作为BROMODOMAIN抑制剂的含磷吲哚衍生物.pdf

本发明公开了一种作为Bromodomain抑制剂的含磷吲哚衍生物，结构如式I所示，式中，X、Y、R1、R2的定义如说明书和权利要求书所述。本发明的含磷吲哚衍生物可用作Bromodomain抑制剂，用于治疗肿瘤、白血病，糖尿病，病毒等其它疾病。。

权利要求书
1.  一种含磷吲哚衍生物及其药学上可接受的盐，其特征在于，所述含磷吲哚衍生物的结构如下式I所示：

式中，
X、Y独立地为N或CH，且X≠Y；
R1、R2独立地为C1-C8直链或支链烷基、C1-C8直链或支链烷氧基、取代的C1-C8直链或支链烷基、取代的C1-C8直链或支链烷氧基、C3-C8环氧烷基、取代的C3-C8环氧烷基、C6-C20芳基、或取代的C6-C20芳基，
其中，各取代是指烷基、烷氧基、环氧烷基或芳基上的H被选自下组的取代基取代：F、Cl、Br、I、C1-C6直链或支链烷基。

2.  如权利要求1所述的含磷吲哚衍生物，其特征在于，R1为C1-C6直链或支链烷基、或C3-C6环氧烷基；R2为C1-C6直链或支链烷基、或C6-C14芳基。

3.  如权利要求1所述的含磷吲哚衍生物，其特征在于，R1为C3-C6环氧烷基；R2为C6-C14芳基。

4.  如权利要求1所述的含磷吲哚衍生物，其特征在于，R1为C1-C6直链或支链烷基；R2为C1-C6直链或支链烷基。

5.  如权利要求1所述的含磷吲哚衍生物，其特征在于，X为N；Y为CH。

6.  如权利要求1所述的含磷吲哚衍生物，其特征在于，R1为C3-C6环氧烷基；R2为苯基。

7.  如权利要求1所述的含磷吲哚衍生物，其特征在于，所述的含磷吲哚衍生物为：


8.  如权利要求1所述的含磷吲哚衍生物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(i)式I化合物与式II化合物反应生成式V化合物；

(ii)式V化合物与式VI化合物反应得到式I化合物所示的权利要求1所述的含磷吲哚衍生物，
各式中，R为F、Cl、Br或I；
X、Y、R1、R2的定义如权利要求1所述。

9.  如权利要求1所述的吲哚衍生物或其药学上可接受的盐的用途，其特征在于，(i)用作bromodomain抑制剂；(ii)用于制备预防和/或治疗肿瘤的药物；(iii)用于制备bromodomain抑制剂；或(iv)用于制备预防和/或治疗白血病，糖尿病或病毒的药物。

10.  一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包含：
(i)权利要求1所述的吲哚衍生物或其药学上可接受的盐；和
(ii)药学上可接受的载体。

说明书作为Bromodomain抑制剂的含磷吲哚衍生物
技术领域
本发明涉及吲哚衍生物，具体涉及一种含磷吲哚衍生物，作为Bromodomain抑制剂。
背景技术
吲哚类化合物是一类较重要的杂环衍生物。吲哚类化合物以其独有的化学结构，对许多激酶具有抑制作用，具有显著的生理活性。
近年来，吲哚类化合物逐步发展成为新药研制开发的优势结构。因此，本领域尚需对吲哚类化合物进一步深入研究，开发新型的吲哚类化合物有效用于治疗肿瘤等疾病。
发明内容
本发明的目的在于提供一种含磷吲哚衍生物及其制备方法和应用。
本发明的第一方面，提供一种含磷吲哚衍生物及其药学上可接受的盐，所述含磷吲哚衍生物的结构如下式I所示：

式中，
X、Y独立地为N或CH，且X≠Y；
R1、R2独立地为C1-C8直链或支链烷基、C1-C8直链或支链烷氧基、取代的C1-C8直链或支链烷基、取代的C1-C8直链或支链烷氧基、C3-C8环氧烷基、取代的C3-C8环氧烷基、C6-C20芳基、或取代的C6-C20芳基，
其中，各取代是指烷基、烷氧基、环氧烷基或芳基上的H被选自下组的取代基取代：F、Cl、Br、I、C1-C6直链或支链烷基。
在另一优选例中，R1为C1-C6直链或支链烷基、或C3-C6环氧烷基；R2为C1-C6直链或支链烷基、或C6-C14芳基。
在另一优选例中，R1为C3-C6环氧烷基；R2为C6-C14芳基。
在另一优选例中，R1为C1-C6直链或支链烷基；R2为C1-C6直链或支链烷基。
在另一优选例中，X为N；Y为CH。
在另一优选例中，R1为C3-C6环氧烷基；R2为苯基。
在另一优选例中，所述的含磷吲哚衍生物为：

本发明的第二方面，提供第一方面所述的含磷吲哚衍生物的制备方法，包括以下步骤：

(i)式I化合物与式II化合物反应生成式V化合物；

(ii)式V化合物与式VI化合物反应得到式I化合物所示的权利要求1所 述的含磷吲哚衍生物，
各式中，R为F、Cl、Br或I；
X、Y、R1、R2的定义如第一方面所述。
本发明的第三方面，提供第一方面所述的吲哚衍生物或其药学上可接受的盐的用途，(i)用作bromodomain抑制剂；(ii)用于制备预防和/或治疗肿瘤的药物；(iii)用于制备bromodomain抑制剂；或(iv)用于制备预防和/或治疗白血病，糖尿病或病毒的药物。
在另一优选例中，所述肿瘤选自：肝癌、肺癌（包括纵隔癌）、口腔上皮癌、鼻咽癌、甲状腺癌、食道癌、淋巴癌、胸腔癌、消化道癌、胰腺癌、肠癌、乳腺癌、卵巢癌、子宫癌、肾癌、胆囊癌、胆管癌、中枢神经癌、睾丸癌、膀胱癌、前列腺癌、皮肤癌、黑色素瘤、肉癌、脑癌、血癌(白血病)、宫颈癌、胶质瘤、胃癌、或腹水瘤。
本发明的第四方面，提供一种药物组合物，所述药物组合物包含：
(i)第一方面所述的吲哚衍生物或其药学上可接受的盐；和
(ii)药学上可接受的载体。
本发明的含磷吲哚衍生物，结构新颖，制备方法简单，可用于预防和/或治疗例如肿瘤，白血病，糖尿病，病毒等疾病，特别是与bromodomain抑制剂有关联的疾病。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
具体实施方式
本申请的发明人经过广泛而深入地研究，首次意外研发出一种新型的结构如式I所示的含磷吲哚衍生物，用作bromodomain抑制剂。在此基础上，完成了本发明。
术语
Bromodomain
布罗莫结构域（英语：bromodomain）是识别如组蛋白N端尾部等位置乙酰化赖氨酸残基的蛋白质结构域。这一识别过程往往是蛋白质-组蛋白相关及染色质重塑的先决条件。该结构域的采取一种全-α蛋白质折叠的形式，由四个α螺旋捆在一起形成。
具体地，bromodomain是一进化上高度保守约110个氨基酸的蛋白质功能结构域，可特异性识别组蛋白末端乙酰化的赖氨酸位点，通过染色质的组装和乙酰化而参与信号依赖性的、非基础性的基因转录调控；bromodomain亦可通过对转录因子等非组蛋白的乙酰化修饰而广泛参与细胞周期调控、细胞分化、信号转导等过程；bromodomain蛋白的改变通过组蛋白乙酰化的失调控参与了白血病等恶性肿瘤的发生；其与肿瘤关系的研究将为肿瘤治疗提供新的策略。
本发明的上下文中，术语“烷基”表示饱和的线性或支链烃部分，例如-CH3或-CH(CH3)2。
本发明的上下文中，术语“烷氧基”表示-O-(C1-8烷基)基团，如-OCH3、-OCH2CH3。
本发明的上下文中，术语“环氧烷基”是指环上包含氧原子的环烷基，如

本发明的上下文中，术语“芳基”表示包含一个或多个芳环的烃基部分。芳基部分的例子包括但不限于苯基(Ph)、萘基、芘基、蒽基和菲基。
除非另外说明，本文所述的烷基、烷氧基、环氧烷基和芳基同时包括取代的和未取代的基团。烷基、烷氧基、环氧烷基和芳基上可能的取代基包括，但不限于：C1-C10烷基、C2-C10烯基、C2-C10炔基、C3-C20环烷基、C3-C20环烯基、C1-C20杂环烷基、C1-C20杂环烯基、C1-C10烷氧基、芳基、杂芳基、杂芳氧基、氨基、C1-C10烷基氨基、C1-C20二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基、C1-C10烷基氨磺酰基、芳基氨磺酰基、C1-C10烷基亚氨基、C1-C10烷基磺基亚氨基、芳基磺基亚氨基、羟基、卤素、巯基、C1-C10烷硫基、C1-C10烷基磺酰基、芳基磺酰基、酰基氨基、氨酰基、氨基硫代酰基、胍基、脲基、氰基、硝基、酰基、硫代酰基、酰氧基、羧基和羧酸酯基。另一方面,环烷基、杂环烷基、杂环烯基、芳基和杂芳基也可互相稠合。
本发明中，取代是指被一个或多个取代基取代。
术语“烯基”表示包含至少一个双键的直链或支链烃基部分，例如-CH=CH-CH3。术语“炔基”表示包含至少一个三键的直链或支链烃基部分，例如-C≡C-CH3。术语“环烷基”表示饱和的环状烃基部分，例如环己基。术语“杂环烷基”表示包含至少一个环杂原子(例如N,O或S)的饱和的环状部分，例如4-四氢吡喃基。术语“杂芳基”表示包含一个或多个具有至少一个杂原子(例如N,O或S)的芳环的部分。杂芳基部分的例子包括呋喃基、芴基、吡咯基、噻吩基、噁唑基、咪唑基、噻唑基、吡啶基、嘧啶基、喹唑啉基、喹啉基、异喹啉基和吲哚基。术语“氨基”表示-NH2、-NH-(C1-6烷基)或-N(C1-6烷基)2。
本发明所述药学上可接受的盐可以是阴离子与式I化合物上带正电荷的基团形成的盐。合适的阴离子包括氯离子、溴离子、碘离子、硫酸根、硝酸根、磷酸根、柠檬酸根、甲基磺酸根、三氟乙酸根、乙酸根、苹果酸根、甲苯磺酸根、酒石酸根、富马酸根、谷氨酸根、葡糖醛酸根、乳酸根、戊二酸根和马来酸根。类似地，可以由阳离子与式I化合物上的带负电荷的基团(例如羧酸根)形成盐。合适的阳离子包括钠离子、钾离子、镁离子、钙离子和铵离子，例如四甲基铵离子。在另一优选例中，“药学上可接受的盐”是指同选自下述酸形成的盐类：氢氟酸、盐酸、氢溴酸、磷酸、乙酸、草酸、硫酸、甲磺酸、水杨酸、三氟甲磺酸、萘磺酸、马来酸、柠檬酸、醋酸、酒石酸、琥珀酸、酢浆草酸、苹果酸、谷氨酸。
含磷吲哚衍生物及其药学上可接受的盐
本发明所述含磷吲哚衍生物和本发明所述吲哚衍生物具有相同的含义，是指具有下式I所示结构的化合物：

式中，
X、Y独立地为N或CH，且X≠Y；
R1、R2独立地为C1-C8直链或支链烷基、C1-C8直链或支链烷氧基、取代的C1-C8直链或支链烷基、取代的C1-C8直链或支链烷氧基、C3-C8环氧烷基、取代的C3-C8环氧烷基、C6-C20芳基、或取代的C6-C20芳基，
其中，各取代是指烷基、烷氧基、氧代环烷基或芳基上的H被选自下组的取代基取代：F、Cl、Br、I、C1-C6直链或支链烷基。
在另一优选例中，所述各取代是指被一个或多个取代基取代。
在另一优选例中，所述各取代是指被2-6个取代基取代。
在另一优选例中，R1为C1-C6直链或支链烷基、或C3-C6环氧烷基；R2为C1-C6直链或支链烷基、或C6-C14芳基。
在另一优选例中，R1为C3-C6环氧烷基；R2为C6-C14芳基。
在另一优选例中，R1为C1-C6直链或支链烷基；R2为C1-C6直链或支链烷基。
在另一优选例中，X为N；Y为CH。
在另一优选例中，R1为C3-C6环氧烷基；R2为苯基。
在另一优选例中，所述的含磷吲哚衍生物为：

在另一优选例中，所述药学上可接受的盐选自：氢氟酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、磷酸盐、甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐、苯磺酸盐、萘磺酸盐、乙酸盐、三氟乙酸盐、苹果酸盐、草酸盐、马来酸盐、水杨酸盐。
制备方法
本发明的制备方法包括以下步骤：

(i)式I化合物与式II化合物反应生成式V化合物；

(ii)式V化合物与式VI化合物反应得到式I化合物所示的权利要求1所述的含磷吲哚衍生物，
各式中，R为F、Cl、Br或I；
X、Y、R1、R2的定义如前所述。
在另一优选例中，所述式VI化合物为
在另一优选例中，所述式VI化合物为
在另一优选例中，各式中，X为N；Y为CH。
在另一优选例中，R为Br、X为N、Y为CH，采用如下路线制备式V化合物。

在另一优选例中，采用如下路线制备式I化合物：

用途
本发明的吲哚衍生物或其药学上可接受的盐，可以(i)用作bromodomain抑制剂；(ii)用于制备预防和/或治疗肿瘤的药物；(iii)用于制备bromodomain抑制剂；或(iv)用于制备预防和/或治疗白血病，糖尿病或病毒的药物。
在另一优选例中，所述肿瘤选自：肺癌,白血病等疾病。
药物组合物
本发明提供包含本发明的吲哚衍生物或其药学上可接受的盐和药学上可接受的载体的药物组合物。
在另一优选例中，所述组合物中含有重量比为0.01％-99.95％的吲哚衍生物或其药学上可接受的盐作为活性成分。
该药物组合物优选含有重量比为0.1％-99.9％的吲哚衍生物或其药学上可接受的盐作为活性成分，较佳地，含有重量比为0.1％-99.5％的吲哚衍生物或其药学上可接受的盐作为活性成分，更优选含有重量比为0.5％-95％的活性成分。
该药物组合物，含有治疗有效量的本发明吲哚衍生物或其药学上可接受的盐，可作为一种高效、高选择性的预防和/或治疗肿瘤的药物，尤其是与bromodomain抑制剂有关联的疾病。
“药学上可接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的活性成分以及它们之间相互掺和，而不明显降低活性成分的药效。药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如吐温)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。
可将本发明吲哚衍生物或其药学上可接受的盐与可药用赋形剂、稀释剂等药学上可接受的载体的混合物以片剂、胶囊、颗粒剂、散剂或糖浆剂的形式口服给药或以注射剂的形式非口服给药。上述制剂可通过常规制药方法制备。可用的药学上可接受的载体的例子包括赋形剂(例如糖类衍生物如乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇和山梨糖醇；淀粉衍生物如玉米淀粉、土豆淀粉、糊精和羧甲基淀粉；纤维素衍生物如结晶纤维素、羟丙基纤维素、羧甲基纤维素、羧甲基纤维素钙、羧甲基纤维素钠；阿拉伯胶；右旋糖酐；硅酸盐衍生物如偏硅酸镁铝；磷酸盐衍生物如磷酸钙；碳酸盐衍生物如碳酸钙；硫酸盐衍生物如硫酸钙等)、粘合剂(例如明胶、聚乙烯吡咯烷酮和聚乙二醇)、崩解剂(例如纤维素衍生物如羧甲基纤维素钠、聚乙烯吡咯烷酮)、润滑剂(例如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、鲸蜡、硼酸、苯甲酸钠、亮氨酸)、稳定剂(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯等)、矫味剂(例如常用的甜味剂、酸味剂和香料等)、稀释剂和注射液用溶剂(例如水、乙醇和甘油等)。
使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明吲哚衍生物或其药学上可接 受的盐施用于哺乳动物，“安全有效量”指的是：活性成分的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。其中该安全有效量通常至少约1微克/天，而且在大多数情况下不超过约10毫克/千克体重。较佳地，该剂量是约1微克/天-约3毫克/千克体重。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是在熟练医师技能范围之内的。通常，药物组合物含有1-2000mg活性成分/剂，更佳地，含有10-200mg活性成分/剂。较佳地，所述的“一剂”为一个药片。
此外，本发明吲哚衍生物或其药学上可接受的盐可以单药使用，也可以与其它药物联合使用。优选的联合使用包括：与外科手术联合使用，与一种或多种西药联合使用，与中草药联合使用，与放射性治疗联合使用。
本发明的药物组合物的给药途径没有特别限制，其中包括但并不限于：口服给药，注射给药，瘤内给药，植入给药，腔内给药，肛门给药，透皮给药，内外敷；优选的注射给药包括：静脉注射，肌肉注射，皮下注射，腔内注射、瘤内给药。
本发明提到的上述特征，或实施例提到的特征可以任意组合。本案说明书所揭示的所有特征可与任何组合物形式并用，说明书中所揭示的各个特征，可以被任何提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。因此除有特别说明，所揭示的特征仅为均等或相似特征的一般性例子。
本发明的有益之处在于：
(1)本发明提供了一种新型结构的含磷吲哚衍生物；
(2)本发明的含磷吲哚衍生物可作为bromodomain抑制剂。
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press,1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟 悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
实施例1

将1-溴4-碘苯（1.0eq），二甲基氧膦（1.0eq），四（三苯膦）合钯（0.01eq），三乙胺（10eq）溶解于乙腈中。此溶液去氧三次后，在氮气环境下加热回流过夜，浓缩后层析分离（MeOH/DCM0-20％）得产物（42％）。

将上述得到的产物，4-溴苯基-二甲基氧膦（1.0eq），双（频哪醇）二硼（2.0eq），KOAc（5eq），PdCl2(pddf)CH2Cl2（0.1eq）溶解在1，4-二恶烷中。此溶液去氧三次后，在氮气环境下90度搅拌过夜。冷却后，过滤，减压浓缩后得粗品直接用于下一步反应。

将2，5-二溴-3-硝基吡啶（1.0eq），上述中间体反应混合物（1.3eq），磷酸三钾溶液（2M,3eq），PdCl2(pddf)CH2Cl2(0.1eq)溶于THF中。此溶液去氧三次后，在氮气环境下70度搅拌4小时.冷却后，用NaHCO3饱和液淬灭反应，EtOAc萃取，减压浓缩后得粗品，层析分离（EtOAc/Hexane30-50％）得产物A（38％）。

将产物A（1.0eq），Ph3P（2.5eq）溶解在1，2-二氯苯中。在氮气环境下170度搅拌2小时.冷却后，减压浓缩后得粗品，层析分离（EtOAc/Hexane30-50％）得产物B（32％）。

将产物B（1.0eq），1，4-二甲基-5-（三丁基锡烷基）-1H-1，2，3-三唑（1.0eq），三乙胺（4eq），碘化铜（I）（0.1eq），Tetrakis(0.05eq)溶解在DMF中。此溶液去氧三次后，在氮气环境下100度搅拌2小时.冷却后，用NaHCO3饱和液淬灭反应，EtOAc萃取，减压浓缩后得粗品，层析分离（MeOH/DCM0-10％）得产物C（36％）。

将中间体D（1.0eq）溶解在甲醇中，冷却到0度后，固体硼氢化钠（1.5eq）缓慢地加入到搅拌中的反应液中，然后再在0度搅拌2小时.用水液淬灭反应后，用HCl（1.0N）将溶液调到pH4。CH2Cl2萃取，减压浓缩后得粗品E。

将C(1.0eq)和E（1.5eq）溶于THF中，冷却到0度后。Ph3P（2eq）和DIAD（2eq）加入到反应液中。搅拌此混浑溶液过夜。用NaHCO3饱和液淬灭反应，EtOAc萃取，减压浓缩后得粗品，层析分离（MeOH/DCM0-20％）得产物（43％）。
实施例2

将C(1.0eq)和F（2eq）溶于THF中，冷却到0度后。PPh3（2eq）和DIAD（2eq）加入到反应液中。搅拌此混浑溶液过夜。用NaHCO3饱和液淬灭反应，EtOAc萃取，减压浓缩后得粗品，层析分离（MeOH/DCM0-20％）得产物（56％）。
经常规方法检测，实施例1和实施例2制备的含磷吲哚衍生物，可以用于治疗肿瘤以及其它疾病，例如肿瘤，白血病，糖尿病，病毒，特别是与bromodomain抑制剂有关联的疾病。
在一检测试验中，实施例制备的吲哚衍生物可用于抑制肝癌、肺癌、淋巴癌、乳腺癌、卵巢癌、胃癌等肿瘤细胞的生长，可用作bromodomain抑制剂，且具有高药效性、高选择性，表明可用于预防和/或治疗肿瘤。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。