一种盐生植物的Ω3脂肪酸去饱和酶基因及其表达载体和用该基因转化的植物细胞及植株.pdf

本发明提供了一种盐生植物的ω3脂肪酸去饱和酶基因及其表达载体和用该基因转化的植物细胞及植株，该基因在植物体内过量表达可增加叶中α－亚麻酸的含量，能提高植物的耐冷、耐盐和抗真菌能力，并能够提高蔬菜等的营养价值。反义抑制该基因在植物体内的表达可减少α－亚麻酸的含量，能提高植物耐受高温的能力。该发明涉及到带有真核表达启动子的嵌合基因的构建，并涉及到转化该嵌合基因的宿主细胞及重组转化的方法；同时，也提供了培育过量表达或反义抑制该基因的转基因植株的方法。

1.  一种盐生植物的ω3脂肪酸去饱和酶基因，包括：(a)编码氨基酸序列的核苷酸片段，包含基本上如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示的碱基序列；或包含基本上如SEQ ID NO：3所示的氨基酸序列；或与(a)互补的核苷酸片段。

2.  权利要求1中的核苷酸片段与相应的真核表达载体构成的重组质粒或与相应的反义表达载体构成的重组质粒。

3.  用权利要求2中的重组质粒转化的农杆菌细胞。

4.  用权利要求3中的农杆菌细胞转化的植物细胞。

5.  用权利要求2中的重组质粒利用基因枪直接转化法转化的植物细胞。

6.  如权利要求2、3、4或5中的宿主细胞，其特征是产生的多肽具有SEQ ID NO：3所示的序列，并能够催化ω6脂肪酸生成相应的ω3脂肪酸。

7.  一种转基因植物或植物的一部分，其特征在于其部分或全部细胞过量产生α-亚麻酸或α-亚麻酸含量降低。

8.  一种使质体ω3脂肪酸去饱和酶在宿主细胞中过量表达的方法，包括：重组质粒利用基因枪法直接转化植物细胞；或利用农杆菌介导的方法转化植物细胞。

9.  一种反义抑制质体ω3脂肪酸去饱和酶在宿主细胞中表达的方法，包括重组质粒利用农杆菌介导的方法转化植物细胞。

一种盐生植物的ω3脂肪酸去饱和酶基因及其表达载体和用 该基因转化的植物细胞及植株
技术领域
本发明属于植物分子生物学领域，与植物脂肪酸代谢有关。更进一步讲本发明涉及盐地碱蓬(Suaeda salsa)质体ω3脂肪酸去饱和酶(ω3 fatty acid desaturase)的全长cDNA序列及其编码的氨基酸序列，包含该cDNA序列的过量表达和反义抑制表达载体，用该序列转化的植物及产生转基因植物的方法。
背景技术
多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids，PUFAs)是膜脂的重要成分，并且是前列腺素、凝血素等信号分子的前体。脂肪酸去饱和酶是参与PUFAs合成的一类酶，它们催化在碳氢链特定位置上插入双键的反应(Los and Murata，Biochim Biophys Acta，1998，1394：3-15)。ω3脂肪酸去饱和酶是一种膜结合酶，可催化从亚油酸到α-亚麻酸(α-linoleic acid，ALA)的转化及十六碳二烯酸到十六碳三烯酸的转化(Kodama et al，Plant Mol Biol，1997，33(3)：493-502)。
α-亚麻酸在植物中普遍存在，是植物细胞膜脂和贮脂的重要成分(Horiguch et al，PlantCell Physiol，1998，39：540-544)，在叶绿体膜中，α-亚麻酸和十六碳三烯酸可占膜脂总量的80％。α-亚麻酸也是细胞信号分子茉莉酮酸的前体(Mique and Browes，Plant PhysiolBiochem，1998，36：187-197)，参与植物的防御反应(Farmer et al，Planta，1998，206：167-174)。同时，α-亚麻酸是花粉发育(McConn et al，Proc Natl Acad Sci USA，1997，94：5473-5477)和细胞成熟(Horiguch et al，Plant Cell Physiol，1998，39：540-544)所必需的。
在动物中，α-亚麻酸及其衍生物、被称为″脑黄金″的EPA(eicosapentaenoic acid)和DHA(docosahexaenoic acid)是所有细胞膜的重要成分。DHA和EPA是前列腺素、凝血酸等调节分子的前体(Dyera and Mullen，FEBS Letters，2001，494：44-47)，并可以降低胆固醇、降低血压、抑制血栓形成、促进大脑生长发育等。由于自身不能生成，α-亚麻酸必须从食物中摄取，是一种人体必需脂肪酸(Dyera and Mullen，FEBS Letters，2001，494：44-47)。
ω3脂肪酸去饱和酶主要存在于藻类和植物中，线虫(Caenorhabditis elegans)FAT-1是动物中该酶的唯一代表(Spychalla et al，Proc Natl Acad Sci USA，1997，94(4)：1142-1147)，并已于2001年申请了美国专利(专利号为6,194,167，Browes et a1)。蓝细菌Synechocystis中编码ω3脂肪酸去饱和酶的基因desB已经克隆得到。高等植物中，ω3脂肪酸去饱和酶位于叶绿体和内质网中，在叶绿体中以铁氧还蛋白为电子供体，而在内质网中，电子供体为细胞色素b5(Shanklin and Cahoon，Annu Rev Plant Physiol Plant Mol Biol，1998，49：611-641641)。ω3脂肪酸去饱和酶的结构包括4个跨膜区，在细胞质侧有三个结合铁的组氨酸簇(HDCGH HXXXXXHRTHH HHXXXXHVIHH)和三个亲水区α、β、ε(Knipple etal，Genetics，2002，162：1737-1752)。
ω3脂肪酸去饱和酶最早是从油菜中克隆得到的(Arondel et al，Science，1992，258：1353-1355)，以后又分别从油菜、大豆、紫苏、拟南芥、绿豆、蓖麻、玉米、小麦、欧芹、烟草、水稻、辣椒、Limnanthes douglasii等植物中克隆得到。植物中ω3脂肪酸去饱和酶的表达受光(Nishiuchi et al，Plant Mol Biol，1995，29(3)：599-609；Horiguch et al，Physiol Plant，1996，96：275-283；Nishiuchi et al，Plant Cell，1997，9(10)1701-1712)低温(erberich et al，Plant Mol Biol，1998，36(2)：97-306)伤害(ibson et al，Plant Physiol，1994，106：1615-1621；Kwon et al，Mol Cells，2000，10(5)：49 97；Nishiuchi et al，Plant Cell，1997，9(10)：1701-1712)、盐(Browse et al，J Biol Chem，1993，268：16345-16351)、生长素(Yamamoto，Planta，1994，192：359-364；Matsuda et al，Planta，2001，213：833-840)、脱落酸(Zou et al，Plant Physiol，1995，108：563-571)、真菌感染和肽激发子Pep25、放线菌酮(Kirsch et al，Proc Natl Acad SciUSA，1997，94(5)：2079-2084)等因子的影响。
植物ω3脂肪酸去饱和酶基因在拟南芥(Arondel et al，Science，1992，258，1353-1355)、烟草(Hamada et al，Plant Physiol，1998，118(2)：591-598；Kodama et al，Plant Physiol，1995，107(4)：1177-1185)、水稻(Kodama et al，Plant Mol Biol，1997，33(3)：493-502；Shimiada et al，PlantBiotechnol，2000，17：43-48)、甘薯(Wakita et al，Plant Cell Reports，2001，20：244-249)、胡萝卜(Yadav et al，Plant Physiol，1993，103(2)：467-476)等植物中过量表达，以及线虫脂肪酸去饱和酶基因在拟南芥中过量表达，均增加了α-亚麻酸的含量，增强了植物耐冷性。转基因沉默(Maracari et al，Science，2000，287：476-479)和反义抑制(Hamada et al，Transgenic Res，1996，5：115-121)植物ω3脂肪酸去饱和酶基因的烟草，α-亚麻酸的含量降低，能更好的适应高温。
虽然在多种植物中已克隆得到ω3脂肪酸去饱和酶基因，但通过计算机联网检索尚没有发现植物质体ω3脂肪酸去饱和酶基因的专利，与之相关的专利是美国专利6,194,167(Browes et al，2001)，其所克隆的ω3脂肪酸去饱和酶基因来自于动物线虫，该基因定位于内质网膜上，在植物中其作用主要是催化非光合器官(如种子、根等)中α-亚麻酸的合成，这与植物耐受逆境的关系不大。目前尚无来自盐生植物的ω3脂肪酸去饱和酶基因的报道。
植物在其生活史中不可避免地要遭遇各种环境胁迫，如矿质元素失衡、温度过高或过低、光照过度或不足、水分缺乏等，这些环境胁迫影响植物的生理生化反应，导致植物生长缓慢，严重影响着农业的产量和农作物的质量。据估计，目前世界上农作物的减产一半以上是由环境胁迫造成的。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种编码在ω3位置上具有脂肪酸去饱和酶作用的基因；目的之二是提供该基因的过量表达和反义抑制表达载体；目的之三是提供用该基因转化的植物细胞及植株。
本发明的目的可通过如下技术措施来实现
(1)本发明的盐生植物的ω3脂肪酸去饱和酶基因，包括(a)编码氨基酸序列的核苷酸片段，包含基本上如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2所示的碱基序列；或包含基本上如SEQID NO：3所示的氨基酸序列；或与(a)互补的核苷酸片段。
(2)中的核苷酸片段与相应的真核表达载体构成的重组质粒或与相应的反义表达载体构成的重组质粒。
(3)用(2)中的重组质粒转化的农杆菌细胞。
(4)用(3)中的农杆菌细胞转化的植物细胞。
(5)用(2)中的重组质粒利用基因枪直接转化法转化的植物细胞。
(6)上述(2)、(3)、(4)或(5)中的宿主细胞，产生的多肽具有SEQ ID NO：3所示的序列，并能够催化ω6脂肪酸生成相应的ω3脂肪酸。
(7)一种转基因植物或植物地一部分，其部分或全部细胞过量产生α-亚麻酸或α-亚麻酸含量降低。
(8)一种使质体ω3脂肪酸去饱和酶在宿主细胞中过量表达的方法，包括：重组质粒利用基因枪法直接转化植物细胞；或利用农杆菌介导的方法转化植物细胞。
(9)一种反义抑制质体ω3脂肪酸去饱和酶在宿主细胞中表达的方法，包括重组质粒利用农杆菌介导的方法转化植物细胞。
本发明主要是体现盐生植物盐地碱蓬质体ω3脂肪酸去饱和酶基因在耐逆胁迫中的重要作用，它能够有效地保持植物膜脂特别是类囊体膜的稳定性。本发明提供了一种新的培育耐逆作物、蔬菜、园林植物新品种或新品系的方法：即将首个来自盐生植物的质体ω3脂肪酸去饱和酶基因通过各种转基因方法导入各种甜土植物，特别是作物及园林植物，本发明所述的基因在植物体内过量表达可增加叶中α-亚麻酸的含量，能提高植物的耐冷、耐盐和抗真菌能力，并能够提高蔬菜等的营养价值。反义抑制该基因在植物体内的表达可减少α-亚麻酸的含量，能提高植物耐受高温的能力。本发明提供了带有真核表达启动子的嵌合基因的构建，并提供了转化该嵌合基因的宿主细胞及重组转化的方法；同时，也提供了培育过量表达或反义抑制该基因的转基因植株的方法。
这项发明涉及到的基本的DNA重组技术和分子克隆技术的具体实验方法可参见《分子克隆》(Sambrook et al，1989)，所涉及到的编码盐地碱蓬质体ω3脂肪酸去饱和酶的核苷酸片段的序列及相关的多肽已在序列表中列出，其中：
SEQ ID NO：1是编码盐地碱蓬质体ω3脂肪酸去饱和酶cDNA的全长核苷酸序列；
SEQ ID NO：2是编码盐地碱蓬质体ω3脂肪酸去饱和酶cDNA中开放阅读框架的一段核
苷酸序列；
SEQ ID NO：3是SEQ ID NO：2中核苷酸序列的氨基酸序列；
具体实施方式
实施例1  盐地碱蓬cDNA文库的构建及cDNA克隆的分离与测序
本发明是以盐地碱蓬幼苗地上部分为材料进行cDNA文库的构建。生长4周的盐地碱蓬幼苗用400mM的NaCl溶液处理48小时后，用RNAgent Kit(Promega)提取其地上部分组织的总RNA，用MESSAGEMAKER Kit(GIBCO BRL)分离其mRNA，用cDNA Synthesis Kit(Stratagene)提供的带有XhoI克隆位点的Oligo-dT引物合成cDNA第一链，然后合成第二链，cDNA的5′端经RNaseH消化后，用pfu DNA聚合酶削平或补平，与带有EcoRI克隆位点的adapter连接，然后装入噬菌体λ-ZAP表达载体的EcoRI和XhoI克隆位点之间，构建噬菌体文库。文库由GigapackIII Gold(Stratagene)的包装提取物包装后，感染大肠杆菌(Escherichiacoli)菌株XLOLR，λ-ZAP表达载体经剪切后得到pBluescript KS质粒，将噬菌体文库转化为质粒文库。从含有四环素(10mg/L)和卡那霉素(25mg/L)的培养基上随机挑取单克隆提质粒DNA，用标准的T3测序引物进行测序，得到cDNA 5′端的序列，即ESTs(Expressed SequenceTaqs)。通过构建cDNA文库，得到1500余个ESTs。
实施例2  盐地碱蓬质体ω3脂肪酸去饱和酶全长cDNA克隆的分离及鉴定
采用BLAST同源性分析，分离出编码盐地碱蓬质体ω3脂肪酸去饱和酶的cDNAs。BLAST是在BLAST″nr″数据库中(包括所有非冗余GenBank CDS、具有三维结构的蛋白质数据库的序列、SWISS-PROT蛋白质序列数据库、EMBL及DDBJ数据库)进行同源性搜寻的一种方式。BLASTX(Gish and States，Nature Genetics，1993，3：266-272)是NCBI(NationalCenter of Biology Information)提供的一种将核苷酸序列的6种翻译序列与蛋白质数据库进行比较的一种方式。P值(probability)是被查寻cDNA序列与数据库中的某一序列相比较的同源性程度，P值越大，其二者的同源性就越大。通过BLASTX比较得知，该序列与烟草的质体ω3脂肪酸去饱和酶基因的同源性最高，为80％。从BLAST结果分析，得知这是一个全长cDNA。测序获得2191个碱基对的全长cDNA序列，见序列表SEQ ID NO：1，在此基础上鉴定了其开放阅读框(Open Reading Frame，ORF)，见SEQ ID NO：2，并推测了其氨基酸序列(SEQ ID NO：3)。该基因片段编码一段长423个氨基酸、分子量为48.5KD、等电点为9.04的多肽。
该序列起始密码子ATG位于序列″AACAATGGC″内，与Lütcke(EMBO J，1987，6：43-48)推断的植物起始密码子序列完全一致，证明该序列确实为cDNA起始序列。TargetP Servervl.01软件(http：//www.cbs.dtu.dk/services/TargetP)分析推断该蛋白的亚细胞定位为叶绿体。推导的氨基酸序列中具有3个组氨酸簇(HDCGH，HGWRISHRTHH HHDIGTHVIHH)，完全与植物脂肪酸脱饱和酶细胞质侧的三个结合铁的组氨酸簇(HDCGH，HXXXXXHRTHH，HHXXXXHVIHH)(Lopez Alonso et al，Biochem Syst Ecol，2003，31：1111-1124)吻合，证明
该基因确实编码盐地碱蓬质体ω-3脂肪酸去饱和酶。
实施例3 植物过量表达载体的构建及其在植物中的表达
本发明所涉及到的植物表达载体为pCAMBIAL3301，为使外源基因正向插入pCAMBIAL3301载体，先将基因片段以SmaI和EcoRI克隆位点插入中间载体pRT101(Topferet al，Nucleic Acids Res，1987，15：5890)中，再利用pRT101上的PstI位点双切下外源片断，插入pCAMBIAL3301载体的相应位点，连接在16℃下反应过夜，连接产物用相应的限制性内切酶进行酶切验证。将pCAMBIAL3301重组质粒转化农杆菌菌株GV3101，在28℃ YEB培养基(含60mg/ml利福平)中过夜培养农杆菌细胞，在含60mg/ml利福平的LB平板上划板，用碱裂解法提质粒验证。
用农杆菌转化拟南芥(Arabidopsis thaliana cv.Columbia)，转化方法为真空渗透法(Clough et al，Plant J，1998，16：735-743)。为得到纯合的转基因株系，转化株连续自交三代以上。对纯合的转基因拟南芥植株进行耐盐性分析，结果显示：转基因株系叶片中α-亚麻酸的含量较对照增加10％左右；转基因株系可在200mM NaCl条件下生长并结实；转基因株系在低温下生长状况明显好于对照。
可用叶盘转化法(Horsch et al，Science，1985，227：1229-1231)或原生质体转化法(vanden Elzen et al，Plant Mol Biol，1985，5：149-154)转化双子叶植物，使ω3脂肪酸去饱和酶转入油菜、大豆等油料作物，黄瓜、番茄等蔬菜，杨树、苹果等林木及其它双子叶植物，通过筛选除草剂抗性得到具有一定抗冷和耐盐性的转基因植株。
单子叶植物常采用基因枪直接注射法转化，也可通过农杆菌介导的直接转化体系进行转化。用带有外源基因的pCAMBIA 3301载体转化农杆菌LBA4404，然后转化农作物，或利用基因枪法转化一些农作物如水稻、玉米、小麦等和草坪草类，可以得到耐冷的转基因植物。
实施例4反义抑制植物表达载体的构建及其在植物中的表达
本专利所涉及到的植物表达载体为pCAMBIAL3301，为使外源基因逆向插入该载体，先将基因片段以XhoI和BamHI克隆位点插入中间载体pRT101(Topfer et al，Nucleic Acids Res，1987，15：5890)中，再利用pRT101上的PstI位点双切下外源片断，插入pCAMBIAL3301载体的相应位点，连接产物用相应的限制性内切酶进行酶切验证。将pCAMBIAL3301重组质粒转化农杆菌菌株GV3101中，在28℃YEB培养基(含60mg/ml利福平)中过夜培养农杆菌细胞，在含60mg/ml利福平的LB平板上划板，用碱裂解法提质粒验证。
用农杆菌转化番茄、油菜或大豆，转化方法为叶盘转化法(Horsch et al，Science，1985，227：1229-1231)，用除草剂进行筛选。为得到纯合的转基因株系，转化株连续自交三代以上，可得到α-亚麻酸含量降低的油料品种，并可得到具有一定高温耐性的转基因植株。
                              序列表
SEQ ID NO：1的信息
(a)序列特征：
*长度：2191碱基对
*类型：核酸
*链型：双链
*拓扑结构：线性
(b)分子类型：cDNA
(c)最初来源：盐地碱蓬
(d)序列描述：SEQ ID NO：1
1    CGCGCGCCTG CAGGTCGACA CTAGTGGATC CACAAGAATT CGGCACGAGG GAAACAAGTG
61   AGTAGAAAAC AATATTCCTC ACATATTGTT TGCTGTGACT TCACAAAGGT TTTTTGTGTG
121  AGGAGAGAGA GAAATCAATA GATAAACAAA CAATTTCCAT TATAAATTTG TTTGTTTTGT
181  AACCTTTCAT TCAACTTTTA AATTGAATCT TGTGGTACCC TTTTGTGGTA GAGATTTGTT
241  CTTGTGTTAT CACTTCATTC ATACAAAATC TCCCCATAAA AATCTCATCT TTTTATTTTT
301  ATTAATAATT CATTTCATTT CAAACCCTAA TTTTTCATTT GTGTTTTGTT TATCTCTCTT
361  AAAAAAAACC CTTAAAAGAC CCTCCCTTTT ATCTTGGAGG GTCTCTCAAA AACACCCCAA
421  AAGCTCGAAT TTTTATTAAG AACAATGGCT AGTTGGGTGC TTTCAGAATG TGGGTTAAGG
481  CCTCTTCCAA GAATCTACCC AAAACCCAGA ACTGGGTTTT CCTCAAATCC CATAAAAATT
541  AAAACTTGCA AACCTTTCTC AGATCTGAAA TCACACAATT CATTGTCAAT CTCATGTTGT
601  TCTTCAAATT CAAATTCTAG AGAGAGAAAA TGGGAGGTGA AAGTGAGTGC CCCTTTAAGG
661  GTAACTTCAC CTTCTCCCAT TGAAGAAGAT GATAACAATA ATATTGGAGA ATTTGACCCT
721  GGTTCTCCAC CTCCATTCAA ATTAGCAGAC ATTAAAAATG CAATTCCAAA ACATTGTTGG
781  GTGAAAAATC CATGGAGATC TATGAGTTAT GTTGTTAGAG ATGTTGTTGT TGTTTTTGGG
841  TTAGCTGCTG TTGCTTCTTA CTTCAATAAT TGGATTGTTT GGCCTCTTTA TTGGATTGCT
901  CAGGGTACTA TGTTTTGGGC TCTCTTTGTT CTTGGTCATG ATTGTGGGCA TGGAAGTTTC
961  TCCAATAATC CTAAGCTTAA CAGTGTAGCA GGACACTTGC TTCACTCTTC AATCCTTGTT
1021 CCTTATCATG GATGGAGGAT TAGTCATAGG ACTCACCATC AAAATCATGG ACATGTTGAG
1081 AATGATGAAT CATGGCACCC ATTGCCTGAG AAATTATACA ACAGTTTAGA GATGATGACG
1141 AAAAAGTTGA GGTTCACTTT TCCATTTCCC TTACTTGCAT ACCCCATCTA TTTGTGGACT
1201 AGAAGTCCTG GAAAATCAGG CTCACATTAT CACCCAGGAA GTGACTTGTT CACACCAAAT
1261 GAAAAGAAAG ATGTCTTAAC CTCTACAGCT TGTTGGTCTG CAATGGTTGC GTTGCTTGCG
1321 GGTTTGTCTT TTGTCATGGG TCCGATTCCA CTCCTGAAGC TCTATGGTGT TCCTTATGCG
1381 ATCTTTGTCA TGTGGTTGGA CTTGGTGACT TACTTGCATC ACCACGGCCA CGAAGACAAA
1441 CTTCCTTGGT ACCGAGGCGA GGAATGGAGT TACCTTCGAG GGGGACTTAC GACAATTGAC
1501 CGTGATTATG GATGGATTAA CAACATTCAC CATGACATCG GTACCCATGT CATTCATCAT
1561 CTCTTCCCAC AAATCCCTCA CTATCATCTA ATTGAAGCAA CTGAGGCAGC AAAGCCAGTT
1621 CTCGGTAAAT ATTACCGCGA ACCAAAGAAA TCTGGACCTC TCCCATTATA CTTTAGGTGT
1681 TTTCTTAGAA AGTCTGAAGA AAGATCACTA TGTTAGTGAC ACTGGAGATA TCGTCTACTA
1741 TCAAACCGAC CCAAAGCTGT AGTCTATATC AGATTTAAAG AACTCAGAAG ATTGATCTGT
1801 TCTGATCCTC TATGTGATGT TCGAGATCAT AGCTAAGCCG GTGAAAGTAT TGGAATCACA
1861 AGTAGGAAGG ATCAAATTAG AGTTGTGATT AGTCATAACT AATGCAGTAG TTTATCCCAG
1921 TTTGCTCTCC CTAAACTGTG CAGAGGGCAT AACACTGATG GAT1GAACTA CATTGTTTTA
1981 CTGTAATTGC GGTACAAAAC TATGGAAAGA GAAGGGGTTA GGGAAGCAGA AATCAAGCAT
2041 AATATATATT CAACATATAT ATTTATATGA ATAAAAACAT GTTTATTGTT TTTCCTTCTT
2101 TAAAAAAAAA AAAAAAAAAA CTCGAGAGTA CTTCTAGAGC GGCCGCGGGC CCATCGATTT
2161 TCCACCCGGG TGGGGTACCA GGTAAGTGTA C
SEQ ID NO：2的信息
(a)序列特征：
*长度：1272碱基对
*类型：核酸
*链型：双链
*拓扑结构：线性
(b)分子类型：cDNA
(c)最初来源：盐地碱蓬
(d)序列描述：SEQ ID NO：2
1    ATGGCTAGTT GGGTGCTTTC AGAATGTGGG TTAAGGCCTC TTCCAAGAAT CTACCCAAAA
61   CCCAGAACTG GGTTTTCCTC AAATCCCATA AAAATTAAAA CTTGCAAACC TTTCTCAGAT
121  CTGAAATCAC ACAATTCATT GTCAATCTCA TGTTGTTCTT CAAATTCAAA TTCTAGAGAG
181  AGAAAATGGG AGGTGAAAGT GAGTGCCCCT TTAAGGGTAA CTTCACCTTC TCCCATTGAA
241  GAAGATGATA ACAATAATAT TGGAGAATTT GACCCTGGTT CTCCACCTCC ATTCAAATTA
301  GCAGACATTA AAAATGCAAT TCCAAAACAT TGTTGGGTGA AAAATCCATG GAGATCTATG
361  AGTTATGTTG TTAGAGATGT TGTTGTTGTT TTTGGGTTAG CTGCTGTTGC TTCTTACTTC
421  AATAATTGGA TTGTTTGGCC TCTTTATTGG ATTGCTCAGG GTACTATGTT TTGGGCTCTC
481  TTTGTTCTTG GTCATGATTG TGGGCATGGA AGTTTCTCCA ATAATCCTAA GCTTAACAGT
541  GTAGCAGGAC ACTTGCTTCA CTCTTCAATC CTTGTTCCTT ATCATGGATG GAGGATTAGT
601  CATAGGACTC ACCATCAAAA TCATGGACAT GTTGAGAATG ATGAATCATG GCACCCATTG
661  CCTGAGAAAT TATACAACAG TTTAGAGATG ATGACGAAAA AGTTGAGGTT CACTTTTCCA
721  TTTCCCTTAC TTGCATACCC CATCTATTTG TGGACTAGAA GTCCTGGAAA ATCAGGCTCA
781  CATTATCACC CAGGAAGTGA CTTGTTCACA CCAAATGAAA AGAAAGATGT CTTAACCTCT
841  ACAGCTTGTT GGTCTGCAAT GGTTGCGTTG CTTGCGGGTT TGTCTTTTGT CATGGGTCCG
901  ATTCCACTCC TGAAGCTCTA TGGTGTTCCT TATGCGATCT TTGTCATGTG GTTGGACTTG
961  GTGACTTACT TGCATCACCA CGGCCACGAA GACAAACTTC CTTGGTACCG AGGCGAGGAA
1021 TGGAGTTACC TTCGAGGGGG ACTTACGACA ATTGACCGTG ATTATGGATG GATTAACAAC
1081 ATTCACCATG ACATCGGTAC CCATGTCATT CATCATCTCT TCCCACAAAT CCCTCACTAT
1141 CATCTAATTG AAGCAACTGA GGCAGCAAAG CCAGTTCTCG GTAAATATTA CCGCGAACCA
1201 AAGAAATCTG GACCTCTCCC ATTATACTTT AGGTGTTTTC TTAGAAAGTC TGAAGAAAGA
1261 TCACTATGTT AG
SEQ ID NO：3的信息
(a)序列特征：
*长度：423
*类型：氨基酸
*链型：单链
*拓扑结构：线性
(b)分子类型：肽
(c)最初来源：盐地碱蓬
(d)序列描述：SEQ ID NO：3
1   M A S W V L S E C G L R P L P R I Y P K
21  P R T G F S S N P I K I K T C K P F S D
41  L K S H N S L S I S C C S S N S N S R E
61  R K W E V K V S A P L R V T S P S P I E
81  E D D N N N I G E F D P G S P P P F K L
101 A D I K N A I P K H C W V K N P W R S M
121 S Y V V R D V V V V F G L A A V A S Y F
141 N N W I V W P L Y W I A Q G T M F W A L
161 F V L G H D C G H G S F S N N P K L N S
181 V A G H L L H S S I L V P Y H G W R I S
201 H R T H H Q N H G H V E N D E S W H P L
221 P E K L Y N S L E M M T K K L R F T F P
241 F P L L A Y P I Y L W T R S P G K S G S
261 H Y H P G S D L F T P N E K K D V L T S
281 T A C W S A M V A L L A G L S F V M G P
301 I P L L K L Y G V P Y A I F V M W L D L
321 V T Y L H H H G H E D K L P W Y R G E E
341 W S Y L R G G L T T I D R D Y G W I N N
361 1 H H D I G T H V I H H L F P Q I P H Y
381 H L I E A T E A A K P V L G K Y Y R E P
401 K K S G P L P L Y F R C F L R K S E E R
421 S L C