金钱草的主成分三萜皂角醇和黄酮甙的提取法.pdf

本发明是一种尿路结石症防治药物的有效成份的提取方法。
    金钱草（Desmodium        styracifolium（Osb.）Merr）是豆科植物，主要产在广东、广西、福建等地，它以治疗尿石症和胆石症的有效药物在市场上出售。目前我国主要以草药和制作成流浸膏片（以石淋通为代表）形成应用于临床治疗。以往一般认为它能增加冠状血流量，促进胆汁分泌的作用。而对尿石症的作用及金钱草的主要成份缺乏系统研究。由于草药的成份受自然环境、产地的影响，所以临床疗效不确实，不稳定。

    第二次世界大战以来，我国和世界各地一样，尿石症的发病率出现逐年增高的趋势，且成为我国南方各省泌尿外科的首位疾病。尽管近年来体外震波碎石术和经皮肾镜取石术、输尿管肾镜取石术的临床应用，在临床上亦取得了较大的进展，但术后结石的残留和结石的复发等问题依然是泌尿外科的重要问题，所以目前世界各国均在研究和开发新的尿石症的防治药物。

    本发明的目的是根据目前尿石症治疗的需要，把我国民间常用的金钱草的主成份提炼出来作为尿石症的临床防治用药，使其既避免了生草药地有效成份不稳定现象，又避免了由于生草药的产地不同而造成其主成份含量不一致，导致临床疗效的不良现象。本发明从金钱草中提取的主要成份有两种：黄酮甙与三萜皂角醇，黄酮甙为金钱草中的芳香族化合物（Desmodium        styracifolium-aromatic        compoud，以下简称Ds-a）;三萜皂角醇（Desmodium        styracifolium-Triterpenoid        sapon-in，以下简称Ds-t）。在金钱草的成份实验研究中，发现其主要成份有明显的利尿作用，尿中钙的排泄量减少，柠檬酸排泄量增加，血中转氨酶和肌酐无变化。主成份还能使由乙二醇、活性维生素D3造成的尿路草酸钙结石动物模型的尿石形成率明显减少，并能减轻乙二醇、活性维生素D3对肾功能的损害作用。即证明其主成份能减少含钙尿石形成的重要危险因子尿钙和尿中草酸的排泄量，增加含钙结石抑制因子柠檬酸的排泄量，出现对预防尿石形成的利尿作用，具有防止尿石形成，尤其是草酸钙结石形成的作用和保护肾功能的作用。

    本发明的具体提取方法：金钱草的全草用低级甲醇或乙醇还流抽出，减压浓缩除去抽出液的溶媒，所得的流浸膏用等量n-丁醇和水进行分配，取丁醇层的流浸膏用交联葡聚糖LH20（Sephadex）柱层色谱法分离，得到四大分离部份（以下简称Fr.1、Fr.2、Fr.3、Fr.4）。取Fr.2（即第二大部份）用氯仿-甲醇-水的溶媒系施行硅胶柱（silica gel）色谱法分离，即得到Ds-t的精制品。取Fr.3（第二大部份）用甲醇-水系溶媒施行ODS硅胶（Bondapak）柱色谱法分离，即能得到Ds-a的精制品。随后可以将它们加入各种液体或固体赋形剂制成片剂、乳剂、胶囊剂供临床防治尿石症使用。使用此类经过精制提纯的金钱草药用片剂等，方法既简便、药效浓度高、无付作用，还可解决目前国内外各种方法碎石而造成的结石残留和复发的严重问题。还可避免用生药金钱草所造成的有效成份不稳定现象。

    本发明实施例结合附图说明如下：

    附图为金钱草主成份提取法示意图：

    取金钱草的全草1公斤，在8升80℃甲醇中还流抽出8小时，抽出液过滤后减压浓缩（以上为示意图A）浓缩后得50克金钱草甲醇流浸膏，再将此流浸膏加入等量n-丁醇-水1升作分配（此节看为B），结果得到水层部浸膏14克（此节看为C），丁醇层浸膏36克，并将其用交联萄聚糖柱色谱法分离（此节看为D）成四大部份（即Fr、1-4）。取Fr.2的21.6克用硅胶柱色谱法，使用氯仿∶甲醇∶水＝9∶2∶0.1～8∶2∶0.2～7∶3∶0.5的比例展开溶媒系（此节看为E）、得到1.58克Ds-t。取Fr.3的9.73克用ODS硅胶柱色谱法，使用30%甲醇-水～40%甲醇-水的百分比展开溶媒系（此节看为G），可得到3.37克Ds-a。