结合配偶体及其用于筛查抑制剂 和诊断或治疗疾病的用途 本申请涉及一种蛋白质，该蛋白质可抑制细胞蛋白质p27，从而可解除由p27引起的对细胞增殖的抑制作用，本申请还涉及该蛋白质的突变体，一些所述的突变体具有显性干涉性状，本申请还涉及编码这些蛋白质的相应核酸，以及所述蛋白质和核酸用于预防和治疗疾病的用途。
真核细胞的细胞周期受依赖于细胞周期蛋白的激酶(cdks)的控制；所述激酶需要调节性亚单位(“细胞周期蛋白”)才能保持活性。细胞周期的不同过程(如复制和进入有丝分裂)受不同cdks控制(Morgan，自然，374,131(1995))。与之相关的是依赖于细胞周期蛋白的激酶的活性受到高水平的调节。在这种情况下存在的内部控制机制可以例如防止进入有丝分裂直至DNA已完成其复制。如生长因子地外部因子的控制仅在DNA复制开始前发生；复制由有活性的细胞周期蛋白E/cdks2复合物起始。
除了激酶亚单位中细胞周期蛋白的量以外，依赖于细胞周期蛋白的激酶的活性也受小的抑制蛋白调节(Sherr和Roberts,Gene Dev.,9,1149(1995))。例如，根据其大小被称为p21和p27的两个抑制剂对于细胞周期蛋白E/cdk2而言是至关重要的。通常，在表达大量p27的细胞中，细胞周期蛋白E/cdk2激酶不具活性，DNA复制的进入因而被阻断。
尽管细胞周期正调节物在很多人肿瘤中过量表达或至少组成型表达(Sherr,科学，274,1672(1996)),而负调节物经常突变或仅少量表达(Fero等，细胞，85,733(1996))。这两者存在特殊的关联：例如，发现细胞周期蛋白D1基因在很多颈肿瘤中过量表达。因此我们希望依赖于细胞周期蛋白的激酶及其功能是寻求新的，选择性的，具有抗增殖效应的物质过程中的靶结构。
几年前已知p27蛋白的基因(K.Polyak等，细胞，78,59-66(1994)),该基因可得自GenBank[鼠p27；登记号为K09968；人p27:K10906]。尽管已对p27基因进行了深入的研究，但迄今为止仍未在人肿瘤中发现p27基因的突变。这种现象非常令人惊奇，因为p27基因失活的小鼠表现出多发性发育异常的表型和肿瘤发生率增加(Fero等，细胞，85,733(1996),Kiyokawa等，细胞，85.721(1996))。取而代之的是p27的功能明显地受转录后主调节。
因此，p27由蛋白酶解降解；在正常细胞中这也在DNA复制开始时发生。与正常组织相比，很多肿瘤中蛋白酶解降解p27的能力显著增加，这似乎与不利的预后直接相关(Loda等，天然药物，3,231(1997))。
然而，也必定有能导致p27失活的其它机制。例如，用Mvc癌基因转化细胞之后，p27首先在功能上失活(即不再与细胞周期蛋白/cdk复合物结合)，并仅在较晚的阶段被降解。迄今为止仍无法理解例如为什么很多乳腺肿瘤可表达大量p27蛋白，而这些肿瘤仍能非常快速地生长。目前仍不知道在这些肿瘤中使p27失活的机制(Fredersdorf等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,94,6380(1997))。
因此，有关专家很有兴趣发现负责使肿瘤中p27失活的机制或物质。本发明已解决了这一难题。本申请中描述的蛋白质p163能结合p27，可抑制p27的功能并可导致p27在胞质中被蛋白酶解。1)蛋白质p163及其核酸序列
本发明涉及一种新的，被称为p163的蛋白质，该蛋白质能结合p27，从而可抑制p27的功能并可导致p27在胞质中被蛋白酶解。该蛋白质的氨基酸序列已被测定。
蛋白质p163特异性地与p27结合，而不与如Myc,Max,Bcl-6或前胸腺素-α的其它蛋白质结合。
本发明还涉及编码蛋白质p163的核苷酸序列。已测定小鼠p163蛋白的核苷酸序列，通过序列比较，也测定了人p163蛋白的核苷酸序列。2)显性失活的p163类似物
本发明还涉及编码p163组成肽的核苷酸序列和/或编码身为p163的类似物并可发挥显性失活作用的蛋白质的核苷酸序列，所述显性失活作用即为抑制天然p163蛋白与蛋白质p27结合，而基本上不会削弱p27蛋白与细胞周期蛋白E/cdk2的结合和由此引发的细胞周期蛋白E/cdk2的抑制作用。
本发明还涉及编码p163蛋白显性失活突变体的核酸序列或其组成序列的应用，所述应用包括：将这些核酸序列导入靶细胞，抑制靶细胞-特异性p163蛋白和靶细胞-特异性p27蛋白之间的结合，以使靶细胞的增殖被由此释放的靶细胞-特异性p27蛋白抑制。3)抑制p163的肽
然而，本发明也涉及编码抑制p163功能的蛋白质或肽的核苷酸序列。所述蛋白质或肽包括与p163蛋白上用于结合p27蛋白的位点结合或与p163蛋白上用于结合Ran(Loeb等，分子细胞生物学，4,209-222(1993))的位点结合，从而可抑制对细胞而言为内源性的p163蛋白的蛋白质或肽。
这些蛋白质包括对应于p27蛋白或Ran蛋白上用于结合p163蛋白的位点的肽。这些蛋白质另外还包括对蛋白质p163，尤其是对其结合p27蛋白的位点具有特异性的抗体或抗体裂解产物，如F(ab)2,Fab,Fv和scFv。
本发明还涉及编码这类抑制蛋白或肽的核酸序列的应用，所述应用包括：将这些核酸序列导入靶细胞，抑制靶细胞-特异性p163蛋白和靶细胞-特异性p27蛋白或靶细胞-特异性Ran蛋白之间的结合，以使靶细胞的增殖被由此释放的靶细胞-特异性p27蛋白抑制。4)p163刺激细胞分裂的用途
本发明还涉及编码p163蛋白的核苷酸序列或p163蛋白自身用于抑制对细胞而言为内源性的p27蛋白，从而刺激靶细胞的细胞分裂的用途。5)抑制p163的转录和翻译
然而，本发明也涉及抑制编码p163蛋白的靶细胞-特异性核酸序列转录和/或翻译，从而导致p27蛋白被释放，进而抑制靶细胞增殖的核酸序列。本发明的这类核酸序列可以是例如反义(三链体)DNA，反义RNA和/或核酶。6)筛查p163抑制剂的检测系统
本发明还涉及编码p163蛋白的核酸序列，或p163蛋白，或其组成序列用于筛查p163蛋白和p27蛋白或Ran蛋白之间结合的抑制剂的检测系统的用途，和这些检测系统中发现的p163蛋白抑制剂用于抑制靶细胞增殖的用途。7)检测p163以诊断疾病
本发明还涉及编码p163蛋白或编码p163蛋白之组成序列的核酸构建体，或与p163蛋白的这些核酸序列结合的核酸序列或蛋白质序列，或与p163蛋白结合的蛋白质用于检测细胞或组织或体液中编码p163的核酸或检测其中的p163蛋白以确定细胞或组织的增殖状况或诊断疾病状况的用途。1)鉴定p163蛋白和编码p163蛋白的核酸序列
使用“双杂合体(two-hybrid)技术”(Fields和Song，自然，340,245(1989))发现p163蛋白是一种新的p27配偶体蛋白，为此，使用PCR将鼠p27蛋白的完整编码序列和转录因子GAL4的DNA结合域符合读框地克隆至酵母载体pGBT10(Clontech)中。用此载体转化酵母菌株Hf7c(Clontech Heidelberg,Matchmaker Two Hybrid,K1605-1),然后分离色氨酸营养缺陷型菌落，在使用针对GAL4和p27的特异性抗体的Western印迹中检测正确融合蛋白的表达。
在第二次转化中，使用得自小鼠胚的经VP16标记的cDNA文库(Vojtek等，细胞，74,205(1993))转化此菌株。对在15nM氨基三唑存在下表现为组氨酸营养缺陷型的400个菌落进行进一步的分析，对这些克隆中的70个测序；它们都编码不同的D-型细胞周期蛋白；已知它们是与p27相互作用的配偶体。使用Southern印迹显示出400个抗性克隆中有390个编码D细胞周期蛋白。其余克隆中有两个(第163号)编码相同的蛋白质：对它们进行完整地测序。
由Balb/c-3T3细胞制备λZAP cDNA文库，得自该文库的几个克隆被鉴定为与p163同源。序列分析显示出开放阅读框；该阅读框也被用于得自cDNA文库的VP16嵌合体。两个原始克隆都编码此阅读框的氨基酸121-252。在使用β-半乳糖苷酶作为报道基因的酵母中更详细地鉴定了克隆p163：
如表1所示，酵母中编码的蛋白质特异性地与p27相互作用，而不与如Myc,Max,Bcl-6或前胸腺素-α的其它蛋白质相互作用。表1也显示了p27中与p163发生相互作用的区域的第一处定界。这些数据表明p163和依赖于细胞周期蛋白的激酶(Russo等，自然，382,325(1996))一样与p27的相同区域结合。这暗示了p163和依赖于细胞周期蛋白的激酶竞争同p27的结合。其次，可将p163中与p27相互作用的区域划定为氨基酸121-252。
为了证实得自所述酵母检测系统的这些结果，将重组表达的p163[与谷胱甘肽转移酶(GST)一起表达成融合蛋白]结合到柱上，然后通过在此柱上进行亲和层析试着纯化35S-标记的p27蛋白。含有p163以及谷胱甘肽转移酶(GST)的融合蛋白的应用使得在这些实验中利用均一的基质成为可能(所谓的GST pulldowns；Hateboer等，Proc.Natl.Acad.Sci.USA,90,8489(1993))。
为了进行这些研究，将得自酵母克隆的阅读框转移至pGEX载体(Pharmacia,Freiburg pGEX-2T；Cat.No.27-4801-01)中，所述载体编码与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合的嵌合蛋白，该嵌合蛋白受大肠杆菌的IPTG-诱导的TAC启动子控制(Smith和Johnson，基因，67:31,1988)。通过在谷胱甘肽-琼脂糖上进行亲和层析(Smith和Johnson,1988)从经诱导的大肠杆菌培养物中纯化嵌合蛋白，然后对100mMTris-HCl,pH7.5,100mMKCl,20mMEDTA,10％甘油，O.1mMPMSF透析嵌合蛋白。根据相同方案纯化谷胱甘肽S-转移酶，然后进行透析以作为对照；将纯化的蛋白质储存于-80℃。
然后于4℃下将10μg两种蛋白质各与10μgBSA和20mg膨胀的GST-琼脂糖一起保温2小时；之后离心分离出琼脂糖，用透析缓冲液将琼脂糖洗涤两次。将琼脂糖的等分试样直接煮沸于样品缓冲液中以作为蛋白质结合的对照，SDS凝胶电泳后检测结合的蛋白质。通过体外翻译制备35S-甲硫氨酸-标记的p27(根据厂商的说明：Promega,Mannheim；TNT coupled retc.lys.systems；L4610),于4℃下将所述经标记的p27与上样的琼脂糖一起在总体积为200μl的含有0.1％NP-40的透析缓冲液中保温2小时。用透析缓冲液/0.1％NP-40将琼脂糖洗涤4次，然后在SDS样品缓冲液中煮沸。通过SDS凝胶电泳和荧光显影检测结合的蛋白质。
这些实验的结果示于表2。表2表明：重组的、体外合成的35S-标记的p27选择性地与用嵌合的GST-p163融合蛋白上样的柱结合，而不与用相同量的GST上样的柱结合。表2也表明得自细胞提取物的p27不能有效地与GST-p163结合；在此提取物中，p27与依赖于细胞周期蛋白的激酶的复合物结合。稍作加热处理可从这些复合物中释放出p27，从而使之与p163结合。这表明p163和依赖于细胞周期蛋白的激酶竞争与p27的结合。
本发明的编码鼠p163蛋白的核酸序列示于表3。数据库中有此序列的同系物；该同系物是酵母核蛋白(Nup)2基因。Nup2是核膜蛋白质，该蛋白质参与核蛋白的形成和蛋白质进出核的转运。在酵母中，Nup2可能特别地参与输出。
尽管从整体上看同源性并不高，但几个功能域是保守的(表4)。例如，Ran-结合蛋白(RBP-1),NuP-2和p163之间与调节核转运的调节蛋白(Ran，一种GTP-结合蛋白)结合的位点是保守的(表5)，结构功能已定的短五肽序列也是保守的(表6)。
为了毫无疑问地阐明p163就是核孔蛋白，产生了针对蛋白质[组氨酸-p163(氨基酸121-252)]的多克隆抗血清，然后进行亲和纯化；从免疫荧光下典型的核孔染色(核表面和外周的点被染色)结果看，此抗血清毫无疑问地识别了核孔蛋白。
为了阐明p163或Nup2和p27在细胞内结合，使用CMV表达载体在HeLa细胞中瞬时表达两种蛋白质；48小时后，裂解细胞并通过免疫沉淀/Western印迹检查可能存在的两种蛋白质的相互作用(Peukert等，EMBO J,16,5672(1997))。在每种情况下使用针对Nup2的多克隆抗体和针对鼠p27的多克隆抗体可阐明p27和Nup2之间的结合。仅当p163被表达时p27蛋白才能沉淀良好(见表7)。这证明在HeLa细胞中Nup2和p27能在体内互相结合。
通过使用人EST进行序列比较和序列检索鉴定出人p163蛋白的核酸序列。其中Ran-结合域位于序列AA161285中的第173≥575位，p27-结合域位于序列R62312的第318≥486位，p163的其它组成区段位于序列THC199124的第348≥489位。
为了更精确地限定与Nup2-p163相互作用的p27氨基酸，在酵母中寻找不再与p163相互作用的突变体。为此，对编码p27的cDNA进行诱导错误的PCR反应(PCR的条件描述于“PCR-技术，DNA扩增的原理和应用”；H.A.Erlich,Stockton出版社，纽约1989)，检测含有随机错误的所得克隆与Nup2的相互作用，检测所述克隆与细胞周期蛋白D1的相互作用以作为对照。该PCR的条件(不同于标准条件)是：在1U GIBCO Taq聚合酶和0.1mMMnCl2存在下进行40个循环。
将所得cDNA片断与已被BamHⅠ和EcoRⅠ线性化然后经纯化的pGBT10载体一起共转化至酵母菌株HF7c-p163/Nup2中。通过从缺少-Leu-Trp的培养基中选择筛选出经转化的菌落。分离出960个独立的克隆，将它们平铺在选择培养基上(-Leu-His-Trp)。对在此选择培养基上不生长的克隆进行第二个相互作用试验，即β-半乳糖苷试验。鉴定阴性克隆，从中分离出pGBT10-p27质粒。首先，所得质粒与将p163/Nup2表达成含有反式激活域的嵌合体的酵母表达质粒一起被重新转化，然后所得质粒与将细胞周期蛋白D1表达成含有反式激活域的嵌合体的质粒一起被重新转化以作为对照。如此产生了3个克隆，所述克隆不再选择性地与Nup2相互作用，但与细胞周期蛋白D1相互作用。与几个对照一起测定这些质粒的序列。
所得表型的范围简述于表13。在这些实验中，当在缺乏组氨酸(-Trp-Leu-His,“选择性的”)的条件下生长时，相互作用证实了其自身，而对照(-Trp-Leu；“非选择性的”)显示出两种蛋白质都可在酵母中表达。发现1000个克隆中有3个不再特异性地与p163-Nup2相互作用，但与细胞周期蛋白D1相互作用。这些序列示于表14。所有3个克隆，而不是一系列对照克隆在氨基酸的精氨酸90处携带相同的突变(突变成甘氨酸)。序列也表明克隆是独立形成的，因为它们携有额外的，不同的突变。这清楚地将精氨酸90鉴定为p27与Nup2相互作用的主要氨基酸。可用此突变体证实这种相互作用的生物学关联。2)p163蛋白的显性失活类似物的核苷酸序列
上述功能分析揭示了p163蛋白的两个区域对于其功能是至关重要的。
其中一个区域是结合p27的区域(氨基酸121-252),另一个是结合Ran的区域(氨基酸307-467),Ran是调节转运功能的GTP-结合蛋白。
因此，本发明涉及蛋白质p163的核酸序列或此蛋白质的一部分的核酸序列，这些核酸序列在p27结合域和/或Ran结合域表现出突变，以使所表达的突变蛋白质与p27或Ran的结合大幅度地减少。当导入细胞时，p163的这些类似物抑制功能细胞-特异性的p163。这会产生游离的p27，导致细胞分裂被抑制。p163的这种显性失活突变体的例子示于表8和9。表8显示出其中缺失了p27-结合域的p163，而表9显示出缺乏Ran-结合域的p163。
因此，本发明涉及将显性失活的p163类似物用于细胞，目的是抑制此细胞的增殖。3)与p163结合域结合的蛋白质或肽的核苷酸序列
已描述的研究成果将p163蛋白的p27-结合域确定为氨基酸121-252，将Ran-结合域确定为氨基酸307-467。
另一类例子是与p163结合，特别是与p163的p27-结合域或Ran-结合位点结合的抗体或抗体片段，如F(ab)2,Fab,Fv或s.c.Fv。通过例如用p163或p163的p27-结合域或Ran-结合域免疫动物可产生这种抗体。所述结合域示于表5(Ran-结合域)或表10(p27-结合域)。4)刺激细胞分裂的p163的核苷酸序列
将p163的核苷酸序列或p163蛋白导入细胞可抑制细胞内的p27。这可释放细胞周期蛋白E/cdk2复合物(受p27抑制)，所述复合物可启动细胞分裂。5)抑制p163蛋白转录和/或翻译的核苷酸序列
有关p163蛋白核酸序列的知识提供了制备可用于特异性抑制p163转录或翻译的寡核苷酸的可能性。这些反义核酸包括寡核苷酸，反义(三链体)DNA，核酶和反义RNA。制备三链体DNA寡核苷酸的方法详细描述于Frank-Kamenetskii和Mirkin,Ann.Rev.Biochem,64,65(1995),制备反义RNA寡核苷酸的方法详细描述于Neckers等，Crit.Rev.Oncogen,3,175(1992)；Carter和Lemoine,Br.J.Cancer,67,869(1993)；Mukhdopadhyay和Roth,Crit.Rev.Oncogen,7,151(1996)和Mercola和Cohen,癌症基因疗法，2,47(1995)。
本发明中优选使用能与p163核苷酸序列杂交的三链体DNA或反义RNA寡核苷酸，所述核苷酸序列编码p27蛋白-结合域(总区域，氨基酸121-252)的组成区域或Ran蛋白-结合域(总区域，氨基酸307-467)组成区域。
抑制p163转录和/或翻译的核苷酸序列还包括特异于p163蛋白核苷酸序列区域的核酶。
制备核酶的方法详细描述于Burke，核酸分子生物学，8,105(1994),Christoffersen和Marr，药物化学杂志，38,2023(1995)和Scott等，科学，274,2065(1996)。本发明优选与p163核苷酸序列杂交的核酶，所述核苷酸序列位于p27蛋白-结合域(氨基酸121-252)或Ran蛋白-结合域(氨基酸307-467)的核苷酸序列的区域。
能被核酶裂解的p163蛋白核苷酸序列的例子列于表11。
将寡核苷酸形式的三链体DNA，反义RNA或核酶[使用本领域技术人员已知的方法(见上述文献)制备并保护以防DNA酶或RNA酶降解]或者在体外加入靶细胞，或者通过注射或局部应用而进行体内施用。
然而，本发明也涉及将核酸构建体导入细胞，目的是通过转录在细胞中形成对应于本发明寡核苷酸的反义RNA或核酶，从而抑制所述细胞的增殖。导入细胞可在体外或体内发生。
使用本领域技术人员已知的方法，以裸DNA的形式，或借助于非病毒载体，或借助于并插入病毒载体将核酸构建体导入细胞。6)筛查p163功能抑制剂的检测系统
有关p163蛋白及其与p27蛋白的相互作用的发现使筛查所述相互作用的抑制剂成为可能。这需要检测系统，该检测系统中p27蛋白和p163蛋白之间的结合被抑制，这种抑制的出现由指示剂显示。
大量方法是已知的，一个所述方法的例子是双杂合体筛选试验(有关内容见C.1节和表1)。
然而也可以使用例如亲和系统来筛选，在该系统中，p163[优选为p27-结合域(氨基酸121-252)]与固相结合并与检测物质一起保温，通过对p163蛋白中p27-结合域的经标记的结合配偶体的结合的抑制作用可确定检测物质的结合。所述经标记的结合配偶体可以是p27或特异性地结合p163蛋白的p27-结合域的抗体。可以按照与组建检测p163和p27之间结合的抑制剂的系统相同的方式，组建检测p163和Ran之间结合的抑制剂的系统，并将该检测系统用于筛选。因此，本发明涉及编码p163或p163的组成蛋白的核酸序列用于筛选p163抑制剂的用途，或p163蛋白或其组成蛋白用于筛选p163抑制剂的用途。7)p163的核酸序列或p163的蛋白质序列用于诊断细胞增殖时期或疾病状况的用途
如A)节中所述，很多肿瘤的特征在于p27的胞内浓度增加。由于这些肿瘤在增殖，可假定这种浓度增加的p27的功能受到抑制。根据本发明，p163是p27的特异性抑制剂。在细胞中检测这种抑制剂使得对细胞的增殖状况得出结论成为可能。这种结论对于例如评估肿瘤细胞或肿瘤组织的恶性非常重要。通过细胞死亡可释放p163蛋白。因此，在体液中检测到p163即可对体内的增殖过程和/或伴随细胞死亡的过程，如炎症过程有一定论。通过与经标记物质的特异性结合可检测到p163蛋白。所述特异性结合的物质包括p27蛋白，Ran蛋白和例如通过用p163蛋白或用p163蛋白的组成序列免疫动物产生的抗体。
然而，通过使编码p163蛋白的核酸序列与相应的mRNA杂交也可检测到细胞或组织中的p163mRNA。可以使用本领域技术人员熟知的聚合酶链反应(PCR)技术，其中使用所谓的引物对可复制欲检测的几拷贝核酸序列，从而增加了检测的敏感性。
用于扩增和检测编码p163的核酸序列的引物对的例子示于表12a,b和c。
然而，也可以通过例如使用Gussoni等，Nature Biotechnol,14,1012(1996)所述的荧光原位杂交法来检测编码p163的RNA。
因此，本发明涉及检测编码p163的核酸序列或检测p163蛋白以确定细胞或组织的增殖状况或检测活的哺乳动物中的增殖变化，或伴随细胞死亡的变化。本发明的主题概括如下：1．抑制p27从而可解除由p27蛋白引起的对细胞增殖的抑制作用的蛋白质。2．第1项所述的蛋白质，该蛋白质含有表6所示的P163氨基酸序列[SEQID NO:16]或其部分。3．第2项所述的蛋白质，其中根据表6的编号，p163氨基酸序列的部分选自具有下列位置的氨基酸序列的肽：1至24[SEQ ID NO:2],137至196[SEQ ID NO:4],215至265[SEQ ID NO:6],239至272[SEQ IDNO:8],399至438[SEQ ID NO:10]和307至469[SEQ ID NO:12]。4．通过缺失功能域可衍生自第2项所述蛋白质的蛋白质，其中从表6的[SEQ ID NO:16]中缺失p27-结合域或Ran-结合域。5．第4项所述的蛋白质，其中缺失了p27-结合域之后得到具有表8所示氨基酸序列[SEQ ID NO:18]的蛋白质，缺失了Ran-结合域之后得到具有表9所示氨基酸序列[SEQ ID NO:19]的蛋白质。6．通过缺失除p27结合域区以外的所有氨基酸序列可衍生自第2项所述蛋白质的蛋白质。7．第6项所述的蛋白质，该蛋白质含有表10所示氨基酸序列[SEQ IDNO:20]。8．第1至7项中一项或多项所述的蛋白质，该蛋白质是得自另一哺乳动物种或人的相应同源性蛋白质，或其相应的部分。9．第8项所述的蛋白质，该蛋白质含有p163人同系物的氨基酸序列。10．编码第1至9项中一项或多项所述蛋白质的DNA。11．第10项所述的DNA，该DNA
(a)含有表3所示的核苷酸序列[SEQ ID NO:1]或其部分，
(b)在严格条件下能与(a)所述序列杂交，或
(c)遵照遗传密码的简并性与(a)所述序列相比有所变化，但仍编码相同
的氨基酸序列。12．用作PCR引物的第11项所述的DNA，其中这些PCR引物的核苷酸序列选自：表12a的[SEQ ID NO:21]至[SEQ ID NO:30]，表12b的[SEQID NO:31]至[SEQ ID NO:32]，和表12c的[SEQ ID NO:33]至[SEQ IDNO:40]。13．第10或11项所述的DNA用于检测和/或定量细胞和/或组织中的p163mRNA的用途。14．第13项所述的用途，其中通过Northern印迹实现检测和/或定量。15．第13项所述的用途，其中利用PCR实现检测和/或定量。16．第15项所述的用途，其中利用了第12项所述的PCR引物。17．第13项所述的用途，其中通过荧光原位杂交实现检测和/或定量。18．第1至9项中一项或多项所述的蛋白质用于制备与所述蛋白质结合的抗体的用途。19．与第1至9项中一项或多项所述的蛋白质上的p27蛋白结合域结合的抗体和这些抗体的裂解产物。20．与第1至9项中一项或多项所述的蛋白质上的Ran蛋白结合域结合的抗体和这些抗体的裂解产物。21．第19或20项所述的抗体用于检测细胞、组织或体液中第1或2项中一项或多项所述的蛋白质的用途。22．与第10或11项所述DNA的组成区域互补的反义核酸，所述组成区域位于编码氨基酸121至467的核苷酸区域内。23．第22项所述的反义核酸，该反义核酸选自三链体DNA，合成的寡核苷酸，反义RNA和核酶。24．第22或23项所述的反义核酸抑制细胞增殖的用途，其中将细胞在体外或体内与反义核酸接触。25．编码第22或23项所述的用于抑制细胞增殖的反义核酸的核酸构建体，其中将编码反义核酸序列的DNA与至少一种激活序列连接，并以插入非病毒载体或插入病毒载体的裸DNA的形式导入靶细胞中。26．第1至9项中的一项或多项所述的蛋白质用于筛查所述蛋白质和细胞结合配偶体之间相互作用的抑制剂的用途。27．第26项所述的用途，其中使用了双杂合体系统。28．第26项所述的用途，其中使用了亲和系统，在该系统中p163或其p27结合域与固相结合，然后将所述固相与受试物质一起保温，最后利用第1至9项的蛋白质测定对结合配偶体与所述蛋白质的结合的抑制作用。29．第28项所述的用途，其中结合配偶体选自p27和Ran。30．第3至9项中的一项或多项所述的蛋白质作为第1,2,8和9项中的一项或多项所述的蛋白质的功能的抑制剂的用途。31．第19或20项所述的抗体作为第1,2,8和9项中的一项或多项所述蛋白质的功能的抑制剂的用途。32．核酸构建体，该构建体含有第10或11项所述的DNA，所述DNA与能使第1至9项中的一项或多项所述的蛋白质在细胞中被表达的激活序列有效连接。33．第32项所述的核酸构建体用于刺激细胞增殖的用途。
表1+ p27(1-198) - - -+ p27(1-198) - + -+ p27(1-198) p163 + ++++ - - - -- - p163 + -+ Myc262-439 p163 + -+ Max p163 + -+ 前胸腺素 p163 + -+ LAZ3/Bcl6 p163 + -+ p27(1-178) p163 + ++++ p27(1-94) p163 + ++ p27(69-198) p163 + ++++ p27(69-94) p163 + n.d.+ p27(1-198) p163(121- + +++
252)
表2 柱上样品 与下列物质涂覆的亲和层析柱的结合
谷胱甘肽 谷胱甘肽
转移酶-p163 转移酶
融合蛋白重组的 +++ +(35S-标记的)p27含有p27的细胞提取物 (+) -(RAT1-Myc ER)含有p27的细胞提取物 +++ -(RAT1-Myc ER)，(95℃加热2分钟)cdk-2(细胞提取物) - -cdk-4(细胞提取物) - -
表3 [SEQ ID NO.:1]TCGAATTGGG TACCGGGCCC CCCCTCGAGG TCGACGGTAT CGATAAGCTT GATATCGAAT 60TCGCGGCCGC TCGAGTTACA AGATGGCGGC CCCGGGCGCT CTCTTCACCG TTCTGTAGCA 120GCTTCGGGCT GAGCGGATGT CTCTTCTTGT CCTCAGTGTC GGACTCAGAG ACACACGGCT 180CCCGAGTTCT GCTGATCACG AAGTTCCCGG AGGCGCTCGA CGCACCGGAA TCTCCCAGCG 240GCCGCGACCG CCGCCTCGGC CCTGCTCGCC GCGGCGCCGG GACTCCAGCG TGATCGGCGG 300CGGCAGTCAA GGTTCACAAA AATGGCGAAG AGAGTTGCGG AGAAGGAGTT GACTGACAGG 360AACTGGGATG AGGAAGACGA AGTTGAAGAG ATGGGAACAT TCTCAGTGGC CAGTGAGGAA 420GTCATGAAGA ACAGAGCCGT AAAGAAGGCA AAGCGCAGAA ACGTTGGATT TGAATCTGAT 480AGCGGAGGAG CCTTTAAAGG TTTCAAAGGT TTGGTTGTGC CTTCTGGAGG AGGAGGGTTT 540TCTGGATTTG GTGGCTCTGG AGGAAAGCCT CTGGAAGGAC TGACAAATGG AAACAGCACA 600GACAATGCCA CGCCCTTCTC CAATGTAAAG ACAGCAGCAG AGCCCAAGGC AGCCTTTGGT 660TCTTTTGCTG TGAATGGCCC TACTACCTTG GTGGATAAAG TTTCAAATCC AAAAACTAAT 720GGGGACAGCA ATCAGCCGCC CTCCTCCGGC CCTGCTTCCA GTACCGCCTG CCCTGGGAAT 780GCCTATCACA AGCAGCTGGC TGGCTTGAAC TGCTCCGTCC GCGATTGGAT AGTGAAGCAC 840GTGAACACAA ACCCGCTTTG TGACCTGACT CCCATTTTTA AAGACTATGA GAGATACTTG 900GCGACGATCG AGAAGCAGCT TGAGAATGGA GGCGGCAGCA GTTCTGAGAG CCAGACAGAC 960AGGGCGACGG CTGGAATGGA GCCTCCTTCC CTTTTTGGTT CAACAAAACT ACAGCAAGAG 1020TCACCATTTT CATTTCATGG CAACAAAGCG GAGGACACAT CTGAAAAGGT GGAGTTTACA 1080GCAGAAAAGA AATCGGACGC AGCACAAGGA GCAACAAGTG CCTCGTTTAG TTTCGGCAAG 1140AAAATTGAGA GCTCGGCTTT GGGCTCGTTA AGCTCTGGCT CCCTAACTGG GTTTTCATTC 1200TCTGCTGGAA GCTCCAGCTT GTTTGGTAAA GATGCTGCCC AGAGTAAAGC AGCCTCTTCG 1260CTGTTCTCTG CTAAAGCATC CGAGAGTCCG GCAGGAGGCG GCAGCAGCGA GTGCAGAGAT 1320GGTGAAGAAG AGGAGAATGA CGAGCCACCC AAGGTAGTGG TGACCGAAGT AAAGGAAGAG 1380GATGCTTTCT ACTCCAAAAA ATGTAAACTA TTTTACAAGA AAGACAACGA ATTTAAAGAG 1440AAGGGTGTGG GGACCCTGCA TTTAAAACCC ACAGCAACTC AGAAGACCCA GCTCTTGGTG 1500CGGGCAGACA CCAACCTAGG CAACATACTG CTGAATGTTC TGATCGCCCC CAACATGCCG 1560TGCACCCGGA CAGGAAAGAA CAACGTCCTT ATCGTCTGTG TCCCCAACCC CCCACTCGAT 1620GAGAAGCAGC CCACTCTCCC GGCCACCATG CTGATCCGGG TGAAGACGAG CGAGGATGCC 1680GATGAATTGC ACAAGATTTT ACTGGAGAAA AAGGATGCCT GAGCACTGAG GCTGACCAAG 1740GCATGTTGCC ACGTTGCTGC TTCCCCTCCG TCCCTAACTT AGTCACATTC TTTCCTCTTC 1800TACTGTGACA TTCTGAGAAC TTCTAGGTAA CTTGAACTTT TGTGAGGAAG ATTAAGGCCA 1860ATAAATCCTT TCAGTGGCGG CCGCGAATTC CTGCAGCCCG GGGGATCCAC TAGTTCTAGA 1920GCGGCCGCCA CCGCGGTGGA GCTCCAGCTT TTGGGAGA 1958表4p163: 1 MAKRVAEKELTDRNWDEEDEVEEM 24 [SEQ ID NO.:2]
MAKRVA+ ++ +D + +++ YNup2: 1 MAKRVADAQIQRETYDSNESDDDV 24 [SEQ ID NO.:3]P163: 137 NQPPSSGPASSTACPGNAYHKQLAGLNCS
N+ +G A P + +L LNYNup2: 71 NRADGTGEAQVDNSPTTESNSRLKALNLQ
VRDWIVKHVNTNPLCDLTPIFKDYERYLATI 196 [SEQ ID NO.:4]
++ + V PL DL P+F YE Y+ I
FKAKVDDLVLGKPLADLRPLFTRYELYIKNI 130 [SEQ ID NO.:5]P163: 215 ATAGMEPPSLFGSTKLQQESPFSFHGNKAEDT
A + P ST + PF G++YNup2: 535 ANSSTSPAPSIPSTGFKFSLPFEQKGSQTTTN
SEKVEFTAEKKSDAAQGAT265 [SEQ ID NO.:6]
K E T E + +Q AT
DSKEESTTEATGNESQDAT585 [SEQ ID NO.:7]P163: 239 HGNKAEDTSEKVEFTAEKKSDAAQGATSASFSFG 272 [SEQ ID NO.:8]
+G++++D+ + +A + + AT +FSFGYNup2: 444 NGSESKDSDKPSLPSAVDGENDKKEATKPAFSFG477 [SEQ ID NO.:9]P163: 399 LGNILLNVLIAPNMPCTRTGKNNVLIVCVPNPPLDEKQPT 438[SEQ ID NO.:10]
+GN+LLN + + N ++ P D K TYNup2: 655 MGNVLLNATVVDSFKYEPLAPGNDNLIKAPTVAADGKLVT 694[SEQ ID NO.:11]
表5RBP1(小鼠) DSHADHDTST---ENADESTTHP--QFEPIVSVPE----RBP1(人) 5 DSHADHDTST---ENADESNHDP--QFEPIVSVPE----NUP2p(酵母) 560 SQTTTNDSKE---ESTTEATGNESQDATKVDATPEESKPp163(小鼠) 307 QSKAASSLFSAKASESPAGGGSSECRDGEEEENDEPPKVRBP1(小鼠) QEIKTLEEDEEELFKMRAKLFRFASENDLPEWKEPRHGDVKLIKHK-RBP1(人) QEIKTLEEDEEELFKMRAKLFRFASENDLPEWKERGTGDVKLLKHK-NUP2p(酵母) INLQNGEEDEVALFSQKAKLMTFNA--ETKSYDSRGVGEMKLLKKKDp163(小鼠) VVTEVK--EEDAFYSKKCKLFYKKDNEF----KEKGVGTLHL-KPT-RBP1 (小鼠) EKGTIRLLMRRDKTLKI-CANHYITPMMELKP-NAGSDRAWVWNTHTDRBP1(人) EKGTIRLLMRRDKTLKI-CANHYITPMMELKP-NAGSDRAWVWNTHTDNUP2p (酵母) DSPKVRLLCRSDGMGNV-LLNATVVDSFKYEPLAPGNDNLIKAPTVAAp163(小鼠) ATQKTQLLVRADTNLGNILLNVLIAPNMPCTRTGKNNVLIVCVPNP--RBP1(小鼠) FADECP--KPELLAIRFLNAENAQKFKTKFEECRKEI [SEQ ID NO.:12]RBP1(人) FADECP--KPELLAIRFLNAENAQKFKTKFEECRKEI [SEQ ID NO.:13]NUP2p(酵母) DG-------KLVTYIVFKQKLEGRSFTKAIEDAKKEM [SEQ ID No.:14]p163(小鼠) PLDEKQPTLPATMLIRVKTSEDADELHKILLEKKDAA [SEQ ID NO.:15]
表6p163(小鼠) [SEQ ID NO.:16]Met Ala Lys Arg Val Ala Glu Lys Glu Leu Thr Asp Arg Asn Trp Asp1 5 10 15Glu Glu Asp Glu Val Glu Glu Met Gly Thr Phe Ser Val Ala Ser Glu
20 25 30Glu Val Met Lys Asn Arg Ala Val Lys Lys Ala Lys Arg Arg Asn Val
35 40 45Gly Phe Glu Ser Asp Ser Gly Gly Ala Phe Lys Gly Phe Lys Gly Leu
50 55 60Val Val Pro Ser Gly Gly Gly Gly Phe Ser Gly Phe Gly Gly Ser Gly65 70 75 80Gly Lys Pro Leu Glu Gly Leu Thr Asn Gly Asn Ser Thr Asp Asn Ala
85 90 95Thr Pro Phe Ser Asn Val Lys Thr Ala Ala Glu Pro Lys Ala Ala Phe
100 105 110Gly Ser Phe Ala Val Asn Gly Pro Thr Thr Leu Val Asp Lys Val Ser
115 120 125Asn Pro Lys Thr Asn Gly Asp Ser Asn Gln Pro Pro Ser Ser Gly Pro
130 135 140Ala Ser Ser Thr Ala Cys Pro Gly Asn Ala Tyr His Lys Gln Leu Ala145 150 155 160Gly Leu Asn Cys Ser Val Arg Asp Trp Ile Val Lys His Val Asn Thr
165 170 175Asn Pro Leu Cys Asp Leu Thr Pro Ile Phe Lys Asp Tyr Glu Arg Tyr
180 185 190Leu Ala Thr Ile Glu Lys Gln Leu Glu Asn Gly Gly Gly Ser Ser Ser
195 200 205Glu Ser Gln Thr Asp Arg Ala Thr Ala Gly Met Glu Pro Pro Ser Leu
210 215 220Phe Gly Ser Thr Lys Leu Gln Gln Glu Ser Pro Phe Ser Phe His Gly225 230 235 240Asn Lys Ala Glu Asp Thr Ser Glu Lys Val Glu Phe Thr Ala Glu Lys
245 250 255Lys Ser Asp Ala Ala Gln Gly Ala Thr Ser Ala Ser Phe Ser Phe Gly
260 265 270Lys Lys Ile Glu Ser Ser Ala Leu Gly Ser Leu Ser Ser Gly Ser Leu
275 280 285Thr Gly Phe Ser Phe Ser Ala Gly Ser Ser Ser Leu Phe Gly Lys Asp
290 295 300Ala Ala Gln Ser Lys Ala Ala Ser Ser Leu Phe Ser Ala Lys Ala Ser305 310 315 320Glu Ser Pro Ala Gly Gly Gly Ser Ser Glu Cys Arg Asp Gly Glu Glu
325 330 335Glu Glu Asn Asp Glu Pro Pro Lys Val Val Val Thr Glu Val Lys Glu
340 345 350Glu Asp Ala Phe Tyr Ser Lys Lys Cys Lys Leu Phe Tyr Lys Lys Asp
355 360 365Asn Glu Phe Lys Glu Lys Gly Val Gly Thr Leu His Leu Lys Pro Thr
370 375 380Ala Thr Gln Lys Thr Gln Leu Leu Val Arg Ala Asp Thr Asn Leu Gly385 390 395 400Asn Ile Leu Leu Asn Val Leu Ile Ala Pro Asn Met Pro Cys Thr Arg
405 410 415Thr Gly Lys Asn Asn Val Leu Ile Val Cys Val Pro Asn Pro Pro Leu
420 425 430Asp Glu Lys Gln Pro Thr Leu Pro Ala Thr Met Leu Ile Arg Val Lys
435 440 445Thr Ser Glu Asp Ala Asp Glu Leu His Lys Ile Leu Leu Glu Lys Lys
450 455 460Asp Ala465NUP2(酵母) [SEQ ID No.:17]Met Ala Lys Arg Val Ala Asp Ala Gln Ile Gln Arg Glu Thr Tyr Asp1 5 10 15Ser Asn Glu Ser Asp Asp Asp Val Thr Pro Ser Thr Lys Val Ala Ser
20 25 30Ser Ala Val Met Asn Arg Arg Lys Ile Ala Met Pro Lys Arg Arg Met
35 40 45Ala Phe Lys Pro Phe Gly Ser Ala Lys Ser Asp Glu Thr Lys Gln Ala
50 55 60Ser Ser Phe Ser Phe Leu Asn Arg Ala Asp Gly Thr Gly Glu Ala Gln65 70 75 80Val Asp Asn Ser Pro Thr Thr Glu Ser Asn Ser Arg Leu Lys Ala Leu
85 90 95Asn Leu Gln Phe Lys Ala Lys Val Asp Asp Leu Val Leu Gly Lys Pro
100 105 110Leu Ala Asp Leu Arg Pro Leu Phe Thr Arg Tyr Glu Leu Tyr Ile Lys
115 120 125Asn Ile Leu Glu Ala Pro Val Lys Phe Ile Glu Asn Pro Thr Gln Thr
130 135 140Lys Gly Asn Asp Ala Lys Pro Ala Lys Val Glu Asp Val Gln Lys Ser145 150 155 160Ser Asp Ser Ser Ser Glu Asp Glu Val Lys Val Glu Gly Pro Lys Phe
165 170 175Thr Ile Asp Ala Lys Pro Pro Ile Ser Asp Ser Val Phe Ser Phe Gly
180 185 190Pro Lys Lys Glu Asn Arg Lys Lys Asp Glu Ser Asp Ser Glu Asn Asp
195 200 205Ile Glu Ile Lys Gly Pro Glu Phe Lys Phe Ser Gly Thr Val Ser Ser
210 215 220Asp Val Phe Lys Leu Asn Pro Ser Thr Asp Lys Asn Glu Lys Lys Thr225 230 235 240Glu Thr Asn Ala Lys Pro Phe Ser Phe Ser Ser Ala Thr Ser Thr Thr
245 250 255Glu Gln Thr Lys Ser Lys Asn Pro Leu Ser Leu Thr Glu Ala Thr Lys
260 265 270Thr Asn Val Asp Asn Asn Ser Lys Ala Glu Ala Ser Phe Thr Phe Gly
275 280 285 Thr Lys His Ala Ala Asp Ser Gln Asn Asn Lys Pro Ser Phe Val Phe
290 295 300Gly Gln Ala Ala Ala Lys Pro Ser Leu Glu Lys Ser Ser Phe Thr Phe305 310 315 320Gly Ser Thr Thr Ile Glu Lys Lys Asn Asp Glu Asn Ser Thr Ser Asn
325 330 335Ser Lys Pro Glu Lys Ser Ser Asp Ser Asn Asp Ser Asn Pro Ser Phe
340 345 350Ser Phe Ser Ile Pro Ser Lys Asn Thr Pro Asp Ala Ser Lys Pro Ser
355 360 365Phe Asn Phe Gly Val Pro Asn Ser Ser Lys Asn Glu Thr Ser Lys Pro
370 375 380Val Phe Ser Phe Gly Ala Ala Thr Pro Ser Ala Lys Glu Ala Ser Gln385 390 395 400Glu Asp Asp Asn Asn Asn Val Glu Lys Pro Ser Ser Lys Pro Ala Phe
405 410 415Asn Phe Ile Ser Asn Ala Gly Thr Glu Lys Glu Lys Glu Ser Lys Lys
420 425 430Asp Ser Lys Pro Ala Phe Ser Phe Gly Ile Ser Asn Gly Ser Glu Ser
435 440 445Lys Asp Ser Asp Lys Pro Ser Leu Pro Ser Ala Val Asp Gly Glu Asn
450 455 460Asp Lys Lys Glu Ala Thr Lys Pro Ala Phe Phe Gly Ile Asn Thr Asn465 470 475 480Thr Thr Lys Thr Ala Asp Thr Lys Ala Pro Thr Phe Thr Phe Gly Ser
485 490 495Ser Ala Leu Ala Asp Asn Lys Glu Asp Val Lys Lys Pro Phe Ser Phe
500 505 510Gly Thr Ser Gln Pro Asn Asn Thr Pro Ser Phe Ser Phe Gly Lys Thr
515 520 525Thr Ala Asn Leu Pro Ala Asn Ser Ser Thr Ser Pro Ala Pro Ser Ile
530 535 540Pro Ser Thr Gly Phe Lys Phe Ser Leu Pro Phe Glu Gln Lys Gly Ser545 550 555 560Gln Thr Thr Thr Asn Asp Ser Lys Glu Glu Ser Thr Thr Glu Ala Thr
565 570 575Gly Asn Glu Ser Gln Asp Ala Thr Lys Val Asp Ala Thr Pro Glu Glu
580 585 590Ser Lys Pro Ile Asn Leu Gln Asn Gly Glu Glu Asp Glu Val Ala Leu
595 600 605Phe Ser Lys Ala Lys Leu Met Thr Phe Asn Ala Glu Thr Lys Ser Tyr
610 615 620Asp Ser Arg Gly Val Gly Glu Met Lys Leu Leu Lys Lys Lys Asp Asp625 630 635 640Pro Ser Lys Val Arg Leu Leu Cys Arg Ser Asp Gly Met Gly Asn Val
645 650 655Leu Leu Asn Ala Thr Val Val Asp Ser Phe Lys Tyr Glu Pro Leu Ala
660 665 670Pro Gly Asn Asp Asn Leu Ile Lys Ala Pro Thr Val Ala Ala Asp Gly
675 680 685Lys Thr Tyr Ile Val Lys Phe Lys Gln Lys Glu Glu Gly Arg Ser Phe
690 695 700Thr Lys Ala Ile Glu Asp Ala Lys Lys Glu Lys705 710 715
表7检测HeLa细胞中p27和p163之间的结合
被下列物质转染的HeLa
细胞的总蛋白的沉淀与下列物质的沉淀 CMV-p27 CMV-p27 -
+
CMV-Nap CMV-Nap2 -Nap2-特异性抗体 - + + -p27-特异性抗体 + ++ - -
表8 [SEQ ID NO.:18]Met Ala Lys Arg Val Ala Glu Lys Glu Leu Thr Asp Arg Asn Trp Asp1 5 10 15Glu Glu Asp Glu Val Glu Glu Met Gly Thr Phe Ser Val Ala Ser Glu
20 25 30Glu Val Mer Lys Asn Arg Ala Val Lys Lys Ala Lys Arg Arg Asn Val
35 40 45Gly Phe Glu Ser Asp Ser Gly Gly Ala Phe Lys Gly Phe Lys Gly Leu
50 55 60Val Val Pro Ser Gly Gly Gly Gly Phe Ser Gly Phe Gly Gly Ser Gly65 70 75 80Gly Lys Pro Leu Glu Gly Leu Thr Asn Gly Asn Ser Thr Asp Asn Ala
85 90 95Thr Pro Phe Ser Asn Val Lys Thr Ala Ala Glu Pro Lys Ala Ala Phe
100 105 110Gly Ser Phe Ala Val Asn Gly Pro Phe Thr Ala Glu Lys Lys Ser Asp
115 120 125Ala Ala Gln Gly Ala Thr Ser Ala Ser Phe Ser Phe Gly Lys Lys Ile
130 135 140Glu Ser Ser Ala Leu Gly Ser Leu Ser Ser Gly Ser Leu Thr Gly Phe145 150 155 160Ser Phe Ser Ala Gly Ser Ser Ser Leu Phe Gly Lys Asp Ala Ala Gln
165 170 175Ser Lys Ala Ala Ser Ser Leu Phe Ser Ala Lys Ala Ser Glu Ser Pro
180 185 190Ala Gly Gly Gly Ser Ser Glu Cys Arg Asp Gly Glu Glu Glu Glu Asn
195 200 205Asp Glu Pro Pro Lys Val Val Val Thr Glu Val Lys Glu Glu Asp Ala
210 215 220Phe Tyr Ser Lys Lys Cys Lys Leu Phe Tyr Lys Lys Asp Asn Glu Phe225 230 235 240Lys Glu Lys Gly Val Gly Thr Leu His Leu Lys Pro Thr Ala Thr Gln
245 250 255Lys Thr Gln Leu Leu Val Arg Ala Asp Thr Asn Leu Gly Asn Ile Leu
260 265 270Leu Asn Val Leu Ile Ala Pro Asn Met Pro Cys Thr Arg Thr Gly Lys
275 280 285Asn Asn Val Leu Ile Val Cys Val Pro Asn Pro Pro Leu Asp Glu Lys
290 295 300Gln Pro Thr Leu Pro Ala Thr Met Leu Ile Arg Val Lys Thr Ser Glu305 310 315 320Asp Ala Asp Glu Leu His Lys Ile Leu Leu Glu Lys Lys Asp Ala
325 330 335表9 [SEQ ID NO.:19]Mer Ala Lys Arg Val Ala Glu Lys Glu Leu Thr Asp Arg Asn Trp Asp1 5 10 15Glu Glu Asp Glu Val Glu Glu Met Gly Thr Phe Ser Val Ala Ser Glu
20 25 30Glu Val Met Lys Asn Arg Ala Val Lys Lys Ala Lys Arg Arg Asn Val
35 40 45Gly Phe Glu Ser Asp Ser Gly Gly Ala Phe Lys Gly Phe Lys Gly Leu
50 55 60Val Val Pro Ser Gly Gly Gly Gly Phe Ser Gly Phe Gly Gly Ser Gly65 70 75 80Gly Lys Pro Leu Glu Gly Leu Thr Asn Gly Asn Ser Thr Asp Asn Ala
85 90 95Thr Pro Phe Ser Asn Val Lys Thr Ala Ala Glu Pro Lys Ala Ala Phe
100 105 110Gly Ser Phe Ala Val Asn Gly Pro Thr Thr Leu Val Asp Lys Val Ser
115 120 125Asn Pro Lys Thr Asn Gly Asp Ser Asn Gln Pro Pro Ser Ser Gly Pro
130 135 140Ala Ser Ser Thr Ala Cys Pro Gly Asn Ala Tyr His Lys Gln Leu Ala145 150 155 160Gly Leu Asn Cys Ser Val Arg Asp Trp Ile Val Lys His Val Asn Ile
165 170 175Asn Pro Leu Cys Asp Leu Thr Pro Ile Phe Lys Asp Tyr Glu Arg Tyr
180 185 190Leu Ala Thr Ile Glu Lys Gln Leu Glu Asn Gly Gly Gly Ser Ser Ser
195 200 205Glu Ser Gln Thr Asp Arg Ala Thr Ala Gly Met Glu Pro Pro Ser Leu
210 215 220Phe Gly Ser Thr Lys Leu Gln Gln Glu Ser Pro Phe Ser Phe His Gly225 230 235 240Asn Lys Ala Glu Asp Thr Ser Glu Lys Val Glu Phe Thr Ala Glu Lys
245 250 255Lys Ser Asp Ala Ala Gln Gly Ala Thr Ser Ala Ser Phe Ser Phe Gly
260 265 270Lys Lys Ile Glu Ser Ser Ala Leu Gly Ser Leu Ser Ser Gly Ser Leu
275 280 285Thr Gly Phe Ser Phe Ser Ala Gly Ser Ser Ser Leu Phe Gly Lys Asp
290 295 300Ala Ala Glu Lys Glu Leu305 310
表10 [SEQ ID NO.:20]Thr Thr Leu Val Asp Lys Val Ser Asn Pro Lys Thr Asn Gly Asp Ser1 5 10 15Asn Gln Pro Pro Ser Ser Gly Pro Ala Ser Ser Thr Ala Cys Pro Gly
20 25 30Asn Ala Tyr His Lys Gln Leu Ala Gly Leu Asn Cys Ser Val Arg Asp
35 40 45Trp Ile Val Lys His Val Asn Thr Asn Pro Leu Cys Asp Leu Thr Pro
50 55 60Ile Phe Lys Asp Tyr Glu Arg Tyr Leu Ala Thr Ile Glu Lys Gln Leu65 70 75 80Glu Asn Gly Gly Gly Ser Ser Ser Glu Ser Gln Thr Asp Arg Ala Thr
85 90 95Ala Gly Met Glu Pro Pro Ser Leu Phe Gly Ser Thr Lys Leu Gln Gln
100 105 110Glu Ser Pro Phe Ser Phe His Gly Asn Lys Ala Glu Asp Thr Ser Glu
115 120 125Lys Val Glu Phe
130
表11
p163中的GUC序列 核苷酸位置 序列422-424 GGAA GTC ATGA818-820 CTCC GTC CGCG1021-1023 AAGA GTC ACCA1287-1289 GAGA GTC CGGC1586-1588 CAAC GTC CTTA1595-1597 TATC GTC TGTG1601-1603 CTGT GTC CCCA EST62312(人)中核苷酸位置 序列氨基酸212-214 GACT GTC GAAT 87358-360 GACA GTC AGCA 136402-404 TTGT GTC GGAA 150相互作用的区域含有编号所涉及的小鼠序列的氨基酸121-252。这对应于小鼠序列的核苷酸685-1078。
表12a：5个选定的引物对评分 长度 GC％ 基因座 名称5｀ 3｀5.8 108 43.5 122..143 上： AGAAAGCAAAGCGCAGAAATGT
[SEQ ID NO.:21]
229..209 下： CAAATCCAGAAAAGCGTCCTC
[SEQ ID NO.:22]6.7 119 42.0 104..127 上： TGAAGAATAGAGCCATAAAGAAAG
[SEQ ID NO.:23]
240..220 下： AGAAAAGCGTCCTCCTCCAGA
[SEQ ID NO.:24]23.3 137 43.8 104..127 上： TGAAGAATAGAGCCATAAAGAAAG
[SEQ ID NO.:25]
204..220 下： AGCGCCACTAACCAAATCCAGA
[SEQ ID NO.:26]25.7 100 44.0 122..143 上： AGAAAGCAAAGCGCAGAAATGT
[SEQ ID NO.:27]
221..200 下： GAAAAGCGTCCTCCTCCAGAAG
[SEQ ID NO.:28]48.7 122 46.7 123..144 上： GAAAGCAAAGCGCAGAAATGTT
[SEQ ID NO.:29]
244..224 下： CTCCAGCGCCACTACCAAATC
[SEQ ID NO.:30]
表12b：1个选定的引物对评分 长度 GC％ 基因座 名称5｀ 3｀51.3 193 52.8 34..53 上： CCCGCACGGAGCAGTTCAAG
[SEQ ID NO.:31]
226..205 下： GCAGCGGCAGATCCCAAGGTAG
[SEQ ID NO.:32]
表12c：1个选定的引物对评分 长度 GC％ 基因座 名称5｀ 32.4 136 45.6 4..20 上： GGCATCCTTTTTCTCCA
[SEQ ID NO.:33]
139..120 下： CGTTCTTATCGTCTCTGTGTTC
[SEQ ID NO.:34]2.5 120 45.0 5..23 上： GCATCCTTTTTCTCCAGTA
[SEQ ID NO.:35]
139..119 下： TGTTCCAAATCCACCAAT
[SEQ ID NO.:36]2.7 100 48.0 40..58 上： GTCTGCATCCTCGCTGGTT
[SEQ ID NO.:37]
139..119 下： CGTTCTTATCGTCTGTGTTCC
[SEQ ID NO.:38]50.0 105 44.8 57..75 上： TTTTACCCGAATCAACAT
[SEQ ID NO.:39]
161..141 下： GTAcGCGAACAGGGAAGAATA
[SEQ ID NO.:40]
表13：生长实验概要 细胞周期蛋白D1 Nup2 非选择性的选择性的非选择性的选择性的wtp27++++++++++++Mut106++++++++++++Mut152++++++++Mut294+++++++++-Mut660+++++++++-Mut687+++-+++-Mut826++++++++++++Mut850+++++++++-
表14：与野生型相比突变p27蛋白的序列A)
B)序列 SEQ ID NO.: 大多数 41 克隆 # 106 42 克隆 # 152 43 克隆 # 294 44 克隆 # 660 45 克隆 # 687 46 克隆 # 826 47 克隆 # 850 48 p27(小鼠) 49
序列表(1)一般资料：
(ⅰ)申请人：
(A)名称：Hoechst Marion Roussel Deutschland GmbH
(B)街道：-
(C)城市：法兰克福
(D)州：-
(E)国家：德国
(F)邮政编码(ZIP)：65926
(G)电话：069-305-3005
(H)传真：069-35-7175
(I)电报：-
(ⅱ)发明题目：依赖于细胞周期蛋白的激酶的抑制剂的结合配偶体及
其用于筛查抑制剂和诊断或治疗疾病的用途
(ⅲ)序列数：49
(ⅳ)计算机可读形式：
(A)介质类型：软盘
(B)计算机：IBM PC兼容机
(C)操作系统：PC-DOS/MS-DOS
(D)软件：PatentIn Release#1.0,Version#1.30(EPO)(2)SEQ ID NO:1的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：1958个碱基对
(B)类型：核酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：DNA(基因组的)
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：外显子
(B)位置：1…1958
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:1:TCGAATTGGG TACCGGGCCC CCCCTCGAGG TCGACGGTAT CGATAAGCTT GATATCGAAT 60TCGCGGCCGC TCGAGTTACA AGATGGCGGC CCCGGGCGCT CTCTTCACCG TTCTGTAGCA 120GCTTCGGGCT GAGCGGATGT CTCTTCTTGT CCTCAGTGTC GGACTCAGAG ACACACGGCT 180CCCGAGTTCT GCTGATCACG AAGTTCCCGG AGGCGCTCGA CGCACCGGAA TCTCCCAGCG 240GCCGCGACCG CCGCCTCGGC CCTGCTCGCC GCGGCGCCGG GACTCCAGCG TGATCGGCGG 300CGGCAGTCAA GGTTCACAAA AATGGCGAAG AGAGTTGCGG AGAAGGAGTT GACTGACAGG 360AACTGGGATG AGGAAGACGA AGTTGAAGAG ATGGGAACAT TCTCAGTGGC CAGTGAGGAA 420GTCATGAAGA ACAGAGCCGT AAAGAAGGCA AAGCGCAGAA ACGTTGGATT TGAATCTGAT 480AGCGGAGGAG CCTTTAAAGG TTTCAAAGGT TTGGTTGTGC CTTCTGGAGG AGGAGGGTTT 540TCTGGATTTG GTGGCTCTGG AGGAAAGCCT CTGGAAGGAC TGACAAATGG AAACAGCACA 600GACAATGCCA CGCCCTTCTC CAATGTAAAG ACAGCAGCAG AGCCCAAGGC AGCCTTTGGT 660TCTTTTGCTG TGAATGGCCC TACTACCTTG GTGGATAAAG TTTCAAATCC AAAAACTAAT 720GGGGACAGCA ATCAGCCGCC CTCCTCCGGC CCTGCTTCCA GTACCGCCTG CCCTGGGAAT 780GCCTATCACA AGCAGCTGGC TGGCTTGAAC TGCTCCGTCC GCGATTGGAT AGTGAAGCAC 840GTGAACACAA ACCCGCTTTG TGACCTGACT CCCATTTTTA AAGACTATGA GAGATACTTG 900GCGACGATCG AGAAGCAGCT TGAGAATGGA GGCGGCAGCA GTTCTGAGAG CCAGACAGAC 960AGGGCGACGG CTGGAATGGA GCCTCCTTCC CTTTTTGGTT CAACAAAACT ACAGCAAGAG 1020TCACCATTTT CATTTCATGG CAACAAAGCG GAGGACACAT CTGAAAAGGT GGAGTTTACA 1080GCAGAAAAGA AATCGGACGC AGCACAAGGA GCAACAAGTG CCTCGTTTAG TTTCGGCAAG 1140AAAATTGAGA GCTCGGCTTT GGGCTCGTTA AGCTCTGGCT CCCTAACTGG GTTTTCATTC 1200TCTGCTGGAA GCTCCAGCTT GTTTGGTAAA GATGCTGCCC AGAGTAAAGC AGCCTCTTCG 1260CTGTTCTCTG CTAAAGCATC CGAGAGTCCG GCAGGAGGCG GCAGCAGCGA GTGCAGAGAT 1320GGTGAAGAAG AGGAGAATGA CGAGCCACCC AAGGTAGTGG TGACCGAAGT AAAGGAAGAG 1380GATGCTTTCT ACTCCAAAAA ATGTAAACTA TTTTACAAGA AAGACAACGA ATTTAAAGAG 1440AAGGGTGTGG GGACCCTGCA TTTAAAACCC ACAGCAACTC AGAAGACCCA GCTCTTGGTG 1500CGGGCAGACA CCAACCTAGG CAACATACTG CTGAATGTTC TGATCGCCCC CAACATGCCG 1560TGCACCCGGA CAGGAAAGAA CAACGTCCTT ATCGTCTGTG TCCCCAACCC CCCACTCGAT 1620GAGAAGCAGC CCACTCTCCC GGCCACCATG CTGATCCGGG TGAAGACGAG CGAGGATGCC 1680GATGAATTGC ACAAGATTTT ACTGGAGAAA AAGGATGCCT GAGCACTGAG GCTGACCAAG 1740GCATGTTGCC ACGTTGCTGC TTCCCCTCCG TCCCTAACTT AGTCACATTC TTTCCTCTTC 1800TACTGTGACA TTCTGAGAAC TTCTAGGTAA CTTGAACTTT TGTGAGGAAG ATTAAGGCCA 1860ATAAATCCTT TCAGTGGCGG CCGCGAATTC CTGCAGCCCG GGGGATCCAC TAGTTCTAGA 1920GCGGCCGCCA CCGCGGTGGA GCTCCAGCTT TTGGGAGA 1958(2)SEQ ID NO:2的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：24个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…24
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:2:Met Ala Lys Arg Val Ala Glu Lys Glu Leu Thr Asp Arg Asn Trp Asp1 5 10 15Glu Glu Asp Glu Val Glu Glu Met
20(2)SEQ ID NO:3的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：24个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…24
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:3:Met Ala Lys Arg Val Ala Asp Ala Gln Ile Gln Arg Glu Thr Tyr Asp1 5 10 15Ser Asn Glu Ser Asp Asp Asp Val
20(2)SEQ ID NO:4的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：60个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…60
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:4:Asn Gln Pro Pro Ser Ser Gly Pro Ala Ser Ser Thr Ala Cys Pro Gly1 5 10 15Asn Ala Tyr His Lys Gln Leu Ala Gly Leu Asn Cys Ser Val Arg Asp
20 25 30Trp Ile Val Lys His Val Asn Thr Asn Pro Leu Cys Asp Leu Thr Pro
35 40 45Ile Phe Lys Asp Tyr Glu Arg Tyr Leu Ala Thr Ile
50 55 60(2)SEQ ID NO:5的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：60个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…60
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:5:Asn Arg Ala Asp Gly Thr Gly Glu Ala Gln Val Asp Asn Ser Pro Thr1 5 10 15Thr Glu Ser Asn Ser Arg Leu Lys Ala Leu Asn Leu Gln Phe Lys Ala
20 25 30Lys Val Asp Asp Leu Val Leu Gly Lys Pro Leu Ala Asp Leu Arg Pro
35 40 45Leu Phe Thr Arg Tyr Glu Leu Tyr Ile Lys Asn Ile
50 55 60(2)SEQ ID NO:6的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：51个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…51
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:6:Ala Thr Ala Gly Met Glu Pro Pro Ser Leu Phe Gly Ser Thr Lys Leu1 5 10 15Gln Gln Glu Ser Pro Phe Ser Phe His Gly Asn Lys Ala Glu Asp Thr
20 25 30Ser Glu Lys Val Glu Phe Thr Ala Glu Lys Lys Ser Asp Ala Ala Gln
35 40 45Gly Ala Thr
50(2)SEQ ID NO:7的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：51个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…51
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:7:Ala Asn Ser Ser Thr Ser Pro Ala Pro Ser Ile Pro Ser Thr Gly Phe1 5 10 15Lys Phe Ser Leu Pro Phe Glu Gln Lys Gly Ser Gln Thr Thr Thr Asn
20 25 30Asp Ser Lys Glu Glu Ser Thr Thr Glu Ala Thr Gly Asn Glu Ser Gln
35 40 45Asp Ala Thr
50(2)SEQ ID NO:8的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：34个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…34
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:8:His Gly Asn Lys Ala Glu Asp Thr Ser Glu Lys Val Glu Phe Thr Ala1 5 10 15Glu Lys Lys Ser Asp Ala Ala Gln Gly Ala Thr Ser Ala Ser Phe Ser
20 25 30Phe Gly(2)SEQ ID NO:9的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：34个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…34
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:9:Asn Gly Ser Glu Ser Lys Asp Ser Asp Lys Pro Ser Leu Pro Ser Ala1 5 10 15Val Asp Gly Glu Asn Asp Lys Lys Glu Ala Thr Lys Pro Ala Phe Ser
20 25 30Phe Gly(2)SEQ ID NO:10的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：40个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…40
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:10:Leu Gly Asn Ile Leu Leu Asn Val Leu Ile Ala Pro Asn Met Pro Cys1 5 10 15Thr Arg Thr Gly Lys Asn Asn Val Leu Ile Val Cys Val Pro Asn Pro
20 25 30Pro Leu Asp Glu Lys Gln Pro Thr
35 40(2)SEQ ID NO:11的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：40个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…40
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:11:Met Gly Asn Val Leu Leu Asn Ala Thr Val Val Asp Ser Phe Lys Tyr1 5 10 15Glu Pro Leu Ala Pro Gly Asn Asp Asn Leu Ile Lys Ala Pro Thr Val
20 25 30Ala Ala Asp Gly Lys Leu Val Thr
35 40(2)SEQ ID NO:12的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：157个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…157
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:12:Asp Ser His Ala Asp His Asp Thr Ser Thr Glu Asn Ala Asp Glu Ser1 5 10 15Thr Thr His Pro Gln Phe Glu Pro Ile Val Ser Val Pro Glu Gln Glu
20 25 30Ile Lys Thr Leu Glu Glu Asp Glu Glu Glu Leu Phe Lys Met Arg Ala
35 40 45Lys Leu Phe Arg Phe Ala Ser Glu Asn Asp Leu Pro Glu Trp Lys Glu
50 55 60Pro Arg His Gly Asp Val Lys Leu Leu Lys His Lys Glu Lys Gly Thr65 70 75 80Ile Arg Leu Leu Met Arg Arg Asp Lys Thr Leu Lys Ile Cys Ala Asn
85 90 95His Tyr Ile Thr Pro Met Met Glu Leu Lys Pro Asn Ala Gly Ser Asp
100 105 110Arg Ala Trp Val Trp Asn Thr His Thr Asp Phe Ala Asp Glu Cys Pro
115 120 125Lys Pro Glu Leu Leu Ala Ile Arg Phe Leu Asn Ala Glu Asn Ala Gln
130 135 140Lys Phe Lys Thr Lys Phe Glu Glu Cys Arg Lys Glu Ile145 150 155(2)SEQ ID NO:13的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：157个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…157
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:13:Asp Ser His Ala Asp His Asp Thr Ser Thr Glu Asn Ala Asp Glu Ser1 5 10 15Asn His Asp Pro Gln Phe Glu Pro Ile Val Ser Val Pro Glu Gln Glu
20 25 30Ile Lys Thr Leu Glu Glu Asp Glu Glu Glu Leu Phe Lys Met Arg Ala
35 40 45Lys Leu Phe Arg Phe Ala Ser Glu Asn Asp Leu Pro Glu Trp Lys Glu
50 55 60Arg Gly Thr Gly Asp Val Lys Leu Leu Lys His Lys Glu Lys Gly Thr65 70 75 80Ile Arg Leu Leu Met Arg Arg Asp Lys Thr Leu Lys Ile Cys Ala Asn
85 90 95His Tyr Ile Thr Pro Met Met Glu Leu Lys Pro Asn Ala Gly Ser Asp
100 105 110Arg Ala Trp Val Trp Asn Thr His Thr Asp Phe Ala Asp Glu Cys Pro
115 120 125Lys Pro Glu Leu Leu Ala Ile Arg Phe Leu Asn Ala Glu Asn Ala Gln
130 135 140Lys Phe Lys Thr Lys Phe Glu Glu Cys Arg Lys Glu Ile145 150 155(2)SEQ ID NO:14的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：158个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…158
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:14:Ser Gln Thr Thr Thr Asn Asp Ser Lys Glu Glu Ser Thr Thr Glu Ala1 5 10 15Thr Gly Asn Glu Ser Gln Asp Ala Thr Lys Val Asp Ala Thr Pro Glu
20 25 30Glu Ser Lys Pro Ile Asn Leu Gln Asn Gly Glu Glu Asp Glu Val Ala
35 40 45Leu Phe Ser Gln Lys Ala Lys Leu Met Thr Phe Asn Ala Glu Thr Lys
50 55 60Ser Tyr Asp Ser Arg Gly Val Gly Glu Met Lys Leu Leu Lys Lys Lys65 70 75 80Asp Asp Ser Pro Lys Val Arg Leu Leu Cys Arg Ser Asp Gly Met Gly
85 90 95Asn Val Leu Leu Asn Ala Thr Val Val Asp Ser Phe Lys Tyr Glu Pro
100 105 110Leu Ala Pro Gly Asn Asp Asn Leu Ile Lys Ala Pro Thr Val Ala Ala
115 120 125Asp Gly Lys Leu Val Thr Tyr Ile Val Phe Lys Gln Lys Leu Glu Gly
130 135 140Arg Ser Phe Thr Lys Ala Ile Glu Asp Ala Lys Lys Glu Met145 150 155(2)SEQ ID NO:15的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：160个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…160
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:15:Gln Ser Lys Ala Ala Ser Ser Leu Phe Ser Ala Lys Ala Ser Glu Ser1 5 10 15Pro Ala Gly Gly Gly Ser Ser Glu Cys Arg Asp Gly Glu Glu Glu Glu
20 25 30Asn Asp Glu Pro Pro Lys Val Val Val Thr Glu Val Lys Glu Glu Asp
35 40 45Ala Phe Tyr Ser Lys Lys Cys Lys Leu Phe Tyr Lys Lys Asp Asn Glu
50 55 60Phe Lys Glu Lys Gly Val Gly Thr Leu His Leu Lys Pro Thr Ala Thr65 70 75 80Gln Lys Thr Gln Leu Leu Val Arg Ala Asp Thr Asn Leu Gly Asn Ile
85 90 95Leu Leu Asn Val Leu Ile Ala Pro Asn Met Pro Cys Thr Arg Thr Gly
100 105 110Lys Asn Asn Val Leu Ile Val Cys Val Pro Asn Pro Leu Asp Glu Lys
115 120 125Gln Pro Thr Leu Pro Ala Thr Met Leu Ile Arg Val Lys Thr Ser Glu
130 135 140Asp Ala Asp Glu Leu His Lys Ile Leu Leu Glu Lys Lys Asp Ala Ala145 150 155 160(2)SEQ ID NO:16的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：466个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…466
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:16:Met Ala Lys Arg Val Ala Glu Lys Glu Leu Thr Asp Arg Asn Trp Asp1 5 10 15Glu Glu Asp Glu Val Glu Glu Met Gly Thr Phe Ser Val Ala Ser Glu
20 25 30Glu Val Met Lys Asn Arg Ala Val Lys Lys Ala Lys Arg Arg Asn Val
35 40 45Gly Phe Glu Ser Asp Ser Gly Gly Ala Phe Lys Gly Phe Lys Gly Leu
50 55 60Val Val Pro Ser Gly Gly Gly Gly Phe Ser Gly Phe Gly Gly Ser Gly65 70 75 80Gly Lys Pro Leu Glu Gly Leu Thr Asn Gly Asn Ser Thr Asp Asn Ala
85 90 95Thr Pro Phe Ser Asn Val Lys Thr Ala Ala Glu Pro Lys Ala Ala Phe
100 105 110Gly Ser Phe Ala Val Asn Gly Pro Thr Thr Leu Val Asp Lys Val Ser
115 120 125Asn Pro Lys Thr Asn Gly Asp Ser Asn Gln Pro Pro Ser Ser Gly Pro
130 135 140Ala Ser Ser Thr Ala Cys Pro Gly Asn Ala Tyr His Lys Gln Leu Ala145 150 155 160Gly Leu Asn Cys Ser Val Arg Asp Trp Ile Val Lys His Val Asn Thr
165 170 175Asn Pro Leu Cys Asp Leu Thr Pro Ile Phe Lys Asp Tyr Glu Arg Tyr
180 185 190Leu Ala Thr Ile Glu Lys Gln Leu Glu Asn Gly Gly Gly Ser Ser Ser
195 200 205Glu Ser Gln Thr Asp Arg Ala Thr Ala Gly Met Glu Pro Pro Ser Leu
210 215 220Phe Gly Ser Thr Lys Leu Gln Gln Glu Ser Pro Phe Ser Phe His Gly225 230 235 240Asn Lys Ala Glu Asp Thr Ser Glu Lys Val Glu Phe Thr Ala Glu Lys
245 250 255Lys Ser Asp Ala Ala Gln Gly Ala Thr Ser Ala Ser Phe Ser Phe Gly
260 265 270Lys Lys Ile Glu Ser Ser Ala Leu Gly Ser Leu Ser Ser Gly Ser Leu
275 280 285Thr Gly Phe Ser Phe Ser Ala Gly Ser Ser Ser Leu Phe Gly Lys Asp
290 295 300Ala Ala Gln Ser Lys Ala Ala Ser Ser Leu Phe Ser Ala Lys Ala Ser305 310 315 320Glu Ser Pro Ala Gly Gly Gly Ser Ser Glu Cys Arg Asp Gly Glu Glu
325 330 335Glu Glu Asn Asp Glu Pro Pro Lys Val Val Val Thr Glu Val Lys Glu
340 345 350Glu Asp Ala Phe Tyr Ser Lys Lys Cys Lys Leu Phe Tyr Lys Lys Asp
355 360 365Asn Glu Phe Lys Glu Lys Gly Val Gly Thr Leu His Leu Lys Pro Thr
370 375 380Ala Thr Gln Lys Thr Gln Leu Leu Val Arg Ala Asp Thr Asn Leu Gly385 390 395 400Asn Ile Leu Leu Asn Val Leu Ile Ala Pro Asn Met Pro Cys Thr Arg
405 410 415Thr Gly Lys Asn Asn Val Leu Ile Val Cys Val Pro Asn Pro Pro Leu
420 425 430Asp Glu Lys Gln Pro Thr Leu Pro Ala Thr Met Leu Ile Arg Val Lys
435 440 445Thr Ser Glu Asp Ala Asp Glu Leu His Lys Ile Leu Leu Glu Lys Lys
450 455 460Asp Ala465(2)SEQ ID NO:17的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：715个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…715
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:17:Met Ala Lys Arg Val Ala Asp Ala Gln Ile Gln Arg Glu Thr Tyr Asp1 5 10 15Ser Asn Glu Ser Asp Asp Asp Val Thr Pro Ser Thr Lys Val Ala Ser
20 25 30Ser Ala Val Met Asn Arg Arg Lys Ile Ala Met Pro Lys Arg Arg Met
35 40 45Ala Phe Lys Pro Phe Gly Ser Ala Lys Ser Asp Glu Thr Lys Gln Ala
50 55 60Ser Ser Phe Ser Phe Leu Asn Arg Ala Asp Gly Thr Gly Glu Ala Gln65 70 75 80Val Asp Asn Ser Pro Thr Thr Glu Ser Asn Ser Arg Leu Lys Ala Leu
85 90 95Asn Leu Gln Phe Lys Ala Lys Val Asp Asp Leu Val Leu Gly Lys Pro
100 105 110Leu Ala Asp Leu Arg Pro Leu Phe Thr Arg Tyr Glu Leu Tyr Ile Lys
115 120 125Asn Ile Leu Glu Ala Pro Val Lys Phe Ile Glu Asn Pro Thr Gln Thr
130 135 140Lys Gly Asn Asp Ala Lys Pro Ala Lys Val Glu Asp Val Gln Lys Ser145 150 155 160Ser Asp Ser Ser Ser Glu Asp Glu Val Lys Val Glu Gly Pro Lys Phe
165 170 175Thr Ile Asp Ala Lys Pro Pro Ile Ser Asp Ser Val Phe Ser Phe Gly
180 185 190Pro Lys Lys Glu Asn Arg Lys Lys Asp Glu Ser Asp Ser Glu Asn Asp
195 200 205Ile Glu Ile Lys Gly Pro Glu Phe Lys Phe Ser Gly Thr Val Ser Ser
210 215 220Asp Val Phe Lys Leu Asn Pro Ser Thr Asp Lys Asn Glu Lys Lys Thr225 230 235 240Glu Thr Asn Ala Lys Pro Phe Ser Phe Ser Ser Ala Thr Ser Thr Thr
245 250 255Glu Gln Thr Lys Ser Lys Asn Pro Leu Ser Leu Thr Glu Ala Thr Lys
260 265 270Thr Asn Val Asp Asn Asn Ser Lys Ala Glu Ala Ser Phe Thr Phe Gly
275 280 285Thr Lys His Ala Ala Asp Ser Gln Asn Asn Lys Pro Ser Phe Val Phe
290 295 300Gly Gln Ala Ala Ala Lys Pro Ser Leu Glu Lys Ser Ser Phe Thr Phe305 310 315 320Gly Ser Thr Thr Ile Glu Lys Lys Asn Asp Glu Asn Ser Thr Ser Asn
325 330 335Ser Lys Pro Glu Lys Ser Ser Asp Ser Asn Asp Ser Asn Pro Ser Phe
340 345 350Ser Phe Ser Ile Pro Ser Lys Asn Thr Pro Asp Ala Ser Lys Pro Ser
355 360 365Phe Asn Phe Gly Val Pro Asn Ser Ser Lys Asn Glu Thr Ser Lys Pro
370 375 380Val Phe Ser Phe Gly Ala Ala Thr Pro Ser Ala Lys Glu Ala Ser Gln385 390 395 400Glu Asp Asp Asn Asn Asn Val Glu Lys Pro Ser Ser Lys Pro Ala Phe
405 410 415Asn Phe Ile Ser Asn Ala Gly Thr Glu Lys Glu Lys Glu Ser Lys Lys
420 425 430Asp Ser Lys Pro Ala Phe Ser Phe Gly Ile Ser Asn Gly Ser Glu Ser
435 440 445Lys Asp Ser Asp Lys Pro Ser Leu Pro Ser Ala Val Asp Gly Glu Asn
450 455 460Asp Lys Lys Glu Ala Thr Lys Pro Ala Phe Phe Gly Ile Asn Thr Asn465 470 475 480Thr Thr Lys Thr Ala Asp Thr Lys Ala Pro Thr Phe Thr Phe Gly Ser
485 490 495Ser Ala Leu Ala Asp Asn Lys Glu Asp Val Lys Lys Pro Phe Ser Phe
500 505 510Gly Thr Ser Gln Pro Asn Asn Thr Pro Ser Phe Ser Phe Gly Lys Thr
515 520 525Thr Ala Asn Leu Pro Ala Asn Ser Ser Thr Ser Pro Ala Pro Ser Ile
530 535 540Pro Ser Thr Gly Phe Lys Phe Ser Leu Pro Phe Glu Gln Lys Gly Ser545 550 555 560Gln Thr Thr Thr Asn Asp Ser Lys Glu Glu Ser Thr Thr Glu Ala Thr
565 570 575Gly Asn Glu Ser Gln Asp Ala Thr Lys Val Asp Ala Thr Pro Glu Glu
580 585 590Ser Lys Pro Ile Asn Leu Gln Asn Gly Glu Glu Asp Glu Val Ala Leu
595 600 605Phe Ser Lys Ala Lys Leu Met Thr Phe Asn Ala Glu Thr Lys Ser Tyr
610 615 620Asp Ser Arg Gly Val Gly Glu Met Lys Leu Leu Lys Lys Lys Asp Asp625 630 635 640Pro Ser Lys Val Arg Leu Leu Cys Arg Ser Asp Gly Met Gly Asn Val
645 650 655Leu Leu Asn Ala Thr Val Val Asp Ser Phe Lys Tyr Glu Pro Leu Ala
660 665 670Pro Gly Asn Asp Asn Leu Ile Lys Ala Pro Thr Val Ala Ala Asp Gly
675 680 685Lys Thr Tyr Ile Val Lys Phe Lys Gln Lys Glu Glu Gly Arg Ser Phe
690 695 700Thr Lys Ala Ile Glu Asp Ala Lys Lys Glu Lys705 710 715(2)SEQ ID NO:18的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：335个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…335
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:18:Met Ala Lys Arg Val Ala Glu Lys Glu Leu Thr Asp Arg Asn Trp Asp 1 5 10 15Glu Glu Asp Glu Val Glu Glu Met Gly Thr Phe Ser Val Ala Ser Glu
20 25 30Glu Val Met Lys Asn Arg Ala Val Lys Lys Ala Lys Arg Arg Asn Val
35 40 45Gly Phe Glu Ser Asp Ser Gly Gly Ala Phe Lys Gly Phe Lys Gly Leu
50 55 60Val Val Pro Ser Gly Gly Gly Gly Phe Ser Gly Phe Gly Gly Ser Gly65 70 75 80Gly Lys Pro Leu Glu Gly Leu Thr Asn Gly Asn Ser Thr Asp Asn Ala
85 90 95Thr Pro Phe Ser Asn Val Lys Thr Ala Ala Glu Pro Lys Ala Ala Phe
100 105 110Gly Ser Phe Ala Val Asn Gly Pro Phe Thr Ala Glu Lys Lys Ser Asp
115 120 125Ala Ala Gln Gly Ala Thr Ser Ala Ser Phe Ser Phe Gly Lys Lys Ile
130 135 140Glu Ser Ser Ala Leu Gly Ser Leu Ser Ser Gly Ser Leu Thr Gly Phe145 150 155 160Ser Phe Ser Ala Gly Ser Ser Ser Leu Phe Gly Lys Asp Ala Ala Gln
165 170 175Ser Lys Ala Ala Ser Ser Leu Phe Ser Ala Lys Ala Ser Glu Ser Pro
180 185 190Ala Gly Gly Gly Ser Ser Glu Cys Arg Asp Gly Glu Glu Glu Glu Asn
195 200 205Asp Glu Pro Pro Lys Val Val Val Thr Glu Val Lys Glu Glu Asp Ala
210 215 220Phe Tyr Ser Lys Lys Cys Lys Leu Phe Tyr Lys Lys Asp Asn Glu Phe225 230 235 240Lys Glu Lys Gly Val Gly Thr Leu His Leu Lys Pro Thr Ala Thr Gln
245 250 255Lys Thr Gln Leu Leu Val Arg Ala Asp Thr Asn Leu Gly Asn Ile Leu
260 265 270Leu Asn Val Leu Ile Ala Pro Asn Met Pro Cys Thr Arg Thr Gly Lys
275 280 285Asn Asn Val Leu Ile Val Cys Val Pro Asn Pro Pro Leu Asp Glu Lys
290 295 300Gln Pro Thr Leu Pro Ala Thr Met Leu Ile Arg Val Lys Thr Ser Glu305 310 315 320Asp Ala Asp Glu Leu His Lys Ile Leu Leu Glu Lys Lys Asp Ala
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(A)名称/关键词：蛋白质
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100 105 110Gly Ser Phe Ala Val Asn Gly Pro Thr Thr Leu Val Asp Lys Val Ser
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130 135 140Ala Ser Ser Thr Ala Cys Pro Gly Asn Ala Tyr His Lys Gln Leu Ala145 150 155 160Gly Leu Asn Cys Ser Val Arg Asp Trp Ile Val Lys His Val Asn Ile
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195 200 205Glu Ser Gln Thr Asp Arg Ala Thr Ala Gly Met Glu Pro Pro Ser Leu
210 215 220Phe Gly Ser Thr Lys Leu Gln Gln Glu Ser Pro Phe Ser Phe His Gly225 230 235 240Asn Lys Ala Glu Asp Thr Ser Glu Lys Val Glu Phe Thr Ala Glu Lys
245 250 255Lys Ser Asp Ala Ala Gln Gly Ala Thr Ser Ala Ser Phe Ser Phe Gly
260 265 270Lys Lys Ile Glu Ser Ser Ala Leu Gly Ser Leu Ser Ser Gly Ser Leu
275 280 285Thr Gly Phe Ser Phe Ser Ala Gly Ser Ser Ser Leu Phe Gly Lys Asp
290 295 300Ala Ala Glu Lys Glu Leu305 310(2)SEQ ID NO:20的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：132个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
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(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
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50 55 60Ile Phe Lys Asp Tyr Glu Arg Tyr Leu Ala Thr Ile Glu Lys Gln Leu65 70 75 80Glu Asn Gly Gly Gly Ser Ser Ser Glu Ser Gln Thr Asp Arg Ala Thr
85 90 95Ala Gly Met Glu Pro Pro Ser Leu Phe Gly Ser Thr Lys Leu Gln Gln
100 105 110Glu Ser Pro Phe Ser Phe His Gly Asn Lys Ala Glu Asp Thr Ser Glu
115 120 125Lys Val Glu Phe
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(ⅸ)特征：
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(B)类型：核酸
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(ⅱ)分子类型：DNA(基因组的)
(ⅸ)特征：
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(ⅱ)分子类型：DNA(基因组的)
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(ⅸ)特征：
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(A)长度：22个碱基对
(B)类型：核酸
(C)链型：单链
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(ⅱ)分子类型：DNA(基因组的)
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(ⅰ)序列特征：
(A)长度：19个碱基对
(B)类型：核酸
(C)链型：单链
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(A)长度：21个碱基对
(B)类型：核酸
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(ⅱ)分子类型：DNA(基因组的)
(ⅸ)特征：
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(ⅰ)序列特征：
(A)长度：18个碱基对
(B)类型：核酸
(C)链型：单链
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(ⅱ)分子类型：DNA(基因组的)
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：外显子
(B)位置：1…18
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:39:TTTTACCCGA ATCAACAT 18(2)SEQ ID NO:40的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：21个碱基对
(B)类型：核酸
(C)链型：单链
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(ⅱ)分子类型：DNA(基因组的)
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：外显子
(B)位置：1…21
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(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
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20 25 30Asn His Gly Glu Leu Thr Arg Asp Leu Glu Lys His Cys Arg Asp Met
35 40 45Glu Glu Ala Ser Gln Arg Lys Trp Asn Phe Asp Phe Gln Asn His Lys
50 55 60Pro Leu Glu Gly Arg Tyr Glu Trp Gln Glu Val Glu Arg Gly Ser Leu65 70 75 80Pro Glu Phe Tyr Tyr Arg Pro Pro Arg Pro Pro Lys Ser Ala Cys Lys
85 90 95Val Leu Ala Gln Glu Ser Gln Asp Val Ser Gly Ser Arg Gln Ala Val
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115 120 125Gln Met Pro Asp Ser Ser Asp Asn Gln Ala Gly Leu Ala Glu Gln Cys
130 135 140Pro Gly Met Arg Lys Arg Pro Ala Ala Glu Asp Ser Ser Ser Gln Ile145 150 155 160Lys Arg Ala Asn Arg Thr Glu Glu Asn Val Ser Asp Gly Ser Pro Asn
165 170 175Ala Gly Thr Val Glu Gln Thr Pro Lys Lys Pro Gly Leu Arg Arg Gln
180 185 190Thr Arg Val Asp Leu Gln Pro Ser Phe Arg Ala Asn Phe Leu Phe Met
195 200 205Ile Phe Ile Lys
210(2)SEQ ID NO:42的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：183个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…183 (ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:42:Met Asp Ala Arg Gln Ala Asp His Pro Lys Pro Ser Ala Cys Arg Asn1 5 10 15Leu Phe Gly Pro Val Asn His Gly Glu Leu Thr Arg Asp Leu Glu Lys
20 25 30His Cys Arg Asp Met Glu Glu Ala Ser Gln Arg Lys Trp Asn Phe Asp
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100 105 110Arg His Leu Val Asp Gln Met Pro Asp Ser Ser Asp Asn Gln Ala Gly
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(ⅰ)序列特征：
(A)长度：199个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
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(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…199
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:43:
Arg Val Ser Asn Gly Ser Pro Ser Pro Glu Arg Met Asp Ala Arg Gln1 5 10 15Ala Asp His Pro Lys Pro Ser Ala Cys Arg Asn Leu Phe Gly Pro Val
20 25 30Asn His Gly Glu Leu Thr Arg Asp Leu Glu Lys His Cys Arg Asp Met
35 40 45Glu Glu Ala Ser Gln His Lys Trp Asn Phe Asp Phe Gln Asn His Arg
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85 90 95Val Leu Ala Gln Glu Ser Gln Asp Val Ser Gly Ser Arg Gln Ala Val
100 105 110Pro Leu Ile Gly Ser Gln Ala Asn Ser Glu Asp Arg His Leu Val Asp
115 120 125Gln Met Pro Asp Ser Ser Asp Asn Gln Ala Gly Leu Ala Glu Gln Cys
130 135 140Pro Gly Met Arg Lys Arg Pro Ala Ala Glu Asp Ser Ser Ser Gln Ile145 150 155 160Lys Arg Ala Asn Arg Thr Glu Glu Asn Val Ser Asp Gly Ser Pro Asn
165 170 175Ala Gly Thr Val Glu Gln Thr Pro Lys Lys Pro Gly Pro Arg Arg Gln
180 185 190Thr Arg Val Asp Leu Gln Pro
195(2)SEQ ID NO:44的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：199个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…199
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:44:Arg Val Ser Asn Gly Ser Pro Ser Leu Glu Arg Met Asp Ala Arg Gln1 5 10 15Ala Asp His Pro Lys Pro Ser Ala Cys Arg Asn Leu Phe Gly Pro Val
20 25 30Asn His Gly Glu Leu Thr Arg Asp Leu Glu Lys His Cys Arg Asp Met
35 40 45Glu Glu Ala Ser Gln Arg Lys Trp Asn Phe Asp Phe Gln Asn His Lys
50 55 60Pro Leu Glu Gly Arg Tyr Glu Trp Gln Glu Val Glu Arg Gly Ser Leu65 70 75 80Pro Glu Phe Tyr Tyr Gly Pro Pro Arg Pro Pro Lys Ser Ala Cys Lys
85 90 95Val Leu Ala Gln Glu Ser Gln Asp Val Gly Gly Ser Arg Gln Ala Val
100 105 110Pro Leu Ile Gly Ser Gln Ala Asn Ser Glu Asp Arg His Leu Val Asp
115 120 125Gln Met Pro Asp Ser Ser Asp Asn Gln Ala Gly Leu Ala Glu Gln Cys
130 135 140Pro Gly Met Arg Lys Arg Pro Ala Ala Glu Asp Ser Ser Ser Gln Ile145 150 155 160Lys Arg Ala Asn Arg Thr Glu Glu Asn Val Ser Asp Gly Ser Pro Asn
165 170 175Ala Gly Thr Val Glu Gln Thr Pro Lys Lys Pro Gly Leu Arg Arg Gln
180 185 190Thr Arg Val Asp Leu Gln Pro
195(2)SEQ ID NO:45的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：199个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…199
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:45:Val Ser Asn Gly Ser Pro Ser Leu Glu Arg Met Asp Ala Arg Gln Ala1 5 10 15Asp His Pro Lys Pro Ser Ala Cys Arg Asn Leu Phe Gly Pro Val Asn
20 25 30His Gly Glu Leu Thr Arg Asp Leu Glu Lys His Cys Arg Asp Met Glu
35 40 45Glu Ala Ser Gln Arg Lys Trp Asn Phe Asp Phe Gln Asn His Lys Pro
50 55 60Leu Glu Gly Arg Tyr Glu Trp Gln Glu Val Glu Arg Gly Ser Leu Pro65 70 75 80Glu Phe Tyr Tyr Gly Pro Pro Arg Pro Pro Lys Ser Ala Cys Lys Val
85 90 95Leu Ala Gln Glu Ser Gln Asp Val Ser Gly Ser Arg Gln Ala Val Pro
100 105 110Leu Ile Gly Ser Gln Ala Asn Ser Glu Asp Arg His Leu Val Asp Gln
115 120 125Met Pro Asp Ser Ser Asp Asn Gln Ala Gly Leu Ala Glu Gln Cys Pro
130 135 140Gly Met Arg Lys Arg Pro Ala Ala Glu Asp Ser Ser Ser Gln Ile Lys145 150 155 160Arg Ala Asn Arg Thr Glu Glu Asn Val Ser Asp Gly Ser Pro Asn Ala
165 170 175Gly Thr Val Glu Gln Thr Pro Lys Lys Pro Gly Leu Arg Arg Gln Thr
180 185 190Arg Val Asp Leu Gln Pro Ser
195(2)SEQ ID NO:46的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：220个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…220
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:46:Asn Val Arg Val Ser Asn Gly Ser Pro Ser Leu Glu Arg Met Asp Ala1 5 10 15Arg Gln Ala Asp His Pro Pro Ser Ala Cys Arg Asn Leu Phe Gly Pro
20 25 30Val Asn His Gly Glu Leu Thr Arg Asp Leu Glu Lys His Cys Arg Asp
35 40 45Met Glu Glu Ala Ser Gln Arg Lys Trp Asn Phe Asp Phe Gln Asn His
50 55 60Lys Pro Leu Glu Gly Arg Tyr Glu Trp Gln Glu Val Glu Arg Gly Ser65 70 75 80Leu Pro Glu Phe Tyr Tyr Arg Pro Pro Arg Pro Pro Lys Ser Ala Cys
85 90 95Lys Val Pro Ala Gln Glu Ser Gln Asp Val Ser Gly Ser Arg Gln Ala
100 105 110Val Pro Leu Ile Gly Ser Gln Ala Asn Ser Glu Asp Arg His Leu Val
115 120 125Asp Gln Met Pro Asp Ser Ser Asp Asn Gln Ala Gly Leu Ala Glu Gln
130 135 140Cys Pro Gly Met Arg Lys Arg Pro Ala Ala Glu Asp Ser Ser Ser Gln145 150 155 160Ile Lys Arg Ala Asn Arg Thr Glu Glu Asn Val Ser Asp Gly Ser Pro
165 170 175Asn Ala Gly Thr Val Glu Gln Thr Pro Lys Lys Pro Gly Leu Arg Arg
180 185 190Gln Thr Arg Val Asp Leu Gln Pro Ser Phe Arg Ala Asn Phe Leu Phe
195 200 205Met Ile Phe Ile Ile Lys Val Ile Lys Lys Ile Ser
210 215 220(2)SEQ ID NO:47的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：183个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…183
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:47:Met Asp Ala Arg Gln Ala Asp Mis Pro Lys Pro Ser Ala Cys Arg Asn1 5 10 15Leu Phe Gly Pro Val Asn His Gly Glu Leu Thr Arg Asp Leu Glu Lys
20 25 30His Cys Gln Asp Met Glu Glu Ala Ser Gln Arg Lys Trp Asn Phe Asp
35 40 45Phe Gln Asn His Lys Pro Leu Glu Gly Arg Tyr Glu Trp Gln Glu Val
50 55 60Glu Arg Gly Ser Leu Pro Glu Phe Tyr Tyr Arg Pro Pro Arg Pro Pro65 70 75 80Lys Ser Ala Cys Lys Val Leu Ala Gln Glu Ser Gln Asp Val Ser Gly
85 90 95Ser Arg Gln Ala Val Pro Leu Ile Gly Ser Gln Ala Asn Ser Glu Asp
100 105 110Arg His Leu Val Asp Gln Met Pro Asp Ser Ser Asp Asn Gln Ala Gly
115 120 125Leu Ala Glu Gln Cys Pro Gly Met Arg Lys Arg Pro Ala Ala Glu Asp
130 135 140Ser Ser Ser Gln Ile Lys Arg Ala Asn Arg Thr Glu Glu Asn Val Ser145 150 155 160Asp Gly Ser Pro Asn Ala Gly Thr Val Glu Gln Thr Pro Lys Lys Pro
165 170 175Gly Leu Arg Arg Gln Thr Arg
180(2)SEQ ID NO:48的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：138个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…138
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:48:Met Asp Ala Arg Gln Ala Asp His Pro Lys Pro Ser Ala Cys Arg Asn1 5 10 15Leu Phe Gly Pro Val Asn Mis Gly Glu Leu Thr Arg Asp Leu Glu Lys
20 25 30His Cys Arg Asp Met Glu Glu Ala Ser Gln Arg Lys Trp Asn Phe Asp
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85 90 95Ser Arg Gln Ala Val Pro Leu Ile Gly Ser Gln Ala Asn Ser Glu Asp
100 105 110Arg His Leu Val Asp Gln Met Pro Asp Ser Ser Asp Ser Gln Ala Gly
115 120 125Leu Ala Glu Gln Cys Pro Gly Met Arg Lys
130 135(2)SEQ ID NO:49的资料：
(ⅰ)序列特征：
(A)长度：197个氨基酸
(B)类型：氨基酸
(C)链型：单链
(D)拓扑结构：线性
(ⅱ)分子类型：蛋白质
(ⅸ)特征：
(A)名称/关键词：蛋白质
(B)位置：1…197
(ⅹⅰ)序列描述：SEQ ID NO:49:Met Ser Asn Val Arg Val Ser Asn Gly Ser Pro Ser Leu Glu Arg Met1 5 10 15Asp Ala Arg Gln Ala Asp His Pro Lys Pro Ser Ala Cys Arg Asn Leu
20 25 30Phe Gly Pro Val Asn His Glu Glu Leu Thr Arg Asp Leu Glu Lys His
35 40 45Cys Arg Asp Met Glu Glu Ala Ser Gln Arg Lys Trp Asn Phe Asp Phe
50 55 60Gln Asn His Lys Pro Leu Glu Gly Arg Tyr Glu Trp Gln Glu Val Glu65 70 75 80Arg Gly Ser Leu Pro Glu Phe Tyr Tyr Arg Pro Pro Arg Pro Pro Lys
85 90 95Ser Ala Cys Lys Val Leu Ala Gln Glu Ser Gln Asp Val Ser Gly Ser
100 105 110Arg Gln Ala Val Pro Leu Ile Gly Ser Gln Ala Asn Ser Glu Asp Arg
115 120 125His Leu Val Asp Gln Met Pro Asp Ser Ser Asp Asn Gln Ala Gly Leu
130 135 140Ala Glu Gln Cys Pro Gly Met Arg Lys Arg Pro Ala Ala Glu Asp Ser145 150 155 160Ser Ser Gln Asn Lys Arg Ala Asn Arg Thr Glu Glu Asn Val Ser Asp
165 170 175Gly Ser Pro Asn Ala Gly Thr Val Glu Gln Thr Pro Lys Lys Pro Gly
180 185 190Leu Arg Arg Gln Thr
195