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1、(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201410788254.4(22)申请日 2014.12.18A01C 1/00(2006.01)A01N 43/90(2006.01)A01P 21/00(2006.01)A01N 43/12(2006.01)A01N 37/10(2006.01)(71)申请人 广西壮族自治区药用植物园地址 530023 广西壮族自治区南宁市长岗路189 号(72)发明人 韦荣昌(74)专利代理机构 北京远大卓悦知识产权代理事务所 ( 普通合伙 ) 11369代理人 靳浩(54) 发明名称一种打破三叶青种子休眠的方法(57) 摘要本发明属于农业植物栽。
2、培技术领域，特别涉及到一种打破三叶青种子休眠的方法，包括将预处理过的三叶青种子完全浸泡于浸种剂中，所述浸种剂的有效成分及其配比为：赤霉素 50-200mg/L，灵发素 10-50mg/L，- 萘乙酸110-280mg/L 和氢氧化钠 3-5g/L，其余为水，浸泡时间为 1-24 小时 ；将浸泡后的种子放到恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养。本发明能快速解除三叶青种子休眠，显著提高其种子发芽率，出芽整齐，种苗健壮，同时本发明方法操作简便、成本低、实用性强、无污染以及易推广，为三叶青的繁殖和规模化种植提供有力的保障，具有良好的经济效益和社会效益。(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识。
3、产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书7页(10)申请公布号 CN 104429224 A(43)申请公布日 2015.03.25CN 104429224 A1/1 页21.一种打破三叶青种子休眠的方法，其特征在于，将预处理过的三叶青种子完全浸泡于浸种剂中，所述浸种剂的有效成分及其配比为 ：赤霉素 50-200mg/L，灵发素 10-50mg/L，- 萘乙酸 110-280mg/L 和氢氧化钠 3-5g/L，其余为水，浸泡时间为 1-24 小时。2.如权利要求 1 所述的打破三叶青种子休眠的方法，其特征在于，所述浸种剂的有效成分及其配比为 ：赤霉素100mg/L，灵发素40mg/L，。
4、-萘乙酸115mg/L和氢氧化钠4g/L，其余为水，侵泡时间为 12 小时。3.如权利要求 1-2 中任意一项所述的打破三叶青种子休眠的方法，其特征在于，浸泡三叶青种子之前需要预先处理三叶青种子，包括以下步骤 ：步骤 1、采集成熟的三叶青果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损的种子备用 ；步骤 2、将所述步骤 1 挑选的种子置于质量分数为 2的次氯酸钠溶液浸泡 25 分钟，再置于质量分数为 1的过氧化氢溶液浸泡 30 分钟，蒸馏水冲洗 5 次 ；以及步骤3、将所述步骤2消毒处理过的种子放入温水中浸泡24小时，温水温度为35-70。4.如权利要求 3 所述的打破三叶青种子休眠的方法，其特征在。
5、于，所述温水温度为45。5.如权利要求 1-2 中任意一项所述的打破三叶青种子休眠的方法，其特征在于，还包括将浸泡后的三叶青种子置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，盖上盖子 ；再将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养，所述恒温培养箱温度为 18-28，所述恒温培养箱湿度为 60 70，培养时间为 30 天。6.如权利要求 5 所述的打破三叶青种子休眠的方法，其特征在于，所述恒温培养箱温度为 23。7.如权利要求 5 所述的打破三叶青种子休眠的方法，其特征在于，所述光照和黑暗交替培养分为三个阶段 ：第一阶段为光照 4 小时，光照强度为 1750-。
6、2050lx 和暗培养 3 小时 ；第二阶段为光照 5 小时，光照强度为 2050-3500lx 和暗培养 3 小时 ；第三阶段为光照 6 小时，光照强度为 3500-4500lx 和暗培养 3 小时 ；其中，所述第一阶段的恒温培养箱湿度为 60，所述第二阶段的恒温培养箱湿度为65，所述第三阶段的恒温培养箱湿度为 70。8.如权利要求 7 所述的打破三叶青种子休眠的方法，其特征在于，所述光照和黑暗交替培养为 ：第一阶段为光照 4 小时，光照强度为 2000lx 和暗培养 3 小时 ；第二阶段为光照 5小时，光照强度为 3000lx 和暗培养 3 小时 ；第三阶段为光照 6 小时，光照强度为 4。
7、000lx 和暗培养 3 小时。权 利 要 求 书CN 104429224 A1/7 页3一种打破三叶青种子休眠的方法技术领域0001 本发明属于植物栽培技术领域，具体涉及到一种打破三叶青种子休眠的方法。背景技术0002 三叶青为葡萄科崖爬藤属植物三叶崖爬藤 (Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg)，又名石猴子、石老鼠、蛇附子、金线吊葫芦、丝线吊金钟、三叶扁藤、小扁藤、土经丸等。三叶青以块根或全草入药，为壮、瑶民间常用的中草药，味苦、辛，性凉。具有抗病毒、抗炎、镇痛与解热、祛风活血、保肝等作用，是西药无法替代的“植物抗生素”。三叶青分布在我国广西、广东、江。
8、苏、浙江、福建等省区，主要产于广西的西林、田林、乐业、凌云、靖西、隆林、宜州、环江、罗城、南丹、都安、融水、全州等地。0003 三叶青为珍稀濒危药用植物，地域分布零散且蕴藏量稀少。随着以三叶青为主要原料的抗肿瘤中成药“金芪片”、“金丝地胶囊”等系列产品的不断开发，三叶青的市场需求量逐年攀升，野生资源遭到过度采挖，濒临枯竭。三叶青主要依靠种子进行繁殖，但是三叶青的种子数量极为稀少，且存在休眠特性，即在自然状态下萌发时间长、发芽率低，给科学研究和引种栽培带来极大困难。目前国内现有技术没有对于打破三叶青种子休眠的研究。发明内容0004 本发明的一个目的在于解决至少上述问题或者缺陷，并提供至少后面将说。
9、明的优点。0005 本发明的再一个目的是提供一种浸种剂，其能够有效解除三叶青种子休眠的各种因素，提高三叶青种子吸水能力，最终促进种子打破休眠，提高种子发芽率。0006 本发明的再一个目的是提供用温水浸种处理和恒温培养的方法，其结合浸种剂又进一步提高了三叶青种子的发芽率。0007 本发明还有一个目的是提供一种打破三叶青种子休眠的方法，其操作简单、成本低、对环境友好，具有较强的实用性和推广价值。0008 为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种打破三叶青种子休眠的方法，将预处理过的三叶青种子完全浸泡于浸种剂中，所述浸种剂的有效成分及其配比为 ：赤霉素 50-200mg/L，灵发素 10-。
10、50mg/L，- 萘乙酸 110-280mg/L 和氢氧化钠 3-5g/L，其余为水，浸泡时间为 1-24 小时。0009 优选的是，所述的打破三叶青种子休眠的方法中，所述浸种剂的有效成分及其配比为 ：赤霉素 100mg/L，灵发素 40mg/L，- 萘乙酸 115mg/L 和氢氧化钠 4g/L，其余为水，侵泡时间为 12 小时。0010 优选的是，所述的打破三叶青种子休眠的方法中，浸泡三叶青种子之前需要预先处理三叶青种子，包括以下步骤 ：0011 步骤 1、采集成熟的三叶青果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损的种子备用；说 明 书CN 104429224 A2/7 页40012 步骤 。
11、2、将所述步骤 1 挑选的种子置于质量分数为 2的次氯酸钠溶液浸泡 25 分钟，再置于质量分数为 1的过氧化氢溶液浸泡 30 分钟，蒸馏水冲洗 5 次 ；以及0013 步骤 3、将所述步骤 2 消毒处理过的种子放入温水中浸泡 24 小时，温水温度为35-70。0014 优选的是，所述的打破三叶青种子休眠的方法中，所述温水温度为 45。0015 优选的是，所述的打破三叶青种子休眠的方法中，还包括将浸泡后的三叶青种子置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，盖上盖子 ；再将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养，所述恒温培养箱温度为18-28，所述恒温培养。
12、箱湿度为 60 70，培养时间为 30 天。0016 优选的是，所述的打破三叶青种子休眠的方法中，所述恒温培养箱温度为 23。0017 优选的是，所述的打破三叶青种子休眠的方法中，所述光照和黑暗交替培养分为三个阶段 ：第一阶段为光照 4 小时，光照强度为 1750-2050lx 和暗培养 3 小时 ；第二阶段为光照 5 小时，光照强度为 2050-3500lx 和暗培养 3 小时 ；第三阶段为光照 6 小时，光照强度为 3500-4500lx 和暗培养 3 小时 ；0018 其中，所述第一阶段的恒温培养箱湿度为 60，所述第二阶段的恒温培养箱湿度为 65，所述第三阶段的恒温培养箱湿度为 70。。
13、0019 优选的是，所述的打破三叶青种子休眠的方法中，所述光照和黑暗交替培养为 ：第一阶段为光照 4 小时，光照强度为 2000lx 和暗培养 3 小时 ；第二阶段为光照 5 小时，光照强度为 3000lx 和暗培养 3 小时 ；第三阶段为光照 6 小时，光照强度为 4000lx 和暗培养 3 小时。0020 本发明至少包括以下有益效果 ：0021 1、本发明提供一种浸种剂，其能够有效解除三叶青种子休眠的各种因素，提高三叶青种子吸水能力，最终促进种子打破休眠，提高种子发芽率。0022 2、本发明提供用温水浸种处理和恒温培养的方法，其结合浸种剂又进一步提高了三叶青种子的发芽率。0023 3、本发。
14、明提供的光照和黑暗交替培养的方法，对三叶青种子进行不同时间不同光照，也有效的解除了三叶青种子的休眠。0024 4、本发明提供一种打破三叶青种子休眠的方法，其操作简单、成本低、对环境友好，具有较强的实用性和推广价值。具体实施方式0025 下面结合实施例对本发明的技术方案作进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据之实施。0026 本发明试验用的三叶青种子是在广西百色市西林县 11 月份采集的成熟的三叶青种子。0027 其中，种子发芽率是指发芽试验终期，在规定的日期内发芽的全部种子数占供试种子的百分率。发芽率 ( ) 规定日期内发芽种子 / 供试种子粒数 100。0028 实施例 1。
15、0029 一种打破三叶青种子休眠的方法，包括以下步骤 ：说 明 书CN 104429224 A3/7 页50030 步骤 a、浸泡三叶青种子之前需要预先处理三叶青种子，将成熟的三叶青果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损的种子备用 ；将挑选的种子置于质量分数为 2的次氯酸钠溶液浸泡 25 分钟，再置于质量分数为 1的过氧化氢溶液浸泡 30 分钟，蒸馏水冲洗5 次 ；将消毒处理过的种子放入 45温水中浸泡 24 小时。0031 步骤 b、将预处理过的三叶青种子分成两份，一份作为空白对照浸泡在相同体积的水中，另一份完全浸泡于浸种剂中，所述浸种剂的有效成分及其配比为 ：赤霉素 100mg/L，灵。
16、发素 40mg/L，- 萘乙酸 115mg/L 和氢氧化钠 4g/L，其余为水，浸泡 12 小时。0032 步骤 c、将空白对照的三叶青种子和浸泡后的三叶青种子分别置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，盖上盖子 ；再将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养，所述恒温培养箱温度为 23，所述光照和黑暗交替培养分为三个阶段 ：第一阶段为光照4小时，光照强度为2000lx和暗培养3小时 ；第二阶段为光照 5 小时，光照强度为 3000lx 和暗培养 3 小时 ；第三阶段为光照 6 小时，光照强度为 4000lx 和暗培养 3 小时 ；0033 其中，所述。
17、第一阶段的恒温培养箱湿度为 60，所述第二阶段的恒温培养箱湿度为 65，所述第三阶段的恒温培养箱湿度为 70。0034 培养时间为 30 天，30 天后统计发芽率。0035 实施例2至实施例9中，将浸种剂的有效成分及其配比进行不同的选择，其余步骤与上述实施例 1 完全相同，实施例 2 至实施例 9 中的浸种剂的有效成分及其配比分别在下面的表 1 中显示。30 天后统计实施例 2 至实施例 9 的发芽率。0036 实施例 1 至实施例 9 的发芽率见下面表 1 中显示。0037 表 1 ：浸种剂有效成分及其配比和对应的发芽率。0038 0039 从表 1 的数据分析发现，浸种剂对三叶青种子的发芽。
18、率具有显著的影响，其中最佳的浸种剂溶液配比为 ：赤霉素 100mg/L，灵发素 40mg/L，- 萘乙酸 115mg/L，氢氧化钠4g/L，该条件下的萌发率高达 95，远高于空白对照的的发芽率 (33 )。0040 实施例 100041 一种打破三叶青种子休眠的方法，包括以下步骤 ：0042 步骤 a、浸泡三叶青种子之前需要预先处理三叶青种子，将成熟的三叶青果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损的种子备用 ；将挑选的种子置于质量分数为 2的次氯酸钠溶液浸泡 25 分钟，再置于质量分数为 1的过氧化氢溶液浸泡 30 分钟，蒸馏水冲洗说 明 书CN 104429224 A4/7 页65 次 ；。
19、将消毒处理过的种子放入 35温水中浸泡 24 小时。0043 步骤 b、将预处理过的三叶青种子分成两份，一份作为空白对照浸泡在相同体积的水中，另一份完全浸泡于浸种剂中，所述浸种剂的有效成分及其配比为 ：赤霉素 100mg/L，灵发素 40mg/L，- 萘乙酸 115mg/L 和氢氧化钠 4g/L，其余为水，浸泡 12 小时。0044 步骤 c、将空白对照的三叶青种子和浸泡后的三叶青种子分别置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，盖上盖子 ；再将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养，所述恒温培养箱温度为 23，所述光照和黑暗交替培养分为三个阶段 ：第。
20、一阶段为光照4小时，光照强度为2000lx和暗培养3小时 ；第二阶段为光照 5 小时，光照强度为 3000lx 和暗培养 3 小时 ；第三阶段为光照 6 小时，光照强度为 4000lx 和暗培养 3 小时 ；0045 其中，所述第一阶段的恒温培养箱湿度为 60，所述第二阶段的恒温培养箱湿度为 65，所述第三阶段的恒温培养箱湿度为 70。0046 培养时间为 30 天，30 天后统计发芽率。0047 实施例11至实施例13中，将温水浸泡的温度进行不同的选择，其余步骤与上述实施例 10 完全相同，实施例 11 至实施例 13 中的不同的温水温度分别在下面的表 2 中显示。0048 30 天后统计实。
21、施例 11 至实施例 13 的发芽率。0049 实施例 10 至实施例 13 的发芽率见下面表 2 中显示。0050 表 2 ：不同温水温度和对应的发芽率。0051 0052 上述试验对预处理三叶青种子的温水浸泡温度进行对比选择，从上述表 2 显示的数据可知，温水浸泡这一步骤对三叶青种子的发芽率具有显著的影响，虽然实施例 11 至实施例 13 中的温度不同，在最佳的浸种剂溶液配比为 ：赤霉素 100mg/L，灵发素 40mg/L，-萘乙酸115mg/L，氢氧化钠4g/L条件下的最低发芽率为74，仍然高于空白对照的的发芽率 (33 )，但是实施例 11 至实施例 13 中的发芽率还是低于温水温度。
22、为 45的实施例 1的发芽率 95，最终选择温水温度为 45为最佳的温水温度。0053 实施例 140054 一种打破三叶青种子休眠的方法，包括以下步骤 ：0055 步骤 a、浸泡三叶青种子之前需要预先处理三叶青种子，将成熟的三叶青果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损的种子备用 ；将挑选的种子置于质量分数为 2的次氯酸钠溶液浸泡 25 分钟，再置于质量分数为 1的过氧化氢溶液浸泡 30 分钟，蒸馏水冲洗说 明 书CN 104429224 A5/7 页75 次 ；将消毒处理过的种子放入 45温水中浸泡 24 小时。0056 步骤 b、将预处理过的三叶青种子分成两份，一份作为空白对照浸泡在相。
23、同体积的水中，另一份完全浸泡于浸种剂中，所述浸种剂的有效成分及其配比为 ：赤霉素 100mg/L，灵发素 40mg/L，- 萘乙酸 115mg/L 和氢氧化钠 4g/L，其余为水，浸泡 12 小时。0057 步骤 c、将空白对照的三叶青种子和浸泡后的三叶青种子分别置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，盖上盖子 ；再将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养，所述恒温培养箱温度为 23，所述光照和黑暗交替培养分为三个阶段 ：第一阶段为光照4小时，光照强度为1750lx和暗培养3小时 ；第二阶段为光照 5 小时，光照强度为 2050lx 和暗培养 3 小。
24、时 ；第三阶段为光照 6 小时，光照强度为 3500lx 和暗培养 3 小时 ；0058 其中，所述第一阶段的恒温培养箱湿度为 60，所述第二阶段的恒温培养箱湿度为 65，所述第三阶段的恒温培养箱湿度为 70。0059 培养时间为 30 天，30 天后统计发芽率。0060 实施例 15 至实施例 17 中，将恒温箱培养中的光照和黑暗交替培养的条件进行改变，其余步骤与上述实施例 1 完全相同，实施例 15 至实施例 17 中的光照和黑暗交替培养的条件分别在下面的表 3 中显示。0061 30 天后，统计实施例 15 至实施例 17 的发芽率。0062 实施例 15 至实施例 17 的发芽率见下面。
25、表 3 中显示。0063 表 3 ：光照和黑暗交替培养的不同条件和对应的发芽率。0064 0065 上述试验对三叶青种子的光照和黑暗交替培养条件进行对比选择，从上述表 3显示的数据可知，光照和黑暗交替培养这一步骤对三叶青种子的发芽率具有显著的影响，虽然实施例 14 至实施例 17 中的光照条件不一样，在最佳的浸种剂溶液配比为：赤霉素100mg/L，灵发素 40mg/L，- 萘乙酸 115mg/L，氢氧化钠 4g/L 条件下的发芽率最低为 75，仍然高于空白对照的的发芽率 (33 )，但是实施例 14 至实施例 17 中的发芽率还是低于实施例 1 的发芽率 95，最终选择是所述光照和黑暗交替培养。
26、为 ：第一阶段为光照 4 小时，光照强度为 2000lx 和暗培养 3 小时 ；第二阶段为光照 5 小时，光照强度为 3000lx 和暗培养 3小时 ；第三阶段为光照 6 小时，光照强度为 4000lx 和暗培养 3 小时为最佳的光照和黑暗交说 明 书CN 104429224 A6/7 页8替培养条件。0066 本发明还做了对比试验 A、对比试验 B 和对比试验 C 如下 ：0067 对比试验 A0068 一种打破三叶青种子休眠的方法，包括以下步骤 ：0069 步骤 a、浸泡三叶青种子之前需要预先处理三叶青种子，将成熟的三叶青果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损的种子备用 ；将挑选的种子。
27、置于质量分数为 2的次氯酸钠溶液浸泡 25 分钟，再置于质量分数为 1的过氧化氢溶液浸泡 30 分钟，蒸馏水冲洗5次；0070 步骤 b、将预处理过的三叶青种子分成两份，一份作为空白对照浸泡在相同体积的水中，另一份完全浸泡于浸种剂中，所述浸种剂的有效成分及其配比为 ：赤霉素 100mg/L，灵发素 40mg/L，- 萘乙酸 115mg/L 和氢氧化钠 4g/L，其余为水，浸泡 12 小时。0071 步骤 c、将空白对照的三叶青种子和浸泡后的三叶青种子分别置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，盖上盖子 ；再将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中培养，所述恒温培养箱温度为。
28、 23，培养时间为 30 天。0072 30天后统计发芽率为70，虽然比空白对照试验的发芽率(33)高，但是仍然没有实施例 1 中的发芽率 (95 ) 高。0073 对比试验 B0074 一种打破三叶青种子休眠的方法，包括以下步骤 ：0075 步骤 a、浸泡三叶青种子之前需要预先处理三叶青种子，将成熟的三叶青果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损的种子备用 ；将挑选的种子置于质量分数为 2的次氯酸钠溶液浸泡 25 分钟，再置于质量分数为 1的过氧化氢溶液浸泡 30 分钟，蒸馏水冲洗5 次 ；将消毒处理过的种子放入 35温水中浸泡 24 小时。0076 步骤 b、将预处理过的三叶青种子分成两。
29、份，一份作为空白对照浸泡在相同体积的水中，另一份完全浸泡于浸种剂中，所述浸种剂的有效成分及其配比为 ：赤霉素 100mg/L，灵发素 40mg/L，- 萘乙酸 115mg/L 和氢氧化钠 4g/L，其余为水，浸泡 12 小时。0077 步骤 c、将空白对照的三叶青种子和浸泡后的三叶青种子分别置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，盖上盖子 ；再将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行培养，所述恒温培养箱温度为 23，培养时间为 30 天。0078 30天后统计发芽率为80，虽然比空白对照试验的发芽率(33)高，但是仍然没有实施例 1 中的发芽率 (95 ) 高。007。
30、9 对比试验 C0080 一种打破三叶青种子休眠的方法，包括以下步骤 ：0081 步骤 a、浸泡三叶青种子之前需要预先处理三叶青种子，将成熟的三叶青果实，搓去果皮，洗净，从中挑选饱满、无破损的种子备用 ；将挑选的种子置于质量分数为 2的次氯酸钠溶液浸泡 25 分钟，再置于质量分数为 1的过氧化氢溶液浸泡 30 分钟，蒸馏水冲洗5次；0082 步骤 b、将预处理过的三叶青种子分成两份，一份作为空白对照浸泡在相同体积的水中，另一份完全浸泡于浸种剂中，所述浸种剂的有效成分及其配比为 ：赤霉素 100mg/L，灵发素 40mg/L，- 萘乙酸 115mg/L 和氢氧化钠 4g/L，其余为水，浸泡 12。
31、 小时。说 明 书CN 104429224 A7/7 页90083 步骤 c、将空白对照的三叶青种子和浸泡后的三叶青种子分别置于两层充分湿润的萌发纸上，然后将所述萌发纸放于透明玻璃培养皿中，盖上盖子 ；再将所述透明玻璃培养皿放于恒温培养箱中进行光照和黑暗交替培养，所述恒温培养箱温度为 23，所述光照和黑暗交替培养分为三个阶段 ：第一阶段为光照4小时，光照强度为2000lx和暗培养3小时 ；第二阶段为光照 5 小时，光照强度为 3000lx 和暗培养 3 小时 ；第三阶段为光照 6 小时，光照强度为 4000lx 和暗培养 3 小时 ；0084 其中，所述第一阶段的恒温培养箱湿度为 60，所述第。
32、二阶段的恒温培养箱湿度为 65，所述第三阶段的恒温培养箱湿度为 70。0085 培养时间为 30 天。0086 30天后统计发芽率为85，虽然比空白对照试验的发芽率(33)高，但是仍然没有实施例 1 中的发芽率 (95 ) 高。0087 本发明采用自配的浸种剂浸种处理，能够有效解除三叶青种子休眠的各种因素，包括种皮障碍和萌发抑制物等，提高三叶青种子吸水能力，最终促进种子打破休眠，提高种子萌发率，且本发明对环境友好，同时兼具操作简便、成本低的优势，具有较强的实用性和推广价值，并且还利用温水浸种处理和恒温培养的方法，进一步提高三叶青种子的萌发率。0088 本发明属首次对打破三叶青种子休眠技术的研究成果，快速解除三叶青的种子休眠，显著提高了其种子萌发率，同时本发明方法操作简便、成本低、实用性强、无污染以及易推广，为三叶青的繁殖和规模化种植提供有力的保障，具有良好的经济效益和社会效益。0089 尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的实例。说 明 书CN 104429224 A。