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抗微生物组合物
    【发明领域】

    本发明涉及抗微生物制剂的组合物，组成这种抗微生物组合物的物质，以及抗微生物组合物的应用。

    【发明背景】

    牙周疾病和龋齿是全球主要的公众健康和经济问题。目前广泛认为这两种牙周疾病都是由细菌引起的，而这些细菌成团状滋生于牙齿上和牙龈区内，对于这些细菌团，通常所用的描述术语是“齿斑”。对于牙周疾病，Schluger等(Schluger,Yuodelis,Page&Johnson，牙周疾病，第二版，153-262页，Lea&Fbiger,1990)报道了滋生于牙齿与牙龈交界区域的齿斑细菌引起牙龈的炎症，称为牙龈炎，其特征在于牙龈(“龈”)肿胀、水肿、发红、易出血。如果齿斑未被完全清除，许多人的牙龈炎可能发展成牙周炎或牙周疾病。牙周炎的特征通常在于牙齿周围组织的慢性炎症，这种炎症导致了支持骨的吸收。牙周疾病是成人缺齿的首要原因。龋齿(牙洞)也是由细菌引起的，主要致病成分是变异链球菌(McGhee,Michalek&Cassell，牙齿微生物学，第279页，Harper&Row,1982)。

    防止齿斑或去除齿斑一直是研究的焦点，其最终目的是抑制龋齿和牙周疾病。虽然经常刷牙能够在一定程度上防止齿斑的形成，但是仅靠刷牙并不足以有效地防止齿斑的形成或基本上去除牙齿上已经形成的齿斑。既然刷牙本身通常不足以有效预防由致病齿斑菌引起的龋齿或牙周疾病，那么现已提出应用抗细菌物质如洗必太，氯化苯甲烃铵，氯化十六烷基吡啶嗡的化学方法。

    本领域古老技术是将天然物质用于牙齿和牙龈的治疗，这自19世纪80年代中期已有记载并已进行应用。从那时起，有许多专利公开了含天然物质提取物的口腔产品组合物。

    现在已知扁柏酚、柠檬醛、香叶醇、cocamidopropyl甜菜碱、小檗碱和刺柏子油(Juniper berries oil)单独都表现对某种细菌的抗微生物效应。

    美国专利号3,940,476描述了一种抑制齿斑形成的方法，它包括将下列物质中的一种或几种的组合作为活性制剂局部施用给牙齿，这些物质包括：(a)异硫氰酸丙烯酯，(b)uranine,(c)obtusastyrene,(d)柠檬醛，(e)香茅醇，(f)橙花醇，或(g)香叶醇。

    美国专利号4,913,895描述了一种口腔组合物，它在水性介质中含线性聚磷酸盐或环状聚磷酸盐及薄荷醇，anethol，或其混合物。有报道这种组合物具有抗细菌效应，并预防结石和牙周疾病的发生。

    美国专利号4,966,754描述某些香料油和它们的组合具有对黑曲霉、白色念珠菌、金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抗微生物效应，因而可用作化妆品组合物中地防腐剂。报道了14种精油的混合能够提供针对普通微生物的抗微生物效力。公开了上述组合物适于作为化妆品组合物中的防腐剂。

    美国专利号4,999,184描述了含某种焦磷酸盐的组合物，据报道焦磷酸盐提供抗结石效应。

    美国专利号5,316,760描述了含大荨麻提取物和欧洲杜松提取物组合的口腔护理产品，据描述这些提取物的组合导致协同减少齿斑的形成和牙龈的炎症或出血。也已描述千叶蕃提取物可作为大荨麻提取物及欧洲杜松提取物组合的合适添加剂。

    美国专利号5,472,684描述含麝香草酚和丁子香酚，以及选择性地倍半萜烯醇，如法呢醇的组合物。据报道这种组合物有抗齿斑和抗牙龈炎效应。澳大利亚茶树油、鼠尾草油和桉叶油已描述为能增强漱口液的抗齿斑活性及抗牙龈炎活性，因而配制在公开的组合物中。

    鉴定作为抗齿斑和抗结石制剂的抗微生物制剂的效果的一个特征是它的最小抑制浓度或MIC。MIC是当没有观察到细菌生长时以毫克每毫升表示的抗微生物制剂的最小浓度。当浓度低于MIC时，抗微生物制剂不能有效杀死细菌或抑制细菌生长和繁殖；当浓度高于MIC时，抗微生物制剂能有效地杀死细菌或抑制细菌生长和繁殖。

    典型地，抗微生物制剂以初始浓度导入口腔。由于口腔中的动态变化，初始浓度随即开始下降。实际上，口腔内抗微生物制剂的浓度将降至低于MIC。因此，研究抗齿斑及抗结石配方工作的目标是使用MIC较低的抗微生物制剂。

    洗必太的MIC约为1μg/ml，并且它是衡量其它抗微生物制剂的标准。虽然洗必太的MIC较为理想，但它有令人不快的味道和牙齿染色的副作用。

    发明概述

    本发明涉及这一发现，即将一种下述抗微生物制剂加入另一种下述抗微生物制剂中，导致未预料地和令人惊讶地减少其中至少一种制剂在组合中，即存在其它制剂时测定的最低抑制浓度。换而言之，在制剂B存在时测定的制剂A的MIC低于制剂A单独存在时，即无制剂B存在时测定的制剂A的MIC。因此，在与制剂B组合时，抗微生物制剂A可在低于其单独存在时所测的MIC的浓度下有效抑制或防止细菌的生长。如果制剂A和B的组合导致制剂B的MIC低于制剂B单独存在时所测的MIC，那么抗微生物制剂B可在低于其单独存在时所测的MIC的浓度下有效抑制或防止细菌的生长。换而言之，当制剂A和B组合时，至少其中一种制剂能够在低于其单独存在时抑制或防止细菌生长所需浓度的浓度下抑制或防止细菌生长。

    根据本发明组成的抑制细菌生长的组合物包括有效抑制细菌生长含量的抗微生物制剂A和抗微生物制剂B，其中制剂A和制剂B从含以下物质的一组中选取：小檗碱、香柏油、氯霉素、柠檬醛、香茅油、cocamidopropyl-二甲基甘氨酸、光果甘草提取物、扁柏酚、浆果罗勒油、刺柏子油、柠檬罗勒油、柠檬油和迷迭香油。根据本发明组成的另一种抑制细菌生长的组合物包括香叶醇和选自下列物质的抗微生物制剂：小檗碱、香柏油、氯霉素、香茅油、cocamidopropyl-二甲基甘氨酸、光果甘草提取物、扁柏酚、浆果罗勒油、刺柏子油、柠檬罗勒油、柠檬油和迷迭香油。

    根据本发明，制剂B存在时，制剂A的最小抑制浓度低于制剂A单独的最小抑制浓度。此外，优选地当制剂A存在时制剂B的最小抑制浓度低于制剂B单独的最小抑制浓度。本发明的组合物有效抑制或防止细菌的生长，如粘性放线菌，直肠弯曲杆菌，具核梭杆菌，牙龈卟啉单胞菌，变异链球菌和血链球菌。

    此外，根据本发明组成的组合物包含第三种不同于制剂A和B的抗微生物制剂C，其选自小檗碱、香柏油、氯霉素、柠檬醛、香茅油、cocarmidopropyl-二甲基甘氨酸、香叶醇、光果甘草提取物、扁柏酚、浆果罗勒油、刺柏子油、柠檬罗勒油、柠檬油和迷迭香油。

    根据本发明组成的组合物可用于多种产品，如清洁剂、擦净剂、药品和口腔卫生产品。口腔卫生产品的例子包括牙膏，漱口液。

    根据本发明组成的抑制细菌生长的组合物可通过与表面接触使用。

    附图简述

    附图是关于三种抗微生物制剂A、B和C的组合在96孔板中稀释情况的图解说明。

    优选实施方案详述

    如本文所用的，以下术语具有下列含义：

    “小檗碱”是指5,6-二氢-9,10-二甲氧基苯[g]-1,3-苯并间二氧杂环戊烯[5,6-a]喹嗪及其盐。小檗碱是从北美黄连和小檗科中其它几种植物中分离的生物碱，典型的小檗碱盐包括盐酸小檗碱，硫酸氢小檗碱和硫酸小檗碱。小檗碱的化学摘要作用登记(CAS)号是84603-60-1。

    “香柏油”是指主要从铅笔柏或Juniperus ashei的心材中提取的挥发性全油提取物，该全油提取物的成分包括：thujopsene，雪松醇，α-烯，α-雪松烯，β-雪松烯和韦得醇，香柏油的CAS号为8000-27-9。

    “氯霉素”是指2,2-二氯-N-[2-羟基-1-(羟甲基)-2-(4-硝基苯基)乙基]乙酰胺，氯霉素来自委内瑞拉链霉菌或经有机合成。氯霉素的CAS号是56-75-7。

    “柠檬醛”是指3,7-二甲基-2,6-octadienal，它是禾本科的香茅和Cymbopogon flexuosus的挥发性油，柠檬醛可从商业途径买到纯化合物，柠檬醛的CAS号是5392-40-5。

    “香茅油”是指通过Cymbopogon nardus或Cymbopogon winterianus的蒸汽蒸馏生产的商业上可买到的油。香茅油的CAS号为8000-29-1。

    ″香叶醇″是指对-3,7-二甲基-2,6-辛二烯-1-醇，香叶醇的CAS号是106-24-1。香叶醇是作为其它香料油，如香茅，柠檬草，玫瑰油和玫瑰草中的成分被发现的。

    “cocamidopropyl二甲基甘氨酸”的CAS号为61789-40-0,83138-0-3和86438-79-1。

    “光果甘草提取物”也被称作甘草根提取物，是指来自光果甘草的粗提取粉。存在包括G.typica和G.glandulifera几个品种。光果甘草提取物含有甘草酸和甘草次酸成分。全提取物可从商业途径买到或通过溶剂抽提得到，如以下所述的乙醇提取法。

    “扁柏酚”是指β-thujuplicin，是北美香柏的提取物。

    “浆果罗勒油”是指一种有浆果成分的罗勒植物的所选品种的全提取物，浆果罗勒是矮糠罗勒的栽培品种。

    “刺柏子油”是指来自成熟的桧属欧洲杜松干果的具柠檬醛成分的挥发性全油提取物，刺柏子油又被称为桧树提取物，欧洲杜松提取物和桧树浸膏。刺柏子油的CAS注册号为84603-69-0。

    “柠檬罗勒油”是指从含有柠檬醛成分的所选罗勒属品种中提取的挥发性全油提取物。柠檬罗勒是矮糠罗勒的人工栽培品种，该品种具有较高的柠檬醛含量。

    “柠檬油”是指从柠檬新鲜果皮提取的挥发性全油提取物。柠檬油也称为柠檬的油。柠檬油的CAS注册号为8008-56-8。

    “迷迭香油”是指从迷迭香的花顶端提取的全油提取物。迷迭香油也被称为迷迭香提取物或迷迭香油的提取物。迷迭香油的CAS注册号为84606-14-8。

    有关上述精油的其它信息可查阅kirk-Othmer化学技术百科全书，第4版，第7册，603-674页，John Wiley&Sons有限公司。

    所有前述的都可从商业来源得到。

    “最低抑制浓度或MIC”是指当观察不到细菌生长时抗微生物制剂的最低浓度，该浓度用每毫升中抗微生物制剂的毫克数表示。浓度低于最低抑制浓度时，抗微生物制剂不能有效地杀死或抑制细菌生长繁殖，高于最低抑制浓度的抗微生物制剂能有效地杀死或抑制细菌生长繁殖。

    观察到与组合中的特定制剂单独存在时，即不存在其它制剂时的最低抑制浓度相比，根据本发明组成的抗微生物制剂组合表现出令人惊讶和出乎意料地降低组合中至少一种，优选地所有抗微生物制剂的最低抑制浓度。所观察到的惊人的最低抑制浓度的降低涉及代表性的革兰氏阳性和革兰氏阴性口腔病原细菌，如粘性放线菌，具核梭杆菌，牙龈卟啉单胞菌，变异链球菌，血链球菌和直肠弯曲杆菌。举例来说，如果制剂A单独存在时的最低抑制浓度是10，制剂B单独存在时的最低抑制浓度是20，根据本发明，将制剂A和制剂B组合后，在制剂B存在时，制剂A的最低抑制浓度相对于制剂A单独存在时的最低抑制浓度降低了出乎预料和惊人的数量。另外，优选地，在制剂A存在时，制剂B的最低抑制浓度相对于制剂B单独存在时的最低抑制浓度显著出乎意料地降低。在组合中制剂A和制剂B最低抑制浓度的降低使得制剂A，和优选地制剂B，能够在与仅抗微生物制剂A或仅抗微生物B存在时相比更低浓度下抑制和/或预防微生物的生长和繁殖。如发明背景中所述，通常抗微生物制剂从制剂开始施用时起浓度即下降。因此，通过有效降低抗微生物制剂的最低抑制浓度，能够延长该抗微生物制剂预期的抑制或预防细菌生长的时间范围。以下将更详细地描述与本发明相结合的令人吃惊且出乎意料的结果，并在随后的实施例中举例说明。

    根据本发明组成的抗微生物制剂组合包含：(1)选自小檗碱，香柏油，氯霉素，柠檬醛，香茅油，cocamidopropyl-二甲基甘氨酸，光果甘草提取物，扁柏酚，浆果罗勒油，刺柏子油，柠檬罗勒油，柠檬油和迷迭香油的抗微生物制剂A；和(2)选自同样目录的不同于抗微生物制剂A的抗微生物制剂B。另外，根据本发明组成的组合包含香叶醇以及选自小檗碱，香柏油，氯霉素，香茅油，cocamidopropyl-二甲基甘氨酸，光果甘草提取物，扁柏酚，浆果罗勒油，刺柏子油，柠檬罗勒油，柠檬油和迷迭香油的抗微生物制剂。

    以上列出的抗微生物制剂的很多组合中，优选的组合包括香柏油以及选自小檗碱，氯霉素，柠檬醛，cocamidopropyl-二甲基甘氨酸，香叶醇，光果甘草提取物，扁柏酚，浆果罗勒油和迷迭香油的抗微生物制剂，最优选的是香柏油与小檗碱，氯霉素，柠檬醛，cocamidopropyl-二甲基甘氨酸，香叶醇和光果甘草提取物的组合。

    另一组优选的组合包括小檗碱和选自氯霉素，柠檬醛，香叶醇，光果甘草提取物，扁柏酚，浆果罗勒油，刺柏子油和柠檬罗勒油的抗微生物制剂。与小檗碱组合最优选的是氯霉素，香叶醇，光果甘草提取物和柠檬罗勒油。

    其它优选的组合包括扁柏酚与氯霉素，柠檬醛，cocamidopropyl-二甲基甘氨酸，香叶醇，光果甘草提取物，刺柏子油和柠檬罗勒油的组合。与扁柏酚组合最优选的是选自氯霉素，cocamidopropyl-二甲基甘氨酸，香叶醇和光果甘草提取物的抗微生物制剂。

    将光果甘草提取物与选自香柏油，氯霉素，香叶醇，浆果罗勒油，刺柏子油，柠檬罗勒油，柠檬油和迷迭香油的抗微生物制剂组合时得到优选的结果。与光果甘草提取物组合最优选的是选自香柏油，香叶醇，刺柏子油和迷迭香油抗微生物制剂。

    前述的著名抗细菌制剂组合是优选的和最优选的，因为：(1)组合中特定抗微生物制剂的最低抑制浓度较其单独存在时所测的最低抑制浓度降低的程度；及(2)由于制剂组合得到的各个抗微生物制剂的最低抑制浓度。

    除了上述包含两种抗微生物制剂的组合物以外，本发明也涉及包含两种以上抗微生物制剂，如三种或四种抗微生物制剂的组合物，其中组合中至少一种，优选地所有组成制剂的最低抑制浓度低于这些组分单独存在时所测的最低抑制浓度。同样地，选自以上列出的一组物质不同于抗微生物制剂A和制剂B的抗微生物制剂C可加入到抗微生物制剂A和制剂B中以提供根据本发明的组合物的第三种制剂。根据本发明组成的抗微生物制剂A,B和C的组合，其中至少一种优选地所有组成制剂的最低抑制浓度低于这些组分单独存在时所测的最低抑制浓度。此外在某些情况下，三种抗微生物制剂的组合中组分的最低抑制浓度低于三种组分制剂的两两不同配对时的最低抑制浓度。

    只要得到如上所述组合的成分的最低抑制浓度的降低，根据本发明组成的组合物中抗微生物制剂的比例并限于任何特定值。已观察到两种组成成分的比例在约1∶500到约500∶1的范围内能提供最低抑制浓度惊人而出乎预料的降低。根据本发明，在三种组分系统中，任一制剂相对于另外两种制剂的比例在约1∶500到约500∶1的范围内能降低其最低抑制浓度。

    在根据本发明配制的组合物中存在的抗微生物制剂具体含量并不限于任何特定的值，只要其含量能有效地抑制和/或预防细菌的生长，即抗微生物制剂的含量大于对应于特定细菌的最低抑制浓度。当在根据本发明组成的组合物中加入各种载体时，抗微生物制剂的含量优选地选择保证一旦该组合物被施用或提供后，抗微生物制剂浓度大于其针对特定细菌的最低抑制浓度的含量。每种制剂恰当的含量范围以含制剂的组合物的总重量为基础，按重量百分比，从约0.001％到约5.0％，优选地约0.01％到约2.5％。

    根据本发明组成的组合物可施用于需要抑制细菌生长的表面，用于控制表面细菌生长的产品的例子包括清洁剂，擦净剂，药品，和优选地治疗产品，如口腔卫生产品，包括牙膏，洗口液和漱口液。与根据本发明的组合物结合的这些产品的成分优选地选择对根据本发明组成的组合物降低最低抑制浓度的方法没有拮抗效应的成分。

    牙膏通常是在水性致湿体系中含磨擦增亮剂的增稠浆液。典型地，牙膏含磨擦剂(能够去除污染的菌膜)，致湿剂(香味剂、磨擦剂和增稠剂的载体，以使牙膏具有一定的结构和稳定性)，表面活性剂(主要在使用时产生泡沫)，氟化物(预防牙洞)，和香味剂(赋予牙膏香味)。

    有多种磨擦剂可用于牙膏中，如硅胶、硅沉淀物、磷酸氢二钙、二水合磷酸氢二钙、三水合氢氧化铝、焦磷酸钙、碳酸钙和不溶性偏磷酸钙。

    合适的致湿剂的例子包括山梨糖醇，甘油和聚乙二醇。

    硅气凝胶、焦化硅、硅沉淀物、羧甲基纤维素、羧基乙烯多聚体、黄原胶和角叉藻聚糖适于作为增稠剂。

    典型表面活性剂包括十二烷基磺酸钠和十二烷基苯磺酸盐。

    多种香味剂可由商业途径得到，含香味剂能提供薄荷味和其它清新香味，常用的如桂皮。

    漱口液或洗口液通常是含水的有香味的可倾倒的乳剂，在大多数情况下掺入了抗微生物制剂。典型的漱口液成分包括使人乐于使用并加强治疗或新鲜质量的香味剂，保持香味剂稳定分散的表面活性剂，改善口感的致湿剂，增稠剂和活性剂。漱口液中也常用表面活性剂以产生少量泡沫。

    掺入了根据本发明组成的抑制细菌生长的组合物的牙膏和漱口液按常规方法与抗微生物制剂一起配制，抗微生物制剂存在的含量超过在其组合中测定的MIC。

    以下实施例说明根据本发明组成的抑制细菌生长的组合物中的成分的MIC令人吃惊且出乎意料降低。实施例1单独抗微生物制剂和组合中两种抗微生物制剂最低抑制浓度的测定

    本实施例说明了如何测定要结合形成根据本发明的组合物的单独抗微生物制剂的最低抑制浓度并且也说明了如何测定组合中抗微生物制剂最低抑制浓度。

    为了测定这些抗微生物制剂单独的最低抑制浓度和当这些制剂组合形成根据本发明的组合物时其最低抑制浓度，使用微量滴定板将抗微生物制剂稀释到多种浓度。

    细菌培养物在37℃培养。在如下所述稀释抗微生物制剂以前，将细菌培养物在2000转/分离心形成沉淀并悬浮于磷酸缓冲液中。用分光光度计将接种物标准化到550纳米下光密度在0.180-0.220之间(相当于每毫升5.0×107克隆形成单位，CFU)。接种物被放置在一边直至完成抗微生物制剂的稀释。

    使用无菌的聚苯乙烯96孔板以稀释抗微生物制剂A和抗微生物制剂B的组合物。采用无菌技术，在每一个所测加样孔中加入100微升蒸馏水。抗微生物制剂的稀释方案分两个部分，第一部分为抗微生物制剂A的稀释，第二部分为抗微生物制剂B的稀释。将100微升制剂A的贮备液加入每列的第一个孔中。这是基于贮备液浓度的1/2稀释。然后将第一孔中的100微升液体转移到下一个孔中，并依次转移到每一个测试加样孔中，每一次转移将前一个加样孔的浓度稀释了一半。然后在每行的第一个孔中加入100微升制剂B的贮备液，并依照与制剂A相同的稀释方法在垂直方向交叉向下稀释。在完成制剂B的稀释以后，将80微升与所研究细菌对应的培养基加入每个孔中。

    滴定板的每一列的第一个孔中都加入100微升制剂A的储存液，随后将100微升液体转移到下一个加样孔中并依次至该列的每一个加样孔。每一次转移都将前一个孔的制剂A的浓度稀释了一半。然后用制剂B在另一列重复以上操作。这两列孔用于测定制剂A和制剂B单独存在时的最低抑制浓度。在完成制剂A单独和制剂B单独的稀释以后，将80微升与所研究细菌对应的培养基加入这两列的每个孔中。

    随后将20微升接种物加入到每一个孔中，这使得第一个孔的最终稀释度为贮备液浓度的1/4，其余孔为每次转移的前一孔的1/2稀释。将96孔板在根据特定微生物变化的条件下培养。需氧细菌粘性放线菌、变异链球菌和血链球菌在周围室温条件下培养。厌氧细菌具核梭杆菌和牙龈卟啉单胞菌在10％氢气，5％二氧化碳，其余为氮气的气体条件下培养。

    经过48小时的培养后，用分光光度计测定培养滴定板的光密度值(OD)以测定微生物的生长。对于每种制剂，分光光度计读出值在0.05OD以下(即未检测到微生物生长)的孔中，最低稀释度的孔被认为代表该组合。通过计算起始贮备液的浓度和96孔板中所得稀释度，确定组合中每种制剂的最低抑制浓度。

    表1中列出了96孔板中接种的特定细菌以及对应于该微生物的培养基和培养条件。表1微生物/生长培养基/培养条件微生物粘性放线菌(AV)ATCC号 培养基    培养条件19246 TSB1 48小时/37℃/需氧    具核梭杆菌(FN)10933 FN media3 48小时/37℃/厌氧  牙龈卟啉单胞菌(PG)33277 PG media2 48小时/37℃/厌氧    变异链球菌(SM)25175 TSB1 48小时/37℃/需氧    血链球菌(SS)49295 TSB1 48小时/37℃/需氧1  3.0％(重量/体积比)胰胨豆胨培养液，0.1％酵母提取物和999毫升蒸馏水；2  3.0％(重量/体积比)3.0％胰胨豆胨培养液，0.5％酵母提取物，0.05％ L-半胱氨酸，0.0005％氯化高铁血红素，0.00002％维生素K3和999毫升蒸馏水；3  3.0％(重量/体积比)胰胨豆胨培养液，0.5％酵母提取物，1.0％蛋白胨，L-半胱氨酸提取物，0.0005％氯化高铁血红素，0.00002％维生素K3和999毫升蒸馏水。

    抗微生物制剂A和B由表2列出的物质中选出。表2

                 盐酸小檗碱(BX1)

                 香柏油(RC1)    

                 氯霉素(CR1)

                 柠檬醛(CIT1)

                 香茅油(CTR1)

                 cocamidopropyl二甲基甘氨酸(TB1)

                 香叶醇(GRA1)

                 光果甘草提取物(GLY)

                 扁柏酚(HK1)

                 浆果罗勒油(JFB1)

                 刺柏子油(JPE1)

                 柠檬罗勒油(LMB1)

                 柠檬油(LMO1)

                 迷迭香油(ROF1)

    在以下表格中，代表性的抗微生物制剂A和B对应于表2中列出的缩写识别，另外，引用表1中列出的5种微生物时采用表1中列出的缩写。

    根据上述方案，对表2中列出的抗微生物制剂的各种组合进行检测，以确定那些抑制可见的微生物体外生长的制剂的组合，并测定在组合中制剂的最低抑制浓度。另外，根据上述方案测定在两种成分组合中所用的每个抗微生物制剂抑制可见的微生物体外生长的最低浓度，例如MIC。所得结果总结于表3-16中。在每个表中，给出了制剂A单独存在时的最低抑制浓度的平均值。因为根据上述方案，接种并培养了多孔滴定板以确定关于多个组合的信息，在每个实验中，制剂A单独存在时的MIC得到测定所以表3-16中列出的制剂A单独存在时的最低抑制浓度代表这些数值的平均值。表3香柏油单独及与抗微生物制剂B组合时的最低抑制浓度      制剂    当香柏油与制剂B组合时    针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A     B    AV    FN    PG    SM    SS RCI     --    36.5    36.5    7.8    31.3    15.6    +BX1    7.8    2.0    2.0    7.8    2.0    +CR1    7.8    3.9    2.0    2.0    7.8    +CIT1    7.8    7.8    3.9    7.8    2.0    +CTR1    2.0    15.6    3.9    7.8    7.8    +TB1    7.8    15.6    2.0    7.8    31.3    +GRA1    3.9    7.8    2.0    7.8    2.0    +GLY    7.8    15.6    3.9    7.8    3.9    +HK1    15.6    15.6    3.9    7.8    7.8    +JFB1    7.8    15.6    3.9    2.0    3.9    +JPE1    2.0    15.6    3.9    7.8    7.8    +LMB1    2.0    2.0    3.9    7.8    3.9    +LMO1    7.8    15.6    3.9    7.8    3.9    +ROF1    15.6    15.6    3.9    3.9    7.8表4盐酸小檗碱单独及与抗微生物制剂B组合时的最低抑制浓度     制剂  当盐酸小檗碱与制剂B组合时  针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A  B    AV    FN    PG    SM    SS BX1 --    31.9    38.5    11.4    43.3    46.9+RC1    3.9    1 5.6    7.8    3.9    7.8+CR1    3.9    15.6    7.8    2.0    3.9+CIT1    2.0    7.8    2.0    15.6    15.6+CTR1    7.8    2.0    3.9    2.0    3.9+TB1    31.3    31.3    7.8    31.3    15.6+GRA1    3.9    7.8    2.0    7.8    15.6+GLY    15.6    15.6    7.8    15.6    15.6+HK1    7.8    15.6    2.0    31.3    3.9+JFB1    15.6    15.6    2.0    15.6    15.6+JPE1    2.0    7.8    7.8    2.0    3.9+LMB1    2.0    7.8    2.0    3.9    7.8+LMO1    2.0    2.0    2.0    15.6    7.8+ROF1    31.3    2.0    3.9    31.3    2.0表5扁柏酚单独及与抗微生物制剂B组合时的最低抑制浓度     制剂  当扁柏酚与制剂B组合时  针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A B    AV    FN    PG    SM    SS HK1 --    0.8    2.1    2.1    0.8    0.9+BX1    0.2    0.4    1.6    0.1    0.4+RC1    0.2    0.8    0.1    0.2    0.1+CR1    0.2    0.8    0.4    0.2    0.2+CIT1    0.4    0.8    0.8    0.4    0.4+CTR1    0.1    0.1    0.8    0.1    0.4+TB1    1.0    1.0    7.8    1.0    1.0+GRA1    0.1    0.8    0.8    0.8    0.2+GLY    0.4    0.8    0.8    0.8    0.8+JFB1    0.4    0.4    0.4    0.4    0.4+JPE1    0.1    0.2    0.2    0.1    0.4+LMB1    0.1    0.4    0.2    0.1    0.1+LMO1    0.1    0.2    0.8    0.1    0.2+ROF1    0.1    0.1    0.2    0.1    0.4表6光果甘草提取物单独及与抗微生物制剂B组合时的最低抑制浓度     制剂  当光果甘草抽提物与制剂B组合时  针对所测细菌的MIC(μg/ml) A  B    AV    FN    PG    SM    SSGLY --    15.0    15.6    12.1    15.6    6.6+BX1    7.8    3.9    1.0    7.8    3.9+RC1    3.9    2.0    2.0    3.9    3.9+CR1    1.0    1.0    1.0    3.9    2.0+CIT1    1.0    1.0    2.0    1.0    1.0+CTR1    3.9    2.0    3.9    3.9    1.0+TB1    1.0    1.0    7.8    15.6    1.0+GRA1    3.9    3.9    3.9    3.9    1.0+HK1    7.8    3.9    1.0    1.0    1.0+JFB1    1.0    2.0    2.0    1.0    2.0+JPE1    3.9    2.0    3.9    1.0    1.0+LMB1    3.9    3.9    2.0    3.9    1.0+LMO1    2.0    2.0    2.0    3.9    1.0+ROF1    1.0    2.0    1.0    1.0    2.0表7香叶醇单独及与抗微生物制剂B组合时的最低抑制浓度     制剂    当香叶醇与制剂B组合时    针对所测细菌的MIC(μg/ml)   A  B    AV    FN    PG    SM    SS GRA1 --    133.3    82.3    147.9    133.3    127.1+BX1    31.3    31.3    31.3    31.3    31.3+RC1    62.5    15.6    15.6    31.3    31.3+CR1    62.5    31.3    31.3    62.5    31.3+CTR1    15.6    15.6    31.3    31.3    15.6+TB1    12.5    31.3    31.3    12.5    62.5+GLY    62.5    15.6    3.9    62.5    31.3+HK1    31.3    15.6    15.6    3.9    62.5+JFB1    7.8    31.3    15.6    31.3    31.3+JPE1    31.3    15.6    62.5    31.3    15.6+LMB1    31.3    15.6    62.5    31.3    31.3+LMO1    31.3    7.8    62.5    31.3    31.3+ROF1    31.3    31.3    15.6    31.3    31.3表8氯霉素单独及与抗微生物制剂B组合时的最低抑制浓度     制剂  当氯霉素与制剂B组合时  针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A  B    AV    FN    PG    SM    SS CR1 --    5.4    1.8    6.9    5.2    3.2+BX1    3.1    0.2    0.2    3.1    3.1+RC1    0.4    1.6    0.8    3.1    0.8+CIT1    0.2    0.2    0.2    0.2    0.4+CTR1    1.6    0.4    3.1    1.6    1.6+TB1    1.6    0.4    1.6    3.1    0.8+GRA1    0.4    0.2    0.2    0.8    0.4+GLY    3.1    0.8    0.4    1.6    0.8+HK1    3.1    0.8    0.4    3.1    3.1+JFB1    0.2    0.4    1.6    3.1    0.4+JPE1    1.6    0.2    1.6    0.2    0.2+LMB1    1.6    0.4    0.4    3.1    0.2+LMO1    1.6    0.2    0.2    1.6    0.8+ROF1    0.2    0.2    3.1    0.2    0.2表9柠檬醛单独及与抗微生物制剂B组合时的最低抑制浓度    制剂    当柠檬醛与制剂B组合时    针对所测细菌的MIC(μg/ml)     A  B     AV     FN     PG     SM     SS    CIT1 --    212.5    76.1    75.0    171.1    147.9+BX1    31.3    31.3    15.6    31.3    31.3+RC1    125    125    62.5    125    125+CR1    62.5    31.3    15.6    62.5    31.3+CTR1    7.8    3.9    15.6    15.6    15.6+TB1    125    31.3    31.3    62.5    31.3+GLY    125    31.3    1 5.6    125    7.8+HK1    15.6    3.9    15.6    31.3    15.6+JFBI    15.6    15.6    15.6    15.6    15.6+JPE1    31.3    15.6    31.3    31.3    3.3+LMB1    15.6    7.8    7.8    31.3    31.3+LMO1    31.3    15.6    7.8    15.6    3.9+ROF1    62.5    15.6    31.3    62.5    3.9表10香茅油单独及与抗微生物制剂B组合时的最低抑制浓度    制剂    当香茅油与制剂B组合时    针对所测细菌的MIC(μg/ml)   A  B     AV     FN     PG     SM     SS CTR1 --    119.8    76.9    198.4    138.4    156.2+BX1    31.3    31.3    7.8    62.5    31.3+RC1    62.5    7.8    3.9    31.3    31.3+CR1    31.3    15.6    15.6    31.3    3.9+CIT1    62.5    15.6    15.6    62.5    62.5+TB1    62.5    31.3    31.3    125    31.3+GRA1    31.3    31.3    31.3    31.3    31.3+GLY    31.3    31.3    15.6    31.3    62.5+HK1    62.5    31.3    3.9    62.5    7.8+JFB1    31.3    15.6    31.3    31.3    31.3+JPE1    31.3    7.8    31.3    31.3    31.3+LMB1    3.9    15.6    31.3    7.8    7.8+LMO1    3.9    15.6    31.3    15.6    15.6+ROF1    31.3    15.6    15.6    31.3    7.8表11浆果罗勒油单独及与抗微生物制剂B组合时的最低抑制浓度         制剂    当浆果罗勒油与制剂B组合时    针对所测细菌的MIC(μg/ml)    A  B     AV     FN     PG     SM     SS  JFB1 --    89.6    73.7    36.9    95.8    93.8+BX1    62.5    31.3    3.9    31.3    15.6+RC1    62.5    31.3    3.9    62.5    31.3+CR1    31.3    3.9    3.9    3.9    31.3+CIT1    15.6    15.6    15.6    31.3    31.3+CTR1    15.6    15.6    3.9    15.6    15.6+TB1    31.3    31.3    15.6    62.5    62.5+GRA1    31.3    15.6    15.6    15.6    31.3+GLY    62.5    31.3    15.6    62.5    31.3+HK1    62.5    31.3    3.9    62.5    31.3+JPE1    15.6    3.9    3.9    7.8    15.6+LMB1    15.6    3.9    7.8    31.3    15.6+LMO1    15.6    15.6    15.6    15.6    31.3+ROF1    15.6    3.9    3.9    15.6    15.6表12刺柏子油单独及与抗微生物制剂B组合时的最低抑制浓度        制剂    当刺柏子油与制剂B组合时    针对所测细菌的MIC(μg/ml)    A B     AV     FN     PG     SM    SS   JPE1 --    135.4    76.9    231.8    119.8    119.3+BX1    31.3    31.3    7.8    62.5    31.3+RC1    62.5    15.6    3.9    31.3    31.3+CR1    31.3    7.8    15.6    62.5    31.3+CIT1    62.5    15.6    7.8    62.5    31.3+CTR1    31.3    15.6    31.3    31.3    31.3+TB1    125    31.3    15.6    62.5    62.5+GRA1    31.3    15.6    31.3    31.3    31.3+GLY    62.5    31.3    62.5    62.5    31.3+HK1    62.5    31.3    7.8    62.5    15.6+JFB1    31.3    15.6    62.5    31.3    31.3+LMB1    31.3    15.6    62.5    31.3    31.3+LMO1    31.3    15.6    62.5    15.6    31.3+ROF1    62.5    15.6    31.3    31.3    15.6表13柠檬罗勒油单独及与抗微生物制剂B组合时的最低抑制浓度     制剂    当柠檬罗勒油与制剂B组合时    针对所测细菌的MIC(μg/ml)   A B    AV    FN    PG    SM    SS LMB1 --    125    81.7    200.5    130.2    132.8+BX1    31.3    15.6    7.8    31.3    15.6+RC1    62.5    31.3    3.9    15.6    31.3+CR1    31.3    15.6    31.3    7.8    62.5+CIT1    62.5    15.6    15.6    62.5    31.3+CTR1    62.5    15.6    15.6    62.5    62.5+TB1    62.5    15.6    15.6    62.5    31.3+GRA1    15.6    15.6    31.3    31.3    15.6+GLY    31.3    15.6    31.3    62.5    15.6+HK1    31.3    15.6    7.8    31.3    31.3+JFB1    31.3    15.6    15.6    31.3    31.3+JPE1    31.3    15.6    62.5    31.3    15.6+LMO1    31.3    15.6    15.6    31.3    31.3+ROF1    15.6    31.3    31.3    31.3    31.3表14柠檬油单独及与抗微生物制剂B组合时的最低抑制浓度     制剂    当柠檬油与制剂B组合时    针对所测细菌的MIC(μg/ml)   A B     AV     FN     PG     SM     SS LMO1--    173.6    79.9    367.2    153.4    127.9+BX1    62.5    31.3    15.6    62.5    31.3+RC1    62.5    15.6    3.9    62.5    62.5+CR1    31.3    15.6    15.6    31.3    31.3+CIT1    62.5    15.6    31.3    62.5    62.5+CTR1    62.5    15.6    15.6    62.5    62.5+TB1    125    15.6    62.5    125    62.5+GRA1    31.3    7.8    15.6    31.3    31.3+GLY    62.5    31.3    15.6    62.5    31.3+HK1    125    31.3    7.8    125    62.5+JFB1    15.6    15.6    31.3    31.3    31.3+JPE1    31.3    15.6    31.3    31.3    31.3+LMB1    31.3    15.6    15.6    31.3    31.3+ROF1    31.3    31.3    31.3    31.3    31.3表15迷迭香油单独及与抗微生物制剂B组合时的最低抑制浓度        制剂    当迷迭香油与制剂B组合时    针对所测细菌的MIC(μg/ml)     A B     AV     FN     PG     SM     SS    ROF1 --    192.3    72.1    184.9    174.1    132.8+BX1    31.3    31.3    15.6    31.3    62.5+RC1    7.8    15.6    7.8    62.5    31.3+CR1    62.5    31.3    15.6    62.5    31.3+CIT1    62.5    15.6    31.3    62.5    62.5+CTR1    15.6    31.3    62.5    31.3    31.3+TB1    125    31.3    62.5    125    31.3+GRA1    31.3    15.6    31.3    31.3    31.3+GLY    125    31.3    15.6    125    7.8+HK1    125    31.3    7.8    125    15.6+JFB1    31.3    15.6    31.3    31.3    31.3+JPE1    31.3    15.6    15.6    31.3    31.3LMB1    31.3    15.6    15.6    31.3    31.3+LMO1    15.6    15.6    125    15.6    31.3表16 Cocamidopropyl-二甲基甘氨酸单独及与抗微生物制剂B组合时其最低抑制浓度      制剂  当cocamidopropyl-二甲基甘氨酸与制剂B组合时  针对所测细菌的MIC(μg/ml)    A  B     AV     FN     PG     SM     SS    TB1 --    28.9    45.4    16.8    22.8    30.2+BX1    1.0    1.0    7.8    1.0    15.6+RC1    1.0    7.8    2.0    1.0    0.1+CR1    31.3    31.3    3.9    15.6    31.3+CIT1    1.0    7.8    2.0    1.0    15.6+CTR1    7.8    1.0    2.0    1.0    1.0+GRA1    1.0    15.6    2.0    1.0    7.8+GLY    15.6    62.5    3.9    1.0    31.3+HK1    1.0    1.0    7.8    1.0    1.0+JFB1    7.8    1.0    1.0    3.9    1.0+JPE1    1.0    1.0    2.0    1.0    1.0+LMB1    3.9    1.0    3.9    1.0    1.0+LMO1    1.0    3.9    3.9    1.0    1.0+ROF1    3.9    1.0    2.0    1.0    3.9

    本实例阐述了将抗微生物制剂B加入抗微生物制剂A中对抗微生物制剂A的最低抑制浓度的影响。所得结果说明了当与制剂B结合时制剂A的最低抑制浓度低于其单独存在时的最低抑制浓度。实施例2单个抗微生物制剂和组合物中三种抗微生物制剂最低抑制浓度的测定

    本实例阐述了根据本发明配制的三种抗微生物制剂的组合如何抑制可见的口腔微生物的体外生长。此外本实例还描述了组合中抗微生物制剂的最低抑制浓度低于这些抗微生物制剂单独存在时和这些制剂在各种两两配对中的最低抑制浓度。此处描述了抗微生物制剂的大量组合以形成含三种抗微生物制剂的组合或三联组合，每种形成的三联组合包含香柏油、盐酸小檗碱或扁柏酚。

    所用方案是上述实施例1方案的改进。在96孔板的二维方向上进行实验。为了评估三种制剂，针对第三种制剂将其中的两种制剂配对。例如，针对不同浓度的抗微生物制剂C，在96孔板上评估不同浓度的抗微生物制剂A加抗微生物制剂B。针对另外两种可能的配对重复此过程，即A+C与B,B+C与A。这样，对每种三联组合需要三次实验以评估三种可能的配对方式。

    细菌接种物如实施例1所述的得到制备。

    无菌的聚苯乙烯96孔滴定板用于稀释抗微生物制剂A、B和C。使用无菌技术，在每一加样孔中加入100微升蒸馏水。稀释方案分为两部分。首先是组合的制剂A和B的稀释，然后是制剂C的稀释。如下所述进行制剂A和B的稀释：先在每列的第一个孔中加入50微升制剂A的贮备液，再将50微升制剂B的贮备液加入每列的第一个孔中。这样每列的第一个孔中含有50微升制剂A的贮备液和50微升制剂B的贮备液。然后从每列第一个孔取100微升溶液转移到该列的下一个加样孔中，并依次在此列转移下去。每次转移是前一个孔浓度的1/2稀释。

    如下所述进行制剂C的稀释：将100微升制剂C的贮备液加入每行的第一个孔中，然后从每行第一个孔取100微升溶液转移到下一个孔中，并依次在此行的加样孔中转移下去。每次转移是前一个孔浓度的1/2稀释。附图是按上述稀释方案得到的抗微生物制剂A、B和C的浓度图示。每种抗微生物制剂贮备液的起始浓度为每毫升2500微克。如图所示，制剂A和制剂B的浓度在所给列中由上至下降低。制剂C的浓度在每行中由左至右降低。完成制剂C的稀释后，至少有一列含有稀释的制剂A和B和任何制剂C。该列孔用于测定制剂A和制剂B在组合中的最低抑制浓度，另外，将制剂C的贮备液沿一列进行稀释以测定制剂C单独存在时的最低抑制浓度。向每孔中加入80微升与所研究细菌对应的培养基。表1列出了与细菌对应的培养基。

    然后将20微升接种物加入每个孔中，这导致第一孔中制剂A和制剂B的终浓度为贮备液浓度的1/8，制剂C是贮备液浓度的1/4稀释。

    96孔板在根据微生物变化的条件下培养。表1列出了微生物及其特定培养条件，除了表1所列细菌，还用到了直肠弯曲杆菌(CR)。CR的培养基为0.74％(重量/体积比)脑心浸出液，0.01％的酵母提取物，0.2％甲酸钠，0.03％延胡索酸钠，0.005％氯化高铁血红素，和999毫升蒸馏水。CR的培养条件为37℃，厌氧条件下48小时。然后用分光光度计测定滴定板的光密度以确定微生物的生长情况。对于每种制剂，含分光光度计读出值低于0.05OD的最低稀释度的加样孔被认为代表该组合。通过计算起始贮备液的浓度和96孔板中所得稀释度测定每种制剂的最低抑制浓度。

    所得数据总结于表17-35。表17香柏油、柠檬醛和香叶醇单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度      单独制剂1    针对所测细菌的MIC(μg/ml) A    B    C     AV FN PG SM SS RC1           --            -- --           CIT1           -- --            --           GRA1    31.3    125    125 31.3 62.5 62.5 15.6 62.5 62.5 15.6 125 125 125 125 125    制剂A,B&C两两配对2 RC1+CIT1    15.6    31.3 15.6 31.3 7.8 15.6 15.6 31.3 31.3 62.5 RC1+GRA1    15.6    31.3 15.6 31.3 7.8 15.6 15.6 31.3 31.3 62.5 CIT1+GRA1    62.5    62.5 31.3 31.3 31.3 31.3 62.5 62.5 62.5 62.5  制剂A,B&C三联组合3 GRA1              +RC1              +CIT1    7.8    7.8    15.6 31.3 1 2 15.6 1 2 3.9 7.8 15.6 31.3 3.9 7.8 CIT1              +RC1              +GRA1    3.9    7.8    15.6 15.6 3.9 7.8 15.6 1 2 3.9 7.8 15.6 7.8 7.8 15.6 RC1              +CIT              +GRA1             -    7.8    7.8    7.8 15.6 7.8 7.8 3.9 7.8 7.8 7.8 3.9 3.9 7.8 15.6 15.61其左侧表示每种制剂单独使用时的最低抑制浓度；2其左侧表示每种制剂在第二种制剂存在的时最低抑制浓度；3其左侧表示每种制剂在另外两种制剂存在时的最低抑制浓度表18香柏油、盐酸小檗碱和香叶醇单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度      单独制剂1    针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A  B    C AV FN PG SM SS RC1           --            -- --            BX1           -- --            --           GRA1 31.3 31.3 125 62.5 62.5 62.5 15.6 15.6 62.5 31.3 31.3 125 7.8 31.3 125    制剂A,B&C两两配对2 RC1+BX1 15.6 15.6 15.6 15.6 7.8 7.8 15.6 15.6 3.9 3.9 RC1+GRA1 15.6 31.3 15.6 31.3 7.8 15.6 15.6 31.3 7.8 15.6 BX1+GRA1 31.3 62.5 31.3 31.3 15.6 31.3 15.6 31.3 31.3 62.5    制剂A,B&C三联组合3 RC1              +BX1              +GRA1 7.8 3.9 7.8 15.6 7.8 7.8 3.9 3.9 7.8 7.8 2.0 3.9 3.9 3.9 7.8 BX1              +RC1              +GRA1 3.9 7.8 15.6 7.8 3.9 7.8 7.8 1.0 2.0 7.8 7.8 15.6 7.8 3.9 7.8 GRA1              +RC1              +BX1 7.8 7.8 7.8 15.6 3.9 3.9 15.6 1.0 1.0 31.3 7.8 7.8 31.3 1.0 1.0表19红香柏油、盐酸小檗碱和扁柏酚单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度      单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A  B   C AV FN PG SM SS RC1           --            -- --            BX1           -- --            --            HK1 31.3 31.3 0.8 62.5 62.5 1.6 15.6 15.6 3.1 31.3 31.3 0.8 31.3 31.3 0.8  制剂A,B&C两两配对2 RC1+BX1 15.6 15.6 15.6 15.6 7.8 7.8 15.6 15.6 3.9 3.9 RC1+HK1 15.6 0.8 15.6 0.8 15.6 0.4 15.6 0.8 15.6 0.4 BX1+HK1 15.6 0.8 15.6 0.8 15.6 7.8 15.6 0.8 15.6 7.8  制剂A,B&C三联组合3 RC1              +BX1              +HK1 15.6 1.0 0.05 7.8 3.9 0.2 3.9 3.9 2 7.8 3.9 0.2 3.9 3.9 2 RC1              +RC1              +HK1 3.9 7.8 0.4 15.6 1.0 0.05 7.8 1.0 0.05 7.8 7.8 0.4 15.6 1.0 0.05 HK1              +RC1              +BX1 0.2 7.8 7.8 0.4 3.9 3.9 0.8 3.9 3.9 0.2 7.8 7.8 0.4 1.0 1.0表20红香柏油、盐酸小檗碱和浆果罗勒油单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度   单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A  B  C AV FN PG SM SS RC1          --          -- --           BX1         -- --           --         JFB1 15.6 62.5 125 31.3 62.5 62.5 62.5 15.6 62.5 15.6 31.3 125 15.6 62.5 125  制剂A,B&C两两配对2 RC1 BX1 15.6 15.6 15.6 15.6 7.8 7.8 15.6 15.6 7.8 7.8 RC1+JFB1 7.8 15.6 2.0 31.3 1.0 2.0 7.8 15.6 1.0 2.0 BX1+JFB1 31.3 62.5 15.6 31.3 7.8 15.6 15.6 31.3 15.6 31.3  制剂A,B&C三联组合3 RC1               BX1             +JFB1 7.8 15.6 31.3 7.8 3.9 7.8 7.8 2.0 3.9 7.8 7.8 15.6 7.8 3.9 7.8 BX1               RC1          -              +JFB1 15.6 7.8 15.6 15.6 2.0 3.9 3.9 1.0 2.0 7.8 7.8 15.6 31.3 1.0 2.0 JFB1              +RC1              +BX1 62.5 1.0 1.0 15.6 2.0 3.9 15.6 2.0 2.0 62.5 1.0 1.0 62.5 2.0 2.0表21香柏油、扁柏酚和香叶醇单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度    单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A  B  C AV FN PG SM SS RC1          --            -- --           HK1           -- --           --            GRA1 7.8 0.8 125 62.5 3.1 125 7.8 1.6 62.5 15.6 0.8 125 15.6 0.8 125  制剂A,B&C两两配对2 RC1+HK1 15.6 0.8 15.6 0.8 15.6 0.8 15.6 0.8 7.8 0.4 RC1+GRA1 31.3 62.5 15.6 31.3 7.8 15.6 7.8 15.6 15.6 31.3 HK1+GRA1 0.8 31.3 0.8 31.3 0.8 31.3 0.8 31.3 0.8 31.3  制剂A,B&C三联组合3 RC1             +HK1             +GRA1 3.9 0.2 7.8 15.6 0.05 2.0 3.9 0.1 3.9 3.9 0.1 3.9 7.8 0.05 2.0 HK1             +RC1             +GRA1 0.1 15.6 31.3 1.6 2.0 3.9 0.4 2.0 3.9 0.4 2.0 3.9 0.1 7.8 15.6 GRA1             +RC1             +HK1 15.6 7.8 0.4 31.3 2.0 0.1 62.5 3.9 0.2 7.8 7.8 0.4 62.5 1.0 0.5表22香柏油、扁柏酚和柠檬醛单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度      单独制剂1    针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A  B    C AV FN PG SM SS RC1           --           -- --            HK1          -- --            --          CIT1 7.8 0.8 125 62.5 3.1 125 15.6 1.6 62.5 15.6 0.8 125 15.6 1.6 125    制剂A,B&C两两配对2 RC1+HK1 15.6 0.8 15.6 0.8 7.8 0.4 15.6 0.8 7.8 0.8 RC1+CIT1 31.3 62.5 15.6 31.3 7.8 15.6 15.6 31.3 15.6 31.3 HK1+CIT1 0.8 31.3 0.8 31.3 0.4 15.6 0.8 31.3 0.8 31.3    制剂A,B&C三联组合3RC1              +HK1              +CIT1 3.9 0.2 7.8 15.6 0.05 2.0 3.9 0.1 3.9 3.9 0.2 7.8 7.8 0.1 3.9 HK1              +RC1              +CIT1 0.1 15.6 31.3 0.8 3.9 7.8 0.4 2.0 3.9 0.4 7.8 15.6 0.4 3.9 7.8 CIT1              +RC1              +HK1 7.8 7.8 0.4 31.3 2.0 0.1 3.9 3.9 0.2 7.8 7.8 0.4 62.5 1.0 0.1表23香柏油、扁柏酚和浆果罗勒油单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度    单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml) A   B   C AV FN PG SM SS RC1           --             -- --            HK1            -- --            --             JFB1 7.8 0.8 125 62.5 3.1 125 7.8 3.1 15.6 31.3 0.8 62.5 15.6 0.8 125    制剂A,B&C两两配对2 RC1+HK1 15.6 0.8 15.6 0.8 7.8 0.4 15.6 0.8 7.8 0.4 RC1+JFB1 31.3 62.5 15.6 31.3 3.9 7.8 15.6 31.3 15.6 31.3 HK1+JFB1 0.8 31.3 0.8 31.3 0.4 15.6 0.8 31.3 0.4 15.6    制剂A,B&C三联组合3 RC1              +HK1              +JFB1 3.9 0.4 15.6 15.6 0.2 7.8 3.9 0.1 3.9 15.6 0.05 2.0 7.8 0.1 3.9 HK1              +RC1              +JFB1 0.2 7.8 15.6 0.8 3.9 7.8 0.8 1.0 2.0 0.4 7.8 15.6 0.4 2.0 3.9 JFB1              +RC1              +HK1 62.5 3.9 0.2 31.3 3.9 0.2 7.8 1.0 0.05 15.6 7.8 0.4 31.3 2.0 0.1表24香柏油、盐酸小檗碱和柠檬醛单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度    单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml) A   B    C AV FN PG SM SS RC1           --            -- --            BX1           -- --            --           CIT1 15.6 62.5 125 62.5 62.5 125 7.8 15.6 125 15.6 62.5 125 15.6 62.5 125    制剂A,B&C两两配对2 RC1+BX1 15.6 15.6 31.3 31.3 3.9 3.9 7.8 7.8 15.6 15.6 RC1+CIT1 31.3 62.5 15.6 31.3 7.8 15.6 15.6 31.3 15.6 31.3 BX1+CIT1 31.3 62.5 1 5.6 31.3 7.8 15.6 15.6 31.3 31.3 62.5    制剂A,B&C三联组合3RC1               +BX1               +CIT1 7.8 2.0 3.9 15.6 3.9 7.8 3.9 1.0 2.0 7.8 2.0 3.9 7.8 3.9 7.8BX1               +RC1               +CIT1 31.3 7.8 15.6 15.6 3.9 7.8 3.9 2.0 3.9 15.6 3.9 7.8 31.3 1.0 2.0CIT1               +RC1                BX1 62.5 3.9 3.9 62.5 3.9 3.9 31.3 1.0 1.0 62.5 1.0 1.0 31.3 3.9 3.9表25盐酸小檗碱、扁柏酚和香叶醇单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度     单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A  B  C AV FN PG SM SS BX1          --            -- --           HK1           -- --           --           GRA1 62.5 0.8 125 62.5 3.1 125 15.6 1.6 125 62.5 0.8 125 62.5 0.8 250  制剂A,B&C两两配对2 BX1+HK1 15.6 0.8 15.6 0.8 7.8 0.4 15.6 0.8 15.6 0.8 BX1+GRA1 31.3 62.5 31.3 62.5 7.8 15.6 62.5 62.5 31.3 62.5 HK1+GRA1 0.8 31.3 1.6 62.5 0.8 31.3 0.8 31.3 0.8 31.3  制剂A,B&C三联组合3 BX1              +HK1              +GRA1 31.3 0.2 7.8 15.6 0.4 15.6 7.8 0.05 2 31.3 0.05 2 31.3 0.2 7.8 HK1              +BX1              +GRA1 0.4 15.6 31.3 0.8 7.8 15.6 0.4 2 3.9 0.4 15.6 31.3 0.4 7.8 15.6 GRA1              +BX1              +HK1 62.5 7.8 0.4 31.3 2 0.1 31.3 1 0.05 62.5 7.8 0.4 31.3 3.9 0.2表26盐酸小檗碱、扁柏酚和浆果罗勒油单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度    单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml) A   B   C AV FN PG SM SS BX1            --           -- --             HK1          -- --             --          JFB1 62.5 0.8 125 62.5 3.1 125 15.6 1.6 31.3 62.5 0.8 62.5 62.5 1.6 7.8 制剂A,B&C两两配对2 BX1+HK1 15.6 0.8 31.3 1.6 15.6 0.8 15.6 0.8 15.6 0.8 BX1+JFB1 31.3 62.5 31.3 62.5 7.8 15.6 31.3 62.5 31.3 62.5 HK1+JFB1 0.8 31.3 1.6 62.5 0.2 7.8 0.8 31.3 0.8 31.3  制剂A,B&C三联组合3 BX1               +HK1               +JFB1 31.3 0.2 7.8 15.6 0.4 15.6 3.9 0.05 2 31.3 0.05 2 31.3 0.1 3.9 HK1               +BX1               +JFB1 0.4 15.6 31.3 0.8 7.8 15.6 0.4 2 3.9 0.4 7.8 15.6 0.8 3.9 7.8 JFB1               +BX1               +HK1 62.5 1 1 31.3 7.8 0.4 7.8 3.9 0.2 15.6 7.8 0.4 3.9 2 0.1表27盐酸小檗碱、扁柏酚和柠檬醛单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度     单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A  B  CAV FN PG SM SS BX1          --           -- --           HK1          -- --           --          CIT1 62.5 0.8 125 62.5 3.1 125 15.6 1.6 31.3 62.5 0.8 250 125 0.8 125 制剂A,B&C两两配对2 BX1+HK1 15.6 0.8 31.3 1.6 7.8 0.2 15.6 0.8 15.6 0.8 BX1+CIT1 31.3 62.5 31.3 62.5 7.8 15.6 31.3 62.5 31.3 62.5 HK1+CIT1 0.8 31.3 1.6 62.5 0.4 15.6 0.8 31.3 0.8 31.3  制剂A,B&C三联组合3 BX1             +HK1             +CIT1 31.3 0.2 7.8 1 5.6 0.4 15.6 3.9 0.1 3.9 313 0.05 2 31.3 0.2 7.8 HK1             +BX1             +CIT1 0.4 15.6 31.3 0.8 7.8 15.6 0.4 3.9 7.8 0.4 15.6 31.3 0.4 3.9 7.8 CIT1             +BX1             +HK1 62.5 3.9 0.2 31.3 7.8 0.4 7.8 2 0.05 125 1 0.05 62.5 1 0.05表28扁柏酚、香叶醇和柠檬醛单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度     单独制剂1针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A  B  C AV FN PG SM SS HK1          --           -- --          GRA1          -- --           --          CIT1 1.6 125 125 1.6 62.5 62.5 1.6 62.5 62.5 0.8 125 125 0.8 125 125  制剂A,B&C两两配对2 HK1+GRA1 0.8 31.3 0.8 31.3 1.6 31.3 0.8 31.3 0.8 31.3 HK1+CIT1 0.8 31.3 0.8 31.3 1.6 31.3 0.8 31.3 0.8 31.3 GRA1+CIT1 62.5 62.5 31.3 31.3 31.3 31.3 62.5 62.5 31.3 31.3  制剂A,B&C三联组合3 HK1            +GRA1            +CIT1 0.4 15.6 15.6 0.4 15.6 15.6 0.4 7.8 7.8 0.4 31.3 31.3 0.4 15.6 15.6 GRA1            +HK1            +CIT1 125 0.05 2 15.6 0.4 15.6 15.6 0.4 7.8 62.5 0.4 15.6 31.3 0.2 7.8 CIT1            +HK1            +GRA1 62.5 0.4 15.6 7.8 0.4 15.6 15.6 0.4 7.8 62.5 0.4 15.6 7.8 0.4 15.6表29香柏油、香叶醇和浆果罗勒油单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度单独制剂1针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A  B  C AV FN PG SM SS RC1         --          -- --         GRA1         -- --          --         JFB1 31.3 62.5 125 31.3 62.5 62.5 7.8 62.5 15.6 31.3 125 125 31.3 62.5 62.5制剂A,B&C两两配对2 RCI+GRA1 15.6 31.3 15.6 31.3 7.8 15.6 15.6 31.3 15.6 31.3 RC1+JFB1 15.6 31.3 15.6 31.3 3.9 7.8 7.8 15.6 7.8 15.6 GRA1+JFB1 31.3 31.3 31.3 31.3 15.6 15.6 62.5 62.5 31.3 31.3  制剂A,B&C三联组合3RC1             +GRA1             +JFB1 15.6 2 2 15.6 2 2 3.9 3.9 3.9 3.9 31.3 31.3 7.8 7.8 7.8 GRA1             +RC1          -             +JFB1 15.6 3.9 7.8 31.3 2 3.9 15.6 1 2 31.3 2 3.9 15.6 2 3.9 JFB1             +RC1             +GRA1 62.5 1 2 15.6 3.9 7.8 7.8 1 2 62.5 3.9 7.8 15.6 3.9 7.8表30香柏油、浆果罗勒油和柠檬醛单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度    单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml) A   B  C AV FN PG SM SS RC1          --           -- --           JFB1         -- --           --          CIT1 31.3 125 125 31.3 62.5 62.5 7.8 250 250 31.3 125 125 31.3 62.5 62.5  制剂A,B&C两两配对2 RC1+JFB1 31.3 62.5 15.6 31.3 7.8 15.6 15.6 31.3 7.8 15.6 RC1+CIT1 15.6 31.3 15.6 31.3 62.5 125 15.6 31.3 15.6 31.3 JFB1+CIT1 31.3 31.3 31.3 31.3 15.6 15.6 62.5 62.5 31.3 31.3  制剂A,B&C三联组合3 RC1              +JFB1              +CIT1 15.6 2 2 3.9 15.6 15.6 2 3.9 3.9 3.9 31.3 31.3 7.8 7.8 7.8JFB1              +RC1              +CIT1 62.5 1 2 7.8 7.8 15.6 7.8 31.3 62.5 62.5 2 3.9 3.9 7.8 15.6CIT1              +RC1              +JFB1 62.5 2 3.9 31.3 1 2 62.5 2 3.9 62.5 2 3.9 15.6 2 3.9表31盐酸小檗碱、浆果罗勒油和柠檬醛单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度     单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A  B  C AV FN CR SM SS BX1          --          -- --          JFB1         -- --           --         CIT1 31.3 62.5 125 31.3 125 62.5 125 250 31.3 31.3 62.5 125 31.3 62.5 125  制剂A,B&C两两配对2 BX1+JFB1 31.3 62.5 15.6 31.3 3.9 7.8 31.3 62.5 31.3 62.5 BX1+CIT1 31.3 62.5 15.6 31.3 62.5 125 31.3 62.5 15.6 31.3 JFB1+CIT1 31.3 31.3 31.3 31.3 125 125 31.3 31.3 31.3 31.3  制剂A,B&C三联组合3BX1            +JFB1            +CIT1 7.8 15.6 15.6 3.9 15.6 15.6 62.5 3.9 3.9 7.8 5.6 15.6 7.8 7.8 7.8JFB1            +BX1            +CIT1 15.6 7.8 15.6 31.3 3.9 7.8 15.6 31.3 62.5 15.6 7.8 15.6 15.6 3.9 7.8 CIT1            +BX1            +JFB1 15.6 15.6 31.3 31.3 1 2 7.8 1 2 1 5.6 15.6 31.3 31.3 7.8 15.6表32盐酸小檗碱、浆果罗勒油和香叶醛单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度     单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml) A   B    C AV FN CR SM SS BX1           --           -- --            JFB1         -- --            --          GRA1 62.5 125 125 62.5 125 125 125 250 250 62.5 125 125 62.5 125 250  制剂A,B&C两两配对2 BX1+JFB1 31.3 62.5 15.6 31.3 62.5 125 31.3 62.5 31.3 62.5 BX1+GRA1 31.3 62.5 15.6 31.3 62.5 125 31.3 62.5 31.3 62.5 JFB1+GRA1 62.5 62.5 31.3 31.3 125 125 62.5 62.5 62.5 62.5  制剂A,B&C三联组合3 BX1              +JFB1              +GRA1 15.6 15.6 15.6 15.6 2 2 62.5 2 2 15.6 15.6 15.6 15.6 15.6 15.6 JFB1              +BX1              +GRA1 31.3 7.8 15.6 31.3 2 3.9 31.3 31.3 62.5 31.3 7.8 15.6 31.3 7.8 15.6 GRA1              +BX1              +JFB1 31.3 7.8 15.6 31.3 1 2 31.3 15.6 31.3 31.3 7.8 15.6 31.3 7.8 15.6表33盐酸小檗碱、柠檬醛和香叶醇单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度     单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml) A   B   C AV FN CR SM SS BX1           --          -- --           CIT1         -- --            --         GRA1 62.5 125 250 62.5 125 125 125 250 250 62.5 125 125 62.5 125 125    制剂A,B&C两两配对2 BX1+CIT1 31.3 62.5 31.3 62.5 62.5 125 31.3 62.5 15.6 31.3 BX1+GRA1 31.3 62.5 15.6 31.3 62.5 125 15.6 31.3 15.6 31.3 CIT1+GRA1 62.5 62.5 62.5 62.5 125 125 62.5 62.5 31.3 31.3  制剂A,B&C三联组合3 BX1              +CIT1              +GRA1 31.3 15.6 15.6 15.6 7.8 7.8 31.3 31.3 31.3 15.6 15.6 15.6 15.6 7.8 7.8 CIT1              +BX1              +GRA1 62.5 15.6 31.3 62.5 2 3.9 7.8 31.3 62.5 62.5 1 2 15.6 3.9 7.8 GRA1              +BX1              +CIT1 62.5 7.8 15.6 31.3 2 3.9 62.5 7.8 15.6 62.5 7.8 15.6 31.3 1 2表34扁柏酚、浆果罗勒油和柠檬醛单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度   单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml) A  B    C AV FN CR SM SS HK1          --            -- --          JFB1           -- --           --           CIT1 0.8 250 125 3.1 125 125 3.2 500 500 0.8 125 125 0.8 125 125  制剂A,B&C两两配对2 HK1+JFB1 0.8 31.3 1.6 62.5 3.2 125 0.8 31.3 0.8 31.3 HK1+CIT1 0.8 31.3 0.8 31.3 3.2 125 0.8 31.3 0.8 31.3 JFB1+CIT1 31.3 31.3 31.3 31.3 125 125 31.3 31.3 62.5 62.5  制剂A,B&C三联组合3 HK1             +JFB1             +CIT1 0.4 15.6 15.6 1.6 2 2 1.6 15.6 15.6 0.4 15.6 15.6 0.4 15.6 15.6 JFB1             +HK1             +CIT1 62.5 0.4 7.8 31.3 0.4 15.6 3.9 1.6 62.5 62.5 0.1 3.9 31.3 0.2 7.8 CIT1             +HK1             +JFB1 31.3 0.2 7.8 31.3 0.4 15.6 7.8 1.6 62.5 62.5 0.05 2 31.3 0.2 7.8表35扁柏酚、浆果罗勒油和香叶醇单独使用，两两配对及在组合中的最低抑制浓度     单独制剂1  针对所测细菌的MIC(μg/ml)  A  B  C AV FN CR SM SS HK1          --           -- --          JFB1          -- --           --          GRA1 0.8 125 125 3.1 125 125 3.1 250 250 0.8 125 125 0.8 125 125  制剂A,B&C两两配对2 HK1+JFB1 0.8 31.3 1.6 62.5 3.1 125 0.8 31.3 0.8 31.3 HK1+GRA1 0.8 31.3 1.6 62.5 0.8 62.5 1.6 31.3 0.8 31.3 JFB1+GRA1 31.3 31.3 31.3 31.3 125 125 62.5 62.5 62.5 62.5  制剂A,B&C三联组合3 HK1             +JFB1             +GRA1 0.4 7.8 7.8 1.6 7.8 7.8 1.6 3.9 3.9 0.1 31.3 31.3 0.4 15.6 15.6 JFB1             +HK1             +GRA1 31.3 0.2 7.8 31.3 0.4 15.6 62.5 0.8 31.3 62.5 0.1 3.9 62.5 0.05 2GRA1             +JFB1             +HK1 62.5 3.9 0.1 31.3 15.6 0.4 62.5 31.3 0.8 62.5 7.8 0.2 62.5 3.9 0.1

    本实施例举例说明抗微生物制剂A、B和C在组合中的最低抑制浓度低于在缺少其它抗微生物制剂时单独抗微生物制剂的最低抑制浓度。实施例3牙膏配方

    以下实施例描述了根据本发明配制的含抗微生物制剂A、B和C的牙膏。表36配方18-12∶0.2％香柏油，0.1％浆果罗勒油,0.02％柠檬醛(重量比)    成分 重量百分比(％)水中70％山梨醇    39.72波洛沙姆407(PLURONICF127)    5.0去离子水    25.901卡波姆940(CARBOPOL940)    0.3氢氧化钠    0.205黄原胶    0.40甘油    2.5氟化钠    0.254糖精钠    0.400 SYLODENT750(二氧化硅)    10.0SYLODENT15(二氧化硅)    12.0香味剂    1.0二氧化肽    0.50十二烷基磺酸钠    1.5香柏油    0.200浆果罗勒油    0.100柠檬醛    0.020表37配方18-36∶0.4％香柏油，0.01％小檗碱(重量比)    成分 重量百分比(％)水中70％山梨醇    40.050泊洛沙姆407(PLURONICF127)    5.0去离子水    25.386卡波姆940(CARBOPOL940)    0.3氢氧化钠    0.2黄原胶    0.4甘油    5.0氟化钠    0.254糖精钠    0.800SYLODENT750(二氧化硅)    10.0SYLODENT15(二氧化硅)    10.0香柏油    0.40水合盐酸小檗碱    0.01香味剂    1.00FD&C蓝色#1,1％溶液    0.2十二烷基磺酸钠    1.00表38配方18-35∶0.4％香柏油，0.1％香叶醇和0.01％小檗碱(w/w)    成分 重量百分比(％)山梨醇70％    40.05去离子水    24.486水合盐酸小檗碱    0.01卡波姆940(CARBOPOL940)    0.30泊洛沙姆407(PLURONICF127)    5.00氢氧化钠    0.20黄原胶    0.40氟化钠    0.254糖精钠    0.80SYLODENT750(二氧化硅)    10.0SYLODENT15(二氧化硅)    10.0香味剂    1.0二氧化钛    1.0十二烷基磺酸钠    1.0甘油    5.0香柏油    0.4香叶醇    0.10表39配方18-37∶0.4％香柏油，0.1％香叶醇和0.05％柠檬醛(重量比)    成分 重量百分比(％)水中70％山梨醇    40.050泊洛沙姆407(PLURONICF127)    5.0去离子水    25.246卡洛姆940(CARBOPOL940)    0.3氢氧化钠    0.2黄原胶    0.4甘油    5.0氟化钠    0.254糖精钠    0.800SYLODENT750(二氧化硅)    10.0SYLODENT15(二氧化硅)    10.0香柏油    0.40香叶醇    0.10柠檬醛    0.050香味剂    1.00FD&C蓝色#1,1％溶液    0.2十二烷基磺酸钠    1.00

    卡波姆是指由丙稀酸与丙稀基蔗糖交联组成的多聚体，所得到的如CARBOPOL940。CARBOPOL904是B.F.Goodrich公司的产品，SYLODENT750和SYLODENT15是硅胶(二氧化硅)。SYLODENT可从W.R.Grace&Co.-Conn.Davison Chemical Division购买。表40配方18-58∶0.4％香柏油，0.1％香叶醇(重量比)    成分 重量百分比(％)山梨醇70％    40.05去离子水    25.286盐酸小檗碱水合物    0.01卡波姆940(CARBOPOL940)    0.3波洛沙姆407(PLURONICF127)    5.0氢氧化钠    0.2黄原胶    0.4氟化钠    0.254糖精钠    0.8SYLODENT750(二氧化硅)    10.0SYLODENT15(二氧化硅)    10.0香味剂    1.0FD&C Blue#1,1％溶液    0.2十二烷基磺酸钠    1.0甘油    5.0香柏油    0.4香叶醇    0.1

    泊洛沙姆407可从BASF公司得到，商标为PLURONICF127。PLURONICF127是一种非离子的双功能嵌断共聚物，在伯羟基团上终止，分子量在1,000至约15,000之间变动。它们包括丙二醇的聚氧乙烯衍生物。

    在真空混合器中配制如上配制物，抽真空的同时，加入去离子水并分散卡波姆，当卡波姆很好混匀后，加入氢氧化钠。在另一个容器中，将70％的山梨醇和泊洛沙姆加热并混匀。随后将泊洛沙姆溶液加入真空混合器并与卡波姆混合物混合。将黄原胶加入甘油中，将所得溶液加入真空混合器并掺入混合物中。然后将盐类加入真空混合器中，缓慢混入二氧化硅。随后加入活性成分、香味剂、十二烷基磺酸钠及着色剂，使之混匀直至完全分散。实施例4用户认可

    本实施例说明了根据本发明配制的含抗微生物制剂A、B和选择性地C的组合的牙膏的用户认可程度。

    对表36-40列出的配方进行用户认可评估。配方5-99是一种商品牙膏，名为ListerineCool Mint gel。

    对一组约20人进行偏爱研究。每人发给一管牙膏配制物并使用一周。参与者在周末填写一个问卷表，结果总结于下表41中。评分范围为1-10，其中1表示差，10表示好。记录并计算评分的平均值。表41    用户评价配方18-12 18-36 18-55 18-37 18-58 5-99颜色6.61 6.52 3.20 7.13 7.17 7.25外表6.27 6.74 3.75 6.91 6.89 6.75味道5.09 4.96 5.05 4.17 6.50 4.00余味5.22 5.13 5.20 4.48 6.50 3.85香味5.00 6.35 5.35 4.52 6.94 4.55洁净6.22 6.48 5.95 6.39 6.78 6.10泡沫6.22 6.30 6.00 6.19 6.00 5.85稠度6.09 6.39 6.25 6.04 5.67 5.75口干6.09 6.26 7.05 6.78 7.94 5.70次日晨感觉5.43 5.87 5.50 5.28 6.33 5.15总口感5.61 5.78 5.80 5.57 6.61 4.45总满意度5.04 5.37 5.20 5.53 6.44 4.20

    本实例说明含有根据本发明的抗微生物制剂的配制物的用户总满意度，优于商业产品ListerineCool Mint gel的用户总满意度。实施例5光果甘草的乙醇提取

    将25克光果甘草植物材料粉未与250克95∶5的乙醇/水混合物组合，室温下将混合物搅拌过夜，在布氏漏斗中用Whatman4号滤纸滤除混合物中的固体，随后用Whatman5号滤纸在布氏漏斗中进一步除去固体。用Whatman 1μm滤膜在布氏漏斗中除去其它的固体。最后用真空泵装置和0.2微米滤膜使溶液澄清。澄清溶液用旋转蒸发器浓缩得到固体。大约得到2.5克赭色固体，为光果甘草粗取物。

    虽然本文说明并描述了发明的优选实施方案，但可预期在不超出本发明的精神和范围的情况下可进行各种修改。