说明书一种1,2,3-三唑联1,3,4-噁二唑类化合物及其应用
(一)技术领域
本发明涉及一种新型1,2,3-三唑联1,3,4-噁二唑类化合物及其应用。
(二)背景技术
抗菌药物是目前医药行业中使用最广泛的一类药物，也是药物开发与研究 的重点领域之一。目前临床上的抗菌药物种类有β-内酰胺类、磺胺类、四环素 类、氨基糖苷类、大环内酯类、喹诺酮类和几年来临床上用的噁唑烷酮类等。
但由于抗菌药物的滥用，导致病菌耐药性日益增加，死亡率也随之上升并 引起全球性的健康危机。目前，抗菌药的耐药性问题以及如何提高对耐药细菌 的抗菌活性已成为迫切需要关注的课题。为此已有许多科研工作者致力于这一 方面的努力，例如科研制订一些措施用于防止滥用抗菌药从而降低耐药菌的出 现、对现有药物的靶位进行修饰或改造、探讨耐药菌耐药性的原因和机制等等。 这些工作的侧重点都在于防止耐药菌的出现，但是开发新的抗菌药可以更本质 的解决问题，包括对已有抗菌药物结构的改造和全新结构的抗菌药物的研究与 开发。全新结构的抗菌药可能对病菌具有不同的靶向作用，有望在一定程度上 解决细菌的药耐药性问题，增强抗菌活性。
1,2,3-三唑类衍生物作为是天然产物中常见的结构之一，具有多种生物活性 和生物相容性，同时又因为其化学结构和目前临床上使用的抗菌药不同，有望 能够解决抗菌药的耐药性问题。
本发明通过click反应生成1,2,3-三唑，再经过多步反应生成含1,2,3-三唑联 1,3,4-噁二唑衍生物，这些化合物是一种具有显著抗菌活性的抑制剂药物，为抗 菌药物的筛选提供了研究基础。
(三)发明内容
本发明目的是提供一种新型1,2,3-三唑联1,3,4-噁二唑类化合物及其在制备 抗菌剂中的应用，该类化合物对多种菌体菌有抑制作用，且合成工艺简单，易 于产业化。
本发明采用的技术方案如下所示：
本发明提供了1,2,3-三唑联1,3,4-噁二唑类化合物，其化学名为2-R-(5-(1-(2- 氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醚)，结构如式(Ⅰ)所示：
R取代基为C1-C12烷基、-COOR1、-R2COOR3、或-CH(R4)COR5，其中 R1选自H、支链或支链的C1-C4烷基或苄基；R2选自直链或支链的C1-C4亚烷 基，R3选自H或者直链或支链的C1-C4烷基；R4选自H或1H-1,2,4-三唑基； R5选自直链或支链的C1-C4烷基或取代苯基，取代苯基上的取代基为一个或多 个，所述取代基各自独立选自卤素或3-氯苯氧基。
进一步，卤素优选Cl。
更进一步，R1选自支链或支链的C1-C4烷基；R2选自直链或支链的C1-C4 亚烷基，R3选自直链或支链的C1-C4烷基；R4选自H；R5选自取代苯基，取代 苯基上的取代基为一个或多个，所述取代基各自独立选自氯或3-氯苯氧基。
再更进一步，所述的2-R-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4- 噁二唑-2-硫醚)选自下列之一：
本发明所述可通过常规方法制备，其反应式如下所示：
本发明提供了所述2-R-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁 二唑-2-硫醚)在制备抗菌剂中的应用。
进一步，所述的抗菌剂是针对枯草芽孢杆菌、大肠杆菌或烟曲霉的抑制剂。
更进一步，用于制备针对枯草芽孢杆菌的抑制剂的是化合物Ⅰ-11。
更进一步，用于制备针对大肠杆菌的抑制剂的是化合物I-1、I-4、或I-6。
更进一步，用于制备针对烟曲霉的抑制剂的是化合物I-4、I-6、I-7、或I-8。
与现有技术相比，本发明的有益效果在于：本发明提供的2-R-(5-(1-(2-氯苯 基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醚)对多种菌体菌(枯草芽孢杆 菌、大肠杆菌、烟曲霉)有抑制作用，且合成工艺简单，易于产业化。
(四)具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述，但本发明的保护范围并不 仅限于此：
中间体制备：
1)1-(2-氯)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(3)的制备
称取1.60g的邻氯苄氯1(10mmol)与0.98g NaN3(15mmol)加入到含8 ml的DMF中，常温搅拌，TCL跟踪，反应结束后，加20ml二氯甲烷，用水洗 (20ml×3)，有机相用无水MgSO4干燥，真空旋蒸浓缩，得到产物，透明无色 液体，1.6g，产率95.8％；将1.6g邻氯苄基叠氮2(9.58mmol)加入到100ml 圆底烧瓶中，加入1.11g乙酰乙酸甲酯(9.58mmol)，加入1.45g K2CO3(9.58×1.1＝10.84mmol)和10ml丙酮，加热回流，TCL跟踪，反应结束后，降 温冷却，过滤得到液体，真空旋蒸浓缩，固体用二氯甲烷洗，二氯甲烷溶液与 浓缩液混合，加水洗涤(15ml×3),有机相加无水MgSO4干燥，浓缩得到1-(2-氯)-5- 甲基-1H-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯3，淡黄色固体，2.36g，产率92.9％。
2)5-(1-(2-氯苯)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醇(5)的制 备
将2.36g的8加入过量的水合肼，以水合肼作为溶剂，加热回流5h，TCL 跟踪反应，反应结束后，冷却降温，静置过夜，过滤得到固体，固体用水洗(20 ml×3)，得到化合物1-(2-氯苯)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-酰肼，白色固体，2.24 g，产率95.0％；将2.24g 4(8.45mmol)溶于95％乙醇中，在冰水浴下慢慢加 入1.35ml CS2(25.35mmol)和0.56g KOH(10mmol)，搅拌10min，去掉冰 水浴，加热回流12h，TCL跟踪反应。反应结束后，冷却，真空旋蒸脱去溶剂， 得到固体用50ml H2O溶解，过滤，液体用1M HCl调pH值至3-4，过滤得到 固体，滤饼烘干，用甲醇重结晶得到纯的产物，5-(1-(2-氯苯)-5-甲基-1H-1,2,3- 三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醇(5)，白色固体，2.21g，产率85.32％。
实施例1：2-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醚) 乙酸甲酯(Ⅰ-1)
反应式如下：
将化合物0.153g 5(0.5mmol)与0.076g(0.5mmol)溴乙酸甲酯加入到50ml 圆底烧瓶中，加入5ml水和5ml甲苯，再加入0.016g(0.05mmol)PTC与0.022 g(0.55mmol)NaOH，加热至80℃，搅拌5h，TCL跟踪，反应结束后，分出 有机层，真空旋蒸浓缩得到粗产品，经硅胶板层析分离得最终纯的产物 2-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醚)乙酸甲酯(Ⅰ -1),0.153g,产率80.8％。
1H NMR(600MHz,CDCl3,ppm-1)δ7.45(d,J＝8.0Hz,1H),7.31(t,J＝7.7 Hz,1H),7.24(t,J＝7.6Hz,1H),6.87(d,J＝7.7Hz,1H),5.71(s,2H),4.13(s,2H), 3.81(s,3H),2.58(s,3H).IR(KBr,cm-1):2963,1741,1624,1554,1431,1301,744. HRMS(ESI):m/z calcd for C15H15ClN5O3S+[M+H]+:380.0579,found:380.0585.
实施例2：2-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫 醚)-3-甲基丁酸乙酯(Ⅰ-2)
反应式如下：
将化合物0.153g 5(0.5mmol)与0.104g(0.5mmol)2-溴-3-甲基丁酸乙酯加 入到50ml圆底烧瓶中，加入5ml水和5ml甲苯，再加入0.016g(0.05mmol) PTC与0.022g(0.55mmol)NaOH，加热至80℃，搅拌5h，TCL跟踪，反应 结束后，分出有机层，真空旋蒸浓缩得到粗产品，经硅胶板层析分离得最终纯 的产物2-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醚)-3-甲 基丁酸乙酯(Ⅰ-2),0.177g,产率81.7％。
1H NMR(600MHz,CDCl3,ppm-1)δ7.34(d,J＝7.9Hz,1H),7.21(t,J＝7.6 Hz,1H),7.14(t,J＝7.5Hz,1H),6.78(d,J＝7.6Hz,1H),5.61(s,2H),4.27(d,J＝ 6.4Hz,1H),4.18-4.12(m,2H),2.49(s,3H),1.17(dt,J＝20.7,7.1Hz,4H),1.05 (dd,J＝21.2,6.8Hz,6H).13C NMR(150MHz,CDCl3)δ169.92,163.11,159.90, 135.58,132.55,131.62,131.51,129.96,129.82,128.61,127.60,61.85,56.92,49.13, 31.20,19.95,19.69,14.09,8.91.IR(KBr,cm-1):2921,1737,1642,1385,1376,745. HRMS(ESI):m/z calcd for C19H23ClN5O3S+[M+H]+:436.1205,found:436.1205.实 施例3：2-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-5-(异丙基硫醚)-1,3,4-噁二唑 (Ⅰ-3)
反应式如下：
将化合物0.153g 5(0.5mmol)与0.061g(0.5mmol)2-溴丙烷加入到50ml 圆底烧瓶中，加入5ml水和5ml甲苯，再加入0.016g(0.05mmol)PTC与0.022 g(0.55mmol)NaOH，加热至80℃，搅拌5h，TCL跟踪，反应结束后，分出 有机层，真空旋蒸浓缩得到粗产品，经硅胶板层析分离得最终纯的产物2-(1-(2- 氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-5-(异丙基硫醚)-1,3,4-噁二唑(Ⅰ-3),0.156g, 产率89.8％。
1H NMR(600MHz,CDCl3,ppm-1)δ7.34(d,J＝8.0Hz,1H),7.20(t,J＝7.7 Hz,1H),7.13(t,J＝7.6Hz,1H),6.78(d,J＝7.7Hz,1H),5.62(s,2H),3.88(dq,J＝ 13.5,6.8Hz,1H),2.50(s,3H),1.43(d,J＝6.8Hz,6H).13C NMR(150MHz,CDCl3) δ162.95,158.49,134.41,131.52,130.71,130.63,128.93,128.61,127.54,126.59, 48.11,38.03,22.30,7.94.IR(KBr,cm-1):2955,1638,1472,1383,1374,1151,1050, 752.HRMS(ESI):m/z calcd for C15H17ClN5OS+[M+H]+:350.0837,found: 350.0840.
实施例4：3-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醚) 丁酸甲酯(Ⅰ-4)
反应式如下：
将化合物0.153g 5(0.5mmol)与0.096g(0.5mmol)3-溴丁酸乙酯加入到50 ml圆底烧瓶中，加入5ml水和5ml甲苯，再加入0.016g(0.05mmol)PTC与 0.022g(0.55mmol)NaOH，加热至80℃，搅拌5h，TCL跟踪，反应结束后， 分出有机层，真空旋蒸浓缩得到粗产品，经硅胶板层析分离得最终纯的产物 3-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醚)丁酸甲酯(Ⅰ -4),0.185g,产率87.9％。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.44(d,J＝7.9Hz,1H),7.31(t,J＝8.1Hz,1H), 7.24(t,J＝7.5Hz,1H),6.89(d,J＝7.6Hz,1H),5.71(s,2H),4.41(t,J＝6.8Hz, 1H),4.24(q,J＝7.1Hz,2H),2.60(s,3H),2.11(m,2H),1.28(t,J＝7.1Hz,3H), 1.11(d,J＝7.4Hz,3H).HRMS(ESI):m/z calcd for C18H21ClN5O3S+[M+H]+: 422.1048,found:422.1051.
实施例5：2-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-5-(十二烷基硫 醚)-1,3,4-噁二唑(Ⅰ-5)
反应式如下：
将化合物0.153g 5(0.5mmol)与0.124g(0.5mmol)溴代正十二烷加入到 50ml圆底烧瓶中，加入5ml水和5ml甲苯，再加入0.016g(0.05mmol)PTC 与0.022g(0.55mmol)NaOH，加热至80℃，搅拌5h，TCL跟踪，反应结束 后，分出有机层，真空旋蒸浓缩得到粗产品，经硅胶板层析分离得最终纯的产 物2-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-5-(正十二烷基硫醚)-1,3,4-噁二唑 (Ⅰ-5),0.211g,产率89.1％。
1H NMR(600MHz,CDCl3,ppm-1)7.45(dd,J＝8.0,1.1Hz,1H),7.30(td,J＝ 7.8,1.5Hz,1H),7.23(td,J＝7.6,1.1Hz,1H),6.86(d,J＝8.9Hz,1H),5.71(s,2H), 3.31-3.28(m,2H),2.58(s,3H),1.83(dt,J＝15.1,7.5Hz,2H),1.48-1.43(m,2H), 1.29(s,16H),0.88(t,J＝7.0Hz,3H).IR(KBr,cm-1):2922,1621,1473,1443,1253, 1165,1055,746.HRMS(ESI):m/z calcd for C24H35ClN5OS+[M+H]+:476.2245, found:476.2241.
实施例6：S-5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-yl O- 甲酸乙酯硫醚(Ⅰ-6)
反应式如下：
将化合物0.153g 5(0.5mmol)与0.076g(0.5mmol)1-溴甲酸乙酯加入到50 ml圆底烧瓶中，加入5ml水和5ml甲苯，再加入0.016g(0.05mmol)PTC与 0.022g(0.55mmol)NaOH，加热至80℃，搅拌5h，TCL跟踪，反应结束后， 分出有机层，真空旋蒸浓缩得到粗产品，经硅胶板层析分离得最终纯的产物 S-5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-yl O-甲酸乙酯硫醚 (Ⅰ-6),0.152g,产率80.4％。
1H NMR(600MHz,CDCl3,ppm-1)δ7.45(d,J＝8.0Hz,1H),7.31(t,J＝7.7 Hz,1H),7.24(t,J＝7.6Hz,1H),6.87(d,J＝7.7Hz,1H),5.71(s,2H),4.13(s,2H), 3.81(s,3H),2.58(s,3H).IR(KBr,cm-1):3011,2901,1739,1650,1438,1021,953, 745.HRMS(ESI):m/z calcd for C15H15ClN5O3S+[M+H]+:380.0579,found: 380.0581.
实施例7：2-(丁基硫醚)-5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁 二唑(Ⅰ-7)
反应式如下：
将化合物0.153g 5(0.5mmol)与0.068g(0.5mmol)溴代正丁烷加入到50ml 圆底烧瓶中，加入5ml水和5ml甲苯，再加入0.016g(0.05mmol)PTC与0.022 g(0.55mmol)NaOH，加热至80℃，搅拌5h，TCL跟踪，反应结束后，分出 有机层，真空旋蒸浓缩得到粗产品，经硅胶板层析分离得最终纯的产物2-(丁基 硫醚)-5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑(Ⅰ-7),0.161g,产 率88.9％。
1H NMR(600MHz,CDCl3,ppm-1)δ7.30(dd,J＝8.7,5.6Hz,1H),7.18(t,J＝ 5.5Hz,1H),7.13–7.08(m,1H),6.76(d,J＝7.7Hz,1H),5.58(s,2H),3.18(d,J＝ 7.1Hz,2H),2.48(s,3H),1.70(d,J＝4.4Hz,2H),1.37(d,J＝6.0Hz,2H),0.83(dd, J＝10.7,7.3Hz,3H).HRMS(ESI):m/z calcd for C16H19ClN5OS+[M+H]+:364.0993, found:364.0989.
实施例8：2-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醚) 丙酸乙酯(Ⅰ-8)
反应式如下：
将化合物0.153g 5(0.5mmol)与0.090g(0.5mmol)2-溴丙酸乙酯加入到50 ml圆底烧瓶中，加入5ml水和5ml甲苯，再加入0.016g(0.05mmol)PTC与 0.022g(0.55mmol)NaOH，加热至80℃，搅拌5h，TCL跟踪，反应结束后， 分出有机层，真空旋蒸浓缩得到粗产品，经硅胶板层析分离得最终纯的产物 2-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醚)丙酸乙酯(Ⅰ -8),0.175g,产率85.7％。
淡黄色固体，熔点：79.6-82.2℃.1H NMR(600MHz,CDCl3,ppm-1)δ7.37(d, J＝7.4Hz,1H),7.23(t,J＝7.7Hz,1H),7.16(t,J＝8.1Hz,1H),6.80(d,J＝8.8Hz, 1H),5.64(s,2H),4.44(q,J＝7.3Hz,1H),4.16(qd,J＝7.1,2.2Hz,2H),2.51(s, 3H),1.66(d,J＝7.3Hz,3H),1.20(t,J＝7.1Hz,3H).IR(KBr,cm-1):3033,2932, 2854,1621,1556,1470,1255,1165,1051,744.HRMS(ESI):m/z calcd for C17H19ClN5O3S+[M+H]+:408.0892,found:408.0895.
实施例9：2-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醚) 乙酸(Ⅰ-9)
反应式如下：
将化合物0.153g 5(0.5mmol)与0.069g(0.5mmol)溴乙酸加入到50ml圆 底烧瓶中，加入5ml水和5ml甲苯，再加入0.016g(0.05mmol)PTC与0.042 g(1.05mmol)NaOH，加热至80℃，搅拌5h，TCL跟踪，反应结束后，用1M HCl调pH值为6.0，分出有机层，真空旋蒸浓缩得到粗产品，经硅胶板层析分 离得最终纯的产物2-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2- 硫醚)乙酸(Ⅰ-9),0.152g,产率83.4％。
1H NMR(600MHz,CDCl3,ppm-1)δ9.11(s,1H),7.45(d,J＝8.0Hz,1H),7.31 (t,J＝7.6Hz,1H),7.26(s,2H),7.24(t,J＝7.6Hz,1H),6.88(d,J＝7.7Hz,1H), 5.69(s,2H),2.47(s,3H).IR(KBr,cm-1):1733,1559,1471,1371,1345,1264,1199, 1052,989,854,750.HRMS(ESI):m/z calcd for C14H13ClN5O3S+[M+H]+:366.0422, found:366.0427.
实施例10：2-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫 醚)-1-(2,4-二氯苯基)乙酮(Ⅰ-10)
反应式如下：
将化合物0.153g 5(0.5mmol)与0.133g(0.5mmol)2-溴-1-(2,4-二氯苯基) 乙酮加入到50ml圆底烧瓶中，加入5ml水和5ml甲苯，再加入0.016g (0.05mmol)PTC与0.022g(0.55mmol)NaOH，加热至80℃，搅拌5h，TCL 跟踪，反应结束后，分出有机层，真空旋蒸浓缩得到粗产品，经硅胶板层析分 离得最终纯的产物2-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2- 硫醚)-1-(2,4-二氯苯基)乙酮(Ⅰ-10),0.194g,产率78.9％。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ7.70(d,J＝8.4Hz,1H),7.48(d,J＝1.9Hz,1H), 7.45(d,J＝8.0Hz,1H),7.36(dd,J＝8.4,1.9Hz,1H),7.31(t,J＝7.7Hz,1H),7.24 (t,J＝7.6Hz,1H),6.87(d,J＝7.7Hz,1H),5.71(s,2H),4.79(s,2H),2.57(s,3H). IR(KBr,cm-1):2923,2852,1733,1662,1635,1576,1558,1473,1446,1262,1123, 865.HRMS(ESI):m/z calcd for C20H15Cl3N5O2S+[M+H]+:494.0007,found: 494.0011.
实施例11：1-(2-氯-4-(3-氯苯醚)苯基)-2-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3- 三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醚)乙酮(Ⅰ-11)
反应式如下：
将化合物0.153g 5(0.5mmol)与0.178g(0.5mmol)2-溴-1-(2-氯-4-(3-氯苯 醚)苯基)乙酮加入到50ml圆底烧瓶中，加入5ml水和5ml甲苯，再加入0.016 g(0.05mmol)PTC与0.022g(0.55mmol)NaOH，加热至80℃，搅拌5h， TCL跟踪，反应结束后，分出有机层，真空旋蒸浓缩得到粗产品，经硅胶板层 析分离得最终纯的产物1-(2-氯-4-(3-氯苯醚)苯基)-2-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基 -1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醚)乙酮(Ⅰ-11),0.224g,产率76.9％。
1H NMR(600MHz,CDCl3,ppm-1)δ7.70(dd,J＝8.7,1.5Hz,1H),7.32(d,J＝ 7.1Hz,1H),7.26(d,J＝8.8Hz,2H),7.18(t,J＝7.1Hz,1H),7.12(d,J＝6.8Hz, 1H),6.92(dd,J＝8.8,2.2Hz,2H),6.88(d,J＝1.2Hz,1H),6.81(dd,J＝8.7,2.4Hz, 1H),6.77(d,J＝7.7Hz,1H),5.58(s,2H),4.76(d,J＝1.9Hz,2H),2.46(d,J＝2.3 Hz,3H).IR(KBr,cm-1):3069,1674,1627,1576,1464,1383,1169,1059,841,805, 742.HRMS(ESI):m/z calcd for C26H19Cl3N5O3S+[M+H]+:586.0269,found: 586.0276.
实施例12：O-苯基-S-5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二 唑-2-yl硫醚(Ⅰ-12)
反应式如下：
将化合物0.153g 5(0.5mmol)与0.107g(0.5mmol)溴代甲酸苄酯加入到 50ml圆底烧瓶中，加入5ml水和5ml甲苯，再加入0.016g(0.05mmol)PTC 与0.022g(0.55mmol)NaOH，加热至80℃，搅拌5h，TCL跟踪，反应结束 后，分出有机层，真空旋蒸浓缩得到粗产品，经硅胶板层析分离得最终纯的产 物O-苯基-S-5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-yl硫醚 (Ⅰ-12),0.113g,产率51.3％。
1H NMR(600MHz,CDCl3,ppm-1)δ7.48–7.43(m,3H),7.37–7.26(m,5H), 7.23(td,J＝7.6,1.1Hz,1H),5.70(s,2H),4.53(s,2H),2.57(s,3H).HRMS(ESI): m/z calcd for C20H17ClN5O3S+[M+H]+:442.0735,found:442.0739.
实施例13：1-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑-4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫 醚)-3,3-二甲基-1-(1H-1,2,4-三唑-1-yl)-2-丁酮(Ⅰ-13)
反应式如下：
将化合物0.153g 5(0.5mmol)与0.122g(0.5mmol)1-溴-3,3-二甲基 -1-(1H-1,2,4-三唑-1-yl)-2-丁酮加入到50ml圆底烧瓶中，加入5ml水和5ml甲 苯，再加入0.016g(0.05mmol)PTC与0.022g(0.55mmol)NaOH，加热至80℃， 搅拌5h，TCL跟踪，反应结束后，分出有机层，真空旋蒸浓缩得到粗产品，经 硅胶板层析分离得最终纯的产物1-(5-(1-(2-氯苯基)-5-甲基-1H-1,2,3-三唑 -4-yl)-1,3,4-噁二唑-2-硫醚)-3,3-二甲基-1-(1H-1,2,4-三唑-1-yl)-2-丁酮(Ⅰ-13), 0.182g,产率77.4％。
1H NMR(600MHz,CDCl3)δ8.63(s,1H),7.91(s,1H),7.46(s,1H),7.38(d,J ＝8.0Hz,1H),7.24(t,J＝8.3Hz,1H),7.17(t,J＝5.8Hz,1H),6.81(d,J＝7.7Hz, 1H),5.63(s,2H),2.50(s,3H),1.16(s,9H).IR(KBr,cm-1):2852,1651,1475,1423, 1366,1310,1121,1106,951,751.HRMS(ESI):m/z calcd for C20H22ClN8O2S+[M+H]+:473.1269,found:473.1273.
实施例14：抗菌活性的测定
(1)培养基的配制
肉汤培养基：牛肉膏1g，蛋白胨2g，NaCl 1g，加180ml水溶解，用1N NaOH 调pH值7.0，加水定容至200ml，121℃灭菌20min。
琼脂培养基：牛肉膏1g，蛋白胨2g，NaCl 1g，琼脂4g，加180ml水溶 解，用1N NaOH调pH值7.0，加水定容至200ml，121℃灭菌20min。
PDA固体培养基：马铃薯30g，葡萄糖2g，琼脂1.5-2g，水100ml，自然 pH值，121℃灭菌20min。
PDA液体培养基：马铃薯30g，葡萄糖2g，水100ml，自然pH值，121℃ 灭菌20min。
(2)抗菌活性测定
1)菌液的制备
挑取形态相似的待检菌落(大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌) 3-5个，接种于5ml普通肉汤培养基中，37℃培养2-6h，菌体繁殖后，测定其 OD630值，控制其OD630值在0.1左右，用培养基稀释100倍备用。
用接种圈从4℃保存的PDA培养基上挑取真菌珠菌少量(烟曲霉、黑曲 霉)，接种至5ml PDA培养液，于37℃，在恒温培养箱培养18-25h。
2)受试药物的配制
待试药物用DMSO配成6.4mg/ml溶液，于1.5ml EP管中加入6.4mg样品 和1ml DMSO，溶解后置于-20℃保存，实验前，取出药液取出37℃温箱融化 备用。
3)药敏板的制备
取无菌96孔板，于每排1号孔加184μl新鲜菌液，2～12号孔各加新鲜配 制的菌液100μl；1号孔加入16μl药液。2～11号10级倍比稀释，使各孔中的 药物浓度分别为512、256、128、64、32、16、8、4、2、1和0.5μg/ml，12 号孔不含药物，作阳性对照，另有一组为DMSO作为空白对照，各药敏板于37℃ 培养。
4)IC50值判定
大肠杆菌、枯草杆菌和金黄色葡萄球菌于37℃培养18h，烟曲霉菌、溜曲 霉于37℃培养20h，用酶标仪测OD630。与12号孔对比，以OD值下降50％ 以上的最低浓度孔中的药物浓度为IC50(真菌或细菌生长50％被抑制时的浓度)。 当测定的IC50高于最高浓度时，记为“>512μg/mL”；IC50值低于最低浓度时， 记为“<0.5μg/mL”。
实施例1-13制得的化合物分别按上述方法进行测试，结果如下：
由表可知，化合物I-11对枯草芽孢杆菌显示出与诺氟沙星一样的抗性；化 合物I-1、I-4、I-6对大肠杆菌显示较好的抑制活性，化合物I-10对枯草芽孢杆 菌的抑制效果较好。对真菌的测试活性测试结果显示其中化合物I-4、I-6、I-7、 I-8的抑制效果优于氟康唑。