本申请是1986年10月16日提交的、序列号为No.07/421，596的早期申请的部分继续。 本发明涉及用于诊断和系统免疫功能障碍有关的这种类型的神经认知症（neuro-cognitive disorder）的方法，这种类型的神经认知症和出现类似症状的原发性心理或神经异常的神经病不同。本发明还包括诊断与免疫紊乱有关的痴呆。本发明还描述了用双股的RNA对这些症状的治疗。
记忆力衰退、智商（IQ）下降、以及认知技能的减退这些中枢神经系统（CNS）的表现形式可能和末稍血液单核细胞（PBMC）中的2′-5′A途径代谢障碍有关。这些障碍可能以潜在地和在临床上检查不到的淋巴激活素的释放为征兆，这种释放反过来又贡献于已变得模糊不清的感觉中枢。并且，经常像检测不到的还原病毒感染和/或疱疹感染那样起作用。潜隐性病毒感染也对脑病变有贡献，贡献的方式即有直接的，又有间接的（通过触发不适当的和慢性的淋巴激活素的产生）。通过检查2′-5′A途径的成分并且通过用双股的RNS的干扰治疗就能以简捷的方式诊断出疾病的双重表现形式，所说的双股的RNS在生物学上中和了淋巴激活素毒性，同时还减少了内在的病毒负荷量。
我已发现，某些痴呆是在不消退的病毒感染后持续免疫活化的结果，这就造成了永久性的记忆力衰退。我还观察到了不适和压抑。各种淋巴激活素（诸如IL-2，IL-6）、INF、以及与人体抗御能力有关的干扰素的血清水平都升高了，并且这些分子（单独地或集中在一起地）对该症状似乎都有贡献。
痴呆（Alzheimer病等）的难以确定的病因是迄今难以发现治疗这种疾病的有效治疗方法的原因之一。因此，我开发了一种新的战略：首先确定痴呆病的一个异常的细胞表型，这可能对包括病毒感染在内的各种免疫紊乱产生一个明显的损伤控制，而不管该刺激器官的特殊性质如何;第二，确定该异常表型是否可能在某些细胞内的酶途径中被找到，这些途径使人体细胞（包括脑组织）处于免疫调节的抗病毒状态。这些途径是已知的，并且包括和2-5A相关的合成酶/RNaseL途径以及和双股的RNA相关的蛋白激酶。通过各种动物病毒，以及通过病毒感染的副产物，诸如，干扰素或双股的RNA就可以使这些酶途径活化或失活。这些途径经适当调节即可诱发细胞抵抗大量的病原体的能力，这是因为最终的生化产物能够干扰病原体的合成和稳定。这里我将这些酶途径称为“抗病毒”途径，但应该指出的是，这些途径还和免疫细胞的分化有关。特别是，这些途径可能参与了T细胞、B细胞、和单核细胞或它们的先质细胞的活化。
从前我就注意到在人的另外一种慢性病毒感染过程中的体内2-5A合成酶/RNaseL途径中的异常性（参考文献1）。例如，由人的免疫缺陷病毒（HIV）引起的获得性免疫缺陷综合症（爱滋病）总是伴随有异常高水平的隐性2-5A合成酶，生物活性的2-5A水平降低了，并且低到RNaseL途径的不可探测的水平（参考文献1）。这种表型和由于缺少2-5A的适当活化、并且随后缺少2-5A合成酶产物、2-5A而产生的相对不活跃的抗病毒途径相一致的。
在我的对痴呆病人的现在的研究中，在下面要讨论的某些病人中，疱疹病毒还用单细胞系的抗体鉴别，而其余病人用包含抗几种疱疹病毒的抗体的血清来监视。因此我将称某些痴呆病人为“通过培养的病毒阳性”，而不是HHV-6阳性。还从这些病人以及从具有类似的中枢神经系统（CNS）病因的其它病人分离出新的还原病毒。
我已发现并在这里公开，在任何和代谢障碍、神经缺陷或慢性大脑功能失常（CCD）有关的慢性痴呆的个体中都存在着2-5A合成酶/RNaseL途径的异常或活动过强。这种紊乱经常伴有其它的生化异常和大片的组织异常，如由成像揭示出来的大脑损伤以及认知能力的缺陷，例如智商（IQ）的下降、以及注意力和抽象能力的损伤。另外，在CCD病人中，固有的杀伤细胞的功能和NK细胞的表型通常是异常的。
这些病用双股的RNA疗法进行有效的治疗，这种疗法使2-5A合成酶/RNaseL途径正常化并且对该途径进行了有益的调节，因此使病人恢复了双股的RNA缺陷。尽管运动的忍耐性和氧气的消耗都增加了，但在细胞水平和功能水平上都有所改善，记忆力和IQ值都恢复到接近或达到先前的水平上。使用下面要说明的各种技术和方法来评估患有慢性大脑功能障碍的病人。
对严重慢性痴呆的研究
给15个患有严重慢性痴呆病人服用200-400mg的Ampligen，这是一种有微小副作用的失配的双股的RNA，一周两次，最多服用24周。达到30-50μg/ml Ampligen的血液水平。对于大多数病人，维持10μg/ml水平一小时或更多些时间。所有的15个病人在末梢血液单核细胞中呈现出异常的抗病毒2-5A合成酶/RNaseL途径的成分。在Ampligen治疗期间这些途径的成分返回到比较正常的数值上。例如，在治疗前，生物活性的2′-5′寡腺苷酸浓度是正常值（平均值＝242）的3-665倍，有13个病人经12周的治疗降低到正常值。在经受检查的14个病人中的13个人中，还获得了在治疗期间减少了可培养的病毒的证据，并且有11个病人用单核细胞抗体检测到HHV-6（人类疱疹病毒-6）和/或新的还原病毒。15个病人的行为状况（由改进的Karnofsky分数来判断）都显示出极其明显的改观，大多数病人在记忆力、智商和其它的心理试验方面都表现出持久的改善。没有观察到任何明显的临床毒性。虽然可以观察到轻微的类似流感的症状，但是失配的双股的RNA疗法完全可用，没有任何一个病人要求减少剂量。
对于大多数痴呆病人，异常的表现形式是：隐性的2-5A合成酶的水平减少以及生物活性的2-5A水平和活化的RNasel的水平的增高。这种表型（和HIV感染后的表型明显不同）给出了由2-5A合成酶的慢性过度刺激产生的抗病毒途径的过高活性的概念。在这里，我描述了在用Ampligen（一种原型双股RNA）治疗期间，具有某种2-5A合成酶/RNAaseL抗病毒途径异常的痴呆病人在临床方面和病毒学方面的改进。
病人 病人在治疗前的Karnofsky行为分数为60分或以下。这些病人表现出持久的（或复发的）很衰弱的痴呆，痴呆严重到至少有24个月他们的平均日常活动减少或损伤到发病前的50%以下，没有任何可能产生类似症状的其它临床条件。广泛的医学发展能够排除包括脑瘤、脉管异常、境遇性压抑、或其它原发性的心理疾病、以及非病毒源的感染疾病在内的其它可能的因素。所有病人都要给出痴呆的证据，而在Wechsler记忆力表上的得分比正常人低，并且比希望的总智商得分（Wechsler成人智力量表-修正的，WAIS-R）低，其中要依据病人的学术背景和/或过去在类似试验中的行为。此外，这些个体在WAIS-R试验中的一个个任务的得分比两个标准偏差范围还要大。典型的病人在1.4 Tesla MRI扫描中展示出脑的异常磁共振成象（MRI）扫描。
药物摄入 病人开始时接受200mg的Ampligen（HEM Research，Rockville，MD，USA）;在各个时期一周两次静脉内服用（见表1），在此之后将剂量增加到每周两次400mg。
2-5A途径测量和病毒培养 在中心实验室进行随意抽样的这些测量。进行如下所述的2-5A合成酶/RNAaseL抗病毒途径研究。2-5A合成酶是从PBMC提取物中用poly（I）·poly（C）琼脂糖亲合力色层分离法提纯出来的（参考文献2）。只有隐性的2-5A合成酶是用这种方法提纯出来的，因为由双股的RNA占据的酶不是键连的。然后使用通过薄层色层分离法测到的ATP→2-5A的转换百分比来定量计算通过亲合力提纯的隐性2-5A合成酶的活性。在PBMC提取物中的被活化的RNaseL是由它的劈开核糖体RNA（rRNA）使其成为特定的劈裂产物的能力确定的，而这种能力是由电泳法测出的（参考文献3）。通过密度计扫描法将这些试验结果进行定量计算，并且表示为被劈开的18S rRNA/该提取物的稀释剂的百分数。通过乙烯醇提取法自PBMC提取物中回收2-5A。然后，通过活化被提纯出来的隐性RNasel、从而使poly（U）〔32PpCp〕降级成酸性可溶产物的能力来估算生物活性的2-5A。
针对疱疹病毒，对病毒培养进行了概括地描述（参考文献4）。测量涉及到：制备病人的末稍血液单核细胞并把这些细胞培养30天，定期检查培养物是否呈现疱疹病毒感染的巨型细胞特征。通过免疫荧光法，使用来自病人的血清（其抗人体疱疹病毒-6（HHV-6）的抗体效价相当高），核实某些病人的巨型细胞中确实存在着病毒。还使用HHV-6的特殊的单核细胞抗体。培养后获得的巨型细胞数目和体内病毒负荷量有关。为了定量表示病毒负荷量，将＞10%的细胞为巨型细胞的培养物记为2+，将0%和10%之间的细胞为巨型细胞的培养物记为1+，将无巨型细胞的培养物记为0。还通过监测经Ampligen治疗后阴性培养物的次数来估算病毒负荷量的减少。
双股RNA血液水平 按如下所述确定Ampligen水平（参考文献5）。将肝素化的血液（100μl）和162μl的6M GUSCN/1M EDTA（PH值为8）混合，并且由3H标记的poly（C）探查物孵化。混杂后，用RNase消除不成对的探查物，并且通过过滤，沉淀和收集混杂的探查物。通过参照标准曲线将混杂的探查物数量转换成等价的Ampligen数量，该标准曲线是由加到混杂的血液内并按上述进行处理的已知数量的Ampligen组成。为了测量Ampligen自血液中的排除，在结束从用于注入的这个臂的相对的那个臂的注入后分多次抽血。
神经心理测试 每个病人完成一组认知的神经心理的测试，包括wais-R全标度智商试验，Halstead-Reitan神经心理试验，以及Wechsler记忆表的直接语言、延迟语言、直接视觉、和延迟视觉部分。这里所报导的Wechsler记忆分数是语言分×2再加上视觉分。为了避开可能存在的“训练效应”，在整个时间内引入另外一些形式的Wechsler记忆表。
脚踏传动式试验台训练试验 某些痴呆病人，虽然不是全部，但完全不能进行日常练习。CNS功能的经过治疗的改善经常和日常生活的比较正常的活动有关系，包括练习次数的增加在内。按照修订Bruce议定书进行脚踏传动式试验台训练试验，按照标准方程通过用O2和CO2电极进行的排出的气体交换来估算氧气适应能力。为了消除刺激这个因素，在厌氧阈测量O2消耗量。
第一个接受Ampligen的痴呆病人有慢性病，有进展性的虚弱，因此感觉到活下去的希望有限。特别是，尽管她从前是一个职业高尔夫球手，但大约5年来她不能照料她自己，在没有帮助的情况下走不了25呎，并且病情发作的次数越来越多。她不能读书，甚至不能看电视，这是由于缺少短期记忆力造成的。她表现出NK功能障碍、病毒培养阳性、MRI扫描异常、损伤明显的心理测试、训练耐力低（表1）。在开始治疗的8周内她显示出循环的病毒减少了。她的Karnofsky分数从治疗前的30改善成接受Ampligen24周后的80。在心理测试和训练耐力方面都有临床上的改善（表1和表3）。这个病人在连续18个月接受Ampligen后，有了持续的改善，正过着正常的生活，完全能够自理。
免疫调节的病毒学变化 包括病人00在内的所有15个病人在他们的末梢血液单核细胞内都呈现出一种被扰动的抗病毒途径。特别是，所有15个病人都改变了血液单核细胞中的生物活性的2-5A的水平。这由13个病人中改变了的RNaseL的活性来证实。12个病人在治疗开始时就改变了末梢血液细胞中的隐性2-5A合成酶的水平。总之，11个病例有一个治疗前的抗病毒途径表型，其特征是：（a）低水平的隐性2-5A合成酶，并且伴随有（b）升高了的生物活性的2-5A数量，以及（c）异常高的RNaseL活性。我称此为“第一轮廓表型”，这种表型和细胞外的淋巴激活素对该途径慢性刺激的表型相一致。两个病人（病人01和06）表现出升高了的隐性2-5A合成酶水平，并且伴随有升高了的生物活性2-5A数量以及正常的或升高了的RNaseL水平（“第2轮廓表型”）。隐性2-5A合成酶的水平增高据报导说是由于受到Epstein-Barr病毒（EBV）的感染，并且可能表现出病人01和06的相互感染。EBV对病人01和06的反复刺激受到血清学证据的支持。
在Ampligen治疗期间，2-5A途径返回到一个正常的表型。13个病人的生物活性的2-5A水平经12个星期跌至正常水平，对于其余两个病人，也有所下降，同时RNaseL活性也明显下降，仅为正常值的1-2倍（表2）。大多数病人的隐性2-5A合成酶水平经12个星期升高到正常值（表2），但过了这个时间却再次下降。许多病人在基线的病毒培养是阳性。在大多数病人的Ampligen治疗期间病毒的效价下降。另外，病人02、03、04、06和10在经28-40个星期的Ampligen治疗后的连续三次培养都是阴性。在治疗期间和低水平的隐性2-5A合成酶有关的抗病毒途径轮廓（第一轮廓）伴随着病毒负荷量的更加迅速的减少;但不管所研究的项目（表1）中的表型是什么样的，在24个星期治疗期间被测试的11个病人中的10个病人的病毒负荷量都减少了。双股RNA同时减少出现在受治疗者体内的不同病毒因子（还原病毒和DNA病毒）的水平的能力对响应的大小有所贡献。
行为状况和训练的耐力 参加本项研究的病人是明显无能的，其平均Karnofsky分数为47。经12周治疗后该分数提高到67，在24周时评估的11个病人的该项分数提高到79（表3）。
某些病人在Ampligen治疗前以及在此治疗期间参与了脚踏传动式试验台试验。确定可能进行的脚踏传动式试验台试验的时间长度和训练检验期间的最大O2消耗量。这组病人作为一个整体看，24周后的脚踏传动式试验台试验的持续时间增加了20%，并且在训练期间的最大O2消耗量增加了一倍。15个病人中的12个病人的O2消耗量增加50%以上（表3）。一个病人（01）24周仅提高了10%，一个病人（09）（仅可得到8周的数据）下降了15%。由于O2消耗测量值一般是在厌氧阈处取得的，因此不可能将这些改善像“举起”境遇性的抑郁一样主要归因于增加的刺激。
神经心理学试验 15个病人中的12个病人进入这项研究，他们的短期记忆力被损伤，这一点由Wechsler记忆表检验核实。在试验期间这些病人的Wechsler得分提高了63%。最大的收益是在和视觉任务相反的语言任务上，可能是因为这组病人是从较低语言分数开始的。已达24周的所有病人都改善到Wechsler表的视觉部分的正常限制值以内。由在Wechsler记忆表的延迟任务方面的改进可提出在干扰记忆力方面的改进，干扰记忆力是一种在早期痴呆中越来越引起注意的缺陷。
还注意到在智商（IQ）方面的收益。全标度IQ从106增加到119，增加了12%。行为IQ增加了19%，语言IQ增加了10%。如果考虑治疗了24周的病人，在第三个8周期间的全标度IQ的增加（8%）似乎比第一和第二个8周期间的全标度IQ的增加（分别是2%和0%）更加明显，因此提出，IQ的增加可能比免疫学、行为、或短期记忆力的改善更加缓慢。
Ampligen血液水平和不利的作用 通过分子混杂来确定Ampligen血液水平。如果注入400mg后立即测量血液水平，则其平均值为43μg/ml，范围为31-75μg/ml（表2）。如果注入200μg的剂量，则得到的血液水平约为一半。这些病人以及其它一些病人的表观排除率都不相同，但是在大多数病人中，20μg/ml的血液水平一般可至少维持一个小时。
在该项试验期间没有看到对任何病人的明显临床副作用。一个病人在多次静脉切开后患上了缺铁性贫血，需要补充铁。大多数病人报告说增加了类似流感的症状，包括肌肉疼痛和头痛。在本项试验的整个过程中不存在改变凝固、血化学、白血细胞计数、肝和肾功能的迹象或其它异常的迹象。
病人显示出临床好转、行为能力提高、大脑功能改善的征兆。最早的改善和2-5A合成酶抗病毒途径和NKH1+细胞数的正常化、以及末梢血液细胞中的表观病毒负荷量的减少有关。其中的仅接受8周Ampligen的一个病人（05），他的病毒效价在紧接下去的试验期间不下降。这个病人的抗病毒途径异常的改进延缓了一段时间。病人（01）在头24周显示出Karnofsky分数的改善，但是其它的项目却恶化变差。这个病人的2-5A合成酶异常的特征和14个病人中的其余13个人不同。病人（01）在24周后得到了改善。在32周时，他的IQ是138，在脚踏传动式试验台试验期间他的O2摄入量是1.56l/min。两个自愿中断Ampligen的病人现在已经恶化，他的Karnofsky分数跌落并且练习耐力和神经识别能力都下降了。
这里所研究的病人的生物活性2-5A水平发生了明显的变化，并且他们的隐性2-5A合成酶和活化的RNaseL都有改变，从而使它们的细胞内的酶途径的代谢发生变化。我已经观察到了这样一种“过度活跃的”表型，这种表型是由病毒感染的副产物引起的，即由长期过量产生的刺激胞质分裂引起的。由于在这些病人中只有很小部分的血液单核细胞可能受到病毒的直接感染，因此通过病毒感染本身的途径的过度活化是不可能的。无论如何，2-5A合成酶/RNaseL途径的被改变了的代谢是识别和原发性神经障碍或脑血管障碍无关的慢性痴呆病人的一个很有用的标志。
在Ampligen治疗后，生物活性2-5A水平回到正常值，这和活化的RNaseL的水平的情况是相同的。这一结果是较正常的胞质分裂产生、或血液细胞的胞质分裂利用的次要恢复。还有，2-5A合成酶/RNaseL途径的活性由其它的双股RNA活化的蛋白质激酶途径向下调节。
临床症状的改善伴随着病毒学的改进。在进行分析的最早时期就注意到了在Karnofsky分数、Wechsler记忆力试验、行为和IQ分数方面的改善，这些改善一直继续到整个研究期间。在Karnofsky分数方面的比较巨大的收益似乎是在剂量增大到400mg的Ampligen后取得的。开始时平均Karnofsky分数为47，说明这些病人不能工作，在家里进行日常活动需要大力帮助。在研究期间，Karnofsky分数为80，处于平直稳定状态，说明病人经过努力但勿需帮助就能够在家里和工作单位开展正常的活动。Wechsler记忆力试验较早的时间（16周）就可以得到最大的收益，而IQ试验分数趋向于较晚的改善。
在Ampligen治疗期间观察到的在几个方面的改善一般来说在24周内是很明显的。生物活性2-5A和活化的RNaseL的减少在P＜0.0001水平处是明显的。对于减轻和疲劳有关的痴呆的参数的改善是非常明显的。在16周时在P＜0.01水平处以及在24周在P＜0.001水平处，对于脚踏传动式试验台试验的行为改善是明显的。在16周时在P＜0.01水平处以及在24周时在P＜0.0001水平处，Karnofsky分数的改善是明显的。在16周和24周时（P＜0.02），对于Wechsler记忆力测试的改善是明显的。全标度IQ的增加也是明显的。
大多数病人的生活方式显示出同样巨大的改善，如从第一个病例看到的那样。许多病人不能照料他们自己，并且事实上在治疗前不能记忆，没有帮助不能走路。经过24周，许多仍继续治疗的病人正在过着比较正常的生活。在病人接受Ampligen的同时就发生了改善。再有，两个中断了至少两个月的Ampligen的病人在神经认知方面都发生了恶化。
表1 病人00
试验 治疗前 治疗后c
脚踏传动式试验台
持续时间 1.5分钟 9分钟
O2消耗量 1.15单位 2.36单位
Karnofskya30 80
Wechsler记忆力b0.5 2.75
全标度 IQ 88 134
Halstead-Reitanb
手轻敲 0 3
Trails A 0 3
Trails B 0 3
Wais-R
信息 11 16
数字跨度 8 16
词汇 12 16
算术 5 14
相似性 9 12
方块设计 5 10
数字符号 3 9
a＝从临床表格重新构成的
b＝ 0＝严重 1＝中等损伤 2＝轻微损伤
3＝在正常范围内
c＝治疗10个月
对于慢性的大脑功能障碍的研究
我还研究了一组患器官性的脑综合症的病人，其特征是大脑功能紊乱，某些病人超过15个月。他们在类似感染的发作后得上了一种新型的后感染免疫功能障碍，其特征是进展性的精神恶化，这种恶化和记忆力下降、偶然的病情发作、高级精神能力（所谓认知功能）丧失有关。对诉说有认知问题的病人进行的磁共振成象（MRI）显示出有各种各样的异常，即有大的信号强度，其中包括有和水肿或脱髓鞘一样的大片不规则区域。末梢血液细胞在一个称之为双股RNA连接的2-5A/RNaseL途径的新的抗病毒途径中显示出酶缺陷。用外部来源的双股RNA进行治疗，使认知功能、行为、MRI、2-5A途径缺陷的损失都得以改善。
慢性大脑功能障碍（CCD）对实际上任何年令组都可能发生，并且经常和被认为是病毒性质的后感染疾病的发作有关连。慢性大脑功能障碍（CCD）可能在单核细胞增多症（参考文献6）、布鲁氏菌毒（参考文献7）、或6型疱疹感染、以及其它因素之后发生。
认知功能的减退 和上述的研究一样，可以利用大量的神经心理仪器，我使用这些仪器来研究和确定一组患慢性大脑功能障碍的病人。这里使用的一组典型的试验包括：Wechsler成人智力表（修订版）（WAIS-A）、立即的和延缓的（WMS）、Minnesota多种个性表（MMPI）、以及类似的一些试验。患CCD的病人的试验分数一般在平均值之下2个标准偏差或低得更多些;某些病人的所有分数的平均分数在平均值下一个标准偏差，或更多些;一个偶然的病人的多个分数至少都在平均值下4个标准偏差。我通常还观察在“项目变更时”他们的受到损伤的“抽象能力”和行为。记忆力损伤相对于由注意力和抽象能力产生的困难来说似乎是次要的。有几个病人不能完成摆平他们的检查书籍、把钥匙放到门前并按正确位形放入锁内这样一些简单的任务。这些可测量到的并且是相一致的认知缺陷不可能是由诈病或纯心理原因引起的，因为他们通常是每况愈下的，最终变得卧床不起和濒临死亡。我还发现一个和这种病有关的新的生化缺陷。
脑部的磁共振成象 得到MRI扫描的大部分病人都诉说有认知问题。本项研究的MRI扫描一般是使用通用电气公司制造的1.5T超导Signa磁共振成象仪进行的。
77%的被检查的病人有MRI扫描异常：高信号强度的大片加强区域，有时出现高信号强度的较大不规则区域，和局部水肿和/或脱髓鞘。最经常的是影响皮质下的白色物质，但在深部白色物质中也看到了损伤。
在解剖区和临床表现之间是有关联的：例如，一个有运动失调的病人具有涉及小脑的损伤，九个有视觉症状的病人具有涉及枕骨皮质的损伤，一个有轻瘫的病人具有涉及对侧的内囊的损伤。在这几个重复进行MRI扫描的病例中，这些损伤一直持续到我用双股RNA治疗干预时为止。
NK（Natual Killer-天然杀伤细胞）细胞表型和功能：一种免疫学上的紊乱 NK细胞表型和功能通常是一种不寻常的表型：通常起主要作用的NKH1+T3子群（一种由单核细胞抗体决定的淋巴细胞子型）可能会被削弱，但在包括暂时性的境遇性抑郁的病人在内的控制人体内却是正常的，上述的病人通过兴奋药物、改变环境、训练等通常可以得到改善。还有，病人的NK细胞功能（相对于各种靶细胞线的细胞溶解活性）一般要减少，但在控制人体中并不减少。这个有缺陷的细胞溶解活性在用内白细胞杀菌素-2刺激后并且在靶细胞线是（Epstein-Barr病毒）EBV感染的细胞线（CAZ388）时尤为突出。现在我对这样一些病人已经进行了第一个系列的研究，并且观察到，NK细胞的表型和功能异常在用外源的双股RNA治疗后随着病人的被改善的临床过程而变化。
抗病毒防御和病毒学研究 我还观察到，这些病人的大多数受到了疱疹-6的感染，这是一种比较新的最近才被描述的疱疹病毒（如上述的参考文献4），以前没有将其和精神能力的减退连系起来。在癌症病人的早期研究中发现了这种病毒。对这种病毒有不同的叫法：HBLV（人类B细胞淋巴细胞病毒）、或HHV-6（人类疱疹病毒-6）。这种病毒的主要特点是它的相对于大约162个病毒壳粒和一个脂类膜的二十面体对称性。被感染的细胞发展成大的折射细胞，某些病人可能有高达20-30%或更多些的循环淋巴细胞（某种类型的骨髓或胸腺的淋巴细胞）被感染。经过几个月的双股RNA治疗后，被感染的细胞的百分数大幅度地跌落，并且这个百分数和认知能力的临床改善有关连。在这些病人中的许多病人体内我还发现了EB（Epstein-Barr）病毒以及一种新型的类似于（但一般而言不同于）HIV的还原病毒，它是一种引起获得性免疫缺陷或爱滋病的还原病毒。
从我研究的几个病人取得的样品指示出存在传播这种疾病的一种方式的“伪型”的潜在可能性。例如我可以说6型疱疹病毒的外皮包围着用于还原病毒的遗传物质。这可能会产生一种新的感染形式：感染因子通过像疱疹病毒这样的群体传染性地传播，但传播的遗传信息实际上是还原病毒的遗传信息。我使用了大量的染色体探查物（参考文献8），再加上血清学和形态学上的考虑（参考文献9），提出了这个最终导致精神恶化和发病的新的生物学传播机制。
我还研究了10个患有CCD病人的末梢血液淋巴细胞中的2-5A/RNaseL途径，他们患有MRI损伤以及和智商降低有关的神经缺陷。在这项研究的第一个阶段，我观看了病人的抗病毒防御，他们的智商（IQ）等于或小于105，而他们以前的职业强烈地暗示他们在发病前必然要有较高的IQ;对于许多病人，我能够提出有力的证据证明他们在现在的脑病前的许多年月中是有较高的IQ的。
10个病人中有8个病人有一个过度活跃的或异常的RNaseL，它在一个典型的聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）试验中引起核糖体RNA的非自然的（不期望的）分裂。还有，这8个病人在治疗前的2-5A合成酶水平在正常值之下。这些病人对改善IQ、MRI、等的双股RNA治疗的反应最灵敏，而两个没有生化缺陷的病人对这种治疗的反应一般。
表4 患脑功能障碍的病人（有2-5A/RNaseL途径损伤）的协调反应
A.病人的IQ降低。在双股RNA治疗后（每2或3天200-700mg），在6-9个月内IQ升高了50分。
B、MRI平稳或改善。
C.在9-18个月内，许多病例的WAIS-R、WMS、MMPI都改善了。
D.NK（自然杀伤细胞）细胞、免疫状态平稳或改进。
E.病毒“负荷量”减少，由包含疱疹-6病毒的感染粒子的末梢血液细胞数目的减少来证实。
F.行为的增强，它和改善了的训练耐力（延长保持在脚踏传动式试验台上的时间的能力）以及改善了的氧气消耗量有关。
G.2-5A/RNaseL途径缺陷的改进通常是一个主要的标志，它比临床响应早4-12周。
常规的诊断自取病人的血样开始，使用Carter等人在“The Lancet”中所述的方法分析末梢血液细胞是否是有酶缺陷的2-5′A（参考文献1）。将一旦注意到的异常和其它健康个体的试验结果进行比较，并且采用外部服用双股RNA，最好是失配的双股RNA，对这个异常进行校正，从而改善了病人的临床状况并且恢复其认知能力。在治疗期间和治疗结束时，接下去要由病人判断她/他的细胞水平的改善，这通常比临床改善要早几个星期，从而即可确定维持正常的2-5′A合成酶/RNaseL途径、恢复/保持病人的认知技能所需要的双股RNA数量（如果需要的话）。
诊断方法
按如下所述估算正常人和患有慢性大脑功能障碍病人的2′-5′A分子的体内浓度：分析病人血样品的乙醇可溶部分，以便在用poly U-｛32P｝-PCP进行的2′-5′A核心-纤维素测定中（亲合力色层分离法）得到这些样品的2′-5′A含量。在这种测定中，使用2′-5′A激活的RNaseL水解poly（U）的能力来确定功能性的2′-5′A的浓度。
通过测试15个最近无任何病毒感染史的正常人（由不发烧、无全身症状、无疹等证明）来确定参考数值。使用由可靠的2′-5′A分子获得的校正曲线来确定它们的淋巴细胞2′-5′A水平。
双股RNA可以是聚肌苷酸盐和聚胞（嘧啶核）苷酸盐的一种络合物，其中含一定比例的尿嘧啶基或呱基，例如从1/5到1/30的这样的基（polyI·poly（C4-29X＞U或G））。
双股RNA的一般结构式为rIn·r（C11-14，U）n或rIn·r（C12，U）n。下面讨论双股RNA的其它适宜的例子。
所谓“失配的双股RNA”指的是，其中的相对部分各股之间的氢的结合（基的堆积）是比较完整的，即这种结合在每29个接连的基对残基中的中断平均来说小于一个基对。因此应这样理解“失配的双股RNA”这个术语。
最适合于本发明使用的失配的双股RNA是基于从poly（Cn，U）和poly（Cn，G）中选择出来的共聚核苷酸，其中的n是一个数值为4-29的整数，并且这种RNA是聚核糖肌苷酸和聚核糖胞苷酸的络合物的失配类似物，它是通过修改rIn·rCn以便沿聚核糖胞苷酸盐（rCn）股插入不配对基（尿嘧啶或胍）而形成的。另外，双股RNA还可以通过修改聚核糖肌苷酸（rIn）的核糖基主链，例如通过包括2′-O-甲基的核糖基残基，从poly（I）·poly（C）双股RNA导出。失配的络合物可以和RNA稳定的聚合物（如赖氨酸和纤维素）络合。这些失配的rIn·rCn类似物中的某一些最好具有一般结构式rIn·（C11-14，U）n或rInl·（C29，G）n，在美国专利4，130，641和4，024，222中Carter和Ts′O介绍了这些失配的类似物，在这里参考引用了这些专利公开的内容。这里描述的双股RNA一般来说适合于按本发明使用。
用于本发明的失配的双股RNA的其它例子包括：
poly（I）·poly（C4，U）
poly（I）·poly（C7，U）
poly（I）·poly（C13，U）
poly（I）·poly（C22，U）
poly（I）·poly（C20，G）
poly（I）·poly（C29，G）和
poly（I）·poly（Cp23，G＞P）
另一类适合于本发明实践的双股RNA是具有确定结构的短的双股RNA，例如结构式为
5′lock-（I）n-lock3′
3′lock-（C）m-lock5′
的寡核苷酸，其中的每个m和n都大于5并小于100，I是肌苷磷酸盐，C是胞（嘧啶核）苷磷酸盐，其中在一个股上的lock（锁）补加到其相对股的lock（锁）上;另一个例子是结构为
5′lock-〔（I）xA〕j-lock3′
3′lock-〔（C）yU〕k-lock3′
的寡核苷酸，其中的每个x和y都大于5并小于25，每个j和k至少为1并小于10，I和C和如上所述相同，A是一种不是I的核苷酸，U是一种其基与A配对的核苷酸。
另外，短的寡核苷酸可以具有如下的结构：
5′（I）n-hinge-（C）m3′
其中的n、m、I和C同上。
这些寡核苷酸在相对股内没有补加核苷酸的这一股内可以有替代物。最好通过补加的杂聚物的内部定位来稳定这些寡核苷酸;锁或链、或两者、最好包含补加的杂聚物区域。这些寡核苷酸最好有单股的拖尾。在序列号为07/181，385的美国专利申请（1988年4月14日由Gillespie和Crater申请）和对应的PCT/US89/02172中比较详细地描述了这些寡核苷酸，这里参考引用了其公开的内容。
此外，通过高压液体色层分离法（HPLC）可以定量确定2′-5′A浓度和分子大小。还有，可以使用核糖体RNA分裂测定法来估计由病人在体内合成的2′-5′A的生物功能性（活性），或者用来确定病人样品中的活化的RNaseL的水平。末梢单核血液细胞是用于分析的最好细胞。
按照要求，例如一周一次，坚持让患有慢性大脑功能障碍的病人静脉注入200至700mg的rI·r（C11-14，U），用这种方法来治疗这种病人，2′-5′A酶水平增高，随之得到了临床的改善。由测到的2′-5′A合成酶水平、病人的临床改善情况、特别是认知功能回升的情况来指导服用的双股RNA数量和服用的次数。服用的双股RNA数量水平为每毫升病人的系统血液循环从0.01至1000微克双股RNA，这个水平是在远离注入点处的一点、在服用后立即测量得到的。