具有1E，6E1，7双3，4二甲氧基苯基4，4二取代的庚1，6二烯3，5二酮结构骨架的化合物、它们的生物活性及其用途.pdf

本发明包括具有至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物、药物和化妆品。本发明的化合物和组合物在治疗或预防下列医疗状况中有用，包括雄性激素相关状况、雄性激素相关炎症、创伤(帮助创伤愈合的化合物)、痤疮、类风湿性关节炎、牛皮癣、红斑痤疮和脱发；肯尼迪病(脊髓和延髓肌萎缩或SBMA)、多谷氨酰胺介导的运动神经元退化；癌症诸如前列腺癌、膀胱癌、乳腺癌、卵巢癌、肝细胞(肝)癌和胰腺癌；和本文描述的其他医疗状况。治疗这种医疗状况包括施用治疗上有效量的任何公开的化合物、它们的衍生物或其药物组合物到患有本文描述的医疗状况的个体。

1.  用于治疗患有雄性激素受体相关的医疗状况的对象的药物组合物，其包括：
根据式VI和式VII的化合物：

其中R₁和R₂是单-或二-取代的基团，诸如甲氧基(-OCH₃)、羟基(-OH)或烷基磺酰基如-OSO₂C₂H₅；R₁和R₂可以相同或不同；
当Z不存在时L是羰基、亚烷基、亚烯基或炔基；
Z是-H、-OH、取代的苯乙烯基、芳族环、环烷基、-COR₃、-CONR₃R₄或-CX₃，其中R₃和R₄各自是-c或杂环或杂芳基部分，或R₃和R₄一起形成杂环，诸如吗啉；或当Y不是H时，Z是COOR，其中R是-H、-CH₃、-C_nH_2n+1(n＝2-4)或环烷基；
X是-F、-Cl或-Br；
当L是亚烷基诸如-CH₂和Z是-CONR₃R₄、R₃和R₄各自是-H和杂环或杂芳基或环烷基如环戊基时，Y是H；或Y是短烷基(C1-3)，诸如甲基(-CH₃)，或-F、Cl、Br，
进一步其中所述药物组合物治疗患有所述雄性激素受体相关的医疗状况的所述对象。

2.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是正常的或异常的雄性激素受体诱导、引起或介导的雄性激素受体相关的医疗状况。

3.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是炎症。

4.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是痤疮。

5.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是脱发。

6.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是多毛症。

7.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是创伤。

8.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是脊髓和延髓肌萎缩(SBMA，肯尼迪病)。

9.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是癌症。

10.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是前列腺癌。

11.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是膀胱癌。

12.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是肝癌。

13.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是乳腺癌。

14.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是胰腺癌。

15.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是卵巢癌。

16.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中根据式VI的所述化合物包括药学上可接受的载体。

17.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述对象是人类。

18.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述对象是非人类。

19.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述对象是患者。

20.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是不需要的免疫应答。

21.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述雄性激素受体相关的医疗状况是免疫紊乱。

22.  根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述药物组合物以治疗上有效的量被提供。

23.  用于治疗患有雄性激素受体相关的医疗状况的对象的药物组合物，其包括：
根据式VIII的化合物：

其中：
R₁和R₂是单-或二-取代的基团，诸如甲氧基(-OCH₃)、羟基(-OH)或烷基磺酰基，诸如-OSO₂C₂H₅；R₁和R₂可以相同或不同；
R₃选自
以及
R₄选自CH₃、H、F和Cl；
n是1或2；以及
进一步其中所述药物组合物治疗患有所述雄性激素受体相关的医疗状况的所述对象。

24.  治疗患有雄性激素受体相关的医疗状况的对象的方法，其包括：
a)提供对象；和
b)将治疗上有效的量的根据权利要求1所述的化合物施用至所述患者。

25.  治疗患有雄性激素受体相关的医疗状况的对象的方法，其包括：
a.提供对象；和
b.将治疗上有效的量的根据权利要求23所述的化合物施用至所述患者。

具有(1E,6E)-1,7-双-(3,4-二甲氧基苯基)-4,4-二取代的庚-1,6-二烯-3,5-二酮结构骨架的化合物、它们的生物活性及其用途
相关申请的交叉引用
本申请要求2012年6月18日提交的标题为“Compounds with(Substituted Phenyl)-Propenal Moiety，Their Derivatives，Biological Activity，and Use Thereof(具有(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物、它们的衍生物、其生物活性和用途)”的美国专利申请序列号13/525,941的优先权益处，其通过引用被并入本文。通过引用也被并入本文的是：2008年1月8日提交的标题为“Compounds with(Substituted Phenyl)-Propenal Moiety，Their Derivatives，Biological Activity，and Use Thereof(具有(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物、它们的衍生物、其生物活性和用途)”的美国专利申请序列号12/008,124；2010年5月11日提交的标题为“Compounds with(Substituted Phenyl)-Propenal Moiety，Their Derivatives，Biological Activity，and Use Thereof(具有(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物、它们的衍生物、其生物活性和用途)”的美国专利申请序列号12/800,251；2007年1月8日提交的标题为“Compounds with (Substituted Phenyl)-Propenal Moiety，Their Derivatives，Biological Activity，and Use Thereof(具有(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物、它们的衍生物、其生物活性和用途)”的美国专利申请序列号60/879,458，其每个通过引用以其全部并入本文。
技术领域
本发明涉及具有生物活性的化合物和其药物制剂和化妆品制剂、它们的衍生物和使用方法，更具体地本发明包括具有至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物和它们的生物活性及其用途。本发明还涉及具 有(1E，6E)-1，7-双-(3，4-二甲氧基苯基)-4，4-二取代的庚-1，6-二烯-3，5-二酮结构骨架的化合物和它们的生物活性及其用途。
发明背景
众所周知，某些天然产物可能具有治疗作用，其已经引起它们在治疗和预防跨越许多文化的人类疾病中的用途(例如，中草药和许多其他民间医药)。这种治疗的有效性已经引领制药工业从这些天然产物寻找和分离活性化合物和开发活性成分作为治疗或预防药物用于治疗和预防各种疾病或医疗状况。因此许多常用药物已经从天然产物开发或产生。其中包括阿司匹林(乙酰水杨酸)，其从柳树的树皮中分离；麻黄碱和伪麻黄碱，其从中草药麻黄中分离；和盘尼西林，其从菌类(产黄青霉(Pennicillium chrysogenum))中分离。然而，从天然产物分离出的化合物已知在它的天然宿主中发挥一定的生理功能(一种或多种)；但是对于人类疾病它们的治疗作用不显而易见。在历史上，这种疗法的治疗仅仅由人类中积累的经验或“尝试与失败法(trial and error)”而来。此外，因为这种化合物最初不是形成用于人类，所以处于它们的天然形式的化合物对治疗人类疾病在结构以及治疗效果方面均不是最佳形式。然而，现今的现代化学技术，包括分析和合成化学，连同医药生物学中的进展，已经使人们可能分解化学结构并发现化合物诸如从天然产物中分离出来的化合物中的“药效团”(治疗活性必不可少的核心结构)；而且，这些新的技术允许人们基于具有最佳或甚至更好的治疗效果的药效团的结构合成新的化合物。
在本发明中我们已经证明具有单一(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-丙烯醛部分的化合物具有通过增强雄性激素受体(AR)蛋白的降解能减小其表达的活性。此发现部分起因于我们对化合物ASC-J9(1，7-双-(3，4-二甲氧基-苯基)-5-羟基-庚-1，4，6-三烯-3-酮)的大量研究，其是天然化合物姜黄素(作为姜黄植物中的主要颜料存在)的二甲基化形式。化合物姜黄素和许多它的类似物已经被报道具有许多体外生物活性，诸如，抗氧化、抗炎、抗肿瘤和抗血管生成(antiangiogenesis)活性；但是姜黄素和它的类似物均没有被开发成治疗人类疾病的治疗药物。这表明以其天然 形式的姜黄素可能不是用于开发成治疗药物的最佳分子。
先前我们已经发现化合物ASC-J9和ASC-J15(5-羟基-7-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-4-[3-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-丙烯酰]-庚-4，6-二烯酸乙酯)(图1)二者均具有强力的前列腺癌抑制活性和抗雄性激素活性。我们已有的这两种化合物也显示比目前的治疗药物羟基氟他胺(HF)——一类广泛用于治疗人类前列腺癌的“非甾体抗雄性激素”药物——更强力的抗前列腺癌活性。
在大量进一步研究ASC-J9和ASC-J15的结构和生物活性后，我们惊奇地发现这两种化合物共有的(取代苯基)-丙烯醛部分实际上是贡献这两种化合物的强力的抗雄性激素/AR活性的核心结构，而不是整个类姜黄素结构。部分基于此发现，我们已经通过化学合成生成许多新的化合物，包括具有一个、两个、三个或四个(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物，以进一步支持(取代苯基)-丙烯醛部分是这些化合物的药效团的观念。我们的研究的结果能够显示，增加化合物结构内这些部分的数量可以改变或可以增加化合物的抗雄性激素/AR活性。我们在本文中也证明了在具有单一(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物内抗雄性激素活性是存在的。本发明人也分析了基于具有至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的我们的新化合物的新衍生物，以不仅阐明药效团结构而且评估抗雄性激素和抗癌活性。本发明人在此提供的新的化合物还显示生物活性、生物利用率、水溶性和开发治疗药物必需的其他标准的显著改善和优化。
发明内容
本发明提供具有至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的生物活性化合物。因此本发明的目的是提供具有至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物用作医疗状况诸如人类医疗状况的治疗。
在本发明的一个方面，提供了具有至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物，该化合物具有根据式I的式：

其中1)R₃和R₄各自独立地选自烷氧基、羟基和氢；和2)X选自羟基、烷氧基、丙酸乙酯、碳酸甲乙酯和羰基烷基(carbonyl alkyl)。在一些实施方式中，化合物具有选自单体1、3、5、6和7的式。提供这些单体如下：
单体：

在本发明的另一方面，提供了包括具有根据(IIa)或(IIb)的式的(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物：

其中：1)R₃、R₄、R₃’和R₄’独立地选自-H、-OH和-OCH₃；2)当Z不存在时，L是C0-C8亚烷基，或者L是不饱和亚烯基(alkenylene)或炔基；3)Z选自-H、-OH、芳族环、环烷基、-COR₁、-CO₂R₁、-CONR₁R₂、-NR₁R₂、-CX₃，其中R₁和R₂独立地选自-H、-CH₃和-C₂H₅；和4)X是选自-F、-Cl和-Br的卤原子。式IIa和IIb是作为二酮的常见现象的平衡互变异构体(见，例如图9)。在一些实施方式中，化合物选自II-1、II-2、II-3、II-4和II-5。提供式为：

在本发明的另一方面，提供根据式IIc的化合物：

其中1)R₃、R₄、R₃’和R₄’独立地选自-H、-OH和-OCH₃；和2)R₁和R₂独立地选自-H、-CH₃、-C₂H₅、取代芳基和取代苄基。
在本发明的另一方面，提供根据式III的化合物：

其中R₃、R₄、R₃’、R₄’、R₃”和R₄”各自独立地选自烷氧基、羟基和氢。在一些实施方式中，化合物包括式III-1或III-2，其提供为：

在本发明的另一方面，提供根据式IV的化合物：

其中R₃、R₄、R_3，、R_4，R_3”、R_4”、R_3”’和R_4”’各自独立地选自烷氧基、羟基和氢。在一些实施方式中，化合物包括式IV-1：

在本发明的另一方面，提供根据式V的化合物：

其中1)每一个“n”独立地是1、2或3；2)R₃、R₄、4₃’和R₄’独立地选自-H、-OH和-OCH₃；3)L-Z侧链可以不存在，但是如果L-Z侧链存在，当Z不存在时，L是C0-C8亚烷基或不饱和亚烯基或炔基；4)Z选自-H、-OH、芳族环、环烷基、-COR₁、-CO₂R₁、-CONR₁R₂、-NR₁R₂、-CX₃；5)R₁和R₂独立地选自-H、-CH₃和-C₂H₅；和6)X是选自-F、-Cl和-Br的卤原子。在一些实施方式中，提供根据式V-1或V-2的化合物：

本发明还提供了具有4，4-二取代的1，7-双-(3，4-二甲氧基苯基)-庚-1，6-二烯-3，5-二酮的结构骨架的生物活性化合物。因此，本发明的一个目的是提供在1，7-双-(3，4-二甲氧基苯基)-庚-1，6-二烯-3，5-二酮结构的C4位置具有两个恰当的取代基(substation)的化合物，用作治疗医疗状况，诸如但不限于人类医疗状况。
在本发明的一个方面，提供了具有4，4-二取代的1，7-双-(3，4-二甲氧基苯基)-庚-1，6-二烯-3，5-二酮结构骨架的化合物，具有根据式VI的式的化合物，或具有如根据式VII的式的结构骨架6，6-二取代的1，11-双(取代苯基)-十一-1，3，8，10-四烯-5，7-二酮的化合物：

其中R₁和R₂是单-或二-取代的基团，诸如甲氧基(-OCH₃)、羟基(-OH)、或烷基磺酰基，诸如-OSO₂C₂H₅；R₁和R₂可以是相同的或不同的；
当Z不存在时L是羰基、亚烷基、亚烯基或炔基；
Z是-H、-OH、取代的苯乙烯基、芳族环、环烷基、-COR₃、-CONR₃R₄、或-CX₃，其中R₃和R₄各自是-H、-CH₃或-C_nH_2n+1，(n＝2-4)或杂环或杂芳基部分，或R₃和R₄一起形成杂环，诸如吗啉(morphorine)；或当Y不是H时，Z是COOR，其中R是-H、-CH₃、 -C_nH_2n+1(n＝2-4)或环烷基；
X是-F、-Cl或-Br；
当L是亚烷基诸如-CH₂时，Y是H，和Z是-CONR₃R₄，R₃和R₄各自是-H和杂环或杂芳基，或环烷基，诸如环戊基；或Y是短烷基(C1-3)诸如甲基(-CH₃)或-F、Cl、Br。
在本发明的另一方面，化合物选自C4-R₃R₄。式提供为：

R₁、R₂、R₃或R₄代表如在图10中列出的一系列官能团。
在本发明的另一方面，公开了药物制剂或化妆品制剂，其包括如本申请中提供的并且具有期望的生物活性的包含至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物。该药物制剂或化妆品制剂可以提供本发明的化合物和药学上可接受的载体或化妆品可接受的载体。在各种非限制性实施方式中，化合物可以单独或组合地包括单体1、3、5、6或7。在进一步实施方式中，化合物包括根据式I、II、III、IV、V或其组合的式。因此化合物可以包括至少一个、两个、三个、四个、五个或更多(取代苯基)-丙烯醛部分。
在本发明的另一方面，公开了药物制剂或化妆品制剂，其包括如本申请提供的并且具有期望的生物活性的具有4，4-二取代的1，7-双-(取代苯基)-庚-1，6-二烯-3，5-二酮或6，6-二取代的1，11-双(取代苯基)-十一-1，3，8，10-四烯-5，7-二酮结构的化合物。该药物制剂或化妆品制剂可提供本发明的化合物和药学上可接受的载体或化妆品可接受的载体。在各种非限制性实例中，化合物包括根据式VI或式VII或式VIII或其组合的式。
在本发明的另一方面，公开了治疗医疗状况的方法，其包括将具有期望的或怀疑具有期望的生物活性的包括至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物施用到需要其的个体。化合物可以是任何本文公开的 单独或组合的化合物。本发明的化合物可以用于治疗、预防或改善来自雄性激素相关障碍的症状。可以用公开的化合物治疗的医疗状况的非限制性实例是雄性激素相关炎症，其包括创伤(化合物帮助创伤愈合)、痤疮、类风湿性关节炎、牛皮癣、红斑痤疮和脱发；肯尼迪病(脊髓和延髓肌萎缩或SBMA)、多谷氨酰胺介导的运动神经元退化；癌症诸如前列腺癌、膀胱癌、乳腺癌、卵巢癌、肝细胞(肝)癌和胰腺癌；和本文描述的其他医疗状况。治疗这种医疗状况包括对患有本文描述的医疗状况的个体施用治疗上有效量的任何公开的化合物、它们的衍生物或其药物组合物。
在本发明的另一方面，公开了治疗医疗状况的方法，其包括将具有期望的生物活性的包含4，4-二取代的1，7-双-(3，4-取代苯基)-庚-1，6-二烯-3，5-二酮或6，6-二取代的1，11-双(取代苯基)-十一-1，3，8，10-四烯-5，7-二酮结构骨架的化合物施用到需要其的个体。化合物可以是任何本文公开的单独或组合的化合物。本发明的化合物可以用于治疗、预防或改善来自雄性激素和雄性激素受体(AR)相关障碍的症状。可以用公开的化合物治疗的医疗状况的非限制性实例是雄性激素相关炎症，其包括创伤(化合物帮助创伤愈合)、痤疮、类风湿性关节炎、牛皮癣、红斑痤疮和脱发；肯尼迪病(脊髓和延髓肌萎缩或SBMA)、多谷氨酰胺介导的运动神经元退化；癌症诸如前列腺癌、膀胱癌、乳腺癌、卵巢癌、肝细胞(肝)癌和胰腺癌；和本文描述的其他医疗状况。治疗这种医疗状况包括对患有包括但不限于本文描述的医疗状况的个体施用治疗上有效量的任何公开的化合物、它们的衍生物或其药物组合物。
附图简述
图1描述了化合物ASC-J9(1，7-双-(3，4-二甲氧基-苯基)-5-羟基-庚-1，4，6-三烯-3-酮)和ASC-J15(5-羟基-7-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-4-[3-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-丙烯酰]-庚-4，6-二烯酸乙酯)的结构示意图，其之前显示具有抗雄性激素活性。
图2A、图2B、图2C、图2D、图2E和图2F描绘了表，其包含本发明包含的包括至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的新合成化合物的非限制性清单，其具有它们的结构、化学式和分子量。
图3描绘了蛋白质印迹密度数据的表，其示出了具有不同数量的(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-丙烯醛部分的化合物能够减少人类前列腺癌CWR22Rv1细胞中雄性激素受体(AR)的表达。
图4描绘了蛋白质印迹图像，其示出了具有至少一个(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-丙烯醛部分的新提供的化合物能够减少人类前列腺癌CWR22Rv1细胞中雄性激素受体(AR)蛋白的表达。
图5描绘了一个表，其示出了一些选择的ASC化合物和单体能够抑制体外DHT刺激的人类前列腺癌细胞(LNCaP和CWR22Rv1)的增殖。
图6描绘了蛋白质印迹数据，其示出以各种浓度的四种化合物ASC-Q49、ASC-Q103、ASC-JM12和ASC-JM4能够减少LNCaP和CWR22Rv1人类前列腺癌细胞中内源性AR的表达。
图7描绘了蛋白质印迹数据，其示出在蛋白质合成抑制剂环己酰亚胺(CHX)存在下化合物ASC-J9和ASC-JM5提高了在LNCaP细胞中测试的AR蛋白质降解。
图8描绘了两个表(8a和8b)，其概括了在LNCaP和CWR22Rv1人类前列腺癌细胞中测试时以各种浓度的代表性ASC化合物在减少内源性AR蛋白表达(使用蛋白质印迹分析)的效能。
图9描绘了作为具有抗雄性激素和抗AR活性的烯醇酮和二酮互变异构体的平衡的化合物ASC-JM17和ASC-Q49的结构示意图。
图10A和图10B描绘了一个表，其包含本发明包含的包括4，4-二取代的1，7-双-(取代苯基)-庚-1，6-二烯-3，5-二酮和6，6-二取代的1，11-双(取代苯基)-十一-1，3，8，10-四烯-5，7-二酮骨架的化合物的非限制性清单，其具有它们的结构、化学式和分子量。
图11A、图11B和图11C：描绘了来自HPLC分析的ASC-Q49二酮互变异构体峰(图11A，RT 20.6分钟)、烯醇互变异构体峰(图11B，RT 23.7分钟)和化合物6(图11C，RT 21.1分钟)的UV光谱。
详述
A.定义
除非另有限定，本文使用的所有技术和科学术语具有与本发明所属领域的技术人员通常理解的相同的含义。提及的所有专利、申请、公开的申请和其他出版物以其全部通过引用并入，包括公开的结构、式、使用方法、处理方法和生产方法。如果本文对一个术语存在多个定义，除非另有说明，以此部分的那些定义为准。
如本文所用，术语“(取代苯基)-丙烯醛部分”指的是包括连接有丙烯醛部分(当m等于1时)和烷氧基或羟基部分、或烷基或取代烷基部分的苯基的组分。如本文所用，取代可以位于关于丙烯醛部分的间或对或邻位，并且指的是通式其中n可以是1、2、3、或4的任意数字；并且m可以是1、2、3、4或更大的任意数字。
如本文所用，术语“烷基”指的是直链或支链烃链基，其仅由碳和氢原子组成，不含不饱和度，具有从一到十个碳原子，并且其通过单键连接到分子的其余部分，例如甲基、乙基、正丙基、1-甲基乙基(异丙基)、正丁基、正戊基、1，1-二甲基乙基(叔丁基)等等。
如本文所用，术语“烯基”指的是直链或支链烃链基，其仅由碳和氢原子组成，含有至少一个双键，具有从二到十个碳原子，并且其通过单键或双键连接到分子的其余部分，例如乙烯基、丙-1-烯基、戊-1-烯基、戊-1，4-二烯基等等。
如本文所用，术语“亚烯基”指的是含有碳碳双键并由式C_nH2_n-2表示的直链或支链烃链，其中氢可以被额外的碳碳双键或一价取代基取代，例如亚乙烯基、亚丙-1-烯基等等。
如本文所用，术语“烷氧基”指的是具有式-OR的基，其中R是烷基、卤烷基或环烷基。“任选取代的烷氧基”指的是具有式-OR的基，其中R是本文所述的任选取代的烷基。
如本文所用，术语“炔基”指的是仅由碳和氢原子组成的直链或支链烃链基，其含有至少一个叁键，具有从二到十个碳原子，并且其 通过单键或叁键连接到分子的其余部分，例如乙炔基、丙-1-炔基、丁-1-炔基、戊-1-炔基、戊-3-炔基等等。
如本文所用术语“芳基”指的是碳环系统的基，其中至少一个环是芳族的。芳基可以是完全芳族的或可以含有与非芳族环结合的芳族环。“联芳系统”是包括至少两个芳基的化合物。
如本文所用，术语“环烷基”指的是仅由碳和氢原子组成的稳定的一价单环或二环烃基，其具有从三到十个碳原子，并且其是饱和的并且通过单键连接到分子的其余部分，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基等等。
如本文所用，术语“二酮桥”或“酮-烯醇桥”分别指的是包括位于紧邻酮的两个酮或烯醇的直链或支链烃链。“二酮桥”或“酮-烯醇桥”位于至少两个芳基部分之间。
如本文所用，术语“羟基烷基”指的是具有从一到十个碳原子的直链或支链的羟基取代的烃链基，例如-CH₂OH、-(CH₂)₂OH等等。
如本文所用，术语“雄性激素”指的是雄性的激素，诸如睾酮和二氢睾酮(DHT)。DHT是通过5-α-还原酶的睾酮的转化产物。雄性激素通过结合到雄性激素受体刺激或控制脊椎动物中雄性特征和其他生理功能的发育和维持，雄性激素受体又结合到雄性激素/AR-受控基因(DNA)并激活或调解该基因。
如本文所用，术语“雄性激素受体”或“AR”指的是特异性地结合雄性激素——包括睾酮和DHT——的细胞内受体。AR包括雄性激素受体的所有哺乳类亚型、剪接变体和多态现象。
如本文所用，术语“雌性激素受体”或“ER”’或“ER家族”指的是特定于雌二醇(主要内源性雌性激素)的细胞内受体。当结合至激素时，其作为转录因子(其调解DNA的读取和蛋白质的产生)。ER包括ERα和ERβ。ER包括核受体的所有哺乳类亚型、剪接变体和多态现象。
如本文所用，术语“糖皮质激素受体”或“GR”指的是对皮质醇和其他糖皮质激素具有高亲和性的细胞内受体。GR包括核受体的所有哺乳类亚型、剪接变体和多态现象。
如本文所用，术语“孕酮受体”或“PR”指的是特异性地结合孕酮的细胞内类固醇受体。PR包括核受体的所有哺乳类亚型、剪接变体 和多态现象。
如本文所用，术语“过氧化物增殖物激活受体”或“PPAR”指的是PPAR的所有同种型，包括PPARα、PPARβ和PPARγ。PPAR通过结合到基因的启动子中的特定核苷酸序列增加靶基因的转录。当结合至它的脂肪酸配体时，PPARα与类视黄醇X受体(RXR)形成二聚体复合物以调节转录。PPARγ由前列腺素和白细胞三烯激活并调节和涉及存储脂肪酸的蛋白质的基因表达。PPARβ由脂肪酸、前列腺素和白细胞三烯微弱地激活。它的生理学配体还没有被识别。
如本文所用，术语“视黄酸受体”或“RAR”指的是已知结合许多类视黄醇形式的细胞内受体。“RAR”包括所有家庭成员，其包括RARα、RARβ和RARγ。“RAR”包括核受体的所有哺乳类亚型、剪接变体和多态现象。
如本文所用，术语“类视黄醇X受体”或“RXR”指的是特异性地结合9-顺-视黄酸的细胞内受体。“RXR”包括核受体的所有哺乳类亚型、剪接变体和多态现象。
如本文所用，术语“类固醇受体”或“类固醇核受体”指的是在类固醇激素的调节下结合至并调节DNA的转录的细胞内受体。不同激素的受体具有强的结构和功能相似性，其指从共同的祖先基因进化并且因此被认为是基因超家族。属于此基因超家族的代表性的受体包括由类固醇激素雌二醇(ER)、糖皮质激素(GR)、雄性激素(AR)、孕酮(PR)、盐皮质素(MR)、非类固醇激素三碘甲腺原氨酸(T3R)和二羟基维生素D3(VDR)和两类类视黄醇(全反式视黄酸和9-顺式视黄酸)受体(分别是RAR和RXR)控制的DNA结合和调节蛋白。编码具有不同DNA特异性、调控或激素亲和性的至少75种蛋白质的超过32种基因已经被识别为此基因超家族的一部分。此超家族的新成员正被频繁报道，并且意欲通过引用以其全部并入本文，如在同行综述的科学文献中出版的或如在序列数据库诸如GenBank——无论是DNA、RNA或多肽序列——和SWISSPROT中提供的。使用新的生物技术，分子生物学家和生物化学家已经识别出配体还没有被识别的蛋白质受体，因此产生一类“孤儿受体”。“类固醇受体”包括所有哺乳动物的剪接变体和类固醇受体的亚型。
如本文所用术语“缓释(extended release)”指的是提供延迟的、在一段时间期间内缓慢的、连续的、不连续或持久的释放化合物或组合物的剂型。
如本文所用，术语“药学上可接受的”指的是被联邦或州政府的管理机构批准或可批准用于动物和更具体地人类。术语“药学上可接受的载体”指的是批准的或可批准的稀释剂、佐剂、赋形剂或使用其施用化合物的载体。
如本文所用，术语“前体药物”指的是体内施药后，通过一个或多个步骤或过程代谢或以其他方式转化为化合物的生物学上、药学上或治疗上活性形式的化合物。为了产生前体药物，改性药学活性化合物使得活性化合物将通过代谢过程再生。前体药物可以被设计为改变药物的代谢稳定性或运输特征、掩蔽副作用或毒性、改进药物味道或改变药物的其他特征和性能。在一些但不是所有情况中，前体药物包括易解离的酯，其解离后释放活性形式。
术语“治疗上有效量”指的是当被施用到患者用于治疗疾病或障碍时足以影响对疾病或障碍的这种治疗的化合物的量。“治疗上有效量”将取决于化合物、疾病或障碍和它的严重性和待治疗的患者的年龄和体重变化。“治疗上有效量”可以包括一系列施药，无论最初的施药是否有效，其最终引起期望效果。
如本文所用，术语“衍生物”指的是产生期望效果的核心结构或药效团上的变化。衍生物可以包括沿苯环、分子的丙烯醛区域或沿侧链的取代。因此本文包含的衍生物包括至少一个公开的化合物——诸如式I、II、III、IV或V中鉴定的那些——或由其形成的化合物。形成特定化合物的衍生物以调节稳定性、功效、聚集等等是期望的。
如本文所用，除非另有指示，任何保护基、氨基酸和其他化合物的缩写与它们的常用用法、公认的缩写或生物化学命名法的IUPAC-IUB委员会(见Biochem.197211：942-944)一致。
B.包括(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物和组合物
本发明的发明人已经发现本文描述的包括具有至少一个(取代苯 基)-丙烯醛部分的那些的化合物显示治疗或预防医疗状况的希望。而且本文公开的化合物被认为具有活性，诸如减少被认为具有或怀疑具有癌性情形的细胞的增殖。此外，本文公开的化合物证明了选择性地调节类固醇受体群的能力。因此本发明的一个目的是提供具有生物活性、在治疗或预防哺乳动物诸如人类的疾病中有用的化合物。
本发明公开和包含在医疗领域中诸如在治疗或预防医疗状况中具有实用性的各种化合物和它们的衍生物。因此本文公开的组合物可以被作为化合物自身提供或施用，或者可以用合适的载体改变以实现期望的治疗。当提供本文公开的化合物为药物时，可以结合药学上可接受的载体提供该化合物。当提供本文公开的化合物为化妆品时，可以结合化妆品可接受的载体提供该化合物。药学上可接受的载体和化妆品可接受的载体可能是相同的，可以源自彼此以及药物和化妆品工业中已知的类似物，或可能是不同的，诸如但不限于取决于期望施用途径的变化。在制备为药物或化妆品之前或之后可以测试化合物的溶解度、活性和偶极矩，并且可单独测试或与本文公开的其他化合物结合测试协同作用。因此本发明包括一种或多种化合物和其衍生物，包括具有亲水性或疏水性添加物、取代或消减的那些。
在本发明的一个方面，提供了具有至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物。在一些实施方式中，具有(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物具有包括抗雄性激素/抗AR生物活性的生物活性。在本发明的一个具体实施方式中，(取代苯基)-丙烯醛部分具有根据式I的式：

其中1)R₃和R₄各自独立地选自烷氧基、羟基和氢；和2)X选自羟基、烷氧基、丙酸乙酯、碳酸甲乙酯和羰基烷基。如在图中可见，具有至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物能够减少雄性激素受体的存在或诱导雄性激素受体的降解。此外示出具有至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物减少癌细胞生长或癌细胞的增殖。此抑制在能刺激癌细胞的化合物存在下发生。在本文描述的各种非限制性实施方式中，化合物包括选自单独或组合的单体1、3、5、6或7的(取代苯基)-丙烯 醛化合物或其药学上可接受的盐，所述单体提供如下：
单体

在各种实施方式中，也提供了具有生物活性的以上提及的单体的衍生物。衍生物可以在一个或多个位置具有取代以增加一种或多种特征诸如活性、溶解度等等。这种衍生物可以调节化合物的偶极矩，并且可以导致或多或少疏水或亲水的组合物。
在本发明的另一方面，提供了包括(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物，其具有根据(IIa)或(IIb)的式：

其中：1)R₃、R₄、R₃’和R₄’独立地选自-H、-OH和-OCH₃；2)当Z不存在时，L是C0-C8亚烷基或L是不饱和亚烯基或炔基；3)Z选自-H、-OH、芳族环、环烷基、-COR₁、-CO₂R₁、-CONR₁R₂、-NR₁R₂、-CX₃，其中R₁和R₂独立地选自-H、-CH₃和-C₂H₅；4)X是选自下列的卤原子： -F、-Cl和-Br；和进一步其中式IIa和IIb是作为二酮的常见现象的平衡互变异构体。在一些实施方式中，化合物选自II-1、II-2、II-3、II-4和II-5。所述式提供为：

在本发明的另一方面，提供根据式IIc的化合物：

其中1)R₃、R₄、R₃’和R₄’独立地选自-H、-OH和-OCH₃；和2)R₁和R₂独立地选自-H、-CH₃、-C₂H₅、取代芳基和取代苄基。
在本发明的另一方面，提供根据式III的化合物：

其中R₃、R₄、R₃’、R₄’、R₃”和R₄”各自独立地选自烷氧基、羟基和氢。非限制性实例包括具有式III-1或III-2的那些：

在本发明的另一方面，提供根据式IV的化合物：

其中R₃、R₄、R_3，、R_4，、R_3”，、R_4”、R_3”’和R_4”’各自独立地选自烷氧基、羟基和氢。在一个实施方式中，化合物具有式IV-1：

在本发明的另一方面，提供根据式V的化合物：

其中1)每一个“n”独立地是1、2或3；2)R₃、R₄、R₃’和R₄’独立地选自-H、-OH和-OCH₃；3)L-Z侧链可以不存在，但是如果L-Z侧链存在，当Z不存在时L是C0-C8亚烷基或不饱和亚烯基或炔基；4)Z选自-H、 -OH、芳族环、环烷基、-COR₁、-CO₂R₁、-CONR₁R₂、-NR₁R₂、-CX₃；5)R₁和R₂独立地选自-H、-CH₃和-C₂H₅；和6)X是选自-F、-Cl和-Br的卤原子。在一些实施方式中，化合物具有根据V-1或V-2的式。以下是具有式V-1和V-2的化合物的代表：

公开的化合物的合成可以使用有机合成领域已知的标准实施使用已知溶剂进行。可测试合成的化合物的期望的活性，诸如类固醇受体如雄性激素受体的降解、预防或抑制癌细胞系的增殖的能力、移植动物研究中的肿瘤大小的减小等等。可使用本文公开的合成方法和技术进一步改变鉴定为成功或领先的化合物。因此，提供的合成方法的变化对本领域技术人员将是显而易见的并且被认为在本发明的范围内。
实施例1证明了提供的单体以及其衍生物的各种合成方案，其也包含在本文中。在一些实施方式中，提供衍生物为单体或其部分的结合以形成二苯基、三苯基或四苯基环系统或更多。
在许多实施方式中，利用联苯环系统来测试和与其他提出的治疗比较；然而具有单个(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物也被发现具有活性，诸如预防用DHT刺激的癌细胞系的增殖的能力和降解雄性激素受体的能力。通过使用文献中已知的方法缩合取代的苯甲醛和2，4-戊二酮或3-取代的2，4-戊二酮，制备一些本发明的化合物。Pedersen等人，Liebigs Ann.Chem.，1557-1569(1985)。联苯环上的和共轭桥的C4上的期望的取代基在缩合之前或之后合成。两个苯基部分之间的共轭桥的长度可通过合成策略从5个碳变化到11个碳。适当地增加和去除保护基允许最终合成公开的化合物。
具有(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物的数个类似物和衍生物已经被新近合成，并且被评估了抗雄性激素活性。一些但不是所有公开的化合物的结构信息在图2中进行概述。
在广泛研究4-单取代的-1，7-双-(3，4-二甲氧基苯基)-5-羟基-庚-1，4，6-三烯-3-酮的结构和生物活性后，惊奇地发现在1，7-双-(取代苯 基)-5-羟基-庚-1，4，6-三烯-3-酮结构处的4-取代(一个或多个)是与这些化合物的有效抗雄性激素/AR活性有关的更重要部分。这种类型的化合物的另一个重要结构特征是两个苯基之间的烯醇酮桥，与它的二酮形式平衡存在，其导致独特的分子固有荧光，即化合物的颜色的高密度。这种分子性能在某种程度上影响药物制剂，诸如在溶剂中的溶解度和稳定性。为了减小固有荧光密度和改进溶解度和稳定性而不牺牲生物活性，使用药物化学和有机合成策略，其通过在C4位置除了在先的单取代外引入第二官能团，诸如氟或甲基，打破广泛的分子共轭和稳定分子为不同的二酮形式。通过使用此策略，合成了一系列4，4-二取代的1，7-双-(取代苯基)-庚-1，6-二烯-3，5-二酮和6，6-二取代的1，11-双(取代苯基)-十一-1，3，8，10-四烯-5，7-二酮化合物并评估了生物活性(图10)。出人意料地，这些新合成的二酮化合物不仅具有显著减小的荧光密度，而且，更重要的是，保持了抗雄性激素/AR活性的有效生物活性，该有效生物活性比得上它们的4-单-取代对应物或在一些化合物中比它们的4-单-取代对应物更有效。这种结构改变的另一个进步是代谢稳定性的改善。例如，通过在C4位置引入甲基，ASC-Q49的结构改变(见图10中的化合物6)改进了它的代谢稳定性并减小了荧光密度，同时保持生物活性。
本发明中提供的创新提供了更加用户友好的(即，较少着色)本文讨论的和适用于本发明的皮肤病诸如痤疮、脱发、创伤愈合和其他疾病、障碍和状况的局部治疗。
有趣地和出人意料地，这些新合成的二酮，即，进一步系列的化合物、它们的固有深黄或暗桔色(在可见光下)已经显著减弱或减小为浅/淡黄或发白色。通过化合物ASC-Q49的HPLC曲线和UV光谱，此观察结果是明显的，其具有深桔色和在HPLC上具有两个分开的互变异构体峰，即，一个在344nm具有UV最大值的二酮峰(图11A)和一个在429nm具有UV最大值的烯醇峰(图11B)；但是“化合物6”(ASC-Q49的衍生物)显示浅黄色并且只具有一个在346nm显示UV最大值的二酮峰(图11C)。这些化合物的此单一峰性质显著简化了化合物分析和定量，即，通过消除或减小多态性的复杂度，并且将利于药物活性成分(API)开发和API化学分析的过程。
有趣地和出人意料地，发现大部分进一步系列的化合物已经保持了它们的生物活性，即具有比得上它们的4-单取代对应物或者在一些情况下比它们的4-单取代对应物更有效的有效抗雄性激素/AR活性(表2)。另外，一些化合物也被发现具有在酸性条件以及在生物体液(诸如人和大鼠血浆)中显著提高的它们的代谢稳定性(表3到表5)。例如，ASC-Q49，一种4-单取代的1，7-双-(3，4-二甲氧基苯基)-5-羟基-庚-1，4，6-三烯-3-酮类似物，被示出为有效抗雄性激素/AR剂(例如，图5)。然而，它的代谢不稳定性已经使其成为不太理想的药物候选。然而，通过引入甲基到根据例如式VI和式VIII的C4位置的结构改变，产生化合物6(图10中)并且已经显著改善了代谢稳定性(表4到表5)。
本发明中提供的创新的发现可大大增加作为药物的化合物的有用性(即增加了可药性(drugability))，并且因此有利于治疗性药物开发。化合物的固有颜色的减少也增加了开发这些进一步系列的化合物为局部药物的潜能，其可避免潜在的皮肤色素减退和使它们更用户友好。
C.包括具有至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物的药物和化妆品
本发明包括公开的化合物自身，以及如果适用，它们的盐和它们的前体药物。盐或前体药物应当保持母体化合物的一部分期望的生物活性或被提供为身体或对象可转化为生物活性形式的形式。例如，盐可在化合物上的带正电荷的取代基(例如，氨基)和阴离子之间形成。合适的阴离子包括但不限于氯根、溴根、碘根、硫酸根、硝酸根、磷酸根、柠檬酸根、甲磺酸根、酒石酸根、三氟醋酸根和醋酸根。同样地，化合物上的带负电荷的取代基(例如，羧酸根)可与阳离子形成盐。合适的阳离子包括但不限于钠离子、钾离子、镁离子、钙离子和铵阳离子诸如四甲基铵离子。前体药物的非限制性实例包括酯和其他药学上可接受的衍生物，其施用到对象后能够提供以上描述的化合物衍生物。
本发明的化合物可以被配制为用于施用，以预防或治疗各种医疗状况。药物制剂可以包括至少一种公开的化合物或其药学上可接受的盐结合药学上可接受的载体。药物生产技术在本发明的领域是已知的，并且通常包括在合适的载体存在下混合化合物或盐。用于本发明的化 合物的合适的载体包括根据意欲施用形式选择的和与传统药物或化妆品实践一致的稀释剂、赋形剂或载体材料。合适的载体的实例包括但不限于水、生理盐水、磷酸盐-缓冲盐水、生理相容的缓冲剂、用生理相容的盐缓冲的盐水、油包水乳状液和水包油乳状液、乙醇、二甲基亚砜、葡萄糖、甘露醇、乳糖、甘油、丙二醇、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、卵磷脂、白蛋白、谷氨酸钠、盐酸半胱氨酸等等和其混合物。合适的载体还可包括适当的药学上可接受的抗氧化剂或还原剂、防腐剂、悬浮剂、增溶剂、稳定剂、螯合剂、络合剂、粘度调节剂(viscomodulator)、崩解剂、粘合剂、调味剂、着色剂、添味剂、遮光剂、润湿剂、pH缓冲剂和其混合物，其与传统药物实践一致(“Remington：The Science and Practice of Pharmacy”，20th edition，Gennaro(ed.)和Gennaro，Lippincott，Williams&Wilkins，2000)。
可以根据期望的施用途径使用药物和化妆品领域已知的方法提供药物和化妆品制剂。合适的施用途径可以包括口服、肠道、肠胃外、经粘膜、经皮、肌肉内、皮下、直肠、髓内、鞘内、静脉内、心室内、心房内、主动脉内、动脉内或腹腔内施用。
本发明的药物组合物可通过医疗器械——诸如但不限于植入装置、生物可降解移植片、贴片和泵——被施用到对象。在使用这种装置的情况，组合物可以配制为包括可溶解的或不可溶解的基质或介质(例如，医疗器械上或内的涂层、膜(membrane)、薄膜(film)、浸渍基质、聚合物、海绵、凝胶或多孔层)以允许在规定的时间期间内释放一种或多种活性化合物。
为了用于活的、完整的有机体诸如人类对象中，本发明的组合物可被配制和提供为适于意欲形式的施用和与传统药物实践相一致的任何制剂(“Remington：The Science and Practice of Pharmacy”，20^th edition，Gennaro(ed.)和Gennaro，Lippincott，Williams&Wilkins，2000)。合适的制剂的实例包括药片、胶囊、糖浆剂、酏剂、软膏、乳膏、洗液、喷雾剂、气溶胶、吸入剂、固体、粉剂、微粒、凝胶剂、栓剂、浓缩液、乳剂、脂质体、微球、可溶解的基质、无菌溶液、悬浮液或注射剂等等。注射剂可以制备为传统形式，作为液体溶液或悬浮液、作为适于在注射前液体中的溶液或悬浮液的浓缩液或固体形式、或为乳剂。
D.结合具有至少一个(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物的医学治疗
测试了本发明的化合物对类固醇受体的作用和对癌细胞种群的作用。发现本发明的化合物能够减少雄性激素受体表达(见图3和图4)。进一步调查证明本发明的化合物能够抑制癌细胞生长(见图5)和减少癌细胞内雄性激素受体的表达(见图6和图8)。发明人还考虑了潜在作用机制或潜在路径。图7支持发明人的观点：本发明的化合物诱导雄性激素受体的降解。因此本文证明的活性支持针对医疗状况诸如各种癌症和雄性激素相关障碍的治疗性或预防性治疗。
本发明包括使用公开的化合物和组合物——包括药物和化妆品制剂——治疗各种医疗状况、减轻各种医疗状况的症状或预防各种医疗状况的进展的方法。医疗状况至少部分可以通过类固醇受体调节。特别感兴趣的类固醇受体可以包括但不限于雄性激素受体(AR)、孕酮受体(PR)、雌性激素受体(ER)、糖皮质激素受体(GR)、过氧化物增殖物激活受体(PPAR)、视黄酸受体(RAR和RXR)和孤儿类固醇激素受体。本发明的组合物或化合物可以靶向特定受体，诸如雄性激素受体，或可以靶向类固醇受体超家族内的具体受体。
本发明的方法可以预防、治疗或改善来自下列的癌症的症状，诸如但不限于前列腺癌、肝癌、膀胱癌、宫颈癌、肺癌和乳腺癌、皮肤癌、小细胞肺癌、睾丸癌、淋巴癌、血癌、食道癌、胃癌、结肠癌、子宫内膜癌、卵巢癌、中枢神经系统癌等等。本发明的方法可以诱导针对肿瘤细胞的细胞毒性或可以抑制肿瘤细胞生长。测定化合物或药物是否有利于治疗或预防具体疾病可以包括在动物模型中在体外、体内测试化合物或它们的衍生物或在合适的细胞系上使用基于细胞的测试。在癌症的情况中，可以利用具有癌细胞分布的细胞系，诸如由癌细胞制备的细胞系。在一些实施方式中，任选地用刺激物诸如DHT刺激，评估本发明化合物的活性抑制癌细胞生长或增殖的能力。特别示出本文公开的化合物以减少前列腺癌细胞的生长或增殖。
在其他实施方式中，化合物、它们的衍生物、药物组合物等等用于预防、治疗或改善神经性和神经肌肉障碍诸如肯尼迪病的症状。脊 髓和延髓肌萎缩(SBMA)或肯尼迪病是性别特异性运动神经元疾病，其影响每40,000个男性中的1个(Katsuno等人综述，2004)。SBMA患者具有突变的雄性激素受体，其含有扩大的多谷氨酰胺段。扩大的多谷氨酰胺雄性激素受体形成聚集物，其干扰细胞功能，并且是引起与SBMA有关的邻近肌萎缩的因素。本发明的方法可以包括通过减少突变体AR的量到能更容易地被细胞的天然持家机构监管的水平来减轻聚集物形成所引起的应激。本发明的方法可以包括选择性地降解雄性激素受体，并且因此可以用作SBMA的疗法。可以提高雄性激素受体降解的公开的化合物可以抑制受体的稳态水平，因此减弱患者中聚集物形成的严重性。
本发明的化合物和组合物可以预防、治疗或改善来自雄性激素有关的毛发疾病(hair disorder)的症状。例如，雄性激素脱发或“男性型秃发”是小囊和邻近细胞中的雄性激素受体上的雄性激素活性引起的脱发。作为另一个实例，多毛症是在女性中毛发生长通常极小或不存在的地方密集深色毛发的过度生长。末端体毛的这种男性型生长通常发生在雄性激素刺激的位置，诸如脸、胸部和乳晕。本发明的方法可以包括对需要这种治疗或预防的个体施用化合物、药物或化妆品制剂。
本发明的化合物和组合物可以治疗炎症(例如，类风湿性关节炎)、痤疮、脱发并且可以加速创伤愈合。痤疮是由雄性激素诱导的皮脂腺的AR激活引起的，并且因此可以通过施用能够预防或减少AR激活的化合物治疗。本发明的化合物被认为诱导雄性激素受体的降解，并且因此将提供针对这种医疗状况的有效治疗。已知雄性激素脱发和其他头发生长障碍由毛发小囊中的雄性激素受体(AR)被内源性雄性激素激活引起。某些炎症状况和创伤愈合也被认为与响应雄性激素的雄性激素受体有关。本发明的方法可以包括对需要这种治疗或预防的个体施用化合物、药物或化妆品制剂。局部施用这种制剂可以是特别感兴趣的。
本发明的化合物和组合物可以用于治疗内分泌紊乱。雄性激素过量是女性中最常见的内分泌紊乱之一(Bulun和Adashi综述，2003)。此病理生理学状态可见于具有各种内分泌紊乱的女性，包括多囊卵巢综 合征(PCOS)、垂体腺瘤诱导的高催乳素血症、库兴氏综合征、先天性肾上腺增生症、非典型肾上腺增生症、卵巢或肾上腺肿瘤和医源性雄性激素过量。在这些障碍中，PCOS发生在5-10％的生殖年龄女性中，是雄性激素过多症的最频繁识别的起因。最近，已经在绝经后女性中观察到循环雄性激素与循环雌性激素的比例相对增加(命名为雄性化(androgenicity))(Lee等人，2004)。雄性化是更年期后雌二醇和雌酮合成的下降比雄性激素合成的下降更大的结果，并且它的临床意义处于积极的研究中。已经显示表现雄性化的女性更频繁可见于向心性肥胖(Peohlman等人，1995)。腹壁中的脂肪沉积是代谢活跃的，并且与周边组织中的胰岛素抗性有关(Evans等人，1983)。除了上面提及的内分泌紊乱，也可在显示脂质营养不良综合征的人类免疫缺陷病毒(HIV)-感染的女性中检测到高雄性激素症状(Hadigan等人，2000)。已经建议雄性激素过多症可以涉及在后一组患者中观察到的脂质异常。
本发明的方法包括治疗本文公开的或被认为至少部分与类固醇相关的或类固醇相关障碍的各种医疗状况。治疗方法包括施用本发明的化合物、药物制剂或化妆品制剂至需要其的个体或对象。可以用治疗上有效的剂量治疗对象。治疗上有效的剂量在一定程度上可从化合物到化合物、患者到患者和将根据患者的状况和施用途径发生变化。作为一般性指导，从大约0.1到大约50mg/kg的剂量可具有治疗效果，同时可能采用更高剂量。
在以下非限制性实施例中，更详细地解释了本发明的许多特征。因此提供以下实施例以进一步说明本发明的各种方面和实施方式。然而应当理解，本文充分地描述的和权利要求叙述的本发明不意欲被以下实施例的细节限制。
实施例
实施例1：制备具有至少一个(3，4-烷氧基或羟基取代苯基)-丙烯醛部分的化合物和衍生物
在一些实施方式中，由单个(取代苯基)丙烯醛核心结构单元(单体)组成的化合物通过标准或改进的有机合成法制备。在一些实施方式中，两个或多个(取代苯基)丙烯醛核心结构部分组成的化合物通过文献中已知的方法通过取代苯甲醛和2，4-戊二酮或3-取代的2，4-戊二酮的缩合制备。Pedersen等人(Liebigs Ann.Chem.，1557-1569，1985)。在缩合前或后，合成联苯环上和共轭桥的C4上的期望的取代基。两个苯基部分之间的共轭桥的长度可通过合成策略从5个碳变化到11个碳。恰当地添加和去除保护基允许最终合成公开的衍生物。另外，各种合成步骤可以以可选的顺序进行以产生期望的化合物。
通过在合适的溶剂例如二氯甲烷中，在有机碱例如三乙胺存在下使具有化合物(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物与三氯氧化磷反应来进一步制备衍生的磷酸盐前体药物。公开的化合物的酒石酸盐作为水溶性盐通过使具有(取代苯基)-丙烯醛部分的化合物与酒石酸在水中反应进行合成。
化学合成
熔点在Fisher-John熔点装置上测定并且是未校正的。质子核磁共振(¹H NMR)和¹³C NMR谱在Varian Gemini 300或Inova 500光谱仪上用四甲基硅烷(TMS)作为内标测量。³¹P NMR在500MHz Varian Inova光谱仪上使用磷酸作为外标进行。以δ(ppm)报告化学位移。质谱(MS)在Agilent1100系列LC-MSD-Trap或PE-Sciex API-3000光谱仪上获得。急骤柱层析(flash column chromatography)在硅胶(100-200目)或氧化铝(氧化铝，碱性，Brockmann I，标准等级，～150目)上进行。HPLC在Shimadzu SCL 10A仪器上进行。HPFC在Biotage系统或ISCO Inc.Chemflash色谱系统上进行。还使用硅胶板(Kieselgel 60，F254，1.00mm)上的制备薄层色谱(PTLC)用于分离和提纯。预涂硅胶板(Kieselgel 60，F254，0.25mm)用于薄层色谱(TLC)分析。基于公开的方法通过3，4-二甲氧基苯甲醛与2，4-戊二酮的反应合成ASC-J9作为起始物料(Pedersen等人，Liebigs Ann.Chem.，1557-1569，1985)。
合成单体1、3、5-7
结构上具有(3，4-二甲氧基或3-甲氧基，4-羟基取代苯基)-丙烯醛部分的单体——目前提供的化合物的基本结构——已经通过3-(3’，4’-二甲氧基-苯基)-丙烯酸与相应试剂(单体1、3)的反应或3，4-二甲氧基-苯甲醛或3-甲氧基-4-羟基苯甲醛与γ-戊酮酸乙酯(单体5和6)的反应合成。通过两个步骤从3-(3，4-二甲氧基苯基)丙烷起始合成单体-7。更具体地，单体的合成方法如下描述并在方案1中说明。
单体1，3-(3’，4’-二甲氧基-苯基)-丙烯酸甲酯通过在乙酰氯存在下3-(3’，4’-二甲氧基-苯基)-丙烯酸与甲醇的反应合成。回流2.5h后，通过蒸发到1/3浓缩反应混合物，并且过滤白色固体，并在真空中干燥以得到作为白色结晶固体、收率为76％的期望的产物。熔点74-75℃。ESI MS m/z：223.0[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.64(d，1H，J＝15.9Hz，H-3)，7.11(dd，1H，J＝6.9，2.1Hz，H-6’)，7.05(d，1H，J＝2.4Hz，H-2’)，6.85(d，1H，J＝8.4Hz，H-5’)，6.32(d，1H，J＝15.9Hz，H-2)，3.92(s，6H，苯基OCH₃)，3.80(s，3H，酯OCH₃)。
单体3，一种混合酸酐，通过甲苯/CH₂Cl₂(1∶1)中的3-(3’，4’-二甲氧基-苯基)-丙烯酸在Et₃N存在下的反应制备。将溶液冷却到0℃，逐滴加入氯甲酸乙酯(1.5eq.)。在0℃下搅拌2h后，过滤出沉淀物。将滤液浓缩以得到相对纯的白色固体，其通过经薄硅胶垫快速过滤并用己烷∶乙酸乙酯(1∶0到4∶1)洗脱来提纯以提供作为大量白色固体的期望的产物。ESI MS m/z：281.0[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.78(d，1H，J＝15.9Hz，H-3)，7.15(dd，1H，J＝8.4，1.8Hz，H-6’)，7.06(d，1H，J＝1.8Hz，H-2’)，6.89(d，1H，J＝8.4Hz，H-5’)，6.29(d，1H，J＝15.9Hz，H-2)，4.37(q，2H，J＝6.9Hz，OCH₂CH3)，3.92(d，6H，J＝1.2Hz，苯基OCH₃)，1.40(t，3H，J＝7.2，OCH₂CH₃)。
单体5，即，6-(3’，4’-二甲氧基-苯基)-4-氧-己-5-烯酸乙酯，如方案1所示通过3，4-二甲氧基-苯甲醛与γ-戊酮酸乙酯的反应合成。γ-戊酮酸乙酯(1eq.)与氧化硼(0.7eq)在乙酸乙酯中40℃下反应30min。向所得的混合物中加入硼酸三丁酯和3，4-二甲氧基-苯甲醛(二者均为1eq.)，并在40-42℃下搅拌混合物30min。缓慢加入乙酸乙酯中的丁胺(0.7eq)溶液，进一步允许混合物在40-42℃下搅拌过夜。加入5％的盐酸(1.3 eq)，并在60℃下搅拌反应混合物1h。将反应混合物冷却至r.t.并被分层。水的部分用乙酸乙酯萃取两次。用水洗结合的乙酸乙酯萃取物至pH为4，并用MgSO₄干燥。过滤和浓缩后，粗产物(crude)通过PTLC纯化以得到作为白色固体的单体5。熔点62-63℃。ESI MS m/z：293.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.55(d，1H，J＝16.2Hz，H-6)，7.14(dd，1H，J＝9.0，2.1Hz，H-6’)，7.08(d，1H，J＝1.8Hz，H-2’)，6.88(d，1H，J＝8.4Hz，H-5’)，6.65(d，1H，J＝16.2Hz，H-5)，4.16(q，2H，J＝6.9Hz，OCH₂CH₃)，3.93(s，6H，苯基OCH₃)，3.01(t，2H，J＝6.6Hz，H-3)，2.69(t，2H，J＝6.6Hz，H-2)，1.27(t，3H，J＝6.9，OCH₂CH₃)。
单体6，6-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-4-氧-己-5-烯酸乙酯，通过用合成单体5中记载的类似方法将香草醛与γ-戊酮酸乙酯的反应进行合成。获得期望的化合物为黄色结晶固体。熔点55-56℃。ESI MS m/z：279.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.54(d，1H，J＝15.0Hz，H-6)，7.12-7.06(m，2H，芳香-H)，6.94(d，1H，J＝8.1Hz，芳香H-5’)，6.63(d，1H，J＝15.0Hz，H-5)，4.16(q，2H，J＝7.2Hz，OCH₂CH₃)，3.94(s，3H，苯基OCH₃)，3.01(t，2H，J＝6.9Hz，H-3)，2.69(t，2H，J＝6.9Hz，H-2)，1.27(t，3H，J＝7.2，OCH₂CH₃)。
单体7，即7-(3，4-二甲氧基-苯基)-庚-6-烯-2，5-二酮，由3-(3，4-二甲氧基苯基)丙烷通过2个步骤制得。如合成Q110(方案13)中描述，以60％的收率制得3，4-二甲氧基肉桂醛。在无水EtOH中溶解化合物(1eq.)，加入3-丁烯-2-酮(1eq.)。在N2下将反应溶液加热至80℃，逐滴加入3-苄基-5-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3-氯化噻唑(0.1eq.)、EtOH中的TEA(0.4eq.)。在温度下搅拌所得的反应混合物10h，随后蒸发以得到黄色油状残留物。将粗产物溶解在CH₂Cl₂中，并用0.5％H₂SO₄、2％NaHCO₃和盐水洗。用Na₂SO₄干燥后，通过经Al₂O₃急骤柱(flash column)的柱层析、随后从乙醚和戊烷结晶纯化粗产物，以提供作为白色固体的目标化合物。熔点71-73℃。ESI MS m/z：263.0[M+H]^+.；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.55(d，1H，J＝16.2Hz，H-6)，7.14(dd，1H，J＝9.9，2.1Hz，H-6’)，7.08(d，1H，J＝1.8Hz，H-2’)，6.88(d，1H，J＝8，4Hz，H-5’)，6.64(d，1H，J＝16.2Hz，H-5)，3.93(s，6H，苯基OCH₃)，2.98(t，2H，J＝6.0Hz，H-3)，2.83(t，2H，J＝6.0Hz，H-3)，2.24(s，3H，COCH₃)。
方案1
1.合成单体1：

2.合成单体3：

3.合成单体5：

4.合成单体6：

5.合成单体7：

催化剂：3-苄基-5-(2-羟乙基)-4-甲基-1，3-氯化噻唑
合成化合物Q9、Q44、Q49、Q50、Q77和Q98
为了研究化合物的C4-取代对AR活性的作用，合成了多种具有不同官能团(例如，羟基、酯和酰胺等)的C4-取代的化合物。这些化合物通过1，7-双-(3，4-二甲氧基-苯基)-5-羟基-庚-1，4，6-三烯-3-酮(ASC-J9)的处理来制备，通过方案2中描述的方法，用碱性条件下的适当的溴化 物或氯化物化合物(或者对于制备化合物Q9，用环氧乙烷作为替换)来合成。
如下合成化合物Q9。向含有0.1mmol的四丁基溴化铵(相转移催化剂，PTC)的1N NaOH水溶液(0.2mL，0.2mmol)加入CH₂Cl₂(0.5mL)中的ASC-J9(0.1mmol)。在室温下搅拌混合物10min，并加入2-溴乙醇(0.2mmol)或环氧乙烷(25mmol)。对化合物Q9在40℃下搅拌所得的反应混合物过夜。分离两层，并用CH₂Cl₂萃取水层3次。结合的有机层用Na₂SO₄干燥并浓缩。粗残留物通过PTLC纯化和从EtOAc再结晶。化合物Q9的分析数据示出如下。
化合物Q9：黄色结晶固体(EtOAc)，熔点149-150℃。ESI MS m/z：441.3[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.63(d，1H，J＝15.9Hz，H-1)，7.53(d，1H，J＝15.9Hz，H-7)，7.14-7.04(m，4H，芳环H)，6.88-6.85(2H，芳环H)，6.65(d，1H，J＝15.9Hz，H-2)，6.31(d，1H，J＝15.9Hz，H-6)，4.29(t，2H，J＝12和6Hz，CH₂CH₂OH)，3.94-3.88(12H，OCH₃，)，2.84-2.79(t，1H，C4-H)，2.14-2.10(m，2H，CH₂CH₂OH)。
化合物Q44、Q49、Q77通过使CH₂Cl₂或THF中的ASC-J9与适当的溴化物或氯化物化合物在K₂CO₃和Cs₂CO₃(9∶1)或NaH存在下的反应合成，如方案2所示。作为制备化合物Q49和Q77的实例，在0℃下向THF中的NaH(4eq.)溶液中加入ASC-J9(1eq.)。在0℃下搅拌所得的溶液0.5h，然后室温下搅拌1.5h。加入2-氯化-N，N-二乙基乙酰胺(4eq.)(对于Q49)或2-氯化-N，N-二甲基乙酰胺(4eq.)(对于Q77)。将所得的混合物加热至回流过夜。将反应混合物冷却至r.t.(室温)，用EtOAc稀释，并用10％H₂SO₄aq洗。进一步用饱和NaHCO₃、H₂O和盐水洗有机层，并用Na₂SO₄干燥。通过急骤柱层析纯化期望的产物，并从EtOAc结晶。
化合物Q49：黄色结晶固体，熔点166-167℃。ESI MS m/z：510.7[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.68(d，2H，J＝15.9Hz，H-1，7)，7.16-7.06(4H，芳环H)，6.87-6.84(2H，芳环H)，6.80(d，2H，J＝15.9Hz，H-2，6)，4.97(t，1H，J＝12.0和6.0Hz，C4-H)，3.92-3.89(12H，OCH₃)，3.43-3.33(m，4H，CH₂CON(CH₂CH₃)₂)，3.04(d，2H，J＝6.6Hz， C4-CH₂CON(CH₂CH₃)₂)，1.24(t，3H，CH₂CON(CH₂CH₃)₂)，1.09(t，3H，CH₂CON(CH₂CH₃)₂)。
化合物Q77：黄色结晶固体，熔点155-157℃。ESI MS m/z：482.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.68(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.16-7.06(4H，芳环H)，6.87-6.83(2H，芳环H)，6.77(d，2H，J＝15.6Hz，H-2，6)，4.92(t，1H，J＝13.5和6.6Hz，C4-H)，3.92-3.88(12H，OCH₃)，3.09-3.04(m，5H，-CH₂CO和N(CH₃))，2.94(s，3H，N(CH₃))。
合成化合物Q50和Q98以比较它们与Q44和Q49的活性(方案3)。向无水二氯甲烷中的5-羟基-1，7-双-(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-庚-1，4，6-三烯-3-酮和3，4-二氢-2H-吡喃(20eq.)的溶液中加入氯铬酸吡啶(PPTS)(0.1eq.)。在r.t.下搅拌所得的溶液48h。然后用水洗该溶液。去除溶剂，并且在Biotage柱层析上纯化所得的化合物。获得的产物(Q1)与溴乙酸乙酯(Q50)或2-氯化-N，N-二乙基乙酰胺(4eq.)(Q98)在K₂CO₃和Cs₂CO₃(9∶1)存在下的反应、然后用PPTS/EtOH去除THP保护基分别给出了期望的产物Q50和Q98。
化合物Q50：无定型的。熔点63-65℃。ESI MS m/z：455.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.65(d，2H，J＝15.9Hz，H-1，7)，7.19-7.04(6H，芳环H)，6.72(d，2H，J＝15.9Hz，H-2，6)，4.16(2H，COOCH₂CH₃)，3.96-3.92(6H，OCH₃)，3.04(d，2H，J＝7.2Hz，C4-CH₂COOCH₂CH₃)，1.27-1.23(3H，COOCH₂CH₃)。
化合物Q98：无定型的。熔点68-71℃。ESI MS m/z：482.10[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.65(d，2H，J＝15.9Hz，H-1，7)，7.12-7.03(4H，芳环H)，6.94-6.89(2H，芳环H)，6.76(d，2H，J＝15.9Hz，H-2，6)，4.96(t，1H，J＝13.2和6.9Hz，C4-H)，3.92-3.89(6H，OCH₃)，3.44-3.33(m，4H，CH₂CON(CH₂CH₃)₂)，3.04(d，2H，J＝6.6Hz，C4-CH₂CON(CH₂CH₃)₂)，1.25(t，3H，CH₂CON(CH₂CH₃)₂)，1.10(t，3H，CH₂CON(CH₂CH₃)₂)。
方案2

方案3

合成化合物：Q12
如方案4所示，该化合物由商业可得的取代苯甲醛与4-乙酰基-5-氧基己酸酯起始合成。
更具体地，4-乙酰基-5-氧基己酸酯与氧化硼(0.7eq)在乙酸乙酯中在40℃下反应30min。向所得的混合物中加入硼酸三丁酯和3-甲基-4-羟基苯甲醛(二者均为1.6-1.8eq)，并在40-42℃下搅拌该混合物30min。缓慢加入乙酸乙酯中的丁胺(1.5eq)溶液，并进一步允许在40-42℃下搅拌混合物过夜。加入10％的盐酸(2.5eq)，并在60℃下搅拌反应混合物1h。将该反应混合物冷却至r.t.并被分层。水的部分用乙酸乙酯萃取两次。用水洗结合的乙酸乙酯萃取物至pH～4并用MgSO₄干燥。过滤和浓缩后，通过硅胶柱层析(HPFC)，用己烷：乙酸乙酯作为洗脱液，并从乙酸乙酯结晶，纯化粗产物。
方案4

合成化合物：Q30、Q35和Q70
为了研究二酮基团对AR活性的作用，合成了用亚胺基代替一个酮基的一系列化合物。
化合物Q30、Q35通过ASC-J9与适当的胺在BF₃·OEt₂存在下的反应合成(方案5)。例如，向1，2-二氯乙烷中的ASC-J9溶液中加入N，N-二乙胺(化合物Q30)(1.2eq.)。将所得的溶液冷却至-30℃，并逐滴加入新制的BF₃·OEt₂(2eq.)。在-30℃氮气下搅拌该混合物至室温，用TLC监测。加入吡啶(大约3eq.)淬火后，用盐水洗混合物并用MgSO₄干燥。蒸发溶剂并用急骤柱层析提纯产生期望的产物Q30。ESI MS m/z：452.4[M+H]⁺。
化合物Q70通过ASC-J9(0.75mmol)与(R)-(-)-2-苯基甘氨醇(1.16mmol)在无水甲苯中的反应合成，如方案5中所示。用迪安-斯达克榻分水器加热反应混合物至回流过夜。蒸发溶剂并加入乙酸乙酯，再蒸发。通过Biotage系统上的柱层析纯化获得的粗产物以提供作为淡黄色固体的期望的产物Q70。ESI MS m/z：516.4[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz， CDCl3)δ：7.54(d，1H，J＝15.6Hz，H-1)，7.40-7.28(5H，芳环H)，7.13(d，1H，J＝15.9Hz，H-6)，7.16-7.09(2H，芳环H)，6.95-6.80(4H，芳环H)，6.68(d，1H，J＝15.6Hz，H-2)，6.63(d，1H，J＝15.9Hz，H-7)，5.63(s，1H，C4-H)，3.94-3.83(m，15H)。

合成化合物：Q99、Q106、Q113、JM2和JM20
在连续探索C4侧链对AR活性的作用中，合成了一系列具有含有C4-取代的羰基的化合物。化合物Q99通过ASCJ-9与3-氯-2-甲氧基甲氧基-丙烯的反应，随后去除甲氧基甲基合成，如方案6所示。更具体地，搅拌NaOH(2eq.)和四丁基硫酸氢铵(TBABS)的水溶液5min。向反应溶液中逐滴加入1，4-二烷中的ASCJ-9(1eq.)溶液，并且在rt.下搅拌所得的红色两相混合物10min。向该混合物中加入1，4-二烷中的3-氯-2-甲氧基甲氧基-丙烯(1.5eq)，并在rt.下搅拌所得的溶液5min，然后在70℃下搅拌过夜。通过过滤除去该固体，并将滤液浓缩至干燥。所得的残留物悬浮在1％H₂SO₄/二烷(2∶1，体积)中，并在rt.下搅拌该悬浮液4h，用TLC监测。用CH₂Cl₂萃取反应混合物，用Na₂SO₄干燥，过滤和浓缩。通过急骤柱层析纯化粗产物，并用己烷/EtOAc混合物洗 脱以得到作为黄色结晶固体的期望的产物。M.p.163-166℃。ESI MS m/z：453.1[M+H]⁺。
方案6

使用方案2中用于制备化合物Q44的描述的方法合成化合物Q106和Q113。制备Q106的实例描述如下。向无水CH₂Cl₂(5mL)中的ASC-J9(0.25mmol)溶液中加入2-溴-1-苯基-乙酮(1.2eq.)、K₂CO₃/Cs₂CO₃(10∶1)(～2eq.)。在rt下搅拌反应混合物过夜，用TLC监测。用EtOAc稀释反应混合物，并用H₂O洗，然后用Na₂SO₄干燥。通过硅胶急骤柱层析纯化获得的粗产物，用己烷和EtOAc混合物洗脱以得到期望的产物。
化合物Q106。黄色晶体，熔点160-2℃。ESI MS m/z：515.2[M+H]⁺。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：8.14-8.01(2H，芳环H)，7.74-7.68(2H，H-1，7)，7.65-7.46，(m，4H，芳环H)，7.18-7.15(1H，芳环H)，7.09-7.06(2H，芳环H)，6.91-6.80(m，4H，芳环H)，6.69(d，2H，J＝15.3Hz，H-2，6)，3.92-3.90(12H，OCH₃)，3.78(2H，-CH₂CO)。
化合物Q113，黄色蓬松固体，熔点145-7℃。ESI MS m/z：479.1[M+H]⁺.¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.75(d，1H，J＝15.3Hz，H-1，7)，7.20-7.17(2H，芳环H)，7.07-7.06(2H，芳环H)，6.90，6.88(2H，芳环H)，6.86(1H，J＝15.3Hz，H-2，6)，3.95-3.93(12H，OCH₃)，3.76(2H，-CH₂CO)，2.14-2.05(m，1H，环丙基-H)，1.10-1.04(m，2H，环丙基-H)，0.93-0.86(m，2H，环丙基-H)。
化合物JM2通过ASC-J9(40mg)与碘代乙酰胺(80mg)和无水丙酮中的无水碳酸钠(40mg)的反应合成，如方案7中所示。将反应混合物 加热至回流24小时。冷却后，过滤该混合物以除去无机固体，并蒸发滤液。通过制备型硅胶层析板(仅乙酸乙酯)纯化获得的粗产物残留物以提供作为淡黄色固体的期望的产物。
化合物JM2，无定型的；ESI MS m/z：452.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.79(d，2H，J＝15.3Hz，H-1，7)，7.4-6.4(6H，芳环H)，6.33(d，2H，J＝15.3Hz，H-2，6)，3.93，3.92(all s，两个6H，OCH₃)，2.06(d，J＝6.3Hz，2H，CH₂CONH₂)。
合成JM-10。在70℃下搅拌1.0克的ASC-J9、5ml的乙酸酐和1ml的三甲基原甲酸酯的混合物22小时(方案7)。随后将溶液真空蒸发到干燥。将残留物重新溶解在CH₂Cl₂-乙醇中以重结晶。提供化合物JM10为橙色-泛红晶体(270mg)；熔点137-138℃；ESI MS m/z：425.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：10.37(s，1H，C4-COH)，7.94，7.71(两个d，2H每个，J＝15.6Hz，H-1，2，6，7)，7.26(dd，2H，J＝1.8，8.7Hz，芳香5’-H)，)，7.17(d，2H，J＝1.8Hz，芳香2’-H)，6.91(d，2H，J＝8.7Hz，芳香6’-H)，3.97，3.95(两个，6H每个，OCH₃)。
方案7

合成化合物Q100、Q101、JM1、JM6和JM7
制备在ASC-J9的C4位置具有不饱和侧链的化合物Q100、Q101、JM1、JM6和JM7，意欲提高抗前列腺癌活性。化合物Q100通过ASC-J9与3-溴-丙炔在CH₂Cl₂中在60℃下在K₂CO₃存在下的反应过夜来合成。化合物Q101是通过ASC-J9与溴丙烯在DMF中在100℃下在 K_２CO₃和KI的存在下反应2h来制备(方案8)。粗产物化合物通过硅胶急骤柱层析用己烷和EtOAc的混合物洗脱来纯化以得到期望的产物。
化合物Q100，黄色无定型固体，熔点75-78℃。ESI MS m/z：453.1[M+H]⁺.¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.75(d，1H，J＝15.3Hz，H-1)，7.69(d，1H，J＝15.6Hz，H-7)，7.23-7.05和6.91-6.85(m，7H，芳环H和H-2)，6.73(1H，J＝15.6Hz，H-6)，3.96-3.91(12H，OCH₃)，3.46(1H，C4-H)，2.96(s，1H，乙炔)，2.94-2.90(dd，2H，-CH₂CCH)。
化合物Q101，无定型的，熔点69-72℃。ESI MS m/z：437.1[M+H]⁺。¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.71(d，1H，J＝15.6Hz，H-1)，7.70(d，1H，J＝15.6Hz，H-7)，7.18-7.12(m，2H，芳环H)，7.06-7-7.00(m，2H，芳环H)，6.90-6.85(2H，芳环H)，6.85(1H，J＝15.6Hz，H-2)，6.67(1H，J＝15.6Hz，H-6)，5.64-5.49(m，1H，乙烯H)，5.19-5.07(m，2H，乙烯H)，3.94-3.91(m，12H，OCH₃)，296(d，2H，-CH₂-)。
方案8

化合物JM1通过ASC-J9(40mg)与肉桂基溴和无水碳酸钠在无水丙酮中的反应来合成(方案9)。将反应混合物加热至回流24小时。冷却后，过滤该混合物以除去无机固体，并蒸发滤液。获得的粗产物通过制备型硅胶层析板(正己烷-乙酸乙酯＝1∶1)来纯化以提供作为淡黄色固体的期望的产物JM1。无定型的；ESI MS m/z：513.4[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.74(d，2H，J＝15.3Hz，H-1，7)，7.32(d，1H，J=18.6Hz，-CH2CH＝CH-)，7.4-6.4(11H，芳环H)，6.93(d，2H，J＝15.3 Hz，H-2，6)，6.46(d，1H，J＝18.6Hz，-CH2CH＝CH-)，3.91，3.88(所有，两个6H，OCH₃)，3.50(br d，2H，-CH2CH＝CH-)。
化合物JM6通过ASC-J9(60mg)与溴甲基醋酸酯(50mg)和氢氧化钠(20mg)在无水丙酮中的反应来合成(方案9)。将反应混合物加热至回流24小时。冷却后，过滤该混合物以除去无机固体，并蒸发滤液。获得的粗产物通过制备型硅胶层析板(正己烷-乙酸乙酯＝1∶2)来纯化以提供作为淡黄色固体的期望的产物JM6(ESI MS m/z：467.3[M+H]⁺)。
方案9

化合物JM7，作为前面提及的JM4的副产物而获得，来自EtOAc/己烷的黄色细晶；熔点109-110℃；ESI MS m/z：545.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.83(s，1H，CH＝C-at C4)，7.79，7.51，6.98，6.83(all d，1H每个，J＝15.5Hz，H-1，2，6，7)，7.20，7.15，7.08(全部dd，1H每个，J＝1.8，8.4Hz，芳香5’-H)，6.87(d，1H，J＝8.4Hz，芳香6’-H)，6.83(d，2H，J＝8.4Hz，芳香6’-H)，7.07，7.06，6.99(全部d，1H每个，J＝1.8Hz，芳香2’-H)，3.92，3.88(全部，6H每个，OCH₃)，3.90，3.83(全部，3H每个，OCH₃)。
合成化合物：Q102-Q104、Q108、Q114-Q115、JM12-JM14和JM16-JM19
合成化合物Q102-Q104、Q108、JM12-JM14、JM17来评估具有不同链长度、环大小和链端官能团的ASC-J9上的C4-烷基取代的性能。(例如，Q108和JM14)。合成化合物Q114-Q115、JM16、JM18-19来评 估不仅C4-侧链的而且二苯基部分上的取代的作用。所有化合物通过2，4-戊二酮与适当的在苯中的溴代或碘代烷基或亚烷基(或取代烷基或亚烷基)使用DBU作为碱的反应来制备。所得的产物3-取代的2，4-戊二酮进一步与3，4-二甲氧基苯甲醛或4-甲氧基苯甲醛或3-甲氧基-4-羟基苯甲醛反应以提供期望的产物(方案10)。制备Q104的实例说明如下。在3mL苯中混合0.2g(2mmol)2，4-戊二酮和30ul(1eq.)DBU。在r.t下向该溶液中逐滴加入0.48g(1eq.)的1mL苯中的辛基碘。在r.t.下搅拌所得的溶液过夜。反应混合物用盐水洗和用CH₂Cl₂萃取，用Na₂SO₄干燥并通过硅胶急骤柱层析纯化以产生C3-辛酰基取代的2，4-戊二酮和O-辛基取代的2，4-戊二酮的混合物。通过以上提到的方法该混合物与3，4-甲氧基苯甲醛的反应提供化合物Q104。
化合物Q104，来自EtOAc/己烷(2∶1)的黄色固体，熔点87-90℃。ESI MS m/z：509.3[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.71(d，1H，J＝15.6Hz，H-1)，7.63(d，1H，J＝15.9Hz，H-7)，7.21-7.14(m，2H，芳香H)，7.08-7.05(m，2H，芳香H)，6.95(d，1H，J＝15.6Hz，H-2)，6.91-6.84(m，2H，芳香H)，6.73(d，1H，J＝15.9Hz，H-6)，3.94-3.91(m，12H，-OCH₃)，2.55(t，1H，H-4)，1.61-1.22(m，12H，丁基)，0.87(m，3H，-CH₃)。
方案10

化合物Q102，来自EtOAc/己烷的红色针状晶体，熔点162-164℃。ESI MS m/z：425.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.73(d，2H，J＝15.3Hz，H-1，7)，7.23-7.19(dd，2H，J＝8.1，1.8Hz，芳香H)，7.09(d，2H，J＝1.5Hz，芳香H)，6.96(d，2H，J＝15.3Hz，H-2，6)，6.90(d，2H，J＝8.1Hz，芳环H)，3.96(s，6H，OCH₃)，3.94(s，6H，OCH₃)，2.66-2.57(m，2H，-CH₂CH₃)，1.24(t，2H，J＝15.0，6.0Hz，-CH₂CH₃)。
化合物Q103，来自EtOAc的黄色晶体，熔点125-126℃。ESI MS m/z：453.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.74-7.61(2H，H-1，7)，7.21-7.06(m，4H，芳香H)，6.99-6.71(4H，H-2，6和芳香H)，3.94-3.92(12H，-OCH₃)，2.57(t，1H，H-4)，1.51-1.22(m，6H，-CH₂CH₂CH₂-)，0.87(3H，-CH₃)。
化合物Q108，来自EtOAc的黄色固体，熔点60-62℃。ESI MS m/z：515.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.72-7.60(2H，H-1，7)，7.34-7.00(m，8H，芳香H)，6.91-6.84(3H，芳香H)，6.82-6.68(2H， H-2，6)，3.95-3.92(12H，-OCH₃)，3.46(t，1H，H-4)，2.80-2.52(m，2H，苄基CH₂)，2.12-1.84(2H，-CH₂-)，1.68-1.50(2H，-CHCH₂-)。
化合物JM12，来自EtOAc/己烷的橙色针状体；熔点138-139℃；ESI MS m/z：451.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.72，6.99(两个d，2H每个，J＝15.3Hz，H-1，2，6，7)，7.21(dd，2H，J＝1.8，8.4Hz，芳香5’-H)，)，7.08(d，2H，J＝1.8Hz，芳香2’-H)，6.90(d，2H，J＝8.4Hz，芳香6’-H)，5.30(br.s，1H，OH)，3.95，3.93(两个，6H每个，OCH₃)，2.65(d，2H，J＝6.0Hz，C4-CH₂-)，0.95(m，1H，环丙烷的CH)，0.95(m，1H，环丙烷的CH)，0.51，0.24(两个m，2H每个，环丙烷的CH₂)。
化合物JM13，来自EtOAc/己烷的橙色针状体；熔点172-174℃；ESI MS m/z：493.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：7.71，6.97(两个d，2H每个，J＝15.3Hz，H-1，2，6，7)，7.20(dd，2H，J＝1.8，8.4Hz，芳香5’-H)，)，7.08(d，2H，J＝1.8Hz，芳香2’-H)，6.92(d，2H，J＝8.4Hz，芳香6’-H)，5.30(br.s，1H，OH)，3.95，3.94(两个，6H每个，OCH₃)，2.46(d，2H，J＝6.9Hz，C4-CH₂-)，1.90-1.00(m，11H，1CH和环己烷的5CH₂)。
化合物JM14，来自EtOAc/己烷的橙色针状体；熔点131-132℃；ESI MS m/z：493.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl₃)δ：9.87(br.s，1H，OH)，7.76，6.90(两个d，2H每个，J＝15.3Hz，H-1，2，6，7)，7.19(dd，2H，J＝1.8，8.4Hz，芳香5’-H)，)，7.10(d，2H，J＝1.8Hz，芳香2’-H)，6.91(d，2H，J＝8.4Hz，芳香6’-H)，5.30(br.s，1H，OH)，3.95，3.94(两个，6H每个，OCH₃)，2.86，2.37(两个m，2H每个，C4-CH₂-CH₂-)。
化合物JM16，橙色无定型的；ESI MS m/z：437.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl₃，观察到2∶1互变异构，列出主要形式的数据)δ：7.62，6.71(两个d，2H每个，J＝15.9Hz，H-1，2，6，7)，7.12(dd，2H，J＝1.8，8.4Hz，芳香5’-H)，)，7.05(d，2H，J＝1.8Hz，芳香2’-H)，6.92(d，2H，J＝8.4Hz，芳香6’-H)，5.96(br.s，2H，OH X 2)，3.97(s，3H，OCH₃)，3.94(s，9H，OCH₃X 3)，2.68(d，2H，J＝6.9Hz，C4-CH₂-)，2.19-1.59(m，7H，1CH和环丁烷的3CH₂)。
化合物JM17，来自EtOAc/己烷的橙色针状体，熔点126-127℃；ESI MS m/z：465.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl₃，)δ：7.72，7.00(两 个d，2H每个，J＝15.3Hz，H-1，2，6，7)，7.21(dd，2H，J＝1.8，8.4Hz，芳香5’-H)，)，7.09(d，2H，J＝1.8Hz，芳香2’-H)，6.92(d，2H，J＝8.4Hz，芳香6’-H)，3.96，3.95(两个，6H每个，OCH₃)，2.70(d，2H，J＝6.9Hz，C4-CH₂-)，2.08(m，2H，环丁烷的1CH₂)，1.83(m，4H，环丁烷的2CH₂)。
化合物JM18，橙色无定型的；ESI MS m/z：423.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl₃，观察到2∶1互变异构，列出主要形式的数据)δ：7.65，6.73(两个d，2H每个，J＝15.9Hz，H-1，2，6，7)，7.12(dd，2H，J＝1.8，8.4Hz，芳香5’-H)，)，7.05(d，2H，J＝1.8Hz，芳香2’-H)，6.92(d，2H，J＝8.4Hz，芳香6’-H)，3.93(s，12H，OCH₃X 4)，2.71，2.65(两个d，1H每个，J＝6.0Hz，C4-CH₂-)，0.95(m，1H，环丙烷的CH)，0.51，0.24(两个m，2H每个，环丙烷的CH₂)。
化合物JM19，来自EtOAc/己烷的橙色泛红针状体；熔点153-154℃；ESI MS m/z：465.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl₃，)δ：7.75，6.88(两个d，2H每个，J＝15.5Hz，H-1，2，6，7)，7.17(dd，2H，J＝1.6，8.5Hz，芳香5’-H)，)，7.07(d，2H，J＝1.6Hz，芳香2’-H)，6.96(d，2H，J＝8.5Hz，芳香6’-H)，5.90(s，2H，OH X 2)，3.96(s，6H，OCH₃X 2)，2.86，2.35(两个m，2H每个，C4-CH₂-CH₂-)。
化合物Q114，来自EtOAc/己烷的黄色结晶固体，熔点166-167℃。ESI MS m/z：337.0[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.63(d，2H，J＝16.1Hz，H-1，7)，7.53-7.50(m，4H，芳香H)，6.94-6.91(m，4H，芳香H)，6.50(d，2H，J＝16.1Hz，H-2，6)，5.79(s，1H，H-4)，3.85(s，6H，OCH₃)。
化合物Q115，来自EtOAc的黄色晶体，熔点142-143℃。ESI MS m/z：393.1[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.73(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.55-7.52(4H，芳香H)，6.99-6.92(6H，H-2，6和芳香H)，3.86(6H，-OCH₃)，2.55(t，1H，H-4)，1.53-1.40(m，6H，-CH₂CH₂CH₂-)，1.01(t，3H，-CH₃)。
合成化合物：JM4、JM20和Q116
化合物JM4、JM20、Q116在结构上共有(取代)-三芳基系统[三个(取代苯基)丙烯醛共轭]的性能。合成这些化合物的一个目的是研究多-苯基丙烯醛部分对抗-AR和抗-前列腺癌活性的作用。化合物JM4由3，4-二甲氧基苯甲醛与三乙酰基甲烷的缩合合成，如方案11中所示。
用与JM4相同的方法合成化合物JM20和Q116。
化合物JM20，红色粉末，熔点165-167℃；ESI MS m/z：455.2[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，d₆-DMSO，)δ：7.69(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.03(d，1H，J＝16.2Hz，C4侧链-COCH＝CH-)，7.62-7.34(m，6H，芳环H)，6.67(d，1H，J＝15.6Hz，C4侧链-COCH＝CH-)，6.90-6.72(m，4H，芳香H)，6.57(d，2H，J＝15.9Hz，H-2，6)。
化合物Q116，黄色无定型固体，熔点70-72℃。ESI MS m/z：497.1[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.78(d，2H，J＝15.3Hz，H-1，7)，7.60(d，1H，J＝15.6Hz，C4侧链-COCH＝CH-)，7.54-7.51(2H，芳环H)，7.47-7.44(4H，芳环H)，6.97(d，1H，J＝15.6Hz，C4侧链-COCH＝CH-)，6.92-6.85(6H，芳香H)，6.71(d，2H，J＝15.3Hz，H-2，6)，3.84-3.82(9H，-OCH₃)。
方案11

合成化合物：JM5
结构上含有四个(取代苯基)丙烯醛部分的化合物JM5通过ASC-J9(18.9g)与溴甲基醋酸酯(10.0g)在无水丙酮(250mL)中在碳酸钠(5.0g)存在下的反应合成(方案12)。加热到回流80h后，过滤固体，并将滤液在真空下浓缩。使残留物经受反复的硅胶柱层析(正己烷∶乙酸乙酯＝2∶1)以提供期望的产物，并去除起始物料ASC-J9(15g)。将获得的产 物溶解在0.5mL的乙酸乙酯中并伴随搅拌将其逐滴加入5mL的己烷。过滤和真空干燥后，给出作为黄色粉末的化合物JM5(877mg)。化合物JM5也通过ASC-J9与溴甲基甲醚和碳酸钠在无水丙酮中的反应合成，该反应在较短时间内且具有较高收率。
方案12

以下示出了对化合物JM5的分析数据。
黄色无定型的。熔点111-114℃。ESI MS m/z：804.87[M+H]⁺；在500MHz Varian，(CDCl3)上的¹H和¹³C NMR数据在表1中列出。
表1.ASC-JM5的¹H和¹³C NMR波谱数据




*甲氧基质子的1H数据
合成化合物：Q110和Q111
为了研究共轭桥的长度对AR活性的贡献，合成并在方案13中说明了具有四个共轭双键连接基团的化合物Q110和具有五个共轭双键连接基团的化合物Q111。从1，2-二甲氧基-4-丙基-苯开始合成化合物Q110。向3-(3，4-二甲氧基苯基)丙烷的无水二烷溶液中加入DDQ(3.1eq.)和催化量的乙酸。对混合物超声处理2h，用TLC监测。反应完成后，过滤出固体，并浓缩滤液。将残留物溶解在EtOAc中，并用水、2％NaHCO₃和盐水洗。用Na₂SO₄干燥有机萃取物，并浓缩以产生作为黄褐色固体的粗产物，使用中性氧化铝柱层析纯化该粗产物，并用己烷-乙酸乙酯混合物洗脱以产生淡黄色固体，收率为60％的3，4-二甲氧基肉桂醛(B.P.Joshi等人，Tetrahedron，62，2590-2593，2006)。在40℃下搅拌2，4-戊二酮(3eq.)和EtOAc中的B₂O₃(1eq.)溶液0.5h，加入3，4-二甲氧基肉桂醛(1eq.)和三丁基硼烷(1eq.)。在40℃下搅拌所得的反应混合物0.5h。在该温度下逐滴加入EtOAc中的丁胺(1.2eq.)，并在40℃下搅拌16h。向红色反应混合物中加入1％HCl aq，并搅拌该混合物至60℃1h。冷却到rt后，分离出水的部分，并用水洗有机部分至pH～7，并用Na₂SO₄干燥。粗产物通过硅胶急骤柱层析纯化以得到作为米白色固体的中间产物8-(3，4-二甲氧基-苯基)-4-羟基-辛-3，5，7-三烯-2-酮。在70℃下搅拌EtOAc中的该中间体(1eq.)和B₂O₃(0，7eq.)的溶液0.5h。加入3，4-二甲氧基苯甲醛(1eq.)和三丁基硼烷(trubutyl borane)(1eq.)，并在70℃下搅拌反应混合物0.5h。逐滴加入EtOAc中的哌啶(1.2eq.)，并在88-90℃下搅拌反应混合物1h。冷却至60℃后，加入1％HCl aq，并在60℃下搅拌该混合物0.5h。通过随后进行以上描述的过程，处理反应混合物，并且粗产物通过硅胶柱层析纯化以提供作为红色固体的期望的产物Q110。无定型的，熔点65-68℃， ESI MS m/z：423.1[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.64-7.58(d，2H，H-1和2)，7.16-7.02(4H，芳环H和反式双键H)，6.90-6.82(4H，芳环H)，6.53-6.48(1H，反式双键H)，6.18-6.12(1H，反式双键H)，5.75(s，1H，H-4)，3.94-3.92(12H，-OCH₃)。
化合物Q111通过8-(3，4-二甲氧基-苯基)-4-羟基-辛-3，5，7-三烯-2-酮(3)与在合成Q110中描述的3，4-二甲氧基肉桂醛(2)的反应来合成(方案13)。提供了红色无定型的固体，熔点187-9℃。ESI MS m/z：449.1[M+H]⁺；¹H NMR(300MHz，CDCl3)δ：7.49-7.40(d，2H，H-1和11)，7.06-7.02(4H，芳环H)，6.87-6.81(2H，芳环H和反式双键H的4H)，6.17-6.12(2H，反式双键H)，5.75(s，1H，H-4)，3.94-3.92(12H，-OCH₃)。
方案13

实施例2：检测具有至少一个(3，4-烷氧基或羟基取代苯基)-丙烯醛部分的化合物对人类雄性激素受体(AR)和雄性激素/AR-介导的活性的生物学作用
测试了代表性的ASC化合物和单体对于阻碍雄性激素/AR-诱导的功能的它们的活性。在研究中应用了使用人类前列腺癌细胞LNCaP或CWR22Rv1的细胞生长试验。功能AR蛋白在两种癌细胞系中表达；而 LNCaP细胞的生长是依赖DHT的，但是源自复发的激素难治性肿瘤CWR22Rv1细胞的生长是不依赖DHT的。另外，蛋白质印迹分析通过在前列腺癌细胞中测试单体和一些有代表性的新化合物来进行以证明具有至少一个(4-羟基-3-甲氧基-苯基)-丙烯醛部分的化合物能够减小AR蛋白表达水平和抑制癌细胞体外生长。
使用人类前列腺癌细胞系LNCaP和CWR22Rv1的体外细胞生长试验
本发明中应用MTT细胞增殖试验以检测化合物压制或抑制前列腺癌细胞生长的能力。MTT试验，其为广泛用于检测培养细胞增殖的方法，并且其依赖通过线粒体脱氢酶(所有活的细胞都具有)的无色底物到减少的四唑的转化，并且之前已经被证明(Su等人，1999)评估各种组织培养细胞的生长。简单来说，将悬浮在完全培养基中的1×10³个LNCaP或CWR22Rv1细胞铺板在96-孔Microtest III组织培养板(Falcon，NJ)的每一个孔中。两天后，用含有剥夺10％炭/葡聚糖的FBS(剥夺激素的胎牛血清)的RPMI-1640培养液代替该培养液。将处于指示浓度的具有或不具有1nM DHT的测试化合物加入到培养液中，并在温育箱(处于37℃)中培养细胞5天。在收获前2小时，加入1/10容积的MTT底物溶液(PBS中5mg/ml)至每一个孔中的细胞中。温育2小时后，将板离心(10min，1,000rpm)，并小心地从每一个孔移除上清液。将100μl的裂解缓冲液(50％二甲基甲酰胺、5％十二烷基硫酸钠、0.35M乙酸和50mM HCl)加入到每一个孔中以溶解每一个孔中的细胞和溶解四唑。每一个孔的酶活性的相对量使用Bio-RAD BenchMark微量培养板读数仪基于在450nm波长的吸光度读数测量。源自MTT试验的数据也通过平行设置的单独板上的实际细胞计数和细胞形态证实。来自此平行板的数据证明了酶活性的量和孔中活细胞的数量之间的正向关系。
前列腺癌细胞中的AR蛋白表达水平的蛋白质印迹分析
采用广泛使用的蛋白质印迹分析以测量AR蛋白表达水平。人类前列腺癌细胞LNCaP和CWR22Rv1二者均表达高水平的AR蛋白，并用于该研究中。在本发明中，在蛋白质印迹试验中测试了有代表性的ASC化合物以评估它们减少AR表达的活性；并且该试验在二氢睾酮(DHT，1nM)存在或不存在下进行。在用测试化合物温育细胞指定时间后，根据生物化学领域已知的蛋白质印迹技术收获和溶解该细胞。蛋白质印迹分析方法的细节以前已经公开(Su等人，1999)。简单地说，在2x十二烷基硫酸钠/聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS/PAGE)加样缓冲液或用10μg/ml的苄脒、10μg/ml的胰蛋白酶抑制剂和1mM的苯甲基磺酰氟强化的放射免疫沉淀试验(RIPA)裂解缓冲液中收获细胞。来自每一个细胞溶胞产物的总蛋白(大约40g)的样品通过SDS/PAGE凝胶上的电泳分离。通过电泳分离后，蛋白被从凝胶转移到硝酸纤维素膜，随后是标准程序。随后用10％的脱脂牛奶在用0.1％Tween-20(PBST)补充的磷酸盐-缓冲盐水中温育该膜1小时，并且然后在4℃用初级人类AR-特异性抗体(从BD-PharMingen购买)温育过夜。温育后，用PBST缓冲液洗涤该膜三次；每次10min；然后加入碱性磷酸酶-共轭二级抗体，并在室温下温育1小时。温育二级抗体后，再次用PBST洗涤该膜，并且通过向该膜添加碱性磷酸酶底物、溴氯吲哚基磷酸盐和硝基蓝四唑，使该膜中的AR蛋白信号可见。为了保证分析每个样品的等量的蛋白质，一部分该膜用持家蛋白β-肌动蛋白(Santa Cruz Biotechnology)的特异性抗体着色，并且肌动蛋白信号用以上描述的二级抗体显示。使用光密度计测量蛋白信号强度(如膜上的色带所示)，并使用NIH Image J软件(NIH 1.33)分析。AR蛋白的量通过归一化AR的量为每个样品中β-肌动蛋白的量来计算，并且以相对量表示数据。
使用环己酰亚胺追踪试验方法检测AR降解：
前列腺癌细胞中的AR蛋白“降解”通过使用环己酰亚胺(蛋白质合成抑制剂)追踪试验方法来测量。简单来说，用处于指定浓度的测试ASC化合物温育LNCaP细胞24小时。随后，将浓度为15μg/ml的环己酰亚 胺加入到细胞中以阻碍新蛋白质合成。温育后，在指定的时间期间收获细胞，并且如以上描述，使用蛋白质印迹分析来分析所得的AR蛋白水平的变化。
实施例3：制备具有(1E，6E)-1，7-双-(取代苯基)-4，4-二取代的庚-1，6-二烯-3，5-二酮或(1E，10E)-1，11-双(取代苯基)-6，6-二取代的十一-1，3，8，10-四烯-5，7-二酮结构骨架的化合物和衍生物
化学合成：
使用没有校准的Fisher-John熔点装置测定熔点。质子核磁共振(¹H NMR）和¹³C NMR谱在Inova 400光谱仪上用四甲基硅烷作为内标测量。化学位移以δ(ppm)报告。质谱(MS)在Shimadzu LCMS-2010上获得。CombiFlash色谱系统在用于一般分离和提纯的Grace硅胶柱上进行。使用硅胶板(Kieselgel 60，F254，1.00mm)的制备型薄层色谱也用于分离和提纯。预涂硅胶板(Kieselgel 60，F254，0.25mm)用于薄层色谱(TLC)分析。所有试剂和溶剂从Aldrich、Fisher、VWR或其他供应商购买。
合成化合物1-8、22、24、28、29、31
使用方案14中图解的一般过程合成化合物1-8、22。制备化合物2的实例如下所述。向无水丙酮(50mL)中的JM17(5.0g)溶液中加入甲基碘(2.5ml)和K₂CO₃(5.0g)。回流反应混合物，并搅拌2天，用TLC监测。将反应混合物冷却，并过滤以除去无机粉末，然后真空蒸发。获得的粗产物通过硅胶柱层析、用己烷和EtOAc混合物纯化以得到期望的产物。
化合物24通过22与三甲基氢氧化锡(10eq.)在1，2-二氯甲烷中的水解来合成(方案1)。将该混合物在80℃加热8h，或用TLC监测。去除溶剂后，将残留物溶解在EtOAc中，并用5％HC1aq.(×3)洗。随后用盐水(×2)洗有机部分，用Na₂SO₄干燥，过滤和浓缩。获得的粗产 物通过制备型TLC纯化以产生期望的产物。
方案14

化合物1，淡黄色无定型的。ESI MS m/z：465.2[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.66(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.10(dd，2H，J＝2.0，8.4Hz，芳香H-6’)，6.97(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.81(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，6.63(d，2H，J＝15.6Hz，H-2，6)，3.87(12H，OCH₃X 4)，1.97(d，2H，J＝6.4Hz，CH₂-C4)，1.53(s，3H，CH₃-C4)，0.6-0.03(m，环丙烷的5H)。
化合物2，白黄色晶体，mp 161-162℃。ESI MS m/z：479.2[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.64(d，2H，J＝15.2Hz，H-1，7)，7.09(dd，2H，J＝2.6，8.4Hz，芳香H-6’)，6.96(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.80(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，6.59(d，2H，J＝15.2Hz，H-2，6)，3.87(12H，OCH₃X 4)，3.0-1.6(m，环丁烷的7H)，1.39(s，3H，CH₃-C4)，1.22(t，2H，J＝6.9Hz，CH₂-C4)。
化合物4，淡黄色无定型的。ESI MS m/z：493.2[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.64(d，2H，J＝15.2Hz，H-1，7)，7.09(dd，2H，J＝ 2.6，8.4Hz，芳香H-6’)，6.96(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.80(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，6.59(d，2H，J＝15.2Hz，H-2，6)，3.87(12H，OCH₃X 4)，3.0-1.6(m，环戊烷的7H)，1.39(s，3H，CH₃-C4)，1.22(t，2H，J＝6.9Hz，CH₂-C4)。
化合物5，淡黄色晶体，mp 128-129℃。ESI MS m/z：507.2[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.63(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.10(dd，2H，J＝2.6，8.4Hz，芳香H-6’)，6.97(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.81(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，6.65(d，2H，J＝15.6Hz，H-2，6)，3.87(12H，OCH₃X 4)，1.97(d，2H，J＝5.6Hz，CH₂-C4)，1.65-0.85(m，环己烷的11H)，1.46(s，3H，CH₃-C4)。
化合物6，灰白色晶体，ESI MS m/z：524.3[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.63(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.09(dd，2H，J＝2.0，8.0Hz，芳香H-6’)，6.98(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.80(d，2H，J＝15.6Hz，H-2，6)，6.80(d，2H，J＝8.0Hz，芳香H-5’)，3.85(12H，OCH₃X4)，3.39-3.28(m，4H，-N(CH₂CH₃)₂，3.12(s，2H，C4-CH₂CO)，1.62(s，3H，CH₃-C4)，1.20(t，3H，J＝7.2Hz，-N(CH₂CH₃)₂)，1.04(t，3H，J＝7.2Hz，-N(CH₂CH₃)₂。
化合物7，灰白色晶体，ESI MS m/z：496.4[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.63(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.09(dd，2H，J＝8.4Hz，芳香H-6’)，6.97(s，2H，芳香H-2’)，6.81(d，2H，J＝15.6Hz，H-2，6)，6.80(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，3.85(12H，OCH₃X 4)，3.17(s，2H，C4-CH₂CO)，3.06(s，3H，-N(CH₃)₂)，2.88(s，3H，-N(CH₃)₂)，1.64(s，3H，CH₃-C4)。
化合物8，浅黄色晶体，ESI MS m/z：467.2[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.64(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.09(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-6’)，6.98(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.80(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，6.63(d，2H，J＝15.6Hz，H-2，6)，3.86(12H，OCH₃X 4)，2.00-1.96(m，2H，-CH₂(CH₂)₂CH₃)，1.42(s，3H，CH₃-C4)，1.34-1.27(m，2H，CH₂(CH₂)₂CH₃)，1.16-1.10(m，2H，-CH₂(CH₂)₂CH₃)，0.85(t，3H，，J＝6.8Hz，-CH₂(CH₂)₂CH₃)。
化合物22，黄色无定型的，ESI MS m/z：511.2[M+H]⁺，533.2[M+Na]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.65(d，2H，J＝15.2Hz，H-1，7)， 7.09(dd，2H，J＝2.0，8.0，Hz，芳香H-6’)，6.96(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.79(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，6.61(d，2H，J＝15.2Hz，H-2，6)，4.10-4.05(m，2H，OCH₂CH₃)，3.85(s，12H，OCH₃X 4)，2.36-2.19(m，4H，C4-CH₂CH₂CO-)，1.42(s，3H，CH₃-C4)，1.20(t，3H，J＝7.6Hz，OCH₂CH₃)。
化合物24，黄色无定型的，ESI MS m/z：483.18[M+H]⁺，505.15[M+Na]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.66(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.09(dd，2H，J＝1.6，8.0Hz，芳香H-6’)，6.97(d，2H，J＝1.6Hz，芳香H-2’)，6.80(d，2H，J＝8.0Hz，芳香H-5’)，6.61(d，2H，J＝15.6Hz，H-2，6)，3.86(s，12H，OCH₃X 4)，2.36-2.24(m，4H，C4-CH₂CH₂CO-)，1.43(s，3H，CH₃-C4)。
化合物28通过使用碳酸钾将Q1230用在丙酮中的甲基碘甲基化来合成(方案1)，如以上所述。28用在二氯甲烷中的三溴化硼(3eq.)去甲基化和通过combiflash柱层析的提纯产生化合物29。在三乙胺存在下用乙基磺酰氯(3eq.)处理29产生化合物31。
化合物28，浅黄色无定型的，ESI MS m/z：419.3[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.65(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.24(t，2H，J＝8.0Hz，芳香H)，7.07(d，2H，J＝7.6Hz，芳香H)，6.98(d，2H，J＝2.4Hz，芳香H)，6.89(dd，2H，J＝2.8，8.4Hz，H-2，6)，6.71(d，2H，J＝15.6Hz，H-2，6)，3.78(s，6H，OCH₃X 2)，2.28-2.21(m，1H，环丁烷)，2.13(d，2H，11.6Hz，C4-CH₂)，1.99-1.93(m，2H，环丁烷)，1.80-1.60(m，4H，环丁烷)，1.39(s，3H，C4-CH₃)。
化合物29，黄色无定型的，ESI MS m/z：391.3[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.62(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.19(t，2H，J＝8.0Hz，芳香H)，7.08-6.96(m，4H，芳香H)，6.89-6.83(m，2H，芳香H)，6.89(dd，2H，J＝2.8，8.4Hz，H-2，6)，6.70(d，2H，J＝15.6Hz，H-2，6)，2.27-2.19(m，1H，环丁烷)，2.13-2.11(m，2H，C4-CH₂)，1.97-1.91(m，2H，环丁烷)，1.79-1.54(m，4H，环丁烷)，1.39(s，3H，C4-CH₃)。
化合物31，浅黄色无定型的，ESI MS m/z：575.4[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.68(d，1H，J＝15.6Hz，H-1)，7.64(d，1H，J＝15.6Hz，H-7)，7.51-7.35(m，6H，芳香-H，)，7.27(d，br，2H，J＝8.0Hz，芳香H)，7.11(d，1H，J＝15.6Hz，H-2)，6.73(d，1H，J＝15.6Hz，H-6)， 3.34-3.25(m，4H，OSO₂CH₂CH₃x 2)，2.28-2.21(m，1H，环丁烷)，2.17(m，2H，C4-CH₂)，1.99-1.93(m，2H，环丁烷)，1.82-1.60(m，4H，环丁烷)，1.57-1.51(m，6H，OSO₂CH₂CH₃x 2)，1.40(s，3H，C4-CH₃)。
合成化合物9-12
使用方案15中图解的一般过程合成化合物9-12。
将氯乙酸(2eq.)溶解在二氯甲烷中，向溶液中加入二氯甲烷中的DCC(1eq.)溶液。在rt下搅拌该混合物10min，并缓慢加二氯甲烷中的入DMAP(0.5eq)和适当的胺的溶液。在rt下允许将反应混合物搅拌过夜，或用TLC监测。过滤固体，并用水、6N HCl、6N NaOH和水洗滤液。用Na₂SO₄干燥并蒸发以除去溶剂后，获得了期望的酰胺产物，不进行进一步提纯。在rt下酰胺(1eq.)与2，4-戊二酮(1.5eq.)在乙腈中在DBU(1eq.)存在下的反应产生了相应的产物3-乙酰基-4-氧戊酰胺，如方案2中图解的。然后在B₃O₂(0.5eq.)、(BuO)₃B(2eq.)和NH₂Bu(0.4eq.)存在下将所得的产物(1eq.)与3，4-二甲氧基苯甲醛(2eq.)在DMA中混合，并允许在65℃下将混合物搅拌3-5h，用TLC监测。反应完成时加入1％HCl水溶液，并在65℃下搅拌所得的混合物1-2小时。然后用乙酸乙酯稀释该混合物，并用水萃取两次或直到pH～5。用Na₂SO4干燥乙酸乙酯萃取物，过滤和浓缩。粗产物通过从乙酸乙酯结晶或combiflash柱层析来纯化以产生期望的产物，诸如化合物9或10。通过按照方案1中描述的步骤进行9或10的反应产生化合物11和12。
方案15

化合物9，浅黄色结晶固体，ESI MS m/z：524.5[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.64(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.11(dd，2H，J＝2.0，8.4Hz，芳香H-6’)，7.02(d，2H，J＝1.6Hz，芳香H-2’)，6.82(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，6.76(d，2H，J＝15.6Hz，H-2，6)，3.87(s，6H，OCH₃X 2)，3.84(s，6H，OCH₃X 2)，3.70-3.65(m，4H，吗啉-H)，3.63-3.59(m，4H，吗啉-H)，3.57-3.52(m，1H，C4-H)，3.00(d，2H，J＝6.8Hz，C4-CH₂CO)。
化合物10，橘红色结晶固体，ESI MS m/z：551.6[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.68(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.43(d，1H，J＝4.0Hz，噻唑-H)，7.15(dd，2H，J＝2.0，8.4Hz，芳香H-6’)，7.01(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.90(d，1H，J＝4.0Hz，噻唑-H)，6.83(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，6.78(d，2H，J＝15.6Hz，H-2，6)，3.87(s，6H，OCH₃X 2)，3.85(s，6H，OCH₃X 2)，2.98(s，2H，C4-CH₂CO)。
化合物11，浅黄色结晶固体，ESI MS m/z：538.6[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.65(d，2H，J＝15.2Hz，H-1，7)，7.09(dd，2H，J＝2.0，8.4Hz，芳香H-6’)，6.98(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.80(d，2H，J＝15.2Hz，H-2，6)，6.80(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，3.87(s，6H，OCH₃X 2)，3.82(s，6H，OCH₃X 2)，3.68-3.60(m，4H，吗啉-H)，3.56-3.53(m，4H，吗啉-H)，3.15(s，2H，C4-CH₂CO)，1.64(s，3H，CH₃-C4)。
化合物12，浅黄色结晶固体，ESI MS m/z：551.6[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.69(d，2H，J＝15.2Hz，H-1，7)，7.45(d，1H，J＝4.0Hz，噻唑-H)，7.12(dd，2H，J＝2.0，8.4Hz，芳香H-6’)，6.99(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.93(d，1H，J＝4.0Hz，噻唑-H)，6.81(d，2H，J＝15.2Hz，H-2，6)，6.81(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，3.87(s，6H，OCH₃X2)，3.85(s，6H，OCH₃X 2)，3.46(s，2H，C4-CH₂CO)，1.72(s，3H，CH₃-C4)。
合成化合物13-19、23、25、27
使用如方案16中图解的一般方法合成化合物13-19、23。制备化合物14的实例描述如下。向乙腈(20mL)中的JM17(2.2g)溶液中加入N-氟二苯磺酰亚胺(1.5g)。在室温搅拌反应混合物1天，用TLC监测。 真空蒸发反应混合物，并通过硅胶柱层析用己烷和EtOAc混合物洗脱来纯化获得的粗产物以得到期望的产物。
通过由22制备24的方法转化化合物23来制备化合物25。
化合物27通过从4-羟基-3-甲氧基苯甲醛开始，通过普通MOM保护(氯-甲氧基甲烷)和缩合反应来合成以制备Q15M。Q15M的氟化作用，在rt下使所得的化合物(0.06mM)与溴化锌(znBr)(1.5eq.)和丙硫醇(3eq.)在二氯甲烷中经受去保护反应30min。在该时间期间，产生了红色溶液。加入二氯甲烷，并在冰浴中搅拌溶液10min。加入饱和NaHCO₃(0.3-0.5mL)，并在寒冷中搅拌该混合物15min。通过硅藻土过滤后，用CH₂Cl₂萃取(×2)，并通过combiflash柱层析提纯，获得期望的产物。
方案16

化合物13，淡黄色晶体，mp 104-105℃。ESI MS m/z：469.2[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.72(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.18(dd，2H，J＝2.6，8.4Hz，芳香H-6’)，7.09(dd，2H，J_H-F＝2.4，15.6Hz，H-2，6)，7.08(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.84(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，3.91，3.90(两个，6H每个，OCH₃X 4)，2.20(dd，2H，J＝7.0，24.4Hz，CH₂-C4)，0.8-0.1(m，环丙烷的5H)。
化合物14，淡黄色晶体，mp 98-100℃。ESI MS m/z：483.2[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.70(d，2H，J＝16Hz，H-1，7)，7.17(dd，2H，J＝2.6，8.4Hz，芳香H-6’)，7.08(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，7.05(dd，2H，J_H-F＝2.8，16Hz，H-2，6)，6.84(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，3.91，3.89(两个，6H每个，OCH₃X 4)，2.5-1.7(m，甲基环丁烷的9H)。
化合物15，淡黄色无定型的。ESI MS m/z：497.2[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.70(d，2H，J＝16Hz，H-1，7)，7.17(dd，2H，J＝2.6，8.4Hz，芳香H-6’)，7.08(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，7.05(dd，2H，J_H-F＝2.8，16Hz，H-2，6)，6.84(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，3.91，3.89(两个，6H每个，OCH₃X 4)，2.5-1.7(m，甲基环戊烷的9H)。
化合物16，淡黄色无定型的。ESI MS m/z：511.2[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.71(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.17(dd，2H，J＝2.0，8.4Hz，芳香H-6’)，7.09(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，7.08(dd，2H，J_H-F＝2.0，16Hz，H-2，6)，6.84(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，3.91，3.89(两个，6H每个，OCH₃X 4)，2.19(dd，2H，J＝6.4，24.8Hz，CH₂-C4)，1.8-0.9(m，环己烷的11H)。
化合物17，灰白色晶体，ESI MS m/z：528.5[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.73(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.24(dd，2H，J＝2.4，15.6Hz，H-2，6)，7.19(dd，2H，J＝1.6，8.4Hz，芳香H-6’)，7.12(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.85(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，3.91(s，12H，OCH₃X 4)，3.48(d，2H，J＝24.4Hz，C4-CH₂CO)，3.40-3.29(m，4H，-N(CH₂CH₃)₂，1.21(t，3H，J＝7.2Hz，-N(CH₂CH₃)₂)，1.10(t，3H，J＝7.2Hz，-N(CH₂CH₃)₂。
化合物18，灰白色晶体，ESI MS m/z：500.4[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.71(d，2H，J＝15.2Hz，H-1，7)，7.20(dd，2H，J＝2.4，15.2Hz，H-2，6)，7.17(d，2H，J＝8.0Hz，芳香H-6’)，7.11(s，2H，芳香H-2’)，6.83(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，3.89(s，12H，OCH₃X 4)，3.47(d，2H，J＝25.2Hz，C4-CH₂CO)，3.01(s，3H，-N(CH₃)₂)，2.92(s，3H，-N(CH₃)₂)。
化合物19，浅黄色晶体，ESI MS m/z：471.2[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.72(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.17(dd，2H，J＝1.6，8.4 Hz，芳香H-6’)，7.08(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，7.06(dd，2H，J＝2.8，15.6Hz，H-2，6)，6.84(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，3.91(s，6H，OCH₃X 2)，3.90(s，6H，OCH₃X 2)，2.29-2.19(m，2H，-CH₂(CH₂)₂CH₃)，1.40-1.30(m，4H，CH₂(CH₂)₂CH₃)，0.88(t，3H，J＝6.8Hz，-CH₂(CH₂)₂CH₃)。
化合物23，橘黄色无定型的，ESI MS m/z：515.17[M+H]⁺，537.15[M+Na]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.73(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.17(dd，2H，J＝2.0，8.4，Hz，芳香H-6’)，7.07(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，7.03(dd，2H，J＝2.8，16.8Hz，H-2，6)，6.84(d，2H，J＝8.0Hz，芳香H-5’)，4.13-4.06(m，2H，OCH₂CH₃)，3.90(s，6H，OCH₃X 2)，3.89(s，6H，OCH₃X 2)，2.65-2.55(m，2H，C4-CH₂CH₂CO-)，2.43-2.39(m，2H，C4-CH₂CH₂CO-)，1.21(t，3H，J＝6.4Hz，OCH₂CH₃)。
化合物25，黄色无定型的，ESI MS m/z：487.17[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.74(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.16(d，2H，J＝8.4，Hz，芳香H-6’)，7.07(s，2H，芳香H-2’)，7.02(d，2H，J＝16.8Hz，H-2，6)，6.83(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，3.90(s，6H，OCH₃X 2)，3.89(s，6H，OCH₃X 2)，2.64-2.48(m，4H，C4-CH₂CH₂CO-)。
化合物27，橘黄色无定型的，ESI MS m/z：487.28[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.72(d，2H，J＝16.0Hz，H-1，7)，7.15(dd，2H，J＝1.6，8.4，Hz，芳香H-6’)，7.06(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，7.01(dd，2H，J＝2.4，15.6Hz，H-2，6)，6.89(d，2H，J＝8.0Hz，芳香H-5’)，5.95(s，2H，苯酚OH)，4.13-4.07(m，2H，OCH₂CH₃)，3.92(s，6H，OCH₃X 2)，2.62-2.55(m，2H，C4-CH₂CH₂CO-)，2.43-2.39(m，2H，C4-CH₂CH₂CO-)，1.21(t，3H，J＝7.2Hz，OCH₂CH₃)。
合成化合物20-21
使用如方案17中图解的方法合成化合物20和21。向THF中的Q49或Q77(1eq.)的溶液中加入Et₃N(1.5eq.)。在冰浴中冷却混合物，并缓慢加入THF中的三氟甲烷磺酰氯(1eq.)。允许在rt下搅拌(1h)反应混合物，然后加热到50℃5小时，或用TLC监测。通过加入冰水和乙酸乙酯淬火该反应。用水随后用乙酸乙酯萃取后，粗产物通过 combiflash柱层析用二氯甲烷和乙酸乙酯洗脱来纯化，以得到期望的产物。
方案17

化合物20，灰白色晶体，ESI MS m/z：545.5[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.73(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.15(d，2H，J＝15.6Hz，H-2，6)，7.15-7.13(m，2H，芳香H-6’)，7.04(br，2H，芳香H-2’)，6.82(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，3.88(s，6H，OCH₃X 2)，3.82(s，6H，OCH₃X2)，3.60(s，2H，C4-CH₂CO)，3.38-3.33(m，4H，-N(CH₂CH₃)₂，1.22(t，3H，J＝6.8Hz，-N(CH₂CH₃)₂)，1.08(t，3H，J＝6.8Hz，-N(CH₂CH₃)₂。
化合物21，灰白色晶体，ESI MS m/z：516.4[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.69(d，2H，J＝15.6Hz，H-1，7)，7.18(d，2H，J＝15.6Hz，H-2，6)，7.14(dd，2H，J＝3.6，10.0Hz，芳香H-6’)，7.04(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.82(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H-5’)，3.89(s，6H，OCH₃X 2)，3.82(s，6H，OCH₃X 2)，3.62(s，2H，C4-CH₂CO)，3.07(s，3H，-N(CH₃)₂)，2.92(s，3H，-N(CH₃)₂)。
合成化合物26
通过甲基化和去保护由Q15M合成化合物26(方案18)。该过程如以上描述制备化合物27。ESI MS m/z：483.2[M+H]⁺，506.2[M+Na]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.65(d，2H，J＝16.0Hz，H-1，7)，7.05(dd，2H，J＝2.0，8.4，Hz，芳香H-6’)，6.96(d，2H，J＝2.0Hz，芳香H-2’)，6.85(d，2H，J＝8.0Hz，芳香H-5’)，6.59(d，2H，J＝16.0Hz，H-2，6)，5.89(s，2H，苯酚OH)，4.11-4.05(m，2H，OCH₂CH₃)，3.88(s，6H，OCH₃X 2)，2.38-2.19(m，4H，C4-CH₂CH₂CO-)，1.42(s，3H，CH₃-C4)，1.21(t，3H，J＝7.2Hz，OCH₂CH₃)。
方案18

合成化合物30
通过U.Peterson(Liebigs Ann.Chem.1985，1557-1569)描述的方法从3-甲氧基苯甲醛的反应开始，以给出化合物Q1，合成化合物30，3-((1E，6E)-4-(环丁基甲基)-7-(3-甲氧基苯基)-4-甲基-3，5-二氧庚-1，6-二烯-1-基)苯基乙磺酸酯(方案19)。通过以上描述的方法在C4位置甲基化以产生化合物Q2。通过在80℃在50％HOAc中搅拌Q2 5小时去除保护基，随后用EtOAc萃取并通过PTLC提纯以得到Q3。如上所述通过引入乙磺酰基(与3eq.的乙磺酰氯和三乙胺在CH₂Cl₂中反应3小时)获得期望的产物30。浅黄色无定型的，ESI MS m/z：497.4[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.66(d，1H，J＝15.6Hz，H-1)，7.63(d，1H，J＝15.6Hz，H-7)，7.43(d，br，1H，J＝7.6Hz，芳香H)，7.37(t，1H，J＝8.0Hz，芳香H)，7.34(t，1H，J＝1.6Hz，芳香-H，)，7.28-7.23(m，3H，芳香H)，7.09(d，br，1H，J＝7.6Hz，芳香H)，6.99(t，1H，J＝1.6Hz，芳香H)，6.90(dd，1H，J＝2.4，8.0Hz，芳香H)，6.73(d，1H，J＝15.6Hz，H-2)，6.71(d，1H，J＝15.6Hz，H-6)，3.79(s，3H，OCH₃)，3.27(q，2H，J＝7.2，Hz，OSO₂CH₂CH₃)，2.28-2.18(m，1H，环丁烷)，2.14(s，1H，C4-CH₂)，2.12(d，1H，J＝2.4，Hz，C4-CH₂)，1.99-1.92(m，2H，环丁烷)，1.81-1.61(m，4H，环丁烷)，1.52(t，3H，OSO₂CH₂CH₃)，1.40(s，3H，C4-CH₃)。
方案19

合成化合物32-33
从1，2-二甲氧基-4-丙基苯开始通过与1，4-二烷中的DDQ在超声下反应来合成化合物32-33(方案7)。使所得的醛(＞70％收率)进一步与适当的3-取代二酮反应(U.Peterson：Liebigs Ann.Chem.1985，1557-1569)以给出化合物JM49Z6和JM17Z6。如以上所述的用甲基碘(1.2eq.)在回流丙酮中甲基化JM49Z6产生化合物32。如上所述在r.t下JM17Z6与N-氟二苯磺酰亚胺在乙腈中的反应产生期望的产物33。
化合物32，橘黄色无定型的，ESI MS m/z：576.6[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.46(d，1H，J＝15.0Hz，H-3)，7.43(d，1H，J＝15.0Hz，H-9)，6.99-6.95(m，4H，芳香H)，6.86(d，2H，J＝15.2Hz，H-1，11)，6.80(d，2H，J＝8.0Hz，芳香H)，6.72(d，1H，J＝15.2Hz，H-2)，6.69(d，1H，J＝15.2Hz，H-10)，6.45(d，2H，J＝15.0Hz，H-4，8)，3.84(12H，OCH₃X 4)，3.36-3.29(m，4H，-N(CH₂CH₃)₂，3.09(s，2H，C4-CH₂CO)，1.54(s，3H，CH₃-C4)，1.23-1.13(m，6H，-N(CH₂CH₃)₂).
化合物33，橘黄色无定型的，ESI MS m/z：535.6[M+H]⁺.¹H NMR(400MHz，CDCl₃)δ：7.51(d，1H，J＝14.8Hz，H-3)，7.49(d，1H，J＝14.8Hz，H-9)，7.03-6.98(m，4H，芳香H)，6.94(d，2H，J＝15.2Hz，H-1，11)，6.83(d，2H，J＝8.4Hz，芳香H)，6.79(d，1H，J＝15.2Hz，H-2)，6.76(d，1H，J＝15.2Hz，H-10)，6.68(dd，2H，J＝2.4，14.8Hz，H-4，8)，3.90(6H，OCH₃X 2)，3.88(6H，OCH₃X 2)，2.47-2.38(m，1H，环丁烷)，2.31(d，1H，J＝7.2，C4-CH₂)，2.25(d，1H，J＝7.2，Hz，C4-CH₂)，2.00-1.85(m，2H，环 丁烷)，1.83-1.64(m，4H，环丁烷)。
方案20

实施例4：检测具有(1E，6E)-1，7-双-(取代苯基)-4，4-二取代的庚-1，6-二烯-3，5-二酮或(1E，10E)-1，11-双(取代苯基)-6，6-二取代的十一-1，3，8，10-四烯-5，7-二酮结构骨架的化合物和衍生物的生物活性
在本申请中以上已经描述了本实施例中使用的材料和方法，诸如但不限于实施例2。以下试验和实验的结果在表2中提供。
对于AR减少，指示的化合物诱导癌细胞中AR蛋白表达，如在温育后24或48小时后蛋白质印迹中测定的。示出了诱导AR表达50％减少的每种化合物的剂量。
对于抑制肿瘤细胞体外生长，在测试化合物存在下细胞生长5天，并且细胞生长通过标准MTT试验测试。示出了诱导50％生长抑制的每种化合物的剂量。
表2：具有(1E，6E)-1，7-双-(3，4-二甲氧基苯基)-4，4-二取代的庚-1，6-二烯-3，5-二酮或(1E，10E)-1，11-双(取代苯基)-6，6-二取代的十一-1，3，8，10-四烯-5，7-二酮结构骨架的化合物和衍生物的生物活性

ND＝未做实验
实施例5：改性化合物的改进的稳定性
如表3到表5所示，化合物JM49和JM77，其在两个苯环的连接基团上具有一个烯醇和一个酮基，在37℃下在下列条件下是化学不稳定的：(i)酸性条件(0.1N HCl)；(ii)大鼠血浆中和(iii)在人类血浆中。在这些条件下，对于化合物JM49和JM77，在一段温育时间内它们的相对浓度迅速减小，即，在酸性条件下早至1小时(表3中的JM77)。然而，根据式VI的化学衍生物，其中JM49被改性为化合物6并且JM77被改性为化合物7，这些新衍生物(化合物6和化合物7)的稳定性在这三种温育条件下出人意料地和显著地得到改进。如表3(酸性条件)中所示，其中在1小时时JM77的稳定性是8％，化合物7中稳定性提高到99％。并且，在24小时时其中JM49的稳定性仅仅是4％，而它的衍生物化合物6已经提高到79％。稳定性的类似改进(6-24小时)也在大鼠血浆(表4)和人类血浆(表5)中观察到。这些数据表明，根据式VI，通过化学改性在连接基团上用烯醇-酮基团改性化合物到二酮部分，它们的化学稳定性以及代谢稳定性出人意料地和显著地改进。
表3.酸性条件中的相对化合物浓度变化(稳定性)
浓度变化(％)

表4.大鼠血浆中的相对化合物浓度变化(稳定性)

表5.人类血浆中的相对化合物浓度变化(稳定性)

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