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利用类固醇作为VNO的神经化学刺激物减轻PMS和焦虑症状.pdf

上传人：Y948****062 文档编号：279673 上传时间：2018-02-07 格式：PDF 页数：414 大小：7.89MB
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摘要
申请专利号：

CN97196761.X

 申请日：

1997.07.23
公开号：

CN1226837A

 公开日：

1999.08.25
当前法律状态：

终止

 有效性：

无权
法律详情：

专利权的视为放弃||||||公开
IPC分类号：

A61K51/04; C07J71/00

 主分类号：

A61K51/04; C07J71/00
申请人：

费林药业公司;
发明人：

克莱福·L·坚宁斯－怀特; 大卫·L·伯宁纳; 纳森·W·亚当斯; 路易斯·布洛克－蒙蒂
地址：

美国加利福尼亚州
优先权：

1996.07.23 US 08/686,092; 1996.10.04 US 08/725,862
专利代理机构：

永新专利商标代理有限公司

 代理人：

程伟
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内容摘要

本发明涉及一种减轻PMS和焦虑症状的方法。这种方法包括由鼻施用一种类固醇,这种类固醇是一种人类犁鼻骨外激素,从而使这种犁鼻骨外激素与特定的神经上皮受体结合。这种或多种类固醇优选地以含有一种或多种药学适宜载体的药物成分的形式施用。

权利要求书

1： 一种治疗个人经前焦虑症的方法，所述方法包括：    提供一种与位于所述个人鼻腔神经上皮细胞的受体结合 的类固醇，所述细胞是除了嗅觉上皮以外的部分组织；及     向所述个人的鼻通道内施用所述有效剂量的所述类固 醇，从而使所述类固醇专一性地与所述受体结合，导致所述 个人的所述病症的缓解。
2： 根据权利要求1所述的方法，其中，所述神经上皮细胞位于所 述个人的犁鼻骨器官内。
3： 根据权利要求2所述的方法，所述类固醇包含具有如下通式的 孕烷： 其中，P 1 在由氧基、α-(β-)羟基、α-(β-)乙酸基、α- (β-)丙酸基、α-(β-)甲氧基、α-(β-)低级酰氧基、α- (β-)低级烷基氧和α-(β-)苯甲酰基构成的范围内选择；P 2 从由甲基、羟甲基、酰氧基甲基、烷氧基甲基、低级烷基、 羟基烷基、酰氧基烷基、烷氧基烷基组成的范围选择；P 3 在 氢、氧基、卤元素、羟基、烷氧基和酰氧基中选择；独立 地，P 4 到P 12 每个可以是氢、卤元素、甲基、或一卤、二卤或 全卤代甲基；P 13 是氢、甲基、亚甲基、卤代甲基或卤代亚甲 基、乙基、乙烯基、乙炔基、甲基-亚甲基或甲基-次甲基；且 “a”、“b”、“c”、“d”、“e”、“h”、“i”、“j”和“k”是可选择的双键 的位置，“j”或“k”还可以是三键；并且当P 2 是甲基和P 3 是β-羟 基时，P 2 和P 3 可以结合形成环醚。
4： 根据权利要求3所述的方法，其中“b”是双键。
5： 根据权利要求4所述的方法，其中“e”或“d”是双键。
6： 根据权利要求3所述的方法，其中“a”和“c”是双键。
7： 根据权利要求3所述的方法，其中“h”是可选的双键，且“i”和 “j”不存在。
8： 根据权利要求3所述的方法，其中是双键“j”是双键。
9： 根据权利要求3所述的方法，其中“j”是三键。
10： 根据权利要求2所述的方法，其中所述类固醇包含具有如下通 式的19-降孕烷： 其中，P 1 是氧基、α-或β-羟基、α-或β-乙酸基、α-或β-丙酸 基、α-或β-低级烷氧基、α-或β-低级酰氧基、或α-或β-苯甲酰 基； “a”、“b”、“c”、“d”、“e”、“f”、“g”、“h”、“i”、“j”、“m”和 “n”是可选的双键的位置，“k”可以不存在，若存在则与“j”形成 三键； P 2 是羟基、氢、含1到6个碳原子的低级烷氧基，或P 2 不存 在； P 3 是氧基、氢、羟基、含1到6个碳原子的低级烷氧基或卤 元素； P 4 是甲基或乙基； P 5 是氢、甲基和卤元素； P 6 是氢或甲基； 独立地，R’和R”是氢或卤元素，或不存在。
11： 根据权利要求10所述的方法，其中“a”、“e”和“d”是双键。
12： 根据权利要求11所述的方法，其中“h”是双键。
13： 根据权利要求11所述的方法，其中“g”是双键。
14： 根据权利要求13所述的方法，其中“n”是双键。
15： 根据权利要求10所述的方法，其中“d”是双键。
16： 根据权利要求15所述的方法，其中“b”是双键。
17： 根据权利要求15所述的方法，其中“c”是双键。
18： 根据权利要求17所述的方法，其中“f”是双键。
19： 根据权利要求2所述的方法，其中所述类固醇是具有如下通式 的雌烯： 其中，R 1 从主要由含一个或两个氢原子、甲基、亚甲基、和 一个或两个卤原子组成的范围中选择；R 2 不存在或从主要由 氢和甲基构成的范围中选择；R 3 从主要由氧基、羟基、低级 烷氧基、低级酰氧基、苯甲酰基、π介子氰基 (CYPIONYL)、葡糖苷酸、磺酰基组成的范围中选择；R 4 从主要由氢、羟基、低级烷氧基、低级酰氧基和卤元素的范 围内选择；R 5 不存在或从由氢、羟基、低级烷氧基和低级酰 氧基的范围内选择；R 6 是氢或卤元素；且“a”表示所述类固醇 的A环可选的芳烃不饱和位置，或“b”、“c”和“d”每个都是可选 的双键；“e”、“f”、“g”、“h”、“i”和“j”每个都是可选的双键； 且“e”可能与C 16 和C 17 形成一个环氧环。
20： 根据权利要求19所述的方法，其中“a”存在且“g”、“h”或“i”是可 选的双键。
21： 根据权利要求20所述的方法，其中“h”和“i”都是双键。
22： 根据权利要求19所述的方法，其中“b”是双键。
23： 根据权利要求19所述的方法，其中“j”是双键。
24： 根据权利要求19所述的方法，其中“c”是双键。
25： 根据权利要求19所述的方法，其中“c”和“d”都是双键。
26： 根据权利要求19所述的方法，其中R 2 是甲基且“e”是双键。
27： 根据权利要求19所述的方法，其中所述类固醇从由雌-4,16-二 烯-3-酮，雌-1,3,5(10),16-四烯-3-醇，10-雌-4,16-烯-3α-醇， 雌-4,9(10),16-三烯-3-酮，雌-1,3,5(10),16-四烯-3-醇-6-酮，3-甲 氧基-雌-2,5(10),16-三烯，雌-5(10),16-二烯-3α-醇，和雌- 1,3,5(10),16-四烯-3,6α-二醇组成的范围内选择。
28： 根据权利要求19所述的方法，其中R 5 是甲基。
29： 根据权利要求28所述的方法，其中所述类固醇从基本由雌- 1,3,5(10)-三烯-3-醇，雌-1,3,5(10),6-四烯-3-醇，和雌- 1,3,5(10),7-四烯-3-醇组成的范围内选择。
30： 根据权利要求19所述的方法，其中R 1 是亚甲基。
31： 根据权利要求30所述的方法，其中所述类固醇是17-亚甲基-雌 -1,3,5(10),6,8(9)六烯-3-醇。
32： 根据权利要求19所述的方法，其中R 1 是亚甲基或是单个氢原 子，且R 2 是甲基。
33： 根据权利要求19所述的方法，其中“f”是双键且R 2 是甲基。
34： 根据权利要求33所述的方法，其中至少一种雌烯类固醇是从 由1,3,5(10),16-雌四烯-3-甲基醚，醇，1,3,5(10),16-雌四烯-3- 醇，1,3,5(10),16-雌四烯-3-基乙酸盐，和1,3,5(10),16-雌四烯-3- 基丙酸盐组成的范围内选择的。
35： 根据权利要求33所述的方法，其中雌烯类固醇是1,3,5(10)16- 四烯-3-醇。
36： 根据权利要求19所述的方法，其中雌烯是雌-4,16-二烯-10β-醇 -3-酮。
37： 根据权利要求19所述的方法，其中“e”与C 16 和C 17 形成一个环氧 环。
38： 根据权利要求37所述的方法，其中所述雌烯是16α,17α-环氧- 雌-1,3,5(10)-三烯-3-醇。
39： 根据权利要求37所述的方法，其中所述雌烯是16α,17α-环氧雌 -4-烯-10β-醇-3-酮。
40： 根据权利要求2所述的方法，其中所述类固醇是具有如下通式 的雄烷： 其中，P 1 在由氧基、α-(β-)羟基、α-(β-)乙酸基、α- (β-)丙酸基、α-(β-)甲氧基、α-(β-)低级酰氧基、α- (β-)低级烷基氧和α-(β-)苯甲酰基构成的范围内选择；P 2 从由甲基、羟甲基、酰氧基甲基、烷氧基甲基、低级烷基、 羟基烷基、酰氧基烷基、烷氧基烷基组成的范围选择；P 3 不存 在或从由甲基、羟甲基、酰氧基甲基、烷氧基甲基、低级烷 基、羟基烷基、酰氧基烷基、烷氧基烷基组成的范围选择；P 4 从由氢、氧基、卤元素、羟基、烷氧基和酰氧基组成的范围 内选择；P 5 表示一个或两个取代基，其中P 5 由一个或两个氢原 子、甲基、亚甲基、或一个或两个卤素原子构成；P 6 是氢或卤 元素；且“a”、“b”、“c”、“d”、“e”、“f”和“h”是可选的双键位 置。
41： 根据权利要求40所述的方法，其中“b”是双键。
42： 根据权利要求41所述的方法，其中“c”或“d”是双键。
43： 根据权利要求40所述的方法，其中“a”和“c”都是双键。
44： 根据权利要求40所述的方法，其中P 3 是甲基，“h”是可选的双 键，且P 5 是亚甲基或一个或两个氢原子。
45： 根据权利要求40所述的方法，其中P 3 是甲基，“h”是双键。
46： 根据权利要求45所述的方法，其中所述类固醇从由雄-5,16-烯 -3α-醇，雄-4,6,16-三烯-3-酮，雄-4,16-二烯-3,6-二酮，19-羟基 -雄-4,16-二烯-3-酮，3-甲氧基-雄-3,5,16-三烯，和6-羟基-雄- 4,16-二烯-3酮组成的范围内选择。
47： 根据权利要求40所述的方法，其中P 3 是甲基。
48： 根据权利要求47所述的方法，其中所述类固醇是雄-4-烯-3- 酮。
49： 根据权利要求40所述的方法，其中P 5 是亚甲基。
50： 根据权利要求49所述的方法，其中所述类固醇从20-高-雄-4, 17-二烯-3-醇，20-高-雄-4,17-二烯-3β-醇，和20-高-雄-4,17-二 烯-3,6-二醇组成的范围内选择。
51： 根据权利要求40所述的方法，其中P 5 是甲基且“f”是双键。
52： 根据权利要求40所述的方法，其中“a”或“b”是双键。
53： 根据权利要求40所述的方法，其中至少一种雄烷类固醇是从 雄-4,516-二烯-3-酮，雄-4,16-二烯-3α-醇，和雄-4,16-二烯-3β- 醇组成的范围内选择的。
54： 根据权利要求53所述的方法，其中所述类固醇是雄-4,16-二烯- 3-酮。
55： 根据权利要求53所述的方法，其中所述的类固醇是雄-4,16-二 烯-3β-醇。
56： 根据权利要求2所述的方法，其中所述类固醇是具有如下通式 的19-降胆烷： 其中，P 1 是氧基、α-或β-羟基、α-或β-乙酸基、α-或β-丙酸 基、α-或β-低级烷氧基、α-或β-低级酰氧基或α-或β-苯甲酸 基； “a”、“b”、“c”、“d”、“e”、“f”、“g”、“h”、“i”、“j”、“m”、 “s”、“n”是可选的双键的位置，“k”可以不存在，若存在，则与 “j”形成三键； P 2 是羟基、氢、含1到6个碳原子的低级烷氧基，或P 2 不存 在； P 3 是氧基、氢、羟基、含1到6个碳原子的低级烷氧基或卤 元素； P 4 是甲基或乙基； 独立地，P 5 和P 7 每个是氢、甲基和卤元素； P 6 是氢或甲基； 独立地，R’和R”是氢或卤元素，或不存在，或共同形成 =CH 2 ； 及q是一个从0到2的整数； 在所述个人鼻腔神经上皮细胞，其中所述细胞是除嗅觉 上皮以外的部分组织；及， 向所述个人的鼻通道内施用所述19-降胆烷，从而使所述 19-降胆烷专一性地与所述受体结合，改变所述个人的下丘脑 的功能。
57： 根据权利要求56所述的方法，其中“a”、“e”和“d”是双键。
58： 根据权利要求57所述的方法，其中“h”是双键。
59： 根据权利要求57所述的方法，其中“g”是双键。
60： 根据权利要求59所述的方法，其中“n”是双键。
61： 根据权利要求56所述的方法，其中“d”是双键。
62： 根据权利要求61所述的方法，其中“b”是双键。
63： 根据权利要求56所述的方法，其中“c”是双键。
64： 根据权利要求51所述的方法，其中“s”是双键。
65： 根据权利要求1到64所述的方法，其中施用的所述类固醇的量 是至少约100皮克，但不超过约100微克。
66： 根据权利要求65所述的方法，其中施用的所述类固醇的量是 至少约1纳克，但不超过约10微克。
67： 根据权利要求66所述的方法，其中施用的所述类固醇的量是 至少约10纳克，但不超过约1微克。
68： 根据权利要求65所述的方法，其中所述类固醇是在油膏中施 用。
69： 根据权利要求65所述的方法，其中所述类固醇是在液体中施 用。
70： 根据权利要求65所述的方法，其中所述类固醇是通过气雾即 施用。
71： 一种治疗个人焦虑症的方法，所述方法包括： 提供一种与位于所述个人鼻腔神经上皮细胞的受体结合 的类固醇，所述细胞是除了嗅觉上皮以外的部分组织；以及 向所述个人的鼻通道内施用所述有效剂量的所述类固 醇，从而使所述类固醇专一性地与所述受体结合，导致所述 个人的所述病症的缓解。
72： 根据权利要求71所述的方法，其中所述个人为女性。
73： 根据权利要求71所述的方法，其中所述个人为男性。
74： 一种改变个人体温的方法，所述方法包括： 提供一种与位于所述个人鼻腔神经上皮细胞的受体结合 的类固醇，所述细胞是除了嗅觉上皮以外的部分组织；以及 向所述个人的鼻通道内施用所述有效剂量的所述类固 醇，从而使所述类固醇专一性地与所述受体结合，导致所述 个人的体温改变。
75： 一种治疗个人阵发性心搏过速的方法，所述方法包括： 提供一种与位于所述个人鼻腔神经上皮细胞的受体结合 的类固醇，所述细胞是除了嗅觉上皮以外的部分组织；及， 向所述个人的鼻通道内施用所述有效剂量的所述类固 醇，从而使所述类固醇专一性地与所述受体结合，导致所述 个人的所述病症的缓解。
76： 一种具有如下通式的类固醇： 其中，R 1 在主要由一个或两个氢原子、含1到10个碳原子的烷 基构成的范围内选择；R 2 不存在或在主要由氢、甲基、和与 C 17 形成环氧环的氧组成的范围内选择；R 3 从主要由氧基、羟 基、低级烷氧基、低级酰氧基、苯甲酰基、π介子氰基 (CYPIONYL)、葡糖苷酸、和磺酰基组成的范围内选择； R 4 从基本由氢、羟基、低级烷氧基、低级酰氧基和卤元素组 成的范围内选择；R 5 不存在或从主要由氢、羟基、低级烷氧 基和低级酰氧基组成的范围内选择；R 6 是氢或卤元素；且“a” 表示所述类固醇的A环可选的芳烃不饱和位置，或“b”、“c”和 “d”每个都是可选的双键；“g”、“h”、“i”和“j”每个都是可选的 双键；且“e”可以与C 16 和C 17 形成一个环氧环；“f”可以与C 13 和 C 17 形成一个环氧环；且“k”可以与C 17 和C 20 形成一个环氧环。
77： 根据权利要求76所述的一种类固醇是16α,17α-环氧-雌-4-烯- 10β-醇-酮。
78： 根据权利要求76所述的一种类固醇是雌-4,16-二烯-10β-醇- 酮。
79： 根据权利要求76所述的一种类固醇是17α,20α-环氧-19-降孕- 1,3,5(10)-三烯-3-醇。
80： 根据权利要求76所述的一种类固醇是16α,17α-环氧孕-4-烯-3- 酮。
81： 根据权利要求76所述的一种类固醇是13,17-环氧-10,17-二甲基 甾-4-烯-3-酮。
82： 根据权利要求76所述的一种类固醇是16α,17α-环氧-19,21-双降 胆-4-烯-10β-醇-3-酮。
83： 一种改变个人下丘脑功能的方法，所述方法包括向所述个人 鼻腔神经上皮细胞的化学受体提供一种类固醇，所述细胞是 除了具有如下通式的嗅觉上皮以外的部分组织： 其中，R 1 在主要由一个或两个氢原子、含1到10个碳原子的烷 基构成的范围内选择；R 2 不存在或在主要由氢、甲基、和与 C 17 形成环氧环的氧组成的范围内选择；R 3 从主要由氧基、羟 基、低级烷氧基、低级酰氧基、苯甲酰基、π介子氰基 (CYPIONYL)、葡糖苷酸、和磺酰基组成的范围内选择； R 4 从主要由氢、羟基、低级烷氧基、低级酰氧基和卤元素组 成的范围内选择；R 5 不存在或从主要由氢、羟基、低级烷氧 基和低级酰氧基组成的范围内选择；R 6 是氢或卤元素；且“a” 表示所述类固醇的A环可选的芳烃不饱和位置，或“b”、“c”和 “d”每个都是可选的双键；“g”、“h”、“i”和“j”每个都是可选的 双键；且“e”可以与C 16 和C 17 形成一个环氧环；”f”可以与C 13 和 C 17 形成一个环氧环；及“k”可以与C 17 和C 20 形成一个环氧环； 及， 向所述个人的鼻通道内施用所述类固醇，从而使所述类 固醇专一性地与所述化学受体结合，改变所述个人的下丘脑 的功能。

说明书


利用类固醇作为VNO的神经化学刺激物 减轻PMS和焦虑症状

    【相关申请的交叉引用】

    本发明是于1996年10月4日提交的美国专利申请08/725,862的部分继续再申请，后者又是于1996年7月23日提交的美国专利申请08/686,092的部分继续再申请，后者又是于1996年3月29日提交的美国专利申请08/625,268的部分继续再申请，而后者又是于1994年8月4日提交的美国专利申请08/286,073的部分继续再申请。

    本申请涉及1993年9月28日提交的美国专利申请08/127,908，后者是于1992年6月24日提交的美国专利申请07/903,604的部分继续再申请，后者又是于1991年5月31日提交的美国专利申请07/708,936的部分继续再申请，而后者又是现已放弃的1991年1月7日提交的美国专利申请07/638,185的部分继续再申请。

    本申请还涉及于1993年9月28日提交的美国专利申请08/127,980，后者是于1993年6月15日提交的美国专利申请07/903,604，美国专利申请08/077,359的另一部分继续再申请；本申请还涉及共同转让、共悬未决的标题为“雌烯类固醇作为改变人体下丘脑功能的神经化学引发剂及相关药物成分和方法”并于1992年6月24日提交的美国专利申请07/903,525(它是于1991年5月31日提交的美国专利申请07/707,862的部分继续再申请，后者又是现已放弃的1991年1月7日提交地美国专利申请07/638,743的部分继续再申请)；本申请还涉及共同转让、共悬未决的美国专利申请07/903,525，美国专利申请08/077,140的部分继续再申请。以上所列的美国专利申请都列为参考文献。

    最后，本申请可能涉及于1994年1月11日授权的标题为“含有人体信息素的芳香成分”的美国专利5,278,141和于1993年12月21日授权的标题为“含有人体信息素的芳香成分和其它成分”的美国专利5,272,134。技术领域

    本发明涉及减轻PMS和焦虑症状的方法。相关领域的简述

    本发明涉及一些特定的类固醇及使用这些类固醇作为人体犁鼻骨外激素来改变下丘脑功能，从而影响相应的行为和生理，如减少焦虑，的方法。已被列入参考的还有，Ohloff,G.等(Helv.Chim.Acta(1983)66:192-217)发现一些类固醇(雄烯)具有随不同的同分异构体、非对映异构体和镜像异构体的不同而不同的气味。该族的一些种类据称在一些哺乳动物中作为信息素，例如猪体内的5α-雄甾-16-烯-3-酮和5α-雄甾-16-烯-3-醇(Melrose,D.R.，等，Br.vet.J.(1971)127:497-502)。这些由公猪产生的16-雄烯能促使发情期的母猪产生交配行为(Claus等，《实验》(1979)35:1674-1675)。

    一些研究发现，对于一些种类的动物，某些特定的16-雄烯(包括5α-雄甾-16-烯-3α-醇和5α-雄甾-16-烯-3-酮)的不同特性，如浓度、代谢和位置是雌雄各异的(Brooksbank等，J.Endocr.(1972)52:239-251；Claus等，J.Endocro.(1976)68:483-484；Kwan等，《医疗科学研究》(1987)15:1443-1444)。例如，在男性和女性的末梢血液、唾液和腋窝分泌物发现不同浓度的5α-雄甾-16-烯-3α-醇和5α-雄甾-16-烯-3-酮及雄甾-4,16-二烯-3-酮(Kwan,T.X.等，《医疗科学研究》(1987)15:1443-1444)，且它们作为一定程度上影响人体选择和判断的信息素的功能也被提及(同上；并见Gower等著“腋下气味中有味类固醇的重要性”，于《香水》，第68-72页，Van Toller和Dodd编辑，Champman and Hall出版，1988年；Kirk-Smith D.A.等，《Res.Comm.Psychol.Psychiat.Behav.》(1978)3:379)。在一种男性香水和女性香水的商品(由Jovan生产的男用Andron和女用Andron)中的雄烯醇(5α-雄甾-16-烯-3α-醇)据称有与信息素相似的作用。日本的Kokai No.2295916就是关于含雄烯醇和/或其结构类似物的香水的成分的。在人体的腋下分泌物中也发现了雄二烯-3β-醇(及或许3α-醇)(Gower等，同上，57-60)。另一方面，对于在哺乳动物，特别是人类的性行为或生殖行为中是否有假定的信息素在起作用的问题，文献的意见很不一致。参见Beauchamp,G.K.等，“哺乳动物的化学交流中的信息素概念：批评”，于《哺乳类的嗅觉、生殖过程和行为》，Doty,R.L.著，Academic Press出版，1976年)。并见Gower等，同上，68-73。

    一些雌烯类固醇对于一些哺乳动物的信息素特性已经有所描述，Michael R.P.等在《自然》(1968)218:746中认为雌激素(特别是雌二醇)是雄恒河猴的信息素诱引剂。Parrot R.F.在《激素和行为》(1976)7:207-215中报道了苯甲酸雌二醇注射诱使卵巢切除的老鼠产生交配行为；并描述了雌二醇的血液浓度对雄性恒河猴性反应的作用(Phoenix C.H.,《生理学和行为》(1976) 16 305-310)，和对雌性恒河猴性反应的作用(见Phoenix C.H.《激素和行为》(1977)8:356-362)。另一方面，在这些信息素对哺乳类的生殖行为和动物个体之间的交流是否起任何作用的问题上，意见很不一致(参见Beauchamp,G.K.等，“哺乳动物的化学交流中的信息素概念：批评”，于《哺乳类的嗅觉、生殖过程和行为》，DotyR.L.著，Academic Press出版，1976年)。

    本发明涉及非系统性地向犁鼻骨器官(VNO)施用某种类固醇以减轻PMS和焦虑症状，并治疗体温升高和阵发性心搏过速。这种施用方法使一种或多种类固醇或含类固醇的成分接触到VNO(也称为“雅科布逊器官”)中的神经化学受体。这一器官可以通过从蛇到人的大多数高等动物的鼻孔到达，尤其与某些动物的信息素感受器相联系。(广泛地见Muller-Schwarze & Silverstein，《化学信号》，Plenum Press出版，纽约，(1980))。位于上上腭的犁鼻骨器官的神经上皮的轴突形成犁鼻骨神经，直接与附属的嗅觉球形成突触连接，并从这里间接地输入给大脑的中皮质扁桃体状基前脑和下丘脑核。末梢神经元的末梢轴突可能在VNO中充当神经化学受体(Stensaas,L.J.等，《J.类固醇生物化学和分子生物学》(1991):553)。该神经与下丘脑直接形成突触连接。

    Johson,A.等(J.Otolaryngology(1985)14:71-79)报道了在许多成年人体内存在犁鼻骨器官的证据，但得出结论该器官可能是没有功能的。而Stensaas,L.等(同上)和Moran,D.T.等、Garcia-Velasco,J.、M.Mondragon、Montibloch,L.和B.Grosser(《J.类固醇生物化学和分子生物学》(1991)39)提出了相反的结果，即VNO是有功能的化学感受受体。

    本发明涉及一个出乎预料的发现，即，某些神经化学配体，特别是类固醇和相关化合物，当施用于人类实验者的VNO中时，与特定的鼻神经上皮细胞的化学感受体发生专一性结合，这一结合产生一系列的神经生理反应，减轻PMS和焦虑症状。通过VNO对下丘脑的作用可以影响自主神经系统的功能，及各种行为或生理现象，它们包括但不仅限于：焦虑、经前期紧张、恐惧、攻击性、饥饿、血压及通常由下丘脑调节的其它行为和生理功能。见Otto Appenzeller，“自主神经系统，基本和临床概念导论，(1990)；Korner P.I.的“自主心血管功能的中枢神经控制，以及Levy N.M.与Martin P.J.的“心脏的神经控制”，二者见《生理学手册》；第2部分“心血管系统-心脏”，第Ⅰ卷，华盛顿特区，1979，美国生理学协会；Fisherman A.P.等编辑的《生理学手册》，第3部分：“呼吸系统”，第Ⅱ卷，“呼吸的控制”，Bethesda MD,1986年，美国生理协会。

    被诊断为经前焦虑症(PMDD，通常称为经前综合症，或PMS)的患者在月经周期的黄体期显示情绪的消极变化及身体症状(见表Ⅰ)。这些症状严重得足以引起身体或感情痛苦，并且这些症状在月经开始后很快缓和。但是，这些症状对这种疾病并不是独有的或对诊断起决定作用的。几项调查表明，30％的妇女具有典型的经前焦虑症状，2％-10％受到严重影响。(Woods等，《Am.J.Pub.Health》,72:1257-62,1982；Van Keep等，“经前期综合症--一项流行病学和统计学运用”，Van Keep,P.A.和Utian,W.H.著，《经前期综合症》，MTP出版社，Lancaster，英国，1981；和Andersch等，J.Psychomsom.Obstet.Gyn.5:39-46,1986)。据称PMDD不仅是中年妇女的疾病，因为十几岁的青少年和年青妇女与中年妇女同样频繁地带有这些症状。(Rivera-Tovar等，《Am.J.Psychiatry》,147:1634-43,1990)。

    许多因PMDD寻求治疗的患者可能患有普遍的精神失调，但是，区别PMDD和慢性精神失调的主要特征是在一个月经周期的卵泡期内至少有一个星期没有症状。这种综合症的一般症状如表Ⅰ所示。大多数妇女报告各种各样的感情、身体和行为改变，伴随着月经周期的黄体期。但是只有那些有随月经期缓和的周期性黄体期症状，并且这些症状明显影响她们的心理或职业活动的妇女才患有PMDD。

              表Ⅰ常见PMDD症状

    感情          身体       行为

    焦虑          头痛       渴求食物

    易怒          偏头痛     食欲增加

    情绪不稳定    乳房柔软   酒精摄入增加

    沮丧          肢端水肿   动机下降

    愤怒          浮肿       效率下降

    悲伤          疲劳       避免活动

    易哭          小腹痉挛   呆在家里

    精神紧张      疼痛       睡眠改变

    过度敏感      体重增加   性欲改变

                  皮肤不适   认知功能降低

                  发热       与世隔绝

                  胃肠不适   注意力不集中

                  眩晕       健忘

                  心悸

    最近的研究发现皮克量级的某些犁鼻骨外激素以气雾的形式局部施用于正常的妇女(20-60岁)的VNO中产生了行为和自主功能的显著改变。Monti-Bloch等，《J.类固醇生物化学和分子生物学》，39(4B):573-582(1991)；Monti-Bloch等，《心理神经内分泌学》，19:673-686(1994)。实验者显示出以消极性降低为特征的情绪变化。消极方面和消极性格明显下降，患者感觉放松了。这些改变与所有实验者的副交感神经活动增强相互关联(轻微的呼吸过缓和心动过缓，小但明显的体温升高(0.7℃+0.5)，皮肤传导的改变，以及α-皮层活动的增加)。并且，可以注意到这些效果的延迟时间和多突触反射的延迟时间相互关联得很好。结论是这些犁鼻骨外激素刺激犁鼻骨器官中的受体，从而通过犁鼻骨-末梢系统影响下丘脑。

    本发明还可减轻一般焦虑症状，这些症状是以汉密尔顿-A标准为特征的。发明简述

    本发明的方法具有如下的优点：1)不用药丸或针头，即非侵入性地将药物直接施加于鼻通道和犁鼻器官的化学受体；2)药物的作用方式是通过神经系统，而不是通过循环系统，使得影响脑功能时不必考虑血脑屏障；3)是一种直接地影响下丘脑的方式，即信息素受体和下丘脑之间只有一个突触结合；4)提供十分特定的药效，因而大大地降低了不良副作用发生的可能性，这是因为感受神经位于大脑的特定位置。

    本发明的其他目的、优点和新特点将在下文的描述中作部分说明，有些会在业内人士在审查下文之后变得显而易见，或在本发明的实现中学到。

    在成分中，优选的一类包含一种药学适宜载体和具有如下通式的孕烷类固醇：其中，P1在由氧基、α-(β-)羟基、α-(β-)乙酸基、α-(β-)丙酸基、α-(β-)甲氧基、α-(β-)低级酰氧基、α-(β-)低级烷基氧和α-(β-)苯甲酰基构成的范围内选择；P2从由甲基、羟甲基、酰氧基甲基、烷氧基甲基、低级烷基、羟基烷基、酰氧基烷基、烷氧基烷基组成的范围选择；P3在氢、氧基、卤元素、羟基、烷氧基、和酰氧基中选择；独立地，P4到P12每个可以是氢、卤元素、甲基、或一卤、二卤或全卤代甲基，并且当P2是甲基和P3是β-羟基时，P2和P3可以结合形成环醚；P13是氢、甲基、亚甲基、卤代甲基、卤代亚甲基、乙基、乙烯基、乙炔基、甲基-亚甲基、甲基-次甲基；及“a”、“b”、“c”、“d”、“e”、“h”、“i”和“j”是可选择的双键的位置，“j”或“k”还可以是三键。卤素取代原子包括氟原子、溴原子、氯原子和碘原子。

    有一类优选的类固醇在“b”是双键，特别是当“d”或“e”也是双键时。另外优选的一类在“a”和“c”是双键，或仅有“c”是双键。还有另外优选的一类，当i和j不存在(例如单键)，j是双键，j是三键时包括双键“h”。在另外一类，“h”不存在，并且j或i是双键，或i和j都不存在，或j和i都是双键，或j是三键。

    术语“低级烷基”、“低级烷氧基”等是指所主链包含的碳原子的个数是1-6个，优选地是1-4个。

    第二类成分包含一种药学适宜载体和具有如下通式的孕烷类固醇：其中，P1是氧基、α-或β-羟基、α-或β-乙酸基、α-或β-丙酸基、α-或β-低级乙酸基、α-或β-酰氧基、或α-或β-苯甲酰基；

    “a”、“b”、“c”、“d”、“e”、“f”、“g”、“h”、“i”、“j”、“m”和“n”是可选的双键的位置，“k”可以不存在，若存在则与“j”形成三键；

    P2是羟基、氢、含1到6个碳原子的低级烷氧基，或P2不存在；

    P3是氧基、氢、羟基、含1到6个碳原子的低级烷氧基或卤元素；

    P4是甲基或乙基；

    P5是氢、甲基和卤元素；

    P6是氢或甲基。

    类固醇成分中优选的第二类中的一个子集包括这样的类固醇，其中“d”是双键，且可选地“b”以双键存在。另外优选的一类中，“a”、“d”和“e”存在，g或h可选地存在。在此情况下，若“g”存在，则“n”可选地存在。另外优选的一类中，“f”可选地存在时，“c”存在。

    第三类成分包含具有如下通式的类固醇：其中，R1从基本由含一个或两个氢原子、甲基、亚甲基、和一个或两个卤原子组成的范围中选择；R2不存在或从基本由氢和甲基构成的范围中选择；R3从基本由氧基、羟基、低级烷氧基、低级酰氧基、苯甲酰基、π介子氰基(CYPIONYL)、葡糖苷酸、磺酰基组成的范围中选择；R4从基本由氢、羟基、低级烷氧基、低级酰氧基、氧基和卤元素的范围内选择；R5不存在或从由氢、羟基、低级烷氧基和低级酰氧基的范围内选择；R6是氢或卤元素；且“a”表示所述类固醇的A环可选的芳烃不饱和位置，或“b”、“c”和“d”每个都是可选的双键；“e”、“f”、“g”、“h”、“i”和“j”每个都是可选的双键；且“e”可能与C16和C17形成一个环氧环。在此实施例中，类固醇优选地以包含一种或多种药学适宜载体的药学成分的方式施加。

    第三类类固醇中的优选的一个子集是这样的：其中“a”存在，“g”、“h”或“i”是可选的双键。另外优选的一类中，“b”、”c”或“j“是双键。还有另一类中“c”和“d”是双键。还有一类中，R2是甲基，“e”是双键。

    术语低级烷基、低级烷氧基等的主链包含1到6个碳原子，优选地是1到4个。卤元素是碘、溴、氟和氯。

    第四类优选的成分包括一种药学适宜载体和具有如下通式的雄烷类固醇：其中，P1在由氧基、α-(β-)羟基、α-(β-)乙酸基、α-(β-)丙酸基、α-(β-)甲氧基、α-(β-)低级酰氧基、α-(β-)低级烷基氧和α-(β-)苯甲酰基构成的范围内选择；P2从由甲基、羟甲基、酰氧基甲基、烷氧基甲基、低级烷基、羟基烷基、酰氧基烷基、烷氧基烷基组成的范围选择；P3不存在或从由甲基、羟甲基、酰氧基甲基、烷氧基甲基、低级烷基、羟基烷基、酰氧基烷基、烷氧基烷基组成的范围选择；P4从由氢、氧基、卤元素、羟基、烷氧基和酰氧基组成的范围内选择；P5表示一个或两个取代基，其中P5由一个或两个氢原子、甲基、亚甲基、或一个或两个卤素原子构成；P6是氢或卤元素；及“a”、“b”、“c”、“d”、“e”、“f”和“h”是可选的双键位置。

    第四类优选的类固醇中的一个子集中“b”是双键，特别是其中“c”或“d”也是双键。另外的一个子集中，“a”和“c”是双键。还有一个子集中，P3是甲基基团，“h”是可选的双键，及P5是亚甲基或一个或两个氢原子。类固醇的一个子集，其中“a”或“b”是一个双键，也是优选的。

    卤元素是指F、Cl、Br或I。术语低级烷基、低级烷氧基等表示主链含有1到6个碳原子，优选地是1到4个。

    成分的第五类由一种药学载体和具有如下通式的19-降胆烷：其中，P1是氧基、α-或β-羟基、α-或β-乙酸基、α-或β-丙酸基、α-或β-低级乙酸基、α-或β-低级酰氧基或α-或β-苯甲酸基；

    “a”、“b”、“c”、“d”、“e”、“f”、“g”、“h”、“i”、“j”、“m”、“s”、“n”是可选的双键的位置，“k”可以不存在，若存在，则与“j”形成三键；

    P2是羟基、氢、含1到6个碳原子的低级烷氧基，或P2不存在；

    P3是氧基、氢、羟基、含1到6个碳原子的低级烷氧基或卤元素；

    P4是甲基或乙基；

    独立地，P5和P7是氢、甲基和卤元素；

    P6是氢或甲基；

    独立地，R｀和R＂是氢或卤元素，或不存在，或共同形成=CH2；q是一个从0到2的整数。

    优选地，q=1。

    在一类优选的19-降胆烷类固醇的构成中，“d”是双键，“b”可选地作为双键存在。优选的另一类中“a”、“d”、“e”存在，而“g”或“n”可能存在也可能不存在。在此情况下，如果“g”存在，则“n”可选地存在。其他优选的类固醇中，“c”或“s”存在。

    19-降胆烷的新类型是那些具有以上通式的分子，但不包括那些具有如下特征的化合物：在P3、P6、P5、P7、R｀和R＂是氢；P4是甲基；e、a、d都存在；b、c、f、g、h、i、j、k、n、和s都不存在，q=0,P1是羟基且无论m是否存在。

    术语低级烷基、低级烷氧基等是指主链包含的碳原子的个数是1-6个，优选地是1-4个。

    还提供了一类新型的类固醇，其中在D环上附有氧原子，这样的类固醇有如下通式：其中，R1在基本由一个或两个氢原子、含1到10个碳原子的烷基构成的范围内选择；R2不存在或在基本由氢、甲基、和与C17形成环氧环的氧组成的范围内选择；R3从基本由氧基、羟基、低级烷氧基、低级酰氧基、苯甲酰基、π介子氰基(CYPIONYL)、葡糖苷酸、和磺酰基组成的范围内选择；R4从基本由氢、羟基、低级烷氧基、低级酰氧基和卤元素组成的范围内选择；R5不存在或从基本由氢、羟基、低级烷氧基和低级酰氧基组成的范围内选择；R6是氢或卤元素；且“a”表示所述类固醇的A环可选的芳烃不饱和位置，或“b”、“c”和“d”每个都是可选的双键；“g”、“h”、“i”和“j”每个都是可选的双键；及“e”可以与C16和C17形成一个环氧环；”f”可以与C13和C17形成一个环氧环；及“k”可以与C17和C20形成一个环氧环。

    本发明的其他目的是通过改变人体的下丘脑的功能和/或自主功能的方法实现的。分布于嗅觉神经上皮细胞表面的化学受体的配体在细胞内是除嗅觉上皮以外的组织；并且，配体施用于人体的鼻通道使得配体与特定的化学受体相结合，从而改变人体下丘脑的功能。

    本发明的全部实施例涉及并包括与这些实施例中所述类固醇结构功能相同的物质，及具有相同功能的改进的类固醇，无论改进型类固醇是否明确地被包括在内。附图的简要说明

    附图1是根据实施例16和17，化合物A1-P1在男性体内积分EVG、GSR和ST的数据。

    附图2是化合物A1-P1,A2-P1,A4-P1,A3-P1,A1-P4,A2-P4在女性体内的积分EVG数据测量值。

    附图3是化合物A1-P1,A2-P1,A4-P1,A3-P1,A1-P4,A2-P4在女性体内的ST的测量数据。

    附图4是化合物A1-P1,A2-P1,A4-P1,A3-P1,A1-P4,A2-P4在女性体内的GSR的测量数据。

    附图5是化合物A1-P3在女性体内的ST、GSR和EVG的测量数据。

    附图6是化合物A1-P3在女性体内的RF和EKG的测量数据。

    附图7是化合物A1-P3在女性体内的EEG的测量数据。

    附图8是化合物A1-P3在男性体内的ST、GSR和EVG的测量数据。

    附图9是化合物A1-P3在男性体内的RF和EKG的测量数据。

    附图10是化合物A1-P3在男性体内的EEG的测量数据。

    附图11和12分别显示化合物A2-P3在男性和女性体内的ST、GSR和EVG的测量数据。

    附图13和14分别显示化合物A2-P3在男性和女性体内的EEG的测量数据。

    附图15和16分别显示化合物A2-P3在男性和女性体内的RF和EKG的测量数据。

    附图17和18分别显示化合物A8-P1在男性和女性体内的ST、GSR和EVG的测量数据。

    附图19和20分别显示化合物A8-P1在男性和女性体内的RF和EKG的测量数据。

    附图21和22分别显示化合物A8-P1在男性和女性体内的EEG的测量数据。

    附图23和24分别显示化合物A6-P1在男性和女性体内的ST、GSR和EVG的测量数据。

    附图25和26分别显示化合物A6-P1在男性和女性体内的RF和EKG的测量数据。

    附图27和28分别显示化合物A6-P1在男性和女性体内的EEG的测量数据。

    附图29、30和31显示化合物20,21-二甲基孕-5,20-二烯-3β-醇在男性体内的ST、GSR、EVG、RF、EKG和EEG的测量数据。

    附图32、33和34显示化合物20,21-二甲基孕-5,20-二烯-3β-醇在女性体内的ST、GSR、EVG、RF、KEG和EEG的测量数据。

    附图35、36和37显示化合物20,21-二甲基孕-5,20-二烯-3-酮在男性体内的ST、GSR、EVG、RF、KEG和EEG的测量数据。

    附图38、39和40显示化合物20,21-二甲基孕-5,20-二烯-3-酮在女性体内的ST、GSR、EVG、RFEKG和EEG的测量数据。

    附图41、42和43显示化合物A14-P2在男性体内的ST、GSR、EVG、RFEKG和EEG的测量数据。

    附图44、45和46显示化合物A14-P2在女性体内的ST、GSR、EVG、RF、EKG和EEG的测量数据。

    附图47、48和49显示化合物A7-P2在男性体内的ST、GSR、EVG、RF、EKG和EEG的测量数据。

    附图50、51和52显示化合物A7-P2在女性体内的ST、GSR、EVG、RF、EKG和EEG的测量数据。

    附图53和54显示化合物A11-P1在男性体内的ST、GSR、EVG、EEG的测量数据。

    附图55显示化合物A13-P1在男性体内的EEG的测量数据。

    附图56、57和58显示化合物A13-P1在女性体内的ST、GSR、EVG、RF、EKG和EEG的测量数据。

    附图59显示化合物A3/P1在女性体内的EVG、EDA和BT的测量数据。

    附图60显示化合物A4/P1在女性体内的EVG、EDA和BT的测量数据。

    附图61和62分别显示化合物A8/P1在男性和女性体内的测量数据。

    附图63和64分别显示化合物A13/P8在男性和女性体内的测量数据。

    附图65和66分别显示化合物A6/P1在男性和女性体内的测量数据。

    附图67和68分别显示化合物A6/P1的20-甲基衍生物在男性和女性体内的测量数据。

    附图69和70分别显示化合物A1/P1的21,20-二甲基衍生物在男性和女性体内的测量数据。

    附图71和72分别显示化合物A6/P1的21,20-二甲基衍生物在男性和女性体内的测量数据。

    附图73和74分别显示化合物A14/P2在男性和女性体内的测量数据。

    附图75和76分别显示化合物A12/P1在男性和女性体内的测量数据。

    附图77和78分别显示化合物A7/P2在男性和女性体内的测量数据。

    附图79和80分别显示化合物A13/P1在男性和女性体内的测量数据。

    附图81和82分别显示化合物A2/P7在男性和女性体内的测量数据。

    附图83和84分别显示化合物A3/P5在男性和女性体内的测量数据。

    附图85-96对应于图表Ⅱ中的胆烷。

    附图85和86分别显示化合物A8/C1在男性和女性体内的测量数据。

    附图87和88分别显示化合物A2/C1在男性和女性体内的测量数据。

    附图89和90分别显示化合物A2/C1的乙酸酯在男性和女性体内的测量数据。

    附图91和92分别显示化合物A1/C1在男性和女性体内的测量数据。

    附图93和94分别显示化合物A3/C1在男性和女性体内的测量数据。

    附图95和96分别显示化合物A13/C1在男性和女性体内的测量数据。

    附图97和附图98分别显示类固醇E2/P4和对照剂在雌性老鼠体内的EVG和犁鼻神经放电频率的测量数据。

    附图99至120显示对女性的VNO施用指定的19-降-类固醇的EVG、EDA、RF、CF、EMG、BT和EEG(α-V、α-T、β-V和β-T)的数据。

    附图121至142显示对男性的VNO施用指定的19-降-类固醇的EVG、EDA、RF、CF、EMG、BT和EEG的数据。

    附图143示意1,3,5(10),16-雌四烯-3-醇的合成。

    附图144A、144B和144C是对男性试验者的犁鼻骨器官(附图144A)和嗅觉上皮(附图144C)局部施用特定的类固醇对受体电位的电生理影响的图形表示。附图144B是雌烯对男性和女性试验者的VNO受体电位影响的图形表示。

    附图145是对男性(附图145A)和女性(附图145B)试验者的犁鼻骨器官局部施用特定的类固醇的电生理影响的图形表示。

    附图146表示男性试验者对1,3,5(10),16-雌四烯-3-基乙酸酯的各种自主反应。A=犁鼻神经上皮的受体电位；B=极肤电反应的改变(千欧姆)；C=皮肤温度的改变(摄氏度)。

    附图147表示在施用1,3,5(10),16-雌四烯-3-醇的甲基5醚和1,3,5(10),16-雌四烯-3-醇的乙酸酯之后VNO电位的对比改变。

    附图148显示在VNO接受犁鼻外激素的刺激时局部反应和自主反应的雌雄各异性。各种犁鼻外激素(200 10毫微微摩尔)和稀释对照剂如所述方法施用于30位男性和30位女性(年龄20到45岁)。柱状表示人群的平均反应。

    附图148A和附图148B：如15所述对男性(A)和女性(B)试验者测量的EVG反应。

    附图148C和附图148D：如所述方法测量的皮肤电生理活动。因对男性(C)和女性(D)的每个试验者的VNO施用犁鼻外激素所引起的反应的改变(用xΩ表示)如图所示。

    附图148E和附图148F：如所述方法测量的α-皮层活动。因对男性(E)和女性(F)的每个试验者的VNO施用犁鼻外激素所引起的反应的改变如图所示。

    附图148G和附图148H：如所述方法测量的皮肤温度。因对男性(G)和女性(H)的每个试验者的VNO施用犁鼻外激素所引起的反应的改变如图所示。

    A=1,3,5(10),16-雌四烯-3-基乙酸酯

    B=雄-4,16-二烯-3-酮

    C=1,3,5(10),16-雌四烯-3-醇

    D=3-甲氧基-雌-1,3,5(10),16-四烯

    E=雄-4,16-二烯-3α-醇

    F=雄-4,16-二烯-3β-醇

    附图149表示男性和女性试验者在受到混有气味剂的OE和犁鼻外激素的刺激后的嗅觉电图。A:400毫微微摩尔的气味剂1-香芹酮和桉树脑以及200毫微微摩尔的犁鼻外激素A、B、C、D和F；和E的立体异构体以每秒的脉冲单独地施加到20个试验者(男女都有)的OE，并且每个EOG的反应如所述方法记录。气味剂以及E和B产生明显的(p＜0.01)局部反应。B：当400毫微微摩尔的气味剂1-香芹酮和桉树脑施加到男性和女性的VNO时不产生明显的EVG反应。

    附图150表示如下犁鼻骨外激素对20名女性试验者的犁鼻骨器官的电生理影响。

    G=雄-4-烯-3-酮

    F=雄-4,16-二烯-3,6-二酮

    J=10,17-二甲基甾-4,13(17)-二烯-3-酮

    K=1,3,5(10),16-雌四烯-3-醇-甲基醚

    L=1,3,5(10),16-雌四烯-3-基-丙酸酯

    EVG=犁鼻电图

    GSR=极肤电反应

    =皮肤电生理反应(EDA)

    ST=皮肤温度

    附图151表示犁鼻骨外激素对20名男性试验者的犁鼻骨器官的电生理影响。

    M=1,3,5(10)-雌三烯-3-醇

    附图152表示雌-1,3,5(10)-6-四烯-3-醇和雌-4,16-二烯-3-醇的合成。

    附图153表示在实施例63到66所述的化合物的合成。

    附图154示意的是在实施例67到71所述的合成步骤。

    附图155示意的是在实施例72到75所述的合成步骤。

    附图156示意的是在实施例76到77所述的合成步骤。

    附图157示意的是在实施例78到83所述的合成步骤。

    附图158示意的是在实施例84到86所述的合成步骤。

    附图159示意的是在实施例87到93所述的合成步骤。

    附图160示意的是在实施例94到96所述的合成步骤。

    附图161示意的是在实施例97到98所述的合成步骤。

    附图162A、162B和162C分别示意的是图表Ⅰ中的13种雌烷对女性的EVG、GSR和ST的数据。

    附图163A、163B和163C分别示意的是图表Ⅰ中的13种雌烷对男性的EVG、GSR和ST的数据。

    附图164A和164B到176A和176B分别示意的是在附图163A-163C中指明的13种雌烷对男性(A)和女性(B)的EEG数据。

    附图177示意的是雄-4,16-二烯-3-酮、雄-4,16-二烯-3α-醇和雄-4,16-二烯-3β-醇的合成。

    附图178示意的是雄-5,16-二烯-3α-醇和雄-5,16-二烯-3β-醇的合成。

    附图179示意的是雄-4,16-二烯-3-酮的另一种合成。

    附图180是对女性试验者(附图180A)的犁鼻骨器官和嗅觉上皮(附图180C)局部施用特定的类固醇对受体电位的电生理影响的图形表示。附图180B是雄烷对男性和女性的VNO受体电位影响的图形表示。

    附图181是对男性(附图182A)和女性(附图182B)试验者的犁鼻骨器官局部施用特定的类固醇的电生理影响的图形表示。

    附图182A到182F表示女性试验者对一种雄烷的各种自主反应。A=犁鼻神经上皮的受体电位；B=脑电图中α皮层活动的改变(％)；C=极肤电反应的改变(千欧姆)；D=末梢动脉脉搏的改变(次/分钟)；E=皮肤温度的改变(摄氏度)；和F=呼吸频率的改变(次/分钟)。

    附图183表示5名女性在接受2种不同的雄烷后的VNO受体电位的变化。

    附图184显示在VNO接受犁鼻外激素的刺激时局部反应和自主反应的雌雄各异性。各种犁鼻外激素(200毫微微摩尔)和稀释对照剂如所述方法施用于30位男性和30位女性(年龄20到45岁)。柱状表示人群的平均反应。

    附图184A和184B：如所述对男性(A)和女性(B)试验者测量的EVG反应。

    附图184C和184D：如所述方法测量的皮肤电生理反应。因对男性(C)和女性(D)的每个试验者的VNO施用犁鼻外激素所引起的反应的改变(用xΩ表示)如图所示。

    附图184E和184F：如所述方法测量的α-皮层活动。因对男性(E)和女性(F)的每个试验者的VNO施用犁鼻外激素所引起的反应的改变如图所示。

    附图184G和184H：如所述方法测量的皮肤温度。因对男性(G)和女性(H)的每个试验者的VNO施用犁鼻外激素所引起的反应的改变如图所示。

    A=1,3,5(10),16-雌四烯-3-基乙酸酯

    B=雄-4,16-二烯-3-酮

    C=1,3,5(10),16-雌四烯-3-醇

    D=3-甲氧基-雌-1,3,5(10),16-四烯

    E=雄-4,16-二烯-3α-醇

    F=雄-4,16-二烯-3β-醇

    附图185表示男性和女性试验者在受到混有气味剂的OE和犁鼻外激素的刺激后的嗅觉电图。附图185A:400毫微微摩尔的气味剂1-香芹酮和桉树脑以及200毫微微摩尔的犁鼻外激素A、B、C、D和F；和E的立体异构体以每秒的脉冲单独地施加到20个试验者(男女都有)的OE，并且每个EOG的反应如所述方法记录。气味剂以及E和B产生明显的(p＜0.01)局部反应。附图185B：当400毫微微摩尔的气味剂1-香芹酮和桉树脑施加到男性和女性的VNO时不产生明显的EVG反应。

    附图186表示如下犁鼻骨外激素对20名女性试验者的电生理影响。

    G=雄-4-烯-3-酮

    F=雄-4,16-二烯-3,6-二酮

    J=10,17-二甲基甾-4,13(17)-二烯-3-酮

    K=1,3,5(10),16-雌四烯-3-醇-甲基醚

    L=1,3,5(10),16-雌四烯-3-基-丙酸酯

    EVG=犁鼻电图

    GSR=极肤电反应

    =皮肤电生理反应(EDA)

    ST=皮肤温度

    附图187表示犁鼻骨外激素对20名男性试验者的犁鼻骨器官的电生理影响。

    M=1,3,5(10)-雌三烯-3-醇

    附图188表示的是实施例108到112的合成步骤。

    附图189表示的是实施例113到118的合成步骤。

    附图190表示的是实施例120到121的合成步骤。

    附图191表示的是实施例123到124所述的合成步骤。

    附图192表示的是实施例125到126的合成步骤。

    附图193A表示女性在VNO接受雄-5,16-二烯-3β,19-二醇测试时呼吸频率和EKG的数据。

    附图193B表示女性在VNO接受雄-5,16-二烯-3β,19-二醇测试时呼吸频率和EKG的数据。

    附图194A、194B和194C显示女性对于图表中四种雄烷和雄-5,16-二烯-3β,19-二醇测试的EVG、GSR和ST的数据。

    附图195A、195B和附图195C显示男性对于附图194中指明的五种雄烷测试的EVG、GSR和ST的数据。

    附图196A和196B显示雄烷A4/N3在男性和女性体内的EEG的数据。

    附图197A和197B显示雄烷A3/N3在男性和女性体内的EEG的数据。

    附图198A和198B显示雄烷A13/N1在男性和女性体内的FEG的数据。

    附图199A和199B显示雄-5,16-二烯-3β,19-二酮在男性和女性体内的EEG的数据。

    附图200A和200B显示雄烷A6/N3在男性和女性的EEG的数据。

    附图201A和201B显示两种犁鼻骨外激素对男性的VNO测试的EVG的图形结果(附图201A)，和施用相同的犁鼻骨外激素后鼻呼吸粘膜的电图(附图201B)。

    附图202显示两种犁鼻骨外激素在男性试验者体内的剂量对作用的影响。

    附图203显示两种犁鼻骨外激素的中枢神经放松反应。

    附图204显示某一试验者在VNO首先接受对照剂(B曲线)的施用，然后再接受化合物孕4,20-二烯-3,6-二酮(A曲线)的施用后睾酮浓度的差异。

    附图205、206和207显示对其他三名试验者施用对照剂(曲线B)和孕4,20-二烯-3,6-二酮(曲线A)后睾酮测试的数据。

    附图208和附图209分别显示在图表Ⅵ中的类固醇E2/NC3、E1/NC2、E2/NC3、E1/NC3、甲基化的E2/NC2、甲基化的E2/NC3和E8/NC3在人类男性和女性的VNO的幅度。

    附图210显示施用对照剂或雌-4,16-二烯-10β-醇-3-酮的女性的十一种PMDD症状的结果。

    附图211显示施用对照剂或雌-4,16-二烯-10β-醇-3-酮的女性的肌电图结果。

    附图212显示施用对照剂或雌-4,16-二烯-10β-醇-3-酮的女性的皮肤电生理活动的频率。

    附图213和214显示用雄-4,16-二烯-3β-醇治疗焦虑患者的VNO后Hamilton-A焦虑测试的结果。

    附图215显示用雄-4,16-二烯-3β-醇治疗焦虑患者的VNO后对呼吸频率和心律影响的结果。

    附图216显示用雄-4,16-二烯-3β-醇治疗焦虑患者的VNO后对副交感神经的影响结果。

    附图217显示用雄-4,16-二烯-3β-醇治疗焦虑患者的VNO后对皮肤电生理活动的影响结果。

    附图218显示用雄-4,16-二烯-3β-醇治疗焦虑患者的VNO后对体温变化的影响结果。

    附图219显示女性施用实施例133、134和134A中的化合物后的EVG测试结果。

    附图220显示女性施用实施例133、134和134A中的化合物后的α脑波测试结果。

    附图221A是男性试验者在VNO接受八种在D环上有环氧基团的类固醇的刺激后的电物理影响的总结。

    附图221β是女性试验者在VNO接受八种在D环上有环氧基团的类固醇的刺激后的电物理影响的总结。本发明的详细描述Ⅰ．定义

    “情感”是一种暂时感觉状态。典型的消极情感是神经过敏、紧张、害羞、焦虑、易怒、愤怒、暴怒及类似的感觉。“情绪”是持续较长时间的感觉状态，诸如内疚、悲伤、绝望、自弃、懊悔、痛苦、不愉快等类似的状态。“性格特征”是个人个性的更持久的方面，典型的消极性格特征是敏感、后悔、自责、固执、怨恨、辛酸、胆怯、懒惰等类似症状。

    根据本发明的犁鼻骨外激素可能具有通过与VNO接触，刺激下丘脑的一种或多种荷尔蒙功能、行为功能和自主功能的作用。由于下丘脑在体内各种功能中所起的至关重要的作用，以及VNO和下丘脑之间的神经连接，本发明的犁鼻骨外激素可以刺激诸如控制内分泌量之类的功能，例如控制后叶加压素和催产素和其它几种肽的垂体分泌量。后叶加压素是一种抗利尿激素，因为它在肾脏中有促进水的吸收和尿的浓缩的作用。另外，它在体内还有通过其对动脉平滑肌起作用而调节血压以及通过促进肝脏中糖原转换为葡萄糖而调节新陈代谢的作用。催产素的受体位于子宫平滑肌和乳房平滑肌。它可以通过乳房平滑肌的收缩导致乳汁分泌及在分娩过程中导致子宫收缩。下丘脑还控制前垂体腺体分泌的激素如ACTH、催乳激素、LH(黄体激素)、GH(生长素)、TSH(甲状腺刺激激素)、FSH(卵泡刺激激素)和β-内啡呔。因此，例如，对LH分泌的控制可以控制女性的受孕及男性的睾酮分泌。睾酮分泌可以被用来治疗男性的性欲低下或治疗肌肉衰老性疾病或症状，如衰老。通过降低睾酮的分泌可以治疗前列腺癌等症。

    利用本发明的犁鼻骨外激素控制下丘脑行为功能也是可行的。我们知道下丘脑控制诸如恐惧、愤怒、愉悦和调节睡眠和醒来的生物钟类的行为。下丘脑控制的其它功能包括食欲、口渴和交感神经功能例如应激反应，和心血管控制功能，热调节和内脏功能如胃肠肌肉的控制和消化液的分泌。因此，尽管从解剖学上不同部位有许多感觉通道通往下丘脑，但是大家相信，本发明中的犁鼻骨外激素第一次提供了一种通过鼻腔吸入接触VNO中的上皮细胞而施加刺激的方法，一种刺激上文讨论的下丘脑功能的方法。

    “孕烷类固醇”是脂肪族的多环碳氢化合物，其特征是有一个四环类固醇结构，在10位和13位上由甲基取代，17位上由乙基取代(包括不饱和基团)。孕烯是孕烷的子集，一般认为至少有一个双键。进而，所有具有上述结构特征的衍生物都被广义地认为是孕烷。

    “胆烷类固醇”是脂肪族的多环碳氢化合物，其特征是有一个四环类固醇结构，在10位和13位上由甲基取代，17位上由2-戊基取代(包括不饱和基团)。

    “化学受体”是分布于具有化学感觉的神经上皮细胞表面的受体分子，它以立体特异的形式结合一个或多个配体。该专一性的结合触发信号转导作用来触发传入神经脉冲。特别是在味蕾、嗅觉上皮和犁鼻骨组织中，已发现化学受体，。

    在此使用的“孕烯类固醇”是一种脂肪族多环碳氢化合物，具有一个四环类固醇结构，在A环至少有一个双键，在10位和13位上由甲基取代，17位由乙基(包括不饱和基团)取代，在3位由氧基、羟基或羟基衍生物，如烷氧基、酯、苯甲酸盐、氰酸盐(cypionate)、硫化物、或葡糖苷酸取代。具有这样结构特征的衍生物广义地都称为孕烯类固醇。

    以下结构显示的是类固醇共有的四环类固醇结构。为了便于描述孕烷，在D环显示了一个支链。为了描述基因和取代基的位置，使用如下的编号体系：“雌雄各异”是指同种物种的雌性和雄性对同一药剂表现出不同的效果和反应。

    某种药物的“有效剂量”是指将该药物施用于需要该药的个体时产生所需的生理和/或心理作用时药的剂量和/或浓度的范围。在本案例中，需要药物的个体是具有一般由下丘脑调节的生理特性或行为特性的人，且需要调节下丘脑的功能或上述特性。一种药物的有效剂量根据将要达到的功能、欲达到的效果、施用药物的方法等的不同而不同。例如，当类固醇以溶液的方式施用于实验者的面部皮肤时，有效浓度是从1μg/ml到100μg/ml，优选地是10μg/ml到50μg/ml，而20μg/ml到30μg/ml最适宜。当类固醇直接导入到VNO时，有效剂量一般是1pg到1ng，最适宜剂量是约10pg到50pg。当类固醇通过软膏、软霜、气雾剂之类的方式直接施用于鼻通道时，有效剂量一般是100pg到100μg，以1ng到10μg较适宜。有时，有些药剂以某些方式施用后有效，而以其它方式施用则无效。

    “下丘脑”是间脑的一部分，包括下丘脑沟下第三室的腹壁，组成室壁的结构，及视神经交叉、灰结节、动脉圆锥和乳头体。下丘脑调节自主神经系统和控制一些生理和行为的功能，如所谓的应激反应、性冲动、水平衡、糖脂代谢、饥饿、体温的调节、内分泌等。下丘脑还分泌调节血压的后叶加压素，和促使分娩和乳汁分泌的催产素。所有下丘脑的功能都潜在地可由所述的犁鼻骨外激素疗法调节。

    在此使用的“配体”是一种分子，它通过与分布于受体细胞表面的受体进行专一性结合而作为一种化学信号，从而触发通过细胞表面的信号转导作用。化学感觉受体和配体的结合是能够被测量的。化学感觉组织，如犁鼻神经上皮和嗅觉神经上皮，含有大量的神经受体细胞，每个细胞至少分布一个表面细胞受体。许多受体分子有相同的配体专一性，从而当组织接触具有专一性的配体时(如VNO接触犁鼻骨外激素时)，可以测量细胞表面受体的电位的累积变化。

    在此，“低级烷基”是指有支链的或没有支链的含有1到4个碳原子的饱和碳氢化合物链，如，甲基、乙基、n-丙基、i-丁基之类。这里使用的“烷氧基”就是传统意义上的，在此用-OR来表示，其中R就是上述的烷基。

    “信息素”是一种物质，它提供在同一物种的成员之间通过分泌和外化学感受进行交流的化学方法。在哺乳动物中，信息素一般通过有鼻的犁鼻骨器官的受体来感觉。一般而言，信息素影响发育、生殖和相关行为。“犁鼻骨外激素”代表的意义比较广泛，它包括信息素，可以用来描述来自任何来源的作为化学感受信使、结合特定的犁鼻骨神经上皮受体、并引发生理或行为效果的物质。“犁鼻骨外激素”的生理反应是由犁鼻骨器官来调节的。

    1皮克(pg)等于0.001纳克(ng)。1纳克等于0.001微克(μg)。1微克等于0.001毫克(mg)。Ⅱ．本发明的实现方法A．可用于本发明的类固醇

    本发明直接针对一组特定的类固醇。

    以下描述的是在图表中所指明的如下化合物的合成。

    图表1表示的是本发明所针对的孕烷，但不仅限于此范围。以下的合成图描述了在制备这些孕烷过程中的中间物质和亚结构的合成。

    亚结构的合成

    根据上表，以下是某行(A1到A13)或某列(P1到P8)的中间物质的示范性合成。

    亚结构合成：A型A1

    Parcy L.Julian,Edwin W.Mayer和Helen C.Printy,J.Amer.Chem.Soc.,1948,70,3,887。

    另一个商业可获得的亚结构，例如，17α-乙炔基睾酮。A2：

    这是一个商业可获得的亚结构，例如，脱氢表雄酮，孕烯醇酮。A3:

    David G.Loughhead,J.Org.Chem.,1985,Vol.50,No.20,p.3931。A4:

    I.Z.Kabore,Q.Khuong-Huu,和A.Pancrazi,Tetrahedron,1978,Vol.34,p.2807。A5：

    I.Dory,G.Szabo和P.Opoczky,Acta.Chim,Hung.,Vol.20,p.67(1959)。

    Bernhard Krieger,Egbert Blanke，和Emanuel Kaspar，德国专利1,297,603(1969)。A6:

    Alan M.Krubiner,Norman Gottfried，和Eugene P.Oliveto,J.Org.Chem.,1969,34,11,3502。

    Roberto Sciaky和Alberto Consonni,Gazz.Chim.Ital.1962,22,730。A7：A8：见实施例。

    Vladimir Petrow,Yueh-sha Wang,Leon Lack,AverySandberg,Nobuyuki Kodohame，和Keith Kendle,J.SteroidBiochem.,1983,19,1491。A9:

    Steven R.Schow和Trevor C.McMorris，类固醇，1977,Vol.30,No.3,p389。

    另一个商业可获得的亚结构，例如，17α-乙炔基二氢睾酮。A10：这是一个商业可获得的亚结构，例如，孕烷醇酮，雄酮。还有：

    J.M.Kohli,A Zaman和A.R.Kidwai,Phytochemistry,1971,Vol.10,p.442。A11：见实施例。

    Frederick Brown和Carl Djerassi,J.Amer.Chem.Sco.,1980,102,2,807。A12：A13：亚结构合成：P型P1：Ajay.K.Bose和N.G.Steinberg，合成，1970,p.595。

    Steven R.Schow和Trevor C.McMorris，类固醇，1977,Vol.30,No.3,389。P2:

    Ronald Breslow和Louis M.Maresca,TetrahedronLetters,1977,No.7,p.623。

    Braja G.Hazra,Vandana S.Pore，和Padmakar L.Joshi,J.Chem.Soc.,Perkin Trans I,1993,(15),1818-22。

    另一个商业可获得的亚结构，例如，5α-孕-17(20)-烯-3β-醇(Steraloids)。P3：

    这是一个商业可获得的亚结构，例如，孕-5,16-二烯-3β-醇(Steraloids)。

    如果无法商业获得，合成过程如下：

    John P.Dusza和Werner Bergman,J.Org.Chem.,1960,25,79。P4：

    C.W.Shoppee,Ruth E.Lack，和B.C.Newman,J.Chem.Soc.,1964,P.3388。

    另一个商业可获得的亚结构，例如，5α-孕-3β-醇(Steraloids)。P5:

    Alan M.Krubiner,Norman Gottfried，和Eugene P.Oliveto,J.Org.Chem.,1969,Vol.34,No.11,p.3502。P6:

    Eugene F.Oliveto,Corrine Gerold，和Lois Johnson,J.Am.Chem.Soc.,1951,73,5073。P7:

    Pierre Crabble和Esperanza Valarde，美国专利3,681,410,1972年。P8:Maya Dvolaitsky Anne M.Giroud，和Jean Jacques,Bull.Soc.Chim.France,1963,62。法国专利1,536,034,1968年。17α-孕烷

    对于亚结构P1、P4和P5，在17位上正常的购型是β。但是，相应的17α类似物也可以使用17α-孕醇酮作为初始材料来制备。例如：

    Alan M.Krubiner,Norman Gottfried，和Eugene P.Oliveto,J.Org.Chem.,1969,Vol.34,No.11,p.1502。

    甲基孕烷

    以下的方法可以使甲基基团结合在称为P1、P2、P3、P4和P6结构的20位上：

    J.Bryan Jones和Keith D.Gordon,Can.J.Chem.,1972,Vol.50,P.2712。

    John P.Dusza和Werner Bergmann,J.Org.Chem.,1960,25,79。David G.Loughhead,J.Org.Chem.,1985,50,1931。美国专利3,681,410描述了6α-甲基类似物的制备：美国专利3,492,318描述了18-和21-甲基类似物的制备：

    一些甲基化的孕醇酮的前身是可以商业获得的，VIS 6,16α(β)-甲基：

    另外，17α-甲基孕烯醇酮是能够获得的：法国专利1,363,191：

    因此，由孕烯醇酮在6,16或17位上结合甲基而合成的化合物也可以使用相应的甲基孕烯醇酮为前身制备。

    二甲基化合物，如已经描述过的18,21-二甲基孕-4,16-二烯-20-炔-3-酮，可以通过以下三种常规的方法之一制备：

    方法一是将甲基化的前身，如那些在6、16或17位上有甲基的化合物，通过一定的方法结合一个甲基，如在20位上。

    方法二是使用二甲基化的前身，如可商业获得的6,16α-二甲基孕烯醇酮。

    其它的二甲基化的孕烯醇酮的前身的合成，已有描述，如下所示：

    Sylvestre Julia,Colette Neuville，和Pierre Simon,Bull.Sco.Chim.France,1962,1495。

    Eliott Shapiro,Theodore Legatt,Lois Weber,Merl Steinberg,A.Warnick,M.Eisler,Marilyn Gilmore Hennessey,C.T.Coniglio,W.Charney，和Egene P.Oliveto,J.Med.Pharm.Chem.,1962,5,975。

    James Cairns,Colin L.Hewett,Robert.T.Logan,GeorgeMcGarry,Donald F.M.Stevenson，和Gilbert F.Woods,J.C.S.Perkin I.1976,1958。R.Deghenghi和R.Gaudry,J.Amer.Chem.Soc.,1961,4668。英国专利927,515。

    Romano Deghenghi和Roger Gaudry,Tetrahedron Letters,1962,No.11,p489。

    W.J.Adams,D.K.Patel,V.Petrow,I.A.Stuart-Webb，和B.Sturgeon,J.Chem.Soc.,1956,4490。

    方法三是使用未甲基化的前身，通过一定方法结合两个甲基基团，如下所示：

    20,21-孕烷一般也被认作24-降胆烷。24-降胆烷也可以通过胆烷前身的降解来制备，如下图所示：

    Yutaka Hirano,Tadashi Eguchi,Masaji Ishigmo，和NubuoIkakawa,Chem.Pham.Bull.,1983,31(2),394。

    卤孕烷

    美国专利3,681,410描述了如下物质的制备：

    Derek H.R.Barton,George Bashiardes和Jean-Louis Fourrey,Tetrahedron Letters,1983,Vol.24,1605。

    Biao Jiang和Yuanyao Xu,Tetrahedron Letters,1992,Vol.33,511。

    有些甲基化的孕烯醇酮的前身是可以商业获得的，VIS 6,16α(β)-甲基：

    另外，17α-甲基孕烯醇酮是可以得到的：法国专利1,363,191：

    因此，由孕烯醇酮在6,16或17位上结合甲基而合成的化合物也可以使用相应的甲基孕烯醇酮为前身来制备。                                                    图表Ⅱ                                                                                                          胆烷

    亚结构的合成

    根据上表，以下为某行(A1到A13)或某列(C1到C7)的亚结构的示范性合成。

    亚结构的合成：A型

    A1：

    见实施例。

    A2：

    这是一个可商业获得的亚结构，如：孕烯醇酮，豆甾醇，胆烯酸。

    A3：

    见实施例。

    A6：

    A8：

    见实施例。

    A11:

    D.H.R.Barton,J.Boivin,D.Circh,和C.H.Hill,J.Chem.Soc.Perkin Trans.I,1986,p.1805。

    A13：

    见实施例

    亚结构的合成：C型

    C1:

    J.P.Schit,M.Piraux，和J.F.Pilette,J.Org.Chem.1975,Vol.40,No.11,p.1586。

    C2:

    W.Bergmann和J.P.Dusza,J.Org.Chem.,1958,Vol.23,p.1245。

    C3:

    J.E.VanLier和L.L.Smith,J.Org.Chem.,1970,Vol.36,No.8,P.2631。

    C4:

    A.Burger,F.Colobert,C.Hetru，和B.Luu,Tetrahedron,1988,Vol.44,No.4,p.1141。

    C5:

    A.B.Turner，化学和工业，1979,p.385。

    C6:

    G.Steock和H.Stein，德国专利，No.854,517,1952年。

    C7:

    A.Burger,J-P.Roussel,C.Hetru,J.A.Hoffmann，和B.Luu,Tetrahedron,1989,Vol.45,No.1,p.155。

    24-降胆烷和24-甲基胆烷

    在24位的边链上少一个或多一个碳原子的结构可以通过相似的方法来制备。23-甲基胆烷也可以通过类似的方法来获得。示例如下：

    J.P.Schimt,M.Piraaux，和J.F.Pilette,J.Org.Chem.,1975,Vol.40,No.11,p.1586。

    Y.M.Sheikh和C.Djerassi，类固醇，1975,Vol.26(1),p.129。

    M.Morisaki,M.Shibata,C.Duque,N.Imamura，和N.Ikekawa,Chem.Pharm.Bull.,1980,Vol.28(2),p.606。

    D.H.R.Barton,J.Boivin,D.Circh和C.H.Hill,J.Chem.Soc.Perkin Trans.I,1986,p.1805。

    A.Burger,F.Colobert,C.Hetru，和B.Luu,Terahedron,1988,Vol.44,No.4,p.1141。

    B.M.Trost,T.J.Kulawiec和A.Hammes,Terahedron Letters,Vol.34,No.4,p.587。

    A.Burger,J-P.Roussel,C.Hetru,J.A.Moffmann，和B.Luu,Tetrahedron,1989,Vol.45,No.I,p.155。

    C：合成的方法

    1．3-、6-、19-、20-和21-位的衍生物的制备。

    本发明中的方法中使用的化合物是在3-、6-、19-、20-和21-位被取代的孕烷类固醇。许多3-位取代的类固醇是可以从3-氧基-类固醇衍生而来的已知的化合物。如图1所示，孕-4,20-二烯-3-酮(1)可以被转变为3,5,20-三烯醚(2)或1,4,20-三烯-3-酮(3)，它们分别是6-位和3-位取代的羟基衍生物的初始物质。

    烷氧基衍生物由它们相应的羟基衍生物与烷基化试剂，如氟硼酸三甲基氧鎓、氟硼酸三乙基氧鎓或甲基氟磺酸盐在惰性氯烃溶剂，例如二氯甲烷，里反应而生成的。也可以使用烷基化试剂如NaH、KM或KOBut、氧化银或氧化钡在极化的非种子传递溶剂如DMF、DMSO和六甲基磷酸酰胺中生成。

    类固醇的合成反应的一般步骤对于业内人士而言是知道的。当需要确定反应时间和温度时，可以使用常规的方法来确定。在加入所需的反应试剂后，在惰性气体下搅拌此混合物，并每隔一小时取出一等份。这些等份用色谱法进行分析以监测初始物质的消失，此时反应开始稳定进行。如果初始物质在24小时内没有反应，则加热至回流，并每隔一小时取等份进行分析。如前所述，直至反应物消失。在后一种情况下，在反应稳定进行前可以使混合物冷却。

    如业内人士所知，使用色谱法和/或结晶法对生成物进行提纯。

    2．19-羟基衍生物的制备

    19-羟基-孕-4,17-二烯-3-酮的合成。

    此种化合物的合成方法在方法3中介绍。

    在下图表Ⅲ中，介绍了特别优选的19-降孕烷：

                                                   图表Ⅲ  19-降孕烷

    亚结构的合成：E型

    E1:

    Frank B.Colton,Leonard N.Nysted,Gyron Riegel，和AlbertL.Raymond,J.Amer.Chem.Soc.,1957,79,1132。

    还有一个可商业获得的亚结构，如17α-乙炔基-19-降睾酮。

    这是一个可商业获得的亚结构，如雌酮、乙炔基雌二酮。

    E3:

    Pierre Crabble，美国专利，3,492,318,1970年。

    E4：

    这是一个可商业获得的亚结构，如6-脱氢雌酮。

    E5：

    见实施例。

    E6：

    E7：

    见实施例。

    E8:

    O.I.Fedorova,O.S.Anisimova，和G.S.Grinenko,Khim.Prir.Sodien.,1976,2,180。

    Frank B.Colton,Leonard H.Nysted,Byron Riegel，和AlbertL.Raymond,J.Amer.Chem.Soc.,1957,79,1123。

    E9：

    这是一个可商业获得的亚结构，如马烯雌酮。

    E10：

    这是一个可商业获得的亚结构，如马萘雌酮。

    E11：

    见实施例。

    E12：

    见实施例。

    E13：

    见实施例。

    亚结构的合成：P型

    P1:

    O.I.Fedorova,O.S.Anisimova，和G.S.Grinenko,Khim.Prir.Sodien.,1976,2,180。

    Richard H.Peters,David F.Crowe,Mitchell A.Avery,WesleyK.M.Chong，和Masato Tanabe,J.Med.Chem.,1989,32,1642。

    还可参见实施例。

    P2:

    Frank B.Colton,Leonard H.Nysted,Byron Riegel，和AlbertL.Raymond,J.Amer.Chem.Soc.,1957,79,1123。

    Richard H.Peters,David F.Crowe,Mitchell A.Avery,WesleyK.M.Chong，和Masato Tanabe,J.Med.Chem.,1989,32,1642。

    P3:

    H.Kaufmann,P.Wiel和，和J.Kalvoda,Helv.Chem.Acta.,1972,55(2),381。

    P4:

    O.I.Fedorova,O.S.Anisimova，和G.S.Grinenko,Khim.Prir.Sodien.,1976,2,180。

    Richard H.Peters,David F.Crowe,Mitchell A.Avery,WesleyK.M.Chong，和Masato Tanabe,J.Med.Chem.,1989,32,1642。

    P5:

    Peter Kaspar和Herbert Witzel,J.Steroid Biochem.,1985,Vol.23,No.3,p.259。

    Richard H.Peters,David F.Crowe,Mitchell A.Avery,WesleyK.M.Chong，和Masato Tanabe,J.Med.Chem.,1989,32,1642。

    P6:

    Frank B.Colton，美国专利2,840,582,1958年。

    P7:

    Pierre Crabble和Esperanza Velarde，美国专利3,681,410,1972年。

    Peter Kaspar和Herbert Witzel,J.Steroid Biochem.,1985,Vol.23,No.3,p.259。

    P8:

    Pierre Crabble，美国专利3,492,318,1970年。

    Klaus Prezewowsky和Rudolf Wiechert，美国专利3,682,983,1972年。

    甲基降孕烷

    在此系列中的19-降孕烷可以在6α、7α、18、20或21位上结合一个甲基基团来制备。

    美国专利3,681,410描述了6α-甲基类似物的制备。

    美国专利3,682,983描述了18-甲基类似物的制备。

    美国专利3,492,318描述了7α、18和21-甲基类似物的制备。

    21-甲基类似物：

    L.A.Van Dijck,B.J.Lankwerden,J.G.C.M.Vermeer，和A.J.M.Weber,Recl.Trav.Chim.Pays-Bas Belg.,1971,90,801。

    7α、18、20和21-甲基类似物。

    Richard H.Peters,David F.Crowe,Mitchell A.Avery,WesleyK.M.Chong，和Masato Tanabe,J.Med.Chem.,1989,32,1642。

    另外有些甲基化的前身是可以商业获得的，例如：

    由此，7α-甲基或18α类似物可以这些物质来获得，其中雌酮或17α-乙炔基-19-降睾酮(炔诺酮)分别是前身。

    卤代降孕烷

    美国专利2,840,582描述了如下物质的制备：

    美国专利3,681,410描述了如下物质的制备：

    Richard H.Peters,David F.Crowe,Mitchell A.Avery,WesleyK.M.Chong，和Masato Tanabe,J.Med.Chem.,1989,32,1642。

    烷氧基衍生物由它们相应的羟基类固醇与烷基化试剂，如氟硼酸三甲基氧鎓、氟硼酸三乙基氧鎓或甲基氟磺酸盐在惰性氯烃溶剂，例如二氯甲烷，里反应而生成的。也可以使用烷基化试剂如烷基卤、对甲苯磺酸烷基酯、甲磺酰烷基酯和二烃基硫酸盐和一种基如NaH、KM或KOBut、氧化银或氧化钡在极化的非种子传递溶剂如DMF、DMSO和六甲基磷酸酰胺中生成。

    类固醇的合成反应的一般步骤对于业内人士而言是已知的。当需要确定反应时间和温度时，可以使用常规的方法来确定。在加入所需的反应试剂后，在惰性气体下搅拌此混合物，并每隔一小时取出一等份。这些等份用色谱法进行分析以监测初始物质的消失，此时反应开始稳定进行。如果初始物质在24小时内没有反应，则加热至回流，并每隔一小时取等份进行分析。如前所述，直至反应物消失。在后一种情况下，在反应稳定进行前可以使混合物冷却。

    如业内人士所知，使用色谱法和/或结晶法对生成物进行提纯。

                                                                                                          雌烷

    亚结构的合成

    根据上表，以下是某行(E1到E12)或某列(N1到N4)的中间物质的示范性合成。

    E型

    E1：

    E2：

    可商业获得的亚结构，如：雌酮。

    E3:

    James R.Bull和Jan Floor,J.Chem.Soc.Perkin I,1977(7),724。

    E4：

    可商业获得的亚结构，如：6-脱氢雌酮。

    E5:

    V.I.Mel’nikova和K.K.Pivnitskii,Zhurnal OrganickeskoiKhisnii,1974,Vol.10,No.5,pp.1014-1029。

    E6:

    Hidetoshi Takagi,Ken-ichi Komatsu，和Itsuo Yoshisawa，类固醇，1991,Vol.56,p.173。

    E7:

    Michel Mauney和Jean Rigaydy,Bull.Soo.Chien,1976,No.11-12,2021。

    E8:

    K.J.San,R.H.Blank,R.H.Evans,Jr.,L.I.Feldman，和C.E.Holmbund,J.Org.Chem.,1964,29,2351。

    E9：

    可商业获得的亚结构，如：马烯雌酮。

    E10：

    可商业获得的亚结构，如：马萘雌酮。

    E11：

    A.N.Cherkasov,A.M.Ponamarev，和K.K.Pivnitiskii,Zhurnal Organiskeskoi Khimii,1971,Vol.7,No.5.pp940-947。

    E12:

    Hidetoshi Takagi,Ken-ichi Komatsu，和Itsuo Yoshisawa，类固醇，1991,Vol.56,p.173。

    N型

    N1：

    N2:

    1．Robert H.Shapiro和Carl Djerassi,J.Am.Chem.Sco.,1964,86,2825。

    2．Pilar Lupon,Frances C.Canals,Aresnio Iglesias,Joan C.Ferrer,Albert Palomar，和Juan-Julio Bonet,J.Org.Chem.1988,53,2193-2198。

    N3:

    1．Gunther Drefahl,Kurt Ponold和Hans Schick,Berichte,1965,98,604。

    2．Richard H.Peters,David F.Crowe,Mitchell A.Avery,Wesley K.M.Chong，和Masako Tanabe,J.Med.Chem.,1989,32,1642。

    N4:

    1．Franz Sonheimer,O.Moncera,M.Viquiza & G.Rosenkranz(1955)J.Am.Chem.Sco.77:4145。

    2．William F.Johns,J.Org.Chem.,1961,26,4583。甲基雌烯Harold J.Nicholas,J.Org.Chem.,1958,23,1747。

    Richard H.Peters,David F.Crowe,Mitchell A.Avery,WesleyK.M.Chong，和Masako Tanabe,J.Med.Chem.,1989,32,1642。

    M.B.Green和F.J.Zeelen,Tetrahedron Letters,1982,Vol.23,No.35,pp.3611-3614。

    可合成的化合物因此包括这些，及由他们衍生而来的物质，如17-甲基-N1,17β-甲基-N2，或14α-甲基-N4，与E1、E2、E3、E4、E5、E6、E7、E8、E1 1或E12化合。

    卤代雌烯George A.Boswell在C.A.专利70:58140g，见下。

    G.Michael Blackburn,Brian P.Taylor，和Andrew F.Worrell，标签化合物和放射性药物学报，1986.,Vol.ⅩⅩⅢ,No.2,p.197。

    可合成的化合物因此包括这些，及由他们衍生而来的物质，如，17-氟-N1和E1、E2、E3、E5、E6、E7、E11或E12化合，还有，17-碘-N1和E2、E6或E12的化合。

    欧州专利申请EP208,497。

    可合成的化合物因此包括这些，及由他们衍生而来的物质，如(4-氯、4-溴、4-碘、6α-氯、6α-溴、6β-氯、6β-溴或6β-碘)-A1和N1、N2、N3或N4化合。还有，(17-氟、17-氯、17-溴或17-碘)-N1和A1、A2、A3、A4、A5、A6、A8、A9、A10或A11化合。

    1．3-、5-、6-、18-和19-位衍生物的制备

    在此过程的方法中使用的化合物是在3-、5-、6-、18-和19-位发生取代的雄烷类固醇。许多在3-位和5-位取代的类固醇可能是从17-羟基-和17-氧基-类固醇(可以商业获得，如从Aldrich ChemicalCo.)经过消去或还原成为Δ16同系物衍生而来的已知的化合物。Oholoff(同上)描述了许多这些化合物的合成。在图1中，17β-羟基-5α-雄烷-3-酮和甲基氯甲酸酯(a)在吡啶中形成碳酸二甲酯，17β-甲酯基氧基-5α-雄烷-3-酮(Ⅱ)，后者提供了5α-雄-16-烯-(3-酮和3-醇)的前身(Oholoff，同上，第200页)。

    烷氧基衍生物由它们相应的羟基类固醇与烷基化试剂，如氟硼酸三甲基氧鎓、氟硼酸三乙基氧鎓或甲基氟磺酸盐在惰性氯烃溶剂，例如二氯甲烷，里反应而生成的。也可以使用烷基化试剂如烷基卤、对甲苯磺酸烷基酯、甲磺酰烷基酯和二烃基硫酸盐和一种基如NaH、KM或KOBut、氧化银或氧化钡在极化的非种子传递溶剂如DMF、DMSO和六甲基磷酸酰胺中生成。

    类固醇的合成反应的一般步骤对于业内人士而言是已知的。当需要确定反应时间和温度时，可以使用常规的方法来确定。在加入所需的反应试剂后，在惰性气体下搅拌此混合物，并每隔一小时取出一等份。这些等份用色谱法进行分析以监测初始物质的消失，此时反应开始稳定进行。如果初始物质在24小时内没有反应，则加热至回流，并每隔一小时取等份进行分析。如前所述，直至反应物消失。在后一种情况下，在反应稳定进行前可以使混合物冷却。

    如业内人士所知，使用色谱法和/或结晶法对生成物进行提纯。

    2．19-羟基衍生物的制备。19-羟基雄-4,16-二烯-3-酮的合成。

    这种化合物作为19-氧代-3-氮杂-A-高-5B-雄烷的合成中的中间物质已经被解释了(Habermehl，等，Z.Naturforsch.(1970)25b:191-195)。提供了此化合物的合成方法。

                  图表Ⅳ                                                                                雄烷

    新型雄烷

    17-亚甲基雄-4-烯-3α-醇(A4/N3)

    17-亚甲基雄-4-烯-3β-醇(A3/N3)

    6β-羟基雄-4,16-二烯-3-酮(A13/N1)

    6β-羟基-17-甲基-18降雄-4,13(17)-二烯-3-酮(A13/N4)

    雄-5,16-二烯-3β-19-二醇(AS/N1的19-羟基衍生物)

    17-亚甲基雄-4-烯-3,6-二酮(A6/N4)

    17-甲基-18降雄-4,13(17)-二烯-3α-醇(A4/N4)

    17-甲基-18降雄-4,13(17)-二烯-3β-醇(A3/N4)

    17β-甲基雄-4-烯-3,6-二酮(A6/N2的17β甲基衍生物)

    3-甲氧基-17-亚甲基雄-3,5-二烯(A8/N3)

    6β-羟基-17-亚甲基雄-4-烯-3-酮(A13/N3)

    17亚甲基雄-1,4-二烯-3-酮(A11/N3)

    6β-羟基雄-1,4,16-三烯-3-酮(A11/N1的6β-羟基衍生物)

    6β-羟基-17-亚甲基雄-1,4-二烯-3-酮(A11/N3的6β-羟基衍生物)

    17β-甲基雄-4-烯-3α-醇(A4/N2的17β-甲基衍生物)

    17β-甲基雄-4-烯-3β-醇(A4/N2的17β-甲基衍生物)

    3-甲氧基-17-甲基-18-降雄-3,5,13(17)-三烯(A8/N4)

    亚结构的合成

    根据示上述图Ⅴ，以下是某行(A1到A11)或某列(N1到N4)的中间物质的示范性合成。

    A型

    A1：

    A2：

    这是一个可以商业获得的亚结构，如脱氢表雄酮。

    A3:

    Michio Matusi和David K.Fukushima,J.Org.Chem.,1970,Vol.35,No.3,p.561-564。

    A4:

    Ohloff,G.等(Hevl.Chem.Acta(1983)66:192-217)。

    A5:

    German Off.2,631,915。

    A6:

    J.Romer,H.Wagner，和W.Sihade,Steroids,1988,51/5-6,p.577-581。

    A7:

    (Habermehl等，Z.Naturforsch.(1980)256:191-195)

    A8：

    见实施例15

    A9:

    Ohloff,G.等(Hevl.Chem.Acta(1983)66:192-217)。

    A10:

    V.I.Mel’nikova和K.K.Pivnitskii,Zhumal OrganickeskoiKhisnii,1972,Vol.8,No.1,pp.68-74。

    A11：

    见实施例19。

    N型

    N1：

    N2:

    1．Robert H.Shapiro和Carl Djerassi,J.Am.Chem.Soc.,1964,86,2825。

    2．Pilar Lupon,Frances C.Canals,Arsenio Iglesias,Joan C.Ferrer,Albert Palomar，和Juan-Julio Bonet,J.Org.Chem.1988,53,2193-2198。

    N3:

    1．Gunther Drefahl,Kurt Ponold和Hans Schick,Berichte,1965,98,604。

    2.Richard H.Peters,David F.Crows,Mitchell A.Avery,Wesley K.M.Chong，和Masako Tanabe,J.Med.Chem.,1989.32,1642。

    N4:

    1．Francz Sondheimer,O.Mancera,M.Urquiza & G.Rosenkranze,J.Am.Chem.Soc.,1955,77,4145。

    2．William F.Johns,J.Org,Chem.,1961,26,4583。German Off.2,631,915描述了以下物质

    在如下位置：1α、2α、4、6α、6β、7α和16位上结合一个甲基基团的制备：

    German Off 2,428,679。

    17-甲基雄烯的合成：

    Daniel Bertin和Lucien Nedelac,Memoires Presentesala SocieteChimique,1964,No.345,p.2140。

    可合成的化合物因此包括这些，及由他们衍生而来的物质，如在1α、2α、4、6α、6β、7α、16或17位上结合甲基的N1与A1、A3、A4、A5、A8、A9、A10或A11化合，以及结合17-甲基的A2或A6。

    卤代雄烯

    美国专利3,413,321。

    German Off.2,631,915。

                                图表Ⅵ

                               19-降胆烷

    亚结构的合成：E型

    E1：

    见实施例。

    E2：

    这是一个可以商业获得的亚结构，如：雌酮。

    E3:

    PierreCrabbe美国专利3,492,318,1970年。

    E4：

    这是一个可以商业获得的亚结构，如：6-脱氢雌酮。

    E5:

    V.I.Melnikova和K.K.Pivnitskii,Zhurnal OrganischeskoiKhimii,Vol.10,No.5,p.1014,1974。

    E6:

    Hidetoshi Takagi,Ken-ichi Komatsu，和Hsuo Yoshizawa，类固醇，1991,56,173。

    E7:

    J.Perez Rrleas,J.Iriate,F.Kinel和Carl Djerassi,J.Org.Chem.,1958,23,1744。

    F8：

    见实施例。

    E9：

    这是一个可以商业获得的亚结构，如：马烯雌酮。

    E10：

    这是一个可以商业获得的亚结构，如：马萘雌酮。

    E11:

    A.N.Cherkasov,A.M.Ponamarev，和K.K.Pivniskii,ZhumalOrganicheskoi Khimii,Vol.7,No.5,p.940,1971。

    E12：

    E13：

    E14：

    Elie Stephan,Regine Zen,Laurent Authier,和Gerard Jaouen，类固醇，1995,60,809。

    亚结构的合成：NC型

    NC1:

    Gerard A.Potter,S.Elaine Barrie,Michael Jarman，和MartinG.Rowlands,J.Mde.Chem.,1995,38,2463。

    NC2:

    Richard H.Peters,David F.Crows,Mitchell A.Avery,WesleyK.M.Chong，和Masako Tanabe,J.Med.Chem.,1989,32,1642。

    NC3:

    Richard H.Peters,David F.Crows,Mitchell A.Avery,WesleyK.M.Chong，和Masako Tanabe,J.Med.Chem.,1989,32,1642。

    NC4:

    Gerard A.Potter,S.Elaine Barrie,Michael Jarman，和MartinG.Rowlands,J.Mde.Chem.,1995,38,2463。

    NC5:

    Pierre Crabbe，美国专利3,492,318,1970年。甲基降胆烷

    在此系列中的19-降胆烷可以通过在1位或7α位上结合一个甲基基团来制备。

    1-甲基类似物的前身可以如下方法制备：

    根据Carl Djerassi,G.Rosenkanz,J.Iriarte,J.Berlin，和J.Romo,J.Amer.Chem.Soc.,1951,73,1523，来制备前身物质。

    7α-甲基类似物可以从可商业获得的7α-甲基雌酮来制备。D．使用方法

    本发明的方法是通过非系统性地、由鼻施用某种或某几种类固醇实现的。

    这种通过鼻施用类固醇配体而使其与VNO直接接触的服药方式与其它方式如内服或注射相比有几处重要的不同。在本发明的方法中，适当的配体直接由鼻通道和犁鼻骨器官中的化学受体摄入而不通过内服或注射的方法--也就是非侵入性的。药物反应通过配体与特定的分布在鼻上，优选地与分布在VNO中的神经上皮细胞中的受体进行结合而进行调节。更近一步，药物反应的方式是通过神经系统而非循环系统，因此影响脑功能时可以不考虑血脑屏障。这些治疗方法提供了一种通过神经系统直接影响下丘脑的方法，因为在信息素受体和下丘脑之间只有一个突触连接。由于感觉神经位于脑的特定位置，这种方法的药物作用非常特定，从而大大降低了不良副作用的潜在可能性。

    VNO接触非常重要，因为VNO与化学感受/信息素功能相联系。VNO由一对位于鼻隔膜下沿的盲管膨胀组成。VNO包含有神经上皮，该神经上皮的轴突有突触直接通往扁桃体，并且从那里通向下丘脑。文献证明，VNO在包括人类在内的绝大多数陆生脊椎动物的胚胎中广泛存在，但在成年人中一般认为是初级的(参见Johnson等，同上)。

    在此所述的配体物质或它们的硫化、氰化(CYPIONATED)、苯甲酸盐、丙酸盐或葡糖醛酸衍生物可以直接施用，但优选采用化合的方式。可以制成液剂形式，例如液体、悬浮液等，优选为便于特定剂量一次施用的液剂。液剂可以作为滴鼻液或喷雾剂施用。有效成分也可以制成乳霜或油膏在鼻腔中局部擦拭。此外，犁鼻骨外激素还可以制成喷雾剂在鼻腔施用。作为另一种选择，也可以通过使用合成聚合物如硅酮和天然聚合物如明胶和纤维素，大量地充装或微量水平上控制这些药剂的释放。释放的速度可以通过适当选用用于控制扩散速度的聚合物来控制。(Langer,R.S.和Peppas,NA.，生物材料，2,201,1981)。天然聚合物，如明胶和纤维素，在几分钟至几小时内溶解，而硅酮则需要几个月的时间。成分中需要包括一种常规制药载体或赋形剂，一种或多种有效的化合物。另外，成分中还可能包括其它医学试剂、药学试剂、载体、辅助剂等。

    化学信息配体的最可能传播途径是吸入另一个人皮肤上自然生成的信息素。由于这些化合物是相对不挥发的，因此据估计即使在亲密接触中，一个人类实验者从另一个人的皮肤上也只吸入皮克量级的自然生成类固醇。据估计，吸入量的1％将到达犁鼻骨器官的受体。

    施用的犁鼻骨外激素的量自然要根据接收治疗的人、病症的严重程度、施用方式、施用频率和开具处方的医生的判断而不同。但是，每剂至少10pg，直接施用于犁鼻骨器官的腔中，可以有效地产生暂时的自主反应。当施用于鼻腔中时，剂量约为100pg至100μg，以1ng至10μg为佳，以10ng至1μg为更佳。施用的频率从一小时一次至一月一次，以一日八次至隔日一次为佳，以每日1-3次为更佳。可以以矿脂、猪油或羊毛脂等为基制成以水、盐水、葡糖溶液、甘油和乙醇等为载体的含有一种或几种有效成分和一些可选的制药辅助剂制成油膏。

    可以通过将上述的有效化合物和可选的制药辅助剂在一种载体如水、盐水、葡糖溶液、甘油、乙醇等中溶解扩散形成溶液或悬浮液而制成可施用的液剂。如果需要，施用的药剂中还可以含有微量的无毒添加物质如湿化剂或乳化剂、PH值缓冲剂等，例如乙酸钠、甘油一月桂酸山梨糖酯、三乙醇胺乙酸钠、三乙醇胺油酸酯等。制备这些药剂形式的实际方法对于精通本行业的人士是已知或明显的；例如，参见Remington的《制药科学》，Mack出版社，Easton,PA，第15版，1975。在任何情况下，施用的药剂成分将包括达到一定剂量可以有效地减轻用药的实验者症状的一种或几种有效化合物。

    至于施用气雾剂，有效成分优选地以微小间隔的形式与一种表面活性剂和一种推进剂一同施用。有效成分的典型重量配比为0.001-2％，以0.004-0.10％为佳。

    表面活性剂当然必须是无毒的，以可溶于推进剂为佳。代表物为包含6-22个碳原子的脂肪酸的酯或偏酯，如己酸、辛酸、月桂酸、棕榈酸、硬脂酸、亚油酸、硬脂油酸和油酸等，带有脂族多元醇或其环酐如亚甲基乙二醇、丙三醇、赤藓醇、阿糖醇、甘露糖醇、山梨糖醇和从山梨糖醇(以商标“Spans”销售的山梨糖醇酯)中衍生的己糖醇酐和这些酯的聚氧化乙烯和聚氧亚丙烯衍生物。也可以使用混合酯，如混合或自然的甘油酯。优选的表面活性剂为油酸盐或脱水山梨糖醇，如那些以“Arlacel C”为商标的(倍半油酸山梨糖醇酯)，以“Span 80”为商标的(一油酸山梨糖醇酯)和以“Span 85”为商标的(三油酸山梨糖醇酯)。这些表面活性剂可以占成分重量的0.1-20％，以0.25-5％为佳。

    成分的剩余部分通常是推进剂。液化推进剂在大气条件下通常是气态，加压凝结。合适的液化推进剂包括多达5个碳的低级烷烃，如丁烷和丙烷、氟化烃或氟氯化烃，例如以商标Freon销售的产品。也可以使用上述试剂的混合物。

    在制造气雾剂时，以适当的推进剂充装带有合适阀门的容器，推进剂中含有微小分隔的有效成分及表面活性剂。成分保持在较高的压强下，由阀门控制释放。

    然而另一种施用方式是在皮肤上局部施用挥发性液体成分，优选地，在人的面部皮肤上。混合物通常含有醇，如乙醇或异丙醇。混合物中还可能包括增味剂。E．抗育作用

    类固醇19-降孕-1,3,5(10)-三烯-3-醇(19-降孕烷图表中的E2/P4化合物)在雌鼠的VNO中进行实验。EVG和犁鼻骨神经(VNn)放电频率分别如附图97和98所示。这一数据显示VNO刺激。类固醇E2/P4当给低荷尔蒙行为的(由雌激素-受体结合衡量)雌鼠口服后，显示具有交媾后抗育作用。(Peters等，《J.Med.Chem.》,1989,32,1642-52)。附图97和98中的数据说明这一抗育作用是可以解释的，因为E2/P4不是荷尔蒙，而作为一种犁鼻骨外激素通过刺激VNO来影响下丘脑。与鼠模型数据一致，化合物E2/P4也显示了对女性VNO的刺激(见附图118)及较小程度上的对男性VNO的刺激(见附图140)，因此可以预料犁鼻骨外激素对人类有抗育作用。

    通过VNO刺激下丘脑可以抑制LH和FSH的释放。这可以提供一种治疗前列腺癌、青春期早熟(在男性和女性中)、子宫内膜异位、子宫平滑肌瘤、乳腺癌、经前综合症和功能性子宫出血的临床方法。F．衡量情感、情绪和性格特征

    与情感、情绪和性格特征相关联的感觉状态通常使用问卷来衡量。例如可以要求一个人回答包括几个描述感觉状态形容词的问卷。这个人衡量他或她的由这些形容词描述出的感觉状态，并在数值刻度上衡量这种感觉的强烈程度。相关形容词的集群和一个实验者对每个形容词的评价的统计分析提供了衡量不同感觉状态的基础。

    可选地，感觉状态也可以由自主改变来衡量，例如在多象评价中的使用(极肤电流反应、脉搏及其它)。Cabanac,M.《生理学年鉴》(1975)37:415；Hardy,J.D.“体温调节”，59章，1417页，医学生理学，Ⅱ卷，Ed.:《VB Mountcastle》(1980)；WolframBouscein.《皮层电行为》(Plenum出版社，1992)。此外，也可以衡量非语言性提示如面部表情和肢体动作。经前期综合症的治疗

    进行本研究的病人(20-45岁的妇女)在PMDD症状最严重的一天(月经周期的24-28天)参加一次记录过程。这个过程在一个安静的房间里持续约1小时，实验者仰卧。

    研究中使用的有效成分是16α,17α-环氧基雄-1,3,5(10)-三烯-3-醇。犁鼻骨器官向鼻的开口位于鼻横隔的两侧，一只鼻探针(犁鼻骨涂药器)放置在一个鼻孔中，它的小口指向VNO开口。有效物质或对照剂的一个气流导引到VNO，接着，同样的程序在另一个鼻孔中重复。这种对犁鼻骨器官双侧的喷送在第一次之后的30分钟再次重复。

    这套装置导引200μl的气流，持续1秒钟。在一个气流中喷送的有效物质的量为100pg，在整个实验中向病人的VNO喷送的有效物质的总量为400pg(表Ⅱ)。

                    表Ⅱ随机VBO刺激的实验原则

                   n=40(n对照组=20,n实验组=20)

    筛选            月经周期第24-28天+----------+       +----------------+-------------+----------------+月经周期       双侧VNO刺激    双侧VNO刺激    双侧VNO刺激访问               单盲            双盲          双盲         无VNO刺激临床诊断        (对照组)         (随机)         (随机)

                                                (同前)------------------+-----+-------------+--------------+-------------+------

                心理测试         心理测试       心理测试      心理测试

                电生理学         电生理学       电生理学      (在家回答)

                  -10                0             30-------------------+-----------------+--------------+-----------//----+--

                                 时间(分钟)                          5小时

    实验者在她们有明显的PMDD症状时受测。这通常是在她们月经周期的第24-28天。在用实验物质或对照剂(也见表Ⅱ)双侧刺激VNO的10分钟前和30分钟后进行心理测验(表Ⅲ)。在完成30分钟的问卷后，再用相同的物质(犁鼻骨外激素或对照剂)对VNO进行刺激，再给病人一份类似的心理测验，由病人离开实验室5小时后在家中回答。在实验的第二天向病人询问她们在第二次向VNO进行喷送后的情绪变化、感情、及其他人对她的观察。自主反射和EEG

    使用多个固定在病人皮肤上的周边电极来研究自主功能和脑电图(EEG)。在刺激VNO15分钟前和30分钟后进行记录。皮肤电生理活动(EDA)用位于大拇指和无名指(右手)手掌皮肤的两个银盘电极进行记录。心电图(ECG)从I位进行监测(标准前平台I)。呼吸频率(RF)用位于放置在下胸的应变传感器进行记录。窦性心律由RF和ECG频率的相互关系得到。为了衡量副交感神经系统情况的变化，在外耳道用微型热敏电阻探针测量体温(BT)。双极肌电图(EMG)由置于下颌的两个电极取得。脑电图从标准10/20体系的CzAl和T3Al进行记录。所有的信号都进行放大和数字化(Biopac系统)，并由一台计算机(Macintosh LC-Ⅲ)进行连续监测和储存。在VNO刺激后的筛选阶段和两次双盲阶段对EEG和自主功能进行记录(见表Ⅱ)。

    情绪变化可以用问卷在从0到4的刻度上进行衡量。在VNO施用对照剂或实验物质之前和30分钟后记录的自主功能用“aqknowledge”软件(Biopac系统)进行处理。结果的含义用t-实验和差异分析进行衡量。

    对14个诊断为PMDD的患者进行筛选。2名患者对对照剂产生了反应，不能参加本研究。6名患者VNO中喷送的是类固醇，而另6名患者VNO中喷送的是对照剂。结果如表Ⅲ所示。

    在用类固醇(总量=200pg)或对照剂刺激VNO之前和之后的30分钟要求患者对11项PMDD症状进行打分。用对照剂对VNO进行双侧刺激并没有相对于比照水平(图210，阴影部分)明显改变症状的程度。但是，在用类固醇(总量=200pg)对VNO进行双侧刺激后30分钟，绝大多数的PMDD症状有明显减轻(p小于或等于0.03)。对于一些例如“我感觉想扔东西”和“我很生气”的症状，效果明显到p=0.01。对于其他症状如“我感觉心里灰蒙蒙的”和“我感觉世界没有我会更好”在施用类固醇后与比照水平没有不同(p＞0.05)。

    在用类固醇刺激VNO30分钟后对自主功能的分析显示一些反射的改变与患者的情绪改善相互关联。通过肌电图(EMG)测得的骨骼肌的活动在向VNO喷送类固醇30分钟后减弱，但在施用对照剂后无此变化(附图211)。并且，皮肤电生理活动的频率在施用犁鼻骨外激素后减弱，而在施用对照剂后不变(附图212)。其他的自主反射没有明显变化。在对VNO施用类固醇后，脑电图波形没有从基线有大幅度的改变。但是，用犁鼻骨外激素治疗的4名患者有α皮层活动的增加。

    在第二次向VNO施用犁鼻骨外激素后5小时对PMDD症状的打分情况也进行了研究。这时候与对照水平没有明显不同。但是，在实验次日清晨进行的电话访问中，患者们提到在离开实验室后感觉好一些，这种效果持续了1-2个小时。

    小剂量的类固醇(200pg)以气雾形式施用于患有PMDD的患者的VNO产生了明显的改善。如附图210所示，大部分症状在施用该物质30分钟后有所减轻。而向VNO施用对照剂后没有这一效果。症状减轻伴随着放松，由EMG的降低和EDA频率的降低测量出来。最后，患者的改善还由实验次日清晨的口头报告(电话访问)得到证实。

                                                       表Ⅲ                                                                         犁鼻骨外激素对PMDD患者的作用(n=12)    症状    改善    我感觉想逃开    我感觉想扔东西    我生气    我感觉肿起来    我的乳房疼痛    我想哭    我感觉被淹没了    我很容易伤感    我为小事发脾气    我感觉心里灰蒙蒙的    我感觉世界没有我会更好    ++    ++++    ++++    +++    ++    ++    ++    +++    +++    0    0    骨骼肌放松    皮肤电生理活动放松    α脑电波活动    ++    ++    +焦虑测试

    8位患者用对照剂进行VNO治疗，11位患者用雄-4,16-二烯-3β-醇进行治疗。焦虑症状的打分由传统的Hamilton-A焦虑测试对下列几项进行衡量：总HAMILTON-A    即时HAMILTON-A    静态HAMILTON-A焦虑情绪        焦虑情绪          恐惧紧张            紧张              失眠恐惧            智力              沮丧情绪失眠            躯体(肌肉)        胃肠症状智力            躯体(感觉)        生殖泌尿症状沮丧情绪        心血管症状躯体(肌肉)      呼吸症状躯体(感觉)      自主症状心血管症状      访问时的行为呼吸症状胃肠症状生殖泌尿症状自主症状访问时的行为

    结果如附图213至附图218所示，在附图213中，用药的患者(T)的即时、静止和总Hamilton-A相对于对照水平(C)显示有所改善。在附图214中，施用对照剂的患者中仅25％出显示45％以上的Hamilton-A分值下降，而64％的用药患者显示了45％以上的Hamilton-A分值下降。

    附图215显示用药的焦虑患者相对于对照组有显著的呼吸频率(RF)和心率(CF)下降。

    附图216显示用药的焦虑患者有副交感神经系统改善。这一特性由生理性窦性心律的标准测试来测量。    

    附图217显示用药的焦虑患者相对于对照组在皮肤电生理活动(EDA)方面有改善(降低)。

    附图218显示用药的焦虑患者相对于对照组体温有改善(上升)。犁鼻骨电图(EVG)

    附图201A显示的是从一位25岁男性实验者身上记录的EVG的叠加图。ETA(雌四烯基乙酸酯)刺激物产生了与对照组明显不同的EVG。在所有被研究的实验者身上产生的EVG幅度的平均值为M=1.95mV,S.D.=+0.8mV,n=10。含有等量PDD的气流导致更大的EVG。在所有实验者身上记录的等量的PDD所产生的EVG幅度平均值为M=3.6V,S.D.=0.7mV,n=10)。

    犁鼻骨外激素对鼻呼吸粘膜电图的作用如附图201B所示。研究表明呼吸粘膜对于ETA和PDD(孕二烯二酮)(p＞0.1,n=10)都无反应。同样的犁鼻骨外激素在嗅觉上皮上进行实验时(未经出版的观测结论)也无电图反应。

    附图202描述出了在男性实验者身上得到的ETA和PDD剂量效果曲线。注意对于这两种犁鼻骨外激素，EVG幅度的增长是浓度的函数，刺激间隔为5分钟的剂量-效果关系是一条S形曲线。ETA的斜度与PDD的没有明显不同(p＞0.02,n=20)。犁鼻骨外激素产生的自主反射

    中枢神经系统(CNS)对含有ETA(5X10-9M)和PDD(5X10-9M)的气流对VNO的刺激的反射反应的研究如附图203所示，将在下文讨论。皮肤电生理活动(EDA)

    这两种犁鼻骨外激素都导致皮肤传导相对与对照组有所上升(p＜0.01)。一股含犁鼻骨外激素，无论是ETA或PDD，的气流产生了瞬时的单相波，延迟时间为Xlat=520ms,SD=110ms。PDD的峰幅平均值为XPDD=21.1S,SD=19μS，对于ETA它是XETA=22.01μS,SD=13.6μS。平均的波持续时间为32秒。犁鼻骨外激素ETA和PDD还改变了自发的EDA的频率。在施用了EAT或PDD后，波的频率由4.1下降至0.9。体温(BT)

    一股含ETA的气流产生了小但明显的体温上升(XLTA=0.24℃,SD=0.1℃,p＜0.02)，持续了2分钟，然后回复到基线。心率(CF)

    心率由EKG的R-间隔来测量。两种犁鼻骨外激素在男性实验者身上所产生的效果有显著不同(p＜0.01)(见附图215)。与对照值相比，ETA使心率下降了XETA=-3.3次/分，SD=1次/分，而PDD使心率上升了XPDD=3.8次/分，SD=1.5次/分。这些变化在犁鼻骨外激素刺激VNO后约10秒开始产生，在约2分钟后心率回复到对照值。呼吸频率(RF)

    PDD产生了小但明显的呼吸频率下降(XRF=-2次/分，SD=1次/分，n=10)，在刺激VNO5秒后出现，持续1分钟。脑电图(EEG)

    脑电图从顶点(CzA1)和临时区(T3A1)进行记录，每4分钟长度用快速傅里叶变换进行分析。然后，计算向VNO施用一种犁鼻骨外激素之前和之后的α/β脑波活动(α/β)。PDD使α/β比值从对照组的0.11改变至治疗组的1.85，而ETA使其从对照组的0.14改变至治疗组的1.71。这些效果与对照值显著不同(p＜0.02)。

    如上所述自主反射的测量值说明以犁鼻骨外激素刺激人的VNO会引发中枢神经系统的反射活动。垂体激素和睾酮的血浆浓度

    犁鼻骨外激素刺激VNO对于垂体激素的血浆浓度的作用如表Ⅱ和Ⅲ所示。表Ⅱ显示在B组的10个实验者在施用ETA之前和过程中的TSH、PRL、FSH和LH的搏动释放的特征。

    在10个正常男性施用ETA的志愿者中，TSH、PRL和FSH与正常对照组比较没有明显不同(p＞0.05)。但是，施用ETA的实验者的中峰和峰宽的测量值有所上升，分别是对照组79与用药组92和对照组45与用药组54(p＜0.05)。实验者的LH峰值数与控制值6.8相比(p＜0.05)从5.2显著下降。

    对10个男性和10个女性实验者(C组)施用浓度为5X10-9M的PDD，每10分钟施用一次，持续6小时。对每次取样时间取得的LH和FSH血清浓度进行搏动分析。如表Ⅲ所示，在PDD用药过程中，对于两种促性腺激素，峰下的平均面积(浓度/时间)和基值以上的增量有显著下降，但仅限于男性，在女性中没有明显改变。

    在施用PDD的男性中，M.区和IA.基值的FSH值都明显下降：分别是，用药后的在12.7相对于对照组的17.6，和用药后的0.63相对于对照组的0.89。同样，对于同一组，M.区和I.A.基值的LH值都明显下降，分别为：用药后的在44相对于对照组的77，和用药后的1.4相对于对照组的2.0。

    如上所述的所有测量值，在施用PDD的女性实验者中没有发现有统计上的明显变化(表Ⅲ)。

    发现的主要变化是LH基值以上增量的降低(2.0相对于1.4,p＜0.009)。

    与施用ETA的结果相似，进行分析的其他垂体激素(PRL和TSH)无论在绝对浓度或是搏动特性上，都没有显示统计上的明显变化。

    犁鼻骨外激素ETA和PDD对VNO的作用和下丘脑反射的作用都是性别特异的。它们显著降低男性体内的促性腺激素搏动性，但在女性体内无此作用(见表Ⅲ)。这一对于VNO(犁鼻骨电图)的性别特异的作用在以前使用人体皮肤上自然产生的犁鼻骨外激素(信息素)时就有所阐述：雌-1,3,5(10),16-四烯-3-醇仅刺激男性的VNO，不刺激女性的VNO。但是，雄-4,16-二烯-3-酮仅刺激女性的VNO，不刺激男性的VNO。

    这些数据为VNO和基前脑之间的函数关系提供了依据。更进一步，以ETA(3×10-9M)刺激男性的VNO明显改变了LH搏动性，但不改变FSH。PDD(5×10-9M)仅明显改变男性的LH和FSH搏动性。这些发现开辟了一种机会，可以使用一种特定的犁鼻骨外激素(化学合成的，在自然界中不存在的)治疗某些性别特异性的疾病。

    在几种哺乳动物中，有文献阐述通过暴露于异性的同种化学信息物质而释放LHRH和促性腺激素(Beltramino等，《神经内分泌学》36(1983):53-58,Coquelin等，《J.神经科学》4(1984):2230-2236)。也说明在实验室动物中，VNO受体对于这一神经内分泌反射是至关重要的。(Johns 1978,Wysocki 1979,Meredith 1994)。目前的结果说明这一神经内分泌反射在人体内是起作用的，并可以通过对于犁鼻骨外激素敏感的VNO受体位置得到调节。见表Ⅱ和Ⅲ,LH和FSH峰高和频率的下降和峰间隔的增加。所以，ETA和PDD一定是在影响犁鼻骨传入信号，这一信号调节下丘脑LHRH神经元集群。

    对几种动物的实验研究表明LH搏动性和下丘脑-垂体-门静脉血液的间歇性GnRH释放之间有紧密的相互关联。(Veldhuis等，J.Clin.Endocr.Metab.,64(1987):1275-1282)。正常男性、绝经后女性和整个月经周期都接受研究的年青妇女体内的LH搏动释放反应出间歇性内促性腺释放激素(GnRH)行为。尽管生物活性LH脉冲幅度的变化可能由内GnRH脉冲信号的变化和/或垂体促性腺-细胞反应的变化引起，明显的LH脉冲频率变化也可以看成是反应了下丘脑GnRH脉冲的相应调节。(Knobil,E.1980,《Recent ProgHorm Res》36:53)。在向男性实验者的VNO施用毫微微摩尔量的犁鼻骨外激素过程中观察到的促性腺激素释放量和模式的变化产生了下丘脑/垂体水平上的神经-药理学作用。

    从视叶前下丘脑的LHRH搏动释放引发两种促性腺激素(LH和FSH)从垂体中释放出来。(Yenand Jaffe，生殖内分泌学教科书)。

    几位患者的血睾酮水平数据如附图所示(实验者1、2、4和8分别对应附图204、205、206和207)。诊疗A表示向VNO施用孕-4,20-二烯-3,6-二酮后的水平。诊疗B表示施用对照剂后的睾酮水平。施用孕二烯二酮后的曲线斜度与对照水平的曲线斜度在统计上是不同的。并且，在大多数情况下，施用孕二烯二酮后的睾酮水平与对照水平相比是较低的。这表明VNO施用一种犁鼻骨外激素可以影响血睾酮水平。Ⅲ．实施例

    下列实施例用来说明而非限制本发明。

    实施例中使用的缩略如下：aq.=水溶液；RT.=室温；PE=石油醚(沸点50-70℃)；DMF=N,N=二甲基甲酰胺；DMSO=二甲亚砜；THF=四氢呋喃。

                                          方法1                                 方法2                                  方法3                                 方法4                            方法5  孕烷的氧化               方法6 21-亚甲基-20(R)-甲基孕烷的合成                        方法7  孕烷的合成                              方法8  胆三烯的合成                           方法9  胆烷的合成实施例实施例1 -孕-4,20-二烯3α-(β-)-醇

    向-78℃氩气中的1M三戊基氢硼化锂溶液(5.0ml,5.0mmole)中，加入孕-4,20-二烯-3-酮(1.10g,3.70mmole)的无水THF溶液(14ml)，搅拌，混合物升温至室温。3小时后，混合物冷却至-78℃，然后依次加入下列反应物：水(2ml)，乙醇(6ml),12％KOH水溶液(10ml)和3％过氧化氢(50ml)。混合物搅拌升温至室温。2小时后加入乙酸乙酯(200ml)，继续搅拌。有机层分离后，用饱和NaHSO3溶液、饱和NaHCO3溶液和饱和NaCl溶液冲洗，干燥(Na2SO4)，真空蒸发，获得2.1g生成物。该生成物用急速色谱法在210g硅胶(230-400mesh)中提纯，用EtOAc/CH2Cl2洗脱(5∶95→7∶93)获得三部分。第1部分(0.8g)含有不纯的3α-醇。第2部分(0.1g)是3α-和3β-醇的混合物。第3部分(0.25g)是纯的3β-醇(23％)。第1部分用急速色谱法在80g硅胶(230-400mesh)中再提纯，用EtOAc/己烷洗脱(10∶90→15∶85)，获得0.15g的纯3α-醇(14％)。实施例2孕-3,5,20-三烯-3-基甲基醚，2

    根据方法1，混合物2、3、4和5制备如下。

    孕-4,20-二烯-3-酮(1,1.00g,3.35mmol)的2,2-二甲氧基丙烷(5.0ml,41mmol)，二甲基甲酰胺(5.0ml)和甲醇(0.2ml)的溶液用一水合p-甲苯磺酸(26.9mg,0.141mmol)为催化剂加热回流2小时。冷却后，加入碳酸氢钠(153.6mg,1.828mmol)，混合反应物分隔于75ml己烷和50ml冰水间进行分离。有机层用50ml的水冲洗2次，用50ml的盐水冲洗1次，然后滤过一块17mm高，对角线长30mm的硅胶60。生成物再用100ml的己烷洗脱。混合洗脱液浓缩，用丙酮/甲醇再结晶得到微黄色有光泽的片晶(828.7mg,2.652mmol,79％)，熔点111-114℃。实施例3 孕-1,4,20-三烯-3-酮

    孕-4,20-二烯-3-酮(1,1.19g,3.99mmol)与2,3-二氯-5,6-二氰-1,4-苯醌(DDQ,2.72g,12.1mmol)的40ml苯溶液在氩气中加热回流24小时。冷却的悬浮液用乙醚稀释，用两份100ml5％(重量比)氢氧化钠，两份100ml水和一份100ml盐水冲洗。得到的乳浊液加入乙醚(100ml)，用硫酸钠吸收，然后滤过一块硫酸钠(20g)。残留物用50ml的乙醚冲洗2次，混合滤液减压浓缩，然后进行急速色谱分析(25％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，得到微黄色晶状固体(0.26g,0.88mmol,22％)。实施例4孕-1,4,20-三烯-3-醇，4

    孕-1,4,20-三烯-3-酮(3,0.26g,0.88mmol)的25ml无水乙醚溶液在氩气环境下用氢化锂铝(250.5mg,6.601mmol)还原2小时，然后用2.50克芒硝急冷。得到的悬浮液搅拌70分钟，过滤，然后用50ml的乙醚冲洗2次。混合滤液减压浓缩，生成物用制备性TLC法提纯(35％乙酸乙酯/己烷于铝)，得到白色针状体(26.1mg, 87.4μmol,10％)，熔点98-128℃。实施例5孕-4,20-二烯-6β-醇-3-酮，5

    m-氯过苯甲酸(MCPBA,77.4％,763.4mg,3.42mmol)在30ml的1,2-二甲氧基乙烷(DME),6ml的水和2.4ml的5％(重量比)的氢氧化钠中的悬浮液，85分钟内搅拌加入到孕-3,5,20-三烯-基甲基醚(2,400.3mg,1.281mmol)的20mlDME+2ml水的溶液中。反应继续进行5小时，然后倒入到50ml的饱和碳酸氢钠溶液中。混合物用50ml的乙醚萃取3次，混合有机滤物用50g5％(重量比)五水合硫代硫酸钠+3份50ml的盐水冲洗，用硫酸镁干燥，赛力特硅藻土过滤。用10ml乙醚冲洗残留物，混合滤液真空浓缩。急速色谱分析(35％乙酸乙酯/己烷于硅胶)和制备性TLC分析(35％乙酸乙酯/己烷于硅胶)得到分离困难的混合物白色晶体(95.5mg,0.304mmol,24％)。实施例6 20,21-二甲基孕-5,20-二烯-3β-醇，6

    根据方法2，混合物6、7、8和9制备如下：

    溴化乙基三苯基鏻(25.99g,70.00mmol)和t-丁氧化钾(7.86g,70.0mmol)和80ml的无水DMSO在摄氏80℃氩气下油浴搅拌1小时，然后加入温的preen-5-烯-3β-醇-20-酮(4.43g,14.0mmol)80ml无水DMSO溶液。红色悬浮液搅拌1小时，从加热设备中取出，倒入到200ml的冰盐水中。混合物用100ml的乙醚萃取3次，混合有机萃取物用100ml盐水冲洗，硫酸钠干燥，赛力特硅藻土过滤。用50ml的乙醚冲洗残留物，然后混合滤液减压浓缩。黄色生成物用95％乙醇加热取出，加入1g活性炭短暂沸腾，用赛力特硅藻土过滤。残留物冷却过滤后，用乙醇再结晶两次，得到白色晶体(1.746g,5.314mmol,38％)，熔点140-145℃。实施例7 20,21-二甲基孕-4,20-二烯-3,6-二酮，7

    琼斯试剂(2.67M,2.0ml,5.3mmol)加入到20,21-二甲基孕-5,20-二烯-3β-醇(6,460.1mg,1.400mmol)的50ml丙酮溶液中，搅拌45分钟。混合物用2-丙醇(1.0ml)急冷后倒入到100ml的水中，用50ml的乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用50ml饱和碳酸氢钠+50ml的盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土过滤。残留物用25ml的乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物用急速色谱分析(25％乙酸乙酯/己烷于硅胶)和95％乙醇再结晶得到黄色针状物(138.2mg,0.4059mmol,29％)，熔点172-178℃。实施例8 20,21-二甲基孕-4,20-二烯-3-酮，8

    20,21-二甲基孕-5,20-二烯-3β-醇(6,400.3mg,1.218mmol)的5ml二氯甲烷溶液用氯铬酸吡啶鎓(525.4mg,2.437mmol)氧化42小时。加入乙醚(3.5ml)，悬浮液滤过一块直径5mm，高60mm的硅胶。硅胶块再用3.5ml的乙醚洗脱。混合滤液减压浓缩。得到的树脂样物作急速色谱分析，再用乙醇水溶液再结晶，得到黄色晶体(43.6mg,0.134mmol,11％)，熔点157-165℃。实施例9 孕-4,20-二烯-3,6-二酮，9

    孕-5,20-二烯-3β-醇(300.5mg,1.000mmol)的35ml丙酮溶液在冰水浴中冷却，加入2.67M的琼斯试剂(0.71ml,1.9mmol)。搅拌1.5小时后，再加入0.71ml的琼斯试剂，反应持续45分钟，加入2-丙醇(1.0ml)，混合物倒入100ml水中。然后混合物用50ml的乙酸乙酯萃取2次，混合有机萃取物用50ml的饱和碳酸氢钠+50ml的水+50ml的盐水冲洗，滤过一块直径21mm，高22mm的硅胶60。硅胶块用25ml乙酸乙酯洗脱，混合滤液减压浓缩。生成物用95％乙醇再结晶得到浅黄色粉末(104.6mg,0.3348mmol,33％)，熔点114-120℃。实施例10 孕-5,17,20-三烯-3β-醇，10

    17α-乙炔基雄烯二醇(439.4mg,1.397mmol)的10ml无水THF溶液在氩气下加入到氢化锂铝(106.5mg,2mmol)和氯化锂(在122.9mg,0.9220mmol)在10ml的无水THF的悬浮液中。在加热回流17小时后，反应混合物用十水硫酸钠(1.00g,3.10mmol)搅拌2小时冷却。混合物过滤，残留物用3份10ml的THF冲洗。混合滤液减压浓缩得到0.44g白色固体。用急速色谱法(30％乙酸乙酯/己烷于硅胶)提纯，用乙醇水溶液再结晶2次，得到白色有光泽晶体(92.0mg,0.303mmol,22％)，熔点144-149℃。实施例11 5α-氯-6β,19-环氧基孕-17-3β-醇，11

    根据方法3，混合物11、12、13和14制备如下：

    在76-86℃的水浴中，溴化乙基三苯基鏻(3.05g,8.22mmol)和t-丁氧化钾(0.92g,8.2mmol)氩气下在无水DMSO(9.2ml)中反应1小时，然后加入温的5α-氯-6β,19-环氧基雄-3β-醇-17-酮(555.9mg,1.640mmol)的9.2ml无水DMSO溶液，混合物再搅拌1小时。然后将反应物倒入25ml的冰盐水中，用10ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用盐水冲洗，用硫酸镁干燥，赛力特硅藻土过滤。残留物用5ml的乙醚冲洗2次，混合滤液真空干燥。得到的黄色油状物用急速色谱法提纯(60％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，得到白色糖浆状固体(0.34g,0.97mmol,59％)。实施例12 5α-氯-6β,19-环氧基孕-17-烯-3-酮，12

    5α-氯-6β,19-环氧基孕-17-烯-3β-醇(11,0.34g,0.97mmol)的35ml丙酮溶液在冰丙酮浴中冷却，加入0.47ml的2.67M琼斯试剂。搅拌40分钟后，反应物加入0.5ml的2-丙醇冷却。加入水15ml，减压去除挥发成分，混合物用15ml的二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物用15ml的饱和碳酸氢钠+15ml的盐水冲洗，用硫酸镁干燥，赛力特硅藻土过滤。残留物用5ml的二氯甲烷冲洗2次，混合滤液真空干燥。生成物用30％乙酸乙酯/己烷作洗脱剂在硅胶上做急速色谱分析，得到白色晶状固体(0.34g,0.97mmol，定量的)。实施例13 6β,19-环氧基孕-4,17-二烯-3-酮，13

    5α-氯-6β,19-环氧基孕-17-烯-3-酮(12,0.34g,0.97mmol)加热溶解于10ml的无水甲醇中，加入乙酸钾(0.60g,6.1mmol)，室温下蒸馏出6.5ml的溶剂。残留液减压浓缩，用25ml的水取出，用10ml的二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物用硫酸镁干燥，赛力特硅藻土过滤。残留物用10ml的二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩，得到白色晶状固体(290.0mg,0.9281mmol,96％),TLC(60％乙酸乙酯/己烷于硅胶；Rf0.61)检测是均匀的。实施例14 孕-4,17-二烯-19-醇-3-酮，14

    6β,19-环氧基孕-4,17-二烯-3-酮(290.0mg,0.9281mmol)的10ml冰醋酸溶液中加入锌粉(1.12g,17.1mg-atom)，锌粉先用10％盐酸搅拌2分钟活化，用水和丙酮冲洗。悬浮液在99-102℃下剧烈搅拌10分钟，然后用赛力特硅藻土过滤。残留物用10ml的醋酸冲洗4次，混合滤液真空浓缩。生成物用50ml乙酸乙酯取出，用50ml水+50ml的饱和碳酸氢钠+50ml的盐水冲洗，用硫酸镁干燥，赛力特硅藻土过滤。残留物用10ml的乙酸乙酯冲洗，混合滤液真空干燥。生成物用乙酸乙酯再结晶生成白色晶体(46.4mg,0.148mmol,16％)，熔点192-195℃。实施例15 孕-4-烯-3β-醇-20-炔，15

    孕-4-烯-3β-醇-20-炔，15：孕-4-烯-3-酮-20-炔(200.1mg,0.6750mmol)和三(t-丁氧基)氢化锂铝(343.8mg,1.352mmol)悬浮于3.6ml的无水乙醚中。反应4小时后，再加入343.5mg(1.351mmol)的氢化物，反应持续16小时。见方法4。用十水硫酸钠(3.41g)冷却后，反应混合物搅拌15分钟，然后用硅藻土过滤。残留物用10ml的乙醚萃取5次，混合滤液减压浓缩。生成物作急速色谱分析(25％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，然后用乙醇水溶液再结晶得到白色粉末(85.0mg,0.285mmol,42％)，熔点120.5-123.5℃。实施例16 20,21-二甲基孕-4,20E-二烯-3,6-二酮，16

    琼斯试剂(2.67M,1.75ml,4.67mmol)加入到20,21-二甲基孕-5,20E-二烯-3β-醇(400.0mg,1.281mmol)的45ml丙酮溶液中，搅拌30分钟。然后将混合物倒入85ml的水中，用40ml乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用40ml饱和碳酸氢钠+40ml盐水冲洗，用硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做急速色谱分析(20％乙酸乙酯/己烷与硅胶)再用乙醇水溶液再结晶得到浅黄色针状物(119.1mg,0.3497mmol,29％)熔点171-173℃。TLC(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示主要成分在Rf0.17，少量杂质在Rf0.24。实施例17 20-甲基孕-4,20-二烯-3,6-二酮，17

    琼斯试剂(2.67M,1.83ml,4.89mmol)加入到20-甲基孕-5,20-二烯-3β-醇(400.0mg,1.272mmol)的45ml丙酮溶液中，反应物搅拌20分钟。用2-丙醇(0.91ml)冷却后，混合物倒入到85ml的水中，用40ml乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用40ml饱和碳酸氢钠+40ml盐水冲洗，用硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用25ml的乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。固体生成物用乙醇水溶液再结晶得到黄色晶体(235.0mg,0.7298mmol,57％)熔点148-150℃。TLC(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示主要生成物在Rf0.24，微量杂质在原点。实施例18 孕-4,16-二烯-3,6-二酮，18

    琼斯试剂(2.67M,0.23ml,0.61mmol)加入到孕-5,16-二烯-3β-醇(45.5mg,0.151mmol)的5ml丙酮溶液中，混合物搅拌20分钟。用2-丙醇(0.11ml)冷却后，加入10ml的水，然后混合物用5ml乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用5ml饱和碳酸氢钠+5ml盐水冲洗，用硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用5ml的乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做制备性TLC(25％乙酸乙酯/己烷与硅胶)得到浅黄色固体(10.6mg,33.9μmol,22％),TLC(Rf0.41,25％乙酸乙酯/己烷于硅胶；初始物质Rf0.30)检测是均匀的。实施例19 孕-4,17,20-三烯-3,6-二酮，19

    琼斯试剂(2.67M,1.03ml,2.75mmol)加入到孕-5,17,20-三烯-3β-醇(214.5mg,0.7187mmol)的25ml丙酮溶液中，混合物搅拌20分钟。用2-丙醇(0.52ml)冷却后，混合物倒入到50ml的水中，用25ml乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用25ml饱和碳酸氢钠+25ml盐水冲洗，用硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。用乙醇水溶液进行再结晶，伴随活性炭处理，得到浅黄色针状物(67.7mg,0.218mmol,30％)，熔点140-143℃。TLC(25％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示生成物在Rf0.43，微量杂质在Rf0.86,0.14,0.08和0.00(孕-5,17-二烯-3β-醇Rf0.32)。实施例20 21-亚甲基-20(R)-甲基孕-4-烯-3-酮，20

    异丙醇铝(0.39g,1.9mmol)于3.6ml的热甲苯中，加入到21-亚甲基-20(R)-甲基孕-5-烯-3β-醇(208.2mg,0.6337mmol)的环己酮(3.6ml,35mmol)和18ml甲苯的溶液中。混合物封闭加热回流2小时。在冰中冷却后，加入0.92ml的水和2.2ml的3.6N硫酸，混合物摇动1分钟。再加入水(4.6ml)，混合物摇动5分钟，去除水层。挥发成分用共沸蒸馏/蒸汽蒸馏除去，得到的水性悬浮液用5ml的二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物滤过一小块置于硅藻土上的硫化钠，所有这些都置于一个巴斯德吸管中。残留物用5ml的二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩。生成的薄膜层再结晶后得到白色针状物(152.7mg,0.4677mmol,74％)，熔点138-138℃。TLC(25％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示主要生成物在Rf0.54，微量的杂质在Rf0.71(初始物质Rf0.36)。实施例21 21-亚甲基-20(R)-甲基孕-4-烯-3β-醇，21

    21-亚甲基-20(R)-甲基孕-4-烯-3-酮(5,100.0mg,0.3063mmol)和氢化三-t-丁氧基铝锂(319.4mg,1.256mmol)在5ml无水THF中的悬浮液在氩气下搅拌6小时，然后加入水(48μl),15％(重量比)氢氧化钠(48μl)和水(143μl)。混合物用硅藻土过滤，残留物用5ml等份THF萃取4次。混合滤液减压浓缩，用乙醇水溶液再结晶2次得到白色片晶(42.6mg,0.130mmol,42％)，熔点121-123℃。TLC(25％乙酸乙酯/己烷于硅胶)示主要生成物在Rf0.38，少量生成物在Rf0.43(初始物质Rf0.50)。实施例22 21-亚甲基-20(R)-甲基孕-4-烯-3,6-二酮，22

    琼斯试剂(2.67M,0.68ml,1.8mmol)加入到21-亚甲基-20(R)-甲基孕-5-烯-3β-醇(149.8mg,0.4560mmol)的15ml丙酮溶液中，反应物搅拌20分钟。用2-丙醇(0.34ml)冷却后，混合物倒入到30ml的水中，用15ml乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用15ml饱和碳酸氢钠+15ml盐水冲洗，用硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做制备性TLC(25％乙酸乙酯/己烷与硅胶GF,1000μ)得到黄色晶状固体(49.7mg,0.146μmol,32％),TLC(25％乙酸乙酯/己烷；Rf0.47，初始物质Rf0.35)检测是均匀的。实施例23 孕-4-烯-3β-醇-20-炔，23

    氢化三-t-丁氧基铝锂(343.8mg,1.352mmol)加入到preen-4-烯-3-酮-20-炔(200.1mg,0.6750mmol)3.6ml的无水乙醚悬浮液中，混合物搅拌4小时。再加入氢化物(343.5mg,1.351mmol)，反应物再搅拌16小时。加入芒硝(3.41g)，悬浮液搅拌15分钟。混合物用硅藻土过滤，残留物用10ml乙醚萃取5次。混合滤液减压浓缩，再做急速色谱分析(25％乙酸乙酯/己烷与硅胶)，用乙醇水溶液再结晶得到白色粉末(85.0mg,0.285mmol,42％)，熔点120.5-123.5℃。TLC(25％乙酸乙酯/己烷)显示生成物(Rf0.23)掺杂着微量的看起来似乎是初始物质(Rf0.29)。实施例24 孕-4,16-二烯-6β-醇-3-酮-20-炔，24

    3-氯过苯甲酸(290.0mg,1.680mmol)于9.4ml的1,2-二甲氧基乙烷+3.6ml的水加入到孕-3,5,16-三烯-20-炔-3-基甲基醚(471.0mg,1.527mmol)在1,2-二甲氧基乙烷(9.4ml)的悬浮液中，反应物搅拌30分钟。混合物加入到50ml的饱和碳酸氢钠中，用50ml的乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用50g5％(重量比)五水合硫代硫酸钠+3等份50ml的盐水冲洗，用硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用25ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物用急速色谱分析(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶)再用乙醇水溶液再结晶得到浅黄色固体(145.9mg,0.4700mmol,31％)，熔点大于300℃。实施例25 胆-5,16,20(22)-三烯-3β-醇，25

    溴化丙基三苯基鏻(12.13g,31.48mmol)和t-丁氧化钾(3.54g,31.5mmol)在无水DMSO(35ml)中的悬浮液在氩气环境下置于油浴中(72-87℃)，搅拌1小时。孕-5,16-二烯-3β-醇-20酮(1.9807g,6.298mmol)于35ml温的无水DMSO倒入其中。反应物搅拌90分钟。然后将混合物倒入90ml的冰盐水中，用45ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用45ml的盐水冲洗，硫酸钠干燥，然后过滤。残留物用10ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物用急速色谱分析(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶)得到琥珀色树脂样物(103.6mg,0.3042mmol,4.8％)。实施例26 胆-4,20(22)E-二烯-4,6-二酮，26

    琼斯试剂(2.67M,1.26ml,3.36mmol)加入到胆-5,20(22)E-二烯-3β-醇(300.0mg,0.8758mmol)的30ml丙酮溶液中，反应物搅拌20分钟。用2-丙醇(0.63ml)冷却后，混合物倒入到60ml的水中，用30ml乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用30ml饱和碳酸氢钠+30ml盐水冲洗，用硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。用乙醇水溶液再结晶得到黄色固体(139.3mg,0.3929mmol,45％)，熔点109-116℃。TLC(25％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示主要生成物在Rf0.45，杂质在Rf0.24,0.1和0.08(胆-4,20(22)E-二烯-3-酮Rf0.49)。实施例27 胆-4,20(22)E-二烯-3-酮，27

    异丙醇铝(2.82g,13.8mmol)于26ml的热甲苯中，加入到胆-5,20(22)E-二烯-3β-醇(1.5777mg,4.605mmol)的环己酮(26ml,0.25mmol)和130ml甲苯的溶液中。混合物封闭加热回流4小时。冷却后，加入6.7ml的水和16ml的3.6N硫酸，混合物摇动1分钟。再加入水(32ml)，混合物摇动5分钟，去除水层。挥发成分用共沸蒸馏/蒸汽蒸馏除去，得到的水性悬浮液用20ml的二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物用硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩。用乙醇水溶液再结晶得到黄色固体(生成的薄膜层再结晶伴随活性炭中间处理后得到黄色晶体(1.3317g,3.9104mmol,85％)，熔点133-135℃。TLC(25％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示生成物是均匀的。(Rf0.49；初始物质Rf0.31)。实施例28 胆-4,20(22)E-二烯-3β-醇，28

    胆-4,20(22)E-二烯-3-酮(3,400.0mg,1.175mmol)和氢化三-t-丁氧基铝锂(1.2250g,4.8158g)在15ml无水乙醚中的悬浮液在氩气下搅拌8小时。加入琼斯试剂(6.07g)，混合物搅拌5分钟然后滤过硅藻土。残留物用15ml的乙醚萃取5次，混合滤液减压浓缩。生成物做制备性TLC(5％乙酸乙酯/二氯甲烷于硅胶，1000μ)得到浅黄色固体(49.9mg,0.146mmol,12％),TLC(5％乙酸乙酯/二氯甲烷于硅胶，Rf0.34；孕-5,20-二烯-3β-醇Rf0.26)检测是均匀的。实施例29 胆-3,5,20(22)E-三烯-3-基-甲基醚，29

    胆-4,20(22)E-二烯-3-酮(808.6mg,2.374mmol),2,2-二甲氧基丙烷(3.1ml,25mmol)，二甲基甲酰胺(3.1ml)，甲醇(0.13ml)和一水合p-甲苯磺酸(28.0mg,0.147mmol)的混合物封闭加热回流4小时。冷却后，加入碳酸氢钠(0.17g)，混合物置于30ml的水和50ml的乙醚之间分离，有机层用30ml的盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。生成的固体用丙酮再结晶，得到浅黄色固体(453.8mg,1.280mmol,54％)，熔点94-96℃。TLC(10％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示生成物在Rf0.62，还有微量的初始物质(Rf0.14)。实施例30 胆-4,20(22)E-二烯-6β-醇-3-酮，30

    3-氯过苯甲酸(183.0mg,1.060mmol)在5.9ml的1,2-二甲氧基乙烷+2.3ml水中，在2.5分钟内加入到胆-3,5,20(22)E-三烯-3-基-甲基醚在5.9ml的1,2-二甲氧基乙烷中。反应物继续搅拌0.5小时，然后倒入到30ml的饱和碳酸氢钠中，用30ml的乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用30g5％(重量比)的五水合硫代硫酸钠+三份30ml的盐水冲洗，用硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成的固体经急速色谱分析(60％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，制备性TLC(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶)和制备性TLC(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶，1000μ)，得到白色晶状固体(114.3mg,0.3206mmol,33％)，作TLC分析后含有两种成分(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶，主要成分Rf0.48，次要成分Rf0.41；胆-4,20(22)E-二烯-3-酮Rf0.74)。实施例31刺激VNO引起的自主反射

    A1-P3    孕-4,16-二烯-3-酮

    A2-P3    孕-5,16-二烯-3β-醇

    A8-P1    3-甲氧基-孕-3,5,20-三烯

    A6-P1    孕-4,20-二烯-3,6-二酮

             20,21-二甲基孕-5,20-二烯-3β-醇

             20,21-二甲基孕-5,20-二烯-3-酮

    A14-P2   6β,19-环氧基孕-4,17-二烯-3-酮

    A7-P2    19-羟基-孕-4,17(20)-二烯-3-酮

    A13-P1   孕-4,20-二烯-6β-醇-3-酮

    A11-P1   孕-1,4,20-三烯-3-酮

    A1-P1    孕-4,20-二烯-3-酮

    A2-P1    孕-5,20-二烯-3β-醇

    A4-P1    孕-4,20-3α-醇

    A3-P1    孕-4,20-3β-醇

    A1-P4    preen-4-烯-3-酮

    A2-P4    preen-5-烯-3β-醇

    用实施例32中所描述的程序施用于24位女性和24位男性实验者时，对他们的各项自主指标进行监测。也施用了丙二醇作为对照剂。在与丙二醇对照剂进行对比时，实验化合物对VNO的积分受体电位、极肤电反应(GSR)、皮肤温度(ST)、脑电图的皮层α波活动的百分比、心电图(EKG)和呼吸频率(RF)都产生了明显变化。结果如附图2至58所示。使用其他孕烷衍生物另外做了一些实验，结果如附图59至84所示。胆烷衍生物的实验结果如附图85至96所示。

                         方法10   19-降孕烷的合成                     方法11   降孕烷的进一步的合成

                       方法12   降孕烷的进一步的合成                           方法13    酮的17-乙烯化实施例32 19-降孕-4,20-二烯-3β-醇

    19-降孕-4,20-二烯-3-酮(0.38g,13mmol)和氢化三-t-丁氧基铝锂(1.36g,5.35mmol)在20ml的无水乙醚中的悬浮液在室温下搅拌5小时，然后加入芒硝(6.74g)。得到的混合物搅拌5分钟，用玻璃料过滤。残留物用5份20ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。粗制生成物用制备性TLC在硅胶GF中用5％乙酸乙酯/二氯甲烷为洗脱剂进行提纯，得到黄色树脂样物(39.6mg,0.138mmol,11％),TLC(5％乙酸乙酯/二氯甲烷于硅胶；Rf0.29)检测是均匀的。实施例33 19-降孕-1,3,5,(10),17,20-五烯-3-醇

    在氩气下向氢化锂铝(LAH,256.1mg,6.748mmol)和氯化锂(296.8mg,2.227mmol)在20ml无水乙醚中加入乙炔基雌二醇(1.0000g)于20ml无水乙醚中。加热回流20小时后，反应物加入芒硝(2.00g)冷却，继续搅拌2小时。然后将混合物滤过硅藻土，残留物用3份10ml乙酸乙酯冲洗。混合滤液浓缩，在硅胶上用15％乙酸乙酯/己烷进行急速色谱分析，再用乙醇水溶液再结晶2次，得到浅褐色针状物(367.5mg,1.311mmol,39％)，熔点132-133℃,TLC(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶；Rf0.36；雌-1,3,5(10),16-四烯-3-醇Rf0.36)检测是均匀的。实施例34 19-降孕-1,3,5(10)-三烯-3-醇-20β-炔

    在10分钟内氩气下向冷的(干冰/丙酮浴)19-降孕-1,3,5,(10)17,20-五烯-3-醇(2,280.4mg,1.000mmol)在28ml的无水THF溶液中加入n-BuLi(2.5M于己烷，1.2ml,3.0mmol)。不断搅拌18小时，使反应物缓缓升温至室温15℃。反应物用25ml的1N盐酸冷却，然后用3份10ml乙醚萃取。混合有机萃取物用25ml的变化碳酸氢钠+25ml的盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。对得到的黄色树脂样物在硅胶上用20％乙酸乙酯/己烷进行急速色谱分析，然后再用乙醇水溶液再结晶，得到白色细小的针状物(150.5mg,0.5367mmol,54％)，室温148-149℃,TLC(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶；Rf0.34；初始物质Rf0.37)检测是均匀的。实施例35 19-降孕-1,3,5(10),16,20-五烯-3-醇

    19-去孕-1,3,5(10),16-四烯-3-醇-20-炔(200.0mg,0.7184mmol)于9ml的无水THF加入到大约30ml的无水氨中。加入小片的钠(0.07g,3mg-atom)，反应物搅拌1小时，在此过程中，颜色消失。加入无水乙醇(3ml)，混合物在一夜间升温至室温。加入盐酸(1N,20ml)，混合物用10ml二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物用10ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的琥珀色树脂样物做制备性TLC(硅胶GF,20％乙酸乙酯/己烷)，再用苯/己烷再结晶，得到灰白色粉末，熔点123-125℃。TLC(20％乙酸乙酯/己烷)显示主要生成物(Rf0.38)和少量的杂质(Rf0.04)。实施例36 19-降孕-5(10),20-二烯-3-酮

    19-降孕-2,5(10),20-三烯-3-炔甲基醚(750.0mg,2.513mmol)溶于80ml的丙酮中，加入草酸(0.88g,7.0mmol)的12ml的水溶液。再加入丙酮(20ml)，使大部分沉淀溶解，反应物搅拌6小时。用饱和碳酸氢钠(30ml)冷却后，反应混合物用40ml乙酸乙酯萃取2次，混合有机萃取物用50ml盐水冲洗2次，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用25ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。急速色谱分析(10％乙酸乙酯/己烷于15硅胶)得到无色树脂样物(0.54g,1.9mmol,76％)。实施例37 19-降孕-5(10),20-二烯-3-醇

    向19-降孕-5(10),20-二烯-3-酮(0.42g,1.5mmol)的乙醚(8.4ml)的溶液中加入69.7mg(1.84mmol)的LAH，反应物搅拌30分钟。加入芒硝(2.97g)，悬浮液再搅拌10分钟。然后将混合物滤过硅藻土，残留物用4份35ml的乙醚萃取。混合滤液减压浓缩，得到的油状物做急速色谱分析(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶)得到灰白色泡沫状物(0.38g,1.3mmol,88％)。实施例38 19-降孕-4,20-二烯-10β-醇-3-酮

    19-降孕-5(10),20-二烯-3-酮(5,0.45g,1.6mmol)于DMF(5.7ml)中，在冰丙酮浴中冷却，加入琼斯试剂(2.67M,0.19ml,0.51mmol)。搅拌1.5小时后，再加入0.19ml的琼斯试剂。继续搅拌45分钟，然后再加入0.38ml的琼斯试剂。反应物加入2-丙醇(0.38ml)，并搅拌1小时冷却。加入乙酸乙酯(100ml)，混合物用3份50ml水+50ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，然后滤过硅藻土。残留物用10ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。在铝上用50％乙酸乙酯/己烷做制备性TLC得到白色晶状膜(89.2mg,0.297mmol,19％)。TLC(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示大部分生成物(Rf0.46)，混杂有少量初始物质(Rf0.73)。实施例39 19-降孕-4.9(10),20-三烯-3-酮

    19-降孕-5(10),20-二烯-3-酮(0.34g,1.2mmol)的无水吡啶(4.0ml,49mmol)溶液在冰-盐浴中降温至-80℃，缓缓加入固体过溴化溴化吡啶鎓(1.26g,3.94mmol)，使反应物温度不超过-2℃。在搅拌1分钟后，加入0.20g的苯酚，从冰水浴中取出，反应物在室温下搅拌24小时。加入乙酸乙酯(50ml)，混合物用50ml的1N盐酸+25ml的饱和CuSO4+25ml的5％氢氧化钠+25ml水+25ml盐水冲洗。然后混合物用硫酸钠干燥4小时，然后滤过玻璃料。残留物用10ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的深色糖浆样物(512.8mg)溶于8ml无水乙醇中，加入锌粉(260.8mg,3.990mg-atom)，悬浮液加热回流30分钟。得到的混合物用棉花过滤，残留物用10ml乙醇冲洗。混合滤液浓缩，再做2次制备性TLC，第1次用硅胶GF(1000μ,20％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂)，第2次用铝GF(1000μ,20％乙酸乙酯/己烷)，得到近于无色的树脂样物(152.8mg,0.5410mmol,45％),TLC(Rf0.22,10％乙酸乙酯/己烷于硅胶；孕-4,20-二烯-3-酮Rf0.25)检测是均匀的。实施例40 19-降孕-1,3,5(10),20-四烯-3-醇

    乙炔基雌二醇双乙酸酯(2.0004g,5.2576mmol)于100ml无水THF中，加入到大约140ml的无水NH3中，在5分钟的时间内，加入小片的钠(1.88g,81.8mg-atom)。搅拌此深蓝色溶液1小时后，加入无水乙醇，反应物经一夜时间逐渐升温至室温。加入100ml的1N盐酸，将不同的液层分开，水层用20ml的乙醚萃取2次。得到的混合有机层用3份100ml的盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用25ml乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物溶于25ml的二氯甲烷，用硫酸钠干燥，滤过硅藻土。残留物用10ml的二氯甲烷冲洗2次，混合滤液减压浓缩。急速色谱分析(15％乙酸乙酯/己烷于硅胶)得到带有黄斑的白色晶状固体(0.86g,3.0mmol,58％)。实施例41 19-降孕-1,3,5,(10),20-四烯-3-基甲基醚

    向粗制的19-孕-1,3,5(10),20-四烯-3-醇(9,0.86g,3.0mmol)于75ml的90％乙醇中加入碳酸钾(6.73g,55.2mmol)，悬浮液加热回流30分钟。加入硫酸二甲酯(0.75ml)，反应物继续回流30分钟。在1小时内缓缓加入3等份1.8ml的硫酸二甲酯(总量=6.15ml,65.0mmol)，继续加热回流30分钟。加入冰水(65ml)，混合物在冰浴中冷却，搅拌2小时。悬浮液离心分离，然后滤过粗玻璃料。残留物用50ml水+50ml5％氢氧化钠+3份50ml水冲洗。生成物用乙醇水溶液再结晶，得到白色细小针状物，熔点108.5-110℃(文献中熔点108-110℃)。实施例42 19-降孕-1,3,5,(10),16-四烯-6-酮-20-炔-3-基-乙酸酯

    三氧化铬(2.68g,2.68mmol)悬浮于40ml的二氯甲烷中，悬浮液在冰-盐浴中降温至-8℃。加入3,5-二甲基吡唑(2.58g,26.8mmol)，悬浮液搅拌20分钟。在5分钟之内缓缓加入19-降孕-1,3,5(10),16-四烯-20-炔-3-基乙酸酯(0.86g,2.7mmol)，使反应温度不超过-7℃。继续搅拌2小时后，反应混合物滤过一块30mm×116mm的硅胶，并用二氯甲烷加压洗脱。对适当馏分进行浓缩得到一层棕色的薄膜(0.16g,0.48mmol,18％)。实施例43 19-降孕-1,3,5(10),16-四烯-3,6β-二醇-20-炔

    粗制的19-降孕-1,3,5(10),16-四烯-6-酮-20-炔-3-基乙酸酯(11,0.16g,0.48mmol)悬浮于20无水乙醚中，加入LAH(36.7mg,0.967mmol)，混合物密闭加热回流18小时。冷却后，加入1.22g的芒硝，悬浮液搅拌0.5小时。混合物滤过硅藻土，残留物用4份10ml的热乙酸乙酯冲洗。混合滤液浓缩，然后用制备性TLC提纯(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF,1000μ)得到白色固体(26.0mg,88.3mmol,18％),TLC检测是均匀的(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶；Rf0.48)。实施例44 19-降孕-1,3,5(10),17-四烯-3-醇

    溴化乙基三苯基鏻(1.3947g,3.7572mmol)和t-丁氧化钾(422.5mg,3.765mmol)悬浮于无水DMSO(4.1ml)中，在氩气下置于油浴中(80-84℃)，搅拌1小时。马烯雌酮(200.2mg,0.7459mmol)于4.1ml无水DMSO加入其中，反应物再搅拌1小时。冷却后，加入25ml的冰-1N盐酸，混合物用20ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用25ml的饱和碳酸氢钠+25ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做急速色谱分析(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，然后做制备性TLC(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF,1000μ)得到微黄色树脂样物(182.9mg,0.6523mmol,87％),TLC检测是均匀的(20％乙酸乙酯/己烷；Rf0.42)。实施例45 19-降孕-1,3,5(10),617五烯-3-醇

    溴化乙基三苯基鏻(1.3945g,3.7561mmol)和t-丁氧化钾(422.8mg,3.768mmol)悬浮于4.1ml的无水DMSO中，在氩气下置于77-79℃的浴中，搅拌1小时。6-脱氢雌酮(200.4mg,0.7466mmol)于4.1ml无水DMSO加入其中，反应物再搅拌1小时。反应混合物冷却后，倒入到25ml的冰-1N盐酸中，混合物用20ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用25ml的饱和碳酸氢钠+25ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做急速色谱分析(15％乙酸乙酯/己烷)，然后做制备性TLC(15％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF,1000μ)得到灰白色晶状固体(212.9mg,＞100％),TLC检测是均匀的(15％乙酸乙酯/己烷；Rf0.21)。实施例46 19-降孕-1,3,5(10),6,8,17-六烯-3-醇

    溴化乙基三苯基鏻(1.3945g,3.7561mmol)和t-丁氧化钾(422.3mg,3.763mmol)悬浮于4.1ml的无水DMSO中，在氩气下置于油浴中(74-83℃)，搅拌1小时。马萘雌酮(200.2mg,0.7518mmol)于4.1ml无水DMSO加入其中，反应物再搅拌1小时。反应混合物冷却后，倒入到25ml的冰-1N盐酸中，用20ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用25ml的饱和碳酸氢钠+25ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做急速色谱分析(20％乙酸乙酯/己烷)，然后做制备性TLC(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF,1000μ)得到浅黄色晶状蜡(180.6mg,0.6487mmol,86％)，用TLC检测是均匀的。实施例47

    下面的研究比较了23种具有19-降孕烷结构的犁鼻骨外激素及对照剂(丙二醇)对自主活动和EEG的影响。12位健康的人类实验者(6名女性和6名男性)，年龄19-29岁，参与了这项研究。所有物质都通过持续5秒钟的空气气流作用于犁鼻骨器官(VNO)。为实现这一目的，我们使用了一种别处描述过的微型探针电极，使其能进行局部刺激，并同时记录该器官的犁鼻骨电图(EVG)。记录的参数有：电皮肤生理活动(EDA)、呼吸频率(RF)、心电图(CF)、肌电图(EMG)、体温(BT)和从CzAl和T3Al处的EEG。自主活动、EEG和EVG用表面电极记录。所使用的所有技术都是非侵入性的。这套步骤由两次记录完成，每次持续1小时。电记录被放大、数字化，并由计算机监测和存储。对结果的处理和分析离线进行。

    女性的实验数据如附图99-120所示，男性的实验数据如附图121-142所示。

    结果汇总到下列表中，这些表显示每种犁鼻骨外激素扣除对照剂后的总体作用。用0-5的任意刻度来对比混合物的相对作用，但实际上所有实验混合物都有一些效果。

    这些结果显示一些犁鼻骨外激素对自主行为和EEG的影响与对照剂明显不同。也显示一些物质对两性都没有明显不同的影响。实施例48雌-1,3,5(10),16-四烯-3-醇的合成

    附图1说明了下列合成方法：

    雌酮p-甲苯磺酰腙

    雌酮(270g,1.00mole)和p-甲苯磺酰酰肼(232.8g,1.25mole)于无水甲醇(2.5liters)中，加热回流20小时。混合物转移到锥形瓶中，冷却。晶状生成物吸滤出来，用甲醇(300ml)冲洗。滤液蒸发至2000ml,800ml和400ml进行结晶，进一步得到更多的生成物。生成物总量为433.5g(99％)。

    1,3,5(10),16-雌四烯-3-醇

    雌酮p-甲苯磺酰腙(219.9g,500mmole)于无水四氢呋喃(8.0liters)中，在氯化钠/冰浴中冷却。混合物进行机械搅拌，在此过程中，用双头针加入n-丁基锂(800ml2.5M己烷溶液，2.00mole)。混合物在室温下搅拌3天。加入冰(250g)，及饱和氯化铵溶液(500ml)。搅拌混合物，静置分层。水层用特氟龙管吸气取出，用乙醚萃取(500ml)。两层有机层用等量的饱和碳酸氢钠溶液(500ml)和饱和氯化钠溶液(500ml)冲洗。有机层干燥(MgSO4)，在真空蒸发得到粗制生成物。生成物用500g硅胶60,230-400mesh，进行急速过滤，用乙酸乙酯/己烷(25.75,2.5liters)洗脱。滤液真空蒸发得到晶状物质。生成物用甲醇(300ml)/水(75ml)再结晶，用甲醇(80ml)/水(20ml)冲洗。进一步用乙酸乙酯/己烷(12.5∶87.5)再结晶得到纯净生成物(88.9g,79％)。实施例49 1,3,5(10),16-雌四烯-3-醇的酰基衍生物的合成

    向1,3,5(10),16-雌四烯-3-醇(254mg,1.00mmole)于乙醚(10ml)中加入乙酸酐(0.25ml)(或丙酸酐用来制备丙酸酯)，然后再加入吡啶(0.25ml)，混合物在室温下搅拌16小时。混合物倒入到冰/水中，用乙醚萃取(2×20ml)。有机萃取物用水、饱和硫酸铜溶液、水和饱和氯化钠溶液冲洗，干燥(MgSO4)，真空蒸发，得到纯净生成物(192mg,65％)。实施例50雌-4,16-二烯-3-酮的合成

    向雌-1,3,5(10),16-四烯-3-甲基醚(551.5mg,2.055mmol)于8.6ml的无水THF、约30ml无水氨和6.76g叔丁醇中加入剪成小片的锂丝(0.24g,35mg-atom)。反应混合物在氩气下加热回流4.5小时，然后加入甲醇(2.3ml)，在一夜间使氨挥发。残留物溶于25ml的甲醇，用5N的盐酸酸化至Ph值约为1。在55-70℃的油浴中加入15分钟后，冷却的水解混合物分隔于25ml的水和50ml的乙酸乙酯之间，水层用25ml的乙酸乙酯萃取。混合有机萃取物用25ml的饱和碳酸氢钠和25ml的盐水冲洗，硫酸镁干燥，然后过滤。减压除去溶剂得到0.57g油状生成物，用急速色谱法在硅胶上提纯(洗脱剂：15％乙酸乙酯/己烷)，再用戊烷再结晶，得到晶体(206.1mg,39％)，用TLC检测是均匀的，熔点67-71℃。实施例51 雌-2,5(10),16-三烯-3-甲基醚的合成

    向雌-1,3,5(10),16-四烯-3-甲基醚(1.22g,4.54mmol)于19ml的无水THF、14.99g的叔丁醇和约70ml无水氨中加入剪成小片的锂丝(0.53g,76mg-atom)。反应混合物在氩气下加热回流6小时，然后加入5ml甲醇冷却，在一夜间使氨挥发。残留物在100ml水中的悬浮液用100ml的乙酸乙酯萃取2次。混合有机萃取物用盐水冲洗，硫酸镁干燥。减压除去溶剂后，生成物用急速色谱法在硅胶上以1％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂提纯，再用无水乙醇再结晶，得到绒毛状白色晶体(884.1mg,3.269mmol,72％)，熔点72-73℃，用TLC检测是均匀的。实施例52 雌-5(10),16-二烯-3-酮的合成

    雌-2,5(10),16-三烯-3-甲基醚(2)(646.3mg,2.390mmole)溶于50ml的丙酮中，用二水合草酸(0.84g,6.7mmole)在室温下水解6小时。反应混合物用25ml的饱和碳酸氢钠冷却，然后用25ml的乙酸乙酯萃取2次。混合有机萃取物用25ml的盐水冲洗2次，硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。残留物用己烷再结晶，得到生成物(462.5mg,1.804mmole,75％)，熔点112-116℃。实施例53雌-5(10),16-二烯-3-醇(4)的合成。

    雌-5(10),16-二烯-3-酮(3)(301.1mg,1.174mmole)于6ml的无水乙醚中在室温下用氢化锂铝(50.0mg,1.32mmole)还原1小时，用十水合硫酸钠(2.00g)冷却10分钟后，悬浮液滤过赛力特硅藻土，残留物用4份25ml乙醚冲洗。混合滤液减压浓缩，用急速色谱法提纯(硅胶，5％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂)，再对混合馏分进行制备性TLC分析。较为极性的生成物可以用乙醇水溶液再结晶得到4.8mg的固体，其中有大量损失。较少极性的生成物可以用甲醇水溶液再结晶得到白色晶体(59.5mg)，熔点98-100℃。生成物总量为64.3mg(0.249mmol,21％)。实施例54 雌-4,9,16-三烯-3-酮

    雌-5(10),16-二烯-3-酮(3)(0.38g,1.5mmole)，于吡啶(5.0ml,62mmol)中，在冰-盐浴中冷却至-13℃，小剂量加入过溴化溴化吡啶鎓(1.58g,4.94mmole)，使T＜-4℃。搅拌1分钟后加入苯酚(0.25g,2.7mmole)，反应在室温持续24小时。加入乙酸乙酯(50ml)，反应混合物用25ml1N盐酸，2份25ml饱和硫酸铜，25ml5％氢氧化钠和25ml盐水冲洗。用硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩后，残留物溶于10ml的无水乙醇中，加入锌粒(0.33g,5.0mg-atom)，混合物回流0.5小时。去除上层清液，残留物用10ml无水乙醇冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的树脂样物在硅胶上用15％乙酸乙酯/己烷作洗脱剂进行急速色谱分析。适当馏分收集起来，浓缩，用己烷再结晶，得到固体生成物(117.5mg,0.4619mmol,31％)，熔点87-92％。实施例55 雌-1,3,5(10),16-四烯-6-酮-3-乙酸酯的合成

    三氧化铬(13.40g,0.1340mol)悬浮于200ml二氯甲烷中，在冰-盐浴中冷却至-10℃。加入3,5二甲基吡唑(12.90g,0.1342mol)，混合物搅拌20分钟。加入雌-1,3,5(10),16-四烯-3-基乙酸酯(4.00g,13.5mmol)的20ml二氯甲烷冰溶液，反应搅拌2小时，在此过程中T＜-8℃。混合物滤过200g硅胶，生成物再用二氯甲烷洗脱。混合并浓缩适当馏分，粗制生成物在硅胶上用15％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂进行急速色谱分析。适当馏分收集起来，减压浓缩生成白色固体(0.92g,3.0mmol,22％)，熔点87-103℃。实施例56 雌-1,3,5(10),16-四烯-3-醇-6-酮的合成

    雌-1,3,5(10),16-四烯-6-酮-3-乙酸酯(203.1mg,0.6543mmol)在30ml的甲醇中，用1.5ml的5％(重量比)的氢氧化钠皂化40分钟。反应混合物减压浓缩，溶于50ml的水中，用1N盐酸中和，用25ml二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物用50ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，过滤，浓缩，得到白色固体，再用苯/己烷再结晶，做制备性TLC提纯，得到白色晶状固体(52.8mg,0.197mmol,30％)，熔点188-191℃。实施例57 雌-1,3,5(10),16-四烯-6α-醇-3-基乙酸酯的合成

    雌-1,3,5(10),16-四烯-6-酮-3-基-乙酸酯(421.4mg,1.358mmol)，悬浮于35ml95％乙醇中，用硼氢化钠(98.8mg,2.61mmol)在室温下还原100分钟。减压浓缩后，残留物悬浮于25ml水中，用1N盐酸中和，用25ml二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物用25ml的盐水冲洗，硫酸镁干燥，过滤，浓缩。得到的白色泡沫状物在硅胶上以25％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂进行急速色谱分析。馏分混合、浓缩后得到白色固体(0.12g,0.38mmol,28％)，熔点209-212℃。实施例 58雌-1,3,5(10),16-四烯-3-6-二醇

    向氢化锂铝(LAH,95％,46.9mg,1.17mmol)在5ml的无水THF的悬浮液中逐滴搅拌加入雌-1,3,5(10),16-四烯-6-酮-3-基-乙酸酯(6)(422.9mg,1.360mmol)于5ml无水THF。反应物搅拌50分钟后，再加入LAH(46.5mg,1.16mmol)，反应搅拌22小时。回流4小时后，TLC仍然显示初始反应物。加入0.5ml的水+0.5ml20％(重量比)的硫酸冷却，减压浓缩。生成物用10ml热乙酸乙酯萃取4次，滤过赛力特硅藻土。混合滤液浓缩，用急速色谱法提纯2次，得到固体生成物(0.05g,0.2mmol,10％)，熔点150-157℃。实施例59雌-1,3,5(10),7-烯-3-醇的合成

    向马烯雌酮(100.2mg,0.3733mmol)在2ml二甘醇中的悬浮液中加入肼(59μl,1.9mmol)和氢氧化钾(0.04g,0.7mmol)。混合物在200-214℃的油浴中搅拌2小时，然后冷却的反应物用10ml水稀释，用1N盐酸中和，用25ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用10ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，过滤，浓缩，用制备性TLC提纯(硅胶，15％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂)得到黄色树脂样物。

    生成物进一步用活性炭除色，用乙醇水溶液再结晶提纯，得到褐色晶体(13.2mg,51.9μM,14％)，熔点130-134℃。实施例60 20-高雌-1,3,5(10),6,8,17-六烯-3-醇的合成

    溴化三苯基甲基鏻(671.0mg,1.878mg)和t-丁氧化钾(212.1mg,1.890mmol)在2.1ml无水DMSO中的悬浮液，在氩气下76-86℃的浴中加热1小时，然后马萘雌酮(100.1mg,0.3579mmol)于2.1ml的无水DMSO加入其中，绿色溶于搅拌1小时。冷却后，加入10ml冰-1N盐酸，混合物用3份10ml乙醚萃取。混合有机萃取物用10ml饱和碳酸氢钠+10ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土过滤，减压浓缩。生成的橙色油状物做制备性TLC提纯(硅胶，25％乙酸乙酯/己烷)得到生成物(75.5mg,0.286mmol,76％)TLC检测是均匀的，熔点113-121℃。实施例61 20-高雌-1,3,5(10),6,8,17-六烯-3-醇的合成

    雌-1,3,5(10),6-四烯-3-醇-17-酮(91.1mg,0.339mmol)，肼(54μl,1.7mmol)和氢氧化钾(0.06g)在1.8ml二甘醇中，在氩气下的200℃的浴中加热2小时。冷却至室温后，加热10ml的水，溶液用1N盐酸酸化至pH约为2。得到的悬浮液用10ml乙醚萃取3次，混合有机萃取物用10ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土过滤，减压浓缩。粗制生成物用制备性TLC提纯(25％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，得到的生成物用TLC检测是均匀的(5.9mg,23mmol,7％)。实施例62 雌-4,16-二烯-3-醇的合成

    向雌-4,16-二烯-3-酮(1)(87.2mg,0.340mmol)于1.7ml的无水乙醚中加入氢化锂铝(15.0mg,0.395mmol),悬浮液搅拌17分钟。反应用0.50g的十水合硫酸钠搅拌，滤过赛力特硅藻土。残留物用3份乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。制备性TLC(5％乙酸乙酯/二氯甲烷于硅胶)得到黄色树脂样的粗制生成物(50.0mg)，该生成物可以再用色谱法提纯直至足够纯净。实施例63 雌-4,16-二烯-3-酮

    该合成如附图153所示。19-降-睾酮(ⅩⅨ)是商业可获得的，例如从Chemical Dynamics Corp。它提供了19-降-16-雄烯衍生物的初始物质。19-降-睾酮(ⅩⅨ)用乙酸酐和吡啶转化为其乙酸酯(Hartman,JA.等，J.美国化学协会.(1956)78:5662)。(a)该乙酸酯(4.8g,15.17mmol)在甲苯(10ml)中的溶液在540℃(200Torr，缓慢N2-气流)包埋在石英砂的玻璃管中进行热解(b)。粗制的热解产物(3.1g)在硅胶上(150g)用二氯甲烷做色谱分析，得到1.1g(28％)的均匀油状酮9；+57.9°(C1)((27]：熔点71-73℃。-IR.(CHCL3):1660s,1615m,1585w,-1H-NMR.(90Mhz):0.84(s,3H)；5.82(m,2H)；5.87(br.s,1H)。实施例64 雌-16-烯-3-酮

    该合成如附图153所示。19-降-睾酮用锂和氨(C)根据Villotti,R.等的方法(J.美国化学协会(1960)82:5693)还原为19-降-5α-雄烷-17-醇3-酮(ⅩⅩ)。雄-5α,17-二醇-3-酮(ⅩⅩ)用乙酸酐和吡啶转化为其乙酸酯(Hartman,J.A.等，J.美国化学协会(1956)78:5662)(a)。17β-乙酸基-5α-雌烷-3-酮(8.0g,25.1mmol)的辛烷/丙酮10∶1(22ml)溶液在550°(200Torr，缓慢的N2-气流)进行热解(b)。粗制生成物(5.4g)在硅胶上(600g)用二氯甲烷做色谱分析，均匀馏分用PE再结晶得到3.13g(48.3％)纯的酮10。熔点51-54°,[a]-+72.8°(C1.0)-IR.(CHCL3):1705s,1585w,-1H-NMR.(90MHz):0.79(s,3H)；5.71(m,1H)；5.87(m,1H)。实施例65 雌-16-烯-3α-醇

    该合成如附图153所示。L-Selectride(d，三(仲丁基)氢硼化锂，4ml的1MTHF溶液，4mmol)逐滴加入0℃的酮10(800mg,3.10mmol)的无水乙醚(5ml)溶液中。在0℃搅拌1小时后，加入水(10ml)。该硼烷加入10％氢氧化钠水溶液(5ml)和30％H2O2水溶液(3ml)氧化，在室温下搅拌3小时。经处理后(乙醚)，粗制生成物(790mg，约9∶1的11和12混合物)用二氯甲烷在硅胶上做色谱分析，得到700mg(87％)的纯醇11。熔点119-120°-123°-124°(从PE),[a]D+40.6°(C=1.0)。IR.(CHCl3):3640m,3500br.,1585w.-1H-NMR.(90Mhz):0.78(s,3H)；4.09(m,W1/2≈8,1H)；5.71(m,1H),5.87(m,1H)。实施例66 雌-16-烯-3β-醇

    该合成如附图153所示。酮10(800mg,3.10mmol)的无水乙醚溶液在室温逐滴加入到氢化锂铝(38mg,1mmol)的乙醚溶液(3ml)中(e)。1小时后，混合物用10％硫酸水溶液水解。经处理后(乙醚)，粗制生成物(802mg,9∶1的12和11混合物)用二氯甲烷在硅胶上做色谱分析，一小部分11(70mg)首先洗脱出来，然后主要部分12(705mg,87％)洗脱出来。熔点113-115°,[a]-+36.3°(C=1.0).-IR.(CHCl3):3640m,3500br.,1585w.-1H-NMR.(90Mhz):0.78(s,3H)；3.60(m,W1/2≈(m,20,1H)；5.71(m,1H),5.87(m,1H)。实施例67 雌-4,16-二烯-3-酮的另一种合成方法

    雌-4,16-二烯-3-酮：向雌-1,3,5(10),16-四烯-3-甲基醚(551.5mg,2.055mmol)于8.6ml的无水THF、约30ml无水氨和6.76g叔丁醇中加入剪成小片的锂丝(0.24g,35mg-atom)。反应混合物在氩气下加热回流4.5小时，然后加入甲醇(2.3ml)，在一夜间使氨挥发。残留物溶于25ml的甲醇，用5N的盐酸酸化至Ph值约为1。在55-70℃的油浴中加入15分钟后，冷却的水解混合物分隔于25ml的水和50ml的乙酸乙酯之间，水层用25ml的乙酸乙酯萃取。混合有机萃取物用25ml的饱和碳酸氢钠和25ml的盐水冲洗，硫酸镁干燥，然后过滤。减压除去溶剂得到0.57g油状生成物，用急速色谱法在硅胶上提纯(洗脱剂：15％乙酸乙酯/己烷)，再用戊烷再结晶，得到晶体(206.1mg,39％)，用TLC检测是均匀的，熔点67-71℃。实施例68 雌-2,5(10),16-三烯-3-甲基醚，2

    向雌-1,3,5(10),16-四烯-3-甲基醚(1.22g,4.54mmol)于19ml的无水THF、14.99g的叔丁醇和约70ml无水氨中加入剪成小片的锂丝(0.53g,76mg-atom)。见附图12。反应混合物在氩气下加热回流6小时，然后加入5ml甲醇冷却，在一夜间使氨挥发。残留物在100ml水中的悬浮液用100ml的乙酸乙酯萃取2次。混合有机萃取物用盐水冲洗，硫酸镁干燥。减压除去溶剂后，生成物用急速色谱法在硅胶上以1％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂提纯，再用无水乙醇再结晶，得到绒毛状白色晶体(884.1mg,3.269mmol,72％)，熔点72-73℃，用TLC检测是均匀的。实施例69雌-5(10),16-二烯-3-酮，3

    雌-2,5(10),16-三烯-3-甲基醚2(646.3mg,2.390mmole)溶于50ml的丙酮中，用二水合草酸(0.84g,6.7mmole)在室温下水解6小时。见附图12。反应混合物用25ml的饱和碳酸氢钠冷却，然后用25ml的乙酸乙酯萃取2次。混合有机萃取物用25ml的盐水冲洗2次，硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。残留物用己烷再结晶，得到生成物(462.5mg,1.804mmole,75％)，熔点112-116℃。实施例70雌-5(10),16-二烯-3-醇

    雌-5(10),16-二烯-3-酮，3(301.1mg,1.174mmole)于6ml的无水乙醚中在室温下用氢化锂铝(50.0mg,1.32mmole)还原1小时。见附图155。用十水合硫酸钠(2.00g)冷却10分钟后，悬浮液滤过赛力特硅藻土，残留物用4份25ml乙醚冲洗。混合滤液减压浓缩，用急速色谱法提纯(硅胶，5％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂)，再对混合馏分进行制备性TLC分析。较为极性的生成物可以用乙醇水溶液再结晶得到4.8mg的固体，其中有大量损失。较少极性的生成物可以用甲醇水溶液再结晶得到白色晶体(59.5mg)，熔点98-100℃。生成物总量为64.3mg(0.249mmol,21％)。实施例71 雌-4,9,16-三烯-3-酮

    雌-5(10),16-二烯-3-酮，3(0.38g,1.5mmol)，于吡啶(5.0ml,62mmol)中，在冰-盐浴中冷却至-13℃，小剂量加入过溴化溴化吡啶鎓(1.58g,4.94mmole)，使T＜-4℃。搅拌1分钟后加入苯酚(0.25g,2.7mmole)，反应在室温持续24小时。见附图12。加入乙酸乙酯(50ml)，反应混合物用25ml1N盐酸，2份25ml饱和硫酸铜，25ml5％氢氧化钠和25ml盐水冲洗。用硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩后，残留物溶于10ml的无水乙醇中，加入锌粒(0.33g,5.0mg-atom)，混合物回流0.5小时。去除上层清液，残留物用10ml无水乙醇冲洗，混合上层清液减压浓缩。得到的树脂样物在硅胶上用15％乙酸乙酯/己烷作洗脱剂进行急速色谱分析。适当馏分收集起来，浓缩，用己烷再结晶，得到固体生成物(117.5mg,0.4619mmol,31％)，熔点87-92℃。实施例72 雌-1,3,5(10),16-四烯-6-酮-3-乙酸酯

    三氧化铬(13.40g,0.1340mol)悬浮于200ml二氯甲烷中，在冰-盐浴中冷却至-10℃。加入3,5二甲基吡唑(12.90g,0.1342mol)，混合物搅拌20分钟。见附图13。加入雌-1,3,5(10),16-四烯-3-基乙酸酯(4.00g,13.5mmol)的20ml二氯甲烷冰溶液，反应搅拌2小时，在此过程中T→-8℃。混合物滤过200g硅胶，生成物再用二氯甲烷洗脱。混合并浓缩适当馏分，粗制生成物在硅胶上用15％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂进行急速色谱分析。适当馏分收集起来，减压浓缩生成白色固体(0.92g,3.0mmol,22％)，熔点87-103℃。实施例73 雌-1,3,5(10),16-四烯-3-醇-6-酮

    雌-1,3,5(10),16-四烯-6-酮-3-乙酸酯(203.1mg,0.6543mmol)在30ml的甲醇中，用1.5ml的5％(重量比)的氢氧化钠皂化40分钟。见附图156。反应混合物减压浓缩，溶于50ml的水中，用1N盐酸中和，用25ml二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物用50ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，过滤，浓缩，得到白色固体，再用苯/己烷再结晶，做制备性TLC提纯，得到白色晶状固体(52.8mg,0.197mmol,30％)，熔点188-191℃。实施例74 雌-1,3,5(10),16-四烯-6α-醇-3-基乙酸酯

    雌-1,3,5(10),16-四烯-6-酮-3-基-乙酸酯(421.4mg,1.358mmol)，悬浮于35ml95％乙醇中，用硼氢化钠(98.8mg,2.61mmol)在室温下还原100分钟。见附图13。减压浓缩后，残留物悬浮于25ml水中，用1N盐酸中和，用25ml二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物用25ml的盐水冲洗，硫酸镁干燥，过滤，浓缩。得到的白色泡沫状物在硅胶上以25％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂进行急速色谱分析。馏分混合、浓缩后得到白色固体(0.12g,0.38mmol,28％)，熔点209-212℃。实施例75 雌-1,3,5(10),16-四烯-3-6-二醇

    向氢化锂铝(LAH,95％,46.9mg,1.17mmol)在5ml的无水THF的悬浮液中逐滴搅拌加入雌-1,3,5(10),16-四烯-6-酮-3-基-乙酸酯，6(422.9mg,1.360mmol)的5ml无水THF。见附图156。反应物搅拌50分钟后，再加入LAH(46.5mg,1.16mmol)，反应搅拌22小时。回流4小时后，TLC仍然显示初始反应物。加入0.5ml的水+0.5ml20％(重量比)的硫酸冷却，减压浓缩。生成物用10ml热乙酸乙酯萃取4次，滤过赛力特硅藻土。混合滤液浓缩，用急速色谱法提纯2次，得到固体生成物(0.05g,0.2mmol,10％)，熔点150-157℃。实施例76 雌-1,3,5(10)7-四烯-3-醇

    向马烯雌酮(100.2mg,0.3733mmol)在2ml二甘醇中的悬浮液中加入肼(59μl,1.9mmol)和氢氧化钾(0.04g,0.7mmol)。见附图157。混合物在200-214℃的油浴中搅拌2小时，然后冷却的反应物用10ml水稀释，用1N盐酸中和，用25ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用10ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，过滤，浓缩，用制备性TLC提纯(硅胶，15％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂)得到黄色树脂样物。生成物进一步用活性炭除色，用乙醇水溶液再结晶提纯，得到褐色晶体(13.2mg,51.9μM,14％)，熔点130-134℃。实施例77 20-高雌-1,3,5(10),6,8,17-六烯-3-醇的合成

    溴化三苯基甲基鏻(671.0mg,1.878mg)和t-丁氧化钾(212.1mg,1.890mmol)在2.1ml无水DMSO中的悬浮液，在氩气下76-86℃的浴中加热1小时，然后马萘雌酮(100.1mg,0.3579mmol)于2.1ml的无水DMSO加入其中，绿色溶于搅拌1小时。见附图157。冷却后，加入10ml冰-1N盐酸，混合物用3份10ml乙醚萃取。混合有机萃取物用10ml饱和碳酸氢钠+10ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土过滤，浓缩提纯。实施例78 雌-1,3,5(10),6-四烯-3-醇-17-(p-甲萘磺酰)腙

    6-脱氢雌酮(538.0mg,2.004mmol)和p-甲萘磺酰酰肼(pTsNHNH2,466.6mg,2.506mmol)在无水甲醇(5.4ml)中的悬浮液封闭回流25小时。见附图15。减压浓缩后，反应生成物做急速色谱分析(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，得到灰白色泡沫状物(942.5mg)，代表＞100％生成量。实施例79 雌-1,3,5(10),6-四烯-3-醇-17-(p-甲萘磺酰)腙

    在氩气下向冷却的(冰水浴)粗制雌-1,3,5(10),6-四烯-3-醇-17-(p-甲萘磺酰)腙(1,942.5mg,＜=2.004mmol)的四氢呋喃(THF)溶液在7分钟之内逐滴搅拌加入n-丁基锂(2.5M的己烷溶液，3.2ml,8.0mmol)。见附图158。继续搅拌48小时，反应物逐渐升温至室温。加入50ml的1N盐酸，反应混合物用3份25ml的乙醚萃取。混合有机萃取物用50ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。粗制生成物用急速色谱法提纯(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶)和制备性TLC(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF，厚度1000μ)，得到白色晶状膜(134.5mg,0.5331mmol,27％)，用TLC检测是均匀的(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶，Rf0.39)。实施例80 雌-1,3,5(10),6,16-五烯-3-基-乙酸酯

    雌-1,3,5(10),16-五烯-3-醇(2,97.9mg,0.388mmol)的无水吡啶(1.3ml,16mmol)和乙酸酐(0.18ml,1.9mmol)溶液搅拌24小时，加入乙酸乙酯(15ml)，混合物用3等份5ml的1N盐酸+5ml饱和碳酸氢钠+5ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。见附图15。残留物用5ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做制备性TLC(10％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF，厚度1000)，得到微黄色晶状固体(74.9mg,0.254mmol,66％)，用TLC检测是均匀的(10％乙酸乙酯/己烷于硅胶，Rf0.40)。实施例81 雌-1,3,5(10),7-四烯-3-醇-17-(p-甲萘磺酰)腙

    马烯雌酮(500.1mg,1.863mmol)和p-TsNHNH2(433.7mg,2.329mmol)在无水甲醇(5.0ml)中的悬浮液封闭回流24小时。见附图15。减压浓缩后，生成的反应混合物做急速色谱分析(35％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，得到白色泡沫状物(899.9mg)，代表＞100％生成量。实施例82 雌-1,3,5(10),7,16-五烯-3-醇

    在氩气下向冷却的(冰水浴)粗制雌-1,3,5(10),7-四烯-3-醇-17-(p-甲萘磺酰)腙(4,899.9mg,＜=1.863mmol)的无水THF(20ml)溶液在3分钟之内逐滴搅拌加入n-丁基锂(2.5M的己烷溶液，3.0ml,7.5mmol)。见附图15。继续搅拌48小时，反应物逐渐升温至室温。反应物倒入50ml的1N盐酸中，反应混合物用3份25ml的乙醚萃取。混合有机萃取物用50ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物用急速色谱法提纯(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，活性炭除色，得到黄色晶状固体(274.8mg,1.089mmol,58％)。实施例83 雌-1,3,5(10),7,16-五烯-3-基-乙酸酯

    雌-1,3,5(10),7,16-五烯-3-醇(5,192.1mg,0.7612mmol)的无水吡啶(2.6ml,32mmol)和乙酸酐(0.36ml,3.8mmol)溶液搅拌6小时，加入30ml乙酸乙酯，混合物用3等份10ml的1N盐酸+10ml饱和碳酸氢钠+10ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。见附图15。残留物用10ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做制备性TLC(5％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF，厚度1000μ)，用乙醇水溶液再结晶，得到白色细腻的针状物(78.6mg,0.267mmol,35％)，熔点77-80℃。TLC(4％乙酸乙酯/己烷于硅胶，Rf0.40)显示在Rf0.21和0.24有两个点。实施例84 雌-1,3,5(10),6,8-五烯-3-醇-17-(p-甲萘磺酰)腙

    马萘雌酮(0.6559mg,2.463mmol)和p-TsNHNH2(573.6mg,3.080mmol)在无水甲醇(8.2ml)中的悬浮液封闭回流24小时。见附图16。减压浓缩后，反应混合物做急速色谱分析(35-40％乙酸乙酯/己烷57％)，熔点95-96℃。TLC(2％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示生成物(Rf0.1)含有微量杂质在原点。实施例85 雌-1,3,5(10),6,8,16-六烯-3-醇

    在氩气下向冷却的(冰水浴)粗制雌-1,3,5(10),6,8-五烯-3-醇-17-(p-甲萘磺酰)腙(7,1.0887g,＜=2463mmol)的无水THF(25ml)溶液在2分钟之内逐滴搅拌加入n-丁基锂(2.5M的己烷溶液，3.9ml,9.8mmol)。见附图159。继续搅拌3天，反应物逐渐升温至室温。加入50ml的1N盐酸-冰，反应混合物用3份25ml的乙醚萃取。混合有机萃取物用50ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物急速色谱法提纯(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，乙醇水溶液再结晶，活性炭除色，得到褐色片晶(245.8mg,0.9819mmol,40％)，熔点162-163℃。实施例86 雌-1,3,5(10),6,8,16-六烯-3-基-乙酸酯

    雌-1,3,5(10),6,8,16-六烯-3-醇(8,148.8mg,0.5944mmol)的无水吡啶(2.0ml,25mmol)和乙酸酐(0.28ml,3.0mmol)溶液搅拌6小时，加入20ml乙酸乙酯。见附图159。混合物用3等份10ml的1N盐酸+10ml饱和碳酸氢钠+10ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用5ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物用95％乙醇再结晶，得到白色有光泽片晶(99.4mg,0.340mmol,55％)，熔点95-96℃。TLC(2％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示生成物(Rf0.1)在原点含有微量杂质。实施例87 17-亚甲基雌-1,3,5(10)-三烯-3-醇

    溴化甲基三苯基鏻(100.03g,0.28001mol)和t-丁氧化钾(31.42g,0.2800mol)的无水二甲亚砜(DMSO,320ml)悬浮液在氩气下油浴中(68-81℃)搅拌1小时，然后用注射器将雌酮(15.14g,55.99mmol)于无水DMSO(320ml)加入其中。见附图160。搅拌1小时，反应物冷却。混合物倒入800ml冰-1N盐酸中，用400ml等份的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用350ml饱和碳酸氢钠+400盐水冲洗，硫酸钠干燥，急速滤过一块58mm高X直径84mm的硅胶(200-40mesh)。生成物用乙醚洗脱。适当馏分减压浓缩，用乙醇水溶液再结晶3次，得到非常细小的白色针状物(11.47g,42.73mmol,76％)，熔点134-136℃，用TLC检测是均匀的(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶，0.45)。实施例88 17-亚甲基雌-1,3,5(10)-三烯-3-基-乙酸酯

    17-亚甲基雌-1,3,5(10)-三烯-3-醇(10,5.84g,21.8mmol)的无水吡啶(32ml,0.40mol)和乙酸酐(9.7ml,0.10mol)溶液搅拌24小时，加入250ml乙酸乙酯。见附图160。混合物用3等份100ml的1N盐酸+100ml饱和碳酸氢钠+100ml饱和硫酸铜+100ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用25ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物用乙醇水溶液再结晶，得到白色有光泽片晶(5.84g,18.8mmol)，熔点77-79℃。实施例89 17-亚甲基雌-1,3,5(10)-三烯-6-酮-3-基乙酸酯

    向冷却至-8℃(冰-盐浴)的三氧化铬(6.19g,61.9mmol)在二氯甲烷(100ml)中的悬浮液中加入2,4-二甲基吡唑(5.95g,61.9mmol)。见附图17。搅拌20分钟后，在2分钟内加入17-亚甲基雌-1,3,5(10)-三烯-3-基乙酸酯(11,2.0001g,6.4428mmol)的10ml冰二氯甲烷溶液，使温度不超过-6℃。继续搅拌2小时，混合物滤过一块100g的硅胶(200-400mesh)。生成物继续用二氯甲烷洗脱。适当馏分集中起来，减压浓缩，得到粗制生成物，再用乙醇水溶液再结晶2次提纯得到有光泽的灰白色晶体(334.0mg,1.030mmol,16％)，熔点91-94℃。TLC(25％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示生成物(Rf0.47)在Rf0.30和0.39两处有少量杂质。实施例90 17-亚甲基雌-1,3,5(10)-三烯-3,6B-二酮

    在氩气下向在干冰/丙酮浴中冷却的氢化锂铝(53.6mg,1.41mmol)的无水THF(3.0ml)悬浮液中在8分钟内搅拌逐滴加入17-亚甲基雌-1,3,5(10)-三烯-6-酮-3-基乙酸酯(12,251.7mg,0.7758mmol)于无水THF(3.0ml)。见附图160。搅拌2小时后，从浴中取出，继续搅拌1小时。反应加入芒硝(1.78g)搅拌0.5小时冷却。得到的混合物滤过一短片硅藻土，用10ml乙酸乙酯萃取4次。再用5份10ml热乙酸乙酯萃取，减压浓缩所有的萃取物得到无色的膜。制备性TLC(40％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF，厚度1000IL)得到白色泡沫状物(15.3mg,53.8Ilmol,7％)。TLC(40％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示主要成分(Rf0.29)和次要成分(Rf0.37)。实施例91 17-亚甲基雌-1,3,5(10)-三烯-3-基甲基醚

    回流中的17-亚甲基雌-1,3,5(10)-三烯-3-醇(5.37g,20.0mmol)和碳酸钾(50.82g,0.3678mol)在90％乙醇(500ml)的悬浮液，搅动，加入硫酸二甲酯(5.0ml,53mmol)。回流0.5小时后，再在1小时内加入硫酸二甲酯(36ml,0.38mol，三12ml等份)。见附图160。反应再回流1小时，然后加入360ml的水，混合物置于冰箱中过夜。得到的悬浮液过滤，用80ml的60％甲醇+3份80ml5％(重量比)氢氧化钠+3份80ml的水冲洗。生成物用甲醇水溶液再结晶，得到白色晶体(3.88g,13.7mmol,69％)，熔点59-62℃。TLC(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示生成物(Rf0.63)有微量杂质在Rf0.37和原点。实施例92 17-亚甲基雌-2,5(10)-二烯-3-基甲基醚

    约70ml的无水氨蒸馏过一个KOH塔，进入到一个250ml的火焰干燥的装有人口接管、磁力搅拌棒、干冰/丙酮冷凝器和V形底玻璃塞的三颈烧瓶中。如附图160。加入17-亚甲基雌-1,3,5(10)三烯-3-基甲基醚(14,1.1297g,4.0001mmol)和叔丁醇(13.21g,0.1782mol)的无水THF(17ml)溶液，然后加入剪成小片的锂丝(0.47g,68mg-atom)。在氩气下回流6小时后，加入无水甲醇(6.6ml)，悬浮液搅拌，使氨在一夜间蒸发。加入水(100ml)，悬浮液用50ml二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物用100ml盐水冲洗，硫酸钠干燥，过滤。残留物用25ml二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩。得到浅黄色油状物用乙醇水溶液结晶得到有光泽白色晶体(815.0mg,2.865mmol,72％)，熔点77-78℃，用TLC检测是均匀的(Rf0.60,10％乙酸乙酯/己烷于硅胶)。实施例93 17-亚甲基雌-4-烯-3-酮

    浓盐酸(6.0ml)和水(6.0ml)加入到17-亚甲基雌-2,5(10)-二烯-3-基-甲基醚(15,702.8mg,2.471mmol)的甲醇(6ml)和丙酮(20ml)溶液中。见实施例160。在搅拌1小时后，小心加入碳酸氢钠(7.50g)。一旦沸腾停止后，混合物减压浓缩，加入水(50ml)。混合物用25ml的二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物用50ml的水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物用活性炭脱色，急速色谱法(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶)和乙醇水溶液再结晶提纯得到白色粉末(302.8mg,1.120mmol,45％)，熔点83-89℃。实施例94 17-亚甲基雌-4-烯-3β-醇

    氢化三-t-丁氧基铝锂(766.6mg,3.015mmol)加入到17-亚甲基雌-4-烯-3-酮(16,203.7mg,0.7533mmol)的10ml无水乙醚溶液中，反应物搅拌420小时。见附图161。加入芒硝(3.80g)，悬浮液再搅拌0.5小时。混合物滤过硅藻土，残留物用10ml的乙醚冲洗5次。混合滤液减压浓缩，做制备性TLC(5％乙酸乙酯/二氯甲烷于硅胶GF，厚度1000)，得到白色针状物(60.2mg,0.221mmol,29％)，用TLC检测是均匀的(Rf0.37,5％乙酯/二氯甲烷于硅胶)。实施例95 17-亚甲基雌-1,3,5(10),7-四烯-3-醇

    溴化甲基三苯基鏻(1.9967g,5.5892mmol)和t-丁氧化钾(627.2mg,5.589mmol)的6.1ml无水DMSO悬浮液在氩气下油浴中(71-83℃)搅拌1小时，然后用注射器将马烯雌酮(300.0mg,1.118mmol)于6.1ml无水DMSO加入其中。见附图161。搅拌70分钟，反应物倒入40ml的冰水中，用25ml等份的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用25ml盐水冲洗，硫酸钠干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做急速色谱分析(15％乙酯/己烷于硅胶)，再做制备性TLC(20％乙酯/己烷于硅胶GF，厚度1000μ)，得到不透明白色膜(162.3mg,0.6093mmol,54％)。实施例96 17-亚甲基雌-1,3,5(10),7-四烯-3-基乙酸酯

    溴化甲基三苯基鏻(3.33g,9.32mmol)和t-丁氧化钾(1.05g,9.36mmol)悬浮于10ml无水DMSO中，在氩气下油浴中(77-79℃)搅拌1小时，然后用注射器将马烯雌酮(500.0mg,1.863mmol)于10ml无水DMSO加入其中。见附图161。搅拌1小时，冷却的反应物倒入50ml的冰-1N盐酸中，用25ml等份的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用25ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的浅黄色糖浆样物溶于无水吡啶中(6.3ml,78mmol)，加入乙酸酐(0.88ml,9.3mmol)，反应混合物搅拌1小时。然后将混合物倒入100ml的1N盐酸中，用50ml乙醚萃取3次。混合有机萃取物用100ml饱和碳酸氢钠+100ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用25ml乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。粗制乙酸酯用急速色谱法(5％乙酯/己烷于硅胶)，得到黄色树脂样物(494.7mg,1.604mmol,86％)。实施例97 16α,7α-环氧基雌-4-烯-10β-醇-3-酮

    向冷却的(干冰/丙酮)雌-5(10),16-二烯-3-酮(1,115.7mg,0.4513mmol)的氯仿(3ml)悬浮液加入m-氯过苯甲酸(MCPBA,77.4％,420.8mg,1.89mEquiv.ofperacidz)在乙醚(4.3ml)中的悬浮液，混合物搅拌2小时。反应物在冰箱中存放18小时，然后加入五水合硫代硫酸钠[5％(重量比)，25g]。搅拌5分钟后，混合物用10ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用25ml的饱和碳酸氢钠+25ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。TLC显示中间产物5B，10B-环氧化物已部分消失，将白色晶状生成物在20g5％(重量比)氢氧化钾的无水甲醇溶液中加热回流1小时可以使中间产物完全消失。反应混合物倒入50ml冰水中，用50ml乙醚萃取，有机萃取物用50ml水冲洗2次，硫酸钠干燥，硅藻土过滤。残留物用20ml乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做制备性TLC(50％乙酯/己烷于硅胶GF，厚度1000μ)，得到无色树脂样物(19.7mg,72.3μmol,16％)。实施例98 18-失碳-17-甲基雌-4,13(17)-二烯-3-醇

    向冷却的(冰水浴)18-失碳-17-甲基雌-4,13(17)-二烯-3-酮(3,0.23g,0.90mmol)的无水甲醇(2.3ml)溶液中加入硼氢化钠(0.23g,6.1mmol)，反应搅拌2小时。见附图162。减压除去溶剂，向残留物中加入10ml的水。混合物用10ml的二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物用10ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用5ml的二氯甲烷冲洗2次，混合滤液减压浓缩。得到的微黄色固体用制备性TLC提纯(5％乙酸乙酯/二氯甲烷于硅胶GF，厚度1000)，得到黄色固体(53.6mg,0.207mmol,23％)，用TLC检测是均匀的(5％乙酸乙酯/二氯甲烷于硅胶；Rf0.32)。实施例99 雄-4,16-二烯-3-酮

    该合成如附图178所示。有几种方法已知可以将睾酮转化为雄-4,16-二烯-3-酮(Broosbank等，《Biochem.J.》(1950)AZ:36)。热分解(460°)睾酮的甲基15碳酸酯生成雄-4,16-二烯-3-酮，生成率90％。

    17B-甲氧基碳酰氧基-雄-4烯-3-酮(Ⅳ)用睾酮(Ⅲ.Fluka)和氯甲酸甲酯/吡啶(a)制备，生成率76％(用MeOH再结晶后)。熔点140-141°,[a]D=+95.4°(c=1.10)-IR.(CDCl3):1740s,1665s,1450s,1280s,-1H-NMR.(360Mhz):0.87(s,3H)；1.20(s,3H)；3.77(s,3H)；4.53(br.t,J8,1H)；5.75(s,1H)。甲基碳酸酯Ⅳ的甲苯溶液如Ⅰ中所述热解(b)，用丙酮在室温将粗制生成物再结晶得到纯的酮，生成率90％，熔点127-129.5°,[a]D+118.9°(c=1.32)([3]：熔点131.5-133.5°(己烷),[a]D16=+123±3.5°(C=1.03)).-IR.(CDCl3):3050w,1660s,1615m.-1H-NMR.(360Mhz):0.82(s,3H)；1.22(s,3H)；5.70(m,1H)；5.73(s,1H)；5.84(m,1H).实施例100 雄-4,16-二烯-3α-醇(5)和-3β-醇

    这些合成如附图178所述。雄-4,16-二烯-3-酮(4)在-55°用5氢硼化三(1,2-二甲基丙基)锂于THF(c)中还原，如制备2时所述(附图1)。在硅胶上用二氯甲烷/乙酸乙酯9∶1做色谱分析，得到纯的直立乙醇5(生成率48％)，和纯的平伏乙醇6(生成率48％)。分析试样进一步再结晶提纯(5用PE在-30°,6用环己烷在室温)。

    5的数据。熔点77-79°,[a]D+120.6°(C=1.26)-IR.(CDCl3):3620m,3440mbr.,1660m,1595w.-1H-NMR.(360Mhz):0.79(s,3H)；1.20(s,3H)；4.07(m,W1/2≈10,1H)；5.48(dxd,J5and2,1H)；5.71(m1H)；5.85(m,1H).

    6的数据。熔点116.1190,[a]D+53.9°(C=1.28)([47)：熔点116.1180,[8)D+59.3°(C=0.4)-IR.(CDCl3):3610m,3420mbr.,3050m,1660m,1590w.-1H-NMR.(360Mhz):0.78(s,3H)；1.08(s,3H)4.15(m,W1/2≈20,1H)；5.30(m,W1/2≈5,1H)；5.71(m,1H)；5.85(m,1H).实施例101雄-5,16-二烯-3α-醇

    该合成如附图179所示。在0℃氮气下，向醇8(545mg,2.0mmol)的丙酮(100ml)溶液迅速加入琼斯试剂(I,1.5ml，约4mmol)。5分钟后，混合物倒入到稀释磷酸盐缓冲剂中(pH7.2,1200ml)，用乙醚萃取。萃取物用饱和NaCl水溶液冲洗，干燥(硫酸钠)，蒸干，主要得到油状的雄-5,16-二烯-3-酮(567mg)。粗制生成物溶于THF(7ml)中，用氢硼化三(1,2-二甲基丙基)锂(c)在55°还原，如制备2时所述。粗制生成物(530mg)在硅胶中(100g)用二氯甲烷/乙酸乙酯4∶1做色谱分析，得到280mg(51％)纯的a-醇7(先进行洗脱)和13mg的5初始醇8。一份小的7的试样用丙酮/水在室温下再结晶。熔点1380,[8]D-77.5°(c=1.2.-IR.(CDCl3):3580m,3430m,1665w,1590w,-1H-NMR.(360Mhz):0.80(s,3H)；1.06(s,3H)；4.02(m,W1/28,1H)；5.44(m,1H)；5.72(m,1H)；5.86(m,1H).实施例102 雄-5,16-二烯-3β-醇

    该化合物用商业(Fluka)3B-羟基-雄-5-烯-17-酮(Ⅶ)用已知的步骤制备(Marx,A.F.，等，Ger.Offen.2,631,915；Chem.Abst.87:23614p(1977))，生成率73％。熔点137°,[a]D=-71.9°(C=1.5)([48]：熔点140-141°,[a]D=68°-IR.(CDCl3):3600m,3420mbr.,1670w,1590w.-1H-NMR.(360Mhz):0.80(s,3H)；1.05(s,3H)；3.53(m,W1/2≈22,1H)；5.38(m,1H)；5.72(m,1H)；5.86(m,1H).该合成如附图4所示。实施例103 雄-4,16-二烯-3-酮的其他合成方法

    下述合成方法如附图180所示：

    脱氢表雄酮p-甲苯磺酰腙    

    脱氢表雄酮(Ⅶ)(14.4g,50.0mmole)和p-甲苯磺酰酰肼(12.75g,68.5mmole)于无水甲醇(300ml)中，加热回流20小时。混合物转移到锥形瓶中，冷却。晶状生成物吸滤出来，用甲醇(50ml)冲洗。滤液依次蒸发至75ml和25ml进行结晶，进一步得到更多的生成物。生成物总量为21.6g(95％)。

    雄-5,16-二烯-3β-醇

    脱氢表雄酮p-甲苯磺酰腙(22.8g,50.0mmole)于无水四氢呋喃(1.0liters)中，在干冰/异丙醇浴中冷却。混合物搅拌加入n-丁基锂(125ml的1.6M己烷溶液，200mmole)。混合物升温至室温，搅拌24小时。加入水(50ml)，在冰中冷却。混合物倒入饱和氯化铵溶液/冰中(500ml)，用乙醚萃取(X2)。有机层用饱和碳酸氢钠溶液(500ml)和饱和氯化钠溶液(500ml)冲洗，硫酸镁干燥，真空蒸发，得到粗制生成物。该生成物用急速色谱法在190g硅胶60,230-400mesh，用乙酸乙酯/己烷(20∶80→50∶50)洗脱提纯，得到晶状物。生成物用甲醇(45ml)/3％过氧化氢(8ml)25再结晶，用甲醇(30ml)/水(8ml)冲洗，得到纯的生成物(6.75g,50％)。

    雄-4,16-二烯-3-酮

    10g的雄-5,16-二烯-3β-醇的475CC的甲苯和75CC的30环己酮溶液进行蒸馏去除水分(收集约50CC的馏出液)，5g的Al(Opri)3于50CC甲苯加入其中，溶液回流1小时。加入水，挥发性成分用蒸汽蒸馏去除，残留物用氯仿萃取。干燥的萃取物进行蒸发，用氯仿-己烷结晶，得到7.53g的雄-4,165二烯-3-酮(25)。母液在中性氧化铝中进行色谱分析得到另外0.97g(总量8.5g,86％)。实施例104 雄-3,5,16-三烯-3-基甲基醚的合成

    向雄-4,16-二烯-3-酮(1.00g,3.70mmol)的2.2甲氧基丙烷(5.0ml,41mmol)和5mlDMF的不完全溶液中加入甲醇(0.2ml)和一水合p-甲苯磺酸(26.4mg,0.139mmol)。混合物回流5小时，然后冷却，加入碳酸氢钠(152.5mg)。悬浮液分隔于50ml冰水和50ml乙酸乙酯之间。有机层用2份50ml水+50ml盐水冲洗，20硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。生成的油状物溶于50ml的热己烷中，用150ml的热己烷滤过一块12mm×30mm的硅胶60。混合滤液减压浓缩，用丙酮/甲醇再结晶得到白色晶体(468.0mg,1.645mmol,44％)，熔点83-92℃。实施例105 17-亚甲基-雄-4-烯-醇的合成

    向20-高雄-4,17-二烯-3-酮(119.0mg,0.4184mmol)于5ml甲醇中加入硼氢化钠(6.0mg,0.16mmol)和77μl的水。搅拌2小时后，再加入硼氢化钠(32.0mg,0.846mmol)，混合物搅拌一夜。减压浓缩后(5％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，得到较为极性的生成物(59.8mg)和较少极性的生成物(1.7mg)。实施例106 17-亚甲基-6-氧代-雄-4-烯-3-酮的合成

    向冷却的20-高雄-5,17-二烯-3-醇(399.4mg,1.394mmol)的50ml丙酮溶液中加入2.67M琼斯试剂(2.0ml,5.3mmol)。搅拌1小时后，反应物用异丙醇(1.0ml,13mmol)冷却，倒入100ml水中。混合物用50ml乙酸乙酯萃取3次，混合有机萃取物用50ml饱和碳酸氢钠+50ml盐水冲洗。有机层用硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。生成物用95％的乙醇再结晶得到接近白色的粉末(177.8mg,0.5958mmol,43％)，熔点113-115℃。实施例107 6β-OH-雄-4,16-二烯-3-酮的合成

    向雄-3,5,16-三烯-3-基甲基醚(12)(200.5mg,0.7049mmol)的5ml1,2-甲氧基乙烷(DME)和1ml水的溶液中在90分钟内逐滴搅拌加入氯过苯甲酸(MCPBA,77.4％,173.2mg,0.776mmol)的5mlDME+1ml水+0.40g5％(重量比)NaOH悬浮液。搅拌18小时后，再在1.5小时内逐滴搅拌加入MCPBA(247.0mg,1.11mmol)的10mlDME+2ml水+0.8g5％(重量比)NaOH悬浮液。反应混合物搅拌0.5小时，倒入25ml饱和碳酸氢钠中。含水反应物用25ml的乙醚萃取3次，混合有机萃取物用50g5％(重量比)硫代硫酸钠+3份50ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土过滤，减压浓缩。生成的晶状物做制备性TLC提纯(35％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，再用乙醇水溶液再结晶2次，得到有光泽白色片晶(102.3mg,0.3571mmol,51％)，熔点165-166℃。实施例108 18-失碳-17-甲基雄-4,13(17)-二烯-3-醇

    见附图189。向18-失碳-17-甲基雄-4,13(17)-二烯-3-醇(1,378.2mg,1.399mmol)的7.5ml无水乙醚溶液中加入59.7mg(1.57mmol)的氢化锂铝(LAH)。搅拌得到的悬浮液30分钟后，加入2.00g的芒硝，混合物再搅拌30分钟。然后将混合物过滤，用4份25ml的乙醚萃取。混合滤液减压浓缩后做制备性TLC(硅胶GF,1000μ,5％乙酸乙酯/二氯甲烷为洗脱剂)得到较为极性的馏分(Rf0.63,34.5mg,0.127mmol,9％)和较少极性的馏分(Rf0.45,273.8mg,1.005mmol,72％)。实施例109 18-失碳-17-甲基雄-3,5,13(17)-三烯-3-基-甲基醚

    见附图189。18-去-17-甲基雄-4,13(17)-二烯-3-酮(1,0.86g,3.2mmol)的2,2-二甲氧基丙烷(4.3ml,35mmol)和二甲基甲酰胺(DMF,4.3ml)溶液含有无水甲醇(0.17ml)和一水合p-甲苯磺酸(21.3mg)，加热回流4小时后冷却。加入碳酸氢钠(0.13g)，混合物分隔于65ml的己烷和40ml冰水之间。有机层用2份40ml的水+40ml盐水冲洗，急速滤过一块17mm高×直径30mm的硅胶(200-400mesh)。混合滤液浓缩用丙酮/95％乙醇再结晶后得到明黄色晶体(489.6mg,1.721mmol,54％)，熔点95-101℃。TLC(10％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示主要生成物在Rf0.69，在原点处有微量杂质。实施例110 18-失碳-17-甲基雄-4,13(17)-二烯-6β-醇-3-酮

    见附图189。反应以与D.N.Kirk和J.M.Wiles,J.Chem.Soc.,Chem.Commun.1974,927类似的程序进行。向搅动的18-失碳-17-甲基雄-3,5,13(17)-三烯-3-基甲基醚(477.0mg,1.677mmol)的1,2-二甲氧基乙烷(DME,2026ml)溶液中在88分钟内加入77％氯过苯甲酸(MCPBA,999.7mg,4.48mEq)的DME(39ml)，水(8ml)和5％(重量比)氢氧化钠(7.1ml)悬浮液。搅拌20小时后，反应混合物倒入饱和碳酸氢钠中(50ml)，用3份50ml乙醚萃取。混合有机萃取物用50g5％(重量比)五水合硫代硫酸钠+3份50ml盐水，硫酸镁干燥，硅藻土过滤，残留物用25ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩得到黄色树脂样物。做制备性TLC提纯(硅胶GF,1000μ,35％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂)得到接近白色的晶状膜(132.1mg,0.4612mmol,28％),TLC检测(35％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示含有主要成分(Rf0.23)和次要成分(Rf0.18)。实施例111 17β-甲基雄-4-烯-3,6-二酮

    见附图189。琼斯试剂(2.67M,0.88ml,2.3mmol)加入到17β-甲基雄-5-烯-3β-醇(5,135.5mg,0.4697mmol)(J.B.Jones andK.D.Gordon,Can.J.Chem.1972,50,2712-2718)的15ml丙酮溶液中，搅拌45分钟。混合物用2-丙醇(0.44ml)冷却。继续搅拌10分钟后倒入到30ml的水中，用15ml的乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用15ml饱和碳酸氢钠+15ml的盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土过滤。残留物用10ml的乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做制备性TLC(硅胶GF,1000μ,25％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂)，用乙醇水溶液再结晶得到有光泽灰白色针晶体(37.5mg,0.125mmol,27％)，熔点94-95℃，用TLC检测是均匀的(25％乙酸乙酯/己烷于硅胶，Rf0.39)。实施例112 17β-甲基雄-4-烯-3-醇

    见附图189。LAH(21.3mg,0.561mmol)加入到17β-甲基雄-4-烯-3-酮(7,143.2mg,0.4999mmol)(J.B.Jones和K.D.Gordon,Can.J.Chem.1972,50,2712-2718)的2.8ml无水乙醚溶液中。悬浮液搅拌30分钟后，加入芒硝(0.76g)，混合物继续搅拌30分钟。加入乙醚(10ml)，悬浮液滤过硅藻土。残留物用3份10ml乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。粗制生成物用制备性TLC(硅胶GF,1000μ,5％乙酸乙酯/二氯甲烷为洗脱剂)分离得到较为极性的成分(Rf0.30,77.9mg,0.270mmol,54％)和较少极性的成分(Rf0.43,10.3mg,0.0357mmol,7％)。实施例113 17-亚甲基雄-3,5-二烯-3-基-甲基醚

    见附图190。向17-亚甲基雄4-烯-3-酮(9,2.0000g,7.0314mmol)的2.2-二甲氧基丙烷(9.4ml,76mmol)和9.4mlDMF的溶液中加入无水甲醇(0.37ml)和47.0mg的p-甲苯磺酸。混合物回流4小时，然后冷却，分隔于140ml己烷和90ml水之间。有机层用2份90ml水+90ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，滤过一块37mm×30mm的硅胶(200-400mesh)。生成物继续用200ml己烷洗脱。混合滤液减压浓缩，用丙酮/甲醇再结晶得到微黄色片晶(1.5291g,5.1231mmol,73％)，熔点97-99℃，用TLC检测是均匀的(25％乙酸乙酯/己烷于硅胶，Rf0.72)。实施例114 17-亚甲基雄-4-烯-6β-醇-3-酮

    见附图190。向搅动的17-亚甲基雄-3,5-二烯-3-基甲基醚(10,500.1mg,1.676mmol)的DME(10ml)溶液中在15分钟内加入MCPBA(318.6mg,1.846mmol)的DME(10ml)和水(4ml)悬浮液。搅拌30分钟后，反应混合物倒入饱和碳酸氢钠中(50ml)，用3份50ml乙醚萃取。混合有机萃取物用50g5％(重量比)五水合硫代硫酸钠+3份50ml盐水，硫酸镁干燥，硅藻土过滤，残留物用25ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。急速色谱法(45％乙酸乙酯/己烷于硅胶)和用乙醇水溶液再结晶得到微黄色晶体(187.1mg,0.6228mmol,37％)，熔点192-194℃。TLC检测(35％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示含有主要成分(Rf0.17)和次要成分(Rf0.13)。实施例115  17-亚甲基雄-1,4-二烯-3-酮

    见附图190。17-亚甲基雄-4-烯-3-酮(9,1.0001g,3.5160mmol)和2,3-二氯-5,6-二氰-1,4-苯醌(DDQ,2.43g,10.7mmol)的二噁烷(60ml，用钠回流一夜后刚蒸馏出来)溶液加热回流6小时，在自来水中摇动冷却。加热甲基t-丁基醚(MTBE,50ml)，悬浮液过滤硅藻土。残留物用2份50ml的MTBE冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做急速色谱分析(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，用95％乙醇再结晶得到灰白色晶体(498.9mg,1.767mmol,50％)，熔点155-157℃。实施例116  17-亚甲基雄-1,3,5-三烯-3-基苯甲酸酯

    见附图190。反应按照R.W.Draper等，Arzneim.-Forsch.,1982,32,317-322使用的程序进行如下：

    17-亚甲基雄-1,4-二烯-3-酮(12,389.0mg,1.378mmol)，无水吡啶(4.7ml,58mmol)和苯甲酰氯(1.2ml,10mmol)在氩气下的油浴中(68-73℃)搅拌18小时。在冰中冷却后，反应混合物倒入40ml的冰-1N盐酸中，用3份20ml二氯甲烷萃取。混合有机萃取物用40ml的冷1NHCl+40ml饱和碳酸氢钠+40ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩。急速色谱法(4％乙酸乙酯/己烷于硅胶)得到黄色固体(0.43g,1.1mmol,81％)。实施例117   17-亚甲基雄-1,4-二烯-6β-醇-3-酮

    见附图190。反应按照R.W.Draper等，Arzneim.-Forsch.,1982,32,317-322使用的程序进行如下：在20分钟内将MCPBA(211.4mg,1.225mmol)的DME(6.6ml)和水(2.7ml)悬浮液搅拌加入到17-亚甲基雄-1,3,5-三烯-3-基苯甲酸酯(13,0.43g,1.1mmol)的DME(6.6ml)溶液中。继续搅拌30分钟后，反应混合物倒入饱和碳酸氢钠中(35ml)，用3份35ml乙酸乙酯萃取。混合有机萃取物用35g5％(重量比)五水合硫代硫酸钠+3份35ml盐水，硫酸镁干燥，硅藻土过滤，残留物用10ml的乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。制备性TLC(硅胶GF,1000μ,50％乙酸乙酯/己烷为洗脱剂)得到黄色晶状固体(83.7mg,0.280mmol,25％),TLC检测是均匀的(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶，Rf0.50)。实施例118   雄-1,4,16-三烯-6β-醇-3-酮

    见附图190。雄-1,4,16-三烯-3-酮(15,500.0mg,1.863mmol)，无水吡啶(6.4ml,79mmol)和苯甲酰氯(1.6ml,14mmol)在氩气下的油浴中(70-73℃)搅拌18小时。在冰中冷却后，混合物倒入50ml的冰-1N盐酸中，用3份25ml二氯甲烷萃取。混合有机萃取物用50ml的冷1NHCl+50ml饱和碳酸氢钠+50ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩。急速色谱法(2％乙酸乙酯/己烷于硅胶)得到苯甲酸酯中间产物的黄色晶体(0.47g,1.3mmol,68％)。该生成物与MCPBA(240.0mg,1.391mmol)溶于氯仿(30ml)。搅拌1小时后，再加入MCPBA(239.5mg,1.388mmol)，反应物再搅拌l小时。混合物用30g5％(重量比)五水合硫代硫酸钠+30ml饱和碳酸氢钠+30ml盐水，硫酸镁干燥，硅藻土过滤，残留物用10ml的氯仿冲洗，混合滤液减压浓缩。急速色谱法(40-45％乙酸乙酯/己烷于硅胶)得到黄色树脂样物(106.1mg,0.373lmmol,29％),TLC(40％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示含有主要成分(Rf0.34)和次要成分(Rf0.40)。实施例119    雄-4,16-二烯-6β-醇-3-酮

    向雄-3,5,16-三烯-3-基甲基醚，12(200.5mg,0.7049mmol)的5ml1,2-二甲氧基乙烷(DME)和1ml水的溶液中在90分钟内逐滴搅拌加入m-氯过苯甲酸(MCPBA,77.4％,173.2mg,0.776mmol)的5mlDME+1ml水+0.40g5％(重量比)NaOH悬浮液。搅拌18小时后，再在1.5小时内逐滴搅拌加入MCPBA(247.0mg,1.11mmol)的10mlDME+2ml水+0.8g5％(重量比)NaOH悬浮液。反应混合物搅拌0.5小时，倒入25ml饱和碳酸氢钠中。含水混合物用25ml的乙醚萃取3次，混合有机萃取物用50g5％(重量比)硫代硫酸钠+3份50ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土过滤，减压浓缩。生成的晶状物做制备性TLC提纯(35％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，再用乙醇水溶液再结晶2次，得到有光泽白色片晶(102.3mg,0.3571mmol,51％)，熔点165-166℃。实施例120    20-高雄-4,17-二烯-3-酮

    见附图191。向20-高雄-5,17-二烯-3-醇(1.0001g,3.4911mmol)的100ml甲苯和20ml(0.19mol)的环己酮不完全溶液中加入异丙氧化铝(2.00g,9.79mmol)的20ml热甲苯溶液。回流4小时后，反应混合物冷却，加入5ml的水12.5ml的3.6N硫酸摇动1分钟。有机层用50ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土过滤，减压浓缩。用蒸汽蒸馏去除环己酮后，不挥发的残留物溶于2份10ml的二氯甲烷，用硫酸镁干燥，过滤，浓缩。油状生成物用急速色谱分析提纯(15％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，用丙酮水溶液再结晶得到无色针状物(238.8mg,0.8400mmol,24％)，熔点130-134℃[lit.(B.S.Macdonald等，Steroids1971,18,753-766)，熔点129-131℃]。实施例121    20-高雄-4,17-二烯-3-醇

    见附图191。向20-高雄-4,17-二烯-3-酮(119.0mg,0.4184mmol)于5ml甲醇中加入硼氢化钠(6.0mg,0.16mmol)和77μl的水。搅拌2小时后，再加入硼氢化钠(32.0mg,0.846mmol)，混合物搅拌一夜。减压浓缩后，生成物用制备性TLC提纯(5％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，得到较为极性的生成物(59.8mg)和较少极性的生成物(1.7mg)。实施例122    20-高雄-4,17-二烯-3,6-二酮

    见附图191。向冷却的20-高雄-5,17-二烯-3-醇(399.4mg,1.394mmol)的50ml丙酮溶液中加入2.67M琼斯试剂(2.0ml,5.3mmol)。搅拌1小时后，反应物用异丙醇(1.0ml,13mmol)冷却，倒入100ml水中。混合物用50ml乙酸乙酯萃取3次，混合有机萃取物用50ml饱和碳酸氢钠+50ml盐水冲洗。有机层用硫酸镁干燥，过滤，减压浓缩。生成物用95％的乙醇再结晶得到接近白色的粉末(177.8mg,0.5958mmol,43％)，熔点113-115℃。实施例123    6β,19-环氧基-17-碘雄-4,16-二烯-3-乙二醇缩酮

    见附图192。粗制6β,19-环氧基-5β-氯-17-碘雄-16-烯(17,1.38g,3.09mmol)(G.Habermehl and A.Haaf,Z.Naturforsch.1970,25b,191-195)，亚乙基二醇(0.97g,16mmol)，甲苯(50ml)和一水合p-甲苯磺酸(20.3mg,0.107mmol)的混合物回流19小时，用共沸蒸馏去除水(Deen-Stark)。冷却后，加入乙酸乙酯(100ml)，反应混合物用100ml饱和碳酸氢钠+100ml盐水冲洗。有机层用硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用25ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩，得到褐色晶状固体(1.47g)。这一生成物制成无水甲醇(40ml)悬浮液，加入乙酸钾(2.44g,24.9mmol)，蒸馏去除约26ml的甲醇。剩余物减压浓缩，加入水(50ml)，混合物用25ml二氯甲烷萃取3次。干燥后(硫酸钠)的萃取物滤过硅藻土，残留物用10ml的二氯甲烷冲洗。混合滤液减压浓缩得到黄色固体，用急速色谱法提纯(5-7.5-10乙酸乙酯/二氯甲烷于硅胶)用甲醇再结晶得到浅黄色针状物(914.6mg,2.013mmol,65％)。熔点187-189℃。1H-NMR:6.13_,1H,dd,16-H；5.82_,1H,s,4-H；4.71_,1H,d,6a-H；4.22_和3.53_,2H,AB,19-H’s；4.10-3.28_,4M,mult.,3-ketal H’s；0.83_,3H,s,18-Me.实施例124    雄-4,16-二烯-19-醇-3-酮

    见附图192。无水氨(约75ml)蒸馏过一个KOH塔，进入到一个火焰干燥的装有入口接管、磁力搅拌棒、干冰/丙酮冷凝器和一个塞子的250ml三颈烧瓶中。加入6β,19-环氧基-17-碘雄-4,16-二烯-3-乙二醇缩酮(18,880.4mg,1.938mmol)的无水THF(45m1)溶液，然后加入剪成小片的金属钠(0.20g,8.7mg-atom)。在氩气下加压搅拌30分钟后，反应加入无水乙醇(1.0ml)冷却。一夜间氨挥发掉，加入50ml的水，混合物用3份25ml的二氯甲烷萃取。混合有机萃取物用50ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩。中间产物缩酮证明是很不活泼的，但在5ml氯仿2.5ml的4N盐酸中回流18小时后产生了水解。冷却后的水解混合物中加入乙酸乙酯(50ml)，分层。有机层用25ml饱和碳酸氢钠+25ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的棕色泡沫状物用急速色谱法提纯(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，再做制备性TLC(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF，厚度1000μ)，得到部分晶体的膜(66.7mg,0.233mmol,12％)。1H-NMR:5.92_,1H,s,4-H；5.87-5.64_,2H,mult.,16,17-H’s；4.10_和3.94_,2H,AB,19-H’s；0.79_,3H,s,18-Me.实施例125    雄-5-烯-3β,19-二酮-17-(p-甲苯磺酰)腙

    见附图193。雄-5-烯-3β,19-二酮-17-酮(1，用Research Plus可商业获得，512.5mg,51.684mmol)和p-甲苯磺酰酰肼(pTsNHNH2,392.1mg,2.105mmol)在2-丙醇(6.0ml)中的悬浮液回流24小时。向冷却的反应物中加入20ml的乙醚，减压去除溶剂。残留物溶于10ml乙醚中，溶液滤过硅藻土。滤液中加入10ml己烷，悬浮液减压浓缩。生成物溶于10ml的热乙醚中，冷却的悬浮液过滤。滤液减压浓缩后，做急速色谱分析(40％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，得到不透明树脂状物(0.69g,1.5mmol,87％)。实施例126    雄-5,16-二烯-3β,19-二醇

    见附图193。雄-5-烯-3β,19-二酮-17-(p-甲苯磺酰)腙(2,0.69g,1.5mmol)的无水四氢呋喃(THF,35ml)溶液，在氩气下冰/丙酮浴中冷却，在1分钟内逐滴搅拌加入n-丁基锂(2.5于己烷，3.7ml,9.3mmol)。反应混合物搅拌4天，逐渐升温至室温。反应物倒入50ml冰-饱和氯化铵中分层。水层用25ml乙酸乙酯萃取2次。混合有机层用25ml饱和碳酸氢钠+25ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成的黄色树脂样物做急速色谱分析(50-55-60％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，用甲基t-丁基醚/苯结晶得到绒毛状白色晶体(92.5mg,0.361mmol,24％)，熔点169-171℃。

                                   方法14  双降胆烯的合成实施例127    19,21-双降胆-1,3,5(10),17Z-四烯-3-基甲基醚，2

             (方法14)

    在19,21-双降胆-1,3,5(10),17Z-四烯-3β-醇(1,1.0000g,3.2208mmol)的50ml丙酮溶液中，加入碳酸钾(0.67g,4.8mmol)，得到的悬浮液封闭加热至回流。加入硫酸二甲酯(0.76ml,8.0mmol)，反应持续22小时。然后将混合物倒入50ml5％(重量比)的氢氧化钠中，用50ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用50ml盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用25ml乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的褐色固体以活性炭做中间处理，用95％乙醇结晶形成白色有光泽片晶(735.1mg,2.321mmol,72％)，熔点80.5-82℃，用TLC检测是均匀的(10％乙酸乙酯/己烷于硅胶；生成物Rf0.69；雌-1,3,5(10),16-四烯-3-基甲基醚Rf0.66)。实施例128    19,21-双降胆-2,5(10),17Z-三烯-3-基甲基醚，3(方法

             14)

    19,21-双降胆-1,3,5(10),17Z-四烯-3-基甲基醚(2,450.0mg,1.387mmol)的13ml无水THF+4.60g(62.1mmol)叔丁醇溶液加入约50ml无水氨中，加入0.20g(29mg-atom)剪成小片的锂丝。反应持续7小时，加入1.6ml的甲醇，在一夜间将氨蒸发掉。加入40ml的水，混合物用40ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用40ml的盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用10ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。生成的白色片晶急速过滤(己烷-1％乙酸乙酯/己烷-2％乙酸乙酯/己烷)，再用95％乙醇再结晶，得到白色细腻有光泽白色片晶(329.7mg,1.010mmol,73％)，熔点76-77℃。TLC(1％乙酸乙酯/己烷)显示这是想要的Birch产品(Rf0.15)和初始物质(Rf0.09)的混合物。实施例129    19,21-双降胆-4,17Z-二烯-3-酮,4(方法14)

    向粗制的19-21-双降胆-2,5(10),17Z-三烯-3-基甲基醚(3,130mg,0.3981mmol)的35ml丙酮溶液中加入1.3ml的甲醇和1.3ml的浓盐酸(12.1M)。搅拌1小时后，加入1.33g碳酸氢钠+10ml的水，混合物用5ml的二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物用5ml的盐水冲洗，硫酸钠干燥，滤过赛力特硅藻土503。残留物用5ml二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩。生成的黄色糖浆样物做制备性TLC(10％乙酸乙酯己烷于铝GF,1000μ)得到微黄色树脂样物(293mg,93.7μmol,24％),TLC检测是均匀的(10％乙酸乙酯/己烷于硅胶，生成物Rf0.1；雌-4,16-二烯-3-酮Rf0.1)。实施例130    19,21-双降胆-1,3,5(10)-三烯-3-基甲基醚，6(方法

             14)

    在19,21-双降胆-1,3,5(10)-三烯-3-醇(5,460.0g,1.472mmol)的25ml丙酮溶液中，加入碳酸钾(0.31g,2.2mmol)，悬浮液封闭加热至回流。加入硫酸二甲酯(0.34ml,3.6mmol)，反应持续20小时。然后将混合物倒入25ml5％(重量比)的氢氧化钠中，用25ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用25ml盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。急速色谱法(10％乙酸乙酯/己烷于硅胶)得到无色的糖浆状物(0.43g,1.3mmol,89％)。实施例131    19,21-双降胆-2,5(10)-二烯-3-基甲基醚，7(方法

             14)

    19,21-双降胆-1,3,5(10)-三烯-3-基甲基醚(6,0.36g,1.1mmol)的10ml无水THF+3.68g(49.6mmol)叔丁醇溶液加入约35ml无水氨中，加入0.16g(23mg-atom)剪成小片的锂丝。反应持续8小时，加入1.3ml的甲醇冷却。在一夜间将氨蒸发掉后，加入30ml的水，混合物用30ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用30ml的盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用25ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩得到无色糖浆状物(0.33g,1.0mmol,91％)。TLC检测是均匀的(5％乙酸乙酯/己烷于硅胶；Rf0.69；初始物质Rf0.540.49)。实施例132    19,21-双降胆-4-烯-3-酮，8(方法14)

    向19-21-双降胆-2,5(10)-二烯-3-基甲基醚(7,0.27g,0.82mmol)的7.2ml丙酮溶液中加入2.3ml的甲醇和2.3ml的浓盐酸(12.1M)。搅拌1小时后，加入2.75g碳酸氢钠和20ml的水，混合物用10ml的二氯甲烷萃取3次。混合有机萃取物用10ml的盐水冲洗，硫酸钠干燥，滤过赛力特硅藻土503。残留物用10ml二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩。做制备性TLC(20％乙酸乙酯己烷于铝GF,1000μ)得到浅黄色糖浆样物(125.6mg,0.3994mmol,49％),TLC检测是均匀的(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶，生成物Rf0.39；雌-4,16-二烯-3-酮Rf0.34)。实施例133    16α,17α-环氧基雌-1,3,5(10)-三烯-3-醇,2(方法

             15)

    向1,3,5(10),16-雌四烯-3-醇(2,CAS No.[1150-90-9],636.0mg,2.500mmol)的15ml1,2-二甲氧基乙烷(DME)溶液中在3分钟内加入m-氯过苯甲酸(862.9mg,5,000mmol)的25mlDME溶液，反应搅拌6小时。混合物倒入140g5％(重量比)五水合硫代硫酸钠中，用100ml乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用100ml饱和碳酸氢钠+3份100ml饱和氯化钠冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用50ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做急速色谱分析(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，再用乙酸乙酯再结晶，得到白色有光泽片晶(349.9mg,1.294mmol,52％)，熔点217-219℃。(Lit.[Prelog,V.,Ruzicka,L.,and Wieland,P.,(1945),“类固醇和性荷尔蒙”，(111.Mitteilung).Uberein neues Stereoisomeres des Oestriols.,Helv.Chem.Acta.28:250-256]熔点215℃)，用TLC检测是均匀的(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶；Rf0.32；初始物质Rf0.50)。实施例134    雌-4,16-二烯-10β-醇-3-酮，4(方法15)

    向雌-5(10),16-二烯-3-酮(3,256.4mg,1.000mmol)的6mll,2-二甲氧基乙烷(DME)溶液中加入MCPBA(189.8mg,1.100mmol)的6mlDME+2.4ml水的溶液。搅拌30分钟后，反应混合物倒入30g5％(重量比)五水合硫代硫酸钠中，用30ml乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用30ml饱和碳酸氢钠+3份30ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。向生成的晶状膜中加入45ml5％(重量体积比)氢氧化钾的甲醇溶液，混合物密闭回流1小时，然后倒入100ml的冰水中，用70ml的乙醚萃取3次。混合的醚的萃取物用70ml的盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用25ml的乙醇冲洗混合滤液减压浓缩。生成的树脂样物做制备性TLC(50％乙酸乙酯/己烷于铝GF,1000μ)，再用乙醇水溶液再结晶得到浅黄色针状物(62.4mg,0.229mmol,23％)，熔点156-166℃。TLC(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶；雌酮Rf0.59)显示主要生成物(Rf0.44)，在Rf0.62和0.73处有少量杂质。实施例134A    16α,17α-环氧基雌-4-烯-10β-3-酮，5(方法15)

    雌-5(10),16-二烯-3-酮溶液用MCPBA如实施例134中进行处理，除了使用4等量的MCPBA，而非微超量的等量1。加热回流后，得到的生成物置于5％(重量体积比)的氢氧化钾的甲醇溶液中，经如实施例134中的处理和提纯，得到16α,17α-环氧基雌-4-烯-10β-醇-3-酮。                       方法15实施例135    雌-5(10),16-二烯-3-酮，2(方法16)

    向约200ml的无水氨中加入雌四烯醇甲基醚(2.20g,8.20mmol)的27.07g(.3562mol)的叔丁醇和34ml无水THF溶液，再加入1.01g(0.146g-atom)的剪成小片的锂丝。回流4显示后，加入9.2ml的甲醇，氨在一夜间蒸发掉。加入水(200ml)，混合物用100ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用100ml的盐水冲洗2次，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用25ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的晶状糖浆状物(可能为粗制的醚1)溶于200ml的丙酮中，加入二水合草酸(2.88g)的38ml水溶液。搅拌7小时后，混合物倒入100ml的饱和碳酸氢钠中，用100ml的乙醚萃取3次，混合有机萃取物用100ml的盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用25ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的白色固体用己烷再结晶2次生成白色晶体(1.2931g,5.0435mmol,62％)，熔点117-119℃。TLC(10％乙酸乙酯/己烷于硅胶；雌四烯醇甲基醚Rf0.61)显示生成物(Rf0.34)含有微量杂质(Rf0.14)。实施例135A    16α,17α-环氧基雌-4-烯-10β-醇-3-酮，3(方法16)

    雌-5(10),16-二烯-3-酮(2,270.4mg,1.055mmol)于6.7ml的氯仿中，在丙酮/干冰浴中冷却，3-氯过苯甲酸(724.8mg,4.200mmol)的7.4ml的乙醚溶液加入其中。搅拌2小时后，混合物置于冰箱中。18小时后，混合物倒入60g5％(重量比)五水合硫代硫酸钠中，用25ml的乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用25ml饱和碳酸氢钠+25ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用10ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。向生成的白色固体中加入50ml5％(重量体积比)氢氧化钾的甲醇溶液，混合物密闭回流1小时，冷却后然后倒入100ml的冰水中，用70ml的乙醚萃取3次。混合的醚的萃取物用70ml的盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，硅藻土过滤。残留物用25ml的乙醇冲洗，混合滤液减压浓缩。生成的黄色树脂样物在铝GF制备性TLC色谱板(1000μ)上做2次色谱分析，得到白色晶状固体(55.1mg,0.191mmol,18％)。

                                    方法16实施例136    雄烷刺激人类VNO和嗅觉上皮的电生理学

    使用一种非侵入性的方法记录人类犁鼻骨器官(VNO)和嗅觉上皮(OE)的局部电位。用专门设计的连接着一套多通道药物施用系统的导管/电极分别对这两个鼻结构进行局部气体刺激。这套电极和用药系统由Monti和Grosser描述过(《J.类固醇生物化学和分子生物学》(1991)39:573)，并在共同拥有、共悬未决的USSN 07/771,414中也有描述，在此编入参考文献。VNO和OE的局部反应显示了与配体刺激的浓度的相互关系。

    本研究在10名临床正常(经筛选的)自愿者身上进行-2名男性和8名女性，年龄从18-85岁。研究过程中不进行全身或局部麻醉。

    导管/电极是设计用来导入局部刺激，并同时记录反应的。在VNO记录中，用鼻镜(鼻窥镜)探查实验者的右鼻前庭，犁鼻开口确定在犁骨前端和鼻壁交界处的附近。导管/电极被小心地从VNO开口插入，使电极的端部位于该器官的腔中距开口处1-3mm的地方。取出鼻窥镜。在OE实验中，记录程序是相似的，除了导管/电极的位置是放在中鼻通道的侧部深处，到达嗅觉粘膜。

    局部气体刺激是通过导管/电极进行的。一股持续的洁净、无味、湿润的气流在室温下连续不断地通过刺激系统的通道。刺激配体物质用丙二醇稀释，与潮湿的空气混合，从导管/电极中喷出，时间1-2秒。据估计，这种施用方法向鼻腔施入皮克量级的类固醇配体。本实验的结果如附图180A、180B和180C所示。反应用毫伏-秒(mVxs)计。雄-4,16-二烯-3-酮比其他受测化合物在女性体内引发明显更强的VNO反应(附图180A)。另外，雄-4,16-二烯-3-酮的VNO反应是两性相异的-女性反应是男性反应的两倍强(附图180B)。与其形成对比，男性和女性的OE反应都是相对较低的，与较强的气味剂相比，如丁香(附图180C)。实施例137    各种类固醇使VNO的神经上皮受体电位产生的改变

    5种不同的配体对40名女性(附图181A)和40名男性(附图181B)产生的受体电位改变进行了测量。每个实验者如附图中所示施用7种物质中的每一种60pg。各种物质分开分别施用，每次持续1秒钟。VNO的神经上皮电位的改变记录下来，40名实验者的电位变化总和取平均值。结果如附图所示。附图181A和附图181B进行对比显示每种类固醇对于两性的作用都是各异的，某些配体物质对男性作用强些，另一些对于女性作用强些。实施例138    衡量16-雄烯刺激VNO的自主反应

    向40女性实验者施用雄-4,16-二烯-3-酮的过程中，对各项自主参数进行监测。丙二醇也作为对照剂施用。配体以1秒钟的空气气流的方式施用。自主功能的变化在2秒钟内就可以观察到，持续45秒钟。如附图182所示，当与硼氢化钠对照剂进行对比时，雄烷使VNO的积分受体电位(182A)，极肤电反应(182B)、皮肤温度(182C)，以脑电图衡量的皮层α波活动百分比(182D)，末梢动脉脉搏(182E)和呼吸频率(182F)产生了显著变化。实施例139    两种雄烷类固醇引起的受体电位变化对比

    60皮克的每种配体类固醇和60皮克的丙二醇对照剂施用于5个女性实验者。如附图183所示，雄-4,16-二烯-3β-醇比雄-4,16-二烯-3-酮引起更大的受体电位变化。实施例140    雄烷刺激VNO的精神生理学作用

    雄烷刺激VNO的精神生理学作用用施用信息素配合对实验者在施用前后进行的调查问卷来进行衡量。问卷包括在标准DerogatisSexual Inventory评价中使用的一组形容词。

    实验者是40名女性，年龄在20-45之间。健康状况良好。女性实验者被随机分配-20位施用对照剂，20位施用约20皮克的雄-4,16-二烯-3-酮。在施用对照剂或实验物质之前和之后的30分钟给实验者一份衡量感觉状态的含有70项的问卷。问卷的70个形容词随机使用，按照它们与情绪、感情或性格特征的关系依次排列。结果如下：社教热情、个人状况、唤醒/兴奋和攻击性等感觉的变化，从施用之前到施用后30分钟，那些施用了16-雄烯的实验者，与施用了对照剂的实验者相比变化不明显。但是，在施用了16-雄烯后与施用对照剂相比，消极情感(紧张、压力、羞愧、焦虑、易怒、生气、暴怒-T-测试：p＜0.0001,Anova:p＜0.04)，消极情绪和性格特征(敏感、后悔、自责、负疚、懊悔、悲伤、绝望、自弃、痛苦、不愉快、苦楚、胆怯-T-测试：p＜0.0004,Anova:p＜0.06)以及总体消极性(情感和性格相结合-T-测试：p＜0.0003,Anova:p＜0.05)的减少是十分明显的。

    总地来讲，这些结果说明了雄-4,16-二烯-3-酮当鼻内施用时的镇静和/或抗焦虑和/或抗忧郁作用。实施例141  电生理学研究

    下列电生理学研究在60名临床正常的年龄的20-45岁之间的人类自愿者(30名男性和30名女性)身上进行。没有使用麻醉剂，女性实验者如果怀孕则被排除。

    刺激和记录系统包括一个在别处描述过的“多功能微型探针”(Monti-Bloch,L.和Grosner,B.1.(1991)“推定信息素对人类犁鼻骨器官和嗅觉上皮的电活动的影响”，《J.类固醇生物化学和分子生物学》39:573-582.)。记录电极是一个0.3mm的银球，连接在一条特氟龙绝缘的细银线(0.1mm)上。电极表面先经处理产生一层氯化银界面，然后覆盖一层明胶，电极放在一个小口径的特氟龙导管(直径=5mm)中，使电极的顶端伸出大约2mm。特氟龙导管长10cm，它包含有多通道导引系统的终端延伸，多通道导引系统导引携带化学感受刺激的个别脉冲的连续不断的气流。气流首先进入一个小室中，以气泡的形式通过含有犁鼻骨外激素或含有气味剂的稀释剂或稀释剂自身的溶液。使用螺线管将气流迅速从小室再次导引到一条通路绕过小室。这样就在气流中产生了刺激物的个别脉冲。另外一条直径为2mm的特氟龙外管包裹着这套导管电极组件，它的中端连接到一台持续不断地提供3ml/s吸力的呼吸机上。这种外吸管的同心结构可以使产生的化学感受刺激集中在我们称为“微区”的一个区域内(直径约为1mm)，防止物质扩散到需要刺激的区域之外或者扩散进入呼吸系统。整套刺激和记录组件可以放置在VNO内的神经感受上皮上或呼吸上皮的表面上。

    犁鼻电图(EVG)：记录在安静的房间中进行，实验者仰卧；初始时多功能微型探针用放置在前庭中的鼻牵引器固定在鼻腔中，参比电极和接地电极由银盘(8mm)组成，都放置在眉间。

    进入VNO即犁鼻骨窝首先要张大鼻孔和前庭，然后使用卤素灯照明的六倍双筒放大镜导引特氟龙导管的顶端和记录电极组件进入VNO开口，并固定在犁鼻骨通道内约1mm深。对于一种测验物质而言，记录电极的最佳位置要在电极进行充分地去极化后才能显示出来。

    从记录电极发出的电信号传送给直流放大器，然后被数字化并由计算机监测和存储。对信号的峰-峰振幅进行测量，对去极化波下的面积进行积分，并通过计算机屏幕和数字示波器对信号进行连续不断地监测。通过训练实验者鄂咽关闭、用口呼吸而消除呼吸运动所产生的影响。

    化学感受刺激：嗅觉实验物质为桉烯酸和1-香芹酮；犁鼻骨外激素为A、B、C、D、E和F，如附图180-184。浓度为25-800fmoles的犁鼻骨外激素试样导入连续不断的气流中，持续时间从300毫秒至1秒通常，每两次短的实验脉冲之间间隔3-5分钟。导引实验刺激物的整条管线都由特氟龙、玻璃或不锈钢制成，并在每次使用前仔细清洗和消毒。

    嗅觉电图(EOG)：嗅觉记录使用VNO实验中同样的刺激和记录多功能微型探针。顶端缓慢插入，直到记录电极触到嗅觉粘膜。记录电极的合适位置要在电极相对于气味实验物质的脉冲进行去极化后才能显示出来。

    以300ms空气气流的形式进行的犁鼻骨外激素对VNO的刺激和气味剂的嗅觉刺激引起皮层活动。活动由位于国际10120系统Cz-A1和Tz-A1位置的标准脑电图(EEG)电极记录下来：接地电极位于乳突部。电皮肤生理活动(EDA)用通过导电胶界面分别与中指和无名指的手掌皮肤相接触的标准8mm银电极记录。皮肤温度(ST)由一个放置在右耳垂的小的(1.0mm)热敏电阻探针记录下来。末梢动脉脉搏(PAP)由连接在食指尖的体积描记计进行监测。呼吸频率(RF)由放置在下胸的可调节应变传感器测量出来。所有的电信号都经直流放大，数据化(MP-100,Biopac系统)，并用计算机持续不断地监测。

    统计分析：EVGs或EOGS、峰-峰变化和其他参数的频率变化经过测量，进行数据分析。结果的含义用成对的t-实验或差异分析(ANOVA)来确定。

    犁鼻骨外激素对EVG的效果：每种犁鼻骨外激素都被发现产生雌雄各异的受体电位(附图184A和184B)。对30名男性和30名女性(年龄20-45岁)进行EVG记录。犁鼻骨外激素进行了稀释，以1秒钟的脉冲形式施用于VNO上，两次脉冲之间间隔b分钟。当被询问时，实验者不能“闻”到或有意识发觉任何一种犁鼻骨外激素。这个发现与以前报告的结果是统一的。(Monti-Bloch,L.和Grosser,B.1.(1991)“推定信息素对人类犁鼻骨器官和嗅觉上皮的电活动的影响”，《J.类固醇生物化学和分子生物学》39:573-582)，这说明向VNO施用的嗅觉实验刺激物和犁鼻骨外激素实验刺激物在所施用的浓度都没有引起可感知的感受。

    附图184A显示了男性实验者(年龄20-38岁)对稀释剂和对等摩尔量(100fmoles)的5种犁鼻骨外激素(A、B、C、D和F)以及对E，一种F的立体异构体的平均反应。对各种物质的反应情况在无论什么年龄的所有实验者中都是相似的，并且t-实验和差异分析都没有显著不同。例如，A、C和D产生了明显效果(M15=11.4mV,SD=3.6mV；M76=6.4mV,SD2.5mV，以及M84=15.1mV,SD=4.9mV；p＜0.01)。这在所有的单个实施例中都是一致的。其他的犁鼻骨外激素使VNO的受体进行较小程度的去极化，但是个人的平均反应幅度是一致的。对男性实验者有效的犁鼻骨外激素产生比稀释剂更大的反应(p＜0.001)。B、F和类似浓度的气味剂对男性VNO产生明显降低的反应(附图184A和附图185)。

    对30名女性实验者(年龄20-45岁)遵循相似的实验原则。在这些犁鼻骨外激素中，F(100fmoles)在这一组中产生了最为明显的不同(附图184B)。在这里，A产生了小的效果，与F有显著不同(p＜0.02)。在两组实验者中，有效的犁鼻骨外激素引起标准方差大的受体反应(附图184)。当对男性和女性的A和F的效果的频率分布进行研究时，我们发现了双峰分布。这项发现的意义在此进行研究。

    E,F的一种立体异构体，不刺激女性实验者的VNO，而F却刺激(附图184B)。这是VNO识别犁鼻骨外激素的专一性的例证。在这个方面，一个有趣的发现是尽管F是一种较高等的犁鼻骨外激素，但是E比F产生了更强的嗅觉效果(附图184B和附图185)。

    在男性VNO(附图208)和女性VNO(附图209)中测得的类固醇E2/NC2,E1/NC2,E2/NC3,E1/NC3，甲基取代的E2/NC2,甲基取代的E2/NC3和E8/NC3的EVG幅度的实验结果如附图Ⅵ所示。

    犁鼻骨外激素对EOG的效果：对20名实验者：10男性和10名女性的嗅觉上皮的积分受体电位进行记录。与VNO对犁鼻骨外激素的敏感性形成对比的是OE对这些物质不太敏感。这对于男性和女性(附图185A)都是这样。平均受体电位幅度从2.3mV至0.78mV。在本研究中，B是唯一一种对OE有明显作用的犁鼻骨外激素(p＜0.02)。向实验者询问施加每种刺激物后的嗅觉感受，16名报告没有嗅觉感受，3名男性和1名女性将B描述为一种不好闻的气味。这项发现说明在我们研究中所使用的浓度上，大多数犁鼻骨外激素都不是嗅觉受体的有效刺激物，但对于犁鼻骨受体有明显作用。

    气味剂对EVG和EOG的效果：与犁鼻骨外激素相对比，气味剂1-香芹酮和桉烯酸在VNO中仅产生了微小的局部反应(附图185B)。在男性和女性中都是这样。正如预料的，这些气味剂在局部施用于OE时，在男性和女性中都产生了强烈的反应(附图185A)。稀释剂使嗅觉受体产生比桉烯酸或1-香芹酮较小程度的去极化(p＜0.01)，并且不产生嗅觉感受。

    犁鼻骨外激素的反射效果：开展研究以确定中枢神经系统(CNS)对于VNO受到犁鼻骨外激素刺激的反射反应。犁鼻骨外激素引起的雌雄各异的局部反应(附图184A和184B)有时在雄性和雌性的实验者的自主反应中镜像反映出来。在男性实验者中(附图184C),A和C使皮肤电阻降低(皮肤电生理活动=EDA)(p＜0.01,n=30)。在女性实验者中(附图184B),F和B比A或C在EDA中产生更大的降低(p＜0.01,n=30)。

    犁鼻骨外激素A和C在30名男性实验者中使皮肤温度(ST)产生了明显升高(附图184G)(p＜0.01)；但是D产生了明显的温度降低(p＜0.01)。在30名女性实验者中(附图184H),B和F与A和C相比产生了显著的皮肤温度(ST)升高(p＜0.01)。在女性实验者中，犁鼻骨外激素产生的EDA和ST变化有比男性更大的标准方差。

    在对男性和女性实验者的VNO施加含200fmoles的犁鼻骨外激素的空气脉冲(300毫秒到1秒)时，记录下从Cz和Tz的皮层活动(附图184G和184H)。在男性中(附图184E),A、C和D使α皮层活动产生显著增加，延迟时间为270-380毫秒。D和A产生了最强的效果(p＜0.01)。在施用了一个单个的有效物质的脉冲后，EEG的同步保持了1.5-2.7分钟。在女性中(附图184F)，施用于VNO的B或F的单个脉冲(200fmoles)使α皮层活动增加，独立于嗅觉受体的反应。我们发现了人类VNO和嗅觉上皮的反应的特征专一性，这说明它们是独立的功能系统，分别与CNS有联系。(Brookover,C.(1914)，《成年男性的终神经》,J.Comp.Neurol.24∶131-135.)。也有初步证据表明EVG与三叉神经伤害感受器末端不相联系，因为对鼻中隔呼吸上皮的局部麻醉(2％利度卡因)既不阻碍也不消除EVG(Monti-Bloch,L.和Grosser B.L.(1991),“推定信息素对人体犁鼻骨器官和嗅觉上皮的电活动的影响”，《J.类固醇生物化学和分子生物学》39:573-582)，并且，实验者没有对任何刺激过程报告任何疼痛感觉。

    还根据它们在图表中的位置，用雄-5,16-二烯-3β,19-二醇和4种其他雄烷做了其他实验，结果如附图193-200所示。雄-5,16-二烯-3β,19-二醇的EEG、RF和EKG反应，女性比男性强，但ST、GSR和EVG反应，男性比女性强。一些施用这些化合物的女性报告有幸福感，这是不一般的，因为这样的报告通常伴随有比附图194B和附图194C中高得多的RF和GSR。

    VNO受体很明显对犁鼻骨外激素要比对实验的任何一种气味剂敏感，对嗅觉受体则相反。尽管OE可能对某些犁鼻骨外激素有受体位置，VNO的反应专一性是明显不同的。

    两组犁鼻骨外激素A、C和D及B和F的专一性和效果发现有性别差异。这说明可能有受体相关联的性别特异性存在。发现说明犁鼻骨外激素刺激VNO激活了成年人的自主神经的组成部分。

    更进一步，结果说明犁鼻骨外激素刺激VNO产生了EEG的同步反应(附图184G和184H)。因此，这些证据表明犁鼻系统对多种化学感受刺激作出反应，其中一些可以引发反射自主行为。实施例142  电生理学研究

    如实施例141所述对年龄从20至45岁的男性和女性临床正常的自愿者进行电生理学研究。没有使用麻醉剂，女性实验者一旦怀孕则排除。

    犁鼻电图(EVG)：化合物A1-P1,A2-P1,A4-P1,A3-P1,A1-P4,A2-P4的积分EVG如附图1和2所示(参见图表Ⅰ)。通过训练实验者鄂咽关闭、用口呼吸而消除呼吸运动所造成的人为影响。浓度为25-800fmoles的犁鼻骨外激素试样喷入连续不断的气流中，持续时间为300毫秒至1秒。实施例143

    实施例133、134和134A的化合物在临床正常的成年女性中进行电生理学研究。下列图表总结了实验结果。EVG和α-CA的数据分别如附图219和220所示。

    雌烯犁鼻骨外激素对女性VNO、自主行为、肌电图和α脑波的影响。EVG RF CF EDA BT EMGα-CAExample 133+++0 0 0 0 0+++Example 134+++0 0 0 0 0+Example 134A++++0 0 0 0 00实施例133:16α,17α-环氧基雌-1,3,5(10)-三烯-3-醇实施例134：雌-4,16-二烯-10β-醇-3-酮实施例134A:16α,17α-环氧基雌-4-烯-10β-醇-3-酮EVG=犁鼻电图RF=呼吸频率CF=心率EDA=皮肤电生理活动BT=体温EMG=肌电图α-CA=α脑波0    化合物没有与对照剂明显差别的效果+    任意刻度效果++   比对照剂好一些，相关+++  二者有明显区别++++ 数据(p-值)                  19-降孕烷犁鼻骨外激素对女性EEG和自主活动的影响n=6

                 EVG    EDA    RF    CF  EMG   BT   α-CA  βCA      表现           分值E2/P8的甲醇醚    +25    +100   .5    .5   0    -2.5  -10    -35    EDA+,RF-,CF-,β-   5

        E9/P2    +5     -10    -2.5  +10  +5   -2.5  +5     -35    CF+,α+,β-        3

        E4/P2    +2.5   -10    -2    +5   -5   0     +2.5   +2.5   EDA-,EMG-          3

        E7/P1    +30    +70    -5    -5   0    0     -5     -2     EDA+RF-CF-         4E2/P8的乙酸酯    +50    +130   0     0    0    +6    0      -15    EDA+,BT+,β-       4

        E3/P1    +20    +70    -2.5  -2.5 0    +3    -10    -10       EDA+            2

       E10/P2    +3     -10    0     +10  -5   0     +10    +10    EDA-,CF+EMG-α-    5

        E2/P7    +25    +50    +5    -5   0    +10   -15    -30    EDA+,BT+           3

        E2/P5    +25    +30    0     0    0    0     -10    -40        0              0

        E2/P6    +20    +50    0     .5   0    0     -15    -30    EDA+,CF-           3

        E1/P1    +45    +110   +5    0    0    0     -5     -10        0              0

        E2/P1    +40    +95    +3    +5   0    0     0      -15    EDA+RF+,CF+        4E2/P1的甲醇醚    +20    +85    -2.5  -5   0    0     -6     -20    EDA+,CF-           3

       E13/P1    +1     -10    0     0    -5   0     0      -40    EDA-,EMG-,β-      4

       E11/P1    +20    -10    0     +5   -2.5 -1    0      -25        0              0

        E5/P1    0      -10    0     0    0    0     0      -40        0              0E6/P8的乙酸酯    +2.5   -10    -2.5  +2.5 -5   -3    +10    -20    EMG-,BT-,α+,β-   5

        E2/P8    +25    +110   0     0    0    +10   +7     -20    EDA+,BT+,α+,β+   5

        E2/P2    +20    +20    -2 5  .5   0    -2.5  +7     -25    CF-,BT-,α+,β-    5

        E2/P4    +50    +110   +2.5  0    0    0     +30    -10    EDA+,α+,β-       4

       E12/P8    +35    +100   0     -5   0    -3    -10    -25    EDA+,CF-,BT-       4

        E8/P9    +35    +105   +2.5  0    0    -1    -10    -40        0              0

                   19-降孕烷犁鼻骨外激素对男性EEG和自主活动的影响n=6

               EVG    EDA     RF   CF   EMG  BT    α-CA    βCA      表现         分值E2/P8的甲醇醚  +12    +95     0    -.5  -2.5 -2.5    +2.5    -10    EDA+,CF-       3(+)

        E9/P2  +20    -20     0    +2.5 -2.5 -5      -7      -40       BT-          2

        E4/P2  +15    -20     0    +2.5 0    -2.5    -2.5    -20        0           0

        E7/P1  +18    +70     0    0    0    +7      -2.5    -30    EDA+,BT+β-     4E2/P8的乙酸酯  +40    +80     0    0    0    +2.5    -10     -20       EDA+         2

        E3/P1  +15    +50     0    +2 5 0    -5      -10     -30    EDA+,BT-β-     4

       E10/P2  +20    -20     0    +2.5 -2.5 -1      0       +40        0           0

        E2/P7  +30    +120    0    +2.5 0    0       -10     -20        0           0

        E2/P5  +10    +90     0    0    0    +10     -5      -30    EDA+,BT+,β     4

        E2/P6  +12    +100    0    0    0    -2.5    0       -20       EDA+         2

        E1/P1  +35    +120    -2.5 0    0    +2.5    -2.5    -20       EDA+         2

        E2/P1  +30    +120    0    0    0    -7      -10     -20    EDA+,BT-(EEG±) 4E2/P1的甲醇醚  +15    +110    -5   0    0    0       0       -20    EDA+,RF-        3

       E13/P1  +20    -20     0    0    -2.5 0       -5      -15        0           0

       E11/P1  +18    -20     +2.5 0    0    -2.5    -5      -15        0           0

        E5/P1  +10    -20     0    -2.5 -2.5 0       -5      -10        0           0E6/P8的乙酸酯  +2.5   -20     0    -2.5 -2.5 -2.5    -5      -15        0           0

        E2/P8  +30    +100    0    0    0    0.      -10     -20        0           0

        E2/P2  +15    +80     0    0    0    +2.5    -5      -25        0           0

        E2/P4  +30    +80     -2.5 0    0    -5      -10     -20    EDA+,BT-,(EEG±)4

       E12/P8  +25    +120    0    0    0    +2.5    -10     -25       EDA+         2

        E8/P9  +30    +130    0    0    0    +2.5    -5      -20       EDA+         2

                         方法17    类固醇的D环氧化物的合成                                    方法18  其他的类固醇的D环氧化物的合成实施例144 17α,20α-环氧基-19-降孕-1,3,5(10)-三烯-3-醇，1:

    向19-降孕-1,3,5(10),17Z-四烯-3-醇(282.4mg,0.9999mmol)的6ml1,2-二甲氧基乙烷(DME)溶液中加入3-氯过苯甲酸(92.2％,207.1mg,1.200mmol)的6mlDME溶液，反应搅拌5小时。混合物倒入50g5％(重量比)的五水合硫代硫酸钠中，用3份20ml乙酸乙酯萃取。混合有机萃取物用20ml饱和碳酸氢钠+20ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用5ml的乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的白色固体结晶2次，先用甲基t-甲基醚(MTBE)/己烷，然后用乙醇水溶液，得到细腻，有光泽，灰白色片晶(160.0ma,0.5362mmol,54％)，熔点154-159℃，用TLC检测是均匀的(25％乙酸乙酯/己烷于硅胶，生成物Rf0.42，初始物质Rf0.57,0.42(微量))。实施例145 3-甲氧基螺[雌-1,3,5(10)-17,2挘-氧杂环丁烷],2

    氩气下向3-甲氧基-19-降孕-1,3,5(10)-三烯-17β-醇-21-甲苯磺酸酯(168.1ma,0.3469mmol)和t-丁氧化钾(168.1ma,1.498mmol)中加入8ml的无水二甲亚砜(DMSO)，反应在加热的(77-99℃)的油浴中搅拌3.5小时。冷却后，加入MTBE(20ml)，混合物用3份5ml水+5ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用5mlMTBE冲洗，混合滤液减压浓缩。制备性TLC(10％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF,1000μ)得到灰白色晶体(72.2mg,0.231mmol,67％)。TLC(10％乙酸乙酯/己烷于硅胶；雌-1,3,5(10),16-四烯-3-基甲基醚Rf0.70)显示生成物(Rf0.33)中有微量杂质(Rf0.42)。实施例146 16α,17α-环氧基孕-4-烯-3-酮，3:

    向孕-4,16-二烯-3-酮(31.0ma,0.104mmol)的0.6mlDME溶液中加入3-氯过苯甲酸(92％,21.5ma,0.125mmol)的0.6mlDME溶液，反应搅拌5小时。混合物直接做制备性TLC(30％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF,1000μ)得到白色晶状固体(13.1mg,41.7μmol,40％)。TLC(30％乙酸乙酯/己烷于硅胶；初始物质Rf0.53,0.00(微量))显示生成物(Rf0.33)中有微量杂质(Rf0.38)。实施例147 13,17-环氧基-10,17-二甲基甾-4-烯-3-酮，4：

    向10,17-二甲基甾-4,13(17)-二烯-3-酮(342.1ma,1.265mmol)的7.6mlDME溶液中加入3-氯过苯甲酸(92％,262.0ma,1.518mmol)的7.6mlDME溶液，反应搅拌5小时。反应混合物倒入60g5％(重量比)的五水合硫代硫酸钠中，用30ml乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用30ml饱和碳酸氢钠+30ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用10ml的乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的黄色树脂样物做急速色谱分析(30％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，再做制备性TLC(30％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF,1000μ)得到浅黄色固体(87.2ma,0.304mmol,24％),用TLC检测(30％乙酸乙酯/己烷于硅胶，孕-4,16-二烯-3-酮Rf0.54)有3个点(Rf0.23,0.29和0.32)。实施例148 19-21-双降胆-1,3,5(10),16-四烯-3-基甲基醚，5:

    在氩气下向17-碘雌-1,3,5(10),16-四烯-3-烯-甲基醚(788.6ma,2.000mmol),15％(重量比)氢氧化钠(2.0ml)和氯化[1,1挘-双(二苯基膦基)二茂铁]钯(Ⅱ)和二氯甲烷混合物(1∶1)(40.8ma,50.0Camel)中加入无水THF(8.0ml)和三丁基甲硼烷(1.0M的THF溶液，2.2ml,2.2mmol)。回流24小时后，向冷却的反应物中加入苯(20ml)。混合物用10ml的盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用5ml的苯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成的深色糖浆状物用急速色谱法(1％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，再用95％乙醇结晶，用活性炭中间处理，得到白色片晶(425.4ma,1.311mmol,66％)，熔点50-52℃，做TLC是均匀的(5％乙酸乙酯/己烷于硅胶；Rf0.48；雌-1,3,5(10),16-四烯-3-基甲基醚Rf0.45)。实施例149 19,21-双降胆-5(10、,16-二烯-3-酮，6:

    约30ml的无水氨蒸馏过KOH，进入到一个火焰干燥的装有入口导管、磁力搅拌棒、干冰/丙酮冷凝器和玻璃塞的三颈烧瓶中。加入19,21-双降胆-1,3,5(10),16-四烯-3-基甲基醚(5,300.0ma,0.9245mmol)的8ml无水THF和3.09g(41.7mmol)叔丁醇溶液，然后加入剪成小片的锂丝(高钠，0.13g,19mg-atom)。反应混合物搅拌6小时，用1.0ml的甲醇冷却。使氨在一夜间蒸发后，加入水(25ml)，反应混合物用25ml MTBE萃取3次。混合有机萃取物用25ml盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用10ml MTBE冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的糖浆状物溶于25ml的丙酮中，加入二水合草酸(0.37g)的5ml水溶液。悬浮液搅拌4小时。水解混合物倒入10ml的饱和碳酸氢钠中用10ml的MTBE萃取3次。混合有机萃取物用10ml盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用5mlMTBE冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的糖浆状物溶于5ml己烷中，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用2ml的己烷冲洗，混合滤液蒸发至2ml。得到的溶液置于制备性TLC板(硅胶GF,1000p)，用10％乙酸乙酯/己烷分析。适当柱段的提炼浓缩得到无色糖浆状物(226.4ma,0.7245mmol,78％)。TLC(10％乙酸乙酯/己烷于硅胶)显示生成物(Rf0.34)中有微量杂质(Rf0.14)。实施例150 16α,17α-环氧基-19,21-双降胆-4-烯-10β-醇-3-酮，7

    在3分钟内向冷却的(干冰/丙酮)19,21-双降胆-5(10),16-二烯-3-酮(6,270.2ma,0.8647mmol)的1.6ml二氯甲烷溶液加入3-氯过苯甲酸(97.4％,328.3mg,1.902mmol)的6.3ml二氯甲烷溶液。剩余的过酸用1.8ml的二氯甲烷冲洗入容器中，反应物搅拌5小时。反应物从冷却的浴中取出，反应物继续搅拌1小时。反应物然后用赛力特硅藻土503过滤。残留物用1ml的二氯甲烷冲洗，混合滤液用5g5％(重量比)的五水合硫代硫酸钠+5ml饱和碳酸氢钠+5ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用1ml的二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩。生成的浅黄色固体加热溶于22ml的甲醇中，加入3.6ml的三乙胺，反应物搅拌2小时。混合物减压浓缩得到琥珀色糖浆状物。用制备性TLC提纯(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF,1000μ)，得到白色晶状固体(133.0ma,0.3861mmol,45％)。TLC(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶；16α,17α-环氧基雌-烯-10β-醇-3-酮Rf0.26)显示生成物(Rf0.38)中有微量杂质(Rf0.30)。实施例151  雌-5(10),16-二烯-3-酮，8:

    约2.4L的无水氨蒸馏过KOH，进入到一个火焰干燥的装有两个丙酮/干冰冷凝器、一个机械搅拌器和一个玻璃塞的四颈圆底烧瓶中。加入雌-1,3,5(10),16-四烯-3-基甲基醚(27.45g,0.1023mol)的260ml无水THF和133.24g(1.798mol)叔丁醇溶液，然后加入4份3.12g剪成小片的锂丝(总计12.49g,1.79gg-atom)，每30分钟1等份。有时机械搅拌中断，以防止沸腾。再搅拌3小时后，加入甲醇(100ml)，反应物搅拌使氨在一夜间蒸发后，加入水(600ml)，混合物用300mlMTBE萃取3次。混合有机萃取物用300ml盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用50mlMTBE冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的浅黄色油状物溶于500ml的丙酮中，加入二水合草酸(7.19g)的95ml水溶液。搅拌8小时后，水解混合物倒入250ml的饱和碳酸氢钠中，用250ml的MTBE萃取3次。混合有机萃取物用250ml盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用50mlMTBE冲洗，混合滤液减压浓缩。用己烷再结晶2次(中间用硫酸镁干燥，除去生成的水)得到2批白色晶体。总量为12.18g(47.51mmol,46％)，第1批的熔点117.5-119.5℃，第二批的熔点115-119℃。实施例152 5β,10β,16α,17α-双环氧基雌-3-酮，9

    在58分钟内向冷却到0℃的雌-5(10),16-二烯-3-酮(8,12.02g,46.88mmol)的70ml二氯甲烷溶液加入3-氯过苯甲酸(97.4％,17.80g,0.1031mol)的340ml二氯甲烷悬浮液，使反应温度维持在0℃上下2℃内。再加入二氯甲烷(100ml)，将黏着的过酸冲洗入反应容器中，反应物搅拌5小时。得到的悬浮液用赛力特硅藻土503过滤。残留物用50ml的二氯甲烷冲洗，混合滤液用250g5％(重量比)的五水合硫代硫酸钠+250ml饱和碳酸氢钠+250ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用50ml的二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩。生成的浅黄色固体用95％乙醇再结晶，用活性炭做中间处理，得到光亮的白色片晶(11.38g,39.46mmol,84％)，熔点168-173℃。实施例153 16α,17α-环氧基雌-4-烯-10β-醇-3-酮，10

    5β,10β,16α,16α-双环氧基雌-3-酮(9,11.30g,39.18mmol)加热溶于1L的甲醇中，加入三乙胺(166ml,1.19mmol)。搅拌6小时后，溶液减压浓缩，得到的略带黄色的固体溶于250ml的热95％乙醇中，加入活性炭(DarcoG-60,0.58g)，混合物加热至沸腾。热悬浮液滤过赛力特硅藻土503，残留物用50ml热乙醇冲洗，混合滤液蒸发至约150ml，在自来水中晃动冷却。溶液用“副产品”晶体作仔晶，然后在结晶开始后，放入冰箱中过夜。“副产品”滤掉，用10ml的冷乙醇冲洗(在重3.2762g，熔点262-269℃的残留物干燥后)。混合滤液蒸发至约50ml，在自来水中晃动冷却。溶液用真正产品作仔晶，结晶开始后放入冰箱过夜。悬浮液过滤，残留物真空中用P2O5干燥，得到平的白色晶体(4.6827g,16.282mmol,41％)，熔点193-195℃，用TLC检测是均匀的(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶；生成物Rf0.47；真正的产品样品Rf0.47)。实施例154  16α,17α-环氧基雌-13,5(10)-三烯-3-醇，11:

    在3分钟内，向1,3,5(10),16-雌四烯-3-醇(CAS No.11150-90-91,636.0ma,2.500mmol)的15mlDME溶液中在3分钟内加入m-氯过苯甲酸(862.9mg,5.000mmol)的25mlDME溶液，反应搅拌6小时。混合物倒入140g5％(重量比)五水合硫代硫酸钠中，用100ml乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用100ml饱和碳酸氢钠+3份100ml饱和氯化钠冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用50ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成物做急速色谱分析(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶)，再用乙酸乙酯再结晶，得到白色有光泽片晶(349.9ma,1.294mmol,52％)，熔点217-219℃。(Lit.[Prelog,V.,Ruzicka,L.和Wieland,P.,(1945),“类固醇和性荷尔蒙”,(111.Mitteilung).Uber ein neues Stereoisomeres desOestriols.Helv.Chem.Acta.28:250-256]熔点215C)，用TLC检测是均匀的(20％乙酸乙酯/己烷于硅胶；Rf0.32；初始物质Rf0.50)。

    实施例155对实施例144、146、147、150、153和154的化合物及两种其他的gint-D环氧基类固醇在临床正常的成年男性和女性中进行了电物理学研究。结果汇总于附图221A和221B中。

    17,20-环氧基孕-4-烯-3-酮的制备J.Hader和E.Blanke在英国专利1,049,988(1996)中有所描述。

    16B,20B-环氧基孕4-烯-3B-醇的制备M.Matsui和D.Fukushima在J.Org.Chem.35(3),561(1970)中有所描述。

    18,20-环氧基孕-4-烯-3-酮的制备G.Cainelli,B.Kamber,J.Keller,M.Lj.Michailovic,D.Arigoni和O.Jeger在Helv.Chim.Acta.62,518(1961)中有所描述。

    16a,17a-环氧基雄-4-烯-3-酮(雄烯氧化物)根据文献中的程序制备：F.Sondheimer,O.Mancera,M.Urquiza和G.Rosenkranz,J.Chem.Soc.77,4145(1955)。

    17B,21-环氧基-3-甲氧基-19-失碳-17a-孕-1,3,5(10)-三烯根据文献中的程序制备：B.Singh和R.G.Christiansen,J.Pharm.Sci.60,491(1971)。

                    方法19 17-碘雌-1,3,5(10),16-四烯-3-基甲基醚                  方法20  其他类固醇的D环氧化物的合成

    实施例156雌酮腙，1：雌酮(20.00g,73.97mmol)的150ml无水EtOH,34ml(0.24mol)三乙胺和64ml(2.0mol)肼的悬浮液封闭回流1.5小时。反应混合物搅拌加入到580ml的水中，冷冻过夜。粗的腙过滤，用100ml水冲洗，P2O5真空干燥，得到灰白色固体(22.57g,＞100％)。

    实施例157 17-碘雌-1,3,5(10),16-四烯-3-醇，2：向在33分钟内在氩气下向冷却的(冰水浴)粗制雌酮腙(1,22.45g)和200ml的无水四氢呋喃(THF)和50ml(0.36mol)的三乙胺的混合物中加入碘(44.31g,0.1746mol)的150ml无水THF溶液，直到气泡停止(溶液保持在：8ml)。继续搅拌20分钟后，反应混合物倒入300ml的1N盐酸中，用100ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用3份100g5％(重量比)的五水合硫代硫酸钠+100ml饱和碳酸氢钠+100ml盐水冲洗，硫酸钠干燥，滤过粗的玻璃料。残留物用50ml的乙醚冲洗2次，混合滤液减压浓缩。得到的红色泡沫状物用甲醇水溶液结晶2次，两次都用活性炭做中间处理，得到细腻的灰白色片晶(18.70g,49.18mmol，从雌酮中总共得到66％)，熔点134-135℃。

    实施例158 17-碘雌-1,3,5(10),16-四烯-3-基甲基醚，3，由17-碘雌-1,3,5(10),16-四烯-3-醇制备：17-碘雌-1,3,5(10),16-四烯-3-醇(2,17.11g,44.99mmol)和碳酸钾(9.33g,67.5mmol)的600ml丙酮悬浮液封闭加热至回流，加入硫酸二甲酯(11ml,0.12mol)。搅拌24小时后，冷却的反应混合物倒入500g5％(重量比)的氢氧化钠中，用250ml的甲基t-丁基醚(MTBE)萃取3次，混合有机萃取物用25.0ml的盐水冲洗，硫酸钠干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用50ml的MTBE冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的褐色固体结晶得到粉色至紫色的针状物(14.85g,37.66mmol,84％)，熔点14-147℃。

    实施例159雌-1,3,5(10)-三烯-17-腙-3-基甲基醚，4：雌酮3-甲基醚(1.000g,3.5162mmol)的7ml无水EtOH，三乙胺(1.6ml,11mmol)和肼(3.1ml,99mmol)的悬浮液封闭回流90分钟，在此过程中反应均匀化。搅拌加入水(28ml)，混合物冷冻过夜。过滤，残留物用P2O5真空干燥得到细腻，光亮的白色片晶(1.0437g,3.4973mmol,99％)，熔点166-169℃。

    实施例160 17-碘雌-1,3,5(10),16-四烯-3-基甲基醚，3，由雌-1,3,5(10)-三烯-17-腙-3-基甲基醚制备：在30分钟内在氩气下向雌-1,3,5(10)-三烯-17-腙-3-基甲基醚(4,1.0000g,3.3509mmol)和18ml无水THF的混合物中加入碘(2.01g,7.92mmol)的10ml无水THF的混合液，直到黄色稳定下来(溶液保持在：3ml)。继续搅拌15分钟后，反应混合物倒入35ml的1N盐酸中，用15ml的乙醚萃取3次。混合有机萃取物用15g5％(重量比)的五水合硫代硫酸钠+15ml饱和碳酸氢钠冲洗，硫酸钠干燥，滤过粗的玻璃料。残留物用10ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的桔黄色固体用无水EtOH结晶，用活性炭做中间处理，得到浅黄色晶状固体(764.5ma,1.939mmol,58％)，熔点145-146℃。

    实施例161雌-5(10),16-二烯-3-酮，5，由雌-1,3,5(10),16-四烯-3-基甲基醚制备：约2.4L的无水氨蒸馏过KOH，进入到一个火焰干燥的装有两个丙酮/干冰冷凝器、一个机械搅拌器和一个玻璃塞的四颈圆底烧瓶中。加入雌-1,3,5(10),16-四烯-3-基甲基醚(27.45g,0.1023mol)的260ml无水THF和133.24g(1.798mol)叔丁醇溶液，然后加入4份3.12g剪成小片的锂丝(总计12.49g,1.799g-atom)，每30分钟1等份。有时机械搅拌中断，以防止沸腾。再搅拌3小时后，加入甲醇(100ml)，反应物搅拌使氨在一夜间蒸发后，加入水(600ml)，混合物用300mlMTBE萃取3次。混合有机萃取物用300ml盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用50mlMTBE冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的浅黄色油状物溶于500ml的丙酮中，加入二水合草酸(7.19g)的95ml水溶液。搅拌8小时后，水解混合物倒入250ml的饱和碳酸氢钠中，用250ml的MTBE萃取3次。混合有机萃取物用250ml盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用50mlMTBE冲洗，混合滤液减压浓缩。用己烷再结晶2次(中间用硫酸镁干燥，除去生成的水)得到2批白色晶体。总量为12.18g(47.51mmol,46％)，第1批的熔点117.5-119.5℃，第二批的熔点115-119℃。

    实施例162雌-5(10),16-二烯-3-酮，5，由17-碘雌-1,3,5(10),16-四烯-3-基甲基醚制备：约1.2L的无水氨蒸馏过KOH，进入到一个3L的装有两个丙酮/干冰冷凝器和一个机械搅拌器的三颈圆底烧瓶中，烧瓶中装有17-碘雌-1,3,5(10),16-四烯-3-基甲基醚(14.71g,37.31mmol)的200ml无水THF溶液。按比例加入剪成小片的锂丝(高钠，5.18g,0.7469g-atom)，控制泡沫的产生。搅拌1小时后，在3小时内加入甲醇(40ml)，在此过程中，反应物褪色。混合物搅拌使氨在一夜间蒸发后，加入水(400ml)，混合物用200mlMTBE萃取3次。混合有机萃取物用200ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用50mlMTBE冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的淡黄色糖浆样物溶于175ml的丙酮中，加入二水合草酸(2.51g)的33ml水溶液。搅拌6小时后，水解混合物倒入65ml的饱和碳酸氢钠中，用65ml的MTBE萃取3次。混合有机萃取物用65ml盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用25mlMTBE冲洗，混合滤液减压浓缩。用己烷再结晶2-3次(中间用硫酸镁干燥，除去生成的水)得到2批浅黄至黄色的晶体。总量为4.7217g(18.416mmol,Limo)，第1批的熔点116-118℃，第二批的熔点117-118℃。

    实施例163 3-氯过苯甲酸的提纯和滴定：商业可获得的3-氯过苯甲酸(MCPBA,57-86％,50.00g)加入到1L的磷酸钠水溶液缓冲剂中(0.5M一元磷酸盐和0.5M二元磷酸盐)，悬浮液机械搅拌5分钟。混合物滤过粗玻璃料，残留物用200ML的水冲洗。残留物在真空中用P2O5干燥，得到白色固体(33.50g,67％质量回收)。约0.25g的提纯的过酸试样在以下试剂中滴定3次：碘化钠(1.50g)溶于水，加入醋酸(5.0ml)和氯仿(5.0ml)，然后加入过酸试样。混合物快速搅拌，同时滴定于标准0.1N硫代硫酸钠(从Aldrich可获得)直到无色终点。下列的等式用于计算试样中MCPBA的百分比：

    表观分子量=2(试样的质量，g)/[(体积，硫代硫酸，L)](浓的标准硫代硫酸)

    MCPBA百分比=172.57/表观分子量

    三次读数平均得到MCPBA百分比92.2％。

    实施例164 5β,10β,16α,17α-双环氧基雌-3-酮，6：在58分钟内向冷却到0℃的雌-5(10),16-二烯-3-酮(5,12.02g,46.88mmol)的70ml二氯甲烷溶液加入3-氯过苯甲酸(97.4％,17.80g,0.1031mol)的340ml二氯甲烷悬浮液，使反应温度维持在0℃上下2℃内。再加入二氯甲烷(100ml)，将黏着的过酸冲洗入反应容器中，反应物从冷却的浴中取出，搅拌5小时。得到的悬浮液用赛力特硅藻土503过滤。残留物用50ml的二氯甲烷冲洗，混合滤液用250g5％(重量比)的五水合硫代硫酸钠+250ml饱和碳酸氢钠+250ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用50ml的二氯甲烷冲洗，混合滤液减压浓缩。生成的浅黄色固体用95％乙醇再结晶，用活性炭做中间处理，得到光亮的白色片晶(11.38g,39.46mmol,84％)，熔点168-173℃。

    实施例165 16α,17α-环氧基雌-4-烯-10β-醇-3-酮，7，由雌-5(10),16-二烯-3-酮制备：向雌-5(10),16-二烯-3-酮(5,331.8ma,1.294mmol)的6ml1,2-二甲氧基乙烷(DME)溶液中加入3-氯过苯甲酸(95.6％,491.3ma,2.847mmol)的6mlDME溶液。搅拌24小时后，反应混合物倒入15g5％(重量比)五水合硫代硫酸钠中，用30ml乙酸乙酯萃取3次。混合有机萃取物用30ml饱和碳酸氢钠+3份30ml盐水冲洗，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用15ml乙酸乙酯冲洗，混合滤液减压浓缩。生成的白色固体氩气下溶于20ml的无水THF中，在丙酮/干冰浴中冷却。分2次加入二异丙基氨化锂(LDA,1.5M环己烷溶液，0.86ml,1.3mmol)，反应混合物继续搅拌25分钟。加入饱和氯化铵(0.5ml)和乙醚(30ml)，混合物用10ml的盐水冲洗3次，硫酸镁干燥，赛力特硅藻土503过滤。残留物用5ml的乙醚冲洗，混合滤液减压浓缩。得到的潮湿黄色固体做急速色谱分析(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶150)，再做制备性TLC(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶GF,1000p)，用二氯甲烷/己烷再结晶，得到白色晶体(47.0ma,0.163mmol,13％)，熔点192-194℃。用TLC检测是均匀的(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶；生成物Rf0.32；雌酮Rf0.59)。UV:λmass236nm,ε=13.000,IR:3508cm-1(OHstr.),1661cm-1(unsa’t.C=0str.),1620cm-1(C=C str.).1H-NMR(in d6acetone):5-6-δ(1H,s,H-4),4.1δ(1H,s,10β-OH),3.1-3.3(2H,AB q,160-H&17,O-H),0.82δ(3H,s,18-H).Anal.:C16H24O3计算：74.96％,H 8.33％。发现：C 74.94±0.06％,H 8.33+0.07％。HR-EIMS:C16H24O3计算：288.172544。发现：288.1726.180)。

    实施例166 16α,17α-环氧基雌-4-烯-10β-醇-3-酮，7:5β,10β,16α,16α-双环氧基雌-3-酮(6,11.30g,39.18mmol)加热溶于1L的甲醇中，加入三乙胺(166ml,1.19mmol)。搅拌6小时后，溶液减压浓缩，得到的略带黄色的固体溶于250ml的热95％乙醇中，加入活性炭(DarcoG-60,0.58g)，混合物加热至沸腾。热悬浮液滤过赛力特硅藻土503，残留物用50ml热乙醇冲洗，混合滤液蒸发至约150ml，在自来水中晃动冷却。溶液用“副产品”晶体作仔晶，然后在结晶开始后，放入冰箱中过夜。“副产品”滤掉，用10ml的冷乙醇冲洗(在重3.2762g，熔点262-269℃的残留物干燥后)。混合滤液蒸发至约50ml，在自来水中晃动冷却。溶液用真正的产品，结晶开始后放入冰箱过夜。悬浮液过滤，残留物真空中用P2O5干燥，得到平的白色晶体(4.6827g,16.282mmol,41％)，熔点193-195℃，用TLC检测是均匀的(50％乙酸乙酯/己烷于硅胶；生成物Rf0.47；真正产品样品Rf0.47)。

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本发明涉及一种减轻PMS和焦虑症状的方法。这种方法包括由鼻施用一种类固醇,这种类固醇是一种人类犁鼻骨外激素,从而使这种犁鼻骨外激素与特定的神经上皮受体结合。这种或多种类固醇优选地以含有一种或多种药学适宜载体的药物成分的形式施用。。

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