一种用于生产鲜切花的百合种球繁育方法.pdf

本发明公开一种用于生产鲜切花的百合种球繁育方法，具体步骤如下：1)将商品种球移入35～45℃的温度下处理20～40天；2)取茎尖分生组织；3)将茎尖分生组织接种于百合诱导培养基进行诱导35～45天后，分化大量的丛生芽；4)将丛生芽接种于百合诱导培养基上进行扩繁；5)进行生根培养；6)将生根苗进行瓶炼后取出，洗净附着于根部的培养基，栽入移栽基质中；7)将成活的百合苗移栽到网室内进行种球培养成为商品种球；8)将商品种球置于低温下处理，即可进行鲜切花生产。本发明通过组织培养的方法，进行无病毒种苗的大量生产，从脱毒种苗生产到大田种球的培育，从种球采收到采后处理，实现了切花百合种球大规模工厂化生产。

1、  一种用于生产鲜切花的百合种球繁育方法，其特征在于具体步骤如下：
1)将商品种球放入恒温22～25℃下，待芽长到1cm～2cm时，移入35～45℃的温度下处理20～40天，此时芽长约5～6cm；
2)将茎尖取下进行常规消毒后，在无菌操作台上利用双目解剖镜取大小为0.1～0.5mm的茎尖分生组织；
3)在MS培养基母液中加入6-苄胺基腺嘌呤0.1～1.0mg/l、萘乙酸0.1～1.0mg/l、蔗糖20～50g/l，再加入1～1000μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均匀混合得百合诱导培养基，将茎尖分生组织接种于百合诱导培养基进行诱导，35～45天后即可分化大量的丛生芽；
4)在无菌操作台上将3～5个芽分成一小块接种于和步骤3)一样的诱导培养基上进行扩繁，扩繁周期为30～35天；
5)扩繁后，将大苗分离出来，接种于1/2MS培养基母液+吲哚丁酸0.2～1.0mg/l+蔗糖15～30g/l的生根培养基上进行生根培养，生根培养基的制备过程是：在水浴锅中将凝固剂琼脂溶化，琼脂加入量为6～6.5g/l，将1/2MS培养基液和吲哚丁酸均匀混合后，加入到溶化的琼脂中，均匀搅拌，再加入蔗糖均匀搅拌得到生根培养基；将丛生状小苗继续接入扩繁的培养基中进行扩繁，生根时间约10～20天，大部分苗已长出2～3条0.5～1.5cm长的根时开始移栽；
6)移栽前，首先将生根苗进行3～5天的瓶炼后取出，洗净附着在步骤5)所述生根培养基，栽入珍珠岩和草炭土为1∶1.5～3.5的移栽基质中，保持空气湿度在95％以上，并逐渐降低至正常水平；
7)培养成苗后，将成活的百合苗移栽到网室内进行种球培养，网室温度范围为20～25℃，按生产中正常肥水管理，周径达到12～20cm后，便可成为商品种球；
8)将商品种球置于5～10℃的低温下处理6～8周时间后，即可进行鲜切花生产。

2、  按照权利要求1所述的用于生产鲜切花的百合种球繁育方法，其特征在于：步骤7)所述网室的网孔目数为32目。

一种用于生产鲜切花的百合种球繁育方法
技术领域
本发明涉及花卉培育方法，具体为一种用于生产鲜切花的百合种球繁育方法。
背景技术
随着人们生活水平的提高，人们对鲜切花的数量和质量的要求都在不断的提高，而百合作为全世界最主要的鲜切花之一更是如此，百合花姿雅致，叶片青翠娟秀，茎干亭亭玉立，是名贵的切花新秀，其色泽鲜艳，是盆栽、切花和点缀庭园的名贵花卉，在园林中，适合布置成专类花园，如巧妙地利用不同种类自然花期之差异及种与品种。目前，我国在百合繁殖栽培方面的脱毒技术和规模化生产技术都比较落后，不能在全国的广大地区普遍栽培，对进入家庭和高级场所都存在繁殖和栽培技术不过关的问题，每年需从国外进口百合种球8000万粒以上，进行鲜切花生产不但浪费了大量的外汇，而且常常受到外商的制约。
发明内容
针对上述问题，本发明的目的在于提供一种用于生产鲜切花的百合种球繁育方法，可以大量生产出无病毒、优质种苗种球，并通过低温处理打破休眠、调整花期，实现正常开花。
本发明的技术方案是：
一种用于生产鲜切花的百合种球繁育方法，具体步骤如下：
1)将从荷兰引进的1代生产用商品种球放入恒温22～25℃下，待芽长到1cm～2cm时，移入35～45℃的温度下处理20～40天，此时芽长约5～6cm左右；
2)将茎尖取下进行常规消毒后，在无菌操作台上利用双目解剖镜取大小为0.1～0.5mm左右的茎尖分生组织；
3)在MS培养基母液中加入6-苄胺基腺嘌呤(BA)0.1～1.0mg/l、萘乙酸(NAA)0.1～1.0mg/l、蔗糖20～50g/l，再加入1～1000μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑(ribavirin)均匀混合得百合诱导培养基，将茎尖分生组织接种于百合诱导培养基进行诱导，35～45天后即可分化大量的丛生芽；
4)在无菌操作台上将3～5个芽分成一小块接种于和诱导一样的培养基上进行扩繁，扩繁周期为30～35天；
5)当扩繁达到一定数量后，将大苗分离出来，接种于1/2MS培养基母液+吲哚丁酸(IBA)0.2～1.0mg/l+蔗糖15～30g/l的生根培养基上进行生根培养，生根培养基的制备过程是：在水浴锅中将凝固剂琼脂溶化，琼脂加入量为6～6.5g/l，将1/2MS培养基母液和IBA均匀混合后，加入到溶化的琼脂中，均匀搅拌，再加入蔗糖均匀搅拌得到生根培养基；将丛生状小苗继续接入扩繁的培养基中进行扩繁，生根时间约10～20天左右，大部分苗已长出2～3条0.5～1.5cm长左右的根时开始移栽；
6)移栽前，首先将生根苗进行3～5天的瓶炼(将培养容器直接拿到室外，在温度25℃左右放置)后取出，洗净附着在根部的培养基(即步骤5)中生根培养基)，栽入珍珠岩和草炭土为1∶1.5～3.5的移栽基质中，保持空气湿度在95％以上，并逐渐降低至正常水平(在室外自然条件下降到正常室外湿度)；
7)培养成苗后，将成活的百合苗移栽入隔离区，即移栽到网室内进行种球培养(为防止病毒感染，用32目的网保护，空气和阳光可以进入，网室温度范围为20～25℃)，按生产中正常肥水管理，经过两年后，周径达到12～20cm，便可成为商品种球。
8)将商品种球置于5～10℃的低温下处理6～8周时间后，即可移栽到鲜切花生产基地，进行鲜切花生产。
本发明IBA、NAA、BA均为植物激素。
本发明的有益效果是：
本发明提供了一种新的脱毒技术和一套成熟、完整的切花百合种球规模化生产的方法，通过热处理、茎尖分生组织培养、化学药剂处理三种方法相结合，可以使影响切花百合生产的主要四种病毒(百合无症状病毒、百合黄瓜花叶病毒、烟草环斑病毒、郁金香碎色病毒)脱毒达到100％；通过低温处理种球，打破休眠，实现正常开花；通过组织培养的方法，进行无病毒种苗的大量生产，从脱毒种苗生产到大田种球的培育，从种球采收到采后处理，形成了一套完整、成熟的技术和工艺，实现了切花百合种球大规模工厂化生产。
具体实施方式
实施例1
用于生产鲜切花的百合种球繁育方法，具体步骤如下：
1)将从荷兰引进的1代生产用商品种球放入恒温25℃下，待芽长到2cm时，移入45℃的温度下处理40天，此时芽长约6cm左右；
2)将茎尖取下进行常规消毒后，在无菌操作台上利用双目解剖镜取大小为0.5mm左右的茎尖分生组织；
3)在MS培养基母液中加入6-苄胺基腺嘌呤(BA)1.0mg/l、萘乙酸(NAA)1.0mg/l、蔗糖50g/l，再加入200μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑(ribavirin)均匀混合得百合诱导培养基，将茎尖分生组织接种于百合诱导培养基进行诱导，45天后即可分化大量的丛生芽；
4)在无菌操作台上将5个芽分成一小块接种于和诱导一样的培养基上进行扩繁，扩繁周期为35天；
5)当扩繁达到一定数量后，将大苗分离出来，接种于1/2MS培养基母液+吲哚丁酸(IBA)1.0mg/l+蔗糖30g/l的生根培养基上进行生根培养，生根培养基的制备过程是：在水浴锅中将凝固剂琼脂溶化，琼脂加入量为6.5g/l，将1/2MS培养基母液和IBA均匀混合后，加入到溶化的琼脂中，均匀搅拌，再加入蔗糖均匀搅拌得到生根培养基；将丛生状小苗继续接入扩繁的培养基中进行扩繁，生根时间约10天左右，大部分苗已长出3条1.5cm长左右的根时开始移栽；
6)移栽前，首先将生根苗进行5天的瓶炼(将培养容器直接拿到室外，在温度25℃左右放置)后取出，洗净附着在根部的培养基(即步骤5)所述生根培养基)，栽入珍珠岩和草炭土为1∶2的移栽基质中，保持空气湿度在95％以上，并逐渐降低至正常水平(在室外自然条件下降到正常室外湿度)；
7)培养成苗后，将成活的百合苗移栽入隔离区，即移栽到网室内进行种球培养(为防止病毒感染，用32目的网保护，空气和阳光可以进入，网室温度为20℃，按生产中正常肥水管理，经过两年后，周径达到20cm，便可成为商品种球。
8)将商品种球置于-8℃的低温下处理8周时间后，即可移栽到鲜切花生产基地，进行鲜切花生产。
实施例2
与实施例1不同之处是：
用于生产鲜切花的百合种球繁育方法，具体步骤如下：
1)将商品种球放入恒温22℃下，待芽长到1cm时，移入40℃的温度下处理20天，此时芽长约5cm；
2)将茎尖取下进行常规消毒后，在无菌操作台上利用双目解剖镜取大小为0.1mm的茎尖分生组织；
3)在MS培养基母液中加入6-苄胺基腺嘌呤0.1mg/l、萘乙酸0.1mg/l、蔗糖20g/l，再加入20μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均匀混合得百合诱导培养基，将茎尖分生组织接种于百合诱导培养基进行诱导，35天后即可分化大量的丛生芽；
4)在无菌操作台上将3个芽分成一小块接种于和步骤3)一样的诱导培养基上进行扩繁，扩繁周期为30天；
5)扩繁后，将大苗分离出来，接种于1/2MS培养基母液+吲哚丁酸0.2mg/l+蔗糖15g/l的生根培养基上进行生根培养，生根培养基地制备过程是：在水浴锅中将凝固剂琼脂溶化，琼脂加入量为6g/l，将1/2MS培养基母液和吲哚丁酸均匀混合后，加入到溶化的琼脂中，均匀搅拌，再加入蔗糖均匀搅拌得到生根培养基；将丛生状小苗继续接入扩繁的培养基中进行扩繁，生根时间约20天，大部分苗已长出2条0.5cm长的根时开始移栽；
6)移栽前，首先将生根苗进行3天的瓶炼后取出，洗净附着在根部的培养基(即步骤5)所述生根培养基)，栽入珍珠岩和草炭土为1∶3的移栽基质中，保持空气湿度在95％以上，并逐渐降低至正常水平；
7)培养成苗后，将成活的百合苗移栽到网室内进行种球培养，网室温度为24℃，按生产中正常肥水管理，经过两年后，周径达到12cm，便可成为商品种球；
8)将商品种球置于2℃的低温下处理6周时间后，即可移栽到鲜切花生产基地，进行鲜切花生产。
实施例3
与实施例1不同之处是：
用于生产鲜切花的百合种球繁育方法，具体步骤如下：
1)将商品种球放入恒温23℃下，待芽长到1.5cm时，移入35℃的温度下处理30天，此时芽长约5.5cm；
2)将茎尖取下进行常规消毒后，在无菌操作台上利用双目解剖镜取大小为0.2mm的茎尖分生组织；
3)在MS培养基母液中加入6-苄胺基腺嘌呤0.5mg/l、萘乙酸0.5mg/l、蔗糖30g/l，再加入800μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均匀混合得百合诱导培养基，将茎尖分生组织接种于百合诱导培养基进行诱导，40天后即可分化大量的丛生芽；
4)在无菌操作台上将4个芽分成一小块接种于和步骤3)一样的诱导培养基上进行扩繁，扩繁周期为32天；
5)扩繁后，将大苗分离出来，接种于1/2MS培养基母液+吲哚丁酸0.5mg/l+蔗糖20g/l的生根培养基上进行生根培养，生根培养基的制备过程是：在水浴锅中将凝固剂琼脂溶化，琼脂加入量为6.2g/l，将1/2MS培养基母液和吲哚丁酸均匀混合后，加入到溶化的琼脂中，均匀搅拌，再加入蔗糖均匀搅拌得到生根培养基；将丛生状小苗继续接入扩繁的培养基中进行扩繁，生根时间约15天，大部分苗已长出2条1.0cm长的根时开始移栽；
6)移栽前，首先将生根苗进行4天的瓶炼后取出，洗净附着在根部的培养基(即步骤5)所述生根培养基)，栽入珍珠岩和草炭土为1∶2.5的移栽基质中，保持空气湿度在95％以上，并逐渐降低至正常水平；
7)培养成苗后，将成活的百合苗移栽到网室内进行种球培养，网室温度为21℃，按生产中正常肥水管理，经过两年后，周径达到15cm，便可成为商品种球；
8)将商品种球置于-1℃的低温下处理7周时间后，即可移栽到鲜切花生产基地，进行鲜切花生产。
实施例4
与实施例1不同之处是：
用于生产鲜切花的百合种球繁育方法，其特征在于具体步骤如下：
1)将商品种球放入恒温24℃下，待芽长到2cm时，移入40℃的温度下处理25天，此时芽长约6cm；
2)将茎尖取下进行常规消毒后，在无菌操作台上利用双目解剖镜取大小为0.3mm的茎尖分生组织；
3)在MS培养基母液中加入6-苄胺基腺嘌呤0.8mg/l、萘乙酸0.6mg/l、蔗糖40g/l，再加入500μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均匀混合得百合诱导培养基，将茎尖分生组织接种于百合诱导培养基进行诱导，40天后即可分化大量的丛生芽；
4)在无菌操作台上将3个芽分成一小块接种于和步骤3)一样的诱导培养基上进行扩繁，扩繁周期为30天；
5)扩繁后，将大苗分离出来，接种于1/2MS培养基母液+吲哚丁酸0.6mg/l+蔗糖25g/l的生根培养基上进行生根培养，生根培养基的制备过程是：在水浴锅中将凝固剂琼脂溶化，琼脂加入量为6g/l，将1/2MS培养基母液和吲哚丁酸均匀混合后，加入到溶化的琼脂中，均匀搅拌，再加入蔗糖均匀搅拌得到生根培养基；将丛生状小苗继续接入扩繁的培养基中进行扩繁，生根时间约18天，大部分苗已长出3条1.0cm长的根时开始移栽；
6)移栽前，首先将生根苗进行5天的瓶炼后取出，洗净附着在根部的培养基(即步骤5)所述生根培养基)，栽入珍珠岩和草炭土为1∶1.5的移栽基质中，保持空气湿度在95％以上，并逐渐降低至正常水平；
7)培养成苗后，将成活的百合苗移栽到网室内进行种球培养，网室温度为22℃，按生产中正常肥水管理，经过两年后，周径达到18cm，便可成为商品种球；
8)将商品种球置于-5℃的低温下处理6周时间后，即可移栽到鲜切花生产基地，进行鲜切花生产。
实施例5
与实施例1不同之处是：
用于生产鲜切花的百合种球繁育方法，具体步骤如下：
1)将商品种球放入恒温25℃下，待芽长到2cm时，移入36℃的温度下处理20天，此时芽长约6cm；
2)将茎尖取下进行常规消毒后，在无菌操作台上利用双目解剖镜取大小为0.5mm的茎尖分生组织；
3)在MS培养基母液中加入6-苄胺基腺嘌呤0.3mg/l、萘乙酸0.5mg/l、蔗糖30g/l，再加入5μmol/l的1-β-D-呋喃核糖-1，2，4-三氮唑均匀混合得百合诱导培养基，将茎尖分生组织接种于百合诱导培养基进行诱导，45天后即可分化大量的丛生芽；
4)在无菌操作台上将5个芽分成一小块接种于和步骤3)一样的诱导培养基上进行扩繁，扩繁周期为35天；
5)扩繁后，将大苗分离出来，接种于1/2MS培养基母液+吲哚丁酸0.6mg/l+蔗糖15g/l的生根培养基上进行生根培养，生根培养基的制备过程是：在水浴锅中将凝固剂琼脂溶化，琼脂加入量为6g/l，将1/2MS培养基母液和吲哚丁酸均匀混合后，加入到溶化的琼脂中，均匀搅拌，再加入蔗糖均匀搅拌得到生根培养基；将丛生状小苗继续接入扩繁的培养基中进行扩繁，生根时间约16天，大部分苗已长出3条0.5cm长的根时开始移栽；
6)移栽前，首先将生根苗进行5天的瓶炼后取出，洗净附着在根部的培养基(即步骤5)所述生根培养基)，栽入珍珠岩和草炭土为1∶3.5的移栽基质中，保持空气湿度在95％以上，并逐渐降低至正常水平；
7)培养成苗后，将成活的百合苗移栽到网室内进行种球培养，网室温度为25℃，按生产中正常肥水管理，经过两年后，周径达到20cm，便可成为商品种球；
8)将商品种球置于1℃的低温下处理8周时间后，即可移栽到鲜切花生产基地，进行鲜切花生产。