制备16,17-二氢-赤霉素5及其乙酸酯的方法技术领域
本发明涉及一种制备16，17-二氢-赤霉素5及其乙酸酯的方法。
背景技术
16，17-二氢-赤霉素5(英文简称：16，17-dihydro-GA5)及其乙酸酯(英文化学名：13-Acetoxy-20-nor-16-epi-gibberell-2-en-7-oic acid 19，10-lactone)，是一种植物生长调节剂，因其作用机理及效果一样，在制备时将16，17-二氢-赤霉素5(如式A所示)合成16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯。
关于16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯的合成，国外有文献报道[Can.J.Chem.82：293-300(2004)]。该文献报道的方法，是以赤霉素3(以下简称GA3)为起始原料，经在酰化保护、加氢、磺酰化、脱酰反应得到目标物，其合成路线如图1所示。
发明内容
本发明的目的是提供制备16，17-二氢-赤霉素5及其乙酸酯的方法。
本发明提供的制备16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯的方法，包括如下步骤：
1)将式B所示化合物和金属锂于由液氨和乙醇组成的混合液或由液氨和正丁醇组成的混合液中混匀进行反应，反应完毕得到式C所示化合物；
(式B)
(式C)
2)将步骤1)所得式C所示化合物和卤化剂于由碱的水溶液和四氢呋喃组成的混合液中混匀进行反应，反应完毕得到式D所示化合物；
(式D)
3)在氢气气氛中，将步骤2)所得式D所示化合物、酯化剂、氯化锌和催化剂于乙酸乙酯中混匀进行反应，反应完毕得到式E所示化合物；
(式E)
4)将步骤3)所得式E所示化合物与1，8-二氮杂环[5，4，0]十一烯-7于四氢呋喃中混匀进行反应，反应完毕得到式F所示化合物；
(式F)
5)将步骤4)制备所得式F所示化合物和三苯膦基氯化铑于无水乙醇中进行反应，反应完毕得到所述16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯。
上述方法的所述步骤1)中，所述由液氨和乙醇组成的混合液或由液氨和正丁醇组成的混合液、式B所示化合物和金属锂的用量比为250-180ml∶18-15g∶0.6-0.3g，优选225ml∶16g∶0.4g；所述由液氨和乙醇组成的混合液中，液氨和乙醇的体积比为10-6∶2-0.5，优选8∶1；所述由液氨和正丁醇组成的混合液中，液氨和正丁醇的体积比为10-6∶2-0.5，优选8∶1；所述反应步骤中，温度为-80--60℃，优选-70℃，时间为 2-0.5小时，具体可为1-1.5小时，优选1小时；
所述步骤2)中，所述卤化剂选自溴和碘中的至少一种，优选碘；所述碱选自碳酸氢钠和碳酸氢钾中的至少一种，优选碳酸氢钠；所述碱的水溶液的质量百分浓度为2.5-10％，优选5％；所述式C所示化合物、碱、卤化剂和四氢呋喃的用量比为12-9g∶2.0-0.7g∶9-4g∶50-15ml，优选10g∶1.25g∶6g∶25ml；反应步骤中，温度为-5-10℃，优选0℃，时间为60-25分钟，优选30分钟；
所述步骤3)中，所述催化剂选自铑-氧化铝催化剂、铑-碳催化剂和铑粉中的至少一种，其中，所述铑-氧化铝催化剂中铑的质量百分含量为1％、3％、5％或10％，所述铑-碳催化剂中铑的质量百分含量为1％、3％、5％或10％，优选铑的质量百分含量为5％的铑-氧化铝催化剂；所述酯化剂选自乙酰氯和乙酸酐中的至少一种，优选乙酸酐；所述式D所示化合物、酯化剂、氯化锌、催化剂和乙酸乙酯的用量比为18-10g∶50-30ml∶20-5mg∶2-0.8g∶200-50ml，具体可为14-15g∶38-40ml∶9-10mg∶1-1.2g∶94-100ml，优选15g∶40ml∶10mg∶1g∶100ml；反应步骤中，温度为35-20℃，优选25℃，时间为60-45小时，具体为48-60小时，优选48小时；
所述步骤4)中，所述式E所示化合物、1，8-二氮杂环[5，4，0]十一烯-7和四氢呋喃的用量比为12-8g∶40-25g∶100-30ml，具体可为10g∶27-30g∶40-50ml，优选10g∶30g∶50ml；反应步骤中，温度为70-60℃，优选65℃，时间为5-3.5小时，优选4小时；
所述步骤5)中，式F所示化合物、三苯膦基氯化铑和无水乙醇的用量比为12-8g∶1-0.4g∶200-50ml，具体可为10g∶0.5g∶90-100ml，优选10g∶0.5g∶100ml；反应步骤中，温度为95-100℃，优选97℃，时间为7-5小时，优选6小时。
本发明提供的制备16，17-二氢-赤霉素5的方法，包括如下步骤：在上述制备16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯方法的步骤5)之后，将步骤5)所得16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯、碱与醇进行反应，反应完毕得到所述16，17-二氢-赤霉素5；所述醇为甲醇或乙醇。
上述方法中，所述16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯、碱与醇的用量比为1.7-1g∶2.2-1.5g∶50-25ml，具体可为1.25-1.5g∶1.875-2g∶25-30ml，优选1.5g∶2g∶30ml；所述碱选自碳酸钾、碳酸钠和氢氧化钾中的至少一种，优选碳酸钾；所述醇优选为甲醇；所述反应步骤中，温度为100-95℃，优选97℃，时间为4-1小时，优选2小时。
本发明提供的式E所示化合物；
(式E)。
本发明提供的制备式E所示化合物的方法，包括如下步骤：
1)将式B所示化合物和金属锂于由液氨和乙醇组成的混合液或由液氨和正丁醇组成的混合液中混匀进行反应，反应完毕得到式C所示化合物；
(式B)
(式C)
2)将步骤1)所得式C所示化合物和卤化剂于由碱的水溶液和四氢呋喃组成的混合液中混匀进行反应，反应完毕得到式D所示化合物；
(式D)
3)在氢气气氛中，将步骤2)所得式D所示化合物、酯化剂、氯化锌和催化剂于乙酸乙酯中混匀进行反应，反应完毕得到所述化合物。
所述步骤1)中，所述由液氨和乙醇组成的混合液或由液氨和正丁醇组成的混合液、式B所示化合物和金属锂的用量比为250-180ml∶18-15g∶0.6-0.3g，优选225ml∶16g∶0.4g；所述由液氨和乙醇组成的混合液中，液氨和乙醇的体积比为10-6∶2-0.5， 优选8∶1；所述由液氨和正丁醇组成的混合液中，液氨和正丁醇的体积比为10-6∶2-0.5，优选8∶1；所述反应步骤中，温度为-80--60℃，优选-70℃，时间为2-0.5小时，具体可为1-1.5小时，优选1小时；
所述步骤2)中，所述卤化剂选自溴和碘中的至少一种，优选碘；所述由碱的水溶液和四氢呋喃组成的混合液中，所述碱选自碳酸氢钠和碳酸氢钾中的至少一种，优选碳酸氢钠，所述碱的水溶液的质量百分浓度为2.5-10％，优选5％；所述式C所示化合物、碱、卤化剂和四氢呋喃的用量比为12-9g∶2.0-0.7g∶9-4g∶50-15ml，优选10g∶1.25g∶6g∶25ml；所述反应步骤中，温度为-5-10℃，优选0℃，时间为60-25分钟，优选30分钟；
所述步骤3)中，所述催化剂选自铑-氧化铝催化剂、铑-碳催化剂和铑粉中的至少一种，其中，所述铑-氧化铝催化剂中铑的质量百分含量为1％、3％、5％或10％，所述铑-碳催化剂中铑的质量百分含量为1％、3％、5％或10％，优选铑的质量百分含量为5％的铑-氧化铝催化剂；所述酯化剂选自乙酰氯和乙酸酐中的至少一种，优选乙酸酐；所述式D所示化合物、酯化剂、氯化锌、催化剂和乙酸乙酯的用量比为18-10g∶50-30ml∶20-5mg∶2-0.8g∶200-50ml，具体可为14-15g∶38-40ml∶9-10mg∶1-1.2g∶94-100ml，优选15g∶40ml∶10mg∶1g∶100ml；反应步骤中，温度为35-20℃，优选25℃，时间为60-45小时，具体为48-60小时，优选48小时。
本发明提供的制备16，17-二氢-赤霉素5及其乙酸酯的方法，是将GA3的内脂环打开并脱羟基、经卤化闭环、加氢、脱卤、转位反应得到目标产物。该方法最大的优点在于合成路线稳定，产品收率高，避免了在高温下长时间反应，从而降低合成当中的危险性。公开报道中的甲磺酰化反应要求在无水状态下才能顺利进行反应，所用的吡啶必须无水化处理，处理比较危险，而且不容易保存。而最后一步的脱氧消除转化成烯的反应，一是高温长时间反应，容易出现危险；二是溶剂使用的是二甲基甲酰胺，该溶剂在后处理十分麻烦。本发明提供的制备方法具有重要的应用价值。
附图说明
图1为文献报道16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯的合成路线。
图2为本发明提供的16，17-二氢-赤霉素5及其乙酸酯的合成路线。
具体实施方式
本发明提供的制备16，17-二氢-赤霉素5及其乙酸酯的方法，是将GA3的内脂环打开并脱羟基、经卤化闭环、加氢、脱卤、转位反应得到目标产物，其合成路线如图2所示。
下面结合具体实施例对本发明作进一步阐述，但本发明并不限于以下实施例。所述方法如无特别说明均为常规方法。所述材料如无特别说明均能从公开商业途径而得。
实施例1、制备16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯
1)化合物GA3脱羟产物式C所示化合物的合成
圆底烧瓶、低温磁力搅拌。向烧瓶中加入16g GA3(即式B所示化合物)和25ml无水EtOH；将圆底烧瓶放入低温磁力搅拌中，开动搅拌，使温度保持在-70℃；向圆底烧瓶中通入液氨，搅拌溶解GA3(即式B所示化合物)，用液氨定容至200ml；将0.4克金属锂加入到混合液中，使金属锂完全溶解，保温反应1h，TLC监测反应结束，将反应体系慢慢恢复到室温，使溶剂完全挥发；向体系中加入200ml水，搅拌使样品完全溶解后，滴加稀盐酸(该稀盐酸中，盐酸和水的体积比为1∶2)将体系pH值调到1；过滤、清洗、干燥得到固体，为式C所示化合物，称重：10g，产率：73％。
2)式C所示化合物经卤化后产物式D所示化合物的合成
圆底烧瓶、磁力搅拌。将烧瓶放入冰浴中，向烧瓶中加入50ml由质量百分浓度为5％的碳酸氢钠水溶液(该水溶液中含有碳酸氢钠1.25克)和四氢呋喃以体积比1∶1混合而得的混合液，打开搅拌加入10克式C所示化合物，待完全溶解后加入6克卤化剂碘，反应30分钟后TLC监测反应完成后，用饱合硫代硫酸钠调反应液至无色。再用100ml乙酸乙酯在搅拌下用1M的盐酸调混合液的pH值至3，分层留油相，最后再用200ml乙酸乙酯分两次萃取水相，合并油相经干燥、旋蒸得式D所示化合物，称重12.5克，产率91％。
3)16，17-位加氢产物式E所示化合物的合成
圆底烧瓶、磁力搅拌。向烧瓶中加入15克式D所示化合物，然后加入40ml酯化剂乙酸酐和10毫克氯化锌(ZnCl2)，在室温下搅拌15小时后，用真空在60℃下将溶剂蒸干，得树脂状物料；再用100ml乙酸乙酯将其溶解后，加入1克铑的质量百分含量为5％的催化剂铑-氧化铝(Rh-Al2O3)(该催化剂的CAS号为7440-16-6)催化剂，通入氢气，室温25℃下搅拌反应48小时，TLC监测反应完成后，过滤，将清液旋干得固体物料；用50ml甲醇溶解，置于-5℃下用90分钟滴加完4M氢氧化钾100ml，然后通过减压蒸馏蒸除甲醇。再将蒸除后的混合液置于0℃下滴加2M的盐酸至混合液pH值2，将沉淀过滤、清洗、干燥即得式E所示化合物，称重11.5克，产率75％。
该式E所示化合物的结构确认数据如下：LR-MS m/z(relative intensity)：502([M+]，25)，484(9)，473(20)，457(30)，437(18)，375(5)，372(15)，357(40)，330(28)，329(14).HR-MS calcd.for C21H27IO6([M+])：502.0929；found：502.3424.Anal.calcd.for C21H27IO6(％)：C，50.21；H，5.22；found：C，50.25；H，5.42；.mp 214-216℃。由上可知，该化合物结构正确，为式E所示化合物。
4)脱卤产物式F所示化合物的合成
圆底烧瓶、油浴磁力搅拌。向烧瓶中加入10g式E所示化合物和50ml四氢呋喃(THF)搅拌溶解，在室温下慢慢加入(30分钟内加完)30g 1，8-二氮杂环[5，4，0]十一烯-7(DBU)；将圆底烧瓶放入油浴磁力搅拌中，开动搅拌，加回流冷凝管加热升温，使温度保持在65℃，保温4h，TLC监测反应结束后，将反应体系慢慢恢复到室温，减压蒸馏除去溶剂；向体系中加入150ml水，搅拌使样品完全溶解后，滴加稀盐酸(1∶2)将体系pH值调到1；过滤、清洗、干燥固体。水相用乙酸乙酯提取，回收有机相，减压蒸馏，得到式F所示化合物。合并后称重：7克，产率86％。
5)16，17-二氢-GA5乙酸酯A(A-13-acetate)的合成
圆底烧瓶、油浴磁力搅拌。向烧瓶中加入10g式F所示化合物和100ml无水乙醇搅拌溶解，加入0.5g三苯膦基氯化铑；将圆底烧瓶放入油浴磁力搅拌中，开动搅拌，加回流冷凝管加热升温，使温度保持在95-100℃之间(如97℃)，保温6h，TLC监测反应结束后，将反应体系慢慢恢复到室温，过滤，清液减压蒸馏除去溶剂；过柱纯化，经减压蒸馏即得16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯(A-13-acetate)。称重：8.9克，产率89％。
该16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯的结构确认数据如下：
LR-MS m/z(relative intensity)：374([M+]，6)，332(57)，330(58)，314(9)，289(28)，270(100)，241(21)，225(44).HR-MS calcd.for C21H26O6([M+])：374.1729；found：374.1724.Anal.calcd.for C21H26O6(％)：C 67.36，H 7.00；found：C 67.39，H 7.36.mp222-224℃。
由上可知，该化合物结构正确，为16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯。
实施例2、制备16，17-二氢-赤霉素5
圆底烧瓶、油浴磁力搅拌，向该圆底烧瓶中加入1.5g实施例1制备所得16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯、2g碳酸钾和30ml甲醇，在搅拌下加热回流反应2小时后，将反应混合物在室温下搅拌60min使反应体系的温度降至室温，TLC监测反应结束，将反应体系用水泵减压脱溶(浴温＜50℃)至1/3体积，得到油状粗产品将反应混合物倒入酸水中，有大量白色胶体物出现，清洗干燥后，得到本发明提供的16，17-二氢-赤霉素5。
该产物16，17-二氢-赤霉素5的结构确认数据如下：
LR-MS m/z(relative intensity)：332([M+]，8)，314(40)，296(15)，286(28)，268(100)，241(21)，225(44).HR-MS calcd.for C19H24O5([M+])：332.16；found：332.16.Anal.calcd.for C19H24O5(％)：C 68.64，H 7.26；found：C 68.66，H 7.28.mp 245-247℃。
由上可知，该化合物结构正确，为16，17-二氢-赤霉素5。
实施例3、制备16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯
1)化合物GA3脱羟产物式C所示化合物的合成
圆底烧瓶、低温磁力搅拌。向烧瓶中加入80g GA3(即式B所示化合物)和125ml无水EtOH；将圆底烧瓶放入低温磁力搅拌中，开动搅拌，使温度保持在-70℃；向圆底烧瓶中通入液氨，搅拌溶解GA3(即式B所示化合物)，用液氨定容至1000ml；将2克金属锂加入到混合液中，使金属锂完全溶解，保温反应1.5h，TLC监测反应结束，将反应体系慢慢恢复到室温，使溶剂完全挥发；向体系中加入1000ml水，搅拌使样品完全溶解后，滴加稀盐酸(该稀盐酸中，盐酸和水的体积比为1∶2)将体系pH值调到1；过滤、清洗、干燥得到固体，为式C所示化合物，称重：55g，产率：75％。
2)式C所示化合物经卤化后产物式D所示化合物的合成
圆底烧瓶、磁力搅拌。将烧瓶放入冰浴中，向烧瓶中加入250ml由质量百分浓度为5％的碳酸氢钠水溶液(该水溶液中含有碳酸氢钠6.25g)和四氢呋喃以体积比1∶1混合而得的混合液，打开搅拌加入50克式C所示化合物，待完全溶解后加入30克卤化剂碘，反应30分钟后TLC监测反应完成后，用饱合硫代硫酸钠调反应液至无色，再用400ml乙酸乙酯在搅拌下用1M的盐酸调混合液的pH值至3，分层留油相，最后再用200ml乙酸乙酯分两次萃取水相，合并油相经干燥、旋蒸得式D所示化合物，称重67克，产率92％。
3)16，17-位加氢产物式E所示化合物的合成
圆底烧瓶、磁力搅拌。向烧瓶中加入70克式D所示化合物，然后加入190ml酯 化剂乙酸酐和45毫克氯化锌(ZnCl2)，在室温下搅拌15小时后，用真空在60℃下将溶剂蒸干，得树脂状物料；再用470ml乙酸乙酯将其溶解后，加入6克铑的质量百分含量为5％的催化剂铑-氧化铝(Rh-Al2O3)(该催化剂的CAS号为7440-16-6)催化剂，通入氢气，室温25℃下搅拌反应60小时，TLC监测反应完成后，过滤，将清液旋干得固体物料；用200ml甲醇溶解，置于-5℃下用90分钟滴加完4M氢氧化钾400ml，然后通过减压蒸馏蒸除甲醇。再将蒸除后的混合液置于0℃下滴加2M的盐酸至混合液pH值2，将沉淀过滤、清洗、干燥即得式E所示化合物，称重50克，产率72％。
该式E所示化合物的结构确认数据如下：LR-MS m/z(relative intensity)：502([M+]，25)，484(9)，473(20)，457(30)，437(18)，375(5)，372(15)，357(40)，330(28)，329(14).HR-MS calcd.for C21H27IO6([M+])：502.0929；found：502.3424.Anal.calcd.for C21H27IO6(％)：C，50.21；H，5.22；found：C，50.25；H，5.42；.mp 214-216℃。由上可知，该化合物结构正确，为式E所示化合物。
4)脱卤产物式F所示化合物的合成
圆底烧瓶、油浴磁力搅拌。向烧瓶中加入50g式E所示化合物和200ml四氢呋喃(THF)搅拌溶解，在室温下慢慢加入(60分钟内加完)135g 1，8-二氮杂环[5，4，0]十一烯-7(DBU)；将圆底烧瓶放入油浴磁力搅拌中，开动搅拌，加回流冷凝管加热升温，使温度保持在65℃，保温4h，TLC监测反应结束后，将反应体系慢慢恢复到室温，减压蒸馏除去溶剂；向体系中加入400ml水，搅拌使样品完全溶解后，滴加稀盐酸(1∶2)将体系pH值调到1；过滤、清洗、干燥固体。水相用乙酸乙酯提取，回收有机相，减压蒸馏，得到式F所示化合物。合并后称重：38克，产率87％。
5)16，17-二氢-GA5乙酸酯A的合成
圆底烧瓶、油浴磁力搅拌。向烧瓶中加入50g式F所示化合物和450ml无水乙醇搅拌溶解，加入2.5g三苯膦基氯化铑；将圆底烧瓶放入油浴磁力搅拌中，开动搅拌，加回流冷凝管加热升温，使温度保持在95-100℃之间(如97℃)，保温6h，TLC监测反应结束后，将反应体系慢慢恢复到室温，过滤，清液减压蒸馏除去溶剂；过柱纯化，经减压蒸馏即得16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯(A-13-acetate)。称重：45克，产率90％。
该16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯的结构确认数据如下：
LR-MS m/z(relative intensity)：374([M+]，6)，332(57)，330(58)，314(9)，289(28)，270(100)，241(21)，225(44).HR-MS calcd.for C21H26O6([M+])：374.1729；found：374.1724.Anal.calcd.for C21H26O6(％)：C 67.36，H 7.00；found：C 67.39，H 7.36.mp222-224℃。由上可知，该化合物结构正确，为16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯。
实施例4、制备16，17-二氢-赤霉素5
圆底烧瓶、油浴磁力搅拌，向该圆底烧瓶中加入10g实施例3制备所得16，17-二氢-赤霉素5-13-乙酸酯、15g碳酸钾和200ml甲醇，在搅拌下加热回流反应2小时后，将反应混合物在室温下搅拌60min使反应体系的温度降至室温，TLC监测反应结束，将反应体系用水泵减压脱溶(浴温＜50℃)至1/3体积，得到油状粗产品将反应混合物倒入酸水中，有大量白色胶体物出现，清洗干燥后，得到本发明提供的16，17-二氢-赤霉素5。
该产物16，17-二氢-赤霉素5的结构确认数据如下：
LR-MS m/z(relative intensity)：332([M+]，8)，314(40)，296(15)，286(28)，268(100)，241(21)，225(44).HR-MS calcd.for C19H24O5([M+])：332.16；found：332.16.Anal.calcd.for C19H24O5(％)：C 68.64，H 7.26；found：C 68.66，H 7.28.mp 245-247℃。
由上可知，该化合物结构正确，为16，17-二氢-赤霉素5。
实施例5、制备式E所示化合物
1)化合物GA3脱羟产物式C所示化合物的合成
圆底烧瓶、低温磁力搅拌。向烧瓶中加入16g GA3(即式B所示化合物)和25ml无水EtOH；将圆底烧瓶放入低温磁力搅拌中，开动搅拌，使温度保持在-70℃；向圆底烧瓶中通入液氨，搅拌溶解GA3(即式B所示化合物)，用液氨定容至200ml；将0.4克金属锂加入到混合液中，使金属锂完全溶解，保温反应1h，TLC监测反应结束， 将反应体系慢慢恢复到室温，使溶剂完全挥发；向体系中加入200ml水，搅拌使样品完全溶解后，滴加稀盐酸(该稀盐酸中，盐酸和水的体积比为1∶2)将体系pH值调到1；过滤、清洗、干燥得到固体，为式C所示化合物，称重：10g，产率：73％。
2)式C所示化合物经卤化后产物式D所示化合物的合成
圆底烧瓶、磁力搅拌。将烧瓶放入冰浴中，向烧瓶中加入50ml由质量百分浓度为5％的碳酸氢钠水溶液(该水溶液中含有碳酸氢钠1.25克)和四氢呋喃以体积比1∶1混合而得的混合液，打开搅拌加入10克式C所示化合物，待完全溶解后加入6克卤化剂碘，反应30分钟后TLC监测反应完成后，用饱合硫代硫酸钠调反应液至无色。再用100ml乙酸乙酯在搅拌下用1M的盐酸调混合液的pH值至3，分层留油相，最后再用200ml乙酸乙酯分两次萃取水相，合并油相经干燥、旋蒸得式D所示化合物，称重12.5克，产率91％。
3)16，17-位加氢产物式E所示化合物的合成
圆底烧瓶、磁力搅拌。向烧瓶中加入15克式D所示化合物，然后加入40ml酯化剂乙酸酐和10毫克氯化锌(ZnCl2)，在室温下搅拌15小时后，用真空在60℃下将溶剂蒸干，得树脂状物料；再用100ml乙酸乙酯将其溶解后，加入1克铑的质量百分含量为5％的催化剂铑-氧化铝(Rh-Al2O3)(该催化剂的CAS号为7440-16-6)催化剂，通入氢气，室温25℃下搅拌48小时，TLC监测反应完成后，过滤，将清液旋干得固体物料；用50ml甲醇溶解，置于-5℃下用90分钟滴加完4M氢氧化钾100ml，然后通过减压蒸馏蒸除甲醇。再将蒸除后的混合液置于0℃下滴加2M的盐酸至混合液pH值2，将沉淀过滤、清洗、干燥即得本发明提供的式E所示化合物，称重11.5克，产率75％。
该式E所示化合物的结构确认数据如下：LR-MS m/z(relative intensity)： 502([M+]，25)，484(9)，473(20)，457(30)，437(18)，375(5)，372(15)，357(40)，330(28)，329(14).HR-MS calcd.for C21H27IO6([M+])：502.0929；found：502.3424.Anal.calcd.for C21H27IO6(％)：C，50.21；H，5.22；found：C，50.25；H，5.42；.mp 214-216℃。由上可知，该化合物结构正确，为式E所示化合物。
实施例6、制备式E所示化合物
1)化合物GA3脱羟产物式C所示化合物的合成
圆底烧瓶、低温磁力搅拌。向烧瓶中加入80g GA3(即式B所示化合物)和125ml无水EtOH；将圆底烧瓶放入低温磁力搅拌中，开动搅拌，使温度保持在-70℃；向圆底烧瓶中通入液氨，搅拌溶解GA3(即式B所示化合物)，用液氨定容至1000ml；将2克金属锂加入到混合液中，使金属锂完全溶解，保温反应1.5h，TLC监测反应结束，将反应体系慢慢恢复到室温，使溶剂完全挥发；向体系中加入1000ml水，搅拌使样品完全溶解后，滴加稀盐酸(该稀盐酸中，盐酸和水的体积比为1∶2)将体系pH值调到1；过滤、清洗、干燥得到固体，为式C所示化合物，称重：55g，产率：75％。
2)式C所示化合物经卤化后产物式D所示化合物的合成
圆底烧瓶、磁力搅拌。将烧瓶放入冰浴中，向烧瓶中加入250ml由质量百分浓度为5％的碳酸氢钠水溶液(该水溶液中含有碳酸氢钠6.25g)和四氢呋喃以体积比1∶1混合而得的混合液，打开搅拌加入50克式C所示化合物，待完全溶解后加入30克卤化剂碘，反应30分钟后TLC监测反应完成后，用饱合硫代硫酸钠调反应液至无色，再用400ml乙酸乙酯在搅拌下用1M的盐酸调混合液的pH值至3，分层留油相，最后再用200ml乙酸乙酯分两次萃取水相，合并油相经干燥、旋蒸得式D所示化合物，称重67克，产率92％。
3)16，17-位加氢产物式E所示化合物的合成
圆底烧瓶、磁力搅拌。向烧瓶中加入70克式D所示化合物，然后加入270ml酯化剂乙酸酐和40毫克氯化锌(ZnCl2)，在室温下搅拌15小时后，用真空在60℃下将溶剂蒸干，得树脂状物料；再用400ml乙酸乙酯将其溶解后，加入5克铑的质量百分含量为5％的催化剂铑-氧化铝(Rh-Al2O3)(该催化剂的CAS号为7440-16-6)催化剂，通入氢气，室温25℃下搅拌反应60小时，TLC监测反应完成后，过滤，将清液旋干得固体物料；用200ml甲醇溶解，置于-5℃下用90分钟滴加完4M氢氧化钾400ml，然后通过减压蒸馏蒸除甲醇。再将蒸除后的混合液置于0℃下滴加2M的盐酸至混合液pH值2，将沉淀过滤、清洗、干燥即得本发明提供的式E所示化合物，称重50克，产率72％。
该式E所示化合物的结构确认数据如下：LR-MS m/z(relative intensity)：502([M+]，25)，484(9)，473(20)，457(30)，437(18)，375(5)，372(15)，357(40)，330(28)，329(14).HR-MS calcd.for C21H27IO6([M+])：502.0929；found：502.3424.Anal.calcd.for C21H27IO6(％)：C，50.21；H，5.22；found：C，50.25；H，5.42；.mp 214-216℃。由上可知，该化合物结构正确，为式E所示化合物。