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1、10申请公布号CN104145889A43申请公布日20141119CN104145889A21申请号201410421851322申请日20140825A01K67/0420060171申请人广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所地址510610广东省广州市天河区东莞庄一横路133号72发明人邢东旭杨琼廖森泰罗国庆肖阳李丽李庆荣叶明强刘新涛74专利代理机构广州市华学知识产权代理有限公司44245代理人郭炜绵54发明名称一种改进的白僵蚕高效培养方法57摘要本发明公开了一种改进的僵蚕高效培养方法，该方法包括以下步骤饲养家蚕，在四龄眠蚕蜕皮后的02H内，往家蚕体表喷洒白僵菌孢子悬液，56天后家蚕发。
2、病死亡，拣出死蚕进一步僵化，最后晒干或烘干后获得僵蚕；所述的家蚕品种是皓月、泰圆、航7。本发明筛选出对白僵菌耐受性较差的家蚕品种作为僵蚕生产专用品种，从而提高了家蚕的感染率；选择5龄起蚕的极早期作为体表接种白僵菌的最佳时期，提高了家蚕感染率和白僵蚕收率。51INTCL权利要求书1页说明书3页附图1页19中华人民共和国国家知识产权局12发明专利申请权利要求书1页说明书3页附图1页10申请公布号CN104145889ACN104145889A1/1页21一种改进的僵蚕高效培养方法，其特征在于包括以下步骤饲养家蚕，在四龄眠蚕蜕皮后的02H内，往家蚕体表喷洒白僵菌孢子悬液，56天后家蚕发病死亡，拣出死。
3、蚕进一步僵化，最后晒干或烘干后获得僵蚕；所述的家蚕品种是皓月、泰圆、航7。2根据权利要求1所述的改进的僵蚕高效培养方法，其特征在于所述白僵菌孢子悬液的浓度是11021106个/ML。权利要求书CN104145889A1/3页3一种改进的白僵蚕高效培养方法技术领域0001本发明属于中药生产领域，具体涉及一种改进的白僵蚕高效培养方法。背景技术0002白僵蚕BOMBYXBATRYTICATUS为传统中药，中国药典记载僵蚕具有息风止痉、祛风止痛、化痰散结的功效，主治肝风夹痰，惊痫抽搐，小儿急惊，破伤风，中风口剐，风热头痛，目赤咽痛，风疹瘙痒，发颐痄腮。现代药理试验也证实僵蚕水提物或醇提物在抗惊厥、抗凝。
4、、抑菌、抗癌、降糖降脂等方面有显著的效果。随着僵蚕药理成分和功能研究的深入以及相关新产品的不断研发，僵蚕在药食用领域的应用将越来越广泛，僵蚕的生产和加工具有广阔的市场前景。0003当前，僵蚕的生产步骤是家蚕饲养至5龄起蚕即第四次蜕皮之后至五龄蚕食桑之前，体表喷洒白僵菌孢子悬液，56天后家蚕发病死亡，然后拣出死蚕进一步僵化，最后晒干或烘干后获得僵蚕。该方法中，所用到的家蚕品种都是丝茧生产上的实用品种，但不一定是僵蚕生产的适宜品种。申请人在之前的研究中，也试图发现一些适于僵蚕生产的专用品种，不过更多的是从僵蚕产量来考虑未从感染率考虑，筛选到几个僵蚕产量较高的品种；此外，由于缺乏细致研究，人们通常从。
5、蚕的发育整齐度考虑，选择在起蚕1224H接种。然而，这可能错过僵蚕生产最佳的接种时期，造成家蚕感染率低、僵蚕收率低。0004而且，由于白僵菌孢子粉保存方法的制约，随着时间的增加，活孢子数及孢子活力都会显著降低，因此，在实际生产中往往存在接种后家蚕发病率低、发病时期长等情况，造成家蚕在熟蚕上蔟前仍不能如期发病死亡，给僵蚕生产造成极大经济损失。因此，我们意识到，如何确保绝大多数家蚕发病和集中僵化死亡，是僵蚕生产成败的关键。发明内容0005针对现有的僵蚕生产方法存在感染率低的缺陷，本发明的目的在于提供一种改进的僵蚕高效培养方法，该方法优选得到了若干种以前未知的易感染白僵病的蚕种，此外也对现有的接种时。
6、期进行了更细致的研究，摸索到了感染率较高的接种时期；本发明的方法可操作性强，家蚕僵化率高，获得的僵蚕品质优良。0006本发明的目的通过下述技术方案实现0007一种改进的僵蚕高效培养方法，包括以下步骤0008饲养家蚕，在四龄眠蚕蜕皮后的02H内，往家蚕体表喷洒白僵菌孢子悬液，56天后家蚕发病死亡，拣出死蚕进一步僵化，最后晒干或烘干后获得僵蚕；0009所述的家蚕品种是皓月、泰圆、航7；0010所述白僵菌孢子悬液的浓度是11021106个/ML。0011本发明提供的白僵蚕高效人工生产方法，与传统方法相比，主要在两方面进行了改进00121、筛选出对白僵菌耐受性较差的家蚕品种作为僵蚕生产专用品种，从而提。
7、高了家说明书CN104145889A2/3页4蚕的感染率；00132、选择5龄起蚕的极早期作为体表接种白僵菌的最佳时期，提高了家蚕感染率和白僵蚕收率。附图说明0014图1是18个品种家蚕的LD50及在第7天时的死亡率图。0015图2是起蚕不同时期接种白僵菌后的死亡率图。具体实施方式0016下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。0017本发明中所用的家蚕品种都由广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所广东省蚕桑种质资源库收集、保藏和提供。0018实施例10019一种僵蚕培养方法，包括以下步骤00201用含02吐温80的无菌水配制浓度分别为1106、1105、1。
8、104、1103、1102个/ML的白僵菌孢子悬浮液；00212饲养18个品种的家蚕，在四龄眠蚕蜕皮后的两小时，将家蚕在白僵菌孢子悬浮液中浸泡10S后捞出，放入昆虫饲养盒饲养，每个处理组30头蚕，设3个重复。每天调查死亡情况，连续调查7天，计算LD50。002218个品种家蚕的LD50及在第7天时的死亡率见图1。0023由图1可以看出不同品种对白僵菌耐受性存在较大差异。抗8、限9对白僵菌抗性最强，皓月、泰圆、航7等品种则较为敏感。在接种菌液浓度为1103个/ML时，抗8死亡率为3542233，皓月则全部死亡，这两个品种的半数致死浓度LD50也相差30多倍。因此，皓月、泰圆、航7用于僵蚕生产较为。
9、合适。0024实施例20025一种僵蚕培养方法，包括以下步骤00261用含02吐温80的无菌水配制浓度为1103个/ML的白僵菌孢子悬浮液；00272饲养家蚕皓月，分别在四龄眠蚕蜕皮后的2H、7H、12H，将家蚕在白僵菌孢子悬浮液中浸泡10S后捞出，放入昆虫饲养盒饲养，每个处理组30头蚕，设3个重复。每天调查死亡情况，连续调查7天，计算LD50。0028起蚕不同时期接种白僵菌后的死亡率比较见图2。0029由图2看出，起蚕2H接种白僵菌，接种后96H即可达到85以上的僵化死亡率，发病时间快，死亡时间极为整齐，有利于僵蚕的生产和收获，能够极大提高僵蚕生产的效率。这是由于起蚕早期阶段家蚕体壁较嫩薄，。
10、多褶皱，白僵菌容易粘附和穿透体壁，家蚕容易发病。此后2H后，家蚕表皮开始着色与硬化，7H后转为正常体色，12H体壁已完全硬化，由图2可以看出，7H和12H接种的，接种后96H死亡率仅为10左右，远远低于起蚕2H接种的死亡率，也就是说发病时间大大地延迟了，不利于僵蚕的高效生产。因此，选择在起蚕02H内接种白僵菌是合适的。说明书CN104145889A3/3页50030本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。说明书CN104145889A1/1页6图1图2说明书附图CN104145889A。