草药组合物及由其制备的抵抗II型糖尿病的药物 【发明领域】
本发明涉及药物领域。更准确地，它涉及的是抵抗II型糖尿病的药物，再准确地，它涉及一种基于草药组合物作为活性成份的抵抗II型糖尿病的药物。按照专利的国际分类，本发明的分类标识为A 61 K 35/78-含有它们与不明组合物反应的物质或产品的医药制剂，其中来源于草药的物质是这里要讨论的。
技术问题
技术问题在于寻找一种具有以下特点的治疗II型糖尿病的药物，1)该药物适合于口服应用；2)可将很高值的血糖浓度降至正常值或接近正常值；3)即使长期大日剂量服用，也不会出现明显的有害副作用；4)其有效性不以严格饮食限制为条件，所述技术问题的解决办法公开于本专利申请中。
现有技术
胰岛素是胰腺产生的一种激素，可为人体细胞提供葡萄糖使人获得能量。如果患有I型糖尿病，胰腺将很少或根本不产生胰岛素，患者必须依靠每日注射胰岛素来维持生命。如果患有II型糖尿病，患者地胰腺可以产生胰岛素，但是胰岛素的数量不足或因细胞耐受性而效力降低，或者这两种情况同时存在。无论属于哪种情况，患者都会出现各种各样的异常，但是这些异常可以引起的主要缺陷是：1)进入各种“外周”组织的葡萄糖量降低；以及2)从肝脏向血流中释放的葡萄糖量增加(肝脏生糖作用增强)。因此，细胞外的葡萄糖过剩，而细胞内的葡萄糖缺乏，这种情况被称为“富足中的贫乏”。
有很多口服降糖药物可用于治疗II型糖尿病，大多来自磺酰脲类和双胍类，磺酰脲类包括如氯磺丙脲(商品名：Meldijan等)，氨磺丁脲(约有40个商品名)，格列本脲(商品名：优降糖，GlibenklamidGenericon等)等等，双胍组药物包括如苯乙双胍(商品名：Phenformin，DB-Comb等)，二甲双胍(商品名：Gluchopage等)等等。
所述几组药物的主要缺点在于：有害副作用多，禁忌症多(如妊娠及哺乳期禁用)，常常无法将非常高值的血糖浓度降至正常值或接近正常值，以及需要严格控制饮食的限制才会使药物有效。
发明概述
本发明人研究了本专利申请中所提出技术问题的解决办法，其出发点是：II型糖尿病属于一种代谢紊乱性疾病，实际上其正处于讨论之中，要想对II型糖尿病进行成功地治疗，使用一种仅具有较强降糖作用的药物是不够的，还应该使用有助于全面帮助调节新陈代谢紊乱的药物。另外，还要考虑心理对身体的巨大影响作用(例如，精神压力会增加胰腺β细胞的负荷)，因此作为一个条件，发明者要求所需药物应含有至少一种对心理有安慰作用的成份。
为了确定草药组合物中哪些成份最适合用作获得茶剂和草药酊剂形式的口服药物的起始物质，本发明人经过多次试验后确定由下列干燥成分制成的草药组合物具有较好的效果：矢车菊整株(Centaurii herba)，蒲公英根(Teraxaci radix)，刺柏果实(Juniperi communis fructus)，荨麻整株(Urticae herba)，荨麻根(Urticae radix)，菊苣根(Cichoriiradix)，黑桑树叶(Morus nigra folium)，蓍草花(Achilleaemillefolii flos)，越桔叶(Vaccinii myrtilli folium)，豆荚(Phaseoli fructus sine semeni)，缬草根(Valerianae officinalisradix)。
尽管在相应的领域中都描述过各种植物的应用，但是本发明中的协同作用以前未公开过。
对志愿者和啮齿动物进行的试验证明，从各百分份额示于表1所示范围之内的草药组合物获得的茶剂、草药酊剂和片剂形式的药物，在治疗中将获得阳性结果。矢车菊整株(Centaurii herba) 10-15 ％(按重量计)蒲公英根(Teraxaci radix) 6-12 ％(按重量计)刺柏果实(Juniperi communis fructus) 5-8 ％(按重量计)荨麻整株(Urticae herba) 5-10 ％(按重量计)荨麻根(Urticae radix) 5-10 ％(按重量计)菊苣根(Cichorii radix) 12-20 ％(按重量计)黑桑叶(Morus nigra folium) 5-10 ％(按重量计)蓍草花(Achilleae millefolii flos) 2-5 ％(按重量计)越桔叶(Vaccinii myrtilli folium) 4-10 ％(按重量计)豆荚(Phaseoli fructus sine semeni) 10-20 ％(按重量计)缬草根(Valerianae officinalis radix) 5-10 ％(按重量计)
表1
然而，当给予由具有如表2所示的百分份额的草药组合物制成的茶剂、草药酊剂、丸剂形式的药物时，在II型糖尿病的治疗中可获得最佳效果。矢车菊整株(Centaurii herba) 12.3 ％(按重量计)蒲公英根(Teraxaci radix) 9.7 ％(按重量计)刺柏果实(Juniperi communis fructus) 6.2 ％(按重量计)荨麻整株(Urticae herba) 7.4 ％(按重量计)荨麻根(Urticae radix) 7.0 ％(按重量计)菊苣根(Cichorii radix) 17.7 ％(按重量计)黑桑叶(Morus nigra folium) 7.4 ％(按重量计)蓍草花(Achilleae millefolii flos) 3.5 ％(按重量计)越桔叶(Vaccinii myrtilli folium) 6.6 ％(按重量计)豆荚(Phaseoli fructus sine semeni) 14.4 ％(按重量计)缬草根(Valerianae officinalis radix) 7.8 ％(按重量计)
表2
下面，根据已知文献中的描述，对上述所列各种成份的含量和作用作一简单介绍。
1.Centaurii herba
Centarium umbellatum，Gentianaceae-矢车菊
分布：欧洲，北美、北非和亚洲西部。从保加利亚，匈牙利，克罗地亚，波黑和马其顿进口。
植物的入药部分：地上部分。
开花季节：六-九月。
采集时间和方式：开花时采集，风干。
活性物质：少量苦味物质(矢车菊苦碱，獐牙菜苦甙，獐牙菜糖苷和龙胆苦甙)。此药材含高达0.4％的类黄酮，甲氧基化呫吨酮衍生物：甲基龙胆酮酚，酚羧酸，三萜类，甾醇类。周围部分和根部存在2-羟基-和2，5-二羟基对苯二酸。
适应症：由于苦味物质，可用来促进食欲及促进胃液分泌(对慢性消化不良和无唇患者尤为适用)。
在民间医学中它还被用作强壮剂和补剂。
2.Teraxaci radix
Taraxacum officinale，As teraceae-蒲公英
分布：一种遍布北半球的野生植物，种类繁多；野生和经过培植的蒲公英都有采集，主要在东欧国家。
植物的入药部分：地上部分和根。
开花季节：三-五月。
采集时间和方式：四五月份采集。风干或40℃下人工烘干。
活性物质：名为蒲公英素的苦味物质：四氢日登内酯B和蒲公英交酯β-D-吡喃葡糖苷，以及一些类似的新大根香叶内酯(蒲公英β-D-吡喃葡糖苷和β-D-吡喃葡糖苷的11，13-二氢蒲公英酸，三萜类(蒲公英甾醇，α-蒲公英甾醇，它们的醋酸盐和16-羟基-衍生物arnidol和款冬二醇，甾醇类(谷甾醇，豆甾醇)，类胡萝卜素(叶黄素)，黄酮化物(芹菜配基)，碳水化合物(在根部，含有残渣的约1％)。春季此药材含有18％的糖份(果糖)以及2％的旋复花粉，到了秋季旋复花粉含量可高达40％。
适应症：弱利胆剂，利尿剂，食欲促进剂(苦味物质)，用作肝脏失调、胆囊疾病以及消化功能紊乱(尤其是脂肪消化不良)的治疗辅助剂。
在民间医学中，它被当作轻度泻药用于“血液净化”，还可用于治疗关节炎和风湿类疾病、皮疹和其它皮肤疾病。除了制成茶剂以外，挤压它的新鲜植株还可以制成汁液使用。春季可用它制作沙拉，秋季可用根部作为咖啡的替代品(因为含有大量的胰岛素)。
最近，经大鼠试验证实该流质酊剂具有利尿和促尿盐排泄作用。
这种作用与速尿类的作用相似，但强于其它蔬菜类利尿剂(Equisetiherba，Juniperi fructus)，而且没有毒副作用。
3.Juniperi fructus
Juniperi communis L，Cupresaceae-剌柏
分布：一种生长在欧洲，北美和亚洲北部的野生植物。从意大利、克罗地亚、波黑、马其顿和阿尔巴尼亚进口。
植物的入药部分：浆果及从浆果获得的醚油。
开花季节：四、五月。
采集时间和方式：十月，只采集熟浆果，风干。
活性成份：0.5-2.0％的醚油，含有70多种可分离成份：主要成份是单萜类：α-和β-蒎烯(16.5-80％)，桧萜(0.2-50％)，苧烯(1-12％)，萜品烯-4-醇，冰片，香叶醇，α-萜品醇。另有痕量倍半萜类，酚类和醚类。
适应症：利尿剂和尿抗菌剂。作为利尿剂，其对肾脏有刺激作用(有时还会出现毒性)，所以没有被收入药典。上述的副作用主要由萜类(蒎烯)引起。
在民间医学中将其作为健胃剂、驱风剂和芳香剂用于治疗消化不良性紊乱(而且这是药典中唯-述及的适应症)。
禁忌症：孕妇以及炎性肾脏病变。
4.Urticae herba
5.Urticae radix Urtica dioica L，Urticaceae-荨麻
分布：一种生长于世界各地的野生植物；主要分布于中欧和东欧。
入药部分：地上部分和根部。
开花季节：五-九月。
采集时间和方式：五至八月份采集叶子，风干。
活性成份：类黄酮类物(五羟黄酮的苷类，花中的鼠李素(rhametin))，叶绿素A和B，类胡萝卜素(包括β-胡萝卜素和叶黄素)，维生素类(B族、C族和维生素K1)，三萜类和甾醇类(包括β-甾醇)，矿物盐类(硝酸盐，钾盐)和酸类：甲酸，乙酸，柠檬酸等。
适应症：利尿剂。经过两周时间的治疗可以增加排尿量并降低体重。
在民间医学中，制成茶剂或(挤压新鲜植物获得的)汁液的荨麻绿色部分有广泛的用途：内服可作为利尿剂，治疗风湿病和关节炎，还可以作为“抗糖尿病”茶剂中的一种成份，用于伤口的快速愈合。外用可治疗皮脂溢性皮炎和脱发。
6.Cichorii herba
Cichiorium intybus L，Cichoriaceae-菊苣
分布：作为土生种类的植物，只分布于欧洲、北美和亚洲部分地区。本世纪传遍几乎所有大陆。
入药部分：地上部分和根部。
开花季节：六-九月。
采集时间和方式：初夏采集植物，风干，晚秋采集根部，彻底洗净，切段，于通风干燥处晾干。
活性成份：根部含有旋复花粉，游离果糖，山莴苣苦素苷(glycosideintubin)，单宁。主茎和花含有菊苣苷(glycoside chicorin)。
适应症：作为利胆剂和利尿剂可用于改善食欲。
7.Mori folium
Morus nigra L，Moraceae-黑桑
分布：欧洲东南部和亚洲。
植物的入药部分：果实和叶子。
采集时间和方式：嫩叶，四-五月。
活性成份：碳酸钙，天冬氨酸，腺嘌呤，葡萄糖和胨。
8.Millefoli herba
Achillea millefolium L，Asteraceae--蓍草
分布：欧洲、北美和亚洲北部。东欧和欧洲东南部国家为主要种植者。
植物的入药部分：开花植株(去根)。
开花季节：六-十月。
采集时间和方式：开花时采集开花植株，成捆干燥。除去增厚部分。
活性成份：0.2-1％的醚油，其中可能(但并不必须)含有kamasulen(取决于染色体的数量—只有四倍体植物含有kamasulen，而多数其它核型都没有)。
在不含kamasulen的植物中，醚油中含有以下这些成份：单萜类(芳樟醇)，倍半萜类，樟脑(18％)，桧萜(12％)，1，8-桉树脑(10％)，异蒿属(甲)酮(9％)和α-蒎烯(9％)。
含有kamasulen的醚油包含以下成份：单萜，倍半萜，kamasuleh(25％)，β-蒎烯(23％)，石竹烯(10％)以及α-蒎烯(5％)。已鉴定Achillicin(8-乙酰氧基苦艾素)是proasulenes中的一种。
存在的其它物质还有：愈创内酯2，3-脱氢去乙酸基和8-去乙酰母菊素，以及leucodine，3-氧杂愈创内酯8-acetyl-和8-angeloilegelolid，大根香叶内酯milefine，二氢银胶菊内酯，balhanolid-acetate等等，类黄酮apygenin和葡基黄酮(当药苷，牡荆素-2和牡荆素-3)，酚酸，三萜和甾醇，顺式-和反式-母菊酯。
适应症：主要由于含有kamasulen和类黄酮，它被用作antiflogistic，解痉剂，驱风剂和collagogum。主要用于治疗肠胃功能紊乱(腹泻、肠胃气胀、痛性痉挛)。可还用于改善食欲，促进胆汁分泌-利胆作用已通过动物实验得到证实。
它还可用于洗液、浴液、最常见的是醇制剂(渗滤液，流质酊剂)中，用来治疗皮肤发炎和伤口的快速愈合。水酊剂和醚酊剂具有抗菌作用。
在民间医学中，它被用作化学止血剂—用于因痔疮和月经不调等原因引起的出血。
9.Myrtilli folium
Vaccinium myrtillus L，Ericaceae-越桔
分布：欧洲北部和中部。欧洲东南部(克罗地亚，波黑，马其顿，阿尔巴尼亚和波兰)也有出口。
植物的入药部分：果实和叶子。
开花季节：五、六月。
采集时间和方式：当果实完全成熟时采摘，风干(温度不要超过40-50℃)。取嫩叶，阴干。
活性成份：儿茶单宁(0.8-6.7％)，无色花色素，类黄酮(主要是五羟黄酮苷)，酚羧酸，环烯醚萜类化合物。另外注意到还有铬，生物碱mirtin和epimirtin存在，同时还有痕量的熊果甙和水激肽。
适应症：作为外用收敛剂。
在民间医学中，它被用于调节高血糖，常见于“抗糖尿病茶剂”中。这种作用主要源于铬，铬被认为是所谓的葡萄糖耐受因子的一个组成部分；还有人认为可能是类黄酮的作用结果。有关研究仍在进行当中。
10.Phaseoli pericarpium
Phaseolus vulgaris L，Fabaceae-豆类
分布：欧洲国家(保加利亚，匈牙利，克罗地亚，马其顿)的种植植物。
植物的入药部分：去籽豆荚(壳)。
开花季节：六-九月。
采集时间和方式：采集成熟豆荚，去籽，晒干豆荚。
活性成份：白蛋白，碳水化合物，各种氨基酸，铬盐，硅酸。
适应症：只在民间医学中被用作利尿剂和弱抗糖尿病药物。直至不久之前，人们还一直认为是精氨酸和硅酸产生的抗糖尿病作用，但是最新研究结果表明具有抗糖尿病作用的是铬盐(正在试图证明其对II型糖尿病的作用)。
11.Valerianae radix
Valeriana officinalis L，Valerianaceae-缬草
分布：野生于欧洲和亚洲，在荷兰，比利时，法国，东欧，日本和美国有种植。
植物的入药部分：根部。
开花季节：五-九月。
采集时间和方式：九月将根挖出。经去泥、清洗后，除去侧须，风干。
活性成份：0.3-0.7％的醚油，其代表性成份通常为乙酸冰片酯，但也有其它倍半萜存在：β-石竹烯，戊烯醛，缬草烷酮。
精心干燥(40℃)后的根部含有0.5-2％缬草素类似物(缬草环氧三酯)，二环环烯醚萜类化合物-单萜。它们大多为缬草素和异缬草素。二氢缬草素和IVHD-缬草素(异戊酰-氧羟基双异戊酯缬草素)。
戊酸和乙酸基戊酸(0.8-0.3％)是这种药房常备药特有的成份—在其它种类缬草属植物中未发现它们。
根部含有微量(0.01-0.05％)的生物碱，如缬草碱和α-甲基吡酮。
适应症：具有镇静作用(醚油，缬草素类似物)，用作解痉药和肌肉松弛剂(戊酸)。戊酸和相关的倍半萜可以抑制一种重要的神经递质γ-氨基蒲公英酸的降解。用缬草根制成的茶可以起到镇静、放松的作用，还可用于神经紧张，入睡困难(但只作为一种辅助药剂，并不当作睡眠诱导剂)以及紧张状态。另一方面，缬草类似物或根据缬草类似物的要求制成的标准酊剂(通常每剂为50mg)可用作镇静剂和timoleptic。
始终含有缬草素类似物混合物的这些药剂大多由其它种类的缬草制成。Valeriana edulis NUTT.ssp.MEYER-墨西哥缬草或Valerianawallichii DC.-印度缬草。它们通常含有高百分比的二氢缬草素和异缬草素。这类制剂被用于治疗紧张或焦虑以及注意力减退等精神运动性和身心障碍。
关于本发明进一步的描述几乎全部集中在得自表2所示的草药组合物的药物上。
关于由表2所示的草药组合物制成的茶剂、草药酊剂和丸剂这类药物的说明如下：
这类药物具有与胰岛素相当的极强降糖作用，所以应该严格遵守推荐用量。一般来讲，血糖浓度每天甚至可降低6mmol/l到8mmol/l，但是应避免这种情况的发生，否则会出现低血糖性昏迷。
人们注意到这类药物同时还可以降低胆固醇水平。另外它还可以消除碳水化合物和脂肪代谢紊乱。而且它可以消除II型糖尿病的各种明显症状。除了种种其它功效外，它还能够恢复体力。当其它抗糖尿病药物药力微弱时，可以用它来治疗II型糖尿病。未见对健康有任何有害后果。即使不严格限制糖尿病患者的饮食，这类药物也有效。这种草药酊剂药物还有一个应该特别提及的优势是孕期妇女也可以服用。但是吸烟、饮酒和咖啡因会降低该药物的疗效并延长治疗时间；过量食用上述东西尤其会对治疗产生不利影响。
制备、服用剂量及服用方法
茶剂的制备
根据本发明所描述的方法，由草药组合物制成茶剂可由以下方法获得：将由干燥，切好的药材按照表1或表2所示的比例制成的草药组合物没入沸水中，草药组合物与水的质量比例为1-2∶75。随后放入带盖的容器中静置20分钟，然后过滤。
上述质量比例相当于用3分升沸水浸泡1-2匙草药组合物。
茶剂的服用剂量及服用方法
(仅限于由表2所示草药混合物制成的茶剂)
为了迅速控制病情，建议每日起始服用剂量应为：每日三次，饭前半小时服用，每次应服用一剂由2匙草药组合物和3分升水制成的茶剂(即3×(2×4克)/3分升/天，也就是24克/9分升/天)。茶剂备好后应立即服用。
人们通过对志愿者和啮齿动物进行的实验发现，当血糖浓度没有大幅度高出正常值时，单独使用这种茶剂即可取得很好的效果。
草药酊剂的制备
根据本发明所描述的方法，由草药组合物制成的草药酊剂的生产过程如下：在室温条件下将由干燥，切好的药材按照表1或表2所示的比例制成的草药组合物没入60％的乙醇中，1公斤草药组合物要使用7.21升60％的乙醇。为了便于提取，应将混合物放入带盖容器中在室温常压条件下静置28天。然后倾析出沉淀上面的液体，便制成了草药酊剂。
草药酊剂的服用剂量及服用方法
(仅限于由表2所示草药混合物制成的草药酊剂)
为了迅速控制病情，建议每日起始服用剂量应为：前两天，每日三次，每次应服用1匙草药酊剂(3×10毫升/天)。从第三天起，每日服用两次，每次服用1匙草药酊剂(2×10毫升/天)。另外，当血糖浓度超过8mmol/l时，建议同时服用茶剂和草药酊剂。降低血糖浓度的最适速度应掌握在大约每天1/4mmol/l到1/2mmol/l，即平均1/3mmol/l的水平。当血糖浓度降至7mol/l时，每日只需服用一匙草药酊剂(5毫升/天)即可使血糖浓度保持在这个水平上。如果患者开始采用这种疗法时已经在服用抗糖尿病药物，在采用组合疗法(茶剂+草药酊剂)治疗到第三天时，如果血糖浓度开始以每天1/3mmol/l的速度下降的话，便可开始以每两天少服半片的速度降低服用抗糖尿病药物的剂量。如果患者每天服用4片优降糖，那么所述的日治疗剂量的持续时间可以延长两倍。有时候不能完全弃用优降糖，还需要继续使用，但可以降低用量水平。
丸剂的制备
根据本发明所描述的方法，从草药组合物中获得的用来制备丸剂的活性物质的生产过程如下：将干燥，切好的药材按照表1或表2所示的比例制成草药组合物后没入60％的乙醇中。为了制备乙醇酊剂，将混合物置于暗处，在室温常压条件下静置28天。将依照上述方法获得的乙醇酊剂置于10毫米汞柱的真空中，按照30分钟内20℃至40℃的时间性线性温度梯度进行蒸发。将50毫升的乙醇酊剂与0.5克亲水性表面活性剂(如山梨醇)的非离子型共增溶剂相混合，该加溶剂可使醇性酊剂中亲脂性的成份留在水溶液中，并有助于它们溶解可供口服。40分钟后，以20℃至40℃的时间性线性温度梯度，使酊剂密度增加10倍，用时同样为30分钟。照此方法从醇性酊剂制得浓度更高的悬浮液后立即用液态空气将该悬浮液的温度冷冻至-186℃，然后在0.001毫米汞柱的真空中进行冷冻干燥，制成细粉末。这样得到的细粉末是一种可用于生产丸剂的活性物质。它可以满足丸剂生产的基本条件，因为动物试验表明虽然高压可以引起颗粒的塑性变形以及分子内拉力变形，但并不影响该物质的生物活性。
根据本发明所描述的方法，使用依照上述工艺制得的粉末来制备丸剂，生产过程如下：将60毫克含有全部草药组合物提取成份的活性物质的细粉末与180毫克经摩擦活化的微晶天然沸石相混合，这种沸石的pH值在1到11之间，非常稳定。向用这种方法得到的混合物中加入35.0毫克的单糖，使其达到均衡并能增强其压缩性。然后再向如此制得的混合物中混80毫克的天然澄清的微纤维素，使其发生塑性形变。随后再加入5.0毫克的硬脂酸镁，使其更加滑润。丸剂中各种成份的含量详见表3。使用直接压制法压缩依照上述方法制得的均匀混合物，对水分敏感同时耐热性又差的药物物质制成丸剂时适合使用直接压制法。活性成份 …… 60.0毫克 16.7％ (按重量计)天然微纤维素 …… 80.0毫克 22.2％ (按重量计)天然沸石 …… 180.0毫克 50.0％ (按重量计)单糖 …… 35.0毫克 9.7％ (按重量计)硬脂酸镁 …… 5.0毫克 1.4％ (按重量计)
共计： 360.0毫克 100.0％(按重量计)
表3
丸剂服用剂量及服用方法
(仅限于由表2所示草药组合物制成的丸剂)
对志愿者进行的多次实验中证实，根据本发明，平均来说，对于一位II型糖尿病患者，需要使用0.7-1.0毫克/公斤体重/天的活性物质。更具体地，如果一位II型糖尿病患者的血糖浓度高达10mmol/l的水平，建议治疗剂量为每天2丸，早、晚饭前各服一九。
但是如果一位II型糖尿病患者的血糖浓度超过10mmol/l的水平，建议治疗剂量为每天3丸，早、午、晚饭前各服一丸。
在以上两种情况下需要对饮食和体力活动稍加限制。
实验表明可以将患者的血糖浓度在一天之内降低3-4mmol/l，但应避免这种情况，因为存在引起低血糖性昏迷的危险。需要特别指出的是服用依照本发明制得的丸剂可以降低传统抗糖尿病药物的日剂量，服用茶剂和酊剂也是如此。
以下实施例将详细说明本发明，这些实施例涉及的是由表2所示的草药组合物专门制成的茶剂、草药酊剂和丸剂的应用。但是列举这些实施例的目的并不是去限定本发明的范围。第一组实施例涉及的是本发明在志愿者身上进行的试验。其中前三个实施例涉及的是仅靠组合疗法(茶剂+草药酊剂)便成功地大幅度降低了血糖浓度的情况。后面的实施例给出的是在啮齿动物身上进行的试验结果。
茶剂和草药酊剂的药理学数据
志愿者实验结果实施例1
某男，50岁，被诊断患有II型糖尿病，血糖浓度为15.58mmol/l，在开始治疗的前三天里，患者每天服用三次由2匙草药组合物和3分升水制成的茶剂(即3×(2×4克)/3分升/天，也就是24克/9分升/天)，饭前半小时服用。从第四天起，患者每日服用两次上述药物(即2×(2×4克)/3分升/天，也就是16克/6分升/天)，早晚各一次，饭前半小时服用。经过29天治疗后，患者的血糖浓度降至8.02mmol/l。随后每天服用1茶匙草药酊剂(5毫升/天)，即可将血糖浓度保持在这个水平上。需要特别指出的是患者在服用依据本发明制成的茶剂的同时，没有服用任何其它抗糖尿病药物来降低血糖浓度。治疗期间患者饮食非常节制，体力活动有所节制。
实施例2
某女，45岁，患有II型糖尿病，治疗前每天服用2片优降糖，血糖浓度大致稳定在8mmol/l的水平上。在开始治疗的头三天里，患者每天服用三次由2匙草药组合物和3分升水制成的茶剂(即3×(2×4克)/3分升/天，也就是24克/9分升/天)，饭前半小时服用。从第四天起直至第十五天治疗结束，患者每日两次服用上述药物，早晚各一次，饭前半小时服用。与此同时，服用的优降糖剂量以每天半片的速度递减。经过一共15天的治疗后，患者的血糖浓度降至7mmol/l，同时优降糖也完全停用。随后每天服用1茶匙草药酊剂(5毫升/天)，即可使血糖浓度保持在该水平上。试验期间患者的饮食和体力活动稍有节制。
实施例3
某男，52岁，II型糖尿病症状明显，治疗开始时血糖浓度为9mmol/l。未曾服用任何其它抗糖尿病药物。在开始治疗的前三天里，患者每天服用三次由2匙草药组合物和3分升水制成的茶剂(即3×(2×4克)/3分升/天，也就是24克/9分升/天)，饭前半小时服用。从第四天起直至第十四天治疗结束，患者每日服用上述药物两次(即2×(2×4克)/3分升/天，也就是16克/6分升/天)，早晚各一次，饭前半小时服用。经过一共14天的治疗后，患者的血糖浓度降至6mmol/l。随后每天服用1茶匙草药酊剂(5毫升/天)，即可使血糖浓度保持在该水平上。患者的体力活动稍有节制，对饮食的限制很少。
实施例4
某男，60岁，被诊断患有II型糖尿病，血糖浓度为12.0mmol/l，开始本治疗前，每天服用2片优降糖。在开始治疗的前两天里，患者每天服用三次各10毫升的草药酊剂(30毫升/天)和由2匙草药组合物和3分升水制成的茶剂(即3×(2×4克)/3分升/天，也就是24克/9分升/天)，也就是24克/9分升/天)。从第三天起茶剂和草药酊剂都减少一次给药，这样患者每日继续服用10毫升草药组合物(20毫升/天)两次，用上述方法制得的茶剂两次(16克/6分升/天)，早晚各一次，饭前半小时服用。服用的优降糖剂量逐渐减少。经过15天的治疗后，患者的血糖浓度降至7.0mmol/l，优降糖的日剂量也降到了1片。随后每天服用1匙草药酊剂(5毫升/天)一剂或用上方法制得的茶剂1剂(2×4克/3分升/天)，即可使血糖浓度保持在该水平上。
实施例5
某男，50岁，II型糖尿病症状明显，在采用本发明疗法进行治疗前，血糖浓度为16.19mmol/l，胆固醇浓度为7.3mmol/l。在开始治疗的前两天里，患者每天服用三次10毫升草药酊剂(30毫升/天)和由2匙草药组合物和3分升水制成的茶剂(即3×(2×4克)/3分升/天，也就是24克/9分升/天)，饭前半小时服用。从第三天起，茶剂和草药酊剂都减少一次给药，这样患者每天继续服用两次10毫升的草药酊剂(20毫升/天)和用上述方法制得的茶剂(16克/6分升/天)，早晚各一次，饭前半小时服用。经过15天的治疗后，患者的血糖浓度降至9.98mmol/l，胆固醇浓度降至4.41mmol/l。随后每天服用1茶匙草药酊剂(5毫升/天)和一剂用上述方法制得的茶剂(2×4克/3分升/天)，即可使血糖浓度保持在该水平上。
实施例6
某男，48岁，被诊断患有II型糖尿病，在开始采用本疗法进行治疗时，血糖浓度为17.0mmol/l，未曾服用任何其它抗糖尿病药物。在开始治疗的前两天里，患者每天服用三次10毫升草药酊剂(30毫升/天)和由2匙草药组合物和3分升水制成的茶剂(即3×(2×4克)/3分升/天，也就是24克/9分升/天)。从第三天起患者每日服用的茶剂和草药酊剂都减少一次，这样患者每天继续服用两次10毫升的草药酊剂(20毫升/天)和用上述方法制得的茶剂(16克/6分升/天)，早晚各一次，饭前半小时服用。经过15天的治疗后，患者的血糖浓度降至9.8mmol/l。随后每天服用1茶匙草药酊剂(5毫升/天)和一剂用上述方法制得的茶剂(2×4克/3分升/天)，即可使血糖浓度保持在该水平上。
实施例7
某男，52岁，被诊断患有II型糖尿病，在采用本发明疗法进行治疗前，每天服用4片优降糖，血糖浓度为16.0mmol/l。在开始本治疗的前两天里，患者每天服用三次10毫升草药酊剂(30毫升/天)和由2匙草药组合物和3分升水制成的茶剂(即3×(2×4克)/3分升/天，也就是24克/9分升/天)。从第三天起，茶剂和草药酊剂都减少一次给药，这样患者每天继续服用两次10毫升的草药酊剂(20毫升/天)和用上述方法制得的茶剂(16克/6分升/天)，早晚各一次，饭前半小时服用。经过15天的治疗后，患者的血糖浓度降至12.0mmol/l，服用优降糖的日剂量也降至0片。需要特别指出的是每天服用4片优降糖对肾脏有害，患者很快就会需要摄入胰岛素。
毒理学
上述试验证实以上药物无毒。作为受试对象的身体状况对治疗没有出现任何有害的反应症状。
啮齿动物试验结果
就探测时间而言，对根据本发明制成的制剂对患有糖尿病的小鼠的血糖浓度所产生的作用进行了研究。应用于啮齿类的药物剂量均依照根据本发明制得制剂中的蛋白质浓度进行了调整。根据本发明制得的制剂中的蛋白质浓度用Bradford方法确定。为确定蛋白质浓度，使用了茶剂、草药酊剂(需除去醇)和冻干粉样品。在采用依照本发明制得的制剂进行治疗之前，患有糖尿病的CBA小鼠(每组18只)的葡萄糖浓度平均高达22.4±6.5mmol/l。10分钟之后，也就是30分钟，小鼠的葡萄糖浓度开始下降，用药2小时后，葡萄糖浓度平均比起始值低20％以上。使用醇性酊剂，非醇性酊剂，即丸剂获得的实验结果见图l。
下面补充说明一下根据本发明制得的茶剂和草药酊剂的毒性试验结果。
为了检验根据本发明制得的制剂(茶剂和草药酊剂)的毒性，通过掺入食物的方式每天给小鼠服用该制剂，剂量为20毫克/公斤体重/天。
按照毒性研究和确定方案，每14天把小鼠关在代谢笼中24小时(见表4)。在这24小时期间，要对小鼠消耗的食物、饮水、以及排泄的尿液和粪便进行计量。计量结果表明在此24小时期间，平均一只小鼠吃掉5.37±1.08克食物，饮用2.94±1.02毫升水，排泄1.14±0.28克粪便和1.2±0.4毫升尿液。 小鼠组别 食物(g) 水(ml) 粪便(g) 尿(ml)对照组 21.2±1.5 22.4±2.2 7.8±0.4 6.2±0.2第30天 22.8±1.9 17.3±1.8 4.9±0.6 7.5±0.5第60天 21.0±0.9 15.6±2.3 4.6±0.9 5.8±0.1第90天 33.1±2.5 15.9±1.9 4.5±0.5 6.4±0.3第120天 29.7±1.8 16.4±2.5 6.5±0.6 5.0±0.4第150天 29.3±0.9 17.9±2.1 8.2±1.2 7.0±0.6第180天 33.0±2.4 15.8±1.8 7.9±1.1 6.2±0.4
表4
说明
此处和以下给出的数据均为平均值±标准偏差。
每14天收集一次尿液并进行分析(见表5)。在试验期间，即在试验进行的期间在试验小鼠的尿中没有发现葡萄糖、胆红素或酮体。也没有出现红细胞，尿胆素原，亚硝酸盐或白细胞。存在少量蛋白质实质上是因在将尿液与剩余食物分离开时存在技术难点所致。尿液可能会受到食物的污染。 小鼠组别 尿糖 (g/dl)胆红素 酮 (mg/μl) 比重(g/ml)红细胞(细胞数/μl) pH 蛋白质 (mg/dl) 尿胆素原 (mg/dl) 亚硝 酸盐 白细胞(细胞 数/μl)对照组 - - -1.030 - 7.0++ -- -第30天 - - -1.020 - 6.5++ -- -第60天 - - -1.030 - 6.5++ -- -第90天 - - -1.020 - 7.0+ -- -第120天 - - -1.030 - 6.5+ -- -第150天 - - -1.020 - 7.0++ -- -第180天 - - -1.020 - 7.0+ -- -
表5
在急性、亚慢性和慢性试验中，对接受根据本发明制得的植物混合物治疗的动物进行了解剖。对获得的血清进行了分析，并对可以标志体内重要器官和代谢功能的各种损害的一些生化参数进行了检验。只给出了以下几个参数：尿素，肌酸酐，AST，ALT和胆固醇。这些结果表明接受根据本发明制得的制剂治疗的小鼠的特定生化参数与对照组的数值(见表6和表7)没有偏差。
根据本发明处理的小鼠血清的分析 24小时 7天 3个月 6个月尿素(mmol/l) 7.7±0.7 7.1±0.8 6.8±1.3 6.8±0.3肌酸酐(μmol/l) 47.0±1.8 50.3±1.6 48.5±2.9 40.8±2.2AST(u/l)[22℃] 70.6±11.9 122.6±10.3 76.4±11.4 53.3±11.6ALT(u/l)[22℃] 26.6±2.7 25.7±3.1 29.3±4.2 27.8±6.5胆固醇(mmol/l) 2.3±0.3 3.1±0.4 3.4±0.5 3.2±0.3
表6
对照组小鼠血清分析 24小时 7天 3个月 6个月尿素(mmol/l) 7.6±0.7 8.3±0.8 7.4±0.4 7.2±0.5肌酸酐(μmol/l) 42.5±1.2 51.7±4.2 46.3±2.5 41.4±1.9AST(u/l)[22℃] 54.9±12.5 78.1±10.9 56.2±9.9 55.2±12.3ALT(u/l)[22℃] 26.2±3.4 29.0±2.0 28.6±3.5 29.4±4.6胆固醇(mmol/l) 2.6±0.2 3.1±0.7 2.8±0.4 3.3±0.4
表7
丸剂的药理学数据
在糖尿病小鼠身上证实了丸剂降糖作用的有效性。通过单一注射阿脲(75毫克/小鼠/公斤体重)引发糖尿病。14天后所有患上糖尿病的小鼠都被纳入试验。从患有糖尿病的小鼠身上提取血液零时样品，然后测定血液中的葡萄糖含量，作为100％，列于表8和图2中。用探针将剂量为20毫克活性物质/小鼠/公斤体重的丸剂从口部送入糖尿病小鼠体内。在第一个30分钟里，接受治疗的糖尿病小鼠的外周血液中的葡萄糖浓度平均降低了11％(见表8)。再经过30分钟后，血糖浓度总共降低了18％以上，再经过60分钟，即120分钟后，测得有些小鼠的血糖浓度共计降低了约30％。数据见表8。这些结果表明了在实验室小鼠(每组12只)身上所证实的阳性降糖作用(即血糖浓度比起始值降低10％至30％)。小鼠组别0分钟呫起始值 的百分比30分钟呫起始值 的百分比60分钟呫起始值 的百分比120分钟呫起始 值的百分比 1. 100 92.5±4.2 78.5±4.3 72.4±5.2 2. 100 88.6±4.0 79.3±3.9 70.2±6.8 3. 100 82.5±3.5 74.9±3.6 73.5±6.2 4. 100 94.1±3.1 85.7±4.1 80.1±5.5 5. 100 88.9±3.5 82.7±3.5 78.4±5.9 6. 100 91.0±4.1 85.4±4.2 77.5±5.0 7. 100 82.3±4.2 79.8±4.5 83.4±5.8 8. 100 90.5±3.6 84.3±3.2 82.6±5.3 9. 100 86.4±4.6 83.2±4.0 89.5±6.6 10. 100 93.5±4.0 87.4±3.8 85.4±6.7
89.3±4.2 82.1±4.0 79.3±6.1
表8
在重复试验(结果见图2)中，人们注意到糖尿病小鼠外周血液中的葡萄糖浓度出现了下降，120分钟后下降了20％以上。
对NOD小鼠也进行了试验。NOD小鼠是一类自然患上糖尿病的小鼠。葡萄糖同化作用试验结果见图3。从该图可以看出患有糖尿病的小鼠在给予了根据本发明制得的丸剂120分钟后与被指定为“糖尿病组”的对照糖尿病小鼠相比，其外周血葡萄糖浓度出现了相当程度的下降。图3所示的“对照组”是指没有糖尿病的小鼠。
以下是以附件形式提供的根据本发明制得的丸剂的毒性试验结果。
在对健康的CBA/H Zgr雌雄两性小鼠进行的接下来的6个月的试验中，控制预期与制剂的最终毒性有关的各种参数。每日以每克供给实验室小鼠的食物中掺入5毫克活性物质的剂量加入所述制剂。在这些实验中，对小鼠开始所述饮食后第7，14，30，60，120和180天的体重变化进行观察。在这些天中，将小鼠置于代谢笼中24小时，从而可以保证测量到每只小鼠消耗的食物量、饮水量、排泄的粪便量以及排出的尿液体积。结果见表9，从该表可以明显看出，在6个月中，使用根据本发明制得的制剂不干扰接受治疗的小鼠的健康。小鼠组别 食物(g) 水(ml) 粪便(g) 尿(ml)对照组 23±1.3 24±2.4 5±0.4 6±0.2第30天 19±2.4 20±1.7 6±0.6 9±0.4第60天 24±0.9 20±1.5 6±0.5 7±0.1第90天 27±1.5 18±3.1 5±0.7 5±0.1第120天 30±2.1 19±2.1 7±1.1 6±0.2第150天 31±2.5 18±2.6 9±0.7 5±0.4第180天 35±1.2 19±2.1 8±0.8 7±0.5
表9
同时，研究人员还采集了每只小鼠的尿样，从中确定最终可能表明负面、有害作用的参数，结果见表10。测定10种不同参数的结果显示该制剂无毒。 小鼠组别 尿糖 (g/dl)胆红素 酮 (mg/μl) 比重(g/ml)红细胞(细胞数/μl) pH 蛋白质 (mg/dl) 尿胆素原 (mg/dl) 亚硝 酸盐 白细胞(细胞数/μl)对照组---1.020- 6.5----第30天---1.030- 7.0----第60天---1.030- 6.5----第90天---1.020- 7.0----第120天---1.030- 6.5----第150天---1.030- 6.5+---第180天---1.020- 7.0+---
表10
180天后，在乙醚麻醉下对小鼠进行了解剖，取出各种器官进行组织学处理，然后通过光学显微镜进行详细检查。对照组小鼠和喂食了根据本发明制得的丸剂的小鼠身上的受检器官都未发现病变。
在食物中掺入丸剂中的各种成份后，给健康的小鼠每天喂食此混合物，即给每只小鼠喂食约20毫克的活性物质。在对这组小鼠进行上述试验的同时，研究人员还对长期没有喂食添加丸剂的小鼠进行了试验，试验结果表明在6个月期间及6个月结束时都没有发现使用丸剂有毒性结果。结果见表11。这些结果显示在6个月期间测量的参数浓度没有发生变化(见表11)。在前7天中天冬氨酸转氨酶数值出现一定程度的升高，这可以解释为小鼠正在适应新类型的饮食(也许前7天存在轻度饥饿现象)。但是6个月后，没有任何变化的迹象(见表11)。
根据本发明处理的小鼠血清的分析 1天 7天 3个月 6个月尿素(mmol/l) 7.4±0.7 7.5±0.8 7.1±1.3 6.5±0.3肌酸酐(μmol/l) 47.0±1.8 48.3±1.4 46.5±2.9 45.8±2.8AST(u/l)[22℃] 90.6±13.1 112.6±12.3 86.4±10.4 57.3±13.7ALT(u/l)[22℃] 26.3±3.7 27.7±3.1 28.3±4.2 26.8±7.5胆固醇(mol/l) 2.8±0.1 3.0±0.5 3.7±0.4 3.9±0.3
表11
对照组小鼠相应的血清参数值见表12。
对照组小鼠的血清分析 1天 7天 3个月 6个月尿素(mmol/l) 6.6±0.6 8.5±0.8 7.6±0.3 7.0±0.8肌酸酐(μmol/l) 44.5±1.0 51.2±4.1 46.5±2.4 40.4±2.3AST(u/l)[22℃] 53.9±17.5 78.5±11.9 58.9±8.9 54.2±12.7ALT(u/l)[22℃] 27.2±2.4 28.0±1.9 27.6±3.1 28.4±4.5胆固醇(mmol/l) 2.5±0.3 3.0±0.7 2.7±0.6 3.2±0.4
表12
最后，应该指出的是，尽管用目前认为是本发明中最实用和优选的实施方案展示并描述了本发明，对本领域的技术人员而言，显然可以在本发明的范围内进行许多修改。本发明涵盖的范围应按对所附权利要求最宽泛的解释来理解，以便能够包含所有的等价方法和产品。