芒果止咳胶囊和长效胶囊的制备方法 【技术领域】
本发明涉及一种中药制剂，特别是具有缓释作用的芒果止咳长效胶囊的制备方法。
背景技术
中成药的剂型经过多年发展，已有膏剂、散剂、丸剂、糖浆剂、片剂、胶囊剂、注射剂、颗粒剂等多种剂型。这些剂型各有优势，为中成药的发展开拓了空间。
片剂是常见的中成药剂型，它有如下优点：①通常片剂的溶出度及生物利用度较丸剂好：②剂量准确，片剂内药物含量差异较小；③质量稳定，片剂为干燥固体，且某些易氧化变质及易潮解的药物可借包衣加以保护，光线、空气、水分等对其影响较小；④服用、携带、运输等较方便；⑤机械化生产、产量大、成本低、卫生标准容易达到。
但片剂也有不少缺点：①片剂中需加入若干赋形剂，并经过压缩成型，溶出度较散剂及胶囊剂慢，有时影响其生物利用度；②儿童及昏迷者不易吞服；③含挥发性成份的片剂贮有较之时含量下降。
胶囊剂则具有下列特点
(1)外观光洁、美观、可掩盖药物不适的苦味及臭味，便于服用，如穿心莲等制成硬胶囊剂，容易吞服。
(2)药物的生物利用度高，辅料用量少。与片剂、丸剂相比，制备时可不加粘合剂和压力，所以在胃肠道中崩解分散快、吸收好。一般服后3～10分钟可崩解释放的药物，较丸剂和片剂显效快。例如消炎痛胶囊与片剂分别一次口服100mg，6例服胶囊剂后，平均1.5小时血中达到高峰浓度为6mg/ml；另6例服片剂后，平均在2.5小时血中浓度才达到高峰，而且只有3.5mg/ml。(斋滕太朗：药剂学P90-1977)。又如喃氟啶胶囊剂和片剂在兔血中浓度比较，药时曲线下的面积分别为42.15和29.80mg/ml，片剂的相对生物利用度为胶囊剂的70.7％(陆明廉等：药学通报16(9)；57；1981)。关于中成药方面的片剂和胶囊剂方面的比较也有人进行了对比实验。以毛冬青片和胶囊剂进行释放度和升释放量的对比，结果表明片剂30分钟的释放量与胶囊剂2分钟的释放量相近、胶囊剂50分钟的释放量已为片剂的2倍。
(3)提高药物稳定性。对光敏或遇湿热不稳定的药物，可装入不透明的胶囊中，保护药物不受湿气、空气中的氧、光线的影响，从而提高其稳定性。
从以上资料分析，将适宜的中成药片剂改为胶囊剂，可以提高中成药地人体相对生物利用度，使中成药的药理作用更为迅速，提高中成药的治疗时效，并能减少中成药的服用剂量。
但普通胶囊剂也存在不足之处，如有的药物崩解释放并不需要太快，特别是一些镇痛药或影响肠胃功能的药物，需要一定时间来缓释，才能起到应有的效果。所以人们近年来研制了一些定时定位释放药物，通过适当方法，延缓药物在体内的释放、吸收、分布、代谢和排泄过程，以达到延长药物作用的一类制剂，具体方法是将药物先制成颗粒，然后用不同释放速度的材料包衣，按所要求的比例混匀，装入空胶囊中即可达到延效的目的。如布洛芬，阿司匹林、泰诺等都有缓释制剂，文献介绍硫酸苯丙胺胶囊(长效)将主药分成四等份。一份速效部份、三份分别用阻滞剂包衣成3、6、9小时缓释小丸，四种小丸用不同色泽区分，混合均匀后装入空胶囊内30分钟即可达到血中高峰浓度，持续疗效可达11小时。若需在肠道中显效的，可制成肠溶性胶囊。和一般制剂相比，缓释制剂有3个优点：1、服用方便。一般制剂常需一日数次给药，而缓释制剂通常只用每日给药1-2次。2、缓释药较一般制剂作用徐缓，避免了一般制剂频繁给药后，因血药浓度起伏过大而出现有效血药浓度的忽高忽低。3、毒副作用较一般制剂小。良好的脂溶性，强大的血脑屏障通透性。血药峰、谷浓度波动小，药效持续时间长，使疗效增强、毒副反应降低。
芒果止咳片是有相当疗效的产品，它的制备方法是将芒果叶用水提取，再加入鱼腥草素钠、扑尔敏和片剂辅料，混匀后制粒压片包衣得到，具有宣肺化痰，止咳平喘的功效，主要用于咳嗽、气喘、多痰等症。关于芒果止咳片的作用机理，在郑作文、邓家刚等广西中医学院药理室的研究文章“芒果止咳片药效学研究(I)”(发表于2002年20卷第3期的中医药学刊)中有如下报导：芒果止咳片能明显延长豚鼠Ach引喘的潜伏期和对抗Ach所气管平滑肌的收缩，说明芒果止咳片的平喘作用明显；对小鼠的二氧化硫引喘能明显延长咳嗽潜伏期，并能减少刺激猫咳上神经引起的咳嗽次数，说明芒果止咳胶囊的镇咳作用明显。能明显增加小鼠的酚红排泌量，并有明显的平喘，止咳、化痰作用。
经过广西中医学院的药效研究证明，芒果止咳片还具有明显提高小鼠气管分泌功能，有化痰作用；能明显拟制小鼠巴豆油所致耳廓肿胀，有抗炎作用；对金葡萄菌、肺炎双球菌等有抑制作用，即有抗菌作用。临床结果表明，经300例临床试验证实，本品确有宣肺清热、化痰、止咳、平喘的功效，可以用于咳嗽、气喘、多痰的治疗。对感冒、多型支气管炎引起的鼻塞流涕、咽痒、咳嗽者疗效尤佳。具有疗效确切、质量稳定等优点。
但本发明人在研究中发现芒果止咳片在崩解后并未完全溶解，可能导致人体吸收效率低，影响药效。经研究其原因大概是由于芒果叶的提取液的精制过程引起的：一是过滤，一般的企业常用的过滤方法是200目筛过滤，可能混有少量的原药材微粒；二是干燥，常用的烤房干燥时间较长，温度较高，导致膏状物糊化而难溶于水，有效成分因高温而失效。
咳嗽作为常见病和多发病，在刚开始时需服用见效快的制剂，如普通胶囊，而为控制病情则可服用长效的缓释胶囊。由于技术的限制，芒果止咳片在报批药物生产时是普通片剂，而且相对生物利用度较低，不能满足高质量治疗疾病的需要。
【发明内容】
本发明人经过研究和试验，为了提高药物的相对生物利用度，将口服的芒果止咳片片剂改为胶囊剂，并且通过缓释制剂技术，使之成为一种长效产品。
芒果止咳长效胶囊的制备方法如下：
芒果止咳长效胶囊包括芒果叶有效成分提取、加入鱼腥草素钠和扑尔敏混合的工艺步骤，与普通片剂区别的技术特点是：将新鲜芒果叶先提取有效成分，然后加入鱼腥草素钠和扑尔敏混合，制成缓释微小丸、最后装入空胶囊，包装成盒或热压成铝塑板得到产品。
以上所述的新鲜芒果叶提取有效成分的方法有水提法，或者用水提醇沉法，或者用水提加澄清剂法，或者用半仿生提取法，或者用半仿生提取醇沉法。
以上所述的芒果叶水提法是将芒果叶鲜叶水提2次，第一次2小时、第二次1-1.5小时，水提液合并过滤、浓缩干燥后得芒果膏，再低温干燥、粉碎、得细粉。
以上所述的芒果叶水提醇沉法是将芒果叶鲜叶水提二次，第一次2小时、第二次1-1.5小时合并提取液、过滤、滤液浓缩至比重1.15的清膏，放冷，加入乙醇，使含醇量达60％-75％，静置48小时，滤过滤液回收乙醇，浓成比重1.25的稠膏，再低温干燥、粉碎、得细粉。
以上所述的芒果叶水提加澄清剂法是将芒果叶鲜叶水提二次，第一次2小时、第二次1-1.5小时合并提取液、过滤、滤液浓缩至比重1.15的清膏，放冷，加入澄清剂，静置48小时，滤过滤液回收乙醇，浓成比重1.25的稠膏，再低温干燥、粉碎、得细粉。
所述的澄清剂在101果汁澄清剂或甲壳素类吸附澄清剂、ZTC澄清剂等选取，主要作用是去除中草药药液中蛋白质、鞣质、色素及果胶等大分子不稳定性杂质达到澄清目的。澄清剂中的添加量一般为药液量的2％～20％左右。
以上所述的芒果叶半仿生提取法是将芒果叶鲜叶用半仿生提取液提取2次，第一次2小时、第二次1-1.5小时，提取液合并过滤，中和PH值至7，浓缩干燥后得芒果膏，低温干燥、粉碎、得细粉。
以上所述的芒果叶半仿生提取醇沉法是将芒果叶鲜叶用半仿生提取液提取二次，第一次2小时、第二次1-1.5小时，合并提取液，中和PH值至7，过滤，滤液浓缩至比重1.15的清膏，放冷，加入乙醇，使含醇量达60％-75％，静置48小时，滤过滤液回收乙醇，浓成比重1.25的稠膏，再低温干燥、粉碎、得细粉。
以上所述的过滤是指过200目筛或抽滤。
以上所述的低温干燥是指真空干燥或冷冻干燥。
以上所述的半仿生提取液是指用盐酸或醋酸与水配成的酸性溶液，也可以采用混合酸，酸和水配制后PH值为2-5。
以上所述的制成缓释微小丸的过程是取上述芒果叶提取方法所制细粉按芒果叶粉每公斤加5-10％的鱼腥草素钠加0.07-0.14％的扑尔敏混合均匀，再加粘合剂制成微囊，用10％-50％鲸蜡或其它阻滞剂包衣，分别制成2、4、6、8小时缓释小丸，每种小丸用不同色泽区分。
所述的阻滞剂一般分为不溶性(如乙基纤维素、乙烯-醋酸乙烯共聚物等)、生物溶性(如硬脂酸、硬脂醇、单硬脂酸甘油酯等)和亲水凝胶(如海藻酸钠、羟丙基甲基纤维素等)几类骨架材料，可选择某一类或几类材料的混合物与药物混合，经适当方法制成。为了调节药物的释药速率，可加入致孔剂、表面活性剂。
本发明也可以制备成普通止咳胶囊，其过程是：
取上述芒果叶提取方法所制细粉按芒果叶粉加3-20％的鱼腥草素钠加0.2-1.4％的扑尔敏混合均匀，直接装入空胶囊中或制成颗粒后装入空胶囊中即得。
本发明所称芒果叶为可含嫩技的芒果叶，符合国家中药材标准的原药材；鱼腥草素钠和扑尔敏是符合《中国药典》所规定的原料药。
采用水提醇沉法主要是为了除去淀粉等杂质(含醇量50％-60％)，使含醇量达75％以上时，除去鞣质，水溶性色素等少数无效杂质，其余部份杂质均可沉淀而去除。经醇沉浓缩后所得浸膏粘性增大，密度也增大，可使相同积的胶装入药物，减少服用胶囊颗粒数。这是本发明采用醇沉法的原因。
同样采用水提加澄清剂法目的也是为了除去杂质提高药效，而且本法较水提醇沉法祛除杂质效果相近成本更低。
半仿生提取工艺是当前较为先进的方法，并且是相对经济的方法。其方法是模仿口服药物在胃肠道转运过程，采用选定PH的酸性水和碱性水依次连续提取，其目的是提取含指中药材的标成分高的“活性混合物”。因为半仿生提取的工艺条件要适合工业化生产的实际，故不能完全与人体条件相同。当前关于中药材的半仿生提取工艺的研究正方兴未艾，如“通痹止痛胶囊的半仿生提取工艺条件的研究”(云南中医学院学报，2003年)，用“均匀设计优选麻杏石甘汤半仿生提取工艺”(中成药，2002年)实验结果表明，半仿生提取法优于一般的水提法。半仿生提取醇沉法是半仿生提取法的发展，这是本发明采用是半仿生提取法和半仿生提取醇沉法的原因。
芒果止咳胶囊和芒果止咳缓释胶囊是芒果止咳片的改剂型品种，它克服了芒果止咳片相对生物利用度较低这一困绕片剂的一大问题，提高了药物的相对利用度，同时芒果止咳缓释胶囊也为中成药缓释制剂研究开发提供了一种新的思路。
【具体实施方式】
实施例1
将新鲜芒果叶100公斤分别用10倍和8倍水提二次，第一次2小时、第二次1-1.5小时，水提液合并后过滤、浓缩低温干燥后得芒果膏，粉碎得细粉备用，然后按每公斤芒果叶粉加0.033公斤的鱼腥草素钠加0.0021公斤的扑尔敏混合均匀，加粘合剂制成微囊，用鲸蜡或其它阻滞剂包衣，分别制成2、4、6、8小时缓释小丸，每种小丸用不同色泽区分，混合均匀后装入空胶囊中，包装成盒或热压成铝塑板得到产品。
实施例2
将芒果叶鲜叶100公斤分别用10倍和8倍水提二次，第一次2小时、第二次1-1.5小时合并煎液、过滤、滤液浓缩还比重1.15的清膏，放冷，加入乙醇，使含醇量达65％，静置48小时，滤过滤液回收乙醇，浓成比重1.25的稠膏，再低温干燥、粉碎、得细粉，然后按每公斤芒果叶粉加0.05公斤的鱼腥草素钠加0.0042公斤的扑尔敏混合均匀，加粘合剂制成微囊，用鲸蜡或其它阻滞剂包衣，分别制成2、4、6、8小时缓释小丸，每种小丸用不同色泽区分，混合均匀后装入空胶囊中，包装成盒或热压成铝塑板得到产品。
实施例3
将芒果叶鲜叶100公斤分别用10倍和8倍水提二次，第一次2小时、第二次1-1.5小时合并煎液、过滤、滤液浓缩还比重1.15的清膏，放冷，加入8％的101型澄清剂，静置48小时，滤过，滤液浓成比重1.25的稠膏，再低温干燥、粉碎、得细粉，然后按每公斤芒果叶粉加0.05公斤的鱼腥草素钠加0.0042公斤的扑尔敏混合均匀，加粘合剂制成微囊，用鲸蜡或其它阻滞剂包衣，分别制成2、4、6、8小时缓释小丸，每种小丸用不同色泽区分，混合均匀后装入空胶囊中，包装成盒或热压成铝塑板得到产品。
实施例4
将新鲜芒果叶100公斤分别用12倍和8倍半仿生提取液提二次，第一次1.5小时、第二次1小时，提液合并后过滤、调PH值至7，浓缩低温干燥后得芒果膏，粉碎得细粉备用，然后按每公斤芒果叶粉加0.045公斤的鱼腥草素钠加0.0031公斤的扑尔敏混合均匀，加粘合剂制成微囊，用鲸蜡或其它阻滞剂包衣，分别制成3、6、9小时缓释小丸，每种小丸用不同色泽区分，混合均匀后装入空胶囊中，包装成盒或热压成铝塑板得到产品。
实施例5
将芒果叶鲜叶100公斤分别用10倍和6倍半仿生提取液提二次，第一次1.5小时、第二次1小时合并提取液、调PH值至7，过滤、滤液浓缩到比重1.15的清膏，放冷，加入乙醇，使含醇量达65％，静置48小时，滤过滤液回收乙醇，浓成比重1.25的稠膏，再低温干燥、粉碎、得细粉，然后按每公斤芒果叶粉加0.066公斤的鱼腥草素钠加0.0052公斤的扑尔敏混合均匀，加粘合剂制成微囊，用鲸蜡或其它阻滞剂包衣，分别制成2、4、6、8小时缓释小丸，每种小丸用不同色泽区分，混合均匀后装入空胶囊中，包装成盒或热压成铝塑板得到产品。
实施例6
将新鲜芒果叶100公斤分别用12倍和8倍水提二次先用水提二次，第一次2小时、第二次1-1.5小时，水提液合并后过滤、浓缩低温干燥后得芒果膏，粉碎得细粉备用，然后按每公斤芒果叶粉加0.033公斤的鱼腥草素钠加0.0023公斤的扑尔敏混合均匀，直接装入空胶囊中，或混合均匀后制粒装入空胶囊中，包装成盒或热压成铝塑板得到产品。
实施例7
将芒果叶鲜叶100公斤分别用10倍和8倍水提二次水提二次，第一次2小时、第二次1-1.5小时合并煎液、过滤、滤液浓缩还比重1.15的清膏，放冷，加入乙醇，使含醇量达65％，静置48小时，滤过滤液回收乙醇，浓成比重1.25的稠膏，再低温干燥、粉碎、得细粉，然后按每公斤芒果叶粉加0.066公斤的鱼腥草素钠加0.0042公斤的扑尔敏混合均匀，直接装入空胶囊中，或混合均匀后制粒装入空胶囊中，包装成盒或热压成铝塑板得到产品。
实施例8
将芒果叶鲜叶100公斤分别用12倍和8倍水提二次，第一次2小时、第二次1-1.5小时合并煎液、过滤、滤液浓缩还比重1.15的清膏，放冷，加入按溶液量5％的甲壳素类吸附澄清剂，静置48小时，滤过，滤液浓成比重1.25的稠膏，再低温干燥、粉碎、得细粉，然后按每公斤芒果叶粉加0.066公斤的鱼腥草素钠加0.0046公斤的扑尔敏混合均匀，直接装入空胶囊中，或混合均匀后制粒装入空胶囊中，包装成盒或热压成铝塑板得到产品。
实施例9
将新鲜芒果叶100公斤分别用12倍和8倍半仿生提取液提二次，第一次1.5小时、第二次1小时，提液合并后过滤、调PH值至7，浓缩低温干燥后得芒果膏，粉碎得细粉备用，然后按每公斤芒果叶粉加0.05公斤的鱼腥草素钠加0.0033公斤的扑尔敏混合均匀，直接装入空胶囊中，或混合均匀后制粒装入空胶囊中包装成盒或热压成铝塑板得到产品。
实施例10
将芒果叶鲜叶100公斤分别用10倍和8倍半仿生提取液提二次，第一次1.5小时、第二次1小时合并提取液、调PH值至7，过滤、滤液浓缩还比重1.15的清膏，放冷，加入乙醇，使含醇量达65％，静置48小时，滤过滤液回收乙醇，浓成比重1.25的稠膏，再低温干燥、粉碎、得细粉，然后按每公斤芒果叶粉加0.069公斤的鱼腥草素钠加0.0048公斤的扑尔敏混合均匀，直接装入空胶囊中，或混合均匀后制粒装入空胶囊中，包装成盒或热压成铝塑板得到产品。
药理学研究
1，主要药效学研究
为了验证芒果止咳胶囊的药效，根据上述实验报道，设计了芒果止咳片和芒果止咳胶囊(普通型)的生物等效性实验，即芒果止咳胶囊为实验组芒果止咳片为对照组。实验结果表明，芒果止咳胶囊也能明显延长豚鼠Ach引喘的潜伏期和对抗Ach所致气管平滑肌的收缩，与芒果止咳片相比，没有显著差异(P＜0.01)说明芒果止咳胶囊平喘作用明显。同时，芒果止咳胶囊对小鼠二氧化硫引喘能明显延长咳嗽潜伏期，并能减少刺激猫咳上神经引起的咳嗽次数，与芒果止咳片的对照相比，没有显著差异(P＜0.01)；芒果止咳胶囊也能减少刺激猫喉上神经引起的咳嗽次数，说明芒果止咳胶囊的镇咳作用明显。芒果止咳胶囊也能明显增加小鼠的酚红排泌量，与芒果止咳片相比，没有显著差异(P＜0.01)，说明芒果止咳胶囊剂化痰作用明显.上述实验证明了芒果止咳胶囊也具有明显的平喘、止咳、化痰作用，与对照组相比没有显著差异。上述实验洁果表明，芒果止咳胶囊至少在疗效上不低于芒果止咳片。
2，药代动力学研究
由于中成药的化学成分非常复杂，本发明人以制备芒果止咳胶囊中所含鱼腥草素钠这一单一成份为代表，进行了本药的药代动力学的体外研究。在本处方中的各种化学活性成分应是协同相加的，故可以由鱼腥草素钠的药代动力学推断本品的药代动力学。本发明人设计了药物的体外溶出度实验。溶出度指制剂中主要有效成分在规定介质中溶出速度和程度，是一种模拟口服固体制剂在胃肠道中的崩解和溶出的体外试验法。一般来说体外溶出度与体内生物利用度之间有正相关的关系。故可以通过体外溶出度试验来验证药物体内生物利用度评价，同时可以作为生物等效性试验验证的一种方法。
实验结果表明，芒果止咳片的60分钟的鱼腥草素钠的释放量与芒果止咳胶囊的10分钟的鱼腥草素钠的释放量相当。假设2.5或3小时能达到本品的血药浓度高峰，此时芒果止咳片鱼腥草素钠的总释放量分别为芒果止咳胶囊的66％和72％。上述实验结果说明芒果止咳胶囊的人体相对生物利用度明显优于芒果止咳片，同时也说明芒果止咳胶囊的治疗速度明显快于芒果止咳片。因此也可初步推断芒果止咳片的血药浓度峰值为芒果止咳胶囊的70％左右，因此在相同剂量下，每服3粒胶囊可等效于4粒片剂。
关于芒果止咳缓释胶囊，本发明人采用鲸蜡对芒果止咳小丸进行了包衣，并对这些缓释小丸进行了体外容出度实验，所有缓释小丸均在规定的缓释时间后开始释放鱼腥草素钠。以上实验结果表明能明显减缓芒果止咳片中的鱼腥草素钠的释放，从而达到长效的目的。
临床资料
对中医诊断为风热犯肺型咳嗽，西医诊断为急性上呼吸道感染的自愿病人17例用芒果止咳胶囊和芒果止咳缓释胶囊治疗。治疗初期用芒果止咳胶囊，待病情有所缓解后，再用芒果止咳缓释胶囊，并逐渐减量，七天后观察，治愈13例，有效4例。结果表明本品疗效确切。