一种脱毒马铃薯组培用培养基及制备方法.pdf

摘要
申请专利号：	CN01140272.5	申请日：	2001.12.11
公开号：	CN1348990A	公开日：	2002.05.15
当前法律状态：	终止	有效性：	无权
法律详情：	专利权的终止(未缴年费专利权终止)授权公告日：2003.11.19\|\|\|授权\|\|\|公开\|\|\|实质审查的生效
IPC分类号：	C12N5/04; A01G7/00; A01H4/00	主分类号：	C12N5/04; A01G7/00; A01H4/00
申请人：	中国科学院石家庄农业现代化研究所;
发明人：	冯学赞; 安忠民; 王静
地址：	050021河北省石家庄市槐中路286号
优先权：
专利代理机构：	石家庄冀科专利事务所有限公司	代理人：	王琪
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内容摘要

本发明提供一种脱毒马铃薯组培用培养基组成包括(g/l):大量元素:NH4NO31650mg/l、KNO31900mg/l、CaCl2·4H2O440mg/l、MgSO4·7H2O370mg/l、KH2PO4170mg/l其中一种或几种;微量元素:KI0.83mg/l、H3BO36.2mg/l、MnSO4·4H2O22.3mg/l、ZnSO4·4H2O8.6mg/l、Na2MoO4·2H2O0.25mg/l、CuSO4·5H2O0.025mg/l、CoCl2·6H2O0.025mg/l、FeSO4·7H2O37.3mg/l、其中一种或几种;络合剂:Na2·EDTA·2H2O27.8mg/l;有机成分:肌醇100mg/l、烟酸0.5mg/l、盐酸吡哆醇0.5mg/l、盐酸硫胺素0.1mg/l、甘氨酸2mg/l其中一种或几种;蔗糖30g/l、淀粉60－70/l、水余量。采用本发明的培养基可以大幅降低马铃薯组培苗的生产成本,使马铃薯组培苗快速工厂化繁育成为可能。

权利要求书

1： 1、一种脱毒马铃薯组培用培养基，其组成包括(g/L)：大量元素：NH 4 NO 3 1650mg/l、KNO 3 1900mg/l、CaCl 2 ·4H 2 O 440mg/l、 MgSO 4 ·7H 2 O 370mg/l、KH 2 PO 4 170mg/l其中一种或几种；微量元素：KI 0.83mg/l、H 3 BO 3 6.2mg/l、MnSO 4 ·4H 2 O 22.3mg/l、 ZnSO 4 ·4H 2 O 8.6mg/l、Na 2 MoO 4 ·2H 2 O 0.25mg/l、CuSO 4 ·5H 2 O 0.025 mg/l、CoCl 2 ·6H 2 O 0.025mg/l、FeSO 4 ·7H 2 O 37.3mg/l、其中一种或几种；络合剂：Na 2 ·EDTA·2H 2 O 27.8mg/l；有机成分：肌醇100mg/l、烟酸0.5mg/l、盐酸吡哆醇0.5mg/l、盐酸硫胺素0.1mg/l、甘氨酸2mg/l其中一种或几种；蔗糖30g/l、淀粉60-70/l、水余量。 2、一种脱毒马铃薯组培用培养基的制备方法，其特征在于按照比例(g/L)配制：大量元素：NH 4 NO 3 1650mg/l、KNO 3 1900mg/l、CaCl 2 ·4H 2 O 440mg/l、 MgSO 4 ·7H 2 O 370mg/l、KH 2 PO 4 170mg/l其中一种或几种；微量元素：KI 0.83mg/l、H 3 BO 3 6.2mg/l、MnSO 4 ·4H 2 O 22.3mg/l、 ZnSO 4 ·4H 2 O 8.6mg/l、Na 2 MoO 4 ·2H 2 O 0.25mg/l、CuSO 4 ·5H 2 O 0.025 mg/l、CoCl 2 ·6H 2 O 0.025mg/l、FeSO 4 ·7H 2 O 37.3mg/l、其中一种或几种；络合剂：Na 2 ·EDTA·2H 2 O 27.8mg/l；有机成分：肌醇100mg/l、烟酸0.5mg/l、盐酸吡哆醇0.5mg/l、盐酸硫胺素0.1mg/l、甘氨酸2mg/l其中一种或几种；蔗糖30g/l、淀粉60-70/l、水余量培养基后调节PH值至5.8，装瓶封口，经120℃，
2： 1个大气压的高温高压消毒20分钟。
3： 3mg/l、 ZnSO 4 ·4H 2 O 8.6mg/l、Na 2 MoO 4 ·2H 2 O 0.25mg/l、CuSO 4 ·5H 2 O 0.025 mg/l、CoCl 2 ·6H 2 O 0.025mg/l、FeSO 4 ·7H 2 O 37.3mg/l、其中一种或几种；络合剂：Na 2 ·EDTA·2H 2 O 27.8mg/l；有机成分：肌醇100mg/l、烟酸0.5mg/l、盐酸吡哆醇0.5mg/l、盐酸硫胺素0.1mg/l、甘氨酸2mg/l其中一种或几种；蔗糖30g/l、淀粉60-70/l、水余量。 2、一种脱毒马铃薯组培用培养基的制备方法，其特征在于按照比例(g/L)配制：大量元素：NH 4 NO 3 1650mg/l、KNO 3 1900mg/l、CaCl 2 ·4H 2 O 440mg/l、 MgSO 4 ·7H 2 O 370mg/l、KH 2 PO 4 170mg/l其中一种或几种；微量元素：KI 0.83mg/l、H 3 BO 3 6.2mg/l、MnSO 4 ·4H 2 O 22.3mg/l、 ZnSO 4 ·4H 2 O 8.6mg/l、Na 2 MoO 4 ·2H 2 O 0.25mg/l、CuSO 4 ·5H 2 O 0.025 mg/l、CoCl 2 ·6H 2 O 0.025mg/l、FeSO 4 ·7H 2 O 37.3mg/l、其中一种或几种；络合剂：Na 2 ·EDTA·2H 2 O 27.8mg/l；有机成分：肌醇100mg/l、烟酸0.5mg/l、盐酸吡哆醇0.5mg/l、盐酸硫胺素0.1mg/l、甘氨酸2mg/l其中一种或几种；蔗糖30g/l、淀粉60-70/l、水余量培养基后调节PH值至5.8，装瓶封口，经120℃，1.1个大气压的高温高压消毒20分钟。

说明书

一种脱毒马铃薯组培用培养基及制备方法
    【技术领域】

    本发明涉及到一种脱毒马铃薯组培用培养基及制备方法，属于植物的栽培培养基技术领域，尤其适用于根茎类植物组织培养繁殖。

    背景技术

    马铃薯脱除病毒后可以有效的提高产量和改善品质，脱毒种薯越来越受广大马铃薯栽培者的欢迎。但是由于马铃薯脱毒原原种薯必须通过组织培养方法才能得到，而组织培养技术要求较高的投入，所以原原种薯生产成本过高。这就造成栽培者无法承受过高的种薯价格或原原种薯生产者由于利润过低无法维持生产，导致脱毒原原种苗在我国大范围推广应用困难或应用的原原种薯质量低劣，这是我国脱毒马铃薯生产应用中的一大难题。

    常规脱毒马铃薯原原种薯生产方法是通过茎尖培养获得脱毒组培苗，然后接种在装于玻璃容器中用于提供营养及起支撑作用的培养基上，密封后在人为的环境中通过多次多代分化培养繁殖培养多株无病毒具有相同遗传特性的完整植株，扦插后用于微型薯生产。培养过程分为脱毒初培养、组培苗培养、管外扦插及微型薯培养四个阶段。其中组培苗的培养阶段占脱毒马铃薯生产的总成本的一半以上。此培养阶段中，常规的培养方法是脱毒马铃薯组培苗在常规培养基(大量元素、微量元素、铁盐、有机成分、蔗糖和琼脂)中生长。常规培养方法中培养基的琼脂占培养成本的40％左右，是造成组培苗的成本高的主要原因之一。

    【发明内容】

    本发明的目的在于提供一种降低脱毒马铃薯组培苗生产成本的新型培养基及制备方法。

    本发明的技术方案是这样实现的：这种脱毒马铃薯组培用培养基组成包括(g/L)：大量元素：NH4NO3 1650mg/l、KNO3 1900mg/l、CaCl2·4H2O 440mg/l、MgSO4·7H2O 370mg/l、KH2PO4 170mg/l其中一种或几种；微量元素：KI 0.83mg/l、H3BO3 6.2mg/l、MnSO4·4H2O 22.3mg/l、ZnSO4·4H2O 8.6mg/l、Na2MoO4·2H2O 0.25mg/l、CuSO4·5H2O 0.025mg/l、CoCl2·6H2O 0.025mg/l、FeSO4·7H2O 37.3mg/l、其中一种或几种；络合剂：Na2·EDTA·2H2O 27.8mg/l；有机成分：肌醇100mg/l、烟酸0.5mg/l、盐酸吡哆醇0.5mg/l、盐酸硫胺素0.1mg/l、甘氨酸2mg/l其中一种或几种；蔗糖30g/l、淀粉60-70/l、水余量。

    这种脱毒马铃薯组培用培养基的制备方法是按照比例(g/L)配制：大量元素：NH4NO3 1650mg/l、KNO3 1900mg/l、CaCl2·4H2O 440mg/l、MgSO4·7H2O 370mg/l、KH2PO4 170mg/l其中一种或几种；微量元素：KI 0.83mg/l、H3BO3 6.2mg/l、MnSO4·4H2O 22.3mg/l、ZnSO4·4H2O 8.6mg/l、Na2MoO4·2H2O 0.25mg/l、CuSO4·5H2O 0.025mg/l、CoCl2·6H2O 0.025mg/l、FeSO4·7H2O 37.3mg/l、其中一种或几种；络合剂：Na2·EDTA·2H2O 27.8mg/l；有机成分：肌醇100mg/l、烟酸0.5mg/l、盐酸吡哆醇0.5mg/l、盐酸硫胺素0.1mg/l、甘氨酸2mg/l其中一种或几种；蔗糖30g/l、淀粉60-70/l、水余量。

    调节培养基PH值至5.8，装瓶封口，经120℃，1.1个大气压的高温高压消毒20分钟。

    采用本发明地培养基可以大幅降低马铃薯组培苗的生产成本，使马铃薯组培苗快速工厂化繁育成为可能。

    【具体实施方式】

    下面结合脱毒马铃薯组培苗生产的实例对本发明作进一步的说明：

    在马铃薯组培苗的培养基配制过程中，按培养基的组成配制好大量元素、微量元素、铁盐、有机成分后，在每升培养基中加入30克蔗糖和60-70克玉米淀粉，调节PH至5.8，经加热溶解后，分装入培养容器中，封口，经120℃，1.1个大气压的高温高压消毒20分钟，晾凉后每个瓶中接种10-15个马铃薯组织茎段，封口后在温度为25±2℃，光照1500-2000Lux，光照时间为14-16小时的环境中培养。生长20-30天后，将分化苗继续转接在上述玉米淀粉培养基上进行下一代培养马铃薯组培苗的培养。本发明的技术要点是组培苗培养过种中，培养基中的琼脂被淀粉尤其是玉米淀粉所替代，大幅降低了培养基的制备成本。附培养基配方：大量元素：NH4NO3 1650mg/l，KNO3 1900mg/l，CaCl2·4H2O 440mg/l，MgSO4·7H2O 370mg/l，KH2PO4 170mg/l微量元素：KI 0.83mg/l，H3BO3 6.2mg/l，MnSO4·4H2O 22.3mg/l，ZnSO4·4H2O 8.6mg/l，Na2MoO4·2H2O 0.25mg/l，CuSO4·5H2O 0.025mg/l，CoCl2·6H2O 0.025mg/l铁盐：FeSO4·7H2O 37.3mg/l，Na2·EDTA·2H2O 27.8mg/l有机成分：肌醇100mg/l，烟酸0.5mg/l，盐酸吡哆醇0.5mg/l，盐酸硫胺素0.1mg/l，甘氨酸2mg/l；蔗糖30g/l、淀粉60-70/l、水余量。