一种葛根总黄酮的提取方法及其改善肉鸡生产性能及鸡肉品质的方法.pdf

本发明公开了一种葛根总黄酮的提取方法，其步骤为：（1）洗净并切成小块；（2）加入乙醇溶液，浸渍后取出浸渍液；（3）将浸渍液混合后上大孔吸附树脂柱，乙醇洗脱，收集洗脱液；（4）将洗脱液进行浓缩，再过滤去除沉淀物；（5）滤液浓缩，萃取，浓缩、干燥。本发明还公开了葛根总黄酮改善肉鸡生产性能及鸡肉品质的方法。葛根总黄酮是一种含有酚羟基的黄酮类化合物,其主要成分是异黄酮类化合物。葛根总黄酮具有提高抗氧化酶活性，减少MDA生成，减弱自由基介导的脂质过氧化反应对机体的损害，增强机体抗氧化损伤的。本发明将葛根总黄酮添加到肉鸡生产中，避免人工合成的添加剂在肉鸡中的残留，同时改善肉鸡生产性能及鸡肉品质。

1.  一种葛根总黄酮的提取方法，其步骤为：
（1）取葛根药材，洗净并切成小块；
（2）加入为葛根药材6～10倍体积的30～80%乙醇溶液，浸渍0.5～2小时后取出浸渍液，每份葛根药材提取1～3次；
（3）将浸渍液混合后上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱杂质，再用30～70%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；
（4）将收集的乙醇洗脱液进行浓缩，浓缩后，加乙醇使浓缩液中乙醇浓度达70～80%，再过滤去除沉淀物；
（5）滤液浓缩，加正丁醇萃取，回收正丁醇，浓缩、干燥，葛根黄酮得率为5-10%，葛根总黄酮提取物中葛根素含量为50～80%。

2.  一种权利要求1所述的葛根总黄酮改善肉鸡生产性能及鸡肉品质的方法，其特征在于，在肉鸡的每千克基础日粮中添加的10～1000mg葛根总黄酮。

3.  如权利要求2所述的葛根总黄酮改善肉鸡生产性能及鸡肉品质的方法，其特征在于，每千克基础日粮中优选添加10～500mg葛根总黄酮。

4.  如权利要求2或3所述的葛根总黄酮改善肉鸡生产性能及鸡肉品质的方法，其特征在于，每千克基础日粮中优选添加10～250mg葛根总黄酮。

一种葛根总黄酮的提取方法及其改善肉鸡生产性能及鸡肉品质的方法
技术领域
本发明属于肉鸡生产中的添加剂技术领域，具体涉及葛根总黄酮改善肉鸡生产性能及鸡肉品质的方法。
背景技术
随着现代饲料工业的快速发展，大量人工合成的添加剂如抗生素、促长素、驱虫剂、激素、调味剂、改良剂、防腐剂在饲料中普遍添加。但随着研究的深入，人们逐渐认识到这些添加剂给人和动物健康带来的危害，如导致产生的耐药性和药物残留，已成为肉类食品中的一种新的污染源。同时，由于集约化养殖的发展以及全价饲料的普及，肉鸡的生长速度较以往有较大提髙，但其肉质风味却有下降之势。而中草药由于其天然性、毒副作用少、抗药性不显著以及多功能性等特点，已经成为人们开拓饲料添加剂的新来源。
葛根为豆科植物野葛或粉葛的干燥根，具有解肌退热、升阳止泻、透疹生津的功效。葛根中含有总黄酮活性成分，包括葛根素、大豆苷、大豆苷元等异黄酮类化合物。从理论上分析, 葛根总黄酮具有提高抗氧化酶活性, 减少MDA 生成, 减弱自由基介导的脂质过氧化反应对机体的损害, 增强机体抗氧化损伤的。
发明内容
本发明要解决的技术问题是提供葛根总黄酮提取物作为植物活性成分制备成饲料添加剂应用于肉鸡生产中，使用葛根总黄酮改善肉鸡生产性能及鸡肉品质的方法。
本发明通过以下技术方案解决上述技术问题：
一种葛根总黄酮的提取方法，其步骤为：
（1）取葛根药材，洗净并切成小块；
（2）加入为葛根药材6～10倍体积的30～80%乙醇溶液，浸渍0.5～2小时后取出浸渍液，每份葛根药材提取1～3次；
（3）将浸渍液混合后上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱杂质，再用30～70%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；
（4）将收集的乙醇洗脱液进行浓缩，浓缩后，加乙醇使浓缩液中乙醇浓度达70～80%，再过滤去除沉淀物；
（5）滤液浓缩，加正丁醇萃取，回收正丁醇，浓缩、干燥，葛根黄酮得率为5～10%。葛根总黄酮提取物中葛根素含量为50～80%。
葛根总黄酮改善肉鸡生产性能及鸡肉品质的方法，其特征在于，在肉鸡的每千克基础日粮中添加的10～1000mg葛根总黄酮。
为了获得更好的技术效果，每千克基础日粮中优选添加10～500mg葛根总黄酮；每千克基础日粮中优选添加10～250mg葛根总黄酮。
葛根总黄酮是葛根的乙醇提取物,它是一种含有酚羟基的黄酮类化合物,其主要成分是异黄酮类化合物，这类化合物的主要成分为大豆甙、大豆甙元和葛根素。从理论上分析, 葛根总黄酮具有提高抗氧化酶活性，减少MDA 生成, 减弱自由基介导的脂质过氧化反应对机体的损害, 增强机体抗氧化损伤的。本发明将天然的葛根总黄酮这一活性成分，添加到肉鸡生产中，避免人工合成的添加剂如抗生素、促长素、驱虫剂、激素、调味剂、改良剂、防腐剂肉鸡中的残留，同时改善肉鸡生产性能及鸡肉品质。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明做进一步描述，但本发明并不限于实施例所述范围。
实施例1
一种葛根总黄酮的提取方法，其步骤为：
（1）取葛根药材，洗净并切成小块；
（2）加入为葛根药材6～10倍体积的30～80%乙醇溶液，浸渍0.5～2小时后取出浸渍液，每份葛根药材提取1～3次；
（3）将浸渍液混合后上大孔吸附树脂柱，先用水洗脱杂质，再用30～70%的乙醇洗脱，收集乙醇洗脱液；
（4）将收集的乙醇洗脱液进行浓缩，浓缩后，加乙醇使浓缩液中乙醇浓度达70～80%，再过滤去除沉淀物；
（5）滤液浓缩，加正丁醇萃取，回收正丁醇，浓缩、干燥，葛根黄酮得率为5～10%。葛根总黄酮提取物中葛根素含量为50～80%。
对通过上述方法获得的葛根总黄酮含量进行测定：采用高效液相色谱法测定葛根总黄酮的含量。称取5.6mg葛根黄酮粉末于小瓶中，加10mL质量分数为60%的乙醇，超声波溶解。用葛根素做标准曲线，用高效液相色谱仪取10uL测定，测得葛根中葛根素含量为73.17%。
实施例2
葛根总黄酮改善肉鸡生产性能及鸡肉品质的方法，其特征在于，在肉鸡的基础日粮中添加的葛根总黄酮。
（1）选用1日龄AA肉鸡275只，初重在45-50g，随机分成5个处理组，每组5个重复，每个重复11羽（见表1）。试验前对鸡舍及周边的环境和试验用具进行彻底消毒处理。试验鸡采用笼养，试验期内控制温度、湿度、光照和自然通风，第 1、2 天鸡舍 24h/d 光照，之后为23h/d，即在晚上停止照明1h。第1周保持舍温在 32-34℃，之后温度达到24℃就结束供暖。自由采食和饮水，按常规程序免疫。试验时间为期42天。
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（2）生产性能的测定 
试验期间，每天以每个重复为单位记录供试肉鸡的采食量，并在第7、14、21、28、35、42日对全部试验鸡称重，计算试验肉鸡平均日增重(ADG) 、平均日采食量 ( ADFI) 和料重比 ( F/G) 。测定结果见表2、3、4。
（3）免疫功能的测定
在第21d和42d，每个重复随机选取2只体重相近的健康鸡，空腹翅静脉采血。血液样品在3000r离心，分离血清，采用酶联免疫技术测定血清中的免疫球蛋白 IgA、IgM、IgG的含量。测定结果见表5。
（4）肌肉理化性质分析：在试验的第42d，从每个重复随机取2只鸡（公母各半），测定胸肌、腿肌肉色、pH值、剪切力、失水率等。结果见表6，7。
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由表2可见，与对照组相比，添加葛根总黄酮对肉鸡1-7d的日增重无显著影响（P>0.05）；在第7-14d，添加低剂量、较高剂量葛根总黄酮后肉鸡日增重比对照组分别提高了6.21%（P<0.05）、6.06%（P<0.05），高剂量葛根总黄酮添加组与对照组之间无显著差异（P>0.05）；在第14-21d、21-28d、28-35d和35-42d，添加低剂量（10-50mg/kg）葛根总黄酮后肉鸡日增重比对照组分别提高了9.71%、20.11%、26.62%和23.63%（P<0.05），其他处理组与对照组无显著差异（P>0.05）。
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由表3的结果可知，与对照组相比较，添加不同水平的葛根总黄酮对AA肉鸡在各个生长阶段的日采食量影响均不显著（P>0.05）。
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料重比是衡量肉鸡养殖效益的重要指标。料重比越低，表明肉鸡的饲料转化率越高，饲料报酬越高，饲养的效益越好。由表5可见，与对照组相比，添加葛根总黄酮对肉鸡1-7d、7-14d的料重比均无显著影响（P>0.05）；在14-21d、28-35d、35-42d，随着葛根总黄酮添加水平的提高，肉鸡料重比呈现升高的趋势；其中，添加低剂量（10-50mg/kg）的葛根总黄酮组的料重比与对照组相比分别降低了9.21%、18.36%、17.98%（P<0.05）。而在第21-28d，添加中剂量（50-100mg/kg）的葛根总黄酮组的料重比比对照组降低了12.24%（P<0.05）。
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血清免疫球蛋白主要存在于动物血清中，其含量的高低是反映机体免疫系统状况的重要指标，它在一定程度上反映了哺乳动物抵抗外界病原菌和病毒侵袭的能力。
由表5可见，与对照组相比，各个葛根黄酮添加组肉鸡血清免疫球蛋白均有上升趋势，其中，在21日龄时：低剂量添加组IgA和IgG分别比对照组提高了43.86%（P<0.05）和112.66%（P<0.05），高剂量添加组的IgG和IgM比对照组提高了82.28%（P<0.05）和31.58%（P<0.05）；42日龄时：低剂量添加组IgG比对照组提高了63.18%（P<0.05），高剂量添加组的IgA提高了80.00%，四个葛根黄酮添加组的IgM分别比对照组提高了71.11%（P<0.05）、82.22%（P<0.05）、36.67%（P<0.05）和33.33%（P<0.05）。
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肉色是鸡肉胴体指标最重要的一项，是消费者评价鸡肉品质的第一感官，肉色的好坏会直接决定消费者是否会购买。肉色的变化一般通过L、a和b等参数值来体现，其中L表示亮度，受肌红蛋白含量和肌肉中沉积的脂肪含量影响；a代表红度，表示肌红蛋白的含量；b表示黄度，受饲料色素的影响，比如说胡萝卜素。一般来说，肉色a值（红度）提高，L值（亮度）和b值（黄度）下降，则表现肌肉颜色越鲜艳、红润，更容易受到消费者的喜爱。
由表6可见，与对照组相比，添加低剂量（10-50mg/kg）的葛根总黄酮可显著提高肉鸡42d屠宰后胸肌的红度（a），降低亮度（L）；添加中剂量（50-100mg/kg）的葛根总黄酮显著降低了胸肌的黄度（b）。此外，添加较高剂量（100-250mg/kg）的葛根总黄酮可提高肉鸡腿肌的红度（a），降低其亮度（L）和黄度（b）。综合得知，添加一定剂量（10～250mg/kg）的葛根总黄酮能更好程度改善AA肉鸡肉色。
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由表7可见，与对照组相比，添加葛根总黄酮对AA肉鸡屠宰后肌肉pH值和滴水损失的影响不显著（P>0.05）。但是中剂量（50～100mg/kg）和较高剂量（100～250mg/kg）葛根总黄酮添加组的胸肌剪切力显著低于对照组（P<0.05）。肉的嫩度是消费者最重视的使用品质之一，它决定了肉在食用时口感的老嫩，是反映肉质地的指标。嫩度是人们对肌肉口感满意程度的指标，一般用剪切力表示嫩度的高低，剪切力值越大，肌肉嫩度越小，反之则嫩度越大。本试验结果表明添加50～250mg/kg葛根黄酮可改善鸡肉的嫩度。
综上所述，葛根总黄酮在肉鸡中的应用效果表明，添加10～50mg/kg可显著提高肉鸡日增重，降低料重比，增强肉鸡免疫功能，从而改善肉鸡生产性能；添加10～250mg/kg可提高鸡肉的嫩度，改善鸡肉的颜色，使肌肉品质更好。