSO)(CD₃SOCD₃)作为溶剂在400MHz进行测定，偶合常数(J)以Hz的形式给出；
(vii)化学符号具有它们常见的含义；使用SI单位和符号；
(viii)溶剂比率以体积百分比给出；
(ix)使用直接暴露探针(direct exposure probe)以化学电离(APCI)模式用70电子伏特的电子能量运行质谱(MS)；其中指示的电离通过电喷雾(ES)实现；当给出m/z值时，通常仅记录指示母体质量(parent mass)的离子，并且除非另有说明，引用的质量离子是正质量离子-(M+H)⁺；
(x)使用一对Gilson 306泵连同Gilson 233XL采样器和Waters ZMD4000质谱仪来进行LCMS表征。LC包括具有5微米粒径的Water Symmetry 4.6×50柱C18。洗脱剂为A：具有0.05％甲酸的水，和B：具有0.05％甲酸的乙腈。洗脱梯度为6分钟内从95％A至95％B。其中所指示的电离通过电喷雾(ES)实现；当给出m/z值时，通常仅记录指示母体质量的离子，并且除非另有说明，引用的质量离子为正质量离子-(M+H)⁺；
(xi)使用来自Advanced Chemistry Development Inc，6.00版本的IUPAC命名程序对实施例和方法中的化合物进行命名；以及
(xii)使用下述简写：
THF        四氢呋喃；
DCM        二氯甲烷
DIPE       二异丙基醚
DIBAL      氢化二异丁基铝
DMSO       二甲基亚砜
IPA        异丙醇
R-BINAP    (R)-2，2’-二(二苯基膦基)-1，1’-联萘
           ((R)-2，2’-Bis(diphenylphosphino)-1，1’-binaphthyl)
TPAP       过钌酸四丙基铵(Tetrapropylammonium perruthenate)
Mol eq     摩尔当量
Rel vol    相对体积
MTBE       甲基叔丁基醚
实施例1
4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶

在迪安-斯托克条件(Dean-Stark condition)下，将(3R)-3-(3，5-二氟苯基)-3-(1-甲磺酰基-哌啶-4-基)丙醛(14.3g)、4-(3-乙基-5-(丙-2-基)-1，2，4-三唑-4-基)哌啶(9.6g)和苯并三唑(5.2g)于甲苯(500ml)中的混合物回流加热24小时。将反应混合物冷却到60℃，加入3M甲基溴化镁的乙醚(ether)(72ml)溶液。将反应混合在60℃加热12小时，然后冷却到室温。加入甲醇(25ml)，用2M氢氧化钠(3×100ml)对反应混合物进行洗涤，用MgSO₄干燥并蒸发。残余物通过硅胶色谱法(用乙酸乙酯至20％甲醇/乙酸乙酯的梯度洗脱)进行纯化。得到两个产物馏分(异构体A和异构体B)。
第一个洗脱出的非对映异构体(异构体A)得到3.6g白色固体，第二个洗脱出的非对映异构体(异构体B，标题化合物)得到2.9g白色固体。
异构体A：4-{(1R，3S)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶
¹H NMR(400MHz，DMSO)δ0.75-0.08(3H，d)1.1-1.5(14H，m)1.7(1H，m)1.8(1H，m)1.85(1H，m)1.95-2.1(4H，m)2.2(1H，m)2.3-2.45(3H，m)2.5-2.6(2H，m)2.7(3H，s)2.75-2.8(3H，m)2.9-3.0(1H，m)3.6-3.8(3H，m)6.55-6.6(3H，m)。
异构体B(标题化合物)：4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶
¹H NMR(400MHz，DMSO)δ0.9(3H，d)1.1-1.4(13H，m)1.6-2.15(8H，m)2.2-2.35(3H，m)2.4(1H，m)2.5(1H，m)2.6-2.75(7H，m)2.9(1H，m)3.6-3.8(3H，m)6.55-6.6(3H，m)。
如下制备用作起始原料的(3R)-3-(3，5-二氟苯基)-3-(1-甲磺酰基-哌啶-4-基)丙醛：
步骤1.
1-甲磺酰基-4-(乙氧基羰基)-哌啶的制备

向反应容器中加入哌啶-4-甲酸乙酯(Ethyl isonipecotate)(1摩尔当量)，随后用DCM(1相对体积)进行线性洗涤(line wash)。向容器中加入三乙胺(1摩尔当量)，随后用DCM(1相对体积)进行线性洗涤。向容器中加入DCM(5相对体积)，将反应混合物冷却到0至5℃之间。向容器中加入甲磺酰氯(1摩尔当量)于DCM(2相对体积)中的溶液，随后用DCM(1相对体积)进行线性洗涤，保持温度在1至10℃之间。将反应混合物在0至10℃之间搅拌直到反应结束。向反应混合物中加入纯化水(5相对体积)，并在5至10℃之间搅拌15分钟。将所得各相分离，通过大气压蒸馏将有机相浓缩至约4.5相对体积。对浓缩物进行净化(clarify)，然后加入DIPE(10相对体积)，通过减压蒸馏将反应混合物再次浓缩至约4.5相对体积。加入另一份DIPE(10相对体积)，将所得悬浮液在环境温度搅拌至少60分钟。过滤分离出固体，用DIPE(2相对体积)洗涤，然后在环境温度干燥，得到小标题化合物，收率为约93％。
¹H NMR(400MHz，DMSO-d⁶)δ4.05(q，J＝7.1Hz，2H)，3.46(d，J＝12.0Hz，2H)，2.81(s，3H)，2.76(t，J＝11.5Hz，2H)，2.48-2.38(m，1H)，1.90(d，J＝13.3Hz，2H)，1.56(dd，J＝35.4，3.5Hz，2H)，1.16(t，J＝7.2Hz，3H)。
步骤2.
(1-甲磺酰基哌啶-4-基)甲醇的制备

向反应容器中加入1-甲磺酰基-4-(乙氧基羰基)-哌啶(1摩尔当量)，随后用THF(6相对体积)进行线性洗涤。将反应混合物冷却到0至10℃。向容器中加入氢化铝锂溶液(浓度为1M的THF溶液，0.75摩尔当量)，随后用THF(1相对体积)进行线性洗涤，保持温度在0至20℃之间，然后将反应混合物温热至环境温度并搅拌直到反应结束。将反应混合物冷却到0至2℃。然后向容器中加入纯化水(1相对体积)，保持温度在0至10℃之间。通过加入5MHCl将反应混合物的pH调整到pH＜2，保持温度在0至10℃之间。将反应混合物温热至室温，搅拌至少15分钟，然后将各相分离。向水相中加入DCM(5相对体积)，搅拌至少15分钟，然后将各相分离。通过在40℃真空蒸馏将第一个有机(THF)相浓缩至约3.5相对体积。向浓缩物中加入第二个有机(DCM)相，将各相分离，通过大气压蒸馏将有机相浓缩至约3.5相对体积。将DIPE(10相对体积)加到在40至45℃蒸馏所得到的残余物中。在通过真空蒸馏浓缩至约5相对体积后，加入更多的DIPE(5相对体积)，将所得浆液冷却到环境温度并搅拌约60分钟。过滤分离出小标题化合物，用DIPE(2×1相对体积)洗涤并在环境温度干燥，得到小标题化合物，收率为约87％。
¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ3.84(dd，J＝9.6，2.2Hz，2H)，3.54(d，J＝4.9Hz，2H)，2.78(s，3H)，2.67(t，J＝12.0Hz，2H)，1.70-1.56(m，2H)，1.54(s，1H)，1.36(qd，J＝12.5，4.2Hz，2H)。
步骤3.
(1-甲磺酰基哌啶-4-基)甲醛的制备

方法A
在反应容器中将(1-甲磺酰基哌啶-4-基)甲醇(1摩尔当量)溶解在DCM(5相对体积)中，随后用DCM(1.2相对体积)进行线性洗涤。加入氯铬酸吡啶鎓(Pyridinium chlorochromate)(1摩尔当量)于DCM(10相对体积)中的浆液，随后用DCM(5×1.2相对体积)进行线性洗涤。将反应混合物在环境温度搅拌过夜，之后加入水(18.3相对体积)，将各相分离，使DCM相通过短的硅胶“垫”(用乙酸乙酯洗脱)。从滤液中将溶剂蒸发，留下小标题化合物，其为固体，收率为约40％。
方法B
将(1-甲磺酰基哌啶-4-基)甲醇(1摩尔当量)、分子筛(2.5重量当量)和TPAP(0.05摩尔当量)加入到含有DCM(30相对体积)的反应容器中。在另一个容器中将N-甲基-吗啉N-氧化物(1.5摩尔当量)溶解在DCM(5相对体积)中，并加入到第一个容器中，保持温度低于24℃。一旦反应结束，使反应混合物过滤通过硅藻土，从滤液中真空蒸发溶剂，留下小标题化合物，其为白色固体，收率为约40％。
方法C
称取1-甲磺酰基-4-(乙氧基羰基)-哌啶(1摩尔当量)，将其加入到含有DCM(16相对体积)的反应容器中，并冷却到-77℃。缓慢加入DIBAL(浓度为1M的THF溶液，1.5摩尔当量)，保持反应混合物的温度低于-75℃。3小时后，在低温加入另一份DIBAL溶液(1.5摩尔当量)。一旦反应结束，用氯化铵溶液(20％w/w，2相对体积)将反应混合物淬灭，保持温度低于-67℃。在该温度搅拌30分钟后，加入HCl(2M，2相对体积)，同样保持温度低于-68℃。使所得混合物温热至环境温度过夜，得到白色浆液。加入水、HCl(5M)和盐水，直到沉淀物溶解。分离各层，通过真空蒸发除去有机层中的溶剂，得到小标题化合物，收率为约65％(污染有(1-甲磺酰基哌啶-4-基)甲醇)。
方法D
将DCM(5相对体积)和草酰氯(3摩尔当量)的溶液冷却到-70℃以下。在另一个容器中将DCM(2相对体积)和DMSO(6摩尔当量)混合，然后通过注射器将其加入到草酰氯溶液中，在加入过程中保持温度低于-64℃。搅拌10分钟后，加入(1-甲磺酰基哌啶-4-基)甲醇(1摩尔当量)于DCM(5相对体积)和DMSO(0.5相对体积)中的溶液，在加入过程中保持温度低于-60℃。将反应混合物在-70℃保持40分钟，然后通过注射器缓慢加入三乙胺(7.5摩尔当量)。使反应混合物温热至室温过夜。加入HCl(2M，5相对体积)，同时在冰水浴中冷却反应混合物。加入DCM(5相对体积)，然后分离各层，DCM层用HCl(2M，5相对体积)洗涤，然后用碳酸氢钠溶液(饱和的，5相对体积)洗涤，最后用盐水(5相对体积)洗涤。真空除去有机相中的有机溶剂，留下小标题化合物，收率为约75％。
¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ9.69(s，1H)，3.68-3.54(m，2H)，2.96(ddd，J＝12.3，9.7，2.8Hz，2H)，2.78(s，3H)，2.43(双五重峰(dquintet)，J＝9.5，4.7Hz，1H)，2.10-2.00(m，2H)，1.81(dtd，J＝13.8，9.8，3.9Hz，2H)。
步骤4.
3-(1-甲磺酰基哌啶-4-基)丙烯酸异丙酯的制备

将(1-甲磺酰基哌啶-4-基)甲醛(1摩尔当量)加入到反应容器中，然后用甲苯(11相对体积)进行线性洗涤。向容器中加入哌啶(0.1摩尔当量)，然后用甲苯(0.5相对体积)进行线性洗涤，将反应混合物加热到85至95℃之间。历时6-8小时以10个大约相等的份加入异丙基丙二酸(iso-propyl malonicacid)(1.25摩尔当量)于甲苯中的溶液(如上所述制备)，将反应混合物在85至95℃之间搅拌直到反应结束。然后将反应混合物冷却到40至50℃之间，向反应混合物中加入HCl(0.5M，3相对体积)，保持温度在40至50℃之间。搅拌至少15分钟后，将各相分离。向有机相中加入碳酸氢钠(0.5M，3相对体积)，仍然保持温度在40至50℃之间。将两相混合物搅拌至少15分钟，然后将各相分离，用水(3相对体积)洗涤有机相。然后通过真空蒸馏在40至50℃之间将有机相浓缩至约16相对体积。加入甲苯(3.5相对体积)，在40至50℃之间对溶液进行净化，然后通过真空蒸馏浓缩至约7相对体积。然后将混合物冷却到0至10℃之间，并在该温度搅拌至少60分钟，然后过滤分离出小标题化合物，用甲苯(2相对体积)在0至10℃之间对残余物进行洗涤。干燥固体，留下小标题化合物，收率为约59％。
¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ6.87(dd，J＝15.8，6.5Hz，1H)，5.81(dd，J＝15.8，0.9Hz，1H)，5.07(五重峰，J＝6.2Hz，1H)，3.82(d，J＝12.0Hz，2H)，2.79(s，3H)，2.74(td，J＝12.0，2.4Hz，2H)，2.36-2.17(m，1H)，1.95-1.80(m，2H)，1.57(ddd，J＝24.9，11.7，4.0Hz，2H)，1.27(d，J＝6.4Hz，6H)。
步骤5.
(3R)-3-(3，5-二氟苯基)-3-[1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基]丙酸异丙酯的制备
方法A：(使用3，5-二氟苯基硼酸(3，5-difluorophenylboronic acid))

催化剂溶液如下制备：将R-BINAP(0.045摩尔当量)和(1，5-环辛二烯)氯化铑二聚体(bis(1，5-cyclooctadienerhodium chloride))(0.02摩尔当量)加入到容器中，然后加入THF(2.8相对体积)。对混合物进行搅拌，实现完全溶解。
向更大的反应容器中加入3-(1-甲磺酰基哌啶-4-基)丙烯酸异丙酯(1摩尔当量)、3，5-二氟苯基硼酸(1.35摩尔当量)和碳酸钾(1.35摩尔当量)。然后加入THF(7.8相对体积)和IPA(1摩尔当量)，将混合物加热至60℃。然后将催化剂溶液加入到该混合物中，用THF(1.4相对体积)进行线性洗涤，其用于促进该转移。然后将所得混合物在60℃保持2小时。将反应混合物冷却到室温，加入L-半胱氨酸(0.9相对重量)的水(12相对体积)溶液。将所得混合物在室温搅拌过夜。然后将各相分离，将有机部分浓缩至体积为3.5相对体积。然后加入IPA(10.5相对体积)，接着将批料(batch)再次浓缩至体积为3.5相对体积。再加入IPA(10.5相对体积)，并再次将批料浓缩至体积为3.5相对体积。最后，再加入10.5相对体积的IPA，并将所得混合物在30-35℃保持15-30分钟，然后加热至70℃。然后将混合物过滤到结晶容器(crystallisation vessel)中。用IPA(1.5相对体积)进行线性洗涤，其用于促进转移。
取出约1％结晶溶液以提供晶种样品。其在静置时结晶。
将结晶溶液冷却到50℃，然后以12℃/小时冷却到20℃。当结晶溶液在40℃时，加入晶种。将结晶溶液保持在室温过夜。
通过抽滤将结晶的产物分离出来。用IPA(3.5相对体积)对所得滤饼进行洗涤。然后将经洗涤的滤饼在真空烘箱中在50℃干燥至恒定质量，得到小标题化合物，收率为75％。
¹H NMR(400MHz，DMSO-d⁶)δ0.96(3H，d，J＝6)，1.02(3H，d，J＝6)，1.10(1H，qd，J＝12.5和4)，1.18(1H，qd，J＝12.5和4)，1.33(1H，d，J＝12.5)，1.60(1H，m)，1.88(1H，d，J＝12.5)，2.49-2.66(3H，m)，2.80(1H，dd，J＝15和5)，2.81(3H，s)，2.91(1H，m)，3.46(1H，d，J＝12)，3.57(1H，d，J＝12)，4.71(1H，七重峰，J＝6)，6.98(2H，dd，J＝8和1.5)，7.05(1H，tt，J＝9.5和1.5)。
方法B：(使用2-(3，5-二氟苯基)-5，5-二甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环己烷)
催化剂溶液如下制备：将R-BINAP(0.035摩尔当量)和(1，5-环辛二烯)氯化铑二聚体(0.015摩尔当量)加入到容器中，然后加入THF(2.0相对体积)。对混合物进行搅拌，实现完全溶解。
向更大的反应容器中加入3-(1-甲磺酰基哌啶-4-基)丙烯酸异丙酯(1摩尔当量)、2-(3，5-二氟苯基)-5，5-二甲基-1，3，2-二氧杂硼杂环己烷(1.5摩尔当量)和碳酸钾(0.2摩尔当量)。然后加入THF(10相对体积)和IPA(1.1摩尔当量)，将混合物加热到60℃。然后将催化剂溶液加入到该混合物中，将反应混合物在60-66℃保持2小时。真空浓缩粗制反应混合物。将残余物大部分溶解在MTBE中，并使该溶液过滤通过硅胶垫。将所得溶液真空浓缩，用异己烷和MTBE进行研磨。过滤收集所得固体，在真空烘箱中在40℃干燥过夜。得到标题标题化合物，收率为67％。
步骤6.
(3R)-3-(3，5-二氟苯基)-3-[1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基]丙-1-醇的制备

在0℃历时45分钟将氢化二异丁基铝(浓度为1M的四氢呋喃溶液)(DIBAL-H)(5.8升，3.5当量)滴加至(3R)-3-(3，5-二氟苯基)-3-[1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基]丙酸异丙酯(646g，1.0当量)于四氢呋喃(6.5升，10体积)的溶液中，保持温度低于5℃。将反应混合物在0℃搅拌3小时。将反应混合物冷却到-15℃。历时15分钟向反应混合物中滴加甲醇(646ml，1体积)，将混合物搅拌30分钟直到其冷却回到-10℃。然后非常小心地加入酒石酸钠钾四水合物(2900g，4.5wt)于水(8.1升，12.5体积)中的饱和水溶液，保持温度低于10℃(放热的：从-10℃至+5℃，当沉淀物开始形成时，放热明显增加)。
然后加入乙酸乙酯(6.5升，10体积)，并将混合物在室温搅拌30分钟。然后使其过滤通过硅藻土垫。用乙酸乙酯(6.5升，10体积)洗涤。分离出水层，用乙酸乙酯(2×10.0升)萃取。合并有机物，用50％水/盐水(2×16.0升)洗涤，干燥(硫酸镁)并过滤。将体积真空减小至一半，然后使其通过硅胶垫(～1000g，～1wt)(用乙酸乙酯(8.0升，8体积)洗涤)，并最后真空除去溶剂，得到白色固体。用乙酸乙酯/异己烷重结晶，得到小标题化合物，其为白色固体(96％)。
¹H NMR(400MHz，DMSO)δ0.96-1.23(2H，m)，1.26-1.42(1H，m)，1.51-1.78(2H，m)，1.85-2.03(2H，m)，2.42-2.72(3H，m)，2.86(3H，s)，2.99-3.14(1H，m)，3.19(1H，qd)，3.45(1H，d)，3.57(1H，d)，4.38(1H，t)，6.84-7.13(3H，m)。
步骤7.
(3R)-3-(3，5-二氟苯基)-3-(1-甲磺酰基-哌啶-4-基)丙醛的制备

历时20分钟向冷却到-5℃的(3R)-3-(3，5-二氟苯基)-3-[1-(甲基磺酰基)哌啶-4-基]丙-1-醇(258g，1.0当量)、乙酸钠(114g，1.8当量)和2，2，6，6-四甲基哌啶-N-氧化物(tetra-methylpiperidine-N-oxide)(1.2g，0.01当量)于二氯甲烷(5.0升，20体积)中的混合物中以～50g/批分批加入三氯异氰尿酸(trichloroisocyannuric acid)(189g，1.05当量)于二氯甲烷(2.5升，10体积)中的悬浮液(观察到放热：从-5℃至+5℃)。将反应混合物在2℃搅拌90分钟。对反应混合物进行过滤并用二氯甲烷(2.5升，10体积)洗涤。真空除去溶剂，得到泛红的残余物(308g)。将残余物溶解在二氯甲烷(500ml)中，通过硅藻土(250g)/硅胶(250g)垫(硅藻土在底部)过滤除去微细固体沉淀物(用30％乙酸乙酯/二氯甲烷(5.0升，20体积)洗涤)。真空除去溶剂，留下黄色油状物，在Novasep 1.5kg硅胶柱上对所述黄色油状物进行纯化(开始用5％乙酸乙酯/二氯甲烷洗脱，然后将梯度升至30％乙酸乙酯/二氯甲烷)。产物馏分得到小标题化合物，其为白色固体(174g，68％收率)。
¹H NMR(400MHz，DMSO)δ0.99-1.24(2H，m)，1.37(1H，d)，1.60(1H，m)，1.84(1H，d)，2.44-2.68(2H，m)，2.73-3.02(5H，m)，3.06-3.17(1H，m)，3.54(2H，m)，6.94-7.13(3H，m)，9.55(1H，s)。
中间体1
4-(3-乙基-5-(丙-2-基)-1，2，4-三唑-4-基)哌啶的制备

步骤1.
N-(1-苄基-哌啶-4-基)-2-甲基-丙酰胺的制备

在室温向1-苄基哌啶-4-胺(400g)和三乙胺(531.8g)于二氯甲烷(1.6L)中的悬浮液中加入2-甲基丙酸2-甲基丙酰基酯(2-methylpropanoyl2-methylpropanoate)(349.2g)，加入速度是使反应混合物稳定回流的速度。将反应混合物在40℃再加热1小时。将反应混合物冷却到室温，剧烈搅拌下加入4M氢氧化钠溶液(1500ml)。将反应混合物进一步用二氯甲烷(1500ml)和水(1500ml)稀释，然后分配，取出二氯甲烷层。将有机物用硫酸镁干燥，过滤并真空减小至小体积。加入乙醚(2L)，过滤除去白色固体，用乙醚(2×500ml)洗涤，得到小标题产物(420g，78％收率)。
¹H NMR(400.132MHz，CDCl₃)δ1.15(6H，d)，1.45(2H，q)，1.90(2H，dt)，2.13(2H，m)，2.32(1H，q)，2.82(2H，d)，3.50(2H，s)，3.80(1H，m)，5.44(1H，d)，7.29(5H，m)。
步骤2.
1-苄基-4-(3-乙基-5-(丙-2-基)-1，2，4-三唑-4-基)哌啶的制备

在0℃历时30分钟将N-(1-苄基-哌啶-4-基)-2-甲基-丙酰胺(100g)于二氯甲烷(500ml)中的溶液滴加至五氯化磷(120g，1.5当量)于二氯甲烷(1000ml)中的溶液中(观察到放热)。将反应混合物在0℃搅拌30分钟，然后温热至25℃，并再搅拌1小时。将反应混合物冷却到0℃，历时30分钟滴加丙酰肼(propanohydrazide)(54.1g，1.6当量)于二氯甲烷(500ml)中的溶液。将反应混合物温热至30℃并搅拌1小时。将反应混合物冷却到-10℃，用2M氢氧化钠水溶液碱化至pH为12(当心：剧烈放热)。分离出有机层，水层用二氯甲烷(2×1000ml)萃取。将所有有机物合并，加入乙酸(200ml)，将所得混合物放置18小时。真空除去溶剂，将所得油状物溶解在甲苯(2000ml)和乙酸(200ml)中。将反应混合物加热回流(～105℃)2小时。将反应混合物冷却到室温，真空浓缩，除去所有甲苯和过量乙酸。然后将其悬浮在水(1.5L)中，用40％氢氧化钠碱化至pH为12，并用二氯甲烷(2×4L)萃取。合并有机物，用50％盐水/水(20L)洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，真空除去溶剂，得到粗制产物，其为橘黄色油状物。通过硅胶色谱法(用100％乙酸乙酯至15％MeOH/乙酸乙酯的梯度进行洗脱)对残余物进行纯化，得到小标题产物(72.5g，60％收率)。
¹H NMR(400.132MHz，CDCl₃)δ3.88(1H，t)，1.39(9H，d)，1.80(2H，d)，2.12(2H，t)，2.24(2H，q)，2.83(2H，q)，3.07(2H，d)，3.58(2H，s)，3.88(1H，t)，7.32(5H，m)。
步骤3.
4-(3-乙基-5-(丙-2-基)-1，2，4-三唑-4-基)哌啶的制备

在氩气气氛下向1-苄基-4-(3-乙基-5-(丙-2-基)-1，2，4-三唑-4-基)哌啶(96g)于乙醇(1.44L)中的溶液中加入10％钯/炭(5g)。使用5巴的压力对所得混合物进行氢化。使混合物过滤通过硅藻土垫，用另外量的乙醇进行洗涤。真空除去有机物，用乙醚对所得固体进行浆化，得到标题化合物(56.4g，82％收率)。
¹H NMR(400.132MHz，CDCl₃)δ1.38(s，3H)，1.39(d，6H)，1.84(dd，2H)，2.13(qd，2H)，2.32(s，1H)，2.74(td，2H)，2.84(q，2H)，3.11(五重峰，1H)，3.28(dd，2H)，3.98(qt，1H)。
实施例2
如下测量本发明化合物抑制MIP-1β(CCL-4)结合的能力：
通过如下方法产生同种异体反应性T细胞系(allo-reactive T cell line)：将人外周血单核细胞(PBMCs)暴露于L-DR4/B7成纤维细胞(用戊二醛固定液(glutaraldehyde fixation)和辐射来固定(immobilize))，随后用抗CD3和IL-2扩大培养(expansion)14天。将所得同种异体T细胞冷冻。当需要时，使细胞生长并用经辐射的HLA-DR4+ve PBMCs再次刺激，以及用抗CD3和IL-2扩大培养。培养21至34天后，由细胞制备膜。将这些膜在96孔板中与浓度为2nM的放射标记的CCR5拮抗剂即[³H]1-{(3R)-3-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]丙基}-4-(2-{[4-(甲基磺酰基)苯基]磺酰基}乙基)哌啶和各种浓度的本发明化合物在室温孵育2小时。然后使用Packard Unifilter收获器将板收获到GF/B滤板(已经将其在4℃预浸泡在含有0.2％BSA的0.3％PEI中10分钟)上，使用10次洗涤步骤。通过闪烁计数法确定保留在滤板上的[³H]1-{(3R)-3-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]丙基}-4-(2-{[4-(甲基磺酰基)苯基]磺酰基}乙基)哌啶的量。得到有关本发明化合物的竞争曲线，并且对置换50％已结合的1-{(3R)-3-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(甲基磺酰基)苯基]丙基}-4-(2-{[4-(甲基磺酰基)苯基]磺酰基}乙基)哌啶的浓度(IC₅₀)进行计算。
来自该试验的有关本发明4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶和比较例化合物A的结果呈现在表I中。
表I
  化合物 IC₅₀(μM)  比较例化合物A  0.032  4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基  -4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶  0.0065
实施例3
通过如下方法计算大鼠药代动力学(PK)参数即血液清除率(CL)、分布容量(volume of distribution)(Vdss)和半衰期(t1/2)：在静脉内给药(给予)所配制的测试化合物后在不同的所定义的时间点从大鼠采集全血样品，确定其中的测试化合物浓度(暴露量)。大鼠PK参数即生物利用度(F)是通过如下方法计算的：在口服给药(给予)所配制的测试化合物后在不同的所定义的时间点从大鼠采集全血样品，确定其中的测试化合物浓度(暴露量)，然后对剂量归一化的总口服暴露量(AUCpo)与剂量归一化的总静脉内暴露量(AUCiv)的比率进行比较。吸收分数(Fraction absorbed，Fabs)是次级(secondary)PK参数，其通常由所知道的测试化合物的清除率(CL)和生物利用度(F)来计算。用于确定Fabs的方程如下所示：
Fabs＝F/((1-CL/Qh)×100)
其中Qh是物种肝脏的血液流量(ml/min/kg)。
对于静脉内给药，将测试化合物溶解在二甲基乙酰胺(DMA)中，然后用水稀释，以使最终测试化合物浓度为1mg/ml，制剂的组成为40％DMA：60％水。然后通过尾静脉将测试化合物制剂以2ml/kg体重的剂量体积(dose volume)给药至雄性大鼠(n＝2，Alderley Park Han Wistar品系)，从而使每只大鼠接受2mg/kg体重的总测试化合物剂量。静脉内给药后的血液采样是通过尾静脉针头粘着穿刺(needle stick puncture)进行的并且在设计上是连续的：在给药后的5、20、40、90、180、360、720和1440(心脏穿刺)分钟采集两只大鼠的血液样品。
对于口服给药，将测试化合物溶解在二甲基亚砜(DMSO)中，然后用羟甲基纤维素(HPMC)0.5％w/v-Tween 80(0.1％v/v)进行稀释，从而使最终的测试化合物浓度为1mg/ml，制剂的组成为5％DMSO：95％HPMC/Tween。然后通过口服强饲法(oral gavage)将测试化合物制剂以2ml/kg体重的剂量体积给药至雄性大鼠(n＝2，Alderley Park Han Wistar品系)，从而使每只大鼠接受2mg/kg体重的总测试化合物剂量。口服给药后的血液采样是通过尾静脉针头粘着穿刺进行的并且在设计上是连续的：在给药后的15、30、60、120、180、360、720和1440(心脏穿刺)分钟采集两只大鼠的血液样品。将所有血液样品收集在肝素锂管(lithium heparin tube)中以防止凝结。然后将血液的等分试样用水以1∶1稀释，然后冷冻在-20℃，之后进行测定以确定测试化合物浓度。
通过将已知量的测试化合物加入到空白稀释(1∶1)的血液样品中来制备校正用标准品样品(calibration standard sample)。然后对校正用标准品和未知样品进行稀释，并与3份冰冷却的乙腈(含有合适的内标)混合以使具有蛋白质性质的物质沉淀。离心后，通过HPLC连同MS/MS(三重四极杆质谱仪(triple quad mass spectrometry))检测对样品和校正用标准品上清液中的测试化合物浓度进行分析。通过参考从校正用标准品样品构建的标准曲线对从大鼠采集的血液样品中的测试化合物浓度进行定量。
然后将血液浓度-时间点数据和其它信息例如IV(静脉内注射)和PO(口服)剂量录入到商购的非线性回归软件程序(WinNonLin version 4.1，PharsightCorporation)中并通过其进行分析，确定感兴趣的大鼠PK参数(如上所述)。
有关4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶-1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶和比较例化合物A的雄性大鼠PK参数总结在下面表II中。
表II
  化合物  CL(ml/min/kg)  Vdss(L/kg)  T1/2(hr) F(％)  比较例化合物A  37  4.9  2.7  1  4-{(1R，3R)-1-(3，5-二氟苯基)-3-[4-(3-乙  基-5-异丙基-4H-1，2，4-三唑-4-基)哌啶  -1-基]丁基}-1-(甲基磺酰基)哌啶  18  4.1  4.0  28