一种免疫增强剂白细胞提取物的制备方法.pdf

一种免疫增强剂血液制品——白细胞提取物的制备方法
    本发明属于生物化学领域核苷酸类混合物即血液制品的制备方法。

    众所周知，白细胞在血流中是人体对付入侵微生物的第一道防线，但其免疫原性复杂，在输血上不但不发挥应有的作用，而且有害。目前在输血科学上强调输血前必须把它从血液中分离出去，但它毕竟具有杀灭微生物或增强人体免疫力的特性。人们可利用此特性，将它制备成对人类有疗效的制品。

    曾有的发明者，发明一种增强免疫的血液制品，它也是以白细胞为原料制备的制品，属于转移因子。必须用分离出的新鲜的而且是活的白细胞为原料，同时还要从白细胞当中除去混杂的红细胞，经破碎通过透析或微孔过滤获得，所获得的液体属于转移因子的成份。一般认定为核苷多肽成份较复杂。其免疫功能和临床疗效长期得不到肯定。

    本发明的目的在于克服已有增强免疫的血液制品必须用分离出的新鲜的而且是活地白细胞为原料，同时还要除去混杂的红细胞，而制成品成份复杂，免疫功能得不到肯定等缺点，发明一种以人或动物血液白膜层为原料，以核苷酸类为主要成份的免疫增强剂(血液制品)的制备方法。

    本发明主要靠如下制备方法实现。

    本发明的免疫增强剂是一种血液制品，其制备方法是以人或动物血液白膜层或从它分离出的白细胞及其亚类为原料，加入HClO4搅拌，经离心取上清液；加入KOH搅拌，经离心取上清液；加入活性炭搅拌、吸附、抽泸取出活性炭；加入中性双蒸水搅拌、洗涤，抽泸取出活性炭；加入碱性溶液搅拌、洗脱、抽泸取泸液；加入NaCl得到制品。

    在上述的制备方法中，所用HClO4为40％的HClO4，加入比例为一份HClO4五份白膜层，即1∶5。所用KOH的目的是中和，使制备液达到中性。活性炭的加入量为每100毫升制备液加入2-3g，即2-3g％。所用中性双蒸水的PH值为6-8。所用碱性溶液PH=11-13。在加入NaCl得到制品前先用HCl中和至近中性，使制品等渗度=1.0。

    本发明的免疫增强剂(血液制品)对人无毒、无副作用，采用淋巴结附近皮下注射法使用，经临床使用结果显示，对类风湿关节炎和某些病毒病如带状疮疹效果显著。

    本发明的免疫增强剂(血液制品)，经HPLC分析以AMP为内标测定，其主要成份为核苷酸类，有两主峰，第一主峰占70％以上，核苷酸含量为300-500mg/L。

    本发明的制备方法如说明书附图所示。

    如制备方法附图所示，本发明的免疫增强剂以人或动物血液白膜层包括各种白细胞及其亚类为原料，不必纯化白细胞，新鲜的、新鲜冰冻保存的白膜层均可使用，这样便于大量收集大量生产。选用HClO4为有效物质提取液，可消除血液制品容易传播病毒和细菌的危险。用40％HClO4，加入制备罐中，加入比例为1∶5即一份HCLO4五份白膜层，搅拌均匀，经1500-2000转/分的离心条件，取制备罐中上部清液，加入KOH中和，搅拌均匀，经1500-2000转/分离心作用，还取制备罐中上部清液；加入2-3g％吸附剂活性炭，即每100毫升溶液中加入2-3克吸附剂活性炭，并兼有吸附去热源的特性，用于提高制品的合格率，经搅拌均匀后，抽泸得活性炭；加入近中性的双蒸水溶液，PH值为6.5-7.5，搅拌、洗涤，抽泸得活性炭；此时的泸液应无Cl-，无蛋白质，无核苷酸类；加入偏碱性溶液，PH=11-13，搅拌、洗脱活性炭，抽泸得泸液，用HCL中和，调整PH到中性并测定Cl-含量，加入NaCl，到生理盐浓度，以AMP为内标测定并调整或稀释核苷酸类含量到300-500mg/L的水平，得到本发明的制品。

    整个制备过程均在常温下进行用高压液相分析该制品的核苷酸类含量出现两主峰，第一主峰应占70％以上。