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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201410633867.0(22)申请日 2014.11.12C12N 1/14(2006.01)C12R 1/645(2006.01)(71)申请人 新疆维吾尔自治区和田蚕桑科学研究所地址 848000 新疆维吾尔自治区和田地区和田市玉龙喀什路 52 号申请人 新疆和田玉圣科技有限责任公司(72)发明人 卢红 左少纯 吴丽莉 丁天龙印玉萍 蒲彬 依沙古丽 叶瑞兴刘和洋 钟白琼(74)专利代理机构 乌鲁木齐市禾工专利代理事务所 65108代理人 何冰(54) 发明名称新疆沙漠桑生物菌剂及其生产技术(57) 摘要本发明涉及一种新疆沙漠桑生。
2、物菌剂及其生产技术，是以沙漠桑须根及根际土壤混合物为母种源 AMF 母种群落，以蛭石、河沙为培养基质，以母种源提取的孢子形成的植株根系，最终混合形成一种植株根系及培养基质的混合物。通过采集AMF 母种群落的土壤混合物为母种源，将母种源加水打碎，筛出混合 AMF 孢子群落，并清洁孢子，放入穴盘内接种，接种后放置培养，培养完毕后进行菌剂扩繁。当打孔抽样检测孢子密度达到4555 个 /g 时，即可进行收获。本发明可以有效增强应对干旱、盐碱、高温高寒巨大温差及土壤贫瘠等恶劣生态环境的抵抗能力，对于新疆沙漠桑荒漠化防治、生态修复工程建设具有重要的意义。(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识。
3、产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书3页 附图1页(10)申请公布号 CN 104480020 A(43)申请公布日 2015.04.01CN 104480020 A1/1 页21.一种新疆沙漠桑生物菌剂及其生产技术，其特征在于 ：其是以沙漠桑须根及根际土壤混合物为母种源 AMF 母种群落，以蛭石、河沙为培养基质，以母种源提取的孢子形成的植株根系，最终混合形成一种植株根系及培养基质的混合物。2.如权利要求 1 所述的新疆沙漠桑生物菌剂生产技术，其特征在于 ：其包括以下步骤：沙漠桑 AMF 母种园的建立 ；母种菌群检测与采集 ：采集 AMF 母种群落的土壤混合物为母种源 ；孢子分离清。
4、洁与提取 ：将母种源加水打碎，用湿筛法筛出混合 AMF 孢子群落，并清洁孢子 ；定量接种 ：清洁后孢子放入以蛭石、河沙为培养基质的穴盘内接种 ；菌剂初培养 ：接种后放置在恒温环境中培养，间隔浇灌营养液 ；菌剂扩繁 ：培养完毕后且长势一致的苗带基质放入菌剂扩繁水泥池进行菌剂扩繁 ；品质检测 ：当打孔抽样检测孢子密度达到 45 55 个 /g 时，即可进行收获。3.如权利要求 2 所述的新疆沙漠桑生物菌剂生产技术，其特征在于 ：步骤中选取沙漠戈壁地带，滴灌栽植 10 20 亩沙漠桑，株距 0.5 1m，行距 1 1.5m，在保证存活水份的条件下，自然生长，培育 AMF，形成沙漠桑区域土著 AMF 。
5、母种群落。4.如权利要求 2 所述的新疆沙漠桑生物菌剂生产技术，其特征在于 ：步骤中以三年以上沙漠桑 AMF 母种园为采集地，采集地表以下 15 25cm 处须根及根际土壤混合物为母种源。5.如权利要求 2 所述的新疆沙漠桑生物菌剂生产技术，其特征在于 ：步骤中将采回的须根及根际土壤混合物（母种源）在食品搅拌机中加水打碎，用湿筛法筛出混合 AMF 孢子群落，并在体视显微镜下清洁孢子，逐一将孢子集中于盛有蒸馏水溶液的密闭容量瓶中，使孢子密度达 40 50 个 /ml。6.如权利要求 2 所述的新疆沙漠桑生物菌剂生产技术，其特征在于 ：步骤中以灭菌后的蛭石 : 河沙（质量比 3:1）为培养基质，以。
6、高梁为宿主，50 穴穴盘为容器，将 60% 水份湿度的前述培养基质填充穴盘，在其中每穴接种 1ml 混合孢子，然后每穴播种 4 个种子培养。7.如权利要求 2 所述的新疆沙漠桑生物菌剂生产技术，其特征在于 ：步骤中将接种后的穴盘于在下恒温自然光线下培养25天左右，每周或每2周浇灌一次浇灌1/5 浓度的 Hoaglang 营养液。8.如权利要求 2 所述的新疆沙漠桑生物菌剂生产技术，其特征在于 ：步骤中将灭菌后的蛭石 : 河沙（质量比 1:1）混合，形成培养基质，并加入去 1/2 磷标准 Hoaglang 营养液，使湿度达 50 70%，放入深 50cm 的菌剂扩繁水泥池中，将初培养长势一致的苗。
7、带基质移栽至池中，移栽密度为 50 穴 /m2，培养温度 20 30，光照度在 8000-10000Lx 每日 14h, 每周或每 2 周浇灌一次浇灌去 1/2 磷标准 Hoaglang 营养液，培养 100 130 天。9.如权利要求 2 所述的新疆沙漠桑生物菌剂生产技术，其特征在于 ：在步骤可以收获前处理 ：收获前剪去植株，充分通风，控水 1 2 周。10.如权利要求 2 所述的新疆沙漠桑生物菌剂生产技术，其特征在于 ：在步骤菌剂产品收获后 ：最后在无菌台上，将植株根系及基质混合物充分粉碎混合，干燥定量装袋低温保存。权 利 要 求 书CN 104480020 A1/3 页3新疆沙漠桑生物菌。
8、剂及其生产技术技术领域0001 本发明涉及一种适合新疆沙漠戈壁边缘干旱地区中使用的以建设桑树生态林为目的生物肥料及其生产技术，属农林技术领域。背景技术0002 土地荒漠化及引起的土地沙化是全球关注的重大环境问题。新疆维吾尔自治区是我国土地荒漠化和沙化的重灾地区，脆弱的生态环境已成为制约新疆经济、社会发展的瓶颈之一，防治荒漠化是目前新疆生态建设刻不容缓的任务，其中绿化修复是对荒漠化土地的有效治理措施之一。由于绿化修复工程的造林苗木不仅将面临干旱、土壤盐碱化和养分贫瘠等自然因素的胁迫与影响，而且对根系欠发达的造林苗木的移栽还会造成根部损伤，这些都直接影响着绿化苗木的成活率及整体造林效果。丛枝菌根真。
9、菌（Arbuscular mycorrhizal fungi，AMF）是土壤中广泛存在的一种真菌，能侵染大多数植物根系与之形成互惠共生的丛枝菌根（Arbuscular mycorrhizal ，AM）。近年的研究表明，AM 在植物逆境生理中发挥特殊作用可以通过改善土壤理化性状、根围微生物区系、调节植物间及植物与昆虫关系来改善植物生态环境，同时可以改变植物形态结构，促进植物水分和养分的吸收利用，提高植物酶活性及诱导信号物质和次生物质的产生，诱导植物防卫基因表达，从而增强植物对干旱、水涝、高温、高盐、严寒、重金属毒害、病害和有机毒物等的抗性，以及促进宿主植物生长发育等。丛枝菌根真菌作为生物肥料和生。
10、物防治剂，已广泛应用于绿化造林、盐碱地改良等。0003 桑树是丛枝菌根植物 , 而新疆沙漠桑是荒漠化防治的优势树种，对新疆沙漠化、沙化地带干旱、盐碱、温差大等自然及土壤环境具有较强的适应性。利用新疆本土沙漠桑接种土著 AMF，用于沙漠桑造林生物肥料或培育专用沙漠桑菌根树苗，建立桑树生态技术体系，增强应对干旱、盐碱、高温高寒巨大温差及土壤贫瘠等恶劣生态环境的抵抗能力，对于新疆荒漠化防治、生态修复工程建设具有重要的意义。发明内容0004 本发明的目的是提供一种新疆沙漠戈壁边缘干旱地区桑树生态造林的生物肥料及其生产技术工艺。0005 本发明的目的是这样实现的 ：新疆沙漠桑生物菌剂其是以沙漠桑须根及根。
11、际土壤混合物为母种源 AMF 母种群落，以蛭石、河沙为培养基质，以母种源提取的孢子形成的植株根系，最终混合形成一种植株根系及培养基质的混合物。0006 本发明通过采集 AMF 母种群落的土壤混合物为母种源，将母种源加水打碎，用湿筛法筛出混合 AMF 孢子群落，并清洁孢子。清洁后孢子放入以蛭石、河沙为培养基质的穴盘内接种，接种后放置在恒温环境中培养，间隔浇灌营养液。培养完毕后且长势一致的苗带基质放入菌剂扩繁水泥池进行菌剂扩繁。当打孔抽样检测孢子密度达到 45 55 个 /g 时，即可进行收获。收获前剪去植株，充分通风，控水 1 2 周。最后在无菌台上，将植株根系及说 明 书CN 10448002。
12、0 A2/3 页4基质混合物充分粉碎混合，干燥定量装袋低温保存。0007 本发明通过干旱地区原生态土著桑树 AMF 的培育、菌种采集、孢子提取、定量接种、人工扩繁的方式获得高密度沙漠桑专用生物菌剂。使用该菌剂进行沙漠桑育苗及荒漠造林，可以有效增强应对干旱、盐碱、高温高寒巨大温差及土壤贫瘠等恶劣生态环境的抵抗能力，对于新疆沙漠桑荒漠化防治、生态修复工程建设具有重要的意义。本发明具有如下特点 ：根据本发明的生产技术所制造的产品适应于新疆沙漠沙及新疆沙漠戈壁特定地理气候条件下的专属生物菌剂。土著沙漠桑 AMF 菌剂对沙漠气候及沙漠桑树种有较好的适应性。2、通过培育天然桑树菌根菌剂母种供应地的方式，实。
13、现母种隔年采新，可以有效控制菌剂质量，并可以避免扩繁中种质的退化。3、采用孢子提取收集、定量接种、统一环境培养、产品检测可保障菌剂的质量及品质一致性。0008 附图说明 ：本发明的具体结构由以下的附图和实施例给出 ：图 1 是新疆沙漠桑生物菌剂生产流程图。0009 具体实施方式 ：本发明不受下述实施例的限制，可根据本发明的技术方案与实际情况来确定具体的实施方式。0010 实施例 ：如图 1 所示，本发明包括以下步骤 ：1、沙漠桑 AMF 母种园的建立 ：选取沙漠戈壁地带，滴灌栽植 10 20 亩沙漠桑，株距0.5 1m，行距 1 1.5m，在保证存活水份的条件下，自然生长，培育 AMF（ Ar。
14、buscular mycorrhizal fungi 丛枝菌根真菌），形成沙漠桑区域土著 AMF 母种群落。0011 2、母种菌群检测与采集 ：以三年以上沙漠桑 AMF 母种园为采集地，采集地表以下15 25cm 处须根及根际土壤混合物为母种源。0012 3、孢子分离清洁与提取 ：将采回的须根及根际土壤混合物（母种源）在食品搅拌机中加水打碎，用湿筛法筛出混合 AMF 孢子群落，并在体视显微镜下清洁孢子，逐一将孢子集中于盛有蒸馏水溶液的密闭容量瓶中，使孢子密度达 40 50 个 /ml。0013 4、定量接种 ：以灭菌后的蛭石 : 河沙（质量比 3:1）为培养基质，以高梁为宿主，50穴穴盘为容器。
15、。将 60% 水份湿度的前述培养基质填充穴盘，在其中每穴接种 1ml 混合孢子，然后每穴播种 4 个种子培养。0014 5、菌剂初培养 ：将接种后的穴盘于在下恒温自然光线下培养 25 天左右。每周或每 2 周浇灌一次浇灌 1/5 浓度的 Hoaglang 营养液。0015 6、菌剂扩繁 ：将灭菌后的蛭石 : 河沙（质量比 1:1）混合，形成培养基质，并加入去1/2 磷标准 Hoaglang 营养液，使湿度达 50 70%，放入深 50cm 的菌剂扩繁水泥池中，将初培养长势一致的苗带基质移栽至池中，移栽密度为 50 穴 /m2。培养温度 20 30，光照度在 800010000Lx 每日 14h。
16、, 每周或每 2 周浇灌一次浇灌去 1/2 磷标准 Hoaglang 营养液。培养 100 130 天 ；所述初培养长势一致是指宿主植物高梁地上部分的株高等生长量相对一致，根系布满容器。0016 7、品质检测 ：打孔抽样检测孢子密度达到 45 55 个 /g 为合格，可以收获。0017 8、收获前处理 ：剪去植株，即剪去宿主植物高梁地上部分，留下基质及根系、孢子的混合物，充分通风，控水 1 2 周。0018 9、菌剂产品收获 ：在无菌台上，将植株根系及基质混合物充分粉碎混合，干燥定量装袋低温保存。说 明 书CN 104480020 A3/3 页50019 前述各步骤中所述 Hoaglang 营。
17、养液使用时稀释至 1/5 浓度，成分及含量如下 ：成分 母液浓度 g/L 营养液浓度 ml/LKH2PO4 136 1KNO3 101 5Ca(NO3)2 236 5MgSO4 246.5 2微量元素H3BO3 2.86 1MnCl2.4H2O 1.81 1ZnSO4.7H2O 0.22 1CuSO4.5H2O 0.08 1H2MnO4.H2O 0.02 1EDTA 7.45 1FeEDTA 3.23 1FeSO4.7H2O 5.57 1前述各步骤中所述河沙为建筑用河沙，粒径约 1mm 左右过筛，水洗并灭菌后使用。0020 显然，本发明的上述说明仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。凡是属于本发明的技术方案所引申出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。说 明 书CN 104480020 A1/1 页6图1说 明 书 附 图CN 104480020 A。